DE1768350A1

DE1768350A1 - Neue OEstradiol-17ss-rhamnoside

Info

Publication number: DE1768350A1
Application number: DE19681768350
Authority: DE
Inventors: Wolfgang Dr Eberlein; Guenther Dr Engelhardt; Joachim Dr Heider; Hans Dr Machleidt
Original assignee: Dr Karl Thomae GmbH
Current assignee: Boehringer Ingelheim Pharma GmbH and Co KG
Priority date: 1968-05-03
Filing date: 1968-05-03
Publication date: 1972-06-08
Also published as: NL158183B; DK129833B; CH580119A5; DK129833C; ES366704A2; FR2007816A1; ES366651A1; NL6906773A; CH574972A5; AT299459B; GB1235031A; SE345264B; AT295049B; DE1768350C3; BE732479A; US3629234A; DE1768350B2

Description

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ta ·.

₅ München 2, BräuhauMtrefje 4/|||

Case 5/390 Dr.So/schl

DR. KARL THOMAE GMBH., BIBERACH AN DER RISS Neue Östradiol-1713-rhamnoside

Die Erfindung betrifft neue Öetradiol-17ß-rhamnopyranoside der allgemeinen Formel I

OR,

/2

209824/1107

ORIGINAL INSPECTED

In dieser Formel bedeutet 1 7 6 8 35 C

R-, einen Rhamnopyranosyl- oder einen Rhamnopyranosyltriacylrest, einen Rhamnopyranosylorthoester- oder einen Rhamnopyranosylorthoeaterdiacylrest, also Reste der Formeln

R,

und

in denen
R, Wasserstoffatome oder niedere Acylreste der Formel R₄GO -

darstellen;

R. ist ein niederer Alkylrest, vorzugsweise der Methylrest» R bedeutet Wasserstoff^ einen niederen Alkyl- oder Acylrest, einen Benzylrest, einen Tetrahydropyranylrest oder einen Rest der Formel MeO,S-, in der Me ein Alkaliatom bedeutet.

Erfindungsgemäß werden die neuen Verbindungen nach bekannten Methoden (siehe beispielsweise Ch. Meystre und K. Miescher, Mv. Chim.Acta 27, 231, 1153 (1944) erhalten: 1) Zur Herstellung von Verbindungen der Formel I, in der die Reste R-, und Rp die angeführten Bedeutungen aufweisen, Rp jedoch keinen Rest der Formel MeO,S- bedeuten kann:

Umsetzung einer Verbindung der Formel II

/3

2-09824/1 1Q7

II,

in der der Rest

R£ die für R₂ angeführten Bedeutungen mit Ausnahme eines Wasserstoffatoms und eines Restes der Formel MeO,S- aufweiBt, mit einem Tri-O-acyl-a-L-rhamnopyranosyl-halogenid der Formel

R'Ox 0 Hai

>Q

in der

Hai ein Halogenatom bedeutet und die Reste R4 die oben angeführten niederen Acylreste der Formel R4CO bedeuten.

Die Umsetzung erfolgt in Gegenwart eines Schwermetallsalzes oder eines Schwermetalloxides vorzugsweise in einem inerten organischer Lösungsmittel, beispielsweise Benzol, und vorzugsweise bei der Siedetemperatur des verwendeten Lösungsmittels. Als Schwermetallverbindungen werden vorzugsweise die Oxide, Cyanide oder Carbonate des Silbers oder Quecksilbers verwendet. Eine Lösung einer Verbindung der Formel II wird zweckmäßigerweise mit einer Suspension des Schwermetallsalzes oder Schwermptalloxids versetzt, anschließend wird in der Siedehitze eine Lösung des O-Acylhalogenids r.ugetropft, wobei zweckmäßig ein Teil des verwendeten Lösungsmitteln azeotrop

"00824/1107 ^/4

abdestilliert wird.

Bei diesem Verfahren entsteht zunächst ein Gemisch von 2 Verbindungen der Formel I, wobei einmal der Rest R₁ einen Rhamnopyranosyltriacylrest, das andere Mal einen Rhamnopyranosylorthoesterdiacylreet bedeutet. Diese Verbindungen werden» da sich die acylierten Derivate nicht chromatographisch trennen lassen, anschließend nach bekannten Methoden verseift. Die Verseifung erfolgt mit Alkalien unter schonenden Bedingungen bei Raumtemperatur, beispielsweise mit Kaliumcarbonat, Kaliumhydroxid, Natriumhydroxid oder Ammoniak in methanolischer Lösung oder mit Natriummethylat, Kaliummethylat oder Bariummethylat in Äthanol. Die erhaltenen Rhamnopyranosyl- und Rhamnopyranosylorthoesterverbindungen werden nun in der üblichen Weise mittels Säulenchromatographie getrennt, vorzugsweise an einer zu 15$ desaktivierten Kieselgelsäule, als Lösungsmittel wird vorzugsweise Benzol verwendet, dem steigende Mengen Essigester zugesetzt werden.

In den erhaltenen Verbindungen der Formel I, können anschließend gewünschtenfalls die freien Hydroxylgruppen der Rhamnopyranosylreste nach bekannten Methoden acyliert werden. Die Acylierung erfolgt mit einem Acylhalogenid, einem symmetrischen Anhydrid oder einem gemischten Anhydrid aus der entsprechenden Carbonsäure und einem Kohlensäuremonoester zweckmäßig bei Raumtemperatur in einem inerten Lösungsmittel, vorzugsweise in Gegenwart eines säurebindenden Mittels. Als solche kommen anorganische oder tertiäro organische Basen in Frage.

Las Verhältnis, in dem Rhamnopyranosyltriacetat und Rhamnopyranosylorthoesterdiacetat gebildet wird, hängt von der Art des verwendeten Losunpnmlitels, von der Art und Beschaffenheit des verwendeten Katalysator:· und von dom ßubstituenten R₉ an der phenolisehen

; ύ /1107 BADORlQtNAL _/(-

Hydroxylgruppe ab. In manchen Fällen kann man durch geeignete Auswahl dieser 3 Faktoren erreichen, daß die eine der beiden möglichen Verbindungen in hoher Ausbeute entsteht, so daß sich eine chromatographische Auftrennung erübrigt. Setzt man beispielsweise 3-Methoxy-17ß-östrol in Gegenwart von gealtertem käuflichen Silbercarbonat um, so entsteht praktisch reines Östradiol-17ßrhamnosidtriacylat-3-methyläther, während bei der Anwendung von frisch gefälltem Silbercarbonat praktisch reines Östradiol-17ß-rhamnosidorthoesterdiacylat-3-methyläther gebildet wird. Verwendet man jedoch statt der 3-Methoxy-Verbindung die 3-Benzyloxy-Verbindung, so erhält man in der üblichen Weise ein Gemisch von Rhamnosidtriacylat und Rhamnosidorthoesterdiacylat. Reines Rhamnosidorthoester-diacylat erhält man beispielsweise auch, wenn man eine 3-Acyloxy-Verbindung oder eine 3-Tetrahydropyranyloxy-Verbindung in Gegenwart von käuflichen Silbercarbonat mit einem Acylhalogenid der Formel III umsetzt.

Werden nach diesem Verfahren Verbindungen der Formel I erhalten, in der R₂ einen B_enzyl- oder Acylrest bedeutet, so können diese gewünsentenfalls nach bekannten Methoden in solche überführt werden, in denen R₂ ein Wasserstoffatom darstellt. Der Benzylrest kann mittels katalytischer Hydrierung, vorzugsweise in Eisessig und in Gegenwart eines Palladium-Katalysators, abgespalten werden, ein Acylrest kann mittels milder alkalischer Hydrolyse durch Wasserstoff ersetzt werden, beispielsweise durch Rühren nei Raumtemperatur mit einer methanol!sehen Lösung von Kaliumcarbonat, Kaliumhydroxid, Natriumhydroxid oder Ammoniak oder mit einer Lösung von llatriummethylat, Kaliummethylat oder Bariummethylat in Äthanol. Bei der Abspaltung des Acylrestes in 3-Stellung werden auch gleichzeitig am Rhamnosidrest noch etwa vorhandene Acylreste abgespalten:

2) Alkylierung odor Acylierung einer Verbindung der Formel IV

20y024/1107

in der der Heat

R₁ die eingangs erwähnten Bedeutungen aufweist, an der phenolischen Hydroxylgruppe in 3-Stellung.

Die Einführung des Restes Rp erfolgt nach bekannten Methoden: Bedeutet R_? einen Acylrest, so wird die Verbindung der Formel IV mit einem Acylhalogenid umgesetzt, bedeutet Rp einen Alkylrest, so folgt die Umsetzung mit einem Dialkylsulfat oder einem Alkylhalogenid in Gegenwart eines säurebindenden Mittels. Zur Einführung des Tetrahydropyranylrestes wird die Verbindung der Formel IV mit Dihydropyran in Gegenwart einer aromatischen Sulfonsäure umgesetzt. Der Rest MeO^S- wird vorzugsweise durch Umsetzung mit Amidosulfonsäure in einem inerten organischen Lösungsmittel und in Gegenwart einer tertiären organischen Base eingeführt. Die tertiäre organische Base, vorzugsweise Pyridin, kann auch gleichzeitig als Lösungsmittel dienen, wenn sie in einem entsprechenden Überschuß eingesetzt wird. Anschließend wird der gebildete Schwefelnäurehalbester durch Behandlung mit Alkalien, beispielsweise mit methanolischer Natronlauge oder Kalilauge, in das gewünsch tr. A/Llcfü Lsalz anerführt. Bei dieser Sulfatisierung der Hydroxylgruppe in 3-Stel Lung werden gleichzeitig die Acylreste des Rhamnopyranosylreotes abgespalten. Falls nach dem Verfahren I oder 2 Verbindungen erhalten werden, in denen die Rente R. Acylreste der Formel R.CO- bedeuten,

1 U 7

BAD ORIGINAL /V

.önnen sie gewünschtenfalls nachträglich durch milde alkalische hydrolyse in der bereits beschriebenen Weise verseift werden. Palis andererseits Verbindungen mit freien Hydroxyl-Gruppen am Rhamnopyranosylrest anfallen, beispielsweiae nach der SuIfatisierung der Hydroxylgruppe-in 3-Stellung, so können diese gewünschtenfalls in der ebenfalls bereits beschriebenen Weise nachträglich acyliert werden.

Die Ausgangsstoffe der Formel II sind bekannt, die Ausgangsstoffe der Formel IV lassen sich nach dem unter 1 beschriebenen Verfahren herstellen, vorzugsweise über die entsprechende 3-Benzyloxy-Verbindung.

Die neuen Verbindungen besitzen eine Östrogene Wirksamkeit und sind im besonderen Maße für die Therapie des Menopausensyndroma geeignet. Darüber hinaus können sie auch in gynäkologischen Indikationen, beispielsweise bei primärer oder sekundärer Amenorrhoe, Endemetritis oder Kolpitis, eingesetzt werden, ferner kann in Kombination mit einem Gestagen eine hormonale Fertilitätskontrolle (Ankkonseption) durchgeführt werden.

Die Verbindungen weisen auch nach peroraler Applikation eine sichere östrogene V/irkung auf, die die des bekannten Oestron-Gulfats übertrifft. Zum Nachweiß hierfür wurde die östrogene Wirkung von 3-Acetoxyöstra-l ,3,^r>(l0)-trien-17ß-yl-l' ,2^!-0-orthoacetyl-ß-L-rhamnopyranoaid (AQS 12), von 3-Methoxyöstra-l, 5,5(10)-trjen-17ß-yl-l ' »2 ^I-0-ort.]ioacetyl-3 ' »4 •-di-O-acetyl-.ß-L-rhnjanouyranosid (AQS 20) und von 3-Hydroxyöstra-l,3,?(10)-trien~]7S-yl-1 · ,2 '-O-orthoacotyl-3 ' ,4 ' -di-O-acetyl-ß-L-rliamnopyranooid (AQiS 36)

_vn

BAD

■" *" 176835C

nit Hilfe des Uteruswachctumtestes an der infantilen Ratte verglichen. Bei dienen Untercuchungen wurde im l⁵rini5ip die von Dorfman -und Dorfman (Endocrinology 5J5_, 65 (1954)) angegebene Methodik verwendet: Infantile weibliche FW 49-Ratten eigener Zucht in einem Alter von 21-23 Tagen und einem durchschnittlichen Gewicht von 38 g zu Beginn des Versuches erhielten per Schlundsonde eine einmalige Gabe der zu prüfenden Substanz als wässrige Lösung beigebracht. Die Substanzen wurden äquimolar dosiert. Die Dosis entsprach jeweils 0,1 mg/kg Oestronsulfat. Kontrolltiere erhielten entsprechende Volumina des Vehikels.

40 Stunden nach dieser oralen Gabe wurden die Ratten durch Ätherinhalation getötet und die Uteri von den beiden Ovarien her bis zur Vagina freipräpariert. Nach Ausdrücken des Sekrets wurde ihr Feuchtgewicht festgestellt.

Die Zunahme der gemittelten Uterusgewichte von mit Substanz behandelten Tieren gegenüber denen der scheinbehandelten Kontrolltiere diente als Maß für die östrogene Wirkung.

Aus der nachstehenden Tabelle geht hervor, daß die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen dem Oestronsulfat wesentlich überlegen sind. Die Werte wurden an der infantilen Ratte nach einmaliger oraler Gabe äquimolarer Dosen von 0,1 mg/kg Oestronsulfat-äquivalent ermittelt, bei der Angabe des Uterusgewichtes bedeutet χ den Mittelwert und sx die Standardabweichung.

/9

09824/1 107

Substanz	Tierzahl	UteruE in ι X	3- 3gewicht ag SX	Zunahme des in mg	1768350 3 Uterusgewichtes in yo der Kon trollen
AQS 12 Kontrollen	20 20	36,9 21,3	1,3 0,8	15,6	73,2
AQS 20 Eontrollen	20 20	33,7 20,7	1,5 0,9	13,0	62,8
AQS 36 Kontrollen	20 20	34,7 20,7	1,0 0,9	14,0	67,6
Oestronsulfat Kontrollen	20 20	30,9 20,9	1,2 0,6	10,0	47,8

Die nachstehenden Beispiele dienen zur näheren Erläuterung der Erfindung:

Beispiel 1

(I) 3-Benzyloxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2'-orthoacetyl-L-rhamnopyranosid

(II) 3-Benzyloxyöstra-l,3,5(lO^trien-^ß-yl-l-rhamnopyranosid

Eine Lösung von 10 g a-Acetobromrhamnose in 180 ml absolutem Benzol wird innerhalb von zwei Stunden zu einer Mischung von 5,4 g 3-Benzyloxy-17ß~Ostradiol und 30 g Ag₃OO₅ in 200 ml Benzol zugetropft, wobei gleichzeitig 30 - 40 ml Benzol aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert werden. Die Reaktioii3lösung wird noch weitere zwei Stunden unter Rückfliiß erhitzt. Wach beendeter Reaktion filtriert man von Silbercarbonat ab und engt im Vakuum bei 50⁰C zur Trockene ein. Das erhaltene Rohprodukt wird ohne weitere Reinigung in 250 ml Methanol gelöst und mit 4 g K₂C¹O,, in 5 ml Wasser versetzt. Nach zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit Wasser verdünnt und mehrmals mit Chloroform extrahiert. Die Chlorofox-iu^xtrakte

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176835C

v/erden nach der Trocknung mit Na_?SO. im Vakuum zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wird durch Chromatographie an Kieselgel (15 ,·> desaktiviert) mit Benzol, dem steigende Mengen an Essigester zugesetzt werden, in die beiden Komponenten I und II aufgetrennt .

i)ie Umkristallisation beider Verbindungen erfolgt aus Benzol/ Petroläther
I. Pp.: 168 - 172⁰C

Ausbeute: 1,5 g (18 $> der Theorie)

II. Pp.: 179 - 181⁰C

Ausbeute: 1,3 g (17 °ß> der Theorie).

Beispiel 2

5-Benzylox.vöstra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-2^f,3',4'-tri-O-acetyl-L-rhamnopyrano s id

1,4 g des gemäß BeispiePerhaltenen 3-Benzyloxy-ostra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-Ii-rhamnopyranosid werden in 14 ml Pyridin gelost, auf O⁰C gekühlt und langsam mit 14 ml Acetanhydrid versetzt. Nach Stehen über Hacht bei Raumtemperatur wird das Reaktionats'emisch in 1 1 Eisv/asser gegossen und mehrmals mit Chloroform exbrahiert. Die vereinigten Chloroformextrakte werden nacheinander mit verdünnter Schwefelsäure, gesättigter Natronhydrogencarbonat-Lösung und mit Wasser gewaschen. Nach Trocknung über Natriumsulfat wird im Vakuum zur Trockene eingeengt und das Rohprodukt; aus Methanol umkristallisiert.

Fp.: Iü3 - \<i€°(i

Aubbeufce: 1,2 g (6_:) ,ί der Theorie).

ßAO ORIGINAL

9624/1107

176835C

i γ; ρ j. ο 1 3

i-17ß~yl-2',3',4'-tri-O-aeetyl-1-

-'hamn η ρ ν rano ο i d

1,2 g des gemäß Beispiel 2 erhaltenen 3-Benzyloxyöstra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-2',3',4'-tri-O-acetyl-L-rhamnopyranosid werden in 300 ml Äthanol unter Zusatz von 0,19 ml Eisessig gelöst und in Gegenwart von 0,6 g Palladium /Kohle (lO^ig) zwei Stunden in einer Vi'asserstoffatmosphäre geschüttelt. Nach beendeter Wasserstoffaufnahme verdünnt man mit einem Liter V/asser und extrahiert mehrmals mit Chloroform. Die Chloroformextrakte werden mit gesättigter JTatriunihydrogencarbonatlösung und Wasser gewaschen, mit ITa₂SO, getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingeengt. Die Umkristallisation erfolgt aus Äthanol. P.p. 211 - 212°C
Ausbeute: 0,93 g (90 % der Theorie).

Beispiel 4

3-Hydroxyöstra-l, 3 , 5(lO)-trien-17ß-yl-L-rhamnopy3?anosid

1,25 g des gemäß Beipiel 3 erhaltenen 3-Hydroxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-2',3'^'-tri-O-acetyl-L-rhamnopyranosid werden in 100 ml Methanol gelöst und mit 0,47 g K₂CO₅ in 0,5 ml Wasser versetzt. Nach zwei Stunden bei Raumtemperatur verdünnt man die Reaktionslösung mit Wasser und extrahiert mehrmals mit Chloroform. Die Ohloroformextrakte werden nach Trocknung mit IJa₂SO. in Vakuum zur Trockene eingeengt. Man erhält 800 mg Rohprodukt,das durch Chromatographie an Kieselgel (15 $> deeaktiviert) mit Benzol/Enoigester gereinigt wird. Umkristallisation aus Aceton/Petroläther.

Pp.: 249 - 251°C

ab 238°C (Sintern)

Ausbeute: 420 mg (44 i» der Theorie).

/12 -?''5824/1107

——12 —

3eispiel 5

3-BGnzyloxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l^l,2'-O-orthoacetyl-?',4'-d i~0-ac ety1-L-rhamnopyrano s id

1,6 g des gemäß Beispiel 1 erhaltenen 3-Benzyloxy-östra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l'^'-O-orthoacetyl-L-rhamnopyranosid werden in 60 ml Pyridin gelöst, auf O⁰C gekühlt und langsam mit 16 ml Acetanhydrid versetzt. Nach Stehen über Nacht bei Raumtemperatur wird das Reaktionsgemisch in ein Liter Eiswasser gegossen, mehrmals mit Chloroform extrahiert und die vereinigten Chloroformextrakte nacheinander mit verdünnter Schwefelsäure, gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung und mit Wasser gewaschen. Nach Trocknung über Natriumsulfat wird die Lösung im Vakuum zur Trockne eingeengt.

Pp.: 132 - 142⁰C. (das Rohprodukt wurde ohne Reinigung weiterverarbeitet)

Ausbeute: 1,5 g (81 i» der Theorie).

Beispiel 6

3-Hydroxyöstra-l,3,5(10)-trlen-17ß-yl-l',2'-O-orthoacetyl-3',4'-di-0—acetyl-L-rhamnopyranosid

1,5 g des gemäß Beispiel 5 erhaltenen 3-Benzyloxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2·-O-orthoacetyl-3',4'-di-O-acetyl-L-rhamnopyranosid werden in 300 ml Äthanol unter Zusatz von 0,24 ml Bisessig gelöst
und in Gegenwart von 0,75 g Palladium/Kohle (10#ig) zwei Stunden
in einer Wasserstoffatmosphäre geschüttelt. Nach beendeter Wasserstoffaufnahme verdünnt man mit einem Liter Wasser und extrahiert
mehrmals mit Chloroform. Die Chloroformextrakte werden mit gesättigter Natriumbicarbonat-Lösung und Wasser gewaschen, mit
Na₂SO. getrocknet und im Vakuum zur Trockene eingeengt.
Die Umkristallisation erfolgt aus Äthanol/Petroläther.
Pp.: 211 - 213⁰C
Ausbeute: 1,25 g (98 $> der Theorie).

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Beispiel 7

3-Hydroxyöabra-l,3,5(10) -trien-17ß-yl-l ',2' -O-ortho-acetyl-L-rhamnopyranosid

0,95 g des gemäß Beispiel 6 erhaltenen 3-Hydroxyöstra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-l',2'-O-ortho-acetyl-3',4'-di-acetyl-L-rhamnopyranosid werden in 200 ml Methanol gelöst und mit 0,35 g K₂OO₅ in 0,5 ml Wasser versetzt. Nach zweistündigem Stehen bei Raumtemperatur wird die Reaktionslösung mit Wasser verdünnt und mehrmals mit Chloroform extrahiert. Die Ohloroformextrakte werden nach Trocknung mit Ha₂SO., im Vakuum zur Trockene eingeengt. Der erhaltene Rück- -stand wird durch Chromatographie an Kieselgel (15 $> desaktiviert) gereinigt.

Pp.: 187⁰C (Sintern)

205⁰C (Schmelzen)

Ausbeute: 200 mg (25 # der Theorie).

Beispiel 8

3-Tetrahydropyranyloxy-östra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-l',2'-0-orthoacetyl-3',4'-di-O-acetyl-L-rhamnopvranosid

Zu einer Mischung von 2,0 g 17ß-Östradiol-3-tetrahydropyranyläther und 5 g handelsüblichem Silbercarbonat (Fa.Merck, Darmstadt) in 50 ml absolutem Benzol wird bei der Siedetemperatur des lösungsmittels innerhalb von zwei Stunden eine Lösung von 5 g a-Acetobromrhamnose in 60 ml absolutem Benzol zugetropft, wobei gleichzeitig 15 ml Benzol aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert werden. Die Reaktionsmischung wird noch weitere 2 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Fach beendeter Reaktion filtriert man von Silbercarbonat ab und engt das Piltrat im Vakuum zur Trockene ein. Das Rohprodukt wird durch Chromatographie an Kieselgel (15 $> desaktiviert) gereinigt. Die Umkristallisation erfolgt aus Äthanol/ Wasser.

Pp.: 92 - 96⁰C
Ausbeute: 2

⁰ , 209824/11Ω7 _/1Δ

,7 g (75,5 g der Theorie¹). A4

176835C

Beispiel 9

3-Acetoxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-yl-l'.2'-O-orthoacetyl-5'. 4 ' -d i-0-ac e tyl-L-rhamnopyrano aid

Zu einer Mischung von 1,3 g 17ß-Östradiol-3-acetat und 3,5 g handelsüblichem Silbercarbonat (Pa. Merck, Darmstadt) in 50 ml absolutem Benzol wird bei der Siedetemperatur des Lösungsmittels innerhalb von zwei Stunden eine Lösung von 2,2 g oc-Acetobromrhamnose in 40 ml Benzol zugetropft, wobei gleichzeitig 15 ml Benzol aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert werden. Die Reaktionsmischung wird noch weitere 4 Stunden unter Rückfluß erhitzt. Nach beendeter Reaktion filtriert man von Silbercarbonat ab und engt das Piltrat im Vakuum zur Trockene ein.

Das Rohprodukt wird durch Chromatographie an Eieselgel (15 # desaktiviert) gereinigt. Die Umkristallisation erfolgt aus Äthanol. Fp.: 96 - 100⁰G
Ausbeute: 1,7 g (20 i° der Theorie).

Beispiel 10

a) 3-Methoxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-vl-2'₁3',4'-tri-O-acetyl-l·- rhamnopyrano s id

Zu einer Mischung von 3 g 17ß-Ö"stradiol-3-methyläther und 10 g handelsüblichem Silbercarbonat (Pa.Merck, Darmstadt) in 50 ml absolutem Benzol wird bei der Siedetemperatur des Lösungsmittels innerhalb von zwei Stunden eine Lösung von 5 g a-Acetobromrhamnose in 50 ml absolutem Benzol zugetropft, wobei gleichzeitig 10 - 15 ml Benzol aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert werden. Die Reaktionsmischung wird noch weitere zwei Stunden unter Rückfluß erhitzt. Nach beendeter Reaktion filtriert man vom Silbercarbonat ab und engt das Piltrat im Vakuum zur Trockene ein. Das Rohprodukt wird durch Chromatographie an Kieselgel (15 $ desaktiviert) gereinigt. Umkristallisation aus Äthanol. Pp.: 121 - 124⁰C ² °Ανϋ&βϊϋ: ¹ 9,% g (58 $ der Theorie). /15

b) 3-Methoxyöstra-l, 315 (10)-trien-17ß. yl-L-rhamnopyranosid

2,8g 3-Methoxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-2',3',4^f-tri-O-acetyl-L-rhamnopyranosid werden in 700 ml Methanol gelöst und mit 1,0 g ILJiO* *ⁿ "^ ^m^ Wasser versetzt. Nach zwei stündigem Stehen bei Raumtemperatur wird die Lösung im Vakuum zur Trockene eingeengt und der Rückstand mit Chloroform mehrmals extrahiert.

Die Chloroformextrakte werden mit Wasser gewaschen, mit NapSO, getrocknet und zur Trockene gebracht. Die Substanz kristallisiert aus Methanol/Wasser.

Pp.: 182 - 184°C.

Ausbeute: 2 g (95 # der Theorie).

Beispiel 11

3-Methoxyöstra-l.3,5(10)-trien-17ß-yl--l'«2'-O-orthoacetyl-l·- rhamnppyranoaid

Zu einer Mischung -von 4,4 g 17ß-Östradiol-3-methyläther und 15,0 g frisch gefälltem Silbercarbonat in 120 ml absolutem Benzol wird bei Siedetemperatur innerhalb von zwei Stund^en eine Lösung von 12 g a-Acetobromrhamnose in 180 ml absolutem Benzol zugetropft, wobei gleichzeitig 20 ml Benzol aus dem Reaktionsgemisch abdestilliert werden. Die Reaktionsmischung wird noch weitere zwei Stunden unter Rückfluß erhitzt. Nach Beendigung der Reaktion filtriert man vom Silbercarbonat ab und engt das Piltrat im Vakuum zur Trockene ein.Das erhaltene 3-Methoxy-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-l' ,2"'-0-orthoacetyl-3¹ ^-di-O-acetyl-L-rhamnopyranosid wird ohne weitere Reinigung in 500 ml Methanol gelöst und mit 7 g Kaliumcarbonat in 50 ml Wasser versetzt. Nach zwei Stunden bei Raumtemperatur wird die Lösung im Vakuum zur Trockene eingeengt und der Rückstand mehrmals mit Chloroform extrahiert. Die Chloroformextrakte werden mit Wasser gewaschen, mit Na₃SO- getrocknet und zur Trockene eingeengt.

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176835C

Umkristallisation aus Äthanol /Wasser.

Fp. 192 - 195⁰C

Ausbeute: Ig (90 # der Theorie).

Beispiel 12

5-Methoxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2'-O-orthoacetyl-^' Λ'- dj-O-acetyl-L-rhamnopyranosld

400 mg 3-Methoxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l^l,2^?-0-arthoacetyl-L-rhamnopyranosid (Beispiel 11), gelöst in 15 ml Pyridin und 15 ml Acetanhydrid, werden über Nacht bei Raumtemperatur stehengelassen. Nach beendeter Reaktion verdünnt man die Reaktionslösung mit Wasser und extrahiert mehrmals mit Chloroform. Die vereinigten Chloroforraextrakte werden nacheinander mit verdünnter Schwefelsäure, gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung und mit Wasser gewaschen, Nach der Trocknung mit Na₂SO. wird im Vakuum zur Trockene eingeengt und das Rohprodukt aus Äthanol/Wasser umkristallisiert. Pp.: 135 - 137°C
Ausbeute: 400 mg (80 # der Theorie).

) Beispiel 13

Kalium 3-Sulfoxyöstra-l,3»5(10)-trien-17ß-yl-L-rhamnopyranosiä

1 g 3-Hydroxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-2',3',4'-tri-O-acetyl-L-rhamnopyranosid (Beispiel 3) und 0,53 g Amidosulfonsäure werden in 7 ml Pyridin gelöst und bei 90⁰C unter Stickstoff eineinhalb Stunden gerührt. Nach beendeter Reaktion wird mit 50 ml Äther verdünnt und der entstehende Niederschlag abfiltriert und getrocknet. Das Rohprodukt wird mit Methylenchlarid mehrmals ausgezogen und

Ü y82 4/ 1 107

176835C

die vereinigten Extrakte engt man im Vakuum bei 30⁰G zur Trockene ein. Der Rückstand wird in einer Mischung von 50 ml Methanol und 80 ml 12/oiger methanolischer Kalilauge gelöst und 1 Stunde bei Raumtemperatur gerührt. Das Östrogensulfat fällt man durch Zugabe von 300 ml Äther aus und reinigt durch Chromatographie an Kieselgel, mit Chloroform, dem steigende Mengen Ithanol zugesetzt werden.

Umkristallisation aus Äther/Methanol
Pp.: 158⁰C (Rosafärbung)

185⁰C (Zersetzung)
Ausbeute: 560 mg (57 f° der Theorie).

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Die neuen Verbindungen lassen oich in die üblichen pharmazeutischen Zubereitung3formen, insbesondere in Dragees und Tabletten, einarbeiten. Diesen pharmazeutischen Präparaten können noch v/eitere Wirkstoffe, beispielsweise Tranquillizer oder Gestagene, zugesetzt werden. Die mittlere Einzeldosis liegt zwischen 0,05 und 1 mg Wirkstoff, vorzugsweise zwischen 0,075 und 0,3 mg.

Die nachstehenden Beispiele beschreiben einige solcher Anwendungoformen für die erfindungsgemäß hergestellten Verbindungen:

I· Dragees mit 0,3 mg 3-Acetoxyöstra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-l'.2 '-O-orthoacetyl-ß-L-rhamnopyranoaid

Zusammensetzung:

1 Drageekern enthält:

3-Acetoxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-1',2'-O-orthoacetyl-ß-L-rhamnopyranosid Oalciumphosphat sek. Maisstärke
Polyvinylpyrrolidon Cellulose mikrokrist. Magnesiumstearat

55,0 mg

Herstellungsverfahren:

Die Wirksubstanz wird mit Calciumphoqphat angerieben, dann die Maisstärke beigemischt und die Mischung mit einer lO^igen wässrigen Lösung des Polyvinylpyrrolidone durch Sieb 1 mm granuliert. Das Granulat wird bei 40°G getrocknet, nochmals durch obiges Sieb gerieben und mit den restlichen Hilfsstoffen gemischt. Aus der Mischung werden Drageekerne gepreßt.

Kerngewicht: 55 mg Stempel: 5 mm, gewölbt.

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0,3	mg
37,2	mg
10,0	mg
2,0	mg
5,0	mg
0,5	mg

■jjie no hergestellten Drageekerne werden nach bekanntem Verfahren mit einer Hülle überzogen, die im wesentlichen aus Zucker und Talkum besteht. Die fertigen Dragees werden mit Hilfe von Bienenwachs poliert.

Drageegewicht: 90 mg

II. Dragees mit 0,073 mg 3-Methoxyöstra-l,3,5(l0)-trien-17ß-yl-

I¹,2'-O-orthoacetyl-3',4'-di-0-acetyl-ß-L~rhamnopyranosid

und ;3mg 17a~Athinyl-17ß-hydroxy-östra-5(iO)-en-3-on (ITorethynodreC

Zusammensetzung:

Drageekern enthält:

3-Ile thoxyöstra-1,3,5 (10) -trien-17ß-yl-1·,2'-O-orthoacetyl-3 *,4'-di-O-acetylß-L-rhamnopyranosid 0,075 mg

17a-Äthinyl-17ß-hydroxy-östra-5(lO)-en-3-on 3,0 mg

Oalciumphosphat sek. 34,425 mg

Maisstärke 10,0 mg

Polyvinylpyrrolidon 2,0 mg

Cellulose mikrokrist. 5,0 mg

Magnesiumstearat 0,5 mg

55,0 mg

Herstellungsverfahren:
Analog Punkt 1

Kerngewicht: 55 mg
Stempel: 5 mm, gewölbt
Drageegewicht: 90 mg

/20

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III. Tabletten mit 1 mg 3~Hydrox.vöstra-l_t3,5(10)--trien--17ß-yl-1',2'-O-orthoacetyl-3',4'-di-O-acetyl-ß-L-rhamnopyranosid

Zusammensetzung; 1 Tablette enthält:

3-Hydroxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-yl-1 ·,2 ' -0-orthoacetyl-3',4'-di-O-acetylß-L-rhamnopyranosid 1 mg

Milchzucker 84,0 mg

Kartoffelatärke 30,0 mg

Polyvinylpyrrolidon 4,0 mg

Magnesiumstearat 1,0 mg

120,0 mg

Herstellungsverfahren t

Die Mischung der Wirksubstanz mit Milchzucker und Kartoffelstärke wird mit einer 15$igen Lösung des Polyvinylpyrrolidons in Aethanol durch Sieb 1,5 mm granuliert, bei 40⁰C getrocknet und nochmals durch Sieb 1,0 mm gerieben. Das Granulat wird mit Magnesiumstearat gemischt und zu Tabletten verpreßt.

Tablettengewicht: 120 mg Stempel: 7 mm, flach

IV. Dragees mit 0,3 mg 3-Acetoxyöstra-l,3,5(lO)-trien-17ß-yl-1'i2'-O-orthoacetyl-ß-L-rhamnopyranosid und 10 mg 7-Chlor-1,3-dihydro-3-hydroxy-5-phenyl-2H-l.4-benzodiazepin-2-on

Zusammensetzung:

3-Acetoxyöstra-1,3,5(lO)-trien-17ß-yl-1' ,2'-O-orthoacetyl-ß-L-rhamnopyranosid

7-Chlor-l,3-dihydro-3-hydroxy-5-phenyl-2H-1,4-benzodiazepin-2-on Calciumphosphat sek.

Kartoffelstärke Polyvinylpyrrolidon Alginsäure

Magnesiumstearat 209824/1

d	10,0	mg	0,3 mg (in der Dragfee hülle)
88,5	mg
21,0	mg
9,0	mg
10,5	mg
1.0	me
140,0	mg
	/21

Herstellungsverfahren: 1 /D O ο Ο υ

7-Ciilor-l, 3-dihydro~3-hydroxy-5-phenyl-2H-l, 4-benzodiazepin-2-on wird mit Calciumph.osph.at und Kartoffelstärke gemischt und mit einer 25i° igen Lösung des Polyvinylpyrrolidone in Äthanol durch Sieb 1,5 mm granuliert. Das Granulat wird bei 40⁰O getrocknet, nochmals durch Sieb 1 mm gerieben, mit den restlichen Hilfsstoffen gemischt und zu Drageekernen verpreßt.

Kerngewicht: 140 mg
Stempel: 7 mm, gewölbt.

Die so hergestellten Drageekerne werden mit einer Hülle überzogen, die im wesentlichen aus Zucker und Talkum besteht. Auf diese Isolierschicht wird mit Hilfe einer Gummiarabicum-Zuckerlösung soviel eines lO^igen Wirkstoff-Talkum-Puders aufgetragen, wie 0,3 mg Wirkstoff pro Dragfee entspricht. Die Dragees werden auf die o.a. Weise fertigdragiert und mit Bienenwachs poliert. Drageegewicht: 210 mg.

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Claims

Patent ans prüche

1. Neue Östradiol-17ß-rhamnopyranoside der allgemeinen Formel I

OR,

in der

R^ einen Rhamnopyranosyl-oder einen Rhamnopyranoeyltriacylrest der Formel

RO OR,

oder einen Khamnopyranosylorthoester- oder einen Rhamnopyranosylorthoesterdiacylrest der Formel

OR,

wobei R» Wasserstoffatome oder niedere Acylreete der Formel R₄CO- und R. einen niederen Alkylrest, vorzugsweise den Methylrest, darstellen,

und R₂ Wasserstoff, einen niederen Alkyl- oder Acylreat, einen Benzylrest, einen Tetrahydropyranylreet oder einen

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176835C

Rest der Formel MeO^S-, in der Me ein Alkaliatom darstellt, bedeuten.

2. 3-Acetoxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2'-O-orthoacetylß-L-rhamnopyranosid.

3. 3-Methoxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-yl-l^!,2'-O-orthoaeetyl-3',4'-di-O-acetyl-ß-L-rhamnopyranosid.

4. 3-Hydroxyöstra-l,3,5(10)-trien-17ß-yl-l^!,2'-O-orthoacetyl-

3',4'-di-O-acetyl-ß-L-rhamnopyranosid. m

5. 3-Benzyloxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2'-orthoacetyl-L-rhamnopyranosid.

6. 3-Hydroxyöstra-1,3,5(10)-trien-17ß-yl-l',2'-0-orthoacetyl-L-rhamnopyranosid.

7. Kalium 3-Sulfoxyöstra-1,3,5(lO)-trien-17ß-yl-L-rhamnopyranosld.

8. 3-Methoxyöstra-l, 3,5 (I0)-trien-17ß-yl-li-rhamnopyranosid.

9. Verfahren zur Herstellung "von neuen Östradiol-17ß-rhamnosiden der obigen allgemeinen Formel I, dadurch gekennzeichnet, daß

a) zur Herstellung von Verbindungen der Formel I, in der die
Reste R₁ und Rp die angeführten Bedeutungen aufweisen, R₂ jedoch keinen Rest der Formel MeO,S- bedeutet, eine Verbindung der Formel II

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in der R£ die für R2 angeführten Bedeutungen mit Ausnahme eines Wasserstoffatoms und des Restes MeO,S- besitzt, mit einem Tri-O-acyl-L-rhamnopyranosyl-halogenid der Formel III

III

in der Hai ein Halogenatom und die Reste R¹, die oben angeführten niederen Acylreste der Formel R4CO bedeuten, wobei R. einen niederen Alkylrest, vorzugsva.se den Methylrest darstellt, in Gegenwart eines Schwermetalloxids oder eines Schwermetallsalzes umgesetzt und das erhaltene Gemisch von Verbindungen der Formel I, in der der Rest R, einmal einen Rhamnopyranosyltriacylrest, das andere Mal einen Rhamnopyranosylorthoesterdiacylrest darstellt, durch milde alkalische Hydrolyse entacyliert und mittels Säulenchromatographie aufgetrennt wird und die erhaltenen aufgetrennten Verbindungen mit freien Hydroxylgruppen am Rhamnoserest gewünschtenfalls nachträglich nach bekannten Methoden acyliert werden und/oder Verbindungen, in denen R₂ einen Acylrest oder den Benzylrest darstellt, gewünschtenfalls nachträglich nach bekannten Methoden in Verbindungen mit einer freien Hydroxylgruppe in 3-Stellung überführt werden, oder daß

^098

b) zur Herstellung von Verbindungen der Formel I, in der R₂ ^die eingangs erwähnten Bedeutungen mit Ausnahme eines Wasserstoffatoms besitzt, eine Verbindung der Formel IV

IV

in der

R₁ die angegebenen Bedeutungen aufweist, unter Einführung des Restes R₂ an der phenolischen Hydroxylgruppe acyliert oder alkyliert wird.

10. Verfahren nach Anspruch 9a, dadurch gekennzeichnet, daß als Schwermetallsalz Silbercyanid, Silbercarbonat, Quecksilbercyanid und Quecksilbercarbonat bzw. als Schwermetalloxid Silberoxid oder Quecksilberoxid verwendet wird.

11. Verfahren nach den Ansprüchen 9a und 10, dadurch gekennzeichnet, daß die Umsetzung in einem inerten organischen Lösungsmittel vorzugsweise bei der Siedetemperatur des verwendeten Lösungsmittels durchgeführt wird.

12. Verfahren nach den Ansprüchen 9a, 10 und 11, dadurch gekennzeichnet, daß für die Säulenchromatographie eine zu 15# desaktivierte Kieselgelsäule verwendet wird.

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13. Verfahren nach Anspruch 9a, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel II, in der R₂ einen Methyl-, Acyl_T oder Tetrahydropyranylrest bedeutet, mit einer Verbindung der Formel III in Gegenwart von gealtertem Silbercarbonat zu einer entsprechenden einheitlichen Verbindung der Formel I, in der R₁ einen Rhamnopyranosylorthoesterdiacylrest bedeutet, umgesetzt wird.

14. Verfahren nach Anspruch 9b, dadurch gekennzeichnet, daß die Alkylierung mit Dialkylsulfaten oder Alky!halogeniden und die

^ Acylierung mit Acylhalogeniden durchgeführt wird.

15. Verfahren nach Anspruch 9b, zur Herstellung von Verbindungen, in denen der Rest Rp die Gruppe MeO,S- und der Rest R, einen nicht acylierten Rhamnopyranosyl- oder Rhamnopyranosylorthoesterrest bedeutet, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel IV mit Amidosulfonsäure umgesetzt und anschlieesend mit Alkalien behandelt wird.

16. Verfahren nach Anspruch 9b und 15» dadurch gekennzeichnet,

P daß die Umsetzung mit Amidosulfonsäure in einem inerten organischen Lösungsmittel und in Gegenwart einer tertiären organischen Base, vorzugsweise Pyridin, durchgeführt wird.

17. Verfahren nach den Ansprüchen 9-16, dadurch gekennzeichnet, daß eine Verbindung der Formel I, in der der Rest R₁ einen Rhamnopyranosyltriacyl- oder Rhamnopyranosylorthoesterdiacylrest bedeutet, durch milde alkalische Hydrolyse verseift wird.

18. Verfahren nach den Ansprüchen 9-16, dadurch gekennzeichnet,

daß eine Verbindung der Formel I, in der der Rest R₁ einen

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176835C

Rhamnopyranosyl- oder einen Khamnopyranosylorthoesterrest bedeutet, nach bekannten Methoden acyliert wird.

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