CZ331094A3 - Steroidal glycosides and their use for treating hypercholesterolemia and atherosclerosis - Google Patents

Description

Oblast techniky

Vynález se týká steroidních glykosidů, konkrétně je možno uvést spirostanylových glykosidů, a jejich použití * v lékařství, zejména jako hypocholesterolemických činidel a antiaterosklerotických činidel pro léčení savců.

Dosavadní stav techniky

Podle dosavadního stavu techniky je známo mnoho různých látek, které projevují hypocholesterolemickou účinnost, přičemž značná část z těchto látek jsou zesítěné syntetické polymerní deriváty, jako je například polystyren. Ovšem je třeba uvést, že například zesítěné, ve vodě rozpustné pryskyřicové látky na bázi polystyrenu, které váží žlučovou kyselinu, jako jsou například činidla typu Cholestyramin , působí v ústech tak, že skřípají, takže jejich přijímání není příznivé. Kromě toho je třeba uvést, že tyto látky ve formě pryskyřicových perliček mají obvykle malou účinnost in vivo. To znamená, že účinná hypocholesterolemická dávka těchto materiálů je příliš ' veliká, obvykle se pohybuje v rozmezí od 18 do 24 gramů zformulovaného prostředku za den. Mezi další známé polymery,

- které projevují hypocholesterolemickou účinnost patří přírodní produkty chitosan a deriváty tohoto chitosanu, což je například uváděno v publikované evropské patentové přihlášce č. 0212145. Ovšem i v případě těchto látek je účinná hypocholesterolemická dávka těchto látek vysoká.

Mezi další známé látky používané pro kontrolování hypercholesterolemie patří rostlinné extrakty, jako jsou například saponiny z vojtěšky. Ovšem tyto rostlinné extrakty mají zase velice proměnlivé složení a obsahují značný podíl nepoužitelných chemických látek. Vzhledem k tomuto značně proměnlivému složení uvedených extraktů je velice obtížné stanovit standardní dávkové množství nebo určit množství obsažených znečišťujících látek. Takže vzhledem ke všem těmto důvodům nejsou tyto výše uvedené extrakty nijak zvlášť vhodné pro použití v humánní medicíně. Kromě toho je nutno uvést, že čištění těchto extraktů je značně nákladné. Jako alternativní řešení existují určité synteticky připravované čisté sloučeniny představující sapogeninové deriváty, jako jsou například látky připravované ze spirostanu, spirostenu nebo ze sloučenin odvozených od sterolu, které potlačují absorpci cholesterolu účinnějším způsobem než jsou uvedené extrakty z vojtěšky, alespoň pokud se týče použitého množství, a vzhledem k tomu je možno jich použít v rozumných dávkových množstvích. Vzhledem k tomu, že chemické složení těchto prostředků obsahujících dané účinné látky je známé a dále vzhledem k tomu, že je možno tyto látky připravit syntetickým způsobem ve vysoké čistotě, jsou tyto látky vhodné pro podávání teplokrevným zvířatům, včetně lidí.

Ovšem je nutno uvést, že pokud se tyto látky nepodávají v masivních množstvích, potom tyto čisté sapogeniny neprojevují významnější inhibiční účinek pokud se týče absorpce cholesterolu. Tento účinek nastává pouze v případě, kdy se tyto látky kombinují s jinou částí tak, aby se dosáhlo u těchto sapogeninů požadovaného účinku. Jako příklad těchto sapogeninových sloučenin je možno uvést sloučeniny tigogeninu a diosgeninu, zejména to platí o glykosidech těchto sloučenin. V publikaci P.K. Kintia, lu.K. Vasilenko, G.M. Forianu, V. A. Bobeiko, I .V. Suetina, N.E. Mashchenko , Kim. Pharm. Zh., 1981, 15(9), 55 je popisován 3-0-(β-D-galaktopyranosyl)hekogenin a použití této látky jako hypocholesterolemického činidla. V patentech Spojených států amerických č. 4 602 003 a 4 602 005 se uvádí určité steroidní -glykosidy, zejména 3-0-(β-Dglukopyranosyl)tigogenin a 3-0-(β-D-cellobiosyl)tigogenin a použití těchto látek pro kontrolování hypercholesxerolémie. Zejména 3-0-(β-D-cellobiosyl)tigogenin má vynikající hypocholesterolemický účinek v porovnání například s cholestyraminem.

Kromě výše uvedených látek byly v publikacích podle dosavadního stavu techniky publikovány i další specifické glykosidy, ovšem tyto publikace neuvádí hypocholesxerolemickou účinnost. V publikaci Structural Features of the Antioxidant and Fungicidal Activity of Steroid Glycosides, Dimoglo, A.S., Choban I.N., Bersuker,

I. B., Kintya, P.K., Balashova, N.N., Bioorg. Khim, 11(3), 408-413, 1985 se uvádí β-D-galaktopyranosid rockogeninu a β-D-lakxosid tigogeninu. V publikaci Preparation and Propertied of Some New Steroid β-D-Glucopyranosides, β-D-Glucopyranosidiironic Acids and Derivatives, Schneider,

J. J., Carb. Research, 17, 199-207 se uvádí β-D-glukopyranurosid tigogeninu. V patentu Spojených svárů amerických č. 4 260 603, Sterol Glycoside with Activity as Prostaglandin Synthetase Inhibitor, Pegel, K.H. Walker, H., ze 7. dubna 1981, se uvádí β-D-glukopyranosid hekogeninu.

V publikaci Hemolytic Properties of Synthetic Glykosides,

Segal R. , Shud, F. , Millo-Goldzweig, I. , J. Pharm. Sci.,

67(11), 1589-1592, 1978, se uvádí β-D-maltosid tigogeninu, β-L-fukopyranosid tigogeninu, β-maltosid smilageninu a a-L-rhamnosid tigogeninu. V publikaci Steroid Glycosides from the Roots of Ca.psi.cum. Annuum II: The SzrucTure of the Capsicosides, Gutsu, E.V., Kintya, P.K., Lazurevskii,

G.V., Khim. Prír Soedin. , (2) 242-246, 1987, se uvádí α-D-arabanopyranosid tigogeninu a β-D-galaktopyranosid tigogeninu. V publikaci Molluscicidal Sapordns from Cornus Florida L. , Hostettmann, K., Hostettmann-Kaldas, M., Nakanishi, K., Helv. Chim. Acta, 61, 1990-1995, 1978 se popisuje β-D-galaktopyranosid amílageninu. V publikaci Steroidal Saponins from Several Species of Liliiforace Plants, Yang, C., Li ,Κ., Ding, Y., Yunnan Zhiwu Yanj iu Zengkan, Suppl. 3, 13-23, 1990 se popisuje (25S)-hekogeníncellobiosíd. V publikaci Determination of the Absolute Configuration of a Secondary Hydroxy Group in a Chiral Secondary Alcohol Using Glycosidation shifts in Carbon-13 NMR Spectroscopy, Seo, S., Tomita, Y., Tori, K., Yoshimura, Y. , J. Am. Chem. Soc., 100(11), 3331-3339, 1978 se popisuje β-glukosid smilageninu a α-glukosid smilagenínu. V publikaci Steroid Glycosides from Asparagus Officinalis, Lazurevskii, G.V., Goryanu, G.M., Kintya, P.K., Dokl. Akad. Nauk. SSSR, 231(6), 1479-81, 1976 se uvádí β-glukosid sarsasapogeninu.

I když jsou výše uvedené hypocholesterolemické sloučeniny, uváděné ve výše uvedených literárních odkazech, podle dosavadního stavu techniky značným přínosem v této oblasti, výzkumy těchto látek dále pokračují, přičemž úsilí je zaměřeno na získání ještě lepších hypocholesterolemických farmaceutických prostředků.

Podstata vynálezu ·,

Vynález je zaměřen, na steroidní glykosidy, zejména na spirostanylové glykosidy, které jsou vhodné jako hypocholesterolemická činidla a jako antiaterosklerotická činidla. Tyto sloučeniny podle uvedeného vynálezu mají následuj ící obecný vzorec IA :

C ΆΛν ch₃ (IA) ve kterém znamená :

buďto (A) :

Q¹ karbonylovou skupinu,

H OH — C — nebo

OH H '' r —c—

ÍZ *

Q znamená karbonylovou skupinu, methylenovou skupinu.,

H OH λ r nebo

OH H — C —

Qznamená

H OR¹ — c —

R^JO H

R¹O-alkylen(C₂-C₃)R'O-alkyIen(C nebo

C₃)-0^ H /·' a a Cp znamenají oba methylenovou skupinu, přičemž v Těchto skupinách :

Rl znamená β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-galaktopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosy1, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosy1, α-D-arabanopyranosyl, α-L-arabanopyranosyl, α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

3-0^-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (Β) ;

5

Q , Q a Q představují všechny methylenovou skupinu,

Q^z znamená

H OH — c — nebo

OH H _r znamená

H OR¹ — Z

R‘O H — c —

RiO-alkylen(C₂-C₃)-O. _neb_o

R^-alkyleníC^-OjhO H přičemž v těchto skupinách ; znamená :

β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl,

P-D-2-acetamído-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, a-L-arabanopyranosy1, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

3-O-β-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosy1 nebo β-D-maltotriosyl, nebo (C)

Q¹ , Q⁴ a CP představují všechny methylenovou skupinu.

Q znamená karbonylovou skupinu,

Q³ znamená

H OR¹ — C —

R*0 H — C —

R^lO-alkylen(C₂-C₃)-O K

R¹O-alkylen(C,-C₃)-O H nebo

C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách : znamená :

β-D-glukopyranuronosyl, p-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosy1, α-D-arabanopyranosyl, a-L-arabanopyranosyl, β-D-cellobiosy1, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

3-0-β-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl,

H OR¹

Λ —c — znamená

RO-alkylenCCT-CJ-O Η , ^{J 2 3}' s μ nebo přičemž v těchto skupinách ;

nebo (D) :

Q¹, a q5 představují všechny methylenovou skupinu, a

R‘O H — C —

R¹O-alkylen(C₂-C₃)-O^ H

Rl znamená :

β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, a -L-arabanopyranosy1, β-D-cellobiosyl, β-D-gentiobiosyl,

3-0-β-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosy1 nebo β-D-maltotriosyl, nebo (E) ;

Q¹, Q² a Q⁵ představuj i každý methylenovou skupinu, znamená karbonylovou skupinu nebo

OH H

2' Λ znamená

H OR¹ λ / nebo

R^!O H —c vodík je v poloze alfa,

C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách ;

Rl znamená :

β-D-galaktopyranosyl , β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, nebo (F) ;

Ql, a představují každý methylenovou skupinu,

Q³ znamená karbonylovou skupinu

H OR¹

Q·’ znamená Γ nebo

C5 vodík je v poloze alfa,

C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

Rl znamená :

β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, nebo _

R¹!) H — C — s tou podmínkou, že do rozsahu uvedených sloučenin nepatří (33,5a,25R)-3-[(β-D-cellobiosy1)oxy]spirostan.

První výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých ;

H OH

Q¹ představuje karbonylovou skupinu, Λ

OH H nebo __ ,

Q znamená methylenovou skupinu,

Qpředstavuj e

H OR¹ — C — q4 znamená methylenovou skupinu, q5 znamená methylenovou skupinu, vodík je v poloze alfa, a

C25 má R konfiguraci.

Zejména výhodnými sloučeninami z této první skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

Ql představuje karbonylovou skupinu, a r! je α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-glukopyranosyl, β-D-galaktopyranosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl.

Rovněž jsou zejména výhodné sloučeniny z této první skupiny takové sloučeniny, ve kterých :

Q¹ představuje

H OH — O —

R¹ znamená β-D-cellobiosyl.

Rovněž jsou zejména výhodné sloučeniny z této první skupiny takové sloučeniny, ve kterých :

OH H

Q¹ představuje _', a

Rl znamená β-D-cellobiosyl.

Druhou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

qI představuje methylenovou skupinu,

H OH znamena nebo

OH H t Λ — C —

H OR

Q* znamena představuje methylenovou skupinu, představuje methylenovou skupinu

Cg vodík je v poloze alfa, a

C25 je v konfiguraci (R) .

Zejména výhodnou skupinu z této druhé skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

H OH 'A

Q znamena _'_ , a

R¹ znamená β-D-cellobiosyl.

Třetí výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

H OH

Q¹ představuje karbony lovou skupinu, F

OH H nebo ' ?

Ί H OH

Q^z znamená karbonylovou skupinu, t f

OH H nebo ' Jf _ H ^0Rl

Cr znamená Λ , znamená methylenovou skupinu, znamená methylenovou skupinu,

Cg vodík je v poloze alfa, a

C25 má konfiguraci (R),

Zejména výhodnou skupinu z této třetí skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

Ql znamená karbonylovou skupinu,

Q znamená karbonylovou skupinu, a r! představuje β-D-cellobiosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této třetí sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

Q·*· znamená karbonylovou skupinu,

H OH '' Γ

Q představuje -c , a

R·¹· je β-D-cellobiosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této třetí sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

představuje karbonylovou skupinu,

H OH

Q² znamená _, a

R² je β-D-laktosy1.

Další zejména výhodnou skupinu z této třetí sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

H OH q! představuje -_c_

Q představuje karbonylovou skupinu, a R¹ je β-D-cellobiosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této třetí sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

skupiny skupiny skupiny skupiny

Q představuje -cO

Q je karbonylová skupina, a r! je β-D-cellobiosyl.

Čtvrtou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

představuje methylenovou skupinu,

O

Q znamená karbonylovou skupinu,

H OR¹ '' r

Q představuje -q- ,

Q⁴ znamená methylenovou skupinu, znamená methylenovou skupinu, vodík je v poloze alfa, a

C25 má konfiguraci (R).

Zejména výhodnou skupinu z této čtvrté skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

r! znamená β-D-laktosyl nebo β-D-cellobiosyl.

Pátou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

Q a Q představují každý methylenovou skupinu,

H OR^{1 λ} Λ

Q představuje -cQ⁴ a znamenají každý methylenovou skupinu, a

C25 má. konfiguraci (R) .

Zejména výhodnou skupinu z téro páté skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

C5 vodík je v poloze alfa, a r! znamená β-D-gentiobiosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této páté skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých ;

vodík je v poloze beta, a r! je β-D-cellobiosyl.

Šestou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

Q¹, Q² a Cp představují každý methylenovou skupinu,

H OR¹

Λ

Q představuje __c_

Q⁴ znamená karbonylovou skupinu,

C5 vodík je v poloze alfa, a

C₂5 má konfiguraci (R) .

Zejména výhodnou skupinu z této šesté skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

R¹ je β-D-cellobiosyl.

Sedmou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce IA tvoří sloučeniny ve kterých :

Q¹, Q² a Q⁴ představují každý methylenovou skupinu,

Q představuje

H OR¹ — C — q5 znamená karbonylovou skupinu, vodík je v poloze alfa, a C25 má konfiguraci (R).

Zejména výhodnou skupinu z této sedmé skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

Do rozsahu uvedeného vynálezu rovněž náleží způsob kontrolování hypercholesterolemie nebo aterosklerozy u lidí při kterém se podává savcům trpícím touto hypercholesterolémií nebo aterosklerozou spirostanylglykosidová sloučenina obecného vzorce

I v množství kontrolujícím hypercholesterolémií nebo aterosklerozu :

Q

c^ch₃

H (I) ve kterém znamená :

buďto (A) :

Q¹ methylenovou skupinu, karbonylovou skupinu,

H OH /r nebo

OH H / r

Q^z znamená methylenovou skupinu karbonylovou skupinu,

Q'

H OH — c — znamená

OH H λ A nebo -cH OR¹ —C —

R‘O H — C —

R¹O-alkylen(C₂-C₃)-O H

R¹0-alkylen(C₉-C,)-0 nebo a Q⁴ a Q⁵ znamenaj í oba methylenovou skupinu, přičemž v těchto skupinách : r! znamená β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosy1, β-D-galaktopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, a-L-arabanopyranosy1, α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

3-0-β-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (Β) :

q! , q2 a Cp představují každý methylenovou skupinu,

H OR¹ R'0 H ' '' Λ l ''' '

Q znamena -q- nebo -c- ,

OH H

Q⁴ znamená karbonylovou skupinu nebo __c_

C5 vodík je v poloze alfa,

C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách : r! znamená β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, nebo (C) :

4

Q , Q a Q představují každý methylenovou skupinu.

znamená

H OR¹ __c<_ nebo

R‘O H — C —

OH H λ Λ představuje karbonylovou skupinu nebo

Cj vodík je v poloze alfa,

C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

R·*· znamená β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, s tou podmínkou, že do rozsahu uvedených sloučenin nepatří :

(3p,5a,25R)-3-[(α-D-cellobiosyl)oxy]spirostan, (3β,5α,25Κ)-3-[(β-D-glukopyranosyl)oxy]spirostaň, (3β,5α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan a (3β,5α,25Ρ)-3-[(β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan12-on.

První výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých :

, Q², q4 a představují každý methylenovou skupinu, C25 má konfiguraci (R), a

H OR¹ ''' '

Q představuje -cZejména výhodnými sloučeninami z této první skupiny jsou sloučeniny ve kterých ;

C$ vodík je v poloze alfa, a

R¹ je β-D-glukopyranosyl, β-D-maltosyl, β-D-laktosy1, β-D-gentiobiosyl nebo β-D-galaktopyranosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této první skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

vodík je v, poloze beta, a Rl je β-D-cellobiosyl.

Druhou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých :

H OH

Q¹ představuje karbonylovou skupinu, '' Λ

OH H nebo '7

Q znamená methylenovou skupinu,

H 0R>

^λ Γ

Q znamená -cQ⁴ a Q·⁵ každý znamená methylenovou skupinu,

C25 má konfiguraci (R), a

C5 vodík je v poloze alfa.

Zejména výhodnými sloučeninami z této druhé skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

znamená karbonylovou skupinu, a r! znamená α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-glukopyranosyl, β-D-galaktopyranosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl nebo β-D-maltotriosyl,

Další zejména výhodnou skupinu z této druhé skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

H OH ! ''' r

Q znamena -C- , a

Rl je β-D-cellobiosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této druhé skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

OH H '' <

Q znamená -c- , a

R¹ je β-D-cellobiosyl.

Třetí výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých :

Ql znamená methylenovou skupinu,

H OH

Λ

Q představuje karbonylovou skupinu, -_c_

OH H λ Λ nebo -CH OR^{1 λ} <

Q znamená -c23

Q⁴ a Q“ každý představují methylenovou skupinu,

C₂5 má konfiguraci (R), a vodík je v poloze alfa.

Zejména výhodnými sloučeninami z této třetí skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

O

Q znamená karbonylovou skupinu, a

R¹ znamená β-D-cellobiosyl nebo β-D-laktosyl.

Další zejména výhodnou skupinu z této třetí skupiny sloučenin tvoří sloučeniny, ve kterých :

H OH ^{λ Λ} Q znamena -c- , a

R¹ představuje β-D-cellobiosyl nebo β-D-galaktopyranosyl

Čtvrtou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých :

H OH f

Q znamená karbonylovou skupinu, -COH H nebo __cH OH ' Λ

Q znamená karbonylovou skupinu, __

OH H — C — nebo

H OR¹

Q² znamená _'<?_

Q⁴ a CP představují každý methylenovou skupinu, vodík je v poloze alfa, a

C25 má konfiguraci (R).

Zejména výhodnými sloučeninami z této čtvrté skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

znamená karbonylovou skupinu,

Q znamená karbonylovou skupinu, a

R⁴ je β-D-cellobiosyl.

Dalšími zejména výhodnými sloučeninami z této čtvrté skupiny jsou sloučeniny ve kterých : q! znamená karbonylovou skupinu,

H OH '' Γ

Q znamená -C- , a

R² znamená β-D-cellobiosyl nebo β-D-laktosyl.

Dalšími zejména výhodnými sloučeninami z této čtvrté skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

H OH

Q znamená C ,

Q představuje karbonylovou skupinu, a

Rl znamená β-D-cellobiosyl.

Dalšími zejména výhodnými sloučeninami z této čtvrté skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

OH Η q! znamená -q2

Q představuje karbonylovou skupinu, a rA znamená β-D-cellobiosyl.

Pátou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých ;

5

Q , Q a Q představují každý methylenovou skupinu,

H OR¹ '' <

Q znamená -g- ,

Q⁴ znamená karbonylovou skupinu, vodík je v poloze alfa, a

C25 má konfiguraci (R).

Zejména výhodnými sloučeninami z této páté skupiny jsou sloučeniny ve kterých : r! představuje β-D-cellobiosyl.

Šestou výhodnou skupinu sloučenin výše uvedeného obecného vzorce I tvoří sloučeniny ve kterých :

Q¹, Q² a Q⁴ představují každý methylenovou skupinu,

H OR¹ '' '

Q znamená -C- , znamená karbonylovou skupinu,

C5 vodík je v poloze alfa, a

C25 má konfiguraci (R).

Zejména výhodnými sloučeninami z této šesté skupiny jsou sloučeniny ve kterých :

představuje β-D-cellobiosyl.

Uvedený vynález se rovněž týká farmaceutických prostředků používaných pro kontrolování hypercholesterolémie nebo aterosklerozy u savců, přičemž podstata těchto prostředků spočívá v tom, že obsahují jako účinnou složku sloučeninu obecného vzorce IA a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.

Podle dalšího aspektu je uvedený vynález zaměřen na prostředky obsahující hydrát sloučeniny výše uvedeného obecného vzorce IA.

Sloučeniny výše uvedených obecných vzorců IA a I jsou definované v tomto textu jako jednotlivé enantiomery, které mají absolutní stereochemické uspořádání znázorněné příslušnými obecnými vzorci IA a I.

Další znaky a výhody uvedeného vynálezu budou patrné z následujícího popisu, příkladů a patentových nároků, ilustrujících blíže tento vynález.

V následujících reakčních schématech jsou znázorněny postupy přípravy sloučenin podle uvedeného vynálezu a některé výchozí postupy a sloučeniny vedoucí k tomuto postupu.

Reakční schéma II

C vv-CH, (IV) halogenid peracetylováného cukru

ZnF_? adice halogenid peracetylovaného cukru

HO-X

adice za použití sloučenin rtuti (V) silylace

TMSO — X

H (VI)

Reakční schéma III

LAH redukce

(VIII)

Reakční schéma IV

H OH

X

HO. H

Q1 = methylen		υ
-X	5 ◄-	Q1 = methylen Q2 = karbonyl

H OH ”'-X

Q² = karbonyl

Q¹ = karbonyl Q² = karbonyl

Q¹ = karbonyl

H. OH

-x

Q¹ =

Q² = methylen

Q¹ = karbonyl Q² = methylen

I’

HO H

Q² = karbonyl

Reakční schéma V

Reakční schéma VI

(XIII)

(XIV)

OH

1) oxidace

2) odstranění chránící skupiny ▼

(XV)

Sloučeniny obecného vzorce IA tvoří podskupinu sloučenin obecného vzorce I. Vzhledem k výše uvedenému tedy pro následující popis shora ilustrovaných reakčních postupů a další skutečnosti vztahující se k danému vynálezu popisovanému v celém tomto popisu (stejně jako pro popis týkaj ící se uskutečnění a provedení uvedeného vynálezu a použití sloučenin, prostředků a postupů podle vynálezu) platí, že obecně vše co je uvedeno pro sloučeniny obecného vzorce I se vztahuje rovněž i na sloučeniny obecného vzorce IA.

Následující popis se vztahuje na výše ilustrovaná reakční schémata I, II a III, ve kterých se popisuje příprava sloučenin obecného vzorce I, ve kterých a Q³ představují methylenovou skupinu.

Podle tohoto reakčního schématu I se sloučeniny obecného vzorce I, ve kterých Q¹, Q² a Q³ mají stejný význam jako bylo definováno výše, připraví deacetylací vhodné alfa-peracetylované sloučeniny obecného vzorce III nebo beta-peracetylované sloučeniny obecného vzorce IV, ve 12· kterých Q a Q jsou definovány stejným způsobem jako bylo uvedeno shora a X znamená buďto vazbu nebo skupinu alkylen-O- .

V obvyklém provedení se tato deacetylace provede tak, že se sloučenina obecného vzorce III nebo sloučenina obecného vzorce IV uvede do kontaktu s nukleofilní bazickou sloučeninou, jako je například methoxid sodný nebo methoxid draselný, přičemž toto kontaktování se provede ve vhodném rozpouštědle, jako je například methanol, tetrahydrofuran, n-propanol nebo směsi těchto látek, při zvýšené teplotě pohybující se v rozmezí od asi 40 °C do asi 100 °C (obvykle při teplotě varu pod zpětným chladičem), při tlaku pohybujícím se v rozmezí od asi 3,45 kPa do asi 344,75 kPa (obvykle se tento postup provádí při tlaku okolí) a po dobu v rozmezí od asi 0,25 hodiny do asi 2 hodin. Kromě toho je třeba uvést, že v případě sloučenin obecného vzorce I, kdy cukrová část představuje glukopyranuronosylovou skupinu, se výsledná deacetylovaná sloučenina dále hydrolyzuje, což se provádí například zpracováním s hydroxidem sodným. V případě potřeby je rovněž možno sloučeniny, ve kterých buďto Q¹ nebo Q představují karbonylovou skupinu, redukovat, čímž se získají odpovídající alkoholy, přičemž tento postup představuje alternativní postup provádění redukce před provedením adice (tento alternativní postup bude ještě dále blíže popisován v souvislosti s reakčním schématem IV a v následujícím textu). V případě potřeby je možno analogickým způsobem rovněž sloučeniny, ve kterých buďto Q¹ nebo Q představují hydroxyskupinu, oxidovat, čímž se získá odpovídající sloučenina s karbonylovou skupinou, což rovněž představuje alternativní postup provádění oxidace před provedením adice.

Sloučeniny obecného vzorce III, ve kterých Q¹ a Q² mají stejný význam jako bylo definováno shora, je možno připravit anomerací vhodné sloučeniny obecného vzorce IV, ve _z 12 ktere mají Q a Q stejný význam jako bylo uvedeno shora. Stereochemické označení alfa a beta se vztahuje na konfiguraci připojení uhlíku cukru.

V obvyklém provedení je možno tuto anomerací provést zpracováním uvedené sloučeniny minerální kyselinou, jako je například bromovodíková kyselina, v bezvodém aprotickém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, při teplotě pohybující se v rozmezí od asi 20 °C do asi 40 °C (obvykle se tato reakce provádí při teplotě okolí) a po dobu přinejmenším 24 hodin, obvykle se tato reakce provádí po dobu několika dnů. Ovšem v případě arabanopyranosylových derivátů se alfa-anomer získá přímo adicí sacharidu na steroid, jak je to popisováno dále a beta-anomer se získá z výše uvedeného postupu (t. zn. nomenklatura je obrácená).

Podle výše uvedeného reakčního schématu II je možno požadované sloučeniny obecného vzorce IV, ve kterých Q a Q mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, připravit adicí vhodného acetylovaného halogenidu cukru (jako je například bromid) a steroidní sloučeniny. Konkrétně je možno uvést, že v případě sloučenin obecného vzorce IV, ve kterých zbytek cukru má jiný význam než β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl nebo β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, je možno použít adičního postupu promotovaného fluoridem zinečnatým, při kterém se použije vhodné sloučeniny obecného vzorce V (ve kterém Q a Q mají stejný význam jako bylo definováno shora a X představuje buďto vazbu nebo skupinu alkylen-O- ) a peracetylovaného halogenidu cukru, a v případě sloučenin obecného vzorce IV, ve kterých cukrová část představuje β-D-maltosylovou skupinu, β-D-gentiobiosylovou skupinu nebo β-D-2-aceΐamido-2-deoxy-glukopyranosylovou skupinu, potom je možno použít adični reakce promotované bromidem rtufnatým nebo kyanidem rtufnatým, přičemž se použije vhodná sloučenina obecného vzorce VI (jako je například trimethylsilyletherový derivát sloučeniny obecného vzorce V, ve které Q a Q mají stejný význam jako bylo uvedeno shora a X představuje buďto vazbu nebo skupinu alkylen-O- ) a peracetylovaný halogenid cukru.

Obecně je možno uvést, že se adični reakce promotovaná fluoridem zinečnatým, při které se použije sloučeniny obecného vzorce V a peracetylovaného bromidu cukru, provádí v neprotickém, bezvodém rozpouštědle, které je inertní vzhledem k prováděné reakci (jako je například acetonitril) , a při teplotě pohybující se v rozmezí od asi 20 °C do asi 100 °C, po dobu v rozmezí od asi 0,5 hodiny do asi 12 hodin. Obvykle se tato reakce provádí za použití asi 0,5 až asi 4 ekvivalentů (vztaženo na sloučeninu obecného vzorce V) fluoridu zinečnatého a asi 0,5 až asi 3 ekvivalentů acetylovaného bromidu cukru. Ve výhodném provedení postupu podle uvedeného vynálezu se tato adice provádí za současné katalýzy kyselinou, přičemž je zejména výhodné při této reakci použít jako katalyzátoru kyselinu halogenovodíkovou, která vzniká během provádění této reakce. Tyto požadované sloučeniny je možno připravit při tlaku pohybujícímu se v rozmezí od asi 3,45 kPa do asi 344,75 kPa, ovšem obvykle se tento postup provádí při tlaku okolí. Pokud se týče oddělovacích metod, potom se ve výhodném provedení podle vynálezu použije metody, při které se glykosidy vysráží ze surové zfiltrované reakční směsi (jako je například roztok produktu v acetonitrilu), což se provede přídavkem směsi obsahující asi 25 % až asi 75 % vody a zbytek představuje alkohol (jako je například methanol). Tento postup srážení produktu z vodné směsi methanol/acetonitril vyžaduje méně náročné zpracovávání než extrakční isolování, přičemž se získá produkt o větší čistotě.

Pokud se týče adice promotované bromidem rtufnatým a kyanidem rtufnatým, při které se použije sloučeniny obecného vzorce VI a acetylovaného bromidu cukru, potom je možno uvést, že se obvykle provádí v aprotickém bezvodém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, při teplotě v rozmezí od asi 20 °C do asi 100 °C a po dobu v rozmezí od asi 0,5 hodiny do asi 6 hodin. V obvyklém provedení tohoto

- 37 postupu se použije asi 0,5 až asi 4 ekvivalentů (vztaženo na sloučeninu obecného vzorce IV) bromidu rtuťnatého a kyanidu rtutnatého a asi 0,5 až asi 3 ekvivalentů peracetylovaného bromidu cukru (jako je například β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl, p-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl). Výše uvedenou požadovanou sloučeninu je možno připravit při tlaku pohybujícímu se v rozmezí od asi 3,45 kPa do asi 344,75 kPa, ovšem obvykle se tento postup provádí při tlaku okolí. Takto připravená sloučenina se ve výhodném provedení isoluje stejným způsobem jako to bylo uvedeno výše v případě adiční reakce promotované fluoridem zinečnatým, při které bylo použito sloučeniny obecného vzorce V.

Požadovaná sloučenina obecného vzorce VI, ve které

9 mají Q a Q stejný význam jako bylo uvedeno shora a X znamená buďto vazbu nebo skupinu alkylen-0- , je možno připravit silylácí vhodné sloučeniny obecného vzorce V, ve 1 2 které mají Q a Q stejný význam jako bylo uvedeno shora a X znamená buďto vazbu nebo skupinu alkylen-0- .

Obecně je možno uvést, že se uvádí do reakce sloučenina obecného vzorce V, bazické látka, jako je například triethylamin, a aktivovaná trialkylsilylová sloučenina (jako je například trimethylsilyltrifluormethansulfonát nebo trimethylsilylchlorid) , přičemž tato reakce se provádí v aprotickém bezvodém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, při teplotě nižší než asi 10 °C a po dobu v rozmezí od asi 0,5 hodiny do asi 2 hodin.

Podle shora uvedeného reakčního schématu č. III je možno sloučeninu obecného vzorce V, ve kterém mají Q a Q“ stejný význam jako bylo uvedeno shora a X představuje skupinu alkylen-0- , připravit redukováním vhodné sloučeniny

2 obecného vzorce VII, ve kterém Q a Q mají stejný význam jako bylo uvedeno shora.

Obecně je možno uvést, že se tato redukce provádí reakcí sloučeniny obecného vzorce VII s lithiumaluminiumhydridem v bezvodém rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, při teplotě přinejmenším asi 10 °C a po dobu pohybující se v rozmezí od asi 0,5 hodiny do asi 3 hodin.

Požadované sloučeniny obecného vzorce VII, ve kterém 1 2

Q a Q mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, je možno připravit adicí vhodné sloučeniny obecného vzorce VIII, ve kterem Q a Q mají stejný význam jako bylo uvedeno shora, s ethyldiazoacetátem v přítomnosti rhodiumacetátového dimerů. Při provádění této reakce se do reakce uvádí sloučenina obecného vzorce VIII a ethyldiazoacetát v aprotickém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, přičemž tato reakce probíhá v přítomnosti rhodiumacetátového dimerů při teplotě okolí a po dobu pohybující se v rozmezí od asi 0,5 hodiny do asi 3 hodin.

Použité výchozí látky k provádění výše uvedených reakcí podle uvedených reakčních schématu (to znamená ethyldiazoacetát a peracetylované halogenidy cukrů) je možno snadno získat nebo je možno je snadno synteticky připravit za použití běžně známých organických syntetických postupů podle dosavadního stavu techniky, což může snadno provést každý odborník pracující v daném oboru.

Kromě toho je v následujícím uvedena jako pomůcka pro přípravu výše uvedených steroidú tabulka uvádějící postupy přípravy různých sloučenin obecného vzorce VIII. V této tabulce č. I jsou uvedeny literární odkazy, ve kterých je možno nalézt podrobný popis postupů přípravy steroidních sloučenin obecného vzorce VIII (ve kterých představuje 2 methylenovou skupinu a Q a stereochemické uspořádání C$ vodíku a C25 uhlíku jsou stejné jako bylo uvedeno shora).

TABULKA I

Sloučeniny obecného vzorce VIII, ve kterém Q¹ představuje methylenovou skupinu a C3 hydroxyskupina je v poloze beta.

vodík	C25	Q2	Literární odkaz
α	R	ch2	R.E. Markér a kol., J. Am. Chem. Soc. (1943) 65, 1199.
α	R	c=o	Markér a kol., J. Am. Chem.

Soc. (1947) 69, 2167.

a	S	ch2	Goodson & Noller, J. Soc. (1939) 61, 2420.	Am. Chem.
α	S	c=o	Callow & James, J. Chem. Soc. (1955) 1671.
β	R	ch2	Markér a kol., J. Am. (1943) 65, 1199.	Chem. Soc
β	R	c=o	Markér a kol., J. Am. (1947) 69, 2167.	Chem. Soc
β	S	ch2	Markér a kol. , J. Am. (1943) 65, 1199.	Chem. Soc
β	S	c=o	Kenney & Wall, J. Org (1957) 22, 468.	. Chem.

V následujícím textu budou popsány postupy přípravy různých steroidů a/nebo zde bude uveden literární odkaz, ve kterém je možno nalézt postup přípravy těchto steroidů, které se používají jako výchozí látky (to znamená alternativní stereochemické uspořádání na poloze a jiné provedení oxidace a různé epimery na polohách Cy a C^) P^ro výše uvedené sloučeniny obecného vzorce VIII, popisované ve výše uvedené tabulce č. I. Všeobecně je možno uvést, že postup přípravy různých oxidovaných steroidů nezávisí na stereochemickém uspořádání na polohách C3, C5 a C25· Takže jakmile se připraví sloučenina se vhodným stereochemickým 1 2 uspořádáním na polohách C3, C5 a C25, ve které Q a Q představují oba methylenovou skupinu nebo znamená methylenovou skupinu a Q představuje karbonylovou skupinu, je možno z těchto sloučenin připravit různé oxidované 1 2 sloučeniny na Q a Q .

V případě některých postupů přípravy, uváděných v tomto popisu, je třeba chránit některé vzdálenější funkční skupiny (jako například Q , Q a Q ). Potřeba použití těchto chránících skupin bude záviset na povaze této vzdálené funkční skupiny a na podmínkách postupu přípravy dané sloučeniny. Potřebu chránit danou funkční skupinu může snadno určit odborník pracující v daném oboru. Obecně je možno přehled chránících skupin a jejich použití nalézt v publikacích podle dosavadního stavu techniky, například T.W. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, New York, 1981.

Sloučeniny obecného vzorce VIII, ve kterých 0^ znamená methylenovou skupinu, Q představuje buďto methylenovou skupinu nebo karbonylovou skupinu a C3 hydroxyskupina je v poloze beta, je možno převést na odpovídající sloučeniny obecného vzorce VIII, ve kterých C3 hydroxyskupina je v poloze alfa, pomocí následujících dvou metod. Tyto preparativní postupy je možno použít nezávisle na stereochemickém uspořádání C25 ·

V případě, že Q představuje karbonylovou skupinu, přičemž tato karbonylová skupina je chráněna jako ketal (například jako ethylenketal), potom se získají požadované sloučeniny reakcí uvedeného steroidu s ethylenglykolem v přítomnosti kyseliny jako katalyzátoru, přičemž se použije postupu popisovaného v publikaci Engel a Rakhita, Can. J. Chem. , 40_, 2153, 1962. V případě, že vodík je v poloze alfa, potom se C3 hydroxyskupina oxiduje na keton za použití pyridiniumchlorchromanu (PCC) v methylenchloridu za podmínek okolního prostředí. V další fázi tohoto postupu se C^-keton redukuje za pomoci stericky bráněného redukčního činidla,

D jako je například redukční činidlo K-Selectride , přičemž tato reakce se provádí při nízkých teplotách v tetrahydrofuranu, čímž se získá C^-alfa alkohol, viz. postup popisovaný v publikaci Gondos a Orr, J. Chem. Soc. Chem. Commun. 27 , 1239, 1982. V případě potřeby se chránící skupina Q odstraní působením kyseliny, jako je například chlorovodíková kyselina, ve vhodném rozpouštědle, jako je například aceton.

V případě sloučenin, ve kterých C5 vodík je v poloze beta, se použije stejného postupu jako bylo uvedeno v případě sloučenin, ve kterých C^-vodík byl v poloze alfa, s tím rozdílem, že se C3 keton redukuje za použití borohydridu sodného v ethanolu, čímž se získá C^-alfa alkohol.

Na reakčním schématu č. IV jsou znázorněny různé reakční cesty k získání sloučenin obecného vzorce VIII, ve kterých Q a Q“ mají srejný význam jako bylo uvedeno shora, přičemž se vychází ze sloučenin obecného vzorce VIII, ve kxerých Q znamená methylenovou skupinu a Q představuje karbonylovou skupinu.

Obecně je možno uvést, že metody přípravy těchto sloučenin je možno nalézt v publikaci L.F. Fieser a M. Fieser, Steroids, Reihold Pub. Corp., New York, 1959, a ve zde uváděných odkazech, přičemž v následujícím textu budou uvedeny a blížeji popsány některé konkrétní metody, které jsou naznačeny v tomto schématu.

Stručně je možno k tomuto reakčnímu schématu č. IV uvést, že při provádění metody (1) se výchozí sloučenina acetyluje a podrobí bromací, přičemž je možno použít postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4344. Takto získaný meziprodukt se potom redukuje lithiumaluminiumhydridem a potom se zpracovává oxidem stříbra, přičemž je možno použít obdobného postupu jako je uveden v publikaci Hel v.

Act., Chim., 1953, 36, 1241. Otevření takto získaného výsledného β-11,12-epoxidu je možno provést účinkem trichloroctové kyseliny, saponifikací a redukováním za použití zinku a kyseliny octové, přičemž se použije postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, za vzniku produktu uvedenému pro tento postup (1) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (2) se výchozí látka selektivně acetyluje za použití postupu popsanému v J. Chem. Soc.,

1956, 430. Za použití metody popsané v Org. Syn., 1976, 55, 84 se takto získaný produkt oxiduje oxidem chromovým v přítomnosti pyridinu. Za použití metody popsané v Synthesis, 1973, 790 se takto získaný výsledný produkt saponifikuje pomocí kyanidu draselného ve vodě, methanolu a tetrahydrofuranu, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (2) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (3) se výchozí látka převede na odpovídající toluensulfonylhydrazon, který se potom dále zpracovává methoxidem sodným, přičemž se použije postupu obdobného jako je uvedeno v publikaci J. Am. Chem. Soc., 1954, 76, 4013. Takto získaný výsledný 11-en produkt se potom oxiduje za použití oxidu osmičelého a

N-methylmorfolin-N-oxidu, přičemž se použije postupu popsaného v Tetrahedron Letters, 1976, 1973, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (3) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (4) se výchozí látka monobromuje za použití postupu uvedeného v patentu Spojených států amerických č. 3 178 418. Takto získaný meziprodukt se potom hydrolyzuje za použití postupu uvedeného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (4) v uvedeném schématu.

V případě postupů (5) a (6) se výchozí látka redukuje lithiumaluminiumhydridem, přičemž se použije postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc., 1954, 76, 4013. Tyto dva produkty uvedené pro tyto metody (5) a (6) se oddělí chromatograficky.

Při provádění postupu (7) se výchozí látka redukuje za pomoci lithiumaluminiumhydridu, přičemž se použije postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc. , 1951, 73 , 1777, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (7) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (8) se výchozí látka redukuje lithiem a amoniakem, přičemž je možno použít postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc. , 1953, 75, 1282, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (8) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (9) se výchozí sloučenina acetyluje, přičemž je možno použít postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc. , 1955, 77, 1632, čímž se získá směs acetátů, ze které je možno isolovat 3,ll-diacetát.

Nechráněný 12-alkohol se potom oxiduje oxidem chromitým a pyridinem, přičemž je možno použít postupu popsaného v Org. Syn., 1976, 55_, 84. Saponifikací takto získaných acetátů se získá produkt uvedený pro tento postup (9) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (10) se výchozí látka diacetyluje za použití postupu uvedeného v J. Chem. Soc., 1956, 4330. Takto získaný diacetát se redukuje vápníkem a amoniakem, přičemž k provedení této redukce je možno použít postupu uvedeného v J. Chem. Soc., 1956, 4334, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (10) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (11) se výchozí látka redukuje lithiem a amoniakem, přičemž se použije postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc. , 1953, 75, 1282, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (11) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (12) se výchozí látka redukuje lithiumaluminiumhydridem, přičemž je možno použít postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1951, 75, 1777, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (12) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (13) se výchozí sloučenina selektivně chrání na 3-alkoholové části za pomoci t-butyldimethylchlorsilanu a imidazolu, přičemž je možno použít postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1972, 94,

6190. Takto získaný produkt je možno za použití postupu popsaného v Org. Syn. , 1976, 55, 84 oxidovat oxidem chromovým v přítomnosti pyridinu. Takto získaný 3-alkoholový produkt se potom děsilyluje pomocí kyseliny fluorovodíkové v acetonitrilu, přičemž se použije postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc., 1972, 94, 6190, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (13) v uvedeném schématu.

Při provádění postupu (14) se výchozí látka selektivně chrání na 3-alkoholové části za pomoci t-butyldimethylchlorsilanu a imidazolu přičemž je možno použít postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1972, 94,

6190. Takto získaný výsledný meziprodukt se potom redukuje lithiumaluminiumhydridem, přičemž se použije postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1951, 73_, 1777. Takto získaný výsledný meziprodukt se potom selektivně acetyluje na 12-alkoholové části, silyluje se na 11-alkoholové čásxi pomocí trimethylsilyltriflátu (triflát je zkratka pro trifluormethansulfonát) a 2,6-lutidinu, přičemž k provedení tohoto postupu je možno použít metody podle Tetrahedron Letters, 1981, 22, 3455, a potom následuje deacetylace na 12-alkoholové části za pomoci lithiumaluminiumhydridu a reakce se zakončí přídavkem vodného roztoku chloridu amonného. Takto získaný 12-alkoholový produkt se potom oxiduje oxidem chromitým a pyridinem v methylenchloridu, přičemž se použije postupu popsaného v Org. Syn., 1976, 55, 84, načež následuje desilylace provedená reakcí s kyselinou fluorovodíkovou v acetonitrilu, přičemž tento postup je možno provést stejným způsobem jako je uvedeno v publikaci

J. Am. Chem. Soc. , 1972, 94 , 6190, čímž se získá produkt uvedený pro tento postup (14) v uvedeném schématu.

Podle výše uvedeného reakčního schématu V je možno požadované sloučeniny obecného vzorce IA, ve kterých ,

Q², Q² , Q⁴ , Cp , a C22 mají stejný význam jako v provedení (E) viz výše (to znamená oxidovaný produkt na Q⁴ poloze), připravit následujícími postupy.

Sloučeniny obecného vzorce X je možno připravit oxidací tigogeninu obecného vzorce IX. Obecně je možno uvést, že se tato oxidace provádí reakcí tigogeninu s pyridiniumchlorchromanem v inertním reakčním rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, přičemž tato reakce se provádí při teplotě pohybující se v rozmezí od 0 °C až do teploty okolí a po dobu v rozmezí od asi 2 hodin do asi 10 hodin.

Požadované sloučeniny obecného vzorce XI je možno připravit bromací sloučenin obecného vzorce X, přičemž potom následuje eliminační reakce. V obvyklém provedení se tato bromace provádí reakcí sloučeniny obecného vzorce X s bromem v tetrahydrofuranu při teplotě asi -78 °C, přičemž potom následuje ohřátí reakční směsi na teplotu okolí a udržování při této teplotě po dobu v rozmezí od asi 1 hodiny do asi 3 hodin. Eliminační reakce se provádí reakcí hromovaného produktu připraveného shora uvedeným postupem s lithiumbromidem a uhličitanem lithným v polárním aprotickém rozpouštědle, jako je například dimethylformamid, přičemž tato reakce se provádí při teplotě v rozmezí od asi 100 °C do asi 140 °C a po dobu v rozmezí od asi 1 hodiny do asi 4 hodin.

Požadované sloučeniny obecného vzorce XII je možno připravit epoxidací vhodné sloučeniny obecného vzorce XI , po které následuje redukce za použití lithiumaluminiumhydridu. Obecně je možno uvést, že se tato epoxidace provádí reakcí sloučeniny obecného vzorce XI s peroxidem vodíku a hydroxidem sodným v polárním protickém rozpouštědle, jako je například methanol, při teplotě okolí a po dobu pohybující se v rozmezí od asi 2 hodin do asi 6 hodin. Tato redukce se provádí reakcí epoxidu připraveného shora uvedeným postupem s líthiumaluminiumhydridem v inertním reakčním rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, při teplotě okolí a po dobu v rozmezí od 2 hodin do asi 6 hodin.

Sloučeniny obecného vzorce IA, které jsou popsány ve výše uvedeném provedení (E), ve kterých Q⁴ obsahuje hydroxyskupinu, je možno připravit tak, že se vychází ze vhodných sloučenin obecného vzorce XII, přičemž se provede adice katalyzovaná fluoridem zinečnatým, po které následuje deacetylace za použití methoxidu sodného, jak již bylo uvedeno ve shora uvedeném textu. Sloučeniny, ve kterých Q⁴ představuje karbonylovou skupinu, je možno připravit analogickým způsobem jako bylo uvedeno shora, přičemž se při provádění tohoto postupu před deacetylaci navíc zařadí oxidace prováděna za použití pyridiniumchlorchromanu (stejně jako to bylo uvedeno v souvislosti se sloučeninami obecného vzorce X).

Podle shora uvedeného reakčního schématu VI se požadované sloučeniny obecného vzorce IA, ve kterých Q¹,

Q², Q³, Q⁴, Q⁵, C₅ a C25 mají stejný význam jako to bylo uvedeno ve výše uvedeném provedení (F) (to znamená oxidovaná forma na poloze Q⁵), připraví následujícími postupy.

Požadované sloučeniny obecného vzorce XIV je možno získat tak, že se provede chránění (které je označeno symbolem P) alkoholové funkční skupiny v diosgeninu (sloučenina obecného vzorce XIII), přičemž potom následuje hydroborace takto získaného olefinů. V obvyklém provedení se alkoholová funkční skupina chrání jako ethoxymethylether reakcí disgeninu s ethoxymethylchloridem a diisopropylethylaminem v bezvodém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, přičemž tato reakce se provádí při teplotě okolí po dobu přibližně od asi 2 hodin do asi 6 hodin. Hydroborace se provádí reakcí sloučeniny připravené shora uvedeným postupem s boran-tetrahydrofuranovým komplexem v inertním reakčním rozpouštědle, jako je například tetrahydrofuran, přičemž tato reakce se provádí při teplotě okolí po dobu v rozmezí od asi 1 hodiny do asi 6 hodin.

Požadované sloučeniny obecného vzorce XV je možno připravit oxidací vhodné sloučeniny obecného vzorce XIV, přičemž potom následuje odstranění alkoholové chránící skupiny. Obecně je možno uvést, že se oxidace provádí reakcí sloučeniny obecného vzorce XIV s pyridiniumchlorchromanem v bezvodém rozpouštědle, jako je například methylenchlorid, přičemž tato reakce se provádí při teplotě okolí po dobu v rozmezí od asi 2 hodin do asi 8 hodin. Odstranění alkoholové chránící skupiny je možno provést reakcí oxidovaného produktu, získaného shora uvedeným postupem, s koncentrovanou kyselinou chlorovodíkovou ve smíšeném rozpouštědle obsahujícím methanol a tetrahydrofuran, přičemž tato reakce se provádí při teplotě pohybující se v rozmezí od asi 40 °C do asi 65 °C a po dobu v rozmezí od asi 5 minut do asi 1 hodiny.

Požadované sloučeniny obecného vzorce IA, které jsou specifikovány ve shora uvedeném provedení (F), ve kterých představuje karbonylovou skupinu, je možno připravit ze vhodných sloučenin obecného vzorce XV adiční reakcí katalyzovanou fluoridem zinečnatým, po které následuje deacetylace za použití methoxidu sodného, což se provede stejným způsobem jako to bylo uvedeno shora. Sloučeniny, ve kterých obsahuje hydroxyskupinu je možno připravit analogickým způsobem jako je uvedeno shora, přičemž před deacetylaci se navíc zařadí redukce. V obvyklém provedení se tato redukce provede reakcí s borohydrídem sodným ve smíšeném rozpouštědle obsahujícím ethanol a dichlormethan, přičemž tato reakce se provádí při teplotě okolí po dobu v rozmezí od 1 hodiny do asi 6 hodin.

Takto získané sloučeniny obecného vzorce I, které mají asymetrické uhlíkové atomy je možno oddělit na jejich diastereomery tak, že se využije jejich odlišných fyzikálně-chemických vlastností, přičemž se použije metod běžně známých z dosavadního stavu techniky, jako je například chromatografie a/nebo frakční krystalizace.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu, ve kterých je cukr β-D-glukopyranuronosyl, jsou acidické povahy a mohou tedy tvořit bazické soli. Všechny tyto bazické soli náleží do rozsahu uvedeného vynálezu, přičemž tyto látky je možno rovněž připravit běžně známými metodami podle dosavadního stavu techniky. Například je možno uvést, že se tyto látky připraví jednoduše jednoduchým kontaktováním acidické a bazické části, které jsou použity obvykle ve stechiometrickém poměru, což se provede podle potřeby ve vodném, nehodném nebo částečně vodném médiu. Takto připravené soli se oddělí buďto odfiltrováním, vysrážením za použití ne-rozpouštědla, po kterém následuje filtrace, odpařením rozpouštědla nebo v případě vodných roztoků loyofilizací.

Kromě toho je třeba uvést, že mnoho sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno oddělit ve formě hydrátů.

Sloučeniny podle uvedeného vynálezu jsou účinnými inhibitory absorpce cholesterolu a z tohoto důvodu jsou vhodné k terapeutickému použití jako činidla pro kontrolování hypercholesterolemie u savců, zejména u lidí. Vzhledem k tomu, že s touto hypercholesterolémií úzce souvisí vznik celkových kardiovaskulárních poruch, cerebrálních vaskulárních poruch nebo periferálních vaskulárních poruch, slouží tyto sloučeniny podle uvedeného vynálezu rovněž k zabránění vzniku aterosklerózy, a zejména arteriosklerózy.

Tuto hypercholesterolemickou kontrolní účinnost sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno demonstrovat pomocí metod, při kterých je použito standardních postupů. Například je možno uvést, že in vívo účinnost těchto sloučenin při inhibování intestinální absorpce cholesterolu je možno určit metodou podle Melchoira a Harwella, J. Lipid. Res. , 1985, 26, 306-315.

Účinnost těchto sloučenin je možno stanovit určením množství hypocholesterolemického činidla, při kterém se dosáhne snížení absorpce cholesterolu v porovnání s kontrolními pokusy u samečků zlatých syrských křečků.

Podle této metody se samečkům zlatých syrských křečků podává buďto potrava neobsahující cholesterol (kontrolní zvířata) nebo potrava s přídavkem 1 % cholesterolu a 0,5 % kyseliny cholové po dobu 4 dní. Následující den se tato zvířata udržují bez potravy po dobu 18 hodin a potom se jím podá 1,5 mililitru perorální dávky vody obsahující 0,25 % methylcelulozy, 0,6 % látky Tween 80 a 10 % ethanolu (kontrolní zvířata) nebo perorální dávka, ve které je obsažena kromě toho požadovaná koncentrace testované sloučeniny. Okamžitě po podání této dávky se těmto zvířatům podá druhá 1,5 mililitrová perorální dávka kapalné potravy pro křečky obsahující 1 % [ H]-cholesterolu (2,0 gCi/jedno zvíře; 210 dpm/nmol) a 0,5 % kyseliny cholové, přičemž potom se těmto zvířatům nepodává potrava po dobu dalších 24 hodin. Na konci této druhé půstové periody se zvířata usmrtí, játra se vyjmou, saponifikují a alikvótní podíly se odbarví přídavkem peroxidu vodíku a stanoví se úroveň radioaktivity. Na základě zjištěné hmotnosti jater se potom vypočte celková hepatická radioaktivita. Stupeň absorpce cholesterolu se vyjádří jako procento z celkové radioaktivity podané v perorální dávce, které je obsaženo v játrech 24 hodin po podání této dávky.

Anti-aterosklerotický účinek sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno stanovit na základě množství činidla, pomocí kterého se dosáhne snížení ukládání lipidů v aortě králíka. Podle této metody se samečkům novozélandských bílých králíků podává potrava obsahující 0,4 % cholesterolu a 5 % podzemnicového oleje po dobu 1 týdne (potrava podávána jednou denně). Po jednom týdnu se těmto králíkům podává denní dávka testované sloučeniny o vhodné koncentraci. Po 8,5 týdnu se přeruší podávání léčiva a zvířata se udržují na potravě obsahující cholesterol po dobu dalších 2 týdnů, přičemž potom se změní potrava na potravu neobsahující cholesterol, která se podává po dobu 5 týdnů. Po proběhnutí xéxo periody se zvířata usmrtí a vyjme se aorta v oblasti torakálního oblouku až k rozvětvení u kyčli. Tyto aorty se potom očistí od vnější vrstvy na cévní stěně, podélně se rozříznou a potom se označkuji činidlem Sudan IV, viz Holman a kol. Lab. Invet. 1958, 7. 42-47. Procentuální podíl povrchové plochy, na kterém je patrné označení se potom kvantifikuje denzitometrickou metodou za použití systému Optimas Image Analyzing System (Image Processing Systems). Snížené ukládání lipidů je indikováno zmenšením označené povrchové plochy v procentech u skupiny zvířat, kterým bylo podáváno léčivo, v porovnání s kontrolními zvířaty.

Podávání sloučenin podle uvedeného vynálezu je možno provádět metodami umožňujícími průchod těchto sloučenin do intestinálního lumenu. Mezi tyto metody patří perorální aplikace, intraduodenální aplikace, atd.

Množství podávaných steroidních glykosidů bude samozřejmě záviset na léčeném subjektu, na intenzitě poškození, na způsobu podávání a na odhadu, který provede ošetřující lékař. Nicméně je možno uvést, že v obvyklých případech se účinná dávka těchto sloučenin pohybuje v rozmezí od 0,71 miligramu/kilogram tělesné hmotnosti/den, přičemž ve výhodném provedení se tato dávka pohybuje v rozmezí od 20 do 50 mg/kg/den a podle nejvýhodnějšího provedení je tato dávka v rozmezí od 2 do 7 mg/kg/den.

V případě průměrného člověka o tělesné hmotnosti asi 70 kilogramů toto dávkování představuje asi 0,05 gramů/den až asi 14 gramů/den, přičemž ve výhodném provedení je tato dávka v rozmezí od 0,14 g/den do 3,5 g/den a nejvýhodněji v rozmezí od asi 0,14 g/den do asi 0,5 g/den.

V případě perorálního podávání, které je výhodné v případě sloučenin podle uvedeného vynálezu, může mít tento farmaceutický prostředek formu roztoku, suspenze, tablety, pilulky, kapsle, prášku, prostředku s dlouhotrvajícím uvolňováním a podobně.

V závislosti na uvažované metodě podávání mohou být farmaceutické prostředky podle uvedeného vynálezu ve formě pevných prostředků, polo-pevných prostředků nebo kapalných prostředků, jako jsou například tablety, pilulky, kapsle, prášky, kapaliny, suspenze nebo podobné další prostředky. Ve výhodném provedení podle uvedeného vynálezu se používají jednotkové dávkové formy, které jsou vhodné pro jednorázové podávání přesně stanovené dávky. Tyto farmaceutické prostředky podle uvedeného vynálezu obsahují běžnou farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku nebo vehikulum a sloučeninu podle uvedeného vynálezu jako účinnou složku. Kromě toho mohou tyto prostředky obsahovat další běžně používaná medicínská nebo farmaceutická činidla, nosičové látky, vehikula, atd.

Tyto farmaceutické prostředky podle uvedeného vynálezu mohou obsahovat asi 0,1 % až asi 95 % sloučeniny podle uvedeného vynálezu, přičemž ve výhodném provedení je obsaženo asi 1 % až asi 70 % této sloučeniny podle uvedeného vynálezu. V každém případě obsahuje podávaný prostředek nebo přípravek takové množství sloučeniny podle uvedeného vynálezu, které je účinné pro zmírnění příznaků vyskytujících se u daného subjektu, který má být podroben léčení jako je například hypercholesterolemie nebo ateroskleroza.

V případě pevných farmaceutických prostředků podle uvedeného vynálezu je možno použít běžně používaných netoxických pevných nosičových látek, jako je například manitol, laktoza, škrob, stearát hořečnatý, sacharin sodný, mastek, celulóza, sacharoza, uhličitan hořečnatý, které mají kvalitu vhodnou pro farmaceutické použití, a kromě toho další jiné podobné látky.

Farmaceutické prostředky podávané v kapalné formě je možno připravit rozpuštěním nebo dispergováním sloučeniny podle uvedeného vynálezu ve vhodném prostředí nebo je možno je připravit jiným vhodným způsobem, přičemž takto získaná směs se mísí případně s farmaceuticky přijatelným vehikulem a s nosičovou látkou, jako je například voda, slaný roztok, vodný roztok dextrozy, glycerol, ethanol a podobné jiné látky, za účelem přípravy roztoku nebo suspenze.

Metody přípravy různých farmaceutických prostředků s určitým stanoveným množstvím účinné látky jsou z dosavadního stavu techniky pro odborníky pracující v daném oboru běžně známé. Jako příklad těchto použitelných metod je možno uvést metody uvedené v publikaci Remington’ s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easter, Pa., 15th Edit i on (1975).

Příklady provedení vynálezu

Nové steroidní glykosidy pro léčení hypercholesterolémie a aterosklerózy podle uvedeného vynálezu a postup jejich přípravy bude v dalším blíže popsán s pomocí konkrétních příkladů, které vynález pouze ilustrují aniž by jej jakýmkoliv způsobem omezovaly.

Příklad 1

Postup přípravy (3β,5α,12β,25R)-3-[(β-D-galaktosyl)oxy]-12hydroxyspirostanu.

Redukce ketonů

Podle tohoto provedení byl k roztoku o teplotě místnosti, který obsahoval (3β,5α,25R)- 3-[(β-D-galaktosyl)oxy]spirostan-12-on (v množství 1,33 gramu, což představuje 2,24 mmolů, který byl získán deacetylací (3p,5a,25R)-3[(tetraacetyl-β-D-galaktosyl)oxy]spirostan-12-onu (viz dále uvedená Příprava B2) postupem popsaným v příkladu 3, dále ethanol (v množství 130 mililitrů) a chloroform (v množství 260 mililitrů), přidán roztok borohydridu sodného (v množství 0,51 gramu, což představuje 13,4 mmolů) a ethanol (50 mililitrů). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 4 hodin, načež byl přidán methanol (v množství 200 mililitrů) a tato reakční směs byla potom opět promíchávána po dobu 2 hodin. Vzniklá reakční směs byla zkoncentrována za použití vakua, čímž bylo získáno 3,38 gramu surového produktu. Rekrystalizací ze směsi methanolu (80, mililitrů) a vody (8 mililitrů) , po které následovalo promývání ochlazeným roztokem methanolu (20 mililitrů) a sušení, byla získána požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví.

Výtěžek : 1,33 gramu (kvantitativní výtěžek).

Hmotové spektrum : 595 (Μ + H)

Teplota tání : > 200 °C

FAB MS s vysokým rozlišením (m/e) :

vypočteno pro Cg^HggOg ; 595,3846 nalezeno : 595,3861.

V následujícím příkladu byla požadovaná titulní sloučenina připravena ze vhodné výchozí sloučeniny, přičemž se postupovalo analogickým způsobem jako v příkladu 1.

Příklad 2 (3β,5α,12β,25Ρ)-3-[(β-D-cellobiosy1)oxy]-12-hydroxyspirostan.

Teplota tání : > 200 °C

Hmotové spektrum : 757 (Μ + Η), 779 (M + Na)

FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro C-jpHg^O-^Na : 779,4194 nalezeno : 779,4250

Příklad 3

Postup přípravy (3β,5α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan-11-onu.

Deacetylace

Podle tohoto příkladu byla směs, která obsahovala (3β,5α,25Η)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan11-on (v množství 6,57 gramu, což představuje 6,26 mmolů), dále methoxid sodný (v množství 68 miligramů, což představuje 1,25 mmolů), methanol (35 mililitrů) a tetrahydrofuran (75 mililitrů) , zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny, přičemž potom následovalo promíchávání reakční směsi při teplotě místnosti po dobu 12 hodin. Při tomto zpracovávání se po 30 minutách vytvořila v reakční směsi sraženina. Získaná konečná suspenze byla potom zkoncentrována za použití vakua, čímž bylo získáno 6,0 gramů surového produktu. Tento materiál byl potom vyčištěn mžikovou chromatografickou metodou (jako elučního činidla bylo použito chloroformu a potom směsi chloroformu a methanolu v poměru 8:2), čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 2,71 gramu (71 %) .

¹H NMR (DMSO*d₆) δ :

5,22	(d,	j =	5 Hz ,	IH) ,	5,00	(m	, 3H)
4,64	(s ,	IH)	»		4,58	(X	, J =	5 Hz,	IH)
4,54	(x.	J =	6 Hz,	IH) ,	4,34	(q	, J =	8 Hz,	IH)
4,27	(d,	J =	8 Hz,	IH) ,	4,23	(d	, J =	8 Hz,	IH)
3,68	- 2,	94	(m, 15'	Η) ,	2,34	(	m, 2H	),
2,08	- o,	81	(m, 23	Η) ,	0,92	(s	, 3H)
0,86	(d,	J =	7 Hz,	3H) ,	0,72	(d	, J =	6 Hz,	3H)
0,59	(s ,	3H)
DEPT	13C	NMR	(DMSO	-d6) δ :
210,4	(s)	»	108,8	(s) , 1	03,6 (d),		100,6	(d) ,
81,1	(d) ,		80,6	(d) , 7	7,2 (d),		76,9	(d),
76,5	(d),		75,5	(d) , 7	5,1 (d),		73,7	(d),
73,6	(d) ,		70,5	(d) , 6	6,4 (τ) ,		63,5	(d) ,
61,5	(x) .		60,9	(x) , 5	0,5 (d),		57,1	(x),
54,7	(d) ,		44,3	(s) . 4	•4,1 (d),		41,7	(d) ,
36,8	(d) ,		35,6	(X) , 3	5,2 (s),		34,0	(x),
32,6	(t).		31,3	(s), 3	0,2 (d),		29,2	(x),
28,9	(x),		28,2	(x) . 1	7,5 (q),		17,3	(q),
14,8	(q),		12,3	(q).
IR (KBr)
3407	(s) ,		1700 (	m) cm-4 .

FAB MS (m/e) s vysokým rozlišením : vypočteno pro ' 777,4037 nalezeno : 777,4108

Analýza pro vypočteno : nalezeno :

Teplota tání ^C39^H62°14 59,22 % C 59,48 % C > 300 °C

H₂0 :

8,41 % H 8,48 % H.

Monohydrátová krystalická forma výše uvedené sloučeniny uvedené v záhlaví byla připravena následujícím způsobem.

Směs obsahující 20 gramů surového produktu, který byl připraven podle shora uvedeného postupu, 600 mililitrů n-propanolu a 400 mililitrů vody byla promíchávána a zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem. K takto získanému výslednému roztoku byly potom přidány 2,0 gramy křemeliny. Nerozpustné podíly byly potom odstraněny při zahřívání této reakční směsi pod zpětným chladičem odfiltrováním. Získaný filtrát byl destilován za atmosférického tlaku na celkový objem 600 mililitrů a potom byl ochlazen na teplotu okolí. Takto získaná výsledná suspenze byla potom granulována po dobu jedné hodiny a takto získaný produkt byl oddělen filtrací. Nesušený rekrystalovaný koláč z výše uvedené rekrystalizace byl suspendován v 500 mililitrech methanolu. Tato suspenze byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin, načež byla ochlazena na teplotu okolí, granulována po dobu 48 hodin a potom byla oddělena odfiltrováním. Produkt byl potom vakuově sušen, čímž byl získán krystalický monohydrát titulní sloučeniny podle příkladu 3.

Výtěžek : 16,1 gramu (81 %) .

Příklady 4-47

Postupem obdobným jako bylo uvedeno výše byly připraveny následující sloučeniny, přičemž se vycházelo ze vhodných výchozích sloučenin.

Příklad 4 (3β,5a,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň-12-on.

Teplota tání Hmotové spektrum

Obecný vzorec vypočteno :

nalezeno > 200 ’C

755 (Μ + Η), 777 (M + Na) ^{: C}39^H62°14 · ^{2 H}2° 59,22 % C 8,41 % H

59,54 % C

8,64 % H.

Příklad 5 (3 β,5 α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání : > 300 °C

Hmotové spektrum : 741 (Μ + H)

Obecný vzorec ' ^C39^H64°13 · °>^{5 H}2° vypočteno : 62,46 % C 8,74 % H nalezeno : 62,31 % C 8,36 % H.

Příklad 6 (3β,5β,25R)- 3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : 61,72 % C nalezeno : 61,76 % C > 300 °C 741 (Μ + H) ^C37^H64°13 h₂o

8,77 % H 9,04 % H.

Příklad Ί (3p,5a,25R)-3-[(β-D-glukuronosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání : > 200 °C

Hmotové spektrum : 615 (M + Na), 637 (M + 2 Na) FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro Cj^H^^0gNa2 : 637,3278 nalezeno : 637,3329.

Příklad 8 (3β , 5α,25R)-3-[(β-D-glukosy1)oxy]spirostaň-12-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 200 °C 593 (M + ^C33^H52°9

64,89 % C 64,46 % C

Η) , 615 (M + Na) • h₂o 8,91 % H 8,62 % H.

Příklad 9 (3β , 5α,25R)-3-[(β-D-galaktosyl)oxy]spirostan-ll-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : 65,38 nalezeno : 65,34 > 200 °C 593 (M + ^C33^H52°9

Η), 615 (M + Na) . 0,75 H₂0 8,89 % H 8,63 % H.

Příklad 10 (3β,5β,25δ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání : > 250 °C

Hmotové spektrum ; 741 (Μ + H)

Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

' ^C39^H64°13 · ^X’⁵ 60,99 % C 8,85 % 60,69 % C 8,90 % h₂o

H

H.

Příklad 11 (3p,5a,25R)-3 -([(β-D-cellobiosyl)oxy]ethoxy)spirostaň.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 250 °C

785 (Μ + H) ^C41^H68°14 ·

60,65 % C 8,81 %

60,53 % C 8,97 % h₂o

H

H.

Příklad 12 (3β,5α,25Η)-3-([(β-D-galaktopyranosyl)oxy]ethoxy)spirostaň

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno ;

225 °C (za rozkladu)

623 (Μ + H) ^C35^H58°9 · ^{1)25 H}2°

65,14 % C 9,45 % H

65,39 % C 9,61 % H.

Příklad 13 (3p,5a,25R)-3-[(β-D-maltosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno ; nalezeno :

230 °C (za rozkladu)

741 (Μ + H) ^C39^H64°13 · ^{2 H}2°

60,30 % C 8,82 % H

60,64 % C 8,84 % H.

Příklad 14 (3β,5α,25R)-3-[(β-D-laktosyl)oxy]spirostan.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 260 °C

741 (Μ + H) ^C39^H64°13

63,22 % C 8,71 % H

62,96 % C 8,65 % H.

Příklad 15 (3β,5α,25Ρ)-3-[(β-D-laktosyl)oxy]spirostaň-12-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : 61,31 % C nalezeno : 61,02 % C

8,31 % H 8,45 % H.

> 260 °C 755 (Μ + H) ^C39^H62°14

Příklad (3β,5α,25R)-3-[^-D-2-acetamido-2-deoxyglukopyranosyl)oxy] spirostan.

Teplota tání : 210 - 212 °C

Hmotové spektrum : 620 (Μ + H)

Obecný vzorec ^{: C}39^H62°14 · ¹’° ^H2° vypočteno : 65,91 % C 9,32 % H 2,20 % N nalezeno : 66,07 % C 9,55 % H 2,26 % N.

Příklad 17 (3β,5a,25R)-3-[(β-D-gentiobiosyl)oxy]spirostan.

Teplota tání : 265 °C (za rozkladu)

Hmotové spektrum : 741 (Μ + H)

Obecný vzorec : C^Hg^O^ . 1,0 vypočteno : 61,72 % C 8,77 % nalezeno : 61,71 % C 8,96 % h₂o

H

H.

Příklad 18 (3p,5a,25R)-3-[(a-L-arabanopyranosy1)oxy]spirostaň

Teplota tání : > 200 °C Hmotové spektrum : 549 (M + Obecný vzorec vypočteno : 68,36 % C nalezeno : 68,30 % C ^C32^H52°7

H) . 0,75 H₂0 9,59 % H 9,64 % H.

Příklad 19 (3β,5α,25R)-3-[(α-D-arabanopyranosyl)oxy]spirostan

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 200 °C 549 (M + ^C32^H52°7

65,73 % C 65,54 % C

H) . 2,0 H₂0

9,65 % H 9,25 % H.

Příklad 20 (3β,5α,25R)-3-[(β-L-xylopyranosyl)oxy]spirostan.

Teplota tání : > 230 °C Hmotové spektrum : 549 (M + Obecný vzorec vypočteno : 68,91 % C nalezeno : 68,52 % C ^C32^H52°7

H) . 0,5 H₂0 9,58 % H 9,36 % H.

Příklad 21 (3p,5a,25R)-3-[(β-L-fukopyranosy1)oxy]spirostan.

Teplota tání :

Hmotové spektrum : Obecný vzorec :

vypočteno : 68,25 nalezeno : 68,62 > 230 °C 561 (M + ^C33^H54°7 % C % C

H) . 1,0 h₂o 9,72 % H 9,53 % H.

Příklad 22 (3β,5α,25R)-3-[(β-D-xylopyranosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 220 °C 549 (M + ^C32^H52°7

66,23 % C 66,32 % C

H) . 1,75 H₂0 9,64 % H 9,31 % H.

Příklad 23 (3β,5α,25R)-3-[(β-D-fukopyranosyl)oxy]spirostan.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 220 °C

563 (M + ^C33^H54°7

69,32 % C 69,32 % C

H) . 0,5 H₂0 9,69 % H 9,78 % H.

Příklad 24 (3β,5α,25Ρ)-3-[(β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan

Teplota tání : > 200 °C

Hmotové spektrum : 579 (Μ + H)

Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :	: C33H54°8 66,12 % C 66,46 % C	. 1,25 H20 9,47 % H 9,26 % H.
Příklad	25
(3β,5α,25R)-3-	[ (3-0^-D-galaktopyranosyl)
pyranosy1)oxy	spirostan.
Teplota tání	: > 200 °C
Hmotové spektrum : 579 (M +	H)
Obecný vzorec	: C38H62°12	• 1 h2°
vypočteno :	62,64 % C	8,78 % H
nalezeno :	62,93 % C	8,66 % H.

Příklad 26 (3p,5a,25S)-3-[(β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostaň.

Teplota tání : > 200 °C Hmotové spektrum : 579 (M + Obecný vzorec vypočteno : 64,51 % C nalezeno : 64,69 % C ^C33^H54°8

H) . 2 H₂0 9,44 % H 9,41 % H.

Příklad 27 (3β,5α,25Κ)-3-[(α-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň-11-on.

Teplota tání : 290 - 292 °C

Hmotové spektrum : 777 (M + Na)

FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro CggH^O^ ^: 755,4218 nalezeno : 755,4163.

Příklad 28 (3β,5α,12β,25Κ)-3-[(β-ϋ-ϋ6ΐ1ο6ίθ3γ1)οχγ]-12-hydroxy

spirostaň-11-on.
Teplota tání Hmotové spektrum	> 200 °C 771 (Μ + Η), 793 (M + Na)

Obecný vzorec :

vypočteno : 60,76 % C 8,10 % H nalezeno : 61,76 % C 8,88 % H.

Příklad 29 (3β,5α,11α,2511)-3-[ (β-D-cellobiosyl) oxy] -11-hydroxy

spirostan.
Teplota tání Hmotové spektrum FAB HRMS (m/e)	> 210 °C 779 (M + Na)

vypočteno pro C-jgHg^O^Na : 779,4194 nalezeno : 779,4138.

Příklad 30 (3β,5α,11β,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-12-hydroxy

spirostan.
Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec	: > 210 °C : 779 (M + Na) : C39H64°14 · H2°

vypočteno : 60,45 % C 8,28 % H nalezeno : 60,41 % C 8,58 % H

Příklad 31 (3β , 5α , 25R)-3-[(β-D-glukopyranosyl)oxy]spirostan-ll-on

Teploxa tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

293 - 295 593 (M + ^C33^H52°9

64,89 % C 64,48 % C °C

H)

H₂0 8,91 % H 8,85 % H.

Příklad 32 (3 β,5α,11β,12β,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-11,12-di(hydroxy)spirostan.

Teplota tání : > 230 °C

Hmotové spektrum ; 773 (Μ + H)

Obecný vzorec : . 2 H₂0 vypočteno : 57,91 % C 8,47 % H nalezeno : 57,87 % C 8,41 % H.

Příklad 33 (3β,5α,11α,12β,25Κ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-11,12-di(hydroxy)spiróstan.

> 230 °C

773 (Μ + H) ^C39^H64°15 · ¹

59,22 % C 8,41

59,27 % C 8,32

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno ;

h₂o % H % H

Příklad 34 (3β,5α,12α,25Ρ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-12-hydroxyspirostan.

Teplota tání	; > 230 °	C
Hmotové spekt	rum ; 757 (M	+	Na)
Obecný vzorec	: C39H64°	14	. 3	h2o
vypočteno ;	57,76 % C		8,70	% H
nalezeno :	57,56 % C		8,61	% H

Příklad 35 (3p,5a,25R)-3-[(β-D-laktosyl)oxy]spirostan-11-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : 62 nalezeno ; 61

Příklad > 270 °C

755 (Μ + H) ^C39^H62°14 · ^{3 H}2° 05 % C 8,28 % H 88 % C 8,14 % H (3β,5α,11α,12α,25Κ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-11,12-di (hydroxy)spirostan.

Teplota tání ; 287 - 288 °C

Hmotové spektrum : 795 (M+H)

FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro CjgHg^O^Na : 795,4143 nalezeno : 795,4164.

Příklad 37 (3β,5α,11α,25Ρ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-11-hydroxyspirostan-12-on.

Teplota tání : > 300 °C

Hmotové spektrum : 771 (Μ + Η), 793 (M + Na)

Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

^{: C}39^H62°15 ²’⁵

57,41 % C 8,28 % 57,38 % C 7,90 % ^H2°

H

H.

Příklad 38 (3β,5α,25R)-3-[^-D-cellobiosyl)oxy]spirostan-11,12-dion

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

244 - 246 °C

769 (Μ + Η), 791 (M + Na) ^C39^H60°15 · ^{4 H}2°

55,70 % C 8,15 % H

55,93 % C 7,99 % H.

Příklad (3β,5α,11β,12α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-11,12-di· (hydroxy)spirostan.

Teplota tání : > 228 - 229 °C

Hmotové spektrum : 773 (Μ + H)

FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro C-^gHg^O-^Na : 795,41429 nalezeno : 795,4164.

Příklad 40 (3β,5α,12α,25Ρ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-12-hydroxyspirostan-11-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 230 °C

771 (Μ + Η), 793 (M + Na) ^C39^H62°15

56,78 % C 56,97 % C

H₂0 8,31 % H 7,80 % H.

Příklad 41 (3p,5a,123,25R)-3-[(3-D-laktosyl)oxy]-12-hydroxyspirostan-ll-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 275 °C

771 (Μ + H) ^C39^H62°15 ·

60,06 % C 8,

59,92 % C 7,

0,5 14 % 89 % h₂o

H

H.

Příklad 42 (3β,5α,25ΙΙ)-3-[ (β-D-maltotriosyl) oxy] spir ostaň -11-on.

> 230 ^eC

939 (M + Na) ^C39^H62°15 · ⁴’⁵

54,15 % C 8,17 %

54,08 % C 7,84 %

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

h₂o

Η

Η.

Příklad 43 (3β,5α,25Ι1)-3-[ (β-D-maltosyl) oxy ] spirostan-ll-on.

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

> 280 °C 755 (Μ + Η) ^C39^H62°14

59,22 % C 59,38 % C

H₂0 8,41 % H 8,13 % H.

Příklad 44 (1α,3β,5α,25Κ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-1-hydroxyspirostaň

Teplota tání : > 280 °C

Hmotové spektrum : 757 (Μ + H)

Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

^C39^H64°14

60,45 % C 60,30 % C

H₂0 8,58 % H 8,21 % H.

Příklad 45 (3£,5a,25R)-3-[(p-D-cellobiosyl)oxy]spirosXan-l-on.

> 250 °C 755 (Μ + H) ^{: C}39^H62°14 - ¹'²

60,32 % C 8,36 % 60,24 % C 8,13 %

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : nalezeno :

h₂o

H

H.

Příklad 46 (3β,5α,25Κ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň-6-on.

Teplota tání : > 200 °C

Hmotové spektrum : 754 (Μ + H)

FAB HRMS (m/e) :

vypočteno pro C^gH^O^ ^: 755,4286 nalezeno : 755,4219.

Příklad 47 (3β,5α,6α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-6-hydroxyspirostaň

Teplota tání Hmotové spektrum Obecný vzorec vypočteno : 59,12 nalezeno > 250 °C 756 (Μ + H) . 2 8,65 ^C39^H64°14

59,23 % C

8,46 h₂o % Η % Η

Příklad

Postup přípravy (3β,5α,11β,25R)-3-[(β-D-cellobiosy1)oxy]11-hydroxyspirostaň-12-onu.

Při provádění postupu podle tohoto příkladu se vycházelo z postupu uvedeného v publikaci Synrhesis, 1973,

790, přičemž podle tohoto provedení byl (3β,5α,11β,25R)3-[(heptaacety1-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan-11-ol-12-on (v množství 240 miligramů, což představuje 0,225 mmolů) rozpuštěn v methanolu (20 mililitrů) a tetrahydrofuranu (10 mililitrů). K tomuto roztoku byl potom přidán roztok kyanidu draselného (v množství 146 mililitrů, což představuje 2,25 mmolů) ve vodě (0,1 mililitru) a v methanolu (5 mililitrů) . Takto získaná výsledná reakční směs byla potom zahřáta na teplotu 80 C a při této teplotě byla udržována po dobu čtyř hodin. Po ochlazení reakční směsi byla tato zkoncentrována do sucha a potom vyčištěna mžikovou chromatografickou metodou (jako elučního činidla bylo použito směsi chloroformu a methanolu v poměru 9:1), čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Teplota tání : 245 - 247 °C.

Hmotové spektrum (m/e) : 771 (P + 1), 793 (P + Na).

Analýza pro vypočteno : nalezeno :

^C39^H62°15 56,70 % C 56,97 % C

H₂0 :

8,31 % H

7,80 % H.

Příprava Al

Postup přípravy (3β,5α,25R)- 3-[(heptaacetyl-a-Dcellobiosyl)oxy]spirostan-11-onu.

Anomerace

Podle tohoto provedení byla kyselina bromovodíková (30 %-ní roztok v kyselině octové, v množství 1,2 mililitru) přidána do roztoku o teplotě místnosti obsahujícího (3p,5a,25R)-3-[(heptaacetyl-α-D-cellobiosy1) oxy]spirostan11-on (v množství 2,0 gramy) v methylenchloridu (v množství 35 mililitrů) , přičemž takto získaná výsledná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu 94 hodin. Tato reakční směs byla potom zpracována pomalým přídavkem nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného (v množství 20 mililitrů). Vzniklá organická vrstva byla potom oddělena, usušena síranem hořečnatým a usušena za použití vakua, čímž bylo získáno 1,637 gramu černé pevné látky. Tato látka byla potom přečištěna opakovaně prováděnou mžikovou chromatografickou metodou (jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylesteru kyseliny octové v poměru 1:1), čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 651 miligramů (33 %) .

¹H NMR (CDC1₃) δ :

5,41 (t, J = 10 Hz, IH), 4,91 (t, J = 8 Hz, IH), 4,49 (komplex, 3H),

5,09 (komplex, 3H),

4,69 (dd, J = 4 & 10 Hz, IH), 4,36 (dd, J = 4 & 13 Hz, IH),

3,99 (m, 3H), 3,40 (m, 3H), 2,22 (s, 2H), 2,07 (s, 3H), 2,00 (s, 3H), 1,97 (s, 3H), 1,02 (s, 3H),

3,67 (m, 2H), 2,45 (m, IH), 2,11 (s, 3H), 2,03 (s, 6H), 1,99 (s, 3H),

0,77 (d, J = 7 Hz, 3H),

2,00 - 0,80 (m, 22H), 0,92 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,69 (s, 3H).

DEPT 13C NMR (CDC13) δ :
210,0 (s)	170,5 (s),	170,3 (s),	170,2	(s)
169,6 (s)	169,3 (s),	169,1 (s) ,	109,2	(s)
100,9 (s)	94,3 (d),	80,6 (d),	78,0	(d) ,
77,0 (d) ,	77,0 (d),	73,1 (d),	71,9	(d) ,
71,8 (d),	71,2 (d),	69,6 (d),	68,1	(d) ,
67,8 (d),	66,9 (d),	64,4 (d),	62,0	(x) ,
61,5 (t) ,	60,7 (d),	57,6 (t),	55,7	(d) ,
45,0 (d),	44,3 (s),	41,8 (d),	36,9	(d) ,
35,5 (t),	35,4 (t),	35,1 (s) ,	32,7	(X) ,
31,3 (t) ,	31,2 (t),	30,2 (d),	28,7	(X) ,
28,0 (t) ,	27,4 (t),	20,9 (q),	20,7	(q).
20,6 (q),	20,5 (q),	17,1 (q),	17,0	(q),
14,2 (q),	12,1 (q).
IR (KBr)	: 1751 (s),	1706 (m) cm-3.
MS (m/e):	1049 (Μ + H),	1071 (M + Na).
Analýza pro ^53^76θ21	• H20 :
vypočteno	: 59,65 % C	7,37 % H
nalezeno	: 59,66 % C	7,00 % H

Teplota tání : 248 - 249 °C.

Příprava Bl

Postup přípravy (3β , 5a , 25R)-3-[ (heptaacetyl^-Dcellobiosyl)oxy]spirostan-11-onu.

Adice volného spirostanu promotovaná fluoridem zinečnatým

Podle tohoto provedení byla suspenze obsahující (3β,5α,25R)-3-hydroxyspirostan-ll-on (v množství 3,0 gramy což představuje 6,97 mmolu) a bezvodý fluorid zinečnatý (v množství 2,88 gramu, což představuje 27,9 mmolu) v suchém acetonitrilu (175 mililitrů), sušena, přičemž bylo odstraněno destilací 75 mililitrů acetonitrilu. Takto získaná suspenze byla potom ponechána ochladit, načež byl přidán heptaacetyl-p-D-cellobiosylbromid (v množství 9,75 gramu, což představuje 13,9 mmolu) a takto získaná suspenze byla potom zahřáta na teplotu 65 °C a při této teplotě byla udržována po dobu 3 hodin. Potom byla tato suspenze ochlazena na teplotu místnosti, načež byl přidán methylenchlorid (v množství 150 mililitrů) a takto vzniklá suspenze byla promíchávána po dobu 10 minut a zfiltrována. Filtrát byl zkoncentrován za použití vakua, čímž bylo získáno 10 gramů surového produktu. Tato látka byla potom rozpuštěna ve směsi chloroformu a methanolu v poměru 8:2, načež byla provedena předběžná adsorpce na silikagelu a čištění mžikovou chromatografickou metodou (jako elučního činidla bylo použito směsi ethylacetátu a hexanu v poměru 1:1, načež následovalo eluování čistým ethylacetátem), čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 6,81 gramu (93 %) .

¹H NMR (CDC1₃) 5 :

5,11	(komplex, 2H),	5,04	(t.	J =	9	Hz,	IH) ,
4,90	(T ,	J = 9 Hz, IH),	4,83	(t,	J =	8	Hz,	IH) ,
4,49	(komplex, 4H),	4,34	(dd,	J	= 4	.5	& 12,5 Hz,
4,04	(t,	J = 13 Hz, IH),	4,03	(ΐ.	J =	11	Hz	, IH) ,
3,72	(ť ,	J = 9,5 Hz, IH),	3,65	(m,	IH)	>
3,56	(m,	IH) ,	3,45	(m,	IH)
2,47	(m,	IH) ,	2,22	(s,	2H)
2,08	(s ,	3H) ,	2,06	(s,	3H)
2,00	(s,	6H) ,	1,99	(s,	6H)	♦
1,96	(s ,	3H) ,	2,00	- 1,	00	(m,	22	Η) ,
0,98	(s.	3H) ,	0,92	(d,	J =	7	Hz,	3H) ,

0,77	(d,	J = 7 Hz, 3H)	0,68	(s, 3H)
DEPT	13C	NMR (CDC13) δ
209,9	(s)	170,5 (s)	, 170,3	(s) ,	170,2 (s)
169,9	(s)	169,8 (s)	169,5	(s) ,	169,2	1 (s)
169,0	(s)	109,2 (s)	100,8	(d) ,	99,4	(d) ,
90,0	(s) ,	80,6 (d),	79,4	(d),	76,6	(d),
75,3	(s) ,	72,9 (d),	72,6	(d) ,	72,5	(d),
71,9	(d) ,	71,8 (d),	71,6	(d) ,	67,8	(s) ,
66,9	(x) ,	64,4 (d),	62,1	(x) ,	61,5	(X),
60,8	(s) ,	60,7 (d),	57,6	(X) ,	55,7	(d),
44,8	(d),	44,3 (s),	41,8	(d),	36,9	(d) ,
35,6	(x) ,	35,2 (s),	34,1	(x),	32,7	(X) ,
31,3	(x) ,	31,2 (t),	30,2	(d),	29,0	(X),
28,7	(X),	28,0 (t),	20,9	(q),	20,7	(q),
20,6	(q).	20,5 (q),	20,5	(q),	17,1	(q).
17,0	(q),	14,2 (q),	12,0	(q) ·
IR (K	Br)	: 1756 (s),	1706 (m)	cm” 1 .
MS (m	/e) :	1049 (Μ + H)	, 1071 (M	+ Na) .

Analýza pro	C53H76°21	H20 :
vypočteno :	59,65 % C	7,37 % H
nalezeno :	59,86 % C	7,25 % H

Teplota tání : 210 - 212 °C.

Analogickým způsobem jako je uvedeno shora byly připraveny následující sloučeniny. Při provádění těchto Příprav B2 - B31 bylo použito vhodných výchozích látek a výše uvedeného obecného postupu přípravy.

Příprava B2 (3β,5α,25R)-3-[(tetraacetyl^-D-galaktosyl)oxy]spirostan12-on.

Příprava B3 (3α,5α,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan

Příprava B4 (3β,5β,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan

Příprava B5 methylester (3β,5α,25R)-3-[(triacetyl^-D-glukuronosyl)oxy]spirostanu.

Příprava B6 (3β,5a,25R)-3-((tetraacetyl^-D-glukopyranosyl)oxy]spirostan-12-on.

Příprava B7 (3 β,5 a,25R)- 3-[(tetraacetyl^-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan-11- on.

Příprava B8 (3β,5α,25δ)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostaň

Příprava B9 (3β,5α,25R)-3-([(heptaacety1-β-D-cellobiosy1)oxy]ethoxy)spirostan.

Příprava BIO (3β,5α,25Β)-3-([(tetraacetyl^-D-galaktopyranosyl)oxy]ethoxy)spirostan.

Příprava Bil (3p,5a,25R)-3-[(heptaacety1-β-D-laktosyl)oxy]spirostan.

Příprava B12 (3β,5α,25Η)-3-[(heptaacety1-β-D-laktosy1)oxy]spirosxan12-on.

Příprava B13 (3p,5a,25R)-3-[(triacetyl-a-L-arabanopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava B14 (3 β , 5α,25R)-3-[(triacetyl-a-D-arabanopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava B15 (3β,5α,25Β)-3-[(triacetyl^-L-xylopyranosyl)oxy]spirostan

Příprava B16 (3β,5α,25R)-3-[(triacetyl^-L-fukopyranosyl)oxy]spirostan

Příprava B17 (3β,5α,25Β)-3-[(triacetyl^-D-xylopyranosyl)oxy]spirostan

Příprava B18 (3β,5α,25Η)-3-[(triacetyl^-D-fukopyranosyl)oxy]spirostan

Příprava B19 (3β,5α,25Η)-3-[(tetraacetyl-β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava B20 (3p,5a,25R)-3-[(hexaacetyl-3-0^-D-galaktopyranosyl-a-Darabanopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava B21 (3p,5a,25S)-3-[(tetraacetyl-β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava B22 (3β,5α,12β,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy] -12hydroxyspirostaň-11- on.

Příprava B23 (3β,5a,11α,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]-11hydroxyspirostan.

Příprava B24 (3β,5α,llβ,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]-lihy dr oxy spir ostaň .

Příprava B25 (3β,5α,25R)-3-[(tetraacetyl^-D-glukopyranosyl)oxy]spirostan-11-on.

Příprava B26 (3β,5α,11β,12β,25Β)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]11,12-di(hydroxy)spirostan.

Příprava B27 (3β,5α,11α,12β,25Ρ)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]11,12-di(hydroxy)spirostan.

Příprava B28 ( 3β,5α ,12α,25R)-3-[(hepxaacety1-β-D-cellobiosyl)oxy]-12hydroxyspirostan.

Příprava B29 (3β,5α,25Ρ)-3-[(heptaacetyl-β-D-laktosyl)oxy]spirostan11- on.

Příprava B30 (3β,5α,25Κ)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]spirostan

12- on.

Příprava B31 (3β,5α,11α,12α,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]11.12- dihydroxyspirostan.

Příprava Β32 (3β,5α,11α,25Κ)-3-[(heptaacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy] -11 hydroxyspirostan-12-on.

Příprava B33 (3β,5α,25R)-3-[(heptaacetyl-p-D-cellobiosyl)oxy]spirostan-11,12-dion.

Příprava B34 (3β,5α,11β,12α,25R)-3-[(heptaacetyl^-D-cellobiosyl)oxy]11.12- di(hydroxy)spirostan.

Příprava B35 (3β,5α,12α,25Κ)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]-12-hydroxyspirostan-11-on.

Příprava B36 (3β,5α,12β,25Ι1)-3-[ (hepraacetyl- β -D - lak rosy 1) oxy] -12hydroxyspirostan-11-on.

Příprava B37 (3β,5α,25Ι1)-3-[ (dodekaacetyl-β-D-maltotriosyl) oxy] spirostan-11-on.

Příprava B38 (3β,5α,25Κ)-3-[(hepraacetyl-β-D-maltosyl)oxy]spirostaň11-on.

Příprava B39 (Ια,3β,5a,25R)-3-[(heptaacetyl^-D-cellobiosyl)oxy]1-hydroxyspirostaň.

Příprava B40 (3β,5α,25R)-3-[(heptaacetyl^-D-cellobiosyl) oxy]spirostan6-on.

Příprava B41 (3β,5α,11β,25R)-3-[(hepraacetyl-β-D-cellobiosyl)oxy]-lihy droxy spirostan- 12- on .

Příprava Cl

Postup přípravy (3β,5α,25R)-3-([(heptaacetyl^-D-laktosyl) oxy]spirostanu.

Adice silylovaného spirostanu promotovaná systémem bromid měďnatý/kyanid měďnatý.

Podle tohoto postupu bylo molekulové síto 4A v práškové formě (v množství 1 gram) přidáno do roztoku, který obsahoval trimethylsilyltigogenin (v množství 1,17 gramu, což představuje 2,4 mmoly) a acetobromlaktozu (v množství 3,36 gramu, což představuje 4,8 mmolu) v dichlormethanu CH2CI2 (15 mililitrů) a methylkyanidu CH^CN (5 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě místnosti. Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána po dobu 15 minut, načež byl přidán kyanid měďnatý Hg(CN)₂ (v množství 2,4 gramu, což představuje 9,6 mmolu) a bromid měďnatý (v množství 3,4 gramu, což představuje 9,6 mmolu) a tato směs byla potom promíchávána při teplotě místnosti po dobu tří hodin. Vzniklá reakční směs byla potom zředěna ethylacetátem (50 mililitrů) a zfiltrována. Filtrát byl promyt 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (tři podíly po 30 mililitrech) a solankou (jeden podíl po 30 mililitrech), načež byl tento podíl usušen (za pomoci síranu sodného Na₂S04), zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua.

Získaný produkt byl potom přečištěn mžikovou chromatografickou metodou (eluční činidlo : 10-20 % EtOAc/CH₂Cl₂), čímž byl získán požadovaný produkt ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek : 400 miligramů.

Hmotové spektrum : 489 (M + H)⁺.

-*-H NMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

5,35	(d,	IH, J	= 1,0 Hz),		5,2	(dd, IH, J = 4,5,	, 4,5 Hz),
5,15	(dd,	IH, J	= 6,0, 5,0	Hz)	♦
4,95	(dd,	IH, J	= 4,5, 1,0	Hz)
4,85	(dd,	IH, J	= 5,0, 4,5	Hz)	»
4,55	(d,	IH, J	= 6,0 Hz),		4,4	(m, 3H),
4,1	(m, 3	H),			3,85	(t, IH, J = 3,0	Hz) ,
3,8	(t, 1	H, J =	4,5 Hz),		3,5	(m, 3H),
3,35	(τ.	IH, J	= 5,0 Hz) ,		2,15	(s, 3H),
2,12	(s,	3H) ,			2,07	(s, 12H),

2,0 (s,	3H) ,	2,0 - 0,5 (m, 27H)
0,98 (d.	, 3H, J = 4,0 Hz),	0,82 (s, 3H),
0,8 (d,	3H, J = 4,0 Hz),	0,73 (s, 3H).

Analogickým způsobem jako je uvedeno shora byly v následujících přípravách C2 - C4 připraveny následující sloučeniny, přičemž bylo použito vhodných výchozích látek a uvedeného obecného postupu.

Příprava C2 (3p,5a,25R)-3-[(heptaacetyl-β-D-maltosyl)oxy]spirostan.

Příprava C3 (3β,5α,25Ρ)-3-[(triacetyl-β-D-2-acetamido-2-deoxyglukopyranosyl)oxy]spirostan.

Příprava C4 (3β,5α,25Κ)-3-[(heptaacetyl-β-D-gentiobiosyl)oxy]spirostan.

Příprava Dl

Postup přípravy (3β,5α,25R)-3-trimethylsilyloxyspirostanu.

Silylace spirostanů.

Podle tohoto provedení byl trimethylsilyltrifluormethansulfonát (v množství 4 mililitry, což představuje 22,1 mmolů) přidáván po kapkách k roztoku obsahujícímu tigogenin (v množství 6 gramů, což představuje 14,4 mmolů) a triethylamin (v množství 6 mililitrů, což představuje 45 mmolů) v dichlormethanu CH₂Cl2 (50 mililitrů). Po 1 hodině byla tato reakční směs zředěna etherem (100 mililitrů) a promyta nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného NaHCOg (dva podíly po 50 mililitrech) a solankou (jeden podíl po 50 mililitrech), přičemž potom byl získaný produkt sušen (za použití síranu sodného Na₂S0₄), zfiltrován a zkoncentrován za použití vakua. Po přídavku methanolu vznikla sraženina, která byla potom zfiltrována a promyta methanolem a usušena, čímž byl získána požadovaná sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky.

Výxěžek	: 6,2 gramu
Teplota	tání : 197	- 198 °C
Hmotové	spektrum :	489 (M + H)+.
NMR (	250 MHz, CDi	Cl3) δ :
4,35 (q,	IH, J = 3,	0 Hz), 3,5	(m, 2H),
3,4 (x,	IH, J = 5,5	Hz), 2,0	- 0,5 (m
1,0 (d,	3H, J = 4,0	Hz), 0,85	(s, 3H)
0,8 (d,	3H, J = 4,0	Hz), 0,75	(s, 3H)
0,1 (s,	9H) .
P ř í p	r a v a	El

Postup přípravy (3β,5α,25R)-3-(2-hydroxyethoxy)spirostanu.

Redukce za použití LAH

Podle tohoto provedení byl lithiumaluminiumhydrid LAH (v množství 0,285 gramu, což představuje 7,5 mmolů) přidán do roztoku ethylesteru kyseliny tigogenin-O-octové (v množství 2,5 gramu, což představuje 4,98 mmolů) v tetrahydrofuranu THF (50 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě 0 °C. Po asi 1 hodině byla tato reakční směs zpracována postupně provedenými přídavky vody (0,285 mililitru), 15 %-ního hydroxidu sodného NaOH (0,285 mililirru) a vody (0,85 mililitru). Takto získaná konečná směs byla potom zředěna etherem (v množství 25 mililitrů) a potom byla usušena síranem hořečnatým MgSO^, zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž byla získána požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek : 2,1 gramu.

Teplota tání : 207 - 208 °C

Hmotové spektrum : 461 (M + H)⁺.

¹H NMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

4,4	(q,	IH, J	= 3,0	Hz) ,	3,7	(m,	2H)
3,6	(m,	2H) ,			3,5	(m,	IH)
3,4	(t.	IH, J	= 5,5	Hz) ,	3,3	(m,	IH)
2,0	- o,	,5 (m,	28H) ,		1,0	(d,	3H,	J = 4,0	Hz) ,
0,85	(S :	, 3H) ,			0,8	(d,	3H,	J = 4,0	Hz) ,

0,75 (s, 3H).

Příprava F1

Postup přípravy ethylesteru kyseliny ((3β,5α,25R)spirostan-3-yl)-0-octové.

Adice katalyzovaná [Rh(OAc)2l2

Podle tohoto provedení byl ethyldiazoacetát (v množství 5,5 mililitru, což představuje 0,048 molu) rozpuštěný ve 30 mililitrech dichlormethanu CH2CI2 přidáván po kapkách během intervalu 1 hodiny k roztoku obsahujícímu tigogenin (v množství 10 gramů, což představuje 0,024 molu) a rhodiumacetátový dimer (v množství 250 miligramů) v dichlormethanu CH2CI2 (250 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě místnosti. Během tohoto přidávání se uvolňoval plyn a po dokončení tohoto přídavku byla takto získaná reakční směs promíchávána po dobu další jedné hodiny. Potom byla získaná reakční směs zředěna hexany (100 mililitrů) a zfiltrována přes vrstvu silikagelu. Filrrát byl zkoncentrován za použití vakua a po přídavku methanolu k takto získanému zbytku vznikla sraženina, která byla zfiltrována a promyta methanolem a potom usušena, čímž byl získán konečný požadovaný produkt uvedený v záhlaví tohoto příkladu ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek : 6,0 gramů.

Teplota tání : 119 - 120 °C

Hmotové spektrum	: 503 (M	+ H) + .
ΧΗ NMR (250 MHz,	cdci3) δ
4,35 (q, IH, J =	3,0 Hz),	4,2 (m, 2H),
4,1 (s, 2H),		3,4 (m, 3H),
2,0 - 0,5 (m, 30H),	0,95 (d, 3H, J = 4,0	Hz)
0,8 (s, 3H),		0,75 (d, 3H, J = 4,0	Hz)

0,72 (s, 3H).

Příprava G1

Postup přípravy (3β,5α,11β,12α,25R)-spirostan-3,11,12triolu.

(3β,5α,11α,25Ρ)-11,12-dibrom-3-acetoxyspirostan-12-οη :

Tato sloučenina byla synteticky připravena z (3β,5α,25R)-3-acetoxyspirostan-12-onu, přičemž bylo použito postupu publikovaného v literatuře, viz. J. Chem. Soc., 1956, 4344.

(3β , 5α,11α,12β,25R)-11,23-dibromspirostan-3,12-diol :

Podle tohoto postupu byl (3β,5α,11α,25R)-11,23dibrom-3-acetoxyspirostan-12-οη (v množství 20,00 gramů; azeotropicky sušený s toluenem) rozpuštěn v tetrahydrofuranu

THF (v množství 600 mililitrů), přičemž takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu -78 ° C. K této reakční směsi byl potom pomalu přidáván lithiumaluminiumhydrid (v množství 96,0 mililitrů ve formě 1 M THF roztoku) a takto připravená reakční směs byla potom promíchávána při teplotě -78 °C po dobu 2 hodin a při teplotě 0 °C po dobu 0,5 hodiny. Za pomoci kanyly byla tato reakční směs opatrně převedena do promíchávaného 3 M vodného roztoku chloridu amonného (200 mililitrů). Vzniklá organická fáze byla oddělena, spojena s tetrahydrofuranovými promývacími podíly pevných zbytků a nakonec bylo provedeno zkoncentrování, čímž byla připravena konečná titulní sloučenina.

(3p,5a,l^,12p,25R)-23-brom-ll,12-epoxyspirostan-3-ol :

Při provádění tohoto postupu bylo použito metody, která je obdobná metodě popsané v publikaci Helv. Act.

Chim., 1953, 36., 1241. Podle tohoto postupu byl (3p,5a,lla,12p,25R)-ll,23-dibromspirostan-3,12-diol (v množství 18,08 gramu) rozpuštěn v pyridinu (500 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě místnosti, a potom byla tato reakční směs zpracována oxidem stříbra (v množství 70,0 gramů). Výsledná reakční směs byla potom promíchávána v tmavém prostředí po dobu 71 hodin. Tato reakční směs byla potom zfiltrována a pevný podíl byl promyt etherem a potom chloroformem. Promyté podíly byly potom spojeny s filtrátem a tento spojený podíl byl potom zkoncentrován. Výsledná pevná látka byla potom přečištěna mžikovou chromatografickou metodou (jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 1:1), čímž bylo získáno 12,2 gramu směsi titulní sloučeniny a (3β,5α,25R)-23-bromspirostan-3-ol-12-onu v poměru 1 : 1.

Dalším chromatografickým zpracováním (za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 7 : 3 jako elučního činidla) byla získána čistá požadovaná titulní sloučenina.

(3p,5a,llp,12a,25R)-23-brom-12-(trichloracetoxy)spirostan3,11-diol ;

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, přičemž při tomto postupu byl (3β,5α,11β,12β,25R)-23-brom-ll,12epoxyspirostan-3-ol zpracováván kyselinou trichloroctovou v toluenu při teplotě místnosti po dobu 3 dní, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11β,12α,25Ρ)-23-bromspirostan-3,11,12-triol :

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, přičemž při tomto postupu byl (3β , 5α,11β,12α,25R)-23-brom-12-(trichloracetoxy)spirostan-3,11-diol zmýdelněn hydroxidem sodným ve vodě a ethanolu, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11β,12α,25R)-spirostan-3,11,12-triol :

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, přičemž při tomto postupu byl (3β,5α,11β,12α,25R)-23-brom-12-(trichloracetoxy)spirostan-3,11-diol redukován zinkem a kyselinou octovou, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Příprava G2

Postup přípravy (3β,5α,11β,12α,25R)-spirostan-3,12-diol11-onu.

(3β,5a,11β,12a,25R)-3,12-di(acetoxy)spirostan-11-ol :

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v J. Chem. Soc., 1956, 4330, přičemž při tomto postupu byl (3β,5α,11β,12α,25R)-spirostan-3,11,12-triol (viz příprava Gl) selektivně acetylován anhydridem kyseliny octové v přítomnosti pyridinu, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3p,5a,12a,25R)-3,12-di(acetoxy)spirostan-11-on :

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v Org. Syn. 1976, 55, 84, přičemž při tomto postupu byl (3β,5α,11β,12α,25R)-3,12-di(acetoxy)spirostanll-ol oxidován oxidem chromovým v přítomnosti pyridinu v methylenchloridu, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

(3p,5a,12a,25R)-spirostan-3,12-diol-11-on :

Při přípravě této sloučeniny bylo použito postupu popsaného v Syn. 1973, 790, přičemž při tomto postupu byl (3β,5α,12α,25R)-3,12-di(acetoxy)spirostan-ll-on zmýdelněn kyanidem draselným ve vodě, methanolu a tetrahydrofuranu, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

Příprava G3

Postup přípravy (3β,5α,11β,25R)spirostan-3,11-diolu.

(3β,5α,11β,25R)spirostaň-3,11-diol :

Podle tohoto postupu byl (3β,5α,25R)spirostan-3-ol11-on (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, VI nebo Steraloids lne., Vilton, N.H., nebo viz. Příprava G13) převeden na požadovanou titulní sloučeninu redukcí provedenou lithiumaluminiumhydridem v tetrahydrofuranu THF při teplotě místnosti, přičemž bylo použito postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc., 1951, 73_, 1777.

Příprava G4

Postup přípravy (3β,5α,11α,25R)spirostan-3,11-diolu.

(3β,5α,11α,25R)spirostan-3,11-diol :

Podle tohoto postupu byl (3β,5α,25R)spirostan-3-ol11-οη (Aldrich Chemical Company, Milwaukee, VI nebo Steraloids lne., Vilton, N.H., nebo viz. Příprava G13) převeden na požadovanou titulní sloučeninu redukcí provedenou za použití lithia a amoniaku, přičemž bylo použito postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc. , 1953, 75, 1282.

Příprava G5

Postup přípravy (3β,5α,11β,12β,25R)spirostan-3,11,12triolu.

(3β,5α,11β,12β,25R)spirostan-3,11,12-triol :

Podle tohoto postupu byl (3β,5α,12β,25R)3,12-di(acetoxy)spiróstan-11-on (dodaný firmou Steraloids lne., nebo viz. Příprava G13) převeden na požadovanou titulní sloučeninu redukcí provedenou za pomoci lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu THF při teplotě místnosti, přičemž bylo použito postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc., 1951, 73, 1777.

Příprava G6

Postup přípravy (3β,5α,11α,12β,25R)spiróstan-3,11,12triolu.

(3β,5α,12β,25Ρ)spiróstan-3,12-diol-ll-on :

Podle tohoto postupu byl (3β,5α,12β,25R)3,12-di(acetoxy)spirostan-ll-on (dodaný firmou Steraloids lne., nebo viz. Příprava G13) zmýdelněn uhličitanem draselným ve vodě, methanolu a tetrahydrofuranu THF, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11α,12β,25R)spiróstan-3,11,12-triol :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,12β,25R)spirostan3,12-diol-ll-on převeden na požadovanou titulní sloučeninu redukcí za použití lithia a amoniaku, přičemž bylo použito postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1953, 75, 1282.

Příprava G7

Postup přípravy (3β,5α,12α,25R)spiróstan-3,12-diolu.

(3β,5α,12α,25R)spiróstan-3,12-diol :

Postup podle tohoto provedení byl prováděn stejným způsobem jako je uvedeno v J. Am. Chem. Soc., 1954, 76 ,

4013, přičemž při provádění tohoto postupu byl (3β,5α,25R)spirostan-3-ol-12-on redukován za pomoci lithiumaluminiumhydridu v etheru, čímž byla získána směs alkoholů obsahujících 12 atomů uhlíku, ze které byla isolována požadovaná sloučenina uvedená v záhlaví.

Příprava G8

Postup přípravy (3β,5α,25R)spirostan-3-ol-ll,12-dionu.

(3β,5α,12β,25R)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan12-ol-ll-on :

Postup podle tohoto provedení byl prováděn stejným způsobem jako je uvedeno v J. Am. Chem. Soc., 1972, 94, 6190, přičemž při provádění tohoto postupu byl (3β,5α,12β,25R)spírostan-3,12-diol-ll-on (viz Příprava G6) silylován t-butyldimethylchlorsilanem a imidazolem v dimethylformamidu DMF, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,25R)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan11,12-dion :

Při přípravě výše uvedené sloučeniny bylo použito stejného postupu jako je uvedeno v Org. Syn. , 1976, 5_5, 84, přičemž podle tohoto provedení byl (3β,5α,12β,25R)-3(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan-12-ol-ll-on oxidován oxidem chromovým v přítomnosti pyridinu v methylenchloridu, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3p,5a,25R)spirostan-3 -ol-11,12-dion :

Při přípravě výše uvedené sloučeniny bylo použito stejného postupu jako je uvedeno v J. Am. Chem. Soc., 1972,

94, 6190, přičemž podle tohoto provedení byl (3β,5α,25R)- 3(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan-11,12-dion desilylován za použití kyseliny fluorovodíkové v acetonitrilu, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Příprava G9

Postup přípravy (3β,5α,11β,25R)spirostan-3 , ll-diol-12-onu.

(3β,5α,11β,12β,25R)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan11, 12-diol :

Podle tohoto postupu byl (3β,5a,12β,25R)spirostan3-(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan-12-ol-ll-on ( viz. Příprava G8) převeden na požadovanou titulní sloučeninu redukcí provedenou za použití lithiumaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu THF při teplotě místnosti, přičemž bylo použito postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc., 1951, 735, 1777.

(3β,5α,11β,12β,25Κ)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)-12acetoxyspirostan-ll-ol :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11β,12β,25R)-3(t-butyldimethylsilyloxy)spirostan-11,12-diol selektivně acetylován anhydridem kyseliny octové, pyridinem a dimethylaminopyridinem v prostředí methylenchloridu, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11β,12β,25Κ)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)-11(trimexhylsilyloxy)-12-acexoxyspirostan :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11β,12β,25R)-3(x-buxyldimexhylsilyloxy)-12-acexoxyspirostan-11-ol silylován xrimexhylsilylxriflátem (xrifláx je zkrácený název pro trifluormexhylsulfonát) a 2,6-lutidinem v prostředí methylenchloridu, přičemž bylo použito postupu popsaného v Tetrahedron Letters, 1981, 22, 3455.

(3β,5α,11β,12β,25Ρ)-3-(t-butyldimethylsilyloxy)-11(trimethylsilyloxy)spirostan-12-ol :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11β,12β,25R)-3(t-butyldimethylsilyloxy)-11-(trimethylsilyloxy)-12acetoxyspirostan deacetylován zpracováním s lithiumaluminiumhydridem v tetrahydrofuranu THF, po kterém následoval opatrný přídavek vodného roztoku chloridu amonného. Takto získaná titulní sloučenina trpěla migrací silylových skupin na polohách 11 a 12 na silikagelu a vzhledem k výše uvedenému musela být použita nečištěná.

(3β,5α,11β,25Ρ)-3 - (t-butyldimethylsilyloxy)-11(trimethylsilyloxy)spirostan-12-on :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11β,12β,25R)-3(t-butyldimethylsilyloxy)-11-(trimethylsilyloxy)-12-ol oxidován oxidem chromovým a pyridinem v prostředí methylenchloridu, přičemž bylo použito postupu podle Org. Syn., 1976, 55, 84, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11β,25R)-spirostan-3,ll-diol-12-on :

Podle tohoto postupu byla požadovaná titulní sloučenina synteticky připravena z (3β,5α,11β,25R)-3(t-butyldimethylsilyloxy)-11-(trimethylsilyloxv)spirostan-12-onu, který byl desilylován zpracováním s kyselinou fluorovodíkovou v acetonitrilu, přičemž bylo použito postupu uvedeného v J. Am. Chem. Soc., 1972, 94,

6190. S touto titulní sloučeninou je nutno opatrně zacházet neboř je nebezpečí přesmyku na (3β,5α,12β,25R)-spirostan3,12-diol-ll-on jestliže se tato sloučenina vystaví účinku bazické látky.

Příprava G10

Postup přípravy (3β,5α,11α,25R)spirostan-3,11-diol-12-onu.

(3β,5α,11α,12β,25Ρ)-3,11-di(acetoxy)spirostaň-12-on :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11α,12β,25R)spirostan-3,11,12-triol (viz příprava G6) acetylován, přičemž bylo použito postupu popsaného v J. Am. Chem. Soc. , 1955, 77, 1632, čímž byla získána směs acetátů, ze které bylo možno isolovat požadovanou titulní sloučeninu.

(3β,5α,11α,25R)-3,11-di(acetoxy)spirostan-12-on :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11α,12β,25R)3,11-di(acetoxy)spirostan-12-ol oxidován oxidem chromovým a pyridinem v prostředí methylenchloridu, přičemž bylo použito postupu popsaného v Org. Syn. , 1976, 55, 84, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

(3β,5α,11α,25R)-spirostan-3,ll-diol-12-on :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,11α,25R)-3,lidi (acetoxy)spirostan-12-οη zmýdelněn za použití methoxídu sodného v methanolu v prostředí tetrahydrofuranu THF, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

Příprava Gll

Postup přípravy (3β,5α,11α,12α,25R)spirostan-3,11,12triolu.

(3β,5α,25Ρ)spirostan-3-ol-12-tosylhydrazon :

Podle tohoto provedení byl (3β,5α,25R)-spirostan3-ol-12-on (v množství 8,00 gramů) rozpuštěn v ledové kyselině octové (200 mililitrů) a tato reakční směs byla zahřáta na teplotu 50 °C. Potom byl přidán paratoluensulfonylhydrazid (v množství 6,928 gramu), načež byl tento roztok promícháván při teplotě 50 °C po dobu 30 minut. Po dalších dvou hodinách promíchávání této reakční směsi při teplotě místnosti byla přidána voda (200 mililitrů). Tímto způsobem vznikla pevná látka, která byla oddělena, promyta vodou (100 mililitrů), usušena, triturována refluxujícím acetonem (300 mililitrů), zfiltrována za horka a potom usušena, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 3,903 gramu.

(3β,5α,25R)spirost-ll-en-3-ol :

Podle tohoto provedení byla směs obsahující (3β,5α,25R)-spirostan-3-ol-12-tosylhydrazon (v množství 9,100 gramu) a methoxid sodný (v množství 8,379 gramu)

- 97 v dimethylfořmamidu DMF (200 mililitrů) zahřáta na teplotu 150 °C, přičemž při této teplotě byla udržována po dobu 35 minut, načež byla ochlazena na teplotu místnosti. Takto připravená reakční směs byla potom nalita do lázně ledu a vody (1200 mililitrů), přičemž výsledná suspenze byla zfiltrována. Pevný podíl byl oddělen a promyt vodou (100 mililitrů), sušen na vzduchu a rozpuštěn v methylenchloridu (700 mililitrů). Takto získaný roztok byl potom promyt vodou (ve formě dvou podílů po 200 mililitrech), usušen pomocí síranu hořečnatého MgSO^ a zkoncentrován, čímž byla získána bílá pevná látka. Po zpracování této látky mžikovou chromatografickou metodou byl získán požadovaný produkt uvedený v záhlaví.

Výtěžek : 2,384 gramu.

Teplota tání : 179-181 °C (literární údaj je 188-192 °C, viz J. Am. Chem. Soc., 1954, 76_, 4013).

(3p,5a,lla,12a,25R)spirostan-3,11,12-triol :

Podle tohoto provedení byl (3β,5a,25R)-spirost-11-en3-ol oxidován na požadovanou titulní sloučeninu oxidem osmičelým a N-methylmorfolin-N-oxidem ve vodě, t-butanolu a acetonu, přičemž bylo použito postupu uvedenému v Tetrahedron Letters, 1976, 1973.

Příprava G12

Postup přípravy (3β,5α,12β,25R)spirostan-3,12-diol-ll-onu.

(3β,5α,11β,25R)-ll-bromspirostan-3-ol-12-on :

Podle tohoto provedení bylo použito reaktoru se skleněným vyložením, do kterého bylo vloženo 189,27 litrů methanolu, přičemž pod hladinu tohoto methanolu byl přiváděn plynný chlorovodík, který zde byl rozptylován, v množství 7,7 kilogramu (5,0 ekvivalentů). Po dokončení tohoto rozptylování byl do tohoto reaktoru přidán (3P,5a,25R)spirostan-3-ol-12-on v množství 18,8 kilogramu (což představuje 42,2 molu), dále 189,27 litrů methanolu a 37,85 litru methylenchloridu. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 10 °C, načež byl přidán roztok obsahující 8,4 kilogramu bromu (což představuje 52,7 molů, neboli 1,25 ekvivalentu) v 37,85 litrech methylenchloridu, přičemž tento přídavek byl prováděn v intervalu dvou hodin a za současného udržování teploty na přibližně 10 °C. Po dokončení tohoto přídavku byla takto získaná reakční směs ponechána ohřát na teplotu místnosti a potom byla promíchávána po dobu 2 hodin. Chromatografřekou analýzou v tenké vrstvě (neboli metodou TLC) bylo zjištěno, že reakce proběhla úplně.

V dalším postupu byla tato reakční směs zředěna přídavkem 189,27 litrů vody a tato reakční směs byla promíchávána po dobu 10 minut. Po oddělení vrstev byla vodná vrstva extrahována dvakrát 113,56 litry methylenchloridu. Uvedené tři organické extrakty byly spojeny a tento spojený podíl byl promyt dvakrát 113,56 litry vody a jednou 113,56 litry nasyceného roztoku solanky, načež byla tato reakční směs usušena za pomoci 7,0 kilogramů síranu hořečnatého. Použité sušící činidlo bylo potom odstraněno odfiltrováním na Lapp filtru o rozměru 76,2 centimetru, načež následovalo promytí 11,35 litry methylenchloridu. Takto získaný filtrát a spojené promývací podíly byly spojeny a tento spojený podíl byl potom destilován při atmosférickém tlaku na celkový objem 26,5 litru. Potom následovaly dva přídavky methanolu po 37,85 litrech, přičemž následovalo opět destilování. Po dosažení konečného objemu < 37,85 litrů byla taxo reakční směs ochlazena na teplotu místnosti. Výsledná suspenze byla granulována po dobu 2 hodin, zfiltrována na filtru Lapp o rozměru 76,2 centimetru a filtrační koláč byl promyt dvakrát 11,35 litry methanolu. Po vakuovém usušení tohoto filtračního koláče při teplotě v rozmezí od 45-50 °C bylo získáno 12,6 kilogramu (výtěžek 58,6 %) požadované titulní sloučeniny. ··.

(3β,5α,12β,25ϊΟ -spirostaň-3,12-diol-ll-on :

Podle tohoto postupu bylo použito reaktoru se skleněným vyložením, do kterého bylo přidáno 12,4 kilogramu (3β,5α,11β,25R)-ll-bromspirostan-3-ol-12-onu (což odpovídá 24,34 molu), dále 123,8 litrů t-butanolu, 123,8 litrů vody a 7,5 kilogramu (což představuje 189 molu, neboli 7,75 ekvivalentu) hydroxidu sodného ve formě pelet. Takto připravená reakční směs byla potom zahřáta na teplotu varu pod zpětným chladičem, což bylo provedeno v intervalu 1,5 hodiny, a při této teplotě varu pod zpětným chladičem byla tato reakční směs udržována po dobu 4,5 hodiny (teplota v reakčním prostoru byla 83 °C) , načež následovalo zchlazení na teplotu místnosti. Chromatografickou analýzou v tenké vrstvě (neboli metodou TLC) bylo zjištěno, že reakce proběhla úplně.

Tato reakční směs byla potom podrobena destilování za účelem odstranění t-butanolu. Tato destilace byla prováděna jak vakuovým způsobem tak při atmosférickém tlaku. Po zkoncentrování bylo přidáno 123,8 litru vody. Po odstranění t-butanolu byla vodná suspenze ochlazena na teplotu místnosti a granulována po dobu 2 hodin. V dalším postupu byla tato suspenze zfiltrována na filtru Lapp o rozměru

76,2 centimetru, přičemž filtrační koláč byl promyt dvakrát

100

11,36 litry vody a potom byl sušen vzduchem při teplotě 60 °C. Tímto shora uvedeným způsobem bylo připraveno 11,1 kilogramu požadované titulní sloučeniny.

Příprava G13

Postup přípravy (3β,5α,25R)spirostan-3-ol-11-onu.

(3β,5α,12β,25R)-3,12-diacetoxyspirostan-ll-on :

Podle tohoto provedení bylo použito reaktoru se skleněným vyložením, do kterého bylo vloženo 98,4 litrů pyridinu, 98,4 litrů anhydridu kyseliny octové a 11,0 kilogramů (3β,5α,12β,25R)-spirostan-3,12-diol-ll-onu (viz Příprava G12). Tato reakční směs byla potom zahřívána pod zpětným chladičem při teplotě varu po dobu 2 hodin (teplota v reakčním prostoru byla 128 °C), načež byla ponechána ochladit na teplotu místnosti. Takto získaná reakční směs byla potom destilována za použití vakua na celkový objem 56,78 litrů (teplota v reakčním prostoru během provádění destilace byla přibližně 45 °C) . Takto získaná suspenze byla potom zředěna 94,63 litry kyseliny octové a potom byla tato reakční směs opět destilována za použití vakua na celkový objem 56,8 litru (teplota v reakčním prostoru byla přibližně 80 °C). Tato reakční směs byla potom zředěna 329,3 litry vody a potom byla ochlazena na teplotu místnosti. Po 5-ti hodinovém granulování byla požadovaná titulní sloučenina isolována odfiltrováním na filtru Lapp o rozměru 76,2 centimetrů, načež následovalo promývání vodou v množství 11,36 litrů. Filtrační koláč byl potom sušen při teplotě 60 °C za použití vakua, čímž bylo získáno 12,2 kilogramu požadovaného produktu (výtěžek 93,3 %) .

101 (3β,5α,25β.) - spirostan-3-ol-11-on :

Podle tohoto postupu bylo použito korozivzdorného ocelového reaktoru, který byl ochlazen na teplotu -80 °C zavedením kapalného dusíku do vnitřních spirál umístěných v tomto reaktoru. Do tohoto reaktoru byl potom postupně přidáván amoniak v celkovém množství 54,5 kilogramu (80 litrů, což představuje 3,200 molu, neboli 170 ekvivalentů).

Současně s tím, jak probíhalo dávkování amoniaku, bylo do reaktoru se skleněnou výplní přivedeno 10,0 kilogramů (3β,5α,12β,25R)-3,12-diacetoxyspirostan-11-onu (což představuje 18,84 molů) a 151,4 litrů tetrahydrofuranu THF. Takto připravený roztok byl potom destilován při atmosférickém tlaku na konečný objem reakční směsi 98,4 litru.

Po dokončení přídavku amoniaku bylo přidáno 2,8 vápníkových kousků (69,0 gramatomů, což představuje 3,7 ekvivalentu), což bylo provedeno v intervalu 30 minut, přičemž teplota v reakčním prostoru byla udržována na -50 °C. Po dokončení tohoto přídavku byl přidán výše uvedený roztok (3β,5α,12β,25R)-3,12-diacetoxyspirostan-ll-onu v tetrahydrofuranu THF, což bylo provedeno během intervalu 20 minut (teplota v reakčním prostoru byla udržována na konci tohoto přidávání na -35 °C), načež bylo provedeno promytí 3,8 litry tetrahydrofuranu THF. Tato reakční směs byla potom promíchávána po dobu 30 minut při teplotě pohybující se v rozmezí od -35 °C do -40 °C. Při dosažení této teploty v rozmezí od -35 °C do -40 °C bylo přidáno 3,33 litrů brombenzenu (4,98 kilogramů, což představuje 31,7 molu, neboli 1,68 ekvivalentu) a potom 3,33 litru vody.

102

Po provedení tohoto přídavku byla zahájena destilace za účelem odstranění amoniaku z tohoto reaktoru. Toto oddestilovávání bylo směrováno do vodního skrubru. Po odstranění veškerého amoniaku byla reakční směs (nyní o teplotě 24 °C) přemístěna do reaktoru se skleněnou výplní, načež následovalo promytí pomocí 15,1 litry tetrahydrofuranu THF. Spojený podíl roztoku a promývacího podílu byl potom destilován za použití vakua za vzniku hustého oleje.

K tomuto podílu bylo potom přidáno 132,5 litru methanolu a 3,3 kilogramu (což představuje 59 molů) hydroxidu draselného ve formě pelet. Tato reakční směs byla potom zahřívána při teplotě varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny, načež byla ochlazena a potom bylo přidáno 10 litrů kyseliny octové a 166,5 litru vody. Tato suspenze byla potom dále ochlazena na teplotu místnosti a granulována po dobu 1 hodiny. Takto získaná požadovaná titulní sloučenina byla potom oddělena odfiltrováním na filtru Lapp o rozměru 76,2 centimetru, načež následovalo promývání 18,9 litry směsi vody a methanolu v poměru 3:1. Získaný produkt byl usušen za použití vakua při teplotě 55 °C, přičemž tímto shora uvedeným způsobem bylo získáno 7,05 kilogramu požadovaného produktu (výtěžek 86,9 %).

Příprava G

Fyzikální hodnoty.

V případě všech (3β,5α,25R)-spirostan-3-olů, které jsou uvedeny v těchto přípravách G (viz následující tabulka č. 1), byly dosaženy příznivé hodnoty pokud se týče hmotového spektra (MS) a infračervené spektroskopické analýzy (IR). Různé dioly a trioly bylo možno odlišit metodou protonové NMR (viz tabulka č. 2).

103

TABULKA č. 1

Hodnoty získané při hmotové spektroskopické analýze a infračervené spektroskopické analýze.

«	Sloučenina	Molekulový vzorec	LSMIS zákl.	Hodnoty IR rezonance (cm-·*·, intenzita,
			ion	rozpouštědlo)
			(m/z)

lla-ol	C27H44°4	433	3575 3440	(m) (m)	1 (CHCI3
11β-ο1	C27 H44°4	433	3560	(m)
			3425	(m)	(CHC13
12a-ol	C27H44°4	433	3590	(m)
			3420	(m)	(CHC13
12β-ο1	C27H44°4	433		-

11α,12a-diol	C27H44°5	449	3427	(m)	(KBr)
11a,12β-Ηίο1	C27 H44°5	449	3550	(m)	>
			3450	(m)	(CHC13)
11β,12a-diol	C27H44°5	449	3441	(m)	(KBr)
11β , 12β-Ηϊο1	C27 H44°5	449	3600	(m)
			3450	(m)	(CHCI3)

104

TABULKA č. 1 (pokračování)

Sloučenina	Molekulový	LSMIS	Hodnoty IR rezonance
	vzorec	zákl.	(cm-'*', intenzita,
		ion	rozpouštědlo)
		(m/z)

lla-ol-12-on	C27H42°5	447	3515 1705	(m) , (s)	► (KBr)
ΙΙβ-οΙ-12-οη	C27H42°5	447	3450	(m) .	►
			1712	(s)	(KBr)
12a-ol-ll-on	C27H42°5	447	3410	(m) ,
			1706	(s)	(KBr)
12β-ο1-11-οη	C27H42°5	447	3475	(m) ,
			1708	(s)	(CHCI3)

11,12-dion	C27H40°5	445	3600 1700 1605	(w) , 3400 (m) (w) , 1670 (s) (m) (CHCI3)1
11-on	C27H42°4	431	3600 1705	(w), 3450 (m) (s) (CHC13)

- IR hodnoty naznačují, že tato sloučenina snadno tautomerizovala na enolketonovou formu v CHCI3.

105

TABULKA č. 2

Hodnoty analýzy pomocí protonové nukleární magnetické rezonance^

Sloučenina	Píky	> 2 ppm
lla-ol	3,90	(ddd, 6,6 & 4 Hz, IH)	, 2,26 (dt,
	13 &	14, IH)
11β-ο1	4,22	(br s, IH)
12a-ol	3,67	(s, IH), 2,37 (dd, 8	& 7 Hz, IH)
12β-ο1	3,26	(dd, 10 & 4 Hz, IH)
11a,12a-diol	3,91	(m, IH), 3,56 (d, 3H,	IH) ,	2,45 (dd,
	9 & 7	Hz, IH)
11a,12β-άίο1	3,55	(m, IH), 3,03 (d, 8H,	IH) ,	2,21 (dt,
	12 &	4 Hz, IH)
11β,12a-diol	4,12	(br s, IH), 3,55 (d,	2 Hz,	IH) ,
	2,36	(dd, 9 & 7 Hz, IH)
11β , 12β^ϊο1	4,07	(br s, IH), 3,13 (d,	3 Hz,	IH)
lla-ol-12-on	3,72	(m, IH), 2,39 (dt, 13	& 4	Hz, IH)
11β-ο1-12-οη	3,96	(m, IH), 2,2 (m, IH)

12a-ol-ll-on

12β-ο1-11-οη

3,51 (s, IH), 2,57 (dd, 8 & 7 Hz, IH),

2,2 (komplex, 7H)

3,78 (s, IH), 2,39 (dt, 13 & 4 Hz, IH) , 2,1 (m, 2H)

106

Všechny analýzy byly prováděny v CDCI3 s výjimkou Ιΐβ-ol-12-onu, kde byl použit DMSO-dg. Rovněž byly pozorovány píky ro H₁₆, H₃, H_26eq a Η_26&χ při > 2ppm.

V CDC1₃ byly tyto píky pozorovány při :

4,37 (ddd, J=9,9 a 7 Hz, IH), 3,56 (heptet, J=4 Hz, IH), 3,45 (ddd, J=10,6 a 2 Hz, IH) a 3,35 (t, J=ll Hz, IH) .

Příprava Postup přípravy (5a

Hl

25R)-spirostan-3-onu.

Podle tohoto provedení byl pyridiniumchlorchroman (PCC) přidán ke směsi obsahující tigogenin (v množství 50,00 gramu, což představuje 120,0 mmolů) a celit (160 gramů) v dichlormethanu CH₂C1₂ (1000 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě 0 °C. Teplota reakční směsi byla potom ponechána zvýšit na teplotu okolí a potom byla tato reakční směs promíchávána po dobu 5 hodin. V dalším postupu byla reakční směs zředěna 1000 4 mililitry diethyletheru Et₂O a potom byla zfiltrována přes silikagelovou vrstvu. Tato vrstva byla potom promyta dalšími 6000 mililitry diethyletheru Et₂0. Získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 45,00 gramů (90,4 %).

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ 4,38 (q, J = 7 Hz, IH), 2,20 - 2,45 (m, 3H),

1,02 (s, 3H),

0,76 (s, 3H),

3,40 (m, 2H),

0,70 - 2,14 (m, 36H) , 0,96 (d, J = 7 Hz, 3H), 0,76 (d, J = 7 Hz, 3H).

107

Hmotové spektrum: 415 (M + H) ⁺

Teplota tání : 209 - 211 °C.

Příprava H2

Postup přípravy (2α,5α,25R)-2-bromospirostan-3 - onu.

Podle tohoto příkladu byla směs, která obsahovala (5α, 25R)-spirostan-3-on (v množství 1,00 gram, což představuje 2,41 mmolu) a tetrahydrofuran (10 mililitrů, ochlazena na teplotu -78 °C, což bylo provedeno pod atmosférou dusíku. Potom byl přidán brom (v množství 0,39 gramu, což představuje 2,41 mmolu) a tato reakční směs byla potom postupně ponechána ohřívat na teplotu místnosti. Po třech hodinách byla tato reakční směs zpracována přídavkem nasyceného roztoku hydrogensiřičitanu sodného. Tato reakční směs byla potom zředěna ethylesterem kyseliny octové, potom byla promyta nasyceným roztokem hydrogensiřičitanu sodného (lx) , nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného (lx) a solankou (lx) a potom byla sušena (za použití síranu sodného), zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua. Po přídavku etheru se vytvořila sraženina, která byla zfiltrována a promyta hexany, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 1,20 gramu (85 %) .

^XH NMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

4,75	(q,	J = 7	Hz,	IH) ,	4,40	(q, J = 7	Hz,	IH) ,
3,40	(m,	2H) ,			2,64	(q, J = 6	Hz,	IH) ,
2,40	(m,	2H) ,			0,70	- 2,55 (m,	, 34H),
1,10	(s ,	3H) ,			0,96	(d, J = 7	Hz,	3H) ,
0,80	(d,	J = 7	Hz,	3H) .
Hmotové	spektrum:	493 (M + H)+.

108

Příprava H3

Postup přípravy (5a,25R)-spirost-1-en-3-onu.

Podle tohoto postupu byla směs, která obsahovala bromid lithný (v množství 0,700 gramu, což představuje 8,06 mmolu), uhličitan lithný (v množství 1,20 gramu, což představuje 16,24 mmolu) a bezvodý Ν,N-dimethylformamid (30 mililitrů), zahřáta pod atmosférou dusíku na teplotu 95 °C. K této směsi byl potom přidán (2α,5a,25R)-2bromspirostan-3-on (v množství 4,00 gramy, což představuje 8,11 mmolu). Takto získaná reakční směs byla potom promíchávána při teplotě 130 °C po dobu 3 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byla potom tato reakční směs zředěna ethylacetátem, potom byla promyta vodou (3x) a solankou (lx), načež byla sušena (za použití síranu sodného), zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 3,31 gramu (98 %).

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

7,10	(d,	J =	10 Hz,	IH) ,	5,85	(d,	J =	10	i Hz, IH),
4,40	(q.	J =	7 Hz,	IH) ,	3,40	(m,	2H) ,	>
2,30	(m,	2H)			0,70	- 2,	05 l	(m,	33H) ,
1,02	(s ,	3H)	»		0,96	(d,	J =	7	Hz, 3H),
0,80	(s ,	3H)	»		0,78	(d,	J =	7	Hz, 3H).

Hmotové spektrum: 413 (M + H)⁺

Příprava H4

Postup přípravy (Ια,2a,5a,25R)-1,2-epoxy-spirostan-3-onu.

109

Podle tohoto postupu byla směs, která obsahovala (5α,25R)-spirost-1-en-3 - on (v množství 2,87 gramu, což představuje 6,96 mmolů), tetrahydrofuran (v množství 30 mililitrů), methanol (v množství 50 mililitrů) a 15 % hydroxid sodný (1 mililitrů), promíchávána pod atmosférou dusíku. Takto získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 0 °C, načež byl přidán 30 %-ní roztok peroxidu vodíku (5 mililitrů). Tato reakční směs byla potom postupně ohřátá na teplotu místnosti, načež byla promíchávána po dobu 4 hodin. Tato reakční směs byla potom zředěna ethylesterem kyseliny octové, ochlazena na teplotu 0 °C a zpracována nasyceným roztokem hydrogensiřičitanu sodného. Tato směs byla potom promyta nasyceným roztokem hydrogensiřičitanu sodného (2x) a solankou (lx), načež byla usušena (síranem sodným), zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž byla připravena požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 2,64 gramu (88 %) .

1HNMR	(2	50 MHz, CDC13)	δ :
4,40	(q,	J = 7 Hz, IH)	, 3,40	(m, 3H),
3,24	(d,	J = 6 Hz, IH)	2,25	(dd, J = 18, 4 Hz,
0,70	- 2	,28 (m, 34H),	0,98	(d, J = 7 Hz, 3H),
0,92	(s,	3H) ,	0,80	(s, 3H),
0,78	(d,	J = 7 Hz, 3H)	•
Hmoto	vé	spektrum: 429	(M + H)+
Pří	P	r a v a H5

Postup přípravy (Ια,3β,5a,25R)-1,3-di(hydroxy)spirostanu.

Podle tohoto postupu byl lithiumaluminiumhydrid (v množství 0,43 gramu, což představuje 15,38 mmolů) přidán k roztoku obsahujícímu (Ια,2a,5a,25R)-1,2-epoxy-spirostan111 což představuje 0,19 mmolu; viz Příprava B39) a celit (0,2 gramu) v dichlormethanu CH2CI2 (5 mililitrů), což bylo provedeno při teplotě 0 °C. Tato reakční směs byla potom ponechána ohřát na teplotu okolí, načež byla promíchávána po dobu 2 hodin. V dalším postupu byla potom tato reakční směs zředěna 15 mililitry diethyletheru Et₂O, načež byla zfiltrována přes silikagelovou vrstvu. Tato vrstva byla potom promyta dalším přídavkem 500 mililitrů diethyletheru Et₂O. Takto získaný filtrát byl potom zkoncentrován za použití vakua, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina.

Výtěžek : 0,18 gramu (90 %).

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

5,15 (m, 3H),	4,90	(m,	2H) ,
4,50 (m, 2H),	4,35	(m,	2H) ,
4,05 (m, 2H),	3,65	(m,	3H) ,
3,40 (m, 2H),	2,35	(x,	J =12,5 Hz,
2,60 (q, J = 6 Hz, IH),	1,95	- 2,20 (m, 21H),
0,70 - 1,90 (m, 37H),	1,15	(s,	3H) ,
0,95 (d, J = 7 Hz, 3H),	0,80	(d,	J = 6 Hz, 3H)
0,76 (s, 3H).

Hmotové spektrum: 1049 (M + H)⁺.

Příprava JI

Postup přípravy (3β,25R)-3-ethoxymethoxy-5-spirostenu.

Podle tohoto postupu byla směs obsahující diosgenin (v množství 2,5 gramu, což představuje 6,0 mmolů), chlormethylethylether (v množství 1,14 gramu, což představuje 12,0 mmolů), diisopropylethylamin (v množství 3,90 gramu, což představuje 30,0 mmolů) a 1,2-dichlorethan

112 (75 mililitrů) promíchávána pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Potom byl přidán k zakončení této reakce methanol (v množství < 1 mililitr). Tato reakční směs byla potom zředěna ethylacetátem a promyta vodou (2x) a solankou (lx) , načež byla usušena síranem sodným, zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky..

Výtěžek : 2,17 gramu (76,5 %).

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ

5,35 (d, 2H, J = 7,0 Hz),

4.4 (m, IH),

3.4 (m, 2H),

2.4 - 0,7 (m, 38H),

0,95 (d, 3H, J = 7 Hz), 0,75 (s, 3H).

4,75 (s, 2H),

3,6 (q, 2H, J = 7,0 Hz) ,

3,35 (t, IH, J = 11 Hz),

1,2 (s, 3H),

0,8 (d, 3H, J = 7 Hz),

Hmotové spektrum : 777 (M + Na)⁺ Teplota tání : 125 - 127 °C.

Příprava J2

Postup přípravy (3β,5α,6α,25R)-3-ethoxymethoxy-6-hydroxyspirostanu.

Podle tohoto postupu byl boran-tetrahydrofuranový komplex (v množství 0,68 mililitru, což představuje 0,68 mmolu) přidán k roztoku, který obsahoval (3β,25Ρ)-3ethoxymethoxy-5-spirostan (v množství 0,10 gramu, což představuje 0,21 mmolu) v tetrahydrofuranu (8 mililitrů). Tato reakční směs byla potom promíchávána pod atmosférou dusíku při teplotě okolí po dobu 3,5 hodiny. Získaná reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 0 °C, načež byl přidán

113 methanol (1,5 mililitru), 15 %-ní roztok hydroxidu sodného (1,5 mililitru) a 30 %-ní roztok peroxidu vodíku (1,5 mililitru). Tato reakční směs byla potom postupně ohřátá na teplotu okolí, načež byla promíchávána po dobu přes noc.

Tato reakce byla potom zakončena ochlazením na teplotu 0 °C a přídavkem nasyceného roztoku hydrogensiřičitanu sodného. Tato reakční směs byla potom zředěna ethylacetátem a promyta roztokem chloridu amonného (lx) a solankou (lx), načež byla usušena (síran sodný), zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž bylo získáno 0,11 gramu směsi 6a-alkoholu a όβ-alkoholu. Tyto dva produkty byly potom odděleny mžikovou chromatografickou metodou na silikagelu (jako elučního činidla bylo použito směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 6:4). Hlavní produkt (Rf = 0,40) byl identifikován jako požadovaná titulní sloučenina.

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

4,7	(s,	2H) ,	4,4 (	m, IH),
3,6	(q,	2H, J = 11,0 Hz),	3,45	(m, 3H),
3,35	(t,	, IH, J = 11,0 Hz),	2,3 -	0,6 (m,
1,8	(d,	3H, J = 7,0 Hz),	0,82	(s, 3H),
0,78	(d,	, 3H, J = 7,0 Hz),	0,75	(s, 3H).
Hmot	ové	spektrum : 491 (M +	H) + .

Teplota tání : 171 °C.

Příprava J3

Postup přípravy (3β,5α,25R)-3-ethoxymethoxy-spirostan-6-onu.

Podle tohoto postupu byl pyridiniumchlorchroman (v množství 1,98 gramu, což představuje 9,20 mmolu) přidán ke směsi, která obsahovala (3β,5α,6α,25R)-3-ethoxymethoxy6-hydroxyspirostan (v množství 0,90 gramu, což představuje

114

1,8 mmolů) a celit (v množství 8,0 gramů) v bezvodém dichlormethanu, což bylo provedeno při teplotě 0 °C. Tato reakční směs byla potom postupně ohřátá na teplotu okolí , což bylo prováděno po dobu 1 hodiny, a potom byla ponechána míchat po dobu dalších 5 hodin. Takto získaná reakční směs byla potom zfiltrována přes vrstvu silikagelu, přičemž jako elučního činidla bylo použito etheru. Spojené etherové frakce byly potom zkoncentrovány za použití vakua, čímž byla získána požadovaná požadovaná titulní sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek : 0,80 gramu (91 %) .

¹HNMR (250 MHz, CDClj) δ :

4,75 (m, 2H),

3,6 (q, 2H, J = 7,0 Hz),

3,35 (t, IH, J = 11,0 Hz), 0,9 (d, 3H, J = 7,0 Hz), 0,78 (s, 6H).

4.4 (m, IH),

3,45 (m, 2H),

2.4 - 0,6 (m, 40H),

0,8 (d, 3H, J = 7,0 Hz) ,

Hmotové spektrum : 489,0 (M + H)⁺. Teplota tání : 191 - 193 °C.

Příprava J4

Postup přípravy (3β,5α,25R)-spirostan-6-onu.

Podle tohoto postupu byla koncentrovaná kyselina chlorovodíková (2 kapky) přidána k roztoku, který obsahoval (3β,5a,25R)-3-ethoxymethoxy-spirostan-6-on (v množství 0,70 gramu, což představuje 1,43 mmolů) v methanolu (10 mililitrů) a tetrahydrofuranu (10 mililitrů). Tato reakční směs byla potom promíchávána pod atmosférou dusíku, načež byla zahřáta na teplotu 62 °C. Po 15 minutách byla tato reakční směs ochlazena na 0 °C a neutralizována 15 %-ním

115 roztokem hydroxidu sodného. Tato reakční směs byla potom zkoncentrována za použití vakua a potom byla zředěna ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta vodou (2x) a solankou (lx), načež byla usušena (za pomoci síranu sodného), zkoncentrována za použití vakua a vyčištěna mžikovou chromatografickou metodou (za použití směsi hexanu a ethylacetátu v poměru 1 : 1 jako elučního činidla), čímž byla získána požadovaná titulní sloučenina ve formě bezbarvé pevné látky.

Výtěžek : 0,55 gramu (89,4 %) .

¹HNMR (250 MHz, CDC1₃) δ :

4,4 1	(m ,	IH) ,			3,45	(m,	2H) ,
3,35	(X ,	IH,	J = 11,0	Hz) ,	2,35	- o.	,6 (m, 38H),
0,95	(d,	3H,	J = 7,0	Hz) ,	0,75	(d,	3H, J = 7,0 Hz)
0,71	(s,	6H)

Hmotové spektrum ; 431 (M + H)⁺

Teplota tání : 210 - 212 °C..

Příprava K1

Postup přípravy (3β,5α,6α,25R)-3-[(heptaacetyl-β-Οcellobiosyl)oxy]-6-hydroxyspirostanu.

Podle tohoto postupu byl borohydrid sodný (v množství 0,11 gramu, což představuje 2,86 mmolu) přidán k roztoku, který obsahoval (3β,5a,25R)-3-[(heptaacetyl-β-ϋcellobiosyl)oxy]spirostan-6-on (v množství 1,5 gramu, což představuje 1,43 mmolu; viz Příprava B41) v ethanolu (20 mililitrů) a dichlormethanu (5 mililitrů), a takto získaná reakční směs byla potom promíchávána pod atmosférou dusíku při teplotě místnosti po dobu 4 hodin. Tato reakční směs byla potom ochlazena na teplotu 0 °C, načež byla

116 zneutralizována přídavkem 1 N roztoku kyseliny chlorovodíkové. Takto získaná směs byla potom částečně zkoncentrována za použití vakua a potom byla zředěna ethylacetátem, promyta 1 N roztokem kyseliny chlorovodíkové (lx) a solankou (lx), načež byla usušena (za použití síranu sodného), zfiltrována a zkoncentrována za použití vakua, čímž byla získána požadovaná tixulní sloučenina ve formě

bezbarvé pevné látky. Výtěžek : 1,00 gram (66 %) .
LHNMR (250 MHz, CDC13) δ
5,2 - 4,4 (m, 14H),	4,3	(m,	IH) ,
3,75 - 3,35 (m, 3H),	3,3	(ΐ,	IH, J
2,15 - 0,5 (m, 59H),	0,95	(s.	, 3H) ,
0,90 (d, 3H, J = 7,0 Hz)	0,75	(s ,	, 3H) ,
0,70 (d, 3H, J = 7,0 Hz)
Hmotové spektrum : 1051	(M + H)+.

Rozsah vynálezu není nijak omezen na xaxo konkréxní popsaná provedení, ale je možno v jeho rámci prováděx různé změny a modifikace, kxeré náleží všechny do rozsahu tohoto vynálezu. Rozsah vynálezu je xedy určen pouze následujícími patentovými nároky.

Claims (64)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   1. Spirostanylovy glykosid obecného vzorce IA (IA) ve kterém znamená :

   buďto (A)

   Q¹ karbonylovou skupinu,

   H OH OH H

   J nebo t r znamená karbonylovou skupinu, methylenovou skupinu nebo

   OH H

   -C — znamená

   118

   R¹0-alkyIen(C₂-C₃)-O H -C — nebo

   R¹O-alkyIen(C₂-C₃)-O^ H a a Cp znamenají oba methylenovou skupinu, přičemž v těchto skupinách : Rl znamená β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-galaktopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosy1, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, α-L-arabanopyranosy1, α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

   3-0^-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (B) :

   Ql, a Cp představují všechny methylenovou skupinu,

   H OH λ Λ nebo

   OH H r

   Q znamena

   C

   119

   Q znamena

   H OR¹ λ A

   R^J0 H λ A

   R¹O-alkylen(C₂-C₃)-O H

   A nebo

   R¹0-alkylen(C,-C,)-0 H přičemž v těchto skupinách : r! znamená :

   β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, α-L-arabanopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

   3-Ο-β-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosy1 nebo β-D-maltotriosyl, nebo (C)

   Q¹, Q⁴ a představují všechny methylenovou skupinu,

   Q znamená karbonylovou skupinu,

   I

   120 α

   Q znamená

   H OR¹ λ Λ

   R*O H

   Λ

   R^-alkylenlCA-CjJ-q H nebo

   R¹0-alkyIen(C₂-C₃)-O^ H

   C₂5 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

   Rl znamená :

   β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosy1, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, α-L-arabanopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

   3-0^-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (D)

   Q¹, Q², Q⁴ a představují všechny methylenovou skupinu, a

   R^JO H α

   Q znamena

   121 nebo

   R^lO-alkylen(C-,-C₃)-O^ H přičemž v těchto skupinách : r! znamená :

   β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-L-arabanopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-gentiobiosyl,

   3-0^-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (E) :

   12 5

   Q , Q a Q představují každý methylenovou skupinu,

   Q⁴ znamená karbonylovou skupinu nebo

   OH H

   Λ ₃

   Q znamena

   H OR¹ '·> r nebo

   Rio η λ Λ vodík je v poloze alfa, C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

   β-D-galaktopyranosyl,

   Rl znamená :

   122 β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotřiosy1, nebo (F) :

   Ql, a Q⁴ představují každý methylenovou skupinu,

   OH H λ f — Cskupinu nebo

   R‘0 H '' f nebo znamená karbonylovou

   H OR» α . '' Γ

   Q znamena -cvodík je v poloze alfa,

   C25 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

   Rl znamená ;

   β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, s tou podmínkou, že do rozsahu uvedených sloučenin nepatří (3β,5a,25R) -3-[(β-D-cellobiosyl) oxy]spirostan.
2. 2. Sloučenina podle nároku 1, ve které :

   Ql znamená karbonylovou skupinu,

   OH H — c — nebo

   -C

   123

   Q² , Q⁴ a každý znamená methylenovou skupinu,

   H ORI

   Q² znamená skupinu _' _ vodík je v poloze alfa, a C₂5 má konfiguraci (R).
3. 3. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

   Q² znamená karbonylovou skupinu a R² je β-D-cellobiosylová skupina.
4. 4. Sloučenina podle nároku 2, ve které : Q¹ znamená karbonylovou skupinu a R¹ je β-D-galaktopyranosylová skupina.
5. 5. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

   Q² znamená karbonylovou skupinu a R² je a-D-cellobiosylová skupina.
6. 6. Sloučenina podle nároku 2, ve které : q! znamená karbonylovou skupinu a R² je β-D-glukopyranosylová skupina.
7. 7. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

   q! znamená karbonylovou skupinu a R^ je β-D-laktosylová skupina.
8. 8. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

   Q² znamená karbonylovou skupinu a R² je β-D-maltosylová skupina.

   124
9. 9. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

   Q¹ znamená karbonylovou skupinu a R¹ je β-D-maltotriosylová skupina.
10. 10. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

    H OH znamená skupinu , a

    R¹ je β-D-cellobiosylová skupina.
11. 11. Sloučenina podle nároku 2, ve které :

    OH H

    Ql znamená skupinu , a

    R¹ je β-D-cellobiosylová skupina.
12. 12. Sloučenina podle nároku 1, ve které :

    Q¹, Q⁴ a Q⁵ znamenají každý methylenovou skupinu,

    2 ' r

    Q je skupina __c'_ nebo „3 · H OR¹

    Q je skupina f vodík je v poloze alfa, a C₂5 má konfiguraci (R) .

    OH H λ r
13. 13. Sloučenina podle nároku 12, ve které :

    Q je skupina

    H OH λ Λ

    125

    R⁴ je β-D-cellobiosyl.
14. 14. Sloučenina podle nároku 1, ve které

    Q¹ je karbonylová skupina,

    H OH _nebo

    OH H

    O

    Q je karbonylová skupina,

    H OH s f nebo

    OH H — C —

    H OR¹

    3 '' Λ

    Q je skupina __

    Q⁴ a představuj i každý π thylenovou skupinu,

    C₇₃ má konfiguraci (R), a

    C₃ vodík je v poloze alfa.
15. 15. Sloučenina podle nároku 14, ve které : q! představuje karbonylovou skupinu,

    O

    Q představuje karbonylovou skupinu, a

    Rl je β-D-cellobiosyl.
16. 16. Sloučenina podle nároku 14, ve které : Ql znamená karbonylovou skupinu,

    H OH

    2 ^λ Γ

    Q je skupina -c- . a r! znamená β-D-cellobiosyl.
17. 17. Sloučenina podle nároku 14, ve které : q! znamená karbonylovou skupinu,

    126

    H OH

    2 ''Λ

    Q je skupina _'_c' , a

    Rl znamená β-D-laktosyl.
18. 18. Sloučenina podle nároku 14, ve které :

    H OH

    Ql znamená skupinu '-<7

    Q je karbonylová skupina, a

    Rl znamená β-D-cellobiosyl.
19. 19. Sloučenina podle nároku 14, ve které :

    OH H

    Q·*· znamená skupinu __

    Q je karbonylová skupina, a r! znamená β-D-cellobiosyl.
20. 20. Sloučenina podle nároku 1, ve které :

    Ql, a znamenají každý methylenovou skupinu, Q představuje karbonylovou skupinu,

    H OR¹

    Cp je skupina '£ vodík je v poloze alfa, a C25 má konfiguraci (R) .
21. 21. Sloučenina podle nároku 20, ve které představuje β-D-laktosyl.

    127
22. 22. Sloučenina podle nároku 20, ve které R^ představuje β-D-cellobiosyl.
23. 23. Sloučenina podle nároku 21, ve které :

    a , q4 a Q~* každý představuje methylenovou skupinu, ₃ H OR¹

    Q·³ znamená skupinu , a

    C₂5 má konfiguraci (R).
24. 24. Sloučenina podle nároku 23, ve které : vodík je v poloze beta, a r! představuje β-D-cellobiosylovou skupinu.
25. 25. Sloučenina podle nároku 23, ve které :

    C5 vodík je v poloze alfa, a r! představuje β-D-gentiobiosylovou skupinu.
26. 26. Sloučenina podle nároku 1, ve které :

    12 5

    Q , Q a Q každý znamenají methylenovou skupinu,

    H OR¹ znamená skupinu _' £ znamená karbonylovou skupinu,

    C5 vodík je v poloze alfa, a C₂₃ má konfiguraci (R).
27. 27. Sloučenina podle nároku 26, ve které R^ znamená β-D-cellobiosylovou skupinu.
28. 28. Sloučenina podle nároku 1, ve které :

    Ql, Q“ a každý představují methylenovou skupinu,

    128 i .... ,

    H OR¹ · . - ; _fC

    3 ''^Γ - - ? ‘ ;

    Q znamena skupinu -C- , - .. '

    Q³ znamená karbonylovou skupinu, ¹ ..............._ vodík je v poloze alfa, a

    C25 má konfiguraci (R) .
29. 29. Sloučenina podle nároku 28, ve kreré R¹ znamená β-D-cellobiosylovou skupinu.
30. 30. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I :

    C^CH, (I) ve kterém znamená buďto (A) :

    Q⁴ methylenovou skupinu, karbonylovou skupinu,

    H OH —c— nebo

    OH H

    Λ —c —

    Q znamená methylenovou skupinu, karbonylovou skupinu

    H OH

    Τ Λ —C — nebo

    OH H τ r —C —

    129 ₃

    Q znamena

    H OR¹ λ Λ_

    R^l <D Η

    R¹0-alkylen(CT-C₃)-O Η

    -C nebo a Q⁴ a θ' znamenají oba methylenovou skupinu, přičemž v těchto skupinách : Rl znamená β-D-glukopyranosyl, β-D-glukopyranuronosyl, β-D-2-acetamido-2-deoxy-glukopyranosyl, β-D-galaktopyranosyl, β-D-fukopyranosyl, β-L-fukopyranosy1, β-D-xylopyranosyl, β-L-xylopyranosyl, α-D-arabanopyranosyl, a-L-arabanopyranosyl, α-D-cellobiosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, β-D-gentiobiosyl,

    3-0^-D-galaktopyranosyl-a-D-arabanopyranosyl nebo β-D-maltotriosyl, nebo (B) :

    12 5

    Q , Q a Q představují každý methylenovou skupinu,

    130

    H OR¹ R^lO Η

    3 ''Λ ''Λ

    Q znamená _'_ nebo __

    OH Η

    Q⁴ znamená karbonylovou skupinu nebo Γ

    C₃ vodík je v poloze alfa,

    C₂5 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

    R³ znamená β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl, nebo (C) :

    Q·¹·, a Q⁴ představuji každý methylenovou skupinu,

    H OR¹ RlO H

    3 λ Λ λ Λ

    Q znamena _q_ nebo __

    OH H

    Q³ představuje karbonylovou skupinu nebo __

    C5 vodík je v poloze alfa,

    C₂5 má konfiguraci (R), přičemž v těchto skupinách :

    Rl znamená β-D-galaktopyranosyl, β-D-cellobiosyl, β-D-laktosyl, β-D-maltosyl, nebo β-D-maltotriosyl,

    131 s tou podmínkou, že do rozsahu uvedených sloučenin nepatří :

    (3β,5a,25R)-3-[(a-D-cellobiosyl)oxy]spiróstan, (3 β,5α,25R)-3-[(β-D-glukopyranosyl)oxy]spiróstan, (3β,5α,25R)-3-[(β-D-cellobiosyl)oxy]spiróstan a (3β,5α,25Ρ)-3-[(β-D-galaktopyranosyl)oxy]spirostan12-on, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
31. 31. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    Q¹, Q^, Q⁴ a každý představuje methylenovou skupinu, C₂5 má konfiguraci (R), a

    H OR¹ ₃

    Q znamená skupinu C , pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
32. 32. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 31, ve kterém :

    C3 vodík je beta, a r! znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
33. 33. Spirostanylový glykosid Obecného vzorce I podle nároku 31, ve kterém :

    C5 vodík je alfa, a

    R¹ znamená β-D-glukopyranuronosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie

    132 nebo atherosklerozy u savců.
34. 34. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 31, ve krerém :

    vodík je alfa, a

    R⁴ znamená β-D-maltosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
35. 35. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 31, ve kterém :

    C5 vodík je alfa, a

    R·*· znamená β-D-laktosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
36. 36. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 31, ve kterém :

    C5 vodík je alfa, a

    R¹ znamená β-D-gentiobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
37. 37. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 31, ve kterém :

    C5 vodík je alfa, a

    R¹ znamená β-D-galaktopyranosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
38. 38. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    133

    Η OH

    Q-l· znamená karbonylovou skupinu, -qOH H λ r nebo -c, Q⁴ a každý znamená methylenovou skupinu,

    Q znamena

    H OR¹ λ r

    C₂5 má konfiguraci (R), a

    C3 vodík je v poloze alfa, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
39. 39. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    q! znamená karbonylovou skupinu a

    Rl znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
40. 40. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    znamená karbonylovou skupinu a Rl je β-D-galaktopyranosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
41. 41. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu a

    Rl je α-D-cellobiosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.

    134
42. 42. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    Q² znamená karbonylovou skupinu a

    R² je β-D-glukopyranosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
43. 43. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu a r1 je β-D-maltosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
44. 44. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu a je β-D-maltotriosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
45. 45. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu a

    Rl je β-D-laktosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
46. 46. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    H OH

    Q¹ znamená skupinu

    135

    R¹ je β-D -cellobiosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
47. 47. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 38, ve kterém :

    OH H

    1 ^λ r

    Q znamena skupinu -c- , a

    R¹ je β-D-cellobiosylová skupina, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
48. 48. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    q!, Q⁴ a Q³ každý představuje methylenovou skupinu,

    H OH nebo

    Q znamena karbonylovou skupinu,

    H ORl znamená skupinu Λ

    C₂5 má konfiguraci (R), a

    C₃ vodík je v poloze alfa, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
49. 49. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 48, ve kterém :

    Q znamená karbonylovou skupinu a

    R¹ znamená β-D-cellobiosylovou skupinu,

    136 pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
50. 50. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 48, ve kterém :

    Q znamená karbonylovou skupinu a

    Rl znamená β-D-laktosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
51. 51. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 48, ve kterém :

    H OH

    2 ' Λ

    Q znamená skupinu __ , a r! znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
52. 52. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 48, ve kterém :

    H OH znamená skupinu -c- , a

    R¹ znamená β-D-galaktopyranosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy ů savců.
53. 53. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    137

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu,

    H OH OH H λ r r ^c nebo C znamená karbonylovou skupinu, nebo

    OH H —c — fc

    H OR¹ 3

    Q znamená skupinu -cQ⁴ a Q³ znamenají každý methylenovou skupinu,

    C₂5 má konfiguraci (R), a vodík je v poloze alfa, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
54. 54. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 53, ve kterém ;

    Ql znamená karbonylovou skupinu,

    Q znamená karbonylovou skupinu a znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
55. 55. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 53, ve kterém : q! znamená karbonylovou skupinu, znamená skupinu r! znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.

    138
56. 56. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 53, ve kterém :

    Q¹ znamená karbonylovou skupinu,

    H OH ₂

    Q znamená skupinu C- , a

    Rl znamená β-D-laktosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie » nebo atherosklerozy u savců.
57. 57. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 53, ve kterém :

    H OH znamená skupinu -g- ,

    Q znamená karbonylovou skupinu, a

    R¹ znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolováni hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
58. 58. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 53, ve kterém :

    OH H

    1 ''

    Q znamená skupinu -C*

    Q znamená karbonylovou skupinu, a

    Rl znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.

    139
59. 59. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    195

    Q , Q a Q každý představuje methylenovou skupinu,

    H OR¹ _ í_

    Q² znamená skupinu ,

    Q⁴ znamená karbonylovou skupinu,

    Cg vodík je v poloze alfa a

    C25 má konfiguraci (R), pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
60. 60. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 59, ve kterém :

    Rl představuje β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
61. 61. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 30, ve kterém :

    Q¹, Q² a Q⁴ každý představuje methylenovou skupinu,

    H OR¹

    3 '

    Q znamena skupinu -C- , znamená karbonylovou skupinu,

    Cg vodík je v poloze alfa a C₂5 má konfiguraci (R), pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
62. 62. Spirostanylový glykosid obecného vzorce I podle nároku 61, ve kterém :

    140

    R.1 znamená β-D-cellobiosylovou skupinu, pro přípravu léčiva pro kontrolování hypercholesterolémie nebo atherosklerozy u savců.
63. 63. Farmaceutický prostředek pro kontrolování hypercholesterolemie nebo aterosklerózy u savců, vyznačující se tím, že obsahuje sloučeninu obecného vzorce IA podle nároku 1 a farmaceuticky přijatelnou nosičovou látku.
64. 64. Prostředek, vyznačující se tím, že obsahuje hydrát sloučeniny obecného vzorce IA podle nároku 1.