DE4219360A1 - Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fettsäuren - Google Patents

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fett­ säuren mit 20 bis 22 C-Atomen durch Extraktion aus einem Rohmaterial tierischen oder pflanzlichen Ursprungs, den dabei gewonnenen Extrakt und dessen Verwendung.

Neben den gesättigten Fettsäuren finden sich in unseren Le­ bensmitteln einfach und mehrfach ungesättigte Fettsäuren, die somit in ihrer Kohlenstoffkette mindestens eine Doppelbindung aufweisen. Zur Bezeichnung dieser Polyenfettsäuren werden häu­ fig Kurzformeln verwendet. Dabei wird zunächst die Anzahl der C-Atome bzw. die Kettenlänge angegeben. Es folgt ein Binde­ strich oder Doppelpunkt, an die sich eine Zahl anschließt, welche die Anzahl der Doppelbindungen in der Kohlenstoffkette bezeichnet. Im Anschluß daran, jedoch getrennt davon, wird die Zahl der Omega-C-Atome, gezählt vom Methylende der Kette, nach einem "w" oder "n" angegeben. Dementsprechend wird die Linol­ säure als 18-2 n6 bezeichnet.

Im Fettsäurestoffwechsel des Menschen können zwar Doppelbin­ dungen in die Kohlenstoffkette einer gesättigten Fettsäure eingeführt werden. Diese Desaturierung ist allerdings nur ab dem Kohlenstoffatom C9 in Richtung auf das Carboxylende mög­ lich. Dies hat zur Folge, daß Fettsäuren, wie die Lonolsäure (18 : 2 n6) und die α-Linolensäure (18 : 3 n3) als essentiell zu bezeichnen sind, da sie vom menschlichen Organismus nicht selbst synthetisiert werden können, sondern mit der Nahrung zugeführt werden müssen.

Ausgehend von diesen essentiellen C18-Fettsäuren ist der ge­ sunde menschliche Organismus in der Lage, eine Reihe von hochungesättigten Fettsäuren mit 20 bzw. 22 C-Atomen durch weitere Desaturation und Kettenelongation zu synthetisieren. Dabei erfolgt die Elongation am Carboxylende des Moleküls und die Desaturation zwischen der Carboxylgruppe und der ersten folgenden Doppelbindung. Die Zahl der C-Atome zwischen dem Me­ thylende der Fettsäure und der letzten Doppelbindung (Omega-C- Atome) bleibt dadurch unverändert, so daß aus der Linolsäure (18 : 2 n6) im Lipidstoffwechsel nur Omega-6-Fettsäuren (w6-Fa­ milie) und aus der α-Linolensäure nur Omega-3-Fettsäuren (w3- Familie) abgeleitet werden können. Der Biosyntheseweg der w6- Familie verläuft somit ausgehend von der Linolsäure (C18-2 n6) über die Gamma-Linolensäure (C18-3 n6), die Di-Homo-Gamma- Linolensäure (C20-3 n6), die Arachidonsäure (C20-4 n6) zur Do­ cosapentaensäure (C22-5 n6). Hinsichtlich der w3-Familie ver­ läuft der Biosyntheseweg ausgehend von der α-Linolensäure (C18-3 n3), über die Octadecatetraensäure (C18-4 n3), die Ei­ cosatetraensäure (C20-4 n3), die Eicosapentaensäure (C20-5 n3) zur Docosahexanensäure (C22-6 n3).

Diese Gruppe von physiologisch außerordentlich bedeutsamen Fettsäuren wird entsprechend internationaler Konvention auch als LCP ("long-chain polyunsaturated fatty acids") bezeichnet. Diese Fettsäuren mit 20 bis 22 C-Atomen leiten sich von den essentiellen C18-Fettsäuren ab und besitzen mindestens zwei Doppelbindungen im Acylrest. Die Bezeichnung LCP wird nachste­ hend als Kurzschreibweise dieser Gruppe von Fettsäuren be­ nutzt, wobei zwischen den w6- und w3-LCP unterschieden wird.

Die LCP′s verfügen über vielfältige biologische Wirkungen. Sie sind beispielsweise unverzichtbarer Bestandteil aller Zellmem­ branen des Körpers. Eine Änderung der Membranlipidzusammenset­ zung kann zu den verschiedensten physiologischen Störungen führen.

Besondere Aufmerksamkeit haben zudem in den letzten Jahren die aus einigen LCP′s im Organismus synthetisierten Eicosanoide (Prostaglandine, Leucotriene, Prostacycline und Thromboxane) erfahren. Es hat sich gezeigt, daß diese hochwirksame Sub­ stanzgruppe der Eicosanoide in niedrigen Konzentrationen an einer Vielzahl physiologischer Prozesse beteiligt ist.

Bei Säuglingen und Kindern besteht nun im Vergleich von Er­ wachsenen wegen des relativ hohen Bedarfs für das Wachstum und der geringen Reserven die Gefahr eines Mangels an diesen LCP. Während des letzten Trimesters der intrauterinen Entwicklung des Fötus und während der postnatalen Entwicklung des Neugebo­ renen werden große Mengen der w6- und w3-LCP in den Organen accumuliert Die Kapazität zur Synthese der LCP aus den essen­ tiellen Vorstufen scheint beim jungen Säugling jedoch aufgrund einer Unreife des desaturierenden Enzymsystems limitiert zu sein.

Da diese LCP-Fettsäuren in den bisher erhältlichen Säuglings­ nahrungen nahezu vollständig fehlen, wurden in letzter Zeit Formelnahrungen entwickelt, die mit diesen Fettsäuren angerei­ chert sind, man vergleiche beispielsweise DE 39 20 679 A1.

Aufgrund des gestiegenen Interesses an LCP′s wurde verstärkt nach Rohstoffquellen für derartige langkettig-hochungesättigte Fettsäuren gesucht. Die zur Zeit erhältlichen Öle aus LCP′s werden ganz überwiegend aus marinen Kaltwasserfischen gewonnen (man vergleiche EP 0 292 846 A2 und DE 39 40 239 A1). Derar­ tige Öle aus dem Muskelgewebe oder aus Organen von Fischen zeichnen sich durch hohe Anteile an w3-LCP′s und insbesondere an Eicosapentaensäure (20-5 n3) und Docosahexanensäure (22-6 n3) aus. Derartige Öle und insbesondere Öle aus Fischorganen haben jedoch den Nachteil, daß sie einen hohen Choleste­ ringehalt besitzen und auch einen hohen Gehalt an fettlösli­ chen Vitaminen und ggf. an fettlöslichen Schadstoffen (Schwermetalle/Pesticide) aufweisen.

Es wurde auch bereits vorgeschlagen, LCP aus autotroph bzw. heterotroph fermentierten Microorganismen zu gewinnen (man vergleiche WO 91/07498, WO 91/119 182 und DE 34 46 795 A1).

Die hier interessierenden LCP können außerdem aus Organfetten von Schlachttieren (Rinder/Schweine und aus dem Eigelb von Hühnereiern (EP 0 074 251 B2) gewonnen werden. Die Extraktion von LCP aus Humanplacenten ist in der EP 0 140 805 A1 be­ schrieben.

Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es, ein Verfahren zur Gewinnung von LCP-reichen Lipiden aus einem bisher noch nicht für diese Zwecke eingesetzten Rohmaterial bereitzustellen. Ferner ist es Aufgabe der Erfindung, einen Lipidextrakt bzw. Lipidextraktfraktionen bereitzustellen, die reich an LCP-Fett­ säuren sind und u. a. eine Grundlage zur Herstellung von Nah­ rungen, insbesondere Babynahrungen darstellen.

Gelöst wird diese Aufgabe durch die Lehre der Ansprüche.

Ein wesentlicher Aspekt der Erfindung besteht darin, daß man ein bestimmtes Rohmaterial zur Gewinnung von LCP-haltigen Li­ piden einsetzt.

Im erfindungsgemäßen Verfahren kann man beispielsweise haupt­ sächlich im Meer vorkommende Makroalgen aus den Familien der Braun-, Rot- und Grünalgen zur Anwendung bringen. Von diesen sind insbesondere diejenigen aus den Familien der Phaeophyceen und Rhodophyceen von Interesse. Einzelne Arten werden vor al­ lem in den Küstenländern Nordeuropas und Ostasiens (Japan) aber auch in anderen Teilen der Welt für die menschliche Er­ nährung genutzt. Diese Makroalgen sind in vielen Schelfgebie­ ten der Ozeane zu finden und stehen in praktisch unbegrenzter Menge zur Verfügung. Einige wenige Makroalgenarten werden zu­ dem auch in abgegrenzten Meeresarealen (Aquakulturen) gezielt kultiviert.

Es wurde nun überraschend gefunden, daß man Lipide mit einem hohen Anteil an LCP′s aus diesen Markoalgen in wirtschaftli­ cher Weise extrahieren kann, wenn man ein organisches Lösungs­ mittel oder ein verdichtetes Gas einsetzt. Zudem werden die Makroalgen vor der eigentlichen Extraktion zerkleinert, insbe­ sondere gemahlen, so daß das aus diesen Makroalgen gewonnene, im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzte Rohmaterial eine Korngröße 50 mm besitzt. Außerdem werden die Makroalgen entweder vor oder nach der Zerkleinerung getrocknet, so daß ihr Wassergehalt 50 Gew.-% beträgt.

Als Rohmaterial auf Basis von Braun- und Rotalgen kann man auch am Markt verfügbare, teilweise getrocknete Produkte aus zermahlenen nativen Algen ("Algenmehl") einsetzen. Diese kom­ merziell erhältlichen Produkte werden preisgünstig am Markt angeboten und bisher lediglich zur Bodenverbesserung oder auch als Zusatz zum Tierfutter eingesetzt.

Aus verschiedenen Braun- und Rotalgenarten werden derzeit in größerem Umfang Alginate und Carraghenane gewonnen, die als Hydrokolloide im Bereich der Lebensmittelindustrie in vielfäl­ tigster Weise Anwendung finden. Zur Gewinnung der Hydrokol­ loide werden die Algen in großem Umfang wie oben beschrieben "angebaut" bzw. kultiviert, geerntet, getrocknet und zermah­ len. In Abhängigkeit von den gewünschten Eigenschaften der zu extrahierenden Hydrokolloide werden gezielt verschiedene Al­ genspezies gemischt und schließlich wäßrig extrahiert.

Es wurde nun ferner überraschend gefunden, daß die bei der Hy­ drokolloidextraktion anfallenden Reststoffe, die zur Zeit überhaupt nicht bzw. in sehr geringem Umfange zur Herstellung von Produkten zur Bodenverbesserung oder als Zusätze für Tier­ futter genutzt werden, als Rohmaterial für das erfindungsge­ mäße Verfahren einsetzen kann. Es hat sich nämlich gezeigt, daß bei der Extraktion zur Gewinnung der Hydrokolloide unter Verwendung von Säuren und Laugen die in den Algen vorhandenen LCP-haltigen Lipide nicht geschädigt werden. Durch die Entfer­ nung der Hydrokolloide aus den Algengemischen kommt es im Ge­ genteil sogar zu einer verbesserten Ausbeute der extrahierba­ ren Lipide einschließlich der hier interessierenden langket­ tig-hochungesättigten Fettsäuren und zugleich zu einer gerin­ geren Belastung der Extrakte mit Hydrokolloiden und Pigmenten.

Bei dem erfindungsgemäß bevorzugten Einsatz von derartigen bei der Hydrokolloidgewinnung anfallenden Reststoffen wird somit ein für die menschliche Ernährung eingesetzter Rohstoff noch einmal verwendet und somit optimiert genutzt. Die Reihenfolge der Extraktionsprozesse (Extraktion mit einem wäßrigen und organischen Lösungsmittel) ist im Prinzip nicht von Bedeutung. Allerdings wird eine vorherige Alginatgewinnung bevorzugt, da in Folge dessen der relative Lipidgehalt im Rohstoff und damit die Ausbeute gesteigert werden kann und die Belastung der Lipidextrakte mit Hydrokolloiden minimiert wird.

Als Rohmaterial, das im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzt wird, können erfindungsgemäß ferner Mikroalgen eingesetzt wer­ den, die zum Teil in einigen Ländern bereits traditionell zur menschlichen Ernährung benutzt werden. Diese überwiegend ein­ zelligen, im Süß-, See- oder auch Brackwasser beheimateten Al­ gen werden hierzu häufig in offenen Freilandteichen unter Aus­ nutzung des Sonnenlichtes kultiviert.

In den letzten Jahren wurde verstärkt versucht, einzellige Al­ gen unter definierten Kulturbedingungen zu fermentieren. Ent­ sprechend fermentativ hergestellte Algenbiomasse ist heute z. B. bereits für die Arten der Gattung Spirulina, Dunaliella und Porphyridium am Markt erhältlich. Zusätzlich zu diesen au­ totroph - d. h. unter Sonnenlicht oder künstlicher Beleuchtung - kultivierten Arten wurden Verfahren entwickelt, bestimmte Mikroalgen-Biomasse heterotroph in geschlossenen Fermentern kostengünstig herzustellen. Alle diese im Freiland kultivier­ ten oder autotroph bzw. heterotroph fermentierten Mikroalgen aus den Stämmen der Cyanophyta, Chrysophyta Dinophyta, Euglenophyta, Rhodophyta und Chlororphyta können er­ findungsgemäß eingesetzt werden.

Sollten die erfindungsgemäß eingesetzten Reststoffe aus der Hydrokolloidextraktion und die erfindungsgemäß eingesetzten Mikroalgen einen Feuchtigkeitsgehalt von mehr als 50 Gew.-% und/oder eine Korngröße von größer als 50 mm besitzen, dann wird dieses Rohmaterial vor der erfindungsgemäßen Extraktion getrocknet und/oder gemahlen, so daß der Wassergehalt der im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzten Biomasse 50 Gew.-% und die Korngröße 50 mm sind.

Vorzugsweise setzt man ein Rohmaterial mit einem Wassergehalt von 5 bis 50 Gew.-%, insbesondere 5 bis 15 Gew.-% und mit ei­ ner Korngröße von 0,01 bis 50 mm, insbesondere von 0,1 bis 1,0 mm ein.

Als Lösungsmittel zur Extraktion der Lipide mit einem hohen Anteil an LCP′s setzt man ein organisches Lösungsmittel oder ein verdichtetes Gas ein. Als organische Lösungsmittel kommen insbesondere klassische organische Solventien und niedere Al­ kohole mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen zur Anwendung. Vorzugs­ weise setzt man dabei solche Solventien und Alkohole ein, die mit Wasser in jedem Verhältnis mischbar sind. Als bevorzugter Vertreter sei Ethanol genannt. Natürlich können auch Gemische der genannten Lösungsmittel eingesetzt werden. Dabei werden vorzugsweise solche organischen Lösungsmittel zur Anwendung gebracht, die nach den jeweiligen lebensmittelrechtlichen Be­ stimmungen zulässig sind.

Als verdichtete Gase setzt man vorzugsweise Kohlendioxid oder Propan oder ein Gemisch davon ein. Das eingesetzte Gas muß Drücke und Temperaturen aufweisen, die gewährleisten, daß es sich in einem flüssigen oder überkritischen Zustand befindet. Derartige verdichtete Gase sind durch charakteristische Lö­ sungseigenschaften insbesondere für lipophile Inhaltsstoffe gekennzeichnet. Dem komprimierten Gas können zur Änderung der Extraktionseigenschaften andere Gase oder Flüssigkeiten als Schleppmittel in einer solchen Menge beigemischt werden, daß sich die Mischung bei den Extraktionsbedingungen in einem einheitlichen flüssigen oder überkritischen Zustand befinden. Als Schleppmittel kann dabei ein verdichtetes Gas, das polarer oder unpolarer ist als das zur Extraktion eingesetzte verdich­ tete Gas oder auch ein organisches Lösungsmittel Anwendung finden. Auf diese Weise kann man die Polarität des Extrakti­ onsmittels und somit die Lösungseigenschaften davon beeinflus­ sen bzw. einstellen.

Die Extraktion mit einem organischen Lösungsmittel führt man insbesondere bei einer Temperatur von 20°C bis 65°C durch, wobei der obere Temperaturwert natürlich von dem eingesetzten Lösungsmittel abhängt. Vorzugsweise extrahiert man bei einer Temperatur von ca. 60°C, insbesondere wenn man Ethanol als organisches Lösungsmittel einsetzt.

Die Extraktion führt man vorzugsweise in Form einer ansatzwei­ sen Extraktion (Mazeration), einer Perkolation, einer Dekan­ terextraktion oder einer Gegenstromextraktion durch. Die Gesamtausbeuten bei diesen Verfahrensweisen können zwar gerin­ ger sein als bei einer Extraktion der gesamten Lipide, beispielsweise mit Hilfe der erschöpfenden Soxhlet-Extraktion. Allerdings lassen sich diese Arbeitsweisen in wesentlich kürzerer Zeit und somit wirtschaftlicher durchführen.

Bei der Extraktion mit einem verdichteten Gas führt man vor­ zugsweise eine Perkolation durch.

Wenn im Rahmen der vorliegenden Unterlagen von einem organi­ schen Lösungsmittel die Rede ist, das im erfindungsgemäßen Verfahren eingesetzt werden kann, dann werden darunter sowohl die entsprechenden wasserfreien Lösungsmittel als auch solche Lösungsmittel verstanden, die Wasser enthalten (beispielsweise bis zu 30 Vol.-%). Somit können Standardlösungsmittel einge­ setzt werden, ohne daß es erforderlich ist, diese vorher zu trocknen. Jedoch kann ein hoher Wasseranteil die Ausbeute an gewünschten Lipiden nachteilig beeinflussen.

Zur Abtrennung des Lipidextraktes aus der durch Extraktion mit organischen Lösungsmitteln gewonnenen Extraktionsflüssigkeit (Misceila) erniedrigt man vorzugsweise die Temperatur der Miscella soweit, daß sich der Lipidextrakt zumindest teilweise abscheidet. Setzt man als Lösungsmittel ein in jedem Verhält­ nis mit Wasser mischbares Lösungsmittel, beispielsweise Etha­ nol oder Isopropanol ein, dann kann man den Lipidextrakt auch durch Erhöhung des Wassergehaltes abtrennen, wobei diese Maß­ nahme auch mit der geschilderten Temperaturerniedrigung kombi­ niert werden kann. Dabei entzieht man der Miscella das organi­ sche Lösungsmittel nicht oder nur teilweise. Die Miscella wird, ggf. unter Kühlung, in einer ersten Stufe mit Wasser versetzt, so daß die Lösungskapazität der Mischung bei der ge­ wählten Temperatur nicht mehr ausreicht, die Lipide in Lösung zu halten. Diese werden nun beispielsweise mit einem Trennse­ parator von der Miscella abgetrennt.

Der dabei resultierenden Lösung kann man nun bei Normaldruck und hohen Temperaturen das flüssige Lösungsmittel entziehen und so den Restextrakt gewinnen.

Bei dieser Abtrennung des Lipidextraktes aus der Miscella durch Erhöhung des Wassergehaltes und/oder durch Temperaturer­ niedrigung erhöht man den Wassergehalt der Miscella vorzugs­ weise auf 20% bis 90%, insbesondere auf 30 bis 50%. Die Temperatur der Miscella senkt man vorzugsweise auf Werte von +20 °C bis -60 °C und insbesondere auf +5 °C bis -18 °C ab. Es versteht sich von selbst, daß der Wassergehalt des ursprüng­ lich eingesetzten Lösungsmittels und somit der Miscella vor der Wasserzugabe oberhalb der angegebenen Werte gelegen hat. Vorzugsweise setzt man ein Lösungsmittel mit einem Wasserge­ halt von 0 bis 20 Vol.-%, insbesondere von 4-15 Vol.-% (z. B. Ethanol).

Analoges gilt für die Temperatur. So muß die Temperatur der Miscella vor der Temperaturerniedrigung natürlich oberhalb derjenigen Werte liegen, auf die abgesenkt wird. Vorzugsweise hat die Miscella eine Temperatur von 40 °C bis zur Siedetempe­ ratur des eingesetzten Lösungsmittels.

Natürlich kann man den Gesamtextrakt aus der Miscella auch durch Abdampfen des Lösungsmittels gewinnen. Durch Erhöhung des Wassergehaltes und/oder durch Temperaturerniedrigung ist es jedoch möglich, die Lipide mit den hier interessierenden Fettsäuren nahezu quantitativ abzuscheiden.

Aus der mit Hilfe eines organischen Lösungsmittels gewonnenen Miscella oder aus dem daraus erhaltenen, vollständig oder teilweise vom Lösungsmittel befreiten Extrakt kann man mit ei­ nem verdichteten Gas, vorzugsweise Kohlendioxid, nochmals extrahieren. Bei dieser bevorzugten Ausführungsform fraktio­ nierte man den mit Hilfe des organischen Lösungsmittels gewon­ nenen Extrakt in eine unpolare triglyceridhaltige Franktion und eine polare phospholipidhaltige Fraktion, die, ggf. nach entsprechender Raffination, vielfältigen Verwendungszwecken zugeführt werden kann.

Die Bedingungen für die fraktionierende Extraktion mit dem verdichtenden Gas sind die gleichen wie bei der Extraktion der ursprünglich eingesetzten Algen etc. mit diesem Gas.

Es wurde überraschend gefunden, daß es möglich ist, durch Wahl bestimmter Rohmaterialien und durch bestimmte Extraktions­ schritte einen Lipidextrakt bzw. Lipidextraktfraktionen mit Lipiden zu erhalten, die reich an bestimmten LCP′s sind. Gegenstand der Erfindung ist somit auch ein Lipidextrakt bzw. eine Lipidextraktfraktion mit einem Gehalt an Arachidonsäure von mindestens 5 Gew.-% und/oder mit einem Gehalt an Docosa­ hexaensäure von mindestens 3 Gew.-%, bezogen auf das Gesamt­ gewicht der Fettsäuren. Es versteht sich von selbst, daß diese Fettsäuren nicht frei, sondern in "gebundener Form" (z. B. Triglycerid, Glycolipid, Phospholipid etc.) vorliegen. Durch die Bereitstellung dieses Lipidextraktes bzw. dieser Li­ pidextraktfraktionen ist es u. a. möglich, einen Rohstoff für die Herstellung von Babynahrungen bereitzustellen, der die für die Entwicklung des Kindes wichtigen Arachidonsäure und/oder Docosahexaensäure enthält. Lipide, die an diesen Fettsäuren reich sind, sind ansonsten nur schwierig oder in wirtschaftli­ cher Hinsicht unbefriedigender Weise zu erhalten. Der Gehalt an Arachidonsäure und Docosahexaensäure und insbesondere der Gehalt an diesen beiden Fettsäuren in einem Lipidextrakt hängt natürlich von der Wahl des eingesetzten Rohmaterials ab. Es ist jedoch ausreichend, wenn der Lipidextrakt eine dieser Fettsäuren in einem hohen Anteil enthält, da er natürlich mit anderen Extrakten und auch anderen Bestandteilen vermischt werden kann.

Gegenstand der Erfindung ist ferner ein nach dem erfindungsge­ mäßen Verfahren erhältlicher Lipidextrakt bzw. eine Lipidex­ traktfraktion.

Die erfindungsgemäßen LCP-haltigen Lipidextrakte oder einzelne Lipidfraktionen (Triglyceride, Glxcolipide, Phospholipide etc. oder Gemische von beiden) können, ggf. nach üblicher Rafina­ tion und Stabilisierung, als Zusatz zum Fettkörper von Säug­ lingsnahrungen benutzt werden. Hierbei sind unter Säuglings­ nahrungen nicht nur die üblichen Anfangsmilchnahrungen für früh- und reifgeborene Säuglinge zu verstehen, sondern auch Spezialprodukte, die beispielsweise zur Therapie oder Präven­ tion atopischer Erkrankungen angeboten werden.

Aufgrund der charakteristischen Anteile an LCP und ihrer emul­ gierenden Eigenschaften können insbesondere phospholipidhal­ tige Fraktionen aus Algen-Rohstoffen nach entsprechender Raf­ fination und Stabilisierung auch als Zusatz in Fettemulsionen zur parenteralen Ernährung benutzt werden.

Die genannten Lipidextrakte und/oder Lipidfraktionen und/oder die daraus nach Hydrolyse und Umesterung erhaltenen Alkylester der LCP können in geeigneter Form (beispielsweise Gelatine- Kapseln) zur Prävention arteriosklerotischer Erkrankungen und von entzündlichen Autoimmunerkrankungen eingesetzt werden.

Die LCP-haltigen Fraktionen und insbesondere die Phospholipid­ fraktionen können als Wirkstoffzusatz zu kosmetischen Präpara­ ten oder als Ausgangsmaterial zur Bildung von Liposomen die­ nen, die gleichfalls kosmetischen Präparaten zugesetzt werden können.

Insbesondere die LCP-haltigen Phospholipidfraktionen können aufgrund ihrer physiko-chemischen Eigenschaften als Emulgato­ ren in der Lebensmittel- und der kosmetischen Industrie einge­ setzt werden.

Hochgereinigte Fraktionen der LCP-haltigen Lipide sowie die nach Hydrolyse und eventueller Umesterung erhaltenen freien Fettsäuren und Fettsäureester können als Vergleichssubstanzen (Standards) in der Analytik Anwendung finden.

Beispiel 1 Extraktion verschiedener Rohmaterialien mit Hilfe der Soxhlet- Extraktion

Eine Reihe verschiedener Algenarten sowie eine Vielzahl ver­ schiedener Reststoffe der Alginat- und Carraghenangewinnung wurden mit Hilfe der erschöpfenden Soxhlet-Extraktion unter Verwendung von Ethanol (96%; V/V) während eines Zeitraumes von 40 h extrahiert. Dabei wurden die Lipide quantitativ extrahiert. Als gesamte Lipide werden im folgenden die natür­ lichen Gemische aus Triglyceriden, Glyco- und Phospholipiden sowie fettlöslichen Pigmenten und Vitaminen bezeichnet.

Die Ergebnisse dieser Extraktionen sind in den Tabellen 1 und 2 zusammengefaßt. Diese Tabellen zeigen das jeweilige Fettsäu­ remuster bzw. die jeweiligen Gesamtlipid- bzw. Fettsäureaus­ beuten.

Die in diesen Tabellen 1 und 2 aufgeführten Ergebnisse zeigen, daß die erfindungsgemäß extrahierten Braun- und Rotalgen bzw. die Reststoffe der Alginat- und Carraghenangewinnung einen ho­ hen Gehalt an physiologisch-bedeutsamen polyungesättigten Fettsäuren aufweisen. Als wertgebende Komponenten sind hier in erster Linie die Arachidonsäure (AA; 20-4 n6) und die Docosahe­ xaensäure (DHA; 22-6 n3) zu nennen. Diese Fettsäuren können in sehr unterschiedlichen Anteilen aus den einzelnen Rohstoffen extrahiert werden. Während die Arachidonsäure mit Anteilen von 5 bis 8 Gew.-% aus allen Rohstoffen extrahiert werden konnte, sind vor allem die als Alginat 3 und 4 bezeichneten Rohstoffe der Alginat- und Carraghenangewinnung durch charakteristische Gehalte an Docosahexaensäure gekennzeichnet. Diese Fettsäure kommt in den übrigen Rohstoffen nicht oder in nur sehr gerin­ gen Anteilen vor.

Die in Tabelle 2 dargestellten Extraktionsausbeuten zeigen, daß sich der insgesamt extrahierbare Lipidgehalt der verschie­ denen Algen-Rohstoffe etwa zwischen 10 bis 70 g pro kg Trocken­ masse bewegt, woraus sich jeweils etwa 50% an Gesamtfettsäu­ ren gewinnen lassen. In den Reststoffen der Alginatgewinnung beträgt der Anteil der extrahierbaren wertgebenden Fettsäuren (n6-LCP+n3-LCP) bis zu 7 g pro kg Trockensubstanz und in den nativen Algen bis zu 6 g pro kg Trockensubstanz.

Das erfindungsgemäße Verfahren ist insbesondere dann wirt­ schaftlich durchführbar, wenn man als Rohmaterial beim erfin­ dungsgemäßen Verfahren die beiden Reststoffe der Alginatgewin­ nung Alginat 2 und Alginat 3, das Single-Cell Oil (Mikroalge) und das Algenmehl von Ascophyllum nodosum einsetzt.

Der durch die Lösungsmittelextraktion erhaltene Extrakt kann mittels herkömmlicher Verfahren fraktioniert und gereinigt werden. Es kann sich auch eine erfindungsgemäße Extraktion mit einem verdichteten Gas anschließen.

Tabelle 1

Fettsäuremuster von Mikroalgen, Makroalgen und von Reststoffen der Alginatgewinnung durch Ehtanol-Soxhlet-Extraktion in Gew.-% des Gesamtfettsäuremusters

Tabelle 2

Gesamtextrakt-, Lipidextrakt- und Fettsäureausbeuten von Mikro­ algen, Makroalgen und von Reststoffen der Alginatgewinnung durch Ethanol-Soxhlet-Extraktion in g pro kg Rohstoff-Trockensubstanz

Der Extrakt wird vorzugsweise durch Destillation unter vermin­ dertem Druck vollständig vom Lösungsmittel befreit und dann den bei der Gewinnung von Speisefetten industriell üblichen Reinigungsverfahren, wie Bleichung, Entschleimung und Desodo­ rierung, unterzogen. Das Bleichmittel kann bereits vor dem vollständigen Entfernen des Lösungsmittels zugegeben werden.

Beispiel 2 Extraktion von Lipiden aus der Alge Ascophyllum nodosum mit 90%igem Ethanol

Als Rohstoff eingesetzt wurde das Mehl der Alge Ascophyllum nodosum.

Charakterisierung des Rohstoffes Ascophyllum nodosum

Die Lösungsmittel-Extraktion über 4 h wurde mit Ethanol (90%; Vol/Vol) bei verschiedenen Temperaturen vorgenommen. Bei der verwendeten Anordnung handelt es sich um eine im Labormaßstab nachempfundene einstufige Perkolation. Das Verhältnis zwischen eingesetztem Extraktionsmittel und der Rohstoff-Trockensub­ stanz betrug etwa 4 : 1 (Gew./Gew.).

Im Vergleich zur Soxhletextraktion (vgl. Tab. 3), bei der eine Extraktionszeit von 40 h eingehalten wurde, lagen die Ausbeu­ ten der 4stündigen Perkolation durchweg relativ hoch. Es zeigte sich, daß eine Erhöhung der Extraktionstemperatur zu einer verbesserten Ausbeute bei allen Extraktinhaltstoffen führt. Eine weitergehende Optimierung der Ausbeute bei der Ex­ traktion dieses Rohstoffes ist durch eine weitere Erhöhung des Verhältnisses zwischen Lösungsmittel und Rohstoff oder durch eine Änderung der Prozeßführung hin zu einer Gegenstromex­ traktion erreichbar (vgl. Beispiel 3).

Tabelle 3

Extraktionsausbeuten bei der Perkolation in % bezüglich Roh­ stoff-Trockensubstanz

Die in Tab. 3 dargestellten Ergebnisse des einstufigen Perko­ lationsversuches zeigen, daß mit dieser Versuchsanordnung Aus­ beuten von 41% der Arachidonsäureanteile und 58,5% der Ei­ cosapentaensäureanteile im Vergleich zur Soxhlet-Extraktion erzielt werden. Mit dem Perkolationsverfahren konnten insge­ samt 33,4% der maximal extrahierbaren Fettsäuren gewonnen werden. Der im Vergleich zur Soxhlet-Extraktion erhöhte Wert für die Gesamtextraktausbeute ist auf den höheren Wassergehalt (10%) des bei der Perkolation verwendeten Ethanols und die daraus resultierende intensivere Extraktion hydrophiler Sub­ stanzen zurückzuführen.

Aus Tabelle 3 wird zudem ersichtlich, daß zur Extraktion des Mehles der Alge Ascophyllum nodosum mit 90%igem Ethanol eine Extraktionstemperatur von ca. 60 °C anzustreben ist, wenn das Verfahren hinsichtlich der Miscellabeladung, d. h. des Lösungs­ mittelverbrauches optimiert werden soll. Selbstverständlich sind vergleichbare Ausbeuten auch bei niedrigeren Temperaturen und entsprechend höherem Lösungsmitteleinsatz erreichbar.

Beispiel 3 Stufenweise Gegenstromextraktion eines Reststoffes der Algi­ natgewinnung mit 90% Ethanol

Bei diesem Beispiel wurde ein Rohstoff verwendet, der bereits zur Gewinnung von Alginat eingesetzt wurde (Alginat 1). Bei diesem Reststoff handelt es sich um ein Gemisch verschiedener Braunalgen-Arten. Die Algenreststoffe wurden nach dem Alginat­ gewinnungsprozeß getrocknet und gemahlen. So daß sie in Korn­ größe und Wassergehalt in etwa dem Mehl der Alge Ascophyllum nodosum (siehe Beispiel 2) entsprechen.

Die angewandte Extraktionsmethode der stufenweisen Gegenstrom­ extraktion entspricht den in technischem Maßstab durchgeführ­ ten Verfahren. Im Gegensatz zur Perkolation (Beispiel 1) schwankt die Extraktbeladung der Miscella bei der mehrstufigen Gegenstromextraktion um einen Mittelwert. Je mehr Stufen ein­ gesetzt werden und je kürzer die Verweildauer des Rohstoffes in der Anordnung ist, um so geringer ist diese Schwankung. Mit diesem Verfahren können im Vergleich zur Perkolation identi­ sche Ausbeuten mit einem Bruchteil des Lösungsmittelaufwandes bzw. mit ähnlichen Lösungsmittelmengen höhere Ausbeuten er­ zielt werden.

In dem gewählten Beispiel wurde eine 4stufige Versuchsanord­ nung gewählt. Die Extraktionstemperatur betrug 20 °C; das Ver­ hältnis zwischen eingesetzter Extraktionsmittelmenge und Roh­ stoff-Trockensubstanz lag bei 2 : 1.

Trotz der vergleichsweise einfachen Anordnung (bei industriell betriebenen Anlagen sind 30 und mehr Stufen nicht unüblich), konnten in diesem Beispiel Ausbeuten von 66% der Arachidon­ säure, 72,5% der Eicosapentaensäure und 45,7% der Gesamt­ fettsäuren im Vergleich zur Soxhlet-Extraktion erreicht wer­ den.

Tabelle 4

Ausbeuten der mehrstufigen Gegenstromextraktion von Alginat 1 im Vergleich zur Soxhlet-Extraktion in Gew.-% bezüglich Roh­ stoff-Trockensubstanz

Vergleicht man diese Werte mit den Ergebnissen der Perkolation von Beispiel 2, werden die Vorteile der Gegenstromextraktion deutlich. Obwohl bei der Gegenstromextraktion nur 50% der Lö­ sungsmittelmenge eingesetzt wurde und die Extraktionstempera­ tur lediglich 20 °C betrug, übersteigen die Ausbeuten bezüg­ lich der Gesamtfettsäuren und der Arachidonsäure dennoch deut­ lich die der Perkolation.

Beispiel 4 Extraktion von Mehl der Alge Ascophyllum nodosum mit verdich­ tetem Kohlendioxid

Zur Extraktion mit verdichteten Gasen wird der getrocknete und gemahlene Rohstoff aus nativen Algen oder aus Reststoffen der Alginat- und Carraghenangewinnung verwendet. Der Wassergehalt des Ausgangsmaterials liegt üblicherweise zwischen 5 und 50 Gew.-% vorzugsweise zwischen 10 und 20 Gew.-%. Die Korngröße des Materials beträgt 0,01 mm bis 50 mm, vorzugsweise 0,1 mm bis 0,3 mm.

Als Rohstoff dient das bereits im Beispiel 2 verwendete Algen­ mehl von Ascophyllum nodosum. Die Extraktion wurde mit verdichtetem Kohlendioxid (150 bar, 35 °C, ca. 11 kg CO₂/kg Rohstoff) durchgeführt. Unter diesen Bedingungen sind minde­ stens 90% der insgesamt mit diesem Lösungsmittel extrahier­ baren Lipide zu gewinnen.

Tabelle 5

Extrakt- und Fettsäureausbeuten der HD-Extraktion von Asco­ phyllum nodosum im Vergleich zur Ethanol-Soxhlet-Extraktion in Gew.-% bezüglich Rohstoff-Trockensubstanz

In Tabelle 5 werden die mit der jeweils bezeichneten Methode bezüglich des genannten Rohstoffes maximal erreichbaren Aus­ beuten gegenübergestellt. Die Soxhlet-Extraktion steht hierbei für Verfahren der Lösungsmittelextraktion mit Ethanol insge­ samt, da selbst im Prinzip nichts anderes als eine wiederholte Perkolation/Mazeration darstellt.

Um die Qualität der erhaltenen Extrakte beurteilen zu können, werden in Tabelle 6 die Fettsäuremuster der nach den beiden Verfahren gewonnenen Extrakte gegenübergestellt.

Tabelle 6

Vergleich der Fettsäurespektren eines HD-Extraktes und eines Soxhlet-Extraktes von Ascophyllum nodosum; Angaben in Gew.-% der Gesamtfettsäuren

Die Ergebnisse in Tabelle 6 machen deutlich, daß der Lösungs­ mittelextrakt aus Ascophyllum nodosum im Vergleich zum HD-Ex­ trakt hinsichtlich des Anteils an Arachidon- und Eicosapen­ taensäure nur eine geringfügig günstigere Zusammensetzung auf­ weist. Da mit Hilfe der Hochdruck-Extraktion in erster Linie unpolare Lipide (Triglyceride) extrahiert werden, muß davon ausgegangen werden, daß die wertgebenden Fettsäuren auch mit hohen Anteilen in diesen Lipiden vorkommen.

Beispiel 5 Abtrennung der Lipidfraktion aus der Miscella durch Erhöhung des Wassergehaltes

Die Abtrennung der Lipidfraktion aus der Miscella durch Erhö­ hung des Wassergehaltes wurde am Beispiel der durch stufen­ weise Gegenstromextraktion von Alginat 2 mit 90%Ethanol er­ haltenen Miscella durchgeführt. Es wurden 5 aliquote Teilmen­ gen der Miscella abgenommen und diese ausgehend von den 10% Wasser in der Ausgangsmiscella gezielt auf verschiedene Was­ sergehalte eingestellt (vgl. Tab. 7). Die nach Wasserzugabe abgeschiedenen Extrakte wurden durch Zentrifugieren, Abdekan­ tieren des Überstandes und abschließendes Trocknen gewonnen.

Aus der nachstehenden Tabelle 7 wird ersichtlich, welcher Zu­ sammenhang zwischen dem Wassergehalt der Miscella und der Aus­ beute der abgeschiedenen Lipidfraktion besteht. Gegenüberge­ stellt werden die erhaltenen Lipidausbeuten einem Vergleichs­ extrakt, der durch vollständiges Abdampfen des Lösungsmittels einer aliquoten Menge aus der Ausgangsmiscella gewonnen wurde. Dabei werden die Ausbeuten relativ in Prozent des Vergleichs­ extraktes dargestellt (Vergleichsextrakt = 100%).

Tabelle 7

Lipidausbeuten aus der Miscella nach Abscheidung durch Er­ höhung des Wassergehaltes in Prozent bezüglich des Vergleichs­ extraktes (= 100%); Werte für Wassergehalt in % absolut

Die Werte in Tabelle Nr. 7 zeigen, daß bereits eine Erhöhung des Wassergehaltes der Miscella von 10% auf 35% ausreicht, um die Lipide, in denen die wertgebenden Fettsäuren Arachidon- und Eicosapentaensäure lokalisiert sind, nahezu quantitativ abzuscheiden. Die Werte über 100% resultieren vermutlich da­ raus, daß aufgrund der höheren Reinheit der Lipidfraktionen nach Abscheidung im Vergleich zu Vergleichsextrakt die Fett­ säuren vollständiger in die gaschromatographisch bestimmbaren Derivate überführt werden können.

Das hier angewandte Verfahren der Lipidabscheidung aus der Miscella durch Erhöhung des Wassergehaltes weist zudem ver­ schiedene verfahrenstechnische Vorzüge auf:

• 1. Durch die starke Erhöhung des Wassergehaltes der Miscella findet eine Vorreinigung des Extraktes statt, denn hydro­ phile Substanzen, die bei einem Wassergehalt des Extrak­ tionsmittels von 10% bereits mitextrahiert wurden, blei­ ben in Lösung und müssen auf diese Weise nicht erst nach­ träglich durch aufwendige Verfahren aus dem Gesamtlipid­ extrakt entfernt werden.
• 2. Alginate oder Carraghenane, die vor allem aus den nativen Algen in z. T. recht großen Mengen durch 90% Ethanol ex­ trahiert werden, können bei der Lösungsmittelrückgewin­ nung in modernen Verdampfersystemen /z. B. Fallstromver­ dampfer) zu Störungen führen. Wird der Lipidextrakt je­ doch durch Zugabe von Wasser aus der Miscella gewonnen, hält der Wasserüberschuß die hydrophilen Hydrokolloide in Lösung, so daß die Abtrennung des Lösungsmittels aus der Restmicella problemlos durchgeführt werden kann.

Um überprüfen zu können, ob durch die Wasserzugabe eine selek­ tive Abscheidung der Lipide aus der Miscella und damit eine Veränderung des Fettsäuremusters der Lipide stattfindet, wurde exemplarisch der bei einem Miscella-Wassergehalt von 55% ab­ geschiedene Extrakt und der Vergleichsextrakt gaschromatogra­ phisch untersucht.

Der in der nachstehenden Tabelle 8 aufgeführte Extrakt 1 wurde durch Erhöhung des Wassergehaltes auf 55% aus der Ausgangs­ miscella gewonnen, während der Vergleichsextrakt durch Abdamp­ fen des Lösungsmittels aus der Ausgangsmiscella erhalten wurde.

Tabelle 8

Fettsäuremuster eines bei 55% Wasseranteil abgeschiedenen Ex­ traktes im Vergleich zum Gesamtextrakt: Angaben in Gew.-% der Gesamtfettsäuren

Die Ergebnisse der Fettsäureanalyse in Tabelle 8 zeigen, daß sich die Fettsäurespektren der beiden Extrakte nicht wesent­ lich unterscheiden. Auch die Anteile der wertgebenden Fettsäu­ ren Arachidon- und Eicosapentaensäure stimmen mit 10 bis 11 Gew.-% nahezu überein. Dieses Ergebnis bestätigt die bereits in Tabelle 7 dargestellten Ergebnisse, daß durch gezielte Was­ serzugabe eine quantitative Abscheidung der Lipide und Fett­ säuren aus der Roh-Miscella möglich ist.

Beispiel 6

Nachstehend ist die Abtrennung des Neutrallipidextraktes durch Extraktion mit verdichteten Gasen beschrieben.

In einer geeigneten Anlage wird die mit organischen Lösungs­ mitteln (vorzugsweise Ethanol) gewonnene Miscella oder ein ganz oder teilweise vom Lösungsmittel befreiter Extrakt in ei­ nem Extraktionsautoklaven in Kontakt mit verdichteten Gasen, vorzugsweise Kohlendioxid gebracht. Dem verdichteten Gas kann ein Schleppmittel zur gezielten Einstellung der Extraktionsei­ genschaften zudosiert werden.

Wurde das flüssige Lösungsmittel vollständig aus dem Extrakt entfernt, und dem Extraktionsgas kein Schleppmittel beige­ mischt, werden aus dem Extrakt selektiv die Triglyceride, Ca­ rotinoide, Chlorophylle und Phytosterine herausgelöst. Durch geeignete Wahl und Dosierung des Schleppmittels bzw. unvoll­ ständige Abtrennung des flüssigen Lösungsmittels aus dem Ex­ trakt können die Lösungsseigenschaften des Extraktionsgases wesentlich erweitert werden.

Durch Druckminderung und/oder Temperaturerhöhung des Extrakti­ onsgases wird dessen Lösungskapazität stufenweise verringert. In jeder dieser Stufen fällt ein bestimmter Teil der gelösten Lipide als Extraktfraktion an. Auf diese Weise erfolgt primär eine Fraktionierung der Lipide in eine unpolare und eine po­ lare Fraktion. Die unpolare Lipidfraktion kann dann im Zuge­ einer mehrstufigen Abscheidung einer weiteren Fraktionierung unterzogen werden.

Diese Abtrennung wird anhand einer CO₂-Hochdruck-Gegenstromex­ traktion einer Miscella näher erläutert.

Ein Aliquot einer Miscella, die durch eine Mazeration von Al­ ginat 2 mit 90% Ethanol gewonnen wurde, wird im Gegenstrom mit verdichtetem Kohlendioxid (150 bar, 35°C) in einer Ab­ triebssäule extrahiert. Nach der Extraktion wird das verdich­ tete Gas in einem Abscheideautoklaven auf 20 bar entspannt, so daß das im Fluid gelöste Lipid als Extrakt anfällt. Am Boden der Säule sammelt sich die nicht im Fluid lösliche Fraktion. Sie besteht aus polaren Lipiden und dem nicht lipophilen Rest­ extrakt. Der Füllstand des Abscheiders und der Abtriebssäule kann während der Extraktion über Sichtfenster visuell kontrol­ liert werden. Beide Fraktionen werden im Laufe der Extraktion bei Erreichen einer bestimmten Füllhöhe über ein Ventil abge­ nommen.

Die Mazeration wurde in diesem Beispiel als einstufige Batch- Extraktion bei 35 °C über 20 h durchgeführt. Die Miscellabela­ dung betrug vor Hochdruckextraktion bezüglich Gesamtextrakt 1,37% und bezüglich Lipidextrakt 1%. Von der durch die Maze­ ration erhaltenen Miscella wurde eine Teilmenge abgenommen und zur Hochdruckextraktion eingesetzt. Nach der Hochdruckextrak­ tion konnten im Abscheider 41,3% des Gesamtextraktes und 50,9% des Lipidextraktes wiedergefunden werden.

Gaschromatographische Untersuchung der Extrakte im Abscheider und vor der HD-Extraktion

Um beurteilen zu können, ob sich der durch die Hochdruckex­ traktion erhaltene Neutrallipidextrakt infolge der Fraktionie­ rung in der Zusammensetzung der Fettsäuren gegenüber dem Ge­ samtextrakt unterscheidet, wurde eine gaschromatographische Analyse des Fettsäuremusters des Extraktes vor und nach der Hochdruckextraktion durchgeführt.

Tabelle 9

Fettsäuremuster eines durch Mazeration erhaltenen Lipidextrak­ tes aus Alginat 2 vor und nach der Hochdruck-Extraktion (HD-E) in Gew.-% der Gesamtfettsäuren

Der Vergleich der Fettsäurespektren der Lipidextrakte vor und nach der Hochdruckextraktion zeigt, daß sich das Fettsäuremu­ ster der Neutrallipidfraktion nicht wesentlich vom Gesamtex­ trakt unterscheidet. Der Anteil der physiologisch bedeutsamen Fettsäuren Arachidonsäure (20-4 n6) und Eicosapentaensäure (20-5 n3) im Neutrallipidextrakt ändert sich infolge der HD- Extraktion nicht zum Negativen, sondern steigt im Gegenteil im Falle der Eicosapentaensäure sogar an.

Die Ergebnisse dieses Versuches zeigen, daß die LCP′s in we­ sentlichen Anteilen in den Neutrallipiden der Reststoffe der Alginatgewinnung lokalisiert sind.

Claims (11)

1. Verfahren zur Gewinnung von Lipiden mit einem hohen Anteil von langkettig-hochungesättigten Fettsäuren (LCP) mit 20 bis 22 C-Atomen durch Extraktion aus einem Rohma­ terial tierischen oder pflanzlichen Ursprungs dadurch gekennzeichnet, daß man als Rohmaterial einzellige Algen (Mikroalgen), Makroalgen aus den Familien der Braun-, Rot- und Grün­ algen und/oder Reststoffen der Alginat- bzw. Carraghenan­ gewinnung mit einem Wassergehalt 50 Gew.-% und einer Korngröße 50 mm einsetzt und daß man zur Extraktion ein organisches Lösungsmittel oder ein verdichtetes Gas verwendet.

2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man ein Rohmaterial mit einem Wassergehalt von 5 bis 50%, insbesondere 5 bis 15 Gew.-%, und mit einer Korn­ größe von 0,01 bis 50 mm, insbesondere 0,1 bis 1,0 mm einsetzt.

3. Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, daß man mit einem mit Wasser in jedem Verhältnis misch­ baren Lösungsmittel, insbesondere einem niederen Alkohol, bei einer Temperatur von 20 °C bis 65 °C, insbesondere 60 °C, extrahiert und daß man die Extraktion in Form einer ansatzweisen Extraktion (Mazeration), Perkolation, Dekan­ terextraktion oder Gegenstromextraktion durchführt.

4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet,
daß die mit Hilfe eines mit Wasser in jedem Verhältnis mischbaren Lösungsmittel, insbesondere Ethanol, bei 20 °C oder darüber gewonnene Extraktionsflüssigkeit (Miscella) mit Wasser soweit verdünnt, insbesondere auf 20 bis 90 Vol.-%, und/oder soweit abkühlt, insbesondere auf < + 20 °C bis -60 °C, daß sich der Lipidextrakt zumindest teil­ weise abscheidet, und
daß man den so erhaltenen Lipidextrakt abtrennt.

5. Verfahren nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß man die mit Hilfe eines organischen Lösungsmittels gewonnene Miscella oder den daraus erhaltenen, teilweise oder vollständig vom Lösungsmittel befreiten Extrakt mit einem verdichteten Gas extrahiert und die im verdichteten Gas gelöste, neutrale Lipidfraktion sowie gewünschten­ falls die nicht im verdichteten Gas in Lösung gegangene, polare Lipidfraktion isoliert.

6. Verfahren nach Anspruch 1 oder 5, dadurch gekennzeichnet, daß die angewandten Drücke der verdichteten Gase 60 bis 2000 bar, insbesondere 70 bis 500 bar, und die Temperatur -20 bis + 200 °C, insbesondere +20 bis +60 °C, betra­ gen.

7. Verfahren nach Anspruch 1, 5 oder 6, dadurch gekennzeichnet, daß man Kohlendioxid als verdichtetes Gas einsetzt, dem ein Schleppmittel beigegeben sein kann.

8. Lipidextrakt oder Lipidextraktfraktion von einzelligen Algen (Mikroalgen), Makroalgen aus den Familien der Braun-, Rot- und Grünalgen und/oder den Reststoffen der Alginat- bzw. Carraghenangewinnung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Arachidonsäure von mindestens 5 Gew.-% und/oder einen Gehalt an Docosahexaensäure von mindestens 3 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Fettsäuren.

9. Lipidextrakt oder Lipidextraktfraktion, erhältlich nach dem Verfahren gemäß einem der Ansprüche 1 bis 7.

10. Lipidextrakt oder Lipidextraktfraktion nach Anspruch 9, gekennzeichnet durch einen Gehalt an Arachidonsäure von mindestens 5 Gew.-% und/oder einen Gehalt an Docosahexaensäure von mindestens 3 Gew.-%, bezogen auf das Gesamtgewicht der Fettsäuren.

11. Nahrungsmittel, dadurch gekennzeichnet, daß sie einen Lipidextrakt oder eine Lipidextraktfraktion nach einem der Ansprüche 8 bis 10 enthält 12. Verwendung des Lipidextraktes oder der Lipidextraktfrak­ tion nach einem der Ansprüche 8 bis 10 als Zusatz zum Fettkörper von Säuglingsnahrungsprodukten, als Diätetika zur Arterioskleroseprävention, zur Prävention von Auto­ immunerkrankungen (Atopien) und als Zusatz zu kosme­ tischen Produkten.