DE69005568T2 - Packungsmaterial für die Chromatographie und seine Verwendung zur Trennung von wasserlöslichen Verbindungen. - Google Patents

Packungsmaterial für die Chromatographie und seine Verwendung zur Trennung von wasserlöslichen Verbindungen.

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Description

  • Die vorliegende Verbindung betrifft ein neues Packungsmaterial für die Chromatographie und ein Verfahren zur Trennung von wasserlöslichen organischen Verbindungen durch Chromatographie unter Verwendung des Packungsmateriais Das erfindungsgemäße Packungsmaterial ist in verschiedenen Fachgebieten nützlich, z.B. in der Lebensmittelanalyse und der klinischen Analyse.
  • Im Fachgebiet der Lebensmittelanalyse und der klinischen Analyse wurden kürzlich mehrere Studien beschrieben, in denen die Simultananalyse von Vitaminen mittels eines einfachen, schnellen und praktischen Verfahrens durchgeführt wird. Solche Berichte umfassen z.B. eine Umkehrphasenchromatographie unter Verwendung eines Packungsmaterials, bei dem die Octadecylgrup pe (C18) auf ein Kieselgel aufgepfropft ist [Maeda et al., J. Assoc. Off. Anal. Chem. 72 (1989), 244; Amin et al., Pharm. Ind. 50 (1988), 1307], und eine Chromatographie unter Verwendung eines Packungsmaterials, bei dem die vorstehende C18- oder Aminopropylgruppe auf ein Kieselgel aufgepfropft ist [R. B. H. Wills et al., J. Chromatogr. Sci. 15 (1977), 262].
  • Diese Verfahren bewähren sich jedoch in der Praxis nicht, da sie Nachteile aufweisen, so sind die Verbindungen, die durch diese Verfahren getrennt werden können, begrenzt, die Auflösung der zu analysierenden Verbindungen ist nicht hoch genug oder die Analyse nimmt zu viel Zeit in Anspruch.
  • Außerdem muß bei den herkömmlichen Verfahren als mobile Phase eine wäßrige Lösung verwendet werden, die ein organisches Lösungsmittel (z.B. Acetonitril, Methanol usw.) enthält, wodurch sich Probleme bei der Behandlung des nach dem Trennverfahren erhaltenen Abfallmaterials und ferner aufgrund der beschränkten Auswahl der Wellenlänge für den UV-Detektor ergeben. Sofern Proben analysiert werden, die einen großen Anteil eines anorganischen Salzes enthalten, wie z.B eine Transfusionsflüssigkeit, wird außerdem das Salz durch ein bei der Analyse verwendetes organisches Lösungsmittel ausgefällt, weshalb es manchmal schwierig ist, die Analyse durchzuführen.
  • Kürzlich wurde in WO-A-8 706 233 ein Mittel zur Zelltrennung beschrieben, außerdem damit zusammenhängende Verfahren, die zur Trennung von Zellen aus verschiedenen biologischen Proben, wie z.B. Blut, nützlich sind, wobei die Mittel zur Zelltrennung kolloidale Silikateilchen und einen Modifikator, z.B. ein an kolloidale Silikateilchen kovalent gebundenes Organosilan, wie 3-MorPholinopropyltrimethoxysilan, umfassen.
  • Eine Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist die Bereitstellung eines in der Praxis nützlichen Packungsmaterials für die Simultananalyse von wasserlöslichen Verbindungen, insbesondere Vitaminen, wobei das Packungsmaterial für die Analyse von ganz verschiedenartigen Verbindungen angewendet werden kann, eine hochauflösende Trennung erhalten wird und die Analyse nur eine kurze Zeitspanne in Anspruch nimmt, sowie eines Verfahrens zur Trennung von wasserlöslichen organischen Verbindungen durch Chromatographie unter Verwendung einer mobilen Phase, die kein organisches Lösungsmittel enthält. Diese Aufgabe konnte aufgrund der Tatsache gelöst werden, daß ein Packungsmaterial für die Chromatographie, das eine spezifische cyclische aminosubstituierte Silanverbindung umfaßt, die auf einen anorganischen Träger aufgepfopft ist, die vorstehenden Erfordernisse befriedigt und für die Trennung von verschiedenen wasserlöslichen organischen Verbindungen, wie z.B. Vitaminen, nützlich ist.
  • Der Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit ein Packungsmaterial zur Verwendung in der Chromatographie, das eine cyclische aminosubstituierte Silanverbindung der Formel (I) umfaßt,
  • wobei R¹, R² und R³ gleich oder verschieden sind und jeweils einen Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, einen Alkoxyrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Hydroxygruppe oder ein Halogenatom bedeuten, wobei mindestens einer der Reste R¹, R² und R³ ein Alkoxyrest oder ein Halogenatom ist, R&sup4; eine x- Piperidino-, x-Piperazino oder x-Morpholinogruppe bedeutet, die gegebenenfalls durch einen geradkettigen oder verzweigten Niederalkylrest substituiert ist, n eine ganze Zahl von 2 bis 10 ist, wobei die Verbindung auf Kieselgel aufgepfropft ist, das auf der Oberfläche Hydroxylgruppen aufweist.
  • Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung des Packungsmaterials zur Trennung von wasserlöslichen Verbindungen, insbesondere Vitaminen, durch Chromatographie.
  • Die Figuren 1, 2, 3, 4 und 5 stellen jeweils ein Chromatogramm dar, das in den Beispielen 5, 6, 7, 8 bzw. 9 durch Analyse erhalten wurde.
  • In der cyclischen aminosubstituierten Silanverbindung der allgemeinen Formel (I) sind R¹, R² und R³ gleich oder verschieden, wobei jeder Rest einen Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen (z.B. eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Butyl-, Pentylgruppe), einen Alkoxyrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen (z.B. eine Methoxy-, Ethoxy-, Propoxygruppe), eine Hydroxygruppe oder ein Halogenatom (z.B. ein Fluor-, Chlor-, Bromatom) darstellt. R&sup4; bedeutet eine x-Piperidino-, x-Piperazino oder x-Morpholinogruppe, die gegebenenfalls durch einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, wie z.B. eine Methyl-, Ethyl-, Propyl-, Isopropyl-, Butyl-, Isobutyl-, sek.-Butyl- und tert.-Butylgruppe, substituiert ist.
  • Die cyclische aminosubstituierte Silanverbindung umfaßt, ist aber nicht beschränkt auf, Dimethyl(3-piperidinopropyl)methoxysilan, Methyl (3-piperidinopropyl)dimethoxysilan, 3-Piperidinopropyltrimethoxysilan, 3-Piperidinopropyltriethoxysilan, Dimethyl(3-Piperazinopropyl)methoxysilan, Methyl(3-piperazinopropyl)dimethoxysilan, 3 -Piperazinopropyltrimethoxysilan, 3-Piperazinopropyltriethoxysilan, Dimethyl (3-morpholinopropyl)methoxysilan, Methyl(3-morpholinopropyl)dimethoxysilan, 3-Morpholinopropyltrimethoxysilan, 3-Morpholinopropyltriethoxysilan, 10-Morpholinodecyltriethoxysilan, 3-(2-Methylpiperidino)propyltrimethoxysilan, 3-(3-Methylpiperidino)propyltriimethoxysilan, 3-(4-Methylpiperidino)propyltrimethoxysilan, 3-(2-Ethylpiperidino)propyltrimethoxysilan, 3-(3-Ethylpiperidino)propyltrimethoxysilan, 3-(2-Isopropylpiperidino)propyltrimethoxysilan, 3-(N-Methylpiperazino)propyltrimethoxysilan, Methyl(3-piperidinopropyl)dichlorsilan, 3-Piperidinopropyltrichlorsilan, Methyl(3-piperazinopropyl)dichlorsilan, 3-Piperazinopropyltrichlorsilan, Methyl(3-morpholinopropyl)dichlorsilan, 3-Morpholinopropyltrichlorsilan und 10-Morpholinodecyltrichlorsilan.
  • Das erfindungsgemäße Packungsmaterial für die Chromatographie kann hergestellt werden, indem ein Gemisch aus der cyclischen aminosubstituierten Silanverbindung (I) als Silan- Kupplungsmittel und einem Kieselgel, das auf der Oberfläche Hydroxygruppen aufweist, in Gegenwart oder Abwesenheit eines organischen Lösungsmittels erhitzt wird. Nachdem die Umsetzung vollständig abgelaufen ist, kann den Enden des erhaltenen Packungsmaterials gegebenenfalls eine Silanverbindung, die aus Trimethylchlorsilan, Trimethylinethoxysilan und Hexamethyldisilazan oder einer Kombination davon ausgewählt ist, angefügt werden.
  • Die Hydroxygruppen auf der Oberfläche können mit der cyclischen aminosubstituierten Silanverbindung (I) reagieren und ermöglichen das Aufpfropfen der cyclischen aminosubstituierten Verbindung (I) auf das Kieselgel.
  • Das in der vorliegenden Verbindung verwendete Kieselgel kann zum Erhalt einer Chromatographiesäule mit hoher Effizienz in einer beliebigen Form vorliegen, einschließlich einer Kugelform oder pulverisierten Form, jedoch ist die Form von feinen Teilchen bevorzugt, die eine einheitliche Teilchengröße aufweisen.
  • Das in der vorliegenden Erfindung verwendete organische Lösungsmittel umfaßt z.B. Benzol, Toluol, Xylol, Chlorbenzol, Hexan, Cyclohexan, Chloroform, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid und Dimethylsulfoxid.
  • Die Umsetzung wird vorzugsweise bei einer Temperatur von 50 bis 150ºC durchgeführt. Nach vollständigem Ablaufen der Umsetzung wird das Gemisch auf Raumtemperatur abgekühlt, filtriert und das Filtrat mit einem organischen Lösungsmittel (z.B. Toluol, Aceton, Ether) oder reinem Wasser gewaschen und sodann bei einer Temperatur unter 80ºC bei Normaldruck oder bei vermindertem Druck gemäß einem herkömmlichen Verfahren getrocknet, wodurch das erfindungsgemäße Packungsmaterial für die Chromatographie erhalten wird. Die cyclische aminosubstituierte Silanverbindung wird vorzugsweise in einer Menge von 0,1 bis 4 mMol/g Kieselgel auf das Kieselgel aufgepfropft.
  • Das auf diese Weise hergestellte erfindungsgemäße Packungsmaterial, das eine basische Gruppe aufweist, wird in herkömmlicher Art und Weise in eine Chromatographiesäule gefüllt und als stationäre Phase in der Flüssigchromatographie verwendet.
  • Durch Flüssigchromatographie unter Verwendung der erfindungsgemäßen stationären Phase können verschiedene wasserlösliche organische Verbindungen unter geeigneten Elutionsbedingungen, insbesondere unter Verwendung einer wäßrigen Lösung als Elutionsmittel, mit hoher Auflösung und in einer kurzen Zeitspanne getrennt und analysiert werden.
  • Die in der erfindungsgemäßen Chromatographie verwendete mobile Phase umfaßt Wasser oder eine wäßrige Lösung von z.B. Acetonitril, Methanol, Ethanol, oder einen Phosphat- oder Boratpuffer, in dem Phosphorsäure-Phosphat oder Borsäure-Borat in Wasser oder der wäßrigen Lösung wie vorstehend gelöst ist. Die vorstehende wäßrige Lösung wird gegebenenfalls mit einem Ionenpaar-Reagens versetzt. Am stärksten bevorzugt als mobile Phase zur Verwendung in der vorliegenden Erfindung ist eine wäßrige 0,05 bis 0,7 M Phosphatpufferlösung, in der 1 bis 100 mM Ionenpaar-Reagens gelöst ist.
  • Das in der vorliegenden Erfindung verwendete Ionenpaar-Reagens umfaßt z.B. Tetrabutylammoniumfluorid, Tetrabutylammoniumchlorid, Tetrabutylammoniumbromid, Tetrabutylammoniumiodid, Tetrabutylammoniumhydroxid, Tetraethylammoniumfluorid, Tetraethylammoniumchlorid, Tetraethylammoniumbromid, Tetraethylammoniumiodid, Tetraethylammoniumhydroxid, Tetramethylammoniumfluorid, Tetramethylammoniumchlorid, Tetramethylammoniumbromid, Tetramethylammoniumiodid, Tetramethylammoniumhydroxid, Hexyltrimethylammoniumchlorid, Hexyltrimethylammoniumbromid, Octyltrimethylammoniumchlorid, Octyltrimethylammoniumbromid, Decyltrimethylammoniumchlorid, Decyltrimethylammoniumbromid, Cetyltrimethylammoniumchlorid, Cetyltrimethylaminoniumbromid, Natriumpentansulfonat, Natriumoctansulfonat, Natriumlaurylsulfat und Natriumdodecylsulfat.
  • Die wäßrige Lösung von Phosphatpuffer umfaßt üblicherweise Phosphorsäure, Dinatriumhydrogenphosphat und Natriumdihydrogenphosphat, wobei die Lösung auf einen beliebigen pH-Wert innerhalb eines Bereiches von 2 bis 9 eingestellt werden kann, indem jeweils die Menge der verschiedenen Komponenten geändert wird.
  • Die wasserlösliche organische Verbindung, die durch die erfindungsgemäße Chromatographie getrennt werden kann, umfaßt z.B. wasserlösliche Vitamine, Aminosäuren, Peptide, Nucleinsäuren und Saccharide.
  • Die vorstehenden Vitamine umfassen Thiamin (-Hydrochlorid), Riboflavin, Flavinadenindinucleotid, Nicotinsäure (-amid), Folsäure, Pantothensäure, Liponsäure, Pyridoxin (-Hydrochlorid), Pyridoxal (-Hydrochlorid), Pyridoxamin (-Hydrochlorid), Pyridoxin-5'-phosphat, Pyridoxal-5'-phosphat, Pyridoxamin-5'-phosphat, Cyanocobalamin, Hydroxocobalamin (-acetat), Methylcobalamin, Adenosylcobalamin, Aquacobalamin, Biotin, Ascorbisäure und Riboflavinphosphatester.
  • Die vorstehenden Aminsosäuren umfassen Glycin, Alanin, Valin, Serin, Threonin, Cystein, Methionin, Phenylalanin, Tryptophan, Tyrosin, Prolin, Cystin, Glutaminsäure, Asparaginsäure, Asparagin, Glutamin, Lysin, Arginin und Histidin.
  • Die vorstehenden Peptide umfassen Methioninenkephalin, Leucinenkephalin und Kyotorophin.
  • Die vorstehenden Nucleinsäuren umfassen Nucleinsäurebasen (z.B. Adenin, Guanin, Cytosin, Uracil, Thymin), Nucleoside (z.B. Guanosin, Adenosin, Cytidin, Uridin, Desoxycytidin, Thymidin), Nucleotide (z.B. 2'-Adenosinmonophosphat (abgekürzt "AMP"), 3'-AMP, 5'-AMP, Adenosindiphosphat (abgekürzt "ADP"), Adenosintriphosphat (abgekürzt "ATP"), 5'-Cytidinmonophosphat (abgekürzt "CMP"), Cytidindiphosphat (abgekürzt "CDP"), Cytidintriphosphat (abgekürzt "CTP"), 5'-Uridinmonophosphat (abgekürzt "UMP"), Uridindiphosphat (abgekürzt "UDP"), Uridintriphosphat (abgekürzt "UTP"), 2'-Guanosinmonophosphat (abgekürzt "GMP"), 3'-GMP, NADH, NADPH, CoA).
  • Die vorstehenden Saccharide umfassen Monosaccharide (z.B. Arabinose, Xylose, Ribose, Glucose, Mannose, Fructose, Galactose) und Disaccharide (z.B. Maltose, Lactose, Saccharose, Trehalose).
  • Das erfindungsgemäße Packungsmaterial für die Chromatographie ist für die chromatographische Trennung vieler verschiedener wasserlöslicher organischer Verbindungen mit hoher Auflösung und in einer kurzen Zeitspanne nützlich.
  • Da in der erfindungsgemäßen Chromatographie als mobile Phase eine wäßrige Lösung eingesetzt wird, die kein organisches Lösungsmittel enthält, ist nach der Trennung keine Entsorgung der Abfallflüssigkeit erforderlich, außerdem kann bei Verwendung eines UV-Detektors eine beliebige Wellenlänge ohne Einschränkung ausgewählt werden. Aus diesem Grund zeigt die erfindungsgemäße Chromatographie in der Praxis eine hohe Leistung und Auflösung.
  • Die vorliegende Erfindung wird in den nachstehenden Beispielen ausführlicher erläutert, wobei die Beispiele in keiner Weise den Umfang der Patentansprüche einschränken sollen.
    • Beispiel 1
  • Ein 300 ml-Kolben wurde mit Toluol (300 ml) und Kieselgel ("Daiso-Gel SP-120", hergestellt von DAISO CO., LTD., durchschnittliche Teilchengröße: 5 µm; 10,0 g) gefüllt und das Gemisch 28 Stunden unter Rückfluß gekocht, wobei Wasser als azeotropes Gemisch mit Toluol entfernt wurde.
  • Nach Abkühlen des Gemisches auf Raumtemperatur wurde 3- Morpholinopropyltrimethoxysilan (25 g) zugegeben und das Gemisch 24 Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach Abkühlen des Gemisches auf Raumtemperatur wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat mit Toluol, Acetonitril und Ether in dieser Reihenfolge gewaschen und unter vermindertem Druck getrocknet, wodurch ein Gel erhalten wurde.
  • Die Elementaranalyse des erhaltenen Gels zeigte C: 7,89%, H: 1,54% und N: 1,20%, wobei die aus der Elementaranalyse von Stickstoff errechnete aufgepfropfte Menge 0,86 mMol/g betrug.
    • Beispiel 2
  • In gleicher Art und Weise wie in Beispiel 1 wurde ein Gemisch aus Kieselgel (10,0 g) und 3-Morpholinopropyltrimethoxysilan (25 g) 24 Stunden unter Rückfluß gekocht. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde ein Gemisch aus Trimethylchlorsilan (3,68 g) und Hexamethyldisilazan (5,43 g) tropfenweise zur vorstehenden Reaktionslösung zugegeben und das Gemisch nach vollständiger tropfenweiser Zugabe fünf Stunden unter Rückfluß gekocht.
  • Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde das Gemisch filtriert und das Filtrat mit Toluol, Aceton und Ether in dieser Reihenfolge und danach mit Aceton gewaschen. Das Waschen wurde weiterhin mit reinem Wasser, Aceton und Ether in dieser Reihenfolge wiederholt, sodann wurde das Ganze bei 80ºC getrocknet, wodurch ein an den Enden ergänztes Gel erhalten wurde.
  • Die Elementaranalyse des erhaltenen Gels zeigte C: 8,50%, H: 1,65% und N: 1,36%.
    • Beispiel 3
  • Das Verfahren in Beispiel 1 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß 3-Piperazinopropyltrimethoxysilan anstelle von 3-Morpholinopropyltrimethoxysilan eingesetzt wurde, wodurch ein Gel erhalten wurde, bei dem 3-Piperazinopropylgruppen aufgepfropft waren.
  • Die Elementaranalyse des erhaltenen Gels zeigte C: 7,92%, H: 1,64% und N: 2,42%, wobei die aus der Elementaranalyse von Stickstoff errechnete aufgepfropfte Menge 0,86 mMol/g betrug.
    • Beispiel 4
  • Das Verfahren in Beispiel 1 wurde wiederholt, mit der Ausnahme, daß 3-Piperidinopropyltrimethoxysilan anstelle von 3-Morpholinopropyltrimethoxysilan eingesetzt wurde, wodurch ein Gel erhalten wurde, bei dem 3-Piperidinopropylgruppen aufgepfropft waren.
  • Die Elementaranalyse des erhaltenen Gels zeigte C: 8,47%, H: 1,68% und N: 1,19%, wobei die aus der Elementaranalyse von Stickstoff errechnete aufgepfropfte Menge 0,85 mMol/g betrug. Beispiel 5 Das in Beispiel 1 erhaltene Packungsmaterial wurde mittels Aufschlämmtechnik in einer Lösung von Glycerin/Methanol (4:6, Vol./Vol.) in eine Säule aus rostfreiem Stahl (innerer Durchmesser: 4,6 mm, Länge 150 mm) gefüllt und die Analyse einer Probe unter den folgenden Bedingungen wie nachstehend beschrieben durchgeführt. Die erhaltenen Ergebnisse werden in Fig. 1 als Chromatogramm gezeigt.
  • Temperatur: Raumtemperatur, mobile Phase: ein Gemisch aus 0,1 M Phosphatpuffer (0,1 M H&sub3;PO&sub4; + 0,1 M Na&sub2;HPO&sub4;), eingestellt auf pH 6,0, und 10 mM Tetrabutylammoniumbromid,
  • Durchflußgeschwindigkeit: 1,0 ml pro Minute,
  • Detektor: UV-Spektrophotometer (Wellenlänge: 270 µm).
  • Die in der Analyse eingesetzte Probe war ein Gemisch aus den folgenden Verbindungen:
  • (A) Ascorbinsäure,
  • (B) Pydridoxin-Hydrochlorid,
  • (C) Nicotinsäure,
  • (D) Flavinadenindinucleotid,
  • (E) Hydroxocobalaminacetat,
  • (F) Thiamin-Hydrochlorid.
    • Beispiel 6
  • Die Analyse wurde durchgeführt, indem die Säule aus Beispiel 5 unter den gleichen Bedingungen wie in Beispiel 5 verwendet wurde, mit der Ausnahme, daß als mobile Phase der auf pH 5,0 eingestellte Phosphatpuf fer eingesetzt wurde. In Fig. 2 werden die Ergebnisse als Chromatogramm gezeigt.
  • Die in der Analyse eingesetzte Probe war ein Gemisch aus den folgenden Verbindungen:
  • (B) Pydridoxin-Hydrochlorid,
  • (E) Hydroxocobalaminacetat,
  • (F) Thiamin-Hydrochlorid,
  • (G) Nicotinsäureamid,
  • (H) Riboflavinphosphatester.
    • Beispiel 7
  • Die Analyse von handelsüblichen Vitamin-Nährstoffen wurde durchgeführt, indem die gleiche Säule und die gleichen Bedingungen wie in Beispiel 5 verwendet wurden. In Fig. 3 werden die Ergebnisse als Chromatogramm gezeigt. Die Peaks B, D und F entsprechen in Fig. 3 Pyridoxin, Flavinadenindinucleotid bzw. Thiamin.
    • Beispiel 8
  • Jedes Packungsmaterial, das in den Beispielen 3 und 4 erhalten wurde, wurde mittels Aufschlämmtechnik in einer Lösung von Glycerin/Methanol (4:6, Vol./Vol.) in eine rostfreie Säule (innerer Durchmesser: 4,6 mm, Länge 150 mm) gefüllt und die Analyse unter Verwendung der gleichen Probe und der gleichen Bedingungen wie in Beispiel 5 durchgeführt. In Fig. 5 werden die Ergebnisse als Chromatogramm gezeigt.
  • Die Figuren 4 (a) und (b) zeigen Chromatogramme, die unter Verwendung der Packungsmaterialien aus den Beispielen 3 bzw. 4 erhalten wurden.
    • Beispiel 9
  • Das in Beispiel 1 erhaltene Packungsmaterial wurde mittels Aufschlämmtechnik in einer Lösung von Glycerin/Methanol (4:6, Vol./Vol.) in eine Säule aus rostfreiem Stahl (innerer Durchmesser: 6,0 mm, Länge 150 mm) gefüllt und die Analyse der Probe wie vorstehend beschrieben unter den folgenden Bedingungen durchgeführt. In Fig. 5 werden die erhaltenen Ergebnisse als Chromatogramm gezeigt.
  • Temperatur: Raumtemperatur, mobile Phase: Gemisch aus 0,5 M Kaliumphosphat und 10 mM Tetrabutylammoniumbromid,
  • Durchflußgeschwindigkeit: 2,0 ml pro Minute,
  • Detektor: UV-Spektrophotometer (Wellenlänge: 254 µm).
  • Die in der Analyse eingesetzte Probe war ein Gemisch aus den folgenden Verbindungen:
  • (I) 5'-AMP
  • (J) ADP
  • (K) ATP

Claims (5)

1. Packungsmaterial zur Verwendung in der Chromatographie, das eine cyclische aminosubstituierte Silanverbindung der Formel (I)
umfaßt, in der R¹, R² und R³ gleich oder verschieden sind und jeweils einen Alkylrest mit 1 bis 5 Kohlenstoffatomen, einen Alkoxyrest mit 1 bis 3 Kohlenstoffatomen, eine Hydroxygruppe oder ein Halogenatom bedeuten, wobei mindestens einer der Reste R¹, R² und R³ ein Alkoxyrest oder ein Halogenatom ist, R&sup4; eine ω-Piperidino-, ω-Piperazino- oder ω-Morpholinogruppe bedeutet, die gegebenenfalls durch einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen substituiert ist, n eine ganze Zahl von 2 bis 10 bedeutet, wobei die Verbindung auf ein Hydroxylgruppen auf der Oberfläche aufweisendes Kieselgel aufgepfropft ist.
2. Packungsmaterial nach Anspruch 1, in dem die cyclische aminosubstituierte Silanverbindung Dimethyl-(3-piperidinopropyl)-methoxysilan, Methyl-(3-piperidinopropyl)-dimethoxysilan, 3-Piperidinopropyltrimethoxysilan, 3-Piperidinopropyltriethoxysilan, Dimethyl-(3-piperazinopropyl)-methoxysilan, Methyl-(3-piperazinopropyl)-dimethoxysilan, 3-Piperazinopropyltrimethoxysilan, 3-Piperazinopropyltriethoxysilan, Dimethyl-(3-morpholinopropyl)methoxysilan, Methyl-(3-morpholinopropyl)-dimethoxysilan, 3-Morpholinopropyltrimethoxysilan, 3-Morpholinopropyltriethoxysilan oder 10-Morpholinodecyltriethoxysilan ist.
3. Verwendung des Packungsmaterials nach Anspruch 1 oder 2 zur Trennung von wasserlöslichen organischen Verbindungen durch Chromatographie.
4. Verwendung des Packungsmaterials nach Anspruch 3, wobei ein ein Ionenpaar-Reagenz enthaltender wäßriger Phosphatpuffer als mobile Phase verwendet wird.
5. Verwendung des Packungsmaterials nach Anspruch 3 oder 4, wobei die wasserlöslichen organischen Verbindungen wasserlösliche Vitamine, Aminosäuren, Peptide, Nucleinsäuren und/oder Saccharide sind.
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