DD151005A3 - PROCESS FOR THE CONSERVATION AND DISPOSAL OF MICROORGANISMS - Google Patents

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DD151005A3
DD151005A3 DD21579879A DD21579879A DD151005A3 DD 151005 A3 DD151005 A3 DD 151005A3 DD 21579879 A DD21579879 A DD 21579879A DD 21579879 A DD21579879 A DD 21579879A DD 151005 A3 DD151005 A3 DD 151005A3
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fermentation
separation
microorganisms
propylene oxide
ethylene oxide
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DD21579879A
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Gustav-Adolf Luebbert
Guenter Heidenreich
Norbert Bienek
Ursula Reiter
Reingard Klinger
Joachim Bauch
Herbert Gentzsch
Original Assignee
Petrolchemisches Kombinat
Allunionsforschungsinst
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  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Zuechtung und Abtrennung von Mikroorganismen, wobei die Zuechtung in Gegenwart einer selbstaendigen dispergierten Oelphase erfolgt. Die Anwendung nichtionogener Tenside auf der Basis von Addukten aus Propylenoxid und Aethylenoxid als Fermentations-und Separationshilfsmittel ist allgemein bekannt. Optimale wirksame Eigenschaften werden aber vornehmlich als Fermentationshilfsmittel erreicht. Um die spezifischen Leistungsparameter durch Anwendung der Addukte aus Aethylenoxid-Propylenoxid auch in der Stufe der Seperation weiter zu verbesserns, wurde gefunden, dasz Nukleinsaeuren oder Nukleotide, die leicht aus Mikroorganismen abgetrennt werden koennen und bei ihrem alleinigen Einsatz fuer die Fermentation oder Separation keine positiven Wirkungen zeigen, in Kombination mit sAethylenoxid-Propylenoxid sowohl in der Fermentation als auch in der Separation als Hilfsmittel dienen koennen.The invention relates to a method for culturing and separating microorganisms, wherein the cultivation takes place in the presence of a self-dispersed oil phase. The use of nonionic surfactants based on adducts of propylene oxide and ethylene oxide as a fermentation and separation aid is well known. Optimal effective properties are achieved primarily as a fermentation aid. In order to further improve the specific performance parameters by using the adducts of ethylene oxide-propylene oxide also in the stage of the separation, it has been found that nucleic acids or nucleotides which can be easily separated from microorganisms and when used alone for fermentation or separation have no positive effects show, in combination with sAethylenoxid-propylene oxide both in the fermentation and in the separation can serve as an aid.

Description

2 157982 15798

Titel der ErfindungTitle of the invention

Verfahren zur Züchtung und Abtrennung von MikroorganismenProcess for growing and separating microorganisms

Anwendungsgebiet der ErfindungField of application of the invention

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Züchtung und Ab-. trennung von Mikroorganismen, wobei die Züchtung in Gegenwart einer selbständigen dispergierten ölphase erfolgt.The invention relates to a method for breeding and Ab-. separation of microorganisms, wherein the cultivation takes place in the presence of a self-dispersed oil phase.

Die Erfindung ist anwendbar bei der Züchtung und Abtrennung von Mikroorganismen für die Erzeugung eiweißhaltiger oder anderer wertvoller Produkte»The invention is applicable to the growth and separation of microorganisms for the production of proteinaceous or other valuable products »

Charakteristik der bekannten LösungenCharacteristic of the known solutions

Allgemein bekannt ist die Anwendung bestimmter nichtionogener Tenside als Fermentationshilfsmittel zur Verbesserung der Stoffaustauschvorgänge aerober Fermentationsprozesse nach DD-PS 36,727* Desweiteren ist ein Verfahren bekannt nach DE-OS 2,544*625 und der britischen Patentschrift 1»499»118, bei der das gleiche Fermentationshilfsmittel auch zur Abtrennung der ölphase aus der Mikroorganismensuspension vorteilhaft als einziges Separationshilfsmittel genutzt wird.The use of certain nonionic surfactants as fermentation aids for improving the mass transfer processes of aerobic fermentation processes according to DD-PS 36,727 * is also well known. Furthermore, a process is known from DE-OS 2,544 * 625 and British Patent Specification 1 »499» 118, in which the same fermentation aid is also known for separation of the oil phase from the microorganism suspension is advantageously used as the only separation aid.

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- *- 2 15798- * - 2 15798

Bei diesem Verfahren handelt es sich im Falle des alleinig verwendeten Hilfsmittels sowohl für die Züchtung (Fermentation) als auch für die Abtrennung (Separation) um ein Addukt aus Propylenoxid und Äthylenoxid mit einem mittleren Molekulargewicht von 1750 - 2ü20e Dieser Hilfsstoff wird normalerweise nur als Fermentationshilfsmittel wirksameThis process, in the case of the sole auxiliary used for both breeding (fermentation) and separation (separation), is an adduct of propylene oxide and ethylene oxide with an average molecular weight of 1750-220 e. This excipient is normally used only as a fermentation aid effective

Um diesen Hilfsstoff auch als Separationshilfsmittel für die Ölaotrennung wirken zu lassen, wird gemäß o· g· Patentschriften die Konzentration erhöht und die Separation unmittelbar nach Erwärmung auf 60 - 90 0C durchgeführt* Der Bedarf an diesem Hilfsmittel in den angegebenen Mengen "bis zu 2 g/kg führt zu einer merklichen Kostenbelastung des Verfahrens·In order to make this excipient also act as a separation tool for Ölaotrennung, the concentration is increased in accordance o · g · patents and the separation immediately after heating to 60 - carried out 90 0 C * The need for this tool in the stated amounts of "up to 2 g / kg leads to a significant cost burden of the process ·

Außerdem treten meßbare Anteile des o. g· Polyäthylenoxid-Propylenoxid-Adduktes bei 60 - 90 0C in die ölphase über, falls die Aufgabe der ölabtrennung besteht« Für bestimmte Anwendungsfälle des weiterzuverwendenden Öles kann die Anwesenheit von Polyäthylenoxid-Propylenoxid-Addukten nur in bestimmten Mengen toleriert werden, so daß eine Entfernung mittels zusätzlicher Verfahrensstufen notwendig wird. Diesen Nachteil gibt es ebenso für biogene hochmolekulare Tenside oder Tensidgemische, die für den gleichen Verwendungszweck eingesetzt werden. Weiterhin ist nach DD-Patent 104-o099 ein Verfahren bekannt, nach dem für den Fermentations- und Separationsprozeß vorteilhaft eine Kombination zweier, auf chemischem Wege synthetisierte Tenside eingesetzt werden.In addition, measurable proportions of the o. G · polyethylene oxide-propylene oxide adduct at 60 - 90 0 C in the oil phase, if the task of oil separation exists «For certain applications of the oil to be used, the presence of polyethylene oxide-propylene oxide adducts only in certain Quantities are tolerated, so that a removal by means of additional process steps is necessary. This disadvantage also exists for biogenic high molecular surfactants or surfactant mixtures which are used for the same purpose. Furthermore, according to DD patent 104-099 , a process is known according to which a combination of two chemically synthesized surfactants is advantageously used for the fermentation and separation process.

Es hat sich jedoch für die Herstellung von eiweißhaltigen Produkten oder anderer Wertstoffe aus Mikroorganismen als Nachteil erwiesen, Tenside als Hilfsmittel einzusetzen, da diese an den Zellwänden der Mikroorganismen adsorbiert werden und den weiteren Verarbeitungsprozeß stören können oder in den Endprodukten unerwünscht sinde However, it has proved to be a disadvantage for the production of protein-containing products or other recyclables from microorganisms to use surfactants as adjuvants, since they are adsorbed on the cell walls of microorganisms and can interfere with the further processing or are undesirable in the final products e

215798215798

Insgesamt ist auch aus ökonomischer und betriebstechnischer Sicht ein hoher Bedarf an Fremdhilfsinitteln, wie sie Tenside bekanntlich darstellen, prinzipiell von Nachteil« - · ·,. ,-. ·>.. .·.. .· ·. ·. -. -.· ··.'. ..: ·. ' Overall, from an economic and operational point of view, a high demand for foreign auxiliary agents, as they are known to surfactants, in principle from disadvantage «- · ·,. -. ·> ... · · · · ·. ·. -. -. · ··. '. ..: ·. '

Ziel der Erfindung Aim of the invention

Ziel der Erfindung ist die Senkung des Bedarfs an Hilfsmitteln der Äthylenoxid-Propylenoxid-Adduktklasse für den Fermentations- und Separationsprozeß bei gleichbleibenden oder verbesserten spezifischen Leistungsparametern dieser Verfahrensstufen.The aim of the invention is to reduce the need for adjuvants of the ethylene oxide-propylene oxide adduct class for the fermentation and separation process with constant or improved specific performance parameters of these process stages.

Darlegung des Wesens der ErfindungExplanation of the essence of the invention

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, physikalisch chemische Bedingungen im Fermentations - Separationsge-Eiisch zu schaffen, unter denen eine qualitativ neue Wirkung der o. g. Hilfsmittel ermöglicht wird«, Diese Aufgabe sollte durch Substanzen erreicht werden, die von den Mikroorganismen selbst erzeugt oder durch gesonderte Verfahren aus diesen abgetrennt und dem Prozeß zugeführt werden können, wobei diese Substanzen wegen der sowohl durch chemische als auch biogene Tenside möglichen Nachteile Tensidwirkung haben und vor allem auch bei Temperaturen von 50 - 90 0C in Ölen nahezu unlöslich sein sollen.The invention has for its object to provide physical chemical conditions in the fermentation - Separationsge-Eiisch under which a qualitatively new effect of the above aids is made possible, This task should be achieved by substances produced by the microorganisms themselves or by separate methods can be separated from these and fed to the process, these substances have because of the both chemical and biogenic surfactants possible disadvantages surfactant and especially at temperatures of 50 - 90 0 C in oils should be almost insoluble.

Überraschenderweise wurde gefunden, daß Nukleinsäuren oder Nucleotide, die durch bekannte Verfahren leicht aus Mikroorganismen abgetrennt werden können und die bei ihrem alleinigen Einsatz für die Fermentation oder Separation keine positive Beeinflussung des FermentationsprozessesSurprisingly, it has been found that nucleic acids or nucleotides which can be easily separated from microorganisms by known processes and which, when used alone for fermentation or separation, have no positive effect on the fermentation process

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oder Separationsprozesses bewirken, in Kombination mit Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukten sowohl in der Fermentation als auch in der Separation als Hilfsstoffe dienen können* or separation process in combination with ethylene oxide-propylene oxide adducts can serve as auxiliaries both in the fermentation and in the separation *

Es wurde gefunden, daß im Fermentationsprozeß die Zugabe an Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukt um 10 -* 40 % verringert werden konnte, ohne daß sich die Stoffaustauschparameter verringerten, wenn dem Fermentationsgemisch eine wäßrige Nukleinsäurelösung in einer solchen Menge zugegeben wurde, daß die Konzentration an Nukleinsäuren mindestens 50 mg/1 Fermentationsgemisch betrug.It was found that in the fermentation process, the addition of ethylene oxide-propylene oxide adduct by 10 - * 40 % could be reduced without the mass transfer parameters decreased when the fermentation mixture, an aqueous nucleic acid solution was added in such an amount that the concentration of nucleic acids at least 50 mg / l of fermentation mixture.

Im Falle der erforderlichen ölabtrennung aus diesem Ferment at ionsgemisch mittels Separatoren bei 60 - 90 0C verringerte sich der' Bedarf an Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukt ebenfalls in der gleichen Größenordnung· Es tritt eine synergetische Wirkung bei Kombination der nichttensidischen Nukleinsäuren und der tensidisch wirkenden Äthylenoxid-Prcpylenoxid-Addukte ein«In the case of the required oil separation from this fermentation ationsgemisch by means of separators at 60 - 90 0 C, the 'need for ethylene oxide-propylene oxide adduct also in the same order of magnitude • There is a synergistic effect when combining the non-surfactant nucleic acids and surfactant ethylene oxide -Prpylene oxide adducts «

Anwendungsbeispielexample

Die-Erfindung soll an Hand eines typischen Verfahrensbeispiels erläutert werden.The invention will be explained with reference to a typical method example.

In einem 500 1 Rührfermentor wird Candida guilliermondii kontinuierlich auf Erdöldestillat als Kohlenstoffquelle unter aeroben Bedingungen gezüchtet.In a 500 liter stirred fermentor, Candida guilliermondii is continuously grown on petroleum distillate as a carbon source under aerobic conditions.

Folgende Bedingungen und Verfahrensparameter werden eingestellt:The following conditions and process parameters are set:

Füllmenge im Fermentor: · 200 kgFilling quantity in the fermenter: · 200 kg

zugeführte Luftmenge: 23 Kubikmeter proamount of air supplied: 23 cubic meters per

Stundehour

-tr- 2 1 5798-tr- 2 1 5798

spezifischer Rührerleistungs-specific stirrer power

eintrag: 1,5 Watt/Kilogrammentry: 1.5 watts / kilogram

Erdöldestillatanteil im . ' ' ·Petroleum distillate content in. '' ·

Fermentationsgemisch.: 15 GewichtsprozentFermentation mixture .: 15 weight percent

mittlere Verweilzeit im Permentor: 5 Stundenaverage residence time in the per-mentor: 5 hours

Dem Permentor wurde weiterhin eine Nährlösung zugeführt, die Stickstoff, Kalium, Phosphor sowie Nähr- und Spurenfelemente in ausreichendem Maße enthielt. Außerdem wurde in den Fermentor die wäßrige Lösung der Hilfsstoffkombination aus Nukleinsäuren und Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukt dosiert« Diese Lösung enthielt 10 g/l Nukleinsäuren sowie 40 g/l Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukt mit einem mittleren Molekulargewicht von 1850« Insgesamt wurde so viel dieser Lösung in den Permentor eingebracht, daß während des gesamten kontinuierlichen Betriebes die Konzentration an Nukleinsäure zwischen 60 - 50 mg/1 und die des Äthylenoxid-Propylenoxid-Adduktes zwischen 240 -'20O mg/1 Fermentationsflüssigkeit gehalten wurde. Im Permentor wurde während des Versuchs eine Biomassekonzentration von 23 Gramm Hefetrockensubstanz pro.Liter Ferment at ionsflüssigke it erreicht.The perforator was further fed a nutrient solution containing nitrogen, potassium, phosphorus and nutrients and trace elements sufficiently. In addition, the aqueous solution of the excipient combination of nucleic acids and ethylene oxide-propylene oxide adduct was dosed into the fermenter. "This solution contained 10 g / l nucleic acids and 40 g / l ethylene oxide-propylene oxide adduct with an average molecular weight of 1850" Solution in the Permentor introduced that during the entire continuous operation, the concentration of nucleic acid between 60 - 50 mg / 1 and that of the ethylene oxide-propylene oxide adduct between 240 - '20O mg / 1 fermentation liquid was maintained. In the permentor, a biomass concentration of 23 grams of yeast dry matter per liter of fermentation liquid was achieved during the experiment.

Aus dem Fermentor wurden kontinuierlich 40 Liter pro Stunde abgezogen«40 liters per hour were continuously withdrawn from the fermenter «

Dieser Produktstrom, in dem die dem Fermentor zugesetzte Hilfsstoffkombination in der o· go Konzentration enthalten waren, da beide Hilfsstoffe in nur ganz geringen Mengen von den Mikroorganismen adsorbiert werden, wurde nochmals mit Äthylenoxid-Propylenoxid-Lösung in solcher Menge gemischt, daß die Konzentration anschließend 500 mg/1 betrug und sofort bei 60 0C separiert.This product stream, in which the adjuvant combination added to the fermenter was contained in the o.g o concentration, since both adjuvants are adsorbed by the microorganisms in only very small amounts, was again mixed with ethylene oxide-propylene oxide solution in such an amount that the concentration then 500 mg / 1 and immediately separated at 60 0 C.

Die erhaltene Mikroorganismenphase wurde der weiteren Verarbeitung zu einem Protein - Vitaminkonzentrat zugeführt.The resulting microorganism phase was sent for further processing to a protein vitamin concentrate.

Claims (1)

2 1 5 79 82 1 5 79 8 Erfindungsanspruch Erfindu ngsanspr u ch Verfahren zur Züchtung und Abtrennung von. Mikroorganismen durch Zugabe von. Äthylenoxid-Propylenoxid-Addukten gekennzeichnet dadurch, daß als Fermentations— und Se.parationshilfsmittel eine Kombination aus Nukleinsäuren und/ oder Nukleotiden und Athylenoxid-Propylenoxid-Addukten verwendet wird, wobei die Konzentration an Nukleinsäuren bzw. Nukleotiden mindestens 50 Milligramm pro Liter, bezogen auf die Wass.erph.ase bei der Züchtung und Abtrennung der Mikroorganismen, beträgt.Method for breeding and separation of. Microorganisms by adding. Ethylene oxide-propylene oxide adducts characterized in that the fermentation and Se.parationshilfsmittel a combination of nucleic acids and / or nucleotides and ethylene oxide-propylene oxide adducts is used, wherein the concentration of nucleic acids or nucleotides at least 50 milligrams per liter, based on the Wass.erph.ase in the cultivation and separation of the microorganisms, is.
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