DE3518817A1 - Mercaptocycloalkylcarbonyl- und mercaptoarylcarbonyldipeptide - Google Patents

Description

In der GB-PS 2 04-5 771 sind Mercaptoacyldipeptide der Formel

R₂ O

_Rl-S-(CH₂)_n-CH- C-A₁-A₂

beschrieben, in der R^ ein Wasserstoffatom, einen Alkanoylrest oder eine Benzoylgruppe bedeutet oder ein symmetrisches Disulfid bildet, Rg ein Wasserstoffatom, einen Alkyl- oder Phenylalkylrest darstellt, η den Wert 0 oder 1 hat und die Reste A^ und Ap jeweils einen oC-Iniino- oder <*_-Aminosäurerest bedeuten, die durch eine Peptidbindung verbunden sind. Die Verbindungen besitzen Angiotensin-Converting-Enzyme inhibierende Wirksamkeit.

In der US-PS 4- 24-8 883 sind 1-(3-Mercapto-2-methylpropanoyl)-prolyl-aminosäure-Derivate der Formel

^CH3 O O

ι ρ ο ii

R_n-S-CHr-CH C— N I— C-N-CH-COOR

R₂ R₃

beschrieben, in der Ro ein Wasserstoffatom oder einen Niederalkylrest bedeutet, R^ ein Wasserstoffatom, eine Phenylgruppe, einen Niederalkylrest oder einen substituierten Niederalkylrest darstellt, oder Rg und R^ zusammen genommen einen heterocyclischen Ring vervollständigen. Für diese Verbindungen ist Angiotensin-Converting-Enzyme inhibierende Wirksamkeit beschrieben.

In der DE-OS 33 41 610 sind verschiedene Carbox?/- und substituierte Carboxycycloalkylcarbonyldipeptide beschrieben.

Pur diese Verbindungen ist Angiotensin-Converting-Enzyme inhibierende Wirksamkeit offenbart und in Abhängigkeit von der endständigen o(-Aminosäure auch Enkephalinase inhibierende Wirkung.

10

m der US-Patentanmeldung Nr. 44-6 923 sind verschiedene Carboxy- und substituierte Carboxyarylcarbonyldipeptide beschrieben. Pur diese Verbindungen ist Angiotensin-Converting-Enzym inhibierende Wirksamkeit und in Abhängigkeit von der endständigen ^-Aminosäure auch Enkephalinase inhibierende Wirkung offenbart.

Gegenstand der Erfindung sind die neuen Mercaptocycloalkylcarbonyl- und Mercaptoarylcarbonyldipeptide der allgemeinen Formel I und ihre Salze

A ist

O R R, O

Il

R₂-S-(CH₂) -A-C-N-CH-C-X

■c I

C-

I
H

(D

-C-C-

14

-C-C-

-C- C-

-C-C-

- 22 -

ν hat den Wert 1 oder

Z vervollständigt einen Cycloalkylring mit 3 bis 10 Kohlenstoffatomen, einen solchen Cycloalkylring, in dem eines der Kohlenstoff atome durch einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, Niederalkoxyrest mit 1 bis 4-Kohlenstof fat omen, Niederalkylthiorest mit 1 bis 4-Kohlenstöffatomen, eine Phenyl-, Benzyl-,'Halogen-, Trifluormethyl- oder Hydroxylgruppe substituiert ist, oder einen Cycloalkenylring mit 5 bis 7 Kohlenstoffatomen .

X bedeutet eine Amino-oder Iminosäure der Formel

^R7

-N

CH₂ C-COOR,

(L)

-N

Pb-

-N

• C-COOR I (L) ^fc

10

-N

10

CH-

I ² '

C-COOR₁- -N—C-COOR,.

I (D ⁶ I (D

-N·

. C-COOR,

(L)

-N-C-COOR,

-N C-COOR,

(L)

C—COOR-I /τ , ο

(L)

i24

•CH-COOR-

N'

ι ι

-N— C-COOR, (L) ^K

(CH₂In

-N-

(L)

COOR.., ο

-N-

-COOR-' (D

OCH.

R-

-N

COOR,

(D

COOR.

oder

r »

• COOR_C ¹ (L) ⁶

η hat den Wert 0, 1 oder 2.

R₂c bedeutet einen Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder den Rest

R_ bedeutet ein Wasserstoff atom, einen Niederalkylrest, ein HaIo-⁷

b-natom, eine Hydroxylgruppe, einen Rest der Formel

Il

-HH-C-Niederalkyl, eine Amiiiogruppe, einen der Reste

/ 19 N

^R2Q

O Ii

¹⁵ eine 1- oder 2-Naphthylgruppe der Formel

' -(CH₂) -cycloalkyl,

Il /⁸IS

-O-C-N , -O-niederalkyl, -O-

25 eine 1- oder 2-I\^Taphthyloxygruppe der Formel

-O-(CH₂)

, -s-aiederalkyl,

oder eine 1- oder 2-Naphthylthiogruppe der Formel

-S-(CH-). 2 m

q bedeutet ein Halogenatom/

-O-C-N

, -0-O-ieder alkyl, eine 1- oder

^(R13>p

2-Naphthyloxygruppe der Formel

-O-(CH_)v 2 πν

-S-niederalkyl, -S-

oder eine 1 — oder 2-Kaphthyltiiiogruppe der Formel -S-(CH₂)

R ist eine Ketogruppe oder — (CH^)

^(R13^}p

R bedeutet ein Halogenatom oder den Rest -Y-R.. ^.

R' 2 sind unabhängig voneinander Wasserstoff atome oder Niederalkylreste oder R^₁, R₁₉ und R'« sind Wasserstoffatome und R₁₁ bedeutet einen Rest der Formel

R bedeutet ein Wasserstoff atom, einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, Niederalko:<:yrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Niederalkylthiorest mit 1 bis A- Kohlen stoffatomen, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom, eine Trifluormethyl-, Hydroxyl-, Phenyl-, Phenoxy-, Phenylthio- oder Phenylmethylgruppe.

_OI_ R₁. stellt ein Wasserstoff atom, einen Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Niederalkoxyrest mit 1 bis 4- Kohlen-

stoff atomen, Niederalkylthiorest mit Λ bis A- Kohlen-

Stoffatomen,¹ ein Chlor-, Brom- oder STuoratom, eine

Trifluormethyl- oder Hydroxylgruppe dar, m hat den Wett 0, 1, 2, 3 oder

ρ hat den Wert 1, 2 oder 3, mit der Maßgabe, daß ρ einen höheren Wert als 1 nur hat, wenn R^₇. oder R^ ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Methoxygruppe, ein Chlor- oder Fluoratom bedeutet^

R stellt ein Wasserstoffatom oder einen Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen dar.

Y bedeutet ein Sauerstoff- oder Schwefelatom. R_{-1 r} bedeutet einen Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoff-

atomen oder einen Rest der Formel

13¹P

oder die Reste R₁₆ vervollständigen zusammen einen unsubstituierten 5- oder 6-gliedrigen Ring oder einen derartigen Ring, in dem mindestens eines der Kohlenstoffatome mit einem Niederalkylrest mit 1 bis 4· Kohlenstoffatomen oder einem Di-(nieaeralkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen) substituiert ist.

R. bedeutet ein Wasser stoff atom, einen Niederalkylrest -

I ι

R₁. stellt ein Wasserstoff atom, einen Niederalkylrest -(CH_) —/F~))

-⁰¹¹' - (CH₂) _r-0H, -

(CH₂)-

-SH, -(CH₂)_r-S-niedeialkyl,

'" ^(CH2⁾ r"^iIH~^{C 0άβΓ} " ^(CH2^} r"^C~^NH2

r ist eine ganze Zahl im Wert von 1 bis Rg stellt einen Niederalkylrest, eine Benzyl- oder

Phenäthylgruppe der. R₂₀ bedeutet ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest,

eine Benzyl- oder Phenäthylgruppe. R stellt ein Wasserstoffatom, einen Niederalkyl- oder Cycloalkylrest,

-(CH₂J₄-OH, - (CH₂)₂-SH, -(CH₂J₃-SH, oder

-(CH₂J₄-SH dar.

R₁ bedeutet ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest,

__ einen halogensubstituierten Niederalkylrest 25

-(CH₀) 30 - _N

OH I

-.(CH₂) _r-0H, - (CH₂) _r-S-nieaeralkyl -

₂~S-

-(CH₂) ^NH-C

^NH

oder -(CH- J-C-NH

R stellt ein Wasserstoffatom, R-C-, oder

ORRO

-S-(CH₂) -A-C-N-CH-C-X syometrischen Disulfids dai; Bilaung 8xnes

R_ bedeutet einen Niederalkylrest

RgStellt ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest, eine Benzyl- oder Benzhydrylgruppe

V Γ²

-CH-O-C-R₁₈

¹⁷

■ Γ²¹

-C C

, -CH-CH CH_, - (CH,),-N(CH-),

²I!² 223 2

OH OH

dan;

N'

R..- bedeutet ein Wasser stoff atom, einen Niederalkyl-

oder Cycloalkylrest oder eine Phenylgruppe. R₁₀ stellt ein Wasserstoffatom, einen Niederalkyl- oder

Niederalkoxyrest oder eine Phenylgruppe dar, oder R- und R₁₈ bedeuten zusammengenommen

- (CH₂)₂-, - (CH₂)₃-, -CH=CH- oder \ /

R₂₁ und R„₂ stellen unabhängig voneinander Wasserstoff-

atome oder Niederalkylreste dar. R₂ bedeutet einen Niederalkylrest. R₂₄ bedeutet ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest,

_

oder

-o

q hat den Wert O oder 20

Gegenstand der Erfindung sind die vorstehend erläuterten Mercaptocycloalkylcarbonyl- und Mercaptoarylcarbonyldipeptide der Formel I und ihre Salze, diese Stoffe enthaltende Arzneimittel, sowie diese Stoffe zur Verwendung als pharmazeutische Wirkstoffe.

Der Begriff "Niederalkyl", der zur Definition verschiedener Reste verwendet wird, bezieht sich auf unverzweigte oder verzweigte Reste mit bis zu 7 Kohlenstoffatomen. Bevorzugte Niederalkylreste haben bis zu 4- Kohlenstoff atome, wobei die Methyl- und Äthylgruppe am stärksten bevorzugt ist. In gleicher Weise beziehen sich die Begriffe "Niederalkoxy" und "Niederalkylthio" auf solche Niederalkylreste, die an ein Sauerstoff- oder Schwefelatom gebunden sind.

15

Der Begriff "Cycloalkyl" bezieht sich auf gesättigte Ringe mit 3 bis 10 Kohlenstoffatomen, wobei die Cyclopentyl-, Cyclohexyl- und Cycloheptylgruppe am stärksten bevorzugt sind.
20

Der Begriff "Halogenatom" bezieht sich auf Chlor-, Brom- und Fluoratome.

Der Begriff "halogensubstituierter Niederalkylrest" betrifft Niederalkylreste gemäß vorstehender Beschreibung, in denen mindestens ein Wasserstoffatom durch ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom ersetzt ist, wie die bevorzugte Trifluormethylgruppe oder Pentafluoräthyl-, 2,2,2-Trichloräthyl-, Chlormethyl- oder Brommethylgruppen.
30

Die Symbole

bedeuten, daß die Alkylenbrücke an irgend eines der verfügbaren Kohlenstoffatome gebunden ist.

0518817

Die Verbindungen der allgemeinen Formel I, in denen A einen Cycloalkyl- oder substituierten Cycloalkylrest der Formel

-C ι H	- C- I H
I
c - \- H
— c- H

oder

bedeutet, q den Wert 0 hat und R2 ein Wasserstoffatom darstellt, können durch Kopplung einer geschützten Mercaptocycloalkylcarbonsäure der Formel II

prot-S-A-C-ΟΞ

(II)

in der prot eine Schutzgruppe, wie die p-Methoxybenzylgruppe darstellt, mit einem Dipeptidester der Formel III

(III)

HN-CH- C-X

in der R^ in der Definition von X eine abspaltbare Schutzgruppe, wie die t-Butyl-, Trimethylsilyläthyl-, Benzhydryl- oder p-Methoxybenzylgruppe bedeutet, hergestellt werden. Diese Umsetzung wird vorzugsweise in Gegenwart eines Kopplungsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid, oder durch Umwandlung der Säure der Formel II in ihr gemischtes Anhydrid, symmetrisches Anhydrid, Säurehalogenid, aktiven Ester oder durch Verwendung von Woodward-Reagenz K, N-Äthoxycarbonyl-2-äthoxy-1,2-dihydrochinolin durchgeführt. Einen Überblick über derartige Acylierungsverfahren findet man in Methoden

- 52 -

der Organischen Chemie (Houben-Weyl), Bd. XV, Teil II, S. 1 ff. (1974-).

Die erhaltene geschützte Verbindung der !Formel IV

O R R₁ O

prot—S-A-C-N-CH-C-X (IV)

wird mit Trifluoressigsäure und Anisol zur Entfernung der Estergruppe Rg und mit Quecksilver(Il)-trifluoracetat zur Entfernung der p-Methoxybenzyl-schwefelschutzgruppe behandelt, wobei das Mercaptan-Produkt der Formel I erhalten wird, in dem Rq und R^ Wasserstoffatome sind.

Die Verbindungen der Formel I, in denen A einen Cycloalkyl- oder substituierten Cycloalkylrest der vorstehend angegebenen Formel bedeutet, q den Wert C hat und Rp den' Rest 0

Il

R^-C- darstellt, können durch Acylierung der entsprechenden Mercaptane der Formel I mit einem Säurehalogenid der Formel V 0

R₅-C-halo (V)

erhalten werden, in der halo ein Chlor- oder Bromatom bedeutet .

Die Verbindungen der Formel I, in denen A einen Cycloalkyl- oder substituierten Cycloalkylrest der vorstehend angegebenen Formel darstellt, q den Wert 0 hat und R- den Rest 0

Il

R^-C- bedeutet, können ebenfalls durch Kopplung einer Acylmercaptocycloalkylcarbonsäure der Formel VI

O 0

R₃-C-S-A-C-OH (VI)

mit einem Dipeptidester der Formel III gemäß vorsthender

Beschreibung hergestellt werden. Die Behandlung mit Trifluoressigsäure und Anisol entfernt den Esterrest IL- und gibt das Acylmercapto-Produkt der allgemeinen !Formel I, d.h. Verbindungen, in denen R^ ^^en Rest

R,-C- bedeutet und R_r ein Wasserstoffatom ist. 0 ο

Die Verbindungen der Formel I, in denen A einen Cycloalkyl oder substituierten Cycloalkylrest der vorstehend angegebenen Formeln darstellt, q den Wert 0 hat und R£ ein Wasserstoff atom bedeutet, können auch durch Behandlung der entsprechenden Verbindungen der Formel I, in denen Rg den 0

Il

Rest R-z-C- darstellt, mit Ammoniak oder Natriumhydroxid nach der Beschreibung in der US-PS 4 105 776 erhalten werden.

Die geschützten Mercaptocycloalkylcarbonsäuren der Formel II können durch Umsetzung einer Cycloalkylencarbonsäure d.er Formel VII

HC

C—C-OH

(VII)

25 oder der Formel VIII

oder der Formel IX

C-C-OH

(IX)

oder der Formel X

14

(χ)

mit einem Mercaptan der Formel XI

HS-prot erhalten werden.

(XI)

Die Acylmercaptocycloalkylcarbonsäuren der Formel VI können durch Abspaltung der Schutzgruppe der Carbonsäuren der Formel II und anschließende Acylierung mit dem Acylhalogenid der Formel V hergestellt werden. In einer anderen Ausführungsform kann die Cycloalkylencarbonsäure der Formel VII, VIII, IX oder X mit einem Mercaptan der Formel XII

H-S-C-R,

(XII)

umgesetzt werden.

Die Verbindungen der Formel I, in denen A einen Aryl- oder substituierten Arylring der Formeln

14

-C-C-

-C-C-

oder

-c—c-

und Ep ein Wasserstoffatom bedeuten, können wie folgt hergestellt werden. Eine Disulfid-arylcarbon- oder substituierte

- 35 - ■ - ■--■

1 Arylcarbonsäure der Formel XIII

I I

HO-C-A-(CH₂J-S-S-(CH₂) -A-C-OH (XIII)

wird mit dem Dipeptidester der Formel III umgesetzt, wobei das Arylcarbonyl- oder substituierte Arylcarbonyldisulfidester-Produkt der Formel I erhalten wird. Die Entfernung des Esterrestes R,- ergibt das entsprechende Disulfid-Säureprodukt. Diese Kopplungsreaktion wird vorzugsweise in Gegenwart -eines Kopplungsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid oder durch Umwandlung der Säure der Formel XIII in eine aktivierte Form durchgeführt.

Die Arylcarbonyl- oder substituierte Arylcarbonyl-disulfidverbindung wird dann mit Sink in Gegenwart von Salzsäure behandelt, wobei das entsprechende Mercaptan erhalten wird. Acylierung des Mercaptans mit einem Acylhalogenid der Formel V ergibt die Acylmercaptoarylcarbonyl- oder substituier-

20 te Arylcarbonyl-dipeptide der Formel I.

Die Verbindungen der Formel I, in denen q den Wert Λ hat, können durch Umsetzung eines Carbonsäure-cycloalkylcarbonyl- oder Arylcarbonyl-dipeptids der Formel XIV

²⁵ O O R R₁ O

Il Il ι I Ii

HO-C -A -C-N-CH-C-X

mit Boran in Tetrahydrofuran zu dem entsprechenden Alkohol der Formel XV

O R R₁ O

HO-CH₂-A-C-N-CH-C-X

35 hergestellt werden.

Der Alkohol der Formel XV wird mit dem Acylmercaptan der Formel XII in Gegenwart von Diisopropylazodicarboxylat und Triphenylphosphin behandelt, wobei die Produkte der Formel I erhalten werden, in denen Ro den Rest

5 O

II

IU-C- bedeutet und q den Wert 1 hat.

Behandlung dieser Acylmercapto-Produkte mit Natriumhydroxid oder Ammoniak ergibt das entsprechende Mercaptan, in dem Rp ©in Wasserstoffatom bedeutet.

Die Carbonsäure der Formel XIV, in denen A einen Cycloalkyl- oder substituierten Cycloalkylrest bedeutet, werden gemäß DE-OS 33 41 610 hergestellt. Die Carbonsäuren der Formel XIV, in denen A einen Aryl- oder substituierten Arylrest bedeutet, werden nach dem in der US-Patentanmeldung 446 923 beschriebenen Verfahren erhalten. Dazu wird eine Carbonsäure der Formel XVI

²⁰ H₃C-O-C-A-C-OH (XVI)

mit einem Dipeptid der Formel III gekoppelt, wobei eine Verbindung der Formel

O O R R, O

Il 25

erhalten wird.

H₃CO-C-A-C-N-CH-C -X

Behandlung mit Natriumhydroxid ergibt die Carbonsäure der Formel XIV.

Die symmetrischen Disulfide der Formel I, in denen R2 einen

Rest; der Formel

O R R₁ O

³⁵ -S-(CH₂ )_q-A-C- N- CH-C-X

bedeutet, können durch direkte Oxidation der entsprechenden Mercaptane mit Jod gemäß US-PS 4 105 776 erhalten werden.

Die Dipeptide der Formel III sind in der Literatur beschrieben. Sie können durch Umsetzung einer N-geschützten Aminosäure der Formel XVII

¹⁰ Prot-N-CH- C-OH (XVII)

in der die N-Schutzgruppe eine Benzyloxycarbonyl-, tert.-Butoxycarbonyl- oder p-Methoxybenzyloxycarbonylgruppe darstellt, mit einem Imino- oder Aminosäureester der Formel XVIII

H-X (XVIII)

erhalten werden.

Die Entfernung der N-Schutzgruppe ergibt das Zwischenprodukt der Formel III. Wenn die Imino- oder Aminosäure der Formel XVIII in Form der Säure bekannt ist, kann diese leicht in üblicher Weise in einen Ester umgewandelt werden. Beispielsweise können die Ester, in denen Rg die tert.-Buttylgruppe bedeutet, durch Behandlung der entsprechenden N-Carbobenzyloxyimino- oder -aminosäure mit Isobutylen unter sauren Bedingungen und anschließende Entfernung der N-Carbobenzyloxy-Schutzgruppe durch katalytische Hydrierung erhalten werden.

Wenn in den vorstehenden Umsetzungen einer oder alle Reste R, R,, und R₁-

-(CH ) -OH ^oder /

-(CH,) -NH-C

^r \

^

bedeuten, sollten die Hydroxyl-, Amino-, Imidazolyl-, Mercaptan- oder Guanidinylgruppen während der Umsetzung geschützt werden. Geeignete Schutzgruppen sind die Benzyloxycarbonyl-, tert.-Butoxycarbonyl-, Benzyl-, Benzhydryl- oder Tritylgruppen sowie die Nitrogruppe im Fall der Guani-,» dinylgruppe. Die Schutzgruppen werden durch Hydrierung, Behandlung mit einer Säure oder ein anderes bekanntes Verfahren nach Beendigung der Umsetzung abgespalten.

Die Ester-Produkte der Formel I, in denen IL- einen Rest der Formel

O
11
-CH-O-C-R_1fl

R
^X/

bedeutet, können durch Verwendung der Dipeptide der Formel III in den vorstehenden Umsetzungen erhalten werden, wobei sich ein derartiger Ester bereits an seinem Platz befindet. Solche Ester-Umsetzungsteilnehmer können durch Behandlung des Dipeptids der Formel III, in der Rg ein Wasser st off atom darstellt, mit einem Säurechlorid, *d.e

O O

!I Il

-CH₂-O-C-Cl or (H₃C)₃-C-O-C-Cl

zum Schutz des N-Atoms hergestellt werden. Die geschützte

- 39 - -- --■—■

Verbindung wird dann in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel XIX

Il

L-CH-O-C-R₁₈ (XIX)

in der L eine austretende Gruppe, wie ein Chlor- oder Bromatom oder eine Tolylsulfonylgruppe darstellt, umgesetzt werden, wobei dann die N-Schutzgruppe beispielsweise durch Behandlung mit einer Säure oder Hydrierung, abgespaltet wird.

Die Ester-Produkte der Formel I, in denen Rg einen Rest

der Formel

0 Il 15 -CH-O-G-R₁₈

R₁₇

bedeutet, können auch durch Behandlung von Produkten der Formel I, in denen Rg ein Wasserstoffatom bedeutet, mit einem molaren Überschuß an einer Verbindung der Formel XIX erhalten werden.

Die Ester der Formel I, in denen Rg einen Rest der Formel ^R21

^R22

bedeutet, können durch Behandlung der Produkte der Formel I, in denen Rg ein Wasserstoffatom bedeutet, mit einem molaren Überschuß einer Verbindung der Formel XX

^R21 J

1-C-C-O-R₂₃ . _(XX)

^R22

1 erhalten werden.

Die Ester der Formel I, in denen Rg -CH-(CH₂-OH)₂ oder -CH₀-CH-CH₀ bedeutet, können durch Koppeln von Produkten

*- I I I-

5 OH OH

der Formel I, in denen Rg ein Wasserstoffatom darstellt, mit einem molaren Überschuß einer Verbindung der Formel XXI

CH-(CH₂-OPrOt)₂ (XXI) OH

oder der Formel XXII

CH₂ — CH CH₂

OH OProt OProt 15

in Gegenwart eines Kopplungsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid, gefolgt von der Entfernung der Hydroxyl-Schutzgruppen, erhalten werden.

In ähnlicher Weise können die Ester der Formel I, in denen Rg den Rest -(CH₂)₂-N(CH^)₂ oder den Rest

durch Kopplung eines Produktes der Formel I,

in dem Rg ein Wasserstoffatom bedeutet, mit einem molaren Überschuß einer Verbindung der formel XXIII

HO-CH₂-CH₂-N-(CH₅)₂ (XXIII)

oder der Formel XXIV 30 " x^\

HO-(CH₂ )_r—Kj) ^(XZIV) N

in Gegenwart eines Kopplungsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid oder gegebenenfalls in Gegenwart eines Katalysators, wie 4-Dimethylaminopyridin, hergestellt werden.

_ 41 - ' ■■"

Bevorzugte Verbindungen der Erfindung im Hinblick auf den Peptid-Teil der Struktur der Formel I, sind diejenigen,

bei denen:

R ein Wasserstoffatom oder einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen bedeutet;

Ry, ein Wasserstoff atom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, -CF,, , wobei r eine ganze Zahl im Wert von Λ bis 4·

. -CH₂-(O)-OH , -CH,-<0

ist

-(CH₂J₂-S-CH₃, -(CH₂J₃NHC

NH

NH,

, -CH₂-OH,

O · O

il Il

-CH₂-C-NH₂, oder - (CH₂) ₂-^c-

R₂, ein Wasserstoffatom, eine Cyclohexyl- oder Phenylgruppe bedeutet;

R_n- ein Wasserstoff atom, einen verzweigten oder unverzweigten Niederalkylrest mit 1 bis K Kohlenstoffatomen,

-CH

, -CH₂-(Q)-OH , OH

-CH

-CH,

-CH₂-SH, - (CH₂)₂-S-CH₃, -ι

Oder - (CH₂)₂-C-NH₂

darstellt;

R^ ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, ein Alkalimetallsalzion

O O

ti ii

,18 2 23

^R17
-CH-(CH.-OH), ,-CH--CH-CH- , -(CH-) ,-N(CH-) ,/

OH OH

²⁰ oder - ^

bedeutet;

r eine ganze Zahl im Wert von 1 bis 4 ist; R02 einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, insbesondere die Gruppe -C(CH^), darstellt;

R^r₇ ein Wasserstoff atom, einen verzweigten oder unverzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder die Cyclohexylgruppe bedeutet;

R^o einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit Λ bis 4 Kohlenstoffatomen oder die Phenylgruppe bedeutet;

En ein Wasserstoffatom ist; 35 Rr₇ eine Hydroxylgruppe ist;

Rr₇ einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest

mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen oder die Cyclohexylgruppe

bedeutet;

Rr₇ eine Aminogruppe darstellt;
R₁-, einen Rest der Formel -O-Niederalkyl bedeutet, wobei der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und

1 bis 4- Kohlenstoff atome aufweist; Rr, einen Rest der Formel

bedeutet, in der m den V/ert 0, 1 oder 2 hat und R,,-, ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet;

Rr₇ einen Rest der Formel

-O-(CH₂)

^R13

eine 1-Naphthyloxy- oder 2-Naphthyloxygruppe darstellt, wobei m den Wert 0, 1 oder 2 hat und R„-, ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methöxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe darstellt;
Rr₇ einen Rest der Formel -S-Niederalkyl bedeutet, wobei

der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und Λ bis 4 Kohlenstoffatome aufweist; Rr₇ einen Rest der Formel

-S-(CH )

30 ²

eine 1-Naphthylthio- oder 2-Naphthylthiogruppe bedeutet, wobei m den V/ert 0, 1 oder 2 hat und R^ ein Wasserstoff atom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe darstellt;

Ro einen Rest der Formel -O-Niederalkyl bedeutet, wobei der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist;

Ro einen Rest der Formel

-O-(CH.) 2 tu

bedeutet, in der m den Wert O, 1 oder 2 hat und R,,-, ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methyl-

thiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe darstellt;
Rg einen Rest der Formel -S-Niederalkyl bedeutet, wobei

der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und 1 bis 4 Kohlenstoffatome aufweist; Ro einen Rest der Formel

-S-(CH,)

darstellt, in der m den Wert 0, 1 oder 2 hat und R^- ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet;

Rq eine Phenyl-, 2-Hydroxyphenyl- oder 4-Hydroxyphenyl-

gruppe darstellt;

beide Reste R,*_o Fluor- oder Chloratome sind; beide Reste R^₀ Reste der Formel -Y-R^g darstellen, wobei Y ein Sauerstoff- oder Schwefelatom ist und R^g einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen darstellt, oder die Reste R.g zusammen einen unsubstituierten 5- oder 6-gliedrigen Ring oder einen solchen Ring, in dem mindestens eines der zur Verfügung stehenden Kohlenstoffatome einen Methyl- oder Dimethyl-Substituenten aufweist, bilden; alle Reste L,, R'l-p R-ip ^¹¹^- ^'i2 W^assers't'^o;£f^ai^;ome bedeuten

oder R^ eine Phenyl-, 2-Hydroxyphenyl- oder 4~Hydroxyphenylgruppe darstellt und die Reste Κ'-ι-ηι R*ο ^un(^ R¹^o Wasserstoffatome sind;
Ro^i eine Phenylgruppe bedeutet.

Die am stärksten bevorzugten Verbindungen der Erfindung im Hinblick auf den Peptid-Teil der Strukturformel I sind diejenigen, in denen X

CH₂

C-COOR, I (L) ^e

CH-COOR,

oder

Ν—

C-COOR.

(D

COOR,

bedeutet;
R ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe darstellt;

R. ein Wasserstoffatom, eine Methyl- oder Benzylgruppe oder die Gruppe -(CIL,)^-!^ bedeutet;

Rg ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederallcylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen oder ein Alkalimetallsalzion darstellt;

R^. eine Cyclohexyl- oder Phenylgruppe und R,- ein Wasserstoffatom bedeuten;

R^ ein Wasserstoffatom und R,- eine Methylgruppe

-CH₂-CH(CH₃) ₂, -

OH ,

^0Η ' -

OH

darstellt; Rr₇ ein Wasserst off atom, eine Cyclohexylgruppe, einen Niederalkoxyrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen,

13

-O-

^Odei>

bedeutet, wobei m den Wert O, 1 oder 2 hat und R,^ ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet, insbesondere bevorzugt, wenn R₁-, ein Wasserstoffatom ist; t den Wert 2 oder 3, insbesondere den Wert 2 hat.

Bevorzugte Verbindungen der Erfindung im Hinblick auf den Mercaptocycloalkylcarbonyl- oder Mercaptoarylcarbonyl-Teil der Struktur der Formel I sind diejenigen, in denen A

-CH

14

CH- oder

-c — c-

bedeutet;

35T8817

Z einen Cycloalkylring mit 4- bis 7 Kohlenstoffatomen oder einen Cycloalkylring mit 4- bis 7 Kohlenstoffatomen, in dem eines der Kohlenstoffatome durch eine Methyl-, Methoxy-, Methylthio-, Phenyl-, Benzyl- oder Hydroxylgruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom substituiert ist, vervollständigt; insbesondere wenn Z einen Cyclohexylring vervollständigt;

R^k ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet;
Rp ein Wasserstoffatom

O O

-C-CH- oder -c

insbesondere ein Wasserstoffatom bedeutet.

Die Verbindungen der Formel .-I, in denen Rg ein Wasserstoffatom bedeutet, bilden Salze mit einer Vielzahl von anorganischen oder organischen Basen. Die nicht-toxischen, pharmazeutisch verträglichen Salze sind bevorzugt, obwohl auch andere Salze zur Abtrennung und Reinigung der Produkte nützlich sein können. Solche pharmazeutisch verträglichen Salze sind die Alkalimetallsalze, wie die Natrium-, Kalium- oder Lithiumsalze, die Erdalkalimetallsalze, wie Calcium- oder Magnesiumsalze, sowie von Aminosäuren, wie Arginin oder Lysin, abgeleitete Salze. Die Salze werden durch Umsetzung der sauren Form der Verbindung mit einem Äquivalent einer Base, die das gewünschte Ion liefert, in einem Medium erhalten, in dem das Salz ausfällt, oder in wäßrigem Medium und anschließende Lyophilisierung.

Die Verbindungen der Formel I, die eine freie Aminofunktion enthalten, bilden auch Salze mit einer Vielzahl von anorganischen und organischen Säuren. Auch hier sind die nichttoxischen, pharmazeutisch verträglichen Salze bevorzugt,

obwohl auch andere Salze zur Abtrennung und Reinigung der Produkte nützlich sein können. Solche pharmazeutisch verträglichen Salze umfassen diejenigen mit Salzsäure, Methansulf onsäure, Schwefelsäure, Maleinsäure und dergleichen. Die Salze werden durch Umsetzung des Produktes mit einer äauivalenten Menge der Säure in einem Medium erhalten, in dem das Salz ausfällt.

Der Peptid-Teil des Moleküls der formel I, enthält ein asymmetrisches Zentrum, wenn R^ eine andere Bedeutung als Wasserstoff atom hat. Vorzugsweise liegt dieses Zentrum in der L-Konfiguration vor. Wenn A einen Rest der Formel

., ζ

15 /^ N

-CH CH-

bedeutet, entsteht in der Mercaptocycloalkylcarbonyl-Seitenkette eine cis-trans-Isomerie. Die "Verbindungen der Formel 1 können somit in diastereomeren Formen oder als Gemische davon vorliegen. In den vorstehend beschriebenen Verfahren können die Razemate, Enantiomeren oder Diastereomeren als Ausgangsverbindungen eingesetzt werden. Wenn diastereomere Produkte hergestellt werden, können sie durch übliche chromatographische oder fraktionierte Eristalli-

25 sationsverfahren getrennt werden.

Die Verbindungen der Formel I, in denen der Iminosäure-Ring monosubstituiert ist, enthalten ebenfalls eine cis-trans-Isomerie. Die Konfiguration der Endprodukte hängt von der Konfiguration der Substituenten Rr₇, Ro und R₀ im Ausgangsmaterial der Formel XVIII ab.

Die Verbindungen der Formel I und ihre pharmazeutisch verträglichen Salze davon sind blutdrucksenkende Wirkstoffe. Sie inhibieren die Umwandlung des Decapeptids Angiotensin-I in Angiotensin II und sind deshalb wertvoll bei der Vermin-

derung oder Beseitigung der durch Angiotensin verursachten Hypertension. Die Wirkung des Enzyms Renin auf Angiotensinogen, ein Pseudoglobulin im Blutplasma, erzeugt Angiotensin I. Angiotensin I wird durch das Angiotensin-Converting-Enzym (ACE) in Angiotensin II umgewandelt. Letzteres ist ein aktiver druckerzeugender Stoff, der als auslösendes Agens bei einigen Formen von Bluthochdruck bei verschiedenen Säugern, z.B. Menschen, erkannt wurde. Die Verbindungen der Erfindung greifen durch Hemmung des Angiotensin-Converting-Enzyms oder durch Verminderung oder Beseitigung der Bildung des druckerzeugenden Angiotensins II in die Reaktionsfolge Angiotensinogen —$ (Renin) —^ Angiotensin I —^ Angiotensind II ein. Deshalb wird durch Gabe eines Mittels, das eine (oder eine Kombination) von Verbindungen der Erfindung enthält, der von Angiotensin abhängige Bluthochdruck bei Säugern, z.B. beim Menschen, vermindert. Eine Einzeldosis oder vorzugsweise zwei bis vier tägliche Teildosen, die auf der Basis von etwa 0,1 bis 100 mg, vorzugsweise etwa 1 bis 50 mg Körpergewicht/Tag gegeben werden, eignen sich zur Verminderung des Blutdrucks. Der Stoff wird vorzugsweise oral verabreicht, kann jedoch auch parenteral, wie subkutan, intramuskulär, intravenös oder intraperiotoneal gegeben werden. Die Verbindungen der Erfindung können auch in Kombination mit einem Diuretikum zur Behandlung von Bluthochdruck formuliert werden. Ein Kombinationspräparat, das eine Verbindung dieser Erfindung und ein Diuretikum enthält, kann in einer wirksamen Menge verabreicht werden, die eine Gesamt-Tagesdosis von etwa 30 bis 600 mg, vorzugsweise etwa 30 bis 330 mg, einer Verbindung der Erfindung und etwa 15 bis 300 mg, vorzugsweise etwa 15 bis 200 mg, des Diuretikums enthält. Beispiele für Diuretika, die zur Verwendung in Kombination mit einer Verbindung der Erfindung in Betracht kommen, sind Thiazid-Diuretika, wie ChIorthiazid, Hydrochlorthiazid, Flumethiazid, Hydroflumethiazid, Bendroflumethiazid, Methylchlothiazid, Trichlormethiazid, Polythiazid oder Benzthiazid, sowie Äthacrynsäure,

Ticrynafen, Chlorthalidon, Furosemid, Musolimin, Bumetanid, Triamteren, Amilorid und Spironolacton, sowie Salze dieser Verbindungen.

Der Verbindungen der Formel I können zur Verwendung bei der Verminderung des Blutdrucks zu Zusammensetzungen formuliert werden, wie Tabletten, Kapseln oder Elixiere zur oralen Verabreichung, oder in sterilen Lösungen oder Suspensionen zur parenteralen Gabe. Etwa 10 bis 500 mg einer Verbindung der Formel I wird in einem physiologisch verträglichen Vehikel, Träger, Hilfsmittel, Bindemittel, Konservierungsstoff, Stabilisator und/oder Geschmacksstoff in üblicher Weise zu einer Einheitsdosis formuliert. Die Menge an Wirkstoff in diesen Zusammensetzungen oder Präparaten ist derart, daß eine geeignete Dosierung im angegebenen Bereich erreicht wird. Die Verbindungen der Formel I, in denen X einen Rest der Formel -NH-CH-COOR,- bedeutet, besitzen

H₅.
auch Enkephalinase-Inhibitorwirkung und sind wertvolle Analgetika. Durch Verabreichung einer Zusammensetzung mit einem Gehalt an mindestens einer solchen Verbindung der Formel I oder einem pharmazeutisch verträglichen Salz davon können somit beim Menschen Schmerzzustände erleichtert oder beseitigt werden. Eine Einzeldosis, oder vorzugsweise zwei bis vier tägliche Teildosen, bereitet auf .einer Basis von etwa 0,1 bis etwa 100 mg/kg Körpergewicht/Tag, vorzugsweise etwa 1 bis etwa 50 mg/kg/Tag, ergibt die gewünschte analgetische Wirkung. Das Mittel wird vorzugsweise oral verabreicht, kann jedoch auch parenteral, wie subku-

30 tan, gegeben v/erden.

Die Beispiele erläutern die Erfindung. Der Begriff "HP-20" bezeichnet ein neutrales Pplystyrolharz, das im Handel von Mitsubishi erhältlich ist.
35

1 Beispiel 1

Monolithiumsalz von (trans)-1-/N-/C2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin

a) (trans)-2-/7r^zi—Methoxyphenyl)-methyl7-thio7~cyclohexan-

carbonsäure

Eine Lösung von 22,1 g (0,175 Mol) I-Cyclohexencarbonsäure und 30,0 ml (0,175 Mol) p-Methoxy- oC-toluolthiol in 55 ml Piperidin wird 20 Stunden unter Rückfluß gekocht. Die erhaltene Lösung wird abgekühlt, mit konzentrierter Salzsäure abgeschreckt und mit Diäthyläther verdünnt. Das Gemisch wird filtriert und das Filtrat zweimal mit 1N Salzsäure gewaschen. Die Atherschicht wird eingedampft und der Rückstand in Hexan gelöst und zweimal mit 1N Natriumhydroxid extrahiert. Die vereinigten wäßrigen Schichten wird mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und zweimal mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden über Magnesiumsulfat getrocknet und eingedampft. Ausbeute: 44,41 g 2-/7Γ4-- Me t hoxypheny 1) -m ethyl7-thi o7-cyclohexanc arb ons äure als klares öl. Die NMR-Analyse zeigt ein Gemisch von eis/ trans-Isomeren.

Das vorstehende Produkt wird mit dem Material von einem früheren Ansatz (2,7 g) vereinigt und in Diäthyläther gelöst. Diese Lösung wird mit 33,5 ml (0,168 Mol) Dicyclohexylamin versetzt. Die erste Charge Kristalle wird aus Essigsäureäthylester umkristallisiert, wobei 28,9 g Dicyclohexylaminsalz von (trans)-2-/7r4-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexancarbonsäure als weißer Feststoff vom F. 147 bis 150⁰C erhalten werden.

Ein Anteil von 10,5 g (22,8 mMol) dieses Dicyclohexylaminsalzes wird in Essigsäureäth:/lester gelöst und mit 10$ Kaliumbisulfatlösung gewaschen. Die organische Schicht wird getrocknet und eingedampft. Ausbeute: 6,4 g (trans)-2-/714-Methoxyphenyl)-methyl7-thi o7-cyc1ohexanc arb ons äure als kristalliner Feststoff. Die NMR-Analyse zeigt gesamte trans-Stereochemie:

Γ - 52 -

351881"?

1Η <Γ 2,40 (d,d,d; J = 10,10,4 Hz) und 1H £ 2,75 (d,d,d; J = 10, 10, 4 Hz).

b) (trans)-1-/!-/ZZl^-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclo-

hexylcarbony^-L-alany^-L-prolin-i ,1-dimetliyläthylester Ein Gemisch von 2,0 g (7,1 mMol) (trans)^-/Z^-Meth nyl)-methyl7-thio7-cyclohexancarbonsäure, 1,7 g (7,1 L-Alanyl-L-prolin-1,1-dimethyläthylester, 2,5 ml (14,2 mMol) Diisopropyläthylamin, 0,96 g (7,1 mMol) 1-Hydroxybenzotriazolhydrat und 1,47 g (7,1 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid in 50 ml Tetrahydrofuran wird 15 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Gemisch wird filtriert und das Filtrat mit Essigsäureäthylester verdünnt, mit 1N Salzsäure, 10$ Natriumbicarbonatlösung und gesättigte Kochsalzlösung gewaschen,

¹S über Magnesiumsulfat getrocknet und zu einem weißen Schaum eingedampft. Das Rohprodukt wird an LPS-I chromatographiert und mit einem Elutionsgradienten von Hexan:Essigsäureäthylester (2:1 —^1:1) eluiert. Das Produkt (R_f = 0,65) wird ein zweites Mal mit einem Gradienten aus Hexan:Essigsaureäthylester (4:1 —*1:1) chromatographiert. Die die jeweiligen Isomeren enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft. Ausbeute: 0,5 g (trans )-1-/1-/ZZ^-Me thoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alanyl7-L-prolin-1,1-dimethyläthylester (Isomer A, schneilaufend, R~ = 0,68), 0,28 g (trans)-1-/S-/7Zr^/i~Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alanyl7-L-prolin-1,1-dimethyläthylester (Isomer B, langsamlaufend, Rx. = 0,63) und 1,46 g (trans)-1-/N-/7Zt^-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alany17-L-piOlin-i,1-dimethyläthylester (3:2-

³⁰ Gemisch der Isomeren B:A).

c) Monolithiumsalz von (trans )-1 -/!!-/^-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-Ij-alanyl7-L-prolin

Eine Lösung von 0,37 g (0,73 mMol) trans-1-/N-/ZZ^-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alanyl7-L- prolin-1,1-dimethyläthylester (3:2 Gemisch der Isomeren B:A)

L J

r - 53

351881"?

in 10 ml Trifluoressigsäure wird 2,5 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird dann in einem Eisbad gekühlt und 0,233 g (0,73 mMol) Quecksilber(Il)-acetat werden in den Kolben gegeben. Die erhaltene Lösung wird 20 Minuten bei 0 0 gerührt, eingedampft, in Toluol gelöst und zur Trockne eingedampft. Der Rückstand wird in Diäthyläther digeriert und das feste Salz wird gesammelt.

Schwefelwasserstoff wird durch eine Lösung des vorstehend genannten Salzes in 80$ Essigsäure/Wasser fO Minuten geleitet. Das erhaltene Gemisch wird mit Argon gespült und filtriert. Das Filtrat wird eingedampft und durch Kieselgel (SilicAR CC-4) filtriert, wobei 80$ Essigsäureäthylester: Chloroform als Laufmittel verwendet werden. Das liltrat wird eingedampft und mit dem Material eines vorangehenden Ansatzes (0,05 g) vereinigt. Der Rückstand wird mit 0,55 ml 1N Lithiumhydroxid behandelt, mit AG50V/ χ 2 Ionenaustauseherharz (H⁺-5Orm) neutralisiert, filtriert, mit Diäthyläther gewaschen und lyophilisiert. Ausbeute: 0,0⁰A g Monolithiumsalz von (trans)-1-/N-/T2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-

alanyl7-L-prolin vom F. 180 bis 200⁰C (Zers.); /W^⁵ =-68° (c = 1$ in Methanol).

TLC (Kieselgel; Toluol:Essigsäure 4:1), R_f = 0,24. Analyse für C₁₅H₂₅N₂O^SLi -1,75 H₂O

ber.: C 49,25 H 7,30 N 7,66 S 8,76 SH 9,04 gef.: C 49,25 H 7,05 N 7,40 S 8,37 SH 8,86.

Beispiel 2

Monolithiumsalz von (trans)-1-/f-/^2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer A) Eine Lösung von 0,5 g (0,99 mMol) (trans)-1-/S-ZZZr^-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alanyl7-L-prolin-1,1-dimethyläthylester (Isomer A) von Beispiel 1 (b), in 10 ml Trifluoressigsäure wird 40 Minuten bei Raumtemperatur gerührt und dann auf O⁰C abgekühlt. Die kalte Lösung wird mit 0,32 g (0,99 mMol) Quecksilber (Il)-acetat versetzt. Die erhaltene Lösung wird 15 Minuten bei O⁰C gerührt

L j

Γ" _ S4 — ~Ί

und dann eingedampft. Der Rückstand wird mit Diäthyläther digeriert und das Salz abgetrennt.

Schwefelwasserstoff wird 30 Minuten durch eine Lösung des vorstehend genannten Salzes in Essigsäure geleitet. Die erhaltene Lösung wird durch Kieselgel (SilicAR CC-4) filtriert, wobei 80% Sssigsäureäthylester in Chloroform als Laufmittel verwendet wird. Das Filtrat wird eingedampft und mit 1N Lithiumhydroxid behandelt und mit Wasser verdünnt. Die Lösung wird mit AG50W χ 2 Ionenaustauscherharz (H⁺-Form) auf den pH-Wert 6 neutralisiert, filtriert und lyophilisiert. Ausbeute: 0,11 g Monolithiumsalz von (trans)-1-/H-/T2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer A) vom 5¹. 200 bis 206⁰C (Zers.); OOj) = ~5⁴° (^c = 0,8% in Methanol). TLC (Kieselgel/Toluol:Essigsäure 4:1), E_f = 0,24. Analyse für C^₅H₂₅N₂O₄SLi · 1,5 H₂O

ber.: C 49,85 H 7,25 N 7,75 S 8,87 SH 9,15 gef.: C 50,09 H 7,24 N 7,51 S 8,58 SH 9,26.

Beispiel 3

Monolithiumsalz von (trans)-1-/ίΤ-/Τ2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer B) Eine Lösung von 0,54 g (1,07 mMol) (trans)-1-/f-/77Γ4-Μβΐη-oxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-alanyl7-L-prolin-1,1-dimethyläthylester (Isomer B) vom Beispiel 1 (b) in 10 ml Trifluoressigsäure wird bei Raumtemperatur 1,5 Stunden gerührt und dann auf O⁰C abgekühlt.Die kalte Lösung wird mit 0,34 g (1,07 mMol) Quecksilber(II)-acetat versetzt. Die erhaltene Lösung wird 30 Minuten gerührt und dann eingedampft. Der Rückstand wird mit Diäthyläther digeriert

³⁰ und das feste Salz abfiltriert.

Schwefelwasserstoff wird 30 Minuten bei Raumtemperatur durch eine Lösung des vorstehend genannten Salzes in Essigsäure geleitet. Das erhaltene Gemisch wird filtriert und eingedampft. Das Produkt wird an Kieselgel (SilicAR CC-4) unter Verwendung eines 20 bis 100% Essigsäureäthylesters: Chloroform-Gradienten chromatographiert. Die gewünschten

L j

Γ - 55 -

Rf = O,	24.	151	j ;	N2O4	SL:	i	7	♦ 1	,16	H	?°	S	9	,03	SH	9	,31
Analyse	für C,	■ • C	50	,72	H	7	,09	N	7	789	S	8	,91	SH	9	,29.
	ber.:	C	50	,72	H		,05	N	7	,81
	gef.:

Fraktionen werden vereinigt und eingedampft. Der Rückstand wird mit 3 ml 0,1 M Lithiumcarbonat behandelt, mit Wasser verdünnt und mit Diäthyläther gewaschen. Die wäßrige Lösung wird lyophilisiert. Ausbeute: 0,26 g Monolithiumsalz von (trans ) -1 -/!-/^-Mercapt ocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L·- prolin (Isomer B) vom F. 177°C (Zers.); /Ί^ψ = -1W⁰ (c = 1,G# in Methanol). TLC (Kieselgel; Toluol:Essigsäure, 4:1),

Beispiel 4

N-/K-/^2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin

a) 2-/7r^z<~Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexancarbonsäure Eine Lösung von 2,75 S (25 mMol) I-Cyclohexencarbonsäure und 3,62 ml (26 mMol) p-Methoxy-ot-toluolthiol in 6,5 ml Piperidin v/ird mit Stickstoff gespült und 12 Stunden unter Rückfluß erhitzt (Trockenrohr). Das Gemisch wird dann mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 3 angesäuert, in 100 ml Diäthyläther gegossen und durch Celite filtriert. Die Ätherlösung wird mit 0,5 N Salzsäure, Wasser, gesättigte Natriumbicarbonatlösung und zweimal 5prozentige Kaliumhydroxidlösung (je 40 ml) gewaschen. Die basischen Extrakte werden vereinigt, mit 40 ml Diäthyläther gewaschen, mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 1 angesäuert und erneut mit 3 x 30 ml Essigsäureäthylester extrahiert.

Diese organischen Extrakte werden mit Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu 5,52 g hellgelbes Öl eingedampft. Dieses Öl wird auf eine Säule mit 300 g Kieselgel (230 bis 400 /um, E. Merck) aufgebracht und mit 9:1 C^clohexan:Essigsäure eluiert. Die Fraktionen Nr. 33 bis 51 (jeweils 30 ml) werden vereinigt und eingedampft. Ausbeute: 4,63 S 2-/7r4-Methoxyphenyl)-methyl7-

351881?

thio7-cyclohexancarbonsäure als blaßgelbes klares Öl. Das TLC zeigt, daß das Material etwa ein 2:3-Gemisch von cistrans-Isomeren ist.

b) p-Toluolsulfonsäuresalz von L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-

dimethyläthylester

Eine in Sis gekühlte Lösung von 20 g (42,68 mMol) N-/H-/(Phenylmethoxy)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethylätliylester in 325 ml 95% Äthanol wird mit 8,12 g (4-2,7 mMol) p-Toluolsulfonsäure versetzt. Das Reaktionsgefäß wird mit Argon gespült und das Gemisch mit 2,0 g 10$ PalIadium-auf-Kohlenstoff als Katal7sator versetzt. Das Gemisch wird unter einen Druck von etwa 1 bar Wasserstoff gebracht und 20 Stunden gerührt. Abfiltrieren des Katal7sators und Eindampfen des Piltrats ergibt einen klebrigen weißen Feststoff, der mit Diäthyläther digeriert und im Vakuum getrocknet wird. Ausbeute: 18,75 g p-Toluolsulfonsäuresalz von L-Phenylalan7l-L-Leucin-1,1-dimethyläthylester vom P. 157 bis 159,5°C (Erweichung bei 145⁰C).

c ) N-,/fi-/77r4-Methoxyph.enyl) -11^11717^11107-0701 ohex7lcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethylathylester Eine Lösung von 1,03 g (5 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid in 10 ml Tetrahydrofuran wird tropfenweise innerhalb von 10 Minuten zu einer eisgekühlten Lösung von 2,53 g (5,0 mMol) p-Toluolsulfonsäuresalz von L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylester, 1,40 g (5,0 mMol) 2-ZZÖ--Methoxyphenyl)-methy^-thioZ-cyclohexancarbonsäure von Teil (a), 0,68 g (5 mMol) 1-Hydroxybenzotriazolhydrat und 1,74 ml (10 mMol) Diisopropyläthylamin in 30 ml Tetrahydrofuran unter Stickstoff als Schutsgas gegeben. Das Gemisch wird über Nacht gerührt, auf Raumtemperatur erwärmt und dann mit 30 ml Diäthyläther verdünnt. Der Dicyclohexylharnstoff wird abfiltriert und der Rückstand unter vermindertem Druck eingedampft. Der ölige Rückstand wird in 100 ml Essigsäureäth7/1-ester aufgenommen, zweimal mit 10$ Kaliumbisulfatlösung,

r - 57 -

gesättigte Kochsalzlösung und 50prozentige Kochsalzlösung (jeweils 30 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem weißlichen Schaum eingedampft. Die chromatographische Reinigung an 180 g Kieselgel (230 bis 400 um, E. Merck) ergibt bei der Eluierung mit 7:2 = Hexan:Acetonitril einen weißen Schaum, der aus Hexan umkristallisiert wird. Ausbeute: 2,22 g N-/N-/77r^-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7~L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester als weißer Feststoff vom F. 69,5 bis 87⁰C.

d) N-/N-/^2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-

L-leucin
6 ml auf O⁰C abgekühlte Trifluoressigsäure mit einem Gehalt von 0,76 ml Anisol wird in einer Menge zu 1,79 g (3,0 mMol) N-/!i-/77r4-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester von Teil (c) gegeben. Das Gemisch wird gerührt bis das gesamte Material in Lösung ist und dann mit 2,12 ml (8 Äquiv.) auf 5°C abgekühlte Trifluormethansulfonsäure versetzt. Die tiefrote Lösung wird 1 Stunde in der Kälte gerührt, dann mit 10 ml Toluol versetzt und die Trifluoressigsäure unter vermindertem Druck entfernt. Der Rückstand wird mit 40 ml Toluol verdünnt und vorsichtig in 60 ml Eiswasser gegossen. Das Gemisch wird geschüttelt und der erhaltene Niederschlag abfiltriert. Die organische Schicht wird abgetrennt, mit weiteren 4-0 ml Wasser geschüttelt und erneut filtriert. Die vereinigten Feststoffe werden über Nacht über Phosphorpentoxid getrocknet, wobei ein hellrotes Pulver erhalten wird, das aus Sssigsäureäthylester/Hexan umkristallisiert wird. Ausbeute: 0,77 g N-/N-/^2-Mercaptocyclohexyl) -carbony^-L-phenylalany^-L-leucin als weißer Feststoff vom F. 168 bis 176⁰C. TLC (Kieselgel, Benzol!Essigsäure 9:1) R_f = 0,50, 0,54.

Analyse für C₂₂H-2^N2⁰4^S:

ber.:C 62,95 H 7,67 N 6,66 3 7,62 SH 10C# KSf. :C '62,53 H 7,65 N 6,59 3 7,4-9 SH

L J

|— _ CD _ ,

1 Beispiel 5

N-/N-/^2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Paar A)

a) 2-/7rMethoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclopentancarbonsaure Eine Lösung von 1,68 g (15 mMol) I-Cyclopentencarbonsäure und 2,17 ml (15,6 mMol) p-Methoxy- et -toluolthiol in 3,9 ml Piperidin wird mit Argon gespült und 12 Stunden,geschützt mit einem Trockenrohr, unter Rückfluß erhitzt. Das Gemisch wird dann zwischen 100 ml Diäthyläther und 3 χ 40 ml 1 N Salzsäure verteilt. Die organische Phase wird mit etwa 0,5 g Aktivkohle gerührt, über Magnesiumsulfat getrocknet und durch Celite filtriert und unter vermindertem Druck zu einem orangegelben öl eingedampft. Das Öl wird nacheinander dreimal aus Cyclohexan/Hexan umkristallisiert. Ausbeute: 1,75 g 2-/7Γ4--Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclopentancarbonsäure als gelbbrauner körner Feststoff vom F. 63 bis 66⁰C. TLC (Kieselgel, Cyclohexan:Essigsäure, 8:1) R^ = 0,23.

b) L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylester-hydro-

chlorid

Eine Lösung von 93,72 g (200,0 mMol) N-/N"-/tPhenylmethoxy)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester in 1,5 1 95$ Äthanol wird unter atmosphärischem Wasserstoffdruck mit 6,0 g 10$ Palladium-auf-Kohle als Katalysator hydriert. Nach etwa 15 Stunden Rühren wird das Gemisch durch Celite filtriert, auf etwa 1/2 Volumen eingeengt, erneut filtriert und dann zu einem viskosen gelben Öl eingedampft. Dieses Öl wird in 1,2 Liter Hexan aufgenommen und unter starkern Rühren mit 200 ml 1N Salzsäure in Diäthyläther behandelt. Die erhaltene dicke, weiße Suspension wird mit 1 Liter Hexan verdünnt, filtriert und mit weiterem Hexan gewaschen. Über Nacht Trocknen unter vermindertem Druck über Phosphorpentoxid ergibt 71,80 g L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylester-hydrochlorid als weißer Feststoff vom F. 152,5 bis 154⁰C mit Blasenbildung.

L J

Γ - 59 -

c) N-/N-/77r^~Methoxyphenyl)-methyl7-th.io7-cyclopentylcarbo-

nyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester Eine Lösung von 1,13 g (5,48 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid in 10 ml Tetrahydrofuran wird tropfenweise innerhalb von 10 Minuten zu einer in Eis/Methanol gekühlten Lösung von 2,04- g (5,0 mMol) L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylesterhydrochlorid, 1,4-6 g (5,4-8 mMol) 2-/7I>-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclopentancarbonsäure, 0,74- g (5,5 mMol) Hydroxybenzotriazol und 1,4-0 ml (8,04- mMol) Diisopropyläthylamin in 30 ml Tetrahydrofuran gegeben. Nach etwa 15 Stunden Rühren unter Erwärmen auf Raumtemperatur wird das Gemisch durch Celite filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in 60 ml Essigsäureäthylester aufgenommen, mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung, 50$ Kochsalzlösung, zweimal 10$ Kaliumbisulfatlösung und Kochsalzlösung (jeweils 30 ml) gewaschen, dann über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 3,13 g hellbrauner !Feststoff erhalten werden. Eine Menge von 2,59 g dieses Feststoffs wird an einer Säule mit 150 g Kieselgel (230 bis 4-00 ,um,

E. Merck) chromatographiert und mit Hexan : Aceton * 7:2 eluiert. Die das Hauptprodukt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und eingedampft. Ausbeute: 2,14- g Ν-/Κ"-/77Γ4--Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclopentylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester als weißer Feststoff vom F. 126 bis 129,5°C

d) N-/I-/^2-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-

L-leucin (Paar A)
1,77 ml (20 mMol) Trifluormethansulfonsäure werden in einer Menge zu einer in Eis gekühlten Lösung von 1,4-6 g (2,51 mMol) Ν-/Η-/77Γ4-- Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclopentylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester in 5 ml vorher abgekühlte Trifluoressigsäure und 0,65 ml Anisol gegeben. Die dunkelrote Lösung wird 4-5 Minuten in der Kälte gerührt, dann mit 60 ml Toluol verdünnt und im Vakuum zur Entfernung der Trifluoressigsäure eingedampft. Der Rückstand

wird in 100 g Eis und V/asser gegossen und der feste Niederschlag abfiltriert, wobei nach dem Trocknen über Calciumsulfat 1,1g weißer Feststoff erhalten werden. Umkristallisation des Feststoffs aus Benzol/Hexan ergibt 0,682 g roter flockiger -Feststoff, der zwei TLC-Flecke (10$ Essigsäure/Toluol) zeigt. Chromatographie dieses Feststoffs an einer Säule mit 65 g Kieselgel (230 bis 400 um, E. Merck) und Eluieren mit 10% Toluol/Essigsäure ergibt 0,38? g eines Gemisches der Bestandteile und 87 mg der langsamer wandernden Komponente.

Eine Menge von 0,19 g des Mischproduktes wirdM,25 ml Methanol aufgenommen und unter Argon mit 1,5 ml 1N Natronlauge behandelt. Das Gemisch wird 3 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, dann mit 30 ml Wasser verdünnt, mit 20 ml Diäthyläther gewaschen und die wäßrige Schicht mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 1,5 angesäuert. Der erhaltene Niederschlag wird mit 3 χ 15 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die Extrakte werden mit Wasser und Kochsalzlösung (jeweils 15 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 0,14 g hellbrauner Feststoff erhalten werden. Umkristallisation aus Essigsäureäthylester ergibt 119 mg N-ZH-A^-Mercaptocyclopentyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Paar A) als weißer kristalliner Feststoff vom F. 169,5 bis 172,5°C.

TLC (Kieselgel, Benzol-.Essigsäure = 10:1) R_f = 0,24 (mit einem sehr blassen Schwanz).
Analyse für Cp^H,qN20¹^S:

ber.: C 62,04 H 7,44 N 6,89 S 7,89 SH 100%

gef.: C 61,81 H 7,52 N 6,89 S 7,71 SH 100%. 30

Beispiel 6

(trans ) -N-/N-/C2-Mercapt ocyclohexyl) -carbonyl-7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Isomer A)

a) (trans)-N-/N-/77r^zi~Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-I'--leucin-1,1 -dimethylathylester (isomere A,B)

-'35ΊΊ

Eine Lösung von 3,82 g (10,3 mMol) L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethylathylester-hydrochlorid in 75 ml Tetrahydrofuran wird bei 0 bis 5°C unter Stickstoff und unter Rühren mit 2,15 ml (12,36 mMol) Diisopropyläthylamin, 2,89 g (10,3 iaMol) (trans)-2-/7Γ4-Μβthoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexancarbonsäure von Beispiel 1 (a) und 1,39 g (10,3 mMol) Hydroxybenzotriazolhydrat versetzt. Dann wird eine Lösung von 2,13 g (10,3 mMol) Dicyclohexylcarbodiimid in 20 ml Tetrahydrofuran tropfenweise innerhalb von 10 Minuten zugegeben. Das Eisbad wird entfernt und das Reaktionsgemisch über Nacht gerührt. Das Gemisch wird mit 60 ml Diäthyläther verdünnt und der Dicyclohexylhamstoff wird abfiltriert. Das Ifiltrat wird eingedampft und der ölige gelbe Rückstand in 200 ml Essigsäureäthylester aufgenommen. Diese Lösung wird dann nacheinander mit 10$ Kaliumbisulfatlösung, Wasser, 5$ Natriumbicarbonatlösung, Wasser und Kochsalzlösung (je 5 x 60 ml) gewaschen, dann über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 6,0 g hellgelber Schaum erhalten werden. Dieses Material wird auf eine Säule mit 400 g Kieselgel (230 bis 400 pn, E.Merck) aufgebracht und mit einem stufenweisen Gradienten von Hexan/ Essigsäureäthylester (2:1 —j> 1:1) eluiert. Die einzelnen Mengen des Materials werden aus dieser Säule gewonnen, wobei jede mit einem der zwei Isomeren angereichert ist.

Jede Menge wird durch Kieselgel-Chromatographie (jeweils zweimal) weiter gereinigt. Bei einer typischen Trennung werden etwa 2,5 g Material auf eine Säule mit 175 S Kieselgel (230 bis 400 um, E. Merck) aufgebracht und mit Toluol/ Aceton =15:1 eluiert. Die gleiche Säule wird zur Trennung der übrigen Anteile des Materials verwendet. Die Cesamtausbeute an Produkt beträgt 4,25 S in folgenden Mengen: 1,95 g (trans)-N-/N-/7ZT4-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethylirbhylester (Isomer A) als weißer Feststoff vom F. 114 bis 115°C; TLC (Kieselgcl, Toluol:Aceton = 8:1) B_f = 0,29; 1,11 g (trans)-N-/N-/77r4-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-

~⁶²~ 351881?

cyclohexylcarbonylZ-L-phenylalanyly'-L-leucin-i,1-dimethyläthylester (Isomer B) als weißer Feststoff vom F. 68 bis 70⁰C; TIC (Kieselgel, Toluol:Aceton = 8:1) R_f = 0,26; und 1,19 g eines 2:1 Gemisches der Isomeren B:A. 5

b) (trans)-N-/N-/C2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenyl-

alanyl7-L-leucin (Isomer A)

Eine Lösung von 1,94 g (5,25 mMol) (trans)-N-/f-/77I>-Methoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-phenylalanyl7- L-leucin-1,1-dimethyläthylester (Isomer A) in 50 ml Trifluoressigsäure wird 4-5 Minuten bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird dann in einem Eisbad abgekühlt und 1,04 g (3?25 mMol) Quecksilber(II)-acetat werden in einer Menge in den Kolben eingebracht. Die erhaltene tief violette Lösung wird 20 Minuten bei O⁰C gerührt und dann unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in Toluol gelöst und unter vermindertem Druck eingedampft (zweimal), dann mit Diäthyläther digeriert, wobei ein hellbraunes festes Salz erhalten wird. Dieser Peststoff wird in 50 ml 80$ Essigsäure/Wasser gelöst und 20 Minuten unter Einleiten von Schwefelwasserstoff gerührt. Das erhaltene schwarze Gemisch wird mit Argon gespült und durch Celite filtriert.

Das Filtrat wird erneut durch ein Teflon-Mikrofilter filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 1,60 g gelbbrauner Feststoff erhalten werden. Dieses Material wird unter Erhitzen in einem kleinen Volumen Toluol/ Essigsäure (9:1) gelöst und auf eine Säule mit 105 g Kieselgel (230 bis 400 /um, E. Merck) aufgebracht, die in Toluol gepackt ist und mit Toluol/Essigsäure (9:1) eluiert, wobei ein farbloses Öl erhalten wird. Dieses Öl wird in Methanol gelöst und durch ein Cellulose-Mikrofilter filtriert. Ausbeute: 1,27 g (trans)-N-/N-/r2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Isomer A) als weißer Feststoff vom F. 180 bis 183°C (sintert oberhalb 85⁰C); /*λ7ί;⁵ = -41,8° (c = 1,10, Methanol). TLC (Kieselgel, BenzoltEssigsäure = 4:1) R_f = 0,47.

Γ - 63 -

351*881"?

Analyse für C^H-^HgO^S · 0,59 H₂O:

ber.: C 61,29 H 7,76 N 6,50 S 7,44 SH 7,67 gef.: C 61,29 H 7,51 N 6,19 S 7,39 SH 7,66.

Beispiel7

(trans)-N-ZR-Z^-Mercaptocyclohexyl)-carbonyly'-L-phenyl-

alanyl7-L-leucin (Isomer B)

Eine Lösung von 1,10 g (1,84 nKol) (trans)-Ν-/Ι-/77Γ4-Μβthoxyphenyl)-methyl7-thio7-cyclohexylcarbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester (Isomer B) von Beispiel 6 (a) in 30 ml Trifluoressigsäure wird 2 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Die Lösung wird dann in einem Eisbad gekühlt und 0,59 g (1,84 mMol) Qeucksilber(II)-acetat werden in einer Menge in den Kolben eingebracht. Die erhaltene tiefviolette Lösung wird 20 Minuten bei 0⁰C gerührt und dann unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in Toluol gelöst und unter vermindertem Druck eingedampft (zweimal), dann mit Diäthyläther digeriert, wobei ein hellbraunes festes Salz erhalten wird. Dieser Feststoff wird in 30 ml 80% Essigsäure^vasser gelöst und gerührt, wobei 20 Minuten Schwefelwasserstoff eingeleitet wird. Das erhaltene schwarze Gemisch wird mit Argon gespült und durch Celite filtriert. Das Filtrat wird dann erneut durch ein Teflon-Mikrofilter filtriert und unter vermindertem Druck eingedampft. Der Rückstand wird in Essigsäureäthylester gelöst und die Lösung unter vermindertem Druck eingedampft, wobei 740 mg weißer Feststoff erhalten werden. Dieser Feststoff wird aus Essigsäureäthylester/Hexan umkristallisiert, wobei 349 mg (trans)-N-/N-/('2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Isomer B) vom F. 204 bis 206⁰C erhalten werden; F^J²Q = -8,0° (c = 0,87, Methanol). TLC (ICieselgel, Benzol !Essigsäure = 4:1) R_f = 0,40. Analyse für C^H^N-O^S -0,21 HgO:

ber.: C 62,27 H 7,70 N 6,60 S 7,56 SH 7,79 gef.: C 62,27 H 7,57 N 6,72 S 7,53 SH 7,83.

L J

Γ - 64- -

Beispieles bis 54-.

Nach den Verfahren der Beispiele 1 bis 7 werden die in nachstehender Spalte I aufgeführten Carbonsäuren mit den in nachstehender Spalte II genannten Thiolen zu den in Spalte III angegebenen Zwischenprodukten umgesetzt. Die Kopplung mit dem in Spalte IV gezeigten Dipeptid ergibt die Produkte von Spalte V. Die Entfernung des Esterrestes Rg und der S-Schutzgruppe ergibt das entsprechende Mercaptan.
10

L J

Spalte!

HC .== CH-C-OH

oder

HC

-C-C-OH

II ·■'

oder

HC

•C—C — OH

oder

HC=-C—C —

- 66 -

Spalte II

HS CH

OCH.

Spalte HI

Spalte IV

R R₁ O I¹ Il HN-CH-C-X

Spalte V

O R R₁ O

H₂C-S-A-C-N-CH-C —Χ

ro in

Ul

Beispiel

-C

CH,

I'

C-

—Η

-H

^Rl -CH,

(L)

COOC(CH₃)

COOC(CH )

-H

-c	C-
ι	I
H	H

-N f-T^COOC (CH₃)

(L)

-C

-CH, -H

-N p

COOC(CH ) (L)

GvJ! '

cn

OC," QO₁"

cn

Ul

υι

Beispiel

R R,

12

-C

-H -CH,

ΟΙ H OCH.

(L)

13

-H -CH,

C-

H H

S-CH,

-N I-COOC (CH, )

(L) H

14

-H -CH.

-C — C-I

H H

^

-N L-COOC(CH )

(L) ^J

GO-GO

Ui

IO

Beispiel

H₃CO

-C
I
H

I H

Cl

-C	I
I	H
H

-H -CH.

-CH₃ -H

18

CF.

I H

I H

-C —C-H H

-H -H

-H -CH,,

O-CH

-COOC(CH ) (L) ³

-N i— COOC (CH₃)

cooq (CH₃

-N J

COOC(CH )

IO

in

to

H¹ Ul

Ul

Beispiel A

19

-C— C-I

H H

-CH.

(L)

COOC(CH₃)

20

21

22

-CH,

-CH,

-CH,

COOC(CH₃J₃

(L) NH-CH-COOC(CH,),

^{3 3}

-N UCOOC(CH )

(L) ^J

LO

KJ

Ln

Beispiel ^A

H₃CO

-c — c-

I I

H H

-C C-

I t

H H

-H

-H -CH

-NH-CH₂-COOC(CH

(L)

-NH-CH-COOC(CH,)_ I ^{3 3}

CH -CH(CH )

-C C-

I I

H H

-H -CH,

Beispiel ^A

26

-C- σι I H H

-CH.

-N \— COOC(CH )

(L) ³

27

-C- C-I I

H H

-H

-CH.

-N 1- COOC(CH )

I (L) ³

Ul O

Ut

Η· U)

Ul

Eeispiel

28

-c — σι ι

H H

-H -CH,

COOC(CH ) (L)

29

-C t H

-H -CH.

C-

-N —j—COOC(CH )

30

-c

CH,

I ' C-I H

-H -CH.

-N-

-f— COOC(CH₃J₃

KJ

cn

Cn

Beispiel

31

-C—C-I I H H

-H -CH,

"X)

-N ' 1— COOC(CH₃)

32

OCH.

-C C-

I I H H

33

H₃C

-C
I
H

C-

-H -CH.

-H -CH.

-N j—COOC (CH )

-N

COOC(CH )
3 3

Ui

tu

Ul

Ul

Ul

Beispiel a

-C C-

i I

H H

-H -CH,

CH.

COOC(CH₃J₃

-C C-

I I H H

-H

-NH-C

.NH

NH-NO,

-N- J—COOC (CH₃)

-C

5\ -H C-

₄NHCOCH₂

KÖ)

(L)

COOC(CH )

Ul

υι

Beispiel

37

-C	C
I	I
H	H

(CH₂)

0 Il ₂NHCOC(CH₃)

-N 1 COOC(CH )

l(L) ^{3 3}

38

CH

C-H

J— COOC(CH )

(D H

39

I I

H H

-CH

OCH

(L)

COOCH ((("~")

Ui

ro cn

Beispiel ^A

-c ι

ΟΙ H

-H -CH,

-C C-

I I

H H

-H

-C ΟΙ I H H

-H -CH;

I H

-N

-COOC(CH,) (L)

3 3

-N 1—COOCH

UJ

IO

in

Ul

Beispiel

—Ρ ρ

I I

H H

-CH₃ -H

-N-CH -COOC(CH )

IO

-C-

C-

-H -CH

(L)

-NH-CH — COOC (CHJ ι 3 3

CH,

N I H

mo

-C C-

I I

H H

-H -CH.

(L) -NH-CH — COOC(CH )

^{3 3}

CH

ro in

to

U»

ui

Beispiel

46

C I H

C-I H

-H -CH

(L) -NH-CH —COOC(CH₃)

47

1 H

-H -CH.

(L) -NH-CH COOC (CH₃)

CH,

T)

^CH-<O

48

-C C-

I

H H

-CH

-N L- COOC (CH )

(L) H

to in

H O

Ul

Beispiel

49

OCH.

C-	- C-
I	\
H	H

Il

-(CH₂J₄-NH-COC(CH)₃ -H

COOC(CH,)
(D ³

50

H ft _ammmmmm /ItI _*-

-C C-

I I

H H

(L) -NH-CH — COOC(CH

,) 3

^CH~-(CX

-C C-

I I

H H

-H

-N ^-COOC (CH,).

(L) H

Ul

Ul

Beispiel ^A

I I H H

-H -CH.,

-N 1 COOC(CH )

(L) ³

53

-C·

C-

-H -CH,

COOC(CH )

• (L) H

Ul

Beispiel a

-C C-

I I

H H

-H -CH.

-N

(L)

COOC H

Γ - 83

35188Ί 7¹

Die Schutzgruppe R^ in den Beispielen 35 bis 40, die Schutzgruppe R in Beispiel 45 und die Schutzgruppen R,- in den Beispielen 46 und 47 werden als letzte Stufe der Synthese abgespaltet. Das 4-Azidoprolin von Beispiel 41 ergibt bei der Behandlung mit einem Reduktionsmittel ein 4-Aminoprolin.

Beispiel 55 N-/N-(2-Mercaptobenzoyl)-L-phenylalanyl7-L-leucin

a) N,N^!-(2,2'-Dithiobisbenzoyl)-bis-/i;-phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylester7

Eine mit Argon gespülte Lösung von 3,55 g (7,0 mMol) L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylester-p-toluolsulfonsäuresalz, hergestellt gemäß Beispiel 4 (b), 0,95 g (7,0 mMol) 1-Hydroxybenzotriazolhydrat, 1,44 g (7,0 mMol) Dicyclohexyicarbodiimid und 1,83 ml (10,5 mMol) Diisopropyläthylamin in 25 ml Dimethylformamid wird unter einem Trockenrohr auf -5⁰C (Eis/Methanol) abgekühlt. Dann wird eine Lösung von 1,07 g (3,50 mMol) 2,2'-Dithiobisbenzoesäure in 5 ml Dimethylformamid tropfenweise zugegeben, gefolgt von 0,61 ml (5,5 mMol) Diisopropyläthylamin, das in einer Menge zugegeben v/ird. Das Gemisch wird 90 Minuten in der Kälte gerührt, dann wird das Eisbad entfernt und weitere 24 Stunden gerührt. Die erhaltene Suspension wird mit 50 ml Essigsäureäthylester versetzt, danach von dem Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und unter vermindertem Druck zu einem braunen gummiartigen Feststoff eingedampft. Dieser Rückstand wird in 60 ml Essigsäureäthylester aufgenommen und mit Wasser, gesättigter Natriumbicarbonatlösung, Wasser, 10$ Kaliumbisulfatlösung und Kochsalzlösung (jeweils 30 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem hellbraunen Schaum eingedampft. Chromatographie an 200 g Kieselgel (0,037 his 0,63 pm, E. Merck) und Eluieren mit Hexan : Aceton = 5:2 ergibt 1,82 g N,N'-(2,2'-Dithiobisbensoyl)-bis-/L-phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthyl- ester7 als weißen Feststoff vom F. 181 bis 184⁰C.

L j

^Γ -⁸⁴- 351861T

b) N,N'-(2,2'-Dithiobisbenzoyl)-bis-/L'-phenylalanyl-L-

Ieucin7

1,67 g (1,78 mMol) N,N'-(2,2^f-Dithiobisbenzoyl)-bis-/L-phenylalanyl-L-leucin-1,i-dimethyläthylestery⁷ werden unter Stickstoff als Schutzgas mit 17,8 nil etv/a 2N Salzsäure/Essigsäure behandelt. Die erhaltene Lösung wird 2 Stunden bei Raumtemperatur und einem Trockenrohr gerührt und dann unter vermindertem Druck eingedampft. 30 ml Toluol werden zu dem öligen gelben Rückstand gegeben, der erneut eingedampft und dann mit 50 ml Diäthyläther und 100 ml Hexan behandelt wird. Nach etwa 15 Stunden Stehen in der Kälte (Kühlschrank) wird der erhaltene gelbe Niederschlag abfiltriert, zweimal mit Hexan digeriert und unter vermindertem Druck getrocknet. Ausbeute: 1,25 g N,N'-(2,2'-Dithiobisbenzoyl)-bis-/L*-phenyl-

15 alanyl-L-leucin7 als hellgelber Feststoff vom E¹. 233

c) N-/fi-(2-Mercaptobenzoyl)-L-phenylalanyl7-L-leucin

Eine methanolische Lösung von 0,62 g (0,75 mMol) N,N'-(2,2'-Dithiobisbenzoyl)-bis-/E-phenylalanyl-L-leucin7 in 40 ml Methanol wird im Eisbad abgekühlt und mit 6,43 ml konzentrierte wäßrige Salzsäure und anschließend innerhalb von 30 Minuten mit 4 Anteilen von insgesamt 3,69 g Zinkstaub versetzt. Der Rückstand wird in 150 ml 1N Salzsäure gegossen und der erhaltene weiße Niederschlag mit 3 χ 25 ml Chloroform extrahiert. Die organischen Extrakte werden vereinigt, mit 50 ml Wasser gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu 0,62 g leicht gummiartigem Rückstand eingedampft. Umkristallisation aus 300 ml Benzol ergibt 0,40 g N-/N-(2-Mercaptobenzoyl)-L-phenylalanyl7-L-leucin vom Έ. 127 bis 129⁰C (Schrumpfung bei 117°C); /JzJ^ = -16,3° (c = 1,0 in Methanol). TLC (Kieselgel, Benzol : Essigsäure = 8:1) R_f = 0,28.

Λύί ο 1 -rrc?ο "Pitt* Cl _{A Λ}ΤΤ_Α TT_ΛΟ Fi ·

ber.: C 63,75 H 6,32 N 6,76 S 7,74 SH 100$ gef.: C 63,66 H 6,26 N 6,63 S 7,88 SH 102$.

L J

30 35

Beispiele 56 bis 64-Nach dem Verfahren von Beispiel 55 wird bei Verwendung der in nachstehender Spalte I aufgeführten Dithiobisbenzoesäure das Produkt gemäß nachstehender Spalte II erhalten.

Spalte I

HO₂C-A-S-S-A-CO₂H 10

Spalte Ii.

15

O O

l| (L) || (L) HS-A-C-NH-CH -C-NH-CH -COOH

CH₂"^CH(^CH3)2 20

Beispiel

56

-C Ο

57

58

25

-C — C-

-C C-

Beispiel

60

H₃CO

-C— Ο

ΙΟ 15

Cl

-C — C-

20

30

62

63

64 F₃C

C_ Η —

.SCH,

-C — C-

-C — C-

35

In den Verfahren der Beispiele 55 bis 64 können auch die Dipeptide der Beispiele 1 und 8 bis 54 eingesetzt werden, wobei v/eitere Produkte der Erfindung erhalten werden.

5 Beispiel 65

(trans)-H-/N-/72-(Mercaptomethyl)-eye1ohexyl7-carbony±7-

L-phenylalanyl7-L-leucin

a) (trans)-1,2-Cyclohexandicarbonsäure-mono(methyl)ester Eine Suspension von 38,54 g (250,0 mMol) (trans)-Cyclohexan-1,2-dicarbonsäureanhydrid in 55 ml Methanol wird 2 Stunden unter Stickstoff als Schutzgas unter Rückfluß erhitzt. Das Gemisch wird abgekühlt und unter vermindertem Druck eingedampft. Nach dem Trocknen über Phosphorpentoxid werden 46,12 g (trans)-1,2-Cyclohexandicarbonsäure-monomethylester erhalten.

b) (trans)-N-/H-/2-/TMethoxycarbonyl)-cyclohexyl7-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1, 1 -dimethyläthylester Eine Lösung von 3,09 g (15 mMol). Dicyclohexylcarbodiimid in 30 ml Tetrahydrofuran wird tropfenweise innerhalb von 15 Minuten zu einer in Eis/Methanol gekühlten Lösung von 5,58 g (15,0 mMol) L-Phenylalanyl-L-leucin-1,1-dimethyläthylest er-hydrochlorid, hergestellt gemäß Beispiel 5 (b), 2,73 g (15,0 mMol) (trans)-1 ^-Cyclohexandicarbonsäuremonomethylester, 2,04 g (15,0 mMol) Hydroxybenzotriazolhydrat und 3,93 ml (22,6 mMol) Diisopropyläthylamin in 80 ml Tetrahydrofuran gegeben. Das Gemisch wird etwa 15 Stunden unter Stickstoff gerührt, auf Raumtemperatur erwärmt, dann durch Celite vom Dicyclohexylharnstoff abfiltriert und unter vermindertem Druck eingedampft. Der gummiartige Rückstand wird in 80ml Essigsäureäthylester aufgenommen und zweimal mit 10$ Kaliumbisulfatlösung, 50$ Kochsalzlösung, gesättigte Natriumbicarbonatlösung, 50$ Kochsalzlösung und mit Kochsalzlösung (jeweils 50 ml) gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und zu 6,96 g gelber Schaum

L J

Γ - 89 -

35186Τ7¹

eingedampft. Umkristallisation aus Hexan ergibt 5,59 g (trans)-E-/ß-/2-/( Methoxycarbonyl)-eyeIohexyl7-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester als fast weißer Feststoff.

e) (trans)-I-/I-/f2-Carboxycyclohexyl)-carbonyl7-L-plienylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester

Eine Lösung von 5,50 g (10,9 niMol) (trans)-N~^N"-/2-/^Methoxy c arb ony 1) - eye 1 ohexyl7-c arb onyl7-L-phenyl al anyl7-L-1 euc in-1,1-dimethyläthylester in 11 ml Methanol wird unter Argon als Schutzgas 1 Stunde lang mit 12 ml 1N Natronlauge behandelt. Dann wird weiteres Methanol zugegeben, um das Material in Lösung zu halten und das Gemisch weitere 4 Stunden bei Raumtemperatur gerührt. Das Methanol wird unter vermindertern DruckVbdestilliert und der Rückstand mit 100 ml Wasser verdünnt. Diese Lösung wird mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-Wert von etwa 1 angesäuert und mit 3 x 40 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt, mit. Wasser und Kochsalzlösung -(jeweils 50 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck zu einem schaumigen hellgelben Feststoff eingedampft. Der Versuch der Umkristallisation aus Isopropyläther/Hexan ergibt einen Gummi, der mit Hexan digeriert wird. Ausbeute: 4,77 g (trans)-N-/N-/^2-Carboxycyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1- dimethyläthylester als weißlicher Feststoff.

d) (trans ) -13-/1-/72- (Hydroxymethyl) -eye 1 ohexyl7-earb onyl7-L-pheiiylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester Eine Lösung von 4,50 g (9,21 mMol)(trans)-N-/I-/r2-Carboxycyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester in 10 ml Tetrahydrofuran wird unter Argon als Schutzgas in einem Kohlendioxid/Aceton-Bad auf -35 C abgekühlt. Diese Lösung wird innerhalb von 30 Minuten mit 12 ml (1,25 Äouiv.) 0,96 M Boran-tetrahydrofuran-Komplex versetzt. Das Gemisch wird über Nacht gerührt, auf 1.5⁰C

Γ -QO-

erwärmt, und das überschüssige Boran durch vorsichtige Zugabe von 10 ml 'vascer zersetzt. Das Tetrahydrofuran wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit SO ml Essigsäureäthylester verdünnt, mit gesättigter Natriumbicarbonatlösung, 10?j Kai iuabi sulfat lösung und Kochsalzlösung (jeweils 50 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und zu 5,38 g gelber Schaum eingedampft. Dieses Material wird chromatographisch an Waters Modell 500 (präparative HPLC) und anschließend an einer Säule mit 260 g Kieselgel (0,037 bis 0,063 «ei, E. Merck) gereinigt und mit 4-,5# und 5r<> Äthanol/Cyclohexan eluiert. Ausbeute: 1,90 g (trans)-ii-/K«/72-(Hydroxymethyl)-cyclohexyl7-carbonyl7-L-pheriTlalanyl7~L-leucin-1,1 -dimethyläthylester als weißlicher schaumiger Feststoff.

e) (trans)-i'i-/:w-/£2"/^Acetylthio)-methyl7-cyclohexyl7-carbonyl7"L~pr-snyialanyl7~L—leucin-1,1 -dimethyläthylester
0,20 ml (1,0 niMol) Diisopropylazodicarboxylat wird su einer in Eis/Methanol gekühlten, stark gerührten Lösung von 0,26 g (1,0 mMol) Tripheny!phosphin in 2,5 ml Tetrahydrofuran unter Stickstoff als Schutzgas gegeben. Die erhaltene Aufschlämmung wird zur Verdünnung mit 0,5 ml weiteres Tetrahydrofuran versetzt und das Gemisch 30 Minuten in der Kälte gerührt. Es wird dann 7 Minuten mit einer Lösung von 76 mg (1,0 mMol) Thiolessigsäure und 0,4-7 g (1,0 mMol) (trans ) -H-/N-/72- ( Hydr oxymethc/1) -cy c 1 ohxy±7-c ar b onyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin-1,1-dimethyläthylester in 1,5 ml Tetrahydrofuran behandelt. Das erhaltene schwarze Gemisch wird 1 Stunde in der Kälte und dann 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt und die dann hellgelbe Lösung unter vermindertem Druck eingedampft. Der ölige Rückstand wird an einer kleinen Menge Kieselgel (0,037 bis 0,063 jum, E. Merck) adsorbiert und auf eine Säule mit 80 g des gleichen Kieselgels aufgebracht. Die Eluierung mit Hexan/Aceton (11:2) ergibt 0,37 g (trans)-N-/N-_j/72-/rAcetylthio)-methyl7-cyclo-

L j

r - 91 -

hexyl7-carbonyl7-L-phen:7lalanyl7™L--leucin--'1 /i-dimethyläthylester. Ein zweiter Ansatz ergibt das gewünschte Produkt in größerer Reinheit als weißen Feststoff (es v/erden weniger Fraktionen der Chromatographie gesammelt). Die Fx^odukte aus

5 beiden Ansätzen werden vereinigt,

f) Lithiumsalz von (tr&ns)-H-^i^-/72"/CAcetylthio)-metüyl7-

c ycl ohexyl7-c ar b onyl7-*L-phenyL al anyl7-L-l euc in 0,50 s (0,94 mMol) (traas)-NV^//2-/Ucet7lthio)-meth7l7-cyclohex7l7-carbonyl7-L-phenylaIanyl7-l:~leucin-1,1-dimethyl- äthylester werden unter Stickstoff mit etwa 5,5 ml 1,7N Chlorwasserstoff/Essigsäure behandelt;. Das Gemisch wird 6 Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wonach das TLC noch die Gegenwart von Äusgsngsmaterial zeigt« Die Lösung wird unter vermindertem Druck eingedampft und wie zuvor mit weiterem Chlorwasserstoff/Essigsäure behandelt. lach 1,5 Stunden (die Umsetzung ist gemäß TLC nach 1 Stunde vollständig) wird die Lösung eingedampft. Der Rückstand wird mit 7 ml Toluol versetzt und unter vermindertem Druck zu einem weißen Feststoff eingedampft. Chromatographie dieses Materials an 22 g Kieselgel (0,057 bis 0,06ο pi, E. Merck) und Eluieren mit Toluol/Essigsäure = A¹?:2 ergibt 0,30 g weißen Feststoff. Ein Anteil dieses Feststoffs wird in 5 ml Aceton aufgenommen und mit O₅^ ml 0.1 M Liriiiumcarbonatlösung behandelt. Die erhaltene Losung wird auf etwa 1,5 ml eingeengt, zur Lösung der Feststoffe mit sr'.s:·,eichend Methanoi versetzt und auf eine Säule mit HP-TO ;:^Λ:ιΐ den Dimensionen 2,5^ cm x 53 cm aufgebracht. Die Slui^ra:.^ mit einem linearen Gradienten Wasser/Acetonitril ergibt 38 mg (trans)-N-/H-/72-/"CAcetylthio)-metü7l7-'-:7olO'ier ·■■/ -carbonyl/'-L-phenylalanyl/-L-leucin-lithiumsalz, Die fre:' ; Säure wird durch Waschen der Säule mit Acetonitril uuLalten.

g) (trans)-N-/N-/7i-(H'3rcaptoinethyl)-cyciohexyl7~carbonyl7-L-phenylalanyl7-L—1suein

Sine Lösung von 36 Eg (C,077 aiMol) Lithiumsalz von Teil (f)

_OWGIM6« INSPECTED

in 0,3 ml Methanol wird unter Argon als Schutsgas in Eis/ Methanol gekühlt. Dann wird 0,25 ml (3 A'quiv.) 1N Natronlauge auf einmal augegeben und das Gemisch 75 Minuten in der Kälte gerührt. Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck abdestilliert und der Rückstand mit 3 ml Wasser behandelt und mit konzentrierter Salzsäure auf einen pH-wert von etwa 1,5 eingestellt. Der erhaltene weiße Niederschlag wird mit 5 x 15 ml Essigsäureäthylester extrahiert. Die organischen Phasen werden vereinigt, mit Wasser und Kochsalzlösung (jeweils 15 ml) gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und unter vermindertem Druck eingedampft. Es wird ein weißer Feststoff erhalten, der aus Benzol kristallisiert wird. Ausbeute: 21 mg (trans)-N-/H-/72-(Mercaptomethyl)-cyclohexyl7~carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin als flockiger weißer Feststoff vom F. 156 bis 158⁰C (Erweichung bei 148⁰C). TLC (Kieselgel, Benzol!Essigsäure = 8:1) R_f = 0,41 mit blassem Vorlauf.
Analyse für C₂₅H₅₄N₂O₄S · 0,18 H₂O:

ber.: C 63,09 H 7,91 N 6,40 S 7,32 SH 100% gef.: C 63,09 H 7,81 N 6,26 S 7,38 SH 101%.

Beispiele 66 bis 74

Nach dem Verfahren von Beispiel 65 wird das in Spalte I aufgeführte 2-Carbonsäure-dipeptid (das in die entsprechende Hydroxysie thy !-Verbindung umgewandelt wird) und das in Spalte II gezeigte Thiol zum Acylmercapto-Produkt von Spalte III umgesetzt. Der Esterrest R^- kann dann entfernt v/erden, wobei das gewünschte Dipeptid als Säure erhalten wird. Auch der Acylrest kann abgespaltet werden, wobei das

in Spalte IV aufgeführte Mercaptan erhalten wird.

L J

10

15

20

Spalte I

O E

HOOC—A— C-N -CH — C-X

Spalte II

j~ C-SH Spalte-J

O R

O WIl_-1C^ Λ \* Vi

Süalte IV

Il I I Il

25

O R

S !

HS— CE

r — χ

30 35

ro υι

ro ο

ι-¹

Ul

Beispiel ^A

R R.

66

-C C'

I I

H H

-H -CH.

-N rf—COOC(CH )

H <^L>

67

-C ΟΙ i

H H

-H -CH

(D
-NH-CH COOC (CH )

CH₂-

68

-C—Ο Ι I H H

-H -CH.

COOC(CH )

(I.IL.

cc

■—· Cl

B CJ

B • CJ

CJ I

K CJ

o —a ι

•Η ft ■■j

■Η O

ιΟ

Ul

to

Ul

Cn

Beispiel a

72

R R.

.-H -CH,

-c— c-

COOC(CH„).

73

-H -CH.

CH,

-C— C-

S S

-N COOC(CH.

74

-H

-NH- CH — COOC (CH )

(O)

-C— C-

(L) CH

L-

₂ CH(CH₃)

351&6Τ7

Beispiel 75

(trans)-1-/!i-/7r2-Benzoylthio)-C3^rclohezyl7-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin

Eine Lösung von 328 mg (1 mMol) (trans)-1-/N-/T2-Mercaptocyclohe2cyl)-carbonyl7-Ij-alanyl7-L-prolin in 10 ml Dichlormethan wird bei O⁰G unter Argon mit 2SO <ul (2,0 mHol) TvI-äthylamin und 120 μΐ (1,03 niMol) Benzoylchlorid -versetzt.
Das Gemisch wird 4- Stunden gerührt, auf Raumtemperatur erwärmt und danach mit Essigsäureäthylester verdünnt und mit Hi Salzsäure gewaschen. Die organische Phase wird getrocknet und eingedampft. Der Rückstand wird an Eieselgel (sili-CAR CC—4-) chromatographiert, wobei ein Elut ions gradient von Chloroform su Essigsäureäthylester verwendet wird. Es wird das (trans)-1-/S-/7r2-Benzoylthio)-cyclohexyl7-carbonyl7-

L-alanyl7-Ii-prolin erhalten.

Beispiele 76 bis
Nach dem Verfahren von Beispiel 75 wird bei Verwendung des in nachstehender Spalte I aufgeführten Acylchlorids das in Spalte II angegebene Produkt erhalten.

Spalte I

H

Rj- C -Cl

Spalte Ii

__:

ο /-—ν ο ο y\

Il < > Ii (L) H Γ 1

R-C-S — C — C C — NH-CH- C — N l—COOH

i I I mi

HH CH. H

BAD

Beisniel

84

-38 -

35Ί&8Ί7

78

79

80

(OL

81

Cl -/QV ^(CH2^}2"

^Γ -99- 3518617

In ähnlicher Weise kann das Verfahren der Beispiele

8M- mit den Mercaptan-Produkten der Beispiele 1 bis ^M- angewendet werden, wobei weitere Verbindungen der Erfindung erhalten v/erden. 5

Beispiel 85

(trans ) -1 -/N-/{Acetylthio) -cyclohexylcarbony^-I·— alanyl7-L-prolin wird mit dem in nachstehender Spalte I angegebenen Reagenz zu dem in Spalte II aufgeführten Produkt umgewandelt.

Süalte II

H-C-C-S—C C C-NH-CH C--N—

³ Il I

H H CH₃ H

-COOR CL)

Deacylierung mit Ammoniak ergibt das entsprechende Mercaptan.

ORIGINAL INSPECTED

I- J

- ΛΟΟ -

Bon p-niel Spalte I

Il

Cl-CH-O-C-C H

0 Il

Cl-CH-O-C-C H_c

CH(CH₃) 0 If

-CH-O-C-C H

0 Il

-CH-O-C-C H_e

88

Cl-CH₂-O-C-C(CH₃J₃

Il -CH₂-O-C-C(CH₃J₃

89

II

Br-CH-O-C-CH

Il

-CH₃-O-C-CH₃

90

0 Il

91

1-CH₂-C-O-C(CH₃J₃

I«

-CH -C-O-C(CH J

92

CH 0

I-C C-O-CH.

CH,	0
I 3	H
-C	— C-O-CH

CH.

CH.

93

CH—

OH

CH-O-CH

-CH(CH-OH)

94

CH

OH

•CH-

-CH_

-CH.-CH-CH

²I I ²

OH OH

95 96

Jp)

-(CH

-N(CH₃)

98

HO-(CH₂J₂

Im Fall der Beispiele 9? bis 98 wird die Umsetzung mit dem in Spalte I aufgeführten Reagenz in Gegenwart eines Kopplungsmittels, wie Dicyclohexylcarbodiimid und gegebenenfalls in Gegenwart eines Katalysators, wie 4-Dimethylaminopyridin, durchgeführt.

^Γ -¹⁰²- 35iS8T

35iS8T7

1 Beispiel 99

(trans)-N,H'-/("2,2^l-Dithiobi3cyclohexyl)-carbonyl7-1,1'-bis-/E-alanyl-L-prolin7

(trans)-1-/N-/[r2-Mercaptohexyl)-car'bonyl7-L-alanyl7-Ii-proliii wird in Wasser gelöst und der pH-Wert mit 1N Natronlauge auf 6,5 eingestellt. Dann wird tropfenweise eine äthanolische Jodlösung zugegeben, wobei der pH-Wert durch vorsichtige Zugabe von 1N Natronlauge auf 6,5 gehalten wird. Nach vollständiger Umsetzung (TIC) wird das Reactionsgemisch mit konzentrierter Salzsäure angesäuert und mit Essigsäureäthylester extrahiert. Die organische Phase wird mit Wasser gewaschen, getrocknet und zur Trockne eingedampft. Ss wird das (trans)-N,N^l-/^2,2'-Dithiobiscyclohexyl)-carbonyl7-1,1'-bisVE-alanyl-L-prolin/ erhalten.

In ähnlicher Weise können symmetrische Disulfide aus den Verbindungen von Beispiel 1 bis 98 hergestellt werden.

Beispiel 100 Mononatriumsalz von (trans)-1-/N-^CS-Mercaptocyclohexyl)-

20 carbonyl7-I-alanyl7-I-prolin

'^{/ J} 1 mMol (trans)-1-/N-^r2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-I-prolin (isomer A) wird in 50 ml Wasser gelöst. Die lösung wird mit 20 ml 0,1N Natriumbicarbonatlösung versetzt. Dann wird die wäßrige lösung lyophilisiert. Der Rück-

25 stand wird in 10 ml Wasser gelöst und auf eine Säule

(5 x 60 cm) mit Sephadex-Gel G-10 zur Chromatographie aufgebracht und mit Wasser eluiert. Die das gewünschte Produkt enthaltenden Fraktionen werden vereinigt und lyophilisiert. Es wird das Mononatriumsalz von (trans)-Λ-/β-/ζ2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-I-alanyl7-I-prelin (Isomer A) erhalten.

Beispiel101

Es werden 1000 Tabletten aus folgenden Bestandteilen hergestellt:

L J

Γ - 103 -

Mononatriumsalz von (trans)-1-/N-/T2-Mercapto-

cyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer A) 100 mg

Maisstärke 50 mg

Gelatine 7,5 mg

Avicel (mikrokristalline Cellulose) 25 mg

Hagnesiumstearat 2,5 mg

185 mg

Das Natriumsalz von (trans)-1-/N-,/X2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer A) und die Maisstärke v/erden mit einer wäßrigen Lösung der Gelatine vermischt. Das Gemisch wird getrocknet und zu einem feinen Pulver vermählen. Das Avicel und danach das Magnesiumstearat werden unter Granulierung zugemischt. Dieses Gemisch wird sodann in einer Tablettenpresse zu 1000 Tabletten mit einem Gehalt von jeweils 100 mg Wirkstoff verpreßt.

In ähnlicher Weise können Tabletten mit einem Gehalt von jeweils 100 ng der Produkte der Beispiele 1 bis 99 hergestellt

werden. 20

Ein ähnliches Verfahren kann zur Herstellung von Tabletten mit einem wirkstoffgehalt von 50 mg angewendet werden.

Beispiel 102

Zweiteilige Gelatinekapseln Nr. 1 werden mit einem Gemisch der folgenden Bestandteile gefüllt:

Mononatriumsalz von (trans)-N-,/N-/T2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin

(Isomer A) 50 mg

Magneniumotearat 7 mg

Lactose 193 mg

250 mg

In ähnlicher Weise können Kapseln mit einem Gehalt von 50 mg eines der Produkte der Beispiele 1 bis 5 und 7 bis 100 hergestellt werden.

L j

Γ - 104 -

35188Τ7

Beispiel 103

Aus folgenden Bestandteilen wird eine injizierbare Lösung hergestellt:

Piononatriumsalz von l;-/N-(2-Mercaptobenzoyl)-L-phenylalanylJ-L-leucin 50C g

Methylparaben 5 <r

Propylparaben 1 g

Natriumchlorid 25 g

Wasser zur Injektion 5 Liter

Der Wirkstoff, die Konservierungsmittel und das Natriumchlorid v/erden in 3 Liter Wasser zur Injektion gelöst. Das Volumen der Lösung wird auf 5 Liter aufgefüllt. Die Lösung wird durch ein keimfreies Filter filtriert und aseptisch in vorher sterilisierte Fläschchen gefüllt, die mit vorher sterilisierten Gummistopfen verschlossen werden. Jedes Fläschchen enthält 5 nil Lösung in einer Konzentration von 100 mg Wirkstoff pro ml Lösung zur Injektion.

In ähnlicher Weise können injizierbare Lösungen mit einem Gehalt von 100 mg Wirkstoff pro ml Lösung aus den Produkten der Beispiele 1 bis 3 und 5 bis 100 hergestellt werden.

Beispiel 104

3s werden 1000 Tabletten aus folgenden Bestandteilen hergestellt:

Mononatriumsalz von (trans)-1-/f-/T2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-piOlin

(Isomer A) ³⁰ AvIc el Hydrochlorthiazid Lactose Maisstärke

Stearinsäure 35

550 mg

100	5	mg
100		mg
	5	mg
113		mg
17,	mg
7	mg

r -105- 35Ί88Τ7

Das Mononatriumsalz von (trans)-1-/H-/^2-Kercaptocyclohexyl)-carbonyl7-Iⁱ-alanyl7-I<--prolin (Isomer A), das Avicel und eine Menge der Stearinsäure werden vermischt. Das Gemisch wird gemahlen und durch ein Sieb Nr. 2 geführt. Sodann wird es mit dem Hydrochlorthiazid, der Lactose, der Maisstärke und dem Rest der Stearinsäure vermischt. Das Gemisch wird in einer 'Tablettenpresse zu 350 mg kapseiförmigen Tabletten verpre£t. Die Tabletten werden sur Teilung in Hälften eingekerbt.

In ähnlicher Weise können Tabletten mit einem Gehalt von 100 mg eines der Produkte der Beispiele 1 bis 99 hergestellt werden.

15

20 25 30 35

L J

Claims (1)

1. VOSSIUS ■ VOSSIUS -TAUCHN ER -HEUNEWANh" -'RAUH

   SIEBERTSTR AS SE 4-8OOO MÜNCHEN 86 · PHONE: (O 89) 474O75 CABLE: BENZOLPATENT MDNCHEN - TELEX 5-29 4-53 VOPAT D

   5 u.Z.: T 795 (ßa/H) Case: A-614,090-S

   S.R. SQUIBB & SONS, INC.
   Princeton, N.I., V.St.A.

   24-Mai 1985

   "Mercaptocycloalkylcarbonyl- und Mercaptoarylcarbonyldipeptide"

   Patentansprüche

   1. Verbindungen der allgemeinen Formel ι

   O R R₁ O

   IM P

   R₂-S- (CH₂ ) g-A-C-N-CH— C-X

   und ihre pharmazeutisch verträglichen Salze, in der A

   -C

   C-I

   -C C-

   ! ι

   H H

   (H₂C)

   R.

   14

   H H

   -C-C-I I
   H H

   -C — C-

   -C-C-

   -C-C-

   oder

   -C— Ο

   15

   20

   25

   30

   bedeutet;

   ν den Wert 1 oder 2 hat;

   Z einen Cycloalkylring mit 3 bis 10 Kohlenstoffatomen, einen solchen Cycloalkylring, in dem eines der Kohlenstoffatome durch einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, Niederalkoxyrest mit 1 bis 4-Kohlenstoffatomen, Niederalkylthiorest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, eine Phenyl-, Benzyl-, Halogen-, Trifluormethyl- oder Hydroxylgruppe substituiert ist, oder einen Cycloalkenylring mit 5 bis 7 Kohlenstoffatomen vervollständigt,

   X eine Amino-oder Iminosäure der Formel

   CHo

   H₂C

   -N

   CH₂ C-COOR.

   . C-COOR,- "Ν

   (L)

   (L)

   ■ C-COOR, KL) ^e H

   -N— C-COOR,

   ' 11 ' 17 -N — C-COOR₄- -N -C-COOTT,

   (L)

   I (L)

   (L)

   35

   C-COOR
   I (L)

   -N—C-COOR, I (D ^e

   C-COOR₁

   24

   -N CH-COOR,- ,

   I I

   ^R4 ^RS

   -N—C-COOR, (L) ^e

   -N-

   (L)

   COOR-, ο

   -N-

   (D

   OCH.

   OCH.

   COOR,

   -N

   COOR,

   (L)

   '25

   -N

   COOR,,

   oder

   (L)

   COOR,

   (L)

   35

   darstellt; η den Wert O, Λ oder 2 hat;

   R~t- einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen

   oder den Rest

   -(CH₂)

   bedeutet;

   ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest, ein Halogenatom, eine Hydroxylgruppe, einen Re_st der Formel 0

   II

   -NH-C-Niederalkyl, eine Aminogruppe, einen der Reste

   O -NH-C-(CH₂)

   -N

   R. . / 19

   <^R14>p

   ^(R13>p

   - -^(CH2»iirri · -«v.-fp) -

   eine 1- oder 2-Naphthylgruppe der Formel

   -cycloalkyl,

   -O-niederalkyl, -O- (CH₂) -W Q) ι

   1 eine 1- oder S-Eiaphthyloxygruppe der Formel

   -O- (CH₂)

   , -s-niedesalkyl,

   10 oder eine 1— oder 2-Naphthylthiopruppe der Formel

   darstellt;

   ein Halogenatom,

   «^R13>

   O -0-C-N

   , -o-niederalkyl, eine 1- oder

   2-Naphthyloxygruppe der Formel

   -0-(CH₂)

   -S-niederalkyl, -S- (CH₃) Jj

   ^(R13'p

   oder eine 1- oder 2-Haphthylthio gruppe der Fo2?mel

   (R,₄) bedeutet;

   -S-(CH₂)

   Rq eine Ketogruppe_oder

   darstellt;

   <^R13^} _P

   1 R_x,Q ein Halogenatom oder den Rest -Y-R_x.,- bedeutet;

   R/|-p R'^i^., R^o ^unc^· ^'i2 ^una^^änsiS voneinander Wasserstoffatome oder Niederalkylreste bedeuten oder R¹,,, R_x. _o und R'y|2 Wasserst off atome sind und R_x,^ einen Rest der

   Formel

   bedeutet;
   R^, ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, Niederalkoxyrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen, Niederalkylthiorest mit Λ bis 4- Kohlenstoffatomen, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom, eine Trifluormethyl-, Hydroxyl-, Phenyl-, Phenoxy-, Phenylthio- oder Phenylmethylgruppe bedeutet; R_x^ ein Wasserstoff atom, einen Niederalkylrest mit 1 bis 4-Kohlenst off atomen, Niederalkoxyrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, Niederalkylthiorest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom, eine Trifluormethyl- oder Hydroxylgruppe darstellt;

   20 m den Wert O, 1, 2, 3 oder 4- hat;

   ρ den Wert 1, 2 oder 3 hat mit der Maßgabe, daß ρ einen höheren Wert als 1 nur hat, wenn R_x,, oder R_x,^ ein Wasserstoff atom, eine Methyl- oder Methoxygruppe, ein Chlor- oder Fluoratom bedeutet;

   R_xIi- ein Wasserstoff atom oder einen Niederalkylrest mit 1

   bis 4- Kohlenstoffatomen darstellt; Y ein Sauerstoff- oder Schwefelatom bedeutet; R_xJg einen Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen oder einen Rest der Formel

   30 - - ν—, - ,

   ^(R13^Jp

   bedeutet, oder die Reste R_x,/- zusammen einen unsubstituierten 5- oder 6-gliedrigen Ring oder einen derartigen Ring, in dem mindestens eines der Kohlenstoffatome mit einem Niederalkylrest mit Λ bis 4- Kohlenstoffatomen oder einem Di-(niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen) substituiert ist, vervollständigen;

   3 5 T SS17

   ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest -(CH-)

   -)—

   , - (CH₂)

   bedeutet;

   Rc ein Wasserstoffatom, einen Nie ^ deralkylrest

   OH

   - (CH₂)

   _r-SH, - (CH₂)_r-S-niederalkyl, NH

   r-NH-C^

   oder - (CH₂) -C-NH₂ darstellt;

   NH,

   r eine ganze Zahl im Wert von 1 bis A- bedeutet; R^iq einen Niederalkylrest, eine Benzyl- oder Phenathyl-

   gruppe darstellt;

   30 R2Q ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest, eine Benzyl- oder Phenäthylgruppe bedeutet;

   R ein Wasserstoffatom, einen Niederalkyl- oder Cycloalkylrest,

   ' ~^iCH2^}3~^NH2 '

   , -(CH₂J₂-OH, -

   -(CH₂J₄-OH, -(CH₂J₂-SH, -(CH₂J₃-SH, oder

   -(CH₂J₄-SH darstellt;

   JL· ein Wasserstoffatom, einen Niederalkylrest, einen halogensubstituierten Niederalkylrest

   OH , -(CH₂)-

   OH "?

   15 - ^Η

   ' "^(CH2^}r"^NH2' -(CVr"³*¹'

   I *

   -.(CH₂) _r-OH, - (CH₂) _r-S-ni-ederalkyl -(CH₂J ₂

   -(CH-J-NH-C^ oder -(CH-J -C-NH, bedeutet;

   NH₂ 25 . _s

   R₂ ein V/asserstoffatom, R-,-C-, oder

   ORR 0

   "II¹ Il ³⁰ -S-(CH₂)^-A-C-N-CH-C-X zur Bildung eines

   symmetrischen Disulfids darstellt;

   R^ einen Niederalkylrest _(_Ch )_

   ³⁵ ^-(CH.)--s-(CH-)^

   ^oder

   351W17

   *6 i^^l?«»Ä Niederal^est, eine Ben-

   H ' '^{21 9}

   !-0-C-R₁₈

   R,

   |l I H

   -CH-O-C-R_{1 Q} -C C-R

   l 18 j

   17

   -CH-(CH₂-OH)₂ , -CH₂-CH CH₃, -(CH₂) ,,-N (CH₃)

   OH OH

   oder - (CH₂) j--(0) darstellt;

   R^r₇ ein Wasserst off atom, einen Niederalkyl- oder Cycloalkylrest oder eine Phenylgruppe bedeutet;

   Rxjq ein Wasserstoff atom, einen Niederalkyl- oder Niederalkoxyrest oder eine Phenylgruppe darstellt, oder R^r₇ und R.g zusammen genommen

   - (CH-)--, - (CH₇) -, -CH=CH- oder \—/

   (O)

   bedeuten;

   2ΐ ^22 ^^a^angiS voneinander Wasserstoffatome oder

   Niederalkylreste darstellen;
   B.2^ einen Niederalkylrest bedeutet; R24 ^ei-ⁿ Wasserst off atom, einen Niederalkylrest

   -fl i) > Sx Π oder -fOJ

   bedeutet; und

   q den Wert O oder 1 hat.

   1 2. Verbindungen nach Anspruch 1 der allgemeinen Formel l, in der
   R ein Wasserstoffatom oder einen unverzweigten oder

   verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoff-5 atomen bedeutet;

   R^, ein Wasserstoff atom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen,

   CF₃, -(CH₂)_r-NH₂, 10

   ₂J₂-S-(CHj)₂-NH , - (CH₂)₂-S-CH 20

   , -CH₂-OH, -CH₂-C-NH₂ oder

   25 NH₂

   Il
   - (CH₂)₂-C-NH₂ bedeutet;

   R₁, ein Wasserst off atom, eine Cyclohex:/! oder Phenyl-

   gruppe darstellt;
   Rr ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder ver-

   zv/eigten Niederalkylrest mit Λ bis 4 Kohlenstoff-35 atomen,

   "36iWi7

   -CH5KÖ

   OH , -^CH2"O)"^0H ' "^CH2"^0H '

   OH

   -CH.

   -CE

   ' -(CH₂)₄-NH₂ ,

   -CH₂-SH ,

   0 Il -CH₂-C-NH₂ odea?

   NH

   NH,

   darstellt;

   ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit Λ bis 4 Kohlenstoffatomen, ein Alkalimetallaalzion,

   ι 0
   Il
   -CH-O-C-R.

   18

   It

   -CH₂-C-OR₂₃

   -CH-(CH₂-OH)₂ , -CH₂-CH CH₂ ,

   OH OH

   oder -(CH₂)—fOl bedeutet;

   ORIGINAL INSPECTED

   R^„ ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen oder eine Cyclohexylgruppe darstellt; R^o einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen oder eine Phenylgruppe

   bedeutet;

   Roz einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen darstellt; Rr₇ ein Wasserstoff atom, eine Hydroxylgruppe, einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen, eine Cyclohexyl- oder Aminogruppe, einen -O-Niederalkylrest, in dem der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und 1 bis 4- Kohlenstoff atome enthält,

   ^R13 ^R13

   eine 1-Naphthyloxy- oder 2-Naphthyloxygruppe, einen S-Niederalkylrest, in dem der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und 1 bis 4- Kohlenstoffatome enthält

   -S-(CH₂J₁WqN

   ^R13

   eine 1-Naphthylthio- oder 2-Naphthylthiogruppe bedeutet;
   Ro einen -O-Niederalkyl- oder -S-Niederalkylrest "°"^(CH2⁾ _Ir(OX ^oder -^S-^(CH2⁾iT{O). bedeutet

   ^R13 ^R13

   wobei der Niederalkylrest unverzweigt oder verzweigt ist und 1 bis 4· Kohlenstoff atome aufweist; Rq eine Phenyl-, 2-Hydroxyphenyl- oder 4~Hydroxyphenyl-

   gruppe darstellt;

   beide Reste R^₀ Fluoratome, beide Chloratome oder beide Reste der Formel -Y-R,,,- bedeuten;

   ein Sauerstoff- oder Schwefelatom ist; einen unverzweigten oder verzweigten Niederalkylrest mit Λ bis 4- Kohlenstoffatomen darstellt oder die Rente Ry,^ zusammen einen unsubstituierten 5- oder 6-gliedrigen Ring oder einen solchen Ring, in dem mindestens eines der verfügbaren Kohlenstoffatome einen Methyl- oder Dimethylsubstituenten aufweist, vervollständigen;

   R/1/1, R¹ZM* ^2 ¹¹^d- R'i2 all^e Wasserstoffatome sind oder R/|/| eine Phenyl-, 2-Hydroxyphenyl- oder 4~Hydroxyphenylgruppe bedeutet und die Reste R'/i/p R/ip und R'^2 alle Wasserstoffatome darstellen; ε eine ganze Zahl im Wert von 1 bis 4 ist; m die Bedeutung 0, 1 oder 2 hat;

   R/1? ein Wasserst off atom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom-oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet; R/14, ein Wasserst off atom, eine Methyl-, Methoxy- oder

   Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet; und R24 eine Phenylgruppe darstellt.

   3. Verbindungen nach Anspruch 2 der allgemeinen Formel I,

   in der
   25

   -C C- oder (CVS

   HH cu

   bedeutet;

   Z einen Cycloolkylring mit Λ bis 7 Kohlenstoffatomen oder einen Cycloalkylring mit 4 bis 7 Kohlenstoffatomen, in dem eines der Kohlenstoffatome durch eine Methyl-, Methoxy-, Methylthio-, Phenyl- oder Benzylgruppe, ein Chlor-, Brom- oder lluoratom oder eine Hydroxylgruppe substituiert ist, vervollständigt; R/j4 ein Wasserstoff atom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet; und

   ein Wasserstoff atom, .^^ J.^ darstellt

   4. Verbindungen nach Anspruch 3 der allgemeinen Formel I, in der X __N _ CH-COOR^ ,

   ι ι

   ^R7 I
   C-COOR-
   I (L) ⁶ I
   -N-

   ^{10 D} /(¹³VtX

   ^sx^s

   H₂C CH₂

   (D ° Il

   ^{1 H} -N C-COOR-

   ,(L) ⁶

   20 ^oder

   25 bedeutet,

   R einen Wasserstoff oder eine Methylgruppe darstellt; Ry, ein Wasserstoff atom, eine Methyl-, Benzyl- oder

   -(CH₂)^-NH₂-GrUpPe bedeutet;

   Rg ein Wasserstoffatom, einen unverzweigten oder ver zweigten Niederalkylrest mit Λ bis 4 Kohlenstoffatomen oder ein Alkalimetallsalzion darstellt;
   En eine Cyclohexyl- oder Phenylgruppe und
   R₁- ein Wasserstoffatom bedeutet oder R^ ein Wasserstoffatom und Er eine Methylgruppe, -CH₂-CH(CH₃) ₂ 35

   35188M

   oder

   N darstellt;

   N ι

   10 R₉ ein Wasserstoffatom, eine Cyclohexylgruppe, einen Niederalkoxyrest mit 1 bis 4- Kohlenstoffatomen,

   bedeutet;
   20 m den Wert 0, 1 oder 2 hat;

   R^, ein Wasserstoffatom, eine Methyl-, Methoxy- oder Methylthiogruppe, ein Chlor-, Brom- oder Fluoratom oder eine Hydroxylgruppe darstellt; und t den Wert 2 oder 3 hat.
   25

   5. Verbindungen nach Anspruch 4 der allgemeinen Formel I, in der
   q den Wert 0 hat;

   30 A -C — c- bedeutet; und

   ι ι

   H H

   R₀ ein Wasserstoffatom ist.

   6. Verbindungen nach Anspruch 5 d.er allgemeinen Formel I, 35 in der

   ^R7

   - COOR. (L) ⁶

   -N — H

   bedeutet.

   7. Verbindungen nach Anspruch 6 der allgemeinen Formel I, 10 in der R₇ ein Wasserstoffatom ist; Rg ein Wasserstoffatom oder ein Alkalimetallsalzion

   darstellt;

   R ein Wasserstoffatom bedeutet; und R,, eine Methylgruppe darstellt. 15

   8. Monolithiumsalz von (trans)-1-/N-/T2-Mercaptocyclohexyl)-

   9. Monolithiumsalz von (trans)-1-/iT-//C2-Mercaptocyclohexyl)-20 carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (isomer A).

   10. Monolithiumsalz von (trans)-1-/N-/^2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-alanyl7-L-prolin (Isomer B).

   25 11. Verbindungen nach Anspruch 5 der allgemeinen Formel I,

   in der X _nh-CH-coor, bedeutet. ι ^ö

   ^R5

   12. Verbindungen nach Anspruch 11 der allgemeinen Formel I, 30 in der

   R₅ -CH₂-CH(CH^)₂ darstellt;

   Rg ein Wasserstoffatom oder ein Alkalimetallsalzion

   bedeutet;

   R ein Wasserstoffatom darstellt; und 35

   Yo) ' darstellt.

   13. N-/^~/r2-Mercaptocyclohex7l)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin.

   14. CDrans)-N-/N-(2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl7-L-leucin (Isomer A).

   15· (Trans)-N-/Itf-(2-Mercaptocyclohexyl)-carbonyl7-L-phenylalanyl/-L-leucin (Isomer B).

   16. Verbindungen nach Anspruch 4- der allgemeinen Formel I, in der
   q den Wert 0 hat;

   A -C—— c- bedeutet; und

   ι ι
   15 HH

   ILp ein Wasserst off atom darstellt.

   17· Verbindungen nach Anspruch 16 der allgemeinen Formel I, in der

   20 X -NH-CH-COORe bedeutet. ι ⁶

   ^R5

   18. Verbindungen nach Anspruch 17 d.er allgemeinen Formel I,

   in der
   25 R -CH₂-CE(CH₅)₂ bedeutet;

   Rg ein Wasserstoffatom oder ein Alkalimetallsalzion

   darstellt;
   R ein Wasserstoffatom bedeutet; und

   30 R₁ -GH₂-(( )) darstellt

   19. Verbindungen nach Anspruch 4 der allgemeinen Formel I, in der
   q den Wert 0 hat;

   A "C c- bedeutet; und

   FU ein Wasserstoffatom darstellt.

   _ 18 -

   1 20. Verbindungen nach Anspruch 19 der allgemeinen Formel I, in der X -NH-CH-COOR₆ bedeutet.

   21. Verbindungen nach Anspruch 20 der allgemeinen Formel I, in der

   R₁- -CH₀-CH(CH₂)O bedeutet;

   J *-· 0 t—

   Rr- ein Wasserstoffatom oder ein Alkalimetallsalzion 10 darstellt;

   R ein Wasserstoffatom bedeutet; und

   darstellt. *2

   15 22. Verbindungen nach Anspruch 4- der allgemeinen Formel I, in der q den Wert 1 hat;

   A -C—C- bedeutet; und ι ι '

   H H
   Rp ein Wasserstoffatom darstellt

   23. Verbindungen nach Anspruch 22 der allgemeinen Formel I, 25 in der

   X -NH-CH-COOR,- bedeutet.

   ^E5

   30 24. Verbindungen nach Anspruch 23 der allgemeinen Formel I,

   in der

   R₁- -CH₂-CH(CH^)₂ bedeutet;

   Rr ein Wasserstoffatom oder ein Alkalimetallsalzion

   darstellt;
   R ein Wasserstoffatom bedeutet; und

   darstellt.

   - 19 - - "-■■

   25. Arzneimittel, enthaltend eine Verbindung der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1.

   26. Arzneimittel zur Behandlung von Bluthochdruck, enthaltend eine Verbindung der allgemeinen Formel I gemäß

   Anspruch 1.

   27. Arzneimittel zur Behandlung von Schmerzzuständen, enthaltend eine Verbindung der allgemeinen Formel

   O R R₁ O O

   R₂-S-(CH₂) -A-C-N-CH - C -NH-CH-C-ORg

   in der R, R^, R₂, Rr, Rg, A und q wie im Zusammenhang mit Formel I gemäß Anspruch 1 definiert sind.

   28. Eine Verbindung der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch 1 als pharmazeutischer Wirkstoff.

   29. Eine Verbindung der allgemeinen Formel I gemäß Anspruch Λ als blutdrucksenkender Wirkstoff.

   50. Eine Verbindung der allgemeinen Formel 25 " O R R₁ O O

   Il I I Il

   R₂-S-(CH₂)_q-A-C-N-CH - C -NH-CH-C-ORg

   ^R5

   als analgetischer Wirkstoff. 30