DK158281B - Fremgangsmaade til fremstilling af et faktor viii (ahf)-holdigt praeparat - Google Patents
Fremgangsmaade til fremstilling af et faktor viii (ahf)-holdigt praeparat Download PDFInfo
- Publication number
- DK158281B DK158281B DK241584A DK241584A DK158281B DK 158281 B DK158281 B DK 158281B DK 241584 A DK241584 A DK 241584A DK 241584 A DK241584 A DK 241584A DK 158281 B DK158281 B DK 158281B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- factor viii
- units
- precipitate
- dissolved
- antithrombin iii
- Prior art date
Links
- 229960000301 factor viii Drugs 0.000 title claims abstract description 66
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- 108010054218 Factor VIII Proteins 0.000 claims abstract description 65
- 102000001690 Factor VIII Human genes 0.000 claims abstract description 65
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 35
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 229940027941 immunoglobulin g Drugs 0.000 claims abstract description 18
- 229920001499 Heparinoid Polymers 0.000 claims abstract description 13
- 239000002554 heparinoid Substances 0.000 claims abstract description 13
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 claims abstract description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 11
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 11
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 11
- 239000000872 buffer Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 9
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 7
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims abstract description 5
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 22
- 102000004411 Antithrombin III Human genes 0.000 claims description 15
- 108090000935 Antithrombin III Proteins 0.000 claims description 15
- 229960005348 antithrombin iii Drugs 0.000 claims description 15
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 15
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 9
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 9
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 claims description 8
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 claims description 7
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 claims description 5
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 5
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 claims description 4
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 claims description 4
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 claims description 4
- 239000012467 final product Substances 0.000 claims description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 229940043138 pentosan polysulfate Drugs 0.000 claims description 3
- 229940025770 heparinoids Drugs 0.000 claims description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 2
- 102100023804 Coagulation factor VII Human genes 0.000 claims 1
- 108010023321 Factor VII Proteins 0.000 claims 1
- 229940012413 factor vii Drugs 0.000 claims 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims 1
- 239000004019 antithrombin Substances 0.000 abstract description 5
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 16
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 4
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 4
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 3
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 235000019263 trisodium citrate Nutrition 0.000 description 3
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 3
- FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 5,5-diethylbarbituric acid Chemical compound CCC1(CC)C(=O)NC(=O)NC1=O FTOAOBMCPZCFFF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- -1 florigel Substances 0.000 description 2
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 239000012266 salt solution Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O IJRKANNOPXMZSG-SSPAHAAFSA-N 0.000 description 1
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 1
- 102000002572 Alpha-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010068307 Alpha-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 108010039627 Aprotinin Proteins 0.000 description 1
- 102000006734 Beta-Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010087504 Beta-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 241000252095 Congridae Species 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 101710202013 Protein 1.5 Proteins 0.000 description 1
- 108010094028 Prothrombin Proteins 0.000 description 1
- 102100027378 Prothrombin Human genes 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 229960004405 aprotinin Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 229960002319 barbital Drugs 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M cobalt(2+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(1r,2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2 Chemical group [Co+2].N#[C-].[N-]([C@@H]1[C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP(O)(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O AGVAZMGAQJOSFJ-WZHZPDAFSA-M 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 108010074605 gamma-Globulins Proteins 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000000951 immunodiffusion Effects 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical group C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 229940039716 prothrombin Drugs 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 239000012925 reference material Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K sodium citrate Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O NLJMYIDDQXHKNR-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 235000011083 sodium citrates Nutrition 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N sulfuric acid Substances OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/745—Blood coagulation or fibrinolysis factors
- C07K14/755—Factors VIII, e.g. factor VIII C (AHF), factor VIII Ag (VWF)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/829—Blood
- Y10S530/83—Plasma; serum
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Hematology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
i
DK 158281 B
Den foreliggende opfindelse angår en fremgangsmåde til fremstilling af et faktor VIII (AHF)-holdigt præparat.
Der kendes allerede faktor VIII (AHF)-koncentrater, der fremstilles ud fra menneskeplasma eller dyrisk plasma og i sammen-5 ligning med naturligt plasma har en forøget faktor VIII-ak-tivitet. Kendte fremgangsmåder til fremstilling af faktor VIII-koncentrater benytter sig som fraktioneringsforanstaltninger af en behandling af plasmaet med ethanol, med ether, med polyethylenglycol og/eller glycin. Kendt er også kryoud-10 fældningen af plasmaet ifølge Pool (1965, "The New England Journal of Medicine" 273, 1443) eller kryoethanoludfældning-en af plasmaet ifølge Johnson (Congr. Int. Soc. Blood Transf., Sidney, Australien, Abstracts of Paper, side 1109 (1966)).
I tysk offentliggørelsesskrift 2.516.186 er endvidere beskre-15 vet en fremgangsmåde, ved hvilken et fra blodplasma udvundet kryopræcipitat macereres, det macererede produkt suspenderes i en citrat-glucose-pufferopløsning, centrifugeres, og den således opnåede pufferekstrakt indstilles til en pH-værdi i området fra 6,0 til 6,8. Under disse betingelser ind-20 træder en udfældning af uønskede forureninger, hvorpå den tilbageværende rest indeholdende faktor VIII steriliseres og lyofiliseres. Et ved denne fremgangsmåde udvundet faktor VIII-produkt udviser kun en ringe specifik aktivitet af faktor VIII-enheder/mg protein. Endvidere er også andelen af 25 immunoglobulin G (IgG), regnet i forhold til faktor VIII-en-hederne, uønsket høj.
Lignende fremgangsmåder er også beskrevet i østrigsk patentskrift nr. 349.639 samt i U.S.A. patentskrifterne nr. 4.170.639 og nr. 4.104.266, ved hvilke man ligeledes ved at gå ud fra 30 plasma udvinder et kryopræcipitat, opløser dette i en pufferopløsning i det' neutrale pH-område, hvorved uønskede proteiner fraskilles, behandler det resterende med aluminiumhydroxid til fraskillelse af prothrombinkomplekset og derpå koncentrerer og lyofiliserer opløsningen indeholdende faktor
2 DK 158281 B
VIII. Også ved denne fremgangsmåde er den specifikke aktivitet af faktor VIII-enheder pr. mg protein uønsket ringe.
Således andrager den specifikke aktivitet ved arbejdsmåden ifølge U.S.A. patentskrift nr. 4.104.266 ifølge de deri væren-5 de angivelser kun 0,5 til 0,6 enheder/mg protein.
En yderligere metode til fremstilling af faktor VIII-koncen-trater består i behandling af plasmaet med adsorptionsmidler, såsom florigel, bentonit, ionbyttere og permeationskromato-10 grafiske midler.
Den foreliggende opfindelse tager sigte på undgåelse af de omtalte ulemper og vanskeligheder og angår en fremgangsmåde til fremstilling af et faktor VIII (AHF)-holdigt præparat med 15 en specifik aktivitet på mindst 1,5 enheder faktor VIII/mg pro tein samt med et indhold af immunoglobulin G (IgG) på 15 til 30 mg/1000 enheder faktor VIII og et indhold af fibrinogen på 20 til 40 mg/100 enheder faktor VIII, hvorved et faktor VIII-holdigt præparat opløses i en pufferopløsning, opløsningen renses ved 20 udfældning af uønskede proteiner ved en pH-værdi ca. i neutral området, den faktor VIII-holdige rest koncentreres, og koncentratet bringes i en holdbar form.
Opfindelsen, hvormed denne opgave løses, består i en fremgangsmåde af den ovenfor omtalte art, der er ejendommelig 2 5 ved, at udfældningen af de uønskede proteiner gennemføres i nærværelse af sulfatiseret polysaccharid ved en pH-værdi på 6 til 7, hvorpå man efter bortkastning af bundfaldet behandler det tilbageblevne indeholdende faktoren VIII med et proteinfældningsmiddel i nærværelse af salte ved en pH-værdi fra 6 til 7, hvorved der opnås et bundfald indeholdende faktoren VIII, opløser dette bundfald og sætter eventuelt et antithrombin III-heparin- eller antithrombin III-heparinoid-kompleks til slutproduktet.
35
Ved hjælp af fremgangsmåden ifølge opfindelsen opnås et præparat med en høj specifik aktivitet på eksempelvis 1,5 til 4,0 enheder faktor VIII/mg protein og med et ringe immuno-globulinindhold på 15 til 30 mg/1000 enheder faktor VIII.
DK 158281 B
3
Et præparat af denne art udviser en meget god opløselighed efter lyofiliseringen. Rekonstitutionstiden andrager ikke mere end 0,5 til 4 minutter, økonomien ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen er meget god, og udbytterne er høje.
5 Ifølge en foretrukken udførelsesform anvendes som sulfati-seret polysaccharid heparinoider, såsom mucopolysaccharid-polysvovlsyreester, pentosan-polysulfat eller dextransulfat.
En fordelagtig fremgangsmåde ifølge opfindelsen er kombinationen af følgende foranstaltninger: 10 - at et kryopræcipitat opløses i en citrat-heparinoid-puf- fer, indstilles til en pH-værdi fra 6,0 til 6,4, og suspensionen køles til 0 til 25°C, fortrinsvis 4 til 8°C, hvorved indifferente proteiner udfældes, - at den efter bortkastning af bundfaldet rensede tilbage-15 bievne opløsning indeholdende faktor VIII opkoncentreres ved udfældning med et proteinfældningsmiddel, såsom ethylalkohol, ved en pH-værdi fra 6,0 til 7,0, i nærværelse af højst 1,45 mol glycin og/eller mindst en ionstyrke på 0,15, - at det faktor VIII-holdige bundfald opløses i en glycin-20 citrat-NaCl-pufferopløsning i nærværelse af et antithrombin- III-heparinoid- eller antithrombin Ill-heparin-kompleks og bringes på holdbar form.
En variant af denne udførelsesform består i, at den opnåede suspension efter tilsætning af proteinfældningsmidlet og sal-25 tene til den tilbageblevne opløsning indeholdende faktoren VIII nedfryses og atter optøes ved en temperatur fra 0 til 4°C, hvorefter den ovenstående væske bortkastes, og bundfaldet indeholdende fåktoren VIII opløses i glycin-citrat-NaCl-pufferopløsningen i nærværelse af et antithrombin III-heparinoid-30 eller antithrombin Ill-heparin-kompleks og bringes på holdbar form.
DK 158281 B
4
Hensigtsmæssigt sættes albumin til slutproduktet med henblik på stabilisering.
Ved den specifikke faktor VIII-aktivitet af det ifølge opfindelsen fremstillede præparat forstås forholdet faktor VIII-5 aktivitet/mg protein. Faktor VIII-aktiviteten bestemmes ifølge den såkaldte totrinsmetode, nemlig ifølge D.E.G. Austen og I.L. Rhymes, "A Laboratory Manuel of Blood Coagulation", Blackwell Scientific Publications, 1975. Proteinkoncentrationen kan bestemmes- ifølge metoden beskrevet i litteratur-10 stedet A.G. Gornall, C.S. Bardawill og M.M. David, J.Biol. Chem. 177, 751 (1949).
En metode til bestemmelse af immunoglobulinet G (IgG), som kan anvendes til de ifølge opfindelsen fremstillede præparater, er beskrevet i litteraturen, nemlig af G. Mancini, J.P.
15 Vaerman, A.O· Carbonara og J.F. Heremans, "A single-radialdiffusion method for the immunological quantitation of proteins", XI. Colloquium on protides of the biological fluids (1964) 370, Elsevier, Amsterdam.
Princippet i bestemmelsesmetoden består i reaktionen mellem 20 antigen (IgG) og antistof (Anti-IgG). En immunodiffusionsplade af agarose (f.eks. fra firmaet Immuno-Diagnostika) indeholder det specifikke antiserum (Anti-IgG).
_3 5*10 ml af det faktor VIII-holdige præparat og af refe-rence-standard-præparatet (med kendt IgG-indhold, regnet i 25 forhold til WHO-standarden) påføres i påføringshullerne. Efter mindst 45 timers reaktionstid ved 20 til 24°C måles dia- meteren af den cirkulære udfældning. Ved sammenligning med den definerede immunoglobulin-referencestandard bestemmes immunoglobulinkoncentrationen i det faktor VIII-holdige præ-30 parat.
Bestemmelsen af fibrinogenet ved hjælp af celluloseacetat-
DK 158281 B
5 membran-elektroforese er ligeledes beskrevet i litteraturen, nemlig af Michael D. Gebott, Beckman Microzone Electrophoresis Manual, Beckman Instruments, Inc. 1977, 015-083630-C.
Ifølge den dér angivne anvisning går man frem på følgende 5 måde: En celluloseacetatmembran gennemvædes med veronal/ve- ronalnatriumpuffer, pH-værdi 8,6 (Beckman B-2 puffer) og ækvi-libreres. Ved hjælp af prøvepåføringsstemplet påføres 12,5 x _3 10 mg af det faktor VIII-holdige præparat pa den aekvilibre-rede membran. Som referencemateriale for indordningen af de 10 enkelte komponenter (albumin, a-globulin, β-globulin, fibrinogen og γ-globulin) benyttes humant plasma. Til bestemmelsen af komponenternes vandringshastighed anvendes som standard humant albumin.
Er alle prøver, albumin og plasma påført på membranen, gennem-15 føres den elektroforetiske adskillelse i mikrozone-separa-tionskammeret (Beckman R-200) og med strømforsyningsenheden (Beckman 4264): elektrisk spænding 250 V, strømstyrke 3 til 4 mA pr. membran, tidsvarighed 20 minutter.
Derefter farves proteinbåndene med Ponceau S, den overskyden-20 de farveopløsning fjernes ved hjælp af en blanding af 1 del eddikesyre og 19 dele methanol. Folien dehydratiseres ved hjælp af rent methanol og gøres transparent ved neddykning i en blanding af 1 del eddikesyre og 3 dele methanol. Derpå tørres folien på en glasplade og vurderes densitometrisk (Beck-25 man Densitometer R-112). Det relative fibrinogenindhold af den samlede proteinkoncentration udtrykkes. Den absolutte fibrinogenmængde opnår man ved multiplikation af den relative fibrinogenkoncentration med proteinkoncentrationen i det faktor VIII-holdige præparat.
30 Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere ved hjælp af de følgende eksempler.
DK 158281 B
6
Eksempel 1.
6660 ml frosset frisk plasma blev optøet ved 0 til 4°C. Det dannede kryopræcipitat blev fraskilt ved hjælp af centrifugering og opløst i 700 ml tri-natriumcitratopløsning, der 5 indeholdt 0,1 mg dextransulfat (Pharmacia) pr. ml samt 30 enheder aprotinin pr. ml. Opløsningens pH-værdi blev indstillet til 6,3 og temperaturen til 4°C. Derved dannedes et bundfald, der blev fraskilt ved hjælp af centrifugering og bortkastet.
10 Ved tilsætning af 8% ethanol udfældedes den faktor VIII-hol-dige fraktion, hvorved immunoglobulinerne (IgG, IgA, IgM) for en stor dels vedkommende blev holdt i opløsning ved tilsætning af aminosyrer, såsom 10% glycin, eller ved forøgelse af ionstyrken ved hjælp af NaCl eller natriumcitrat. Det fra- 15 skilte bundfald, der indeholdt den faktor VIII-holdige fraktion, blev opløst i en glycin-citrat-NaCl-pu-ffer, der indeholdt et antithrombin III-heparin-kompleks med en antithrom-bin-koncentration på 0,05 E pr. ml. Derpå blev det opløste præcipitat fyldt på slutbeholdere og lyofiliseret.
20 Fremstillingen af dette antithrombin III-heparin-kompleks blev gennemført som følger:
Til 1 liter plasma tilsattes 80.000 E heparin, og der blev omrørt i 30 minutter ved +4°C. Efter indrøring af 1 g DEAE-"Sephadex"A 50 blev der omrørt i yderligere 2 timer ved +4°C.
25 Den fyldte gel blev fraskilt ved hjælp af Buchnertragt og til fjernelse af ledsageproteiner vasket to gange, hver gang med 100 ml af en phosphat- og citratpufret isotonisk kogsaltopløsning.
Den fyldte, vaskede gel blev suspenderet i 50 ml af den oven- 30 nævnte puffer, og ved tilsætning af fast NaCl indstilledes
en ledningsevne på 42 mS/cm. Efter 1 times omrøring ved +4°C
DK 158281 B
7 fraskiltes ved hjælp af Biichnertragt, og antithrombin III-heparin-komplekset blev udvundet i eluatet, idet eluatet blev dialyseret mod saltvand.
De karakteristiske tal for det ifølge dette eksempel opnåede 5 produkt - konstateret ifølge de ovenfor anførte litteratursteder - er:
Faktor VIII-enheder/mg protein 1,5
IgG/1000 enheder faktor VIII 17,0 mg
Fibrinogenindhold/100 enheder faktor VIII 35 mg 10 Rekonstitutionstid 4 minutter
Eksempel 2.
Præparatet blev blandet på samme måde som i eksempel 1, men i stedet for dextransulfat benyttedes en mucopolysaccharid-polysvovlsyreester. De karakteristiske værdier for dette pro-15 dukt var følgende:
Faktor VIII-enheder/mg protein 3,1
IgG/1000 enheder faktor VIII 15,6 mg
Fibrinogenindhold/100 enheder faktor VIII 30 mg
Rekonstitutionstid 1 minut 20 Eksempel 3.
Præparatet blev fremstillet på samme måde som i eksempel 1, men i stedet for dextransulfat benyttedes et pentosanpolysul-fat (SP 54), og opløsningspufferen indeholdt et antithrombin III-heparinoid-kompleks i en koncentration på 0,05 enheder/ 25 ml. Dette antithrombin III-heparinoid-kompleks blev fremstillet på følgende måde:
Til 1 liter plasma sattes 3 g polyanion SP 54, og der omrør-tes i 30 minutter ved +4°C. Efter indrøring af 2,5 g DEAE-
DK 158281B
8 "Sephadex"A 50 blev der omrørt i yderligere 2 timer ved +4°C. Den fyldte gel blev fraskilt ved hjælp af Buchnertragt, og til fjernelse af ledsageproteiner blev der vasket to gange, hver gang med 200 ml af en phosphat- og citratpufret, isoto-5 nisk kogsaltopløsning. Den fyldte, vaskede gel blev suspenderet i 100 ml af den ovennævnte puffer, og ved tilsætning af fast kogsalt indstilledes en ledningsevne på 60 mS/cm.
Efter 1 times omrøring ved +4°C blev der fraskilt ved hjælp af Buchnertragt, og antithrombin III-heparinoid (SP 54)-kom-10 plekset blev udvundet i eluatet, idet eluatet blev dialyseret mod saltvand.
De karakteristiske tal for det ifølge dette eksempel fremstillede produkt var følgende:
Faktor VlII-enheder/mg protein 2,47 15 IgG/1000 enheder faktor VIII 27,0 mg
Eibrinogenindhold/100 enheder faktor VIII 33 mg
Rekonstitutionstid 1 minut.
Eksempel 4.
7000 ml frosset frisk plasma blev optøet ved 0 til +4°C. Det 20 dannede kryopræcipitat blev fraskilt og opløst i 550 ml tri-natriumcitrat-opløsning, der indeholdt mucopolysaccharidpoly-svovlsyreester. Opløsningens pH-værdi blev indstillet til 6,65 og temperaturen til 1°C. Derved dannedes et bundfald, der blev fraskilt og bortkastet. Den faktor VIII-holdige frak-25 tion blev udfældet ved tilsætning af 8% ethanol og 7,5% gly-cin til den tilbageblevne væske. Suspensionen blev dybfrosset og atter optøet ved 0 til +4°C.
Efter fraskillelse af det faktor VIII-holdige bundfald blev dette atter opløst, aftappet og lyofiliseret. De karakteri-30 stiske tal for dette produkt var følgende:
DK 158281 B
9
Faktor VIII-enheder/mg protein 1,66
IgG/1000 enheder faktor VIII 22,0 mg
Fibrinogenindhold/100 enheder faktor VIII 40 mg
Rekonstitutionstid 3 minutter.
5 Eksempel 5.
5000 ml frosset, frisk plasma blev optøet ved 0 til +4°C.
Det dannede kryopræcipitat blev fraskilt og opløst i 350 ml tri-natriumcitrat-opløsning, der indeholdt pentosanpolysul-fat. Opløsningens pH-værdi blev indstillet til 6,20, og tempera-10 turen til 8°C. Derved dannedes et bundfald, der blev fraskilt og bortkastet. Den faktor VIII-holdige fraktion blev udfældet ved tilsætning af 15% glycin til den tilbageblevne væske. Suspensionen blev dybfrosset og atter optøet ved 0 til +4°C.
Efter fraskillelse af det faktor VIII-holdige bundfald blev 15 dette opløst, aftappet og lyofiliseret. De karakteristiske tal for dette produkt var følgende:
Faktor VIII-enheder/mg protein 3,80
IgG/1000 enheder faktor VIII 20 mg
Fibrinogenindhold/100 enheder faktor VIII 21 mg 20 Rekonstitutionstid 2 minutter.
Claims (5)
1. Fremgangsmåde til fremstilling af et faktor VIII (AHF)-holdigt præparat med en specifik aktivitet på mindst 1,5 en- 5 heder faktor VlII/mg protein samt med et indhold af immunoglobulin G (IgG) på 15 til 30 mg/1000 enheder faktor VIII og et indhold af fibrinogen på 20 til 40 mg/100 enheder faktor VIII, hvorved et faktor VIII-holdigt præparat opløses i en pufferopløsning, opløsningen renses ved udfældning af 10 uønskede proteiner ved en pH-værdi ca. i neutralområdet, den faktor Vlll-holdige rest koncentreres, og koncentratet bringes i holdbar form, kendetegnet ved, at udfældningen af de uønskede proteiner gennemføres i nærværelse af sulfati-seret polysaccharid ved en pH-værdi fra 6 til 7, hvorpå den 15 tilbageblevne faktor Vlll-holdige væske efter bortkastning af bundfaldet behandles med et proteinfældningsmiddel i nærværelse af salte ved en pH-værdi fra 6 til 7, hvorved et faktor VIII-holdigt bundfald opnås, dette opløses, og et anti-thrombin III-heparin- eller antithrombin III-heparinoid-kom-20 pleks sættes eventuelt til slutproduktet.
2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at der som sulfatiseret polysaccharid anvendes heparinoider, såsom mucopolysaccharidpolysvovlsyreester, pentosanpolysulfat eller dextransulfat.
3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved kombinationen af følgende foranstaltninger: - at et kryopræcipitat opløses i en citrat-heparinoid-puffer, indstilles til en pH-værdi fra 6,0 til 6,4, og suspensionen køles til 0 til 25°C, fortrinsvis 4 til 8°C, hvorved indif-30 ferente proteiner udfældes, DK 158281 B - at den rensede ovenstående opløsning indeholdende faktor VIII efter bortkastning af bundfaldet opkoncentreres ved udfældning med et proteinfældningsmiddel, såsom ethylalko-holf ved en pH-værdi fra 6,0 til 7,0 i nærværelse af højst 5 1,45 mol glycin og/eller mindst en ionstyrke på 0,15, - at det faktor VIII-holdige bundfald opløses i en glycin-ci-trat-NaCl-pufferopløsning i nærværelse af et antithrombin III-heparinoid- eller antithrombin III-heparin-kompleks og bringes på holdbar form.
4. Fremgangsmåde ifølge krav 3, kendetegnet ved, at man efter tilsætning af proteinfældningsmidlet og saltene til den tilbageblevne opløsning indeholdende faktoren VIII, nedfryser den opnåede suspension og atter optøer den ved en temperatur fra 0 til 4°C, hvorefter den ovenstående væske bort-15 kastes, og det opnåede bundfald indeholdende faktoren VIII opløses i glycin-citrat-NaCl-pufferopløsningen i nærværelse af et antithrombin III-heparinoid- eller antithrombin III-heparin-kompleks og bringes på holdbar form.
5. Fremgangsmåde ifølge ethvert af kravene 1 til 4, k e n-20 detegnet ved, at albumin sættes til slutproduktet med henblik på stabilisering.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| AT0185883A AT379510B (de) | 1983-05-20 | 1983-05-20 | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf) -haeltigen praeparation |
| AT185883 | 1983-05-20 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK241584D0 DK241584D0 (da) | 1984-05-16 |
| DK241584A DK241584A (da) | 1984-11-21 |
| DK158281B true DK158281B (da) | 1990-04-30 |
| DK158281C DK158281C (da) | 1990-10-01 |
Family
ID=3522525
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK241584A DK158281C (da) | 1983-05-20 | 1984-05-16 | Fremgangsmaade til fremstilling af et faktor viii (ahf)-holdigt praeparat |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4522751A (da) |
| EP (1) | EP0127603B1 (da) |
| JP (1) | JPS59222420A (da) |
| AT (2) | AT379510B (da) |
| CA (1) | CA1225331A (da) |
| DE (1) | DE3475871D1 (da) |
| DK (1) | DK158281C (da) |
| ES (1) | ES532640A0 (da) |
Families Citing this family (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8403473D0 (en) * | 1984-02-09 | 1984-03-14 | Special Trustees For St Thomas | Purification of factor viii |
| US4965199A (en) * | 1984-04-20 | 1990-10-23 | Genentech, Inc. | Preparation of functional human factor VIII in mammalian cells using methotrexate based selection |
| GB8505882D0 (en) * | 1985-03-07 | 1985-04-11 | Central Blood Lab Authority | Purification of blood coagulation factor viii |
| DE3512910A1 (de) * | 1985-04-11 | 1986-10-16 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur reinigung von plasminogenaktivatoren |
| DE3625090A1 (de) * | 1986-07-24 | 1988-01-28 | Behringwerke Ag | Mittel zur therapie faktor viii-resistenter haemophilie a und verfahren zu seiner herstellung |
| AT391808B (de) * | 1986-11-03 | 1990-12-10 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer faktor viii (ahf)-haeltigen fraktion |
| AT391809B (de) * | 1988-01-12 | 1990-12-10 | Immuno Ag | Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen filtrierbaren krankheitserregern in blutplasmaprodukten |
| US5110907A (en) * | 1989-08-01 | 1992-05-05 | Alpha Therapeutic Corporation | Factor viii complex purification using heparin affinity chromatography |
| FR2659557A1 (fr) * | 1990-03-15 | 1991-09-20 | Fondation Nale Transfusion San | Procede de preparation d'une solution concentree de facteur viii. |
| FR2665364A2 (fr) * | 1990-03-15 | 1992-02-07 | Fondation Nale Transfusion San | Procede de preparation d'une solution concentree de facteur viii. |
| US5278289A (en) * | 1991-11-12 | 1994-01-11 | Johnson Alan J | Antihemophilic factor stabilization |
| PT2193809E (pt) | 1999-02-22 | 2015-08-24 | Baxter Int | Formulações de fator viii livres de albumina |
| ES2229931B1 (es) * | 2003-10-03 | 2006-01-16 | Grifols, S.A. | Composicion liquida bilogicamente estable de fviii, de fvw o del complejo fviii/fvw humanos. |
| PT2126106T (pt) | 2007-02-23 | 2017-12-12 | Sk Chemicals Co Ltd | Proceso para produzir e purificar o fator viii e seus derivados |
| RU2326689C1 (ru) * | 2007-03-13 | 2008-06-20 | Общество с ограниченной ответственностью "БиоГениус" | Способ получения концентрата viii фактора свертывания крови человека и продукт его содержащий |
| BRPI0921429B1 (pt) * | 2008-11-07 | 2022-07-12 | Takeda Pharmaceutical Company Limited | Formulação farmacêutica liofilizada estável, e, método para preparar um fator liofilizado estável |
| JP2014138614A (ja) * | 2014-04-09 | 2014-07-31 | Sk Chemicals Co Ltd | 第ｖｉｉｉ因子とその誘導体の製造及び精製方法 |
Family Cites Families (14)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE392038B (sv) * | 1971-09-08 | 1977-03-14 | Kabi Ab | Forfarande for isolering av antitrombin ur blod eller blodprodukter |
| US4022758A (en) * | 1973-06-19 | 1977-05-10 | Ab Kabi | Isolation of coagulation factors I and VIII from biological material |
| US3973002A (en) * | 1974-04-12 | 1976-08-03 | E. R. Squibb & Sons, Inc. | Antihemophilic factor |
| US4069216A (en) * | 1975-06-16 | 1978-01-17 | Edward Shanbrom, Inc. | Simplified methods for preparation of very high purity Factor VIII concentrate |
| CA1054052A (en) * | 1976-08-14 | 1979-05-08 | Edward Shanbrom | Simplified method for preparation of high yield, high purity factor viii concentrate |
| US4104266A (en) * | 1977-04-14 | 1978-08-01 | American National Red Cross | Method for preparation of antihemophilic factor |
| CA1074698A (en) * | 1977-12-19 | 1980-04-01 | Gail A. Rock | Method of collecting anti-hemophilic factor viii from blood and blood plasma |
| US4170639A (en) * | 1978-07-10 | 1979-10-09 | Warner-Lambert Company | Antihemophilic factor concentrate and its production |
| AT359646B (de) * | 1979-04-19 | 1980-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung von nebenwirkungs- freien plasmafraktionen |
| US4210580A (en) * | 1979-06-19 | 1980-07-01 | David Amrani | Process for separation and isolation of AHF and fibronectin from blood plasma |
| US4289691A (en) * | 1980-01-18 | 1981-09-15 | The Canadian Red Cross Society | Method of obtaining intermediate purity factor VIII |
| AT368883B (de) * | 1980-07-22 | 1982-11-25 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung einer neuen blutgerinnungsfoerdernden praeparation auf basis von humanproteinen |
| AT369263B (de) * | 1980-08-27 | 1982-12-27 | Immuno Ag | Verfahren zur herstellung eines faktor viii(ahf) -hochkonzentrates |
| US4361509A (en) * | 1981-12-14 | 1982-11-30 | Scripps Clinic And Research Foundation | Ultrapurification of factor VIII using monoclonal antibodies |
-
1983
- 1983-05-20 AT AT0185883A patent/AT379510B/de not_active IP Right Cessation
-
1984
- 1984-05-10 AT AT84890083T patent/ATE39618T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-05-10 DE DE8484890083T patent/DE3475871D1/de not_active Expired
- 1984-05-10 EP EP84890083A patent/EP0127603B1/de not_active Expired
- 1984-05-16 CA CA000454413A patent/CA1225331A/en not_active Expired
- 1984-05-16 DK DK241584A patent/DK158281C/da not_active Application Discontinuation
- 1984-05-18 US US06/611,638 patent/US4522751A/en not_active Expired - Lifetime
- 1984-05-18 ES ES532640A patent/ES532640A0/es active Granted
- 1984-05-19 JP JP59101636A patent/JPS59222420A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK241584D0 (da) | 1984-05-16 |
| DK158281C (da) | 1990-10-01 |
| ES8505822A1 (es) | 1985-06-16 |
| JPH0553777B2 (da) | 1993-08-10 |
| EP0127603A2 (de) | 1984-12-05 |
| ES532640A0 (es) | 1985-06-16 |
| DE3475871D1 (en) | 1989-02-09 |
| JPS59222420A (ja) | 1984-12-14 |
| US4522751A (en) | 1985-06-11 |
| EP0127603B1 (de) | 1989-01-04 |
| DK241584A (da) | 1984-11-21 |
| AT379510B (de) | 1986-01-27 |
| ATE39618T1 (de) | 1989-01-15 |
| ATA185883A (de) | 1985-06-15 |
| CA1225331A (en) | 1987-08-11 |
| EP0127603A3 (en) | 1986-09-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK158281B (da) | Fremgangsmaade til fremstilling af et faktor viii (ahf)-holdigt praeparat | |
| US4217339A (en) | Glycoprotein and process for isolating it | |
| Suzuki et al. | Purification and characterization of two lectins from Aloe arborescens Mill | |
| US4507229A (en) | Tissue protein PP4, a process for isolating it and its use | |
| KR940003751B1 (ko) | 항혈액 응고물질의 제조방법 | |
| PL168353B1 (pl) | Sposób wytwarzania zatezonego, standaryzowanego ludzkiego c z y n n i k a von Willebranda o wysokiej czystosci PL PL PL PL PL PL PL | |
| Olson et al. | Purification of porcine and human ristocetin-Willebrand factor | |
| US4301064A (en) | Ubiquitary tissue protein PP8 | |
| US4269825A (en) | New glycoprotein and process for isolating it | |
| US4402872A (en) | Protein and process for isolating it | |
| US4348316A (en) | New protein PP15, a process for its preparation and its use | |
| US4302385A (en) | Placenta-specific tissue protein PP10 | |
| JP2965623B2 (ja) | 精製されたアルブミン溶液の製造方法 | |
| US4368148A (en) | Protein PP9, process for its enrichment and its isolation and its use | |
| Holmberg et al. | Immunologic studies in haemophilia A | |
| US4075197A (en) | Serum albumin production | |
| NL8402182A (nl) | Humane eiwitten, antiserum en proefuitrustingen. | |
| Gonmori et al. | Properties of human tissue thromboplastins from brain, lung, arteries, and placenta | |
| US4325866A (en) | Protein, PP11, a process for its preparation and its use | |
| CA1108535A (en) | Protein and process for isolating it | |
| JPH0550520B2 (da) | ||
| US4018885A (en) | Steroid-binding globulin and process for preparing it and antibodies thereto | |
| US4309339A (en) | Leucine-rich 3,1-S-α2 -glycoprotein, process for isolating it and its use | |
| JPH0523280B2 (da) | ||
| Garcia et al. | The use of pluronic polyols in the precipitation of plasma proteins and its application in the preparation of plasma derivatives |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| AHB | Application shelved due to non-payment |