DE69123444T2

DE69123444T2 - Verfahren zur Züchtung von befruchteten Hühnereiern in vitro

Info

Publication number: DE69123444T2
Application number: DE69123444T
Authority: DE
Inventors: Mitsuru Naito; Keijiro Nirasawa; Takao Oishi
Original assignee: DIRECTOR GENERAL NATIONAL INST
Current assignee: DIRECTOR GENERAL NATIONAL INST
Priority date: 1991-04-30
Filing date: 1991-09-23
Publication date: 1997-07-03
Anticipated expiration: 2011-09-24
Also published as: EP0511431A2; EP0511431B1; US5286641A; DK0511431T3; EP0511431A3; DE69123444D1; JPH0669336B2; JPH04330238A

Description

HINTERGRUND DER ERFINDUNG

Die vorliegende Erfindung betrifft ein in vitro Bebrütungsverfahren zum Bebrüten eines befruchteten Ovum einer Henne.
Es ist ein Bebrütungsverfahren bekannt, bei dem ein Ovum einer Henne, das gerade befruchtet wurde, zum Bebrüten bei einer Temperatur von 41 ºC in Albumen eingetaucht wird. Das Ovum kann bis zu einem frühen Stadium der Zellteilung entwickelt werden, nicht aber bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X).
Um ein ungeteiltes, befruchtetes Ovum einer Henne zu bebrüten, wird das Ovum in einen Glasbehälter gelegt, der mit einem Kultursubstrat gefüllt ist, das ein Gemisch aus dünnem Albumen und Salzlösung ist, vermischt im Verhältnis 3:2. Der Glasbehälter wird mit transparenter Kunststoff-Folie abgedichtet. Das Ovum wird dann bei einer Temperatur zwischen 41 ºC und 42 ºC bebrütet.
Das ungeteilte Ovum kann so bis zum Ende des Blastoderm-Stadiums (Stadium X) entwickelt werden. In diesem Fall ist es jedoch notwendig, das befruchtete Ovum mit genügend dick gewordenem Albumen 165 Minuten nach der Eiablage oder 135 Minuten nach der Ovulation, aus einem unteren Teil des Ovidukt-Magnum herauszunehmen.
In dieser Hinsicht offenbart die Veröffentlichung The Journal of Experimental Zoology 254 (1990), 322 - 326, ein Verfahren, bei dem befruchtete Ova, die von einer teilweise gebildeten Kapsel aus dickem Albumen umgeben sind, aus dem Magnum des Ovidukts mit einem Abstand von 0 - 15 cm vom Übergang zwischen dem Magnum und Isthmus (2,5 - 2,75 Std. nach der Eiablage des vorhergehenden Eies) erhalten wurden. Die Ova wurden in Glasgefäße mit Kultursubstrat (drei Teile dünnes Albumen, ein Teil Salzlösung) gelegt, die Gefäße wurden mit Kunststoff-Folie abgedichtet, und die Zubereitungen 24 - 24,5 Std. bei 41,5 ºC inkubiert.
Das Ovum, das gerade befruchtet worden ist, ist in einem oberen Teil des Ovidukt-Magnums angeordnet. In diesem Stadium werden nur Muzinalbumen und ein dickes, teilchenförmiges Albumen um den Dotter gebildet, so daß das befruchtete Ovum nicht erfolgreich bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X) mit dem vorstehend erwähnten Bebrütungsverfahren entwickelt werden kann.

ZUSAMMENFASSUNG DER ERFINDUNG

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein Verfahren zum Bebrüten eines Ovum einer Henne zur Verfügung zu stellen, bei dem ein frisch befruchtetes Ovum in vitro bis zum Blastoderm- Stadium (Stadium X) entwickelt wird, so daß die Embryonalentwicklung bis zum Stadium des Ausschlüpfens vorangetrieben werden kann, indem unter Verwendung von Ersatz-Eierschalen das kürzlich entwickelte Bebrütungsverfahren kombiniert wird.
Gemäß der vorliegenden Erfindung wird ein in vitro Bebrütungsverfahren für ein befruchtetes Ovum einer Henne zur Verfügung gestellt, das folgende Schritte aufweist: Ablegen des befruchteten Ovum in einem Behälter, der dünnes Albumen enthält, Bedecken eines Dotters des Ovum mit einer Gaze-Schicht und Bebrüten des Ovum bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X).
Gemäß einem Aspekt der Erfindung wird das Ovum so in dem Behälter angeordnet, daß eine Keimscheibe an einer Oberseite des Dotters angeordnet ist. Das befruchtete Ovum wird aus einem oberen Teil des Ovidukt-Magnums einer Henne herausgenommen.
Weitere Aufgaben und Merkmale dieser Erfindung sind aus der nachfolgenden Beschreibung mit Bezugnahme auf die beiliegenden Zeichnungen verständlich.

KURZE BESCHREIBUNG DER ZEICHNUNGEN

Fig. 1 ist eine Seitenansicht im Schnitt, die ein Ovum in einem Behälter zeigt, bei dem das erfindungsgemäße in vitro-Verfahren angewandt wird; und
Fig. 2 ist eine Draufsicht des Behälters von Fig. 1.

GENAUE BESCHREIBUNG DER BEVORZUGTEN AUSFÜHRUNGSFORM

Wie aus den Zeichnungen ersichtlich, wird ein Ovum (Embryo) 1, das gerade befruchtet worden ist, 60 bis 80 Minuten nach der Eiablage oder 30 bis 40 Minuten nach der Ovulation, aus einem oberen Teil des Ovidukt-Magnums einer Henne herausgenommen. Wie in Fig. 1 und 2 gezeigt, wird das Ovum in einen Glasbehälter 2 mit einem Innendurchmesser von 45 mm und einer Höhe von 50 mm gelegt, und 5 ml dünnes Albumen 3 wird in den Behälter 2 gegossen.
Ein Dotter 1b des Ovum 1 wird so gedreht, daß die Keimscheibe 1a an der Oberseite des Dotters 1b angeordnet ist. Eine Gaze- Schicht 4 von drei Zentimetern im Quadrat wird so angeordnet, daß sie den Dotter 1b einschließlich der Keimscheibe 1a bedeckt. Die vier Ecken der Gaze 4 werden in das umgebende dünne Albumen 3 zum Vollsaugen eingetaucht. Die Öffnung des Glasbehälters 2 wird mit einer Kunststoff-Folie 5 bedeckt, die von einem Gummiband in ihrer Position gehalten wird, um die Öffnung des Behälters 2 abzudichten. Das Ovum 1 wird unter diesen Bedingungen 26 Stunden lang bei einer Temperatur zwischen 41 ºC und 42 ºC, vorzugsweise 41,5 ºC, bebrütet.
Das Ovum 1 wird mit dem erfindungsgemäßen Verfahren bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X) bebrütet. Das Ovum 1 wird danach unter Verwendung von Ersatz-Eierschalen nach dem kürzlich entwickelten Verfahren bebrütet.
Die nachfolgende Tabelle zeigt die Lebensfähigkeit und die Ausschlüpfrate des mit dem erfindungsgemäßen Verfahren befruchteten Ovum bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X), und weiter mit den bekannten Verfahren nach dem Blastoderm-Stadium. Die Tabelle gibt weiter zum Vergleich die mit gelegten Eiern erhaltenen Ergebnisse an, die nach dem kürzlich entwikkelten Bebrütungsverfahren bebrütet wurden. TABELLE Lebensfähigkeit und Ausschlüpfrate von Hennenova
Wie in der Tabelle gezeigt, haben sich wenigstens 46,3% der befruchteten Ova, die mit dem erfindungsgemäßen Verfahren bebrütet worden sind, bis zum Blastoderm-Stadium (Stadium X) entwickelt, und 19,5% sind ausgeschlüpft.
Aus dem Vorstehenden ist verständlich, daß die vorliegende Erfindung ein Verfahren zum Bebrüten eines befruchteten Ovum zur Verfügung stellt, bei dem das Ovum zum Blastoderm-Stadium (Stadium X) mit der in vitro-Bebrütung, die sofort nach der Befruchtung beginnt, entwickelt wird.

Claims

1. In vitro Bebrütungsverfahren für ein befruchtetes Ovum einer Henne, das die folgenden Schritte aufweist:

a) Gewinnung des befruchteten Ovum (1) von einem oberen Teil eines Magnum eines Ovidukt einer Henne 60 bis 80 Minuten nach der Eiablage;

b) Ablegen des befruchteten Ovum (1) in einen Behälter (2), der dünnes Albumen (3) enthält, und teilweises Eintauchen des befruchteten Ovum in das dünne Albumen (3);

c) Bedecken eines Dotters (1b) des Ovum (1) mit einer Gaze-Schicht (4), wobei die Gaze (4) den Dotter (4) und das dünne Albumen (3) berührt; und

d) Bebrüten des mit Gaze (4) bedeckten Ovum (1) bis zum Blastoderm-Stadium.

2. Verfahren nach Anspruch 1, wobei das Ovum (1) in dem Behälter (2) so angeordnet wird, daß eine Keimscheibe (1a) an einer Oberseite des Dotters (1b) angeordnet ist.

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, wobei eine Öffnung des Behälters (2) mit einer Kunststoff-Folie (5) bedeckt ist, die von einem Gummiband in ihrer Position gehalten wird.

4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, wobei das Ovum (1) 26 Stunden bei einer Temperatur zwischen 41ºC und 42ºC bebrütet wird.