DK154857B - Fremgangsmaade til stabilisering af en proeveobjektbaerer og stabiliseret proeveobjektbaerer til bestemmelse af bloedningsblod - Google Patents

Description

i

DK 154857 B

Prøveobjektbærere og procedurer til bestemmelse af blødningsblod i fækalt materiale er velkendte. F.eks. omhandler USA patentskrift nr. 3.996.006 objektbærere med et prøveoptagende lag mellem en forplade og en bagplade, hvor der er åbnin-5 ger i for- og bagpladen, og drejelige dæksler eller klapper til at dække disse åbninger. En sådan prøveobjektbærer sælges under varemærket "Hemoccult".

Det prøveoptagende lag er generelt et absorberende papir, der er imprægneret med et guajakreagens. Den hæmoglobin-10 katalyserede oxidation af det guajakekstraktbelagte papir benyttes klinisk til bestemmelse af blødningsblod i fæces. Kort fortalt er bestemmelsesproceduren som følger:

En prøve af fækalt materiale smøres på guajakpapiret gennem en åbning i forpladen. Derpå dækkes pladen, og bagpladens 15 klap åbnes. En fremkalderopløsning, såsom hydrogenperoxid, påføres på guajakpapiret via den tilsvarende åbning i bagpladen. Hvis blod er til stede i det fækale materiale, vil guajakreaktionen farve papiret blåt. Den samlede reaktion er som følger: 20 Guajak „ n "oxideret" guajak h2u2_ hæmoglobin ^

Farveløst Blå farve

En af hovedulemperne ved guajakprøven består i, at for tidlig blåfarvning finder sted i det guajakimprægnerede papir.

25 Lejlighedsvis vil papiret blive en smule blåfarvet ved at blive udsat for luft. Spormængder af nitrogendioxid, ozon og andre oxidanter i luften kan gennemtrænge den lukkede objektbærer og reagere med guajakken i papiret til fremkaldelse af en blåfarvning. Denne for tidlige blåfarvning 30 kan indføre et forvekslingselement i bestemmelsen og resultere i falske positive bestemmelser.

2

DK 154857 B

Der har tidligere været gjort forsøg på at stabilisere det guajakimprægnerede papir. Visse i handelen gående prøve-objektbærere har glacépapir placeret over åbningerne i forpladen til beskyttelse af guajakpapiret, når objektbæ-5 reren udsættes for atmosfæren. Tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.716.060 omhandler en fremgangsmåde til behandling af papiret med forskellige antioxidanter. Resultaterne af denne bestemmelse viste, at det med beskyttende antioxidant-koncentrationer behandlede papir ikke var anvendeligt til 10 bestemmelse af patologiske blodmængder i fæces, fordi bestemmelsens følsomhed blev påvirket i negativ retning. Når koncentrationerne af antioxidanter blev formindsket, så at en tilstrækkelig følsomhed af bestemmelsen blev nået, mistede stofferne deres stabiliserende virkning.

15 Tysk offentliggørelsesskrift nr. 2.716.060 omtaler, at alle de afprøvede forbindelser, 1-arylsemicarbaziderne, specielt 1-phenylsemicarbazid, tilvejebragte en vis beskyttelsesgrad, når det blev imprægneret på guajakpapiret. l-phenyl= semicarbazid forøger imidlertid også blegningen af den blå 20 farve, der dannes ved en positiv bestemmelse.

Den foreliggende opfindelse tager derfor sigte på at stabilisere det guajakimprægnerede papir ved at hindre for tidlig blåfarvning uden væsentlig påvirkning af bestemmelsens følsomhed.

25 Det har uventet vist sig, at i tilfælde af at 2,6-di-tert-butyl-p-cresol (BHT) blev påført som overtræk på objekbæ-rerens dæksel eller klap og ikke indført som imprægnering i guajakpapiret, var papiret stabilt overfor for tidlig blåfarvning forårsaget af lys og luft, og patologiske blod-30 mængder i fæces kunne let bestemmes.

Flere betydelige fordele opnås ved overtrækning af objekt-bærerdækslet eller -beholderen i stedet for at imprægnere 3

DK 154857 B

guajakpapiret med antioxidanterne. Som følge af den ringe koncentration af krævet antioxidant, kan materialet påføres ved opløsning og/eller suspendering deraf i den tynde film af fernis, som normalt anvendes for at hindre sværteudtvæ-5 ring under fremstilling. Hertil kommer, at når først antioxidan ten er sat til den overtrækkende fernis, sker der ingen ændring i fabrikationsproceduren. Denne metode er meget omkostningsbesparende. Mest vigtigt er det, eftersom intet yderligere materiale indføres i guajakpapiret, at objekt-10 bæreren opførsel forbliver uændret.

Et antal antioxidanter blev afprøvet med hensyn til deres evne til at hindre for tidlig blåfarvning af "Hemoccult"-objektbærere ved overtrækning af objektbæreren, specielt indersiden af klappen eller dækslet. Bestemmelsesproceduren 15 var som følger:

Seks antioxidanter blev opløst i acetone, og 22,5 ymol af hver blev derpå påført på indersiden af objektbærernes dæksel. Efter at alt opløsningsmidlet var fordampet, blev objekt-bæreme lukket til simulering af en uåbnet "Hemoccult"-objekt-20 bærer. Objektbærerne blev derpå udsat for nitrogendioxid i luft, 2 ppm. Blåfarvningstiden for hver objektbærer blev bestemt. Resultaterne er som følger: λ

Forbindelse Blåfarvningstid

Kontrol (acetone alene) 5 min.

25 Vanillin " 1-phenylsemicarbazid " 4-phenylsemicarbazid " 4-phenyl-3-thiosemicarbazid " 3,3-thiodipropionsyre " 30 BHT 240 min.

Resultaterne viser tydeligt, at under overdrevne betingelser beskyttes guajakpapiret mod blåfarvning, når BHT er på-

DK 154857 B

4 ført som overtrask på objektbærer dæks let. Det vil bemærkes, at selvom 1-phenylsemicarbazid har været omtalt som frem-bringende en vis beskyttelsesgrad, når det påføres direkte på guajakpapiret, har det ingen virkning ved påføring som 5 overtræk på indersiden af objektbærerdækslet.

BHT blev opløst i fernis, påført på indersiden af en objektbærers dæksel, og den lukkede objektbærer blev udsat for luft under normale betingelser. Ved dette forsøg opnås følgende resultater: 10 mg påført BHT Blåfarvningstid * 0 · . 2 dage 0,6 20 dage 1,5 27 dage d·

Blåfarvningstid defineret som tiden, når det første far-15 aveskær af blåt iagttages.

Resultaterne viser atter, at BHT opløst i fernis har en beskyttende virkning på guajakpapiret ved påføring som overtræk på prøveobjektbærerens dæksel.

BHT kan opløses eller suspenderes i et· passende organisk 20 opløsningsmiddel, såsom acetone eller alkohol, qg påføres på dækselklapperne. Fordelagtigt anvendes fernis, som er en opløsning af en harpiks eller tørrende olie i et flygtigt opløsningsmiddel som bæreren for BHT. Fernisopløsningen påføres som overtræk eller påtryk på objektbærerdæksler-25 ne og påføres ikke på guajakpapiret.

Fortrinsvis kan anvendes opløsninger eller suspensioner indeholdende indtil 5% BHT. Mest fordelagtigt anvendes opløsninger på ca. 2-3%.

,· i

Claims (7)

15 BHT blev opløst i acetonen og påført som overtræk på en "Hemoccult"-objektbærers objektbærerdæksel. 20

1. Fremgangsmåde til stabilisering af en prøveobjektbærer til bestemmelse af blødningsblød, hvilken objektbærer har et optagelseslag for guajakbehandlet prøve mellem en forplade og en bagplade med åbninger i frontpladen og bagpla-25 den samt drejelige dæksler til at dække nævnte åbninger, kendetegnet ved, at en opløsning eller suspension af 2,6-di-tert.-butyl-p-cresol påføres på nævnte drejelige dæksler. DK 154857 B

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at opløsningen eller suspensionen påføres på indersiden af objektbærerens dæksel.

3. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 2,6-di-tert.-butyl-p-cresol foreligger i form af en fernisopløsning eller suspension.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at 2,6-di-tert.-butyl-p-cresol· foreligger i form af en acetoneopløsning.

5. Fremgangsmåde ifølge krav 1,kendetegnet ved, at 2,6-di-tert.-butyl-p-cresol . foreligger i en mængde 15 fra ca. 1 til ca. 3%.

6. Fremgangsmåde ifølge krav 1, kendetegnet ved, at opløsningen er påtrykt på de drejelige dæksler.

7. Prøveobjektbærer til bestemmelse af blødningsblod med et optagelseslag for guajakbehandlet prøve mellem en forplade og en bagplade med åbninger i forpladen og bagpladen samt drejelige dæksler til at dække nævnte åbninger, kendetegnet ved, at de drejelige dæksler er overtrukket 25 med 2,6-di-tert.-buty1-p-cresol. 30 35