CZ63395A3

CZ63395A3 - Composition based on polyoxyethylene-polyoxypropylene block co-polymers and a tank containing thereof

Info

Publication number: CZ63395A3
Application number: CZ95633A
Authority: CZ
Inventors: Mary Sou; Craig William Davis; Alison Green Floyd
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1992-10-19
Filing date: 1993-10-18
Publication date: 1995-07-12
Also published as: IL107313A0; TW276183B; SK44795A3; KR950703345A; CA2147889A1; HUT75701A; NZ256890A; WO1994008596A1; EP0671919A1; PL308459A1; MX9306467A; NO951462L; HU9501104D0; ZA937714B; GB9221883D0; AU5284293A; JPH08502284A; NO951462D0; BR9307268A; SI9300545A

Description

Kompozice na bázi polyoxyethylen-polyoxypropýlen^vých blokových kopolymerů a zásobník s jejím obsahem -—

Oblast techniky

Tento vynález se týká stabilního farmaceutického prostředku z polyoxyethylen-polyoxypropylenového blokového kopolymeru.

Dosavadní stav techniky

U určitých povrchově aktivních polyoxyethylen-polyoxypropylenových blokových kopolymerů bylo nalezeno, že mají příznivé účinky ve veterinární a humánní medicíně. Kopolymery se zvláště mohou používat pro ošetřování poruch oběhového ústrojí, samotné nebo v kombinaci s jinými prostředky, jako jsou fibrinolytické enzymy, antikoagulační prostředky, látky zachycující volné radikály, protizánětlivě působící prostředky, antibiotika, stabilizátory membrán a/nebo promývací prostředí. Tato použití jsou popsána v US patentech

č.	3	641 240,	4	801 452, 4 873 083,	4	879	109,	4 837 014,
4	897	263, 4	937	070, 4 997 644, 5	017	370	, 5	028 599,
5	030	448, 5	032	394, 5 039 520, 5	041	288	, 5	047 236,
5	064	643, 5	071	649, 5 078 995, 5	080	894	, 5	089 260,
5	152	979, 5	182	106 a 5 198 211, Z	nichž	všechny se zde

zahrnují do stavu techniky.

Povrchově aktivní kopolymery působí účinně na poruchy oběhového systému, kde nastává patologicky hydrofilní interakce mezi buňkami a/nebo molekulami. Předpokládá se, že tato interakce je způsobena

1) vyšší než normální koncentrací fibrinogenu,

2) vznikem intravaskulárně nebo lokálně rozpustného fibrinu, zvláště fibrinogenu o vysoké molekulové hmotnosti,

3) zvýšením tření v mikrovaskulatuře nebo

4) mechanickým nebo chemickým traumatem ke složkám krve.

Tyto poruchy způsobují zvýšení patologicky hydrofobních interakcí složek krve, jako jsou buňky nebo molekuly. Předpokládá se, že fibrin, zvláště rozpustný fibrin, zvyšuje vzájemnou adhezi buněk, zvyšuje zřetelně tření v malých krevních cévách a zvyšuje viskozitu krve, obzvláště při nízké rychlosti střihu. Předpokládá se také, že účinky povrchově aktivních kopolymerů se projevují v podstatě lubrikačním působením, protože snižují tření způsobené adhezí.

Komerčně dostupné povrchově aktivní polyoxyethylen-polyoxypropylenové blokové kopolymery obecně obsahují antioxidační prostředky. Zvláště prostředky z poloxameru 188, které se dají zakoupit u firmy BASF, Parsippany (New Jersey, USA), obsahují butylovaný hydroxytoluen (BHT). Tento antioxidační prostředek není normalizován pro farmaceutické použití. Kromě toho antioxidační prostředky mají sklon být hydrofobní a nerozpustné ve vodném prostředí a některé z nich mohou také představovat problémy z hlediska toxicity. Tyto látky jsou jednoznačně nežádoucí v injekčním roztoku pro použití v medicíně. Předmět tohoto vynálezu proto poskytuje vodný roztok blokového kopolymerů, který je v podstatě zbaven takových antioxidačních prostředků.

Nepřítomnost antioxidačního prostředku v roztocích blokových kopolymerů má sklon způsobit jejich oxidaci a degradaci. To vede ke kratšímu řetězci molekuly a vedlejším produktům, jako jsou organické kyseliny (například kyselina octová), co má za výsledek snížení hodnoty pH roztoku na 4 nebo i nižší hodnotu. Dále bylo pozorováno, že při nižších hodnotách pH nastává rychlejší a rozsáhlejší degradace kopolymerů. Předmět tohoto vynálezu se proto týká stabilního vodného roztoku blokového kopolymerů.

EP-A-103 290 popisuje vodné farmaceutické prostředky z polyoxypropylenu a polyoxyethylenu, které jsou upraveny na fyziologicky přijatelnou hodnotu pH, výhodně od 6 do 8, přidáním elektrolytů a pufrů. Není však popsán farmaceutický prostředek z polyoxyethylen-polyoxypropylenového blokového kopolymeru a není ani popsána nebo nepřímo naznačena některá z výše zmíněných nevýhod, spojených s takovým polymerem. Podobně US patent č. 4 938 961 popisuje vodný roztok polypropylenglykolu, ale nezmiňuje se o roztocích polyoxyethylen-polyoxypropylenového blokového kopolymeru.

Podstata vynálezu

Kromě výše uvedeného je dalším znakem tohoto vynálezu vodný roztok polyoxyethylen-polyoxypropylenového blokového kopolymeru, který je vhodný pro injekce, zvláště pro intravenózní injekce.

Podle toho tento vynález poskytuje farmaceuticky přijatelný zásobník, který za sníženého tlaku nebo v inertní atmosféře obsahuje sterilní vodný injekční roztok blokového polymeru obecného vzorce I

HO(C₂H₄O)_b(C₃H₆O)_a(C₂H₄O)_bH (I), ve kterém a znamená takové celé číslo, že hydrofobní složka představovaná skupinou (C₃H₆O) má molekulovou hmotnost od 950 do 4000 daltonů, výhodně přibližně od 1200 do 3500 daltonů, a b znamená takové celé číslo, že hydrofilní podíl představovaný skupinou (C₂H₄O) tvoří od 50 do 90 % hmotnostních kopolymeru, přičemž roztok je v podstatě prost antioxidačního prostředku a je pufrován na hodnotu pH od 5,5 do 6,5.

Výhodný blokový kopolymer obecného vzorce I je kopolymer, ve kterém molekulová hmotnost hydrofobní skupiny (C₃H₆O) je přibližně 1750 daltonů a celková molekulová hmotnost kopolymerů je přibližně 8400 daltonů. Zvláštním příkladem takového blokového kopolymerů je kopolymer, který je označen jako poloxamer 188 (BASF, Parsippany, New Jersey, USA). Rozbor struktury poloxamerů a poloxaminových blokových kopolymerů se může nalézt v publikaci I. R. Schmolka,

A Review of Block Polymer Surfactans, J. Am. Oil Chemists Soc. 54, 110-116 /1977/, která se zde zmiňuje jako součást stavu techniky.

U komerčně dostupných zdrojů poloxamerů 188 se uvádí, že mají molekulovou hmotnost přibližně 8400 daltonů. Ve skutečnosti blokový kopolymer sestává z molekul, které mají molekulovou hmotnost od velikosti menší než 3000 daltonů až do hodnoty nad 20 000 daltonů. Rozdílnost molekul a distribuce molekul v komerčně dostupném poloxamerů 188 se může ilustrovat širokým primárním a sekundárním pikem, který se dá detekční stanovit za použití gelové chromatografie, jak je popsáno v dokumentu WO 92/16484.

Složky s vysokou molekulovou hmotností, to znamená složky, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 kDa, jsou přítomny v komerčně dostupném poloxamerů 188 obvykle v množství do 3 % hmotnostních blokového kopolymerů nebo rovněž více. Taková významná množství mohou způsobit vzestup nežádoucích vedlejších účinků při klinických aplikacích blokového kopolymerů. Zvláště tyto složky mají delší poločas eliminační fáze než převážná část blokového kopolymerů a tak se hromadí v plasmě a v ledvinách. Kromě toho tyto složky s vysokou molekulovou hmotností mohou být odpovědné za aktivaci komplementárního systému. Tak je výhodné, když blokový kopolymer pro použití podle tohoto vynálezu je zbaven, alespoň v podstatném rozsahu, to znamená na méně než 1 % hmotnostní, výhodně na 0,5 nebo 0,2 % hmotnostního, jakýchkoli molekul, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 kDa.

Standardním měřítkem distribuce molekulové hmotnosti polymeru je jeho polydisperzita. Té se týká a ta je popsána v dokumentu WO 92/16484, jehož obsah je zde zahrnut do stavu techniky. V krátkosti uvedeno, polydisperzita 1,0 je ukazatelem polymeru, ve kterém všechny molekuly mají stejnou molekulovou hmotnost. Obvyklý polymer může mít polydisperzitu od 2 do 5. Polyoxyethylen-polyoxypropylenový blokový kopolymer, který se používá podle tohoto vynálezu, má polydisperzitu menší než 1,4, výhodně 1,3 nebo 1,2 nebo rovněž 1,1.

Povrchově aktivní blokový kopolymer se může vyrobit kondenzací ethylenoxidu a propylenoxidu za zvýšené teploty a tlaku v přítomnosti bázického katalyzátoru. Avšak jsou statistické změny v počtu monomerních jednotek, které se slučují za vzniku polymerního řetězce každého kopolymerů.

Daná molekulová hmotnost je přibližně průměrnou hmotností molekul kopolymerů v každém přípravku. Podrobnější rozbor výroby těchto kopolymerů se nachází v US patentu č.

674 619, který se zde uvádí jako součást stavu techniky. Výhodné formy blokového kopolymerů, to znamená formy, které jsou zbavené jakéhokoli podstatného množství molekul, jež mají molekulovou hmotnost větší než 15 kDa, nebo které mají polydisperzitu menší než 1,4, se mohou získat způsobem popsaným v dokumentu WO 92/16484.

Určité komerčně dostupné blokové kopolymery, jako je poloxamer 188, se mohou vyskytovat ve formě, která obsahuje antioxidační prostředek. Před použitím podle tohoto vynálezu, se antioxidační prostředek má odstranit z kopolymeru, například filtrací nebo za použití jiného prostředku známého v oboru. Výhodně se však blokový kopolymer dostává ve formě, která je již v podstatě prosta antioxidačního prostředku.

Množství blokového kopolymeru obsažené ve vodném roztoku pro injekce je výhodně od 135 do 165 mg/ml, zvláště okolo 150 mg/ml.

Hodnota pH vodného roztoku pro injekce je s výhodou přibližně 6.

Vodný roztok pro injekce je pufrován na požadovanou hodnotu pH za použití pufrovacího činidla. Příklady takových pufrovacích činidel zahrnují citrát (například citrát sodný a kyselinu citrónovou). Koncentrace pufrovacího činidla, zvláště citrátového pufrovacího činidla, by výhodně měla být 0,005 až 0,05-molární, obzvláště přibližně 0,01-molární.

Třebaže kromě vody může být popřípadě přítomno farmaceuticky přijatelné spolurozpouštědlo, je výhodné, když prostředí pro vodný injekční roztok je zcela nebo v podstatě vodné.

Vodný roztok pro injekce má s výhodou takovou tonicitu s krevním šerem pacienta, že se vyhne nežádoucím vedlejším účinkům. Pokud je zapotřebí zvýšit tonicitu vodného roztoku pro injekce, potom se v podstatě isotonický roztok může dostat přidáním farmaceuticky přijatelného prostředku, který je schopen zvýšit tonicitu roztoku na požadovanou úroveň. Příklady takového prostředku jsou dobře známé v oboru a zahrnují dextrózu, chlorid sodný a jejich směsi.

Ί

Vodný roztok pro injekce se může dostat ve sterilní formě filtrací nebo zpracováním v autoklávu.

Výroba vodného roztoku pro injekce a jeho plnění do farmaceuticky přijatelných zásobníků se s výhodou provádí podle způsobů, které jsou známy v oboru a za podmínek, které jsou určeny pro minimalizaci obsahu kyslíku ve vyráběném roztoku nebo v prostoru nad ním.

Příklady farmaceuticky přijatelného zásobníku zahrnují zásobníky, které jsou vyrobeny z plastické hmoty nebo ze skla, jako jsou lékovky, ampule a láhvičky. Zásobník může být popřípadě zbarven, jako například na jantarovou barvu, aby se snížilo vystavení vodného roztoku pro injekce působení ultrafialového záření a možné degradaci. Podle jiného provedení zásobníky mohou být bezbarvé, ale zabalené v neprůsvitné lepenkové krabici.

Výhodně je vodný roztok pro injekce obsažen v inertní atmosféře, kterou je dusík.

využitelnost

Povrchové aktivní kopolymer se může používat pro ošetřování poruch oběhového ústrojí, které jsou způsobeny nebo jejichž příčinou je patologická hydrofóbní interkace krevních složek. Příklady takových poruch zahrnují infarkt myokardu, mrtvici, infarkt střev nebo jiných tkání, zhoubné bujení, syndrom respirační tísné dospělých (ARDS), roztroušenou intravaskulární koagulaci (DIC), diabetes, neustálenou angínu pectoris, hemolyticky uremický syndrom, příznaky fragmentace červených buněk, tepelnou mrtvici, retinovaný plod, eklampsii, maligní hypertenzi, srpkovité onemocnění buněk, spáleninu, zlomeniny, trauma vyvolané šokem, chirurgický zákrok, sepsi, bakteriální, parazitické, virové a riketsiální infekce, které napomáhají aktivaci koagulačního systému, trauma centrálního nervového systému a stavy během libovolného chirurgického zákroku nebo bezprostředně po něm.

Povrchově aktivní kopolymer je také účinný při zvyšování kolaterální cirkulace k nepoškozeným tkáním s ohroženým dodáváním krve. Takové tkáně často sousedí s prostory, kde došlo k vaskulárnímu uzavření cév. Ukazuje se mechanizmus vedoucí ke snížení patologických hydrofobních interakcí v malých krevních cévách. Poruchy oběhového ústrojí, při kterých jsou účinné povrchově aktivní kopolymery, zahrnují cerebrální trombózu, cerebrální embolii, infarkt myokardu, nestabilizovanou angínu pectoris, přechodné cerebrální ischemické záchvaty, přerušované kulhání nohou, plastickou a rekonstruktivní chirurgii, angioplasty, periferní vaskulární chirurgii a ortopedickou chirurgii, zvláště pokud se používá turniket. Kopolymer se může také používat k ochraně orgánů pro transplantaci.

Vodný roztok pro injekce obsahující blokový kopolymer se může podávat pacientovi ve formé injekce nebo výhodně infuzí. Obvyklým místem pro podání bude periferní žíla.

Roztok ve formě injekce se běžně podá během 2 minut. Infuze se normálně provádí s roztokem, který je obsažen v infuzním vaku nebo nádobě nebo pomocí elektrického infuzního čerpadla. Roztok se může uvolňovat z infuzního vaku nebo nádoby do pacienta pod vlivem gravitačního působení nebo za použití infuzního čerpadla.

Účinné množství blokového kopolymeru pro ošetřování pacienta trpícího poruchou ohěhového ústrojí bude samozřejmě záviset na řadě okolností, včetně například věku a hmotnosti pacienta, přesného stavu vyžadujícího ošetření, cestě podáni a bude v konečném rozhodnutí záviset na uvážení ošetřujícího lékaře. Účinné množství však patrně bude z obecného hlediska v rozmezí od 0,2 do 3,0 g/kg, výhodně od 1,5 do 2,5 g/kg tělesné hmotnosti, při podávání pacientovi během časového období od 1 do 48 hodin.

Příklady provedení vvnálezu

Dále uvedené příklady slouží k ilustraci tohoto vynálezu.

Příklad 1

Pro šarži o velikosti 5000 litrů se použije dále uvedené výroby a výrobního postupu, přičemž se pracuje za použití ochrany dusíkem.

Na šarži

poloxamer 188, NF¹	750,00 kg
chlorid sodný, USP	15,40 kg
citrát sodný (dihydrát), USP	11,90 kg
kyselina citrónová (bezvodá), USP	1,83 kg
voda pro injekce, USP	podle potřeby
celkem	5000,0 litrů

^x Obsahuje méně než 0,2 % molekul, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 kDa a je poskytnut v této formě

1. Připraví se přibližně 4000 litrů vody pro injekce, předehřáté na teplotu 70 až 80 °C ve vhodné nádobě (nádoba č

1). Dále se připraví dalších 1000 litrů vody pro injekce předehřáté na teplotu 70 až 80 ’C do druhé nádoby (nádoba č. 2).

2. Voda v obou nádobách se profukuje filtrovaným plynným dusíkem. Obsah nádob se ochladí na teplotu místnosti, přičemž se nepřetržitě profukují filtrovaným plynným dusíkem.

3. Rozpustí se kyselina citrónová, citrát sodný a chlorid sodný pod dusíkovou atmosférou a vzniklý roztok se vnese do vody v nádobě č. 1. V profukování filtrovaným plynným dusíkem se pokračuje.

4. Horní část prostoru se pokryje filtrovaným plynným dusíkem a nato se profukování dusíkem přeruší. K roztoku se pomalu přidá blokový kopolymer a vše se míchá až do rozpuštění .

Poznámka: Za míchání se pokračuje v pokrývání horní části prostoru filtrovaným plynným dusíkem.

5. Přidá se dostatečné množství vody pro injekce, předem profouknuté dusíkem (z nádoby č. 2), aby se šarže upravila na konečný objem a vše se míchá.

6. Roztok se filtruje membránovým filtrem 0,45 μιη nebo jeho ekvivalentem, do vhodného čistého zásobníku profouknutého dusíkem.

7. Za podmínky dodržování čistoty se plní přibližně vždy 500 ml roztoku do předem vymytých nádob z flintového skla, typu 1 o objemu 650 ml.

8. Za podmínky dodržování čistoty se aplikuje vhodný uzávěr na láhve, aniž by se do nich vložil.

9. Na horní část naplněných láhví se aplikuje snížený tlak a uzávěr se vsune do hrdla.

10.

Provede se neprodyšné uzavření.

11. Produkt se tepelně sterilizuje.

12. Produkt se ochladí na teplotu místnosti a potom míchá až do stejnorodého stavu.

13. Láhve se uskladní v jednotlivých lepenkových krabicích k ochraně produktu před světlem.

V 1 ml základního roztoku jsou obsažena dále uvedená množství výše popsaných složek prostředku:

Na mililitr poloxamer 188, NF¹

150,0 mg chlorid sodný, USP

3,08 mg citrát sodný (dihydrát), USP

2,38 mg kyselina citrónová (bezvodá), USP

0,366 mg voda pro injekce, USP podle potřeby celkem

1,0 ml

Obsahuje méně než 0,2 % molekul, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 kDa a je poskytnut v této formě

Vodný roztok pro injekce, získaný tímto způsobem, je čirý bezbarvý roztok, který neobsahuje hmotu ve formě částic, zákalu nebo rozvířené složky a je stabilní, jak je zřejné z dále uvedených údajů:

Produkty degradace

Sklado- Poloxamer 188 (ppm) vání pH D Mw Mn %l.s. ach act pro met form

při skladováni	5,8	1,21	5718,0 4713,0	99,3	25	<1	21	<1	2
UV:
7 dní	5,8	—	není uvedeno	98,4	25	3	24	<1	2
14 dní	5,8	—	není uvedeno —	99,1	20	3	20	<1	2
Fluor:
7 dní	5,8	—	není uvedeno	100,3	24	7	25	<1	1
14 dní	5,8	—	není uvedeno	99,0	19	7	19	<1	1
50 °C
1 měsíc	5,8	1,24	5438,0 4408,0	101,6	22	<1	19	<1	4
4 měsíce	5,8	1,24	5418,0 4369,0	98,3	33	1	29	<1	6
40 °C
4 měsíce	5,7	1,26	5437,0 4326,0	98,6	36	<1	33	<1	5
30 °C
4 měsíce	5,6	1,25	5429,0 4354,0	99,2	35	<1	33	<1	5

Vysvětlivky:

ppm:	díly na milion	ach:	acetaldehyd
D:	polydispersita (Mw/Mn)	act:	aceton
N/A:	nedostupné	pro:	propionaldehyd
Fluor:	fluorescent	met:	methanol
1. s. :	značíčí síla	form:	formaldehyd

Příklad 2

Postup z příkladu 1 se opakuje pro velikost šarže 200 litrů za použití dále uvedené výroby. Připraví se 160 litrů vody do nádoby č. 1 a 40 litrů vody do nádoby č. 2.

poloxamer 188, NF¹ chlorid sodný, USP

30,00 kg

0,616 kg citrát sodný (dihydrát), USP kyselina citrónová (bezvodá), USP voda pro injekce, USP celkem

0,476 kg

0,0732 kg podle potřeby

200,0 litrů

Výsledný vodný roztok pro injekce má podobný fyzikální vzhled, jaký je v příkladu 1. Dosáhne se hodnot stability, které jsou uvedeny dále.

Produkty degradace

Sklado- Poloxamer 188 (ppm)

vání	PH	D	Mw	Mn	%1. s.	ach	act	pro	met	form
při skladování	5,8	1,24	5550,0	4482,0	99,8	32	<1	11,0	<1	<1
UV:
7 dní	5,7	1,28	5764,5	4509,5	99,7	23	4	24	1	3
14 dní	5,9	1,29	5789,0	4498,0	98,8	22	7	23	1	1
Fluor:
7 dní	5,8	1,29	5852,0	4535,5	99,2	24	9	23	2	3
14 dní	5,9	1,29	5873,0	4545,5	98,1	25	12	25	2	4
50 °C
1 měsíc	5,8	1,26	5591,5	4428,0	104,8	33	1	29	<1	7
2 měsíce	5,7	1,35	5411,0	3996,0	101,7	35	1	28	2	10
40 °C
3 měsíce	5,8	1,25	5414,0	4327,0	99,6	30	<1	22	<1	8
30 °C
3 měsíce	5,9	1,26	5328,0	4228,0	98,6	22	<1	19	<1	4

Vysvětlivky:

ppm: díly na milion

D: polydispersita (Mw/Mn)

N/A: nedostupné

Fluor: fluorescent

l.s.: značíčí síla ach: acetaldehyd act: aceton pro: propionaldehyd met: methanol form: formaldehyd

PATENTOVÉ

T?

ž Z. i> Z v> ·< C· - l; 23.

Ξ ^r >

s.

Claims

NÁROKY

1. Uzavřený farmaceuticky přijatelný zásobník, který za sníženého tlaku nebo v inertní atmosféře obsahuje sterilní vodný injekční roztok blokového polymeru obecného vzorce I

HO(C₂H₄O)_b(C₃H₆O)_a(C₂H₄O)_bH (I), ve kterém a znamená takové celé číslo, že hydrofobní složka představovaná skupinou (C₃H₆O) má molekulovou hmotnost od 950 do 4000 daltonů a b znamená takové celé číslo, že hydrofilní podíl představovaný skupinou (C₂H₄O) tvoří od 50 do 90 % hmotnostních kopolymeru, přičemž roztok je v podstatě prost antioxidačního prostředku a je pufrován na hodnotu pH od 5,5 do 6,5.
2. Zásobník podle nároku 1, vyznačující se t i m, že molekulová hmotnost hydrofobní složky je od 1200 do 3500 daltonů.
3. Zásobník podle nároku 2,vyznačující se t i m, že molekulová hmotnost hydrofobní složky je přibližně 1750 daltonů a celková molekulová hmotnost kopolymeru je přibližně 8400 daltonů.
4. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tim, že blokový kopolymer je v podstatě prost jakýchkoli molekul, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 000 daltonů.
5. Zásobník podle nároku 4, vyznačující se t í m, že množství molekul, které mají molekulovou hmotnost větší než 15 000 daltonů, je menší než 1 %.
6. Zásobník podle nároku 5, vyznačující se ti m, že množství je menší než 0,5 %.
7. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že blokový kopolymer má polydisperzitu menší než 1,4.
8. Zásobník podle nároku 7,vyznačující se t í m, že polydisperzita je menší než 1,3.
9. Zásobník podle nároku 8, vyznačující se t í m, že polydisperzita je menší než 1,2.
10. Zásobník podle nároku 9,vyznačuj ící se t í m, že polydisperzita je menší než 1,1.
11. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tim, že blokový kopolymer je přítomen v množství od 135 do 165 mg/ml.
12. Zásobník podle nároku 11,vyznačuj ící se t í m, že množství odpovídá přibližně 150 mg/ml roztoku.
13. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že hodnota pH je okolo 6.
14. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že roztok je pufrován za použití citrátu jako pufrovacího činidla.
15. Zásobník podle nároku 14,vyznačující se t i m, že koncentrace citrátového pufrovacího činidla je 0,005 až 0,05-molární.
16. Zásobník podle nároku 15,vyznačující se t í m, že koncentrace je přibližně 0,01-molární.
17. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že roztok je v podstatě isotonický s krevním šerem člověka.
18. Zásobník podle některého z předcházejících nároků, vyznačující se tím, že inertní atmosférou je dusík.