CZ404691A3 - Process for removing residues of cyclodextrin from fats and oils - Google Patents
Process for removing residues of cyclodextrin from fats and oils Download PDFInfo
- Publication number
- CZ404691A3 CZ404691A3 CS914046A CS404691A CZ404691A3 CZ 404691 A3 CZ404691 A3 CZ 404691A3 CS 914046 A CS914046 A CS 914046A CS 404691 A CS404691 A CS 404691A CZ 404691 A3 CZ404691 A3 CZ 404691A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- cyclodextrin
- alpha
- amylase
- bacillus
- fats
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/01001—Alpha-amylase (3.2.1.1)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C15/00—Butter; Butter preparations; Making thereof
- A23C15/12—Butter preparations
- A23C15/14—Butter powder; Butter oil, i.e. melted butter, e.g. ghee ; Anhydrous butter
- A23C15/145—Removal of steroids, e.g. cholesterol or free acids; Fractionation of anhydrous milkfat by extraction with solvents other than solvent crystallisation or with supercritical gases or by distillation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
- A23L5/25—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification using enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
- A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
- A23L5/27—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B3/00—Refining fats or fatty oils
- C11B3/003—Refining fats or fatty oils by enzymes or microorganisms, living or dead
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Edible Oils And Fats (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- General Preparation And Processing Of Foods (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
Description
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu odstraňování zbytků cyklodextrinu z tuků a olejů, z nichž byly působením cyklodextrinu odstraněny komplexovatelné nežádoucí látky jako steroly, zvláš tě cholesterol, volné mastné kyseliny, vitaminy, barviva a některé zvláštní nečistoty a které ještě obsahují určitý zbytek cyklodextrinu.
Dosavadní stav techniky
Oe známo, že zvýšený obsah cholesterolu v krevním seru u lidí představuje zvýšené riziko vzniku arteriosklerosy a koronárního srdečního onemocnění. Z tohoto důvodu je snahou potravinářského průmyslu podstatně snížit obsah cholesterolu nebo esterů cholesterolu v potravinách živočišného původu, bohatých na tuky, přičemž podstatný problém spočívá v tom, aby byly pokud možno zachovány sensorické a fyziologické vlastnosti potravin.
Poměrně šetrným způsobem odstraněním derivátů cholesterolu je tvorba komplexů těchto látek s beta-cyklodextrinem s následným odstraněním vytvořeného komplexu.
Podle EP 0 256 911 se na zkapalněný tuk působí pevným cyklodextrinem, čímž je možno snížit obsah cholesterolu až o 80 %, je však třeba opakovaného působení cyklodextrinu.
Z publikace W. Schlenk, V. M. Sand, 0. Am. Chem. Soc.,
84, str. 2312 (1961) je známo, že lze vytvořit komplexy volných mastných kyselin s cyklodextrinem.
Podstatným problémem tohoto postupu je skutečnost, že určitý podíl rozpuštěného cyklodextrinu zůstane v tucích a olejích při použití dosud známých postupů pro oddělení těchto látek.
Za běžných podmínek jsou cyklodextriny (alfa, beta a gama) s šesti až osmi jednotkami glukosy oligosacharidy, které vytvářejí kruh a jsou netoxické. Při zkouškách na akutní toxicitu u myší a krys nebylo možno pozorovat při perorálním podání žádné známky toxického účinku. Přesto nejsou cyklodextriny v řadě států dosud povoleny jako přísady do potravin.
Vynález si klade za úkol navrhnout postup k odstranění zbytků cyklodextrinu z tuků a olejů tak, aby docházelo bez velkých technických nákladů k dobrému a selektivnímu odstranění cyklodextrinu z uvedených látek.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je tedy způsob odstraňování zbytků cyklodextrinu z tuků a olejů, který spočívá v tom, že se tuky a oleje s obsahem cyklodextrinu emulgují ve vodě a cyklodextrin se enzymaticky odbourává při použití alespoň jedné alfa-amylázy, která se volí z enzymů, produkovaných mikroorganismy ze skupiny Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Bacillus polymyxa, dále je možno užít amylázu ze slinivky vepře, z Bacillus coagulans nebe Flavobacterium a/nebo se cyklodextrin enzymaticky odbourává při použití CTGázy, která se volí z enzymů, produkovaných bakteriemi z čledi Bacillus, Klebsiella, Micrococcus a alkalofilní bakterie.
Bylo neočekávaně prokázáno, že tímto způsobem je možno dosáhnout prakticky úplného odbourání cyklodextrinu v tucích a olejích hospodárným způsobem. To je překvapující z toho důvodu, že cyklodextriny byly popsány jako účinné inhibitory alfa- i beta-amyláz podle publikace R. 0. Weselake, R. D.
Hill, Cereal Chem. 60, str. 98, 1983, a jako látky, odolné proti působení většiny alfa- i beta-amyláz. Navíc bylo zjištěno, že několik typů alfa-amyláz, například enzymy z Bacillus polymyxa, Aspergillus oryzae nebo amyláza ze slinivky vepře jsou schopné cyklodextriný hydrolyzovat, avšak s malou rychlostí. Je proto zvláště překvapující a neočekávané, že účinnost těchto látek v emulzích tuků a olejů je dostatečné k relativně rychlému a úplnému odbourání cyklodextrinu.
Při provádění způsobu podle vynálezu se výchozí látka, která je tvořena tuky a oleji živočišného nebo rostlinného původu, například máslo, sádlo nebo lůj, husí sádlo, rybí olej, slunečnicový olej a podobně, přičemž tyto tuky a oleje obsahují po působení cyklodextrinu ještě zbytek, například 0,001 až 1,0 % hmotnoatních cyklodextrinu, podrobí enzymatickému zpracování.
S výhodou se užijí amylázy, produkované mikroorganismy ze skupiny Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Bacillus polymyxa, dále amyláza ze slinivky vepře, amyláza, produkovaná Bacillus coagulans a čeledí Flavobacterium. Ze skupiny CTGáz, tj . cyklodextrintransglykosyláz (EC 2.4.1.19) jsou zvláště vhodnými enzymy ty enzymy, které jsou produkovány bakteriemi z čeledi Bacillus, například Bacillus macerans, Bacillus megaterium, Bacillus stearothermophilus, Bacillus circulans a Bacillus ohbensis, dále čeledí Klebsiella, například pneumoniae, Micrococcus, například varians a alkalofilními bakteriemi, například kmeny č. 38-2 a 17-1. Uvedené enzymy je možno získat také po genetické manipulaci expresí v produkčních buňkách jiného původu. Tyto enzymy umožní prakticky odbourání cyklodextrinu. Požadované množství enzymů se v podstatě řídí výchozím obsahem cyklodextrinu v tuku nebo v oleji a v případě alfa-amylázy je zpravidla zapotřebí 10 až
500 FAU na 1 gram cyklodextrinu, který má být odstraněn.
FAU = fungální alfa-amylázy, to znamená množství, které odbourá za standardních podmínek (substrát: rozpustný škrob, doba inkubace 7 až 20 m inut, teplota: 37 °C, pH 4,7) 5,2 g škrobu za hodinu. V případě CTGáz se užije s výhodou 0,5 až 20 U (jednotka) na 1 gram cyklodextrinu, který má být odstraněn. Jedna jednotka enzymu odbourá jeden mikromol substrátu za minutu. Je možno užít i větší množství enzymu, dochází však ke snížení hospodárnosti vzhledem k tomu, že již není možno dosáhnout lepšího účinku. Podle výhodného provedení způsobu podle vynálezu se užívá směs alfa-amylázy a CTGázy.
Je důležité, aby tuk nebo olej byl užit ve formě emulze olej ve vodě. K tomuto účelu se výchozí materiál, popřípadě po rozpuštění emulguje ve vodě, přičemž se s výhodou na 1 kg tuku nebo oleje přidá 0,1 až 5 kg vody. Tato voda již může obsahovat alfa-amylázy a/nebo CTG-ázu. Enzym je však možno přidat také až po vytvoření emulze. Před přidáním enzymu se s výhodou upraví hodnota pH vody nebo emulze na hodnotu, optimální pro použitý enzym. Tato úprava pH se s výhodou provádí pomocí pufrů, je však možno ji provést také jednoduchým přidáním kyseliny nebo zásady, s výhodou poživatelných látek, například kyseliny citrónové, kyseliny mléčné a solí těchto kyselin. Do emulze je možno popřípadě přidat daké kofaktory, například dvojmocné ionty, jako ionty vápenaté nebo hořečnaté ve stopových množstvích. V případě použití CTG-ázy je možno také ještě přidat akceptory, například glukosu.
Podmínky zpracování, jako je teplota nebo doba zpracování je možno v určitém rozmezí měnit, avšak tuky a oleje by se při zpracování měly nacházet v kapalném stavu, to znamená, že enzymatické odbourávání by se mělo provádět v rozmezí teploty tání tuku nebo oleje a 70 °C. 5 výhodou se užije pro enzymatické odbourávání teplotního rozmezí 25 až 55 °c, doba odbourávání je pak 1 až 5 hodin.
Způsobem podle vynálezu je takto možno technicky velmi jednoduchým způsobem dosáhnout dobrého a selektivního odstranění cyklodextrinu ze zpracovávaného tuku nebo oleje, přičemž zbytek cyklodextrinu po tomto zpracování je nižší než hranice prokazatelnosti 10 ppm.
Praktické provedení způsobu podle vynálezu bude osvětleno následujícími příklady.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
K 1 kg rybího tuku,předem zpracovaného beta-cyklodextrinern se zbytkovým obsahem beta-cyklodextrinu 150 ppm se přidá 1 kg vody a směs se emulguje při teplotě 40 °C. Pak se pH emulze upraví kyselinou citrónovou na hodnotu 5,5. Pak se přidá 50 FAU směsi alfa-amyláz z Aspergillus oryzae ve formě běžně dodávaného výrobku Fungamyl 800 (Novo).
Směs se inkubuje 2 hodiny při teplotě 40 °C, po této době již není možno beta-cyklodextrin prokázat (hranice prokazatelnosti je 10 ppm).
Příklad 2 kg máselného tuku, předem zpracovaného beta-cyklodextrinem, se zbytkovým obsahem beta-cyklodextrinu 2500 ppm se emulguje v 1 kg vody při teplotě 50 °C. Pak se upraví pH emulze přidáním kyseliny citrónové na hodnotu 6,2 a emulze se inkubuje 2 hodiny při teplotě 50 °C s 250 FAU alfa-amylázy z Sacillus coagulans (nečištěný preparát). Po tomto zpracování již není možno beta-cyklodextrin prokázat (hranice prokazatelnosti je 10 ppm).
- 6 Příklad 3 kg hovězího loje se zbytkovým obsahem 200 ppm alfa-cyklodextrinu se emulguje při teplotě 40 °C v roztoku s obsahem síranu vápenatého v množství 5 mmol/litr a pH se upraví kyselinou citrónovou na hodnotu 6,5. Pak se k emulzi přidá 5 g glukosy a 20 U CTG-ázy z Bacillus macerans. Směs se inkubuje 2,5 hodiny při teplotě 40 °C, po této době již není možno prokázat žádný alfa-cyklodextrin (hranice prokazatelnosti je 10 ppm).
Zastupuje:
KOfíejzov,' a“vokáli<a τ
Claims (6)
- PATENTOVÉ1. Způsob odstraňování zbytků cyklodextrinu z tuků a olejů, vyznačující se tím, že se tuky a oleje emulgují ve vodě a cyklodextrin se enzymaticky odbourává při použití alespoň jedné alfa-amylázy ze skupiny alfa-amyláz, produkovaných mikroorganismy Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Bacillus polymyxa, při použití amylázy ze slinivky vepře, alfa-amylázy z Bacillus coagulans nebo Flavobacterium nebo/a s výhodou při použití CTG-ázy, která se volí z enzymů, produkovaných bakteriemi čeledi Bacillus, Klebsiella, Micrococcus a alkalofilními bakteriemi.
- 2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se t í m , že se užije 10 až 500 FAU alfa-amylázy na 1 g cyklodextrinu, který má být odstraněn.
- 3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že se užije 0,5 až 20 U CTG-ázy na 1 g cyklodextrinu, který má být odstraněn.
- 4. Způsob podle nároků 1 nebo 2, vyznačující se tím , že se enzymatické odbourávání provádí při teplotě tání užitého tu/u nebo oleje až teplotě 70 °C.
- 5. Způsob podle nároků laž3, vyznačující se tím, že se enzymatické odbouráváš provádí při teplotě 25Jaž 55 °C.
- 6. Způsob podle nároků 1 až 5 , vyznačující se tím, že se jeden hmotnostní díl tuku nebo oleje emulguje v 0,1 až 5 hmotnostních dílech vody.ZastupujeJUDr. Zdeňka KOREJZOVÁ.........advokátka
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE4041386A DE4041386A1 (de) | 1990-12-21 | 1990-12-21 | Verfahren zur entfernung von cyclodextrin-rueckstaenden aus fetten und oelen |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CZ404691A3 true CZ404691A3 (en) | 1993-01-13 |
Family
ID=6421169
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CS914046A CZ404691A3 (en) | 1990-12-21 | 1991-12-23 | Process for removing residues of cyclodextrin from fats and oils |
Country Status (17)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0492475B1 (cs) |
JP (1) | JPH04296396A (cs) |
AT (1) | ATE117357T1 (cs) |
AU (1) | AU640837B2 (cs) |
CA (1) | CA2058038A1 (cs) |
CZ (1) | CZ404691A3 (cs) |
DE (2) | DE4041386A1 (cs) |
DK (1) | DK0492475T3 (cs) |
ES (1) | ES2067840T3 (cs) |
HR (1) | HRP921073A2 (cs) |
HU (1) | HU208474B (cs) |
IE (1) | IE65633B1 (cs) |
NO (1) | NO915069L (cs) |
NZ (1) | NZ240920A (cs) |
PL (1) | PL165829B1 (cs) |
RU (1) | RU2086618C1 (cs) |
ZA (1) | ZA919676B (cs) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
NL9202130A (nl) * | 1992-12-09 | 1994-07-01 | Nl Ind Eiprodukten Bv | Werkwijze voor het verwijderen van Beta-cyclodextrine uit eigeel of eigeelplasma. |
DE4331565A1 (de) * | 1993-09-16 | 1995-03-23 | Consortium Elektrochem Ind | Verfahren zur Reduktion des Gehalts an Triglyceriden im Eigelb und in eigelbhaltigen Produkten |
EP2106280A2 (en) * | 2006-12-22 | 2009-10-07 | Danisco US, INC., Genencor Division | Enzyme-assisted de-emulsification of aqueous lipid extracts |
Family Cites Families (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
DE4001611C1 (cs) * | 1990-01-20 | 1991-02-28 | Skw Trostberg Ag, 8223 Trostberg, De | |
FR2657623B1 (fr) * | 1990-01-29 | 1995-02-17 | Roquette Freres | Procede de recuperation de composes lipophiles extraits d'un milieu gras par action de la cyclodextrine. |
DE4029287A1 (de) * | 1990-09-14 | 1992-03-19 | Sueddeutsche Kalkstickstoff | Verfahren zur herstellung von cholesterinreduziertem eigelb |
-
1990
- 1990-12-21 DE DE4041386A patent/DE4041386A1/de not_active Withdrawn
-
1991
- 1991-12-04 IE IE421491A patent/IE65633B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-12-09 ZA ZA919676A patent/ZA919676B/xx unknown
- 1991-12-10 NZ NZ240920A patent/NZ240920A/xx unknown
- 1991-12-11 AU AU89630/91A patent/AU640837B2/en not_active Ceased
- 1991-12-18 CA CA002058038A patent/CA2058038A1/en not_active Abandoned
- 1991-12-19 DE DE59104331T patent/DE59104331D1/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-12-19 PL PL91292867A patent/PL165829B1/pl unknown
- 1991-12-19 AT AT91121867T patent/ATE117357T1/de not_active IP Right Cessation
- 1991-12-19 HU HU914055A patent/HU208474B/hu not_active IP Right Cessation
- 1991-12-19 JP JP3336465A patent/JPH04296396A/ja active Pending
- 1991-12-19 EP EP91121867A patent/EP0492475B1/de not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-19 ES ES91121867T patent/ES2067840T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-12-19 DK DK91121867.5T patent/DK0492475T3/da active
- 1991-12-20 NO NO91915069A patent/NO915069L/no unknown
- 1991-12-20 RU SU915010432A patent/RU2086618C1/ru active
- 1991-12-23 CZ CS914046A patent/CZ404691A3/cs unknown
-
1992
- 1992-10-16 HR HRP921073AA patent/HRP921073A2/hr not_active Application Discontinuation
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
AU640837B2 (en) | 1993-09-02 |
JPH04296396A (ja) | 1992-10-20 |
EP0492475B1 (de) | 1995-01-18 |
IE65633B1 (en) | 1995-11-01 |
DE59104331D1 (de) | 1995-03-02 |
DK0492475T3 (da) | 1995-05-29 |
IE914214A1 (en) | 1992-07-01 |
DE4041386A1 (de) | 1992-06-25 |
AU8963091A (en) | 1992-06-25 |
ZA919676B (en) | 1992-09-30 |
EP0492475A1 (de) | 1992-07-01 |
CA2058038A1 (en) | 1992-06-22 |
ATE117357T1 (de) | 1995-02-15 |
HRP921073A2 (hr) | 1995-02-28 |
PL292867A1 (en) | 1992-08-24 |
NZ240920A (en) | 1993-04-28 |
NO915069D0 (no) | 1991-12-20 |
PL165829B1 (pl) | 1995-02-28 |
ES2067840T3 (es) | 1995-04-01 |
HU208474B (en) | 1993-11-29 |
RU2086618C1 (ru) | 1997-08-10 |
NO915069L (no) | 1992-06-22 |
HU914055D0 (en) | 1992-03-30 |
HUT61163A (en) | 1992-12-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU616364B2 (en) | Process for the removal of b-cyclodextrin from egg yolk or egg yolk plasma | |
EP0325872B1 (fr) | Procédé de préparation enzymatique d'oligodextranes utiles dans la fabrication de substituts du sucre, et nouveaux oligodextranes | |
US5464766A (en) | Multienzyme powdered composition containing bacteria for treatment of waste | |
CZ298366B6 (cs) | Zpusob snižování fosfor obsahujících podílu v rostlinných olejích | |
HUT61446A (en) | Method for producing egg-yolk of decreased cholesterol content | |
MXPA04005679A (es) | Alimento animal. | |
Yamatoya et al. | Effects of hydrolyzed xyloglucan on lipid metabolism in rats | |
CZ404691A3 (en) | Process for removing residues of cyclodextrin from fats and oils | |
JP2002171931A (ja) | 水中油型乳化物 | |
CZ293494A3 (en) | Method of removing residual cyclodextrin from a system | |
US20030082290A1 (en) | Method for stabilizing bran and the resultant composition | |
JP3332510B2 (ja) | 洗浄剤組成物 | |
EP0763981B1 (en) | Immobilized enzyme for removal of residual cyclodextrin | |
US20020004192A1 (en) | Decolorized animal blood products and method of making same | |
JPS6015314B2 (ja) | β−アミラ−ゼの製造法 | |
JPH0565149B2 (cs) | ||
Cox et al. | Detergent Composition Containing a Microbial Hetero-polysaccharide Stabilizing Agent | |
JPH0331435B2 (cs) |