DD160357A3 - METHOD FOR PRODUCING LYSINE-ENRICHED FODDER WHITE CONCENTRATE - Google Patents
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Abstract
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von lysinangereichertem Futtereiweisskonzentrat mit einem hohen Naehrwert durch Zuechtung von Mikroorganismen auf Kohlenwasserstoffen. Das Ziel der Erfindung besteht in einer kostenguenstigen Herstellung von lysinangereichertem Futtereiweisskonzentrat ohne zusaetzlichen Bedarf von Wirkstoffen bei der Lysinproduktion unter Ausschluss der Bildung von schwer applizierbaren Produkten. Ein unsteriler mikrobiologischer Prozess zur Gewinnung von Futtereiweiss auf der Basis n-alkanhaltiger Erdoelprodukte wird mit einem mikrobiellen Sterilprozess zur Gewinnung von Lysin auf der Basis fluessiger n-Paraffine kombiniert. Die lysinhaltige Mikroorganismensuspension wird mit der Hefesuspension vereinigt und einem gemeinsamen Reinigungsprozess zur Entfernung unerwuenschter Kohlenwasserstoffe unterworfen.The invention relates to a process for the production of lysine-enriched feed concentrate with a high nutrient value by cultivating microorganisms on hydrocarbons. The aim of the invention is to inexpensively produce lysine-enriched feed concentrate without the need for additional active ingredients in lysine production, excluding the formation of difficult-to-apply products. An unsterile microbiological process for the production of feed wheat based on n-alkane petroleum products is combined with a microbial sterile process to obtain lysine based on liquid n-paraffins. The lysine-containing microorganism suspension is combined with the yeast suspension and subjected to a common purification process to remove unwanted hydrocarbons.
Description
Verfahren zur Herstellung von lysinangereichertem E ]?utterexweißkonzentratProcess for the preparation of lysine enriched E ] utternxweißkonzentrat
C 12 1 Anwendungsgebiet der Erfindung C 12 1 Application Area of the Invention
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Herstellung von lysinangereichertem Futtereiweißkonzentrat mit einem hohen Nährwert durch Züchtung von Mikroorganismen auf Kohlenwasserstoffen.The invention relates to a process for the production of lysine-enriched feed protein concentrate with a high nutritional value by cultivating microorganisms on hydrocarbons.
Charakteristik der "bekannten technischen Lösungen Characteristics of the "known technical solution en
L - Lysin übt eine wichtige !Funktion im Stoffwechsel tierischer Lebewesen aus.L - lysine plays an important role in the metabolism of animal life.
Insbesondere bei der physiologisch richtigen Ernährung von STutztieren, vorrangig solcher zur Fleichproduktion, ist die qualitativ und quantitativ adäquate G-abe von Lysin mit dem Futtermittel ein unabdingbares Erfordernis, In den allgemein verfügbaren konventionellen Futtermitteln aus der landwirtschaftlichen Produktion ist Lysin bekanntlich nicht in ausreichendem Maße enthalten. Es werden deshalb viele Anstrengungen unternommen, Lysin in diesen !Futtermitteln in Form von Zusätzen anzureichern.In particular, in the physiologically correct diet of trimmings, primarily those for meat production, the qualitatively and quantitatively adequate G-abe of lysine with the feed is an indispensable requirement, In the commonly available conventional feed from agricultural production lysine is not known to be sufficiently contained , Many efforts are therefore made to enrich lysine in these feeds in the form of additives.
Vorwiegend wird Lysin auf mikrobiellem Wege gewonnen. Dazu sind zahlreiche Verfahren bekannt, die sich von Seiten der Kohlenstoffquelle in zwei Hauptgruppen aufteilen lassen:Predominantly, lysine is obtained by microbial route. Numerous methods are known for this, which can be divided into two main groups by the carbon source:
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1, Mikrobielle Verfahren auf der Basis von Kohlehydraten oder anderen wasserlöslichen Substraten.1, Microbial processes based on carbohydrates or other water-soluble substrates.
2. Mikrobielle Verfahren auf der Basis von flüssigen n-Alkanen ( Cj ρ - C30 ) a^s Kohlenstoffquelle.2. Microbial processes based on liquid n-alkanes (Cj ρ - C30) a ^ s carbon source.
Nachteilig dabei ist:The disadvantage is:
1. Die Kohlenstoffquellen sind kostenintensiv, insbesondere bei der Anwendung von Kohlehydraten, da in der Regel auf Zucker zurückgegriffen werden IEU ß .1. The sources of carbon are expensive, especially when using carbohydrates, as sugar is generally used. IEU ß.
Damit erreicht das Endprodukt Lysin als Futtermittelzusatz Preise, die über den Preisen menschlicher nahrungsmittel liegen.As a result, the end product lysine as a feed additive reaches prices that are above the prices of human foods.
Zusätzlich sind für das Wachstum der lysinproduzierenden Mikroorganismen im Sterilprozeß biologische Wirkstoffe erforderlich, die kostenintensiv sind.In addition, the growth of lysine-producing microorganisms in the sterile process requires biological agents that are costly.
2. Die Aufarbeitung von Lysinkonzentraten zu Reinlysin führt zu erheblichen Schwierigkeiten, da bei der Verwendung von Kohlehydraten als Kohlenstoff quelle in der Regel schwer applizierbare Bndprodukte entstehen.2. The workup of Lysinkonzentraten to Reinlysin leads to considerable difficulties, since the use of carbohydrates as carbon source usually difficult to apply Bndprodukte arise.
Gemäß SU-PS 1959952 wird eine technische Lösung zur Umgehung dieser Probleme vorgeschlagen.According to SU-PS 1959952 a technical solution to circumvent these problems is proposed.
Bei der Verwendung von n-Alkanen als Kohlenstoffquelle sind zwar die Rohstoffkosten verhältnis- mäßig niedrig, aber für die mikrobielle Lysinproduktion ist der Einsatz von Wirkstoffkonzentraten unerläßlich·Although raw material costs are relatively low when using n-alkanes as carbon source, the use of active substance concentrates is indispensable for microbial lysine production.
Erschwerend kommt noch hinzu, daß die aiehtutilisierten Rest - η - Alkane aus dem Endprodukt entfernt werden müssen.To make matters worse, the exhausted η - alkanes must be removed from the final product.
Diese Schwierigkeiten sind Grund dafür, daß bis jetzt kein industrieller Prozeß der Lysingewinnungauf der Basis von n-Alkanen "bekannt ist.These difficulties are the reason why no industrial process of n-alkane-based lysing is known so far.
Das Ziel der Erfindung besteht in einer kostengünstigen Herstellung von lysinangereichertem IPuttereiweißkonzentrat ohne zusätzlichen Bedarf von Wirkstoffen bei der Lysinproduktion unter Ausschluß der Bildung von schwer applizierbaren Produkten.The object of the invention is the cost-effective production of lysine-enriched IPuttie white concentrate with no additional requirement of active ingredients in lysine production, excluding the formation of products which are difficult to apply.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Verfahren zur Herstellung eines lysinangereicherten Puttereiweißkonzentrates für die Tierernährung zu entwickeln, daß ohne zusätzliche Zugabe von Wirkstoffen arbeitet und die Leistungsfähigkeit der Mikroorganismen erhöht und fördert. Erfindungsgemäß wird ein steriler mikrobieller Prozeß zur Lysingewinnung auf der Basis von η-Paraffinen mit einem unsterilen Prozeß der HefeZüchtung auf n-alkanhaltigem Erdöldestillat gekoppelt.The invention has for its object to develop a method for producing a lysine-enriched Puttereiweißkonzentrates for animal nutrition that works without additional addition of drugs and increases the performance of microorganisms and promotes the task. In accordance with the present invention, a sterile microbial process for η-paraffin lysing recovery is coupled with an unsterile yeast-growing process to n-alkane petroleum distillate.
Der unsterile Prozeß zur Züchtung von Hefen auf η - alkanhaltigen Erdölprodukten hat eine EeiheThe unsterile process for breeding yeasts on η-alkane-containing petroleum products has an egg series
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biologischer Vorteile·biological advantages ·
Tm ungeschützten offenen biologischen Syster. findet eine Seihe von Bakterien eine ökonomische Nische, indem sie auf Stoffwechsel- und lyseprodukten der Hefezellen wachsen, ohne selbst n-Alkane verwerten zu können. Diese Bakterien beseitigen die für das Hefewachstum schädlichen Substanzen und bilden selbst.eine Reihe von für das Wachstum der Hefen auf n-Alkanen notwendige akzessorische Wirkstoffe. Die auf diese Weise entstehende Symbiose bewirkt ein optimales schnelles Hefewachstum und gestattet damit eine technisch - ökonomisch günstige Hefeproduktion.Tm unprotected open biological Syster. A number of bacteria find an economic niche in growing on metabolic and lyse products of yeast cells without being able to utilize n-alkanes themselves. These bacteria eliminate the substances harmful to yeast growth and themselves form a series of accessory agents necessary for the growth of yeasts on n-alkanes. The resulting symbiosis results in an optimal fast yeast growth and thus allows a technically - economically favorable yeast production.
Die bei diesem Verfahren nach Abtrennung der Hefezellen erhaltene Kulturflüssigkeit enthält wachstumsfördernde Paktoren in physiologisch optimaler Zusammensetzung, da sie einem Fließgleichgewicht von Zellen, die in unmittelbarer Wechselwirkung miteinander standen und entgegen gesetzte Substratverwerter sind, entstammen.The culture fluid obtained in this method after separation of the yeast cells contains growth-promoting Paktoren in physiologically optimal composition, since they stem from a steady state of cells, which are in direct interaction with each other and are opposed substrate recyclers derived.
Im Verfahren der Hefezüchtung wird die Kulturflüssigkeit durch Rückführung mehrfach genutzt. Sine vollständige Nutzung war entsprechend dem Stand der Technik in den meisten Fällen nicht möglich, da es bei zu häufiger Kreislauffahrweise zu unerwünschten Anreicherungen anderer Substanzen, z.B. anorganische Aschebildner,kommeη kann.In the process of yeast cultivation, the culture liquid is used repeatedly by recycling. Complete use according to the state of the art was in most cases not possible because, if the circulation is too frequent, undesirable accumulations of other substances, e.g. inorganic ash formers, kommeη can.
Ein Teil dieser an Wirkstoffen ausbilanzierten wertvollen Kulturflüssigkeit mußt,e somit als Abprodukt mit dem Abwasser vernichtet werden. Diese wertvolle Kulturflüssigkeit wird nun mittels der erfindungsgemäßen technischen Lösung vollständig genutzt.Part of this valuable culture fluid, which has been absorbed into active substances, must therefore be destroyed as waste with the wastewater. This valuable culture fluid is now fully utilized by means of the technical solution according to the invention.
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Die auf n-Alkanen wachsenden lysinproduzierenden Bakterien, wie Acinetobacter - Spezies, erreichen in einem Kulturmedium, das einem unsteril gehaltenen Futterhefeprozeß n-paraffinhaltiger Erdölprodukte entnommen wurde, ihre größte Aktivität. In diesem Kulturmedium wurden nach 36 Stunden Lysinkonzentrationen bis 40 g/l erreicht· Dieses Kulturmedium enthält ca. 500 mg/1 unverwertete Kohlenwasserstoffe, die teils physikalisch gelöst, teils als Miszellen kollodial gelöst vorliegen und einer mechanischen Abtrennung nicht zugänglich sind. Bei der Aufarbeitung dieser Suspension sind die Kohlenwasserstoffe im Konzentrat in unerwünscht hoher Menge enthalten.The lysine-producing bacteria growing on n-alkanes, such as Acinetobacter species, reach their greatest activity in a culture medium taken from an unsterilised feed yeast process of n-paraffinic petroleum products. Lysine concentrations of up to 40 g / l were reached in this culture medium after 36 hours. This culture medium contains about 500 mg / 1 of unreacted hydrocarbons, some of which have been physically dissolved, some are collodially dissolved as miscalls and are inaccessible to mechanical separation. In the work-up of this suspension, the hydrocarbons are contained in the concentrate in an undesirably high amount.
Die Beherrschung der Abtrennung oder Reinigung kann bei der Kopplung des Verfahrens mit einem Erdöldestillathefeprozeß in technisch günstiger Weise wie folgt erreicht werden:The control of the separation or purification can be achieved in the coupling of the process with a Erdöldestillathefepprozesses in a technically favorable manner as follows:
Sin besonderes Merkmal der Verfahren zur Gewinnung von Puttereiweiß auf Erdöldestillatbasis ist, daß die abgetrennten Hefezellen einem intensiven Reinigungsprozeß, in der Regel nach einer vorangegangenen Trocknung, zur Entfernung der Restkohlenwasserstoffe unterworfen werden müssen.A particular feature of the processes for obtaining petroleum distillate putty is that the separated yeast cells must be subjected to an intensive cleaning process, usually after a previous drying, to remove the residual hydrocarbons.
Diese Besonderheit kann für die Reinigung der auf n-Alkanen erhaltenen Lysin-Mikroorganismen-Suspension bei Kopplung beider Verfahren mit ausgenutzt werden. Wird beispielsweise Acinetobacter unter bestimmten biologischen Bedingungen im Sterilprozeß zur Lysinproduktion gezüchtet, kann die am Ende erhaltene n-alkanhaltige Mikroorganismen-Lysinsuspension, gegebenenfalls nach einer vorangegangenen thermischen Aufkonzentrierung, der Hefesuspension vor dem Trockenprozeß oder nach dem Trockenprozeß zugegeben und einer gemeinsamen ReinigungThis peculiarity can be utilized for the purification of the lysine-microorganism suspension obtained on n-alkanes by coupling both methods. For example, if Acinetobacter is grown under certain biological conditions in the sterile process for lysine production, the final n-alkane microorganism lysine suspension, optionally after a previous thermal concentration, the yeast suspension before the drying process or after the drying process added and a common cleaning
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zur Entfernung der Restkohlenwasserstoffe unterworfen werden.be subjected to the removal of the residual hydrocarbons.
Die Kopplung eines sterilen mikrobiellen Prozesses zur Lysingewinnung auf der Basis von n-Paraffinen mit einem unsterilen Prozeß der Hefezüchtung auf n-alkanhaltigem Erdöldestillat erbringt erhebliche Vorteile für die biologische Leistungsfähigkeit des Lysinproduktionsprozesses und für die Technik der Aufarbeitung der n-alkanhaltigen und lysinhaltigeη Kultursuspension·The coupling of a n-paraffin-based sterile microbial lysing process to an n-alkane petroleum distillate non-sterile process of yeast production provides significant benefits to the biological performance of the lysine production process and to the workup of the n-alkane-containing and lysine-containing culture suspension.
In der Endkonsequenz wird eine hochreine Hefebiomasse gewonnen, die je nach Bedarf mit Lysin angereichert worden ist .und als lysinangereichertes Futtereiweißkonsentrat der Tierernährung zur Verfügung steht. Die aus dem unsterilen Prozeß des Mikroorganismenwachstums auf Erdölprodukten erhaltene Kulturflüssigkeit ist hinsichtlich der wachstumsfördernden Wirkstoffe auch für lysinproduzierende η - Alkanverwerter sehr effektiv.In the final consequence, a high-purity yeast biomass is obtained, which has been enriched with lysine as needed, and is available as lysine-enriched feed protein concentrate of animal nutrition. The culture fluid obtained from the non-sterile process of microorganism growth on petroleum products is also very effective for lysine-producing η-alkane recyclers in terms of growth-promoting agents.
Durch die nutzung der Kulturflüssigkeit im sterilen Prozeß und ihre Aufarbeitung zu gereinigtem lysinangereicherten Futtereiweißkonzentrat entsteht im unsterilen Puttereiweißprozeß auf Srdöldestillatbasis keine Abfallkulturlösung.By using the culture liquid in the sterile process and their processing to purified lysine-enriched feed protein concentrate produced in the unsterile Puttereiweißprozeß on Srdöldestillatbasis no waste culture solution.
Insgesamt wird durch die erreichten Vorteile die industrielle Einführung der n- Alkannutzung zur Lysinproduktion wesentlich erleichtert* Die Erfindung soll an folgendem Beispiel näher erläutert werden:Overall, the advantages achieved by the industrial introduction of n-alkane use for lysine production much easier * The invention will be explained in more detail by the following example:
In einem 500 1 Rührfermentor wird Lodderomyces elongisporus unter bekannten Bedingungen kontinuierlich aufIn a 500 1 stirred fermentor Lodderomyces elongisporus continuously under known conditions
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der Basis von n-alkanhaltigem Erdöldestillat im unsterilen Prozeß gezüchtet. Die technologischen Bedingungen sind folgende:the base of n-alkane petroleum distillate bred in the non-sterile process. The technological conditions are as follows:
des Fermentors 200 kgof the fermenter 200 kg
Als anorganische Bahrst of fe werden UH-,-Wasser, Phosphorsäure und eine Lösung bestehend aus ZCl, MgSO^, ZnSO^, PeSO^, MnSO^, in physiologisch ausbilanzierter Menge zudosiert.UH -, - water, phosphoric acid and a solution consisting of ZCl, MgSO.sub.2, ZnSO.sub.2, PeSO.sub.4, MnSO.sub.4, are added as the inorganic substances of Fe in a physiologically balanced amount.
Im. Permentor entsteht eine Biomassekonsentration von 2,1 g/l "bezogen auf Trockensubstanz· Die Mikroorganismensuspension wird dem Fermentor kontinuierlich entnommen und einer Dekantation unterworfen. Die mittels Dekantation abgetrennte wässrige, hefefreie iCulturflüssigkeit wird zum größten Teil in den Permentor zurückgeführt.The microorganism suspension is continuously withdrawn from the fermentor and subjected to decantation The aqueous, yeast-free culture fluid separated by means of decantation is for the most part returned to the per-mentor.
Bin Teilstrom wird, wie nachstehend beschrieben, zur Kultivierung lysinproduzierender Acinetobakterien genutzt.A partial flow is used to cultivate lysine-producing acinetobacteria as described below.
Die hefeangereicherte Phase aus der Dekantation wird auf 343 K erwärmt und zunächst das Erdöldestillat unter Zugabe von 0,5 g/kg eines Tensides aus Ethylenoxid und Propylenoxid in einem Tellerseparator abgetrennt. Anschließend wird diese Suspension in einen Düsenseparator durch Abtrennung von weiterer wäßriger Kulturflüssigkeit auf 21 % HTS aufkonzentriert·The yeast-enriched phase from the decantation is heated to 343 K and first the petroleum distillate with the addition of 0.5 g / kg of a surfactant of ethylene oxide and propylene oxide separated in a Tellerseparator. Subsequently, this suspension is concentrated in a jet separator by separation of further aqueous culture fluid to 21 % HTS.
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Die Kulturflüssigkeit wird ebenfalls in den 3?ermentor zurückgeführt.The culture fluid is also returned to the fermenter.
Aus dem Dekantationsgefäß werden, wie oben genannt, kontinuierlich 3-5 l/h Kulturflüssigkeit entnommen und durch Erhitzen auf 368 K über 30 Minuten sterilisiert.As mentioned above, 3-5 l / h of culture fluid are continuously withdrawn from the decantation vessel and sterilized by heating to 368 K for 30 minutes.
Diese Kulturflüssigkeit wird als Grundnährlösung für die Anzucht von Acinetobacter-Spezies auf 6 $ gereinigten n-Alkanen der Kettenlänge Cmc ~" 0?4 in einem zweiten diskontinuierlich arbeitenden Sterilfermentor genutzt.This culture fluid is used as a basal broth for the growth of Acinetobacter species on 6 $ purified n-alkanes of chain length Cmc ~ "0-4 in a second discontinuous sterile fermentor.
unter anderem folgendeincluding the following
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Die Anzüchtung erfolgt unter an sich bekannten Bedingungen bei einer Temperatur von 309 K und einen pH-Wert von 7,1.The cultivation takes place under known conditions at a temperature of 309 K and a pH of 7.1.
Nach Abschluß der Lysinbildungsphase., 34 h nach Beimpfung, entsteht eine Lysinkonzentration von 31 g/l und.eine Biomassekonzentration von 28 g/l. Diese entstandene Suspension wurde im Vakuum so weit eingeengt, daß die Konzentration an Lysin 93 g/l beträgt·After completion of the lysine phase, 34 h after inoculation, a lysine concentration of 31 g / l und.eine biomass concentration of 28 g / l. This resulting suspension was concentrated in vacuo so that the concentration of lysine 93 g / l ·
Danach wird die Suspension im Verhältnis von 1:5 ( 1 Teil Lysinsuspension, 5 Teile Hefesuspension) mit der vorher erhaltenen Hefesuspension gemischt sowie in e-inem Sprühtrockner zu Trockenpulver mit einem Wassergehalt von 9,2 fo verarbeitet· Dieses Trockenpulver enthält noch 5,1 % Kohlenwasserstoffe aus beiden Prozessen.Thereafter, the suspension is mixed in a ratio of 1: 5 (1 part lysine suspension, 5 parts yeast suspension) with the previously obtained yeast suspension and processed in e-inem spray drier to dry powder with a water content of 9.2 fo · This dry powder still contains 5.1 % Hydrocarbons from both processes.
In einer 5-stufigen Extraktion wird dieses Pulver im Verhältnis von 1 : 1 Vol,-$> mit einem Gemisch aus Äthanol und Benzin gereinigt.In a 5-stage extraction, this powder is purified in a ratio of 1: 1 vol, - $> with a mixture of ethanol and gasoline.
Die Trockenhefe weist nach der Reinigung 21 g Lysin pro 10Og Protein auf.The dry yeast has 21 g of lysine per 10Og of protein after purification.
Im normalen Futtereiweiß auf Hefebasis sind demgegenüber nur etwa 7 g Lysin pro 100 g Protein enthalten.On the other hand, in normal yeast-based dietary protein, only about 7 g of lysine are contained per 100 g of protein.
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