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Gebiet der Erfindung
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Die
vorliegende Erfindung betrifft allgemein die Entfernung von menschlichem
Ohrenschmalz. Genauer betrifft die vorliegende Erfindung, ohne sie
dadurch zu beschränken,
vorteilhafte Zusammensetzungen, die die Entfernung von menschlichem
Ohrenschmalz fördern.
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Beschreibung des Standes
der Technik
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Ohrenschmalz
oder Cerumen ist eine Mischung von Ausscheidungen aus Ohrenschmalzdrüsen und Talgdrüsen ebenso
wie von Epithelschuppen, von Staub und anderen Bruchstücken. Ohrenschmalz
bildet eine Schutzschicht auf der Haut des äußeren Ohrkanals. Die Konsistenz
von und damit die Schwierigkeit bei der Entfernung von Ohrenschmalz
variieren von Person zu Person und sind zumindest teilweise genetisch
bestimmt.
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Ohrenschmalzbildung
und -verdichtung im äußeren Ohrkanal
ist weltweit ein erhebliches Problem, insbesondere für Kinder
und alte Menschen. In den Vereinigten Staaten finden etwa 8 Millionen
Ohrenschmalzentfernungen jedes Jahr statt und im Vereinigten Königreich
ist die Anzahl 2 Millionen. Menschen, die haarige Ohrkanäle, enge
Ohrkanäle
oder Osteoma besitzen, sind einem solchen Aufbau oder einer solchen
Verdichtung mehr ausgesetzt. Außerdem
deuten einige Literaturstellen darauf hin, dass die Verwendung von
Baumwollbällchen
zur Reinigung des äußeren Ohrkanals
die normale Ausschüttung
von Ohrenwachs und Epithel stören
und die Chance erhöhen,
dass es sich ansammelt und verdichtet. Das Ansammeln und/oder Verdichten von
Ohrenwachs kann Reizung, Jucken, Schmerzen, Infektion oder Schallleitungsschwerhörigkeit
verursachen. Die Wachsentfernung ist notwendig, um diese Bedingungen
zu lindern. Die Entfernung von Ohrenschmalz ist auch erforderlich,
wenn es notwendig ist, die Trommelfellmembran zu untersuchen.
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Verschiedene
Zusammensetzungen zur Erweichung oder Entfernung von menschlichem
Ohrenschmalz sind bekannt. Verschiedene Produkte enthalten Carbamidperoxid
(6,5%) in wasserfreiem Glycerin als Träger, wie in der FDA-Monografie
Teil 344 definiert. Diese schließen Produkte ein, wie Murine® Ohrtropfen, die
von Abbott Laboratories, Columbus, Ohio, erhältlich sind; Debrox® Drops
Earwax Removal Aid, erhältlich von
SmithKline Beecham in Pittsburgh, Pennsylvania; Bausch & Lomb Ohrenwachsentferner,
erhältlich
von Bausch & Lomb
in Rochester, New York und Flents® Ohrwachsentferner,
erhältlich
von Flents Products Co. in Yonkers, New York. Ein weiteres im Handel
erhältliches
Produkt sind Cerumenex® Ohrtropfen, die verschreibungspflichtig
sind, die Triethanolaminpolypeptidoleat-Kondensat (10%) enthalten
und von Purdue Frederick Company in Norwalk, Connecticut erhältlich sind.
Cerumenex® führt manchmal
zu einer Reizung im Ohrkanal.
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Außerdem wird
in der Literatur von bestimmten anderen Mitteln gesprochen, von
denen bekannt ist, dass sie wirksam sind, um Ohrwachs zu erweichen.
Solche Mittel schließen
Glycerin (Glycerol), Olivenöl,
Mandelöl,
Mineralöl,
Natriumcarbonat, Natriumbicarbonat, Wasserstoffperoxid, Docusatnatrium
und Dichlorbenzol ein. Nach dem Erweichen mit einem dieser Mittel
wird oft ein Spülen
mit Wasser oder Kochsalzlösung
mit Körpertemperatur
durchgeführt,
um das erweichte Ohrenschmalz zu entfernen. Dichlorbenzol führt manchmal
zu einer Reizung im Ohrkanal.
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Zusammensetzungen,
die die Entfernung von Ohrwachs erleichtern, waren auch Gegenstand
verschiedener Patente. Z.B. offenbart U.S.-Patent Nr. 3 422 186
(Sasmor) cerumenolytische Zusammensetzungen bzw. Ohrenschmalz lösende Zusammensetzungen
mit Ethylenoxid-Polyoxypropylenglycolkondensaten; U.S.-Patent Nr.
4 895 875 (Winston) offenbart stabilisierte Peroxidlösungen mit
Harnstoffperoxid und Glycerin und Verfahren zur Herstellung und
Verwendung, die nützlich
sind zur Entfernung von Ohrenschmalz; U.S.-Patent Nr. 5 296 472
(Sanchez et al.) offenbart Zusammensetzungen mit Cyclodextrinen
und Verfahren zur Verwendung für
die Cerumenentfernung; U.S.-Patent Nr. 5 380 711 (Sanchez et al.)
offenbart ölfreie "leere" Cyclodextrinzusammensetzungen
und Verfahren zur Verwendung für
die Entfernung von Ohrenschmalz und U.S.-Patent Nr. 5 480 658 (Melman)
offenbart Zusammensetzungen mit Essigsäure und Borsäure auf
Wasserbasis, die geeignet sind zur Reinigung des äußeren Ohrkanals
von Haustieren.
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Eine
wässrige
Lösung
mit 5% Natriumbicarbonat wird oft von Ärzten hergestellt und dazu
verwendet, verdichtetes Ohrenschmalz wirksam zu behandeln. Diese
Lösung
kann mit oder ohne Glycerin hergestellt werden. Diese Lösungen sind
jedoch nicht stabil und aus diesem Grund wurden Natriumbicarbonatlösungen nie zu
kommerziellen Produkten entwickelt. Wenn sie verwendet werden, hat
der Arzt die Unannehmlichkeit, dass die Lösung für jeden einzelnen Patienten
hergestellt werden muss.
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Trotz
der oben beschriebenen Ohrenschmalz lösenden Mittel und Zusammensetzungen
besteht ein Bedarf für
eine verbesserte Zusammensetzung, um die Entfernung von menschlichem
Ohrenschmalz zu fördern,
die wirtschaftlich lebensfähig
ist und nicht unter den Beschränkungen
der derzeit verfügbaren
Cerumenolytika leidet. Die vorliegende Erfindung liefert vorteilhafte
Zusammensetzungen, um diesen Bedarf zu erfüllen.
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Zusammenfassung der Erfindung
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Ein
Aspekt der vorliegenden Erfindung ist eine Zusammensetzung, um die
Entfernung von menschlichem Ohrenschmalz zu fördern, die Bicarbonat und ein
cerumenolytisch annehmbares Enzym enthält. Die Zusammensetzung enthält bevorzugt
auch einen wässrigen
für die
Ohren annehmbaren Hilfsstoff, der als Träger dient. Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
sind wirtschaftlich lebensfähig
und liefern ein sicheres und wirksames Mittel, um menschliches Ohrenschmalz
aus dem äußeren Ohrkanal
zu entfernen.
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Kurze Beschreibung der
Zeichnungen
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Für ein vollständigeres
Verständnis
der vorliegenden Erfindung und der weiteren Gegenstände und Vorteile
davon wird auf die folgende Beschreibung Bezug genommen, die in
Zusammenhang mit den begleitenden Zeichnungen zu sehen ist, worin:
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1 eine
Explosionszeichnung einer bevorzugten Vorrichtung ist, die für die Abgabe
bestimmter bevorzugter Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung
geeignet ist;
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2 ein
Querschnitt der Ansicht von 1 ist;
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3 eine
Vorderansicht der Vorrichtung von 1 im zusammengesetzten
Zustand ist, bei der der erste und zweite Teil der Zusammensetzung
nicht vermischt sind;
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4 ein
Querschnitt der Ansicht von 3 ist;
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5 ein
vergrößerter Querschnitt
des oberen Behälters
der Vorrichtung von 1 ist;
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6 ein
Querschnitt von 5 entlang der Linie 6-6 ist;
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7 eine
Draufsicht des Sicherheitsrings der Vorrichtung von 1 ist;
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8 eine
quergeschnittene fragmentarische Ansicht in aufgelösten Einzelteilen
der röhrenförmigen Hülse, des
oberen Behälters
und der Kappe der Vorrichtung von 1 ist;
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9 eine
Vorderansicht der Vorrichtung von 1 im zusammengesetzten
Zustand ist, bei der der erste und zweite Teil der Zusammensetzung
vermischt worden sind, die Kappe entfernt ist und die Vorrichtung fertig
zur Abgabe der vermischten Zusammensetzung ist und
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10 eine
querschnittartige fragmentarische Ansicht von 9 ist.
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Detaillierte Beschreibung
der Erfindung
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Die
bevorzugten Ausführungsformen
der vorliegenden Erfindung und deren Vorteile werden am besten unter
Bezugnahme auf die 1 bis 10 der
Zeichnungen verstanden, wobei gleiche Ziffern für gleiche und entsprechende
Teile der verschiedenen Zeichnungen verwendet werden.
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Wenn
nicht anders angegeben, sind alle Konzentrationen von Inhaltsstoffen,
die als Prozent aufgeführt sind,
in Einheiten von Gewicht/Volumenprozent angegeben.
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Der
Ausdruck "Bicarbonat", wie er hier verwendet
wird, bezieht sich auf jedes lösliche
Bicarbonatsalz. Diese Salze werden am häufigsten mit Metallen der Gruppe
I gebildet. Natriumbicarbonat, Kaliumbicarbonat oder Mischungen
davon sind bevorzugte Bicarbonate.
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Der
Ausdruck "für die Ohren
annehmbarer Träger" bezieht sich auf
jede Substanz oder Kombination von Substanzen, die als Träger für ein aktives
Mittel oder für
Mittel dienen kann und die geeignet ist zur Verabreichung in den äußeren Ohrkanal.
Z.B. kann ein für
die Ohren annehmbarer Träger
irgendeine Kombination von Konservierungsmitteln, Tensiden, die
Viskosität
verbessernden Mitteln, die Penetration verbessernden Mitteln, Puffern,
Natriumchlorid oder anderen Salzen, Löslichkeitsvermittlern, Stabilisatoren,
Mitteln zur Einstellung des pH-Werts, Tonizitätsmitteln, Füllstoffen,
Einhüllmitteln
und Wasser sein. Der für
die Ohren annehmbare Träger
für die
erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
ist bevorzugt ein wässriger
Träger.
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Die
bevorzugten Konservierungsmittel für die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
schließen, ohne
darauf begrenzt zu sein, Poly[dimethylimino-2-buten-1,4-diyl]chlorid-alpha-[4-tris-(2-hydroxyethyl)ammonium]-dichlorid, das von
Onyx Chemical Corporation als Polyquaternium 1 oder Onamer MTM oder von Alcon Laboratories Inc. als Polyquad® erhältlich ist;
Benzalkoniumhalogenide, wie Benzalkoniumchlorid; Alexidinsalze,
Chlorhexidinsalze; Hexamethylenbiguanimide und deren Polymere und
Mischungen davon ein.
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Das
Tensid der vorliegenden Erfindung ist bevorzugt nicht ionisch und
kann, ohne darauf beschränkt zu
sein, Polysorbate, wie Polysorbat 20, das von ICI Americas Inc.
in Wilmington, Delaware, unter dem Markennamen Tween® 20
erhältlich
ist; 4-(1,1,3,3-Tetramethylbutyl)phenol/poly(oxyethylen)polymere,
wie das unter dem Markennamen Tyloxapol vertriebene Polymer; Poly(oxyethylen)-Poly(oxypropylen)-Blockcopolymere; Polyethylenglycolester
von Fettsäuren,
wie Cocosnuss-, Polysorbat-, Polyoxyethylen- und Polyoxypropylenether
von höheren
Alkanen (C12-C18)
einschließen.
Beispiele für
die bevorzugte Klasse schließen
Polysorbat-20-polyoxyethylen-(23)-laurylether (Brij® 35),
Polyoxyethylen-(40)-stearat (Myrj® 52),
Polyoxyethylen-(25)-propylenglycolstearat (Atlas G2612) ein. Brij® 35,
Myrj® 52
und Atlas® G2612
sind Markennamen und sind im Handel erhältlich von ICI Americas Inc.
Am meisten bevorzugt wird das nichtionische Tensid ausgewählt aus
Poly(oxyethylen)-Poly(oxypropylen)-Blockcopolymeren und Mischungen
davon. Solche Tensidkomponenten können im Handel erhalten werden
von BASF Corporation unter den Markennamen Pluronic® und Tetronic®.
Solche Blockcopolymere können
allgemein beschrieben werden als Polyoxyethylen/Polyoxypropylen-Kondensationspolymere,
die in primären
Hydroxylgruppen enden. Sie können
synthetisiert werden, indem zuerst eine hydrophobe Verbindung mit
dem gewünschten
Molekulargewicht durch kontrollierte Addition von Propylenoxid an
die zwei Hydroxylgruppen von Propylenglycol erzeugt wird. In der
zweiten Stufe der Synthese wird Ethylenoxid zugefügt, um diese
hydrophobe Verbindung zwischen hydrophilen Gruppen sandwichartig einzuschließen.
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Bevorzugte
Puffer der vorliegenden Erfindung schließen, ohne darauf beschränkt zu sein,
Citrat, Phosphat, Borat, Acetat, Tris und deren Salze und Mischungen
ein. Bicarbonate können
auch als Puffer für
die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
dienen. Andere übliche
Pufferkomponenten können
auch angewendet werden, um den pH-Wert der Zusammensetzung zu erhalten
oder einzustellen.
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Die
erfindungsgemäße Zusammensetzung
wendet ein Enzym an, das unten genauer beschrieben wird. Das Enzym
kann eine feste Zusammensetzung, wie ein Pulver oder eine Tablette,
oder eine flüssige
Zusammensetzung sein. Die flüssigen
Enzymzusammensetzungen der vorliegenden Erfindung enthalten bevorzugt
ein Enzym, Stabilisierungsmittel und Wasser.
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Enzym
stabilisierende Mittel, die zur Verwendung für die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen bevorzugt
sind, schließen,
ohne darauf beschränkt
zu sein, monomere Polyole, polymere Polyole, Calciumionen und Borat/Borsäureverbindungen
ein.
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Der
Ausdruck "monomeres
Polyol", wie er
hier verwendet wird, bezieht sich auf eine Verbindung mit 2 bis
6 Kohlenstoffatomen und mindestens zwei Hydroxygruppen. Beispiele
für monomere
Polyole sind Glycerin, Propylenglycol, Ethylenglycol, Sorbit und
Mannit. Bevorzugt werden die monomeren Polyole ausgewählt aus Polyolen
mit 2 bis 3 Kohlenstoffatomen und mindestens zwei Hydroxygruppen
("2-3-Carbonpolyol"). Beispiele für 2-3-Carbonpolyole
sind Glycerin, 1,2-Propandiol ("Propylenglycol"), 1,3-Propandiol
und Ethylenglycol. Glycerin und Propylenglycol sind die am meisten
bevorzugten 2-3-Carbonpolyole.
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Der
Ausdruck "polymeres
Polyol", wie er
hier verwendet wird, bezieht sich auf polyalkoxyliertes Glycol mit
einem Molekulargewicht im Bereich von etwa 200 bis 600 Dalton. Beispiele
für polymere
Polyole sind Polyethylenglycol 200 (was ein Molekulargewicht von
200 Dalton bezeichnet, "PEG
200") und PEG 400.
Die PEGs können
gegebenenfalls monoalkoxyliert sein. Beispiele für monoalkoxylierte PEGs sind
Monomethoxy-PEG 200 und Ethoxy-PEG 400. Obwohl diese alkoxylierten
PEGs technisch keine Polyole sind, sind sie in der Struktur den
nicht alkoxylierten PEGs ähnlich,
daher sind sie für
Definitionszwecke in dem Ausdruck "polymeres Polyol" enthalten.
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Wenn
eine Kombination von monomeren und polymeren Polyolen verwendet
wird, variieren die Mengen von monomerem Polyol und polymerem Polyol
abhängig
von der jeweiligen Kombination der verwendeten Polyole. Im Allgemeinen
erfordert eine solche flüssige
Enzymzusammensetzung etwa 40 bis 85% Gewicht/Volumen ("% G/V") einer Polyolmischung,
um die notwendigen Kriterien für
wirksame und kommerziell lebensfähige
flüssige
Enzymzusammensetzungen zu erzielen, wie oben beschrieben. Das Verhältnis von
monomeren zu polymeren Polyolen ist auch wichtig. Allgemein liegt
das Verhältnis
von monomerem Polyol:polymerem Polyol bei 1:5 bis 5:1 mit einem
bevorzugten Verhältnis
von 2:1 bis 1:2, Gewicht:Gewicht. Obwohl alle Polyole Komponenten
der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
sein können,
können
spezielle Polyole verwendet werden abhängig von der jeweils vorgesehenen
Verwendung. Z.B. ist Propylenglycol, das eine konservierende Aktivität aufweist,
ein bevorzugtes monomeres Polyol, wenn Bedarf dafür besteht,
dass ein zusätzliches Konservierungsmittel
in einer flüssigen
Enzymzusammensetzung der vorliegenden Erfindung vorhanden ist. Die
am meisten bevorzugte Kombination von Polyolen, die in den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen verwendet
wird, ist Glycerin und PEG-400. Die am meisten bevorzugte Menge
der Kombination aus Glycerin/PEG-400 ist 25% G/V Glycerin mit 50%
G/V PEG-400.
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Die
flüssigen
Enzymzusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können auch
eine wirksame Menge an Calciumionen enthalten. Die in den erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
enthaltenen Calciumionen können
erhalten werden durch Zugabe verschiedener Calciumsalze. Z.B. kann
eine Calciumionenquelle erhalten werden aus Calciumchlorid, Calciumacetat
und Calciumascorbat oder anderen wasserlöslichen Salzen von Calcium.
Die am meisten bevorzugte Calciumionenquelle ist Calciumchlorid.
Der Ausdruck "wirksame
Menge an Calciumionen",
wie er hier verwendet wird, bezieht sich auf die Menge an Calciumionen, die
die proteolytische Stabilität
eines Enzyms in der flüssigen
Enzymzusammensetzung der vorliegenden Erfindung verbessert. Während diese
Menge abhängig
von verschiedenen vorhandenen Komponenten variieren kann, ist eine
typische Calciumionenkonzentration etwa 1 bis 90 millimolar. Bevorzugte
Konzentrationen sind etwa 4,5 bis 45 millimolar und am meisten bevorzugte
Konzentrationen sind 10 bis 25 millimolar.
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Die
flüssigen
Enzymzusammensetzungen der vorliegenden Erfindung können auch
eine wirksame Menge einer Borat/Borsäureverbindung enthalten. Der
Ausdruck "Borat/Borsäureverbindung", wie er hier verwendet
wird, bezieht sich auf eine anorganische Verbindung mit Bor und
ein oder mehreren Sauerstoffgruppen, die entweder in saurer oder
basischer Form ist, wenn sie in einer Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung
gelöst
wird. Quellen für
Borat/Borsäureverbindungen
schließen
Alkalimetallsalze von Borat, Borsäure und Borax ein. Der Ausdruck "wirksame Menge einer
Borat/Borsäureverbindung", wie er hier verwendet wird,
bezieht sich auf die Menge einer Borat/Borsäureverbindung, die in einer
flüssigen
Enzymzusammensetzung der vorliegenden Erfindung enthalten ist, die
die proteolytische Stabilität
des Enzyms verbessert. Auch wenn eine solche Menge variieren kann
abhängig
von anderen Komponenten, die vorhanden sind, ist die Menge etwa
0,3 bis 8,0% (GN). Bevorzugte Mengen sind 0,5 bis 2,0% (G/V). Die
Borat/Borsäureverbindung
kann auch zu einer antimikrobiellen Konservierung der flüssigen Enzymzusammensetzungen
der vorliegenden Erfindung beitragen in einem Ausmaß, das wirksam
ist für
eine Mehrfachverwendungsabgabe. Die Löslichkeit der Borat/Borsäureverbindung
kann in Wasser begrenzt sein. Die Löslichkeit dieser Verbindungen
kann jedoch erhöht
werden, indem die Menge an angewendetem Polyol erhöht wird.
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Bevorzugte
Demulcentien oder Einhüllmittel
für die
erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
schließen,
ohne darauf beschränkt
zu sein, Povidone, Polyvinylalkohol, Glycerin, Propylenglycol, Polyethylenglycol und
Cellulosederivate, wie Hydroxypropylmethylcellulose (HPMC) ein.
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Eine
erste Zusammensetzung, die hier als Referenz beschrieben wird, schließt Bicarbonat
und einen wässrigen
für das
Ohr annehmbaren Träger
ein. Natriumbicarbonat ist das bevorzugte Bicarbonat. Natriumbicarbonat
ist bevorzugt in einer Menge von etwa 0,5 bis etwa 15% vorhanden.
Die Menge an Natriumbicarbonat ist am meisten bevorzugt etwa 5%.
Der wässrige
für das
Ohr annehmbare Träger
schließt
bevorzugt ein Demulcens, ein Tensid, ein Konservierungsmittel und
einen Puffer oder Kombinationen von jedem der vorhergehenden Bestand teile
ein. Glycerin ist ein bevorzugtes Demulcens und es ist bevorzugt
in einer Menge von etwa 1% bis etwa 20% vorhanden. Natriumcitrat·2 H2O ist ein bevorzugter Puffer und ist bevorzugt
in einer Menge von etwa 0,1 bis etwa 8% vorhanden. Tetronic® 1304
ist ein bevorzugtes Tensid und ist bevorzugt in einer Menge von
etwa 0,05 bis etwa 1% vorhanden. Benzalkoniumchlorid ist ein bevorzugtes
Konservierungsmittel und ist bevorzugt in einer Menge von etwa 0,001
bis etwa 0,1% vorhanden. Puffer sind bevorzugt in einer Menge vorhanden,
die ausreichend ist, um den pH-Wert der Zusammensetzung auf etwa
7,5 bis etwa 9,0 einzustellen.
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Die
Beispiele 1 und 2 unten liefern in-vitro-Daten, die zeigen, dass
die erste Zusammensetzung wirksam ist, um die Entfernung von menschlichem
und künstlichem
Ohrenschmalz zu fördern.
Die erste Zusammensetzung wird bevorzugt in einer Flasche mit einer
Spritze oder Tropfvorrichtung verpackt, um die Zusammensetzung abzugeben,
oder in einer Plastikflasche, die zusammengedrückt werden kann, um die Zusammensetzung
abzugeben.
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Um
die Zusammensetzung zu verabreichen, dreht ein Anwender zuerst seinen
oder ihren Kopf zu einer Schulter oder nimmt eine geneigte Position
auf seiner oder ihrer Seite ein. Der Anwender füllt dann im Wesentlichen den äußeren Ohrkanal
mit der Zusammensetzung. Ungefähr
1 bis 2 ml der Zusammensetzung füllen
typischerweise den äußeren Ohrkanal.
Der Anwender/die Anwenderin lässt
seinen/ihren Kopf geneigt oder bleibt in der geneigten Position über einen
ausreichenden Zeitraum, damit die Zusammensetzung den äußeren Ohrkanal
baden kann und im Ohrkanal vorhandenes Ohrenschmalz verschieben,
aufbrechen und/oder verdauen kann. Dieser Zeitraum ist bevorzugt
etwa 15 Minuten bis etwa 30 Minuten, obwohl in bestimmten Fällen der
Zeitraum kürzer
oder länger
sein kann. Anders als bei vielen bekannten cerumenolytischen Mitteln
wird angenommen, dass die wässrigen
Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung für eine vollständige Entfernung
von Ohrenschmalz kein Spülen
mit Wasser oder Kochsalzlösung
erfordern aufgrund der Wirksamkeit bei der Verschiebung, dem Aufbrechen
und dem Verdauen des Ohrenschmalzes. Alternativ kann nach Beendigung
des Badens eine Spülung
mit Wasser, Kochsalzlösung
oder einer anderen Spülflüssigkeit
mit Körpertemperatur
durchgeführt
werden, um die Entfernung von Ohrenschmalz aus dem Ohrkanal zu erleichtern.
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Eine
zweite Zusammensetzung, die hier als Referenz beschrieben wird,
schließt
ein Enzym und einen für
das Ohr annehmbaren Träger
ein. Der für
das Ohr annehmbare Träger
ist bevorzugt identisch mit oder im Wesentlichen gleich mit dem
oben im Zusammenhang mit der ersten Zusammensetzung beschriebenen
für das
Ohr annehmbaren Träger.
Der für
das Ohr annehmbare Träger
der zweiten Zusammensetzung kann jedoch auch ein Enzym stabilisierendes
Mittel enthalten. Glycerin ist ein bevorzugtes Enzym stabilisierendes
Mittel.
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Die
Enzyme, die für
die Zusammensetzungen und Verfahren der vorliegenden Erfindung verwendet werden
können,
schließen
alle Enzyme ein, die geeignet sind zum Aufweichen, Verschieben,
Aufbrechen und/oder Verdauen von menschlichem Ohrenschmalz im äußeren Ohrkanal
und verursachen höchstens
nur eine geringe Reizung im äußeren Ohrkanal.
Für die
Zwecke dieser Beschreibung werden Enzyme, die die vorhergehenden
Erfordernisse erfüllen,
als "cerumenolytisch
annehmbar" bezeichnet.
Es wurde gefunden, dass bevorzugte cerumenolytisch annehmbare Enzyme
Lipasen, Proteasen und Amylasen einschließen. Außerdem können Kombinationen von Lipasen
und Proteasen, Lipasen und Amylasen und von Proteasen und Amylasen
verwendet werden. Die am meisten bevorzugten Enzyme sind Proteasen,
die hier auch als proteolytische Enzyme bezeichnet werden.
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Beispiele
für cerumenolytisch
annehmbare proteolytische Enzyme, die für die vorliegende Erfindung verwendet
werden können,
schließen,
ohne darauf beschränkt
zu sein, Pankreatin, Trypsin, Subtilisin, Collagenase, Keratinase,
Carboxypeptidase, Papain, Bromelain, Aminopeptidase, Elastase, Aspergillus-Peptidase, Pronase
E (aus S. griseus), Dispase (aus Bacillus polymyxa) und Mischungen
davon ein. Wenn Papain verwendet wird, kann ein Reduktionsmittel,
wie N-Acetylcystein, erforderlich sein. Von Mikroben abgeleitete
Enzyme, wie solche aus Bacillus-, Streptomyces- und Aspergillus-Mikroorganismen,
stellen eine weitere cerumenolytisch annehmbare bevorzugte Art von
Enzym dar, die in der vorliegenden Erfindung verwendet werden kann.
Von dieser Untergruppe von Enzymen sind die am meisten bevorzugten
die von Bacillus stammenden alkalischen Proteasen, die allgemein "Subtilisin"-Enzyme genannt werden.
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Die
Identifizierung, Abtrennung und Reinigung von Enzymen ist im Stand
der Technik bekannt. Viele Techniken zur Identifikation und Isolierung
gibt es in der allgemeinen wissenschaftlichen Literatur zur Isolierung
von Enzymen, einschließlich
solcher Enzyme mit proteolytischer und gemischter proteolytischer/lipolytischer/amylolytischer
Aktivität.
Die erfindungsgemäß in Betracht
gezogenen Enzyme können
leicht mit bekannten Techniken aus Pflanzen, Tieren oder mikrobiellen
Quellen erhalten werden. Außerdem
ist mit der Verfügbarkeit
rekombinanter DNA-Techniken davon auszugehen, dass neue Quellen
und Arten von stabilen proteolytischen Enzymen verfügbar werden.
Solche Enzyme sollen als im Schutzbereich der vorliegenden Erfindung liegend
angesehen werden, solange sie die vorher ausgeführten Kriterien erfüllen.
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Pankreatin,
Subtilisin und Trypsin sind bevorzugte Enzyme zur Verwendung für die vorliegende
Erfindung. Pankreatin wird aus Säugetierpankreas
extrahiert und ist im Handel erhältlich
aus verschiedenen Quellen, einschließlich Scientific Protein Laboratories
in Waunakee, Wisconsin; Novo Nordisk in Dänemark; Sigma Chemical Co.
in St. Louis, Missouri und Boehringer Mannheim in Indianapolis,
Indiana. Pankreatin USP ist eine Mischung aus Proteasen, Lipasen
und Amylasen und wird in der United States Pharmacopeia ("USP") definiert. Die
am meisten bevorzugte Form von Pankreatin ist Pankreatin 9X. Der
Ausdruck "Pankreatin
9X", wie er hier
verwendet wird, bedeutet filtriertes (0,2 μm) Pankreatin, das den neunfachen
USP-Proteaseeinheitsgehalt enthält.
Subtilisin stammt aus Bacillus-Bakterien und ist im Handel erhältlich aus
verschiedenen kommerziellen Quellen, einschließlich Novo Industries; Fluka
Biochemika in Buchs, Schweiz und Boehringer Mannheim. Trypsin ist
eine Protease mit 23.800 Dalton und 6 Disulfidbrücken. Trypsin kann synthetisiert
werden oder aus verschiedenen Quellen erhalten werden, z.B. Pankreatin
von Schwein, Rind oder schweineartigen Tieren. Trypsin ist auch
aus kommerziellen Quellen verfügbar,
wie Sigma Chemical Co., Biofac Co. im Vereinigten Königreich
und Novo Nordisk. Trypsin kann von Art zu Art variieren, ist aber
im Allgemeinen stark homolog mit Trypsin von Schwein oder Mensch.
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Die
am meisten bevorzugten Enzyme der vorliegenden Erfindung sind die
Alkyltrypsine ("Al-Trypsin(e)"). Al-Trypsine sind
in flüssigen
Zusammensetzungen stabiler als natives Trypsin oder andere native
Enzyme. Der Ausdruck "Al-Trypsin", wie er hier verwendet
wird, bezieht sich auf ein kovalent modifiziertes Trypsin, bei dem
eine oder mehrere der Lysin-Epsilon-Aminogruppen monoalkyliert oder
dialkyliert wurden, um die entsprechende Monoalkylamino- oder Dialkylaminogruppe
zu bilden. Die an das Amin gebundene Alkylgruppe kann eine primäre oder
verzweigte C1-C12-Gruppe
sein.
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Bevorzugte
Al-Trypsine der vorliegenden Erfindung sind solche, bei denen die
Alkylgruppe eine primäre
oder verzweigte C1-C4-Gruppe
ist. Die Alkylierung von Trypsin wird allgemein durch reduktive
Alkylierung bewirkt. Der Alkylierungsgrad der Lysin-Epsilon-Aminogruppen
hängt von
den Reaktionsbedingungen des reduktiven Alkylierungsverfahrens ab.
Wenn z.B. der Reaktionszyklus einige Male wiederholt wird und/oder
ein höheres
Verhältnis
von Reagenz zu Enzym verwendet wird, dann wird eher eine vollständige Alkylierung,
d.h. Alkylierung aller Lysin-Epsilon-Aminogruppen, erreicht. Al-Trypsine
der vorliegenden Erfindung sind bevorzugt an allen ihren Lysin-Epsilon-Aminogruppen
zu mehr als etwa 80% dialkyliert.
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Das
am meisten bevorzugte Al-Trypsin ist Methyltrypsin ("Me-Trypsin"). Das am meisten
bevorzugte Me-Trypsin der vorliegenden Erfindung stammt aus Schweinegewebequellen
und ist zu mehr als etwa 80% dimethyliert, wie oben beschrieben.
Methyltrypsin ist bevorzugt in einer Menge von etwa 50 AU/ml bis
etwa 500 AU/ml vorhanden. Methyltrypsin ist am meisten bevorzugt
in einer Menge von 200 AU/ml vorhanden. Für die Zwecke dieser Beschreibung
wird eine "Aktivitätseinheit" oder "AU" definiert als die
Menge an Enzymaktivität,
die notwendig ist, um 1 Mikrogramm (mcg) Tyrosin pro Minute ("mgc Tyr/min") zu erzeugen, wie
es durch Caseinverdau und kolorimetrische Tests, wie unten beschrieben,
bestimmt wird. 200 AU/ml ist äquivalent
zu etwa 600 USP-Einheiten Trypsin/ml und entspricht etwa 0,25 mg
Methyltrypsin pro ml.
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Caseinverdau-Test
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Ein
5,0-ml-Anteil von Caseinsubstrat (0,65% Casein G/V) wird 10 Minuten
(min) ± 0,5
Sekunden (s) lang bei 37°C
equilibriert. Ein 1,0-ml-Anteil Enzymlösung (0,2 mg/ml) wird dann
zu dem Caseinsubstrat zugegeben und die Mischung verwirbelt und
dann 10 min ± 0,5
s bei 37°C
inkubiert. Nach der Inkubation werden 5,0 ml 14% Trichloressigsäure zugegeben
und die entstehende Mischung sofort verwirbelt. Die Mischung wird mindestens
weitere 30 Minuten lang inkubiert, dann verwirbelt und 15 bis 20
Minuten lang (ungefähr
2000 U/min) zentrifugiert. Der Überstand
der zentrifugierten Probe wird in einen Serumfiltersammler filtriert
und ein 2,0-ml-Aliquot
entnommen. Zu der 2,0-ml-Probe werden 5,0 ml 5,3% Natriumcarbonatlösung zugegeben.
Die Probe wird verwirbelt, 1,0 ml 0,67 n Folin's Phenolreagenz zugegeben und die Probe
sofort wieder verwirbelt und dann bei 37°C 60 Minuten lang inkubiert.
Die Probe wird dann an einem Spektrophotometer mit sichtbarem Licht
bei 660 nm gegen gereinigtes Wasser als Referenz abgelesen. Die
Probenkonzentration wird dann durch Vergleich mit einer Tyrosinstandardkurve
bestimmt.
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Al-Trypsine
können
mit dem Verfahren der reduktiven Alkylierung aus Trypsin synthetisiert
werden, wie es genauer in U.S.-Patent Nr. 6 228 323 beschrieben
wird, das hier in seiner Gesamtheit durch Bezugnahme mit aufgenommen
wird. Me-Trypsin ist auch aus kommerziellen Quellen verfügbar, z.B.
Sigma Chemical Co. und Promega Corp. (Madison, Wis.).
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Während der
Lagerung kann etwas von der Aktivität des Enzyms verloren gehen
abhängig
von der Dauer der Lagerung und den Temperaturbedingungen. Somit
können
die Enzyme der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
mit Anfangsmengen hergestellt werden, die die hier beschriebenen
Konzentrationsbereiche überschreiten.
Die bevorzugten Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung enthalten
im Allgemeinen ein oder mehrere Enzyme in einer Menge von etwa 50
bis 1000 AU/ml in der vereinigten Lösung. Die Zusammensetzungen
enthalten am meisten bevorzugt etwa 100 bis 500 AU/ml in der kombinierten
Lösung,
was Pankreatin im Bereich von etwa 0,1 bis 2% G/V; Subtilisin in
einem Bereich von etwa 0,01 bis 0,2% G/V; Trypsin im Bereich von
etwa 0,01 bis 0,2% G/V und Methyltrypsin im Bereich von etwa 0,01
bis 0,2% G/V entspricht.
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Die
Beispiele 1 und 2 unten liefern in-vitro-Daten, die zeigen, dass
die zweite Zusammensetzung wirksam ist bei der Förderung der Entfernung von
menschlichem und künstlichem
Ohrenschmalz.
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Weil
viele cerumenolytisch annehmbare Enzyme in stark wässrigen
Lösungen
nach einem Zeitraum von Tagen oder Wochen instabil sind, wird die
zweite Zusammensetzung bevorzugt in zwei getrennten Teilen hergestellt
und verpackt, die vor der Verabreichung in den äußeren Ohrkanal vermischt werden.
Der erste Teil enthält
bevorzugt das cerumenolytisch annehmbare Enzym und den Enzymstabilisator
des für
das Ohr annehmbaren Trägers
und der zweite Teil enthält
bevorzugt den Rest des für
das Ohr annehmbaren Trägers.
Referenzbeispiel 3 unten beschreibt den ersten Teil und den zweiten
Teil einer beispielhaften zweiten Zusammensetzung der vorliegenden
Erfindung ebenso wie ein bevorzugtes Verfahren zur Herstellung der
ersten und zweiten Teile.
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Sobald
die ersten und zweiten Teile hergestellt sind, können sie aus den getrennten
Packungen entnommen werden und vermischt werden. Eine Flasche mit
einer Spritze oder einer Tropfvorrichtung oder eine zusammendrückbare Kunststoffspenderflasche
werden bevorzugt verwendet, um die gemischte Zusammensetzung in
das Ohr abzugeben, wie oben im Zusammenhang mit der ersten Zusammensetzung
beschrieben.
-
Alternativ
kann die zweite Zusammensetzung in einer einzelnen Vorrichtung mit
getrennten Behältern oder
Kammern für
ersten Teil und zweiten Teil verpackt werden. Eine solche Vorrichtung
ermöglicht
bevorzugt das Vermischen der zwei Teile vor der Verabreichung und
ermöglicht
auch die Verabreichung der gemischten Zusammensetzung in den äußeren Ohrkanal,
wie oben im Zusammenhang mit der ersten Zusammensetzung beschrieben.
Die 1 bis 10 erläutern eine solche Vorrichtung 10,
die für
die Verpackung des ersten Teils 22 und des zweiten Teils 26 der
zweiten Zusammensetzung gemäß einer
bevorzugten Ausführungsform geeignet
ist.
-
Wie
am besten in den Explosionszeichnungen der 1 und 2 zu
sehen ist, schließt
die Vorrichtung 10 allgemein einen unteren Behälter 12 und
einen oberen Behälter 14,
eine röhrenförmige Hülse oder
ein Glied 16, eine Kappe 18 und eine Sicherheitsversiegelung 19 ein.
Wie am besten in den 3 und 4 gezeigt,
ist im zusammengesetzten Zustand der Vorrichtung 10 der
obere Behälter 14 mit
einem unteren Behälter 12 verbunden,
eine röhrenartige
Hülse 16 ist
in dem oberen Behälter 14 angeordnet
und mit diesem gekoppelt, die Kappe 18 deckt die röhrenförmige Hülse 16 und
ist entfernbar an den oberen Behälter 14 gekoppelt
und die Sicherheitsdichtung 19 ist um den oberen Behälter 14 unter
der Kappe 18 angeordnet. Die Kappe 18 und die
Sicherheitsdichtung 19 sind in 4 aus Gründen der
Klarheit der Darstellung in gestrichelten Linien gezeigt. Die verschiedenen
Teile der Vorrichtung 10 werden bevorzugt aus üblichen
Kunststoffmaterialien geformt. Am meisten bevorzugt wird der untere
Behälter 12 aus
Polyethylen niederer Dichte gebildet, der obere Behälter aus
Polyethylen hoher Dichte, die röhrenförmige Hülse 16 aus
Zylar, einem Copolymer, das von NOVA Chemicals in Leominster, Massachusetts,
erhältlich
ist und die Kappe 18 aus Polypropylen gebildet. Der obere
Behälter 14 hat
ein Reservoir 20 zur Aufnahme des ersten Teils 22.
Der untere Behälter 12 hat
ein Reservoir 24, um den zweiten Teil 26 aufzunehmen.
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Der
untere Behälter 12 schließt einen
hohlen Hals 28 ein, der zwei ringförmige Kanten 30 und 32 beinhaltet.
Rillen 34 sind an den Kanten 30 und 32 angeordnet.
Eine Schulter 36 ist an der Verbindung von Hals 28 und Reservoir 24 angeordnet.
Dichtungsringe 37 sind an der inneren Oberfläche des
Halses 28 über
der Schulter 36 angeordnet.
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Wie
am besten in den 2 und 4 gezeigt,
weist der obere Behälter 14 eine
Oberfläche 82 auf, die
bündig
ist mit den Dichtungsringen 37 des unteren Behälters 12,
um eine Leckage des zweiten Teils 26 aus Reservoir 24 oder
den Eintritt von Luft in das Reservoir 24 zu verhindern.
Der obere Behälter 14 hat
auch einen Verschluss 38, der den Hals 28 des
unteren Behälters 12 umgibt.
Wie am besten in 5 gezeigt, schließt der Verschluss 38 zwei
ringförmige
Rippen 40 und 42 ein, die an der inneren Oberfläche 44 des
Verschlusses 38 angeordnet sind, um mit den Kanten 30 und 32 des
unteren Behälters 12 bündig abzuschließen. Rillen 46 verlaufen
vertikal entlang der inneren Oberfläche 44 von der Rippe 40 zu
der inneren Oberfläche
der Schulter 48. Obwohl in den Figuren nicht gezeigt, verlaufen
auch horizontal und radial entlang der inneren Oberfläche der Schulter 48 Streifen 46 hin
zu der Längsachse
des oberen Behälters 14.
Wenn der obere Behälter 14 auf
dem unteren Behälter 12 angeordnet
ist, kuppeln die Rillen 34 der Kanten 30 und 32 mit
Rillen 46, um zu verhindern, dass der obere Behälter 14 und
der untere Behälter 12 sich
relativ zueinander drehen. Wie am besten in den 5 und 6 gezeigt,
ist eine Vielzahl von Sägezähnen 50 an
der äußeren Oberfläche der
Schulter 48 angeordnet. Wie in 7 gezeigt,
treffen die Sägezähne 50 auf
flexible Flügel 52,
um die Sicherheitsdichtung 19 entfernbar mit dem oberen
Behälter 14 zu
koppeln. Die Sicherheitsdichtung 19 hat eine ringförmige Geometrie mit
einer Perforation am Verbindungspunkt 58. Die Sicherheitsdichtung 19 hat
einen axialen Flügel 56,
der mit dem Rest der Dichtung 19 am Verbindungspunkt 59 verbunden
ist. Der obere Behälter 14 hat
auch einen Hals 55 mit einem äußeren Gewinde 56,
das zu dem inneren Gewinde 60 der Kappe 18 passt,
wie am besten in 8 gezeigt. Wie am besten in 5 gezeigt,
hat der obere Behälter 14 am
Boden eine nicht durchlässige Membran 62,
die entlang einer perforierten Linie 64, die über der
Peripherie des Bodens 62 angeordnet ist, abreißbar ist.
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Die
röhrenförmige Hülse 16 weist
einen Hohlkörper 64 mit
einem trunkierten kegelförmigen
Teil 66 an einem Ende und einer schraubenförmigen Kante 68 am
anderen Ende auf. Der trunkierte kegelförmige Teil 66 hat
einen inneren Kanal 70, der in einem reversen trunkierten
kegelförmigen
Loch 72 endet, das als Düse oder Tropfvorrichtung dient,
um die gemischte Zusammensetzung aus Vorrichtung 10 abzugeben.
Alternativ kann der trunkierte kegelförmige Teil 66 so modifiziert
sein, dass er einen üblichen "Luer Lok" aufweist, der zu
der Luer Taper Spezifikation 70.1 der American Standards Association
passt und das Aufsetzen einer Spritze, Kanüle oder eines anderen üblichen
medizinischen Instruments zulässt.
Die schraubenförmige
Kante 68 hat bevorzugt einen kleinen horizontalen Abschnitt 74.
Die röhrenförmige Hülse 16 weist
auch einen ersten Dichtungsring 76 und einen zweiten Dichtungsring 78 auf,
die an der äußeren Oberfläche des
Körpers 64 angeordnet
sind. Die Dichtungsringe 76 und 78 treffen auf
die innere Oberfläche 84 des
Reservoirs 20 des oberen Behälters 14, um die Leckage
des ersten Teils 22 aus Reservoir 20 oder den
Eintritt von Luft in das Reservoir 20 zu verhindern. Der
Dichtungsring 78 ist besonders nützlich, um eine solche Leckage
oder das Eintreten von Luft zu verhindern, wenn der erste Teil 22 eine
Flüssigkeit
ist. Wie in 8 gezeigt, hat die Kappe 18 bevorzugt ein
Glied 80, das das Loch 72 verschließt, wenn
die Kappe 18 auf den oberen Behälter 14 aufgeschraubt
ist.
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Die
oben ausgeführte
Beschreibung ist eine Zusammenfassung der Struktur der Vorrichtung 10.
Bestimmte Teile der Vorrichtung 10 werden genauer in den
U.S.-Patenten Nr. 5 474 209 und 5 782 345 beschrieben, die hier
durch Bezugnahme mit eingeschlossen werden.
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Allgemein
Bezug nehmend auf die 1 bis 10 wird
die bevorzugte Verwendung der Vorrichtung 10, ersten Teil 22 und
zweiten Teil 26 der zweiten Zusammensetzung zu vermischen
und die gemischte Zusammensetzung in den äußeren Ohrkanal abzugeben, genauer
beschrieben. Wie in den 3 bis 4 gezeigt,
ist die Vorrichtung 10 in einer ersten Position, in der
der erste Teil 22 und der zweite Teil 26 unvermischt sind.
Um die Teile 22 und 26 zu mischen, bewegt der
Benutzer zuerst den axialen Flügel 56 der
Sicherheitsdichtung 19 radial nach außen, wobei der Verbindungspunkt 59 bricht.
Der Benutzer hält
dann den axialen Flügel 56 und
dreht die Sicherheitsdichtung 19 um eine Längsachse
der Vorrichtung 10, was bewirkt, dass Sägezähne 50 des oberen
Behälters 14 in
flexible Flügel 52 der
Sicherheitsdichtung 19 eingreifen. Eine solche Drehung
zersprengt die Sicherheitsdichtung 19 am Verbindungspunkt 58.
Der Benutzer kann dann die Sicherheitsdichtung 19 von Vorrichtung 10 entfernen.
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Als
Nächstes
dreht der Benutzer die Kappe 18 auf dem Hals 55 des
oberen Behälters 14 nach
unten. Während
dieser Abwärtsbewegung
der Kappe 18 kommt die innere Schulter 85 der
Kappe 18 mit der äußeren Schulter 86 der
röhrenförmigen Hülse 16 in
Kontakt. Die röhrenförmige Hülse wird
in den oberen Behälter 14 nach
unten geschoben, bis die äußere Schulter 86 der
röhrenförmigen Hülse 16 mit
der Schulter 88 des oberen Behälters 14 in Kontakt
kommt. Bezug nehmend auf 10 wird
die röhrenförmige Hülse 16 nach
unten gestoßen,
die schraubenförmige
Kante 68 reißt
den Boden 62 des Reservoirs 20 entlang der Perforation 64 auf mit
Ausnahme eines Teils der Perforation 64 am horizontalen
Abschnitt 74 der Kante 68. Der Boden 62 wird dadurch
geöffnet,
bleibt aber mit dem oberen Behälter 14 verbunden.
Der erste Teil 22 ist dann in Verbindung mit dem zweiten
Teil 26 und kann weiter vermischt werden, indem die Vorrichtung 10,
falls notwendig, geschüttelt
wird. In dieser zweiten Position der Vorrichtung 10, in
der die Teile 22 und 26 gemischt werden, treffen
die Dichtungsringe 76 und 78 auf die innere Oberfläche 84 des
oberen Behälters 14,
um eine Leckage des ersten oder zweiten Teils der Zusammensetzung
aus den Vorratsbehältern 20 und 24 oder
einen Eintritt von Luft in die Vorratsbehälter zu verhindern. Bei Entfernung
der Kappe 18 kann die gemischte Zusammensetzung in den äußeren Ohrkanal
abgegeben werden, indem auf die äußere Oberfläche des
unteren Behälters 12 so
gedrückt wird,
dass die Mischung durch die Düse 66 der
röhrenförmigen Hülse 16 gedrückt wird.
Wenn die Kappe 18 wieder auf die röhrenförmige Hülse 16 aufgeschraubt
wird, verschließt
das Glied 80 das Loch 72.
-
Eine
dritte Zusammensetzung, die die erfindungsgemäße Zusammensetzung ist, enthält Bicarbonat, ein
cerumenolytisch annehmbares Enzym und einen für das Ohr annehmbaren Träger. Natriumbicarbonat
ist das bevorzugte Bicarbonat. Natriumbicarbonat ist bevorzugt in
einer Menge von etwa 0,5 bis etwa 15% vorhanden. Die Menge an Natriumbicarbonat
ist am meisten bevorzugt etwa 5%. Das cerumenolytisch annehmbare
Enzym für
die dritte Zusammensetzung ist bevorzugt identisch mit dem oben
in Zusammenhang mit der zweiten Zusammensetzung beschriebenen. Das
cerumenolytisch annehmbare Enzym ist bevorzugt in einer Menge von
etwa 50 AU/ml bis etwa 1.000 AU/ml vorhanden. Die am meisten bevorzugten
cerumenolytisch annehmbaren Enzyme sind proteolytische Enzyme. Das
proteolytische Enzym ist bevorzugt in einer Menge von etwa 50 AU/ml
bis etwa 1.000 AU/ml vorhanden. Das am meisten bevorzugte proteolytische
Enzym ist Methyltrypsin. Methyltrypsin ist bevorzugt in einer Menge
von etwa 50 AU/ml bis etwa 500 AU/ml vorhanden. Methyltrypsin ist
am meisten bevorzugt in einer Menge von 200 AU/ml vorhanden. Der
für das
Ohr annehmbare Träger
ist bevorzugt identisch oder im Wesentlichen gleich mit dem für das Ohr
annehmbaren Träger,
der oben im Zusammenhang mit der zweiten Zusammensetzung beschrieben
wurde. Die Beispiele 1, 2, 4, 5 und 7 unten liefern in-vitro-Daten,
die zeigen, dass die dritte bevorzugte Zusammensetzung wirksam ist,
um die Entfernung von menschlichem und künstlichem Cerumen oder Ohrenschmalz
zu fördern.
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Ähnlich wie
die zweite Zusammensetzung wird die dritte Zusammensetzung bevorzugt
in zwei getrennten Teilen hergestellt und verpackt, die vor der
Verabreichung in den äußeren Ohrkanal
vermischt werden. Der erste Teil enthält bevorzugt das cerumenolytisch
annehmbare Enzym und den Enzymstabilisator des für das Ohr annehmbaren Trägers und
der zweite Teil enthält
bevorzugt das Natriumbicarbonat und den Rest des für das Ohr
annehmbaren Trägers.
Die Beispiele 6, 8, 9 und 10 unten, beschreiben Beispiele des ersten Teils
und des zweiten Teils der dritten Zusammensetzung der vorliegenden
Erfindung ebenso wie ein bevorzugtes Verfahren zur Herstellung des
ersten und zweiten Teils.
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Der
erste und zweite Teil können,
sobald sie hergestellt sind, aus den getrennten Verpackungen entnommen
und vermischt werden. Eine Flasche mit einer Spritze oder einer
Tropfvorrichtung oder eine zusammendrückbare Kunststoffspenderflasche
werden bevorzugt verwendet, um die gemischte Zusammensetzung in
das Ohr abzugeben, wie oben im Zusammenhang mit der ersten bevorzugten
Zusammensetzung beschrieben. Alternativ kann die dritte Zusammensetzung
in einer einzelnen Vorrichtung mit getrennten Behältern oder Kammern
für den
ersten Teil und den zweiten Teil verpackt sein und daraus in den äußeren Ohrkanal
abgegeben werden. Eine bevorzugte Vorrichtung ist Vorrichtung 10,
die oben im Zusammenhang mit der zweiten bevorzugten Zusammensetzung
beschrieben wurde.
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Wie
unten beschrieben, können
alle erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
in eine Flasche mit einer Spritze oder einer Tropfvorrichtung zur
Abgabe der Zusammensetzung, eine Kunststoffflasche, die zusammengedrückt werden
kann, um die Zusammensetzung abzugeben, oder eine Vorrichtung, wie
Vorrichtung 10, verpackt werden. Es ist bevorzugt, dass
die abgefüllten
Zusammensetzungen auch in eine Blisterpackung aus Aluminiumfolie
verpackt werden, um jede unerwünschte
Erhöhung
des pH-Werts der Zusammensetzung zu minimieren. Solche Zusammensetzungen
sind, wenn sie so verpackt sind, anders als derzeit bekannte wässrige auf
Natriumbicarbonat basierende Cerumenolytika bis zu 3 Monate nach
ihrer Herstellung pH-stabil bei bis zu 40°C.
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Bei
allen erfindungsgemäßen Zusammensetzungen,
die in einer Kunststoffflasche oder Vorrichtung verpackt sind und
Benzalkoniumchlorid als Konservierungsmittel benutzen, enthält der für das Ohr
annehmbare Träger
bevorzugt auch Natriumcitrat·2
H2O oder ein anderes Citrat. Solche Flaschen
und Vorrichtungen werden bevorzugt aus einem weichen Kunststoff,
wie Polyethylen, hergestellt und bevorzugt mit üblichen Ethylenoxid-(ETO)-methoden sterilisiert.
Es wurde unerwarteterweise gefunden, dass Citrat dazu beiträgt, die
Konzentration des Benzalkoniumchlorids über die Zeit aufrechtzuerhalten
und somit ein Produkt zu liefern, das kommerziell lebensfähiger ist.
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Alle
erfindungsgemäßen Zusammensetzungen,
die ein flüssiges
Enzym enthalten, werden bevorzugt auf sterile Art und Weise hergestellt
durch Filtration durch ein geeignetes mikrobielles Filter. Nachdem
der erste und zweite Teil der Zusammensetzung durch Filtration sterilisiert
worden sind, besteht ein weiterer Vorteil der Vorrichtung 10 darin,
dass der erste und zweite Teil der Zusammensetzung aseptisch vermischt
werden. Dies ist der Fall, weil die Vorrichtung 10, die
den ersten und zweiten Teil der Zusammensetzungen enthält, in aseptischer
Art und Weise mit einer luftdichten Versiegelung zusammengesetzt
wird, wodurch ein steriles Vermischen in dem geschlossenen sterilen
System der Vorrichtung durchgeführt
wird.
-
Die
folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung erläutern, aber
in keiner Weise beschränken.
-
Beispiel 1
-
Tabelle
1 zeigt Beispiele der bevorzugten Zusammensetzungen der vorliegenden
Erfindung, die Zusammensetzungen bestimmter Komponenten dieser beispielhaften
Zusammensetzungen und die Träger
für diese
beispielhaften Zusammensetzungen. Alle Mengen für Inhaltsstoffe haben die Einheit
% Gewicht/Volumen, wenn nicht anders angegeben. Die Zusammensetzung
A ist ein Beispiel für
die erste Zusammensetzung, Zusammensetzung B ist ein Beispiel für die zweite
Zusammensetzung nach dem Vermischen des ersten und zweiten Teils,
und die Zusammensetzungen C und D sind Beispiele der dritten Zusammensetzung
nach dem Vermischen des ersten bzw. zweiten Teils. Zusammensetzung
A ist auch die "Bicarbonatkomponente
von Zusammensetzung C" und
Zusammensetzung B ist auch die "proteolytische
Enzymkomponente von Zusammensetzung C". Zusammensetzung D1 ist
die "Bicarbonatkomponente
von Zusammensetzung D" und
Zusammensetzung D2 ist die "proteolytische Enzymkomponente
von Zusammensetzung D".
V1 ist der für das Ohr annehmbare Träger der
Zusammensetzungen A, B und C und V2 ist
der für
das Ohr annehmbare Träger
für Zusammensetzung
D. Natriumchlorid wurde V2 und D2 zugegeben, so dass diese Zusammensetzungen
einen äquivalenten
Salzgehalt wie V1 haben.
-
-
Beispiel 2
-
Die
Zusammensetzungen A und B wurden auf folgende Art und Weise auf
ihre Wirksamkeit getestet, die Entfernung von Ohrenschmalz zu fördern.
-
Proben
von menschlichem Cerumen wurden von verschiedenen Ohrkliniken bereitgestellt.
Die Proben variierten in der Art und Menge. Daher wurden etwa 20
bis 30 Proben zusammengefasst und in einem Mörser mit Pistill gemischt,
um eine größere relativ
homogene Probencharge zu bilden. Dies ermöglichte es, dass eine Reihe
von Versuchen mit einer einzigen Charge von menschlichem Ohrenschmalz
durchgeführt
wurden.
-
Um
die Variation von Charge-zu-Charge bei menschlichem Ohrenschmalz
zu überwinden,
wurde ein künstliches
Ohrenschmalz entwickelt. Das künstliche
Ohrenschmalz besteht aus einer Mischung von drei Komponenten. Die
erste Komponente (50%) ist eine Lipidmischung basierend auf der
angegebenen Zusammensetzung der Lipide in Ohrwachs. Die zweite Komponente
(30%) sind homogenisierte Rinderhornhautepithelzellen, die die abgeschilferten
Epidermiszellen in Ohrwachs nachahmen. Die dritte Komponente (20%)
ist lyophilisiertes fötales
Rinderserum, das andere Komponenten im Ohrwachs nachahmt, die aus
den Ohrwachs- und Talgdrüsen
ausgeschieden werden.
-
Herstellung von 14 Gramm
künstlichem
Ohrenschmalz
-
- 1. Die folgenden Lipide werden in ein Glasgefäß eingewogen
und dann in 70 ml Chloroform/Methanol (2:1 V/V) unter Erwärmen gelöst: * = Triglyceridsuspension
wird mit Wasser in Stufe 4 gemischt.
- 2. Die Rinderhornhautepithelzellen wurden wie folgt präpariert.
Gefrorene Rinderaugen (insgesamt 305) wurden von Pel-Freeze erworben.
Nach Auftauen in Wasser wurden die Hornhautepithelzellen von den
Augen gekratzt unter Verwendung einer Rasierklinge und in 200 ml
deionisiertem Wasser angesammelt. Diese Suspension wurde mit einem
Polytron®-Homogenisator
unter Verwendung der Einstellung 4 1 Minute lang behandelt. Die
entstehende Suspension wurde dann lyophilisiert, was 4,2 g getrocknete
Rinderhornhautepithelzellen ergab.
- 3. Getrocknetes fötales
Rinderserum wurde wie folgt hergestellt. Fötales Rinderserum (100 ml)
wurde von Hyclone erworben und lyophilisiert, was 5,34 g eines fahlrosafarbenen
Pulvers ergab. Ein Teil dieses Pulvers (2,8 g) wurde zur Herstellung
von künstlichem
Ohrenschmalz verwendet.
- 4. Künstliches
Ohrenschmalz wurde wie folgt hergestellt. Unter Verwendung eines
Glasmörsers
und Pistills mit 5 inch wurden Hornhautepithelzellen (4,2 g) und
getrocknetes fötales
Rinderserum (2,8 g) mit wenigen Tropfen Wasser vermischt, um eine
Paste zu bilden. Zu dieser Paste wurde die Chloroform/Methanollösung der
Lipide (Abzugshaube) zugegeben und die Mischung wurde mit dem Mörser verrieben,
um eine gleichmäßige Paste
zu erzeugen. Diese wurde langsam in der Abzugshaube eindampfen gelassen,
bis der Geruch von Chloroform verschwunden war. Das künstliche
Wachs wurde dann gesammelt und in einem verschlossenen und luftdichten
Behälter
in einem Kühlschrank
(4°C) aufbewahrt.
Vor der Verwendung für
die Wirksamkeitstests wurde das künstliche Ohrenschmalz auf 37°C erwärmt.
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In-vitro-Wirksamkeitstest
(menschliches und künstliches
Ohrenschmalz)
-
Proben
mit etwa 30 mg von der gepoolten Charge aus menschlichem Ohrenschmalz
oder von dem künstlichen
Ohrenschmalz wurden genau eingewogen unter Verwendung einer Analysewaage.
Jede Probe wurde dann vorsichtig zu einer Kugel gerollt unter Verwendung
der Finger (mit Handschuhen) und in 12 × 75 mm Borsilicatglasteströhrchen gelegt.
Jede Testlösung
wurde vorerwärmt
und dann zu einer Ohrenschmalzprobe in einem Wasserbad, das auf
37°C eingestellt
war, zugegeben (2 ml), wo sie ohne Rühren stehen gelassen wurde.
-
Nach
dem jeweiligen Zeitintervall (30 Minuten oder 2 Stunden) wurden
die Inhalte von jedem Teströhrchen
in getrennte Spritzen pipettiert, die vorher mit Acrodisc®-Filtern
versehen worden waren. Unter Verwendung des Fingerdrucks wurde die
Probe in Borsilicatglasteströhrchen
der Größe 13 (100
mm) filtriert. Bei einigen Proben war es schwierig, sie vollständig zu
filtrieren, und deshalb wurden die Filtrationsversuche nach 90 Sekunden
gestoppt und die Analyse dann mit dem gesammelten Volumen weitergeführt. Dieses
Verfahren wurde für
jede Testlösung
dreifach wiederholt. Indem der Aufschluss um 5 oder 10 Minuten versetzt
wird, kann dies in geeigneter Weise erreicht werden.
-
Die
Extinktionen bei 600 nm wurden aufgezeichnet, gewöhnlich ohne
irgendeine Verdünnung
des Filtrats. Wenn die Extinktion größer als 0,7 Einheiten war oder
wenn weniger als 1 ml Filtrat vorhanden waren, erfolgten geeignete
Verdünnungen.
Die Extinktionen bei 280 nm wurden an verdünnten Lösungen des Filtrats gemessen.
Eine geeignete Verdünnung
ist gewöhnlich
0,2 ml des Filtrats vereinigt mit 4 ml Wasser (Faktor 21). Die Extink tion
von jeder Originaltestlösung
wurde auch bei beiden Wellenlängen
aufgezeichnet unter Verwendung der gleichen Verdünnungen wie bei den entsprechenden
Testproben.
-
Die
cerumenolytische Aktivität
der Testlösung
wird definiert als die Extinktionseinheiten, die von der Testlösung aus
1 g Ohrenschmalz/ml Lösung
freigesetzt werden nach Inkubation. Für die Berechnungen wurde der
Extinktionswert des Lösungsleerwerts
mit einer identischen Verdünnung
wie der Testprobenlösung
abgezogen von dem Probenwert und diese Nettoextinktion wurde dann
mit dem Verdünnungsfaktor
multipliziert und mit dem 2-ml-Testvolumen, um die Gesamteinheiten
zu erhalten. Die Gesamtextinktionseinheiten wurden dann durch Gewicht
der Ohrenschmalzprobe in Gramm dividiert wie folgt: ((Extinktion der Testlösung – Extinktion des Leerwerts) × 2 × Verdünnungsfaktor)/Probengewicht
in Gramm = Extinktion/g/ml
-
Die
Extinktion bei 280 nm zeigt die Menge an Protein, die von der Zusammensetzung
verdaut wurde, während
die Extinktion bei 600 nm die Menge an Farbstoffen, Lipiden und
anderen Inhaltsstoffen zeigt, die aus dem Ohrenschmalz freigesetzt
wurden.
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Ergebnisse
-
Tabelle
2 zeigt die Menge an Ohrenschmalz, die von jeder Zusammensetzung
verdaut wurde, gemessen mit einem Spektrophotometer in Extinktionseinheiten
pro Gramm Ohrenschmalz pro Milliliter Zusammensetzung, nachdem das
Ohrenschmalz in die Zusammensetzung 2 Stunden lang eingetaucht worden
war. Die 280-nm-Wellenlänge wird
hier als "Proteinkomponente" bezeichnet. Die
600-nm-Wellenlänge
wird hier als "Lipidkomponente" bezeichnet. Wie
in Tabelle 2 gezeigt, waren die Zusammensetzungen A und B jeweils
wirksam beim Verdauen der Proteinkomponente und der Lipidkomponente
sowohl von menschlichem als auch künstlichem Ohrenschmalz.
-
Tabelle
2 Ergebnisse
für die
Wirksamkeit (Extinktionseinheiten/g/ml nach 2 Stunden)
-
Referenzbeispiel 3
-
Tabelle
3 zeigt die Zusammensetzung des ersten Teils von Zusammensetzung
B vor dem Vermischen mit dem zweiten Teil von Zusammensetzung B.
Tabelle 4 zeigt die Zusammensetzung des zweiten Teils von Zusammensetzung
B vor dem Vermischen mit dem ersten Teil von Zusammensetzung B.
Zusammensetzung B wird bevorzugt hergestellt durch einfaches Vermischen
der Zusammensetzung von Tabelle 3 mit der Zusammensetzung von Tabelle
4. Alle Inhaltsstoffmengenangaben sind in der Einheit % Gewicht/Volumen,
wenn nicht anders angegeben.
-
Tabelle
3 (Erster
Teil von Zusammensetzung B)
-
Tabelle
4 (Zweiter
Teil von Zusammensetzung B)
-
Verschiedene
Volumina des ersten Teils und des zweiten Teils von Zusammensetzung
B können
angewendet werden. Das bevorzugte Verhältnis von Volumen des ersten
Teils der Zusammensetzung B zu dem Volumen des zweiten Teils von
Zusammensetzung B ist 3:17. Ein bevorzugtes Volumen des ersten Teils
ist 1,5 ml. Ein bevorzugtes Volumen des zweiten Teils ist 8,5 ml.
Das Glycerin im ersten Teil der Zusammensetzung B dient als Enzym
stabilisierendes Mittel für
das Methyltrypsin. Nachdem erster Teil und zweiter Teil von Zusammensetzung
B vermischt worden sind, dient das Glyerin auch als Demulcens.
-
Beispiel 4
-
Zusammensetzung
C wurde auf die in Beispiel 2 beschriebene Art und Weise auf ihre
Wirksamkeit getestet, die Entfernung von menschlichem Ohrenschmalz
zu fördern.
Tabelle 2 zeigt die Menge an Ohrenschmalz, die von Zusammensetzung
C verdaut wurde, gemessen mit einem Spektrophotometer in Extinktionseinheiten/g
Ohrenschmalz/ml Zusammensetzung, nachdem das Ohrenschmalz in die
Zusammensetzung 2 Stunden lang eingetaucht worden war. Wie in Tabelle
2 gezeigt, war Zusammensetzung C wirksam im Aufschließen der
Proteinkomponente und der Lipidkomponente sowohl bei menschlichem
als auch bei künstlichem
Ohrenschmalz.
-
Zusätzlich wurde
unerwarteterweise gefunden, dass Zusammensetzung C eine synergistische
Wirkung aufweist beim Aufschließen
von künstlichem
Ohrenschmalz. Wiederum Bezug nehmend auf Tabelle 2 werden die Extinktionsmessungen
für die
Bicarbonatkomponente A von Zusammensetzung C, die proteolytische
Enzymkomponente B von Zusammensetzung C und den Träger V1 von Zusammensetzung C angegeben. Wie in
Tabelle 2 gezeigt, ist die Summe der Extinktionsmessungen für die Bicarbonatkomponente
A und die proteolytische Enzymkomponente B, wobei jeder Beitrag
des Trägers
V1 abgezogen wird, signifikant geringer
als die Extinktionsmessung für
Zusammensetzung C, wenn jeder Beitrag durch Träger V1 abgezogen
wird, sowohl für
die Proteinkomponente als auch die Lipidkomponente des künstlichen
Ohrenschmalzes.
-
Beispiel 5
-
Zusammensetzung
C wurde auch getestet in Bezug auf die Wirksamkeit bei der Entfernung
von Ohrenschmalz im Vergleich zu Murine®-Ohrtropfen
und Cerumenex®-Ohrtropfen.
Zusammensetzung C, Murine und Cerumenex wurden auf die in Beispiel
2 beschriebene Art und Weise getestet, außer dass die Extinktionswerte
nach 30 Minuten statt nach 2 Stunden gemessen wurden.
-
Tabelle
5 zeigt die Menge an Ohrenschmalz, die durch Zusammensetzung C,
Cerumenex und Murine verdaut bzw. aufgeschlossen wurde, gemessen
mit einem Spektrophotometer in Extinktionseinheiten/g Ohrenschmalz/ml
Zusammensetzung, nachdem das Ohrenschmalz in die Zusammensetzung
30 Minuten lang eingetaucht worden war. Wie in Tabelle 5 gezeigt,
war die Zusammensetzung C viel wirksamer bei der Entfernung der
Proteinkomponente sowohl aus menschlichem als auch künstlichem
Ohrenschmalz, als Murine oder Cerumenex. Zusammensetzung C war auch
viel wirksamer bei der Entfernung der Lipidkomponente von künstlichem
Ohrenschmalz als Murine oder Cerumenex. Zusätzlich war, wie in Tabelle
5 und Tabelle 8 (unten diskutiert) gezeigt, Zusammensetzung C viel
wirksamer bei der Entfernung von Protein- und Lipidkomponenten aus künstlichem
Ohrenschmalz, als eine 5%ige Natriumbicarbonatlösung.
-
Tabelle
5 Ergebnisse
für die
Wirksamkeit (Extinktionseinheiten/g/ml nach 30 Minuten)
-
Beispiel 6
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Tabelle
6 zeigt die Zusammensetzung des ersten Teils von Zusammensetzung
C vor dem Vermischen mit dem zweiten Teil von Zusammensetzung C.
Tabelle 7 zeigt die Zusammensetzung des zweiten Teils von Zusammensetzung
C vor dem Vermischen mit dem ersten Teil von Zusammensetzung C.
Zusammensetzung C wird bevorzugt hergestellt, indem einfach die
Zusammensetzung von Tabelle 6 mit der Zusammensetzung von Tabelle 7
vermischt wird. Alle Mengen für
die Inhaltsstoffe sind in % Gewicht/Volumen gezeigt, wenn nicht anders
angegeben.
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Tabelle
6 (Erster
Teil der Zusammensetzung C)
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Tabelle
7 (Zweiter
Teil der Zusammensetzung C)
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Verschiedene
Volumina des ersten Teils und des zweiten Teils der Zusammensetzung
C können
angewendet werden. Das bevorzugte Verhältnis von Volumen des ersten
Teils der Zusammensetzung C zu dem Volumen des zweiten Teils von
Zusammensetzung C ist 3:17. Ein bevorzugtes Volumen des ersten Teils
ist 1,5 ml. Ein bevorzugtes Volumen des zweiten Teils ist 8,5 ml.
Das Glycerin im ersten Teil der Zusammensetzung C dient als Enzym
stabilisierendes Mittel für
das Methyltrypsin. Nachdem erster Teil und zweiter Teil von Zusammensetzung
C vermischt worden sind, dient das Glyerin auch als Demulcens.
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Beispiel 7
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Die
Zusammensetzung D wurde auf ihre Wirksamkeit getestet, die Entfernung
von Ohrenschmalz zu fördern
im Vergleich zu einer wässrigen
Lösung
von 5% Natriumbicarbonat. Zusammensetzung D und die 5%ige Natriumbicarbonatlösung wurden
auf die in Beispiel 2 beschriebene Art und Weise getestet, außer dass die
Extinktionswerte nach 30 Minuten statt nach 2 Stunden gemessen wurden.
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Tabelle
8 zeigt die Menge an Ohrenschmalz, die von Zusammensetzung D und
der 5%igen Natriumbicarbonatlösung
aufgeschlossen wurde, gemessen mit einem Spektrophotometer in Extinktionseinheiten/g Ohrenschmalz/ml
Zusammensetzung, nachdem das Ohrenschmalz 30 Minuten lang in die
Zusammensetzung einge taucht worden war. Wie in Tabelle 8 gezeigt,
war Zusammensetzung D viel wirksamer bei der Entfernung der Lipidkomponente
von menschlichem Ohrenschmalz und der Protein- und Lipidkomponente
von künstlichem
Ohrenschmalz, als die 5%ige Natriumbicarbonatlösung.
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Außerdem wurde
unerwarteterweise gefunden, dass Zusammensetzung D eine synergistische
Wirkung zeigt sowohl bei der Entfernung von menschlichem als auch
künstlichem
Ohrenschmalz. Wiederum Bezug nehmend auf Tabelle 8 sind die Extinktionsmesswerte
für die
Bicarbonatkomponente D1 von Zusammensetzung
D, der proteolytischen Enzymkomponente D2 von
Zusammensetzung D und des Trägers
V2 von Zusammensetzung D angegeben. Wie
in Tabelle 4 gezeigt, ist die Summe der Extinktionsmessungen für die Bicarbonatkomponente
D1 und die proteolytische Enzymkomponente
D2, unter Abzug irgendeines Beitrags des Trägers V2, signifikant geringer als die Extinktionsmessung
für Zusammensetzung
D, nach Subtraktion irgendeines Beitrags durch den Träger V2, für
die Proteinkomponente und die Lipidkomponente sowohl bei menschlichem
als auch künstlichem
Ohrenschmalz.
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Beispiel 8
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Tabelle
9 zeigt die Zusammensetzung des ersten Teils von Zusammensetzung
D vor dem Vermischen mit dem zweiten Teil von Zusammensetzung D.
Tabelle 10 zeigt die Zusammensetzung des zweiten Teils von Zusammensetzung
D vor dem Vermischen mit dem ersten Teil von Zusammensetzung D.
Zusammensetzung D wird bevorzugt hergestellt, indem einfach die
Zusammensetzung von Tabelle 9 mit der Zusammensetzung von Tabelle
10 vermischt wird. Alle Inhaltsstoffmengen sind in % Gewicht/Volumen
angegeben, wenn nicht anders angezeigt.
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Tabelle
9 Erster
Teil von Zusammensetzung D)
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Tabelle
10 (Zweiter
Teil von Zusammensetzung D)
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Verschiedene
Volumina des ersten Teils und des zweiten Teils der Zusammensetzung
D können
angewendet werden. Das bevorzugte Verhältnis von Volumen des ersten
Teils von Zusammensetzung D zu dem Volumen des zweiten Teils von
Zusammensetzung D ist 3:17. Ein bevorzugtes Volumen des ersten Teils
ist 1,5 ml. Ein bevorzugtes Volumen des zweiten Teils ist 8,5 ml.
Das Glycerin im ersten Teil der Zusammensetzung D wirkt als Enzym
stabilisierendes Mittel für
das Methyltrypsin. Nachdem erster Teil und zweiter Teil der Zusammensetzung
D vermischt worden sind, dient das Glyerin auch als Demulcens.
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Beispiel 9
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Beispiel
9 ist ein weiteres Beispiel für
die dritte Zusammensetzung der vorliegenden Erfindung, die Calciumchlorid
und Borsäure
als Enzym stabilisierende Mittel enthält. Tabelle 11 zeigt den ersten
Teil der Zusammensetzung, der bevorzugt im oberen Behälter 14 der
Vorrichtung 10 enthalten ist. Tabelle 12 zeigt den zweiten
Teil der Zusammensetzung, der bevorzugt im unteren Behälter 12 der
Vorrichtung 10 enthalten ist. Tabelle 13 zeigt die gemischte
Zusammensetzung, die bevorzugt hergestellt wird, indem die Zusammensetzung von
Tabelle 11 mit der Zusammensetzung von Tabelle 12 in dem bevorzugten
Volumenverhältnis
von 3:17 vermischt wird. Alle Inhaltsstoffmengen sind in % Gewicht/Volumen,
wenn nicht anders angegeben. Das Glycerin im ersten Teil der Zusammensetzung
dient als Enzym stabilisierendes Mittel für das Methyltrypsin. Nachdem erster
Teil und zweiter Teil der Zusammensetzung vermischt worden sind,
dient das Glycerin als auch Demulcens.
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Tabelle
11 (Erster
Teil der Zusammensetzung)
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Tabelle
12 (Zweiter
Teil der Zusammensetzung)
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Tabelle
13 (Gemischte
Zusammensetzung)
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Beispiel 10
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Tabelle
14 zeigt ein weiteres Beispiel für
die Zusammensetzung eines ersten Teils von Zusammensetzung C vor
dem Vermischen mit dem zweiten Teil von Zusammensetzung C. Tabelle
15 zeigt ein weiteres Beispiel für
die Zusammensetzung des zweiten Teils von Zusammensetzung C vor
dem Vermischen mit dem ersten Teil von Zusammensetzung C. Alle Inhaltsstoffmengen
sind in % Gewicht/Volumen gezeigt, wenn nicht anders angegeben.
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Tabelle
14 (Erster
Teil von Zusammensetzung C)
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Tabelle
15 (Zweiter
Teil von Zusammensetzung C)
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Der
erste Teil von Zusammensetzung C ist ein Pulver oder Granulat. Die
Zusammensetzung von Beispiel 10 ist daher bevorzugt, wenn es erwünscht ist,
dass der erste Teil der Zusammensetzung in Pulver oder Granulatform
ist. Verschiedene Massen und Volumina des ersten Teils und des zweiten
Teils von Zusammensetzung C können
jeweils angewendet werden. Die bevorzugte Masse des ersten Teils
ist 200 mg und die Mengen in Tabelle 14 sind für 200 mg des ersten Teils von
Zusammensetzung C. Das bevorzugte Volumen des zweiten Teils ist
10 ml. 1 mg Methyltrypsin entspricht 900 AU. Die dehydratisierte
Alkoholkomponente des ersten Teils wird während der Herstellung verdampft.
Wenn der erste Teil und der zweite Teil vermischt werden, hat die
entstehende Zusammensetzung C eine identische Formulierung wie die
in Tabelle 1 von Beispiel 1 gezeigte Formulierung von Zusammensetzung
C. Das Glycerin im ersten Teil von Zusammensetzung C dient als Enzym
stabilisierendes Mittel für
das pulverförmige
oder granulatartige Methyltrypsin und als Bindemittel zwischen Natriumcitrat·2 H2O und wasserfreier Citronensäure. Das
Glycerin im zweiten Teil von Zusammensetzung C und in der Zusammensetzung,
nachdem erster Teil und zweiter Teil von Zusammensetzung C vermischt
worden sind, dient auch als Demulcens. Der pH-Wert des ersten Teils
der Zusammensetzung C ist bevorzugt etwa 6,5.
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Die
Zusammensetzung C von Beispiel 10 wird bevorzugt hergestellt unter
Verwendung der folgenden Technik. Der erste Teil von Zusammensetzung
C, wie in Tabelle 14 gezeigt, wird bevorzugt wie folgt hergestellt. 187,4
mg Natriumcitrat·2
H2O werden durch ein sich drehendes Hochgeschwindigkeitssieb
mit 450 μm
in einen Planetenmischer geleitet. 2,0 mg Glycerin werden dann unter
Bewegung in 14 mg dehydratisiertem Alkohol in einem Compoundiergefäß gelöst. Das
Compoundiergefäß ist bevorzugt
aus Glas oder rostfreiem Stahl. Der Alkohol ist bevorzugt wasserfreies
Ethanol. 4,2 mg wasserfreie Citronensäure werden dann zu dem Compoundiergefäß zugegeben
und unter Rühren
lösen gelassen.
Der Inhalt des Compoundiergefäßes wird
dann zu dem Natriumcitrat·2
H2O in dem Planetenmischer zugegeben und
die entstehende Mischung wird in dem Planetenmischer 10 Minuten
lang gemischt. Die Mischung bildet ein Granulat. Das Granulat, das
in den Schaufeln des Planetenmischers festgehalten wird, wird dann
entfernt und die Mischung wird in dem Planetenmischer weitere 5
Minuten lang gemischt. Das nasse Granulat wird aus dem Planetenmischer
entnommen, auf einem Tablett verteilt, mit einem Tuch abgedeckt
und bei Raumtemperatur mindestens 12 Stunden lang trocknen gelassen.
Das getrocknete Granulat wird durch ein sich drehendes Hochgeschwindigkeitssieb
mit 450 μm
geleitet, um ein vorläufiges
Granulat zu bilden.
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Methyltrypsin
wird unter Verwendung eines Waring-Mischers vermahlen, der bevorzugt
mit 18.000 bis 25.000 U/min und am meisten bevorzugt mit 21.000
U/min gedreht wird. Ungefähr
20% überschussiges
Methyltrypsin (2,7 mg insgesamt) werden verwendet, um Verluste während der
Herstellung auszugleichen. Kleine Mengen des vorläufigen Granulats
und kleine Mengen des Methyltrypsins werden alternativ in einen
reinen Planetenmischer zugegeben und gemischt, bis sie homogen sind.
Dieses Vermischen dauert typischerweise etwa 10 Minuten. 4,0 mg
Tetronic® 1304
werden dann unter Bewegung in 14 mg dehydratisiertem Alkohol in dem
Compoundiergefäß gelöst. Das
Compoundiergefäß ist bevorzugt
aus Glas oder rostfreiem Stahl. Der Alkohol ist bevorzugt wasserfreies
Ethanol. Tetronic® 1304 und wasserfreies
Ethanol werden dann der homogenen Mischung des vorläufigen Granulats
und dem Methyltrypsin in dem Planetenmischer zugegeben und 5 Minuten
lang gemischt. Das Tetronic dient als Bindemittel für das Methyltrypsin
und das vorläufige
Granulat. Das Granulat, das in den Schaufeln des Planetenmischers
festgehalten wird, wird dann entnommen und die Mischung in dem Planetenmischer
weitere 5 Minuten lang gemischt. Das nasse Granulat wird aus dem
Planetenmischer entnommen, auf einem Tablett ausgebreitet, mit einem
Tuch abgedeckt und bei Raumtemperatur mindestens 12 Stunden lang
trocknen gelassen. Das getrocknete Granulat wird durch ein sich
drehendes Hochgeschwindigkeitssieb mit 450 μm geleitet, um das fertige Granulat
oder Pulver des ersten Teils von Zusammensetzung C zu bilden. Es
wurde gefunden, dass das fertige Granulat oder Pulver des ersten
Teils von Zusammensetzung C, wenn es unter Verwendung der oben beschriebenen
Technik hergestellt wurde, bei bis zu 40°C mindestens 3 Monate nach Herstellung
eine stabile Konzentration von Methyltrypsin hat.
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Der
zweite Teil von Zusammensetzung C, wie in Tabelle 15 gezeigt, wird
bevorzugt wie folgt hergestellt. Die Mengen, die in Klammern angegeben
sind, bedeuten die Mengen für
ein 10-ml-Volumen des zweiten Teils von Zusammensetzung C. Eine
Menge an gereinigtem Wasser entsprechend etwa 50% des erforderlichen
Volumens (5,0 ml) wird in ein geeignetes Compoundiergefäß überführt. 0,21%
Gewicht/Volumen (0,021 g) Tetronic 1304 werden dann dem Compoundiergefäß zugegeben
und sich lösen
gelassen. Tetronic® 1304 im zweiten Teil
der Zusammensetzung C und in der Zusammensetzung, nachdem der erste
Teil und der zweite Teil von Zusammensetzung C vermischt wurden,
dient auch als Tensid. Als Nächstes
werden 5,00% Gewicht/Volumen (0,5 g) Natriumbicarbonat dem Compoundiergefäß unter
Bewegung bei geringer Geschwindigkeit zugegeben und lösen gelassen.
6,98% Gewicht/Volumen (0,698 g) Glycerin wird dann zu dem Compoundiergefäß unter
Bewegung zugegeben und auflösen
gelassen. Als Nächstes
werden 0,01% Gewicht/Volumen plus weitere 5% Überschuss, um den Verlust während der
Herstellung zu kompensieren (0,0021 ml einer Lösung mit 50% Gewicht/Volumen
in Wasser) an Benzalkoniumchlorid dem Compoundiergefäß unter
Bewegung zugefügt
und mischen gelassen. 1,13% Gewicht/Volumen Natriumcitrat·2 H2O (0,113 g) werden dann dem Compoundiergefäß unter
Bewegung zugegeben und auflösen
gelassen. Der pH-Wert der Mischung in dem Compoundiergefäß wird dann
durch Zugabe von Citronensäure
auf 8,0 eingestellt. Die Citronensäure ist bevorzugt wasserfrei.
Gereinigtes Wasser wird dann dem Compoundiergefäß unter Bewegung zugegeben,
um das gewünschte
Volumen des zweiten Teils der Zusammensetzung C von 10 ml zu erreichen.
Der endgültige pH-Wert
der Mischung wird dann untersucht. Als Nächstes wird die Mischung durch
eine 0,22-μm-Membran filtriert,
um den fertigen zweiten Teil von Zusam mensetzung C zu erhalten.
Zusammensetzung C wird dann hergestellt, einfach indem die Zusammensetzung
von Tabelle 14 mit der Zusammensetzung von Tabelle 15 vermischt
wird.
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Aus
dem Obigen ergibt sich, dass die vorliegende Erfindung verbesserte
Zusammensetzungen liefert, um die Entfernung von menschlichem Ohrenschmalz
zu fördern.
Zusätzlich
sind die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung nützlich zur
Behandlung von anderen Zuständen
in Nase und Ohr. Bei Tympanostomieröhrchen oder einem anderen Riss
oder Loch in der Trommelfellmembran können die Zusammensetzungen der
vorliegenden Erfindung verwendet werden, um das mittlere und äußere Ohr
von dem viskosen Exudat zu reinigen, das häufig durch eine Mittelohrentzündung entsteht.
Dieses viskose Exudat, das allgemein als "verklebtes Ohr" bezeichnet wird, schließt Zustände ein,
wie eine sekretorische Otitis media, schleimige Otitis media, seröse Otitis
media und chronische Otitis media mit Erguss. Diese Zustände führen manchmal
zu einem Verlust des Gehörs
durch eine Entzündung
und/oder Hemmung der Tonübertragung
im Knochen durch das Exudat. Als weiteres Beispiel können die
erfindungsgemäßen Zusammensetzungen
für innere
Gewebe der Nase durch Sprühen
oder Spray angewendet werden, um Nasenkrusten oder Popel zu lösen, die
durch chirurgischen Eingriff oder einen anderen Eingriff oder ein
Trauma auf das Nasengewebe entstehen. Solche Krusten und Ansammlungen
sind typischerweise eine Mischung aus Blut, Schleim und Sekretionen
von offenen Schleimhautoberflächen.
Als weiteres Beispiel können
die Zusammensetzungen der vorliegenden Erfindung verwendet werden,
um andere Krusten oder Ansammlungen zu lösen.
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Die
vorliegende Erfindung wurde unter Bezugnahme auf bestimmte bevorzugte
Ausführungsformen beschrieben.
Es versteht sich jedoch, dass sie in anderen spezifischen Formen
oder Variationen davon ausgeführt
werden kann, ohne von ihrem Geist oder den wesentlichen Eigenschaften
abzuweichen. Die hier beschriebenen Ausführungsformen werden daher nur
in jeder Hinsicht als erläuternd
und nicht als beschränkend angesehen,
wobei der Schutzbereich der Erfindung durch die beigefigten Ansprüche und
nicht durch die vorhergehende Beschreibung angegeben wird.
