DE244326T1 - Verfahren zum feststellen und/oder zum identifizieren einer biologischen substanz durch elektrische messungen und vorrichtung zum durchfuehren dieses verfahrens. - Google Patents
Verfahren zum feststellen und/oder zum identifizieren einer biologischen substanz durch elektrische messungen und vorrichtung zum durchfuehren dieses verfahrens.Info
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Claims (14)
- Bio Merieux 87 401 000.2Veröff.-Nr. 0244326PatentansprücheVerfahren zum Aufspüren einer biologischen Substanz in einem flüssigen Milieu, das in der Lage ist, einen elektrischen Leiter zu enthalten, gekennzei cn net d u r c h die Tatsache, dass man das flüssige Milieu (5, 14, 24) innerhalb einer Meßzelle mit einer ein reagierendes Mittel tragenden Platte (4, 11, 18) in Kontakt bringt, welche einen spezifischen Liganden trägt, der direkt auf einer Oberfläche eines sehr kleinen Bettes aus einem isolierenden Material (4a, lla, 18a) befestigt ist, während die andere Fläche auf einem Träger befestigt ist, der in der Lage ist, den elektrischen Strom zu leiten, daß man die Größen C und/oder R der elektrischen Impedanz des Systems aus flüssigem Milieu/ isolierendem Bett / Träger für eine gegebene Spannung mißt und daß man die genannten Größen mit denjenigen eines Referenzsystems (12, 19) vergleicht, das dem vorgenannten System analog ist mit der Ausnahme des spezifischen Liganden, wobei eine eventuelle Verminderung der Kapazität oder eine Abweichung des Widerstandes hinsichtlich des Referenzsystems gemessen wird, welche die Gegenwart derbiologischen Substanz im untersuchten flüssigen Milieu anzeigt.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1, gekenn-z e i c h &eegr; et d u rc h die Tatsache, dass das Paar aus Ligand und biologischer Substanz ausgewählt ist aus den Paarungen Antikörper-Antigen, Hapten-Antikörper, ADN-ADN, ADN-ARN, Poly-dT-ARN Eucaryot, Enzym-Substrat, Enzyminhibitor, Lectin-Glycoconjugiertes Substrat, Zellmarkierer (oder von Mikroorganismen) - Zellen . (oder Mikroorganismen).. HcG - Geweberezeptor und T3-TBG sowie jede weitere Paarung vom Typ biologischer Rezeptor· - (entprechender Ligand oder Agonist oder Antagonist).
- 3. Verfahren nach den vorhergehenden Ansprüche gekennzeichnet durch die Tatsache, dass man zurErhöhung der Empfindlichkeit der Aufspürung in dem Fall, dass die biologische Substanz mehrere Affinitätsstellen besitzt, nachdem man die Untersuchungsflüssigkeit mit der das Reaktionsmittel tragende Platte in Kontakt gebracht hat, zu der Flüssigkeit, einen zweiten Liganden zusetzt und dass man erneut das Messen von Kapazität und/oder Widerstand des erhaltenen Systems durchführt.
- 4. Verfahren nach Anspruch 3, g e k e &eegr; &eegr; zeichnet durch die Tatsache, dass der zweite Ligand auf einem Makromolekül fixiert ist, wie ein Protein oder auf kleineeinzelne Partikel, die in der Lage sind, in Suspension in dem flüssigen Milieu gehalten zu werden.
- 5. Verfahren nach den vorhergehenden Ansprüchen, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass das flüssige leitfähige Milieu eine Pufferlösung mit einem pH-Wert ist, der zwischen 2 und 11 betragen kann.
- 6. Verfahren nach den vorhergehenden Ansprüchen, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass man zum Messen der Größen der elektrischen Impedanz eine nicht angreifbare Elektrode, (7, 17, 21) in Kontakt mit der genannten Flüssigkeit bringt, dass man eine alternative Spannung zwischen dieser Elektrode und dem leitfähigen Träger einrichtet und dass man die Größen R und/oder C mit den üblichen Methoden für eine gegebene Spannung bestimmt.
- 7. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel zur Verwendung in dem Verfahren, wie es in den vorstehenden Ansprüchen definiert ist, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass sie aus einem Träger (4, 11, 12, 18, 19) aus einem Material besteht, das in der Lage ist, die Elektrizität zu leiten, wobei eine der Flächen mit einem sehr kleinen Isolierbett (4a, 18a) bedeckt ist,auf welchem unmittelbar ein Ligand für eine biologische Substanz fixiert ist.
- 8. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nachAnspruch 7, g e k e &eegr; &eegr; &zgr; e i c h &eegr; e t du rc h die Tatsache, dass dieser Träger ein Metall ist und dass das Isolierbett ein Bett aus einem Oxyd dieses Metalles ist.
- 9. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nach Anspruch 8, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass das Metall Aluminium oder Tantal ist.
- 10. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nach Anspruch 7, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass/dieser Träger aus einem halbleitenden Material besteht und dass es auf der Fläche, die der mit dem isolierenden Material bedeckten Fläche gegenüber liegt, mit einem Metallbett beschichtet ist, das einen Ohm'schen Kontakt sicherstellt.
- 11. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nach Anspruch 10, gekennzei chnet d u r c h die Tatsache, dass der Halbleiter aus Silicium ist und dass das Isolierbett ein Bett aus Kieselsäure und Siliciumnitrid ist....Il
- 12. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nach einem der Ansprüche 7 bis 11, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass der Ligand auf dem Isolierbett durch Adsorption fixiert ist.
- 13. Platte als Träger für ein Reaktionsmittel nach einem der Ansprüche 7 bis 11, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass der Ligand auf das Isolierbett durch kovalente Bindungen aufgepfropft ist.
- 14. Meßküvette, bestimmt für das Messen nach dem Verfahren der Ansprüche 1 bis 6, gekennzeichnet durch die Tatsache, dass sie einen umflossenen Raum darstellt mit einem Innenraum (14, 20) zur Aufnahme der Flüssigkeit, dass sie einen Behälter für eine Platte, die ein Reaktionsmittel trägt und auswechselbar ist (4, 11, 18) aufweist, die es gestattet, eine Messung in Verbindung mit der Innenfläche durchzuführen, welche ein Isolierbett trägt, auf welchem ein Ligand auf der Platte befestigtest, mit einem Innenraum des umschlossenen Raums und wobei gegebenenfalls ein zweiter Aufnahmebehälter für eine Referenzplatte ohne spezifischen Liganden vorgesehen ist, und daß Mittel vorgesehen sind, um die Dichtigkeitzwischen dem umschlossenen Raum und den Platten sicherz us teilen, und dass eine Elektrode vorgesehen ist, mit deren Hilfe der Kontakt mit der flüssigen Probe hergestellt werden kann und daß Mittel vorgesehen sind, um die elektrischen Kontakte nach außen zwischen Elektrode und Außenfläche der Platten sicherzustellen.
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