DE10307787A1

DE10307787A1 - Protein-bindende Camptothecin-Derivate

Info

Publication number: DE10307787A1
Application number: DE10307787A
Authority: DE
Inventors: Felix Kratz; André WARNECKE
Original assignee: KTB Tumorforschungs GmbH
Current assignee: KTB Tumorforschungs GmbH
Priority date: 2003-02-24
Filing date: 2003-02-24
Publication date: 2004-09-02

Abstract

Die Erfindung betrifft niedermolekulare Camptothecin-Derivate, die eine proteinbindende Gruppe enthalten und hydrolytisch oder enzymatisch im Körper unter Freisetzung des Wirkstoffs spaltbar sind.

Description

Camptothecin (CPT) ist ein Alkaloid mit tumorhemmenden Eigenschaften (Wall M. E., et al. J. Am. Chem. Soc. 1966, 88, 3888–3890), dessen Derivate wie Topotecan oder Irinotecan zur Behandlung verschiedener Krebserkrankungen eingesetzt werden (Kollmannsberger C., et al. Oncology 1999, 56, 1–12, Rothenberg M. L. Oncologist 2001, 6, 66–80). Jedoch sind Therapien mit diesen Arzneistoffen von Nebenwirkungen begleitet. Um das Nebenwirkungsprofil und die Wirksamkeit von CPT bzw. CPT-Derivaten zu verbessern, wurden makromolekulare Transportformen von CPT durch Kopplung des Wirkstoffs an synthetische Polymere wie Poly(ethylenglykol) (Greenwald R. B., et al. Bioorg. Med. Chem. 1998, 6, 551–562, Conover C. D., et al. Anti-Cancer Drug Design 1999, 14, 499–506) oder HPMA-Copolymere entwickelt (Fraier D., et al. J. Pharm. Biomed. Anal. 2000, 22, 505–514, Caiolfa V. R., et al. J. Controlled Release 2000, 65, 105–119).

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, Derivate von CPT zu schaffen, die eine gesteigerte in-vivo-Wirksamkeit im Vergleich zu CPT aufweisen.

Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß gelöst durch niedermolekulare Camptothecin-Derivate der allgemeinen Formel

worin R₁ = H oder OH, R₂ = H, NH₂, NO₂ oder N,N-Dimethylaminomethyl, R₃ = H oder Ethyl, R₄ = H, Alkyl oder Aryl, R₅ = H, Alkyl oder Aryl, von denen die beiden letztgenannten gegebenenfalls substituiert sein können, X = NH, NCH₃ oder O, n = 0 bis 5, m = 0 bis 6 bedeuten und PM eine proteinbindende Gruppe ist.

Eine integrierte hydrolytisch oder enzymatisch spaltbare Sollbruchstelle erlaubt hierbei eine kontrollierte Freisetzung des Wirkstoffs, eines α-Aminoacyl-Wirkstoff-Derivates oder eines α-Hydroxyacyl-Wirkstoff-Derivates in vivo, sodass Camptothecin-Derivate der vorliegenden Erfindung Prodrugs darstellen.

Die erfindungsgemäßen CPT-Derivate sind aus einer antitumoral wirksamen Camptothecin-Komponente, einem Spacermolekül und einem heterobifunktionellen Crosslinker aufgebaut. Im Folgenden wird dieser Aufbau näher erläutert: Die antitumoral wirksame CPT-Komponente ist ein Wirkstoff der allgemeinen Formel

worin
R₁ = H, OH
R₂ = H, NH₂, NO₂ oder N,N-Dimethylaminomethyl
R₃ = H, Ethyl
bedeuten, welcher eine freie 20-Hydroxygruppe aufweist. Bevorzugte Wirkstoffe sind Camptothecin, Topotecan, 10-Hydroxycamptothecin, 9-Aminocamptothecin und 9-Nitrocamptothecin.

Das Spacermolekül ist eine α-Aminocarbonsäure oder α-Hydroxycarbonsäure der allgemeinen Formel

in der R₁ = H, Alkyl oder Aryl, bevorzugt H
R₂ = H, Alkyl oder Aryl, gegebenenfalls substituiert, bevorzugt H, Methyl, Hydroxymethyl, Phenylmethyl, 4-Hydroxyphenylmethyl, Imidazolylmethyl, Indolylmethyl, CH(CH₃)₂, CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH₂CH₃, CH(OH)CH₃, CH₂COOH, CH₂CH₂COOH, CH₂CONH₂, CH₂CH₂CONH₂, CH₂(CH₂)₃NH₂, CH₂CH₂SCH₃ oder CH₂(CH₂)₂NHC(NH)NH₂
X = NH₂, NHCH₃ oder OH
bedeuten.

Besonders bevorzugte Spacer sind ⎿-Aminosäuren, Sarcosin und Glycin.

Der heterobifunktionelle Crosslinker ist eine Carbonsäure mit einer proteinbindenden Gruppe der allgemeinen Formel

in der
n = 0 bis 5
m = 0 bis 6
PM = proteinbindende Gruppe
bedeuten.

Die proteinbindende Gruppe (PM) ist bevorzugt ausgewählt unter einer 2-Dithiopyridylgruppe, einer Halogenacetamidgruppe, einer Halogenacetatgruppe, einer Disulfidgruppe, einer Acrylsäureestergruppe, einer Monoalkylmaleinsäureestergruppe, einer Monoalkylmaleaminsäureamidgruppe, einer N-Hydroxysuccinimidylestergruppe, einer Isothiocyanatgruppe, einer Aziridingruppe oder einer Maleinimidgruppe. Eine besonders bevorzugte proteinbindende Gruppe ist die Maleinimidgruppe.

Wirkstoff und Spacermolekül sind durch eine Esterbindung zwischen der 20-Hydroxygruppe des Wirkstoffs und einer Carboxylgruppe des Spacermoleküls verbunden. Die Bindung zwischen Spacermolekül und dem Crosslinker besteht aus einer Ester- oder Amidbindung zwischen einer Hydroxy-, Amino- oder Methylaminogruppe des Spacermoleküls und einer Carboxylgruppe des Crosslinkers.

Eine wesentliche Eigenschaft der erfindungsgemäßen CPT-Derivate besteht darin, dass die Bindungen zwischen Wirkstoff und Spacermolekül sowie zwischen Spacermolekül und dem Crosslinker hydrolytisch oder enzymatisch spaltbar sind, wodurch eine kontrollierte Freisetzung des Wirkstoffs, eines α-Aminoacyl-Wirkstoff-Derivates oder eines α-Hydroxyacyl-Wirkstoff-Derivates ermöglicht wird.

Die Herstellung der erfindungsgemäßen CPT-Derivate erfolgt bevorzugt durch Kondensation von Camptothecin-20-O-acyl-Derivaten der allgemeinen Formel

in der
R₁ = H oder OH
R₂ = H, NH₂, NO₂ oder N,N-Dimethylaminomethyl
R₃ = H oder Ethyl
R₄ = H, Alkyl oder Aryl
R₅ = H, Alkyl oder Aryl, gegebenenfalls substituiert
X = NH, NCH₃ oder O
bedeuten, mit heterobifunktionellen Crosslinkern der allgemeinen Formel

worin
n = 0 bis 5
m = 0 bis 6
PM = proteinbindende Gruppe
bedeuten.

Dabei werden als Reagenzien zur Aktivierung der Carboxylgruppe des Crosslinkers vorzugsweise N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, N,N'-Diisopropylcarbodiimid, (Benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium-Hexafluorophosphat oder 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid unter Zusatz gängiger Katalysatoren bzw. Hilfsbasen wie z.B. Trialkylamine, Pyridin, 4-Dimethylaminopyridin (DMAP) oder Hydroxybenzotriazol (HOBt) eingesetzt. Die Umsetzung erfolgt zweckmäßig in einem polaren organischen Lösungsmittel, vorzugsweise in Dichlormethan, N,N-Dimethylformamid und Tetrahydrofuran. Die Umsetzungen werden zweckmäßig bei Temperaturen zwischen –10°C bis Raumtemperatur durchgeführt, wobei die Reaktionszeit normalerweise zwischen 3 und 48 Stunden liegt. Die Aufarbeitung kann z.B. durch Umkristallisation aus Methanol oder Ethanol erfolgen. Bei Umsetzung eines Crosslinkers mit einer Kettenlänge von mehr als 14 (Methylen-Einheiten + Sauerstoff-Atome) erfolgt die Aufarbeitung besser durch Säulenchromatographie z.B. an Kieselgel. Hierbei verwendete Laufmittel sind bevorzugt Chloroform-Methanol-Gemische, die gegebenenfalls Zusätze von Aminen oder Carbonsäuren enthalten können.

Nach einer bevorzugten Ausführungsweise wird Camptothecin-20-O-glycinat-Trifluoracetat mit einer Maleinimidocarbonsäure, welche ein Oligo(ethylenglykol)-Rückgrat aufweist, unter Einsatz von 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid umgesetzt (siehe Beispiele 1 und 2). Durch die bevorzugte Verwendung eines Crosslinkers mit einem Oligo(ethylenglykol)-Rückgrat lässt sich die Wasserlöslichkeit gegenüber CPT signifikant steigern. Solche Verbindungen weisen typischerweise eine gegenüber CPT bis zu 27-fach gesteigerte Löslichkeit in isotonischer Kochsalzlösung auf (siehe Beispiel 3).

Die erfindungsgemäßen proteinbindenden Camptothecin-Derivate werden parenteral, bevorzugt intravenös appliziert. Dazu werden die erfindungsgemäßen CPT-Derivate als Lösungen, Feststoffe oder Lyophilisate, gegebenenfalls unter Verwendung üblicher Hilfsstoffe bereitgestellt. Solche Hilfsstoffe sind beispielsweise Polysorbate, Glucose, Lactose, Mannitol, Dextrane, Zitronensäure, Tromethamol, Triethanolamin, Aminoessigsäure und/oder synthetische Polymere. Bevorzugt werden die erfindungsgemäßen CPT-Derivate in einem isotonischen Puffer gelöst appliziert. Die Löslichkeit des CPT-Derivates kann gegebenenfalls durch pharmazeutische Lösungsmittel wie etwa 1,2-Propandiol, Ethanol, Isopropanol, Glycerol und/oder Poly(ethylenglykol) mit einem Molekulargewicht von 200 bis 600 g/mol, bevorzugt Poly(ethylenglykol) mit einem Molekulargewicht von 600 g/mol, und/oder Löslichkeitsvermittler wie z.B. Tween 80, Cremophor oder Polyvinylpyrrolidon verbessert werden.

Ein wesentliches Merkmal der erfindungsgemäßen CPT-Derivate liegt in einer raschen kovalenten Bindung an Serumproteine über die proteinbindende Gruppe, wodurch eine makromolekulare Transportform des Wirkstoffs generiert wird. Von Serumproteinen wie Transferrin, Albumin und LDL ist eine erhöhte Aufnahme in Tumorgewebe bekannt (Kratz F.; Beyer U. Drug Delivery 1998, 5, 281–299), sodass diese im Rahmen der Erfindung als endogene Träger für Zytostatika herangezogen werden können. Ein besonders bevorzugtes Serumprotein ist zirkulierendes Humanserumalbumin (HSA), das mit einer durchschnittlichen Konzentration von 30 bis 50 g/L die Hauptprotein-Komponente des menschlichen Blutes bildet (Peters T. Adv. Protein Chem. 1985, 37, 161–245) und eine freie Cysteingruppe (Cystein-34-Gruppe) an der Oberfläche des Proteins aufweist, welche zur Anbindung von thiolbindenden Gruppen wie Maleinimiden oder Disulfiden geeignet ist (WO 00/76551). Dass erfindungsgemäße Maleinimid-funktionalisierte CPT-Derivate schnell und selektiv an HSA binden, zeigt Beispiel 4. Die Reaktion der neuen CPT- Derivate mit Serumproteinen kann auch extrakorporal durchgeführt werden, z.B. mit einer zur Infusion vorgesehenen Albumin-, Blut- oder Serummenge.

Gegenüber Camptothecin-Konjugaten mit synthetischen Polymeren als Trägersystemen besitzen die der Erfindung zugrundeliegenden CPT-Derivate als niedermolekulare Verbindungen den Vorteil, chemisch eindeutig definiert zu sein.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung in Verbindung mit der beigefügten Zeichnung näher.

In der Zeichnung stellen dar:
1 ein Chromatogramm von humanem Blutplasma; bei 370 nm ist lediglich eine geringfügige Absorption zu beobachten und ein Chromatogramm von CPT-CH₂-6-Mal in Pufferlösung, bzw. CPT-CH₂-6-Mal, das zuvor 60 s mit humanem Plasma inkubiert wurde.

Beispiel 1

Herstellung von Camptothecin-20-O-[(20-maleinimido-3,6,9,12,15,18-hexoxaeicosanoyl)glycinat] (abgekürzt CPT-6-Mal)

Zu einer Suspension von Camptothecin-20-O-glycinat-Trifluoracetat (318 mg, 0.613 mmol), 0.919 mmol 20-Maleinimido-3,6,9,12,15,18-hexoxaeicosansäure und Triethylamin (256 μL, 1.838 mmol) in 5 mL wasserfreiem Dichlormethan wird 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid (235 mg, 0.919 mmol) unter Stickstoffatmosphäre als Feststoff gegeben und die entstandene Suspension drei Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wobei eine klare Lösung entsteht. Anschließend wird mit 50 mL Dichlormethan verdünnt, zweimal mit 20 mL 1N HCl und zweimal mit 20 mL Wasser gewaschen die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Nach säulenchromatographischer Reinigung des Rückstands (Chloroform/Methanol 30 : 1) erhält man 322 mg der Zielverbindung als blaßgelben wachsartigen Feststoff.

¹H-NMR (DMSO-d₆):
δ = 0.92 (t, J = 7.3 Hz, 3H, C18-H), 2.16 (q, J = 7.3 Hz, 2H, C19-H), 3.35–3.61 (m, 24H, NCH₂CH₂O, OCH₂CH₂O), 3.93 ('s', 2H, CH₂C(O)NH), 4.08/4.22 (dd, J_AB = 17.9 Hz, J_AX = 6.0 Hz, 2H, NHCH₂CO), 5.28 (s, 2H, C5-H), 5.50 (s, 2H, C17-H), 7.00 (s, 2H, C(O)CH=CHCO), 7.17 (s, 1H, C14-H), 7.71 ('t', J = 7.5 Hz, 1H, C10-H), 7.87 ('t', J = 7.2 Hz, 1H, C11-H), 8.12 (d, J = 7.7 Hz, 1H, C9-H), 8.17 (d, J = 8.6 Hz, 1H, C12-H), 8.21 (t, J = 6.0 Hz, 1H, NH), 8.68 (s, 1H, C7-H)
ESI-MS (4.0 kV, McOH): m/z (%) 829.3 ([M + Na]⁺, 100)

Beispiel 2

Herstellung von Camptothecin-20-O-[(21-maleinimido-4,7,10,13,16,19-hexoxauncosanoyl)glycinat] (abgekürzt CPT-CH₂-6-Mal)

Zu einer Suspension von Camptothecin-20-0-glycinat-Trifluoracetat (318 mg, 0.613 mmol), 0.919 mmol 21-Maleinimido-4,7,10,13,16,19-hexoxauncosansäure und Triethylamin (256 μL, 1.838 mmol) in 5 mL wasserfreiem Dichlormethan wird 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid (235 mg, 0.919 mmol) unter Stickstoffatmosphäre als Feststoff gegeben und die entstandene Suspension drei Stunden bei Raumtemperatur gerührt, wobei eine klare Lösung entsteht. Anschließend wird mit 50 mL Dichlormethan verdünnt, zweimal mit 20 mL 1N HCl und zweimal mit 20 mL Wasser gewaschen, die organische Phase über Magnesiumsulfat getrocknet und das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Nach säulenchromatographischer Reinigung des Rückstands (Chloroform/Methanol 30 : 1) erhält man 322 mg der Zielverbindung als blaßgelben wachsartigen Feststoff.

¹H-NMR (DMSO-d₆):
δ = 0.93 (t, J = 7.3 Hz, 3H, C18-H), 2.16 (q, J = 7.3 Hz, 2H, C19-H), 2.38 ('t', J = 6.4 Hz, 2H, CH₂C(O)NH), 3.29–3.66 (m, 26H, NCH₂CH₂O, OCH₂CH₂O), 4.01/4.20 (dd, J_AB = 18.3 Hz, J_AX = 5.8 Hz, 2H, NHCH₂CO), 5.26 (s, 2H, C5-H), 5.50 (s, 2H, C17-H), 7.01 (s, 2H, C(O)CH=CHCO), 7.16 (s, 1H, C14-H), 7.70 ('t', J = 7.5 Hz, 1H, C10-H), 7.87 ('t', J = 7.8 Hz, 1H, C11-H), 8.11 (d, J = 7.5 Hz, 1H, C9-H), 8.17 (d, J = 8.7 Hz, 1H, C12-H), 8.41 (t, J = 5.8 Hz, 1H, NH), 8.67 (s, 1H, C7-H)
ESI-MS (4.0 kV, MeOH): m/z (%) 843.2 ([M + Na]⁺, 100)

Beispiel 3

Löslichkeit von CPT-CH₂-6-Mal in isotonischer Kochsalzlösung

Durch Messungen an einem Spektrophotometer bei 370 nm wurde die Löslichkeit von CPT-CH₂-6-Mal und die von CPT in isotonischer Kochsalzlösung bestimmt:

Beispiel 4

Bindung von CPT-CH₂-6-Mal an HSA im HumanplasmaHumanplasma wurde durch Chromatographie an einer C₁₈-RP-HPLC-Säule (Symmetry^® 300–5 4.6 × 250 mm von Waters) durch Gradientenelution (Fluss: 1.2–1.8 mL/min; Eluent A: 30% 200 mM K₂HPO₄ pH 7,70% Acetonitril; Eluent B: 72.5% 200 mM K₂HPO₄ pH 7, 28.5% Acetonitril; Gradient: 26 min Eluent B isokrat., 15 min 0–100% Eluent A linear) in seine Protein-Bestandteile aufgetrennt und bei 280 nm detektiert (siehe 1). HSA erscheint dabei als scharfer Peak mit einer Retentionszeit von ca. 37 min, während bei der CPT-spezifischen Wellenlänge λ = 370 nm keine nennenswerte UV-Absorption erfolgt (nicht abgebildet). CPT-CH₂-6-Mal läßt sich unter identischen chromatographischen Bedingungen mit einer Retentionszeit von ca. 23 min eluieren (siehe 1, Detektion bei 370 nm).

Nun werden 1.64 mg CPT-CH₂-6-Mal in 1.0 mL Phosphatpuffer (0.15 M NaCl, 0.004 M Natriumphosphat, pH 6.5) bei Raumtemperatur gelöst (2000 μM Lösung) und 250 μL dieser Lösung mit 1.0 mL Humanplasma 3 min lang bei 37°C inkubiert und die Probe anschließend auf die C₁₈-RP-HPLC-Säule aufgetragen (Methode s. oben). Bei Messung der Absorption bei 370 nm zeigt sich, dass der überwiegende Teil von CPT-CH₂-6-Mal an Albumin gebunden vorliegt (siehe 1).

Beispiel 5

Nachweis der kontrollierten Freisetzung von CPT aus den HSA-Konjugaten von CPT-CH₂-6-Mal und CPT-6-Mal

Die Halbwertszeiten der durch Inkubation von CPT-CH₂-6-Mal und CPT-6-Mal mit humanem Blutplasma generierten HSA-Konjugate wurden mit der in Beispiel 3 beschriebenen HPLC-Methode durch Messung der Abnahme der Peakflächen (λ = 370 nm) bestimmt:
Konjugat mit CPT-6-Mal: t_1/2 = 9 h, Konjugat mit CPT-CH₂-6-Mal: t_1/2 = 15 h Somit findet eine kontrollierte Freisetzung des Wirkstoffs aus den HSA-Konjugaten statt.

Beispiel 6

Wirksamkeit von CPT-CH₂-6-Mal und CPT-6-Mal in vivo

Die unten aufgeführten biologischen Daten verdeutlichen eine erhöhte in-vivo-Wirksamkeit von CPT-CH₂-6-Mal und CPT-6-Mal im Vergleich zu freiem Camptothecin.
Tiere: Nacktmäuse Tumormodell: HT 29(Kolorektalkarzinom)
Therapie: Tag 13, 17, 21, 25; i. v. (CPT und Derivate in jeweils 0.15–0.3 mL isoton. Kochsalzlösung/Tween 80 9 : 1)

Claims

Camptothecin-Derivate der allgemeinen Formel I:
worin R₁ = H oder OH; R₂ = H, NH₂, NO₂ oder N,N-Dimethylaminomethyl; R₃ = H oder Ethyl; R₄ = H, Alkyl oder Aryl; R₅ = H, gegebenenfalls substituiertes Alkyl oder Aryl; X = NH, NCH₃ oder O; n = 0 bis 5; m = 0 bis 6; PM eine proteinbindende Gruppe bedeutet.
Camptothecin-Derivat gemäß Anspruch 1, wobei PM eine Maleinimidgruppe, eine 2-Dithiopyridylgruppe, eine Halogenacetamidgruppe, eine Halogenacetatgruppe, eine Disulfidgruppe, eine Acrylsäureestergruppe, eine Monoalkylmaleinsäureestergruppe, eine Monoalkylmaleaminsäureamidgruppe, eine N-Hydroxysuccinimidylestergruppe, eine Isothiocyanatgruppe oder eine Aziridingruppe ist, die gegebenenfalls substituiert sein kann.
Camptothecin-Derivat nach Anspruch 2, wobei PM eine Maleinimidgruppe ist, die gegebenenfalls substituiert sein kann.
Camptothecin-Derivat nach Anspruch 1, worin R₁ = OH, R₂ = N,N-Dimethylaminomethyl und R₃ = H ist.
Camptothecin-Derivat nach Anspruch 3, worin R₁ = H, R₂ = H und R₃ = H ist.
Camptothecin-Derivat nach Anspruch 5, worin R₄ = H, R₅ = Methyl, Hydroxymethyl, Phenylmethyl, 4-Hydroxyphenylmethyl, Imidazolylmethyl, Indolylmethyl, CH(CH₃)₂, CH₂CH(CH₃)₂, CH(CH₃)CH₂CH₃, CH(OH)CH₃, CH₂COOH, CH₂CH₂COOH, CH₂CONH₂, CH₂CH₂CONH₂, CH₂(CH₂)₃NH₂, CH₂CH₂SCH₃ oder CH₂(CH₂)₂NHC(NH)NH₂ ist und X = NH ist.
Camptothecin-Derivat gemäß Anspruch 5, worin R₄ = H, R₅ = H und X = NCH₃ ist.
Camptothecin-Derivat gemäß Anspruch 5, worin R₄ = H, R₅ = H und X = NH ist.
Camptothecin-Derivat gemäß Anspruch 8, worin n < 2 und m = 3 bis 6 ist.
Verfahren zur Herstellung von Camptothecin-Derivaten nach einem der vorhergehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass ein Camptothecin-20-O-acyl-Derivat der allgemeinen Formel II
in der R₁ = H oder OH R₂ = H, NH₂, NO₂ oder N,N-Dimethylaminomethyl R₃ = H oder Ethyl R₄ = H, Alkyl oder Aryl R₅ = H, Alkyl oder Aryl, gegebenenfalls substituiert X = NH, NCH₃ oder O bedeuten, wobei etwaige nukleophile Gruppen an R₁, R₂ und R₅ gegebenenfalls durch geeignete Schutzgruppen geschützt vorliegen, mit einem heterobifunktionellen Crosslinker der allgemeinen Formel III
in der n = 0 bis 5 m = 0 bis 6 PM = eine proteinbindende Gruppe bedeuten, in Gegenwart von Carbonsäure-Aktivierungsreagenzien umgesetzt werden.
Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, dass als Carbonsäure-Aktivierungsreagenzien N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid, N,N'-Diisopropylcarbodiimid oder (Benzotriazol-1-yloxy)tris(dimethylamino)phosphonium-Hexafluorophosphat, am meisten bevorzugt 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid verwendet werden.
Verfahren gemäß Anspruch 10 oder 11, dadurch gekennzeichnet, dass man Camptothecin-20-O-glycinat-Trifluoracetat mit einer Maleinimidocarbonsäure der allgemeinen Formel IV
in der n = 0, 1 m = 1 bis 6 bedeuten, unter Einsatz von 2-Chlor-1-methylpyridiniumiodid umgesetzt wird.
Arzneimittel enthaltend ein Camptothecin-Derivat gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9, gegebenenfalls zusammen mit üblichen Hilfsstoffen und/oder pharmazeutischen Lösungsmitteln.
Verwendung eines Camptothecin-Derivates nach einem der Ansprüche 1 bis 9 zur Behandlung von Krebskrankheiten.
Verfahren zur Herstellung eines Arzneimittels für die Behandlung von Krebskrankheiten, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung gemäß einem der Ansprüche 1 bis 9 in eine therapeutisch annehmbare Lösung überführt.