DK155741B - 7-beta-amino-cepham-3-on-4-carboxylsyreforbindelser 1-oxider og salte deraf til anvendelse som mellemprodukt ved fremstilling af antibiotisk virksomme 7-beta-acylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-forbindelser. - Google Patents

Description

, DK 155741 B

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte 73-amino-cepham- 3-on-4-carboxylsyreforbindelser og 1-oxider og salte deraf til anvendelse som mellemprodukter ved fremstilling af antibiotisk virksomme 73-acylamino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelser.

73-Amino-cepham-3-on-4-carboxylsyreforbindelserne ifølge opfindelsen er ejendommelige ved, at de har den almene formel

Rla „ S 0 \1—/ \ f (I) 0=_N 3 =0

V

s 0=0-1ΓΛ hvori R er hydrogen eller en aminobeskyttelsesgruppe R1 med højst

2A

18 C-atomer, og R er en gruppe, der sammen med carbonylgrupperingen -C(=0)- danner en ved forestring, amidering eller hydroximering beskyttet carboxylgruppe med højst 19 C-atomer.

De omhandlede cepham-3-on-forbindelser samt de tilsvarende 1-oxider kan foreligge såvel i ketoform som i enolform af cephem-3-ol-forbindelser med formlen pla R\

v-A

0=1_N β - OH (la) \ t / 0-C-R2a som indeholder en dobbeltbinding i 2,3- eller fortrinsvis 3,4-stil-ling, eller som en blanding af de to former.

forbindelser med formlen la med en dobbeltbinding i 2,3-stilling 2

DK 155741 B

1A

En aminobeskytteisesgruppe R er en med hydrogen udbyttelig gruppe, i første række en acylgruppe Ac, samt en organisk silyl- eller en organisk stannylgruppe. En gruppe Ac er i første række acylresten af en organisk carboxylsyre med højst 18 carbonatomer, især acylresten af en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk, araliphatisk, heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk carboxylsyre (inklusive myresyre), samt acylresten af et kulsyrehalvderivat.

2A

En beskyttet carboxylgruppe med formlen -C(=0)-R er i første række en forestret carboxylgruppe, men kan også være en eventuelt substitueret carbamoyl- eller hydrazinocarbonylgruppe.

2A

Gruppen R kan være en med en organisk gruppe foretheret hydroxy-gruppe, hvori den organiske gruppe fortrinsvis indeholder 18 carbon· atomer, og som sammen med -C(=0)-grupperingen danner en foresteret carboxylgruppe. Sådanne organiske grupper er f.eks. aliphatiske, cycloaliphatiske, cycloaliphatisk-aliphatiske, aromatiske eller ar-aliphatiske grupper, især eventuelt substituerede carbonhydridgrupp-af denne art, samt heterocycliske eller heterocyclisk-aliphatiske grupper.

2A

Gruppen R kan også være en organisk silyloxygruppe samt en med en organometalllsk gruppe foretheret hydroxygruppe, såsom en tilsvaren organisk stannyloxygruppe, især en silyloxy- eller stannyloxygruppe der er substitueret med 1 til 3 eventuelt substituerede carbonhydri grupper, fortrinsvis med højst 1$ carbonatorner, såsom aliphatiske carbonhydridgrupper, og eventuelt med halogen, såsom chlor.

2A

En gruppe R , der sammen med -C(=0)-gruppering danner en carbamoyl gruppe, er en eventuelt substitueret aminogruppe, hvori substituent er eventuelt substituerede monovalente eller divalente carbonhydrid grupper, fortrinsvis med højst 1$ carbonatomer, såsom eventuelt

„ DK 155741 B

substituerede monovalente eller divalente aliphatiske, cycloaliphati-ske, cycloaliphatisk-aliphatiske, aromatiske eller araliphatiske carbonhydridgrupper med højst lå carbonatomer, endvidere tilsvarende heterocycliske eller heterocyclisk-aliphatiske grupper med højst lå carbonatomer og/eller funktionelle grupper, såsom eventuelt funktionelt omdannet, især frit hydroxy, endvidere foretheret eller foresteret· hydroxy, hvori dé foresterende eller foretherende grupper f.eks. har de ovenfor angivne betydninger og fortrinsvis indeholder højst lå carbonatomer, samt acylgrupper, i første række af organiske carboxylsyrer og af kulsyrehalvderivater, fortrinsvis med højst lå carbonatomer.

OA

I en substitueret hydrazinoearbonylgruppe med formlen -C(-0)-R kan det ene eller begge nitrogenatomer være substitueret, hvorved der som substituenter i første række kommer på tale eventuelt substituerede monovalente eller divalente carbonhydridgrupper, fortrinsvis med højst 18 carbonatomer, såsom eventuelt substituerede, monovalente eller divalente aliphatiske, cycloaliphatiske, cycloaliphatisk-aliphatiske, aromatiske eller araliphatiske carbonhydridgrupper med højst lå carbonatomer, endvidere tilsvarende heterocycliske eller heterocyclis aliphatiske grupper med højst lå carbonatomer og/eller funktionelle grupper, såsom acylgrupper, i første række af organiske carboxylsyre! eller af kulsyrehalvderivater, fortrinsvis med højst lå carbonatomei

De i oven- og nedenstående beskrivelse, anvendte almene begreber har f.eks. følgende betydninger:

En aliphatisk gruppe, inklusive den aliphatiske gruppe i en tilsvaren· de organisk carboxylsyre samt en tilsvarende ylidengruppe, er en even· tuelt substitueret mono- eller divalent aliphatisk carbonhydridgruppe især lavalkyl, samt lavalkenyl eller lavalkinyl, endvidere lavalkyl-iden, der f.eks. kan indeholde højst 7/ fortrinsvis højst 1,carbonatomer. Sådanne grupper kan eventuelt være mono-, di- eller polysub-stitueret med funktionelle grupper, f.eks. frie, foretherede eller foresterede hydroxy- eller mereaptogrupper, såsom lavalkoxy, lav-alkenyloxy, lavalkylendioxy, eventuelt substitueret phenyloxy eller

DK 155741 B

4 phenyllavalkoxy, lavalkylthio eller eventuelt substitueret phenylthio, phenyllavalkylthio, heterocyclylthio .eller heterocyclyllavalkyl-thio, eventuelt substitueret lavalkoxycarbonyloxy eller lavalkanoyl-oxy, eller halogen, endvidere oxo, nitro, eventuelt substitueret amino, f.eks. lavalkylamino, dilavalkylamino, lavalkylenamino, oxa-lavalkylenamino eller azalavalkylenamino, samt acylamino, såsom lav-alkanoylamino, lavalkoxycarbonylamino, halogenlavalkoxycarbonylamino, eventuelt substitueret phenyllavalkoxycarbonylamino, eventuelt substitueret carbamoylamino, ureidocarbonylamino eller guanidinocar-bonylamino, endvidere eventuelt i salt-, såsom alkalimetalsaltform foreliggende sulfoamino, azido, acyl, såsom lavalkanoyl eller benzoyl, eventuelt, funktionelt omdannet carboxyl, såsom i saltform foreliggende carboxyl, foresteret carboxyl, såsom lavalkoxycarbonyl, eventuelt substitueret carbamoyl, såsom N-lavalkyl- eller Ν,ΚΓ-dilavalkylcarbam-oyl, endvidere eventuelt substitueret ureidocarbonyl eller guanidino-carbonyl eller cyan, eventuelt funktionelt omdannet sulfo, såsom sulfamoyl eller i saltform foreliggende sulfo, eller eventuelt O-mono-eller Ο,Ο-disubstitueret phosphono, hvori substituenter f.eks. er eventuelt substitueret lavalkyl, phenyl eller phenyllavalkyl, hvorved usubstitueret eller O-monosubstitueret phosphono også kan foreligge i salt-, såsom alkalimetalsaltform.

En divalent aliphatisk gruppe, inklusive den tilsvarende gruppe i en divalent aliphatisk carboxylsyre er f.eks. lavalkylen eller lavalken-ylen, der eventuelt kan være mono-, di- eller polysubstitueret, f. eks. som en ovenfor angivet aliphatisk gruppe, og/eller afbrudt af heteroatomer, såsom oxygen, nitrogen eller svovl.

En cycloaliphatisk eller cycloaliphatisk-aliphatisk gruppe, inklusive den cycloaliphatiske eller cycloaliphatisk-aliphatiske gruppe i en tilsvarende organisk carboxylsyre eller en tilsvarende cycloaliphatisk eller cycloaliphatisk-aliphatisk ylidengruppe,er en eventuelt substi-. tueret, mono- eller divalent cycloaliphatisk eller cycloaliphatisk-aliphatisk carbonhydridgruppe, f.eks. mono-, di- eller polycyclisk cycloalkyl eller cycloalkenyl, endvidere cycloalkyliden eller cyclo-alkyl- eller cycloalkenyl-lavalkyl eller lavalkenyl, endvidere cyclo- 5

DK 155741 B

alkyl-lavalkyliden eller cycloalkenyllavalkyliden, hvorved cycloalky] og cycloalkyliden f.eks. indeholder højst 12, såsom 3-3, fortrinsvis 3-6,ringcarbonatomer, medens cycloalkenyl f.eks. har højst 12, såsom 3-$, f.eks. 5-3, fortrinsvis 5 eller 6,ringcarbonatomer, samt 1 til 2 dobbeltbindinger, og den aliphatiske' del af en cycloaliphatisk-aliphatisk gruppe f.eks. kan indeholde højst 7? fortrinsvis højst 2j carbonatomer. De ovennævnte cycloaliphatiske eller cycloaliphatisk-aliphatiske grupper kan om ønsket være mono-, di- eller polysubstitu-eret f.eks. med eventuelt substituerede aliphatiske carbonhydridgrupper, såsom de ovennævnte, eventuelt substituerede lavalkylgrupper, eller med funktionelle grupper, f.eks. som de ovennævnte aliphatiske carbonhydridgrupper.

En aromatisk gruppe, inklusive den aromatiske gruppe i en tilsvarende carboxylsyre,er. en eventuelt substitueret aromatisk carbonhydridgrupp f.eks. en mono-, di- eller polycyclisk aromatisk carbonhydridgruppe, især phenyl, samt biphenylyl eller naphthyl, der eventuelt kan være mono-, di- eller polysubstitueret, f.eks. som. de ovennævnte aliphatiske og cycloaliphatiske carbonhydridgrupper.

En divalent aromatisk gruppe, f.eks. i en aromatisk carboxylsyre, er i første række 1,2-arylen, især 1,2-phenylen, der eventuelt kan være mono-, di- eller polysubstitueret, f.eks. som de ovennævnte aliphatiske og cycloaliphatiske carbonhydridgrupper.

En araliphatisk gruppe, inklusive den araliphatiske gruppe i en tilsvarende carboxylsyre, endvidere en araliphatisk ylidengruppe, er f.eks. en eventuelt substitueret araliphatisk carbonhydridgruppe, såsom en eventuelt substitueret aliphatisk carbonhydridgruppe, der f. eks. har indtil tre, eventuelt substituerede mono-, di- eller poly-cycliske, aromatiske carbonhydridgrupper, og er i første række phenyl lavalkyl eller phenyl-lavalkenyl, samt phenyl-lavalkinyl, endvidere phenyllavalkyliden, hvorved sådanne grupper f.eks. indeholder 1-3 phenylgrupper og eventuelt kan være mono-, di- eller polysubstitueret i den aromatiske og/eller aliphatiske del, f.eks. som de ovennævnte aliphatiske og cycloaliphatiske grupper.

6

DK 155741 B

Heterocycliske grupper, indbefattet sådanne i heterocyclisk-aliphati-ske grupper, inklusive heterocycliske eller heterocyclisk-aliphatiske grupper i tilsvarende carboxylsyrer, er især monocycliske, samt dieller polycycliske, aza-, thia-, oxa-, thiaza-, thiadiaza-, oxaza-, diaza-, triaza- eller tetrazacycliske grupper af aromatisk karakter, endvidere tilsvarende partielt eller helt mættede heterocycliske grupper af denne art, hvorved sådanne grupper eventuelt kan være mono-, di- eller polysubstitueret, f.eks. som de ovennævnte cyclo-aliphatiske grupper. Den aliphatiske del i heterocyclisk-aliphatiske grupper har f.eks. den for de tilsvarende cycloaliphatisk-aliphatiske eller araliphatiske grupper angivne betydning.

Acylresten af et kulsyrehalvderivat er fortrinsvis acylresten af en t svarende halvester,hvori den organiske gruppe i estergruppen er en ev substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, aromatisk eller araliphatis carbonhydridgruppe eller en heterocyclisk-aliphatisk gruppe, i første række acylresten af en eventuelt, f.eks. i a~ eller β-stilling, substitueret lavalkylhalvester af kulsyre samt en eventuelt i den organiske gruppe substitueret lavalkenyl-, cycloalkyl-, phenyl- eller phenyl-lavalkyl-halvester af kulsyre. Acylrester af en kulsyrehalv-ester er endvidere tilsvarende rester af lavalkylhalvestere af kulsyre, hvori lavalkyIdelen indeholder en heterocyclisk gruppe, f.eks. en af de ovennævnte heterocycliske grupper af aromatisk karakter, hvorved såvel lavalkylgruppen som den heterocycliske gruppe eventuelt kan være substituret. Acylresten af et kulsyrehalvderivat kan også være en eventuelt N-substitueret carbamoylgruppe, såsom en eventuelt halogeneret N-lavalkylcarbamoylgruppe.

En foretheret hydroxygruppe er i første række eventuelt substitueret lavalkoxy, hvori substituenter i første række er frie eller funktionelt omdannede, såsom foretherede eller foresterede,hydroxygrupper, især lavalkoxy eller halogen, endvidere lavalkenyloxy, cycloalkyloxy eller eventuelt substitueret phenyloxy samt heterocyclyloxy eller 7 DK 155741 8 heterocyclyllavalkoxy, især også eventuelt substitueret phenyllav-alkoxy.

En eventuelt substitueret aminogruppe er f.eks. amino, lavalkylamino, dilavalkylamino, lavalkylenamino, oxalavalkylenamino, thialavalkylen-amino, azalavalkylenamino, hydroxyamino, lavalkoxyamino, lavalkanoyl-oxyamino, lavalkoxycarbonylamino eller lavalkanoylamino.

En eventuelt substitueret hydrazinogruppe er f.eks. hydrazino, 2-lavalkylhydrazino, 2,2-dilavalkylhydrazino, 2-lavalkoxycarbonylhydra-zino eller 2-lavalkanoylhydrazino.

Lavalkyl er f.eks. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, iso- . butyl, sek.butyl eller tert.butyl samt n-pentyl, isopentyl, n-hexyl, isohexyl eller n-heptyl, medens lavalkenyl f.eks. er vinyl, allyl, isopropenyl, 2- eller 3-methallyl eller 3-butenyl, lavalkinyl f.eks. propargyl- eller 2-butinyl, og lavalkyliden f.eks. isopropyliden eller isobutyliden.

Lavalkylen er f.eks. _l,2-ethylep, 1,2- eller 1,3-propylen, 1,4-butylen, 1,5-pentylen eller 1,6-hexylen, medens lavalkenylen f.eks. er 1,2-ethenylen .eller 2-buten-l,4-ylen. Med heteroatomer afbrudt lavalkylen er f.eks. oxalavalkylen, såsom 3-oxå-1,5-pentylen, thia-lavalkylen, såsom 3-thia-l,5-pentylen, eller azalavalkylen, såsom 3-lavalkyl-3-aza-l,5-pentylen, f.eks. 3-methyl-3-aza-l,5-pentylen.

Cycloalkyl er f.eks. cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclo-hexyl eller cycloheptyl, samt adamantyl, cycloalkenyl f.eks. cyclo-propenyl, 1-, 2- eller 3-cyclopentenyl, 1-, 2- eller 3-cyclohexenyl, 3-cycloheptenyl eller 1,4-cyclohexadienyl og cycloalkyliden f.eks. cyclopentyliden eller cyclohexyliden. Cycloalkyl-lavalkyl eller -lavalkenyl er f.eks. cyclopropyl-, cyclopentyl-, cyclohexyl- eller cycloheptylmethyl, -1,1- eller -1,2-ethyl, -1,1-, -1,2- eller -1,3-propyl, -vinyl eller -allyl, medens cycloalkenyl-lavalkyl eller -lavalkenyl f.eks. er 1-, 2- eller 3-cyclopentenyl-, 1-, 2- eller 3-cyclohexenyl- eller 1-, 2- eller 3-cycloheptenylme.thyl, -1,1- eller -1,2-ethyl, -1,1-, -1,2- eller -1,3-propyl, -vinyl eller -allyl. Cycloalky1-lavalkyliden er f.eks. cyclohexylmethylen, og cycloalkenyl-lavalkyliden f.eks. 3-cyclohexenylmethylen.

8 DK 155741B

Naphthyl er 1- eller 2-naphthyl, medens biphenylyl f.eks. er 4-bi-p he ny ly 1.

Phenyl-lavalkyl eller phenyl-lavalkenyl er f.eks. benzyl, 1- eller 2- phenylethyl, 1-, 2- eller 3-phenylpropyl, diphenylmethyl, trityl, styryl eller cinnamyl, naphthyl-lavalkyl, f.eks. 1- eller 2-naphthyl-methyl, og phenyllavalkyliden,f.eks. benzyliden.

Heterocycliske grupper er i første række eventuelt substituerede heterocycliske grupper af aromatisk karakter, f.eks. tilsvarende mono-cycliske, monoaza-, monathia- eller monooxacycliske grupper, såsom pyrryl, f.eks. 2-pyrryl eller 3-pyrryl, pyridyl, f.eks. 2-, 3“ eller 4-pyridyl, endvidere pyridinium, thienyl, f.eks. 2- eller 3-thienyl, eller furyl, f.eks. 2-furyl, bicycliske monoaza-, monooxa- eller mono-thiacycliske grupper, såsom’ indolyl, f.eks. 2- eller 3-indolyl, qui-nolinyl, f.eks. 2- eller 4-quinolinyl, isoquinolinyl, f.eks. 1-iso-quinolinyl, benzofuranyl, f.eks. 2- eller 3-benzofuranyl, eller benzo-thienyl, f.eks. 2- eller 3**benzothienyl, monocycliske diaza-, triaza-, tetraza-, oxaza-, thiaza-, thiadiaza- eller oxazacycliske grupper,såsom imidazolyl, f.eks. 2-imidazolyl, pyrimidinyl, f.eks. 2- eller 4-pyri-midinyl, triazolyl, f.eks. l,2,4-triazol-3-yl, tetrazolyl, f.eks. 1-eller 5-tetrazolyl, oxazolyl, f.eks. 2-oxazolyl, isoxazolyl, f.eks. ' 3- eller 4-isoxazolyl, thiazolyl, f.eks. 2-thiazolyl, isothiazolyl, f.eks. 3- eller 4-isothiazolyl eller 1,2,4- eller 1,3,4-thiadiazolyl, f.eks. l,2,4-thiadiazol-3-yl eller 1,3,4-thiadiazol-2-yl, eller bicycliske diaza-, oxaza- eller thiazacycliske grupper,såsom benzimida-zolyl, f.eks. 2-benzimidazolyl, benzoxazolyl, f.eks. 2-benzoxazolyl, eller benzthiazolyl, f.eks. 2-benzthiazolyl. Tilsvarende partielt eller helt mættede grupper er f.eks. tetrahydrothienyl, såsom 2-tetrahydrothienyl, tetrahydrofuryl, såsom 2-tetrahydrofuryl eller piperidyl, f.eks. 2- eller 4-piperidyl. Heterocyclisk-aliphatiske grupper er lavalkyl eller lavalkenyl, der indeholder heterocycliske grupper, især de ovennævnte. De ovennævnte heterocyclylgrupper kan f.eks. være substitueret med eventuelt substituerede aliphatiske eller aromatiske carbonhydridgrupper, især lavalkyl, såsom methyl, eller eventuelt, f.eks. med halogen, såsom chlor, substitueret phenyl,f.eks. phenyl eller 4-chlorphenyl, eller med funktionelle grupper,f.eks, som ie aliphatiske carbonhydridgrupper.

Lavalkoxy er f.eks, methoxy, ethoxy, n-propyloxy, isopropyloxy,· n- I*m4*xr1 nvtr *? rT\V\irl"Trl ovir Vnvf-trl Avir *f~ nv»+* ΛνΐΓ m_Avrr ώΐ 1 ΛΥ»

9 DK 155741 B

tert.pentyloxy, Disse grupper kan være substitueret, f.eks. som i halogen-lavalkoxy, især 2-halogen-lavalkoxy, f.eks. 2,2,2-trichlor-, 2-brom- eller 2-iodethoxy, Lavalkenyloxy er f.eks. vinyloxy eller allyloxy, lavalkylendioxy f.eks. methylendioxy, ethylendioxy eller isopropylidendioxy, cycloalkoxy f.eks. cyclopentyloxy, cyclohexyl-oxy eller adamantyloxy, phenyl-lavalkoxy f.eks. benzyloxy, 1- eller 2-phenylethoxy, diphenylmethoxy eller 4^T~dimetkoxy~diphenylmethoxy, eller heterocyclyloxy eller heterocyclyllavalkoxy f.eks. pyridyllav-alkoxy, såsom 2-pyridylmethoxy, furyl-lavalkoxy, såsom furfuryloxy, eller thienyl-lavalkoxy, såsom 2-thenyloxy.

Lavalkylthio er f.eks. methylthio, ethylthio eller n-butylthio, lav-alkenylthio f.eks. allyIthio, og phenyl-lavalkylthio -f.eks. benzyl-thio, medens med heterocyclylgrupper eller heterocyclylaliphatiske grupper foretherede mercaptogrupper især er pyridylthio, f.eks. 4-pyridylthio, imidazolylthio, f.eks. 2-imidazolylthio, thiazolylthio, f.eks. 2-thiazolylthio, 1,2,4- eller 1,3,4-thiadiazolylthio, f.eks.

l,2,4-thiadiazol-3-ylthio eller 1,3,4~thiadiazol-2-ylthio, eller te-trazolylthio, f.eks. l-methyl-5-tetrazolylthio.

Foresterede hydroxygrupper er i første række halogen, f.eks. fluor, chlor, brom eller iod, samt lavalkanoyloxy, f.eks. acetyloxy eller propionyloxy, lavalkoxycarbonyloxy, f.eks. methoxycarbonyloxy, ethoxy-carbonyloxy eller tert.butyloxycarbonyloxy, 2-halogenlavalkoxycar-bonyloxy, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxy, 2-bromethoxycarbo-nyloxy eller 2-iodethoxycarbonyloxy, eller arylcarbonylmethoxy-carbonyloxy, f.eks. phenacyloxycarbonyloxy.

Lavalkoxycarbonyl er f.eks. methoxycarbonyl, ethoxycarbonyl, n-propyl-oxycarbonyl, isopropyloxycarbonyl, tert.butyloxycarbonyl eller tert. pentyloxyc arbonyl.

N-Lavalkyl- eller Ν,Ν-dilavalkyl-earbamoyl er f.eks. W-methylcarbamoyl, N-ethylcarbamoyl, Ν,Ν-dimethylcarbamoyl eller N,N-diethylcarbam~ oyl, medens N-lavalkylsulfamoyl f.eks. er N-methylsulfamoyl eller N,N~dimethylsulfamoyl.

Et i alkalimetalsaltform foreliggende carboxyl eller sulfo er f.eks. et i natrium- eller kaliumsaltform foreliggende carboxyl eller sulfo.

10 DK 155741 B

Lavalkylamino- eller dilavalkylamino er f.eks. methylamino, ethyl-amino, dimethylamino eller diethylamino, lavalkylenamino f.eks. pyrrolidino eller piperidino, oxalavalkylenamino f.eks. morpholino, thialavalkylenamino f.eks. thiomorpholino, og azalavalkylenamino f.eks. piperazino eller 4-methylpiperazino, Acylamino står især for carbamoylamino, lavalkylcarbamoylamino, såsom methylcarbamoylamino, ureidocarbonylamino, guanidinocarbonylamino, lavalkoxycarbonylamino, f.eks* methoxycarbonylamino, ethoxycarbonylamino eller tert.butyl-oxycarbonylamino, halogenlavalkoxycarbonylamino, såsom 2,2,2-trichlor-ethoxyearbonylamino, phenyllavalkoxycarbonylamino, såsom 4-methoxy-benzyloxycarbonylamino, lavalkanoylamino, såsom acetylamino eller propionylamino, endvidere phthalimido, eller eventuelt i salt-, såsom alkalimetal-, f.eks. natrium-, eller ammoniumsaltform, foreliggende siilf oamino.

Lavalkanoyl er f.eks. formyl, acetyl, propionyl eller -pivaloyl.

O-Lavalkyl-phosphono er f.eks. 0-methyl- eller O-ethyl-phosphono, 0,0T-dilavalkyl-phosphono f.eks. 0,0r-dimethylphosphono eller 0,0?-diethylphosphono, O-phenyllavalkyl-phosphono f.eks. O-benzyl-phos-phono, og 0-lavalkyl-0T-phenyl-lavalkyl-phosphono f.eks. O-benzyl-0T-methy1-phosphono.

Lavalkenyloxycarbonyl er f.eks.vinyloxycarbonyl, medens cycloalkoxy-carbonyl og phenyllavalkoxycarbonyl f.eks. er adamantyloxycarbonyl, benzyloxycarbonyl, 4-methoxybenzyloxycarbonyl, diphenylmethoxycarbo-nyl eller α-4-biphenylyl-a-methyl-ethoxycarbonyl. Lavalkoxycarbonyl, hvori lavalkyl f.eks. indeholder en monocyclisk monoaza-, monooxa-eller monothiacyclisk gruppe, er f.eks. furyllavalkoxycarbonyl, såsom furfuryloxycarbonyl, eller thienyllavalkoxycarbonyl, såsom 2-thenyl-oxycarbonyl.

2-Lavalkyl- og 2,2-dilavalkylhydrazino er f.eks. 2-methylhydrazino eller 2,2-dimethylhydrazino, 2-lavalkoxycarbonylhydrazino f.eks. 2-methoxycarbonylhydrazino, 2-ethoxycarbonylhydrazino eller 2-tert. butyloxycarbonyl-hydrazino, og lavalkanoylhydrazino f.eks. 2-acetyl-hydrazino.

11 DK 155741 B

En acylgruppe Ac står især for en i et naturligt forekommende eller i et bio-, halv- eller totalsyntetisk fremstilleligt, fortrinsvis farmakologisk virksomt N-acylderivat af en 6-amino~penam-3~carboxyl-syre- eller 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelse indeholdt acylrest af en organisk carboxylsyre med højst 18 carbonatomer, eller en let fraspaltelig acylrest, især af et kulsyrehalvderivat.

En i et farmakologisk virksomt N-acylderivat af en 6-amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7-amino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelse indeholdt acylgruppe Ac er i første række en gruppe med formlen R11 0 T ' i ir—(c)—c— (a) lin hvori n er 0,og R^ er hydrogen eller en eventuelt substitueret cyclo-aliphatisk eller aromatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk gruppe, fortrinsvis af aromatisk karakter, en funktionelt omdannet, f.eks. foresteret eller foretheret hydroxy-eller mercapto- eller en eventuelt substitueret aminogruppe, eller hvori n er 1, R"1" er hydrogen eller en eventuelt substitueret, ali-phatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe, hvori den hetero-cycliske gruppe fortrinsvis har aromatisk karakter og/eller et kva-ternært nitrogenatom, en eventuelt funktionelt omdannet, fortrinsvis foretheret eller foresteret,hydroxy- eller mercaptogruppe, en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe, en acylgruppe, en eventuelt substitueret aminogruppe eller en azidogruppe, og hver af grup-

II III I

perne R og R er hydrogen, eller hvori n er 1, R er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe, hvori den heterocycliske gruppe fortrinsvis har aromatisk karakter,

II

R er en eventuelt funktionelt omdannet, f.eks. foresteret eller foretheret hydroxy- eller mercaptogruppe, såsom et halogenatom, en eventuelt substitueret aminogruppe, en eventuelt funktionelt omdannet

12 DK 155741 B

carboxylgruppe eller sulfogruppe, en eventuelt O-mono- eller 0,0T-

III

disubstitueret phosphonogruppe, eller en azidogruppe, og R er

I II

hydrogen, eller hvori n er 1, hver af grupperne R og R en funktionelt omdannet, fortrinsvis foretheret eller foresteret hydroxygruppe

III

eller en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe, og R er hydrogen, eller hvori n er 1,R^ hydrogen eller en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk el-

II III

ler araliphatisk carbonhydridgruppe,og R og R sammen er en eventuelt substitueret,med en dobbeltbinding med carbonatomet forbundet ali-phatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk eller aralipha-

T

tisk carbonhydridgruppe, eller hvori n er 1, og R er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe,

TT

hvori heterocycliske grupper fortrinsvis har aromatisk karakter, R er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe og R·^* hydrogen eller en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe.

DK 155741B

13 gen, såsom chlor, med eventuelt substitueret, såsom hydroxy, acyl-oxy, hvori acyl har den ovenfor angivne betydning,og/eller halogen, f.eks. chlor, indeholdende phenyloxy, eller med eventuelt beskyttet amino og/eller carboxy substitueret lavalkylgruppe, f.eks. en 4-amino-4-carboxy-butylgruppe med eventuelt beskyttet amino- og/eller carboxygruppe, f.eks. silyleret, såsom trilavalkylsilyleret, f.eks. trimethylsilyleret, amino- eller acylamino, såsom lavalkanoylamino-, halogenlavalkanoylamino- eller phthaloylaminogruppe, og/eller silyleret, såsom trilavalkylsilyleret, f.eks. trimethylsilyleret, eller foresteret, såsom med lavalkyl, 2-halogenlavalkyl eller phenyllav-alkyl, f.eks. diphenylmethyl, foresteret carboxygruppe, eller er en lavalkenylgruppe, eller en eventuelt substitueret, såsom eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet,acyleret hydroxy og/eller halogen, f.eks. chlor, endvidere eventuelt beskyttet, f.eks. som ovenfor angivet, acyleret amino-lavalkyl, såsom aminomethyl, eller eventuelt substitueret, såsom eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet, acyleret hydroxy og/eller halogen, f.eks. chlor, indeholdende phenyloxy indeholdende phenylgruppe, en eventuelt, f.eks. med lavalkyl, såsom methyl, eller eventuelt beskyttet, f.eks. som ovenfor angivet acyleret, amino eller aminomethyl, substitueret pyridyl-, f.eks. 4-py**idyl-, pyridinium-, f.eks. 4-pyridinium-,thienyl-,f.eks. 2-thienyl-,furyl-,f.eks. 2-furyl“, imidazolyl-,f.eks. 1-imidazolyl-, eller tetrazolyl-,f.eks. 1-tetra-zolylgruppe, en eventuelt substitueret lavalkoxy-, f.eks. methoxy-gruppe, en eventuelt substitueret, såsom eventuelt beskyttet, f.eks. som ovenfor angivet acyleret,hydroxy og/eller halogen, såsom chlor, indeholdende phenyloxygruppe, en lavalkylthio-, f.eks. n-butylthio-, eller lavalkenylthio-, f.eks. allylthiogruppe, en eventuelt, f.eks. med lavalkyl, såsom methyl, substitueret phenylthio-, pyridylthio-, f.eks. 4-pyridylthio-, 2-imidazolylthio-, l,2,4-triazol-3-ylthio-, 1.3.4- triazol-2-ylthio-, l,2,4-thiadiazol-3-ylthio-, såsom 5-methyl- 1.2.4- thiadiazol-3-ylthio-, 1,3,4-thiadiazol-2-ylthio-, såsom 5-me-thyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthio-, eller 5-tetrazolylthio-,såsom 1-methyl-· 5-tetrazolylthiogruppe, et halogen-, især chlor- eller bromatom, en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe, såsom lavalkoxycarbo-nyl, f.eks. methoxycarbonyl eller ethoxycarbonyl, cyan eller eventuelt, f.eks. med lavalkyl, såsom methyl,eller phenyl, N-substitueret carbamoyl, en eventuelt substitueret lavalkanoyl, f.eks. acetyl- eller

TT TTT

propionyl-, eller benzoylgruppe, eller en azidogruppe, og R og R er hydrogen, eller n er 1, R^ lavalkyl eller en eventuelt, såsom med 14

DK 155741 B

eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet,acyleret hydroxy og/eller halogen, f.eks. chlor, substitueret phenyl-, furyl-, f.eks. 2-furyl-, thienyl-, f.eks. 2- eller 3-thienyl-, eller isothiazolyl, f.eks. 4-

II

xsothiazolylgruppe, endvidere en 1,4-cyclohexadienylgruppe, R er eventuelt beskyttet eller substitueret amino, f.eks. amino, acylami-no, såsom lavalkoxycarbonylamino, 2-halogenlavalkoxycarbonylamino eller eventuelt substitueret, såsom lavalkoxy, f.eks. methoxy, eller nitro indehoIdende,phenyllavalkoxycarbonylamino, f.eks. tert.butyloxy-curb ony lamino, 2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino, 4-methoxybenzyloxy-carbonylamino eller diphenylmethyloxycarbonylamino, arylsulfonylamino f.eks. 4-methylphenylsulfonylamino, tritylamino, arylthioamino, såsom nitrophenylthioamino, f.eks. 2-nitrophenylthioamino, eller trityl-thioamino eller eventuelt substitueret, såsom lavalkoxycarbonyl, f. eks. ethoxycarbonyl, eller lavalkanoyl, f.eks. acetyl, indeholdende, 2-propylidenamino, såsom l-ethoxycarbonyl-2-propylidenamino, eller eventuelt substitueret carbamoylamino, såsom guanidinocarbonylamino, eller en eventuelt i salt-, f.eks. alkalimetalsaltform foreliggende sulfoaminogruppe, en azidogruppe, en eventuelt i salt-, f.eks. alkalimetalsaltform eller i beskyttet, såsom foresteret form, f.eks, som lavalkoxycarbonyl-, f.eks. methoxycarbonyl- eller ethoxycarbonyl-, eller som phenyloxycarbonyl-, f.eks. diphenylmethoxycarbonylgruppe, foreliggende carboxylgruppe, en cyangruppe, en sulfogruppe, en eventuelt funktionelt omdannet hydroxygruppe, hvorved funktionelt omdannet iiydroxy især er acyloxy, såsom formyloxy, samt lavalkoxycarbonyl-oxy, 2-halogen-lavalkoxycarbonyloxy eller eventuelt substitueret, såsom lavalkoxy, f.eks. methoxy, eller nitro indeholdende, phenyl-lav-alkoxycarbonyloxy, f.eks. tert.butyloxycarbonyloxy, 2,2,2-trichlor-ethoxycarbonyloxy, 4-methoxybenzyloxycarbonyloxy eller diphenylme-thoxycarbonyloxy, eller eventuelt substitueret lavalkoxy, f.eks. methoxy, eller phenyloxy, en O-lavalkyl- eller 0,0f-dilavalkyl-phosphonc gruppe, f.eks. O-methyl-phosphono eller Ο,Ο’-dimethylphosphono, eller

III

et halogenatom, f.eks. chlor eller brom, og R er hydrogen, eller I II

n er 1, R og R hver er halogen, f.eks. brom, eller lavalkoxycarbo-

III T

nyl, f.eks. methoxycarbonyl, og R er hydrogen, eller n er 1, R' er en eventuelt, f.eks.· med eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet, acyleret hydroxy og/eller halogen, f.eks. chlor, substitueret phenyl, furyl-, f.eks. 2-furyl-, eller thienyl-, f.eks. 2- eller 3-thienyl-, eller isothiazolyl-, f.eks. 4-isothiazolylgruppe, endvidere en 1,4-

II

cyclohexadienylgruppe, R er eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet, 15

III

DK 155741 B

beskyttet aminomethyl, og R er hydrogen, eller n er l,og hver af

I II III

grupperne R , R og R er lavalkyl, f.eks. methyl.

Sådanne acylgrupper Ac er f.eks. formyl, cyclopentylcarbonyl, a-amino~ cyclopentylcarbonyl eller α-amino-cyclohexylcarbonyl (med eventuelt substitueret aminogruppe, f.eks. eventuelt i saltform foreliggende sulfoaminogruppe, eller en, med en, fortrinsvis let, f.eks. ved behandling med et surt middel, såsom trifluoreddikesyre, reduktivt, f. eks. ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, eller katalytisk hydrogen, eller hydro-lytisk fraspaltelig acylgruppe, eller en acylgruppe, der kan overføres til en sådan, fortrinsvis en egnet acylrest af en kulsyrehalvester, såsom lavalkoxycarbonyl, f.eks. tert.butyloxycarbonyl, 2-halogen-lav-alkylcarbonyl, f.eks. 2,2,2-trichlorethyloxycarbonyl, 2-bromethoxy-carbonyl eller 2-iodethoxycarbonyl, arylcarbonylmethoxycarbonyl, f. eks. phenacyloxycarbonyl, eventuelt substitueret, såsom lavalkoxy, f.eks. methoxy, eller nitro indeholdende phenyllavalkoxycarbonyl, f. eks. 4-methoxybenzyloxycarbonyl eller diphenylmethoxycarbonyl, eller af et kulsyrehalvamid, såsom carbamoyl,eller N-substitueret, såsom N-lavalkyl, f.eks. N-methylcarbamoyl, samt med trityl, endvidere med arylthio, f.eks. 2-nitrophenylthio, arylsulfonyl, f.eks. 4-methylphenyl-sulfony1,eller l-lavalkoxycarbonyl-2-propyliden, f.eks. 1-ethoxy-carbonyl-2-propyliden, substitueret aminogruppe), 2,6-dimethoxybenz-oyl, 5 j 6,7 j 8-tetrahydro-naphthoyl, 2-methoxy-l-naphthoyl, 2-ethoxy- 1- naphthoyl, benzyloxycarbonyl, hexahydrobenzyloxycarbonyl, 5-methyl- 3-phenyl-4-isoxazolylcarbonyl, 3-(2-chlorphenyl)-5-methyl-4-isoxa-zolylcarbonyl, 3-(2,6-dichlorphenyl)-5-methyl-4-isoxazolylcarbonyl, 2- chlorethylaminocarbonyl, acetyl, propionyl, butyryl, pivaloyl, hexan-oyl, octanoyl, acrylyl, crotonoyl, 3-butenoyl, 2-pentenoyl, methoxy-acetyl, butylthioacetyl, allylthioacetyl, methylthioacetyl, chlor-acetyl, bromacetyl, dibromacetyl, 3-chlorpropionyl, 3-brompropionyl, aminoacetyl eller 5-amino-5-carboxy-valeryl (med eventuelt, f.eks.

som angivet, såsom med en monoacyl- eller diacylgruppe, f.eks. en eventuelt halogeneret lavalkanoylgruppe, såsom acetyl eller dichlor-acetyl, eller phthaloyl, substitueret aminogruppe og/eller eventuelt funktionelt omdannet, f.eks. i salt-, såsom natriumsalt-, eller i ester-, såsom lavalkyl-, f.eks. methyl- eller ethyl-, eller aryl-lavalkyl-, f.eks. diphenylmethylesterform, foreliggende carboxylgrup-pe), azidoacetyl, carboxyacetyl, methoxycarbonylacetyl, ethoxycarbo-

16 DK 155741 B

nylacetyl, bis-methoxycarbonylacetyl, N-phenylcarbamoylacetyl, cyan-acetyl, α-cyanpropionyl, 2-cyan-3,3-dimethyl-acrylyl, phenylacetyl, a-bromphenylacetylj cc-azido-phenylacetyl, 3-chlorphenylacetyl, 2-eller 4-aminomethylphenyl-acetyl (med eventuelt, f.eks. som angivet, substitueret aminogruppe), phenacylcarbonyl, phenyloxyacetyl, 4-tri-fluormethylphenyloxyacetyl, benzyloxyacetyl, phenylthioacetyl, brom-phenylthioacetyl, 2-phenyloxypropionyl, a-pbenyloxyphenylacetyl, a-methoxyphenylacetyl, α-ethoxy-phenylacetyl, a-methoxy-3,4-dichlor-phenylacetyl, α-cyan-phenylacetyl, især phenylglycyl, 4-hydroxy-phenylglycyl, 3-chlor-4-hydroxy-phenylglycyl, 3,5-dichlor-4-hydroxy-phenylglycyl, a-amino-a-(l,4-cyclohexadienyl)-acetyl, a-aminomethyl-a-phenylaeetyl eller a-hydroxy-phenylacetyl, idet i disse grupper en tilstedeværende aminogruppe eventuelt kan være substitueret, f.eks. som ovenfor angivet,og/eller en tilstedeværende, aliphatisk og/eller phenolisk bundet hydroxygruppe eventuelt kan være beskyttet analogt med aminogruppen,f.eks.med en egnet acylgruppe,især med formyl eller en acylrest af en kulsyrehalvester),eller α-0-methyl-phosphono-phenyl-acetyl eller α-Ο,Ο-dimethyl-phosphono-phenylacetyl, endvidere benzyl-thioacetyl, benzylthiopropionyl, α-carboxyphenylacetyl (med eventuelt, f.eks. som ovenfor angivet, funktionelt omdannet carboxygruppe),3-phenylpropionyl, 3-(3-cyanphenyl)-propionyl, 4-(3-methoxyphenyl)-butyryl, 2-pyridylacetyl, 4-amino-pyridiniumacetyl (eventuelt med, f.eks. som ovenfor angivet, substitueret aminogruppe), 2-thienyl-acetyl, 3-thienylacetyl, 2-tetrahydrothienylacetyl, 2-furylacetyl, 1-imidazolylacetyl, 1-tetrazolylacetyl, a-carboxy-2-thienylacetyl eller a-carboxy-3-thienylacetyl (eventuelt med funktionelt, f.eks. som ovenfor angivet, omdannet carboxylgruppe), a-cyan-2-thienylacetyl, a-amino-a-(2-thienyl)-acetyl, a-amino-a-(2-furyl)-acetyl eller a-ami-no-a-(4-isothiazolyl)-acetyl (eventuelt med, f.eks. som ovenfor angivet, substitueret aminogruppe), α-sulfophenylacetyl (eventuelt med, f.eks. som carboxylgruppen, funktionelt omdannet sulfogruppe), 3-me-thyl-2-imidazolyl-thioacetyl, l,2,4-triazol-3-ylthioacetyl, 1,3,4-triazol-2-ylthio-acetyl, 5-methyl-l,2,4-thiadiazol-3-ylthioacetyl, 5-methyl-1,3,4-thiadiazol-2-ylthioacetyl eller l-methyl-5-tetrazolyl-thioacetyl.

En let fraspaltelig acylrest Ac, især af en kulsyrehalvester, er i første række en ved reduktion, f.eks. ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, eller ved syrebehandling, f.eks. med trifluoreddi- 17 ' i

DK 155741 B

kesyre, fraspaltelig acylrest af en halvester af kulsyre, såsom en, fortrinsvis ved carbonatomet i α-stilling til oxygruppen flere gange forgrenet og/eller aromatisk substitueret lavalkoxycarbonylgruppe eller en med arylcarbonyl-, især benzoylgrupper substitueret methoxy-carbonylgruppe, eller i β-stilling med halogenatomer substitueret lavalkoxycarbonylgruppe, f.eks. tert.butyloxycarbonyl, tert.pentyl-oxycarbonyl, phenacyloxycarbonyl, 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl eller 2-iodethoxycarbonyl eller en til sidstnævnte omdannelig gruppe, såsom 2-chlor- eller 2-bromethoxycarbonyl, endvidere, fortrinsvis polycyc-lisk,cycloalkoxycarbonyl, f.eks. adamantyloxycarbonyl, eventuelt substitueret phenyllavalkoxycarbonyl, i første række cc-phenyllavalkoxy-carbonyl, hvori a-stillingen fortrinsvis er substitueret flere gange, f.eks. diphenylmethoxycarbonyl eller a-4~biphenylyl-a-methyl-ethyl-oxycarbonyl, eller furyllavalkoxycarbonyl, i første række a-furyllav-alkoxycarbonyl, f.eks. furfuryloxycarbonyl.

Έη foretheret hydroxygruppe R danner sammen med carbonylgrupperingen en fortrinsvis let spaltelig eller let til en anden funktionelt omdannet carboxylgruppe, såsom til en carbamoyl- eller hydrazino-carbonylgruppe omdannelig, foresteret carboxylgruppe. En sådan gruppe • η λ R er f.eks. lavalkoxy, såsom methoxy, ethoxy, n-propyloxy eller isopropyloxy, der sammen med carbonylgrupperingen danner en foresteret carboxylgruppe, der især i 2-cephemforbindelser let kan overføres til en fri carboxylgruppe eller til en anden funktionelt omdannet carboxylgruppe .

O Λ

En foretheret hydroxygruppe R der sammen med en -C(=0)-gruppering danner en særlig let spaltelig foresteret carboxylgruppe, er f.eks.

2-halogen-lavalkoxy, hvori halogen fortrinsvis har en atomvægt på over 19. En sådan gruppe danner sammen med -C(=0)-grupperingen en ved behandling med kemiske reduktionsmidler under neutrale eller svagt sure betingelser, f.eks. med zink i nærværelse af vandige eddikesyrer, let spaltelig foresteret carboxylgruppe eller en til en sådan let omdannelig foresteret carboxylgruppe og er f.eks·. 2,2,2-trichlorethoxy eller 2-iodethoxy, endvidere 2-chlorethoxy eller 2-bromethoxy, der let kan omdannes til sidstnævnte.

DK 155741 B 1 18

En foretheret hydroxygruppe R , der sammen med -C(=0)-grupperingen udgør en ligeledes ved behandling med kemiske reduktionsmidler under neutrale eller svagt sure betingelser, f.eks. ved behandling med zink i nærværelse af vandig eddikesyre, endvidere ved behandling med et egnet nucleofilt reagens, f.eks. natriumthiophenolat, let spaltelig foresteret carboxylgruppe, er en arylcarbonylmethoxygruppe, hvori aryl især er en eventuelt substitueret phenylgruppe, og fortrinsvis phenacyloxy.

Gruppen R kan også stå for en arylmethoxygruppe, hvori aryl især er en monocyclisk, fortrinsvis substitueret aromatisk carbonhydrid-gruppe. En sådan gruppe danner sammen med -C(=0)-grupperingen en ved bestråling, fortrinsvis med ultraviolet lys, under neutrale eller sure betingelser let spaltelig, foresteret carboxylgruppe. En aryl-gruppe i en sådan arylmethoxygruppe er især lavalkoxyphenyl, f.eks. methoxyphenyl {hvorved methoxy i første række står i 4- og/eller 5-stilling),og/eller fremfor alt nitrophenyl (hvorved nitro fortrinsvis står i 2-stilling). Sådanne grupper er især lavalkoxy-, f.eks. methoxy-, og/eller nitro-benzyloxy, i første række 3- eller 4-methoxy-benzyloxy, 3,5-dimethoxy-benzyloxy, 2-nitro-benzyloxy eller 4,5-dime-thoxy-2-nitro-benzyloxy.

2A o

En foretheret hydroxygruppe R kan også være en gruppe, der sammen med -C(=0)-grupperingen danner en under sure betingelser, f.eks. ved behandling med trifluoreddikesyre eller myresyre, let spaltelig, forest er et carboxylgruppe. En sådan gruppe er i første række en methoxy-gruppe, hvori methyl er polysubstitueret med eventuelt substituerede carbonhydridgrupper, især aliphatiske eller aromatiske carbonhydrid-grupper, såsom lavalkyl, f.eks. methyl, og/eller phenyl, eller er raonosubstitueret med en elektronafgivende substituent indeholdende carbocyclisk arylgruppe eller en oxygen eller svovl som ringled indeholdende, heterocyclisk gruppe af aromatisk karakter, eller også udgør et ringled i en polycycloaliphatisk carbonhydridgruppe eller i en oxa-eller thiacycloaliphatisk gruppe udgør ringleddet i α-stilling til oxygen- eller svovlatomet.

19 DK 155741 B Γ

Foretrukne polysubstituerede methoxygrupper af denne art er tert.lav-alkoxy, f.eks. tert.butyloxy eller tert.pentyloxy, eventuelt substitue-. ret diphenylmethoxy, f.eks. diphenylmethoxy eller 4,4T-dimethoxy~di-phenylmethoxy, endvidere 2-(4-biphenylyl)-2-propyloxy, medens en me-thoxygruppe, der indeholder de ovennævnte substituerede arylgrupper eller den heterocycliske gruppe,' f.eks. er a-lavalkoxyphenyl-lavalkoxy, såsom 4-methoxybenzyloxy eller 3,4-dimethoxy-benzyloxy, henholdsvis furfuryloxy, såsom 2-furfuryloxy. En polycycloaliphatisk carbonhydrid-gruppe, hvori methyl i methoxygruppen er et fortrinsvis tre gange, forgrenet ringled, er f.eks. adamantyl, såsom 1-adamantyl, og en ovennævnt oxa- eller thiacycloaliphatisk gruppe, hvori methyl i methoxygruppen er det ringled, der udgør α-stillingen til oxygen- eller svovlatomet, betyder f.eks. 2-oxa- eller 2-thia-lavalkylen eller lavalkeny-len med 5-7 ringatomer, såsom 2-tetrahydrofuryl, 2-tetrahydropyranyl eller 2,3-dihydro-2~pyranyl. eller tilsvarende svovlanaloge.

2A o

Gruppen R kan også være en foretheret hydroxygruppe, der sammen med -C(=0)-grupperingen danner en hydrolytisk, f.eks. under svagt basiske eller sure betingelser, spaltelig foresteret carboxylgruppe. En sådan gruppe er fortrinsvis en foretheret hydroxygruppe, der sammen med -C(=0)-grupperingen danner en aktiveret estergruppe, såsom nitrophenyl-oxy, f.eks. 4-nitrophenyloxy eller 2,4-dinitrophenyloxy, nitrophenyl-lavalkoxy, f.eks. 4-nitrobenzyloxy, hydroxy-lavalkyl-benzyloxy, f.eks.

4-hydroxy-3,5-tert.butyl-benzyloxy, polyhalogenphenyloxy, f.eks.

2,4,6-trichlorphenyloxy eller 2,3,4,5,6-pentachlorphenyloxy, endvidere cyanmethoxy, samt acylaminomethoxy, f.eks. phthaliminomethoxy eller succinyliminomethoxy.

Gruppen R kan også være en foretheret hydroxygruppe, der sammen med carbonylgrupperingen med formlen -C(=0)- danner en under hydrogeno-lytiske betingelser spaltelig foretheret carboxylgruppe, og er f.eks. eventuelt, f.eks. med lavalkoxy eller nitro, substitueret a-phenyllav-alkoxy, såsom benzyloxy, 4-methoxy-benzyloxy eller 4~nitrobenzyloxy.

20 DK 155741B

Gruppen R kan også være en foretheret hydroxygruppe, der sammen med carbonylgrupperingen —C(=0)— danner en under fysiologiske betingelser spaltelig foresteret carboxylgruppe, i første række en acyloxymethoxy-gruppe, hvori acyl f.eks. betyder resten af en organisk carboxylsyre, i første række en eventuelt substitueret lavalkancarboxylsyre, eller hvori acyloxymethyl danner resten af en lacton. Således foretherede hydroxygrupper er lavalkanoyloxymethoxy, f.eks. acetyloxymethyloxy eller pivaloyloxymethoxy, amino-lavalkanoyloxymethoxy, især a-amino-lavalkanoyloxymethoxy, f.eks. glycyloxymethoxy, L-valyloxymethoxy, L-leucyloxymethoxy, endvidere phthalidyloxy.

2A

En silyloxy- eller stannyloxygruppe R indeholder som substituenter fortrinsvis eventuelt substituerede aliphatiske, cycloaliphatiske, aromatiske eller araliphatiske carbonhydridgrupper, såsom lavalkyl-, halogen-lavalkyl-, cycloalkyl-, phenyl- eller phenyllavalkylgrupper, eller eventuelt omdannede funktionelle grupper, såsom foretherede hydroxy-, f.eks. lavalkoxygrupper, eller halogen-, f.eks. chloratomer, - og er i første række trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimethylsilyloxy, halogen-lavalkoxylavalkylsilyl, f.eks. chlor-methoxy-methyl-silyl, eller trilavalkylstannyloxy, f.eks. tris-n-butylstannyloxy.

En gruppe R , der sammen med en -C(=0)-gruppering danner en eventuelt substitueret carbamoyl- eller hydrazinocarbonylgruppe, er f.eks. amino, lavalkylamino eller dilavalkylamino, såsom methylamino, ethyl-amino, dimethylamino eller diethylamino, lavalkylenamino, f.eks. pyrrolidino eller.piperidino, oxalavalkylenamino, f.eks. morpholino, hydroxyamino,hydrazino, 2-lavalkylhydrazino eller 2,2-dilavalkyl-hydrazino, f.eks. 2-methylhydrazino eller 2,2-dimethylhydrazino.

Salte er f.eks. salte af forbindelser med formlen I med en sur gruppering, såsom en carboxy-, sulfo- eller phosphonogruppe, i første række metal- eller ammoniumsalte, såsom alkalimetal- og jordalkalimetal, f.eks. natrium-, kalium-, magnesium- eller calciumsalte, samt ammoniumsalte med ammoniak eller egnede organiske aminer, hvorved i første række til saltdannelse kommer på tale aliphatiske, cycloaliphatiske, cycloaliphatisk-aliphatiske og araliphatiske primære, sekundære eller 2i DK 155741 Bl tertiære mono-, di- eller polyaminer, samt heterocy'cliske baser, såsom lavalkylaminer, f.eks. triethylamin, hydroxy-lavalkylaminer, f. eks. 2-hydroxyethylamin, bis-(2~hydroxyethyl)-amin eller tri-(2-hy-droxyethyl)~amin, basiske aliphatiske estere af carboxylsyrer, f.eks.

4-aminobenzoesyre-2-diethylaminoethylester, lavalkylenaminer, f.eks.· 1-ethyl-piperidin, cycloalkylaminer, f.eks. bicyclohexylamin, eller benzylaminer, f.eks. N,Nf-dibenzyl-ethylendiamin, endvidere baser af pyridintypen, f.eks. pyridin, collidin eller quinolin. Forbindelser med formlen I, der har en basisk gruppe, kan ligeledes danne syreadditionssalte, f.eks. med uorganiske syrer, såsom saltsyre, svovlsyre eller phosphorsyre, eller med egnede organiske carboxyl- eller sulfon-syrer, f.eks. trifluoreddikesyre eller 4-mnthylphenylsulfonsyre. Forbindelser med formlen I med en sur og en basisk gruppe kan også foreligge i form af indre salte, d.v.s. i amfoionisk form. 1-Oxider af forbindelser med formlen I med saltdannende grupper kan ligeledes danne salte, som ovenfor beskrevet.

De omhandlede forbindelser er værdifulde mellemprodukter, der kan anvendes som mellemprodukter til fremstilling af antibiotisk virksomme 73-amino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelser. De kan omdannes til de virksomme forbindelser, f.eks. som beskrevet nedenfor.

Opfindelsen angår især cepham-3-on-forbindelser med formlen I, hvori la R er hydrogen eller fortrinsvis en acylrest, der er indeholdt i et fermentativt (d.v.s. naturligt forekommende) eller bio-, halv- eller totalsyntetisk fremstilleligt, især farmakologisk aktivt, såsom højaktivt N-acylderivat af en 6p-amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7β- amino-3‘-cephem-4“Carboxylsyreforbindelse, såsom en af de ovennævnte

I II III

acylgrupper med formlen A, hvorved R , R , R og n i denne i

2A

første række har de foretrukne betydninger, og R er lavalkoxy, der eventuelt er mono- eller polysubstitueret, fortrinsvis i a-stil-ling, f.eks. med eventuelt substitueret aryloxy, såsom lavalkoxy-phenyloxy, f.eks. 4-methoxyphenyloxy, lavalkanoyloxy, f.eks. acetyl-oxy eller pivaloyloxy, a-aminolavalkanoyloxy, f.eks. glycyloxy, L-valyloxy eller L-leucyloxy, arylcarbonyl, f.eks. benzoyl, eller eventuelt substitueret aryl, såsom phenyl, lavalkoxyphenyl, f.eks. 4-•methoxyphenyl, nitrophenyl, f.eks. 4-nitrophenyl, eller biphenylyl, f.eks. 4-biphenylyl, eller i β-stilling med halogen, f.eks. chlor, 22

DK 155741 B

brom eller iod, såsom lavalkoxy, f.eks. methoxy, ethoxy, n-propyloxy, isopropyloxy, n-butyloxy, tert.butyloxy eller tert.pentyloxy, eventuelt med lavalkoxy substitueret bis-phenyloxy-methoxy, f.eks. bis- 4-methoxyphenyloxy-methoxy, lavalkanoyloxy-methoxy, .f.eks. acetyloxy-methoxy eller pivaloyloxymethoxy, α-aminolavalkanoyloxy-methoxy, f.eks. glycyloxymethoxy, phenacyloxy, eventuelt substitueret phenyllavalkoxy, især 1-phenyllavalkoxy, såsom phenylmethoxy, hvorved sådanne grupper kan indeholde 1-3, eventuelt, f.eks. med lavalkoxy, såsom methoxy, nitro eller phenyl, substituerede phenylgrupper, f.eks. benzyloxy, 4-methoxy-benzyloxy, 2-bip.heny lyl-2-pr opy loxy, 4-nitro-benzyloxy, di-phenylmethoxy, 4,4t-dimethoxy-diphenylmethoxy eller trityloxy, eller 2-halogenlavalkoxy, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxy, 2-chlorethoxy, 2-bromethoxy eller 2-iodethoxy, endvidere 2-phthalidyloxy, samt acyloxy, såsom lavalkoxycarbonyloxy, f.eks. methoxycarbonyloxy eller ethoxy-.carbonyloxy, eller lavalkanoyloxy, f.eks. acetyloxy eller pivaloyloxy, trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimethylsilyloxy, eller eventuelt, f.eks. med lavalkyl, såsom methyl, amino eller hydroxy substitueret amino, f.eks. amino, lavalkyl- eller dilavalkylamino, såsom methylamino eller dimethylamino, hydrazino, 2-lavalkyl- eller 2,2-dilavalkyl-hydrazino, f.eks. 2-methylhydrazino eller 2,2-dimethylhydrazino, eller hydroxyamino, samt 1-oxiderne deraf eller salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper.

I første række er i en cepham-3-on-forbindelse med formlen I, endvidere i et 1-oxid af en cepham-3-on-forbindelse med formlen I eller i et salt af en sådan forbindelse med saltdannende grupper R^a hydrogen eller en acylgruppe, der er indeholdt i fermentativt (d.v.s. naturligt forekommende) eller biosyntetisk fremstillelige N-acylderivater af 6p-aminopenam-3-carboxylsyre- eller 7β“aminO“3“Cephem-4-carboxyl-

T TT ITT

syreforbindelser, især med formlen A, hvori R , R , R og n iførste række har de foretrukne betydninger, såsom en eventuelt, f.eks. med hydroxy, substitueret phenylacetyl- eller phenyloxyacetylgruppe, endvidere en eventuelt, f.eks. med lavalkylthio-, eller lavalkenylthio, samt eventuelt substitueret, såsom acyleret,amino og/eller funktionelt omdannet, såsom foresteret,carboxyl, substitueret lavalkanoyl- eller lavalkenoylgruppe, f.eks. 4-hydroxy-phenylacetyl, hexanoyl, octanoyl eller n-butylthioacetyl, og især 5-amino-5-carboxy-valeryl, hvori amino- og/eller carboxylgrupperne eventuelt er beskyttet og f.eks.

23 DK 155741 B

foreligger som acylamino eller foresteret carboxyl, phenylacetyl eller phenyloxyacetyl, eller en i højvirksomme N-acylderivater af 6β- amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7β-amino-3-cephem-Z^-carboxylsyrefor-

I II

bindeiser forekommende acylgruppe, især med formlen A, hvori R , R , og n i første række har de foretrukne betydninger, såsom formyl, 2-halogenethylcarbamoyl, f.eks. 2-chlorethylcarbamoyl, cyanacetyl, phenylacetyl, thienylacetyl, f.eks. 2-thienylacetyl, eller tetrazolyl-acetyl, f.eks. 1-tetrazolylacety-l, men især i α-stilling med en cyc-lisk, såsom en cycloaliphatisk, aromatisk eller heterocyclisk, i første række monocyclisk,gruppe og med en funktionel gruppe, i første række amino, carboxy, sulfo eller hydroxygrupper, substitueret acetyl, især phenylglycyl, hvori phenyl er eventuelt, f.eks. med eventuelt beskyttet hydroxy, såsom acyloxy, f.eks. eventuelt halogensubstitueret lavalkoxycarbonyloxy eller lavalkanoyloxy, og/eller med halogen, f.eks. chlor, substitueret phenyl, f.eks. phenyl, eller 3- eller 4-hydroxy-, 3-chlor-4-hydroxy- eller 3,5-dichlor-4-hydroxy-phenyl (eventuelt også med beskyttet, såsom acyleret,hydroxygruppe), og hvori aminogruppen eventuelt også kan være substitueret og f.eks. er en eventuelt i saltform foreliggende sulfoaminogruppe eller en aminogrup-pe, der som substituenter indeholder en hydrolytisk spaltelig trityl-gruppe eller i første række en acylgruppe, såsom en eventuelt substitueret carbamoyl-, såsom en eventuelt substitueret ureidocarbonyl-gruppe, f.eks. ureidocarbonyl eller NT-trichlormethylureidocarbonyl, eller.en eventuelt substitueret guanidinocarbonylgruppe, f.eks. guanidinocarbonyl, eller en, fortrinsvis let, f.eks. ved behandling med et surt middel, såsom trifluoreddikesyre, endvidere reduktivt, såsom ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, eller med katalytisk hydrogen, eller hydrolytisk fraspaltelig acylgruppe eller en acylgruppe, der kan overføres til en sådan, fortrinsvis en egnet acylrest af en kulsyrehalv-ester, såsom en af de ovennævnte, f.eks. eventuelt halogen- eller benzoylsubstituerede lavalkyloxycarbonylgrupper, f.eks. tert.butyloxy-carbonyl, 2,2,2-trichlorethyloxycarbonyl, 2-chlorethoxycarbonyl, 2-bromethoxycarbonyl, 2-iodethoxycarbonyl, eller phenacyloxycarbonyl, eventuelt lavalkoxy- eller nitrosubstitueret phenyllavalkoxycarbonyl, f.eks.’ 4-methoxybenzyloxycarbonyl eller diphenylmethoxycarbonyl, eller af et kulsyrehalvamid, såsom carbamoyl eller N-methylearbamoyl,endvidere en med et nucleofilt reagens, såsom hydrogencyanid, svovlsyr- 24

DK 155741 B

ling eller thioeddikesyreamid, fraspaltelig arylthio- eller aryllav-alkylthiogruppe, f.eks. 2-nitrophenylthio eller tritylthio, en ved ' hjælp af elektrolytisk reduktion fraspaltelig arylsulfonylgruppe, f. eks. 4-methylphenylsulfonyl, eller en med et surt middel, såsom myresyre eller vandig mineralsyre, f.eks. hydrogenchlorid eller phosphor-syre, fraspaltelig 1-lavalkoxycarbonyl- eller l-lavalkanoyl-2-propyl-idengruppe, f.eks. l-ethoxycarbonyl-2-propyliden, endvidere a-1,4-cyclohexadienyl-glycyl, a-thienylglycyl, såsom ¢-2- eller α-3-thienyl-glycyl, a-furylglycyl, såsom α-2-furylglycyl, a-isothiazolylglycyl, såsom α-4-isothiazolyl-glycyl, hvorved i sådanne grupper aminogruppen kan være substitueret eller beskyttet, f.eks. som angivet for en phenylglycylgruppe, endvidere α-carboxy-phenylacetyl eller a-carboxy-thienylacetyl, f.eks. a-carboxy-2-thienylacetyl (eventuelt med funktionelt omdannet, f.eks. i salt-, såsom natriumsaltform, eller i ester-, såsom lavalkyl-, f.eks. methyl- eller ethyl-, eller phenyllav-alkyl-, f.eks. diphenylmethylesterform, foreliggende carboxylgruppe), α-sulfo-phenylacetyl (eventuelt også med, f.eks. som carboxylgruppen, funktionelt omdannet sulfogruppe), α-phosphono, a-O-methylphosphono-eller a-0,0T-dimethylphosphono-phenylacetyl, eller a-hydroxy-phenyl-acetyl (eventuelt med funktionelt omdannet hydroxygruppe, især med en acyloxygruppe, hvori acyl er en, fortrinsvis let, f.eks. ved behandling med et surt middel, såsom trifluoreddikesyre, eller med et kemisk reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, fraspaltelig acylgruppe eller en acylgruppe, der kan overføres til en sådan, fortrinsvis en egnet acylrest af en kulsyrehal·vester, såsom en af de ovennævnte, f.eks. eventuelt med halogen eller benzoyl substitueret lavalkoxycarbonylgruppe, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl, 2-chlorethoxycarbonyl, 2-brornethoxycarbonyl, 2-iodethoxycarbonyl, tert. butyloxycarbonyl eller phenacyloxycarbonyl, endvidere formyl), samt 1-amino-cyclohexylearbonyl, aminomethylphenylacetyl, såsom 2- eller 4-aminomethyl-phenylacetyl, eller amino-pyridiniumacetyl, f.eks. 4-aminopyridiniumacetyl (eventuelt også med, f.eks. som ovenfor angivet, substitueret aminogruppe), eller pyridylthioacetyl, f.eks. 4-pyridyl-thioacetyl, og er lavalkoxy, især α-polyforgrenet lavalkoxy, f.eks. tert.butyloxy, endvidere methoxy eller ethoxy, 2-halogen-lavalkoxy, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxy, 2-iodethoxy eller det let til dette omdannelige 2-chlorethoxy eller 2-bromethoxy, phenacyloxy, 1-phenyl-lavalkoxy med 1-3, eventuelt med lavalkoxy eller nitro substituerede phenylgrupper, f.eks. 4-methoxybenzyloxy, 4-nitrobenzyloxy, diphenyl- methoxv . 4.4 1 — dimethoxv—Λΐ nhfsnvl'mfs’f-hnvv pllor fri nwr . 1 λτγλΊ Irannwl — 25

DK 155741 B

oxymethoxy, f.eks. acetyloxymethoxy eller pivaloyloxymethoxy, a-aminolavalkanoyloxymethoxy, f.eks. glycyloxymethoxy, 2-phthalidyl-oxymethoxy, lavalkoxycarbonyloxy, f.eks. ethoxycarbonyloxy, eller lavalkanoyloxy, f.eks. acetyloxy, endvidere trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimethylsilyloxy.

Opfindelsen angår i første række cepham-3-on-forbindelser med formlen la I, hvori R er hydrogen eller en acylgruppe med formlen 0

Ra - U)m - CH - C - (B) m (

Rb hvori Ra er phenyl eller hydroxyphenyl, f.eks. 3- eller 4-hydroxy-phenyl, hydroxy-chlorphenyl, f.eks. 3-chlor-4-hydroxyphenyl- eller 3,5-dichlor-4-hydroxy-phenyl, hvorved i sådanne grupper hydroxy-substituenter kan være beskyttet med acylgrupper, såsom eventuelt halogenerede lavalkoxycarbonylgrupper, f.eks. tert.butyloxycarbonyl eller 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl, samt thienyl, f.eks. 2- eller 3-thienyl, endvidere pyridyl, f.eks. 4-pyridyl, aminopyr idinium, f.eks.

4-aminopyridinium, furyl, f.eks. 2-furyl, isothiazolyl, f.eks. 4-isothiazolyl, eller tetrazolyl, f.eks. 1-tetrazolyl, eller også 1,4-cyclohexadienyl, X er oxygen eller svovl, m er 0 eller 1, og Ru er hydrogen eller, når n er 0, amino samt beskyttet amino, såsom acyl-amino, f.eks. a-polyforgrenet lavalkoxycarbonylamino, såsom tert. butyloxycarbonylamino, eller 2-halogenlavalkoxycarbonylamino, f.eks.

2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino, 2-iodethoxycarbonylamino eller 2-bromethoxycarbonylamino, eller eventuelt lavalkoxy- eller nitrosubsti-tueret phenyllavalkoxycarbonylamino, f.eks. 4-methoxybenzyloxycarbo-nylamino eller diphenylmethoxycarbonylamino, eller 3-guanylureido, endvidere sulfoamino eller tritylamino, samt arylthioamino, f.eks.

2-nitrophenylthioamino, arylsulfonylamino, f.eks. 4-methylphenyl-sulfonylamino, eller l-lavalkoxycarbonyl-2-propylidenamino, f.eks.

l-ethoxycarbonyl-2-propylidenamino, carboxy eller i salt-, f.eks. alkalimetal-, såsom natriumsaltform foreliggende carboxy, samt beskyttet carboxy, f.eks. foresteret carboxy, såsom phenyllavalkoxycarbonyl, f.eks. diphenylmethoxycarbonyl, sulfo eller i salt-, f.eks. alkalimetalsalt-, såsom natriumsaltform foreliggende sulfo samt beskyttet sulfo. hvdroxv samt beskvttet hvdroxv. såsom acvloxv. f.eks. α-ϋοίν- .

26 DK 155741 B

forgrenet lavalkoxycarbonyloxy, såsom tert.butyloxycarbonyloxy, eller 2-halogenlavalkoxycarbonyloxy, såsom 2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxy, 2-iodethoxycarbonyloxy eller 2-bromethoxycarbonyloxy, endvidere for-myloxy, eller O-lavalkylphosphono eller 0,0T-dilavalkylphosphono, f.eks. O-methylphosphono eller 0,0T-dimethylphosphono, eller en $-amino-5-carboxy-valerylgruppe, hvori amino- og/eller carboxygruppen også kan være beskyttet og f.eks. foreligge som acylamino, f.eks. lav-alkanoylamino, såsom acetylamino, halogenlavalkanoylamino, såsom di-chloracetylamino, benzoylamino eller phthaloylamino, eller som foresteret carboxy, såsom phenyllavalkoxycarbonyl, f.eks. diphenylmethoxy-carbonyl, hvorved fortrinsvis m er 1, når Ra er phenyl, hydroxyphenyl, hydroxy-chlorphenyl eller pyridyl, og m er 0,og R° er forskellig fra hydrogen, når Ra er phenyl, hydroxy-phenyl, hydroxy-chlorphenyl, thienyl, furyl, isothiazolyl eller 1,4-cyclohexadienyl, og R2A er lavalkoxy, især a-polyforgrenet lavalkoxy, f.eks. tert-butyloxy, 2-halogen-lavalkoxy, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxy, 2-iodethoxy eller 2-bromethoxy, eller eventuelt med f.eks. lavalkoxy, f.eks. methoxy, substitueret diphenylmethoxy, f.eks. diphenylmethoxy eller 4,4,-dimethoxydiphenylmethoxy, endvidere trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimethylsilyloxy, samt 1-oxider af sådanne cepham-3-on-forbindelser med formlen I, eller salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper, såsom syreadditionssalte, f.eks. med mineralsyrer eller stærke carboxyl- eller sulfonsyrer, såsom fortrinsvis halogensubstituerede lavalkancarboxylsyrer eller arylsulfonsyrer, især trifluor- eddikesyre eller 4-methylphenylsulfonsyre, af forbindelser med formla len I, hvori R er hydrogen.

I første række står i cepham-3-on-forbindelser med formlen I samt salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper, såsom de i ovenstå- la ende afsnit nævnte salte, R for hydrogen, for acylgruppen med formlen B, hvori Ra er phenyl, 4-hydroxyphenyl, 2-thienyl, 4-isothiazolyl eller 1,4-cyclohexadienyl, X er oxygen, m er 0 eller 1, og R er hydrogen eller, når m er 0, amino, samt beskyttet amino, såsom acylamino, f.eks. a-polyforgrenet lavalkoxycarbonylamino, såsom tert.-butyloxycarbonylamino, eller 2-halogenlavalkoxycarbonylamino, f.eks.

2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino, 2-iodethoxycarbonylamino eller 2-bromethoxycarbonylamino, eller eventuelt lavalkoxy- eller nitro-substitueret phenyllavalkoxycarbonylamino, f.eks. 4-methoxybenzyloxy-carbony1amino, eller hydroxy, samt beskyttet hydroxy, såsom acyloxy, f.eks. α-polvforgrenet lavalkoxycarbonvloxv, såsom tert.butyloxy-

27 DK 155741 B

carbonyloxy, eller 2-halogenlavalkoxycarbonyloxy, såsom 2,2,2-tri-chlorethoxycarbonyloxy, 2-iodethoxycarbonyloxy eller 2-bromethoxy-carbonyloxy, endvidere formyloxy, eller er en 5-amino-5-carboxy-valerylgruppe, hvori amino- og carboxygruppen også kan være beskyttet og f.eks. foreligger som acylamino, f.eks. lavalkanoylamino, såsom acetylamino, halogenlavalkanoylamino, såsom dichloracetyl-amino, benzoylamino, eller phthaloylamino, henholdsvis som foresteret carboxy, såsom phenyllavalkoxycarbonyl, f.eks. diphenyl- methoxycarbonyl, hvorved fortrinsvis m er 1, når Ra er phenyl eller

2A

hydroxyphenyl, og R er eventuelt i 2-stilling halogen-, f.eks. chlor-, brom- eller iodsubstitueret lavalkoxy,. især a-polyforgrenet lavalkoxy, f.eks. tert.butyloxy, eller 2-halogen-lavalkoxy, f.eks.

2,2,2-trichlorethoxy, 2-iodethoxy eller 2-bromethoxy, eller eventuelt lavalkoxy-, såsom methoxysubstitueret diphenylmethoxy, f.eks. diphenylmethoxy eller 4,4'-dimethoxy-diphenylmethoxy, endvidere trilavalkylsilyloxy, f.eks. trimethylsilyloxy.

Opfindelsen angår i første række 73-(D-a-amino-a-Ra-acetylamino)-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylestere, hvori Ra er phenyl, 4-hydroxyphenyl, 2-thienyl eller 1,4-cyclohexadienyl, og amino fortrinsvis foreligger i beskyttet form, f.eks. som acylamino, f.eks. a-polyforgrenet lavalkoxycarbonylamino, såsom tert.butyloxycarbonyl-amino, eller 2-halogenlavalkoxycarbonylamino, f.eks. 2,2,2-trichlor-ethoxycarbonylamino, 2-iodethoxycarbonylamino eller 2-bromethoxy-carbonylamino,eller eventuelt lavalkoxy- eller nitrosubstitueret phenyllavalkoxycarbonylamino, f.eks. 4-methoxybenzyloxycarbonylamino, samt 7P“amino-cepham-3-on-4?-carboxylsyre~diphenylmethylester og salte deraf, og fremfor alt 7p-(D-cc-tert.butyloxycarbonylamino-a~phenyl-acetylamino) -cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester.

Forbindelserne med formlen I fremstilles ved, at man i en cepham-forbindelse med formlen

Rla q

\_A

I (IX) 0=1_N 1=CH0

Y

28 DK 155741 B

eller i et 1-oxid deraf fraspalter methylengruppen i 3-stilling oxida-tivt og om ønsket opdeler en opnået blanding af en forbindelse med formlen I og det tilsvarende 1-oxid eller oxiderer den til 1-oxidet af en forbindelse med formlen I, og/eller om ønsket oxiderer en opnået forbindelse med formlen I til 1-oxidet af en forbindelse med formlen I og/eller om ønsket omdanner en opnået forbindelse til en ketal og om ønsket bagefter spalter denne og/eller om ønsket indenfor definitionen af slutstofferne overfører en opnået forbindelse til en anden forbindelse og/eller om ønsket overfører en opnået forbindelse med saltdannende gruppe til et salt eller et opnået salt til den frie forbindelse eller til et andet salt og/eller om ønsket opdeler en opnået isomerblanding i de enkelte isomere.

I et udgangsmateriale med formlen II har den beskyttede carboxylgruppe

2A

med formlen -C(=0)-R i 4-stilling fortrinsvis'a-konfiguration.

I et udgangsmateriale med formlen II står en aminobeskyttelsesgruppe 1A

R især for en acylgruppe Ae, hvori eventuelt tilstedeværende frie funktionelle grupper, f.eks. amino-, hydroxy-, carboxyl- eller phos-phonogrupper, kan være beskyttet på i og for sig kendt måde, amino-grupper f.eks. ved acylering, tritylering, silylering eller stannyle-ring, og.hydroxy-, carboxy- eller phosphonogrupper f.eks. ved for-ethering eller forestering, inklusive silylering eller stannylering, medens fortrinsvis er en foretheret hydroxygruppe R^A, der sammen med -C(=0)-grupperingen danner en, især under milde betingelser, spaltelig, foresteret carboxylgruppe, idet eventuelt tilstedeværende funktionelle grupper i en carboxylbeskyttelsesgruppe kan være beskyttet på i og for sig kendt måde, f.eks. som ovenfor angivet.

2A

En gruppe R er f.eks. især en eventuelt substitueret, såsom lav-alkoxy, f.eks. methoxy, eller nitro indeholdende 1-phenyllavalkoxy-gruppe, såsom eventuelt, f.eks. som angivet, substitueret benzyloxy eller diphenylmethoxy, f.eks. benzyl, 4-methoxybenzyl, 4-nitrobenzyl, diphenylmethoxy.eller 4,4'-dimethoxy-diphenylmethoxy, samt en eventuelt halogensubstitueret lavalkoxygruppe, såsom a-polyforgrenet lavalkoxy, f.eks. tert.butyloxy, eller 2-halogen-lavalkoxy, hvori halogen f.eks. er chlor, brom eller iod, i første række 2,2,2-tri-chlorethoxy, 2-bromethoxy eller 2-iodethoxy, endvidere også en organisk silyloxy- eller stannyloxygruppe, såsom trilavalkylsilyl-oxy, f.eks. trimethylsilyloxy.

29 DK 155741 B

Den oxidative fraspaltning af methylengruppen under dannelse af en oxogruppe i 3-stilling i ringskelettet kan foretages på forskellig måde« Således kan man anvende oxidationsmidler, der direkte fører til dannelse af forbindelser med formlen I. Dette er især oxidationsmidler, der indeholder hexavalent chrom, såsom dicromater, f.eks. alkali-metaldicromater, såsom kaliumdicromat, som man sædvanligvis anvender i nærværelse af vandige organiske opløsningsmidler, såsom egnede, med vand blandbare ethere, f.eks. dioxan, eller ketoner, f.eks. acetone, og en egnet syre, såsom en mineralsyre, f.eks. svovlsyre, eller chromtrioxid, som man sædvanligvis anvender i nærværelse af eddikesyre og om nødvendigt eventuelt vandholdigt organisk opløsningsmiddel. Oxidationen gennemføres under køling, f.eks. til ca. -90°C, ved stuetemperatur eller højst let opvarmning, f.eks. til ca. 40°C.

Man kan f.eks. også anvende oxidationsmidler, der fører til dannelse af glycolforbindelser, der optræder som mellemprodukter og som i et yderligere oxidationstrin overføres til forbindelser med formlen I. Sådanne oxidationsmidler indeholder fortrinsvis heptavalent mangan eller octavalent osmium eller ruthenium, såsom tilsvarende salte eller oxider, i første række f.eks. permanganatforbindelser, såsom alkali-metalpermanganater, f.eks. kaliumpermanganat, eller oxiderende tungmetaloxider, f.eks. osmiumtetraoxid eller rutheniumtetroxid. Disse oxidationsmidler anvendes fortrinsvis i nærværelse af opløsningsmidler, såsom egnede ethere, f.eks. dioxan, ketoner, f.eks. acetone, eventuelt halogenerede aliphatiske, cycloaliphatiske eller aromatiske car-bonhydrider, f.eks. carbontetrachlorid eller benzen, eller opløsningsmiddelblandinger, inklusive vandige blandinger, samt under køling eller let opvarmning, f.eks. ved temperaturer på ca« -90°C til ca.+40°C.

Methylengruppen i et udgangsmateriale med formlen II kan også omdannes til en 0,0’-diester, f.eks. med en organisk carboxylsyre, såsom en aliphatisk carboxylsyre, f.eks. en eventuelt halogensubstitueret lavalkancarboxylsyre, såsom trifluoreddikesyre, af en tilsvarende glycolforbindelse, og diestergrupperingen kan overføres til glycol-grupperingen, som man så kan nedbryde til en ketogruppe i et yderligere oxidationstrin. Et egnet oxidationsmiddel er et iod-tris-halogen- 30

DK 155741 B

lavalkanoat, især iod-tris-trifluoracetat, der sædvanligvis anvendes i et inaktivt opløsningsmiddel,' såsom et eventuelt halogeneret carbon-hydrid, f.eks. methylenchlorid,og eventuelt under køling, sædvanligvis dog ved stuetemperatur. Den således opnåede diester af glycolfor-bindelsen, hvori hydroxygruppen foresteres med halogenlavalkanoyl-, især trifluoracetylgrupper, kan hydrolytisk overføres til den tilsvarende glycolforbindelse, hvorved man fortrinsvis arbejder under svagt basiske betingelser, f.eks. i nærværelse af et alkalimetal-, f.eks. natrium- eller kaliumhydrogencarbonat, eller en egnet phosphatpuffer.

Endvidere kan man i et udgangsmateriale med formlen II oxidere me-thylengruppen til den tilsvarende epoxygruppe ved behandling med hydro-genperoxid, fortrinsvis i nærværelse af en egnet syre, såsom myresyre, eller i kombination med andre oxidationsmidler, såsom tungmetaloxider, f.eks. osmiumtetraoxid eller med en uorganisk eller organisk persyre, især en percarboxylsyre, såsom pereddikesyre, trifluorper-eddikesyre, perbenzoesyre, 3-chlor-perbenzoesyre eller monoperphthal-syre, og overføre epoxygruppen til glycolgrupperingen ved behandling med en mild base, såsom et metalalkoholat, såsom et alkalimetallav-alkanolat, f.eks. natrium- eller kaliummethanolat, -ethanolat eller -tert.butanolat, i.nærværelse af en alkohol, såsom en lavalkanol, f.eks. methanol, ethanol eller tert.butanol. I

De som mellemprodukter opnåede glycolforbindelser isoleres sædvanligvis ikke, men overføres direkte til den ønskede 3-oxo-cephamforbindel-se med formlen I ved videre oxidation, fortrinsvis ved behandling med en periodatforbindelse, såsom et alkalimetalperiodat, f.eks. natrium-periodat, eller et oxiderende tungmetalacylat, såsom et bly-IV-acylat, f.eks. blytetraacetat eller blytrabenzoat, thallium-ΙΙΙ-acylat, f.eks. thallium-triacetat, eller kviksølv-II-acylat, f.eks. kviksølvdiacetat, fortrinsvis i et egnet opløsningsmiddel eller en opløsningsmiddelblanding, såsom et af de ovennævnte, samt under køling eller let opvarmning, f.eks. ved temperaturer på ca. -70°C til ca. +40°C.

Den oxidative nedbrydning af methylengruppen i et udgangsmateriale med formlen II foretages fortrinsvis under dannelse af en ozonid-forbindelse ved behandling med ozon. Derved anvender man ozon fortrinsvis i nærværelse af et opløsningsmiddel, såsom en alkohol, f.eks. en lavalkanol, såsom methanol eller ethanol, en keton, f.eks. en lav-

31 DK 155741 B

alkanon, såsom acetone, et eventuelt halogeneret aliphatisk, cyclo-aliphatisk eller aromatisk carbonhydrid, f.eks. en halogenlavalkan, såsom methylenchlorid eller carbontetrachlorid, eller en opløsnings middelblanding ,inklusive en vandig blanding,samt· under højst let opvarmning, fortrinsvis dog køling, d.v.s. ved temperaturer på ca. -90°C til ca. +40°C, fortrinsvis temperaturer på ca. -70°G til ca. +10°C, hvorved man med fordel arbejder i et temperaturinterval på ca. -10°C til ca. +10°C eller også i et væsentligt lavere temperaturområde på ca. -70°C til ca. -40°C.

Et som mellemprodukt dannet ozonid spaltes reduktivt, hvorved man som reduktionsmiddel f.eks. anvender katalytisk aktiveret hydrogen, såsom hydrogen i nærværelse af en tungmetalhydreringskatalysator, f. eks. en nikkel-, endvidere palladiumkatalysator, fortrinsvis på et egnet bæremateriale, såsom calciumcarbonat eller kul, eller kemiske reduktionsmidler, såsom reducerende tungmetaller, inklusive tungmetallegeringer eller -amalgamer, f.eks, zink, i nærværelse af en hydrogendonator, såsom en syre, f.eks. eddikesyre, eller en alkohol, f.eks. lavalkanol, reducerende uorganiske salte, såsom alkalimetaliodider, f.eks. natriumiodid, i nærværelse af en hydrogendonator, såsom en syre, f.eks. eddikesyre, eller reducerende organiske forbindelser, såsom myresyre. Med fordel anvender man reduktionsmidler, der let kan omdannes til oxidforbindelser, hvorved oxiddannelsen kan ske på basis af en tilstedeværende carbon-carbon-dobbeltbinding eller et tilstedeværende oxiddannende hetero-, såsom svovl-, phosphor- eller nitrogenatom. Sådanne forbindelser er f.eks. egnet substituerede ethenforbindelser (der ved reaktionen omdannes til ethylenoxyforbindelser) , såsom tetracyanethylen, især egnede sulfidforbindelser (der ved reaktion omdannes til .sulfoxidforbindelser), såsom dilav-alkylsulfider, i første række dimethylsulfid', egnede organiske phos-phorforbindelser, såsom en phosphin, der kan indeholde eventuelt substituerede aliphatiske eller aromatiske carbonhydridgrupper som sub-stituenter (og som ved reaktionen omdannes til phosphinoxid), såsom tril'avalkyl-phosphiner, f.eks. tri-n-butylphosphin, eller triaryl-phosphiner, f.eks. triphenylphosphin, endvidere phosphiter, der kan indeholde eventuelt substituerede aliphatiske carbonhydridgrupper som substituenter (og som ved reaktionen omdannes til phosphorsyre-triestere), såsom trilavalkyl-phosphiter, sædvanligvis i form af

32 DK 155741 B

tilsvarende alkoholadduktforbindelser, såsom trimethylphosphit, eller phosphorsyrlingtriamider, der indeholder eventuelt substituerede aliphatiske c arbonhy dr idgrupper som substituenter, såsom hexalavalkyl-phosphorsyrlingtriamider, f.eks. hexamethylphosphorsyrlingtriamid, sidstnævnte fortrinsvis i form af et methanoladdukt, endvidere egnede nitrogenbaser (der ved reaktionen omdannes til de tilsvarende N- 1 oxider), såsom heterocycliske nitrogenbaser af aromatisk karakter, f.eks. baser af pyridintypen og især pyridin selv. Spaltningen af det j j sædvanligvis ikke-isolerede ozonid sker normalt under de betingelser, j som man anvender til dets fremstilling, d.v.s. i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel eller en opløsningsmiddelblanding samt under køling eller let opvarmning, hvorved man fortrinsvis arbejder ved temperaturer på ca. -10 C til ca, +25 C og sædvanligvis afslutter ί reaktionen ved stuetemperatur. ! i

Forbindelserne med formlen I kan ligeledes fremstilles ved, at man j behandler en cephemforbindelse med formlen J

Rla : \ NH g ! \_A ! I ; (III) i 0=1_N A-CHO i oXr2A .

der i 2,3- eller 3,4-stilling har en dobbeltbinding, eller i et 1-oxid af en 3-cephemforbindelse med formlen III med en persyre og i en opnået 3-formyloxy-4-R2A-carbonyl-7-N-Rla-amino-cephem-for-bindelse eller et 1-oxid deraf spalter formyloxygruppen og om ønsket gennemfører de ovennævnte supplerende trin.

Den ovennævnte reaktion gennemføres efter Baeyer-Villiger-oxidations-metoden.'Man anvender i denne oxidationsreaktion uorganiske persyrer, der består af ikke-metalliske grundstoffer, organiske persyrer eller blandinger af hydrogenperoxid og syrer, især organiske carboxylsyrer, ·. med en dissociationskonstant på mindst 10” . Egnede uorganiske persyrer er period- og persvovlsyre. Organiske persyrer er tilsvarende percarboxyl- og persulfonsyrer, der kan tilsættes som sådanne eller dannes in situ ved anvendelse af mindst ét ækvivalent hydrogenperoxid i ! DK 155741 β 33 og en carboxylsyre. Derved er det hensigtsmæssigt at anvende et stort overskud af carboxylsyre, når f.eks. eddikesyre anvendes som opløsningsmiddel. Egnede persyrer er f.eks. permyresyre, pereddikesyre, tri-fluorpereddikesyre, permaleinsyre, perbenzoesyre, 3-chlorperbenzoesyre, monoperphthalsyre eller p-toluenpersulfonsyre. Reaktionen gennemføres fortrinsvis i nærværelse af et inaktivt opløsningsmiddel, såsom et eventuelt halogeneret carbonhydrid, f.eks. methylenehlorid eller chloroform, og fortrinsvis under køling, f.eks. ved temperaturer på ca. -10°C til ca. 20°c.

I en opnået 3-formyloxy-4-R^-carbonyl-7-N-R^a-amino-cephem-forbin-delse kan formyloxygruppen spaltes ved solvolyse, især hydrolyse, fortrinsvis i nærværelse af et basisk middel, såsom et alkalimetal-hydrogencarbonat, f.eks. natrium- eller kaliumhydrogencarbonat.

Alt efter de ovennævnte oxidationsreaktioners art får man en forbindelse med formlen I eller det tilsvarende 1-oxid eller en blanding af de to forbindelser. En sådan blanding kan opdeles i forbindelsen med formlen I og det tilsvarende 1-oxid,eller man kan oxidere dentil et ensartet 1-oxid af en forbindelse med formlen I.

En blanding af en forbindelse med formlen I og det tilsvarende 1-oxid kan opdeles i enkeltkomponenterne på sædvanlig måde, f.eks. ved fraktioneret krystallisation eller ved kromatografi (f.eks. søjlekromatografi, tyndtlagskromatografi).

Endvidere kan man oxidere en opnået blanding af en forbindelse med formlen I og et 1-oxid deraf eller en opnået forbindelse med formlen I til det tilsvarende 1-oxid. Som egnede oxidationsmidler kommer på tale uorganiske persyrer, der har et reduktionspotentiel på mindst + 1,5 volt og består af ikke-metalliske grundstoffer, organiske persyrer eller blandinger af hydrogenperoxid og syrer, især organiske -5 carboxylsyrer, med en dissociationskonstant på mindst 10 . Egnede uorganiske persyrer er period- og persvovlsyre. Organiske persyrer er tilsvarende percarboxyl- og persulfonsyrer, der kan tilsættes som sådanne eller dannes in situ ved anvendelse af mindst ét ækvivalent . hydrogenperoxid og en carboxylsyre. Derved er det hensigtsmæssigt at anvende et stort overskud af carboxylsyre, når f.eks. eddikesyre an- . vendes som opløsningsmiddel. Egnede persyrer er f.eks. permyresyre, Λ -3 J «? 1 _ i · Λη j i » i "i · _______ „Τ. ΛνηίΑώ <frv> a

34 DK 155741 B

Oxidationen kan ligeledes gennemføres under anvendelse af hydrogen-peroxid med katalytiske mængder af en syre med en dissociationskonstant på mindst 10 , hvorved man kan anvende lave koncentrationer, f.eks.

1-2$ og mindre, men også større mængder syre. Derved afhænger blandingens virkning i første række af syrens styrke. Egnede blandinger er f.eks. blandinger af hydrogenperoxid og eddikesyre, perchlorsyre eller trifluoreddikesyre.

Den ovennævnte oxidation kan gennemføres i nærværelse af egnede katalysatorer. Således kan f.eks. oxidationen med percarboxylsyrer katalyseres ved nærværelse af en syre med en dissociationskonstant på -5 mindst 10 , hvorved deres virkning afhænger af deres styrke. Som katalysatorer egnede syrer er f.eks. eddikesyre, perchlorsyre og trifluoreddikesyre. Sædvanligvis anvender man mindst ækvimolære mængder af oxidationsmidlet, fortrinsvis et ringe overskud på ca. 10$ til ca. 20$, hvorved man også kan anvende større overskud, d.v.s. indtil den 10-dobbelte mængde af oxidationsmidlet eller derover. Oxidationen gennemføres under milde betingelser, f.eks. ved temperaturer på ca. -50°C til ca. +100°C, fortrinsvis på ca. -10°C til ca. +40°C.

Oxidationen af cepham-3-on-forbindelser til de tilsvarende 1-oxider kan også gennemføres ved behandling med ozon, endvidere med organiske hypohalog'enitforbindelser, såsom lavalkyl-hypochloriter, f.eks. tert. butylhypochlorit, som man anvender i nærværelse af inaktive opløsningsmidler,· såsom eventuelt halogenerede carbonhydrider, f.eks. methylenchlorid, og ved temperaturer på ca. -10°C til ca. +30°G, med periodatforbindelser, såsom alkalimetalperiodater, f.eks. kalium-periodat, som man fortrinsvis anvender i et vandigt medium ved en pH-værdi på ca. 6 og ved temperaturer på ca. -10°C til ca. +30°C, med iodbenzendichlorid, som man anvender i et vandigt medium, fortrinsvis i nærværelse af en organisk base, f.eks. pyridin, og under køling; f.eks. ved temperaturer på ca. -20°C til ca. 0°C, eller med et vilkårligt andet oxidationsmiddel, der egner sig til omdannelse af en thio- til en sulfoxidgruppering.

Alt efter det anvendte oxidationsmiddel får man la- eller Ιβ-oxid eller en blanding af de to.

35

DK 155741 B

Opnåede forbindelser med formlen I kan overføres til andre forbindelser med formlen I, hvorved man må passe på at vælge reaktionsbetingelserne således, at oxogruppen i 3-stilling og den beskyttede

2A

carboxylgruppe med formlen -C(=0)-R forbliver intakte, hvorved oxogruppen også kan være beskyttet og f.eks. foreligge i form af en funktionelt omdannet enolgruppe, såsom en silyleret eller stan-nyleret enolgruppe, eller en ketalgruppe. Desuden kan om nødvendigt frie funktionelle grupper, der ikke deltager i reaktionen, være be-· skyttet på i og for sig kendt måde, frie aminogrupper f.eks. ved acylering, tritylering eller silyleringfrie hydroxy- eller mercapto-grupper f.eks. ved forethering eller forestering, og frie carboxylgrup-per,. f.eks. ved forestering, inklusive silylering. Disse grupper kan om ønsket frigøres bagefter på i og for sig kendt måde.

I en opnået forbindelse kan f.eks. en aminobeskyttelsesgruppe R^.f især en let fraspaltelig acylgruppe, fraspaltes på i og for sig kendt måde, f.eks. en a-polyforgrenet lavalkoxycarbonylgruppe, såsom tert.butyloxycarbonyl, ved behandling med trifluoreddikesyre og en 2-halogen-lavalkoxycarbonylgruppe, såsom 2,2,2-trichlorethoxy-carbonyl eller 2-iodethoxycarbonyl, eller en phenacyloxycarbonylgrup-pe ved behandling med et egnet reducerende middel eller en tilsvarende metalforbindelse,f.eks.zink,eller en chrom-II-forbindelse,såsom -chlnrid eller -acetat, med fordel i nærværelse af et middel, der sammen med metallet eller metalforbindelsen danner nascerende hydrogen, fortrinsvis i nærværelse af vandholdig eddikesyre. I en opnået forbindelse

1A

med formlen I kan endvidere en acylgruppe R , hvori eventuelt tilstedeværende frie funktionelle grupper eventuelt er beskyttet, aminogrupper f.eks. i form af acylaminogrupper eller silylerede aminogrupper, og/eller carboxygrupper f.eks. i form af foresterede eller silylerede carboxygrupper, fraspaltes ved behandling med et imidhalogeniddannende middel, omsætning af det dannede imidhalogenid med en alkohol og spaltning af den dannede iminoether.

Imidhalogeniddannende midler, hvori halogen er bundet til et elektro-filt centralatomer fremfor alt syrehalogenider, såsom syrebromider

36 . DK 155741B

og især syrechlorider. Det drejer sig i første række om syrehalogeni-der af uorganiske syrer, fremfor alt af phosphorholdige syrer, såsom phosphoroxy-, phosphortri- og især phosphorpentahalogenider, f.eks. phosphoroxychlorid, phosphortrichlorid, og i første række phosphor-pentachlorid, endvidere pyrocatechyl-phosphortrichlorid, samt syre-halogenider, især -chlorider, af svovlholdige syrer eller af carboxylsyrer, såsom thionylchlorid, phosgen eller oxalylchlorid.

Omsætningen med et af de nævnte imidhalogeniddannende midler foretages sædvanligvis i nærværelse af en egnet, især organisk base, i første række en tertiær amin, f.eks. en tertiær aliphatisk mono- eller diamin, såsom en trilavalkylamin, f.eks. trimethyl-, triethyl- eller N-ethyl-N,N-diisopropylarain, endvidere en Ν,Ν,Ν1,Nf-tetralavalkyl-lavalkylendiamin, f. eks. N, N, N1, NT -tetramethyl-1,5-pentylen-diamin eller N,N,Nf,NT-tetramethyl-l,6-hexyldiamin, en mono- eller bicyclisk mono- eller diamin, såsom en N-substitueret, f.eks. N-lavalkyleret, alkylen-, azaalkylen- eller oxaalkylenamin, f.eks. N-methyl-piperidin eller N-methyl-morpholin, endvidere 2,3,4,6,7,#-hexahydro-pyrrolo [l,2-a]pyrimidin (diazabicyclononen, DBN), eller en tertiær aromatisk amin, såsom en dilavalkylanilin, f.eks. Ν,Ν-dimethylanilin, eller i første række en tertiær heterocyclisk, mono- eller bicyclisk base, såsom quinolin eller isoquinolin, især pyridin, fortrinsvis i nærværelse af et opløsningsmiddel, såsom et eventuelt halogeneret, f.eks. chloreret, aliphatisk eller aromatisk carbonhydrid, f.eks. methylen-chlorid. Derved kan.man anvende omtrent ækvimolære mængder af det imidhalogeniddannende middel og basen·, sidstnævnte kan imidlertid også være til stede i over- eller underskud, f.eks. i ca. 0,2 til ca.

1 gange mængden af midlet,eller i et indtil ca. 10-dobbelt, især ca.

3- til 5~dobbelt, overskud.

Reaktionen med det imidhalogeniddannende middel gennemføres fortrinsvis under køling, f.eks. ved temperaturer på ca. -50°C til ca. +10°C, hvorved man dog også kan arbejde ved højere temperaturer, d.v.s. ved f.eks. indtil ca. 75°C, såfremt udgangsstofferne og produkternes stabilitet tillader en forhøjet temperatur.

Imidhalogenidproduktet, som man sædvanligvis videreforarbejder uden isolering, omsættes til iminoetheren med en alkohol, fortrinsvis i nærværelse af en af de ovennævnte baser. Egnede alkoholer er f.eks. aliphatiske samt araliphatiske alkoholer, i første række eventuelt

37 DK 155741B

substituerede, såsom halogenerede, f.eks. chlorerede eller yderligere hydroxygrupper indeholdende,lavalkanoler, f.eks. ethanol, propanol eller butanol, især methanol, endvidere 2-halogen-lavalkanoler, f.eks. 2,2,2-trichlorethanol eller 2-bromethanol, samt eventuelt substituerede phenyl-lavalkanoler, såsom benzylalkohol. Sædvanligvis anvender man et, f.eks. til ca. 100-dobbelt, overskud af alkoholen, og arbejder fortrinsvis under køling, f.eks. ved temperaturer på ca.

-50°C til ca. 10°C.

Iminoetherproduktet kan med fordel underkastes spaltningen uden isolering. Spaltningen af iminoetheren opnås ved behandling med en egnet hydroxyforbindelse, fortrinsvis ved hjælp af hydrolyse, endvidere ved alkoholyse, hvorved sidstnævnte ved anvendelse af et overskud af alkoholen kan ske direkte i tilslutning til iminoetherdannelsen. Derved anvender man fortrinsvis vand eller en alkohol, især en lav-alkanol, f.eks. methanol, eller en vandig blanding af et organisk opløsningsmiddel, såsom en alkohol. Man arbejder sædvanligvis i et surt medium, f.eks. ved en pH-værdi på ca. 1 til ca. 5, som man om nødvendigt kan indstille ved tilsætning af et basisk middel,såsom et vandigt ‘ alkalimetalhydroxid, f.eks. natrium- eller kaliumhydroxid, eller en syre, f.eks. en mineralsyre eller organisk syre, såsom saltsyre, svovlsyre, phosphorsyre, hydrogenborfluorid, trifluoreddikesyre eller p-toluensulfonsyre.

Den ovenfor beskrevne tretrinsfremgangsmåde til fraspaltning af en acylgruppe gennemføres med fordel, uden isolering af imidhalogenid-og iminoethermellemprodukterné, sædvanligvis i nærværelse af et organisk opløsningsmiddel, der forholder sig inaktivt overfor reaktionsdeltagerne, såsom et eventuelt halogeneret carbonhydrid, f.eks. methylenchlorid, og/eller i en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

Hvis .man omsætter det efter ovennævnte fremgangsmåde opnåede imid- halogenidmellemprodukt i stedet for med en alkohol med et salt, såsom et alkalimetalsalt af en carboxyl-, især en sterisk hindret carboxyl- la syre, får man en forbindelse med formlen I, hvori gruppen R er en acylgruppe.

DK 155741 B

38

Visse acylgrupper R1^ i en acylaminogruppering i ifølge opfindelsen opnåede forbindelser, som f.eks. en 5“-amino-5-carboxy-valerylgruppe, hvori carboxyl eventuelt er beskyttet, f.eks* ved forestering, især med diphenylmethyl, og/eller aminogruppen eventuelt er beskyttet, f.eks. ved acylering, især med en acylrest af en organisk carboxylsyre, såsom-halogenlavalkanoyl, f.eks. dichloracetyl., eller phthaloyl, kan også fraspaltes ved behandling med et nitroserende middel, såsom nitrosylchlorid, med et carbocyclisk arendiazoniumsalt, såsom ben-zendiazoniumchlorid, eller med et middel, der afgiver positivt halogen, såsom et N-halogen-amid eller -imid, f.eks. N-bromsuccin-imid, fortrinsvis i et egnet opløsningsmiddel eller en opløsningsmiddelblanding, såsom myresyre sammen med en.nitro- eller cyan-lav-alkan,og tilsætning af et hydroxylholdigt middel, såsom vand eller en lavalkanol, f.eks. methanol, til reaktionsproduktet, eller,såfremt aminogruppen i 5-amino-5-carboxy-valerylgruppen R^ er usubstitueret, og carboxygruppen er beskyttet, f.eks. ved forestering, ved henstand i et inaktivt opløsningsmiddel, såsom dioxan eller et halogeneret aliphatisk carbonhydrid, f.eks. methylenchlorid, og om nødvendigt oparbejdning af den frie eller monoacylerede aminoforbindelse efter i og for sig kendte metoder..

1A

En formylgruppe R kan også fraspaltes ved behandling med et surt middel, f.eks. p-toluensulfonsyre eller hydrogenchlorid, et svagt basisk middel, f.eks. fortyndet ammoniak, eller et decarbonylerings-middel, f.eks. tris-(triphenylphosphin)-rhodiumchlorid.

En triarylmethyl-, såsom en tritylgruppe R^ kan fraspaltes f.eks. ved behandling med et surt middel, såsom en mineralsyre, f.eks. hydrogenchlorid.

1 Q

I en forbindelse med formlen I, hvori R er hydrogen, og oxogruppen i 3-stilling om nødvendigt er beskyttet, f.eks. som angivet, kan den frie aminogruppe beskyttes efter i og for sig kendte metoder, f.eks. acyleres ved behandling med syrer, såsom carboxylsyrer, eller reaktionsdygtige syrederivater deraf.

39 DK 155741 B

Såfremt en fri syre, fortrinsvis med beskyttede, eventuelt tilstedeværende funktionelle grupper, såsom en eventuelt tilstedeværende aminogruppe,anvendes til acylering, anvender man sædvanligvis egnede kondensationsmidler, såsom carbodiimider, .f.eks. N,N’-diethyl-, N,N*-dipropyl-, Ν,Ν’-diisopropyl-, Ν,Ν’-dicyclohexyl- eller N-ethyl-N’-3-dimethylaminopropyl-carbodiimid, egnede carbonylforbindelser, f.eks. carbonyldiimidazol, eller isoxazoliniumsalte, f.eks. N-ethyl-5-phenyl-isoxazolinium-3’-sulfonat og N-tert.butyl-5-methyl-isoxazoliniumper-chlorat, eller en egnet acylaminoforbindelse, f.eks. 2-ethoxy-l-ethoxycarbonyl-1,2-dihydroquinolin.

Kondensationsreaktionen gennemføres fortrinsvis i et af de nedenfor nævnte, vandfrie reaktionsmedier, f.eks. methylenchlorid, dimethylform-amid eller acetonitril.

Et amiddannende, funktionelt derivat af en syre, fortrinsvis'med beskyttede eventuelt tilstedeværende funktionelle grupper, såsom en eventuelt tilstedeværende aminogruppe, er i første række et anhydrid af en sådan syre, inklusive, og fortrinsvis et blandet anhydrid. Blandede anhydrider er f.eks. sådanne med uorganiske syrer,især hydro-genhalogenid, d.v.s. de tilsvarende syrehalogenider, f.eks. -chlori-der eller -bromider, endvidere azoimid, d.v.s. de tilsvarende syre-azider, en phosphorholdig syre, f.eks. phosphorsyre eller phosphor-syrling, en svovlholdig syre, f.eks.svovlsyre, eller hydrogencyanid. Andre blandede anhydrider er f.eks. sådanne med organiske syrer, såsom organiske carboxylsyrer, såsom eventuelt, f.eks. med halogen, såsom fluor eller chlor, substituerede lavalkancarboxylsyrer, f.eks. pivalinsyre eller trichloreddikesyre, eller med halvestere, især lav-alkylhalvestere, af kulsyre, såsom ethyl- eller isobutylhalvesteren af kulsyre, eller med organiske, især aliphatiske eller aromatiske, sulfonsyrer, f.eks. p-toluensulfonsyre.

Endvidere kan man som acyleringsmidler anvende indre anhydrider, såsom ketener, f.eks. diketen, isocyanater (d.v.s. indre anhydrider af carbaminsyreforbindelser) eller indre anhydrider af carboxylsyrefor-bindelser med carboxy-substituerede hydroxy- eller aminogrupper, såsom mandelsyre-O-carboxanhydrid eller anhydridet af 1-N-carboxy-amino-cyclohexancarboxylsyre.

40 DK 155741 B

Andre syrederivater, der er egnet til reaktion med den frie amirio-gruppe,er aktiverede estere, sædvanligvis med beskyttede, eventuelt tilstedeværende funktionelle grupper, såsom estere med vinyloge alkoholer (d.v.s. enoler), såsom vinyloge lavalkanoler, eller arylestere, såsom, fortrinsvis, f.eks, med nitro eller halogen, såsom chlor, substituerede phenylestere, f.eks. pentachlorphenyl-, 4-nitrophenyl-eller 2,4-dinitrophenylestere,heteroaromatiske estere, såsom benztria-zolestere,eller diacyliminoestere, såsom succinylimino- eller phthal-yliminoestere.

Andre acyleringsderivater er f.eks. substituerede formiminoderivater, såsom substituerede Ν,Ν-dimethylchlorformiminoderivater af syrer, eller N-substituerede Ν,Ν-diacylaminer, såsom en Ν,Ν-diacyleret anilin.

Acyleringen med et syrederivat, såsom et anhydrid,og især med et syre-halogenid, kan gennemføres i nærværelse af et syrebindende middel, f.eks. en organisk base, såsom en organisk amin, f.eks. en tertiær amin, såsom trilavalkylamin, f.eks. triethylamin, N,N-dilavalkyl-anilin, f.eks. Ν,Ν-dimethylanilin, eller en base af pyridintypen, f.eks. pyridin, en uorganisk base, f.eks. et alkalimetal- eller jord-alkalimetalhydroxid, -carbonat eller -hydrogencarbonat, f.eks. natrium-, kalium- eller calciumhydroxid, -carbonat eller -hydrogencarbonat, eller en oxiran, f.eks. et lavere 1,2-alkylenoxid, såsom ethylen-oxid eller propylenoxid.

Ovennævnte acylering kan foretages i vandigt eller fortrinsvis vandfrit opløsningsmiddel eller en opløsningsmiddelblanding, f.eks. i et carboxylsyreamid, såsom Ν,Ν-dilavalkylamid, f.eks. dimethylformamid, et halogeneret carbonhydrid, f.eks. methylenchlorid, carbontetra-chlorid eller chlorbenzen, en keton, f.eks. acetone, en ester, f.eks. ethylacetat, eller et nitril, f.eks. acetonitril, eller blandinger deraf og om nødvendigt ved sænket eller forhøjet temperatur og/eller i en atmosfære af en inaktiv gas, såsom nitrogen.

Derved kan en acylgruppe også indføres trinvis.. Således kan .man f. eks. i en forbindelse med formlen I med en fri aminogruppe indføre en halogen-lavalkanoyl-, f.eks. en bromacetylgruppe, eller f.eks. ved behandling med et kulsyredihalogenid, såsom phosgen, en halogencarbo-nyl-, f.eks. chlorcarbonylgruppe, og omsætte en således opnået N-(halogen-lavalkanoyl)- eller N-(halogencarbonyl)-aminoforbindelse med

41 DK 155741 B

egnede udbytningsreagenser, såsom basiske forbindelser, f.eks. tetra-zol, thioforbindelser, f.eks. 2-mercapto-l-methyl-imidazol, eller metalsalte, f.eks. natriumazid, eller alkoholer, såsom lavalkanoler, f.eks. tert.butanol, og således nå til substituerede N-lavalkanoyl- eller N-hydroxycarbonylaminoforbindelser.

Acyleringen kan også ske ved udbytning af en allerede eksisterende acylgruppe med en anden, fortrinsvis sterisk hindret acylgruppe, f. eks. ifølge den ovenfor beskrevne fremgangsmåde ved, at man fremstiller imidhalogenidforbindelsen, behandler denne med et salt af en syre og hydrolytisk fraspalter en af de i det således opnåede produkt tilstedeværende acylgrupper, sædvanligvis den sterisk mindst hindrede acylgruppe.

la I en forbindelse med formlen I, hvori R er hydrogen, kan den frie aminogruppe også beskyttes ved indføring af en triarylmethylgrup-pe, f.eks. ved behandling med en reaktionsdygtig ester af en triaryl-methanol, såsom tritylchlorid, fortrinsvis i nærværelse af et basisk middel, såsom pyridin.

En aminogruppe kan også beskyttes ved indføring af en silyl- og stannylgruppe. Sådanne grupper indføres på i og for sig kendt måde, f.eks. ved behandling med et egnet silyleringsmiddel, såsom en di-halogen-dilavalkyl-silan, lavalkoxy-lavalkyl-dihalogen-silan,eller et trilavalkyl-silyl-halogenid, f.eks. dichlor-dimethylsilan, methoxy-methyl-dichlor-silan, trimethylsilylchlorid eller dimethyl-tert.butyl-silylchlorid, hvorved man anvender sådanne silylhalogenidforbindelser fortrinsvis i nærværelse af en base, f.eks. pyridin, med en eventuelt N-mono-lavalkyleret, N,N-di-lavalkyleret, N-trilavalkylsilyleret eller N-lavalkyl-N-trilavalkylsilyleret N-(tri-lavalkylsilyl)-amin (se f.eks. britisk patent nr. 1.073.530) eller med et silyleret carboxylsyreamid, såsom et bis-trilavalkylsilyl-acetamid, f.eks. bis-trimethylsilyl-a'cetamid, eller trifluorsilylacetamid, endvidere med et egnet stannyleringsmiddel, såsom et bis-(tri-lavalkyl-tin)-oxid, f.eks. bis-(tri-n-butyl-tin)-oxid, et tri-lavalkyl-tinhydroxid, f.eks. triethyl-tin-hydroxid, en trilavalkyl-lavalkoxytin-, tetra-lavalkoxy-tin- eller tetralavalkyl-tinforbindelse, samt et tri-lavalkyl-tin-halogenid, f.eks. tri-n-butyl-tinchlorid (se f.eks. hollandsk fremlæggelsesskrift nr. 67/IIIO7).

DK 155741 B

42 I en opnået forbindelse med en foresteret gruppering med formlen p Λ -C(=0)-R kan denne overføres til en anden foresteret carboxygruppe med denne formel, f.eks. 2-chlorethoxycarbonyl eller 2-bromethoxy-carbonyl til 2-iodethoxycarbonyl ved behandling med et iodsalt, såsom natriumiodid, i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel, såsom acetone.

Ved fremgangsmåden samt eventuelle supplerende foranstaltninger kan om nødvendigt i reaktionen ikke deltagende, frie funktionelle grupper i udgangsstofferne eller i de opnåede forbindelser beskyttes forbigående på i og for sig kendt måde, f.eks. frie aminogrupper f.eks. ved acylering, tritylering eller silylering, frie hydroxy-eller mercaptogrupper f.eks. ved forethering eller forestering og frie carboxylgrupper f.eks. ved forestering, inklusive silylering, og efter endt reaktion frigøres på i og for sig kendt måde, om ønsket, enkeltvis eller samlet. Således kan man fortrinsvis beskytte f.eks. amino-, hydroxy-, carboxyl- eller phosphonogrupper i en acylgruppe R f.eks. i form af acylamino-, såsom de ovennævnte, f.eks. 2,2,2-trichlorethoxycarbonylamino-, 2-bromethoxycarbonyl-amino-, 4-methoxybenzyloxycarbonylamino-, diphenylmethoxycarbonyl-amino- eller tert.butyloxycarbonylamino-, aryl- eller aryllavalkyl-thioamino-, f.eks. 2-nitrophenylthioamino-, eller arylsulfo-nylamino-, f.eks. 4-methylphenylsulfonylamino-, eller 1-lavalkoxy-carbonyl-2-propylidenaminogrupper, henholdsvis acyloxy-, såsom de ovennævnte, f.eks. tert.butyloxycarbonyloxy-, 2,2,2-trichlorethoxy-carbonyloxy- eller 2-bromethoxycarbonyloxygrupper, henholdsvis forest erede carboxy-, såsom de ovennævnte, f.eks. diphenylmethoxycarbo-nylgrupper, henholdsvis 0,0T-disubstituerede phosphono-, såsom de ovennævnte, f.eks. 0,0T-dilavalkylphosphono-, f.eks. 0,0T-dimethyl-phosphonogrupper,- og bagefter om ønsket, f.eks. delvis, eventuelt efter omdannelse af beskyttelsesgruppen, f.eks. en 2-bromethoxy-carbonyl- til en 2-iod-ethoxycarbonylgruppe, på i og for sig kendt måde og alt efter beskyttelsesgruppens art, f.eks. en 2,2,2-trichlor-ethoxycarbonylamino- eller 2-iodethoxycarbonylaminogruppe ved behandling med egnede, reduktionsmidler, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, en diphenylmethoxycarbonylamino- eller tert.butyloxy-carbonylaminogruppe ved behandling med myre- eller trifluoreddike- .

DK 155741 B

43 syre, en aryl- eller aryllavalkylthioaminogruppe ved behandling med et nucleofilt reagens i såsom svovlsyrling, en arylsuifonylaminogrup-pe ved hjælp af elektrolytisk reduktion, en l-lavalkoxycarbonyl-2-. propylidenaminogruppe ved behandling med vandig mineralsyre, en tert. butyloxycarbonyloxygruppe.ved behandling med myre- eller trifluor-eddikesyre, 2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxygruppe ved behandling med et kemisk reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af vandig eddikesyre, en diphenylmethoxycarbonylgruppe ved behandling med myre- eller trifluoreddikesyre eller ved hydrogenolyse eller en 0,0f-disubstitu-eret phosphonogruppe ved behandling med et alkalimetalhalogenid.

Salte af forbindelser med formlen I kan fremstilles på i og for sig kendt måde .Således kan man danne salte af sådanne forbindelser med sure grupper,f.eks.ved behandling med metalforbindelser,såsom alkalimetalsalte af egnede carboxylsyrer,f.eks. natriumsaltet af a-ethyl-capronsyre, eller med ammoniak eller en egnet organisk amin, hvorved man fortrinsvis anvender støkiometriske mængder eller kun et lille overskud af det saltdannende middel. Syreadditionssalte af forbindelser med formlen I med basiske grupperinger får man på sædvanlig måde, f.eks. ved behandling med en syre eller et egnet anionbytterreagens. Indre salte af forbindelser med formlen I, der indeholder en saltdannende amino-gruppe og en fri carboxylgruppe, kan f.eks. dannes ved neutralisation af salte, såsom syreadditionssalte, til det isoelektriske punkt, f. eks. med svage baser, eller ved behandling med flydende ionbyttere.

Salte af 1-oxider af forbindelser med formlen I med saltdannende grupper kan fremstilles på analog måde.

Salte kan overføres til de frie forbindelser på sædvanlig måde, metal-og ammoniumsalte f.eks. ved behandling med egnede syrer, og syreadditionssalte f.eks. ved behandling med et egnet basisk middel.

Opnåede blandinger af isomere kan opdeles i de enkelte isomere efter i og for sig kendte metoder, blandinger af diastereomere isomere f.eks. ved fraktioneret krystallisation, adsorptionskromatografi (kolonne- eller tyndtlagskromatografi) eller andre egnede skillemetoder. Opnåede racemater kan skilles i antipoderne på sædvanlig måde, eventuelt efter indførelse af egnede saltdannende grupperinger, f.eks. ved dannelse af en bl ånding af diast ereoisomere salte med ontisk ak-

DK 155741 B

44 tive saltdannende midler, adskillelse af blandingen i de diastereo-isomere salte og overførelse af de fraskilte salte til de frie forbindelser eller ved fraktioneret krystallisation af optisk aktive opløsningsmidler.

Fremgangsmåden omfatter også de udførelsesformer, efter hvilke forbindelser, der fås. som mellemprodukter, anvendes som udgangsstoffer, og. hvor de resterende fremgangsmådetrin gennemføres med disse,eller hvor fremgangsmåden afbrydes på et vilkårligt trin; endvidere· kan udgangsstoffer anvendes i form af derivater, eller dannes under reaktionen.

Fortrinsvis· anvendes sådanne· udgangsstoffer og vælges reaktionsbe-tingelserne således, at man kommer til de forbindelser, der tidligere er.omtalt som værende særligt foretrukne.

De anvendte udgangsstoffer med formlen II kan f.eks. fremstilles ved, at man i en cephemforbindelse med formlen

Rla /S.

\-/ \ o I I (IV)

i__N i-CHo-0-C-CHQ

Y 2 3 0=C-R2 la 1A 2 hvori R fortrinsvis er en aminobeskyttelsesgruppe R , og R for-

„ 2A

trinsvis er hydroxy, men også kan være en gruppe R , overfører acetyloxymethylgruppen til en hydroxymethylgruppe, f.eks. ved hydrolyse i svagt basisk medium, såsom med en vandig natriumhydroxidopløsning ved pH-værdi 9-10, eller ved behandling med en egnet esterase, såsom et tilsvarende enzym fra Rhizobium tritolii, Rhizobium lupinii, Rhizobium japonicum eller Bacillus .subtilis, om-danner en fri carboxylgruppe med formlen —C(=0)—R funktionelt på egnet måde, f.eks. foresterer ved behandling med en diazoforbindelse, såsom diphenyldiazomethan, og omdanner hydroxymethylgruppen til en halogenmethyl-, f.eks. chlormethyl- eller iodmethylgruppe, f.eks. ved

DK 155741 B

45 behandling med et halogeneringsmiddel, såsom chloreringsmiddel, f.eks. thionylchlorid, eller ioderingsmiddel, såsom N-methyl-Ν,Ν'-dicyclo-hexyl-carbodiimidiumiodid. En chlormethylgruppe overføres til en methylengruppe i udgangsmaterialet med formlen II enten direkte, f.eks. ved behandling med en egnet chrom-II-forbindelse, såsom et uorganisk eller organisk salt deraf, f.eks. chrom-II-chlorid eller chrom-II-acetat, i et egnet opløsningsmiddel, såsom dimethylsulfoxid, eller også indirekte over en iodmethylgruppe (som man f.eks. kan danne ved behandling af chlormethylforbindelsen med et metaliodid, såsom natriumiodid, i et egnet opløsningsmiddel, såsom acetone), ved behandling af en opnået iodmethylforbindelse med et egnet reduktionsmiddel, såsom zink i nærværelse af eddikesyre.

I en forbindelse med formlen II, som man også kan få ud fra forbindelser med formlen IV ved elektrokemisk reduktion eller .ved reduktion med chrom-Il-salte eller aluminiumamalgam, kan en beskyttet amino-gruppe i 7-stilling frigøres eller overføres til en anden beskyttet aminogruppe, og/eller en fri aminogruppe i 7-stilling kan overføres til en beskyttet aminogruppe; disse reaktioner gennemføres på i og for sig kendt måde, f.eks. som ovenfor beskrevet.

Udgangsstofferne med formlen III kan f.eks. fås ved, at man i en ovennævnt forbindelse med formlen ^NH s \ / \ CH-CH \ i I i 0=C-N J~CHo0H (V) \y 4 0=C-R2 o hvori R fortrinsvis er hydroxy, og som i 2,3- eller 3,4-stilling indeholder en dobbeltbinding, oxiderer hydroxymethylgruppen til en formylgruppe og på et egnet trin isomeriserer en 3-cephem- til den ønskede 2-cephemforbindelse og om ønsket eller nødvendigt i en opnået 2 forbindelse erstatter en hydroxygruppe R med en egnet foretheret hydroxy- eller med en amino- eller hydrazinogruppe. Oxidationen kan f.eks. gennemføres efter den i USA-patent nr. 3*351.596 beskrevne metode, d.v.s. ved behandling med oxiderende metalforbindelser, så-

DK 155741 B

46 som -oxider,f.eks. chromtrioxid eller mangandioxid, 2-cephemforbin-delser med fordel med 2,3-dichlor-5,6-dicyan-l,4-benzoquinon og 3-cephemforbindelser med fordel med aliphatiske sulfoxider, såsom di-lavalkylsulfoxider, f.eks. dimethylsulfoxid, eller lavalkylensulf-oxider, f.eks. tetramethylensulfoxid, i nærværelse af aliphatiske carboxylsyreanhydrider, f.eks. eddikesyreånhydrid, fortrinsvis under anvendelse af et overskud af sulfoxid og en, sammenlignet med sulf-oxidet, ækvimolær mængde anhydrid, og ved temperaturer på ca. -50°C til ca. +70°C, om ønsket i nærværelse af et ekstra,inaktivt opløsningsmiddel, såsom benzen eller toluen. Isomeriseringen af en 3-cephem- til den tilsvarende 2-cephemforbindelse kan f.eks. gennemføres ved behandling af en, eventuelt in situ dannet,ester eller anhydrid med en base, såsom en tertiær amin, f.eks. triethylamin, og/ eller en heterocyclisk base, f.eks. pyridin.

2-Cephemudgangsstofferne med formlen III kan også*fås totalsyntetisk, f.eks. efter de i de østrigske patenter nr. 263*765 og 264*537 beskrevne metoder.

Som ovenfor nævnt kan forbindelserne med formlen I anvendes som mellemprodukter til fremstilling af forbindelser med cephamstruktur, hvilke forbindelser enten har værdifulde farmakologiske egenskaber eller igen på deres side kan anvendes som mellemprodukter.

Således kan man f.eks. omdanne forbindelserne med formlen I til deres enolderivater, f.eks. til en enolether ved behandling med en eventuelt substitueret diazocarbonhydridforbindelse af aliphatisk karakter, såsom en diazolavalkan, f.eks.diazomethan, eller en phenyl-diazolavalkan, såsom phenyldiazomethan, eller til en enolester ved behandling med en syre eller fortrinsvis et egnet syrederivat, såsom halogenid, f.eks. chlorid, elleranhydrid, og om ønsket i således opnåede enolderivater omdanne en beskyttet carboxylgruppe med formlen 2 A.

—C(=0)—R på i og for sig kendt måde til en fri carboxylgruppe og således nå til cephemforbindelser med formlen

DK 155741 B

47 pl& R \

NH

\ \ j-{ \ (vi) ._w l-o-ra

°^YS

0=C-R^ som i 2,3- eller 3j4-stilling indeholder en dobbeltbinding, og hvori <LcL 2 R har den ovenfor angivne betydning, R er hydroxy eller en

2A

gruppe R , der sammen med carbonylgrupperingen danner en beskyttet carboxylgruppe, og R^ er en eventuelt substitueret carbonhydridgruppe af aliphatisk karakter eller en'acylgruppe. Forbindelser med formlen VI,især sådanne, hvori Rla er en acylgruppe, der er indeholdt i farmakologisk aktive N-acylderivater af 6p-amino-penam-3-carboxylsyre- og 7β—amino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelser, og R er hydroxy eller en foretheret hydroxygruppe, der sammen med carbonylgrupperingen danner en under fysiologiske betingelser spaltelig car- a boxylgruppe, og R* har den ovenfor angivne betydning, hvorved i en acylgruppe R^a eventuelt tilstedeværende funktionelle grupper, såsom amino, carboxy, hydroxy og/eller sulfo, sædvanligvis foreligger i fri form, eller salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper, er ved parenteral og/eller oral indgift virksomme mod mikroorganismer, såsom gram-positive bakterier, f.eks. Staphylococcus aureus, Streptococcus pyrogenes og Diplococcus pneumoniae (f.eks. hos mus i doser på ca. 0,001 til ca. 0,02 g/kg s.c. eller p.o.),og gram-negative bakterier, f.eks. Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Klebsiella pneumoniae, Enterobacter cloacae, Proteus vulgaris, Proteus rettgeri og Proteus mirabilis (f.eks. hos mus i doser på ca. 0,001 til ca. 0,15 g/kg s.c. eller p.o.), især også mod penicillin-resistente bakterier, ved ringe toksicitet. Disse hidtil ukendte forbindelser kan derfor finde anvendelse til behandling af tilsvarende infektioner, f.eks. i form af antibiotisk virksomme præparater.

Endvidere kan man i cephamforbindelserne med formlen I reducere oxo- 48 DK 155741 B.· gruppen i 3-stilling til en hydroxygruppe, f.eks. ved behandling med et egnet komplekst metalhydrid, såsom natriumborhydrid, i nærværelse af et egnet opløsningsmiddel, såsom en alkohol eller ether, og om ønsket omdanne hydroxygruppen til en foresteret, især en med organiske carboxylsyrer foresteret, hydroxygruppe og/eller overføre en be-

2A

skyttet carboxylgruppe med formlen -C(=0)-R til en fri carboxylgrup-pe. I den således opnåede cephamforbindelse med formlen pla y_Λ ~A J-o-hB (vil) M, 0=C-R^

B

hvori R er hydrogen eller en acylgruppe, kan elementerne til en forbindelse med formlen RB-0H (VIII) d.v.s. vand eller en syre, fraspaltes under sure .eller basiske betingelser, og man får således de kendte 3-cephemforbindelser med formlen pla

R

XNH g w\ I (IX) ‘'T, 0=C-R* la 2 hvori R og R har de ovenfor angivne betydninger, og i hvilke disse grupper kan overføres til hinanden på i og for sig kendt måde. Forbindelserne med formlen IX eller salte deraf har enten værdifulde farmakologiske, især antimikrobieIle,egenskaber, især sådanne, la hvori R er en acylgruppe, der er indeholdt i farmakologisk aktive N-acylderivater af 6p-amino-penam-3-carboxylsyre- og 73-amino-3-

DK 155741 B

49 cephem-4-earboxylsyreforbindelser, og R2 er hydroxy eller en foretherdt hydroxygruppe, der sammen med carbonylgrupperingen danner en under fysiologiske betingelser spaltelig carboxylgruppe, eller salte deraf, eller kan anvendes som mellemprodukter til fremstilling af de nævnte forbindelser med farmakologiske egenskaber.

Ved de ovennævnte omdannelser af forbindelser med formlen I til forbindelser med formlen IV eller til forbindelser med formlerne V og VII behøver forbindelserne med formlen I ikke at blive isoleret; man kan overføre dem i form af rå reaktionsblandinger efter fremstilling ud fra forbindelserne med formlen II direkte til forbindelser med formlen VI eller VII eller IX.

I sammenhæng med den foreliggende beskrivelse indeholder med "lav" betegnede organiske grupper højst 7, fortrinsvis højst 4, carbon-atomer. Acylgrupper indeholder højst 20, fortrinsvis højst. 12, car-bonatomer.

73-Acylamino-3-cephem-4-carboxylsyreforbindelsernes antibiotisk virkning på forskellige organismer illustreres ved hjælp af en in vitro-test på agarplader. I den følgende tabel I er diameteren angivet i mm af det med en 0,5%'s opløsning af forsøgsforbindelsen opnåede hæmningsområde på den inficerede agarplade. Der angives resultater fra 2 forsøg.

Tabel I

0

Ra-(0)m-CH-C-NH^ s R 0=1-j(^)-0-R3

0=C-0H

50

DK 15574 IB

Staph. Staph. Esch.coli aureus resist.

Ra-(0)m- R13 R3 12 12 12 X>- -H -CH3 25 26 17 15 12 11 <ζ -H -C4Hg-n 29 30 17 17 10 10 <X N.- -HH2 -CH3 28 28 21 20 20 19 -HH2 -C2H5 25 25 17 17 16 16 <^~X.- -EH2 -C^Hg-n 26 27 21 21 16 16 _hh2 26 25 18 18 17 17 x>- -Mi2 -CH3 26 27 22 21 20 18 Η0-</ X>- -KH2 -0H3 26 26 20 20 19 18 I I -mo -CH, 26 26 19 18 20 19 V* 3 </ ^-0- -H -CH3 26 26 22 22 - <X X> - -OH -CHg 28 28 17 17 24 24

K1 DK 1557 41 B

bl

Endvidere sammenlignes den antibiotiske virkning af en 73-amino- 3-cephem-4-carboxylsyreforbindelse med formlen

/ V -CH-COHH S

I \_/ \ HHo I (A) /-V"0CE3

0 T

COOH

med virkningen af den kendte forbindelse cephalexin

J’ V -CH-COHH S

I \_κ\ • nh2 I (B) /-V-0H3

0 T

COOH

Ler udføres in vivo-test på mus ved peroral indgivelse af forsøgsforbindelsen ad en eller to gange samtidig med infektionen. Den anden indgivelse sker 3 timer efter den første.

'Til bestemmelse af ED,-q-vær di en anvendes der til hvert forsøg et forskelligt antal forsøgsdyr, nemlig mellem 35 og 139 for forbindelse A (i gennemsnit væsentligt over 50) og mellem 60 og 230 for forbindelse 3 (i gennemsnit ca. 100). Resultaterne fremgår af nedenstående tabel II.

Tabel II

_SDrq (mg/kg)_

Sygdomsfremkalder Indgivelse Forbindelse Å Forbindelse B

Staph.aureus 10 B (K 1098) 1 x p.o. 6 8

Staph.aureus Smith (K 322) 1 χ p.o. 0,6 0,8

Str.pyogenes Aronson (Z 1129) 2 x p.o. 2,5 8

Pipi.pneumoniae 3/84 (Z 1126) 2 x p.o. 16 55 E.coli 205 (E 1075) 2 x p.o. 30 78

52 DK 155741 B

Tabel II (fortsat)_ E.coli 205 R+ TEM (E 1256) 2 x p.o. 48 34 E.coli 2018 R+ TEM (E llS?) 2 x p.o. 38 50 E.coli 5 (K 1258) 2 x p.o. 13 28

Salmonella typh. 273 (IC 1127) 2 x p.o. 60 170

Salmonella typli. 277 (K 1079) 2 x p.o. 65 150

Shigella flexa. II836 (K 1135) 2 x p.o. 25 95

Klebsiella pneum. 327 (K 1081) 2 x p.o. 120 250

Klebsiella pneum. 329 (K II32) 2 x p.o. 40 90

Proteus morganii 2359 (K IO78) 2 x p.o. > 300 1000

Proteus vulgaris (K 1076) 2 x p.o. 25 50

Proteus rettgeri (K 856) 2 χ p.o. 14 50

Proteus mirabilis 774 (K 1108) 2 x p.o. 54 130

Proteus mirabilis (K 564) 2 x p.o. 27 60

Disse data viser, at forbindelse A ved den for denne forbindelsestype betydningsfulde orale indgivelse er det i handelen bragte præparat B ("Cephalexin") væsentligt overlegen over for et antal sygdomsfremkaldere, bl.a. under hensyn til de for denne indgivelsesmåde konstaterede toksicitetsværdier:

Akut LD^q p.o. (mg/kg)

Forbindelse A > 6000

Forbindelse B 3000

De følgende eksempler tjener til illustration af opfindelsen.

DK 155741 B

53

Eksempel 1.

En opløsning af 0,50 g 3-methylen-7β-phenylacetylamino-cepham-'4α-carboxylsyre-diphenylmethylester i 100 ml methanol behandles ved -70°C i 6,5 minutter med en oxygen-ozon-strøm, indeholdende 0,175 mmol/ min. ozon. Til reaktionsblandingen sættes 0,5 ml dimethylsulfid,og der omrøres i 1 time ved -70°C, så· i 2 timer ved stuetemperatur og inddampes til tørhed. Remanensen i methylenehlorid kromatograferes på 15 g silicagel. Man eluerer med methylenehlorid den amorfe 7β-phenylacetylamino-cepham-3-on-4?-carboxylsyrediphenylmethylester; tyndtlagskromatografi (silicagel): Rf ^ 0,47 (system: toluen/acetone/ methanol/eddikesyre 80:10:5:5); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,95u, 5,6ΐμ, 5,77u, 5,&5u, 5,95μ, 6,21μ og 6,87μ; forbindelsen giver en positiv jern-III-chlorid-reaktion, hvoraf tilstedeværelsen af enolformen kan sluttes.

Med methylenchlorid indeholdende 10% acetone kan der elueres en mere polær forbindelse, der højst sandsynligt er identisk med 7p-phenyl-acetylamino-cepham-3-on-4?-carboxylsyrediphenylmethylester-l-oxid; tyndtlagskromatogram (silicagel): Rf = 0,22 (system: toluen/acetone/ methanol/eddikesyre 80:10:5:5); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,96μ, 5,5É>u, 5,76μ (skulder), 5?S3Uj 5,97μ, 6,22μ og 6,6ΐμ; forbindelsen giver en positiv jern-III-chlorid-reaktion, hvoraf tilstedeværelsen af enolformen kan sluttes.

Udgangsmaterialet kan fremstilles som følger:

En opløsning af 11,82 g af det rå natriumsalt af 3”-hydroxymethyl-7β-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre (fremstillet ved ensymatisk desacetylering af natriumsaltet af 3-acetyloxymethyl-^-phenylacetyl-amino-3-cephem-4--carboxylsyre ved hjælp af en renset enzymekstrakt · af Bacillus subtilis,stamme ATCC 6633; og påfølgende lyofilisering af reaktionsopløsningen) i 200 ml vand overhældes med 400 ml ethylacetat og syrnes med koncentreret vandig phosphorsyre til en pH-værdi på 2. Den vandige fase skilles fra og efterekstraheres to gange, hver gang med 150 ml ethylacetat. De forenede organiske ekstrakter vaskes fire gange, hver gang med 50 ml,vand og tørres over magnesiumsulfat

DK 155741B

54 og inddampes til ca. 400 ml. Til opløsningen sætter man overskud af diphenyldiazomethan, lader henstå i 3 timer ved stuetemperatur og filtrerer så det kornede krystallinske bundfald fra. Filtratet inddampes til ca. 200 mlj i varmen tilsættes cyelohexan,og efter afkøling til stuetemperatur henstilles i nogen tid ved ca. 4°C. Bundfaldet filtreres fra og omkrystalliseres af en blanding af acetone og cyclohexan; den således opnåede 3-hydroxymethyl-7p-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyrediphenylmethylester smelter ved 176-176,5°C (ukorr.)5 = -6° - 1° (c = 1,231$ i chloroform); tyndt lagskromat ogram (silicagel, påvisning med ioddamp eller ultraviolet lys, 254 i Rf = 0,42 (system: chloroform/acetone 4:1), Rf = 0,43 (system: toluen/ acetone 2:1) og Rf = 0,41 (system: methylenchlorid/acetone 6:1).

Man opløser 1,03 g 3-hydroxymethyl-7β-phenylacetylamino-3-cephem-4~ carboxylsyre-diphenylmethylester og 1,05 g N-methyl-N,NT-dicyclo-hexylcarbodiimidiumiodid under en nitrogenatmosfære i 25 ml absolut tetrahydrofuran og opvarmer i en time ved 35°C. Herpå tilsætter man på ny 1,05 g N-methyl-N,NT-dicyclohexylcarbodiimidiumiodid i 15 ml absolut tetrahydrofuran og lader henstå i 17 timer ved stuetemperatur under nitrogenatmosfære. Reaktionsblandingen befries for opløsningsmiddel i rotationsfordamper ved formindsket tryk. Remanensen optages i methylenchlorid og filtreres gennem en søjle af 50 g silicagel (tilsætning af 10$ destilleret vand); man vasker efter med 4 portioner, hver på 100 ml methylenchlorid. Eluatet inddampes til et lille volumen og kromatograferes på en silieagelsøjle (9° g;desaktiveret ved tilsætning af 10$ destilleret vand). Med i alt 900 ml af en 3 ^-blanding af toluen og methylenchlorid elueres upolære forureninger. Elu-ering med 2 portioner, hver på 200 ml,methylenchlorid giver 3-iod-methyl-7p-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmet hylester ; de tyndtlagskromatografisk ensartede fraktioner lyofiliseres af benzen; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 3,00μ, 5,62μ., 5,£2μ, 5,95u, 6,70μ, 7,32μ. og £,164.

Det ovenfor anvendte ioderingsreagens kan fremstilles som følger: I en 250 ml rundkolbe med magnetomrører, tilbagesvaler og påsat nitrogenballon opløses 42 g frisk destilleret N,N’-dicyclohexylcarbo-

DK 155741 B

55 diimid i 90 ml methyliodid under en nitrogenatmosfære ved stuetemperatur, og den farveløse reaktionsblanding omrøres i 72 timer ved en badtemperatur på 70°C. Efter udløbet af reaktionstiden afdestilleres det overskydende methyliodid fra den nu rødbrune opløsning under formindsket tryk, og den sejtflydende, rødbrune remanens opløses i 150 ml absolut toluen ved 40°C. Den i løbet af få timer spontant udkrystalliserende krystalmasse skilles ved hjælp af en glasfilternutsche med påsat nitrogenballon under udelukkelse af luft fra moderluden*,, reaktionsbeholderen skylles tre gange, hver gang med 25 ml absolut iskoldt toluen,og det samme toluen benyttes til at vaske den let gullige krystalmasse på glasfilternutschen farveløs. Efter 20 timers tørring ved 0,1 mm Hg og stuetemperatur fås N-methyl-N,NT-dicyclo-hexylcarbodiimidiumiodid i form af farveløse krystaller, smp. 111-113°C; infrarødt absorptionsspektrum (i chloroform): karakteristiske bånd ved 4,72u og 6,00μ.

En opløsning af 0,400 g 3-iodmethyi-7p-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester i 15 ml 90$Ts vandig eddikesyre afkøles i isbad til 0°C,og under god omrøring tilsættes portionsvis 2,0 g zinkstøv. Efter en 30 minutters reaktionstid ved 0°C frafiltre-res det ureagerede zinkstøv ved' hjælp af en filternutsche rned diatomé-jordbelægning; filterremanensen suspenderes flere gange i frisk me-thylenchlorid og filtreres på ny. De forenede filtrater koncentreres under formindsket tryk*, der tilsættes absolut toluen og inddampes under formindsket tryk til tørhed. Remanensen optages under omrøring i 50 ml methylenehlorid og 30 ml af en 0,5 molær vandig dikaliumhydro-genphosphatopløsning; den vandige fase skilles fra, efterekstraheres med to portioner, hver på 30 ml,methylenchlorid og bortkastes. De organiske ekstrakter vaskes flere gange med en mættet vandig natrium-chloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på en søjle af 22 g sili-cagel (tilsætning af 10$ vand). Man eluerer 3-methylen-7p~phenyl-ac etylamino- c epham-4a-c arboxylsyre-diphenylmethyle ster med methylen-chlorid og methylenehlorid indeholdende 2$ methylacetat og krystalliserer fra en blanding af methylenchlorid og hexan, smp. 144-147°C; [a]^ = -1&° -1° (c = 0,715 i chloroform); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$’s vandigt ethanol): \ = 254'mμ(ε =* 1540) og 260 mp (£ = 1550); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karak-

DK 155741 B

56

Eksempel 2.

En opløsning af 1,53 g' 3-formyl^-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 40 ml methylenchlorid afkøles til 0°C, og der tilsættes 0,6l g 3-chlorperbenzoesyre. Man lader stå i en time under opvarmning til stuetemperatur og vasker så efter hinanden med 5 fo's vandig natriumhydrogensulf it opløsning, 0,5 molær vandig dikaliumhydrogenphosphatopløsning og vand; de vandige vaskeopløsninger ekstraheres to gange med methylenchlorid og bortkastes så. Den organiske fase tørres over magnesiumsulfat og inddampes, under formindsket tryk.

Den gule geléagtige remanens, der indeholder 3-formyloxy-7p~phenyl-acetylamino-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, hvori ringdobbeltbindingen fortrinsvis befinder sig i 3-stilling, omrøres i en time ved 0°C med 30 ml tetrahydrofuran og 30 ml af en 0,5 molær natriumhydrogencarbonatopløsning og koncentreres under formindsket tryk til et volumen på ca. 25 ml. Man fortynder med 25 ml vand og ekstraherer så to gange med ethylacetat. Den organiske fase vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 65 g silicagel. 7β-Phenylacetyl-amino-cepham-3-on-4§-carboxylsyre-diphenylmethylester elueres med methylenchlorid indeholdende 2-3$ acetone og lyofiliseres af dioxan; det tyndtlagskromatografisk ikke helt rene produkt er identisk med det ifølge eksempel 1 opnåede og anvendes som udgangsmateriale uden yderligere rensning.

Udgangsmateriale kan fremstilles som følger:

Til en. opslæmning af 3,40 g 3-acetyloxymethyl-7p-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre i 70 ml destilleret vand sættes under omrøring med en vibroblander 1 N vandig natriumhydroxidopløsning indtil en pH-værdi på 7,3. Opløsningen opvarmes i termostatbad til 35°C,og der tilsættes 0,4 g cellelyofilisat af Bacillus subtilis ATCC 6633 i 3 ml vand. pH-Værdien holdes ved tilsætning af 1 N vandig natriumhydroxidopløsning konstant på 7,4; efter ca. 2 l/2 time er halvdelen af det teoretiske natriumhydroxidforbrug nået. Man lader reagere fær-

DK 155741B

57 dig, til der ikke mere forbruges natriumhydroxid, og til reaktionsopløsningens pH-værdi ikke ændres mere, selv ikke efter flere timers henstand ved stuetemperatur. Man overhælder med 300 ml afkølet ethyl-acetat og syrner under god omrøring med 5 molær vandig phosphorsyre I til.pH-værdi 2,0. Den vandige fase mættes efter adskillelse af lagene med natriumchloridjOg der ekstraheres med to yderligere portioner, hver på 250 ml koldt ethylacetat. De forenede organiske faser vaskes fem gange, hver gang med 50 ml af en mættet' vandig natriumchlorid- | opløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes. Remanensen består af kromatografisk ensartet 3-hydroxymethyl-75-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre, der efter flere ganges krystallisation af en blanding af ethylacetat og cyclohexan fås i form af hvide nåleformede krystaller med smp. 156-156,5°C.

Til en opløsning af 0,7 g 3"hydroxymethyl-7p-phenylacetylamino-2- i cephem-4a-carboxylsyre i 30 ml af en 4:1-blanding af dioxan og me- j i

thanol sættes 0,507 g diphenyldiazomethan i 5,07 ml dioxan,og der I

henstilles ved stuetemperatur; man tilsætter i 90 minutter, portions- . vis yderligere mængder diphenyldiazomethan, indtil den lette farv- i ning er bestandig. Man inddamper så til tørhed og krystalliserer re- ; manensen af en blanding af ethylacetat og cyclohexan; den således ; opnåede 3-hydroxymethyl-7p-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxyl-syre-diphenylmethylester smelter i form af fine farveløse nåle ved 179-179}5°C; [a]^ = +390° ΐ 1° (c = 1,174 i chloroform);tyndtlags-kromatogram(silicagel): Rf = 0,35 (system: benzen/acetone 4:1); ultraviolet absorptionsspektrum [95%'s vandigt ethanol) : . = 250 mu (£ = 6500) og λ m^n = 245 mμ (ε = 6400) ; infrarødt absorptionsspektrum: karakteristiske bånd ved 2,74μ, Μ9μ, 5,58μ, 5,71μ, 5,90μ, 6,6lu og 6,65μ ( i methylenchlorid) og ved 3,00μ, 3,07μ, 5,62μ, 5,71μ, 6,04μ, 6,52μ, 6,68μ, 7,lQi, 7,42μ,8,20μ og 8,52μ(ι mineralolie).

Til en blanding af 5,14 g 3-hydroxymethyl-73-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 150 ml acetone sættes ved -15°C dråbevis en chromsyreopløsning (fremstilles ved opløsning af 267 g ehrom-VI-oxid i 230 ml koncentreret svovlsyre og 400 ml vand og fortynding med vand til 1000 ml),indtil den orange-brunlige farvning bliver bevaret; efter 20 minutter er 4,5 ml af reagenset forbrugt. Man omrøres i 20 minutter ved -10°C, tilsætter så 0,5 ml iso-

' DK 155741 B

58 propanol og inddamper under formindsket tryk. Til koncentratet sættes 50 ml vand,og der ekstraheres med ethylacetat. Den organiske ekstrakt vaskes med vand, tørres over magnesiumsulfat og inddampes. Remanensen omkrystalliseres af en blanding af ethylacetat og cyelohexan og giver 3-formyl-73-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre-diphenyl-methylester, smp. 175>5-176°C (med sønderdeling); tyndtlagskromato-gram (silicagel): Rf = 0,35 (system: toluen/acetone 4:1) og Rf = 0,5δ (system: toluen/acetone 65:35); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$fs ethanol): λ = 289 mp (8 = 20200); infrarødt absorptions-spektrum (i mineralolie): karakteristiske bånd ved 3}00p , 5,63u, 5,76μ, 5;95μ, 5,99μ og 6,07μ.

Eksempel 3.

Gennem en til -60°C afkølet opløsning af 0,553 g af 4-methylphenyl-sulfonatet af 73-amino-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyrediphenyl-methylester i 50 ml methanol ledes i 4 minutter en strøm af oxygen og ozon (indeholdende 0,35 mmol ozon pr. minut). Efter yderligere 5 minutter sætter man til den svagt blåfarvede opløsning 0,3 ml dime-thylsulfid. Blandingen omrøres i 15 minutter ved -70°C, i en time ved -12°C og i en time i isbad og inddampes så. Remanensen optages i en lille mængde methylenchlorid; der tilsættes diethylether indtil uklarhed og henstilles. Det mikrokrystallinske, rødligt farvede pulver-formige bundfald filtreres fra og giver 4-methylphenylsulfonatet af 78-amino-cepham-3-on-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester, der hovedsagelig foreligger i enolform som 4-methylphenylsulfonat af 7β-amino-3-cephem-3-ol-4-earboxylsyrediphenylmethylester, smp. 143-145°C (under sønderdeling); tyndtlagskromatogram (silicagel): Rf ~ 0,28 (system: ethylacetat/pyridin/vand 85:10:5); ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol) : λ = 262 ιημ (£. = 3050) og 282 πιμ (8 = 3020); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 5,58μ, 5,77μ (skulder), 6,02μ og 6,22u.

Udgangsmaterialet kan fremstilles som følger:

Til en til -15°C afkølet opløsning af 2,0 g 3-methylen-7p-phenyl-acetylamino-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 80 ml absolut methylenchlorid sættes 3>2 ml absolut pyridin og 32 ml af en 8f>'s opløsning af phosphorpentachlorid i methylenchlorid, og der omrøres

DK 155741 B

59 i en time under en nitrogenatmosfære ved en temperatur på mellem -10°C og -5°C. Reaktionsblandingen afkøles så til -25°C; der tilsættes 25 ml absolut methanol og omrøres i en time ved -10°C og så i 1 l/2 time ved stuetemperatur. Man tilsætter så 80 ml af en 0,5 molær vandig opløsning af kaliumdihydrogenphosphat, indst iller pH-værdien med 20%' s vandig phosphorsyre på 2 og omrører blandingen i 30 minutter ved stuetemperatur.

Den organiske fase skilles fra; den vandige fase efterekstraheres to gange, hver gang med 150 ml met hylene hlor id, og de organiske opløsninger forenes, tørres over natriumsulfat og inddampes. Den olieagti-ge remanens optages i 25 ml ethylacetat, og ved 0°C tilsættes en opløsning af 1,14 g 4-methylphenylsulfonsyre-monohydrat i 25 ml methylen-chlorid. Der udfældes et voluminøst bundfald, der filtreres fra, vaskes efter med koldt ethylacetat og diethylether, tørres og omkrystalliseres af en blanding af methylenchlorid og diethylether. Man får således i form af farveløse nåle 4-methylphenylsulfonatet af 7f3-amino-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester, smp. 153-155°C; [α]ρ = -14° -1° (c = 0,97 i methanol); ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol) : λ = 257 mu (ξ. = 1500) ; infrarødt max absorptionsspektrum (i methylenchlorid) : karakteristiske bånd ved 3,50μ, 5,60μ, 5,73μ, 3,50μ, 9,6δμ og 9,92μ.

Eksempel 4.

I en til -70°C afkølet opløsning af 530 g 3-methylen-7p-(D-a-tert. butyloxycarbonylamino-a-phenylacetylamino)-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 500 ml methylenchlorid ledes under kraftig omrøring i en time en oxygen-ozon-strøm, indeholdende 0,21 mmol ozon/ min. Efter yderligere 10 minutter sætter man 3 ml dimethylsulfid til reaktionsblandingen, omrører i en time ved -65°C og i 2 timer ved stuetemperatur, og inddamper så under formindsket tryk. Til råproduktet, der indeholder 7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenylacetyl-amino)-cepham-3-on-4§-carboxylsyre-diphenylmethylester i 150 ml methanol, sættes ved 0°C et overskud· af en opløsning af diazomethan i diethylether, og der omrøres i 15 minutter og inddampes derpå. Man får et gulligt skum, der kromatograferes på 200 g silicagel. Med en 3:l-blanding af toluen og ethylacetat eluerer man den amorfe 3-methoxy-7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenylacetyl-amino)-3-cephem-4-

DK 155741 B

60 tu.

Rf = 0,22 (system: toluen/ethylacetat 3:1); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenehlorid): karakteristiske bånd ved 2,94u, 5,6θμ, 5,#5u, 6,23u og 6,70μ.

Udgangsmaterialet kan fremstilles som følger:

En kromatografisøjle (diameter 3 cm) fyldes med 350 g zinkgrus, amal-. garneres i 10 minutter med en 0,1 molær opløsning af kviksølv-II-chlorid i 0,1 N saltsyre og vaskes med meget vand og endelig med en lille mængde 1 N saltsyre. En opløsning af 55 g grønt chrom-III-chlorid-hexahydrat i 55 ml vand og 11 ml 2 N svovlsyre hældes i reduktionsrøret, og udløbshastigheden reguleres således, at en chrom-II-chloridopløsning med ren blå farve drypper ned i den under en nitrogenatmosfære holdte reaktionsbeholder. Til den blå chrom-II-chlorid-opløsning sættes derpå en opløsning af 92 g natriumacetat i 180 ml luftfrit vand, hvorved opløsningen farves rød, og der udfældes finkrystallinsk chrom-Il-acetat. Efter endt fældning fjernes den foroven stående opløsning,og chrom-II-acetatet vaskes to gange, hver gang med 250 ml luftfrit vand. Til det fugtige chrom-II-acetat sættes en opløsning af 10,0 g 3-acetyloxymethyl-7β-(D-a-tert.butyloxycarbonyl-amino-a-phenylacetyl-amino)-3-cephem-4-carboxylsyre i 200 ml dime-thylsulfoxid, og reaktionsblandingen omrøres i 15 timer under en ni-trogenatmosfære ved stuetemperatur. Til oparbejdning beluftes reaktionsblandingen i 30 minutter, og efter tilsætning af 1000 g af en polystyrensulfonsyre-ionbytter i Na®-form (Dowex 50 W) og 1000 ml vand omrøres i en time. Efter fjernelse af ionbytteren indstilles opløsningens pH-værdi på 2 med 6 N saltsyre, og den vandige fase ek-straheres tre gange, hver gang med 2000 ml ethylacetat. De organiske ekstrakter vaskes en gang med 1000 ml af en mættet vandig natrium-chloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes.

Det opnåede råprodukt opløses i 100 ml methanol og omrøres med en opløsning af 6 g diphenyldiazomethan i 30 ml benzen i en time ved stuetemperatur. Det efter inddampning opnåede råprodukt kromatograferes på 500 g silieagel; 3-niethylen-73-(D-a-tert.butyloxyearbonylamino-a-phenylacetyl-amino)-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester elue-res med en 4:l-blanding af petroleumsether; efter krystallisation af en blanding af methylendichlorid og hexan smelter produktet ved 156-158°C,· [alj-j = -50°-l° (c = 0,713 i chloroform); ultraviolet absorp-

DK 155741 B

61 tionsspektrum i 95%1 s vandigt ethanol: i = 258 ζημ (ε = 990);

jTIcLX

infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,64μ, 5,74μ> 5,88μ (skulder) og 6;71μ·

Eksempel 5.

En opløsning af 1,0 g 3-methylen-7β-phenylacetyl~amino-cepham-4α-carboxylsyre-diphenylmethylester i 250 ml methylenchlorid behandles ved -70°C i S l/2 minut med en oxygen-ozon-blanding (0,265 mmol ozon/ min.), og til reaktionsblandingen sættes 1 ml dimethylsulfid. Man omrører i 30 minutter ved -70°C og i 1 l/2 time ved stuetemperatur og inddamper så under formindsket tryk til tørhed. Remanensen, indeholdende en blanding af 7β-phenylacetylamino-cepham-3-on-4ς-carboxyl-syre-diphenylmethylester og 7β-phenylacetylamino-cepham-3-on-4α-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid, optages i 50 ml methanol, og ved 0°C tilsættes et overskud af diazomethan ( i form af en opløsning i diethylether). Man omrører i en time ved 0°C og inddamper under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 50 g silicagel. Man eluerer med en 4:l-blanding af toluen og et hylacetat 3-πΐ6ΐϊκ^-7β-phenylacetylamino-2-cephem-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester med Rf = 0,57 (system: toluen/ethylacetat 1:1); smp. 174-177°C efter krystallisation af en blanding af methylenchlorid og pentan; ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol) : λ = 258 mu (£. = 4310); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,96μ , 5,6θμ, 5,71μ, .5,92μ, 6,15μ og 6,66μ; efter-• fulgt af 3-methoxy-7β“phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-di-phenylmethylester med Rf ~ 0,37 (system: toluen/ethylacetat 1:1); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol): λ = 258 rn (ε = 6340), λ max = 264 mu (ε = 6350) og λ skulder = 261 mp (ε = 5600); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94u, 3»02μ, 5,62u, 5,67u (skulder), 5,8ΐμ, 5,92μ, 6,23μ og 6,67μ; °g med ethylacetat 3-methoxy-7β-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid med Rf = 0,31 (system: ethylacetat), smp. 152-155°C efter krystallisation af en blanding af acetone og diethylether; ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol): λ max = 288 mu (ε = 3610) og λ skulder = 247 mp; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,59μ, 5,8ΐμ, 5,95μ> 6,22μ og 6,6ΐμ.

DK 155741 B

62

Eksempel 6.

Man behandler en opløsning af 0,50 g 3-methylen-7p-phenylacetylamino-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 50 ml methanol ved -70°C med en oxygen-ozon-blanding indtil begyndende blåfarvning. Det overskydende ozon fordrives med nitrogen; man tilsætter 0,5 ml dimethyl-sulfid og omrører i 1 l/2 time ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen, der indeholder en blanding af 7β-phenylacetylamino-cepham-3-on-4 ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester og 7β-phenylacetylamiπo-cepham- 3-on-4?-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid inddampes så under formindsket tryk til tørhed·, remanensen optages i 10 ml pyridin,og der tilsættes 5 ml eddikesyreanhydrid og henstilles i 16 timer ved 0°C.

Man inddamper under højvakuum til tørhed; remanensen optages i ethyl-acetatjOg den organiske opløsning vaskes med en mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløs-ning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 30 g silicagel, hvorved man eluerer 3-acetyloxy~7β-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylme-thylester med en 4:l-blanding af toluen og ethylaeetat. Produktet krystalliseres af en blanding af acetone og diethylether, smp. 158-l60°C; ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol): λ = 258 m^ (S = 658Ο) og 264 ιημ (£ = 6550) ; infrarødt absorptions- spektrum (i methylenehlorid): karakteristiske bånd ved 2,95μ, 5,59μ, 5,69μ (skulder), 5,78μ, 5,91u, 6,06μ (skulder) og 6,67ii.

Eksempel 7*

En opløsning af 1,0 g 3-methylen-^-phenylacetylamino-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 100 ml methanol behandles ved -70°C med en oxygen-ozon-blanding indtil begyndende blåfarvning, og overskuddet af ozon fordrives med nitrogen. Til reaktionsblandingen sættes 0,4 ml dimethylsulfid,, og der omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur. Derpå afkøler man til 0°C og sætter til reaktionsblandingen, der indeholder 7p-phenylacetylamino-cepham-3-on-4§-carboxylsyre-di-phenylmethylester og 7β-phenylacetylamino-cepham-3-on-4ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid, en opløsning af 0,10 g natriumborhydrid i 5 ml vand. Man lader reagere i 30 minutter ved 0°C, indstiller pH-

DK 155741 B

63 værdien ved tilsætning af eddikesyre på ca. 6 og inddamper reaktionsblandingen under formindsket tryk. Remanensen optages i ethylacetat, den organiske opløsning vaskes med en mættet vandig natriumhydrogen-carbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 50 g silicagel. Med en 2:l-blanding af toluen og ethylacetat elueres 3 g-hydroxy-7p-phenylacetylamino-cepham-4§-carbo-xylsyre-diphenylmethylester,der efter krystallisation af en blanding af acetone og diethylether smelter ved 157-l60°Cj [a]p = +80° -1° (c = 0,492 i dioxan): λ = 258 ιημ (£ = 850}; infrarødt absorptionsspek-trum (i methylenehlorid): karakteristiske bånd ved 2,82μ, 2,94μ, 5,63μ, 5;74μ, 5,92μ, ό,25μ og 6,63μ.

Eksempel 8.

En opløsning af 0,400 g 7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen~cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 40 ml methylenchlorid afkøles til 0°C, og der tilsættes 0,0835 g tetracyanethylen. Den gule opløsning behandles ved 0°C med en oxygen-ozon-blanding, indtil 0,773 mmol er forbrugt, og inddampes så under højvakuum ved ca. 35°C til tørhed. Remanensen, der indeholder 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham-3-on-4ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester, optages i 50 ml methanol*, der tilsættes en opløsning af diazomethan i diethylether indtil blivende gulfarvning og inddampes så under formindsket tryk ved ca. 35°C. Af remanensen oparbejdes 0,1 g ved hjælp af lagkromatogram (silicagel; system: ethylacetat/toluen 1:1), hvorved man med Rf ~ 0,5 får 3-me~ thoxy-7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, der er identisk med produktet ifølge eksempel 4, og med Rf ~ 0,6 7β-(D-a-tert.butyloxycarbo-nylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-di-phenylmethylester.

Eksempel 9.

En opløsning af 0,2 g 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 3 ml methylenchlorid afkøles til -22°C,og under køling tilsættes først r\ r\r\ S ·*»· *» o * * , ·» ni*»· ·._*»

DK 155741B

64 til gennemledning af 1,31 mmol ozon. Reaktionsblandingen inddampes under højvakuum til tørhed, og remanensen renses tyndtlagskromatografisk. 7 β-(D-a-tert.Butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham- 3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester viser en Rf-værdi på ~ 0,5 (silicagel; system: toluen/acetone/methanol/eddikesyre 80;10:4:5); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94u, 3,40u, 5,62μ, 5,77u, 5,75-5,95u (bredt bånd), 6,21u og 6,88μ.

Eksempel 10. ·

Fremstilling af 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetyl-amino)-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester ud fra 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester gennemføres med fordel kontinuerligt;

Man lader en til 0°C forkølet 1%'s opløsning af 7β-(0-α^βηυ.Βη1}Γ1-oxycarbonylamino-a~phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxyl-syre-diphenylmethylester i methylenchlorid flyde igennem et med faste legemer (f.eks. Raschig-ringe) fyldt, til 0°C afkølet reaktorrør (ca. 3 cm i diameter) og leder i modstrøm en ozon-oxygen-blanding igennem, hvilket giver 0,245 mmol ozon i minuttet. Gasstrømmen reguleres, således at der pr. time strømmer 700 ml af gasblandingen gennem reaktorrøret. Opholdstiden for opløsningen af 7β-(D-a-tert.butyl-oxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxyl-syre-diphenylmethylester i reaktorrøret andrager 15 sekunder.Reaktionsopløsningen med ozonidet bringes til at flyde direkte ned i et forlag med en opløsning af dimethylsulfid i methylenchlorid, indtil denne indeholder et overskud på 5% dimethylsulfidj derpå udskiftes forlaget.

Den således opnåede opløsning af 7β-(D-α-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham-3-on-4?-carboxylsyre-diphenylmethylester inddampes under formindsket tryk ved ca. 35°C, og remanensen optages, f.eks. som beskrevet i eksempel 4> i methanol og behandles med en opløsning af diazomethan i diethylether. Man får således 3-methoxy-73-(D-a-tert .butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino) -3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, der er identisk med produktet ifølge eksempel 4»

DK 155741B

65

Eksempel 11.

En blanding af 5 g 3-methylen-73-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester og 500 ml methylenehlorid behandles ved -?0°C med 1,15 ækvivalenter ozon efter den i de ovenstående eksempler beskrevne metodej derpå tilsættes 2 ml dimethylsulfid og omrøres i en time ved -70°C og 2 timer ved stuetemperatur,og derpå inddampes under formindsket tryk. Remanensen, der indeholder 7β-(ϋ-α-ΐβΓΪ.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham-3-on-4 ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester, opløses i 150 ml methanol, og ved 0°C tilsættes en opløsning af diazo-n-butan i diethylether indtil blivende gulfarvning. Efter 15 minutter inddampes opløsningen under formindsket tryk, og remanensen renses ved hjælp af præparativ tyndtlagskromatografi (silieagel; 1,5 mm tykkelse, plader på 16 x 100, cm; system: toluen/ethylacetat 7.5:25).Den under ultraviolet lys synlige zone med en Rf-værdi på ca. 0,35 giver 3-n-butyloxy-7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-· 3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, som man renser igen ved hjælp af en ny kromatografi på silieagel og lyofiliserer af dioxan; [a]p° = + 11° - 1° (c = 0,98 i chloroform); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt, ethanol): λ = 264 πιμ (¾. = 6100); infra-rødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,88μ, 5,63μ, 5,84μ (skulder), 5,88μ, 6,26μ og 6,71μ.

Eksempel 12,

En opløsning af 0,258 g 3-methylen-7β-phenylacetylamino-cepham-4α-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid i 50 ml methanol behandles ved -65°C med en oxygen-ozon-blanding (20 mmol ozon pr. minut) indtil blivende blåfarvning'. Reaktionsblandingen behandles derpå med 0,5 ml dimethylsulfid, omrøres i 20 minutter ved -65°C og i 30 minutter ved stuetemperatur og inddampes under formindsket tryk. Remanensen>, der indeholder 7p-phenylacetylamino-cepham~3-on-4?-carboxylsyre-di-phenylmethylester-l-oxid, optages i 20 ml methanol,og ved 0°G tilsættes en etherisk opløsning af diazomethan i diethylether, indtil gulfarvningen holder sig. Efter .15 minutters henstand inddampes reaktionsblandingen under formindsket tryk. Remanensen renses ved hjælp

DK 155741 B

66 af præparativ lagkromatografi; den under ultraviolet lys (λ = 254 nu) synlige zone med Rf ~ 0,20 (system: ethylacetat; identifikation med iod) elueres med en l:l-blanding af acetone og methanol,og man får således 3-methoxy-75-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-di-phenylmethylester-l-oxid-, ultraviolet ab sorptions spektrum (i 95$T s vandigt ethanol): λ = 276 ηιμ (ε. = 7500); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,56μ, 5,6 1μ, 5,92μ, 6,22μ og 6,67μ.

•te^

Pet i ovenstående eksempel anvendte udgangsmateriale kan fremstilles som følger:

Til en til 0°C afkølet opløsning af 0,50 g 3-methylen-7p-phenylacetyl-amino-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 50 ml methylenchlorid sættes en opløsning af 0,19 g 3-chlorperbenzoesyre i 10 ml methylenchlorid, og blandingen omrøres i 30 minutter under en nitrogenatmosfære i isbad. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml methylenchlorid, vaskes to gange med 50 ml af en mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og med 50 ml af en mættet vandig natrium-chloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 50 g silicagel. 3-Methy-len-73-phenylacetylamino-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester- 1-oxid elueres med methylenchlorid indeholdende 3-5$ acetone og krystalliseres af en blanding af acetone, diethylether og hexan, smp. 172-175°C; = -66° (c = 0,925 i chloroform); tyndtlagskromato- gram (silicagel; identifikation med iod): Rf ~ 0,25 (system: toluen/ ethylacetat 1:1); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$Ts vandigt ethanol): ingen specifik absorption; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,96μ, 5,6θμ, 5,74μ, 5,92μ, 6,24u, 6,63μ og 9,60i.

Eksempel 13.

En til -70°C afkølet opløsning af 6,2 g 7p-(D-a-tert.butyloxycarbonyl-amino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenyl-methylester i 600 ml methylenchlorid behandles i 34 minutter med en oxygen-ozon-strøm (0,49 i mol ozon pr. minut); derpå tilsættes 3,5 ml dimethylsulfid og omrøres i en time ved -70°C og i 2 timer ved stue-

67 DK 155741 B

temperatur. Efter inddampning under formindsket tryk opløses den olie-agtige remanens, der indeholder 7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenylacetylamino)-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester, i 300 ml benzen·, der tilsættes 3>2$ g l-ethyl-3-(4-methylphenyl)-tria~ zen og koges i en time under en nitrogenatmosfære under tilbagesvaling og inddampes så under formindsket tryk. Remanensen kromatografe- \ res på 360 g silicagel; den amorfe 3-ethoxy-7p-(D-a-tert.butyloxy-carbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4~carboxylsyre-diphenyl-methylester elueres med en 4:l-blanding af toluen og ethylacetat; tyndtlagskromatografi (silicagel): Rf „ 0,28 (system: toluen/ethyl-acetat 3:1); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%fs vandigt ethanol): λ max = 258 πιμ (£ = 7OOO) og λ Tf|fly = 264 mu (£ = 6900) ; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenehlorid): karakteristiske bånd ved j 2,96μ, 5?64μ, 5,90μ, 6,28μ og 6,73μ.

Eksempel 14.

En opløsning af 15 g 3-methylen-7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-

α-phenyl-acetylamino)-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i J

1500 ml methylenehlorid behandles ved -65°C i 62 minutter med en ! blanding af oxygen og ozon, indeholdende 0,5 mmol ozon pr. minut, og derpå tilsættes ved -70°C 8,7 ml dimethylsulfid. Man omrører i en time ved -70°C og i 2 timer ved stuetemperatur og inddamper under for- 1 mindsket tryk. Remanensen, der indeholder den rå 7p-(D-a-tert.butyl-oxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham-3-on-4 ξ-carboxylsyre- i diphenylmethylester, opløses i 350 ml benzen, og der tilsættes 11 g l-benzyl-3-(4-methylphenyl)-triazen og koges i 4 timer under tilbage« svaling. Efter afkøling vaskes med 100 ml 2 N vandig saltsyre og med en mættet vandig natriumchloridopløsning; den organiske fase tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 650 g silicagel; med toluen indeholdende 15% ethylacetat elueres den tyndtlagskromatografisk ensartede, amorfe 3-benzyloxy-7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)- 3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester; tyndtlagskromatogram (silicagel; udvikling med iod): Rf ~ 0,34 (system: toluen/ethylacetat 3:1); [a]^ = + 7° -1° ( c = 0,97 i chloroform); ultraviolet absorp tionsspektrum (i 95$fs vandigt ethanol) : λ = 258 ηιμ (£ = 6800) ΠΙο,Χ og 264 πιμ (ε = 68OO) og λ skuider = ^ ^ = ^300) 5 infrarødt ab sorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved

DK 155741 B

68

Eksempel 15.

En opløsning af 1,59 g 7P“(5-benzoylamino-5-diphenylmethoxycarbonyl-valeryl-amino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 150 ml methylenchlorid afkøles til -70°C,og under kraftig omrøring behandles i 12 minutter og 43 sekunder med en blanding af ozon og oxygen, indeholdende 0,2 mmol ozon pr. minut; derpå behandles med 1 ml dimethylsulfid. Man omrører i 5 minutter ved -70°C og i 30 minutter ved stuetemperatur og inddamper under formindsket tryk. Remanensen, indeholdende 7β-(5-benzoylamino-5-diphenylmethoxycarbonyl-vale-ryl-amino)-cepham-3-on-4 ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester, opløses i 40 ml methanol, afkøles i et isbad, og der tilsættes en opløsning af diazomethan i diethylether, indtil gulfarvningen holder sig. Reaktionsblandingen inddampes under formindsket tryk, og remanensen kroma-tograferes på 100 g silicagel. 7p-(5-Benzoylamino-5-diphenylmethoxy-carbonyl-valeryl-amino)-3-methoxy-3~cephem-4-carboxylsyre-diphenyl-methylester elueres med en l:l-blanding af toluen og ethylacetat og .fås som amorft produkt. Tyndtlagskromatogram (silicagel): Rf = 0,45 (system: toluen/ethylacetat 1:1); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$Ts vandigt ethanol):! skulder = 25S πιμ [t - 7450), 264 nu (ε = 7050) og 268 ιημ (£. = 6700) ; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 5,65μ, 5,7<3μ, 6,03μ og 6,64u·

Udgangsmaterialet kan fremstilles som følger:

En opløsning af 50 g af natriumsaltet af cephalosporin C i 1500 ml 10$Ts vandigt dikaliumhydrogenphosphat fortyndes med 1200 ml acetone, og ved 0°C tilsættes 21 g benzoylchlorid. Man omrører i 30 minutter ved 0°C og i 45 minutter ved 20°C, hvorved pH-værdien holdes konstant ved tilsætning af en 50$Ts vandig trikaliumphosphatopløsning. Man inddamper under formindsket tryk til omkring det halve volumen, vasker med ethylacetat, syrner med 20$Ts vandig phosphorsyre til pH-værdi 2,0 og ekstraherer med ethylacetat. Den organiske fase tørres og inddampes under formindsket tryk; remanensen, omkrystalliseret af acetone, giver N-benzoyl-cephalosporin C, smp. 117-119°C; tyndtlagskromatogram (silicagel): Rf = 0,37 (system: n-butanol/eddikesyre/vand 75:7,5:21) og Rf = 0,08 (system: ethylacetat/pyridin/eddikesyre/vand 62:21:6:11).

DK 155741 B

69

En opløsning af 4,7 g N-benzoyl-cephalosporin C i 85 ml 0,5 molær vandig dikaliumhydrogenphosphatopløsning og 9 ml dimethylformamid omrøres sammen med 4,7 g aluminium-amalgam i 45 minutter ved pH-værdi 6,0 og 45°C, hvorved pH-værdien holdes konstant ved tilsætning af 20%'s vandig phosphorsyre. Man tilsætter 100 ml is, overhælder med koldt ethylacetat og indstiller med koncentreret phosphorsyre på pH-værdi 2,0. Blandingen mættes med natriumchlorid, det organiske lag skilles fra, og den vandige fase vaskes efter to gange med ethylacetat. De med mættet vandig natriumchloridopløsning vaskede og over natriumsulfat tørrede, forenede organiske ekstrakter giver ved inddampning under formindsket tryk en remanens, der bringes til krystallisation i ethylacetat. Man fortynder langsomt med 15 ml af en 2:3-hlanding af ethylacetat og hexan, filtrerer.efter 2 timers henstand ved -5°C og får efter krystallisation af en 1:4-blanding af ethylacetat og di-ethylether 7β-(5-benzoylamino-5-carboxy-valeryl-amino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre, smp. 82-89°C (under sønderdeling); tyndtlags-kromatogram (silicagel): Rf = 0,53 (system: n-butanol/eddikesyre/ vand 75:7,5:21) og Rf = 0,08 (system: ethylacetat/pyridin/eddikesyre/ vand 62:21:6:11).

Det ovenfor anvendte aluminiumamalgam kan fremstilles som følger:

En blanding af 3,3 g aluminiumgrus og 100 ml 50$Ts vandig natriumhydroxidopløsning rystes i 30 sekunder, og efter fradekantering af den foroven stående væske vaskes tre gange, hver gang med 300 ml vand. Remanensen behandles i 3 minutter med 130 ml af en 0,3$Ts vandig kviksølv-II-chlorid-opløsning og vaskes tre gange, hver gang med 300 ml vand. Hele behandlingen gentages en gang, og aluminiumamalgamet vaskes til sidst tre gange med tetrahydrofuran. Til overførelse af produktet til reaktionsbeholderen anvendes ca. 15 ml-ethylacetat .

Til en opløsning af 2,3 g 7β-(5-benzoylamino-5-carboxy-valeryl-amino)~ 3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre i 25 ml dioxan sættes i løbet af 10 minutter dråbevis en opløsning af 2,5 g diphenyldiazomethan i 10 ml n-pentan. Man omrører i 30 minutter ved stuetemperatur, sønderdeler j overskuddet af diphenyldiazomethan ved tilsætning af nogle dråber eddikesyre (iseddike) og inddamper opløsningen under formindsket tryk.

DK 155741 B

70

Remanensen kromatograferes på 80 g silicagel, hvorved man eluerer 7 β-(5-benzoylamino-5-diphenylmethoxycarbonyl-valeryl-amino)-3-methy-len-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester med en 3:1-blanding af toluen og ethylacetat og omkrystalliserer den af en blanding af methylacetat og cyclohexan, smp. låO-lål°C; tyndtlagskromatogram (silicagel): Rf = 0,24 (system: toluen/ethylacetat 2:1); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$Ts vandigt ethanol): ingen karakteristiske bånd; infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 5,66μ, 5,76μ, 5,95μ, 6,03μ, 6,64μ og 6,70μ.

Eksempel 16.

En til 0°C afkølet opløsning af 0,400 g 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonyl-amino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-di-phenylmethylester i 40 ml methylenchlorid behandles i 3,6 minutter med en ozon-oxygen-blanding, indeholdende 0,21 mmol ozon i minuttet; derpå tilsættes 0,5 ml dimethylsulfid og inddampes så under formindsket tryk. Remanensen, indeholdende 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonyl-amino-a-phenylacetylamino)-cepham-3-on-4 ξ-carboxylsyre-diphenylmethyl-ester, opløses i 10 ml methanol, og der tilsættes en opløsning af diazomethan i diethylether indtil blivende gulfarvning. Man inddamper under formindsket tryk og underkaster remanensen præparativ lagkromatografi (silicagel; system: toluen/ethylacetat 1:1; identifikation med ultraviolet lys, λ = 254 mp). Man får således en blanding af 7β- (D-a-tert .butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino) -3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester og 7β-(D-a-tert.butyloxy-carbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methoxy-2-cephem-4a-carboxyl-syre-diphenylmethylester, begge med en Rf-værdi på 0,55, så 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methoxy-3~ cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester med en Rf-værdi på 0,45 og endelig en blanding af 7β-(D-α-tert.butyloxycarbonylamino-α-phenyl-acetylamino)-3-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester-Ιβ-oxid med en Rf-værdi på 0,17 og -la-oxid med en Rf-værdi på 0,07.

I stedet for 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)- 3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester kan man ved. ovennævnte metode som udgangsstoffer anvende 7β-(D-a-tert.butyloxy-carbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxyl-syre-4-nitro-benzylester eller 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-

DK 155741 B

71 α-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4cc-carboxylsyre-2,2,2-tri-chlorethylester, som man kan få ved behandling af natriumsaltet af 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre med 4-nitro-benzylbromid henholdsvis et reaktionsdygtigt, blandet anhydrid af 7β-(D-a-tert .butyloxycarbonylamino-α-phenyl-acetylamino)-3-methylen-cepham-4a-carboxylsyre med 2,2,2-trichlorethanol, og over 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham~3-on-45-carboxylsyre-4-nitro-benzylester henholdsvis 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-cepham- 3-on-45-carboxylsyre-2,2,2-trichlorethylester få 7β-(D-a-tert.butyl-oxyc arb onylamino-α-pheny1-ac etylamino)-3-met hoxy-3-c ephem-4-c arb oxy 1-syre-4-nitro-benzylester henholdsvis 7β-(D-a-tert.butyloxycarbonyl-amino-a-phenyl-acetylamino)-3-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre-2,2,2- i trichlorethylester. .

Eksempel 17.

Til en .opløsning af 0,250 g af 4-methylphenylsulfonsyresaltet af 7β-amino-cepham-3-on-4ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester, der hovedsagelig foreligger i enolform som 4-methylphenylsulfonatet af 7β-amino-3-cephem-3-ol-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, i 10 ml me- ! i thylenchlorid sættes 0,063 ml trimethylchlorsilan og 0,044 ml pyri- 1 din,og der omrøres i 30 minutter ved stuetemperatur og afkøles så til I 0°C. Man tilsætter Ο,Οδδ ml pyridin og 0,092 ml phenyleddikesyre- j chlorid, lader reagere i en time ved 0°C og i yderligere en time ved .

stuetemperatur, fortynder med 5 ml af en l:l-blanding af dioxan og vand og omrører i· 10 minutter. Man fortynder med 50 ml methylen-chlorid, skiller faserne og vasker den organiske opløsning med en mættet vandig natriumhydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørrer over natriumsulfat og inddamper under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på silicagel; 73-phenyl-acetylamino-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester elueres med methylenehlorid; tyndtlagskromatogram (silieagel): Rf ^ 0,55 (system: ethylacetat/ pyridin/vand $5:10:5); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol): \ = 2#3 mu (s = 4400): infra-

IflcLX.

rødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid}: karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,12μ, 5,77u, 5,93μ, 6,2Χμ og -6,63d. '

72 DK 155741B

Eksempel 1¾.

På analog måde kan man ved udvalg af egnede udgangsstoffer få følgende forbindelser: 7β-[D-a-tert.Butyloxycarbonylamino-α-(4-hydroxy-phenyl)-acetylamino]-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester, 7β-[D-a-tert.butyloxycarbonylamino-α-(2-thienyl)-acetylamino]~cepham- 3-on-4ξ-carboxylsyre-diphenylmethylester, 7p-CD-a-tert.butyloxycarbonylamino-a“(3”thienyl)-acetylamino]“ cepham-3-on-4|-carboxylsyre-diphenylmethylester, 7p-[D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-(2-furyl)-acetylamino-cepham-3~on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester, 7β-[D-a-tert.butyloxycarbonylamino-α-(4-isothiazolyl)-acetylamino]-c epham-3-on-45-carboxylsyre-diphenylmethylester, 7β-[ϋ-α-ΐβΓΐ,butyloxycarbonylamino-a-(l,4-cyclohexadienyl)-acetyl-amino]-c epham-3- on-4 §- c arb oxylsyre-diphenylmet hylester, 7β-(2-thienyl)-acetylamino-cepham-3-on-45-carboxylsyre-diphenyl-methylester, 7β-(l-tetrazolyl)-acetylamino-cepham-3-on-4ξ-carboxylsyre-diphenyl- methylester, 73-(4-pyridylthio)-acetylamino-cepham-3-on-4§-carboxylsyre-diphenyl-methylester, 7β-(4-aminopyridinium-acetylamino)-cepham-3~on-4?-carboxylsyre-diphenylmethylester og 7β-[Ε)-α- (2,2,2-trichlorethoxycarbonyloxy) -α-phenyl-acetylamino Ιο epham-3-on-4 §-carboxylsyre-diphenylmethylest er.

De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan f.eks. viderefor-arbejdes som følger:

Eksempel 19.

En opløsning af 0,050 g 7p-phenylacetylamino-cepham-3-on-4§-carboxyl-syre-diphenylmethylester og 0,020 g l-methyl-3-(4-methylphenyl)-tria-zen i 5 ml benzen koges i 2 timer under tilbagesvaling. Efter afkø-

DK 155741 B

73 ling inddampes blandingen under formindsket tryk, og remanensen renses tyndtlagskromatografisk (silicagel; 1 x 20; system: toluen/ethylacetat 3:1)* Den under ultraviolet lys (λ = 254μ) synlige zone (Rf ~ [ 0,13) elueres med acetone,og man får 3-methoxy-7p-phenylacetylamino- '' 3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester; ultraviolet absorptions- j spektrum (i ethanol): χ = 264μ (£ = 6300); infrarødt absorptions- !

IugL/£ j spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,63d, ! 5,83u, 5,94d, 6,26μ og 6,66μ. | i i i

Eksempel 20. · !

Til en opløsning af 0,50 g af 4-methylphenylsulfonatet af 7p-amino- j cepham-3-on-4£-carboxylsyre-diphenylmethylester, der overvejende fore- ! ligger i enolform, d.v.s. som 4-methylphenylsulfonat af 7$-amino-3- : cephem-3-ol-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, i 25 ml methanol i sættes ved 0°C indtil blivende gulfarvning en opløsning af diazome- j than i diethylether* Man omrører i 10 minutter i isbad og inddamper ! så. Remanensen kromatograferes på silicagel. Med en 2:l-blanding af | toluen og ethylacetat eluerer man den olieagtige 7β-amino-3-methoxy- j 3-c ephem-4-c arb oxylsyre-diphenylmet hyle st er; tyndtlagskromat ogram j (silicagel; udvikling med ioddamp):Rf ~ 0,39 (system: ethylacetat); ; ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol) : λ = 265u (£- = 6100); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid) : karakteristiske i bånd ved 3,33u, 5,63μ, 5,8ΐμ og 6,23u.

Den videre eluering med ethylacetat giver den olieagtige 7p-d.imethyl-amino-3-methoxy~3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester; tyndt-1agskromatogram (silicagel; udvikling med ioddamp): Rf ^ 0,20 (system: ethylacetat); ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol): λ- ffiax ~ 265u (£. = 5900); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,98μ, 3,33u, 5,62μ, 5,8ΐμ og 6,24u.

En til 0°C afkølet opløsning af 0,253 g D-a-tert.butyloxycarbonyl-• amino-a-(l,4-cyclohexadienyl)-eddikesyre i 75 ml methylenchlorid omrøres i 30 minutter med 0,097 nil N-methyl-morpholin og 0,129 ml chlor-eddikesyre-isobutylester under en nitrogenatmosfære; derpå afkøles til -10 C og tilsættes efter hinanden 0,30 g 7β-&πιΐηο-3-πιβΐίκ^-3-

74 DK 155741 B

cephem-4—carboxylsyre—diphenylmethylester og 0,085 ml N-methyl- morpholin. Reaktionsblandingen omrøres i 30 minutter ved -10°C og i 30 minutter ved 0°C; der tilsættes 30 ml vand,og pH-værdien indstilles på 7,9 ved tilsætning af 40%’s vandig dikaliumhydrogenphosphat-opløsning. Faserne skilles; den vandige opløsning ekstraheres med methylenchlorid,og de forenede organiske opløsninger vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen renses ved hjælp af præparativ lagkromatografi (silicagel; system: diethylether; identifikation med ultraviolet lys λ = 254 mp; Rf ~ 0,39)· Man får den tyndt-lagskromatografisk ensartede 7β“[0-α-·ΐβ^ .butyloxycarbonylamino-α-(1,4-cyclohexadienyl)-ac etylamino]-3-met hoxy-3-c ephem-4-c arb oxylsyre-diphenylmethylester som et amorft produkt; tyndtlagskromatogram (silicagel; identifikation med diethylether): Rf ~ 0,39 (system: diethylether); [a]^ = + 1° - 1° (c = 0,745 i chloroform); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol):! = 263 ιημ (£. = 6700) og λ = 2^0 ιημ (£ = 63ΟΟ); infrarødt absorptions spektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,96μ, 5,64μ, 5,S6μ, 5,90μ (skulder), 6,27μ og 6,73μ·

En blanding af 0,200 g 7p-[D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-(1,4-cyclohexadienyl)-acetylamino]-3-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre-di-phenylmethylester, 0,5 ml anisol og 10 ml forkølet trifluoreddike-syre omrøres i 15 minutter ved 0oC; derpå tilsættes 50 ml koldt toluen og inddampes under formindsket tryk. Remanensen røres op med diethylether, og det pulverformige bundfald filtreres fra og tørres. Det således opnåede salt af 7p-[D-a-amino-a-(l,4-cycl°bexadienyl)-acetylamino]-3-methoxy-3-cephem-4~carboxylsyre med trifluoreddikesyre opløses i ca. 6 ml vand; opløsningens pH-værdi indstilles på 1,5 ved tilsætning af 2 Hr saltsyre, og den vandige opløsning vaskes med 20 ml ethylacetat, og dens pH-værdi indstilles på 5,0 ved dråbevis tilsætning af en 20$Ts opløsning af triethylamin i methanol. Man fortynder med 20 ml acetone og 10 ml diethylether og lader blandingen stå i 16 timer ved 0°C. Det dannede bundfald filtreres fra, vaskes med acetone og diethylether og tørres. Man får således 7p-[D-a-amino-a-(l,4-cyclo-hexadienyl)-acetylamino]~3-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre i form af det indre salt, smp. 170°C (under sønderdeling); tyndtlagskromatogram (silicagel; identifikation med iod): Rf ~ 0,26 (system: n-butanol/

DK 155741 B

75 eddikesyre/vand 67:10:23) og Rf 0,5$ (system: isopropanol/myresyre/ vand 77:4:19); ultraviolet absorptionsspektrum: λ max = 267 mp. (£. = 6100) i 0,1 N saltsyre, og λ = 26$ my (£. = 6600) i 0,1 N vandig

IuclX

natriumhydrogencarbonatopløsning.

Eksempel 21.

Til 256,3 g 3Hmethoxy-7$-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester sættes en blanding af 250 ml anisol i 1200 ml methylenchlorid,og der behandles ved 0°C med 1200 ml, til 0°G forkølet trifluored'dikesyre. Man lader henstå i 30 minutter ved 0°G og fortynder reaktionsblandingen i løbet af 15 minutter med 12000 ml af en til 0°C afkølet l:l-blanding af diethylether og petroleumsether. Det udfældede trifluoreddikesyresalt af 3-methoxy-7$-(D-a-phenylglycylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre filtreres fra, vaskes med diethylether, tørres under formindsket tryk og opløses i 1900 ml vand. Til fjernelse af de gulligt farvede forureninger vasker man med 900 ml ethylacetat; den organiske vaskevæske bortkastes, og den vandige opløsning (pH-værdi ^1,5) indstilles med en 20$rs opløsning af t'riethylamin i methanol på pH-værdi 4/5.

Det indre salt af 3-methoxy-7$-(D-a-phenyl-glycylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre udkrystalliserer som dihydrat i form af farveløse prismer og filtreres fra efter tilsætning af 1$00 ml acetone og 2 timers omrøring ved 0°C, smp. 175-177°C (under sønderdeling); [α]^ = +138° 4" O L* .

- 1 (c = 1 i 0,1 N saltsyre); ultraviolet absorptionsspektrum (i 0,1 N vandig natriumhydrogencarbonatopløsning: λ max = 265 mu {€. = 65ΟΟ); infrarødt absorptionsspektrum (i mineralolie): . bånd ved 2,72μ, 2,$7μ, 3,ΐ4μ, 3,65μ, 5,6$μ, 5,90μ, 6,1$μ, 6,27μ, 6,37μ, 6,56μ, 6,92μ, 7,ΐ6μ, 7,5δμ, 7,74μ, 7,80μ, $,12μ, .8,30μ, 8,43ϋ, $,52μ, 8,65μ, 8,95μ, 9,36μ, 9,55μ, 9,70μ, 10,02μ, 10,38μ, ιθ,77μ, 11,70μ, 12,Οίμ, 12,15μ, 12,48μ, 12,6CU, 12,$7μ, 13,45μ og 14,30μ; mikroanalyse (C^H-^yO^N^S^HgO; molekylvægt: 399,42); beregnet: C 48,11$ H 5,30$ N 10,52$ S 8,03$ fundet: C 47,86$ H 5,27$ N 10,47$ S 8,00$

DK 155741 B

76

Eksempel 22.

En blanding af 0,06 g 3-methoxy-7p-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester og 0,05 ml anisol og-1 ml trifluor-eddikesyre henstilles i 5 minutter ved stuetemperatur og inddampes så under formindsket tryk; Remanensen inddampes to gange til-tørhed • sammen med en 1:1-blanding af chloroform og toluen og kromatQgraferes på 5 g silicagel (indeholdende ca. 5$ vand). Med methylenehlorid indeholdende 30-50$ acetone elueres den amorfe 3-methoxy-^-phenylacetyl-amino-3-cephem-4-carboxylsyre, som lyofiliseres afdioxanj ultravio-. let absorptionsspektrum (i 95$fs vandigt ethanol):! „ = 259 πιμ (ε. = 4970) og 265 ιημ {£ = 4950); infrarødt absorptionsspektrum {i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 3,03μ> 5,60μ, 5,74μ, 5,92μ, 6,24μ og β,67μ·.

. Eksempel 23. '

En blanding af 0,312 g 3?-hydroxy-7p-phenylacetylamino-cepham-4J~ carboxylsyre-diphenylmethylester i 15 ml pyridin og 7 ml eddikesyre-anhydrid henstilles i 16 timer ved 0°C, og efter tilsætning af 50 ml toluen inddampes under formindsket tryk. Remanensen optages i ethyl-acetat; den organiske opløsning vaskes med en mættet vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen renses ved hjælp af præparativ tyndtlagskromatografi; man anvender en silicagelplade med en længde på 100 cm og udvikler med en l:l-blanding af toluen og ethylacetat. Man får 3§-acetyloxy-7£-phenylacetylamino-cepham~4f-carboxylsyre-diphenylmethylester med Rf = 0,47} der efter krystallisation af en blanding af methylenchlorid og pentan smelter ved l62-l64°C; [a]^0 = +55° -1° (c = 0,492 i chloroform); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95$Ts ethanol): λ max = 253 = 700)5 258 ^ = 820) °S 263 ™μ (£ = 660); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,96.u, 5,66u, 5,77Uj 5,97μ, 6,2δμ og 6,71μ.

77 DK 155741 B

Til en blanding af 0,150 g 35-acetyloxy~7p-phenylacetylamino-cepham-4;|-carboxylsyre-diphenylmethylester og 5 ml methylenchlorid sættes 0,1 ml triethylamin, og der henstilles i 16 timer ved stuetemperatur. Reaktionsblandingen fortyndes med 100 ml methylenchlorid-, den organiske fase vaskes med 50 ml 2 N saltsyre og 50 ml af en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over magnesiumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen renses ved hjælp af præparativ tyndtlagskromatografi (2 silicagelplader med en længde på 20 cm, system: toluen/ethylacetat 3:1)· Man får med Rf = 0,36 en svagt gullig olie, der krystalliserer af en blanding af methylenchlorid og hexan. Produktet er 7p-phenylacetylamino-3-cephem~4-carboxylsyre-diphenyl-methylester, smp. l6l-l63°C$ [α]^° = +30° -1° (c = 0,963 i dioxan); tyndtlagskromatogram (silicagel, identifikation i ultraviolet lys'og med ioddamp) : Rf = 0,55 (system: toluen/acetone 4:1], Rf = 0,35 (system: toluen/acetone 9:1)' og Rf = 0,40 (system: toliien/ethylacetåt 4:1); ultraviolet absorptionsspektrum: X = 253 πιμ (£ = 6100) og λ min = 240 mμ(£ = 5250) (i methylenchlorid). og λ ma^. = 259 ιημ (ε = 6050) og λ m^n = 239 mp,(e = 4950) (i 95%'s vandigt ethanol); infrarødt absorptionsspektrum: karakteristiske bånd ved 2,90μ, 5,57μ, 5,76μ, 5,91μ, 6,09μ, 6,66μ, 7,13μ, 3,12μ, 3,63μ, 9,07μ, 10,43μ· og 12,22μ (i methylenchlorid) og 3,01μ, 5,6(tø, 5,#2μ, 6,04μ, 6,03μ (skulder), 6,51μ og 7,13μ (i mineralolie).

En opløsning af 1,94 g 73-phenylacetylamino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester i 100 ml absolut methylenchlorid afkøles til -15°C, og der tilsættes 3,36 ml absolut pyridin og 31,6'ml af en 3$Ts opløsning af phosphorpentachlorid i methylenchlorid,og reaktionsblandingen omrøres i 30 minutter ved -10°C og i yderligere 30 minutter ved -5°C.Man afkøler den guldgule opløsning til -20°C og tilsætter 26,3 ml absolut methanol så hurtigt, at den indre temperatur ikke stiger over -10°C. Reaktionsblandingen omrøres i en time ved -10°C,' henstilles i yderligere en time ved 25-30°C;under stærk omrøring tilsættes 30 ml af en 0,5 molær vandig kaliumdihydrogenphosphatopløs-ning. Man indstiller den tofasede reaktionsblandings pH-værdi på 2 ved dråbevis tilsætning af 20$rs phosphor syre·, omrører i 20 minutter ved stuetemperatur og skiller faserne. Den vandige opløsning vaskes to gange med methylenchlorid; de forenede organiske opløsninger vaskes med to portioner, hver på 20 ml,vand og tørres over magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet fjernes under reduceret tryk; den olieagti-

DK 155741 B

78 ge remanens påføres på en søjle af 110 g silicagel (5$Ts vandindhold). Med met hylene hlor id eluerer man phenyleddikesyremet hylester og med methylenchlorid indeholdende 3% methylacetat 7p-amino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, som man krystalliserer ved opløsning i en lille mængde methylenchlorid og tilsætning af diethylether til opløsningen i varmen (nåleformede krystaller), vasker med kold diethylether og tørrer, smp. 153-154°C; tyndt lagskromatogram (silicagel) : Rf = 0,50 (system: toluen/acetone 4:1), Rf =? 0,65 (system: toluen/aceton’e 2:1), Rf = 0,40 (system: toluen/ethylacetat 1:1) og Rf = 0,33 (system: toluen/diethylether 1:1); ultraviolet absorptionsspektrum: λ max = 257 πιμ (£. = 6150) og λ min = 245 πιμ (£- = 7730) (i methylenchlorid) og λ max = 255 πιμ (s = 5500) og λ min = 236 mμ [L· = 4650) (i 95%ts ethanol); infrarødt absorptionsspektrum: karakteristiske bånd ved 2,91 μ, 2,97μ, 5,6ΐμ, 5,7&μ, 6,11μ, 7,1 4μ, 6,15μ, S,29μ, 9,l4u og 9,$3μ (i methylenchlorid) og ved 2,99μ, 5,65μ, 5,77μ, 6,06μ, 7,ΐ4μ, 7,74μ, 7,64μ, 6,06μ, 6,53μ, 9,14μ, 9,65μ og 10,35μ (i mineralolie).

Man overhælder 0,360 g 7B-amino-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester med 2 ml anisol og 6 ml absolut trifluoreddikesyre, lader den klare opløsning stå i 10 minutter ved stuetemperatur og fortynder så med ca. 20 ml absolut toluen. Blandingen inddampes under formindsket tryk; remanensen inddampes endnu to gange sammen med toluen til tørhed og suspenderes så i 5 ml methanol, 5 ml diethylether og 0,5 ml vand. Suspensionens pH-værdi indstilles på 3,5 ved dråbevis tilsætning af en 5%'s opløsning af triethylamin i methanol; man lader stå i et isbad i 30 minutter og filtrerer det fine bundfald ved hjælp af et egnet glassugefilter. Den svagt beigefarvede filterremanens vaskes med en blanding af methanol og methylenchlorid, derpå med diethylether og tørres under formindsket tryk ved 35°C. Den således som fint mikrokrystallinsk pulver opnåede 7β-ηπιίηο-3-cephem-4-carboxylsyre sønderdeles ved 215°C; tyndt lagskromat ogram (silicagel, udvikling med iod) : Rf = 0,12 (system: n-butanol/eddikesyre/vand 67:10:23), Rf = 0,26 (system: n-butanol/pyridin/eddikesyre/vand 40:24:6:30) og Rf = 0,21 (system: ethylacetat/n-butanol/pyridin/eddikesyre/vand 42:21:21:6:10); infrarødt absorptionsspektrum (i mineralolie): karakteristiske bånd ved.

3,12μ, 3,6θμ, 4,12μ (skulder), 4,92μ, 5,54μ, 6,05μ (skulder), 6,19μ, 6,55μ, 7,05μ, 7,42μ, 6,23μ, 8,79μ, 9,55μ, 12,08μ, 12,69μ og 13,04μ.

DK 155741 B

79

Til en opslæmning af 0,070 g 7β-3ΐηίηο-3~οβρ1ιβιιι-4-·οα^ο:χ2^^ΓΘ i 2 ml absolut methylenchlorid sættes 0,031 g triethylamin i 0,35 ml methylene hlorid; suspensionen fortyndes med 5 ml absolut tetrahydrofuran og omrøres i 30 minutter, af og til i ultralydbad.

Man opløser 0,102 g tert.butyloxycarboriyl-D-a-phenylglycin i 5 ml absolut methylenchlorid, tilsætter 0,040 g 4-methylmorpholin og fortynder med 10 ml acetonitril. Man afkøler til -20°C og tilsætter under omrøring 0,060 g chlormyresyreisobutylester, hvorpå man lader reagere i 30 minutter ved -15°C. Efter fornyet afkøling til under -20°C tilsættes så den mælkeagtige suspension af triethylammoniumsaltet af 7β'-amino~3-cephem-4-carboxylsyre. Man omrører reaktionsblandingen i 30 minutter ved -15°C, i yderligere 30 minutter ved 0°C og endelig i 2 timer ved stuetemperatur. Man filtrerer, vasker efter med acetonitril, methylenchlorid og diethylether og tørrer filtratet, der inddampes til tørhed. Remanensen optages i ethylåeetat og vand,og blandingen syrnes under kraftig omrøring og køling med is til en pH-værdi på 2 ved tilsætning af 5 molær vandig phosphorsyre. Den organiske fase skilles fra og vaskes fire gange med en lille mængde af en mættet vandig natriumchloridopløsning. De vandige udtræk efterekstra-heres med 2 portioner ethylacetat, og de forenede organiske ekstrakter tørres over vandfrit magnesiumsulfat og befries for opløsningsmiddel under formindsket tryk. Remanensen kromatograferes på 10 g silieagel (søjle, tilsætning af 5% vand). Man eluerer først ureageret tert. butyloxycarbonyl-D-a-phenylglycin med methylenchlorid og methylenchlorid indeholdende stigende mængder acetone, og derpå 7β’-(0-α-ΐβΓΐ. butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3~cephem-4~carboxyl- . syre,som man får i amorf form;ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%fs ethanol): = 252 ιημ (£ = 5100); infrarødt absorptionsspektrum nicLX.

(i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 5,01μ, 5,&5μ, 5,92μ og 6,12μ; tyndtlagskromatogram (silieagel G, påvisning med ioddamp):Rf = 0,6-0,7 (system: n-butanol/eddikesyre/vand 44:12:44)*

En opløsning af 0,02 g 7p-(D-a-tert .butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre'i 3 ml ren trifluoreddikesyre henstilles ved stuetemperatur i 15 minutter.Den opnåede opløsning inddampe: i rotationsfordamper;til fuldstændig fjernelse af trifluoreddikesyren

DK 155741 B

80 inddampes remanensen to gange, hver gang sammen med en l:l-blanding af chloroform og toluen og tørres i 16 timer ved 0,0001 mm Hg-tryk..

7β - (D-a-Phenylglycylamino) -3-c ephem-4-carboxylsyre fås som et gul-ligt amorft pulver ved, at man til en opløsning af det opnåede salt med t rifluor eddike syre i vand og methanol sætter en ækvivalent mængde triethylamin, inddamper og digererer remanensen med methylen-chlorid; tyndtlagskromatogram (silicagel, udvikling med ioddamp): . Rf = 0,29. (system: n-butanol/pyridin/eddikesyre/vand 40:24:6:30); ultraviolet abs'orptionsspektrum (i vand): - 250 m|i (£ = 4300).

Eksempel 24.

.En blanding af 0,5 g 3-n-butyloxy-7p-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-α-phenylacetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, 1 ml anisol og 15 ml trifluoreddikesyre henstilles i 15 minutter ved 0°C; derpå fortyndes med 200 ml koldt toluen og inddampes under formindsket tryk. Remanensen røres op med diethylether,og den pulverfor-mige, farveløse remanens filtreres fra, vaskes med diethylether og tørres under højvakuum. Man får således trifluoracetatsaltet af 3-n-butyloxy-7p-(D-a-phenyl-glycylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre, der opløses i 5 ml vand. Opløsningen vaskes to gange, hver gang med 10 ml ethylacetat, og den vandige fases pH-værdi indstilles på 5,0 ved tilsætning af en opløsning af triethylamin i methanol. Derpå inddampes opløsningen under formindsket tryk; remanensen optages i en lille mæng de acetone og fortyndes indtil uklarhed med diethylether. Den i form af det indre salt foreliggende 3-n-butyloxy-7p-(D-a-phenyl-glycyl-amino)-3-cephem-4-carboxylsyre fås som krystallinsk bundfald og filtreres fra, smp. 141’-142°C; tyndtlagskromatogram (silicagel) : Rf 0,21 (system: ethylacetat/pyridin/eddikesyre/vand 62:21:6:11); ultraviolet absorptionsspektrum (i 0,1 N vandig natriumhydrogencarbonat-opløsning): λ max = 267 m (s. = 7300).

Eksempel 25»

En blanding af 2,70 g 3-ethoxy-7f3-(D-a-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino) -3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylest er, 6,7 ml anisol og 67 ml myresyre omrøres i en time ved stuetemperatur; der fortyndes med 200 ml toluen, inddampes så under formindsket tryk, og

DK 155741 B

81 remanensen tørres under højvakuum, digereres med diethylether og filtreres fra. Det som brunligt pulver opnåede formiat af 3-βΡϊκ^-7β-(D-a-phenyl-glycylamino )-3-cephem-4--carboxylsyre opløses i S ml vand; den vandige fase syrnes med 2 N saltsyre, vaskes med 10 ml ethylacetat, indstilles med en 10$’s opløsning af triethylamin i methanol på en pH-værdi på ca. $ og inddampes under formindsket tryk. Remanensen optages i en lille mængde methanol, og den amorfe lysegullige 3-ethoxy-7p-(D-a-phenyl-glycylamino) -3-cephem-4-carboxylsyre udfældes som indre salt ved tilsætning af methylenehlorid og diethylether; tyndtlagskromatogram (silieagel): Rf ~ 0,17 (system: ethylacetat/ pyridin/eddikesyre/vand 62:21:6:11); ultraviolet absorptionsspektrum (i 0,1 molær vandig natriumhydrogencarbonatopløsning): λ = 263 mu (E = 5300).

Eksempel 26,

En blanding af 4,6 g 3-benzyloxy-7β-(D-α-tert.butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester, 10 ml anisol og 100 ml trifluoreddikesyre omrøres i 15 minutter ved 0°C og fortyndes så med 250 ml forkølet toluen, inddampes under formindsket tryk, og remanensen tørres under højvakuum. Man rører produktet op med diethylether og får således det pulverformige trifluor-acetat af 3-benzyloxy~7p-(D-a-phenyl-glycylamino)-3-cephem-4-carboxyl-syre, der filtreres fra og opløses i en 9:1-blanding af vand og methanol. pH-Værdien indstilles på 1,7 med 2 N vandig saltsyre; man vasker to gange, hver gang med 30 ml ethylacetat (de organiske vaske-opløsninger bortkastes)?og den vandige fases pH-værdi indstilles på 5 ved tilsætning af en 10%1 s opløsning af triethylamin i methanol.

Man inddamper under formindsket tryk, rører remanensen op med en blanding af acetone og diethylether, filtrerer det pulverformige produkt fra og vasker efter med acetone og diethylether. Man får således 3-benzyloxy-7β-(D-a-phenyl-glycylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre i amfo-ionisk form; tyndtlagskromatogram (silieagel): Rf = 0,17 (system: 1 ethylacetat/pyridin/eddikesyre/vand 62:21:6:11); ultraviolet absorp- \ tionsspektrum (i 0,1 N vandig natriumhydrogencarbonatopløsning) : λ max = 266 mμ (£ = 65OO).

DK 155741 B

82

Eksempel 27.

En opløsning af 0,203 g 7p-(5-benzoylamino-5-diphenylmethoxycarbonyl-valeryl-amino)-3-methoxy-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester i 13 ml methylenehlorid afkøles til -10°C, og der tilsættes 0,132 ml pyridin og 3,52 ml af en 8%*s opløsning af phosphorpentachlorid i methylenchlorid. Man omrører i en time ved -10°C, afkøler så til -30°C, tilsætter hurtigt 2,2 ml, til -30°C afkølet methanol og omrører videre i 30 minutter ved -10°C og 30 minutter ved -5°C. Derpå tilsætter man reaktionsblandingen 6,5 ml af en 0,5 molær vandig opløsning af kaliumdihydrogenphosphat, omrører i 5 minutter ved stuetemperatur og skiller faserne. Den vandige fase vaskes med methylenchlorid; de forenede methylenchloridfaser vaskes med koncentreret vandig natrium-chloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes under formindsket tryk. Remanensen opløses i methanol,og til opløsningen sættes diethylether indtil svag uklarhed. Man får således 73-amino-3-methoxy- 3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethylester som amorft bundfald; tyndt-lagskromatogram (silieagel): Rf = 0,17 (system: ethylacetat; udvikling med iod); ultraviolet absorptionsspektrum (i 95%'s vandigt ethanol) : \ = 256 mu (E = 5700); infrarødt absorptionsspektrum (i max dioxan): karakteristiske bånd ved 2,δ7μ, 5,62μ, 5,#5μ og 6,26μ.

Eksempel 26.

Til en til 0°c afkølet opløsning af 0,63 g 3-methoxy-73-(D-a-tert. butyloxycarbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-2-cephem-4a-carboxylsyre-diphenylmethylester i 25 ml methylenchlorid sættes en opløsning af 0,20 g 3-chlor-perbenzoesyre i 5 ml methylenchlorid. Blandingen omrøres i 30 minutter ved 0°Cj der tilsættes 50 ml methylenchlorid og vaskes efter hinanden med 25 ml af en mættet vandig natriumhydrogenearbonat-opløsning og en mættet vandig natriumchloridopløsning. Man tørrer den organiske fase over natriumsulfat og inddamper under formindsket tryk. Remanensen krystalliseres af en blanding af methylenchlorid og diethylether; man får således 3-ιιιβΐ1κ^-7β-(0-α-ΐβΓΐ .butyloxycarbonyl-amino-a-phenyl-acetylamino)-3-cephem-4-carboxylsyre-diphenylmethyl-ester-l-oxid i form af farveløse nåle, smp. 172-175°C; tyndtlagskromatogram (silieagel): Rf ~ 0,44 (system: ethylacetat; udvikling med ioddamp); ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol): λ = 277 mu (£ = 7200); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karak-

DK 155741 B

83

Til en til -10°C afkølet opløsning af 1,30 g 3-methoxy-7P“(D“a-tert. butyloxycarbonylaraino-a-phenyl-acet7lamino)-3-cephem-i4.-carboxylsyre-diphenylmethylester-l-oxid i 30 ml dimethylformamid sættes under udelukkelse af luft 2,80 g phosphortrichlorid. Efter 13 minutters henstand hældes reaktionsblandingen ud på en blanding af is og en vandig dikaliumhydrogenphosphatopløsning; den vandige blanding ekstraheres to gange, hver gang med 100 ml ethylacetat. Den organiske ekstrakt vaskes med en mættet vandig natriumchloridopløsning, tørres over natriumsulfat og inddampes. Remanensen kromatograferes på silicagel; man eluerer med diethylether. den amorfe 3-methoxy-7p-(D-a-tert.butyloxy-carbonylamino-a-phenyl-acetylamino)-3"cephem-4-carboxylsyre-diphenyl-methylester som tyndt lagskromat ografisk rent stof, Rf ~ 0,39 (system: diet hylet her;· udvikling-med ioddamp); [alp = 1° - 1° (c = 0,9&L i chloroform); ultraviolet absorptionsspektrum (i ethanol): λ m = 264 mu (£- = 63OO); infrarødt absorptionsspektrum (i methylenchlorid): karakteristiske bånd ved 2,94μ, 5,62μ, 5,δ4μ, 5,&3μ, 6,25μ og 6,70μ.

Claims (12)

1. 2. Forbindelser ifølge krav 1, kendet egnet ved, at "1 Q R i formlen I er hydrogen eller en acylgruppe, der er indeholdt i et fermentativt eller bio-, halv- eller totalsyntetisk fremstilleligt R-acylderivat af en 6β-amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7β-amino-3- 2A cephem-4-carboxylsyreforbindelse, og R er eventuelt substitueret lavalkoxy, eventuelt substitueret phenyllavalkoxy, acyloxy, trilav-alkylsilyloxy eller eventuelt substitueret amino eller hydrazino.
2. 3. Forbindelser ifølge krav 1, kendet egnet ved, at R i formlen I er hydrogen, en acylgruppe, der er indeholdt i fermentativt eller biosyntetisk fremstillelige R-acylderivater af 6β-amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7β-amino-3-c ephem-4-c arb oxylsyreforbindelser, eller en acylgruppe, der forekommer i højvirksomme R- acylderivater af 63-amino-penam-3-carboxylsyre- eller 7β-&Ώΐΐηο-3- 2A cephem-4-carboxylsyreforbindelser, og R er lavalkoxy, 2-halogen-lavalkoxy, phenacyloxy, 1-phenyllavalkoxy med 1-3 eventuelt med lavalkoxy eller nitro substituerede phenylgrupper, lavalkanoyloxymeth-
3. 85 DK 155741 B oxy, a-amino 1 avalkano y1oxymethoxy, 1 avalkoxy c arbonyloxy eller lav-alkanoyloxy.
4. 4. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 2 Λ Ri formlen I bar den i krav 3 angivne betydning, og R er hydrogen eller en gruppe med formlen R11 0 T 1 " RMC) -C- (A) Em hvori n er 0, og E1 er hydrogen eller en eventuelt substitueret cyclo-aliphatisk eller aromatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk gruppe, fortrinsvis af aromatisk karakter, en funktionelt omdannet, f.eks. foresteret eller foretheret, hydroxy-eller mercaptogruppe eller en eventuelt substitueret aminogruppe, eller hvori n er 1,. R1 er hydrogen eller en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe, hvori den hete-rocycliske gruppe fortrinsvis har aromatisk karakter, og/eller et kva-temært nitrogenatom, en eventuelt funktionelt omdannet, fortrinsvis foretheret eller foresteret, hydroxy- eller mercaptogruppe, en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe, en acylgruppe, en eventuelt substitueret aminogruppe eller en azidogruppe, og hver af grupperne R og R er hydrogen, eller hvori n er 1, R er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe, hvori den heterocycliske gruppe fortrinsvis har aromatisk karakter, R er en eventuelt funktionelt omdannet, f.eks. foresteret eller foretheret, hydroxy- eller mercaptogruppe, en eventuelt substitueret aminogruppe, en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe eller sulfogruppe, en eventuelt O-mono- eller O-disubstitueret phos-phonogruppe, en azidogruppe eller et halogenatom, og R er hydrogen, eller hvori n er 1, hver af grupperne R og R en funktionelt omdannet, fortrinsvis foretheret eller foresteret, hydroxygruppe eller en eventuelt funktionelt omdannet carboxylgruppe, og R er hydrogen, eller hvori n er 1, R1 hydrogen eller en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller
5. 86 DK 155741 B araliphatisk carbonliydridgruppe, og og R^^" sammen er en eventuelt substitueret, med en dobbeltbinding med carbonatomet forbundet aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk eller aralipliatisk carbonliydridgruppe, eller hvori n er 1, og B1 er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonliydridgruppe eller en eventuelt substitueret heterocyclisk eller heterocyclisk-aliphatisk gruppe, hvori heterocycliske grupper fortrinsvis har aromatisk karakter, R^ er en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk carbonhydridgruppe TTT og R hydrogen eller en eventuelt substitueret aliphatisk, cycloaliphatisk, cycloaliphatisk-aliphatisk, aromatisk eller araliphatisk c arb onhydri dgrupp e.
6. 5. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at "1 3, R i formlen I er hydrogen, en acylgruppe med formlen 0 e II Ra-(X) -CH-C- (B) m i hvori Ra er phenyl, hydroxyphenyl eller hydroxy-chlorphenyl, hvorved hydroxysubstituenter i sådanne grupper kan være beskyttet med acyl- grupper, thienyl, pyridyl, amino-pyridinium, furyl, isothiazolyl, tetrazolyl eller 1,4-cyclohexadienyl, X er oxygen eller svovl, m er 0 eller 1, og R*3 er hydrogen eller, når m er 0, eventuelt beskyttet amino, carboxy, sulfo eller hydroxy eller O-lavalkylphosphono eller Ο,Ο’-dilavalkyl-phosphono eller en 5-amino-5-c arb o xy-valerylgrupp e, 2A hvori amino- og carboxygruppen eventuelt er beskyttet, og R er lav-alkoxy, 2-halogen-lavalkoxy, eventuelt substitueret diphenylmethoxy eller trilavalkylsilyloxy.
7. 6. Forbindelser ifølge krav 1, kendet egnet ved, at ”1 8l R i formlen I er hydrogen, acylgruppen med formlen B ifølge krav 5, hvori Ra er phenyl, 4-hydroxy-phenyl, 2-thienyl, 4-isothiazolyl eller 1,4-cyclohexadienyl, X oxygen, m 0 eller 1, og R° er hydrogen eller, når m er 0, eventuelt beskyttet amino eller hydroxy eller en 5-amino- 5-carboxy-valerylgruppe, hvori amino- og carboxygruppen eventuelt er 2A beskyttet, og R eventuelt i 2-stilling halogensubstitueret lavalk-oxy, eventuelt lavalkoxysubstitueret diphenylmethoxy eller trilav-alkylsilyloxy. a7 DK 155741 B
8. 7. Forbindelser ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er 7p-(D-a-amino-a-Ra-acetylamino)-cepliam-3-on-4-§-carboxylsyre-diphenylmethylester med formlen I, hvori Ra er phenyl, 4-hydroxyphe-nyl, 2-thienyl eller 1,4-cyclohexadienyl, og amino fortrinsvis foreligger i beskyttet fom, eller salte af sådanne forbindelser med saltdannende grupper.
9. 8. Forbindelse ifølge krav 1, kendet egnet ved, at det er 7P-phenylacetylamino-cepham-3-on-4?-carboxylsyre-diphenyl-methylester. μ
10. 9. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er 7β - (D-oc-t e rt. butylo xy c arb onyl amino -oc-phenyl-ac e tyl amino) -cepham-3-on-45--carboxylsyre-diphenylmethylester.
11. 10. Forbindelse ifølge krav 1, kendet egnet ved, at det er 7P-amino-cepham-3-on-4§-carboxylsyre-diphenylmethylester eller et salt deraf.
12. 11. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at det er 7 β - (5 -b enz o yl amino -5 -diphenylme tho xy c arb onyl -val e ryl amino) -cepham-3-on-4§~carboxylsyre-diphenylmethylester.