CZ34625U1 - Inhibitory purinnukleosidfosforylasy k léčení T-buněčné akutní lymfoblastické leukémie a lymfomů - Google Patents

Description

Inhibitory purinnukleosidfosforylasy k léčení T-buněčné akutní lymfoblastické leukémie a lymfomů

Oblast techniky

Předkládané technické řešení se týká nových látek využitelných k léčení T-buněčné akutní lymfoblastické leukemie a lymfomů.

Dosavadní stav techniky

Léčba T-akutní lymfoblastické leukemie (dále T-ALL) neprošla v posledních letech tak intenzivním vývojem, jako léčby jiných maligních onemocnění. Z toho důvodu jsou potřebné nové a inovativní způsoby léčby a léčebné postupy, které zvýší prognózy pacientů trpících T-ALL. Především prognózy u dospělých pacientů s T-ALL jsou stále nízké a celkové přežití těchto pacientu (po 5 a více letech) se pohybuje pouze okolo 40 %.

Dosavadní léčebné postupy jsou založené zejména na podávání vysokých dávek klasických chemoterapeutik. Těmi jsou například tzv. hyper-CVAD (směs léku cyklofosfamid, vincristine, adriamycin, dexamethasone v kombinaci s vysokými dávkami methotrexátu a cytarabinu), kombinace léků pegaspargase s methotrexátem a kombinace výše uvedených terapií s lékem nelarabine [Litzow, M. R.; Ferrando, A. A. Blood. 2015, 126, 833-841], Tyto léčebné postupy doprovází silné nežádoucí účinky (ztráta vlasů a ochlupení, otoky, záněty, život ohrožující infekce), které vysoce zatěžují pacienty a komplikují jejich léčbu.

Potenciál inhibitorů purinnukleosidfosforylasy (dále jen PNP) pro léčbu krevních maligních onemocnění je diskutován dlouhou dobu [Krenitsky, T. A., et al., J. Biol. Chem. 1968, 265 (6), 3066 3069], Dosavadní inhibitory PNP ovšem ve většině případů selhaly v preklinických či klinických studiích z důvodů špatných farmakodynamických nebo farmakokinetických vlastností.

Peldesine selhal v klinické studii fáze III, kdy nebyl účinnější než placebo. Toto selhání je přičítáno nízké rozpustnosti a špatné permeabilitě látky buněčnými membránami [Duvic, M., et al., J. Am. Acad. Dermatol. 2001, 44 (6), 940-947],

Experimentální látka CI-972 selhala v klinických studiích z neuvedených důvodů [Gilbertsen, R. B., et al., Biochem. Biophys. Res. Commun. 1991,178 (3), 1351-1358],

Další experimentální látky odvozené od Peldesinu, založené na 9-deazapurinech, vykazovaly podobnou aktivitu s velmi nízkou rozpustností ve vodě [Montgomery, J., et A.. Med. Chem. 1993, 36(1), 55-69.].

Experimentální látky obsahující přirozené purinové báze s benzylfosfonátovým řetězcem, vykazovaly dobrou rozpustnost ve vodě, ale nízkou aktivitu [Halazy, S., et al., Tetrahedron 1996, 52(1), 177-184.].

Experimentální látky podobné struktuře Peldesinu, obsahující heteroatom mezi nepřirozenou 9-deazapurinovou bází a fenylovým substituentem vykazovaly vyšší aktivitu, ale jejich rozpustnost ve vodě byla opět extrémně nízká [Morris, P. E., et al., Nucleosides, Nucleotides and Nucleic Acids. 2000,19 (1-2),379 404.].

Popsaná nízká rozpustnost ve vodě činí tyto látky nevhodnými pro farmaceutické použití jako léčivé substance.

V roce 2017 získal PNP inhibitor forodesine hydrochlorid (Mundesine) od japonské národní

- 1 CZ 34625 UI agentury PMDA schválení pro léčbu T-lymfomů. Forodesine hydrochlorid se vyznačuje vysokou inhibiční aktivitou jak vůči PNP enzymu, tak buněčným liniím T-ALL [Kicska, G., et al., Proč. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2001, 98 (8), 4593 4598.]. Jako jeden z jeho zásadních nedostatků lze ovšem uvést nízkou biologickou dostupnost, která u primátů a lidí dosahuje méně než 10 % [Kilpatrick, J. M., et al., Int. Immunopharmacol. 2003, 3 (4), 541-548.].

Výše uvedené experimentální látky byly připravovány převážně málo efektivní lineární syntézou, která spočívá v postupném vystavění přirozené nebo modifikované purinové nukleobáze. Takový postup neumožňuje, nebo umožňuje pouze velmi obtížně, přípravu komplexnějších látek, obsahujících citlivé a reaktivní funkční skupiny, které by mohly vylepšit vlastnosti inhibitorů PNP.

Z výše uvedených citací je zřejmé, že v oblasti inhibitorů PNP a jejich terapeutického využití pro léčbu T-ALL se stále hledá látka, která by kombinovala vysokou účinnost in-vitro ain-vivo s dobrými farmakokinetickými vlastnostmi, především pak dobrou rozpustností v biologicky relevantních rozpouštědlech a vysokou biologickou dostupností v organismu při různých způsobech podávání. Stejně tak jsou hledány účinné syntetické postupy, které by takové látky umožňovaly připravit.

Předkládané technické řešení popisuje nové inhibitory purin nukleosid fosforylasy obecného vzorce I včetně farmaceuticky přijatelných solí, jejich přípravu a použití v terapii T-buněčné akutní lymfoblastické leukemie (T-ALL) a lymfomů.

Díky inovativní syntéze byly zkombinovány strukturní prvky nových látek, což předchozí postupy neumožňovaly. Tyto nové látky oproti doposud publikovaným látkám vykazují lepší účinnost inhibice purin nukleosid fosforylasy i farmakokinetické vlastnosti. Farmakokinetickými vlastnostmi se rozumí takové fýzikálně-chemické vlastnosti látek, které umožňují distribuci látek v biologických systémech. Těmi jsou například, a ne výlučně, rozpustnost, stabilita, biologická dostupnost atd. Kombinace uvedených vlastností umožňuje i různé způsoby podání látek obecného vzorce I, například a ne výlučně, perorální, intravenózní, topické atd.

Podstata technického řešení

Předmětem technického řešení jsou sloučeniny obecného vzorce I,

G (I) kde:

X je fúnkční skupina NH, nebo atom síry, v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty Ar, Z, GaR;

Ar je aryl nebo heteroaryl, v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Z, G a R;

Z je řetězec atomu zvolený ze skupiny, sestávající z -CH2-, -CH2O-, -CH2OCH2- a -CHCH-, vázající se do polohy -2, nebo -3 arylu nebo heteroarylu Ar vůči substituentu X podle obecného

- 2 CZ 34625 UI vzorce 1 a to v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, G a R;

G je funkční skupina zvolená ze skupiny, sestávající z -SO2A¹, -P(O)( A¹)(A²). v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, Z a R, kde:

substituenty A¹ a A² jsou stejné nebo různé a nezávisle na sobě jsou každý zvolen ze skupiny sestávající z -OH, -OR¹ a -NHR², přičemž R¹ je zvolen z lineárního či rozvětveného Ci-Ce alkylu, C6-C12 arylu nebo skupiny

-CH₂OC(O)R², a

R² je lineární či rozvětvený Ci až C10, výhodněji C3 až C5 alkyl, nebo skupina -CHR³COOR⁴, vykazující (R), (.S). nebo (RS) stereochemii, kde

R³ je lineární nebo rozvětvený Ci až C10 alkyl, s výhodou C2 až Ce, nejvýhodněji C3 až C5 alkylový řetězec, v němž může případně být kterákoliv skupina -CH2- nahrazena atomem síry, kyslíku, dusíku, nebo Ce až C12 arylem nebo Ce až C12 arylalkylem;

R⁴ je lineární nebo rozvětvený Ci až C10 a výhodněji C3 až C5 alkyl,

R je atom vodíku, nebo substituent, vybraný ze skupiny, sestávající z -OH, -O(aryl), O(arylalkyl), -C(O)-, -CN a halogenu, v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, Z, G;

zvolené ze skupiny, obsahující:

(£)-7-((2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on sodný,

7-((2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4//-pyrrolo [3,2-ó/| pyri m idi n-4-on sodný, (£)-7-((4-brom-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5-brom-2-(2-(fbsfbnáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo [3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5-hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-isopropoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-(perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-(perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný,

- 3 CZ 34625 UI (£)-7-((3-hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-isopropoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-(perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-(perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5 -fluor-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4H-pyrrolo [3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3 -methoxy-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4//-py rrolo [3,2-ó/| py n m idi n-4-on sodný, (£)-7-((3-(2-(fosfonáto)vinyl)thiofen-2-yl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný,

7-((3-((fosfonáto)methoxy)thiofen-2-yl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný,

7-((2-((sulfo)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((2-(2-(sulfo)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7/]pyrimidin-4-on sodný,

7-((2-((fosfonáto)methyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný,

7-((2-(3-fosfonáto-2-oxapropyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný,

7-((2-(((((S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl)amino)(fenoxy)fosforyl)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on.

(£)-7-((2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)amino)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on.

Tak, jak jsou zde popsány a pokud není uvedeno jinak, mají jednotlivé substituenty následující významy:

- alkyl je rovný nebo rozvětvený uhlovodíkový řetězec, obsahující počet uhlíků, uvedený v místě použití tohoto termínu;

- aryl je uhlovodíková skupina obsahující 6 až 12 uhlíkových atomů, obsahující alespoň jedno aromatické jádro, a může být nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny, zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

- heteroaryl je uhlovodíková skupina obsahující 4 až 12 uhlíkových atomů, obsahující alespoň jedno aromatické jádro a alespoň jeden heteroatom ze skupiny zahrnující kyslík, dusík a síru, a může být nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

- 4 CZ 34625 UI

- arylalkyl označuje alkylovou skupinou, která je substituována jednou nebo více arylovými skupinami, nesubstituovanými nebo substituovanými jedním nebo více ze substituentů, vybraných ze skupiny, zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

Předmětem předkládaného technického řešení jsou sloučeniny obecného vzorce I a/nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli pro použití jako léčiva.

Předmětem předkládaného technického řešení jsou sloučeniny obecného vzorce I a/nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli pro použití k léčení onemocnění, způsobených rakovinným bujením T-lymfocytů.

Dále jsou předmětem předkládaného technického řešení sloučeniny obecného vzorce I pro použití k léčení T-akutní lymfoblastické leukemie.

Předmětem předkládaného technického řešení je rovněž farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I jako aktivní složku a případně dále obsahuje alespoň jednu farmaceuticky přijatelnou pomocnou látku, jako je nosič, plnivo, emulgátor a/nebo ředidlo.

Přemětem předkládaného technického řešení je také farmaceutický prostředek pro použití k léčení onemocnění, způsobených rakovinným bujením T-lymfocytů.

Předmětem předkládaného technického řešení je zejména farmaceutický prostředek pro použití k léčení T-akutní lymfoblastické leukemie.

Sloučeniny podle předkládaného technického řešení prokázaly v testech in vitro významný a selektivní cytotoxický účinek proti leukemickým T-lymfocytům. Látky jsou zejména dobře rozpustné v biologicky relevantních rozpouštědlech a dobře prostupují biologickými membránami.

Příklady uskutečnění technického řešení

Seznam použitých zkratek:

TLC	tenkovrstvá chromatografíe
HPLC	vysokotlaká kapalinová chromatografíe
C18	oktadecyl
HR-MS	hmotnostní spektrum ve vysokém rozlišení
MS	hmotnostní spektrum
ESI	ionizace elektrosprejem
Cl	chemická ionizace
aq.	vodný roztok
THF	tetrahydrofuran
DMF	/V,/V-dimethylformamid
DMSO	dimethylsulfoxid
Me	methyl
Et	ethyl
Pr	propyl
/-Pr	z.so-propyl
Ph	fenyl
Bn	benzyl
/-Bii	ZiTC-butyl
SEM	2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl
Boc	terc-butoxykarbonyl
Tf	triflyl

- 5 CZ 34625 UI

Ts TMSBr dba Bn-F₅ Ph-F₅ IC₅₀ ΛΡΝΡ ND Ni-NTA RPMI DMEM FBS PBMC tosyl bromtrimethylsilan dibenzylidenaceton pentaflourobenzyl: perfluorobenzyl pentafluorofenyl: perfluorfenyl polovina maximální inhibiční koncentrace lidský enzym purinnukleosidfosforylasy neurčená hodnota afínitní pryskyřice obsahující nikelnaté ionty růstové médium pro buněčné kultury Dulbeccova modifikace Eaglova média fetální hovězí sérum mononukleámí buňka periferní krve

Pokud není uvedeno jinak, tak rozpouštědla byla odpařována při 40 °C/2 kPa a připravené látky byly sušeny při 30 °C/2 kPa. Výchozí látky a reagenty byly zakoupeny od komerčních dodavatelů (Sigma-Aldrich, Fluorochem, Acres Organics, Carbosynth, TC1) a byly použity bez dalšího čištění, nebo byly připraveny podle publikovaných procedur.

Diethylether, tetrahydrofůran, dioxan a acetonitril byly sušeny aktivovanou neutrální aluminon (AI2O3, drysphere®). Dimethylformamid byl sušen aktivovanými molekulovými síty (3Á).

Reakce ve větších měřítcích byly prováděny v systému Atlas Pottasium® (Syrris Ltd, Royston, UK) s dvouplášťovým reaktorem o objemu 0,5; 1 nebo 2 1, spojeným s Julabo FP50-HL oběhovým termostatem.

Analytická TLC byla provedena na hliníkových destičkách s předem naneseným silikagelem s fluorescentním indikátorem (Merck 60 F254). Bleskové (flash) chromatografíe byly provedeny na systému Combiflash® Rf200 s duálním absorpčním detektorem (Teledyne ISCO, Lincoln, USA). Bylo použito několik druhů kolon (sloupců): a) Teledyne ISCO kolony RediSepRf HP Silica GOLD ve velikostech 12 g, 40 g, 80 g a 120 g; b) Teledyne ISCO kolony RediSepRf HP C18 Aq GOLD ve velikostech 50 g, 100 g a 200 g; c) kolony Chromabond Flash DL 40, DL 80, DL 120 a DL 200, plněné silikagelem FLUKA 60; d) Interchim puriFlashC18 Aq ve velikostech F0040 and F0080. Použité eluenty byly: metanol (A), cyklohexan (B), ethylacetát modifikovaný 10 % (obj./obj.) metanolu (C), chloroform (D), voda (E), cyklohexan modifikovaný 0,5 % triethylaminu (F).

Preparativní HPLC separace byla provedena na chromatografíckém systému Waters Delta 600 a kolonách (sloupcích) plněných C18 reversním silikagelem (Phenomenex Gemini 10 pm 21 x 250 mm, Phenomenex Gemini 5 pm 21 x 250 mm, Phenomenex Luna 10 pm 21 x 250 mm) s gradientem H2O/MeOH jako eluentem.

Analýzy UV absorbance, hmotnostní spektra a čistota látek byly měřeny na systému Waters UPLCMS, složeném z Waters UPLC Η-Class Core systému (kolona Waters Acquity UPLC BEH Cl8 1,7 mm, 2,1 x 100 mm) a Waters Acquity UPLC PDA detektoru s hmotnostním spektrometrem Waters SQD2. Byla použita universální LC metoda (eluent voda/acetonitril 0 - 100 %, délka měření 7 min.) a MS metoda (ESI+- anebo ESI-, napětí jehly 30 V. rozsah detektoru 100 až 1000 Da).

Hmotnostní spektra s vysokým rozlišením byla měřena na spektrometru LTQ Orbitrap XL (Thermo Fisher Scientific).

NMR spektra byla měřena na spektrometru Bruker Avance 400 nebo 500 a spektra byla vztažena ke zbytkovému signálu rozpouštědla, nebo specifické přísady. Některé signály uhlíkových atomů štěpenými fluorem nemusí být uvedeny z důvodu jejich nízké intenzity ve spektrech.

-6CZ 34625 UI

Pryskyřice Dowex® 50W (The Dow Chemical Company, Midland, USA) byla převedena do Na⁺cyklu pomocí 1 mol I¹ ho vodného roztoku NaOH a následným promytím vodou do neutrálního pH.

Příklad 1

4-(Bcnzyloxy)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin L1

Dvouplášťový reaktor byl zapuštěn dusíkem, naplněn benzyl alkoholem (1 1) a systém byl nastaven na udržování teploty 20 °C. Kovový sodík (22,5 g; 977 mmol; 1,5 ekv.) byl přidán po částech a směs byla míchána 20 hodin pod malým proudem dusíku. Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 1 hodiny, pak byla opět ochlazena na 20 °C. Přidán byl 4-chlor-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin (100 g; 651 mmol; 1 ekv.) a směs byla míchána při 80 °C, dokud nebyla dosažena plná konverze (cca 4 hodiny). Směs byla ochlazena na 5 °C, naředěna vodou (400 ml), pH bylo upraveno na pH 7 prostřednictvím 3 mol I¹ HC1 (aq.) (cca 100 až 130 ml) a směs byla ohřátá na 20 °C. Směs byla extrahována chloroformem (3 x 400 ml) a organická fáze byla promyta solankou (500 ml). Směs byla zahuštěna a benzylalkohol byl odpařen při vysokém vakuu při cca 90 °C. Pevný podíl byl rozpuštěn v chloroformu, zfiltrován přes krátký sloupec silikagelu (600 g) a vymyt chloroformem, pak chloroformem s 5 % methanolu (obj./obj). Rozpouštědla byla odpařena a pevný podíl byl rozpuštěn ve vroucí směsi ethylacetát/methanol (1:1; obj./obj.) a roztok byl ochlazen na 30 °C. Poté byl pomalu přidán pentan (stejný objem jako měl roztok) a směs byla ochlazena na -20 °C během 3 hodin a poté byla míchána při -20 °C přes noc. Krystaly byly zfiltrovány, promyty pentanem a sušeny s výtěžkem 141 g (97%) 4-(bcnzyloxy)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidinu jako bílých krystalů.

‘HNMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 9,33 (s, 1H); 8,58 (s, 1H); 7,49 - 7,43 (m, 2H); 7,41 (m, 1H); 7,38 - 7,32 (m, 2H); 7,35 (s, 1H); 6,67 (dd, J= 3,2, 2,1 Hz, 1H); 5,59 (s, 2H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-ó/) δ 155,46; 150,55; 150,11; 136,22; 128,76 - 128,28 (m), 115,14; 103,31; 67,94. MS (ESI) m/z = 226,1 [M + H]⁺ (vypočteno 226,1).

Příklad 2

4-(Bcnzyloxy)-7-jod-5-((2-(trimcthylsilyl)cthoxy)mcthyl)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin L2

Dvouplášťový reaktor (1 1) byl zapuštěn dusíkem, 4-(bcnzyloxy)-5//-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin (40 g; 178 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (500 ml) a po částech byl přidán A-jodsukcinimid (44 g; 195 mmol; 1,1 ekv.). Směs byla míchána po dobu jedné hodiny, během které produkt vykrystalizoval. Krystaly byly zfiltrovány, promyty tetrahydrofůranem a sušeny s výtěžkem 56 g (90 %) bílých krystalů jodového derivátu, který byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace. Dvouplášťový reaktor (2 1) byl zapuštěn dusíkem, do reaktoru byl přidán 4-(bcnzyloxy)-7-jod-5A-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin (56 g, 159 mmol, 1 ekv.)

- 7 CZ 34625 UI a dimethylformamid (560 ml). Směs byla ochlazena na -5 °C a poté byl přidán hydrid sodný (8 g; 199 mmol; 1,25 ekv.) po částech pod malým proudem dusíku tak, aby teplota směsi nepřesáhla 5 °C. Směs byla míchána při 20 °C po dobu jedné hodiny. Pak byl přikapán 2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl chlorid (35,3 ml; 199 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla dále míchána při 20 °C po dobu jedné hodiny. Reakce byla ukončena nasyceným vodným roztokem NH4CI zředěným na poloviční koncentraci (560 ml) a směs byla extrahována ethylacetátem (3x 300 ml), promyta solankou (Ix 500 ml) a sušena MgSOr. Sušidlo bylo zfiltrováno, rozpouštědla byla odpařena, pevný podíl byl rozpuštěn v chloroformu a zfiltrován přes krátký sloupec silikagelu (300 g), pak vymyt chloroformem a pak chloroformem s 1 % methanolu. Rozpouštědla byla odpařena a pevný podíl byl rozpuštěn ve vroucím acetonitrilu. Roztok byl pomalu ochlazován na 20 °C po dobu 3 hodin, během kterých produkt vykrystalizoval. Krystaly byly zfiltrovány, promyty acetonitrilem a sušeny s výtěžkem 66 g (86 %) uvedeného produktu ve formě bílých vločkových krystalů.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-í/) δ 8,65 (s, 1H); 7,51 (s, 1H); 7,51 - 7,45 (m, 2H); 7,44 - 7,31 (m, 3H); 5,63 (s, 2H); 5,62 (s, 2H); 3,73 - 3,17 (m, 2H); 0,97 - 0,65 (m, 2H); -0,09 (s, 9H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-í/) δ 155,90; 151,86; 151,05; 136,44; 136,11; 128,80; 128,52; 128,33; 115,87; 77,84; 68,55; 66,30; 59.18; 17,80; -1,34. MS (ESI) m/z = 482,2 [M + H]⁺ (vypočteno 482,1).

Příklad 3

4-(Benzyloxy)-7-brom-5-((íerc-butoxykarbonyl))-5H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin L3

Dvouplášťový reaktor (1 1) byl zapuštěn dusíkem, 4-(bcnzyloxy)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin (40 g; 178 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (500 ml) apo částech byl přidán /V-bromsukcinimid (34,7 g; 195 mmol; 1,1 ekv.). Směs byla míchána po dobu 1 hodiny, během které produkt vykrystalizoval. Rozpouštědla byla odpařena a surový bromový derivát, byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace. Dvouplášťový reaktor (11) byl zapuštěn dusíkem, surový 4-(bcnzyloxy)-7-brom-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin byl rozpuštěn v suchém acetonitrilu (400 ml) a přidán byl 4-(dimethylamino)pyridin (2,2 g; 18 mmol; 0,1 ekv.), následovaný pomalým přidáváním roztoku di-terc-butyldikarbonátu (58,2 g; 267 mmol; 1,5 ekv.) v suchém acetonitrilu (100 ml) během 30 minut. Směs byla míchána při teplotě místnosti, dokud se nepřestal vyvíjet plyn (cca 2 hodiny). Rozpouštědla byla odpařena, pevný podíl byl rozpuštěn ve směsi cyklohexan/ethylacetát (3:1; obj ./obj.) a zfiltrován přes krátký sloupec neutrální aluminy (300 g). Rozpouštědla byla odpařena a pevný podíl byl lyofilizován z dioxanu s výtěžkem 58 g (81 %) uvedeného produktu jako bílého lyofilizátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ti) δ 8,68 (s, 1H); 7,92 (s, 1H); 7,56 - 7,48 (m, 2H); 7,43 - 7,27 (m, 3H); 5,65(s, 2H); 1,54 (s, 9H). ¹³CNMR(101 MHz, Chlorofom-í/) δ 156,47; 152,90; 152,00; 147,23; 136,29; 131,34; 128,58; 128,22; 128,14; 114,26; 96,81; 85,90; 68,68; 27,87. MS (ESI) m/z = 404,1 [M + H]⁺ (vypočteno 404,1).

Příklad 4

4-(Bcnzyloxy)-5-((2-(trimcthylsilyl)cthoxy)mcthyl)-7-(thio)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin: l.2-bis(4-(bcnzyloxy)-5-((2-(trimcthylsilyl)cthoxy)mcthyl)-5//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-7-yl)disulfan L4

-8CZ 34625 UI

Do mikrovlnné kyvety byla vložena látka L2 (4 g; 8,31 mmol; 1,0 ekv.), jodid měďný (158 mg; 0,83 mmol; 0,1 ekv.) a 1,10-fenantrolin (299 mg; 1,63 mmol; 0,2 ekv.). Kyveta byla zapuštěna argonem a poté byl přidán suchý toluen (15 ml) a roztok thiobenzoové kyseliny (1,18 ml; 9,97 mmol; 1,2 ekv.) s triethylaminem (1,73 ml; 12,5 mmol; 1,5 ekv.) v suchém toluenu (20 ml), čímž směs změnila barvu na tmavě červenou. Kyveta byla uzavřena a vložena do mikrovlnného reaktoru na 1 hodinu při 120 °C. Tmavě hnědá reakční směs byla následně rozpuštěna v chloroformu a promyta nasyceným roztokem NaHCCf zředěným na poloviční koncentraci (2x), 1 mol I¹ HC1 (aq.) (2x), solankou a sušena MgSCL. Rozpouštědla byla odpařena a separace pomocí flash chromatografíe na silikagelu (eluenty: D do 5 % A) poskytla hnědý olej. Olej byl rozpuštěn v suchém methanolu a k roztoku byl přidán uhličitan draselný (2,30 g; 16,6 mmol; 2 ekv.). Směs byla míchána při teplotě místnosti, dokud nebylo dosaženo plné konverze (cca. 1 h). Poté byla reakce ukončena vodou a směs byla míchána 1 hodinu při přístupu vzduchu. Směs byla rozpuštěna, extrahována chloroformem (3x), solankou (lx) a sušena MgSO4. Rozpouštědla byla odpařena a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 5 % A) a následnou Cl8 flash chromatografíí v reversním módu (E do A) se ziskem 2,5 g (78 %) žlutého oleje uvedeného produktu, který byl lyofílizován z dioxanu pro poskytnutí pevné látky.

Ή NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 8,53 (s, 2H); 7,60 (s, 2H); 7,54 - 7,48 (m, 4H); 7,44 - 7,29 (m, 8H); 5,64 (s, 4H); 5,61 (s, 4H); 3,60 - 3,28 (m, 4H); 0,92 - 0,71 (m, 4H); -0,10 (s, 18H). ¹³C NMR (101 MHZ, Chloroform-d) δ 156,12; 151,46; 151,10; 138,34; 136,20; 128,80; 128,51; 128,34; 116,17; 110,52; 77,98; 68,42; 66,41; 17,83; -1,32. MS (ESI) m/z = 773,5 [M + H]⁺ (vypočteno 773,3).

Obecná syntéza pro látky L5-L6 (Sl)

Do mikrovlnné kyvety byla dána látka L2 (200 mg; 0,4154 mmol; 1,0 ekv.), jodid měďný (8 mg; 0,0415 mmol; 0,1 ekv.) a 1,10-fenantrolin (15 mg; 0,0830 mmol; 0,2 ekv.). Kyveta byla zapuštěna argonem a poté byl přidán suchý toluen (2 ml) a triethylamin (87 μΐ; 0,6231 mmol; 1,5 ekv.). Thiofenol (0,4985 mmol; 1,2 ekv.) byl přidán jako poslední látka a směs změnila barvu na tmavě červenou. Kyveta pak byla uzavřena a vložena do mikrovlnného reaktoru na 2 hodiny při 120 °C. Tmavě hnědá reakční směs byla rozpuštěna v chloroformu a promyta nasyceným roztokem NaHCCf zředěným na polovinu (2x), 1 mol l¹ HC1 (aq.) (2x), solankou a sušena byla MgSCE. Rozpouštědla byla odpařena a surový produkt byl separován pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 15 % C).

Příklad 5

4-(Benzyloxy)-7-((2-hydroxymethyl)fenylthio)-5-((2-(trimethylsilyl)ethoxy)methyl)-5H-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin L5

-9CZ 34625 UI

Postup obecné syntézy Sí poskytl uvedenou látku ve výtěžku 130 mg (64 %).

'HNMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 8,51 (s, 1H); 7,70 (s, 1H); 7,47 (t, J= 8,1 Hz, 2H); 7,42 (dd, 7=7,6, 1,5 Hz, 1H); 7,40 - 7,32 (m, 3H); 7,27 (dd,J=7,8, 1,4 Hz, 1H); 7,17 (td, 7= 7,4, 1,4 Hz, 1H); 7,08 (td, 7= 7,5, 1,6 Hz, 1H); 5,63 (s, 2H); 5,60 (s, 2H); 5,03 (s, 2H); 3,45 (t, 7= 8,1 Hz, 2H); 1,42 (s, 2H); 0,83 (t,7= 8,1 Hz, 2H); -0,08 (s, 9H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 156,18; 150,62; 150,50; 142,31; 137,38; 135,83; 134,76; 133,09; 130,01; 128,69; 128,57; 128,47; 128,27; 128,02; 116,16; 107,07; 77,82; 68,56; 66,31; 63,56; 17,72; - 1,40. MS (ESI) m/z = 494,3 [M + H]⁺ (vypočteno 494,2).

Příklad 6

4-(Benzyloxy)-7-((2-hydroxy)fenylthio)-5-((2-(trimethylsilyl)ethoxy)methyl)-5H-pyrrolo[3,2-ďjpyrimidin L6

Postup obecné syntézy Sí poskytl uvedenou látku ve výtěžku 132 mg (66 %).

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 8,66 (s, 1H); 7,60 (s, 1H); 7,59 (dd, 7= 7,8, 1,6 Hz, 1H); 7,48 (dd, 7= 7,9, 1,6 Hz, 2H); 7,44 - 7,31 (m, 3H); 7,21 (ddd, 7= 8,2, 7,3, 1,7 Hz, 1H); 7,00 (dd, 7 = 8,1, 1,4 Hz, 1H); 6,79 (td, 7= 7,5, 1,4 Hz, 1H); 5,63 (s, 2H), 5,58 (s, 2H); 3,43 (t, 7= 8,0 Hz, 2H); 0,81 (t, 7= 8,2 Hz, 2H); -0,10 (s, 9H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 158,52; 156,09; 150,89; 150,25; 136,69; 136,61; 135,81; 131,43; 128,73; 128,51; 128,26; 121,32; 120,64; 118,48; 115,83; 108,65; 77,74; 68,69; 66,36; 17,70; -1,41. MS (ESI) m/z 480,2 [M + H]⁺ (vypočteno 480,2).

Příklad 7

Diethyl-(£)-(2-jodstyryl) fosfonát L7

V baňce byl rozpuštěn 2-jodbenzaldehyd (2 g; 8,62 mmol; 1 ekv.) v dichlormethanu (20 ml) a do roztoku byl přidán vodný roztok NaOH (20 ml; 5 mol l¹). Poté do směsi přidán tetraethylmethylendifosfonát (2,57 ml; 10,3 mmol. 1,2 ekv.) a ta byla silně míchána přes noc při teplotě místnosti. Směs byla extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (D do 10 % A) se ziskem 3,1 g (98 %) diethyl-(£)-(2-jodstyryl)fosfonátu jako bezbarvého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,87 (dd, 7= 7,9, 1,2 Hz, 1H); 7,63 (dd, 7= 22,3, 17,3 Hz, 1H); 7,52 (dd, 7= 7,9, 1,6 Hz, 1H); 7,35 (dddd, 7 = 7,9, 7,3, 1,3, 0,6 Hz, 1H); 7,04 (td, 7= 7,7, 1,7 Hz, 1H); 6,15 (dd,7= 18,1, 17,3 Hz, 1H); 4,24 - 4,09 (m, 4H); 1,37 (t, 7= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 151,33 (d, 7 = 7,5 Hz); 140,01; 138,38 (d, 7 = 23,7 Hz); 131,28; 128,68; 127,30; 117,86 (d, 7= 190,6 Hz); 100,68; 62,26 (d, 7= 5,7 Hz); 16,56 (d; 7= 6,4 Hz). MS

- 10 CZ 34625 UI (ESI) m/z = 367,0 [M + H]⁺ (vypočteno 367.0).

Příklad 8

Diisopropyl-((2-jodfenoxy)methyl)fosfonát L8

2-Jodfenol (2g; 9,09 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydro fůrami (20 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na 0 °C, poté byl přidán hydrid sodný (382 mg 60 % olejové disperze; 9,54 mmol; 1,05 ekv.) a směs byla míchána 15 minut při 0 °C. Následně byl přidán TfOCH2P(O)(O/-Pr)2 (3,58 g; 10,9 mmol; 1,2 ekv.) a směs byla míchána při 0 °C dalších 15 minut. Reakce byla ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku NH4CI zředěného na poloviční koncentraci a extrahována ethylacetátem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (3x), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (D do 10 % A) se ziskem 2,07 g (100 %) bezbarvého oleje diisopropyl-((2-jodfenoxy)-methyl)fosfonátu.

'HNMR (401 MHZ, Chloroform-ó/) δ 7,76 (dd, J = 7,8, 1,6 Hz, 1H); 7,30 (ddd, J= 8,3, 7,4, 1,6 Hz, 1H); 6,89 (dd, J= 8,3, 1,3 Hz, 1H); 6,74 (td, J= 7,6, 1,3 Hz, 1H); 4,96 - 4,82 (m, 2H); 4,27 (d, J= 10,1 Hz, 2H); 1,42 - l,35(m, 12H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-ó/) δ 157,47 (d, J= 13,8 Hz); 139,84; 129,68; 123,69; 112,29; 86,11; 72,42 (d, J= 6,6 Hz); 63,58 (d, J= 170,5 Hz); 24,28. MS (ESI) m/z - 399,0 [M + H]⁺ (vypočteno 399.0).

Příklad 9 (5-Brom-2-jodfenyl)methanol L9

Látka byla připravena podle publikovaného postupu [Zhou,N.; Wang, L.; Thompson, D. W.; Zhao, Y. Org. Lett. 2008, 10 (14), 3001-3004.]

Methyl-5-brom-2-jodbenzoát (4 g; 11,7 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém dichlormethanu (24 ml) a roztok byl ochlazen na 0 °C. Přidán byl diisobutylaluminium hydrid (23,4 ml 1 mol¹ roztoku v toluenu; 23,4 mmol; 2 ekv.) a směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti. Reakce byla ukončena přidáním 15% vodného roztoku kyseliny citrónové (obj./obj.), extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL a zfiltrována. Odpaření rozpouštědel poskytlo 3,52 g (96 %) nažloutlých krystalů (5-brom-2-jodfenyl)methanolu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ó/) δ 7,64 (d, J= 8,3 Hz, 1H); 7,62 (d, J = 2,4 Hz, 1H); 7,13 (dd, J= 8,4, 2,4 Hz, 1H); 4,62 (d, J= 0,7 Hz, 2H); 2,06 (s, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-ó/) δ 144,70; 140,43; 132,31; 131,27; 123,13; 94,76; 68,82. MS (ESI) m/z = 335,9 [Μ + H - H₂O + CH3CN]⁴ (vypočteno 335,9).

- 11 CZ 34625 UI

Příklad 10

5-Brom-2-jodbenzaldehyd LIO

Látka byla připravena podle publikovaného postupu [Zhou, N.; Wang, L.; Thompson, D. W.; Zhao, Y. Org. Lett. 2008, 10 (14), 3001-3004.] (5-Brom-2-jodfenyl)methanol (3g; 9,58 mmol; 1 ekv.) a pyridinium dichromát (7,2 g; 19,2 mmol; 2 ekv.) byly rozpuštěny v suchém dichlormethanu (40 ml) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Poté byla směs zfiltrována přes křemelinu, promyta diethyletherem a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 10 % C) se ziskem 2,3 g (77 %) bílých krystalů 5 -brom-2-j odbenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ď) δ 9,99 (s, 1H); 7,99 (d, J= 2,5 Hz, 1H); 7,81 (d, J= 8,4 Hz, 1H); 7,41 (dd, J= 8,4, 2,5 Hz, 1H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 194,45; 141,95; 138,37; 136,47; 133,24; 123,63; 98,39. MS (CI) m/z = 310,9 [M + H]⁺ (vypočteno 310,9).

Příklad 11

Diethyl-(£)-(5-brom-2-jodstyryl)fosfonát Lil

Tetraethyl-methylendifosfonát (1,52 ml; 7,72 mmol; 1,2 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofůranu (40 ml) pod argonovou atmosférou a přidán byl terc-butoxid draselný (867 mg; 7,72 mmol; 1,2 ekv.). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a poté byl přidán roztok 5-brom-2-jodbenzaldehydu (2 g; 6,43 mmol; 1 ekv.) v suchém tetrahydrofůranu (15 ml). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a reakce byla ukončena přídavkem 1 mol l¹ HC1 (aq.), extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 5 % A) se ziskem 1,82 g (63 %) čirého olej e diethyl-(£)-(5 -brom-2-j odstyryljfosfonátu.

'HNMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 7,72 (dd, J= 8,5, 1,5 Hz, 1H); 7,63 (d, J= 2,0 Hz, 1H); 7,55 (ddd, 7=22,2, 17,2, 1,5 Hz, 1H); 7,17 (d, J= 8,4 Hz, 1H); 6,17 (td, J= 17,3, 1,5 Hz, 1H); 4,17 (q, 7=7,1 Hz, 4H); 1,38 (t,7=7,l, 6H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 149,76 (d, 7=8,0 Hz); 141,09; 140,26 (d, 7= 24,1 Hz); 133,98; 130,11; 122,92; 119,44 (d,7= 190,0 Hz); 98,21; 62,23 (d, 7= 5,4 Hz); 16,48 (d, 7= 6,5 Hz, MS (ESI) m/z = 444,9 [M + H]⁺ (vypočtěno 444,9).

Příklad 12

4-Brom-l-(brommethyl)-2-jodbenzen L12

- 12 CZ 34625 UI

Látka byla připravena podle publikovaného postupu [Caruso, A.; Tovar, J. D. J. Org. Chem 2011, 76, 2227-2239.]

4-Brom-2-jod-l-methylbenzen (3,94; 13,3 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém 1,2-dichlorethanu (19 ml) pod argonovou atmosférou a do směsi byly postupně přidány A-bromsukcinimid (2,63 g; 14,6 mmol; 1,1 ekv.) s dibenzoylperoxidem (164 mg; 0,6630 mmol; 0,05 ekv.). Směs byla míchána 4 hodiny při varu rozpouštědla a reakce byla poté ukončena přídavkem nasyceného vodného roztoku NH4CI zředěného na poloviční koncentraci a extrahována chloroformem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (Ix), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B) se ziskem 4,35 g (89 %) bílých krystalů 4-brom-l-(brommethyl)-2-jodbenzenu.

¹HNMR(401 MHz, Chloroform-7) δ 8,00 (d, 7= 2,1 Hz, 1H); 7,46 (dd,7=8,3, 1,7 Hz, 1H); 7,33 (d, J= 8,3 Hz, 1H); 4,54 (s, 2H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 141,98; 139,32; 132,04; 131,28; 122,85; 100,38; 37,65. MS (ESI) m/z = 353,9 [Μ + H - HBr + H₂O + CH₃CN]⁺ (vypočteno 353,9).

Příklad 13

4-Brom-2-jodbenzaldehyd L13

A/

Látka byla připravena podle publikovaného postupu [Caruso, A.; Tovar, J. D. J. Org. Chem 2011, 76, 2227-2239.]

A-Methylmorfolin-A-oxid (3,74 g; 31,9 mmol; 3 ekv.) byl rozpuštěn v suchém acetonitrilu (80 ml) pod argonovou atmosférou a přidána byla molekulová síta (26 g; 4 Á). Suspenze byla ochlazena na 0 °C, přidán 4-brom-l-(brommethyl)-2-jodbenzen (4 g; 10,6 mmol; 1 ekv.) a směs byla míchána 2 hodiny při 0 °C. Směs byla zfiltrována přes krátký sloupec silikagelu a promyta cyklohexanem s výtěžkem 3,3 g (100 %) bílých krystalů 4-brom-2-jodbenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 9,98 (d, J= 0,8 Hz, 1H); 8,12 (d, J = 1,8 Hz, 1H); 7,72 (d, J= 8,3 Hz, 1H); 7,61 (ddd, 7=8,3, 1,8, 0,8 Hz, 1H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 194,56; 142,67; 133,95; 132,17; 131,00; 130,04; 100,81. MS (Cl) m/z - 310,9 [M + H]⁺ (vypočteno 310,9).

- 13 CZ 34625 UI

Příklad 14

Diethyl-(/'.')-(4-brom-2-jodstyryl)fosfonát L I 4

Tetraethyl-methylendifosfonát (2,28 ml; 11,6 mmol; 1,2 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (60 ml) pod argonovou atmosférou a poté byl přidán terc-butoxid draselný (1,3 g; 11,6 mmol; 1,2 ekv.). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a následně byl přidán roztok 4-brom-2-jodbenzaldehydu (2 g; 6,43 mmol; 1 ekv.) v suchém tetrahydrofuranu (20 ml). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a reakce byla ukončena přídavkem 1 mol I¹ HC1 (aq.), extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfíltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 5 % A) se ziskem 2,41 g (56 %) čirého oleje diethyl-(£)-(4-brom-2-jodstyryl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ď) δ 8,04 (d, J= 1,9 Hz, 1H); 7,56 (dd, J = 22,3, 17,4 Hz, 1H); 7,51 - 7,47 (m, 1H); 7,38 (d, J= 8,3 Hz, 1H); 6,16 (t, J = 17,4 Hz, 1H); 4,21 -4,11 (m, 4H); 1,38 (t, J= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-ó/) δ 150,08 (d, J = 7,8 Hz); 141,99 (d, J= 1,4 Hz); 131,93; 128,10 (d, J= 1,6Hz); 124,43; 118,61 (d, J= 190,7Hz); 100,96 (d, J= 15,9 Hz); 62,37 (d, J = 5,7 Hz); 16,56 (dd, J= 9,3, 6,1 Hz). MS (ESI) m/z = 445,0 [M + H|⁺ (vypočteno 444,9).

Příklad 15

4-( 1,3 -Dimethylimidazolidin-2-yl)fenol L15

Baňka byla naplněna toluenem (600 ml) a přidán byl 4-hydroxybenzaldehyd (36 g; 295 mmol; 1 ekv.), následovaný Λ'.Λ''-dimcthylcthylcndiamincm (38 ml; 354 mmol; 1,2 ekv.). Směs byla zahřívána 15 minut při varu a pak bylo 2/3 objemu oddestilováno. Směs byla ochlazena ledovou lázní a produkt vykrystalizoval. Krystaly byly zfiltrovány, promyty studeným toluenem a sušeny se ziskem 48,6 g (86 %) nahnědlých krystalů 4-(l,3-dimethylimidazolidin-2-yl)fenolu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-í/₆) δ 9,36 (s, 1H); 7,20 - 7,11 (m, 2H); 6,75 - 6,67 (m, 2H); 3,24 3,15 (m, 2H); 3,09 (s, 1H); 2,47 - 2,38 (m, 2H); 2,01 (s, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-ó/j δ 157,42; 129,89; 129,85; 114,72; 91,41; 52,57; 39,10. MS (Cl) m/z = 193,1 [M + H]⁺ (vypočteno 193,1).

- 14 CZ 34625 UI

Příklad 16

4-Hydroxy-2-jodbenzaldehyd L16

4-(1,3-Dimethylimidazolidin-2-yl)fenol (10 g; 52 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém diethyletheru (350 ml) pod argonovou atmosférou, roztok byl ochlazen na -78 °C a roztok terc-butyllithia (92 ml 1,7 mol 1-1 roztok v pentanu; 156 mmol, 3 ekv.) byl přidán tak, aby teplota směsi nepřesáhla -70 °C. Směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc a poté byla opět ochlazena na -78 °C. Roztok 1,2-dijodethanu (44 g, 156 mmol, 3 ekv.) v suchém tetrahydrofuranu (100 ml) byl přidán tak, aby teplota směsi nepřesáhla -60 °C a pak byla směs míchána 30 minut při teplotě místnosti. Reakce byla ukončena 1 mol 1-1 HC1 (aq.), extrahována diethyletherem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 20 % C) se ziskem 9,4 g (73 %) čirého oleje diethyl-(E)-(4-brom-2-jodstyryl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-ď,) δ 10,86 (s, 1H); 9,74 (d, J = 0,8 Hz, 1H); 7,65 (d, J = 8,6 Hz, 1H); 7,37 (d, 7=2,3 Hz, 1H); 6,91 (dd, J= 8,6, 2,3 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-ď,) δ 193,53; 163,52; 132,06 (d, J = 12,9 Hz); 126,82; 126,79; 116,04 (d, J= 28,8 Hz); 103,01. MS (ESI) m/z = 249,0 [M + H]⁺ (vypočteno 248,9).

Příklad 17

Diethyl-(E)-(4-hydroxy-2-j odstyryljfosfonát L17

4-Hydroxy-2-jodbenzaldehyd (4g; 16,1 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém toluenu (80 ml) a postupně byla přidána diethylfosforyloctová kyselina (3,8 ml; 19,4 mmol; 1,2 ekv.), piperidin (524 pl; 5,13 mmol; 0,33 ekv.) a octová kyselina (221 μΐ; 3,86 mmol; 0,24 ekv.). Směs byla zahřívána při varu rozpouštědla v otevřené baňce přes noc a poté byla reakce ukončena nasyceným vodným roztokem NaHCCf, zředěným na poloviční koncentraci, extrahována chloroformem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCfí, zfiltrována a odpařena do sucha. Směs byla separována pomocí flash chromatografíe na C18 silikagelu (20 % E do A) v modu kapalného nástřiku se ziskem 5,3 g (87 %) nažloutlého oleje diethyl-(E)-(4-hydroxy-2-jodstyryl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-i/) δ 9,48 (s, 1H); 7,62 (dd, J = 23,0, 17,3 Hz, 1H); 7,50 (d, 7= 2,4 Hz, 1H); 7,40 (d, 7 = 8,7 Hz, 1H); 6,92 (ddd, J = 8,7, 2,5, 0,6 Hz, 1H); 5,96 (dd, J= 19,0, 17,3 Hz, 1H); 4,16 (q,7= 7,1 Hz, 4H); 1,37 (t, J= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroformd) δ 160,04; 152,40 (d, J= 8,3 Hz); 128,63 (d, J= 24,2 Hz); 127,86 (d, J= 1,3 Hz); 126,92 (d, J = 1,4 Hz); 116,68; 111,99 (d, J= 194,2 Hz); 102,44; 62,63 (d, J= 5,7 Hz); 16,54 (d, J= 6,4 Hz). MS (ESI) m/z = 383,1 [M + H]⁺ (vypočteno 383,0).

- 15 CZ 34625 UI

Příklad 18

2-Jod-5-methoxybenzaldehyd L18

3-Methoxybenzaldehyd (20 g; 147 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v methanolu (600 ml) a poté byl přidán dusičnan stříbrný (24,8 g; 147 mmol; 1 ekv.), následovaný jodem (42,0 g; 162 mmol; 1,1 ekv.). Baňka byla zabalena do hliníkové folie a směs byla míchána při teplotě místnosti 1 hodinu. Směs byla zfiltrována přes křemelinu a přebytek jódu byl ztitrován nasyceným vodným roztokem thiosíranu sodného. Rozpouštědla byla odpařena a pevný podíl byl rozpuštěn ve směsi chloroformu a vody. Směs byla extrahována chloroformem (2x), promyta solankou (Ix), sušena síranem hořečnatým a zfiltrována. Rozpouštědla byla odpařena a pevný podíl byl rozpuštěn v horkém ethylacetátu a produkt byl sražen přidáním cyklohexanu. Žluté krystaly byly zfiltrovány se ziskem 24g (62 %) 2-jod-5-methoxybenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-ď,) δ 9,89 (s, 1H); 7,89 (d, J= 8,7 Hz, 1H); 7,30 (d, J= 3,2 Hz, 1H); 7,05 (dd, J = 8,6, 3,2 Hz, 1H); 3,80 (s, 3H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-í/₆) δ 195,16; 159,73; 141,25; 135,54; 122,87; 114,36; 89,57; 55,58. MS (ESI) m/z = 263,0 [M + H]⁺(vypočteno 263,0).

Příklad 19

5-Hydroxy-2-jodbenzaldehyd L19

2-Jod-5-methoxybenzaldehyd (5 g; 19,1 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém dichlormethanu (200 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na -78 °C a pomalu byl přikapán roztok bromidu boritého (95 ml 1 mol l¹ roztok v dichlormethanu; 95,5 mmol; 5 ekv.). Směs byla míchána při teplotě místnosti, dokud nebylo dosaženo plné konverze (cca 3 hodiny). Poté byla směs ochlazena na -78 °C a reakce byla ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku NaHCCf. Směs byla extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena síranem horečnatým a zfiltrována. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 20 % C) se ziskem 4,1 g (87 %) žlutých krystalů 5-hydroxy-2-jodbenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-ď,) δ 10,18 (s, 1H); 9,86 (s, 1H); 7,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,21 (d, J=3,IHz, 1H); 6,89 (dd, J = 8,5, 3,1 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-í/₆) δ 195,45; 158,09; 141,27; 135,54; 123,90; 116,41; 87,33. MS (ESI) m/z = 249,0 [M + H]⁺ (vypočteno 248,9).

- 16CZ 34625 UI

Příklad 20

Diethyl-(£)-(5-hydroxy-2-jodstyryl)fosfonát L20

5-Hydroxy-2-jodbenzaldehyd (4g; 16,1 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v absolutním ethanolu (80 ml) a postupně byla přidán uhličitan draselný (11,2 g; 80,6 mmol; 5 ekv.) a tetraethyl-methylendifosfonát (12,0 ml; 48,4 mmol; 3 ekv.). Směs byla zahřívána při varu rozpouštědla v otevřené baňce, dokud nebylo dosaženo úplné konverze (cca 1 hodinu) a poté byla reakce ochlazena na 0 °C a ukončena přídavkem 1 mol I¹ HC1 (aq.), extrahována chloroformem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCfi, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 20 % C). Tato separace poskytla produkt znečištěný přebytkem tetraethyl-methylendifosfonátu. Směs byla separována pomocí flash chromatografie na C18 silikagelu (E do A) v modu kapalného nástřiku v dimethylformamidu se ziskem 5,39 g (88 %) žlutých krystalů diethyl-(£)-(5-hydroxy-2-jodstyryl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 9,23 (s, 1H); 7,64 (d, J = 8,6 Hz, 1H); 7,54 (dd, J = 22,6, 17,3 Hz, 1H); 7,21 (d, 7=2,9 Hz, 1H); 6,68 (dd, J= 8,6, 2,9 Hz, 1H); 6,12 (dd, J= 19,6, 17,3 Hz, 1H); 4,29 - 4,06 (m, 4H); 1,37 (t, J = 7,1, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 158,31; 152,31 (d, 7=6,9 Hz); 140,52; 138,11 (d, 7=23,5 Hz); 120,48; 115,74(d, 7= 192,6 Hz); 114,43; 87,79; 62,95 (d, 7= 5,9 Hz); 16,49 (d, 7= 6,5 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-r/) δ 20,49. MS (ESI) m/z = 383,0 [M + H]⁺ (vypočteno 383,0).

Příklad 21

2-(2-Methoxyfenyl)-l,3-dimethylimidazolidin L21 '

Baňka byla naplněna toluenem (600 ml) a přidán byl 2-hydroxybenzaldehyd (36 g; 295 mmol; 1 ekv.) a následně ΛΆ'-dimcthylcthylcndiamin (31,3 ml; 325 mmol; 1,1 ekv.). Směs byla zahřívána 15 minut při varu a pak byla rozpouštědla odpařena. Pevný podíl byl rekrystalizován z hexanu se ziskem 36 g (67 %) čirých velkých krystalů 2-(2-methoxyfenyl)-l,3-dimethylimidazolidinu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,67 (dd,7=7,6, 1,9 Hz, 1H); 7,26 (td, 7= 6,6, 1,9 Hz, 1H); 7,00 (td, 7= 7,4, 1,3 Hz, 1H); 6,88 (dd,7= 8,2, 1,1 Hz, 1H); 4,06 (s, 1H); 3,82 (s, 3H); 3.37 - 3,31 (m, 2H); 2,65 - 2,57 (m, 2H); 2,19 (s, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 159,04; 129,40; 129,00; 127,75; 121,26; 110,52; 82,90; 55,63; 53,67; 39,83. MS (Cl) m/z = 207,1 [M + H]⁺ (vypočteno 207,1).

- 17 CZ 34625 UI

Příklad 22

2-Jod-6-methoxybcnzaldehyd L22

2-(2-Methoxyfenyl)-l,3-dimethylimidazolidin (10 g; 48,5 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém diethyletheru (250 ml) pod argonovou atmosférou, roztok byl ochlazen na -78 °C a roztok terc-butyllithia (57 ml 1,7 mol l¹ roztoku v pentanu; 97 mmol, 2 ekv.) byl přidán tak, aby teplota směsi nepřesáhla -70 °C. Směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc a poté byla opět ochlazena na -78 °C. Roztok 1,2-dijodethanu (27,3 g, 97 mmol, 2 ekv.) v suchém tetrahydrofůranu (200 ml) byl přidán tak, aby teplota směsi nepřesáhla -60 °C a pak byla směs míchána 30 minut při teplotě místnosti. Reakce byla ukončena přidáním 1 mol I¹ HC1 (aq.), extrahována diethyletherem (3x), promyta solankou (1 x), sušena MgSCfi, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatogratie na silikagelu (B do 15 % C) se ziskem 5,8 g (46 %) čirého oleje 2-jod-6-methoxybenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ó/) δ 10.24 (s, 1H), 7.59 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 8.4, 7.8 Hz, 1H). 6.99 (dd, J = 8.3, 0.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 3H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-d) δ 191,90; 161,98; 135,25; 133.92; 125,04; 112,08; 96,55; 56,16. MS (ESI) m/z = 263,0 [M + H]⁺ (vypočteno 263.0).

Příklad 23

2-Hydroxy-6-jodbenzaldehyd L23 .Λ

2-Jod-6-methoxybenzaldehyd (5 g; 19,1 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém dichlormethanu (200 ml) pod argonovou atmosférou. Do roztoku ochlazeného na -78 °C byl přidán roztok bromidu boritého (95 ml 1 mol l¹ roztok v dichlormethanu; 95,5 mmol; 5 ekv.) a směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu 3 hodin. Poté byla směs ochlazena na -78 °C a reakce byla ukončena přidáním nasyceného vodného roztoku NaHCCf. Směs byla extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena síranem hořečnatým a zfiltrována. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatogratie na silikagelu (B do 20 % C) se ziskem 4,4 g (93 %) nahnědlých krystalů

-hydroxy-2-j odbenzaldehydu.

'HNMR (401 MHz, DMSO-í/₆) δ 11,58 (s, 1H); 10,02 (s, 1H); 7,52 (dd, 7=7,7, 1,0 Hz, 1H); 7,22 (dd,J = 8,4,7,7Hz, 1H); 7,07 - 6,89 (m, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-7,) δ 198,92; 162,10; 137,58; 131,87; 120,06; 118,14; 101,00. MS (Cl) m/z = 248,9 [M + H]⁺(vypočteno 248,9).

- 18CZ 34625 UI

Příklad 24

Diethyl-(£)-(2-hydroxy-6-jodstyryl)fosfonát L24

2-Hydroxy-6-jodbenzaldehyd (1,5 g; 6,05 mmol, 1 ekv.) a tetraethyl-methylendifosfonát (3 ml; 12,1 mmol; 2 ekv.) byly rozpuštěny v suchém dimethylformamidu (30 ml) pod argonovou atmosférou a roztok byl ochlazen na 0 °C. Hydrid sodný (484 mg 60 % olejové disperze; 12,1 mmol; 2 ekv.) byl přidán v jednom dílu a směs byla míchána přes noc při 40 °C. Reakce byla ukončena nasyceným vodným roztokem NH4CI zředěným na poloviční koncentraci, extrahována ethylacetátem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 40 % C) se ziskem 1,2 g (52 %) čirého oleje 2-hydroxy-6-jodbenzaldehydu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-í/e) δ 10,70 (s, 1H); 7,43 (dd, J = 6,9, 1,9 Hz, 1H); 7,42 (dd, J= 24,2, 16,7 Hz, 1H); 6,96 (dd, J = 8,3, 1,5 Hz, 1H); 6,91 (t, 7=8,2, 7,5 Hz, 1H); 6,69 (dd, 7 = 21,7, 17,5 Hz. 1H); 4,02 (q, 7= 7,1 Hz, 4H); 1,27 (t, 7= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-ď,) δ 158,54 - 156,63 (m); 148,12 (d, 7 = 8,0 Hz); 131,89, 130,66, 123,24 (d, 7 =22,1 Hz); 120,16 (d, 7 = 182,8 Hz); 116,74; 103,66; 61,31 (d, 7 = 5,6 Hz); 16,30 (d, 7 = 5,9 Hz).³¹P NMR (162 MHz, DMSO-Je) δ 21,53. MS (ESI) m/z = 383,1 [M + H]⁺ (vypočteno 383,0).

Obecná syntéza pro látky L25-L32 (S2)

Výchozí fenol (500 mg; 1,31 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém dimethylformamidu pod argonovou atmosférou a roztok byl ochlazen na 0 °C. Následně byl přidán hydrid sodný (79 mg 60% disperze v oleji; 1,96 mmol; 1,5 ekv.) a směs byla míchána 30 minut při teplotě místnosti. Pak bylo přidáno alkylační nebo arylační činidlo (2,62 mmol; 2 ekv.) a směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti. Reakce byla ukončena přídavkem nasyceného vodného roztoku NH4CI zředěného na poloviční koncentraci, extrahována ethylacetátem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 30 % C).

Příklad 25

Diethyl-(/'.')-(2-jod-5-mcthoxystyryl)fosfonát L25

Obecná syntéza S2 s jodmethanem (163 pl) poskytla 326 mg (63% výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

*H NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,63 (d, 7 = 8,7 Hz, 1H); 7,50 (dd, 7 = 22,2, 17,3 Hz, 1H); 6,98 (d, 7= 3,0 Hz, 1H); 6,58 (dd, 7 = 8,7, 3,0 Hz, 1H); 6,08 (dd, 7= 18,0, 17,3 Hz, 1H); 4,09 (q, 7= 7,1 Hz, 4H); 3,72 (s, 3H); 1,39 - 1,19 (m, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 159,97; 150,94 (d, 7= 7,4 Hz); 140,22; 138,82 (d, 7 = 23,5 Hz); 117,75 (d, 7= 190,1 Hz); 117,69; 112,53 (d, 7= 1,6 Hz); 89,12; 62,04 (d, 7= 5,7 Hz); 55,41; 16,39 (d, 7 = 6,6 Hz). ³¹P

- 19CZ 34625 UI

NMR (162 MHz, Chloroform-r/) δ 20; 12. MS (ESI) m/z = 397,1 [M + H]⁺ (vypočteno 397,0).

Příklad 26

Diethyl-(E)-(2-jod-5-isopropoxystyryl)fosfonát L26

Obecná syntéza S2 s 2-jodpropanem (261 μΐ) poskytla 402 mg (72% výtěžek) uvedeného produktu jako nažloutlého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-í/) δ 7,56 (d, J = %,Ί Hz, 1H); 7,45 (dd, J= 22,2, 17,3 Hz, 1H); 6,93 (d, J = 3,0 Hz, 1H); 6,51 (dd, J = 8,7, 3,0 Hz, 1H); 6,01 (dd, J= 18,0, 17,3 Hz, 1H); 4,40 (hept, J = 6,0 Hz, 1H); 4,03 (q, J= 7,1 Hz, 4H); 1,24 (t, J= 7,1 6H); 1,18 (d, J =6,0 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-í/) δ 158,12; 150,87 (d, J = 7,8 Hz); 140,09; 138,71 (d, J = 23,5 Hz); 119,05; 117,45 (d, J = 190,1 Hz); 114,57 (d, J = 1,4 Hz); 88,62; 70,02; 61,87 (d, J= 5,8 Hz); 21,66; 16,26 (d, J = 6,5 Hz). ³¹PNMR(162 MHz, Chloroform-í/) δ 20,13. MS (ESI) m/z = 425,2 [M + H]⁺ (vypočteno 425,0).

Příklad 27

Diethyl-(E)-(2-jod-5-((perfluorfenyl)methoxy)styryl)fosfonát L27

Obecná syntéza S2 s 2,3,4,5,6-pentafluorbenzylbromidem (395 μΐ) po chromatografíi (B do 40 % C) poskytla 675 mg (92% výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 7,63 (d, J= 8,7 Hz, 1H); 7,46 (dd, J= 22,2, 17,3 Hz, 1H); 7,06 (d, J = 3,0 Hz, 1H); 6,64 (dd, J= 8,7, 3,0 Hz, 1H); 6,09 (t, J= 17,4 Hz, 1H); 5,04 (s, 2H); 4,07 (q, 7=7,1 Hz, 4H); 1,27 (t, J= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz; Chloroform-í/) δ 158,27; 150,45 (d, J= 7,5 Hz); 146,77 (td, J = 7,4; 3,8 Hz); 144,31 (tt, J= 7,9; 4,2 Hz); 142,93 (tt, J= 13,2; 5,1 Hz); 140,42; 139,10 (d, 7= 23,5 Hz); 118,25 (d, 7= 189,9 Hz); 118,13; 113,35; 109,51 (td, J = 17,4; 4,0 Hz); 90,43; 62,02 (d, J=5,5 Hz); 57,50; 16,23 (d, J= 6,5 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-d) δ 19,75. ¹⁹F NMR (377 MHz, Chloroform-7) δ - 142,27 (d, J = 13,2 Hz); -152,41; -161,51 (d, J= 7,2 Hz). MS (ESI) m/z = 563,0 [M + H]⁺(vypočteno 563,0).

Příklad 28

Diethyl-(/'.')-(2-jod-5-((pcrfhiorfcnyl)oxy)styryl)fosfonát L28

Obecná syntéza S2 s hexafluorbenzenem (151 μΐ) při 70 °C poskytla 300 mg (42% výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chlorofom-7) δ 7,75 (d, J= 8,7 Hz, 1H); 7,50 (dd, J= 22,1, 17,3 Hz, 1H);

- 20 CZ 34625 UI

7,07 (d, J= 3,0 Hz, 1H); 6,65 (dd, J = 8,7, 3,0 Hz, 1H); 6,07 (dd, 7= 34,8, 17,4Hz, 1H); 4,12 (q, 7= 7,0 Hz, 4H); 1,32 (t, 7= 7,0 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz; Chloroform-7) δ 157,56; 149,94 (d, 7=7,7 Hz); 143,15 (dq, 7= 12,0; 4,0 Hz); 140,94; 139,94 (d, 7= 23,7 Hz); 137,92 (tt, 7 = 13,5; 3,8 Hz); 137,03 (ddt, 7= 16,8; 9,3; 3,5 Hz); 128,91 (t, 7= 13,6 Hz); 119,29 (d, 7= 190,2 Hz); 118,29; 114,17 (d, 7 = 1,9 Hz); 93,06; 62,27 (d, 7 = 5,6 Hz); 16,41 (d, 7 =6,4 Hz). ³¹ P NMR (162 MHz, Chloroform-7) δ 19,40.¹⁹FNMR(377 MHz, Chloroform-7) δ -153,82 (d,7= 17,3 Hz); -158,64; -161,25 (dd, 7= 21,6, 17,0 Hz). MS (ESI) m/z = 549,1 [M + H]⁺ (vypočteno 549,0).

Příklad 29

Diethyl-(£)-(2-jod-6-methoxystyryl)fosfonát L29

Obecná syntéza S2 s jodmethanem (163 μΐ) poskytla 483 mg (93% výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,49 (dd, 7 = 7,6, 1,3 Hz, 1H); 7,47 (dd, 7 = 25,0, 17,7 Hz, 1H); 6,92 (t, 7= 8,2, 7,8 Hz, 1H); 6,86 (dd, 7 = 8,4, 1,3 Hz, 1H); 6,54 (dd, 7=21,3, 17,6 Hz, 1H); 4,13 (q, 7=7,1 Hz, 4H); 3,80 (s, 3H); 1,34 (t, 7= 7,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroformd) δ 158,54 (d, 7= 2,1 Hz); 148,06 (d, 7= 7,5 Hz); 132,32; 131,19; 126,54 (d, 7= 23,0 Hz); 121,16 (d, 7 = 184,3 Hz); 111,36; 102,64; 61,96 (d,7= 5,3 Hz); 55,74; 16,50 (d,7= 6,5 Hz). MS (ESI) m/z = 396,9 [M + H |⁺ (vypočteno 397,0).

Příklad 30

Diethyl-(£)-(2-jod-6-isopropoxystyryl)fosfonát

Obecná syntéza S2 s 2-jodpropanem (261 μΐ) poskytla 488 mg (88% výtěžek) uvedeného produktu jako nažloutlého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,46 (dd, 7= 6,3, 2,6 Hz, 1H); 7,45 (dd, 7= 24,9, 17,6 Hz, 1H); 6,92 - 6,84 (m, 2H); 6,53 (dd, 7= 21,6, 17,6 Hz, 1H); 4,56 (hept, 7 = 6,1 Hz, 1H); 4,21 4,06 (m, 4H); 1,39 - l,29(m, 12H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 156,79 (d, 7= 2,1 Hz); 148,46 (d, 7= 8,0 Hz); 132,03; 131,01; 127,50 (d, 7 = 22,6 Hz); 121,08 (d, 7= 183,5 Hz); 113,75; 102,63; 71,33; 61,94 (d, 7= 5,2 Hz); 22,05; 16,53 (d, 7= 6,6 Hz). MS (ESI) m/z 425,0 [M + H]⁺ (vypočteno 425,0).

Příklad 31

Diethyl-(£)-(2-jod-4-((perfluorfenyl)methoxy)styryl)fosfonát L30

- 21 CZ 34625 UI

Obecná syntéza S2 s 2,3,4,5,6-pentafluorbenzylbromidem (395 μΐ) po chromatografii (B do 40 % C) poskytla 668 mg (91 % výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 7,65 - 7,53 (m, 1H); 7,37 (ddd, J= 24,5, 17,6, 2,0 Hz, 1H); 7,03 (d, 7 =8,4 Hz, 1H); 6,97 (td, 7=8,0, 1,5 Hz, 1H); 6,29 (ddd, 7= 20,4, 17,6, 1,7 Hz, 1H); 5,14 (d, 7= 1,6 Hz, 2H); 4,21 -3,95 (m, 4H); 1,29 (t, 7= 7,1 Hz, 6H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroformd) δ 156,23; 147,38 (d, 7=7,7 Hz); 147,25 - 146,51 (m); 145,30 - 144,00 (m); 136,77 - 135,83 (m); 133,59; 131,12; 128,10 (d, 7= 24,2 Hz); 122,08 (d, 7= 183,1 Hz); 112,82; 110,47 - 108,60 (m); 102,16; 61,95 (d, 7 = 5,2 Hz); 58,18; 16,38 (d, 7 = 6,5 Hz). MS (ESI) m/z = 563,1 [M + H]⁺ (vypočteno 563,0).

Příklad 32

Diethyl-(E)-(2-jod-4-((perfluorfenyl)oxy)styryl)fosfonát L31

Obecná syntéza S2 s hexafluorbenzenem (151 μΐ) při 70 °C poskytla 356 mg (50% výtěžek) uvedeného produktu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 7,62 (dd, 7= 7,9, 1,0 Hz, 1H); 7,44 (dd, 7=24,1, 17,7 Hz, 1H); 6,87 (t, 7=8,1 Hz, 1H); 6,61 (d, 7=7,9 Hz, 1H); 6,40 (dd, 7= 19,6, 17,7 Hz, 1H); 4,11 (q, 7= 7,1 Hz,4H); 1,30 (t, 7= 7,0 Hz, 6H). ¹³ C NMR (101 MHz; Chloroform-d) δ 154,61; 146,20 (d, 7= 7,4 Hz); 135,43; 130,98; 128,21 (d, 7= 23,5 Hz); 123,28 (d, 7= 184,7 Hz); 113,99; 101,47 (d, 7= 1,9 Hz); 62,15 (d, 7= 5,3 Hz); 16,33 (d, 7= 6,3 Hz).³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-7) δ 19,80. ¹⁹F NMR (377 MHz, Chloroform-7) δ -154,00 (d, 7 = 17,2 Hz); -158,67; -161,32 (d, 7 = 4,5 Hz). MS (ESI) m/z = 549,2 [M + H]⁺ (vypočteno 549,0).

Příklad 33

Diisopropyl-((4-fluor-2-jodfenoxy)methyl)fosfonát L32

4-Fluor-2-jodfenol (1 g; 4,20 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (20 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na 0 °C, byl přidán hydrid sodný (210 mg 60% olejové disperze; 5,25 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána 15 minut při 0 °C. Poté byl přidán TfOCH2P(O)(Oz-Pr)2 (1,72 g; 5,25 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána při 0 °C dalších 15 minut. Reakce byla ukončena přidáním zředěného vodného roztoku NH4CI a extrahována ethylacetátem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (3x), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 20 % C) s výtěžkem 1,39 g (79 %) bezbarvého oleje diisopropyl-((4-fluor-2-jodfenoxy)methyl)-fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-d) δ 7,49 (dd, 7 = 7,5, 3,0 Hz, 1H); 7,02 (ddd, 7 = 9,0, 7,7, 3,0 Hz, 1H); 6,86 (dd, 7 = 9,1, 4,5 Hz, 1H); 5,02 - 4,72 (m, 2H); 4,24 (d, 7 = 9,9 Hz, 2H); 1.42-1,31 (m, 12H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 157,48 (d, 7= 245,0 Hz); 154,31 (dd, 713,2, 2,3 Hz); 126,47 (d,7= 25,0 Hz); 115,87 (d, 7 = 22,9 Hz); 112,95 (d, 7= 8,2 Hz); 85,73 (d, 7 = 8,6 Hz);

- 22 CZ 34625 UI

72,26 (d, J = 6,6 Hz); 64,58 (d, J = 170,1 Hz); 26,53 - 22,24 (m). ¹⁹F NMR (377 MHz, Chloroform-d) δ -120,75 (d, J= 4,3 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-d) δ 18,12. MS (ESI) m/z = 417,0 [M + H]⁺ (vypočteno 417,0).

Příklad 34

Diisopropyl-((2-jod-6-methoxyfenoxy)methyl)fosfonát L33

2-Jod-6-methoxyfenol (1 g; 4,0 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (20 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na 0 °C, poté byl přidán hydrid sodný (200 mg, 60% olejová disperze; 5,0 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána 15 minut při 0 °C. Poté byl přidán TfOCH2P(O)(Oz-Pr)2 (1,64 g; 5,0 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána při 0 °C dalších 15 minut. Reakce byla ukončena přídavkem zředěného vodného roztoku NH4CI a extrahována ethylacetátem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (3x), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 20 % C) s výtěžkem 1,7 g (99 %) bezbarvého oleje diisopropyl-((2-jod-6-methoxyfenoxy)-methyl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-7) δ 7,33 (dd, J= 7,9, 1,5 Hz, 1H); 6,87 (dd,7= 8,2, 1,6Hz, 1H); 6,80 (t, 7= 8,0 Hz, 1H); 5,00 - 4,82 (m, 2H); 4,31 (d, 7 = 9,7 Hz, 2H); 3,83 (s, 3H); 1,41 (d, 7= 6,2 Hz, 12H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 152,56; 147,76 (d, 7= 14,8 Hz); 130,87; 126,59; 112,90; 91,80; 72,17 (d,7= 6,6 Hz); 66,10 (d,7= 166,6 Hz); 55,97; 26,07 - 22,47 (m). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-7) δ 19,60. MS (ESI) m/z = 429,2 [M + H]⁺ (vypočteno 429,0).

Příklad 35

Diethyl-(/:')-(2-(2-jodthiofcn-3-yl)vinyl)fosfonát L34

Tetraethyl-methylendifosfonát (597 μΐ; 2,4 mmol; 1,2 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (4 ml) pod argonovou atmosférou, pak byl přidán terc-butoxid draselný (269 mg; 2,4 mmol; 1,2 ekv.). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a následně byl přidán roztok 2-jodthiofen-3-karbaldehydu (478 mg; 2,0 mmol; 1 ekv.) v suchém tetrahydrofuranu (1 ml). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti a reakce byla ukončena přídavkem 1 mol I¹ HC1 (aq.), extrahována dichlormethanem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCfi, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 40 % C) se ziskem 596 mg (80 %) čirého oleje diethyl-(£)-(2-(2-jodthiofen-3-yl)vinyl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 7,82 (dd, 7= 5,6, 0,8 Hz, 1H); 7,45 (d, 7= 5,6 Hz, 1H); 7,15 (dd, 7= 22,4, 17,1 Hz, 1H); 6,51 (dd, 7 = 18,1, 17,3 Hz, 1H); 4,02 (q, 7 = 7,1 Hz, 4H); 1,26 (t, 7=7,0 Hz, 6H). ¹³CNMR(101 MHz. DMSO-7,) δ 141,41 (d, 7= 7,3 Hz); 140,87 (d, 7= 24,7 Hz); 132,75; 125,90; 116,75 (d,7= 185,7 Hz); 86,01; 61,35 (d, 7= 5,4 Hz); 16,25 (d, 7= 6,0 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, DMSO-7,) δ 21,59. MS (ESI) m/z = 373.1 [M + H]⁺ (vypočteno 372,9).

- 23 CZ 34625 UI

Příklad 36

Diisopropyl-(((thiofen-3-yl)oxy)methyl)fosfonát L35 (Thiofen-3-yl)boronová kyselina (10 g; 78,2 mmol; 1 ekv.) byla rozpuštěna v diethyletheru (190 ml). Roztok byl míchán při teplotě místnosti a k roztoku byl přikapán vodný roztok peroxidu vodíku (54 ml, 10% roztok). Směs byla zahřívána 1 hodinu při 40 °C a poté byla ochlazena na teplotu místnosti. Směs byla extrahována diethyletherem (3x), promyta vodným roztokem Mohrovy soli (3x, 10% roztok), promyta solankou (Ix), sušena síranem hořečnatým a zfiltrována. Rozpouštědla byla odpařena při 40 °C a 90 kPa a zbytek byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (78 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na 0 °C, byl přidán hydrid sodný (3,9 g 60 % olejové disperze; 97,7 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána 30 minut při 0 °C. Poté byl přidán TfOCH2P(O)(O/-Pr)2 (32 g; 97,7 mmol; 1,25 ekv.) a směs byla míchána při 0 °C další 1 hodinu. Reakce byla ukončena přidáním vodného roztoku NH4CI a extrahována ethylacetátem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (3x), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 20 % C) s výtěžkem 10,5 g (48%) černého oleje diisopropyl(((thiofen-3-yl)oxy)methyl)-fosfonátu.

¹HNMR(401 MHz, Chloroform-7) δ 7,16 (dd, J= 5,3, 3,1 Hz, 1H); 6,78 (dd,7=5,3, 1,6Hz, 1H); 6,35 (dd, 7=3,2, 1,6 Hz, 1H); 4,95 - 4,66 (m, 2H); 4,22 (d, 7 = 9,9 Hz, 2H); 1,40 - 1,28 (m, 12H). ¹³C NMR (101 MHZ, Chloroform-7) δ 157,77 (d, 7= 15,5 Hz); 125,21; 119,39; 98,69; 71,93 (d, 7= 6,7 Hz); 64,89 (d, 7= 171,2 Hz); 24,12 (m). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-7) δ 19,40. MS (ESI) m/z = 279,1 [M + H]⁺ (vypočteno 279,1).

Příklad 37

Diisopropyl-(((2-jodthiofen-3-yl)oxy)methyl)fosfonát L36 „ X?

Diisopropyl-(((thiofen-3-yl)oxy)methyl)fosfonát (557 mg; 2,0 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v absolutním ethanolu (10 ml) a ke směsi byl přidán /V-jodsukcinimid (450 mg; 2,0 mol; 1 ekv.). Směs byla míchána 1 hodinu při teplotě místnosti. Poté byla naředěna vodou, extrahována ethylacetátem (3x), promyta solankou (Ix), sušena síranem horečnatým a zfiltrována. Směs byla odpařena do sucha, pevný podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 40 % C) se ziskem 770 mg (95 %) čirého oleje diethyl-(((2-jodthiofen-3-yl)oxy)methyl)fosfonátu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 7,73 (d, 7= 5,8 Hz, 1H); 6,99 (d, 7 = 5,8 Hz, 1H); 4,77 - 4,61 (m, 2H); 4,42 (d,7= 9,1 Hz, 2H); 1,30 - 1,26 (m, 12H). ¹³CNMR(101 MHz, DMSO-7,) δ 159,16 (d, 7= 13,0 Hz); 131,12; 117,99; 99,79; 71,28 (d, 7 = 6,5 Hz); 65,77 (d, 7= 165,0 Hz); 24,34 (m).³¹P NMR (162 MHz, DMSO-7,) δ 19,29. MS (ESI) m/z = 405,1 [M + H]⁺ (vypočteno 405,0).

- 24 CZ 34625 UI

Příklad 38 (£)-7-((2-(2-(Fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ď]pyrimidin-4-on sodný

L37

Látka L4 (500 mg; 1,29 mmol; 1 ekv.), jodid měďný (25 mg; 0,1290 mmol; 0,1 ekv.) a uhličitan česný (505 mg; 1,55 mmol; 1,2 ekv.) byly dány do mikrovlnné kyvety a kyveta byla naplněna argonem. Do kyvety byly poté postupně přidány suchý toluen (5 ml), diethyl-(E)-(2-jodstyryl)fosfonát L7 (559 mg, 1,33 mmol; 1,1 ekv.) a 2-isobutyrylcyklohexanon (43 μΐ; 0,2580 mmol; 0,2 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 2 hodiny pň 120 °C. Směs byla rozpuštěna v chloroformu, promyta z nasyceným nasyceným vodným roztokem NaHCO3 ředěným na polovinu (2x), 1 mol l¹ HC1 (aq.), solankou (3x), sušena MgSCL zfiltrována a odpařena do sucha. Zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 15 % C) se ziskem 800 mg (99 %) produktu jako čirého oleje. Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace.

Meziprodukt (680 mg) byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2ml/100mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2ml/100mg výchozího materiálu. Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 15 % A) se ziskem 250 mg (48 %) diisopropylfosfonátu jako bílé pevné látky. Baňka byla naplněna diethylfosfonátem (100 mg), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylammoného (2 mol l¹) a směs byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl8, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfíltrovány přes krátký sloupec Dowexu® 50 v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofílizován z vody se ziskem 86 mg (89 %) bílého lyofílizátu produktu.

Ή NMR (400 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,04 (d, J = 3,0 Hz, 1H); 7,81 (d, J = 2,9 Hz, 1H); 7,79 - 7,66 (m, 1H); 7,62 (dd, 7=7,7, 2,7 Hz, 1H); 7,14 (dtd, J = 38,7, 7,5, 2,7 Hz, 2H); 6,89 (dd, J = 7,9, 2,9 Hz, 1H); 6,51 (td, J = 16,8, 3,0 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,17; 147,22; 144,45; 138,59 (d,J = 6,1 Hz); 138,22; 136,89; 135,91 (d, J= 21,3 Hz); 130,63; 128,22 (d, J= 112,1 Hz); 128,02 (d, J= 10,9 Hz); 126,22; 119,69; 104,05.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 13101. MS (ESI) m/z = 350,2 [M + H]⁺ (vypočteno 350,3) pro volnou kyselinu.

- 25 CZ 34625 UI

Příklad 39

7-((2-((Fosfonato)mcthoxy)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L38

Látka L4 (500 mg; 1,29 mmol: 1 ekv.), jodid měďný (25 mg; 0,1290 mmol; 0,1 ekv.) a uhličitan česný (505 mg; 1,55 mmol; 1,2 ekv.) byly dány do mikrovlnné kyvety a kyveta byla naplněna argonem. Do kyvety byly poté postupně přidány suchý toluen (5 ml), diisopropyl-((2-jodfenoxy)methyl)fosfonát L8 (565 mg, 1,33 mmol; 1,1 ekv.) a 2-isobutyrylcyklohexanon (43 μΐ; 0,2580 mmol; 0,2 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 2 hodiny při 120 °C. Směs byla rozpuštěna v chloroformu, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCCL zředěným na poloviční koncentraci (2x), 1 mol l¹ MCI (aq.), solankou (3x), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 15 % C) se ziskem 700 mg (81 %) produktu jako čirého oleje. Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace.

Meziprodukt (680 mg) byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2ml/100mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu). Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 15 % A) se ziskem 320 mg (71 %) diisopropyl-fosfonátu jako bílé pevné látky. Baňka byla naplněna diethyl-fosfonátem (100 mg), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (lOml/lmmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylammoného (2 mol l¹) a směs byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (C18, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfíltrovány přes krátký sloupec Dowexu® 50 v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofílizován z vody se ziskem 72 mg (79 %) bílého lyofílizátu produktu.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,03 (s, 1H); 7,82 (s, 1H); 7,17 (ddd, J = 8,7, 7,2, 1,6 Hz, 1H); 7,11 (dd, J = 8,4, 1,3 Hz, 1H); 6,76 (td, J = 7,5, 1,3 Hz, 1H); 6,65 (dd, 7=7,8, 1,6 Hz, 1H); 4,23 (d, 7= 9,8 Hz, 2H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,66 (d, 7= 13,2 Hz); 156,53; 147,59; 144,48; 137,34; 128,30; 128,04; 127,66; 123,21; 119,81; 113,62; 102,97; 66,53 (d, 7= 156,8 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 16,07. MS (ESI) m/z = 354,1 [M + H]⁺ (vypočteno 354,3) pro volnou kyselinu.

Obecná syntéza pro látky L40-56 (S3)

Látka L4 (100 mg; 0,2580 mmol; 1 ekv.) a jodid měďný (5 mg; 0,0258 mmol; 0,1 ekv.) byly dány do mikrovlnné kyvety a kyveta byla naplněna argonem. Do kyvety byly poté postupně přidány suchý dimethylformamid (2 ml), odpovídající aryljodid (0,3096 mmol; 1,2 ekv.), triethylamin (54 μΐ; 0,3870 mmol; 1,5 ekv.) a 2-isobutyrylcyklohexanon (9 μΐ; 0,0516 mmol; 0,2 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 2 až 3 hodiny při 120 °C. Směs byla rozpuštěna

-26CZ 34625 UI v chloroformu, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCCf zředěným na poloviční koncentraci (2x), 1 mol I¹ HC1 (aq.), solankou (3x), sušena MgSCfi, zfiltrována a odpařena do sucha. Zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 30 % C). Meziprodukt kroku 1 byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace.

Meziprodukt byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu. Směs byla odpařena do sucha a baňka byla uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylammoného (2 mol l¹), malém množství methanolu a směs byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody (rozpustnost lze vylepšit přidáním malého množství vodného amoniaku) a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl8, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfíltrovány přes krátký sloupec Dowexu® 50 v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofílizován z vody.

Příklad 40 (/'.')-7-((4-Brom-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L39

Obecná metoda S3 z 300 mg látky L4 a diethyl-(£)-(5-brom-2-jodstyryl)fosfonátu Lil (414 mg) poskytla 216 mg (40 %) meziproduktu kroku 1 a 71 mg (49 %) bílého lyofilizátu látky L40.

ΉNMR(401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,14 (d,7=2,2 Hz, 1H); 8,03 (d,7= 1,5 Hz, 1H); 7,81 (d, 7=2,2 Hz, 1H); 7,67 (d,7 = 13,6 Hz, 1H); 7,51 (dd,7= 18,5, 17,2 Hz, 1H); 7,23 (ddd,7= 12,3, 8,5, 2,2 Hz, 1H); 7,10 (dd, 7 = 39,2, 14,2 Hz, 1H); 6,70 (dd, 7 = 31,4, 8,5 Hz, 1H); 6,55 (dd, 7 = 17,2, 13,4 Hz, 1H); 6,21 (dd,7= 14,2, 10,8 Hz, 1H). ¹³CNMR(101 MHz, Deuterium Oxid) δ 165,68; 152,68; 149,36 (d, 7 = 6,1 Hz); 139,42; 139,36; 139,17; 138.82; 138,26 (d, 7= 19,6 Hz); 137,96 (d, 7 =7,7 Hz); 132,11; 131,69; 129,34; 127,85; 124,47; 124,40; 119,70; 118,64; 98,08; 97,84.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,23. MS (ESI) m/z = 428,1 [M + H]⁺ (vypočteno 427,9) pro volnou kyselinu.

- TJ CZ 34625 UI

Příklad 41 (£)-7-((5-Brom-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7/]pyrimidin-4-on sodný L40

Obecná metoda S3 z 300 mg látky 1,4 a diethyl-(£)-(4-brom-2-jodstyryl)fosfonátu L14 (414 mg) poskytla 184 mg (34 %) meziproduktu kroku 1 a 60 mg (49 %) bílého lyofilizátu látky L41.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,05 (s, 1H); 7,70 (s, 1H); 7,54 (d, J= 8,1 Hz, 1H); 7,50 (dd, 7= 18,0 Hz, 1H); 7,33 (dd, 7= 8,5, 2,0 Hz, 1H); 6,89 (d, 7 = 2,0 Hz, 1H); 6,55 (dd,7= 17,2, 13,7 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 165,78; 152,87; 149,40; 142,40; 139,37; 135,28 (d, 7 =20,1 Hz); 133,99 (d,7=6,l Hz); 132,38 (d,7= 167,3 Hz); 129,48; 129,16; 124,57; 123,18; 97,51. ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,59. MS (ESI) m/z = 428,1 [M + H]⁺ (vypočteno 427,9) pro volnou kyselinu.

Příklad 42 (£)-7-((5 -Hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4H-pyrrolo [3.2-ó/|pyrimidin-4-

-on sodný L41

Obecná metoda S3 z 200 mg látky L4 a diethyl-(£)-(4-hydroxy-2-jodstyryl)fosfonátu L17 (198 mg) poskytla 100 mg (30 %) meziproduktu kroku 1 a 15 mg (23 %) bílého lyofilizátu látky L42.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,10 (s, 1H); 7,76 (s, 1H); 7,56 (dd, 7= 19,0, 17,3 Hz, 1H); 7,44 (d, 7 = 8,6 Hz, 1H); 6,45 (ddd, 7= 8,6, 2,6, 0,6 Hz, 1H); 6,25 (dd, 7= 17,2, 14,3 Hz, 1H); 6,24 (d, 7=2,6 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 166,50; 163,91; 152,70; 148,30; 139,05; 135,09 (d, 7 = 4,3 Hz); 128,81; 125,70 (d, 7= 171,5 Hz); 124,18 (d, 7= 20,2 Hz); 120,97; 117,99; 117,66; 102,13.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 16,37. MS (ESI) m/z = 366,1 [M + H]⁺ (vypočteno 366,0) pro volnou kyselinu.

-28CZ 34625 UI

Příklad 43 (£)-7-((4-Hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-4-

-on sodný L42

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(5-hydroxy-2-jodstyryl)fosfonátem L20 (99 mg) poskytla 120 mg (73 %) meziproduktu kroku 1 a 44 mg (53 %) lyofilizátu látky L43.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,06 (s, IH); 7,83 (s, 1H); 7,71 (t, J= 18,1 Hz, 1H); 7,10 (d, 7= 2,7 Hz, IH); 7,08 (d, 7= 8,7 Hz, IH); 6,65 (dd,7=8,6, 2,7 Hz, IH); 6,47 (dd,7=17,3, 14,1 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,75; 156,69; 147,08; 144,66; 139,97 (d, 7 = 20,3 Hz); 136,55; 136,21; 133,44; 131,15 (d, 7= 169,1 Hz); 127,81; 119,43; 117,82; 114,33; 106,50.³¹PNMR(162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,90. MS (ESI) m/z = 366,0 [M + H]⁺ (vypočteno 366,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 44 (£)-7-((4-Methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-

-on sodný L43

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(2-jod-5-methoxystyryl)fosfonátem L25 (123 mg) poskytla 160 mg (95 %) meziproduktu kroku 1 a 51 mg (49 %) bílého lyofilizátu látky L44.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,05 (s, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,69 (t,7 = 18,1 Hz, 1H); 7,20 (d, 7 = 2,9 Hz, 1H); 7,01 (d, 7=8,7 Hz, 1H); 6,67 (dd, 7 = 8,8. 2,8 Hz, 1H); 6,54 (dd, 7= 17,3, 13,9 Hz, 1H); 3,80 (s, 3H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 159,32; 156,86; 147,20; 144,87; 139,47 (d,7= 19,9 Hz); 136,70; 135,78 (d,7=5,9Hz); 132,38; 131,84 (d,7= 168,1 Hz); 129,16; 119,55; 116,30; 112,80; 105,80; 56,89.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,74. MS (ESI) m/z = 380,1 [M + H]⁺ (vypočteno 380,0) pro volnou kyselinu.

-29CZ 34625 UI

Příklad 45 (E)-7-((4-Isopropoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-4-on sodný L44

Obecná metoda S3 s diethyl-(E)-(5-isopropoxy-2-jodstyryl)fosfonátem L26 (131 mg) poskytla 150 mg (85 %) meziproduktu kroku 1 a 38 mg (38 %) bílého lyofilizátu látky L45.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,04 (s, 1H);7,81 (s, 1H); 7,80 (dd, 7=20,2, 17,3 Hz, 1H); 7,15 (d, J = 2,8 Hz, 1H); 7,06 (d, J = 8,7 Hz, 1H); 6,64 (dd, J = 8,8, 2,8 Hz, 1H); 6,48 (dd, J= 17,3, 15,4 Hz. 1H); 4,56 (p, J= 6,1 Hz, 1H); 1,27 (d, J = 6,2 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 157,50; 156,34; 147,06; 144,42; 139,01 (d, J= 21,0 Hz); 138,17 (d, J= 6,4 Hz); 136,61; 133,03; 129,56; 128,57 (d, J= 173,6 Hz); 119,43; 118,67; 115,33; 106,07; 72,99; 22,62. ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 13,70. MS (ESI) m/z = 408,2 [M + H]⁺ (vypočteno 408,1) pro volnou kyselinu.

Příklad 46 (E)-7-((4-(Perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo [3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L45

Obecná metoda S3 s diethyl-(E)-(2-jod-5-((perfluorfenyl)methoxy)styryl)fosfonátem L27 (174 mg) poskytla 147 mg (69 %) meziproduktu kroku 1 a 56 mg (54 %) bílého lyofilizátu látky L46

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,05 (s, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,74 - 7,60 (m, 1H); 7,30 (d, J= 2,8 Hz, 1H); 6,98 (d, J = 8,7 Hz, 1H); 6,69 (dd, 7= 8,8, 2,8 Hz, 1H); 6,55 (dd, 7 = 17,3, 13,7 Hz, 1H); 5,23 (s, 2H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 157,67; 157,18; 147,32; 145,30; 139,47 (d, 7 = 19,8 Hz); 136,76; 135,29 (d, 7= 5,7 Hz); 132,40 (d, 7 = 167,4 Hz); 131,97; 130,71; 119,68; 117,38; 114,08; 105,26; 59,58.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,51. ¹⁹F NMR (377 MHz, Deuterium Oxid) δ -143,07 (dd, 7= 23,0, 8,3 Hz); -153,03 (t, 7= 20,9 Hz);

-162,07 (td, 7= 21,8, 7,9 Hz). MS (ESI) m/z = 546,2 [M + H]⁺ (vypočteno 546,0) pro volnou kyselinu.

-30CZ 34625 UI

Příklad 47 (£)-7-((4-(Perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dibydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L46

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(2-jod-5-((perfluorfenyl)oxy)styryl)fosfonátem L28 (174 mg) poskytla 169 mg (81 %) meziproduktu kroku 1 a 70 mg (58 %) bílého lyofilizátu látky L47.

‘HNMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,04 (s, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,61 (dd, J= 17,9 Hz, 1H); 7,26 (d, J = 2,8 Hz, 1H); 6,89 (d, J= 8,8 Hz, 1H); 6,63 (dd, J = 8,8, 2,9 Hz, 1H); 6,48 (dd, 7= 17,3, 13,6 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 157,01; 147,34; 145,17; 139,43 (d, 7= 20,2 Hz); 136,97; 134,73 (d, 7= 6,2 Hz); 133,14 (d, 7 = 167,1Hz); 132,97; 131,24; 119,78; 116,67; 114,54; 104,52.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,22. ¹⁹F NMR (377 MHz, Deuterium Oxid) δ-155,26 (d, 7= 18,8 Hz);-159,99 (t,7= 22,1 Hz);-162,36 (td, 7 = 23.1,22,0, 5,1 Hz). MS (ESI) m/z = 532,2 [M + H]⁺ (vypočteno 532,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 48 (£)-7-((3 -Hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4//-pyrrolo [3.2-ó/|pyrimidin-4-

- on sodný L47

Obecná metoda S3 (1 h, 100 °C) s diethyl-(£)-(2-hydroxy-6-jodstyryl)fosfonátem 1,24 (99 mg) poskytla 100 mg (60 %) meziproduktu kroku 1 a 10 mg (16 %) bílého lyofilizátu látky L48.

Ή NMR (401 MHz. Deuterium Oxid) δ 8,07 (s, 1H); 7,84 (s, 1H); 7,25 (dd, 7= 20,1, 17,9 Hz, 1H); 6,96 (t, 7=8,1 Hz, 1H); 6,73 (dd,7 =8,1, 1,1 Hz, 1H); 6,58 (dd,7= 17,9, 15,7 Hz, 1H); 6,36 (dd, 7=8,0, 1,1 Hz, 1H). ¹³CNMR(101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,90; 155,60; 147,56; 145,09; 140,08; 137,08; 136,14 (d, 7= 165,9 Hz); 132,47 (d,7 =5,2 Hz); 130,04; 124,52 (d, 7= 19,6 Hz); 119,87; 119,31; 1 14,67; 104,19. ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,72. MS (ESI) m/z = 366,1 [M + H]⁺ (vypočteno 366,0) pro volnou kyselinu.

-31 CZ 34625 UI

Příklad 49 (A')-7-((3-Mctlioxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4H-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-

- on sodný L48

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(2-jod-6-methoxystyryl)fosfonátem L29 (123 mg) poskytla 118 mg (70 %) meziproduktu kroku 1 a 39 mg (51 %) bílého lyofilizátu látky L49.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,07(s, lH);7,87(s, 1H); 7,51 (dd, J= 22,4, 17,8 Hz, 1H); 7,13 (t, 7=8,2 Hz, 1H); 6,92 (d, 7 = 8,3 Hz, 1H); 6,71 (t,7= 17,9 Hz, 1H);6,51 (d,7 = 8,0 Hz, lH);3,90(s, 3H). ¹³CNMR(101 MHz, Deuterium Oxid) δ 159,29; 156,21; 147,44; 144,51; 140,42; 137,02; 134,98 (d, 7= 5,9 Hz); 131,39 (d, 7= 173,0 Hz); 130,61; 124,35 (d, 7= 20,9 Hz); 120,41; 119,79; 110,27; 104,33; 57,15. ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 13,13. MS (ESI) m/z = 380,1 [M + H]⁺ (vypočteno 380,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 50 (£)-7-((3-Isopropoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-

- 4-on sodný L49

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(6-isopropoxy-2-jodstyryl)fosfonátem L30 (131 mg) poskytla 160 mg (91 %) meziproduktu kroku 1 a 34 mg (32 %) bílého lyofilizátu látky L30.

Ή NMR (500 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,04 (s, 1H); 7,79 (s, 1H); 7,48 (dd, 7= 22,6, 17,8 Hz, 1H); 7,05 (t, 7= 8,2 Hz, 1H); 6,91 (d, 7 =8,2 Hz, 1H); 6,70 (dd, 7 = 18,1 Hz, 1H); 6,49 (d, 7= 8,1 Hz, 1H); 4,68 - 4,58 (m, 1H); 1,35 (d, 7= 6,1 Hz, 6H). ¹³C NMR (126 MHz, Deuterium Oxid) δ 157,30; 156,62; 147,37; 144,61; 140,39; 137,05; 136,18 (d, 7 = 6,3 Hz); 130,71 (d, 7= 173,7 Hz); 130,49; 129,71; 126,52 (d, 7 = 19,2 Hz); 121,04; 119,85; 115,00; 104,21; 74,90; 22,67.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 13,16. MS (ESI) m/z = 408,2 [M + H]⁺ (vypočteno 408,1) pro volnou kyselinu.

-32CZ 34625 UI

Příklad 51 (£)-7-((3-(Perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-on sodný L50

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(2-jod-6-((perfluorfenyl)methoxy)styryl)fosfonátem L31 (174 mg) poskytla 125 mg (59 %) meziproduktu kroku 1 a 54 mg (60 %) bílého lyofilizátu látky L51

Ή NMR (500 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,45 (s, 1H); 8,19 (s, 1H); 7,90 (dd, 7= 22,4, 17,8 Hz, 1H); 7,48 (t, 7 = 8,1 Hz, 1H); 7,34 (d, 7 = 8,1 Hz, 1H); 7,03 (t, 7 = 17,8 Hz, 1H); 6,99 (d, 7 = 7,9 Hz, 2H); 5,69 (s, 2H). ¹³C NMR (126 MHz, Deuterium Oxid) δ 157.65; 156.44; 148.05; 147.53; 146.06; 144.48; 141.04; 139.94 (t, 7= 16.9 Hz); 136.74; 135.20 (d, 7 = 6.2 Hz); 131.58 (d,7= 172.3 Hz); 130.14; 126.41 (d,7= 23.9Hz); 122.24; 120.00; 112.92; 111.56 (t,7= 18.1 Hz); 105.02; 60.24. ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 14,84. MS (ESI) m/z = 546,2 [M + H]⁺ (vypočteno 546.0) pro volnou kyselinu.

Příklad 52 (£)-7-((3-(Perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L51

Obecná metoda S3 s diethyl-(£)-(2-jod-6-((perfluorfenyl)methoxy)styryl)fosfonátem L32 (174 mg) poskytla 125 mg (59 %) meziproduktu kroku 1 a 54 mg (60 %) bílého lyofilizátu látky L52 ^bH NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,07 (s, 1H); 7,83 (s, 1H); 7,37 (dd, 7= 20,0, 17,8 Hz, 1H); 6,93 (t, 7 = 8,2 Hz, 1H); 6,75 (dd, 7= 17,8, 14,8 Hz, 1H); 6,59 (d, 7= 8,2 Hz, 1H); 6,55 (d, 7= 8.0 Hz, 1H). ¹³CNMR(101 MHz, Deuterium Oxid) δ 157.28; 156.29; 147.62; 145.55; 141.44; 137.79 (d,7 = 165.0 Hz); 137.15; 130.50; 129.77; 126.13 (d,7= 19.3 Hz); 122.81; 120.04; 1 12.13; 103.44.³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,29. ¹⁹F NMR (377 MHz, Deuterium Oxid) δ 155,40 (d, 7=21,0 Hz); -160,34 (t, 7= 22,2 Hz); -162,54 (t, 7=21,5 Hz). MS (ESI) m/z = 532,2 [M + H]⁺ (vypočteno 532,0) pro volnou kyselinu.

-33 CZ 34625 UI

Příklad 53 (E)-7-((5-Fluor-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný L52

Obecná metoda S3 s diisopropyl-((4-fluor-2-jodfenoxy)methyl)fosfonátem L33 (129 mg) poskytla 105 mg (63 %) meziproduktu kroku 1 a 21 mg (32 %) bílého lyofilizátu látky L53.

'HNMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,07 (s, 1H); 7,86 (s, 1H); 7,10 (dd, J = 9,1, 4,5 Hz, 1H); 6,89 (td, J = 8,7, 3,0 Hz, 1H); 6,31 (dd, J = 9,1,3,0 Hz, 1H); 4,16 (d, J= 9,6 Hz, 2H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 158,59 (d, J= 239,1 Hz); 156,30; 152,89 (d, J= 13,0 Hz); 147,44; 144,63; 137,23; 130,18 (d, J = 7,8 Hz); 116,96; 114,57 (d, J= 8,5 Hz); 113,87 (d, J= 26,4 Hz); 113,62 (d, J = 23,3 Hz); 102,18; 67,67 (d, J = 154,7 Hz). ¹⁹F NMR (377 MHz, Deuterium Oxid) δ -122,28 (d, J = 5,4 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 15,10. MS (ESI) m/z = 372,2 [M + H]⁺ (vypočteno 372,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 54 (E)-7-((3 -Methoxy-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4//-py rrolo [3,2-ó/| py ri m idi n-4-on sodný L53

Obecná metoda S3 s diisopropyl-((2-jod-6-methoxyfenoxy)methyl)fosfonátem L34 (133 mg) poskytla 114 mg (64 %) meziproduktu kroku 1 a 32 mg (46 %) bílého lyofilizátu látky L54.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 7,99 (s, 1H); 7,63 (s, 1H); 6,92 (t, J= 8,0 Hz, 1H); 6,87 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H); 6,25 (dd, J= 7,8, 1,7 Hz, 1H); 4,11 (d, J = 9,5 Hz, 2H); 3,92 (s, 3H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 166,33; 153,30; 152,04; 150,15; 145,13 (d; J= 13,6 Hz); 141,85; 136,73; 126,36; 126,14; 119,40; 110,71; 95,72; 72,23 (d, J = 145,9 Hz); 57,38. ³¹PNMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 14,84. MS (ESI) m/z = 383,2 [M + H]⁺ (vypočteno 383,0) pro volnou kyselinu.

-34CZ 34625 UI

Příklad 55 (£)-7-((3-(2-(Fosfonáto)vinyl)thiofen-2-yl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-4-on sodný L54

Obecná metoda S3 s diethyl-(E)-(2-(2-jodthiofen-3-yl)vinyl)fosfonátem L35 (115 mg) poskytla 118 mg (72 %) meziproduktu kroku 1 a 25 mg (33 %) bílého lyofilizátu látky L55.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,15 (d, J= 1,3 Hz, 1H); 7,91 (d, J= 1,4Hz, 1H); 6,75 (ddd, J = 17,7, 15,3, 1,3 Hz, 2H); 6,73 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 6,51 (d, 7=3,3 Hz, 1H); 6,33 (ddd, 7 = 17,6, 13,9, 1,5 Hz, 1H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,61 (d, 7=23,1 Hz); 156,61; 146,41; 146,33; 144,95; 135,41; 127,49 (d; 7= 178,2 Hz); 126,67; 119,23; 118,98; 112,94; 105,47.³¹PNMR(162 MHz, Deuterium Oxid) δ 12,43. MS (ESI) m/z = 356,2 [M + H]⁺ (vypočteno 356,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 56

7-((3-((Fosfonáto)methoxy)thiofen-2-yl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-4-on sodný L55

Obecná metoda S3 s diethyl-(((2-jodthiofen-3-yl)oxy)methyl)fosfonátem L37 (125 mg) poskytla 133 mg (75 %) meziproduktu kroku 1 a 28 mg (35 %) bílého lyofilizátu látky L56.

Ή NMR (401 MHz, Deuterium Oxide) δ 8,14 (s, 1H); 8,04 (d, 7=0,7Hz, 1H); 7,40 (dd, 7= 5,8, 0,7 Hz, 1H); 7.06 (d, 7 = 5,8 Hz. 1H); 4,13 (d, 7= 9,5 Hz, 2H). ¹³C NMR (101 MHz, Deuterium Oxide) δ 160,87 (d,7= 13,1 Hz); 144,58; 136,19; 128,90; 119,01; 118,65; 110,74; 108,71; 70,84 (d, 7= 151,8 Hz).³³P NMR (162 MHz, Deuterium Oxide) δ 14,30. MS (ESI) m/z = 360,1 [M + H]⁺ (vypočteno 360,0) pro volnou kyselinu.

-35CZ 34625 UI

Příklad 57

7-((2-((Sulfo)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-7]pyrimidin-4-on sodný L56

Látka L6 (100 mg; 0,2085 mmol; 1 ekv.) byla rozpuštěna v suchém dimethylformamidu (2 ml) v mikrovlnné kyvetě pod argonovou atmosférou. Hydrid sodný (8 mg 60% disperze v oleji; 0,2085 mmol; 1 ekv.) byl přidán při 0 °C a směs byla míchána při teplotě místnosti 30 minut.

Jodmethansulfonát sodný (102 mg; 0,4170 mmol; 2 ekv.), připravený podle literatury [Gao, F. et al., Bioorganic Med. Chem. Lett. 2008, 18 (20), 5518-5522], byl přidán ke směsi a reakce byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 15 minut při 150 °C. Směs byla naředěna vodou, zneutralizována 1 mol I¹ HC1 (aq.) a odpařena do sucha.

Pevný podíl byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) při teplotě místnosti a směs byla míchána 15 minut. Poté byla směs odpařena do sucha, kodestilována vodou (2x) a přidán byl studený roztok amoniaku v ethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu). Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl 8, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfiltrovány přes krátký sloupec Dowexu® v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofilizován z vody se ziskem 16 mg (21 %) bílého lyofilizátu produktu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 7,83 (s, 1H); 7,70 (s, 1H); 7,21 (dd, J = 8,3, 1,2 Hz, 1H); 7,04 6,91 (m, 1H); 6,71 (td, 7=7,6, 1,2 Hz, 1H); 6,47 (dd, 7= 7,8, 1,6 Hz, 1H); 4,61 (s, 3H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-7,) δ 154,13; 153,66; 146,05; 142,65; 133,88; 127,90; 125,29; 125,18; 121,42; 119,22; 113,55; 101,28; 79,90. MS (ESI) m/z = 354,2 [M + H]⁺ (vypočteno 354,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 58 (/'.')-7-((2-(2-(Sulfo)vinyl)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L57

Látka L4 (100 mg; 0,2580 mmol; 1 ekv.) a jodid měďný (5 mg; 0,0258 mmol; 0,1 ekv.) byly vloženy do mikrovlnné kyvety a ta byla naplněna argonem. Do kyvety byly poté postupně přidány suchý toluen (5 ml), cthyl-(Á')-2-(2-jodfcnyl)cthcn-l-siilfonát (105 mg, 0,3096 mmol; 1,2 ekv.), triethylamin (54 μΐ; 0,3870 mmol; 1,5 ekv.) a 2-isobutyrylcyklohexanon (9 μΐ; 0,0516 mmol; 0,2 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 2 hodiny při 120 C. Směs byla rozpuštěna v chloroformu, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCCf, zředěným na poloviční

-36CZ 34625 UI koncentraci (2x), 1 mol I¹ HC1 (aq.), solankou (3x), sušena MgSCE, zfiltrována a odpařena do sucha. Pevný podíl byl použit v dalším kroku bez dalšího čištění a charakterizace (MS (ESI) m/z = 598,2 [M + H]⁺).

Pevný podíl byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 2 hodiny při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2 ml 100 mg výchozího materiálu). Směs byla odpařena do sucha a zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomoci HPLC (C18, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfiltrovány přes krátký sloupec Dowexu® v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofilizován z vody se ziskem 26 mg (27 %) bílého lyofilizátu produktu.

‘HNMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 12,68 (s, IH); 12,09 (s, IH); 7,84 (s, IH); 7,74 (s, IH); 7,52 (dd, 7=5,7, 3,5 Hz, IH); 7,47 (d, 7= 15,5 Hz, IH); 7,08 (t, 7=3,3 Hz, IH); 7,06 (t, 7= 3,3 Hz, IH); 6,82 (d, 7 = 15,4 Hz, IH); 6,77 (dd, 7 = 5,9, 3,4 Hz, IH). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-7,) δ 153,61; 145,74; 142,88; 138,00; 136,36; 133,82; 132,25; 128,59; 126,60; 126,53; 126,24; 125,23; 119,22; 101,77. MS (ESI) m/z = 350,2 [M + H]⁺ (vypočteno 350,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 59

2-Jodbenzyl bromid L58

2-Jodbenzyl alkohol (3 g; 12,8 mmol; 1 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (30 ml) a baňka byla zapuštěna argonem. K roztoku byl přidán bromid fosforitý (1,8 ml; 19,2 mmol; 1,5 ekv.) a směs byla míchána při teplotě místnosti přes noc. Reakce byla ukončena přidáním silikagelu a rozpouštědla byla odpařena. Separace pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 20 % C) poskytla 3,7 g (97 %) 2-jodbenzyl bromidu jako bílého prášku.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ď) δ 7,86 (dd, 7= 7,9, 1,2 Hz, IH); 7,48 (dd, 7 = 7,7, 1,7 Hz, IH); 7,34 (td,7= 7,5, 1.3 Hz, IH); 6,98 (td, 7=7,8, 1,7 Hz, IH); 4,60 (s, 2H). ¹³CNMR(101 MHz, Chloroform-7) δ 140,33; 140,22; 130,63; 130,22; 129.02; 100,19; 38,91. MS (ESI) m/z = 275,9 [M + H - HBr + ACN + H₂O]⁺ (vypočteno 276,0).

Příklad 60

Diisopropyl-(2-jodbenzyl) fosfonát L59

-37CZ 34625 UI

2-Jodbenzyl bromid (3g; 10,1 mmol; 1 ekv.) byl navážen do mikrovlnné kyvety a kyveta byla zapuštěna argonem. Poté byl postupně přidán suchý toluen (20 ml) a triisopropylfosfit (3 ml; 11,1 mmol; 1,1 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 1 hodinu při 160 °C. Směs byla odpařena a olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 40 % C) se ziskem 3,4 g (88 %) diisopropyl-(2-jodbenzyl) fosfonátu jako čirého oleje.

Ή NMR (401 MHz, Chloroform-ri) δ 7,83 (dd, 7= 7,9, 1,2 Hz, 1H); 7,50 (ddd, 7= 7,7, 2,8, 1,7 Hz, 1H); 7,29 (dt, 7=7,6, 1,1 Hz, 1H); 6,91 (dt, 7= 7,9, 2,0 Hz, 1H); 4,82 - 4,33 (m, 2H); 3,36 (d, 7 = 22,0 Hz, 2H); 1,29 (d, 7 = 6,2 Hz, 6H); 1,18 (d, 7 =6,2 Hz, 6H). ¹³C NMR (101 MHz, Chloroform-7) δ 139,75 (d, 7= 2,9 Hz); 135,95 (d, 7=8,2 Hz); 130,79 (d, 7= 5,1 Hz); 128,57 (d, 7 = 3,6 Hz); 128,37 (d, 7= 3,1 Hz); 101,87 (d, 7 = 9,6 Hz); 70,97 (d, 7= 6,7 Hz); 39,47 (d, 7= 140,0 Hz); 24,83 - 23,34 (m). ³¹P NMR (162 MHz, Chloroform-r/) δ 26,23. MS (ESI) m/z = 383,0 [M + H]⁺ (vypočteno 383,0).

Příklad 61

7-((2-((Fosfonato)mcthyl)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný L60

Látka L4 (500 mg; 1,29 mmol; 1 ekv.), jodid měďný (25 mg; 0,1290 mmol; 0,1 ekv.), 1,10-fenantrolin (46 mg; 0,2580 mmol; 0,2 ekv.) a uhličitan česný (505 mg; 1,55 mmol; 1,2 ekv.) byly dány do mikrovlnné kyvety a ta byla zapuštěna argonem. Do kyvety byl poté postupně přidán suchý toluen (5 ml) a diisopropyl-(2-jodbenzyl)fosfonát L60 (596 mg, 1,6 mmol; 1,2 ekv.) a směs byla zahřívána v mikrovlnném reaktoru 2 hodiny při 120 °C. Směs byla rozpuštěna v chloroformu, promyta nasyceným vodným roztokem NaHCCf, zředěným na poloviční koncentraci (2x), 1 mol I¹ HC1 (aq.), solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (B do 20 % C) se ziskem 754 mg (91 %) produktu jako čirého oleje. Produkt byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace (MS (ESI) m/z = 642,2 [M + H]⁺). Meziprodukt (680 mg) byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku vethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu). Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografie na silikagelu (D do 10 % A) se ziskem 208 mg (42 %) diisopropylfosfonátu jako bílé pevné látky, která byla použita v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace (MS (ESI) m/z = 422,3 [M + H]⁺). Baňka byla naplněna diethylfosfonátem (100 mg), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylammoného (2 mol l¹) a směs byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl8, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfíltrovány přes krátký sloupec Dowexu® 50 v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofílizován z vody se ziskem 70 mg (78 %) bílého lyofilizátu produktu.

-38CZ 34625 UI

Ή NMR (400 MHz, Deuterium Oxid) δ 8,01 (d, 7=2,2 Hz, 1H); 7,76 (d, 7= 2,4 Hz, 1H); 7,37 (d, 7 = 7,7 Hz, 1H); 7,08 (t, 7 = 7,6 Hz, 1H); 6,87 (t, 7 = 7,7 Hz, 1H); 6,72 (d, 7= 7,0 Hz, 1H); 3,36 (dd, 7=20,8, 2,2 Hz, 2H). ¹³CNMR(101 MHz, Deuterium Oxid) δ 156,27; 147,02; 144,37; 138,35 (d, 7= 7,2 Hz); 136,79; 134,47 (d, 7= 8,3 Hz); 132,15 (d, 7= 5,1 Hz); 128,38; 127,89; 126,96; 119,57; 104,97; 35,03 (d, 7= 128,6 Hz). MS (ESI) m/z = 337,2 [M + H]⁺ (vypočteno 337,0) pro volnou kyselinu.

Příklad 62

7-((2-(3-Fosfonáto-2-oxapropyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-d]pyrimidin-4-on sodný L61

Látka L5 (100 mg; 0,2026 mmol; 1 ekv.) byla rozpuštěna v suchém tetrahydrofuranu (20 ml) pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na 0 °C, byl přidán hydrid sodný (12 mg 60% olejové disperze; 0,3039 mmol; 1,5 ekv.) a směs byla míchána 15 minut při 0 °C. Poté byl přidán TfOCH2P(O)(O/-Pr)2 (133 mg; 0,4052 mmol; 2 ekv.) a směs byla míchána při 0 °C dalších 15 minut. Reakce byla ukončena přídavkem nasyceného vodného roztoku NH4CI zředěného na poloviční koncentraci a extrahována ethylacetátem (3x). Organická fáze byla promyta solankou (Ix), sušena MgSO4, zfiltrována a odpařena do sucha. Olejový podíl byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 20 % C) s výtěžkem 82 mg (60 %) produktu, který byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace (MS (ESI) m/z 672,2 [M + H]⁺)· Meziprodukt byl rozpuštěn v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu). Odpaření směsi poskytlo surový diisopropylfosfonát, který byl použit v následujícím kroku bez dalšího čištění a charakterizace (MS (ESI) m/z = 482,2 [M + H]⁺)· Baňka byla naplněna diethylfosfonátem (100 mg), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylammoného (2 mol l¹) a směs byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl8, gradient z vody do methanolu). Frakce obsahující produkt byly zfiltrovány přes krátký sloupec Dowexu® 50 v sodném cyklu a rozpouštědla byla odpařena do sucha. Vyčištěný produkt byl lyofilizován z vody se ziskem 6 mg (12 %) bílého lyofilizátu produktu.

Ή NMR (500 MHz, Mcthanol-0/4) δ 8,00 (s, 1H); 7,76 (s, 1H); 7,46 (dd, 7 = 7,6, 1,5 Hz, 1H); 7,16 (td, 7= 7,5, 1,2 Hz, 1H); 7,07 (t, 7= 7,7, 1,5 Hz, 1H); 6,78 (dd, 7= 8,0, 1,0 Hz, 1H); 4,85 (s, 2H); 3,66 (d, 7 = 8,6 Hz, 2H). ¹³C NMR (126 MHz, Mcthanol-0/4) δ 156,19; 147,02; 144,04; 138,53; 136,54; 135,72; 130,54; 129,56; 127,54; 126,53; 119,48; 103,99; 73,42 (d,7= 11,1 Hz); 68,90 (d, 7= 152,7 Hz). ³¹P NMR (162 MHz, Deuterium Oxid) δ 16,23. MS (ESI) m/z = 368,1 [M + H]⁺ (vypočteno 368,0) pro volnou kyselinu.

-39CZ 34625 UI

Příklad 63

7-((2-(((Diisopropoxy)fosforyl)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ď]pyrimidin-4-on L62

Pi 0}

Do baňky byla dána látka L2 (20,0 g; 41,5 mmol; 1,0 ekv.), jodid měďný (7789 mg; 4,15 mmol; 0,1 ekv.) a 1,10-fenantrolin (1,50 g; 8,31 mmol; 0,2 ekv.). Baňka byla uzavřena šeptem, zapuštěna agonem a poté byl přidán suchý toluen (200 ml), triethylamin (8,67 ml; 62,3 mmol; 1,5 ekv.) a 2-merkaptofenol (5,16 ml, 40,9 mmol; 1,2 ekv.) a směs byla zahřívána 2 hodiny při 120 °C. Tmavě hnědá reakční směs byla rozpuštěna v chloroformu a promyta nasyceným roztokem NaHCCC zředěným na poloviční koncentraci (2x), 1 mol I¹ HC1 (aq.) (2x), solankou a sušena byla MgSOr. Rozpouštědla byla odpařena a surová směs byla odpařena z toluenu (2x) a poté byla rozpuštěna v suchém dimethylformamidu pod argonovou atmosférou. Směs byla zahřáta na 60 °C a přidány byly TsOCH2P(O)(Oz-Pr)2 (21,8 g; 62,3 mmol; 1.5 ekv.) a tert-butoxid draselný (7,00 g; 62,3 mmol; 1,5 ekv.). Směs byla zahřívána 1 hodinu při 60 °C a následně byla přidána další dávka TsOCH2P(O)(Oz-Pr)2 (21,8 g; 62,3 mmol; 1,5 ekv.) a tert-butoxidu draselného (7,00 g; 62,3 mmol; 1,5 ekv.). Tento přídavek byl opakován ještě Ix. Reakce byla ochlazena na 0 °C a byla ukončena přídavkem 1 mol I¹ HC1 (aq.), extrahována chloroformem (3x), promyta vodou (2x), solankou (2x), sušena MgSOr, zfiltrována a odpařena do sucha. Směs byla odpařena z toluenu (2x) a poté rozpuštěna v trifluroctové kyselině (200 ml) a směs byla míchána po dobu 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována toluenem (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (100 ml). Směs byla adsorbována na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 10 % A) s výtěžkem 12,3 g (68 %) bílých krystalů produktu.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 12,67 (d, J = 3,2 Hz, 1H); 12,09 (d, J = 3,5 Hz, 1H); 7,82 (d, J = 3,6 Hz, 1H); 7,69 (d, J = 3,2 Hz, 1H); 7,09 (dd, J = 8,2, 1,3 Hz, 1H); 7,03 (ddd, J = 8,2, 7,2, 1,6 Hz, 1H); 6,76 (td, 7=7,5, 1,3 Hz, 1H); 6,48 (dd,7 = 7,8, 1,6 Hz, 1H); 4,86 - 4,72 (m, 2H); 4,43 (d, 7= 9,9 Hz, 2H); 1,40 - 1,27 (m, 12H). ¹³CNMR(101 MHz, DMSO-7,) δ 153,77 (d,7 = 14,1 Hz); 153,64; 145,97; 142,70; 133,90; 127,86; 125,46; 125,35; 121,79; 119,32; 111,73; 100,80; 70,94 (d, 7= 6,4 Hz); 62,49 (d, 7 = 167,0 Hz); 24,73 - 21,20 (m).³¹P NMR (162 MHz, DMSO- d₆) δ 19,70. MS (ESI) m/z = 438,2 [M + H]⁺ (vypočteno 438,1).

-40 CZ 34625 UI

Příklad 64

7-((2-(( Fosfonato)mcthoxy )fcnyl )th io)-3.5 -dihydro-4//-py rrolo 13 ·2-ό/| py ri m idi 11-4-on mono(tetrabutylamonný) L63

Baňka byla naplněna látkou L63 (12,0 g; 27,4 mmol; 1 ekv.), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha a odpařena z toluenu (2x). Zbytek byl rozpuštěn ve vodném roztoku hydrogenuhličitanu triethylamonného (2 mol l¹) a do roztoku byl přidán tetrabutyl-amonium hydroxid (2 ml 1,5 mol l¹ vodného roztoku/1 mmol výchozího materiálu). Roztok byl zfiltrován přes P2 a P4 skleněné filtry a poté byl odpařen do sucha. Zbylý olej byl adsorbován na Cl8 silikagel a směs byla separována pomocí C18 flash chromatografie (E do 50 % A) se ziskem 14,5 g (80 %) bílého prášku.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7,) δ 7,86 (s, 1H); 7,68 (s, 1H); 7,07 (dd, 7= 8,3, 1,2 Hz, 1H); 6,91 (td, 7 = 8,2, 7,8, 1,7 Hz, 1H); 6,59 (td, 7 = 7,5, 1,2 Hz, 1H); 6,47 (dd, 7= 7,7, 1,7 Hz, 1H); 3,92 (d, 7= 9,2 Hz, 2H); 3,43 - 2,86 (m, 8H); 1,73 - 1,41 (m, 8H); 1,28 (h, 7= 7,4 Hz, 8H); 0,90 (t, 7 = 7,3 Hz, 12H). ¹³C NMR (101 MHz, DMSO-7,) δ 155,84 (d, 7 = 9,4 Hz); 154,81; 146,22; 143,25; 134,38; 127,71; 125,51; 125,17; 120,05; 119,42; 111,78; 100,63; 67,56 (d,7 = 151,6Hz); 57,51; 23,08; 19,20; 13,50. ³¹P NMR (162 MHz, DMSO-7,) δ 10,93. MS (volná kyselina) (ESI) m/z = 354,0 [M + H]⁺ (vypočteno 354,0).

Příklad 65

7-((2-(((((S)-l-(Isopropoxykarbonyl)ethyl)amino)(fenoxy)fosforyl)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4//-pyrrolo|3-2-í/|pyrimidin-4-on L64

Baňka byla naplněna látkou L64 (5,00 g; 8,40 mmol; 1 ekv.), L-alaninem isopropylesterem hydrochloridem (2,50 g; 14,9 mmol; 1,77 ekv.) a fenolem (3,49 g; 37,1 mmol; 4,42 ekv.), poté byla uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Následně byl přidán suchý pyridin (40 ml/1 mmol výchozí látky) a triethylamin (12,4 ml; 89,0 mmol; 10,6 ekv.) a směs byla míchána 15 minut při 60 °C. Poté

-41 CZ 34625 UI byl přidán roztok trifenylfosfmu (11,5 g; 44,0 mmol; 5,24 ekv.) a 2,2'-dipyridyl disulfidu (13,6 g; 61,7 mmol; 7,34 ekv.) v suchém pyridinu (20 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla zahřívána přes noc při 60 °C a poté byla rozpouštědla odpařena a pevný podíl byl odpařen z toluenu (Ix). Směs byla adsorbována na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 10 % A) (2x). Produkt byl lyofílizován z dioxanu s výtěžkem 3,52 g (77 %) bílého prášku.

Ή NMR (401 MHz, DMSO-7₆) δ 12,66 (s, 1H); 12,09 (s, 1H); 7,83 (d, J = 1,6 Hz, 1H); 7,69 (d, J= 8,0 Hz, 1H); 7,38 (ddd, J = 9,1, 7,2, 2,0 Hz, 2H); 7,34 - 7,22 (m, 2H); 7,18 (dt, J= 7,7, 3,7 Hz, 1H); 7,09 (dd, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H); 7,04 (td, J = 6,9, 1,1 Hz, 1H); 6,82 - 6,71 (m, 1H); 6,52 (d, J= 7,8 Hz, 1H); 5,88 (dt, 7= 12,4, 10,2 Hz, 1H); 5,01 - 4,68 (m, 1H); 4,68 - 4,32 (m, 2H); 4,32 -3,93(m, lH);3,56(s, 1H); 1,37-1,19 (m, 3H); 1,16-1,04 (m, 6H). ¹³CNMR(101 MHz, DMSOd6) δ 172,95 (dd, 7= 18,3; 3,8 Hz); 153,98 (dd, 7 = 13,3; 2,2 Hz); 153,67; 150,13 (t; 7= 9,6 Hz); 146,00; 142,74; 133,88 (d, 7 = 4,9 Hz); 129,68; 128,00 (d, 7 = 9,4 Hz); 125,64 (d, 7= 6,1 Hz); 125,47; 124,65 (d, 7= 4,5 Hz); 121,88 (d, 7= 7,7 Hz); 120,83 (t; 7= 4,6 Hz); 119,35; 111,92 (d, 7 = 17,0 Hz); 100,96 (d, 7 = 7,4 Hz); 68,01; 65,62 - 61,49 (m); 51,64 - 45,41 (m); 21,73 - 21,04 (m); 20,56 - 19,98 (m). ³¹P NMR (162 MHz, DMSO- d6) δ 23,09; 22,75. MS (ESI) m/z = 543,1 [M + H]⁺ (vypočteno 543,1).

Příklad 66

7erc-butyl-4-(benzyloxy)-7-((2-(((terc-butyl(dimethyl)silyl)oxy)methyl)fenyl)amino)-5/f-pyrrolo [3,2-ó/|py ri m idi n-5 -karboxylát L65

Do baňky byly vloženy 2-(((terc-butyldimethylsilyl)oxy)mcthyl)anilin (1,22 g; 5,14 mmol; 1 ekv.), látka L3 (1,04; 5,14 mmol; 1 ekv.), uhličitan česný (2,5 g; 7,72 mmol; 1,5 ekv.), chlor(2-dicyklohexylfosfino-2',4',6'-triisopropyl-l,r-bifenyl)[2-(2'-amino-l,rbifenyl)]palladium(II) (200 mg; 0,25 mmol; 0,05 ekv.) a (2-dicyklohexylfosfíno-2',4',6'-triisopropyl-l,r-bifenyl)[2-(2'-amino-l,r-bifenyl)] (130 mg; 0,27 mmol; 0,05 ekv.), baňka byla uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Do baňky byl přidán suchý toluen (10 ml) a směs byla zahřívána 16 hodin při 110 °C. Poté byla směs zfíltrována přes křemelinu a promyta ethylacetátem (3x). Rozpouštědla byla odpařena, směs byla adsorbována na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 40 % C) se ziskem 1,14 g (67 %) bílého prášku.

Ή NMR (400 MHz, DMSO-76) δ 8,55 (s, 1H); 7,71 (s, 1H); 7,66 (s, 1H); 7,52 (m, 2H); 7,38 (m, 2H); 7,32 (m, 1H); 7,27-7,23 (m, 2H); 7,20 (m, 1H); 6,84 (td, 7= 7,3, 1,3, 1H); 5,63 (s, 2H); 4,79 (s, 2H); 1,46 (s, 9H); 0,90 (s, 9H); 0,10 (s, 6H). ¹³CNMR(100 MHz, DMSO-76) δ 155,79; 151,26; 148,66; 148,23; 142,05; 136,62; 128,86; 128,51; 128,41; 128,09; 128,02; 127,48; 123,65; 119,58;

114,74; 114,67; 112,38; 84,54; 67,92; 63,98; 27,49; 25,93; 18,10; - 5,11. MS (ESI) m/z = 561,4 [M + H]⁺ (vypočteno 561,3).

-42CZ 34625 UI

Příklad 67

7erc-butyl-4-(benzyloxy)-7-((2-(hydroxymethyl)fenyl)amino)-5H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-5-karboxylát L66

Roztok tetrabutylammonium fluoridu trihydrátu (1,9ml; 1,9 mmol; 1 ekv.; 1 mol T¹ roztok v THF) v suchém tetrahydrofůranu (50 ml) bylpufrován kyselinou octovou (101 μΐ; 1,96 mmol; 1,03 ekv.). Do roztoku byla přidána látka L66 (1,1 g; 1,96 mmol; 1,03 ekv.) a směs byla míchána 16 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědla byla odpařena, směs byla adsorbována na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 80 % C) se ziskem 467 mg (53 %) bílého prášku.

Ή NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 8,56 (s, 1H); 7,72 (s, 1H); 7,57 (bs, 1H); 7,53 (m, 2H); 7,38 (m, 2H); 7,33 (m, 1H); 7,28 - 7,26 (m, 2H); 7,13 (bd, J = 7,4, 1H); 6,82 (m, 1H); 5,67 (s, 2H); 4,81 (s, 1H); 1,53 (s, 9H). ¹³C NMR (400 MHz, CDCh) δ 156,23; 151,13; 148,52; 148,5; 142,77; 136,32; 129,35; 129,20; 128.43; 128,04; 128,02; 127,02; 123,45; 119,57; 115,02; 114,54; 113,03; 84.63; 68,39; 64,40; 27,85. MS (ESI) m/z = 447,0 |M + H]⁺ (vypočteno 447,2).

Příklad 68

7erc-butyl-4-(benzyloxy)-7-((2-formylfenyl)amino)-5H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-5-karboxylát

L67

Látka L67 (400 mg; 0,90 mmol; 1 ekv.) byla rozpuštěna v dichlormethanu (20 ml) a do baňky byl přidán M11O2 (780 mg; 8,9 mmol; 9,9 ekv.). Výsledná suspenze byla míchána 6 hodin při 35 °C. Směs byla zfiltrována přes křemelinu, promyta dichlormethanem (3x) a rozpouštědla byla odpařena. Směs byla adsorbována na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a poté byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (B do 30 % C) se ziskem 142 mg (36 %) směsi dvou rotamerů jako bílého prášku.

Ή NMR (400 MHz, CDCh) δ 10,43 (bs, 1H); 9,97 (s, 1H); 8,67 (s, 1H); 7,89 (s, 1H); 7,62 (dd, J= Ί,Ί, 1,6, 1H); 7,53 (m, 2H); 7,47 (m, 1H); 7,38 (m, 2H); 7,33 (m, 1H); 7,13 (d, J= 8,5, 1H); 6,91 (m, 1H); 5,67 (s, 2H); 1,54 (s,9H). ¹³C NMR (400 MHz, CDCh) δ 194,28; 156,21; 156,20; 152,07; 152,04; 149,67; 149,62; 148,35; 146,65; 136,65; 136,36; 135,76; 128,44; 128,11; 128,06; 121,04; 121,02; 119,92; 119,90; 119,84; 117,68; 113,51; 113,14; 85,08; 85,07; 68,34; 68,32; 27,82. MS (ESI) m/z = 445,1 [M 4 H]⁺ (vypočteno 445,2).

-43 CZ 34625 UI

Příklad 69 (E)-7-((2-(2-(Diethoxyfosforyl)vinyl)fenyl)amino)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ri]pyrimidin-4-on

L68

Tetraethylmethylendifosfonát (152 μΐ; 0,6080 mmol; 1,2 ekv.) byl rozpuštěn v suchém tetrahydrofuranu (8 ml) pod argonovou atmosférou a poté byl přidán íerc-butoxid draselný (68 mg; 0,6080 mmol; 1,2 ekv.). Směs byla míchána 10 minut při teplotě místnosti a poté byl přidán roztok látky L68 (180 mg; 0,4050 mmol; 1 ekv.) v suchém tetrahydrofuranu (7 ml). Směs byla míchána 30 minut při teplotě místnosti a reakce byla ukončena přídavkem nasyceného vodného roztoku NH4CI, extrahována ethylacetátem (3x), promyta solankou (Ix), sušena MgSCL, zfiltrována a odpařena do sucha. Směs byla rozpuštěna v koncentrované trifluoroctové kyselině (2 ml/100 mg výchozího materiálu) a směs byla míchána 15 minut při teplotě místnosti. Trifluoroctová kyselina byla odpařena a kodestilována vodou (2x) a studeným roztokem amoniaku v ethanolu (2 ml/100 mg výchozího materiálu). Směs byla odpařena do sucha, zbytek byl adsorbován na silikagel ve směsi cyklohexan/aceton a směs byla separována pomocí flash chromatografíe na silikagelu (D do 20 % A) se ziskem 91 mg (58 %) bílého prášku.

Ή NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 11,98 (bs, 1H); 11,92 (bs, 1H); 7,79 (dd, J = 22,8, 17,2, 1H); 7,73 (s, 1H); 7,56 (dd, J= 7,8, 1,5, 1H); 7,48 (bs, 1H); 7,22 (d, J= 3,1, 1H); 7,07 (ddd, J = 8,4, 7,0, 1,5, 1H); 6,68 (m, 1H); 6,56 (dd, J= 8,4, 1,0, 1H); 6,34 (dd, J= 18,9. 17,2, 1H); 4,04(m, 4H); 1,25 (t, 6H../= 7,0). ¹³CNMR(100 MHz, DMSO-J6)δ 153,88; 146,52; 143,86 (d,J= 7,8); 141,13; 139,20; 131,06; 127,11; 122,36; 120,85 (d, J=22,8); 119,45; 117,96; 117,23; 115,24; 112,90 (d, J= 188,0); 61,26 (d, J= 5,3); 16,50 (d, J= 6,0). ³¹P NMR (400 MHz, DMSO-J6) δ 22,68. MS (ESI) m/z = 389,1 [M + H]⁺ (vypočteno 389,1).

Příklad 70 (/'.')-7-((2-(2-(Fosfonáto)vinyl)fcnyl)ainino)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-ó/|pyrimidin-4-on L69

Baňka byla naplněna látkou L69 (55 mg; 0,1400 mmol; 1 ekv.), uzavřena šeptem a zapuštěna argonem. Poté byl přidán suchý pyridin (10 ml/1 mmol výchozího materiálu) a trimethylsilylbromid (1 ml/1 mmol výchozího materiálu). Směs byla míchána přes noc při teplotě místnosti a poté byla odpařena do sucha. Zbytek byl rozpuštěn v malém množství vody a produkt byl čištěn pomocí HPLC (Cl8, gradient z vody do methanolu) a lyofilizován z vody se ziskem

-44CZ 34625 UI mg (21 %) bílého lyofilizátu produktu.

'HNMR (400 MHz, D₂O) δ 7,88 (s, 1H); 7,51 - 7,41 (m, 2H); 7,43 (s, 1H); 7,08 (m, 1H); 6,89 (m, 1H); 6,60 (dd,7=8,2, 1,2, 1H); 6,42 (t, 7 = 16,8, 1H). ¹³C NMR (100 MHz, D2O) δ 156,04; 145,37; 142,18; 140,51; 136,93 (d, 7 = 5,9); 130,44; 127,92; 125,76; 125,54 (d, J = 175,0); 124,47 (d, 7=20,7); 120,09; 119,35; 116,99; 114,72.³¹P NMR (400 MHz, D20) δ 15,12. HRMS (ESI ) m/z = 331,0601 [M + H]⁺ (vypočteno 331,0602).

Stanovení biologických účinků

Inhibice aktivity PNP in vitro

Pro hodnocení inhibiční aktivity látek byl použit lidský rekombinantní PNP protein (/?PN P) exprimovaný v E. coli, přečištěný afinitní chromatografií (Ni-NTA, Thermo Fisher Scientific, Waltham, USA) a skladovaný ve 20 mmolT¹ fosfátovém pufiru s 0,3 mol l¹ NaCl, pH7,4, v alikvotech při -80 °C. Všechny syntetizované látky byly nejprve podrobeny orientačnímu screeningu při koncentraci 10 pmolT¹, v případě, že inhibice byla větší než 50 %, byly stanoveny hodnoty IC50 (polovina maximální inhibiční koncentrace). Reakční směs pro stanovení aktivity PNP obsahovala; 1 mmolT¹ Pí, 200 pmolT¹ [2,8-³H] inosin (ARC Inc., Saint Louis, USA), variabilní koncentraci testované látky, 1 mmolT¹ DTT, 0,2 pg/ml BSA a 1,75 pg PNP proteinu. Reakce byla inkubována 10 min při 37 °C a poté byla ukončena nanesením 2 μΐ alikvotu reakční směsi na PEI-celulózovou destičku (kat. č. 105579, Merck Darmstadt, Německo). Destička byla vyvíjena v soustavě w-butanol-octová kyselina-voda v poměru 10:1:3 (obj ./obj ./obj.) a po vysušení byla analyzována pomocí radio-TLC čtečky RITA Star (Elysia-Raytest GmbH, Strauberhardt, Germany).

Hodnocení cytotoxicity

Pro hodnocení selektivity protinádorového účinku byla použita buněčná linie odvozená od Tlymfoblastů (CCRF-CEM) a jedna leukemická linie promyelocytámího typu (HL-60) (vše ATCC, Manassas, VA, USA). Buňky byly kultivovány v RPMI-1640 nebo DMEM médiu obsahujícím 10% FBS a 1% GlutaMax (vše Thermo Fisher Scientific, Waltham, USA) při 37 °C, v atmosféře 5% CO₂. Experimenty byly prováděny na buňkách mezi pasáží 10-50. V den experimentu byly buňky vysazeny do průhledných 384-jamkových destiček (Brand GmbH, Wertheim, Germany) v koncentraci 2000-10000 buněk na jamku a byly ponechány v inkubátoru přes noc. Druhý den byl přidán deoxyguanosin (10 pmol.l¹, Sigma) a variabilní koncentrace látek. Látky byly inkubovány s buňkami v CO₂ inkubátoru při 37 °C po dobu 72 h, poté následovala inkubace v délce 1-4 hod. s tetrazoliovou solí (XTT, Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) za účelem vizualizace viabilních buněk. Hodnoty absorbance (A450) ovlivněných buněk byly vztaženy k hodnotě neovlivněných, kontrolních buněk, které představovaly 100% životnost. Hodnoty IC50 charakterizující míru cytotoxicity látek byly vypočítány nelineární regresí s pomocí softwaru Prism v. 5.04 (GraphPad Software, San Diego, USA).

-45 CZ 34625 UI

Tabulka 1: Hodnocení in-vitro účinnosti PNP inhibitorů

	ÍVÚ/J ’ ?	£
	s 5 ν·χ {

	MM

-46CZ 34625 UI

ti M ,<Μ·χ. M	UM*	ú.U'.?	;> U	MM
Α··:Ά JM 'MO-	L-W	g.í S :	‘A *v
' Ά ZJ	MI	í>	; ÚŠ	·: < ÍU>
/^.A’ ;’1a cns O/joA^'	M2	OJ o	> i 4	> j. 1J $ λ
ο Γ % Ji, / 'r.	MA		:-- H)	OJ iK
yý' '-ý jt ..... A A:	144	0.0 M	:> řií	C,:M5

-47 CZ 34625 UI

-48CZ 34625 UI

Ctí» ..•''«%····' Ί	LSI	0,049	Λ 5 Λ J	0,91S
H N' U, 9,. -X,;	L52	04)54	X * Π	OJUS
(>., ÍÍ yAl'.· z« ,<	I $5	ί Λ < ,' . · $	;, j γ>	KU
ooOr^\ I U JW । * \ zr-s i LM :>Ý ΐ ,- ΛΧ i $$ .';	U..U7Ď	> 10	ÚD'
\..M	LS5
Í'h3	L56	0 O'—	,, ;λ	Ο,ΟΟί;

-49CZ 34625 UI

*ND - neurčeno

- 50 CZ 34625 UI

Průmyslová využitelnost

Předkládané technické řešení je využitelné pro farmaceutický průmysl a v medicíně, k přípravě a výrobě léčiv, léčebných prostředků a léčebných výrobku k použití při závažných onemocněních, 5 způsobených leukemickým nádorovým bujením.

Claims (7)

1. NÁROKY NA OCHRANU

   1. Sloučeniny obecného vzorce I,

   kde:

   X je funkční skupina NH, nebo atom síry v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty Ar, Z, GaR;

   Ar je aryl nebo heteroaryl v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Z, G a R;

   Z je řetězec atomů zvolený ze skupiny, sestávající z -CH2-, -CH2O-, -CH2OCH2- a -CHCH-, vázající se do polohy -2, nebo -3 arylu nebo heteroarylu Ar vůči substituentu X podle obecného vzorce I, a to v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, GaR;

   G je funkční skupina zvolená ze skupiny, sestávající z -SO2A¹, -P(O)(A¹)(A²), v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, Z a R, kde:

   substituenty A¹ a A² jsou stejné nebo různé a nezávisle na sobě jsou každý zvolen ze skupiny sestávající z -OH, -OR¹ a -NHR², přičemž R¹ je zvolen z lineárního či rozvětveného Ci-Ce alkylu, C6-C12 arylu nebo skupiny -CH₂OC(O)R², a

   R² je lineární či rozvětvený Ci až C10, výhodněji C₃ až C5 alkyl, nebo skupina -CHR³COOR⁴, vykazující (R), (5), nebo (RS) stereochemii, kde

   R³ je lineární nebo rozvětvený Ci až C10 alkyl, s výhodou C2 až Ce, nejvýhodněji C₃ až C5 alkylový řetězec, v němž může případně být kterákoliv skupina -CH2- nahrazena atomem síry, kyslíku, dusíku, nebo Ce až C12 arylem nebo Ce až C12 arylalkylem;

   R⁴ je lineární nebo rozvětvený Ci až C10 a výhodněji C₃ až C5 alkyl,

   R je atom vodíku, nebo substituent, vybraný ze skupiny, sestávající z -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN a halogenu, v kombinaci s nezávisle zvolenými substituenty X, Ar, Z, G;

   přičemž aryl je uhlovodíková skupina obsahující 6 až 12 uhlíkových atomů, obsahující alespoň jedno aromatické jádro, a může být nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

   heteroaryl je uhlovodíková skupina obsahující 4 až 12 uhlíkových atomů, obsahující alespoň jedno aromatické jádro a alespoň jeden heteroatom ze skupiny atomů kyslík, dusík, síra, a může být

   -52CZ 34625 UI nesubstituovaný, nebo substituovaný jedním či více substituenty, vybranými ze skupiny zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

   arylalkyl označuje alkylovou skupinou, která je substituována jednou nebo více arylovými skupinami, nesubstituovanými nebo substituovanými jedním nebo více ze substituentů, vybraných ze skupiny, zahrnující -OH, -O(aryl), -O(arylalkyl), -C(O)-, -CN, halogen;

   zvolené ze skupiny, obsahující:

   (£)-7-((2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný,

   7-((2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-brom-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5-brom-2-(2-(fosfbnáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo [3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5-hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (E)-7-((4-hydroxy-2-(2-(fbsfbnáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-diliydro-4H-pyrrolo [3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-isopropoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((4-(perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný.

   (£)-7-((4-(perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-hydroxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-isopropoxy-2-(2-(fbsfbnáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo [3,2-<7]pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-(perfluorfenyl)methoxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((3-(perfluorfenyl)oxy-2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ó/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((5 -fluor-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4H-pyrrolo [3.2-ó/|pyrimidin-4-on sodný,

   - 53 CZ 34625 UI (£)-7-((3 -methoxy-2-((fosfonáto)methoxy)fenyl)thio)-3,5 -dihydro-4//-py rrolo [3,2-r/| py ri m idi n-4-on sodný, (£)-7-((3 -(2-(fosfonáto)vinyl)thiofen-2-yl)thio)-3,5 -dihydro-4//-py rrolo 13,2-r/| py ri m idi n-4-on sodný,

   7-((3-((fosfonáto)mcthoxy)thiofcn-2-yl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin-4-on sodný.

   7-((2-((siilfo)mcthoxy)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin-4-on sodný, (£)-7-((2-(2-(sulfo)vinyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ti]pyrimidin-4-on sodný,

   7-((2-((fosfonáto)methyl)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-ti]pyrimidin-4-on sodný, 7-((2-(3-fosfonáto-2-oxapropyl)fcnyl)thio)-3.5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin-4-on sodný, 7-((2-(((((S)-l-(isopropoxykarbonyl)ethyl)amino)(fenoxy)fosforyl)methoxy)fenyl)thio)-3,5-dihydro-4//-pyrrolo|3.2-í/|pyrimidin-4-on.

   (£)-7-((2-(2-(fosfonáto)vinyl)fenyl)amino)-3,5-dihydro-4H-pyrrolo[3,2-<7/]pyrimidin-4-on.
2. 2. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, pro použití jako léčiva.
3. 3. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, pro použití k léčení onemocnění, způsobených rakovinným bujením T-lymfocytů.
4. 4. Sloučeniny obecného vzorce I podle nároku 1, pro použití k léčení T-akutní lymfoblastické leukemie.
5. 5. Farmaceutický prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I podle nároku 1 jako aktivní složku a případně dále obsahuje alespoň jeden farmaceuticky přijatelný nosič, plnivo, emulgátor a/nebo ředidlo.
6. 6. Farmaceutický prostředek podle nároku 5, pro použití k léčení onemocnění, způsobených rakovinným bujením T-lymfocytů.
7. 7. Farmaceutický prostředek podle nároku 5, pro použití k léčení T-akutní lymfoblastické leukemie.