CZ354199A3 - Farmakologické prostředky - Google Patents

Abstract

Selektivní antagonisté receptoru CíluR5, kteréjsou vhodné pro léčbu bolesti.Řešení se rovněž týká nových derivátů dekahydroisochinolinu, kteréjsou selektivními antagonisty receptoru GluR5.

Description

Farmakologické prostředky

Oblast techniky

Vynález se týká nové třídy antagonistů receptorů glutamatu které jsou vhodné pro léčení bolesti.

Dosavadní stav techniky

L-glutamat zprostředkovává excitační neurotransmisi v centrálním nervovém systému savců jeho působením na receptory glutamatu. Existují dvě rozsáhlé třídy receptorů glutamatu, známé jako ionotropní glutamatový receptor a metabotropní glutamatový receptor. V rámci ionotropního glutamatového receptorů jsou zahrnuté tři skupiny, známé jako receptory N-methyl-D-aspartatu (NMDA), (R,S)-2-amino-3-(3-hydroxy-5-methyl-isoxazol-4-yl)propanoatu (AMPA) a kainatu (KA). Pomocí molekulárně biologických studií bylo zjištěno, že receptory AMPA jsou složeny ze subjednotek (GluRl-4), které se mohou spojovat a vytvářet funkční kanály. Rovněž bylo identifikováno pět kainatových receptorů, klasifikovaných bud jako receptory s vysokou afinitou (KA1 a KA2) nebo receptory s nízkou afinitou (GluRS, GluR6 a GluR7). (Bleakman a sp., Molecular Pharmacology, 1996, Vol.49, č.4, str.581-585).

V Evropské patentové přihlášce Č.590789A1 a U.S.Patentu č.5,446,051 jsou uvedeny určité dekahydroisochinolinové deriváty jako antagonisté receptorů AMPA, a které jako takové jsou vhodné pro léčení mnoha různých stavů, včetně bolesti.

V těchto spisech však není u žádné sloučeniny uvedeno její hodnocení pro použití při léčení bolesti.

Podstata vynálezu • · • ·

Autoři vynálezu překvapivě zjistili, že sloučenina zahrnutá v Evropské patentové přihlášce Č.590789A1, totiž (3S,4aR,6S,8aR)-6-[(l,2)H-tetrazol-5-y1)methoxymethy1]dekahydroisochinol in-3-karboxylová kyselina je selektivní antagonista GluR5 a je účinná při léčení bolesti v modelech na zvířatech. Proto došli k předpokladu, že nalezli novou farmakologickou třídu prostředků, reprezentovanou kyselinou (3S,4aR,6S,8aR)-6-[(1(2)H-tetrazol-5-y1)methoxymethy1]dekahydroisochinolin-3-karboxylovou, která je vhodná pro léčení bolesti.

Podle jednoho aspektu vynález tedy poskytuje způsob léčení bolesti, který obsahuje podání účinného množství selektivního antagonisty receptorů GluR5 savci, kterého je zapotřebí léčit.

Podle dalšího aspektu vynález poskytuje použití selektivního antagonisty receptorů GluR5 pro výrobu léčiva určeného k léčení bolesti.

Antagonisty receptorů GluR5 je možné identifikovat studiemi vazby s radioaktivně značenými ligandy na klonovaném a exprivovaném lidském receptorů GluR5 (Korczak a sp., 1994, Recept.Channnels 3, 41-49), pomocí elektrofyziologických odezev funkční aktivity lidského GluR5 receptorů měřených na svorkovém napětí celé buňky (Korczak a sp., 1994, Recept. Channels 3, 41-49) a elektrofyziologických odezev proudů na akutně izolovaných neuronech ganglii zadních kořenů míchy měřených na svorkovém napětí celé buňky (Bleakman a sp., 1996, Mol.Pharmacol. 49, 581-585).

Selektivitu sloučenin působících na receptory GluR5 lze • · • · určit stanoveními aktivity na dalších AMPA a kainatových receptorech, která zahrnují studie vazby receptor-1igand a elektrofyziologické odezvy funkční aktivity na lidském GluRl, GluR2, GluR3 a GluR4 receptorech měřené na svorkovém napětí celé buňky (Fletcher a sp., 1995, Recept.Channe1s 3, 21-31), studie vazby receptor-1igand a elektrofyziologické odezvy funkční aktivity na lidských GluR6 receptorech měřené na svorkovém napětí celé buňky (Hoo a sp., Recept.Channe1s 2, 327-338) a elektrofyziologické odezvy funkční aktivity na receptorech AMPA v akutně izolovaných Purkyňových buňkách malého mozku měřené na svorkovém napětí celé buňky (Bleakman asp., 49, 581-585) a v dalších tkáních exprivujících receptory AMPA (Fletcher a Lodge, 1996, Pharmacol.Ther., 70, 65-89).

Výhodně má selektivní antagonista receptorů GluR5 vazebnou afinitu nejméně lOkrát větší vůči GluR5 než pro ostatní receptory glutamatu, výhodněji nejméně lOOkrát větší.

Selektivní antagonista GluR5 pro použití podle vynálezu může být jedna sloučenina nebo to může být kombinace sloučenin, která je schopná působit jako selektivní antagonista receptorů GluR5 vzhledem k jiným ionotropním receptorúm glutamatu. Například to může být kombinace sloučeniny schopné působit jako antagonista receptorů GluRS a jednoho nebo více dalších receptorů glutamatu v kombinaci s jednou nebo více sloučeninami schopnými blokovat její účinky na jeden nebo více dalších ionotropních receptorů glutamatu. Výhodně je uvedený antagonista GluR5 jedna sloučenina.

Bylo zjištěno, že následující sloučeniny jsou selektivní antagonisté receptorů GluR5 a jsou proto pro použití podle vynálezu výhodné: 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-((((lH-tetrazol-5-y1)methyl)oxy)methy1-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin4 • · • · • · · · ·

3-karboxylová kyselina, 3S,4aR,6S,8aR-6-((((lH-tetrazol-5-yl)~ methyl)oxy)methyl)-l,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin-3-karboxylová kyselina, 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-(((4-karboxy)fenyl)methy1-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin-3-karboxylová kyselina a 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl)-l,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin-3-karboxylová kyselina.

Výsledky hodnocení aktivity výše uvedených dekahydroisochinolinových derivátů na receptor GluR5 a na další ionotropní receptory glutamatu jsou na základě testů popsaných níže uvedeny v tabulkách 1 a 2 rovněž uvedených níže.

Tabulka 1

Selektivitní profil sloučenin podle vynálezu ve studiích vazby

Byly použity buněčné linie (buňky HEK293) stabilně transformované lidskými receptory GluR. K vytěsnění 3H AMPA zvyšujícími se koncentracemi zkoušené sloučeniny bylo použito buněk s expresí GluRl-4 a k vytěsnění 3H kainatu (KA) buněk s expresí GluR5. Vyhodnocené aktivity (Ki) jsou uvedeny níže.

• ·

Tabulka 1

Zkoušená s loučenina	GluRl	GluR2	GluR3	GluR4	GluR5	GluR6
A*	150686	35337	4779	31606	3061	6±5%
	±49789	±6163	±8770	±5914	±1083	vytěsnění
	(3)	(3)	(3)	(3)	(3)	@ 100 μΜ (3)
B*				— —	5823 (2)
c*	21 % při 1 mM	55 % při 1 mM	-	23 % při 1 mM	6810

A - 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-[(1(2)H-tetrazol-5-yl)methoxymethyl]dekahydroisochinolin-3-karboxylová kyselina (průměr ze 3 výsledků)

B - sloučenina podle příkladu l (průměr ze 2 výsledků)

C - 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin-3-karboxylová kyselina (pouze jeden výsledek)

D - sloučenina podle příkladu 2 nehodnoceno • · • · • ·

Tabulka 2

Selektivitní profil sloučenin podle vynálezu v elektrofyziologických studiích

Funkční studie byly provedeny na buňkách HEK293 stabilně transformovaných lidskými receptory GluR a na akutně izolovaných neuronech ganglií zadních kořenů míchy (DRG) s použitím techniky patch-clamp (Bleakman a sp., 1996,

Mol.Pharmacol., 49, 581-585). Pro sloučeninu A byly stanoveny hodnoty IC50 (μΜ) pro GluRl-4 vůči 100 μΜ AMPA a pro GluR5 a GluR6 proti 100 μΜ KA a zjištěné výsledky jsou uvedeny níže:

Tabulka 2

Zkoušená GluRl GluR2 GluR3 GluR4 GluRS GluR6 DRG* sloučenina

A >100 >100 >100 >100 3,9+0,5 >100 0,60±0,06

D — — — >100 — >100 0,98±0,07 * Vztaženo na % inhibici proudu indukovaného 30 μΜ kainatem.

Formy bolesti, které je možné léčit způsobem podle vynálezu zahrnují bolest prudkou, chronickou, úpornou a neuropatickou.

Předpokládá se, že následující sloučeniny: 3S,4aR,6S,8aR^-6-((((lH-tetrazol-5-y1)methyl)oxy)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochinolin-3-karboxylová kyselina; a 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)feny1)methy1Ί • ·

-1 ,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochino 1in-3-karboxylová kyselina a jejich farmaceuticky přijatelné sole jsou nové a tvoří tak další aspekt vynálezu. Vynález rovněž poskytuje farmaceutickou kompozici obsahující obsahující jednu z uvedených sloučenin a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič.Tyto sloučeniny lze připravit a zpracovat do formy farmaceutických kompozic obecnými způsoby uvedenými v Evropské patentové přihlášce Č.590789A1 v U.S.Patentu č.5,446,051.

Schopnost selektivních antagonistů receptorů GluRS pro léčení bolesti lze znázornit použitím známých testů jako je formalinový test, test švihání ocasem a test záškubů indukovaných kyselinou octovou.

1) Formalinový test

Samci krys Sprague-Dawley (200-250 g; Charles River, Portage,MI) se umístí do společných klecí a udržují se 4-7 dní před zahájením studie při konstantní teplotě a v cyklu 12 hodin světlo/12 hodin tma. Zvířata mají po celou před dnem pokusu volný přístup k potravě a vodě.

Léčiva nebo vehikula se podávají intraperitoneálně (i.p.) nebo orálně (p.o.) sondou v objemu 1 ml/kg.

Testy se provedou v boxech z umělé hmoty Plexiglas^R zhotovených na míru ve velikosti 25x25x20 cm (podle Shibata a sp., Pain 38, 347-352, 1989; Whee1er-Aceto a sp., Pain, 40, 229-238, 1990). Na zadní stěně klece je zrcadlo umožňující nebráněné pozorování formalinem injektované tlapky. Krysy se nechají v klíckách aklimatizovat nejméně jednu hodinu před pokusem. Všechny testy se provedou v době mezi 08:00 až 14:00 h a teplota v pokusné místnosti se udržuje na 21-23 °C.

• ·

Testované sloučeniny se podají 30 minut před aplikací formalinové injekce. Formalin (50 pl 5% roztoku formalinu ve fyziologickém roztoku) se aplikuje subkutánní injekcí do dorzálního laterálního povrchu pravé zadní tlapky pomocí jehly velikosti 27. Ihned po formalinové injekci se zahájí pozorování zvířat. Bolest vyvolaná formalinem se kvantifikuje záznamem počtu olizování injektované tlapky a doby v sekundách po kterou každá tato událost trvá, a to během pětiminutových intervalů. Tyto jevy se sledují během 50 minut po podání formalinové injekce.

Pro hodnocení formalinového testu se používají různé parametry. Bylo prokázáno, že nejdůleži tější pro hodnocení je stanovení celkové doby strávené olizováním a kousáním tlapky (Coderre a sp., Eur.J.Neurose i., 6, 1328-1334, 1993; Abbott a sp., Pain, 60, 91-102, 1995) a toto stanovení bylo zvoleno jako kritérium hodnocení. Časná fáze skóre je tvořena součtem doby strávené olizováním v sekundách v 0 až 5 minutě. Pozdní fázi skóre tvoří 5 minutové bloky v době od 15 minuty do 40 minuty, kde tato fáze je vyjádřena v těchto blocích počtem sekund strávených olizováním od 15 do 40 minuty pozorování, nebo je možné tyto hodnoty přičítat a stanovit celkovou dobu olizování. Výsledky byla vyjádřeny formou průměrů a standardních odchylek od průměrů (±SEM). Výsledky byly hodnoceny jednocestnou analýzou variance (ANOVA) a příslušné kontrasty byly analyzovány Dunettovým t testem pro oboustranné srovnání. Za významné byly pokládány odchylky v případech, kdy hodnota P byla menší než 0,05 a tyto hodnoty byly označeny hvězdičkou. Statistické hodnocení bylo provedeno pro dobu do 5 minuty a pro pětiminutové intervaly mezi 15 a 40 minutou. Jestliže byly údaje v pozdní fázi vyjádřeny formou celkové doby strávené olizováním v této fázi, bylo statistické vyhodnocení provedeno rovněž s těmito údaji a výsledky byly • ·

podle toho označeny.

V tomto testu bylo zjištěno, že sloučenina podle příkladu 1, v dávkách v rozmezí 10 až 100 mg/kg, účinně snižuje dobu olizování tlapky v druhé fázi.

2) Test švihání ocasem

V tomto dobře známém testu se stanovuje účinek hodnocené sloučeniny na dobu která zvířeti trvá ke švihnutí ocasem ven ze zaměřeného svazku světla. Při tomto testu se na povrch zaměří svazek světla z lampy a potom se lampa vypne. Ošetřená a neošetřená (kontrolní) zvířata jsou upevněna tak, že jejich ocasy jsou v ohnisku světelného svazku z lampy. Pak se lampa opět zapne, a změří se doba která zvířeti trvá ke švihnutí ocasem jako k odezvě pohybem.

Subkutánní podání sloučeniny podle příkladu 1 myším v dávce 3, 10 a 30 mg/kg poskytuje zvýšení doby odezvy závislé na dávce. Orální podání stejné sloučeniny v dávkách 0,03, 0,1, 0,3 a 3 mg/kg primátům (kočkodan) rovněž poskytuje zvýšení doby odezvy závislé na dávce. Z těchto údajů vyplývá, že sloučenina podle příkladu 1, která je selektivní antagonista GluRS, je účinná při léčbě bolesti a má neočekávanou orální aktivitu u primátů (kočkodan).

3) Test záškubů indukovaných kyselinou octovou

V tomto testu se stanoví schopnost testované sloučeniny redukovat počet záškubů vyvolaných intraperitoneální injekcí kyseliny octové myším.

Samcům myší CD-I se podá dávka sloučeniny nebo • · kontrolního vzorku. Každému zvířeti se potom aplikuje intraperitoneální injekcí 0,5% kyselina octová v objemu 0,01 mg/g. Zvířata se pak umístí do jednotlivých pozorovacích komůrek z plexiskla a v době od 5 do 10 minuty po podání kyseliny octové se zaznamená počet záškubů ( zploštění abdominální stěny a asymetrické napnutí a protažení těla a zadních končetin).

Sloučenina podle příkladu 1, která byla podána v dávce 1,3,10 a 30 mg/kg poskytla snížení počtu záškubů závislé na dávce.

Konkrétní dávka antagonisty podle vynálezu se samozřejmě stanoví na základě jednotlivých okolností v daném případě, které zahrnují aktivitu daného antagonisty určeného k podání, způsob podání, stav pacienta který bude léčen a podobné okolnosti. Uvedený antagonista může být podán různými způsoby podávání, které zahrnují orální, rektální, transdermální, subkutánní, intravenósní, intramuskulární nebo intranasální podání. Alternativně může být uvedený antagonista podán kontinuální infuzí. Obvyklá denní dávka obsahuje od asi 0,001 mg/kg do asi 100 mg/kg antagonisty. Výhodné dávky jsou asi 0,05 mg/kg do asi 50 mg/kg, a ještě výhodnější dávky jsou od asi 0,1 mg/kg do asi 20 mg/kg.

Následující příklady znázorňují přípravu nových sloučenin, které jsou selektivní antagonisté GluR5.

Tetrahydrofuran se vysuší destilací se sodíkem. Všechna ostatní rozpouštědla se použijí v obdrženém stavu. Reakce se všeobecně sledují chromatografií na tenké vrstvě z hlediska jejich kvantitativního průběhu. Chromatografie na tenké vrstvě se provádí na deskách E.Merck Kieselgel 60 F254, 5 x 10 cm,

t. » ·* ·· • · · · · · • · * * · · • ·« ·· · · ’ · • · ♦ · í ·» ·· ·· tloušťky 0,25 mm. Detekce skvrn se provádí kombinací detekce v UV světle a chemické detekce (desky se ponoří do roztoku molybdenanu ceričito-amonného [75 g molybdenanu amonného a 4 g síranu ceričitého (IV) v 500 ml 10% vodné kyseliny sírové] a pak se zahřívají na horké desce). Elementární analýza uhlíku, vodíku a dusíku se provádí přístrojem Control Equipment Corporation 440 Elemental Analyzer. Výraz chromatografie znamená rychlou chromatografi i (Still WC., Kahn Μ., Mitra A., J.Org.Chem., 1978, 43, 2923) na silikagelu 60 velikosti 230-400 mesh, s použitím rozpouštědla jako elučního prostředku uvedeného v textu v závorkách. Výraz kationtová chromatografie na iontoměničích zahrnuje výměnu iontu pomocí pryskyřice Dowex 50X-8 (100-200) (v H⁺ formě). Tato pryskyřice se zpracuje promytím (na skleněné fritové nálevce o velké velikosti pórů) vodou, potom methanolem, potom vodou, potom 3N hydroxidem amonným (pH ³ 12Q, potom vodou, potom IN HC1 (pH ² 1), a potom vodou až do neutrální hodnoty pH. Pak se pryskyřice ve vodě naplní do skleněné kolony a sloučenina (která je rozpuštěná ve vodě při pH v rozmezí 2 až 7 ) se pomalu nanese na kolonu s pryskyřicí, potom se kolona promyje vodou až se docílí neutrální hodnota pH, potom se promývá 50% vodným THF a potom vodou. Eluce sloučeniny z pryskyřice se provede 10% vodným pyridinem a frakce obsahující produkt (produkt se detekuje vybarvením s ninhydrinem na TLC desce) se spojí a zahustí se ve vakuu. Přidá se voda a směs se zahustí ve vakuu. Tento postup se opakuje dvakrát nebo vícekrát tak aby se zajistilo úplné odstranění pyridinu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

3S,4aR,6S ,8aR-6-((((lH-tetrazol-5-y1)methyl)oxy)methyl-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi sochino 1in-3-karboxy1ová kyselina

A. Ethyl- 3S,4aR,6S,8aR-6-(((kyanmethyl)oxy)methy1)-2-methoxykarbony1-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi soehinolin-3-karboxylat: roztok 12,8 g (42,6 mmol) ethyl3S,4aR,6S,8aR-6-hydroxymethyl-2-methoxykarbonyl-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroi soehinolin-3-karboxylatu (Ornstein a sp., Journal of Organic Chemistry, 1994, 59, 7862-7869), 10,6 g (85,3 mmol) ((methoxy)ethoxy)methylchloridu, 16,5 g (127,9 mmol) N,N-diisopropylethylaminu a 20 mg 4-N,N-dimethylaminopyridinu v 70 ml methylenchloridu se zahřívá čtyři hodiny při teplotě zpětného toku, potom se směs ochladí, zředí se 150 ml etheru a promyje se dvakrát 100 ml podíly 10% vodného hydrogensíránu sodného. Organická fáze se vysuší (síran hořečnatý), zfiltruje se a zahustí se ve vakuu. Zbytkový olej se rozpustí v 70 ml methylenu a zpracuje se se 17,0 ml (12,7 g, 127,9 mmol) trimethylsilylkyanidu, načež se roztok ochladí na 0 °C a zpracuje se s 1,3 ml (1,5 g, 10,7 mmol) etheratu fluoridu boritého. Vzniklý roztokse nechá ohřát na teplotu místnosti. Po třech hodinách při teplotě místnosti se reakční směs zpracuje se 100 ml 10% vodného uhličitanu draselného a potom se 150 ml etheru. Fáze se rozdělí a organická fáze se promyje ještě jednou s 10% vodným uhličitanem draselným. Potom se organická fáze vysuší (síran hořečnatý), zfiltruje se a zahustí se ve vakuu. Chromatografií zbytku (350 g silikagelu, 30% ethylacetat/hexan) se získá 11,9 g (83 %) titulní sloučeniny.

Analýza vypočtená pro C17H26N2O5: C 60,34; H 7,74;

N 8,28. Nalezeno: C 60,06; H 7,69; N 8,31.

[a]D = -33,5° (c=l, CH2CI2).

• ·

B. Směs 11,7 g (34,6 mmol) sloučeniny připravené podle příkladu 1A a 23,0 g (69,2 mmol) azidu tributylcínu se zahřívá pět dní při 100 °C. Tato směs se pak zpracuje se 100 ml 6N kyseliny chlorovodíkové a pokračuje se v zahřívání při 100 °C. Po asi 18 hodinách se reakční směs nechá vychladnout na teplotu místnosti, potom se směs extrahuje 50 ml etheru, 50 ml dichlormethanu a 50 ml etheru, načež se vodná fáze zahustí ve vakuu. Kationtovou iontoměničovou chromatografií zbytku se získá pevný produkt, který se suspenduje v acetonu, směs se zahřívá jednu hodinu při teplotě zpětného toku, potom se zfiltruje a promytím s acetonem a etherem a vysušením ve vakuu při 60 °C se získá 8,5 g (83 %) titulní sloučeniny.

Analýza vypočtená pro Ci3H21N5O3.0,33 H2O.0.33 C3H6O: C 52,43; H 7,44; N 21,84. Nalezeno: C 52,74; H 7,22; N 21,50.

[a]d=-21,6° (c = 1, IN HC1).

Příklad 2

Příprava 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)feny1)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylová kyselina

A. Methyl-4-(diethylfosfonomethyl)benzoat: roztok 25,0 g (110 mmol) methyl-4-brommethylbenzoatu a 37 ml (36,3 g,

220 mmol) triethy1fosfori tanu ve 150 ml toluenu se zahřívá 18 hodin při teplotě zpětného toku, potom se směs ochladí a zahustí se ve vakuu. Chromatografií (400 g silikagelu, ethylacetat) zbytku se získá 30,6 g (98 %) titulní sloučeniny.

B. Ethyl-3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-methoxykarbony1)feny1)methyl)-l,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3karboxylat: 14,1 g (49,4 mmol) sloučeniny připravené podle • · • · • · • ···· ·· · · · · · • · · · · · · ·· ··· ··· ···· ··· · · příkladu 2A a 48 ml (1M roztoku) bis(trimethylsily1)amidu ve

100 ml THF se míchá 45 minut při 0 °C a potom se zpracuje s

10,0 g ethyl-3S,4aR,8aR-6-oxo-2-methoxy-karbonyl-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylatu ve 40 ml THF. Po 15 minutách při 0 °C se reakční směs zalije 100 ml vody a třikrát se extrahuje 150 ml podíly etheru. Spojené organické podíly se vysuší (síran hořečnatý), zfiltrují se a zahustí se ve vakuu. Zbytek se rozpustí v 500 ml etheru, zpracuje se s 3,0 g 5% paladia na uhlíku a hydrogenuje se 24 hodin při tlaku jedné atmosféry vodíku. Tato směs se zředí 500 ml etheru, zflitruje se přes vrstvu křemeliny a filtrát se zahustí ve vakuu. Chromatografií (400 g silikagelu, 25 % ethylacetat/hexan) zbytku se získá 12,0 g (81 %) titulní sloučeniny ve formě směsi methylesteru a ethylesteru vzniklého transesterifikací methylesteru během hydrogenace.

C. 12,0 g sloučeniny připravené podle příkladu 2B se zahřívá se 100 ml 6N kyseliny chlorovodíkové 18 hodin při teplotě zpětného toku a potom se směs ochladí na teplotu místnosti. Vzniklý pevný produkt se odfiltruje, promyje se vodou, acetonem a etherem a vysušením ve vakuu při 60 °C se získá 6,2 g (57 %) titulní sloučeniny.

Analýza vypočtená pro CieHž3NO4.HCl.1,25 H2O: C 57,44; H 7,10; N 3,72. Nalezeno: C 57,44; H 6,69; N 3,76.

[a]_D = -4,8« (_C=l, IN HCl).

Claims (7)

1. Použití selektivního antagonisty receptorů GluR5 pro výrobu léčiva určeného k léčbě bolesti.

2. Použití podle nároku 1, kde selektivní antagonista receptorů GluR5 se zvolí ze souboru sloučenin zahrnujícího 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-((((lH-tetrazol-5-yl)methyl)oxy)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu, 3S,4aR,6S,8aR-6-((((lH-tetrazol-5-yl)methyl)oxy)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu, 3SR,4aRS,6SR,8aRS-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu a 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl)-l, 2,3,4,4a,5,6,7,8 ,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu.

3. Sloučenina, která je zvolena ze souboru zahrnujícího 3S,4aR,6S,8aR-6-((((lH-tetrazol-5-yl)methyl)oxy)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu a 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

4. Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že zahrnuje sloučeninu podle nároku 3 a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič.

• * · · • · · · • ·

5. Sloučenina, která je zvolena ze souboru zahrnujícího 3S,4aR,6S,8aR-6-((((lH-tetrazol-5-yl)methyl)oxy)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu a 3S,4aR,6S,8aR-6-(((4-karboxy)fenyl)methyl)-1,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a-dekahydroisochinolin-3-karboxylovou kyselinu.

6. Farmaceutická kompozice vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu podle nároku 5 a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič.

7. Farmaceutická kompozice pro léčbu bolesti, vyznačuj ícísetím, že obsahuje selektivního antagonistu receptorů G1UR5 a farmaceuticky přijatelné ředidlo nebo nosič.