DK157381B - Fremgangsmaade til paavisning af antistoffer i en proeve og reagens til brug ved fremgangsmaaden - Google Patents
Fremgangsmaade til paavisning af antistoffer i en proeve og reagens til brug ved fremgangsmaaden Download PDFInfo
- Publication number
- DK157381B DK157381B DK553281AA DK553281A DK157381B DK 157381 B DK157381 B DK 157381B DK 553281A A DK553281A A DK 553281AA DK 553281 A DK553281 A DK 553281A DK 157381 B DK157381 B DK 157381B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- suspension
- erythrocytes
- polymer
- agglutinates
- antibodies
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 40
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 10
- 238000012360 testing method Methods 0.000 title description 6
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 claims description 25
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 21
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 15
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 8
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 claims description 6
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 claims description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 6
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 5
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 3
- 239000000076 hypertonic saline solution Substances 0.000 claims description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 150000001860 citric acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 2
- 229940071106 ethylenediaminetetraacetate Drugs 0.000 claims description 2
- 230000004523 agglutinating effect Effects 0.000 claims 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 4
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 4
- 229920000209 Hexadimethrine bromide Polymers 0.000 description 3
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 2
- 238000010908 decantation Methods 0.000 description 2
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 2
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 239000003109 Disodium ethylene diamine tetraacetate Substances 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N [(3r,4s,5r,6s)-4,5,6-triacetyloxyoxan-3-yl] acetate Chemical compound CC(=O)O[C@@H]1CO[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O MJOQJPYNENPSSS-XQHKEYJVSA-N 0.000 description 1
- VXLCKSFMONBCLQ-UHFFFAOYSA-N [Na]CC[Na] Chemical group [Na]CC[Na] VXLCKSFMONBCLQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001808 coupling effect Effects 0.000 description 1
- -1 dextrose Chemical class 0.000 description 1
- 150000004985 diamines Chemical group 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 235000019301 disodium ethylene diamine tetraacetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 238000005375 photometry Methods 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 150000003242 quaternary ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 description 1
- 229920013730 reactive polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 239000001509 sodium citrate Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K trisodium citrate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O HRXKRNGNAMMEHJ-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229940038773 trisodium citrate Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
- G01N33/554—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals the carrier being a biological cell or cell fragment, e.g. bacteria, yeast cells
- G01N33/555—Red blood cell
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
- Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
- Y10T436/10—Composition for standardization, calibration, simulation, stabilization, preparation or preservation; processes of use in preparation for chemical testing
- Y10T436/107497—Preparation composition [e.g., lysing or precipitation, etc.]
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Cooling Or The Like Of Electrical Apparatus (AREA)
- Cooling Or The Like Of Semiconductors Or Solid State Devices (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Description
DK 157381 B
X
Opfindelsen angâp en fremgangsmàde til pàvisning af antistor-fer i en preve og et reagens til brug ved pàvisning af antistoffer til brug ved fremgangsmàden.
Dèr kendes talrige fremgangsmâder til pàvisning af antistoffer. De anvendes til mange formai for at bestemme tilstedeværelsen af éventuelle eller givne antistoffer og til at mâle deres koncentration i forskellige væ-skar, især blod. Disse fremgangsmâder er især nvttige til afstemning af blod til transfusion.
De mest almindeligt anvendte kendte fremgangsmâder er baseret pâ anvendelse af antiglobulinreagens. Repræsen-tative fremgangsmâder er beskrevet i en artiksl af Coombs m.fl./ bind 26, side 255, i Brit.J.Exp.Path (1945).
Disse fremgangsmâder har imidlertid de ulemper, at de er tidsr0vende og har utilstrækkelig f0lsomhed.
En anden fremgangsmàde er beskrevet i en artikel i Transfusion, bind 8, nr. 6, november-december 1968, af P.La-lezari. Denne metode udnytter en fremgangsmàde, som ligner fremgangsmâden if01ge opfindelsen. Fælles med andre kendte fremgangsmâder har denne metode dog væsentlige ulemper. Den indebærer omhyggelig overvâgning af mængder af bestanddele og reagenser samt kompliceret udstyr. End-, videra er den ogsâ tidsr0vende.
Ulemperne ved de eksisterende fremgangsmâder giver en vssentlig hindring for behovet for hurtig og enkel pàvisning med acceptabel nojagtighed. Behovet for forbedret pâvisningsteknik er derfor klart.
Fpemgangsmàden ifalge opfindelsen er en huptig ûg najagtig fpemgangsniâde til pàvisning af antistoffer, og den er ejendom-me1ig ved (a) fremstilling af en i det væsentlige isotonisk suspension med lav ionstyrke, omfattende proven og erythro-cyter i en netto-negativt ladet form, 2
DK 15738 1 B
(b) o-pretholdelse af suspensionen i mindst 30 sekunder,.
(c) kombinering af suspensionen med en mængde op- 5 I0sning af polymer, der er effektiv til aggluti- nering af erythrocyterne, (d) fràskillelse af de fremkomne agglutinater af poly= mer og ervthrocyter fra suspensionens overliggen- 1° de væske, (e) < dispergering af agglutinatarne i en hvpertonisk saltopl0sniing med en i hovedsagen neutral pH-vsr-di, og 15 f) undersogelse af de dispergerede agglutinater for dissociation af erythrocytagglutinaterne.
Denne fremgangsmâde kan udfores pâ fâ minutter med simpelt 20 laboratorieudstyr. Endvidere giver den najagtige resultater, som er i hovedsagen uafnengige af de fl este variationer i mængden eller typen af bestanddele og anvendte reaktionsdel-tagere.
25 Den foreliggende fremgangsmâde er egnet til pâvisning af antistoffer i enhver normalt vandig pr0ve. Mest almindeligt anvendes den til et blodsarum (inklusive derivater deraf). Erythrocyter mâ sættes til pr0ven.
Erythrocyterne kan f0rst vaskes, normalt med isotonisk saltoplpsning. Hensigtsmæssigt indeholder pr0ven fra
o U
0,1 til 1%, fortrinsvis fra 0,3 til 0,8%, suspenderede erythrocyter (eller antigen-belagte erythrocyter), be-regnet pâ det samlede rumfang. Disse erythrocyter fâs normalt fra en anden donorkilde for at sikre, at de 35 vil acceptere éventuelle antistoffer, som findes i pr0ven. Erythrocyter kan fâs af samme donor som se- rumet, hvis der spges tilstedeværelse af et autoantis tof.
3
DK 157381 B
X pr0vesuspensionen skal erythrocyterne uâvise en netto-negativ ladning. Dette er den normale aller native tilstand af erythrocyt. I denne tilstand vil de hâve maksimal f01somhed for pâ£01gende agglutination. Den ® négative ladning sikres ved at opretholde en pH-værdi mellem ca. 6,0 og 6,6.
Provesuspensionen skal vers en i det vasentlige isotom’sk suspension ined lav ionstyrke. Den lave ionstyrke synes at sensi-10 tivere erythrocyterne til modtagelse af antistoffer. Derfor anvendes en endelig sa!tkoncentration fra ca. 0,02 til 0,05, især ca. 0,03 molær.
Selv om mange additiver kan anvendes til at opnâ disse 15 suspensionsbetingelser, er tilsætning af sukkerarter, sâsom dekstrose, bekvem til at forage det osmotiske tryk.
Praktisk taget ethvert sait kan anvendes til at for0ge ionstyrken, og simpel fortynding vil reducsre begge disse betingelser.
20 I en foretrukken udf0raisesform anvendes et specielt sait i suspensionsmediet. Dette sait er dinatriumethylen= diamintetraacetat. Ikke blot letter det meget sensi-tiveringen af erythrocyter over for antistof, men det 2S yderligere letter og/eller fremhæver andre trin'i den foreliggende fremgangsmâde.
Opfindelsen angâr endvidere et reagens til brug ved pâ-visning af antistoffer til brug i punkt (a) ved fremgangs-30 mâden, hvilket reagens er ejendommeligt ved, at det om-fatter et medium med en pH-værdi fra 6,0 til 6,6 og in-deholder fra 0,005 til 0,25% ethylendiamintetraacetat. og fra 4 til 8%, hensigtsmsssigt 5%, sukker, efter vægt, sâsom dekstrose eller andet monosaccharid.
Mâr farst suspensionen er blevet fremstillet, nàs hurtigt an-tistof-erythrocyt sensibi1isering til folgende trin (d.v.s.
35 4
DK 157381 B
hvis der er antistof til stede i proven). Suspensionen skal holdes i minimalt mindst 30 sekunder far tilsætning af polymer for at sikre nejagtigheden af pâvisningsmetoden.
Agglutinering af de suspenderede erythrocyter opnâs ved tilsætning af en opl0sning af polymer. Mange polvmere, der er effektive til dette formai, er enten kandt eller kan let identificeres. Disse polymère indbefatter de med en netto-positiv ladning, sâsom kvaternæra ammonium-salte, eller de, der er:..negativt ladede,·.. sâsom carboxy= methylcellulose. Foretrukket til dette formai er hexa= dimethorinbromid.
i Mængden af reaktionsdygtig polymer, som sættes til suspensionen, er ikke af afg0rende betydning. Normalt anvendes dog tilstrskkeligt polymer til i det mindste at agglutinere aile erythrocyterne. Et overskud foretræk-kas faktisk for at sikre n0jagtighed ved kvantitative bestemmelser.
Eftar tilsætning kræver den polymère i reglan mindra end 30 sekunder for fuldstændigt at udf0re sin funktion.
Derefter kan agglutinaterne af polymer og erythrocyt fraskillas. Dette opnâs mest bekvemt ved centrifuge-ring, eftarfulgt af dekantering af den klare overliggande væska.
Eftar fraskillelse bliver agglutinaterne dispergeret, fortrinsvis under mild omr0ring, i an hypertonisk salt- opl0sning, der har i det væsentlige neutral pH-værdi.
Mængderne deraf i dispersionsmediet er heller ikke af afg0rende betydning, selv om en pH-værdi fra 6,8 til 7,5 foretrækkes. I l0bet af sekunder bliver eksisten-sen eller fraværet af antistoffer klar.
Bestanddelene af saltopl0sningen (dispersionen) er heller ikke af afg0rende betydning, men kan variera,
DK 157381 B
s som tidligere beskrevet, med hensyn til.dispersions- : rnediet. I en foretrukken udf0relsesform er saltet, der anvendes i dispersionen,dog et citrat (for eksem-pel natrium, kalium, ammonium eller lignende citrat).
Disse salte har vist sig at lette agglutinat-dissocia-tionen, hvor der ikke er antistoffer til stede. Dette bâde fremskynder processen og letter unders0gelsen ved at klare pâvisningsslutpunktet.
Et reagens ifalge opfindelsen til brug ved pâvisning af antistoffer til brug i punkt (a) ved fremgangsmâden omfatter et medium med en pH-værdi fra 6,8 til 7,5 og indeholder fra 0,1 til 0,3 molær citratsalt og fra 1,5 til 5 vægt% sukker, fortrinsvis ca. 2 vægt%.
I fravær af antistoffer dissocierer agglutinaterne hur-tigt og genantager en suspensionsform eller kolloid form. I modsætning hertil bevises tilstedeværelse af antistof ved dets koblingsvirkning pâ erythrocyterne.
Antistoffer afsl0res eller pâvises derfor ved vedvaren-hed af agglutinaterne i dispersionen.
Disse resulater muligg0r, at der kan ske pâvisning gen-nem simpel unders0gelse af de dispergerede agglutinater.
Visuel undersogelse for eksempel (om nodvendigt under-st0ttet med mikroskop) muligg0r hurtig iagttagelse af den éventuelle grad, hvori agglutinaterne dissocierer. Denne dissociation sker i omvendt forhold til koncentrationen af antistof i den oprindelige pr0-ve.
Dette forhold muligg0r ogsâ n0jagtig kvantitativ mâ-ling af antistofkoncentration. Ved anvendelse af en-tan standardiserede betingelser ved processen eller duplikering under anvendelse af kontrolpr0ver kan der opnâs n0jagtig kvantitativ analyse.
DK 15738 1 B
s
Fremgangsmàden ifelge opfindelsen udfores normalt under omgi-velsernes betingelser (ca. 16 - 22eC). Dette er dog ikke ned-vendigt. Anvendelse af lave temperaturer kan være fordelagtig for at muliggare adskilt pàvisning af koldt reaktionsdygtige 5 antistoffer. Oisse kendte antistoffer forhindrer kun dissociation af agglutinaterne ved temperaturer lavere end omgivel-sernes. De kan derfor kun spores ved afkoling af agglutinaterne til fra ca. 0 til 6eC fer dispersion og undersagelse. Fremgangsmàden muliggar derfor ogsâ kvalitativ bestemmelse af 10 antistoffer, som er koldt reaktionsdygtige i modsætning til reaktionsdygtige ved omgivelsernes temperatur.
Yderligere kvalitativ analyse er mulig i overensstemmelse med fremgangsmàden ifolge opfindelsen.
15
Fremgangamâden ifolge opfindelsen er nærmere beskrevet i fal-gende eksempler.
EXSSMPSL I.
20 1/10 ml (2 drâber) af en serumprove blev anbragt i et 12 x 75 mm glasrar, efterfulgt af tilsætning af erythrocyter til dan-nelse af en suspension pâ ca. 0,5¾. 1 ml af et lavt ionisk vandigt fortyndingsmiddel, sammensat af 5¾ dekstrose og 0,01 25 molær dinatriumethylendiamintetraacetat, blev derefter tilsat. Suspensionen blev holdt ved stuetemperatur i 1 minut- 1/10 ml (2 drâber) af en 0,05% vandig opl0sning af Poly-brene (hexadimethrinbromid, fremstillet af Aldrich Che-30 mical Company, Milwaukee, Wisconsin) blev sat til glas-set og blandet. 15 sekunder senere blev glasset cen-trifugeret ved 1000 x g i 10 sekunder, og den cellefri overliggende væske blev dekanteret.
35 Po1ybrene-induceret agglutination blev ophævet ved tilsætning af 0,1 ml (2 drâber) af en oplosning af 60 ml Q,2M trinatrium- citratoplosning med 40 ml 5¾ dekstrose til glasset under for* 7
DK 157381 B
sigtig omroring. I lebet af 10 sekunder dissocierede de Poly-brene-inducerede aggregater delvis. Oenne positive reaktion kunne let iagttages makroskopisk. Den bekræftede tilstedeva-relsen af antistof i proveserumet.
5 EKSEMPEL II.
Fremgangsmâden i eksempel 1 blev gentaget med en ny pr0ve. I stedet for at udf0re aile trinene ved omgi-^g velsernes temperatur blev agglutinaterne, som blev tilbage efter dekantering, afk0let i et isbad i 1 minute
Efter pâ£01gende dispersion i opl0sningen dissocierede 15 agglutinaterne straks fuldstændigt. Dette beviste fra-vær af antistoffer inklusive koldt reaktionsdygtige antistoffer.
I de foregâende eksempler blev unders0gelsen udf0rt 20 blot ved visuel unders0gelse af makroskopiske aggluti- natpartikler. De udgjorde derfor kun negativ-positive pâ-vi s ni ngs p r0ve r. Mere n0jagtige og kvantitative resul- tater kan opnâs ved omhyggelig xnikroskopisk unders0- gelse, som indebærer pâvisning af graden af erythrocyt- 2 5 dissociation. Lignende resultater kan opnâs ved an-den teknik, der indebærer for eksempel fotometrisk analyse af dispersionsmediet kort efter agglutinattilsæt-ning. I dette tilfælde muligg0r analyse for kolloide
individuelle erythrocyter n0jagtig mâling af dissocia-*3 U
tionsgrad.
Til disse kvantitative freragangsmâder if0lge opfindel-sen udf0res der ofte kontrolpr0ver i tandem med den ene pr0ve. Dette sikrer n0jagtighed af mâlingen. Dis- 3 5 se kontroller kan enten hâve intet eller en forudbestemt mængde antistof som ved sædvanlig analytisk teknik.
Claims (10)
1. Fremgangsmâde til pâvisning af antistoffer i en prave, 5 kendetegnet ved (a) fremstiiling af en i det væsentlige isotonisk suspension raed lav ionstyrke, orafattende pr0ven og erythrocyter i netto-negativt ladet form, 10 (b) opretholdelse af suspensionen i mindst 30 sekun-der, (c) kombinering af suspensionen med en mængde opl0s-ning af polymer, der er effektiv til agglutine-ring af erythrocyterne, (d) fraskillelse af de fremkomne agglutinater af poly-mer og erythrocyter fra suspensions overliggende 20 væske, (e) dispergering af agglutinaterne i en hypertonisk saltopl0sning med i hovedsagen neutral pH-værdi, og 25 (f) undersoge1 se af de dispergerede agglutinater for disso ciation af erythrocytagglutinaterne.
2. Fremgangsxnâde if0lge krav 1, kendetegnet ved, at pr0ven vælges af gruppen bestâende af blod og 3. blodserum.
3. Fremgangsmâde if0lge krav 1, kendetegnet ved, at suspensionen omfatter fra 0,1 til 1S erythrocy® ter efter rumfang. 35
4. Fremgangsxnâde ifolge krav 1, kendetegnet ved, at den polymère er en negativt ladet polymer. DK 157381 B
5. Fremgangsmâde ifalge krav 1, kendetegnet ved, at den polymère er en positivt ladet polymer.
6. Fremgangsmâde ifolge krav 5,kendetegnet vedr at den polyraere er hexadimethrinbromid.
7. Fremgangsmâde ifolge krav 1, kendetegnet ved, at suspensionen har en pH-værdi rnellem 6,0 og 6,6.
8. Reagens til brug ved pâvisning af antistoffer til brug i punkt (a) ved fremgangsmâden ifolge krav 1, kendetegnet ved, at det omfatter et medium med en pH-værdi fra 6,0 til 6,6 og indeholder fra 0,005 til 0,25% ethylendiamintetraacetat og fra 4 til 8% sukker 15 efter vsgt.
9. Reagens ifalge krav 8, kendetegnet ved, at det yderligere omfatter fra 0,1 til 1% erythrocyter efter vægt. 20
10. Reagens til brug ved pâviskning af antistoffer til brug i punkt (e) ved fremgangsmâden ifolge krav 1, kendetegnet ved, at det omfatter et medium med en pH-værdi fra 6,8 til 7,5 og indeholder fra 0,1 til 0,3 2 5 molær citratsalt og fra 1,5 til 5 vsgt% sukker. 30 35
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US14444780A | 1980-04-28 | 1980-04-28 | |
| US14444780 | 1980-04-28 | ||
| US8100550 | 1981-04-24 | ||
| PCT/US1981/000550 WO1981003225A1 (en) | 1980-04-28 | 1981-04-24 | Antibody detection process and reagents therefor |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DK553281A DK553281A (da) | 1981-12-14 |
| DK157381B true DK157381B (da) | 1989-12-27 |
| DK157381C DK157381C (da) | 1990-05-21 |
Family
ID=22508628
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DK553281A DK157381C (da) | 1980-04-28 | 1981-12-14 | Fremgangsmaade til paavisning af antistoffer i en proeve og reagens til brug ved fremgangsmaaden |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4436825A (da) |
| EP (2) | EP0039195B1 (da) |
| JP (1) | JPH0370787B2 (da) |
| AU (1) | AU550966B2 (da) |
| CA (2) | CA1167751A (da) |
| DE (1) | DE3174968D1 (da) |
| DK (1) | DK157381C (da) |
| ES (1) | ES501734A0 (da) |
| IS (1) | IS1157B6 (da) |
| WO (1) | WO1981003225A1 (da) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4609630A (en) * | 1983-03-23 | 1986-09-02 | Yanovsky Jorge F | Method for improving the specificity of immunoassays |
| US4748129A (en) * | 1984-08-28 | 1988-05-31 | Snytex (U.S.A.) Inc. | Assay method employing fluorescent cell incorporative dye |
| EP0186476A3 (en) * | 1984-12-21 | 1987-10-21 | Hemochek Corporation | Diagnostic kit and method for assaying blood components |
| FR2577321B1 (fr) * | 1985-02-08 | 1989-04-28 | Lapierre Yves | Dispositif et procede de mise en evidence d'agglutinats erythrocytaires |
| US5076950A (en) * | 1985-12-20 | 1991-12-31 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Magnetic composition for particle separation |
| US4812401A (en) * | 1987-05-19 | 1989-03-14 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reversible agglutination mediators for separating cells from whole blood |
| US5136095A (en) * | 1987-05-19 | 1992-08-04 | Syntex (U.S.A.) Inc. | Reversible agglutination mediators |
| US5338689A (en) * | 1987-08-24 | 1994-08-16 | Stiftung Fur Diagnostische Forschung | Method and card for detecting antigens and/or antibodies |
| JPH087215B2 (ja) * | 1987-08-24 | 1996-01-29 | シュティフツング・フュア・ディアグノスティッシュ・フォルシュンク | 抗原および／又は抗体の検出方法および検出用の試験キット |
| IE61371B1 (en) * | 1989-09-25 | 1994-11-02 | Agen Ltd | Agglutination assay |
| US5411894A (en) * | 1990-03-20 | 1995-05-02 | Abbott Laboratories | Method of using tissue and cell adhesive preparations for biological test systems |
| FR2660437B1 (fr) * | 1990-03-27 | 1993-11-19 | Lille Ctre Rgl Transfusion Sang | Procede de mise en evidence d'agglutination erythrocytaire destine aux analyses de comptabilites sanguines. |
| US5665558A (en) * | 1994-05-17 | 1997-09-09 | Gamma Biologicals, Inc. | Method and apparatus useful for detecting bloodgroup antigens and antibodies |
| US5905028A (en) * | 1994-05-17 | 1999-05-18 | Gamma Biologicals, Inc. | Method and apparatus useful for detecting bloodgroup antigens and antibodies |
| US5583004A (en) * | 1994-12-23 | 1996-12-10 | Pincus; Mathew R. | Direct detection of unexpected alloantibodies in the serum of prospective transfusion recipients using a new hemagglutination inhibition assay |
| ES2126521B1 (es) * | 1997-06-05 | 1999-11-16 | Transfusion De La Comunidad Va | Metodo para la deteccion de antigenos presentes en la membrana de hematies, propios o acoplados y de anticuerpos irregulares en muestras de suero. |
| US20080261247A1 (en) * | 2007-04-03 | 2008-10-23 | Parviz Lalezari | Method of detecting red cell antigen-antibody reactions |
| US7919266B2 (en) * | 2007-04-23 | 2011-04-05 | Clavina Diagnostics, Inc. | Method of detecting red cell antigen-antibody reactions |
| WO2010040103A1 (en) | 2008-10-03 | 2010-04-08 | Micronics, Inc. | Microfluidic apparatus and methods for performing blood typing and crossmatching |
| WO2014182844A1 (en) | 2013-05-07 | 2014-11-13 | Micronics, Inc. | Microfluidic devices and methods for performing serum separation and blood cross-matching |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL130516C (da) * | 1966-11-08 | |||
| US3902964A (en) * | 1971-12-13 | 1975-09-02 | U S Medical Research And Dev I | Method of and apparatus for chemically separating plasma or serum from formed elements of blood |
| DE2310964A1 (de) * | 1973-03-02 | 1974-09-05 | Schering Ag | Antigen- bzw. antigen-proteinkonjugatbeschichtete erythrocytenpraeparation |
| DE2551208C3 (de) * | 1975-11-14 | 1981-05-27 | Behringwerke Ag, 3550 Marburg | Verfahren zur Herstellung einer stabilen Erythrozyten-Präparation |
| JPS53104725A (en) * | 1977-02-24 | 1978-09-12 | Sanki Eng Co Ltd | Immunological blood detecting method and measuring tube |
| GB1589107A (en) * | 1977-06-14 | 1981-05-07 | American Home Prod | Immunologic compositions |
| US4247536A (en) * | 1978-03-20 | 1981-01-27 | American Hospital Supply Corporation | Method of preparing C3-sensitized erythrocytes |
| DE2844060A1 (de) * | 1978-10-10 | 1980-04-30 | Behringwerke Ag | Immunologisch-diagnostisches verfahren sowie diagnostische mittel |
| US4209373A (en) * | 1979-06-01 | 1980-06-24 | Corning Glass Works | Acidic agar gel electrochromatography of hemoglobins |
-
1981
- 1981-04-21 EP EP81301754A patent/EP0039195B1/en not_active Expired
- 1981-04-24 WO PCT/US1981/000550 patent/WO1981003225A1/en not_active Ceased
- 1981-04-24 AU AU71738/81A patent/AU550966B2/en not_active Ceased
- 1981-04-24 EP EP81901264A patent/EP0050660B1/en not_active Expired
- 1981-04-24 JP JP56501718A patent/JPH0370787B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1981-04-24 DE DE8181901264T patent/DE3174968D1/de not_active Expired
- 1981-04-27 CA CA000376259A patent/CA1167751A/en not_active Expired
- 1981-04-28 ES ES501734A patent/ES501734A0/es active Granted
- 1981-07-27 IS IS2634A patent/IS1157B6/is unknown
- 1981-12-14 DK DK553281A patent/DK157381C/da active
-
1982
- 1982-05-21 US US06/380,939 patent/US4436825A/en not_active Expired - Lifetime
-
1984
- 1984-02-22 CA CA000448077A patent/CA1179941A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0370787B2 (da) | 1991-11-08 |
| IS1157B6 (is) | 1984-03-05 |
| DE3174968D1 (en) | 1986-08-28 |
| ES8207638A1 (es) | 1982-09-16 |
| WO1981003225A1 (en) | 1981-11-12 |
| EP0050660A1 (en) | 1982-05-05 |
| DK553281A (da) | 1981-12-14 |
| AU550966B2 (en) | 1986-04-10 |
| EP0050660A4 (en) | 1982-09-03 |
| IS2634A7 (is) | 1982-01-29 |
| CA1179941A (en) | 1984-12-27 |
| EP0050660B1 (en) | 1986-07-23 |
| JPS57500752A (da) | 1982-04-30 |
| CA1167751A (en) | 1984-05-22 |
| ES501734A0 (es) | 1982-09-16 |
| DK157381C (da) | 1990-05-21 |
| EP0039195B1 (en) | 1986-06-18 |
| EP0039195A3 (en) | 1982-04-28 |
| AU7173881A (en) | 1981-11-26 |
| US4436825A (en) | 1984-03-13 |
| EP0039195A2 (en) | 1981-11-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK157381B (da) | Fremgangsmaade til paavisning af antistoffer i en proeve og reagens til brug ved fremgangsmaaden | |
| KR920010294B1 (ko) | 백혈구의 3개의 모 집단에 대한 혈액학 콘트롤 조성물 · 및 그 조제방법과 전혈액 조절체계에 있어서의 사용방법 | |
| JP4686506B2 (ja) | 基準対照血液および製法 | |
| Dimeski et al. | Correction and reporting of potassium results in haemolysed samples | |
| JP2008026317A5 (da) | ||
| SE446911B (sv) | Foerfarande foer beredning av en cellsuspension frforfarande for beredning av en cellsuspension franaan ett blodprov foere raekning av antalet roeda o ett blodprov fore rekning av antalet roda och vitch vita blodkroppar samt blodplaettar a blodkroppar samt blodplettar | |
| Chapman et al. | A rapid, automated flow cytometric method to measure activated degranulated platelets by density determination | |
| CA1319592C (en) | Conservative whole blood sample preparation technique | |
| Clark et al. | Manual, semiautomated, and point-of-care testing in hematology | |
| US5858789A (en) | Method for making a reticulocyte assay control | |
| JPH09508975A (ja) | 全血試料中に存在する分析対象成分の定量に用いる分析用キュベット、定量方法及び診断検査キット | |
| US6444471B1 (en) | Reticulocyte containing complete blood control | |
| Tasker et al. | Evaluation of methods of platelet counting in the cat | |
| DE60116689T2 (de) | Vollblut-Immunoassay | |
| Szuflad et al. | A general method for concentrating blood samples in preparation for counting very low numbers of white cells | |
| Culibrk et al. | Application of the ADVIA cerebrospinal fluid assay to count residual red blood cells in blood components | |
| JPH0611506A (ja) | 白血球測定用試薬及び白血球測定用試料調製方法 | |
| Fauré et al. | A novel rapid method of red blood cell and platelet permeabilization and staining for flow cytometry analysis | |
| JP4547110B2 (ja) | 全血免疫測定方法 | |
| CA1040081A (en) | Method for analysis of endotoxin-precipitated limulus lysate | |
| KR102609257B1 (ko) | Abo 항체 검사 장치 및 그 검사 방법 | |
| Higuchi et al. | Investigation of erythrocyte aggregation parameters of blood with low levels of fibrinogen by syllectometry | |
| US5726745A (en) | Process and apparatus for preparing a blood sample for analysis of white blood cells | |
| Walton | General Laboratory Medicine | |
| Zupanska et al. | A gel microtyping system for diagnosis of paroxysmal nocturnal hemoglobinuria |