DE2519157C2

DE2519157C2 - Verfahren zur Herstellung von Anthracyclinglycosiden

Info

Publication number: DE2519157C2
Application number: DE2519157A
Authority: DE
Inventors: Federico Milano Arcamone; Giuseppe Voghera Cassinelli
Original assignee: Farmaceutici Italia SpA 20146 Milano Soc; Farmaceutici Italia SpA
Current assignee: Pfizer Italia SRL
Priority date: 1974-05-02
Filing date: 1975-04-30
Publication date: 1983-11-10
Also published as: JPS5840556B2; DE2519157A1; GB1462387A; JPS50149663A; SU650507A3; FR2269536A1; FR2269536B1

Description

in der Ri bis Rs die angegebenen Bedeutungen haben oder eine Hydroxylgruppe als R₄ und die benachbarte Carbonylgruppe geschützt sind, mit l^.ö-Tetradesoxy^-O-trlfluoracetylO-trlfluoracetamldo-L-lyxo-hex-1-enopyranose In einem wasserfreien, organischen Lösungsmittel in Gegenwart von p-Toluolsulfonsäure oder Methansulfonsäure umsetzt und

U) die Trifluoracetylgruppen, und ggf. weitere Schutzgruppen, aus dem gemäß Verfahrensstufe I erhaltenen Glycosid In an sich bekannter Welse abspaltet.

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung von Anthracycllnglycoslden entsprechend dem Patentanspruch, wobei das In der Literatur bisher nicht beschriebene Glycal l^^.ö-Tetradesoxy^-O-trlfluoracetylO-trlfluoracetamldo-L-lyxo-hex-1-enopyranose mit Anthracycnone η oder geschützten Derivaten hiervon unter Bil dung von substituierten 2-Desoxyglycoslden umgesetzt wird, welche nach Abspaltung der Schutzgruppen In Anthracyclinglycoslde übergeführt werden, die bei der Behandlung von Krebs und Leukämie bei Menschen angewendet werden.

Glycal ist der Gattungsname von 1,2-ungesättigten Pyranoidzucker (siehe beispielsweise die Monographie »Unsaturated Sugar« Advance in Carbohydrate Chemistry, Bd. 20, S. 67, 1965, Academic Press, London).

Im Rahmen der Erfindung wurde ein Syntheseverfahren zur Herstellung dieses neuen Glycale, das ein wesent-Hches Zwischenprodukt bei der Herstellung der Glyco side gemäß der Erfindung darstellt, geschaffen.

Die Klasse der Anthracyclinone kann durch die folgende allgemeine Formel dargestellt werden:

HO

NH₂

in welcher entweder

A) Ri Wasserstoff und R₂ und R) Wasserstoff, Methyl, Methoxy, Chlor

oder Brom

oder

B) R₂ und Rj Wasserstoff und Ri Methyl, Chlor oder Brom bedeuten

und R₄ und R₅ jeweils Wasserstoff oder Hydroxyl darstellen, dadurch gekennzeichnet, daß man

I) ein. in den Positionen 13 und 14 gegebenenfalls Schutzgruppen aufweisendes, Anthracyclinon der allgemeinen Formel

R₃ O OH

COCH₂R₄

(ΠΙ),

R₂ O j H OH
OH

der R, Wasserstoff ist, R₂ und R, Wasserstoff, Methyl, Methoxy, Chlor oder Brom bedeuten und, wenn R₂ und Ri Wasserstoff darstellen, R, Methyl, Chlor oder Brom sein kann, und R₄ und R"s jeweils Wasserstoff oder Hydroxyl bedeuten.

Typische Beispiele der genannten Anthracyclinone

sind Daunomycinon (R,=R_J=R₄=Wasserstoff;

R2=Methoxy; R5=Hydroxyl) und Adriamycinon

(Ri=Rj=Wasserstoff; Rj=Methoxy; R₄=R5=Hydroxyl).

Daunomycinon und Adriamycinon sind die Aglycone

von Daunomycin und Adriamycin, die In den GB-PS 10 03 383 bzw. 11 61 278 beschrieben sind.

Das Verfahren zur Herstellung von Daunomycin und Adriamycin besteht In der säurekatalysierten Addition von Daunomycinon bzw. geschützten Adrlamycinonderi vaten an 1,2,3,6-Tetradesoxy-4-0-trlfluoracetyl-3-trlflu- oracetamldo-L-lyxo-hex-1-enopyranose, die nach Abspaltung der Schutzgruppen Daunomycin und Adriamycin ergibt. Diese Additionsreaktion wird in einem wasserfreien Lösungsmittel, wie Benzol, Toluol oder Nitromethan, In Gegenwart von p-Toluolsulfonsäure oder Methansulfonsäurc. durchgeführt.

Als reaktives Glycal wird die Verbindung der Formel II, die von Daunosamln stammt (siehe Reaktionsso schema), umgesetzt.

Wenn die Additionsreaktion beendet Ist, wird das Reaktionsgemisch neutralisiert und im Vakuum zur Trockne eingedampft.

Der Rückstand wird dann einer Hydrolyse unterwor-

fen, alkalisch bei der Herstellung von Daunomycin oder alkalisch und sauer bei der Herstellung von Adriamycin, um die Schutzgruppen zu entfernen.

Die Herstellung der Verbindung der Formel II, 1,2,3,6-Tetradesoxy^-O-trlfluoracetylO-trlfiuoracetamldo-L-

lyxo-hex-1-enopyranose erfolgt, indem 2,3,6-Trldesoxy-4-O-lrlfluoraeetyl-3-tfinuofaeetamiuo-L-lyxo-hexnpyranr>
sylchlorld (I) mit einem Chlorwasserstoffakzeptor, wie Quecksilber- und Silberoxiden und Salzen hiervon, in einem organischen Lösungsmittel, beispielsweise Benzol, Toluol, Nitromethan, Dloxan oder Mischungen hiervon, entweder bei Raumtemperatur oder bei Temperaturen bis zum Siedepunkt der Lösungsn;lttelmlschung behandelt wird.

(Π)

II +

(ΠΙ)

O I H OH OCH₃ OH

1) ρ - TsOH C₆H₆

2) CH₃OH

30

OV)

0 OH 0 OH

0 OH OCH₃

HO

COCH₃

NaOH

J5

40

CF₃

50

55

0 OH : OCH₃

HO

NH₂

(V)

II +

fvn

0 OH

OH

OCH₃

0

0 I H OH, OCH₃ OH CH₃ CH₃

1) ρ - TsOH/C₆H₅

2) NaOH

3) HCl

OH

(VH)

COCH₂OH

OH

Beispiel

HO

NH₂

10

15

Die Beispiele sollen die Erfindung näher erläutern.

!,J^ö-Telradesoxy^-O-trffluoracetylO-trifluoracetamido-L-Iyxo-hex-1-enopyranose (II) aus 2,3,6-Tndeoxy- ^O-trifluoracetyl-S-trifluoracetamldo-L-lyxo-hexopyranosylchlorid (1 -Chlor-S^-N-O-trifluoracetyldaunosamin I)

a) Zu einer Lösung von 800 mg der Verbindung (I) (hergestellt gemäß Beispiel 1 der GB-PS 14 57 559 in 25 ml einer 4 : 1-Mischung von Benzol und Dioxan wurden 500 mg Hg(CN)₂ zugesetzt. Die Suspension wurde 3'/₂ Stunden lang am Rückfluß erhitzt. Nach Abkühlen wurde die Mischung filtriert, wobei eine klare Lösung erhalten wurde, die zur Trockne eingedampft wurde. Der Rückstand wurde mit Benzol extrahiert und bei Eindampfen der Lösung wurde die Verbindung (II) in kristalliner Form erhalten, F. 73 bis 74° C, Ausbeute 650 mg, charakterisiert durch NMR-, IR- und Massespektren.

NMR (CDCl₃): 1,28 δ (d, J = 6,5Iiz, 3H, CH₃)

4,25 δ (dq, J = 6,5Kz und J < IHz, IH C_(S)H)

4,51 δ (dt, J = 6,0Hz und J = 2,0Hz, IH, C₍₂₎H)

4,7-5,2 δ (breites m, IH, Q₃)H)

5,2-5,6 δ (m, IH, Q₄)H)

6,20 δ (breites s, IH, NH)

6,50 δ (dd, J = 6,5Hz und J = 2,0Hz, IH, C_(UH)

MS (DIS): m/e 322 (M + 1)

m/e 207 (M - CF₃COOH)

m/e 192 (M - CF₃COOH - CH₃)

m/e 168 (HO = CH - CH = CH - NH - COCF₃)

4 3 +

m/e 154 (CF₃ - CO - O - CH = CH - NH) CH₃

m/e 95

m/e 69(CF₃-CO⁺)

b) Eine lOO-mg-Suspension von Hg(CN)₂ in 40 ml einer I : 1 (bezogen auf das Volumen) Mischung von wasserfreiem Nltromethan und Benzol wurde bis zum Siedepunkt erhitzt und 25 ml Lösungsmittel wurden abdestilliert. Zu der erhaltenen Suspension wurden 100 mg Verbindung (I) zugesetzt und die Mischung 2'/j Stunden lang auf Rückflußtemperatur erhitzt. Die Mischung wurde Im Vakuum zur Trockene eingedampft und mit wasserfreiem Benzol extrahiert. Bei Eindampfen des Extraktes wurde die Verbindung (II) in 85%lger Ausbeute erhalten, F. 73 bis 74" C.

c) 100 mg Verbindung (I) wurden zu einer Suspension von 80 mg AgiCOj In 3 ml Nltromethan zugesetzt. Die Mischung wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt und dann filtriert. Nach Eindampfen der filtrierten Lösung wurde die Verbindung (II; In 80%lger Ausbeute In reiner Form erhalten, F. 72 bis 73⁰C.

Beispiel 2
Daunomycin (V)

220 mg Daunomycinon (III) wurden in 100 ml wasserfreiem Benzol gelöst und mit 320 mg Verbindung (II) in 5 ml wasserfreiem Benzol und mit 13 mg p-Toluolsulfonsäure behandelt. Die Mischung wurde 4 Stunden lang auf 50°C erhitz·. Nach Abkühlen und Neutralisieren mit Pyridln wurde die Lösung zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde In 50 ml wasserfreiem Methanol gelöst und !. Stunde lang auf 55° C erhitzt. Das Lösungsmittel wurde im Vakuum abgedampft und der Rückstand la Chloroform gelöst, Die Lösung wurde mit Wasser gewaschen und mit Natriumsulfat getrocknet, auf ein kleines Volumen eingeengt und auf eine Slllkageisäule aufgebracht, die mit zunehmende Mengen Äthylacetat enthaltendem Chloroform elulert wurde. Die Ausbeute betrug 145 mg (50%) N-Trlfluoracetyldaunomycln (IV), kristallisiert aus Tetrahydrofuran und Hexan, F. 170 bis 17Γ C. \aV,r +235° (ί· = 0.1 In CHCI.).

NMR(CDCl₁): 1,32 Md, J=6,5 Hz, CH₁-C(H)I 2,40 Ö (s, CH₁CO) 4.02Ms, CH₁O) 5,17 i5 (breites s,C„,H) 12,85 und 13,60 δ (zwei s, chelatlslertes OH bei C₁₆, und C,_m).

100 mg N-Trlfluoracetyldaunomyeln wurden In 20 ml 0,1 N wäßrigem Natriumhydroxid gelöst. Nach 1 Stunde bei Raumtemperatur wurde die Lösung mit 0,5 N wäßriger Salzsäure behandelt, um den pH-Wert auf 8,5 zu bringen, und dann mit Chloroform extrahiert. Der mit Natriumsulfat getrocknete Extrakt wurde auf ein kleines Volumen eingeengt und Daunomycin (V) wurde als Hydrochlorld In kristalliner Form durch Zusatz eines Äquivalents I N methanolischem Chlorwasserstoff erhalten. Ausbeute 70 mg, F. 188 bis 189¹C (Zers.h Iz|;7 + 24OMi-= 0.1 In CH₁OH).

Beispiel 3 Adriamycin (VIl)

550 mg Verbindung (Vl) (hergestellt gemäß Beispiel I der üB-PS 14 57 632 wurden In 100 ml wasserfreiem Benzol gelöst und mit 650 mg Verbindung (11) In 10 ml wasserfreiem Benzol und 26 mg p-Toluolsulfonsäure behandelt. Die Mischung wurde 3 Stunden lang auf 30° C erhitzt, dann mit Pyrldln neutralisiert und zur Trockene eingedampft. Der Rückstand wurde In 10 ml Aceton gelöst und mit 50 ml 0,1 N wäßrigem Natriumhydroxyd behandelt. Nach 30 Minuten bei Raumtemperatur wurde der pH-Wert mit wäßriger Salzsäure auf 8,4 eingestellt und die Lösung mehrmals mit Chloroform extrahiert.

Die vereinigten Extrakte wurden mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet, filtriert und Im Vakuum eingedampft. Der Rückstand wurde In 0,1 N walirlger Salzsäure aufgenommen und 36 Stunden lang bei Raumtemperatur stehen gelassen. Die saure Lösung wurde durch Extrahieren mit Chloroform gewaschen, um Spuren von Aglycon zu entfernen, und dann unter Rühren In Anwesenheit von 50 ml Chloroform durch langsames Zusetzen von 0,1 N wäßrigem Natriumhydroxyd auf einen pH-Wert von 8,6 gebracht. Dann wurde die organische Phase abgetrennt, mit wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und auf 10 ml eingeengt. Adriamycin (Vll)-hydrochlorld kristallisierte durch Zersetzen von 1 Äquivalent 1 N methanolischer Salzsäure. Die Ausbeute betrug 420 mg Kristalle, F. 204 bis 205° C, UbV +23O³ (< = 0,05 In CH₁OH).

Claims

Patentansprüche:

Verfahren zur Herstellung von Anthracyclinglycosiden der allgemeinen Formel

COCH₂R₄

R₃ O

COCH₂R,