DE2140417C - Behalter und Verfahren fur die Durchfuhrung einer 2 dimensionalen quantitativen Immunelektrophorese - Google Patents

Description

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derer p glachzeitig wobei auf die ren verzichtet

«pnimoroteine oder Proteine anäS M einer einzigen Analyse ^ _{titaäv m} bestimmen,

die

JineT ersTen dektrophoretischen Schritt au™ Aoarose oder ernem anderen

Gegenstand der Erfindung ist ein Behälter zur Aufbewehrung von Trenngel neben Antikörpergel und ein Verfahren für die Durchführung einer zweidimensionalen quantitativen Immunelektrophorese.

Antigene sind bekanntlich Stoffe, meistens Proteine, die im Organismus die Bildung von Anitikörpern bewirken. Bei der Reaktion von Antigenen mit Antikörpern fällt ein Niederschlag aus, das sogenannte Immumpräzipitat. Zur Bestimmung von Antigenen sind bereits Dosen aus durchsichtigem Material bekannt deren Bodenplatte parallel zu ihren erhöhten Seiten in einen zur Aufnahme eines feuchten Schwamms dienenden Innenraum und einen Außenraum unterteilt ist, der mit einem Antiserum enthaltenden Träger beschichtet ist. Mit dieser Vorrichtung läßt sich unier Verwendung von spezifischen Atttiseren jeweils immer nur eine spezielle Antigenbestim* mung durchführen.

. Für die quantitative Bestimmung von Proteinen, die in der klinischen Diagnostik eine große Rolle spielen, 1st die in den letzten Jahren entwickelte ,quantitative Immunelektrophorese (zweidimerisionale Immunelektrophorese) von zunehmender Bedeutung. Mit dieser Methode gelingt es, Antigen« eines Aftti-

Hch maent. Man nut ω« ^.-—

daß man das antikörperhaltige Gel erst kurz vor dem zweiten elektrophoretischen Schritt an den Gelstreifen der ersten elektrophoretischen Auftrennung angießt.

Dieses bekannte Verfahren, zu dem noch die Bereitung des antikörperhaltigen Gels hinzukommt, ist kompliziert und für routinemäßige Untersuchungen nicht geeignet.

Gegenstand der Erfindung ist ein Behälter zur Aufbewahrung von Trenngel neben Antikörpergel für die Durchführung einer zweidimensionalen quantitativen Immunelektrophorese, bestehend aus einer durchsichtigen Form mit durchsichtigem Deckel, der dadurch gekennzeichnet ist, daß ein Deckel 1 das Unterteil! der Form mit runder oder quadratischer Grundfläche dicht verschließt und das Unterteil 2 durch eine entfembare Trennwand 3 in zwei verschieden große Räume geteilt ist und der kleinere Raum das Trenngel und der größere das antikörperhaltige Gel enthält.

Gegenstand der Erfindung ist des weiteren ein Verfahren zur Bestimmung von Antigenen mittels Antiserum, das dadurch gekennzeichnet ist daß man nach Entfernung des Deckels von einem Behälter mit quadratischer oder runder Grundfläche, der durch eine Trennwand in einen kleineren und einen größeren Raum aufgeteilt ist, von denen der kleinere Trenngel und der größere Raum antikörperhaltiges Gel enthält, die Trennwand am Haltegriff aus dem Behälter zieht, eine Serumprobe in ein vorgebildetes Loch im Trenngel einfüllt, mittels Elektrolytbrücken eine Verbindung zum Elektrophoresepuffer in handelsüblichen Elektrophoresekammern herstellt, die elektrophoretische Auftrennung in bekannter Weise durchführt dann den Spalt zwischen Trenngel und Antikörpergel im Behälter mit flüssigem Trenngel füllt, wieder mit Elektrolytbrücken eine Verbindung zum Puffer in der Elektrophoresekammer herstellt und nach Durchführung der zweiten Elektrophorese das gewünschte immunpräzipitat erhält.

Der erfindungsgemäße Behälter ist etwa 10 X 10, vorzugsweise 5 X 5 cm groß und hat insbesondere

eine quadratische Form. Durch die entfernbar«: Trennwand wird er vorzugsweise in zwei nebeneinanderliegende Räume aufgeteilt , Im Trenngel ist gemäß einem weiteren Merkmal der Erfindung vorzugsweise eine Ctfnung zum.bmfüUen der Serumproben vorgesehen, «n*»™¹*"*?? "^gestanztes oder in anderer Weise hergestelltes

Der erfindungsgemäße Behälter erlaubt es, gebrauchsfertiges Trenngel (!.Dimension) undige- »- brauchsfertiges Antikörpergel (2. Dimension) nebeneinander für längere Zeit aufzubewahren, ohne daß eine Antikörpertfiffusion von der zweiten in die erste Dimension stattfindet In dem dicht schließenden Deckel der Form befindet sich vorzugsweise an der Innenseite ein Feuchtigkeitsschwamm.

Zur Herstellung de- Behälters gemaP der Erfindung eignen sich die meisten bekannten durchsicttugen Behältermaterialien, insbesondere aber thermoplastische Kunststoffe, vorzugsweise Polyolefine w,e « Polyäthylen, Polypropylen und Polystyrol oder Polyvinylchlorid. Als Gele können alle Gele vorhegen, die in der Elektrophorese üblich sind, insbesondere Agarose und Antikörper-Agarose.

Die Erfindung wird nachstehend mit Bezug auf die * Zeichnung erläutert, die eine beispielsweise Austunrungsform der Erfindung zeigt _Β^·«Αιηα

Fig. 1 zeigt einen Behälter gemäß der Erfindung mit einem Behälterdeckel 1;

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Zur quantitativen

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ohne ihore-

sekammern einseuen.

Hierzu 1 Blatt Zeichnungen

Claims (4)

1. Patentansprüche:

   • 1. Behälter zur Aufbewahrung von Trenngel 5 neben Antikörpergel für die Durchführung einer zweidimensionalen quantitativen Immunelektrophorese, bestehend aus einer durchsichtigen Form mit durchsichtigem Deckel, dadurch gekennzeichnet, daß ein Deckel (1) das Unterteil (2) der Form mit runder oder vorzugsweise quadratischer Grundfläche dicht verschließt und das Unterteil (2) durch eine entfembare Trennwand (3) in zwei verschieden große Räume geteilt ist und der kleinere Raum das Trenagel und der größpxe das antikörperhaltige Gel enthält
2. 2. Behälter nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet daß durch die Trennwand (3) nebeneinanderliegende Räume gebildet sind.
3. 3. Behälter nach den Ansprüchen 1 und 2, da- *> diuch gekennzeichnet daß im Trenngel eine Öffnung (5) zum Einfüllen der Serumprobe vorliegt
4. 4. Verfahren zur Bestimmung von Antigenen mittels Antiserum, dadurch gekennzeichnet, daß man nach Entfernung des Deckels von dem Behälter der Ansprüche 1 bis 3 die Trennwand am Haltegriff aus dem Behälter zieht, eine Serumprobe in ein vorgebildetes Loch im Trenngel einfüllt, mittels Elektrolytbrücken eine Verbindung zum Elektrophoresepuffer in der Elektrophoresekammer herstellt die elektrophoretische Auftrennung in bekannter Weise durchführt, dann den Spalt zwischen Trenngel und Antikörpergel im Behälter mit flüssigem Trenngel füllt wieder mit Elektrolytbrücken eine Verbindung zum Puffer in der Elektrophoresekammer herstellt und nach Durchführung der zweiten Elektrophorese das gewünschte Immunpräzipitat erhält.