DD157865A3

DD157865A3 - PROCESS FOR OBTAINING MICROBIAL BIOMASS

Info

Publication number: DD157865A3
Application number: DD22313280A
Authority: DD
Inventors: Rolf Hedlich; Lothar Wuensche; Klaus Triems; Walter Brendler
Original assignee: Adw Ddr
Priority date: 1980-08-06
Filing date: 1980-08-06
Publication date: 1982-12-15

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Erzeugung mikrobieller Biomasse durch kontinuierliche Kultivierung von Mikroorganismenkulturen im ungeschuetzten Prozess auf unterschiedlichen Kohlenstoff- und Energiequellen,insbesondere auf Kohlenwasserstoffen, wie z.B. Erdoeldestillate, Raffinate und n-Alkangemischen. Der Erfindung liegt die Aufgabe der Erhoehung der Produktivitaet und Stabilitaet des Fermentationsprozesses im unsterilen Prozess zugrunde.Erfindungsgemaess wird die Aufgabe dadurch geloest,dass geeignete Bakterienstaemme simultan mit dem Hefeproduktionsstamm kultiviert werden.The invention relates to a process for the production of microbial biomass by continuous cultivation of microorganism cultures in the unprotected process on different carbon and energy sources, in particular hydrocarbons, such as e.g. Petroleum distillates, raffinates and n-alkane mixtures. The invention is based on the object of increasing the productivity and stability of the fermentation process in the non-sterile process. According to the invention, the object is achieved by culturing suitable bacterial tamps simultaneously with the yeast production strain.

Description

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Titeltitle

Verfahren zur Gewinnung mikrobieller BiomasseMethod for obtaining microbial biomass

Anwendungsgebiet der Erfindung; Areas of application of the invention;

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Gewinnung mikrobieller Biomasse durch kontinuierliche Kultivierung definierter Mikroorganismen im ungeschützten Prozeß auf Substraten, die verschiedene Kohlenstoff- und Energiequellen, insbesondere Kohlenwasserstoffe, wie z,B« Erdöldestillate, Raffinate und n-Alkangeraische, enthalten, Die'Erfindung ist einzuordnen in die IPK: C 12 B, 1/20.The invention relates to a process for obtaining microbial biomass by continuous cultivation of defined microorganisms in the unprotected process on substrates containing various carbon and energy sources, in particular hydrocarbons, such as, for example, petroleum distillates, raffinates and n-alkane acids. The invention must be classified into the IPK: C 12 B, 1/20.

Charakteristik der bekannten technischen Lösungen . Die Kultivierung von Hefen zur Gewinnung von mikrobieller Biomasse auf Kohlenwasserstoffen als einziger Kohlenstoff- und Energiequelle im ungeschützten Prozeß ist bekannt· Hierbei wird die'Biomasse nach bekannten Verfahren erzeugt, z„B_# auf der Grundlage von Erdölfraktionen (Destillate, Raffinate) und/oder n-Alkangemischen im Kohlenstoffkettenlängenbereich von C_g bis C₃₅ (DD-PS 105 825) und als Futtermittel in der Tierernährung eingesetzt· Es ist weiterhin bekannt, daß für die schnelle und intensive Verwertung von Kohlenwasserstoffen und anderen mikrobiell verwertbaren Kohlenstoffquellen der Zusatz von Wuchsstoffen (akzessorischen Substanzen) für erforderlich gehalten wird· Bach DD-PS 50 543 erfolgt hierbei die Zugabe von akzessorischen Substanzen durch Verwendung-von Hefe- Characteristic of the known technical solutions. The cultivation of yeasts for the production of microbial biomass on hydrocarbons as the sole source of carbon and energy in the unprotected process is known. Here, the biomass is produced by known processes, for example B _# based on petroleum fractions (distillates, raffinates) and / or n-alkane mixtures in carbon chain length range of C _g to C ₃₅ (DD-PS 105825) and as feed in animal nutrition inserted · It is also known that (for quick and intensive utilization of hydrocarbons and other microbially utilizable carbon sources, the addition of growth substances accessory substances) is considered to be necessary · Bach DD-PS 50 543, the addition of accessory substances by use of yeast

„ ₂ _ 22 3 1 3 2" ₂ _ 22 3 1 3 2

extraktj Abfällen der landwirtschaftlichen Produktion, wie Melasse-und Schlempe der Fermentationsindustrie, bzw_e geringer Mengen wasserlöslicher aliphatischen leicht assimilierbarer Verbindungen, die entweder Produkte des mikrobiellen Stoffwechsels darstellen oder diesem nahestehen, wie organische Säuren oder Zucker* Die in geringen Mengen zugegebenen akzessorischen Substanzen lösen bekanntlich eine Wachstumsförderung der Mikroorganismen aus«, Sie intensivieren bzw« ermöglichen die Umsetzung der. Kohlenstoffverbindungen, z_eB₉ der Kohlenwasserstoffe in Biomasse, dienen aber selbst nicht als Kohlenstoffquelle» Die Verwendung von externen Wuchsstoffen bei der Verhefung von Kohlenwasserstoffen im technischen Maßstab ist jedoch ein bedeutender Mangel der bekannten Verfahren« Sie bedeutet zusätzliche technische Aufwendungen und damit ökonomische Belastung des .jeweiligen Verfahrens* Außerdem stellen die Wuchsstoffe, wie Hefeextrakt oder die genannten anderen geeigneten Stoffe, günstige Hährmedien für Undefinierte Infektionskeime dar*Extracts of agricultural production, such as molasses and stillage of the fermentation industry, or _e small amounts of water-soluble aliphatic easily assimilable compounds that represent either products of microbial metabolism or close to it, such as organic acids or sugars * The added in small amounts of accessory substances known to solve Promoting the growth of microorganisms ", you intensify or" enable the implementation of the. Carbon compounds, _e B ₉ of the hydrocarbons in biomass, but are themselves not as a carbon source "However, the use of external growth substances in yeasting of hydrocarbons on an industrial scale is a major deficiency of the known methods" She means additional technical expenses and economic burden of In addition, the growth substances, such as yeast extract or the other suitable substances mentioned, are favorable healing media for undefined infectious germs.

Es ist, wie bereits festgestellt wurde, bekannt, daß sich im ungeschützten kontinuierlichen Prozeß eine bakterielle Begleitflora einstellt, die unkontrolliert den Prozeßablauf und die Qualität des Endproduktes ungünstig beeinflussen kann« Es ist.auch weiterhin bekannt, daß zwischen der Produktionskultur und der Begleitflora viel~ fältige, z«T*- auch symbiontische bzw« mutualistische Wechselbeziehungen auftreten können (HARRISOlI, D_eE«P*, 1978: Mixed culture .in industrial fermentation processes, Adv, Appl· Microbiol« ,24, 129 - 164)*As already stated, it is known that in the unprotected continuous process, a bacterial accompanying flora is created which can adversely affect the process and the quality of the final product in an uncontrolled manner. It is also known that there is much between the production culture and the accompanying flora fältige, z "T * - also symbiotic or" mutualistic interactions can occur (HARRISOLI, D _e E "P *, 1978: Mixed culture in industrial fermentation processes, Adv, Appl Microbiol, 24, 129-164)

Ziel der Erfindung _Object of the invention

Das Ziel der Erfindung besteht in der Erhöhung der Wachstuiüsgeschwindigkeit der Hefen im.Fermentationsprozeß beiThe object of the invention is to increase the growth rate of the yeasts in the fermentation process

22 3 1 3 222 3 1 3 2

gleichzeitiger Sicherung der Stabilität des Prozesses mit weniger Aufwand gegenüber den bisher bekannten Verfahren· ' ' ·'Simultaneous assurance of the stability of the process with less effort compared to the previously known methods · '' · '

Explanation of the essence of the invention

5'Die Erfindung stellt sich die Aufgabe, durch eine neue Verfahrensführung des Kultivierungsprozesses die für die Intensivierung des Prozesses 'der Biomasseproduktion erforderlichen v/achs turas stimulierenden Substanzen im Prozeß selbst zu erzeugen,»5'The object of the invention is to generate by a new process management of the cultivation process in the process itself, the v / achs turas stimulating substances required for the intensification of the process' of biomass production, »

]0 Erfindungsgemäß wird die Aufgabe dadurch gelöst, daß man in einem ungeschützten Fermentationsverfahren Hefen auf der Basis flüssiger Kohlenwasserstoffe simultan mit ausgewählten Bakterien der Teile 7 und/oder 8 von Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (1974) kultiviert. In accordance with the invention, this object is achieved by cultivating yeasts based on liquid hydrocarbons in an unprotected fermentation process simultaneously with selected bacteria of parts 7 and / or 8 of Bergey's Manual of Determinative Bacteriology (1974).

Die ausgewählten Bakterien assimilieren keine Kohlenwasserstoffe, so daß sie nicht als Substratkonkurrenten auftreten» Sie assimilieren die Stoffwechsel- und Kooxidationsprodukte des Produktionsstammes sowie die im Prozeß anfallenden Lyseprodukte und entfernen damit gleichzeitig im Prozeß anfallende und auf das Wachstum der Hefen inhibierend wirkende Stoffe« Diese ausgewählten Bakterien produzieren wachstumsfördernde Substanzen in solchen Mengen, daß damit die Wachstumsrate der Hefen entscheidend gesteigert wird«The selected bacteria do not assimilate hydrocarbons so that they do not act as substrate competitors. They assimilate the metabolic and co-oxidation products of the production strain as well as the lysis products produced during the process, thereby simultaneously eliminating substances which inhibit the growth of yeast in the process and inhibit them produce growth-promoting substances in such quantities as to significantly increase the growth rate of yeasts «

Erfindungsgemäß wird das Verfahren wie folgt realisiert: In ein bekanntes, für die Kultivierung von Hefen auf flüssigen Kohlenwasserstoffen geeignetes Kulturmedium wird ein bekannter Hefeproduktionsstamm und ein ausgewählter bzw, ein Gemisch ausgewählter Bakterienstämine eingeimpft, wobei sich das Verhältnis Hefe:Bäkterien-According to the invention, the process is carried out as follows: A known yeast production strain and a selected or a mixture of selected bacterial

2 42 4

Zellen bei 10 bis 10 : 1 bewegt* Die Kultivierung erfolgt kontinuierlich unter ungeschützten Bedingungen nach bekannten Verfahren. Zur Konstanthaltung der Bakterienkonzentrat ion im kontinuierlichen Kultivierungsprozeß werden die Bakterien und das limitierende Sub-Cells moved at 10 to 10: 1 * The cultivation is carried out continuously under unprotected conditions by known methods. In order to keep the bacterial concentration constant in the continuous cultivation process, the bacteria and the limiting sub-

-4 - 223132-4 - 223132

str.at nach der Abtrennung der Hefebiomasse aus dem Fermentorablauf mit der wäßrigen Phase zurückgeführt bzw. bei einer Überschreitung der erforderlichen Bakterienkonzentration iia-Prozeß durch eine kurzzeitige Absenkung des pH~Wer-.5 tes nach bekannten Verfahren auf die gewünschte Konzentration eingestellt; str.at returned after the separation of the yeast biomass from the fermenter effluent with the aqueous phase or when exceeding the required bacterial concentration iia process by a brief lowering of pH ~ Wer-.5 tes adjusted by known methods to the desired concentration;

Mit der Anwendung des erfindungsgemäßen Verfahrens wirdWith the application of the method according to the invention is

- —1- -1

eine Wachstumsgeschwindigkeit der Hefe von/u. = 0,32 h erreichte Demgegenüber wird bei einer Kultivierung von Hefen unter Zusatz von Hefeextrakt· eine Wachstumsgeschwindigkeit dera yeast growth rate of / u. In contrast, when culturing yeasts with the addition of yeast extract, a growth rate of

—1 -1

Hefen von/u. = 0,28 h erreicht und bei- einer Kultivierung von Hefen ohne Zusatz wachstumsfördernder Substanzen nur eine Wachstumsgeschwindigkeit von /u .= 0,03 'h erreichte Der Kultivierungsprozei3 verläuft stabil und es ist keine Nachimpfung bzw© externe Zugabe von Wuchsstoffen erforderlich und es verringert sich somit der bei bekannten' Verfahren erforderliche Aufwand« In den nachfolgenden Beispielen wird die Erfindung näher erläutert«Yeasts from / u. = 0.28 h and in cultivation of yeasts without addition of growth-promoting substances only reached a growth rate of / u = 0.03 h The cultivation process is stable and no replenishment or external addition of growth substances is required and reduced Thus, the required in known 'method effort «In the following examples, the invention will be explained in more detail«

Erlenmeyerkolben (500 ml Passungsvermögen) mit Belüftungsschikanen werden mit 100 ml einer mineralischen Nährlösung nach Reader beschickt und sterilisi-erte Der pH-Wert wird auf 4j2 eingestellte Nach Zugabe von 15 g/l eines technischen n~Alkangemisch.es erfolgt das Beimpfen.mit der Hefe Lodderomyces elongisporus_? Stamm IMST H 128 (0,1- g/l HTS) und dem Stamm xB 27 -ZEMET B (0_S02 g/l BTS), Nach einer Kultivierungszeit von 24 h auf einer Schüttelmaschine bei 30 C wird eine Hefebiomassekonzentration von 6,4 oo« 6j8 g/l erreicht«, Längere Kultivierung führt zu keiner signifikanten Erhöhung des Wertes«, Die Wachs-Erlenmeyer flasks (500 ml capacity) with aeration baffles are charged with 100 ml of a nutrient-containing mineral nutrient solution and sterilized. The pH is adjusted to 4:02. After adding 15 g / l of a technical grade alkane mixture, inoculation is carried out with the Yeast Lodderomyces elongisporus _? Strain IMST H 128 (0.1 g / l HTS) and the strain xB 27 -ZEMET B (0 _S 02 g / l BTS). After a cultivation time of 24 h on a shaker at 30 ° C., a yeast biomass concentration of 6, 4 oo «6j8 g / l achieved," Longer cultivation does not lead to a significant increase in value. "

— 1- 1

tumsgeschwindigkeit beträgt 0,32 h ₅ speed is 0.32 h ₅

-·5 - 223- · 5 - 223

Beispiel 2 ' Example 2 '

Es wird wie im Beispiel 1 verfahren» Anstelle des ausgewählten Bakteri ens t amines wird Hefeextrakt (DIFCO yeast extract) zu 0,2 % hinzugefügt« Nach den im Beispiel 1 angegebenen Kultivierungsbedingungen wird eine Hefebiomassekonzentration von 4,4 «·« 4,6 g/l und eine Wachstumsgeschwindigkeit von 0,28 h*~ erreicht*The procedure is as in Example 1 "yeast extract (DIFCO yeast extract) is added to 0.2 % instead of the selected bacterium t amines" According to the cultivation conditions given in Example 1, a Hefebiomassekonzentration of 4.4 «·« 4.6 g / l and a growth rate of 0.28 h * ~ reached *

Example 3

Es wird wie im Beispiel 1 verfahren« Die Kulturlösung TO erhält jedoch weder Hefeextrakt noch einen der ausgewählten Bakterienstämme«· Die nach den im Beispiel 1 angegebenen Kultivierungsbedingungen erzielte Biomassekonzentration beträgt 0,15 ···· 0,20 g/l, die Wachstumsgeschwindigkeit 0,03 h"*¹ _e The procedure is as in Example 1 "However, the culture solution TO receives neither yeast extract nor one of the selected bacterial strains" · The biomass concentration achieved by the cultivation conditions specified in Example 1 is 0.15 ···· 0.20 g / l, the growth rate 0 , 03 h "* ¹ _e

15. Beispiel 4 . '15. Example 4 . '

In einem großtechnischen Rührfermentor mit einem Fassungsvermögen von 250 m bei einem Arbeitsvolumen'von 90 t wird in einem einstufigen kontinuierlichen Verfahren der Hefestamm Lodderomyces elongisporus IMET H 128 auf einer Erdöldestillat-Fraktion mit dem Siedebereich 220 bis 35O⁰C kultiviert· Der Paraffingehalt im Destillat beträgt 17,2 Masse-%o Die Rührleistung beträgt 200 kW, die Luft-In a large-scale Rührfermentor with a capacity of 250 m at a Arbeitsvolumen'von 90 t of yeast strain Lodderomyces elongisporus IMET H 128 is cultivated on a petroleum distillate fraction having the boiling range 220 to 35O ⁰ C in a one-step continuous process · The paraffin content in the distillate is 17.2 mass% o The stirring power is 200 kW, the air

3 menge 66OO m /h. Die Zusammensetzung des IJährmediums,3 amount 6600 m / h. The composition of the nutrient medium,

3 bezogen auf 1 in , ist folgende:3 with respect to 1 in, is the following:

Erdöldestillat · 120 kgPetroleum distillate · 120 kg

Phosphorsäure (75 %) ' 540 mlPhosphoric acid (75 %) ' 540 ml

Kaliumchlorid 570 gPotassium chloride 570 g

Magnesiumsulfat 25P gMagnesium sulfate 25P g

Eisenchlorid 15 gIron chloride 15 g

Mangansulfat 16 gManganese sulfate 16 g

Zinksulfat . " 16 gZinc sulfate. "16 g

Kupfersulfat . 1,8gCopper sulphate. 1.8g

- 6 - £ £ ö I Ö Z - 6 - £ £ ö I Ö Z

Zur Verbesserung des Stoffübergangsverhaltens wird dem Prozeß ein Hilfsstoff vom Charakter eines Propylenoxid-Äthylenoxid-Addukts in einer Konzentration von 65Ο mg/1 wäßrigen Kulturmediums zugesetzt« Der pH-Wert wird mit konzentrierter Ammoniaklösung *ge- _regelt. Der pH-Wert beträgt 4,1 - 0,1 und die Fermenta-r tionstemperatur 33 C - 1 %_e Beimpft wird mit einer Suspension des Stammes Lodderomyces-elongisporus IMET H in einer Menge, daß die Biomassekonzentration bei 1 bis 2 kg/m liegte Gleichzeitig wird eine Suspension, die die Bakterienstämme xB 21 - ZIMET B und xB 27 - ZIMBT B zu gleichen Anteilen enthält, zugegeben« Die An-To improve the mass transfer behavior, the process is an adjuvant of the character of a propylene oxide-ethylene oxide adduct added in a concentration of 65Ο mg / 1 aqueous culture medium «The pH is adjusted with concentrated ammonia solution *. The pH is 4.1 - 0.1 and the fermentation temperature 33 C - 1 % _{e is} inoculated with a suspension of the strain Lodderomyces elongisporus IMET H in an amount that the biomass concentration at 1 to 2 kg / m At the same time, a suspension containing the bacterial strains xB 21 - ZIMET B and xB 27 - ZIMBT B in equal proportions is added.

2 3 2 3

fangskonzentration liegt bei 10 bis 10 Bakterienzellen/ ml« Die Verweilzeit beträgt 4 Stunden_c Der Fermentorauslauf wird in einem geeigneten Aufrahmgefäß von ca« 60 % des wäßrigen Kulturmediums getrennt« Die Biomassesuspension wird durch Separation zweistufig bei unterschiedlichen Bedingungen entölt und entwässert, wobei Hefe-. trockensubstanzkonzentrationen im Bereich von 10 bis 24 % erreicht v/erden*initial concentration is 10 to 10 bacterial cells / ml "The residence time is 4 hours _c The Fermentorauslauf in a suitable Aufrahmgefäß of about" 60% of the aqueous culture medium separated "The biomass suspension is de-oiled by separation in two stages under different conditions and dehydrated, said yeast. dry substance concentrations in the range of 10 to 24 % are reached *

Die abgetrennten wäßrigen Kulturmedien aus der Aufrähmungs- und der Separatorstufe werden in unterschiedlichen Graden, vorzugsweise zwischen 20 und 60 % des gesamten Prozeßwassers, kontinuierlich in den Permentor zurückgeführte Bei einer kontinuierlichen Züchtung über einen längeren Zeitraum und bei einer Rückführung von 60 % des wäßrigen Kulturmediums beträgt die Anzahl der Bakterien 10 bis 10 Zellen/ml Kulturmedium« Im kontinuierlich zurückgeführten wäßrigen Medium sind folgende Arten und Mengen von Stoffwechsel- und Lyseprodukten enthalten:The separated aqueous culture media from the Aufrähmungs- and the separator stage are in varying degrees, preferably between 20 and 60 % of the total process water, continuously recycled to the per- mentor in a continuous cultivation over a longer period and at a recycling of 60 % of the aqueous culture medium the number of bacteria 10 to 10 cells / ml of culture medium "In the continuously recycled aqueous medium, the following types and amounts of metabolic and lysis products are included:

- Fettsäuren ' ca· 150 bis 200 mg/1 ProzeßwasserFatty acids ~ 150 to 200 mg / 1 process water

- Polysaccharide . 900 bis 1500 mg/1 Glukose/1- polysaccharides. 900 to 1500 mg / 1 glucose / 1

- Nukleinsäuren 300 bis 850 mg/1- Nucleic acids 300 to 850 mg / l

- Eiweißverbindungen 250 bis 65Ο mg Ή /1 - Protein compounds 250 to 65Ο mg Ή / 1

orgoorgo

-7.- 22 3 13 2-7.- 22 3 13 2

Beim Züchtungsprozeß beträgt die Produktivität· 3,8 kg t/h_e Der Produkt ions st arnra verhält sich unter den gewählten Bedingungen sehr stabil, ein Nachimpfen, der Kultur mit frischer Hefe ist nicht erforderlich« Die Biomassesusρension wird in einem Sprühtrockner getrocknet, mit einem selektiven Extraktionsmittelgemisch von Lipiden und von nichtbiogenen' Bestandteilen befreit«, Der Rohproteingehalt der gewonnenen Hefe beträgt 65 %> der Restkohlenwasserstoffgehalt 0,1%,In the cultivation process, the productivity is · 3.8 kg / h _e The production of ions under the conditions selected is very stable, re-inoculating, the culture with fresh yeast is not required. "The biomass suspension is dried in a spray drier, with a the crude protein content of the yeast obtained is 65%> the residual hydrocarbon content is 0.1%,

Beispiel 5 Example 5

V -.In einem Rührfermentor von 30 1 wird der HefestammV-In a stirred fermentor of 30 1 is the yeast strain

Lodderomyces elongisporus IMET H 128 bei einem pH-Wert . . von 4,2, einer Temperatur von 32 bis 34⁰Q und einer Luftzufuhr von 3,6 l/l*min gezüchtet* Als Substrat dient ein n-Alkangemisch der Kettenlänge Gq bis CL., vorzugsweise C.p bis C₁O aus einem Erdöl der Erdölleitung • "Freundschaft", Die Siedelage der zugrunde gelegten Destillatfraktion beträgt 230 bis 36O⁰G, Der Laboratoriumsrührfermentor wird mit dem Hefestamm in einer wäßrigen Suspension der Konzentration von 1 bis 2 g/kg angeimpft· Außerdem enthält die Suspension den Bakterienstamm xB 21 - ZIMET B in einer Anfangskonzentration von 10 bis 10 Bakterienzellen/ml« Das Verfahren wird mit einer Verweilzeit von 5 h durchgeführt« Die Menge an n-Alkangemisch im Kulturmedium beträgt 3,6 Masse-%·Lodderomyces elongisporus IMET H 128 at pH. , grown from 4.2, a temperature of 32 to 34 ⁰ Q and an air supply of 3.6 l / l * min * The substrate is an n-alkane mixture of chain length Gq to CL., Preferably Cp to C ₁ O from a petroleum the petroleum pipeline • "Friendship", the boiling point of the underlying distillate fraction is 230 to 36O ⁰ G, the laboratory stirred fermentor is inoculated with the yeast strain in an aqueous suspension at a concentration of 1 to 2 g / kg · In addition, the suspension contains the bacterial strain xB 21 - ZIMET B in an initial concentration of 10 to 10 bacterial cells / ml "The process is carried out with a residence time of 5 h" The amount of n-alkane mixture in the culture medium is 3.6% by mass.

Das'wäßrige, anorganische. Nährmedium enthält in Form von NH₄OH, H₃PO₄, KCl und Sulfaten:The'watery, inorganic. Nutrient medium contains in the form of NH ₄ OH, H ₃ PO ₄ , KCl and sulfates:

N 25OÖ mg Zn ' 8 mgN 25Oö mg Zn '8 mg

P₂O₅ 1400 mg Mn 8 mgP ₂ O ₅ 1400 mg Mn 8 mg

K 65O mg Gu 1,2 mgK 65O mg Gu 1.2 mg

Mg 55 mg H₂O auf 1 1Mg 55 mg H ₂ O to 1 1

Pe . 10 mgPe. 10 mg

ο 223 132ο 223 132

: . — O —:. - O -

Der Energieeintrag beträgt 10 W/kg.Fermentorinhalt«, Die Hefetrockensubstanzkonzentration beträgt 14 bis 17 g/1? • die Produktivität 3,0 kg/t,*h und die Ausnutzung der n-Alkane 95 %· The energy input is 10 W / kg.Fermentorinhalt «, The yeast dry matter concentration is 14 to 17 g / 1? • the productivity 3.0 kg / t, * h and the utilization of n-alkanes 95 % ·

Die Aufkonzentrierung des Fermentorauslaufes'erfolgt über eine sogenannte Aufrahmrinne, wobei ein Wasserabscheidegrad von 70'% erreicht wird* Das abgetrennte Prozeßwasser wird ohne Sterilisation in den Fermentationsprozeß kontinuierlich zurückgeführt«, Hierbei zeigt sich in Abhängigkeit vom Rückführungsgrad und von der Dauer des Prozesses eine stabile Ausschüttung von Stoffwechsel- und Lyseprodukten und entsprechende Bakterienentwicklung _e Die Stabilität und Aktivität der Produktionskultür ist dadurch gewährleistet« Ein Nachimpfen des'Hefe st amines entfällt, Nach einer konventionellen Aufarbeitung der Biomassesuspension v/ird eine Biomasse mit einem Rohproteingehalt von 60 % und einem Kohlenwasserstoffgehalt von 0,1% erhalten»The fermentation effluent is concentrated by means of a so-called creaming channel, whereby a water separation efficiency of 70% is achieved. The separated process water is continuously returned to the fermentation process without sterilization. This results in a stable distribution depending on the degree of recycling and the duration of the process Metabolic and lysis products and corresponding bacterial development _e The stability and activity of the production cultivator is thereby ensured. "After inoculation of the yeast stain is eliminated. After conventional processing of the biomass suspension, a biomass with a crude protein content of 60 % and a hydrocarbon content of 0 is obtained , 1% received »

Claims

223 132

Erf indung sanspruch. '

1 * Method for obtaining microbial biomass by continuous cultivation of yeasts in the unprotected process on the basis of liquid hydrocarbons as sole carbon and energy source "in the presence of a free-oxygen gas, characterized in that the yeasts simultaneously with the bacterial strains xB 21 - ZIIvIET B and / or xB 27 - ZIMET B are cultivated. '.

2. The method according to item 1, characterized in that the bacteria cultivated simultaneously with the production strain are returned to the aqueous phase in the fermentation process and thus kept at the effective concentration level. «

3o method according to item 1 and 2, characterized in that the concentration of the bacterial. Simultaneous culture was controlled by temporarily changing the pH in the fermentation medium