DE102021104462B3

DE102021104462B3 - Verfahren zum abtrennen von blutzellen aus einer blut-probe

Info

Publication number: DE102021104462B3
Application number: DE102021104462.6A
Authority: DE
Inventors: Felix Fiedler; Stefan Müller
Original assignee: Technische Hochschule Luebeck Koerperschaft Des Oeffentlichen Rechts
Current assignee: Technische Hochschule Luebeck Koerperschaft Des Oeffentlichen Rechts
Priority date: 2021-02-24
Filing date: 2021-02-24
Publication date: 2022-08-11
Anticipated expiration: 2041-02-25

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Abtrennen von Blutzellen aus einer fließenden Blutprobe mit einem bestimmten HKT unter Verwendung einer Vorrichtung mindestens aufweisend:- einen Einlass (1),- einen Auslass (2) für mit Blutzellen angereichertes Fluid,- einen Auslass (3) für das Blutplasma,- eine Extraktionszone (4),- ein Ultraschallmittel (5), wobei- die Extraktionszone (4) über eine zentrale Kammer (6) und zwei weitere Kammern (7, 8) verfügt- die zentrale Kammer (6) durch Wände (9) von den beiden weiteren Kammern (7, 8) getrennt ist- die eine weitere Kammer (7) eine Breite BP1und einen sie durchströmenden Volumenstrom QP1aufweist,- die eine zweite weitere Kammer (8) eine Breite BP2und einen sie durchströmenden Volumenstrom QP2aufweist,- der Auslass (2) für mit Blutzellen angereichertes Fluid der zentralen Kammer verbunden ist, und- die beiden weiteren Kammern (7, 8) mit dem Auslass (3) für das Blutplasma verbunden sind, wobeidie Größenverhältnisse der Kammerbreiten KBVund das Volumenstromverhältnis KVSVan den Hämatokrit (HKT) der Blutproben angepasst sind.

Description

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Abtrennen von Blutzellen aus einer fließenden Blut-Probe.
Das Blut von Säugetieren und Menschen umfasst zelluläre Bestandteile und Blutplasma. Zu den zellulären Bestandteilen gehören rote und weiße Blutkörperchen sowie Thrombozyten. Das Blutplasma ist eine wässrige Lösung, welche Proteine, Salze, Nährstoffe, Hormone und gelöste Gase enthalten kann. Bei der optischen Bestimmung verschiedener Blutparameter erweisen sich die zellulären Bestandteile des Blutes als störend. Dieses gilt insbesondere für die roten Blutkörperchen, welche das optische Licht sehr stark streuen. Ein Maß für den Anteil der roten Blutkörperchen am Volumen des Blutes ist der Hämatokrit (HKT). Im Blut wird der HKT definiert als das Verhältnis des Volumens der Blutzellen zum Gesamtvolumen, welches der Summe aus Volumen der Blutzellen und Volumen des Blutplasmas entspricht.
Es werden daher Anstrengungen unternommen, die zellulären Bestandteile des Blutes von dem Blutplasma zu trennen. Prinzipiell kann so eine Trennung mit einer Zentrifuge oder Filtern vorgenommen werden. Für viele Anwendungen wäre es wünschenswert die Untersuchungen an einer fließenden Blut-Probe, ohne den Fluss zu unterbrechen, vorzunehmen.
Einige Verfahren nutzen für die Trennung die akustischen Eigenschaften von roten Blutzellen aus. So beschreibt unter anderem die WO 02/072235 A1 ein Verfahren zum Abtrennen suspendierter Teilchen aus einem Fluid mittels stehender Ultraschallwellen. Es wird im sogenannten Grundastkanal ein Stehwellenfeld erzeugt, das zu einer laminar schichtförmigen Aufteilung der Teilchen im Grundastkanal führt. Durch -im Wesentlichen senkrecht angeordnete- Auslässe können die aufkonzentrierten Teilchen in mehreren Schritten und Schichten entfernt werden.
Die DE 69 628 389 T2 beschreibt eine Trennvorrichtung für fließende Blutproben basierend auf Knoten des akustischen Drucks, die Abtrennung erfolgt hinter den Knoten, dabei werden dünne, verschiebbare Rohre zum Ansaugen verwendet. Als nachteilig erweist sich, dass eine vollständige Abtrennung der Blutzellen in einem Schritt nicht zwingend vorgesehen ist und so die Trennschritte je nach Erfolg unter Umständen mehrfach ausgeführt werden müssen, bis das gewünschte Ergebnis erzielt werden kann.
Die WO 2017/161384 A1 beschreibt die Trennung im Schallfeld multidimensionaler stehendender Wellen, es werden mehrere Trennstücke als Kaskade angeordnet. Die Schallwellen werden mit Hilfe von Piezokristallen direkt an einem Trennstück des Kanals erzeugt. Die Abtrennung von Target-Zellen aus Gemischen erfolgt, indem die Target-Zellen zunächst in einer stehenden Welle „gefangen“ und dann mit einem Lösungsmittel extrahiert werden.
Bei diesen Abtrennverfahren unter Einsatz von akustischen Wellen ist es nachteilig, dass die Abtrennung und damit auch die Fließgeschwindigkeit der Blut-Probe nicht an die Ausgangssituation - den vorliegenden HKT - angepasst ist. So ist es unter Umständen notwendig, die Trennschritte je nach Erfolg mehrfach auszuführen, bis das gewünschte Ergebnis vorliegt. Auch kann es vorkommen, dass es zu Verzögerungen kommt, da Trennschritte unnötigerweise durchlaufen werden, da das gewünschte Ergebnis bereits zu Beginn einer kaskadierten Abtrennung vorlag oder auch bei höherer Fließgeschwindigkeit hätte erzielt werden können.
Die US 2017/0049949 A1 beschreibt eine Vorrichtung zur Trennung von fließendem Blut auf akustophoretischem Wege. Die Trenneffizenz der Vorrichtung kann über die Volumenströme eingestellt werden, so konnte gezeigt werden, dass ein kleiner Gesamtvolumenstrom zu einer verbesserten Trennung führt. Es gelingt mit der Vorrichtung nicht eine an den bekannten HKT der Proben angepasste allgemeingültige Einstellung der Volumenströme zu finden, so dass ein vorbestimmtes optimales Trennergebnis oder gar die vollständige Abtrennung in nur einem Trennschritt erfolgen kann.
Weiter ist aus der DE 69 28 389 T2 eine Vorrichtung zur Einwirkung eines Ultraschallstrahls auf eine Probenlösung bekannt, die zu konzentrierende, zu trennende oder anzuordnende Teilchen enthält, die willkürliche Steuerung der räumlichen Verteilung der durch den Ultraschallstrahl erzeugten potentiellen Energie und das Konzentrieren, Trennen oder periodische Anordnen der Teilchen. Bestrahlungs-Ultraschallquellen zur Erzeugung von Ultraschallstrahlen sind auf einer Kammer vorgesehen, die die Lösung enthält, um eine Ultraschallintensitätsverteilung zur Erzeugung einer Positionspotentialenergieverteilung zu erzeugen, die verwendet wird, um auf jedes Teilchen eine Kraft auszuüben, die in eine vorbestimmte Richtung weitergeleitet wird, oder eine Kraft, die in einem vorbestimmten Bereich bleibt. Auf diese Weise kann eine spezifische räumliche Verteilung der potentiellen Energie durch Ultraschallstrahlen mit jeweils einer spezifischen Intensität, einer spezifischen Frequenz und einer spezifischen Phase oder durch einen Ultraschallstrahl, der durch die gegenseitige Überlagerung solcher Strahlen gebildet wird, realisiert werden. Ferner ist in einer Wandfläche der Kammer, die orthogonal zur Strömung der Probenlösung verläuft, mindestens ein Saugloch zur Rückgewinnung der abgeschiedenen Lösungsmittel oder Partikel vorgesehen.
Daher ist es Aufgabe der Erfindung ein Verfahren und eine Vorrichtung zur Verfügung zu stellen, welches es ermöglicht, die Abtrennung von Blutzellen aus einer fließenden Blut-Probe unter Einsatz von akustischen Wellen an den HKT der zu trennenden Blutprobe anzupassen.
Die Aufgabe der Erfindung wird gelöst durch ein Verfahren gemäß Hauptanspruch.
Das Verfahren zum Abtrennen von Blutzellen aus einer fließenden Blutprobe mit einem bestimmten HKT unter Verwendung einer Vorrichtung mindestens aufweisend:

- einen Einlass,
- einen Auslass für mit Blutzellen angereichertes Fluid,
- einen Auslass für das Blutplasma,
- eine Extraktionszone,
- ein Ultraschallmittel,

- die Extraktionszone über eine zentrale Kammer und zwei weitere Kammern verfügt
- die zentrale Kammer durch Wände von den beiden weiteren Kammern getrennt ist
- die eine weitere Kammer eine Breite B_P1 und einen sie durchströmenden Volumenstrom Q_P1 aufweist,
- die eine zweite weitere Kammer eine Breite B_P2 und einen sie durchströmenden Volumenstrom Q_P2 aufweist,
- der Auslass für mit Blutzellen angereichertes Fluid mit der zentralen Kammer verbunden ist und
- die beiden weiteren Kammern mit dem Auslass für das Blutplasma verbunden sind, ist dadurch gekennzeichnet, dass die Größenverhältnisse der Kammerbreiten K_BV und das Volumenstromverhältnis Kvsvan den HKT der Blutproben angepasst sind, wobei die Größenverhältnisse der Kammerbreiten K_BV entsprechend der folgenden Formel $K_{B V} = \frac{B_{z}}{(B_{P 1} + B_{P 2})} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{v s v}}$

_vsv

K_{v s v} = \frac{(Q_{P 1} + Q_{P 2})}{Q_{z}} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{B V}}

Eine prinzipielle Darstellung der für das erfindungsgemäße Verfahren zu nutzenden Vorrichtung befindet sich in , hierbei zeigt 1A eine isometrische Ansicht und 1B eine Draufsicht sowie weiter 1C eine Seitenansicht beim Schnitt in der Längsachse und 1D eine Ansicht von unten.
zeigt einen Schnitt der Extraktionszone der Vorrichtung. Die Extraktionszone ist so aufgebaut, dass die Kanalstruktur durch Wände in drei Kammern unterteilt wird. In der Extraktionszone erfolgt die Trennung der Blutzellen vom Blutplasma. Die Blutzellen konzentrieren sich im Druckknoten einer akustischen stehenden Welle (10). Da die Höhe aller Kammern durch die Kanalhöhe vorgegeben ist, wird nur die Breite der Kammern B_Z, P_P1 und B_P2 betrachtet, wobei sich B_P1 und B_P2 zu B_P addieren. Die Breite der zentralen Kammer B_Z wird durch die Breite des Auslasses für mit Blutzellen angereichertes Fluid (2) definiert. Die drei Kammern können durch Wände mit der Breite B_W1 und B_W2, wobei sich diese zu Bw addieren, voneinander getrennt werden, wobei Bw = 0 sein kann. Eine Schnittdarstellung der Extraktionszone mit den Breiten befindet sich in . Bei einer stehenden Welle (10), deckt die zentrale Kammer (6) den Wellenknoten und die Kammern (7, 8) die Wellenbäuche der stehenden Welle (10) ab.
Die Breiten der Kammern B_P1 und B_P2 addieren sich zu B_P: $B_{P} = B_{P 1} + B_{P 2}$
Für die Breite der zentralen Kammer B_Z ergibt sich: $B_{Z} = K_{B V} \cdot B_{P}$
Entsprechend gilt: $B P = \frac{1}{K_{B V}} \cdot B_{Z}$
Für die Erzeugung einer stehenden Welle innerhalb des Kanals ist eine entsprechende Frequenz f notwendig, die sich aus der Breite des Kanals B_K mit $B_{K} = B_{Z} + B_{P} + B_{W}$
wobei B_W die Breite der Wände zwischen den Kammern ist und die Schallgeschwindigkeit in Blut c_Blut = 1530 · ms^-1 beträgt, ergibt. $ƒ = \frac{c_{B l u t}}{2 \cdot B_{K}}$
Die roten Blutzellen sind im Wesentlichen rund und haben einen bikonkaven Querschnitt. Es ist somit nicht möglich, diese so zu konzentrieren, dass sich kein Blutplasma zwischen den Blutzellen befindet, damit ist eine genaue Kenntnis der Volumenverhältnisse in jedem Stadium der Verdichtung nicht möglich.
Überraschenderweise gelang es den Erfindern das Verhältnis der Volumenströme K_VSV durch die in Bezug auf das Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV abgestimmten Kammern an den HKT der fließenden Blutproben anzupassen.
Es gelang auf experimentellem Wege einen festen Wert K zu ermitteln, mit dessen Hilfe der Volumenstrom durch die zentrale Kammer (6) Q_Z gegenüber dem Volumenstrom Q_P durch die Kammern (7) und (8) an den HKT angepasst werden kann.
Wobei die Volumenströme durch die einzelnen Kammern (7) und (8) Q_P1 und Q_P2 sich zu Q_P addieren (Q_P = Q_P1 + Q_P2).
Für das Volumenstromverhältnis K_vsv gilt: $K_{v s v} = \frac{(Q_{P 1} + Q_{P 2})}{Q_{z}} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{B V}}$
Für Blut wurde K zu K=41,86 bestimmt.
Die Anwendung des erfindungsgemäßen Verfahrens zur Abtrennung der Blutzellen ist für den Fall gegeben, dass sich Blutzellen in der einströmenden Flüssigkeit am Einlass befinden. Dementsprechend ist HKT > 0 definiert. Würden sich keine Blutzellen am Einlass befinden wäre kein Volumenstrom in der zentralen Kammer notwendig. Es folgt für den Volumenstrom Volumenstrom Q_Z > 0. Daraus folgt weiter, dass ein entsprechendes Volumenstromverhältnis und Kammern für die Anwendung des Verfahrens notwendig sind, woraus sich K_vsv > 0 und K_BV > 0 ergibt.
Die Trennleistung des erfindungsgemäßen Verfahrens ist somit gegenüber denen des Standes der Technik stark verbessert, es ist nunmehr möglich bei bekanntem HKT -bereits durch einen einzigen Trennschritt- zu dem gewünschten Ergebnis, der Abtrennung der Blutzellen, zu kommen.
In einer besonderen Ausführungsform des erfindungsgemäßen Verfahrens erfolgt die Abtrennung der Blutzellen aus einer Blutprobe in einem Trennschritt mit einmaligem Passieren der erfindungsgemäßen Vorrichtung.
Für die vollständige Abtrennung der Blutzellen mit einmaligem Passieren sind in Abhängigkeit der gewählten Vorbedingungen zwei Vorgehensweisen als Ausführungsformen möglich:

1. Die Volumenströme beim Passieren der erfindungsgemäßen Vorrichtung und K sind bekannt. Es wird bei dieser Ausführungsform in Abhängigkeit vom HKT das notwendige Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV festgelegt. Dafür wird das Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV entsprechend der folgenden Formel: $K_{B V} = \frac{B_{z}}{(B_{P 1} + B_{P 2})} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{v s v}}$
für ein festes Volumenstromverhältnis K_vsv bestimmt. Tabelle 1 zeigt exemplarisch das zu wählende Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV bei entsprechendem Hämatokrit für den Fall K_vsv = 1

HKT	K _BV
0,1	0,2150
0,2	0,0956
0,3	0,0557
0,4	0,0358
0,5	0,0239
0,6	0,0159

Eine weitere Möglichkeit liegt in der Festlegung der Volumenströme in den Kammern und dem draus folgenden Volumenstromverhältnis. Bei bekanntem K ist es anschließend möglich die Kammerbreiten an den HKT der Blutprobe anzupassen. Dafür wird das Volumenstromverhältnis K_vsv festgelegt. Für ausgewählte HKT ergibt sich mit dem Korrekturfaktor K und dem festgelegten Volumenstromverhältnis das Kammerbreitenverhältnis.
Für ausgewählte K_vsv ergeben sich mit dem Korrekturfaktor K und einem HKT von 0,4 folgende Kammerbreitenverhältnisse. Tabelle 2: Kammerbreitenverhältnis bei ausgewählten Volumenstromverhältnissen und einem Hämatokrit von 0,4

K _VSV K _BV

9,00 0,0040

4,00 0,0090

2,33 0,0154

1,50 0,0239

1,00 0,0358

0,67 0,0538

0,43 0,0836

0,25 0,1433

0,11 0,3225
Bei einer Auslegung der erfindungsgemäßen Vorrichtung bei der zuerst das Volumenstromverhältnis festgelegt wird und anschließend das Kammerbreitenverhältnis bestimmt wird, ist eine Bestimmung des Kammerbreitenverhältnisses für ein Volumenstromverhältnis von Null nicht möglich. In diesem Fall wären die Kammern 7 und 8 nicht notwendig. Dementsprechend ist es notwendig das B_P > 0.
2. Kammerbreiten und das Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV der erfindungsgemäßen Vorrichtung und K sind bekannt. Es wird bei dieser Ausführungsform in Abhängigkeit vom HKT das benötigte Volumenstromverhältnis K_VSV festgelegt.

Für ausgewählte HKT ergeben sich mit dem Korrekturfaktor K und einem Kammerbreitenverhältnis von K_BV = 0,5 folgende Volumenstromverhältnisse. Tabelle 3: Volumenstromverhältnis in Abhängigkeit vom Hämatokrit

HKT	K	1/K	K _VSV - Q _P / Q _Z
0,1	41,86	0,0239	0,4300
0,2	41,86	0,0239	0,1911
0,3	41,86	0,0239	0,1115
0,4	41,86	0,0239	0,0717
0,5	41,86	0,0239	0,0478
0,6	41,86	0,0239	0,0319

zeigt die CAD-Fertigungszeichnung einer erfindungsgemäßen Vorrichtung. zeigt ein Foto der erfindungsgemäßen Vorrichtung welche mit Hilfe des selektiven LASER-Ätzens (SLE Technologie) aus Quarzglas gefertigt wurde.

	Konstruiert	Real
Breite	48 mm	46,7 mm
Länge	50 mm	50,5 mm
Gesamthöhe	10,2 mm	10,2 mm
Breite Hauptkanal	360 µm	330 µm
Höhe Hauptkanal	180 µm	nicht messbar
Freie Weglänge bis zur Extraktionszone 21,95 mm

Die Allgemeinheit der Lehre nicht einschränkend wird im Folgenden die Abtrennung von Blutzellen aus einer Blut-Probe mit dem erfindungsgemäßen Verfahren beschrieben.
Die Kanalstruktur und die Extraktionszone wird mit Hilfe des selektiven laserinduzierten Ätzens (SLE - slective laserinduced etching) hergestellt. Das Verfahren arbeitet in zwei Prozessschritten. Im ersten Schritt wird das Glas in den gewünschten Bereichen mit einem fokussiertem Laserstrahl belichtet und somit strukturell verändert. Im zweiten Prozessschritt werden die zusammenhängenden modifizierten Bereiche nasschemisch aus dem Glas herausgeätzt.
Das Messystem arbeitet mit einer Rollenpumpe (Hersteller: Ismatec, Modell: Reglio ICC). Die Rollenpumpe besitzt mehrere Kanäle, wobei je einer mit dem Auslass für das Blutplasma (3) und einer am Auslass für die Blutzellen (2) verbunden ist. Durch die Rollenpumpe wird eine negative Druckdifferenz im System erzeugt und es stellt sich, entsprechend der gewählten Umdrehungszahl der Rollenpumpe und der verwendeten Schläuche (Hersteller: IDEX Health and Science, Art.-Nr.: SC304, Innendurchmesser 0,38 mm), ein Volumenstrom in den Kammern ein. Die Blutprobe wird in einen Probenport (Eigenbau) gegeben, der mit dem Einlass (1) verbunden ist. Durch die negative Druckdifferenz wird die Blutprobe in das System gezogen. Bevor sich die Blutprobe in der Vorrichtung befindet, wird das Ultraschallmittel (Hersteller: PI Ceramic GmbH, Modell: 000046033) (1) mit der benötigten Frequenz für eine stehende Welle in Schwingungen versetzt. Für die Ansteuerung wird eine Verstärkerschaltung verwendet die eine Wechselspannung von 24 V mit der entsprechenden Frequenz erzeugt. Die Blutzellen sammeln sich im Druckknoten und werden über die mittlere Kammer vom Blutplasma extrahiert. Die prinzipielle Funktionsweise ist in dargestellt. In ist eine Aufnahme der erfindungsgemäßen Vorrichtung bei Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens bei verschiedenen HKT zu sehen, K_VSV=1, K_BV= 0,5 a HKT=0,1, b HKT=0,2, c HKT=0,3 und d HKT=0,4
Abbildungsverzeichnis - Es zeigen:

: Prinzipielle Darstellung der erfindungsgemäßen Vorrichtung

A

isometrische Ansicht

B

Draufsicht

C

Seitenansicht Schnitt in der Längsachse

D

Ansicht von unten
: Schnittdarstellung der Extraktionszone
: Schnittdarstellung der Extraktionszone mit eingezeichneten Breiten
: Prinzipielle Darstellung der Funktionsweise der erfindungsgemäßen Vorrichtung
: Konstruktionszeichnung einer Durchflusszelle mit der erfindungsgemäßen Vorrichtung
: Bild der Durchflusszelle und Aufnahmen der Extraktionszone im Gebrauch (rechtes Bild)

Bezugszeichenliste

1: Einlass
2: Auslass für mit Blutzellen angereichertes Fluid
3: Auslass für Blutplasma
4: Extraktionszone
5: Ultraschallmittel
6: zentrale Kammer mit der Breite B_Z
7: Kammer links mit der Breite B_P1
8: Kammer rechts mit der Breite B_P2
9: Wände zwischen den Kammern
10: stehende Welle
11: Blutzellen

Claims

Verfahren zum Abtrennen von Blutzellen aus einer fließenden Blutprobe mit einem bestimmten HKT unter Verwendung einer Vorrichtung mindestens aufweisend: - einen Einlass (1), - einen Auslass (2) für mit Blutzellen angereichertes Fluid, - einen Auslass (3) für das Blutplasma, - eine Extraktionszone (4), - ein Ultraschallmittel (5), wobei - die Extraktionszone (4) über eine zentrale Kammer (6) und zwei weitere Kammern (7, 8) verfügt - die zentrale Kammer (6) durch Wände (9) von den beiden weiteren Kammern (7, 8) getrennt ist - die eine weitere Kammer (7) eine Breite B_P1 und einen sie durchströmenden Volumenstrom Q_P1 aufweist, - die eine zweite weitere Kammer (8) eine Breite B_P2 und einen sie durchströmenden Volumenstrom Q_P2 aufweist, - der Auslass (2) für mit Blutzellen angereichertes Fluid der zentralen Kammer verbunden ist, und - die beiden weiteren Kammern (7, 8) mit dem Auslass (3) für das Blutplasma verbunden sind, dadurch gekennzeichnet, dass die Größenverhältnisse der Kammerbreiten K_BV und das Volumenstromverhältnis K_VSV an den Hämatokrit (HKT) der Blutproben angepasst sind wobei die Größenverhältnisse der Kammerbreiten K_BV entsprechend der folgenden Formel $K_{B V} = \frac{B_{z}}{(B_{P 1} + B_{P 2})} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{v s v}}$
und das Volumenstromverhältnis K_vsv entsprechend der folgenden Formel $K_{v s v} = \frac{(Q_{P 1} + Q_{P 2})}{Q_{z}} = \frac{1}{K} \cdot \frac{(1 - H K T)}{H K T \cdot K_{B V}}$
angepasst sind, wobei der Faktor K = 41,86 beträgt.
Verfahren nach dem vorangehenden Anspruch, dadurch gekennzeichnet, dass die Abtrennung der Blutzellen mit einmaligem Passieren der Vorrichtung vollständig erfolgt.
Verfahren nach Anspruch 1 oder 2, dadurch gekennzeichnet, dass das Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV in Abhängigkeit vom HKT anhand einer Tabelle HKT K _BV 0,1 0,2150 0,2 0,0956 0,3 0,0557 0,4 0,0358 0,5 0,0239 0,6 0,0159

festgelegt ist.
Verfahren nach Anspruch 1, 2 oder 3, dadurch gekennzeichnet, dass bei einem Größenverhältnis der Kammerbreiten K_BV von 0,5 das Volumenstromverhältnis K_vsv anhand folgender Tabelle HKT K 1/K K _VSV = Q _P / Q _Z 0,1 41,86 0,0239 0,4300 0,2 41,86 0,0239 0,1911 0,3 41,86 0,0239 0,1115 0,4 41,86 0,0239 0,0717 0,5 41,86 0,0239 0,0478 0,6 41,86 0,0239 0,0319

festgelegt ist.