DK155331B

DK155331B - 5-fluoruracil-derivater eller syreadditionssalte deraf til anvendelse som mellemprodukter ved fremstilling af antitumoralt aktive 5-floururacil-forbindelser

Info

Publication number: DK155331B
Application number: DK441680AA
Authority: DK
Inventors: Tsuneo Baba; Masakatsu Kaneko; Bunji Shimizu; Masao Arakawa
Original assignee: Sankyo Co
Priority date: 1976-10-28
Filing date: 1980-10-17
Publication date: 1989-03-28
Also published as: DK155331C; DK441680A

Description

DK 155331 B

Opfindelsen angår hidtil ukendte 5-fluoruracil-deri-vater eller syreadditionssalte deraf til anvendelse som mellemprodukter ved fremstilling af hidtil ukendte 5-fluoruracil-forbindelser med den i kravets indledning angivne almene formel (I). Disse forbindelser og deres fordelagtige biologiske aktivitet er nærmere beskrevet i dansk patentansøgning nr. 4781/77.

Visse 5-fluoruracil-derivater er kendte som antitumormidler. F.eks. er 5-fluoruracil selv (i det følgende betegnet som "5-FU") og N^-(2-tetrahydrofuryl)-5-fluoruracil (i det følgende betegnet som "FT-207") blevet angivet at vise god antitumor-aktivitet. [R. Duschinsky et al., J. Amer. Chem. Soc. 79, 4559 (1957) og S.A. Hiller et al., Dokl. Akad. Nauk. (USSR), 176, 332 (1967)]. Der er imidlertid behov for et middel, som har lige så god eller bedre antitumor-aktivitet end 5-FU og 0FT-207, men med færre bivirkninger og lav toxicitet.

Dette opnås med 5-fluoruracil-derivaterne med den almene formel (I), som kan fremstilles ved, at en forbindelse med formlen: OR8 hvori R7 betyder benzyl, som eventuelt har en nitro- eller halogensubstituent i phenylringen, eller 8-halogen-ethyl, og R8 betyder en metalholdig ion, omsættes med en 2

DK 155331 B

forbindelse med formlen: R9 - X (III) hvori X betyder halogen, og R9 betyder en af glycosid-resterne R‘0.CH2 r4'oco H /—°\ H A—\ /h \ eller /H Λ yoR1 ι/ττ l\9Rt Ψ vr

0RT5*æf^t 0R,fsssaT3«H

H R3' H R3 hvori R' betyder en alifatisk acylgruppe med 2-4 carbon-atomer eller en aromatisk acylgruppe med 7-11 carbonato-mer, R3 betyder -OR', hvor R' har den foranstående betydning, eller benzyloxycarbonylamino, som eventuelt har en nitro- eller halogen-substituent i phenylringen, eller β-halogenethoxycarbonylamino, og R4' betyder ligekæ-det eller forgrenet alkyl med 1-8 carbonatomer, cycloal-kyl med 5-7 ringcarbonatomer, aralkyl med 7-12 carbonatomer eller aryl med 6-10 carbonatomer, hvor den aromatiske ring i aralkyl- eller arylgruppen eventuelt har en substituent udvalgt blandt alkyl med 1-4 carbonatomer, alkoxy med 1-4 carbonatomer og halogen, til dannelse af en forbindelse med formlen: f , 3

DK 155331 B

hvori R7 og R9 har den ovenstående betydning, og forbindelsen med formlen (IV) i valgfri rækkefølge underkastes reduktion til fjernelse af den hydroxybeskyttende gruppe R7 og, om ønsket, reduktion til fjernelse af en aminobe-skyttende benzyloxycarbonyl- eller β-halogenethoxycarbo-

Q I

nylgruppe i RJ og/eller hydrolyse til fjernelse af de hydroxybeskyttende grupper R' og den carboxylbeskyttende gruppe R4' til dannelse af en forbindelse med formlen (I), hvorpå om ønsket den dannede forbindelse med formlen (I) overføres i et syreadditionssalt deraf.

I glycosid-resterne R9 i reaktanten med formlen (III) er R' almindeligvis den samme acylgruppe som repræsenteret ved R i formlen (I), RJ er, nar den er en beskyttet aminogruppe, almindeligvis den sammé beskyttende amino-gruppe som defineret ved R3 i formlen (I), og R4 er almindeligvis den samme gruppe som repræsenteret ved R4 i formlen (I).

Når R7 i formlerne (II) og (IV) betyder en benzylgruppe, som har en nitro- eller halogensubstituent i phenylrin-gen, er den f.eks. o-nitrobenzyl, m-nitrobenzyl, p-ni-trobenzyl, o-chlorbenzyl, m-chlorbenzyl, p-chlorbenzyl, m-fluorbenzyl eller p-fluorbenzyl; og når den betyder en fj-halogenethylgruppe, er den f.eks. 2,2,2-trichlorethyl, 2,2,2-tribromethyl, 2,2-dichlorbenzyl eller 2,2-dibrom-ethyl.

4

DK 155331 B

Når gruppen R betyder en alifatisk acylgruppe med 2-4 carbonatomer, er den f.eks. acetyl, n-propionyl, n-buty-ryl eller isobutyryl, og når den betyder en aromatisk acylgruppe med 7-11 carbonatomer, er den f.eks. benzoyl, p-nitrobenzoyl, p-methylbenzoyl, p-methoxybenzoyl eller naphthyl.

Når betyder en aminogruppe beskyttet med en benzyl-oxycarbonylgruppe, som har en nitro- eller halogensub-stituent i phenylringen, er den beskyttende gruppe f.eks. o-nitrobenzyloxycarbonyl, m-nitrobenzyloxycarbo-nyl, p-nitrobenzyloxycarbonyl, o-chlorbenzyloxycarbonyl, m-chlorbenzyloxycarbonyl, p-chlorbenzyloxycarbonyl, o-brombenzyloxycarbonyl, o-fluorbenzyloxycarbonyl, m-fluorbenzyloxycarbonyl eller p-fluorbenzyloxycarbonyl; og når den er en aminogruppe beskyttet med en β-halogen-ethoxycarbonylgruppe, er den beskyttende gruppe f.eks.

2,2,2-trichlorethoxycarbonyl, 2,2,2-tribromethoxycarbo-nyl, 2,2-dibromethoxycarbonyl eller 2,2-dichlorethoxy-carbonyl.

R^ betyder hydrogen, en ligekædet eller forgrenet alkyl-gruppe med 1-8 carbonatomer, f.eks. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, n-pentyl, isopen-tyl, n-hexyl, sec.-hexyl, n~heptyl, o-oetyl eller 2-ethylhexyl, en cycloalkylgruppe med 5-7 ringearbonatomer, f.eks. cyclopentyl, cyclohexyl eller cycloheptyl, en aralkylgruppe med 7-12 carbonatomer, hvis aromatiske ring kan være usubstitueret eller have en substituent udvalgt blandt alkyl med 1-4 carbonatomer (f.eks. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl eller isobutyl), alkoxy med 1-4 carbonatomer, (f.eks. methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy eller isobutoxy) og halogen (f.eks. chlor, brom eller fluor), f.eks. ben- 5

DK 155331 B

zyl eller phenethyl, eller en arylgruppe med 6-10 carbonatomer, hvis aromatiske ring kan være usubstitueret eller have en substituent udvalgt blandt alkyl med 1-4 carbonatomer (f.eks. methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl eller isobutyl), alkoxy med 1-4 carbonatomer (f.eks. methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy eller isobutoxy) og halogen (f.eks. chlor, brom eller fluor), f.eks. phenyl.

Forbindelserne med den ovenstående formel (IV) og hydrolyseprodukterne deraf samt sådanne reduktionsprodukter deraf, hvor kun den eventuelle beskyttende aminogruppe

-5 I

RJ er reduceret, udgør mellemprodukterne ifølge opfindelsen, som er ejendommelige ved, at de har den almene formel: .OR2 /γ hvori R2 og R7 har den tidligere angivne betydning, eller er syreadditionssalte af sådanne forbindelser, hvori R^ er amino.

Foretrukne eksempler på sådanne forbindelser, som kan fremstilles ved den angivne fremgangsmåde, er anført nedenfor. De numre, som er givet forbindelserne i den følgende liste, anvendes til at identificere disse forbindelser i det følgende.

6

DK 155331 B

1. 1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-D-glucopyra-nuronsyre.

2. Methyl-1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-D-glu-copyranuronat.

3. Ethyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-fS-6-glu-copyranuronat.

4. n-propyl-1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-0-D-glucopyranuronat.

5. Isopropyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyriiaidin-4-yl)-6-D-glucopyranuronat.

6. n-butyl-1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-D-glucopyranuronat.

7. Isobutyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-(J-D-glucopyranuronat.

8. n-pentyl-1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-D-glucopyranuronat.

9. n-hexyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-3~D-glucopyranuronat.

10. 04-(8-D-gluopyranosyl)-5-fluoruracil.

11. O4-(2-amino-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-fluorura-cil. 1 04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-deoxy-8-D-glucopy-ranosyl)-5-fluoruracil.

7

DK 155331 B

13. Isopentyl-l-0-(5-fluor-lH-oxopyrimidin-4-yl)-B-D-glucopyranuronat.

14. Cyclohexyl-1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)—3—D— glucopyranuronat.

15. O4-(2,3,4,6-tet ra-0-acetyl-(5-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil.

Ved udførelsen af den angivne fremgangsmåde omsættes en forbindelse med den almene formel (II) med en forbindelse med den almene formel (III) til dannelse af en forbindelse med formlen (IV). Denne forbindelse med formlen (IV) underkastes derpå i valgfri rækkefølge reduktion til fjernelse af den hydroxybeskyttende gruppe og, om ønsket, reduktion til fjernelse af en aminobeskyttende benzyloxycarbonyl- eller β-halogenethoxycarbonylgruppe i R3' og/eller hydrolyse til fjernelse af de hydroxybeskyttende grupper R' og den carboxylbeskyttende gruppe R4' til opnåelse af det ønskede 5-fluoruracil-derivat med formlen (I).

I formlen OR8 1 J (D) 8

DK 155331 B

betyder eventuelt substitueret benzyl eller β-halo-genethyl som før nævnt, og R® en metalholdig ion. Den metalholdige ion kan være enhver monovalent ion indeholdende et metal, som i sig selv kan være monovalent eller kan være polyvalent. Når metallet er monovalent, består den metalholdige ion fortrinsvis af metal alene, f.eks. en sølvion, en kviksølv(I)-ion, Hg+, eller en alkalimetalion, f.eks. en natrium- eller kaliumion. Hvor metallet er polyvalent, indeholder den metalholdige ion metallet og en eller flere anioniske ligander, således at den metalholdige ion i sig selv er monovalent; eksempler inkluderer HgCl+ og HgBr+. Hvis metalionen er polyvalent, kan forbindelsen med formlen (II) også indeholde mere end én 5-fluoruracil-derivat-rest, og den metalholdige ion betragtes da som bestående af metallet og alt udover én af de nævnte rester.

I stedet for at sætte metalsaltet med formlen (II) i sig selv til reaktionsblandingen, kan metalsaltet sannes in situ ud fra det tilsvarende frie 5-fluoruracil-derivat.

F.eks. kan reaktionen gennemføres ved tilsætning af f.eks. kviksølv(II)-cyanid til en opløsning af det tilsvarende frie 5-fluoruracil-derivat og derpå tilsætte forbindelsen med formlen (III).

Forbindelsen med formlen (III) er et a-glycosylhaloge-nid, hvori halogenatomet fortrinsvis er chlor eller brom. Når dette a-glycosylhalogenid reagerer med forbindelsen med formlen (II), giver den det tilsvarende β-glycosid af 5-fluoruracil-derivatet.

Reaktionen mellem forbindelserne (II) og (III) gennemføres fortrinsvis i nærvær af et opløsningsmiddel. Ethvert opløsningsmiddel kan anvendes, blot det ikke har nogen 9

DK 155331 B

skadelig virkning på reaktionen. Eksempler på egnede opløsningsmidler er aromatiske carbonhydrider, f.eks. toluen eller xylen, dialkylamider af alifatiske syrer, f.eks. Ν,Ν-dimethylformamid eller Ν,Ν-dimethylacetamid, dialkylsulfoxider, f.eks. dimethylsulfoxid, phosphorsyreamider, f.eks. hexamethylphosphorsyrediamid, nitroal-kaner, f.eks. nitromethan, og nitriler, f.eks. acetoni-tril. Selv om der ikke er nogen særlig begrænsning på reaktionstemperaturen, gennemføres reaktionen i alminde- . o lighed ved en temperatur pa 0-150 C; hvor der anvendes et ikke-polært opløsningsmidel, er den foretrukne reak- o tionstemperatur 100-150 C; hvor der anvendes et polært opløsningsmiddel, foretrækkes omkring stuetemperatur.

Den tid, som kræves til reaktionen, vil hovedsageligt afhænge af reaktionstemperaturen og det anvendte opløsningsmiddel, men vil i almindelighed variere fra 5 minutter til 20 timer.

Efter fuldførelsen af reaktionen kan den resulterende forbindelse med formlen (IV) adskilles fra reaktionsblandingen ved konventionelle metoder. F.eks. kan man efter frafiltrering af uopløselige stoffer fra reaktionsblandingen fjerne opløsningsmidlet ved destillation under formindsket tryk og derpå ekstrahere remanensen med et organisk opløsningsmiddel, såsom chloroform. Ekstrakten kan derpå vaskes med vand og tørres, hvorefter opløsningsmidlet fjernes ved destillation fra ekstrakten. En organisk væske, såsom ethanol, kan sættes til den således opnåede remanens, og blandingen får lov at stå i kulden, f.eks. i køleskab, for at give den ønskede forbindelse (IV) som krystaller.

Forbindelserne med den almene formel (IV) er nyttige som mellemprodukter ved syntesen af antitumor-midler med den 10

DK 155331 B

almene formel (I) og kan som angivet ovenfor let omdannes til sådanne antitumor-midler ved reduktion og eventuelt hydrolyse, der kan gennemføres i valgfri rækkefølge.

Den hydroxybeskyttende gruppe i pyrimidindelen og/eller en eventuel aminobeskyttende gruppe i glycosiddelen kan fjernes ved reduktion ved, at forbindelsen med formlen (IV) bringes i kontakt med et reduktionsmiddel, fortrinsvis i nærvær af et opløsningsmiddel. Arten af det anvendte reduktionsmiddel skal med henblik på de bedste resultater udvælges under hensyntagen til arten af den beskyttende gruppe, som skal fjernes. Hvor den hydroxybeskyttende gruppe er en substitueret eller usubstitue-ret benzylgruppe, eller den aminobeskyttende gruppe er en substitueret eller usubstitueret benzyloxycarbonyl-gruppe, er reduktionsmidlet fortrinsvis hydrogen og en katalysator, såsom palladium på kul. Hvor den hydroxybeskyttende gruppe er en β-halogenethylgruppe, eller den aminobeskyttende gruppe er en β-halogenethoxycarbonyl-gruppe, er reduktionsmidlet fortrinsvis metallisk zink med en syre (f.eks. eddikesyre) eller en alkohol (f.eks. methanol eller ethanol). Arten af det anvendte opløsningsmiddel er ikke kritisk, blot det ikke har nogen skadelig virkning på reaktionen. Egnede opløsningsmidler inkluderer alkoholer, såsom methanol eller ethanol, og ethere, såsom tetrahydrofuran og dioxan. Reaktionstemperaturen er heller ikke kritisk, og af nemhedsgrunde foretrækkes det derfor at udføre reaktionen ved omkring stuetemperatur. Den tid, som kræves til reaktionen, vil hovedsageligt variere afhængigt af reduktionsmidlets art, men vil almindeligvis være 5-60 minutter.

11

DK 155331 B

Efter fuldførelse af reaktionen kan produktet udvindes ved konventionelle metoder. F.eks. kan opløsningsmidlet efter frafiltrering af uopløselige stoffer fra reaktionsblandingen fjernes ved destillation under formindsket tryk, og en organisk væske, såsom ethanol, kan sættes til remanensen, hvorefter blandingen får lov at stå til opnåelse af det ønskede produkt i krystallinsk form.

Hydrolysereaktionen, som kan udføres før eller efter reduktionen, kan gennemføres ved, at forbindelsen med formlen (IV) eller det ved reduktion af forbindelsen med formlen (IV) opnåede produkt bringes i kontakt med en base i nærvær af et opløsningsmiddel for at fjerne acyl-gruppen repræsenteret ved R'. Den anvendte base er fortrinsvis ammoniak eller et alkalimetalalkoxid, f.eks. natriummethoxid, natriumethoxid eller kalium-t-butoxid.

Ethvert opløsningsmiddel, som ikke skader reaktionen, kan anvendes, selv om det foretrækkes at anvende en alkohol, såsom methanol, ethanol eller t-butanol, eller en blanding af en eller flere af disse alkoholer med et eller flere andre organiske opløsningsmidler, såsom ethere (f.eks. tetrahydrofuran eller dioxan) eller halogencar-bonhydrider (f.eks. methylenchlorid eller chloroform).

Reaktionen udføres fortrinsvis under vandfri betingelser. Der er ingen særlig grænse for reaktionstemperaturen, og temperaturer inden for området fra -30 til +50 o o C, og mest foretrukket fra 0 C til omkring stuetemperatur, giver gode resultater. Reaktionstiden vil variere, hovedsageligt afhængigt af reaktionstemperaturen, men vil i almindelighed være 2-20 timer.

Efter fuldførelse af reaktionen kan produktet udvindes fra reaktionsblandingen ved konventionelle midler.

F.eks. kan opløsningsmidlet afdampes fra reaktionsbian- 12

DK 155331 B

dingen under formindsket tryk, og remanensen opløses i en lille mængde vandfrit methanol, hvorefter tilsætning af chloroform vil resultere i krystaller, som kan filtreres .

Hydrolysen af forbindelsen (IV) eller det ved reduktion af forbindelsen (IV) opnåede produkt, hvori R4' er en alkylgruppe, en cycloalkylgruppe, en aralkylgruppe eller en arylgruppe, til forbindelsen med formlen (I), hvori R4 er hydrogen, udføres fortrinsvis ved omkring pH 11 under anvendelse af ammoniumhydroxid i nærvær af et opløsningsmiddel. Opløsningsmidlets art er ikke begrænset, blot det ikke virker skadeligt på reaktionen, og i almindelighed foretrækkes det at anvende en blanding af en alkohol (f.eks. methanol eller ethanol) med vand. Der er heller ingen særlig begrænsning på reaktionstemperaturen, og i almindelighed foretrækkes det at udføre reak- o tionen ved en temperatur mellem -10 og +50 C, og af nemhedsgrunde udføres reaktionen fortrinsvis ved omkring stuetemperatur. Den tid, som kræves til reaktionen, vil hovedsageligt afhænge af reaktionstemperaturen, men vil almindeligvis være 3-24 timer.

Efter fuldførelse af reaktionen kan produktet udvindes ved konventionelle midler. F.eks. kan opløsningsmidlet fjernes fra reaktionsblandingen ved destillation under formindsket tryk, og remanensen derpå renses ved fraktionering ved præparativ tyndtlagskromatografi på sili-ca-gel. Den opnåede fraktion indeholdende den ønskede forbindelse kan ekstraheres med et organisk opløsningsmiddel, såsom methanol, og opløsningsmidlet derpå fjernes fra ekstrakten ved destillation. Tilsætning af en organisk væske, såsom ethanol, til remanensen og henstand af blandingen i kulden, f.eks. i et køleskab, gi- 13

DK 155331 B

ver det ønskede produkt i form af krystaller.

Det foretrækkes at udføre hyrolysen af acylgruppen (R*) før reduktionen.

5-fluoruracil-derivater med formlen (I), hvori R3 betyder en aminogruppe, kan omdannes til farmaceutisk acceptable syreadditionssalte ved konventionelle midler. Eksempler på egnede salte inkluderer syreadditionssaltene af mineralsyrer, f.eks. saltsyre, hyrogenbromidsyre, svovlsyre eller phosphorsyre, eller af organiske syrer, f.eks. oxalsyre, ravsyre, maleinsyre eller citronsyre.

Opfindelsen belyses nærmere ved den følgende præparation, som belyser fremstillingen af et udgangsmateriale for mellemprodukterne ifølge opfindelsen, og ved de efterfølgende eksempler, der belyser fremstillingen af mellemprodukterne ifølge opfindelsen og deres anvendelse til fremstilling af de antitumoralt aktive forbindelser med formlen (I).

14

DK 155302 B

O

flere andre pesticidt aktive forbindelser og, om ønsket, en eller flere fordragelige pesticidt acceptable fortyndere eller bærere, overfladeaktive midler og almindelige hjælpestoffer som før beskrevet. Eksempler på andre aktive 5 forbindelser, som kan indgå i eller anvendes i forbindelse med de herbicide sammensætninger ifølge opfindelsen, omfatter herbicider til f.eks. at øge spektret dvs. mængden af ukrudtsarterne, der bekæmpes, f.eks. alachlor 10 15 20 25 1 35 15

DK 155331 B

EKSEMPEL 1

Methyl-1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-O-acetyl-g-D-qlucopyranuronat ¢61)5^20^(1.

cmcg T h ifi

/1V

i OCOCSi3 > CHsCOO^/l 00C.Cfj3 7,9 g (24,2 ramol) af sølvsaltet af 02-benzyl-5-fluorura-cil (fremstillet som beskrevet i præparationen) blev suspenderet i 320 ml tørt xylen, hvorefter omkring 90 ml af opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under anvendelse af en vandfælde til at fjerne vand i suspensionen. Den resterende blanding fik derpå lov at afkøles. Til suspensionen sattes derpå 9,1 g (24,2 mmol) me-' thyl-2,3,4-tri-O-acetyl-l-brom-deoxy-a-D-glucopyranuro-nat, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 5 minutter. Derefter fik blandingen lov at afkøles, og uopløselige stoffer blev frafiltreret. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under formindsket tryk, og remanensen blev opløst i chloroform. Chloroformopløsnin-gen blev vasket successivt med 5 vægt-% vandig natrium-hydrogencarbonatopløsning og 20 vægt-% vandig natrium af 16

DK 155331 B

chloroformfaserne blev opløsningsmidlet afdestilleret til opnåelse af en karamellignende remanens. Der sattes ethanol til denne remanens, og blandingen fik lov at stå o natten over ved 4 C, hvorved der blev opnået 7,3 g af det ønskede methyl-l-O-acetyl-B-D-glucopyranuronat i o form af krystaller, som smeltede ved 120-121 C.

Elementanalyse;

Beregnet for C24H25O11N2F: C 53,73 - H 4,70 - N 5,22 - F 3,54 Fundet: C 53,94 - H 4,56 - N 5,19 - F 3,48.

Ultraviolet absorptionsspektrum: xmax(°'1N HC1, CH3OH) 271 nm (ε, 8000) *max(CH OH) 271 nm (ε, 7300) *max(°f1N NaOH, CH3OH) 270 nm {e, 9000).

EKSEMPEL 2

Methyl-l-Q-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-g-D- glucopyranuronat.

CH3O.CO ^

Jkj (oh )

1 OH

17

DK 155331 B

Til 6,06 g (11,3 mmol) methyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluor-pyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-0-acetyl-8-D-glucopyranuronat (fremstillet som beskrevet i eksempel 1) sattes 70 ml af en blanding af vandfrit methanol og methylenchlorid i volumenforholdet 3:2. Efter afkøling af blandingen med isvand tilsattes 6,6 ml af en IN methanolisk opløsning af natriummethoxid, og blandingen blev øjeblikkeligt omrørt. Blandingen blev derpå omrørt i yderligere 40 πύο nutter ved 0 C. Efter fuldførelse af reaktionen tilsattes 2,5 ml IN saltsyre for at neutralisere blandingen, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation. Remanensen blev opløst i chloroform, og chloroformopløsnin-gen blev derpå vasket med vand og tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Opløsningsmidlet blev fjernet fra den tørrede opløsning ved destillation, hvorved der blev opnået 4,46 g af en karamellignende remanens. Denne remanens blev underkastet søjlekromatografi på 100 g silica-gel under anvendelse af chloroform indeholdende 2,5 volumenprocent methanol. Eluatet blev opsamlet, og opløsningsmidlet fjernet ved destillation. Der sattes ethanol til remenensen, og den fik derpå lov at stå. De udfældede krystaller blev udvundet ved filtrering, hvorved der blev opnået 1,78 g af det ønskede methyl-l-0-(2-benzyl- oxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-(J-D-glucopyranuronat i form o af hvide krystaller, der smeltede ved 159-160 C. Yderligere 540 mg sekundære krystaller blev opnået ud fra modervæsken.

Elementanalyse:

Beregnet for Ci8H19°8N2F: C 52,68 - H 4,67 - N 6,83 - F 4,63 Fundet: C 53,05 - H 4,50 - N 6,93 - F 4,41.

m 18

DK 155331 B

Ultraviolet absorptionsspektrum:

XmaxiOfiN HC1) 269 nm (ε, 7100)

Xmax(H °) 270 nm (ε, 7300) *max(°' 1 NaOH) 269 nm (ε, 7700).

EKSEMPEL 3

Methyl-l-Q-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-B-D-glucopyranuronat.

EH3MQ γΝ

J—V

kj/1

·* CH

2,03 g (4,95 mmol) methy1-1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyri-midin-4-yl)-|J-D-glucopyranuronat blev opløst i 100 ml vandfrit methanol. Atmosfæren i reaktionsbeholderen indeholdende opløsningen blev vasket med nitrogen, og derpå tilsattes 400 mg 10 vægt-% palladium på kul. Atmosfæren blev igen erstattet med frisk nitrogengas, og derpå indførtes hydrogengas under omrøring ved atmosfærisk tryk i 15 minutter. Efter fuldførelse af den katalytiske reduktion blev uopløselige stoffer frafiltreret, og opløsningsmidlet derpå fjernet ved destillation under formindsket tryk. Der sattes ethanol til de udfældede krystaller, og blandingen blev derefter filtreret, hvorved 19

DK 155331 B

der blev opnået 1,529 g af det ønskede methyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-D-glucopyranuronat (forbindelse 2) i form af hvide krystaller, der smeltede ved 122-124 °C.

Elementanalyse:

Beregnet for C11H13O8N2F.O.5H2O: C 40,13 - H 4,29 - N 8,51 - F 5,77 Fundet: C 39,97 - H 4,64 - N 8,44 - F 5,47.

Ultraviolet absorptionssepktrum: (H9O) 288 nm (ε, 5700).

De opnåede krystaller blev omkrystalliseret fra en blanding af vandfrit methanol og ethanol i volumenforholdet 1:1, hvorved der blev opnået hvide nåle, der smeltede ved 127-128 °C.

EKSEMPEL 4 1-0-(2-benxyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-β-D-qlucopyranu-ronsyre.

WH20 h\Af COOH 1 r l—oo (CH 1/ .

' QH

i 20

DK 155331 B

1,025 g (2,5 mmol) methyl-0-(2-benxyloxy-5-fluorpyrimi-din-4-yl)-(3-D-glucopyranuronat (opnået som beskrevet i eksempel 2) blev opløst i 23 ml af en blanding af methanol, vand og koncentreret ammoniakvand i volumenforholdet 3:3,9:0,1. Opløsningen blev derpå omrørt ved stuetemperatur i 24 timer. Derefter blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under formindsket tryk til opnåelse af 1,2 g af en karamellignende remanens. Denne remanens blev underkastet præparativ tyndtlagskromatografi på silicagel under anvendelse af chloroform indeholdende 35 volumenprocent methanol som udviklingsopløsningsmiddel. En fraktion indeholdende den ønskede forbindelse blev ekstraheret med methanol, og opløsningsmidlet blev afdampet fra ekstrakten. Der sattes ethanol til den resulterende karamellignende remanens, og blandingen fik lov at stå i køleskab natten over. De udfældede krystaller blev opsamlet ved filtrering, hvorved der blev opnået 724,5 mg af det ønskede produkt som hvi- o de krystaller, der smeltede ved 129-130 C.

Elementanalyse:

Beregnet for C17H17O8N2F.2H2O: C 47,23 - H 4,90 - N 6,48 - F 4,39 Fundet: C 47,77 - H 4,60 - N 6,39 - F 4,00.

Ultraviolet absorptionsspektrum: xmax(PH 4,01) 269 nm (ε, 8800)

Xmax(H2°) 269 nm (ε, 8400)

Xmax(pH 9,18) 269 nm (ε, 8500).

EKSEMPEL 5

DK 155331 B

21 1-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-g-D-glucopyranuron-syre.

H

°YK

COOH I F

A

MH . / • \! /

1 OH

362,6 mg 1-0-( 2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-fi-D-glucopyranuronsyre blev opløst i 20 ml vandfrit methanol. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev erstattet med nitrogengas, og derpå sattes 72,5 mg 10 vægt-% palladium på kul til opløsningen. Blandingen blev bmrørt ved stuetemperatur, medens der indførtes hydrogengas i den. Efter fuldførelse af reaktionen blev katalysatoren frafiltreret fra reaktionsblandingen, og opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under formindsket tryk til opnåelse af et krystallinsk pulver. Dette pulver blev suspenderet i et lille volumen ethanol, genvundet ved filtrering og vasket, hvorved der blev opnået 254 mg af den ønskede 1-0-( 5-f luor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-(J-D-gluco-pyranuronsyre (forbindelse 1) som et hvidt pulver.

22

DK 155331 B

Elementarily se:

Beregnet for CyoHnOg^F: C 39,2 - H 3,62 - N 9,15 - F 6,20

Fundetϊ C 38,95 - H 3,51 - N 9,01 - F 6,31.

Ultraviolet absorptionsspektrum: ^max®2®) 288 nm.

EKSEMPEL 6

Methyl-l-O-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-O-aeefcyl-B-D-glucopyranuronat.

IL· X.

CH3O.CO I f 1—ti. o CHjCOoVses^ DOCCH3 1,2 g methyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)- 2,3,4-tri-0-acetyl-8~D-glucopyranuronat (fremstillet som beskrevet i eksempel 1) blev opløst i 120 ml vandfrit methanol. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev erstattet med nitrogen, og derpå sattes 240 mg 10 vægt-% pal-ladium-på-kul til opløsningen. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev igen erstattet med frisk nitrogengas, og 23

DK 155331 B

blandingen blev derpå omrørt i 15 minutter, medens der indførtes hydrogengas under atmosfærisk tryk. Efter fuldførelse af reaktionen blev uopløselige stoffer fjernet fra reaktionsblandingen, og derpå blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under formindsket tryk.

Der sattes ethanol til remanensen, og de udfældede krystaller blev udvundet ved filtrering, hvorved der blev opnået 891 mg af det ønskede methyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-0-acetyl-$-D-glucopyranuro-nat i form af hvide krystaller, der smeltede ved 115-117 C. Yderligere 106 mg sekundære krystaller blev opnået fra modervæsken.

Elementanalyse:

Beregnet for C17H19O11N2F.H2O: C 43,97 - H 4,56 - N 6,03 - F 4,10 Fundet: C 44,70 - H 4,55 - N 5,89 - F 4,26.

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(H20) 288 nm (£* 4800).

EKSEMPEL 7 24

DK 15533 1 B

Isopropyl-O-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-Q-acetyl-B-D-glucopyranuronat.

«>vAf

P^CHOXQ I

} 00¾ 3,27 g (10 mmol) af sølvsaltet af 02-benzyl-5-fluorura-cil blev suspenderet i 150 ml tørt xylen. For at fjerne vandet blev omkring 40 ml af opløsningsmidlet afdestil-leret under atmosfærisk tryk, og derpå fik den resterende suspension lov at afkøles. Til suspensionen sattes 4,25 g isopropyl-2,3,4-tri-0-acetyl-l-brom-l-deoxy-a-D-glucopyranuronat, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 5 minutter. Efter fuldførelse af reaktionen fik blandingen lov at afkøles, og uopløselige stoffer blev derefter frafiltreret. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation under formindsket tryk og efterlod en remanens, som opløstes i 100 ml chloroform. Chloroformopløsningen blev vasket successivt med 50 ml 5% vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og 50 ml 20% vandig opløsning af natriumchlorid. De vandige vaskeopløsninger blev ekstraheret igen med 50 ml chloro- 25

DK 155331 B

form, og alle chloroformfaserne blev kombineret og tørret. Opløsningsmidlet blev fjernet ved destillation til opnåelse af en farveløs karamellignende remanens. Denne remanens blev opløst i ethanol, og opløsningen fik lov at stå natten over i køleskab. De udfældede krystaller blev opsamlet ved filtrering, hvorved der blev opnået 4,97 g af det ønskede isopropyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluor-pyrimidin-4-yl )-2,3,4-tr i-O-acetyl-p-D-glucopyran-uronat i form af hvide krystaller, der smeltede ved 138-139 °C.

Elementanalyse:

Beregnet for C26H29°11N2F: C 55,32 - H 5,18 - N 5,00 - F 3,37 Fundet: C 55,08 - H 5,21 - N 4,93 - F 3,12.

Ultraviolet absorptionsspektrum: *max(50% °'1N HC1' 50% ch3oh) 270 nm (ε, 10500)

Xmax(50% CH3OH, 50% H20) 270 nm (e, 10300)

Xmax(50% 0,IN NaOH, 50% CH3OH) 270 nm (ε, 10800).

EKSEMPEL 8 26

DK 155331 B

Isopropyl-1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-β-Ρ-qlucopyranuronat♦

C8H5CH2O

L X

F

tCH3l2CHO.CC

Q' ’

! OH

100 ml vandfrit methanol blev fyldt i en trehalset kolbe efterfulgt af 0,366 g metallisk natrium. Blandingen blev afkølet til -30 medens fugtighed blev holdt ude. Til den methanoliske opløsning af natriummethoxid sattes 4,50 g isopropyl-l-0-(2-bensyloxy-5-£luor-pyrimiclin~4-yl)-2,3,4-tri-0-acetyl-B-D-glucopyranuronat, og blandingen blev omrørt i 6 timer. Efter fuldførelse af reaktionen blev reaktionsblandingen nautraliseret ved tilsætning af eddikesyre og derpå inddampet til tørhed. Remanensen blev opløst i 100 ml ethylacetat, og ethylacetat-opløsningen blev vasket to gange med en 2,5 vægt-% vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og med mættet vandig natriumchloridopløsning. Den organiske fase blev tørret over magnesiumsulfat, og derpå blev opløsnings

DK 155331B

27 midlet fjernet ved destillation under formindsket tryk/ hvorved den efterlod en remanens, som blev omkrystalliseret fra methanol til opnåelse af det ønskede isopro- pyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-p-D-glucopy- o ranuronat, smeltepunkt 68-69 C.

Elementanalyse:

Beregnet for C20H23°8N2^*1/3H2° C 54,05 - H 5,37 - N 6,30 - F 4,28 Fundet: C 54,06 - H 5,45 - N 6,24 - F 4,04.

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(CH30H) 270 nm (ε, 7300).

EKSEMPEL 9

Isopropyl-l-O-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-β-ρ-glucopyranuronat.

i ·

"Y*Y

H Jk <

ICHohCHD-CO

iH ' ΜΗ J /

OiMaeJr 1 OH

28

DK 155331 B

0,46 g isopropyl-l-Q-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-β-D-glucopyranuronsfc blev opløst i 40 ml vandfrit methanol. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev erstattet med nitrogas, og derpå tilsattes 52,5 mg 10 vægf-% palladium på kul efterfulgt af hydrogengas under atmosfærisk tryk. Efter at der var absorberet 23 ml hydrogengas, blev katalysatoren fjernet fra reaktionsblandingen ved filtrering, og opløsningsmidlet derpå afdestilleret under formindsket tryk. Efter tilsætning af vandfrit methanol til reaktionsblandingen udfældedes krystaller, som blev opsamlet ved filtrering til opnåelse af det ønskede isopropy1-1-0-(5-£luor-lH-oxopyrimidin-4-yl)-ø- D-glucopyranuronat {forbindele 5), smeltepunkt 151-152 0

Co

Elementanalyse:

Beregnet for C^HxgOgMgFo S/BHgQ: C 42,21 - H 5,29 - N 7,57 - P 5,14 Fundet: C 42,25 - H 5,08 - N 7,63 - F 4,71

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(pH 6,86 phosphatpuffer) 288 nm (e, 5200) EKSEMPEL 10-17

Forbindelserne 3, 4, 6, 7, 8, 9, 13 og 14 (identificeret 1 den ovenstående liste) blev fremstillet under anvendelse af den i eksempel 7, 8 og 9 beskrevne fremgangsmåde, undtagen at det i eksempel 7 anvendte isopropyl- 2, 3 , 4-tri-O-acetyl-l-brom-l-deoxy-a-D-glucopyranuronat blev erstattet med det tilsvarende halogensaccharid til opnåelse af en forbindelse med den følgende formel: 29

DK 155331 B

VK

R%CO F

)—Vi • (oh i mJ(

OH

1 o hvori RXiS har den betydning, som er angivet i den følgende tabel 6. De fremstillede forbindelsers egenskaber er anført i de følgende tabeller 6 og 7.

30

DK 155331 B

—I ΓΠ ^ ^ T p

“S' I j I

g : S i c I i | ϊ a o [ 3 <H I ! I : ‘ P <P - I 5 +3 S3 ,·—s ,—\ j r~\ j y'-N / N /'"M I VM i M ft o ooo.o oo[o;

ω -P O ' o o o o. O o S P

ft cd cTi I V S- CO Φ V- - O 5 CQ B . <S- UK i Lf\ 4 L ’ I ^ I : i P-l I v j 'w' I ^—S % f J s^i S w' -p m I \ + f.

ω o co co I od co co co I cg f cu ; η ί I co -CO CO co oo rø I O) o.; O ft CM CM CM CM CM CM | CM . | •h 1 is i

i> vo { I I I

os oo I - ' i i -p vo i I I I i S 5 I [ j * I i _I ‘I _j y s i o 111 v" i: i'; i ^ i ^ 9 ω I K\ [ K\ I 4" I (C\ J CM I CM I CM ! " S +»-p v I <r I <r- vr v- 1 ·\ I ~ 6:71 * Η^ί ^ i |.| |i i j i I 1 i i Ja, ; Φ0 O (O 4- o CO VD vo ^ £ ; S ίί O f CM f .fOl I 4- j K\ CM I CM j CM !· røftwl^r IV { v I v v- { v- s v- j * j i 1 oi [ 1 1 ! CM I K\ i fC\ i

: ( ^ B B i ^ S

K\ ΓΟ, ros ΚΛ O o / \ I

KM B B M B ^ · I ! .„· i I

B · O O O o. B U\ w ί I

O CMlKN I v Ό Ιλ J \ cm cm _ l ^ BIO:, c^ - l \ B · OJ CM O I CM Bil B O B B CM B cvr _ O I i / i O O B O B Vi

v-y w O w O ! I

I ! I 1 · Y I

. i i S J ^ Ϊ ,q cq o KV 4" VD O- CO [2 ^ PH p O <D S3 j ^___________I .....—' • .□ I—i CM ΡΛ <t LTN SP f i— CQ · i—J i—1 r-H i—i r—j r—ξ i—! I J—i B s .__;_._________1- 31

DK 155331 B

κ\ (A ca la I fA O O OJ

O- LA OJ fe i LO lD LA LO

Pr. » » · · j 0 ' * ' · * LA lA LA lA -4 4" -3*' 4

· NA O CO LA CM O <A CA

CO ΓΑΟ CM j OJ V CA 00

P: H o- o- o- O- EN en cD cD

•P --r---—--—I-----:---- r§ V- O CM C> 4 CM -¾ CA l g O O 4 4- fA I CN LA LA j

γ*ί{ t-j—t g · f - e el o · | l I

pq 1-4 LA LA LA LA LA la LA I LA I

OJ 4 Oj CA fA O 4 I CM j ΓΑ fe LO O .OJ (AjOjOJ!

ο · β · 9 4 o i ° I 0 I

V oj ia . 4 lo 4 ζ- co 4 4 4- .-4- 4' j . J -4 j 4-

cr\ I 4- LA o fA i fe LA I EN

4 v CA O EN EN LO LA

Ccj · » · ofcfc oj® IA LA 4- LA 4 4- 4- 4-

__ I

LO IN O IN EN LA LO 4* j ^ O f LA NA tA Ά CA CO ‘EN i vo £3 t « · ! 0 -‘'S0 · i · Γ- 4: CO (N « CN J EN CN I LO LO i LO I - ^____I_j i ‘ .. j:

S LA CA OJ IN LA i O EN ! CM

Γη IN OJ LO LA IN O I 4 CO

Jp H · · * S o c S w I 0 I * I

S4 4 IA LA LA LAIlD LO -LA

ω _________ ________j

CM " fe CA j fe LA i ΕΝ I LO

LO OJ - EN OJ IN f LP O OJ

O · o f 0 1 0 · ! c I 0 0 0 I

fe .CM I ΓΑ j 4 i LO 1 4" ’-N Cp I

I 4- 4- - j 4^_I 4 j 4 j fe 4 4- j o 00 I O I 0.1

; (M OJ I CM I Ϊ CM CM i - CM

w . ixi W .1 fcd . fri i K

K\ la lK S O I ia la O la,

i \ \ \ CM o « CM

i, oj. lo Lo rd O fe- W -r- rrt_l * · 6 » o I o · , I · .2 P Cq- &j · ’ pa ‘ I Qq I (34 ' I J=) · I pq i (4

oj cm Pli OJ i oj i CM CM[ CVI

0 O CO OD CO CO j CO CO ! CO . CO · O O O o O i o o o P ^ LA IN (A CA I fe fe IA ! fe i

£ fe fe fe fej OJ CM i OJ I OJ

S W K tø ixi, 1 td tø K tø 4

OJ ΓΑ 4" 4 j LA LA LO j LO

fe fe fe fe fe i fe fe I fe OOO O . O j O j O I O -

i 1 I i j I

β ! Ilt »ri 0) ® S ^ f I st

w* P . n B

O4-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-B-D-flucopyranosyl)-02-benz- yl-5-fluoruracil.

EKSEMPEL 18

DK 155331B

32 \

AcOCH2 7

Al i

Sfc / OAeHf / OÅc

Ac = Acetyl 4,91 g (15 mmol) af sølvsaltet af 02-benzyl-5-fluoruracil blev suspenderet i 220 ml tørt xylen. 20 ml xylen afdestilleredes derefter for at fjerne alt vand. Derefter sattes 6,17 g (15 mmol) 2,3,4,6-tetra-O-acetyl-a-D-glucopyranosylbromid til suspensionen, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 5 timer. Efter at reaktionen var fuldført, blev der frafiltreret et gråliggult, uopløseligt materiale, og opløsningen blev derpå koncentreret under formindsket tryk og tørret. Remanensen blev opløst i 100 ml ethylacetat, og opløsningen blev vasket en gang med 70 ml af en 5 vægt-% vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og to gange med 70 ml vand. De vandige vaskeopløsninger blev ekstraheret flere gange med 50 ml ethylacetat, og de kombinerede ethylace- 33

DK 155331 B

tatopløsninger blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter opløsningsmidlet blev afdestilleret under formindsket tryk til opnåelse af et karamellignende stof, som derpå blev opløst i ethanol o Tilsætning af isopropylalkohol til ethanolopløsningen førte til udfældning af krystaller, som blev frafiltreret og tørret, hvorved der blev opnået 5,795 g af det ønskede 04-{2,3,4,6-tetra-0-acetyl-8-D-glucopyranosyl)-Q^-benzyl-5-fluoruracil i form af hvide krystaller, der smelter ved 95-96 °C.

Elementanalyse:

Beregnet for C25H27O11N2F: C 54,54 - H 4,94 - N 5,09 - P 3,26 Fundet: C 54,33 - H 4,92 - N 4,70 - F 3,26

Ultraviolet absorptionsspektrum: *max(°'1N HC1 1 CH3OH) 270 nm (ε, 7200)

Xmax(CH OH) 270 nm (ε, 7100)

Xmax(0,!N NaOH i CH3OH) 270 nm (ε, 8300) EKSEMPEL 19 O4-(2,3 r 4,6-tetra-O-acetyl-g-D-qlucopyranosyl)-5- fluoruracil.

34

DK 155331 B

Ϊ X i

°Y'K

AcOCH2 I fI

J—0 0 / (OÅC )

Vj/I / OAcr-^Y 1 OAc 7

Ac = acetyl 5,795 g (10,5 mmol) 04-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-fJ-D-glu-copyranosyl)-02-benzyl-5-fluoruracil blev opløst i 130 ml destilleret tetrahydrofuran. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev derpå erstattet med nitrogengas, hvorefter der sattes 526 mg 10 vægt-% palladium på kul til opløsningen. Der indførtes hydrogengas i beholderen, og blandingen blev under rystning reduceret ved stuetemperatur og atmosfærisk tryk, indtil der var blevet absorberet 254 ml hydrogen. Atmosfæren i beholderen blev derpå igen erstattet med hydrogengas, der tilsattes yderli-

DK 155331 B

35 gere 52 mg palladium på kul og blev absorberet yderligere 14 ml hydrogengas. Da reaktionen var fuldført, blev atmosfæren i beholderen erstattet med hydrogengas, og katalysatoren blev frafiltreret. Filtratet blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk og derpå tørret til opnåelse af en krystallinsk remanens, som tilsattes methanol. De resulterende krystaller blev frafiltreret, hvorved der blev opnået 4,318 g af det ønskede 0^-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-8-D-glucopyranosyl)-5- o fluoruracil (forbindelse 15), smp.: 154-155 C.

Elementanalyse:

Beregnet for C18H21O11N2F: C 46,96 - H 4,60 - N 6,09 - F 4,13 Fundet: C 46,87 - H 4,67 - N 5,93 - F 3,94

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(CH30H) 288 nm (ε, 4200).

O4-(β-D-qlucopyranosyl)-5-fluoruracil

DK 155331B

EKSEMPEL 20 36 | „ i \ γκ , HQCH2 S ; ] A’ ' * VS- ^

Hh 2,3 g (5 mmol) O4-(2,3,4,6-tetra-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl) -5-fluoruracil blev opløst i 125 ml vandfrit methanol, og opløsningen blev mættet med tør ammoniak under isafkøling, omrørt i 6 timer og fik derpå lov at stå natten over i køleskab. Da reaktionen var fuldført, blev opløsningsmidlet afdestilleret under formindsket tryk, der tilsattes vandfrit ethanol, og derpå blev også dette afdestilleret. Det således opnåede gelatinøse stof blev frafiltreret og tørret, hvorved der blev opnået 1,40 g af den ønskede O4-(β-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil (forbindelse 10) i form af et hvidt pulver, som smeltede ved 114-115 °C.

Elementanalyse:

Beregnet for CiøHuOy^F.O.SEtøO: C 39,87 - H 4,68 - N 9,30 - P 6,31 Fundet: C 39,36 - H 5,02 - N 9,31 - P 6,13.

DK 155331B

37

Ultraviolet absorptionsspektrum: \max(0,02M phosphatpuffer, pH 6,86) 286 nm (ε, 4600).

EKSEMPEL 21 02-benzyl-04-(8-D-glucopyranosyl)-5-£luoruracil

D0CH2 F

/K«.

fr ^ ' /

OH

550 mg 04-(2,3,4,6-tetra-0-acetyl-8-D-glucopyranosyl)- 02-benzyl-5-fluoruracil (fremstillet som beskrevet i eksempel 18) blev opløst i 100 ml vandfrit methanol, og blandingen blev mættet med tørt ammoniak ved stuetemperatur og efter tæt lukning af reaktionsbeholderen omrørt i 2 timer. Da reaktionen var fuldført, blev opløsningsmidlet afdestilleret under formindsket tryk, hvorved det efterlod 410 mg af et karamellignende stof, som blev underkastet tyndtlagskromatografi under anvendelse af en fraktionerings-silicagel-plade, elueret og renset med et udviklingsmiddel bestående af chloroform indeholdende 10 volumenprocent methanol. Der blev opnået 310 mg af den ønskede 02-benzyl-04-(β-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil i form af et karamellignende stof, som gav en enkelt plet ved tyndlagskromatografi og havde et smeltepunkt på EKSEMPEL 22 38

DK 155331 B

82-83 °C.

O4-(β-D-qlucopyranosyl)-5-fluoruracil 310 mg 02-benzyl-04-(B-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil blev opløst i 20 ml vandfrit methanol, og der tilsattes 50 mg 10 vægt-% palladium på kul. Blandingen blev omrørt ved stuetemperatur og atmosfærisk tryk under en strøm af j hydrogengas. Da der var blevet absorberet 16 ml hydrogen, blev katalysatoren frafiltreret efter 5 minutter, og derpå blev opløsningsmidlet afdestilleret under formindsket tryk til opnåelse af et karamellignende stof,, som blev opløst i ethanol. Ethanolopløsningen fik lov at stå, hvorved der udfældedes krystaller. Disse krystaller blev frafiltreret til opnåelse af den ønskede 04-(8-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil som et hvidt pulver. Dette produkts egenskaber var identiske med egenskaberne af den forbindelse, som blev fremstillet i eksempel 20.

39 EKSEMPEL 23

DK 15533 1 B

Methy1-1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-O-acetyl-g-D-qalactopyranuronat.

L X i CH30.CO γ F' v OÅC / OÅc 7,9 g af sølvsaltet af 02-benzyl-5-fluoruracil blev suspenderet i 320 ml tørt toluen, og derpå blev omkring 90 ml af opløsningsmidlet fjernet ved destillation under anvendelse af en vandfælde til at fjerne vandet» Den resterende suspension fik lov at afkøles. Derpå tilsattes 9,1 g methy1-2,3,4-tri-O-acetyl-l-brom-l-deoxy-a-D-ga-lactopyranuronat, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 30 minutter. Efter fuldførelse af reaktionen blev uopløselige stoffer fjernet ved filtrering, og opløsningsmidlet afdestilleret under formindsket tryk.

Remanensen blev opløst i 300 ml ethylacetat, og den resulterende opløsning blev vasket successivt med 200 ml vand, 300 ml 5 vægt-% vandig opløsning af natriumhydro- 40

DK 155331 B

gencarbonat og 200 ml 20 vægt-% vandig opløsning af na-triumchlorid. Hver af disse vandige vaskeopløsninger blev ekstraheret med 200 ml ethylacetat, og ethylacetat-opløsningerne blev kombineret. De kombinerede opløsninger blev tørret over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter opløsningsmidlet blev afdestilleret og efterlod en karamellignende remanens. Denne remanens blev renset ved søjlekromatografi på silica-gel under anvendelse af chloroform som elueringsmiddel, hvorved der blev opnået 10,1 g af det ønskede methyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluorpy-rimidin-4-yl)-2,3,4-tri-0-acetyl-$-D-galactopyranuronat som et karamellignende stof, der udviste en enkelt plet ved tyndtlagskromatografi.

Elementanalyse:

Beregnet for C24H25O11N2F: C 53,73 - H 4,70 - N 5,22 - F 3,54 ' Fundet: C 53,96 - H 4,55 - N 5,20 - F 3,52.

Ultraviolet absorptionsspektrum:

XmaxiO/OiN HC1, CH3OH) 271 nm W(CH3OH)

XmaxiO/iN NaOH, CH3OH) 270 nm.

EKSEMPEL 24

DK 155331 B

41

Methyl-1-0-(2-benzyloxv-5-fluorpyrimidin-4-yl)-6~D-qa-lactopyranuronat.

CiHSCftlk^lL

CK30.C0 od—°\j° \0H y OH.

Der fremstilledes en opløsning af natriummethoxid i methanol ved opløsning af 0,55 g metallisk natrium i 160 ml vandfrit methanol, og opløsningen blev afkølet til -30 °^. Til denne opløsning sattes 6,44 g methyl-l-O-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-2,3,4-tri-O-acetyl-Ø-D-galactopyranuronat, og blandingen fik lov at reagere under vandfrie betingelser ved -30 i 6 timer. Derpå tilsattes 2,01 g eddikesyre opløst i 10 ml vandfrit methanol, og blandingens neutralitet blev bekræftet. Blandingen blev derpå inddampet til tørhed under formindsket tryk til opnåelse af en karamellignende remanens, som derefter blev opløst i 90 ml ethylacetat og vasket en gang med 100 ml af en vandig phosphatpufferopløsning (pH 7,0) og to gange med 60 ml af en 10 vægt-% vandig opløs- 42

DK 155331 B

ning af natriumchlorid. Hver vandig vaskeopløsning blev ekstraheret med 50 ml ethylacetat, og ethylacetatopløs-ningerne blev kombineret og derpå tørret over vandfrit magnesiumsulfat. Derefter blev opløsningsmidlet fjernet ved destillation under formindsket tryk, og efter at det meste af ethylacetatet var blevet fjernet, sattes 50 ml isopropylalkohol til den resterende blanding, og dette opløsningsmiddel blev gradvis fjernet. Efter at lugten af ethylacetat var fuldstændig forsvundet, blev det udfældede hvide pulverformede stof opsamlet ved filtrering og tørret, hvorved der blev opnået 1,8 g af det ønskede methyl-l-O-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-β-D-ga-lactopyranuronat.

Elementanalyse:

Beregnet for CigHigOs^F: C 52,68 - H 4,67 - N 6,83 - F 4,63 Fundet: C 52,81 - H 4,50 - N 6,91 - F 4,42.

Ultraviolet absorptionsspektrum: ^maxi®2®) 270 nm.

EKSEMPEL 25 43

DK 155331 B

Methyl-l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-g-D-galacto-pyranuronat.

H

CII30.C0 'Y^F

\ , \® ,/ /

OH

2,46 g methyl-l-O-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl) -β-D-galactopyranuronat blev opløst i 90 ml vandfrit methanol, og blandingen blev omrørt i 15 minutter i en strøm af nitrogen. Atmosfæren i reaktionsbeholderen blev derpå erstattet med nitrogengas. Der sattes 300 mg 10 vægt-% palladium på kul til opløsningen, og 134 ml hydrogengas blev absorberet ved stuetemperatur og atmosfærisk tryk.

Derefter blev katalysatoren fjernet ved filtrering, og opløsningsmidlet blev afdampet under formindsket tryk ved en badtemperatur på under 30 θ^. Efter at det meste af methanolet var afdampet, sattes 30 ml ethanol til remanensen, og inddampningen fortsatte. Denne procedure blev gentaget to gange, og derpå blev et hvidt pulverformet produkt opsamlet ved filtrering, hvorved der blev opnået 1,1 g af det ønskede methyl-l-O-(5-fluor-lH-2-oxopyr imidin-4-yl)-β-D-galactopyranuronat.

44

DK 155331 B

Elementanalyse:

Beregnet for C11H13O8N2F: C 41,26 - H 4,09 - N 8,75 - F 5,93 Fundet: C 41,55 - H 4,30 - N 8,77 - F 5,99.

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(°'02M phosphatpuffer, pH 6,86) 288 nm.

EKSEMPEL 26 1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-β-Ρ-qalactopyranuronsyre.

5 CH2Q Nv.

‘x/x-c coo;) γ f, OH—0 0 y ' OH / 1,0 g methyl-l-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-8-D-galactopyranuronat (fremstillet som beskrevet i eksempel 24) blev opløst i 23 ml af en blanding af methanol, vand og koncentreret ammoniakvand i volumenforholdet 6:3,9:0,1, og opløsningen fik derpå lov at stå i 24 timer under omrøring. Efter at reaktionen var fuldført, blev opløsningsmidlet afdestilleret fra reaktionsblandingen under formindsket tryk, hvorved den efterlod 1,1 45

DK 155331 B

g af en karamellignende remanens. Remanensen blev underkastet præparativ tyndtlagskromatografi, og en fraktion indeholdende den ønskede forbindelse blev udskilt under anvendelse af chloroform indeholdende 35 volumenprocent methanol som udviklingsmiddel. Denne fraktion blev ekstraheret med methanol, og derefter blev methanolet af-dampet fra ekstrakten til opnåelse af en karamellignende remanens. Der sattes ethanol til remanensen, og blandingen fik lov at stå i køleskab, hvorved der udfældedes et pulverformet stof, som blev opsamlet ved filtrering til opnåelse af den ønskede 1-0-(2-benzyloxy-5-fluorpyrimi-din-4-yl)-β-D-galactopyranuronsyre.

Elementanalyse:

Beregnet for C17H17O8N2F.2H2O: C 47,23 - H 4,90 - N 6,48 - F 4,39 Fundet: C 47,56 - H 4,51 - N 6,32 - F 4,21.

Ultraviolet absorptionsspektrum: ^maxi^O) 269 nm.

EKSEMPEL 27 46

DK 155331 B

l-0-(5-fluor-lH-2-oxopyrimidin-4-yl)-6-D-galactopyranu- ronsyre.

! • Y«\ ohJ—\!i

Kry '

1 OH

396 mg 1-0-{2-benzyloxy-5-fluorpyrimidin-4-yl)-B-D-ga-lactopyranuronsyre blev opløst i 20 ml vandfrit methanol, og atmosfæren i reaktionsbeholderen blev erstattet med nitrogengas. Der sattes 50 mg 10 vægt-% palladium på kul til opløsningen, og blandingen blev omrørt ved stuetemperatur under atmosfærisk tryk, medens der sendtes hydrogen igennem den, indtil der var absorberet 22 ml hydrogengas.

Efter at reaktionen var fuldført, blev katalysatoren fjernet ved filtrering, og derpå blev methanolet afdestilleret under formindsket tryk. Efter at det meste af methanolet var fjernet, sattes vandfrit ethanol til den resterende blanding, og derefter fortsattes destillationen. Det opnåede hvide pulverformede stof blev opsamlet ved filtrering, vasket med vandfrit ethanol og tørret

47 DK 155302 B

o form af gule krystaller, ud .fra 2,4-dichlor~3-methylanilin [beskrevet af Cohen og Dakin i J. Chem. Soc., 81, 1332 (1902)], 2,4-dichlor-3-methoxyphenylhydrazin, smeltepunkt 88-80°C, i form af brune krystaller, ud fra 2,4-dichlor-3-methoxyanilin, 5 3-cyano~2,4-dichlorphenylhydrazin, smeltepunkt 199-200°C, i form af et gult pulver, ud fra 3-cyano-2,4-dichloranilin [beskrevet af N.V.Philips Gloelampenfabricken i Chem.. Abs., 75, P 5527K (1971)], 4-brom-2,3-dichlorphenylhydrazin, smeltepunkt 135-137°C, i 10 form af et cremefarvet pulver,ud-fra 4-brom-2,3-dichloranilin [beskrevet af Hurtley i J. Chem. Soc., 79, 1302 (1901)], 2,3-dichlor-4-methylphenylhydrazin, smeltepunkt 111-114°C, i form af farveløse krystaller, ud fra 2,3-dichlor-4-methylanilin [beskrevet af Sylvester og Wynne i J. Chem. Soc., 1936, 691)], 15 4-brom-2-chlor-3-methylphenylhydrazin, smeltepunkt 100-103°C, i form af farveløst fast stof,ud fra 4-brom-2-chlor-3-methylanilin, 2- chlor-3,4-dimethylphenylhydrazin, smeltepunkt 71-73°C, i form af et brungult pulver, ud fra 2“chlor-3,4-dimethylanilin (beskrevet af Hinkel med flere i J. Chem. Soc. 1934, 286), 20 2 -chlor-3-cyano-4-methylphenylhydrazin, smeltepunkt 168-170°C, i form af et farveløst pulver, ud fra 2-chlor-3=cyano-4-methyl-anilin, 3- chlor-2,4-dibromphenylhydrazin, smeltepunkt 148-150°C, i form af brune krystaller, efter krystallisation fra ethanol, 25 ud fra 3-chlor-2,4-dibromanilin [beskrevet af Hurtley i J. Chem. Soc., 79, 1304 (1901)], 3- chlor-2,4-dimethylphenylhydrazon, smeltepunkt 104°C, i form af et gult pulver, ud fra 3-chlor-2,4-dimethylanilin [beskrevet af Staskun i Tetrahedron Bd. 28, 5069 (1972)], 3Q 2-brom-4-chlor-3-methylphenylhydrazin, smeltepunkt 72-73°C, i form af et grålighvidt pulver, ud fra 2-brom=4=chlor“3-methyl-anilin, 4- chlor-2,3-dimethylphenylhydrazin, smeltepunkt 69-71°C, i form af et bleget gult pulver, ud fra 4-chlor-2,3-dimethyl- 35 anilin (beskrevet af Hinkel med flere i J. Chem. Soc., 123, 2968 (1923), 48

DK 155331 B

destillation. Derefter blev suspensionen afkølet til stuetemperatur, der tilsattes en opløsning af 33,6 g (71 mmol) 3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-2-trichlorethoxycarbo-nylamino-2-a-D-glucopyranosylbromid i 100 ml tørt toluen, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 15 minutter under omrøring. Efter at reaktionen var fuldført, blev uopløselige stoffer frafiltreret, og filtratet blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk og tørret til opnåelse af en karamellignende remanens, som blev opløst i 500 ml ethylacetat og derpå vasket successivt med 300 ml af en 5 vægt-% vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat og 500 ml af en mættet vandig opløsning af natriumchlorid. Efter frafiltre-ring af uopløselige stoffer blev den organiske fase tørret med vandfrit magnesiumsulfat, og opløsningsmidlet blev afdampet under formindsket tryk, hvorved der blev opnået 43,2 g af den ønskede 0^-benzyl-04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-2-trichlorethoxycarbonylamino-fJ-D-gluco-pyranosyl)-5-fluoruracil som et karamellignende stof.

Dette stof blev anvendt uden yderligere rensning i det efterfølgende eksempel 29, men til analyseformål blev en prøve renset ved silicagel-søjlekromatografi under anvendelse af chloroform indeholdende 1 volumenprocent methanol som elueringsmiddel.

Ultraviolet absorptionsspektrum: *max(°'1N HC1 i CH3OH) 270 nm (ε, 6950) xmax(CH30H) 271 nm (ε, 7260)

XmaxiO/iN NaOH i CH3OH) 272 nm (ε, 7310).

NMR-spektrum (CDCI3) δ ppm: 6,30 (dublet, H ved 1'-stilling, = 8,5 Hz).

49

DK 155331 B

Elementanalyse:

Beregnet for C26H27O11CI3F.I/3 CHCIs: C 43,77 - H 3,81 - N 5,81 - F 2,56 Fundet: C 43,88 - H 3,66 - N 6,04 - F 2,56.

EKSEMPEL 29 ri ; OA^f !

nk2 I

Ac = acetyl 43,2 g (63,0 mmol) af det i eksempel 28 fremstillede 0^-benzyl-O^-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-deoxy-2-trichlorethoxy-carbonylamino-8-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil blev opløst i 200 ml 80% eddikesyre. Samtidig blev 20,4 g (31,5 mmol) zinkstøv suspenderet i 330 ml 80% eddikesyre, omrørt i omkring 5 minutter og afkølet til omkring 20 °c ved isafkøling. Derefter blev opløsningen under omrøring sat til suspensionen, og blandingen blev omrørt i yderligere 1 time og 10 minutter efter tilsætning af 80% eddikesyre. Efter fuldførelse af reaktionen blev uopløselige stoffer frafiltreret, og derpå blev opløsningsmid- 50

DK 155331 B

let afdarapet under formindsket tryk til opnåelse af en remanens, som blev opløst i 300 ml ethylacetat og derefter vasket successivt med 300 ml isvand, 500 ml 5 vægt-% vandig opløsning af natriumhydrogencarbonat, 200 ml vand og 200 ml mættet vandig opløsning af natriumchlorid.

Hver af de vandige vaskeopløsninger blev ekstraheret med 100 ml ethylacetat, og alle ethylacetatopløsningerne blev kombineret og tørret over vandfrit magnesiumsulfat, hvorefter opløsningsmidlet blev afdestilleret. Remanensen blev opløst i 200 ml ethanol, og opløsningen blev destilleret til et resterende volumen på omkring 100 ml, hvorefter den fik lov at stå natten over ved omkring 5 °c. De udfældede krystaller blev frafiltreret og tørret, hvorved der blev opnået 14,38 g af den ønskede O^-ben-zyl-04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-deoxy-|3-D-glucopy-ranosyl)-5-fluoruracil i form af farveløse krystaller, O n der smeltede ved 141-142 .

Ultraviolet absorptionsspektrum: *max(°'1N HC1 1 CH3OH) 270 nm (ε, 6900)

Xmax(CH30H) 271 nm (ε,6990)

Xmax(0,IN NaOH i CH3OH) 270 nm (ε, 6880) NMR-spektrum (CDCI3) 6 ppm: 8,24 (dublet, H ved 6-stilling, J6jj - F = 2,0 Hz) 5,90 (dublet, H ved l'-stilling, = 8,5 Hz) 5,40 (singlet, -CH2“CgH5).

Elementanalyse:

Beregnet for C23H26O9N3F: C 54,44 - H 5,16 - N 8,28 - F 3,74 Fundet: C 54,18 - H 5,44 - N 8,28 - F 3,45.

EKSEMPEL 30 51

DK 155331 B

O4-(3,4/ 6-tr i-0-acetyl“2-amino-2-deoxy-“B-D-qlucopyran-osyl)-5-fluoruracil♦ 1 \

AcO.CHz Y P

ΥΝΙ fej . Ki.'2

Ac = acetyl 517 mg 02-benzyl-04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-deoxy-β-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil blev opløst i 50 ml vandfrit ethanol. Derpå blev atmosfæren i reaktionsbeholderen erstattet med tør nitrogengas, der tilsattes 50 mg 10 vægt-% palladium på kulr og opløsningen blev omrørt under indføring af hydrogengas ved atmosfærisk tryk, indtil der var absorberet 20 ml hydrogengas. Efter at reaktionen var fuldført, blev katalysatoren frafiltreret, og filtratet blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk. Remanensen blev opløst i 5 ml vandfrit methanol, der tilsattes 20 ml vandfrit ethanol, 52

DK 155331 B

og opløsningen blev koncentreret ved inddampning under formindsket tryk til opnåelse af krystaller, som blev frafiltreret og tørret. Der blev opnået 250 mg af den ønskede 0^-(3,4,6-tri-0-acetul-2-amino-2-deoxy-8-D-glu-copyranosyl)-5-fluoruracil (forbindelse 12), smeltepunkt 129-130 °C (under dekomponering).

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(CH3°H) 291 nm (ε, 5010).

NMR-spektrum (dimethylsulphoxid-d) δ ppm: 8,13 (dublet, H ved 6-stilling, J6H-P = 5,5 Hz) 6,06 (dublet, H ved l'-stilling, Ji'-2'= 8,0 Hz).

Elementanalyse:

Beregnet for Ci6H2o09N3F*H20: C 44,14 - H 5,09 - N 9,65 - F 4,36 Fundet: C 44,05 - H 4,77 - N 9,39 - F 3,87.

EKSEMPEL 31 02-benzyl-0^-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-deoxy-6-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil-hydrochlorid.

3,04 g (6 mmol) 02-benzyl-0^-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-ami-no-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-flururacil, fremstillet som beskrevet i eksempel 29, blev opløst i 160 ml acetone, og der tilsattes dråbevis en opløsning af 1,96 ml diethylether indeholdende 0,95 ækvivalenter hydrogen-chlorid i 40 ml acetone. Efter at reaktionen var fuldført, blev det dannede hvide bundfald frafiltreret, vasket med acetone og tørret, hvorved der blev opnået 2,67 g af det ønskede produkt i form af hvide krystaller med . 0 et smeltepunkt på 171-172 C (under dekomponering). Fil- 53

DK 155331 B

tratet blev koncentreret til opnåelse af en krystallinsk remanens i hvortil der sattes 200 ml acetone. Ved frafil-trering af remanensen, vaskning med acetone og tørring blev der opnået yderligere 378 g af det ønskede produkt, som også havde et smeltepunkt på 171-172 °c (under dekomponer ing) .

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(CH3°H) 270 nm (ε, 7030).

NMR-spektrum (dimethylsulfoxid-dg) 6 ppm: 8,63 (dublet, H ved 6-stilling, Jgjj-p = 2*7 Hz) 6,78 (dublet, H ved l'-stilling, Ji'-2,= 8,5 Hz).

Elementanalyse:

Beregnet for C23H26O9N3F.HCI: C 50,79 - H 5,00 - N 7,73 - Cl 6,52 - F 3,49 Fundet: C 50,84 - H 4,98 - N 7,80 - Cl 6,55 - F 3,30.

EKSEMPEL 32 04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-deoxy-8-D-glucopyrano- syl)-5-fluoruracil-hydrochlforid.

54,4 mg 02-benzyl-04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-amino-2-de-oxy-{S-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil-hydrochXorid blev opløst i 50 ml vandfrit methanol. Derefter blev atmosfæren i reaktionsbeholderen erstattet med tør nitrogengas.

Der tilsattes 50 mg 10 vægt-% palladium på kul, og sendtes hydrogengas igennem opløsningen under omrøring ved atmosfærisk tryk, indtil der var absorberet 20 ml hydrogengas. Efter at reaktionen var fuldført, blev katalysatoren frafiltreret, og filtratet blev koncentreret til opnåelse af krystaller, som blev frafiltreret, vasket 54

DK 155331 B

med vandfrit ethanol og tørret, hvorved der blev opnået hvide krystaller af det ønskede 04-(3,4,6-tri-0-acetyl- 2-amino-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil-hydro- o chlorid, smeltepunkt 112-116 C (under dekomponering). Elementanalyse:

Beregnet for Ci6H20O9N3F.HCl.H2O: C 40,73 - H 4,70 - N 8,91 - Cl 7,51 - F 4,03 Fundet: C 40,66 - H 4,67 - N 9,55 - Cl 7,23 - F 3,57.

EKSEMPEL 33 02-benzyl-04-(2-amino-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil.

C5H5CH2O 'Ssy^^'sN

[/i °\j hh2 2,06 g (4 mmol) 02-benzyl-04-(3,4,6-tri-0-acetyl-2-ami- no-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil blev opløst i en blanding af 30 ml vandfrit methanol og 20 ml methy- 0 lenchlorid, og opløsningen blev afkølet til -35 C. Der tilsattes 8 ml af en IN methanolisk opløsning af natri- 55

DK 155331 B

ummethoxid, og blandingen blev holdt ved en temperatur o o mellem -30 C og -25 C i 2 timer. Efter dette tidsrum o blev opløsningen afkølet til -40 C, der tilsattes 10 ml vandfrit methanol i 528 mg eddikesyre og derpå dråbevis en opløsning af vandfrit methanol i 0,1 ml eddikesyre for at indstille pH-værdien til 6-7, hvorefter opløsningsmidlet blev afdampet under formindsket tryk til opnåelse af en gellignende remanens. Til denne remanens sattes 50 ml af en 0,1N phosphorsyrepufferopløsning og 50 ml ethylacetat, og blandingen blev grundigt omrørt til opnåelse af et bundfald, som blev knust, frafiltreret, vasket med 20 ml ethylacetat og 20 ml vand og tørret, hvorved der blev opnået 597 mg af den ønskede O^— benzyl-O4-(2-amino-2-deoxy-8-D-glucopyranosyl)-5-fluor— uracil i form af hvide krystaller, som smeltede ved 1:24-o 126 C (under dekomponering).

Ultraviolet absorptionsspektrum:

Xmax(cH3°H) 270 nm (e,6930).

NMR-spektrum (dimethylsulfoxid-dg) δ ppm: 8,50 (dublet, H ved 6-stilling, J6H-P = 2,5 Hz) 5,83 (dublet, H ved l'-stilling, i_2'= 8,0 Hz) 5,40 (singlet, -CH2-C6H5).

Elementanalyse:

Beregnet for Ci7H2oC>6N3F: C 53,54 - H 5,29 - N 11,02 - F 4,93 Fundet: C 53,50 - H 5,45 - N 11,03 - F 4,51.

EKSEMPEL 34 56

DK 15533 1 B

O4-(2-amino-2-deoxy-6-D-glucopyranosyl)-5-fluoruracil.

¥ \ VY\

CH2OH J F

r N° fe/.

1 12 762 mg (2 mmol) 0^-benzyl-04-(2-amino-2-deoxy-$-D-gluco-pyranosyl)-5-fluoruracil blev opløst i 60 ml vandfrit methanol. Atmosfæren i reaktionsbeholderen indeholdende opløsningen blev erstattet med tør nitrogengas, og derpå tilsattes 100 mg 10 vægt-% palladium på kul. Der sendtes hydrogen gennem opløsningen under omrøring ved stuetemperatur, indtil der var absorberet 46 ml hydrogen. Efter at reaktionen var fuldført, blev katalysatoren frafiltreret, og derpå blev filtratet koncentreret ved ind-dampning under formindsket tryk til opnåelse af krystaller. Et lille volumen vandfrit ethanol blev tilsat krystallerne, hvorefter de blev frafiltreret og tørret til opnåelse af den ønskede 04-( 2-amino-2-deoxy-fS-D-glucopy- raosyl)-5-fluoruracil (forbindelse 11) i form af hvide , o krystaller med et smeltepunkt på 120-130 C (under de- 57

DK 155331 B

komponering).

Elementanalyse:

Beregnet for C10H14O6N3F.H2O.CH3OH: C 38,71 - H 5,91 - N 12,31 - F 5,57 Fundet: C 38,59 - H 5,62 - N 12,06 - F 5,26.

Claims

DK 155331B 1. 5-fluoruracil-derivater til anvendelse som mellemprodukter ved fremstilling af antitumoralt aktive 5-fluor-uracil-forbindelser med den almene formel 2 pir f' j] ‘ j (1) HG hvori R2 betyder en af glycosidresterne ro.ch2 R4qC0 /=\| eller |/I N vy \or ψ OR OR Τ™Γ H R·5 H R·5 hvori R betyder hydrogen, en alifatisk acylgruppe med 2-4 carbonatomer eller en aromatisk acylgruppe med 7-11 carbonatomer, R3 betyder -OR, hvor R har den foran nævnte betydning, eller amino, benzyloxycarbonylamino, som evetuelt har en nitro- eller halogensubstituent i phe-nylringen, eller β-halogenethoxycarbonylamino, og R4 betyder hydrogen, ligekædet eller forgrenet alkyl med 1-8 carbonatomer, cycloalkyl med 5-7 ringcarbonatomer, aralkyl med 7-12 carbonatomer eller aryl med 6-10 carbonato- DK 155331 B mer, hvor den aromatiske ring i aralkyl- eller arylgrup-pen eventuelt har en substituent udvalgt blandt alkyl med 1-4 carbonatomer, alkoxy med 1-4 carbonatomer og halogen, kendetegnet ved, at de har den almene formel 3R2 r70^ S RQ hvori R2 har den ovenstående betydning, og ?7 betyder benzyl, som eventuelt har en nitro- eller halogensubsfi-tuent i phenylringen, eller β-halogenethyl, eller syreadditionssalte af sådanne forbindelser, hvori R3 er amino.