CZ303054B6 - Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny - Google Patents
Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny Download PDFInfo
- Publication number
- CZ303054B6 CZ303054B6 CZ20100670A CZ2010670A CZ303054B6 CZ 303054 B6 CZ303054 B6 CZ 303054B6 CZ 20100670 A CZ20100670 A CZ 20100670A CZ 2010670 A CZ2010670 A CZ 2010670A CZ 303054 B6 CZ303054 B6 CZ 303054B6
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- bromoethyl
- chloroethyl
- chloropropyl
- bromomethyl
- hydroxy
- Prior art date
Links
- 230000012010 growth Effects 0.000 title claims abstract description 21
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 title claims abstract description 20
- 238000011161 development Methods 0.000 title claims abstract description 16
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 title abstract description 8
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 title abstract 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 36
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 claims abstract description 12
- 125000005843 halogen group Chemical group 0.000 claims abstract description 7
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims abstract description 6
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 claims abstract description 5
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- 230000005305 organ development Effects 0.000 claims abstract description 4
- 238000004904 shortening Methods 0.000 claims abstract description 3
- -1 4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl Chemical group 0.000 claims description 403
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 72
- KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 7H-purine Chemical compound N1=CNC2=NC=NC2=C1 KDCGOANMDULRCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 69
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 63
- 125000005999 2-bromoethyl group Chemical group 0.000 claims description 50
- 125000001340 2-chloroethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)C([H])([H])* 0.000 claims description 48
- 125000005997 bromomethyl group Chemical group 0.000 claims description 47
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 claims description 43
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 31
- 230000009758 senescence Effects 0.000 claims description 23
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 22
- 241000209510 Liliopsida Species 0.000 claims description 10
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 claims description 10
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 claims description 9
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 claims description 9
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 claims description 9
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 claims description 9
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 claims description 9
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 claims description 8
- 230000035882 stress Effects 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 7
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 7
- 125000001844 prenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 7
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 6
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 claims description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000002367 halogens Chemical group 0.000 claims description 5
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 claims description 5
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 4
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 3
- 230000035784 germination Effects 0.000 claims description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical group [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 230000009025 developmental regulation Effects 0.000 claims description 2
- 230000026267 regulation of growth Effects 0.000 claims description 2
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 claims 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 claims 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 claims 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 abstract description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 abstract description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 abstract 2
- 230000001133 acceleration Effects 0.000 abstract 1
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 abstract 1
- 230000007226 seed germination Effects 0.000 abstract 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 abstract 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 abstract 1
- 239000004062 cytokinin Substances 0.000 description 70
- UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N cytokinin Natural products C1=NC=2C(NCC=C(CO)C)=NC=NC=2N1C1CC(O)C(CO)O1 UQHKFADEQIVWID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 52
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 25
- QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N kinetin Chemical compound N=1C=NC=2N=CNC=2C=1NCC1=CC=CO1 QANMHLXAZMSUEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 description 18
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N Kinetin Natural products N=1C=NC=2N=CNC=2C=1N(C)C1=CC=CO1 FAIXYKHYOGVFKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 229960001669 kinetin Drugs 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 12
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 12
- VHLJKGNGSIBAPB-UHFFFAOYSA-N 9-(2-chloroethyl)-n-(furan-2-ylmethyl)purin-6-amine Chemical compound N1=CN=C2N(CCCl)C=NC2=C1NCC1=CC=CO1 VHLJKGNGSIBAPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 10
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 10
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 10
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 9
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 9
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 8
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 8
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 8
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 8
- 230000014634 leaf senescence Effects 0.000 description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 8
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 7
- 230000008635 plant growth Effects 0.000 description 7
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 7
- 240000001592 Amaranthus caudatus Species 0.000 description 6
- 235000009328 Amaranthus caudatus Nutrition 0.000 description 6
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 6
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 6
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 6
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 6
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 6
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 230000002786 root growth Effects 0.000 description 6
- BJFPYGGTDAYECS-UHFFFAOYSA-N (3-chlorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC(Cl)=C1 BJFPYGGTDAYECS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 5
- 235000012735 amaranth Nutrition 0.000 description 5
- 239000004178 amaranth Substances 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 5
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- IBYHHJPAARCAIE-UHFFFAOYSA-N 1-bromo-2-chloroethane Chemical compound ClCCBr IBYHHJPAARCAIE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- JVOKEITZPQXDHG-UHFFFAOYSA-N CC(C)=CCC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 Chemical compound CC(C)=CCC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 JVOKEITZPQXDHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 4
- IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N Ethylene oxide Chemical compound C1CO1 IAYPIBMASNFSPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 4
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 4
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 4
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 4
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 4
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 4
- 239000003630 growth substance Substances 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 4
- 238000005502 peroxidation Methods 0.000 description 4
- 229920000151 polyglycol Polymers 0.000 description 4
- 239000010695 polyglycol Substances 0.000 description 4
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 4
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 4
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 4
- PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 1,2-dibromoethane Chemical compound BrCCBr PAAZPARNPHGIKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 2-thiobarbituric acid Chemical compound O=C1CC(=O)NC(=S)N1 RVBUGGBMJDPOST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005995 Aluminium silicate Substances 0.000 description 3
- DHHFDKNIEVKVKS-FMOSSLLZSA-N Betanin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC(C[C@H]2C([O-])=O)=C1[N+]2=C\C=C\1C=C(C(O)=O)N[C@H](C(O)=O)C/1 DHHFDKNIEVKVKS-FMOSSLLZSA-N 0.000 description 3
- QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N Butylparaben Chemical compound CCCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QFOHBWFCKVYLES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical group [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 3
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 3
- NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N N-benzyladenine Chemical compound N=1C=NC=2NC=NC=2C=1NCC1=CC=CC=C1 NWBJYWHLCVSVIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 3
- 229910004298 SiO 2 Inorganic materials 0.000 description 3
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101001128925 Zea mays 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase 1, chloroplastic Proteins 0.000 description 3
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 3
- 235000012211 aluminium silicate Nutrition 0.000 description 3
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 3
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 3
- 235000000842 betacyanins Nutrition 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- 210000003763 chloroplast Anatomy 0.000 description 3
- 239000008119 colloidal silica Substances 0.000 description 3
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol monoethyl ether Chemical compound CCOCCOCCO XXJWXESWEXIICW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 3
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 3
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 3
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 3
- NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N kaolin Chemical compound O.O.O=[Al]O[Si](=O)O[Si](=O)O[Al]=O NLYAJNPCOHFWQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 3
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 3
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 3
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 3
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229920005552 sodium lignosulfonate Polymers 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 239000004546 suspension concentrate Substances 0.000 description 3
- 239000004563 wettable powder Substances 0.000 description 3
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 3
- JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N (+)-Abscisic acid Chemical compound OC(=O)/C=C(/C)\C=C\[C@@]1(O)C(C)=CC(=O)CC1(C)C JLIDBLDQVAYHNE-YKALOCIXSA-N 0.000 description 2
- KDDNKZCVYQDGKE-UHFFFAOYSA-N (2-chlorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1Cl KDDNKZCVYQDGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KPRZOPQOBJRYSW-UHFFFAOYSA-N 2-(aminomethyl)phenol Chemical compound NCC1=CC=CC=C1O KPRZOPQOBJRYSW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BHIZVZJETFVJMJ-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl dodecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCC(=O)OCC(C)O BHIZVZJETFVJMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WSUXZVNCAWQZDH-UHFFFAOYSA-N 9-(2-bromoethyl)-n-(furan-2-ylmethyl)purin-6-amine Chemical compound N1=CN=C2N(CCBr)C=NC2=C1NCC1=CC=CO1 WSUXZVNCAWQZDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000291564 Allium cepa Species 0.000 description 2
- 240000002234 Allium sativum Species 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000099147 Ananas comosus Species 0.000 description 2
- 235000007119 Ananas comosus Nutrition 0.000 description 2
- 244000003416 Asparagus officinalis Species 0.000 description 2
- 235000005340 Asparagus officinalis Nutrition 0.000 description 2
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 2
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 2
- NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N Butylhydroxytoluene Chemical compound CC1=CC(C(C)(C)C)=C(O)C(C(C)(C)C)=C1 NLZUEZXRPGMBCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 108030005020 Cytokinin dehydrogenases Proteins 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HYVABZIGRDEKCD-UHFFFAOYSA-N N(6)-dimethylallyladenine Chemical compound CC(C)=CCNC1=NC=NC2=C1N=CN2 HYVABZIGRDEKCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 2
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 2
- 244000104275 Phoenix dactylifera Species 0.000 description 2
- 235000010659 Phoenix dactylifera Nutrition 0.000 description 2
- 235000019484 Rapeseed oil Nutrition 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009499 Vanilla fragrans Nutrition 0.000 description 2
- 235000012036 Vanilla tahitensis Nutrition 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 150000004945 aromatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 125000000440 benzylamino group Chemical group [H]N(*)C([H])([H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000005998 bromoethyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 2
- 229940105329 carboxymethylcellulose Drugs 0.000 description 2
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 2
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000003093 cationic surfactant Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 2
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000007931 coated granule Substances 0.000 description 2
- 244000038559 crop plants Species 0.000 description 2
- JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N cyclohexanone Chemical compound O=C1CCCCC1 JHIVVAPYMSGYDF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010088245 cytokinin oxidase Proteins 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 2
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000004807 desolvation Methods 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 235000021186 dishes Nutrition 0.000 description 2
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 235000004611 garlic Nutrition 0.000 description 2
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 2
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 2
- 239000003906 humectant Substances 0.000 description 2
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003859 lipid peroxidation Effects 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 2
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- CLQWKPZLSUWUDR-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-9-(2-bromoethyl)purin-6-amine Chemical compound N1=CN=C2N(CCBr)C=NC2=C1NCC1=CC=CC=C1 CLQWKPZLSUWUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 2
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 150000002926 oxygen Chemical class 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000021749 root development Effects 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 2
- 238000004383 yellowing Methods 0.000 description 2
- LRFWYBZWRQWZIM-UHFFFAOYSA-N (2-fluorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1F LRFWYBZWRQWZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QVSVMNXRLWSNGS-UHFFFAOYSA-N (3-fluorophenyl)methanamine Chemical compound NCC1=CC=CC(F)=C1 QVSVMNXRLWSNGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KWDCKLXGUZOEGM-UHFFFAOYSA-N 1-methoxy-3-(3-methoxypropoxy)propane Chemical compound COCCCOCCCOC KWDCKLXGUZOEGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 1-naphthaleneacetic acid Chemical compound C1=CC=C2C(CC(=O)O)=CC=CC2=C1 PRPINYUDVPFIRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KKZUMAMOMRDVKA-UHFFFAOYSA-N 2-chloropropane Chemical group [CH2]C(C)Cl KKZUMAMOMRDVKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DUIOKRXOKLLURE-UHFFFAOYSA-N 2-octylphenol Chemical compound CCCCCCCCC1=CC=CC=C1O DUIOKRXOKLLURE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DUAXLVGFFDFSAG-UHFFFAOYSA-N 4-amino-2-methylbutan-1-ol Chemical compound OCC(C)CCN DUAXLVGFFDFSAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 6-Chloro-1H-purine Chemical compound ClC1=NC=NC2=C1NC=N2 ZKBQDFAWXLTYKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CTGFGRDVWBZYNB-UHFFFAOYSA-N 6-bromo-7h-purine Chemical compound BrC1=NC=NC2=C1NC=N2 CTGFGRDVWBZYNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CGIDZUKNKRTKIG-UHFFFAOYSA-N 9-(2-bromoethyl)-n-(3-methylbut-2-enyl)purin-6-amine Chemical compound CC(C)=CCNC1=NC=NC2=C1N=CN2CCBr CGIDZUKNKRTKIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KLSOYWBVULHQIO-UHFFFAOYSA-N 9-(2-chloroethyl)-n-(3-methylbut-2-enyl)purin-6-amine Chemical compound CC(C)=CCNC1=NC=NC2=C1N=CN2CCCl KLSOYWBVULHQIO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010080953 9-cis-epoxycarotenoid dioxygenase Proteins 0.000 description 1
- 241001133760 Acoelorraphe Species 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical class NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 235000005255 Allium cepa Nutrition 0.000 description 1
- 235000002732 Allium cepa var. cepa Nutrition 0.000 description 1
- 240000002791 Brassica napus Species 0.000 description 1
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000060011 Cocos nucifera Species 0.000 description 1
- 235000013162 Cocos nucifera Nutrition 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 206010021033 Hypomenorrhoea Diseases 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 241000218922 Magnoliophyta Species 0.000 description 1
- 206010061291 Mineral deficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000234295 Musa Species 0.000 description 1
- 240000005561 Musa balbisiana Species 0.000 description 1
- 235000018290 Musa x paradisiaca Nutrition 0.000 description 1
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-methyl-pyrrolidinone Natural products CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000208125 Nicotiana Species 0.000 description 1
- IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N Nonylphenol Natural products CCCCCCCCCC1=CC=C(O)C=C1 IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 241000209504 Poaceae Species 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150102345 VP14 gene Proteins 0.000 description 1
- 244000290333 Vanilla fragrans Species 0.000 description 1
- 244000263375 Vanilla tahitensis Species 0.000 description 1
- 241000459477 Xanthia Species 0.000 description 1
- 241000209149 Zea Species 0.000 description 1
- 235000007244 Zea mays Nutrition 0.000 description 1
- 241000234314 Zingiber Species 0.000 description 1
- 244000273928 Zingiber officinale Species 0.000 description 1
- 235000006886 Zingiber officinale Nutrition 0.000 description 1
- 230000036579 abiotic stress Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 108010050516 adenylate isopentenyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 239000012911 assay medium Substances 0.000 description 1
- 101150036080 at gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 150000003939 benzylamines Chemical class 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Substances BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940067596 butylparaben Drugs 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- OOCMUZJPDXYRFD-UHFFFAOYSA-L calcium;2-dodecylbenzenesulfonate Chemical compound [Ca+2].CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O.CCCCCCCCCCCCC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O OOCMUZJPDXYRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N chloroform Substances ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003240 coconut oil Substances 0.000 description 1
- 235000019864 coconut oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 1
- 230000000593 degrading effect Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000017858 demethylation Effects 0.000 description 1
- 238000010520 demethylation reaction Methods 0.000 description 1
- FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N desoxyabscisic acid Natural products OC(=O)C=C(C)C=CC1C(C)=CC(=O)CC1(C)C FCRACOPGPMPSHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229940075557 diethylene glycol monoethyl ether Drugs 0.000 description 1
- IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N dihydroxy(oxo)silane Chemical compound O[Si](O)=O IJKVHSBPTUYDLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000118 dimethyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid;propane-1,2-diol Chemical compound CC(O)CO.CCCCCCCCCCCC(O)=O LLRANSBEYQZKFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 238000010410 dusting Methods 0.000 description 1
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 1
- 239000004495 emulsifiable concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 238000003028 enzyme activity measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000008098 formaldehyde solution Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 125000002425 furfuryl group Chemical group C(C1=CC=CO1)* 0.000 description 1
- 125000002541 furyl group Chemical group 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 235000008397 ginger Nutrition 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 150000008282 halocarbons Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000012669 liquid formulation Substances 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- NCBZRJODKRCREW-UHFFFAOYSA-N m-anisidine Chemical compound COC1=CC=CC(N)=C1 NCBZRJODKRCREW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 125000002816 methylsulfanyl group Chemical group [H]C([H])([H])S[*] 0.000 description 1
- 239000011785 micronutrient Substances 0.000 description 1
- 235000013369 micronutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 239000012299 nitrogen atmosphere Substances 0.000 description 1
- SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N nonylphenol Chemical compound CCCCCCCCCC1=CC=CC=C1O SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- BTFQKIATRPGRBS-UHFFFAOYSA-N o-tolualdehyde Chemical class CC1=CC=CC=C1C=O BTFQKIATRPGRBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000008723 osmotic stress Effects 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 230000008447 perception Effects 0.000 description 1
- 229940083251 peripheral vasodilators purine derivative Drugs 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 229930195732 phytohormone Natural products 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000005648 plant growth regulator Substances 0.000 description 1
- 239000003375 plant hormone Substances 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 230000035409 positive regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical group 0.000 description 1
- 125000000561 purinyl group Chemical group N1=C(N=C2N=CNC2=C1)* 0.000 description 1
- ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N pyridoxine hydrochloride Chemical compound Cl.CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O ZUFQODAHGAHPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004172 pyridoxine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019171 pyridoxine hydrochloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000011764 pyridoxine hydrochloride Substances 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000008844 regulatory mechanism Effects 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 1
- PYODKQIVQIVELM-UHFFFAOYSA-M sodium;2,3-bis(2-methylpropyl)naphthalene-1-sulfonate Chemical compound [Na+].C1=CC=C2C(S([O-])(=O)=O)=C(CC(C)C)C(CC(C)C)=CC2=C1 PYODKQIVQIVELM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000013337 sub-cultivation Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 1
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 1
- 125000001412 tetrahydropyranyl group Chemical group 0.000 description 1
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 229940100640 transdermal system Drugs 0.000 description 1
- 238000012250 transgenic expression Methods 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 238000009834 vaporization Methods 0.000 description 1
- 230000008016 vaporization Effects 0.000 description 1
- 239000010455 vermiculite Substances 0.000 description 1
- 229910052902 vermiculite Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019354 vermiculite Nutrition 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
- A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
- A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D473/00—Heterocyclic compounds containing purine ring systems
- C07D473/26—Heterocyclic compounds containing purine ring systems with an oxygen, sulphur, or nitrogen atom directly attached in position 2 or 6, but not in both
- C07D473/32—Nitrogen atom
- C07D473/34—Nitrogen atom attached in position 6, e.g. adenine
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Pest Control & Pesticides (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Agronomy & Crop Science (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Dentistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Predkládané rešení se týká použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu obecného vzorce I, kde R.sub.6.n. je -NH-furfuryl, -NH-(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-1-yl), -NH-(3-methylbut-2-en-1-yl), -NH-(4-hydroxy-3-methylbutyl), -NH-(4-hyroxy-1,3-dimethylbut-2-en-1-ylamino), -NH-(4-hydroxy-1,3-dimethylbutylamino), -NH-benzyl, -NH-fenyl, a R.sub.9.n. je C.sub.1.n.-C.sub.3 .n.alkyl a C.sub.1.n.-C.sub.3 .n.alkenyl, pricemž každá z techto skupin je substituována jedním nebo více atomy halogenu, pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, která zahrnuje napr. stimulaci organogeneze u rostlin vedoucí ke zvetšení korenového systému, urychlení nalévání semen a zvetšení velikosti semen a plodu jednodeložných rostlin a zkrácení doby klícení semen rostlin; prípravku pro klonování rostlinných bunek, orgánu, zárodecných bunek a embryí a rustove-regulacních prípravku.
Description
(57) Anotace;
Předkládané řešení se týká použití 6-substituovaných 9halogenalkyl purinů obecného vzorce 1, kde R6 je -NHfurfuryl, -NH-{4-hydroxy-3-methylbut-2-en-l-yl). -NH-Í3methylbut*2-en-1-yl), -NH-(4-hydroxy-3-methylbutyl), -NH(4-hyroxy-i.3-dímethylbut-2-en-l-ylamino), -NH-(4-hydroxy1,3-dímethyl butylamino), -NH-benzyl, -NH-fenyl, a R9je Cr C3alkyl a Cj-Cjalkenyl, přičemž každáz těchto skupin je substituována jedním nebo více atomy halogenu, pro regulaci růstu a vývoje rostl in, rostl inných orgánů a buněk, která zahrnuje např. stimulaci organogeneze u rostlin vedoucí ke zvětšení kořenového systému, urychlení nalévání semena zvětšení velikosti semen a plodů jednoděložných rostlin a zkrácení doby klíčení semen rostlin; přípravků pro klonování rostlinných buněk, orgánů, zárodečných buněk a embryí a růstovč-regulačnich přípravků.
Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinů pro regulaci růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk, nové 6-substítuované 9-halogenalkyl puriny
Oblast techniky
Vynález se týká použití 6-substituovaných 9—halogenalkyl purinů pro regulaci růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk, přípravků obsahujících tyto deriváty a nových 6substituovaných 9-halogenalkyl purinů.
io
Dosavadní stav techniky
Rostlinné hormony cytokininy (CK) hrají klíčovou roli v různých fyziologických procesech, jako je vývoj, stresové reakce nebo senescence rostlin. Jejich hladiny jsou v různých tkáních nebo buněčných kompartmentech velmi přesně regulovány. Mechanismus regulace CK je zprostředkován proteiny účastnícími se biosyntézy, aktivace, degradace, transportu nebo percepce CK. Cytokinin dehydrogenasy (CKX, EC 1.5.99.12) jsou enzymy deaktivující CK ireverzibilní degradací jejich molekuly. V rostlinách existuje několik isoforem CKX, které mají různou spe20 cifitu vůči cytokininům (Bilyeu et al. 2001, Plant. Phys. 125:378; Šmehilová ct al. 2009, J. Exper. Bot. 60:2701). Sledování z měn hladin transkriptu jednotlivých isoforem CKX v listech huseníčku, kukuřice a ječmene odhalily zvýšenou expresi některých isoforem v průběhu senescence listů a stresu, což vede ke snížení hladiny cytokininů během senescence. Dále bylo zjištěno, že pri solném a osmotickém stresu je navíc posílena i biosyntéza CK, což ve výsledku vede k mírnému nárůstu aktivních forem CK (Vyroubalová et al. 2009, Plant Physiol. 151:433). Celkově tato pozorování naznačují významnou roli různých forem CK během různých fyziologických procesů, jako je abiotický stres (Kuiper et al. 1990, Plant and Soil 123, 243; Davies & Zhang 1991, Ann. Rev. Plant Physiol. Plant Mol. Biol. 42,55; Havlová 2008, Plant Cell. Env. 31:341) nebo senescence (Eisinger 1977, Plant Phys. 90, 1316; Lara et al. 2004, Plant Cell 16:1276). Přesná role CK
3o v uvedených procesech, zejména senescenci listů, však dosud nebyla objasněna.
Senescence listů je klíčovým krokem životního cyklu jednoletých rostlin, hrající důležitou roli v reprodukci, produktivitě, zvládání stresu a přežití u rostlin. Senescence je posledním krokem vývoje listů, závisejícím na věku, přičemž se ukazuje, že se jedná o složitý a vysoce regulovaný proces. Během tohoto procesu se ve stárnoucím listu nemobilizují uložené živiny a nastávají degradační procesy vedoucí k podpoře mladších vyvíjejících se orgánů, jako jsou mladé listy, plody či semena. Jedním z typických vizuálních symptomů senescence listů je ztráta chlorofylových pigmentů (žloutnutí), způsobená náhradou obsahu chloroplastů produkty procesů buněčné degradace. Žloutnutí listů je dále následováno ztrátou vody a případným oddělením listu. Na buněčné nebo molekulární úrovni zahrnují procesy vedoucí k těmto vizuálním symptomům kromě desintegrace chloroplastů také ztrátu proteinů a nukleových kyselin buňky. Molekulární podstata těchto dějů je pod kontrolou velmi rozdílných rostlinných regulačních mechanizmů. Ačkoliv senescence nastává s rostoucím věkem u mnoha druhů, její začátek a progrese může být ovlivňována mnoha faktory prostředí, jako je teplota, nedostatek minerálů a sucho, nebo vnitřními faktory, jako jsou regulátory růstu rostlin. Senescence listů je obecně vyvážena širokým spektrem fytohormonů, přičemž pokles hladiny cytokininů koreluje s procesem senescence v listech (Winkler et al., 2006, J. Exp. Bot. 57:391). Dále bylo ukázáno, že exogenní aplikace cytokininů inhibuje degradaci chlorofylu a proteinů fotosyntetického aparátu (He et al. 2005, J. Exper. Bot. 56, 1117 až 1128). Strategie oddálení senescence zahrnovala transgenní expresi isopentenyl transferasy (IPT; 2.5.1.27), enzymu podílejícího se na biosyntéze cytokininů. Transgenní rostliny se zvýšenými hladinami cytokininů vykazovaly oddálenou senescenci (Gan et al. 1995, Science 270:1986). Jiný přístup k udržení dostatečných hladin aktivních cytokininů v rostlinných tkáních zahrnuje inhibici cytokinin dehydrogenasy. Cytokinin-deficitní transgenní rostliny však nevykazovaly dřívější nástup senescence listů (Werner et al. 2003, Plant Biol. 8:371). Není tedy zatím prokázáno, zda snížení hladiny cytokininů způsobuje senescenci nebo zda se jedná o průvodní jev
- i setiescence. Enzymy považované za důležité v iniciaci a progresi senescence dále zahrnující proteasy, nukleasy a další degradativní enzymy. Předpokládá se, že enzymy podílející se na rozpadu chloroplastů mohou být přímo-indukované cytokininy. Remobilizace živin a udržování aktivity dalších částí rostlin je zajištěno enzymy regulujícími interakce zdroj-sink, především pak enzymy apoplastické floémové vykládací dráhy. Bylo zjištěno, že extracelulární invertasa, jeden z enzymů regulujících koncentraci hexosových cukrů v pletivech, je koindukovaná cytokininy. Bylo dále ukázáno, že extracelulární invertasa je potřebná pro oddálení senescence, což znamená, že mechanismus oddálení senescence cytokininy zahrnuje extracelulární invertasu (Lara et al. 2004, Plant Cell 16:1276). Bylo předpokládáno, že cytokinin dehydrogenásová aktivita se účastní procesu senescence, protože byla zjištěna výrazná upregulace dvou isoforem těchto enzymů deaktivujících cytokininy na úrovni exprese genů a v měřeních enzymové aktivity (Sromová Lucie, diplomová práce 2006, PřF UP).
Skutečnost, že cytokininy mohou oddalovat senescenci, je známá od první izolace kinetinu (N6furfurylaminopurin) (Miíler et al. 1956, J. Am. Chem. Soc. 78:1375) a testování jeho antisenescenčních vlastností na oddělených listech Xanthia (Richmond & Lang 1957, Science 125:650), Mnoho různých derivátů cytokininů oddaluje senescenci v různých druzích rostlin (Zhang & Letham 1989, J. Plant Growth Regul. 8:181; Kuhnle et al. 1977, Physiol. Plant 41:14; Eisinger 1977, Plant Physiol. 59:707; Kudryakova et al. 2001, Plant Growth Regul. 56:21). Jsou známy některé deriváty kinetinu (Zhang & Letham 1989, J. Plant. Growth Regul. 8:181; Fox et al. 1971, Plant Phys. 46:275). Připravili jsme několik nových derivátů substituovaných krátkými 9-alkylhalogenidy v poloze N9 purinu a stanovili jejich antisenescenční a protistámoucí vlastnosti v různých testech.
Dosud známé cytokininy jsou známé jako látky se stimulační aktivitou na buněčnou proliferaci při optimální koncentraci, avšak typicky při koncentracích převyšujících 10 μΜ se jejich účinky na buněčné dělení mění v inhibiční (Holub et al., 1998, Plant Growth Regul, 26, 109 až 115). Stejně tak je známo a dobře popsáno, že cytokininy působí jako negativní regulátory prodlužování kořene a tvorby postranních kořenů (Werner et al., 2001, Proč. Nati. Acad Sci USA. 98, 10487 až 92; Werner et al., 2003, Plant. Cell, 15, 2532 až 50), a jejich exogenní aplikace v koncentracích převyšujících 1 μΜ často vede ke kompletní inhibici růstu kořene. Tento vynález si klade zacil poskytnout další N9-substituované cytokininové deriváty, které mají unikátní aktivity v regulaci růstu rostlin, a které přitom nejsou toxické pro rostlinné a zvířecí buňky.
Purinové deriváty substituované v poloze 6 (případně substituovanými) skupinami benzyl, fenyl, furyl, furfuryl a naftyl, a v poloze 9 nižšími alkylovými skupinami, případně obsahujícími spojky -O- nebo -S-, spadají do obecného vzorce GB i 027 756 (1966) pro použití pro podporu růstu a/nebo prevenci rozkladných procesů v rostlinách, v příkladech tohoto dokumentu jsou však uvedeny pouze sloučeniny mající v poloze 9 tetrahydropyranyl, tedy aktivita sloučenin s nižší alkylovou skupinou v poloze 9 není prokázána a nelze ji vzhledem k rozsahu obecného vzorce z tohoto dokumentu vyvozovat. Dále obdobné deriváty, obsahující v poloze 6 případně substituovaný idi_yi iicďo iiaiL^i α v pvioze 9 Cr—alkyl ΐΐνίυ fenyl, připadne substituovaný fenyl, pro regula ci růstu rostlin spadají do obecného vzorce EP 0 155 911. Ani v tomto dokumentu není aktivita těchto derivátů prokázána, je prokázána pouze aktivita derivátu majícího v poloze 9 mesithylový substituent. Vzhledem k rozsahu obecného vzorce a strukturní rozdílnosti mesithylu od alkylu nelze činit závěry o skuteční aktivitě 9-alkylových substituentů.
Publikace Ramzayeva et al., Žurnál organičeskoj chimii (1988), 1090 až 1094 popisuje postup substituce 6-substituo váných purinů halogenalkyly. Sloučeniny známé z této publikace obsahují v poloze 6 benzylamino nebo methylthio skupinu a v poloze 9 2- chlorethyl, 2-bromethyl a 3chloropropyl skupinu. Tato publikace však nezmiňuje žádné použití uvedených sloučenin.
Podstata vynálezu
Předmětem předloženého vynálezu je použití sloučeniny obecného vzorce I,
*9 q kde io R6 je vybráno ze skupiny zahrnující -NH-furfuryl, - NH- (4-hydroxv 3 methylbut-2- tín- l -yl). -NH-(3-methylbut-2~en-l-yl), -NH-(4-hydroxy-3-methylbutyl), -NH-(4-hydroxy-lJdimethylbut-2—en-l-yl), -NH—(4--hydroxyL3 d i methyl butyl), -NH-benzyl, -NH-fenyl, přičemž benzyl, furfuryl a fenyl mohou být nesubstituované nebo substituované 1 az 3 substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, halogen, methyl a methoxy,
Rq je vybrán ze skupiny zahrnující C|-C3 alkyl a Ci~C3 alkenyl, přičemž každá z těchto skupin je substituována jedním nebo více atomy halogenu, pro regulaci růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk.
Halogen je vybrán ze skupiny zahrnující F, Cl, Br, I.
V případě, že sloučeniny podle předloženého vynálezu mají chirální centrum, vynález zahrnuje všechny enantiomery, směsi enantiomerů i racemáty. Vynález dále zahrnuje sloučeniny obecného vzorce I ve formě solí s alkalickými kovy, amoniakem a aminy, stejně jako jejich adičních solí s kyselinami.
S výhodou je R9 C|-C3 alkyl nebo Ci-C3 alkenyl, substituovaný na terminálním uhlíku jedním nebo dvěma atomy halogenu, a výhodně je atom halogenu vybrán ze skupiny zahrnující chlor a brom. Výhodně je R9 vybráno ze skupiny zahrnující chlormethyl, brommethyl, 2-chlorethyl, 2bromethyl, 2,2-dichlorethyl, 2,2-dibromethyl, 3-chlorpropyl, 3-brompropyl, 3,3-dichlorpropyl, 3,3-dibrompropyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl.
R« je s výhodou vybráno ze skupiny zahrnující -NH-furfuryl, -NH-(3-methylbut-2-en-l-yl).
Výhodnými sloučeninami podle vynálezu jsou substituované 6-substituované 9-alkylhalogenderiváty adeninu obecného vzorce I ze skupiny zahrnující: 6-(furfury lam i no)-9-( chlormethyl, 2chlorethyl, 3—chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-chIorbenzylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlor40 propyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3“-chlorbenzylamino)-9-(chIonnethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3-fluorbenzyIamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3-hydroxybenzyIamino)-9-(chlormethyl,
2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2- 3 CZ 303054 Β6 chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3-methoxybenzylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyi, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6{3-methylbut-2-en-l-ylamino)-9—(chlormethyl. 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6benzylamino~9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2—chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(4-hydroxy-3-methylbut-2—en-1ylamino)~9-<chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(Z)-(4—hydroxy-3-methylbut-2en-l-ylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(E)-(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-l-ylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3dimethylbut-2-en-1-ylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(E)-(4—hydroxy-1,3-dimethylbut-2-en-l-ylamÍno)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6—(4— hydroxy-3-methylbutylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(4-hydroxy1,3-dimethylbutylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-fenylamino~9(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2~bromvinyl)purin, 6-(3-methoxyfenylamino)-9-(chlomnethyl, 2chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyt, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-methoxybenzylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purín, 6-(2-hydroxybenzylamino)-9-(chlonnethyl, 2-chlorethyl, 3—chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-fluorbenzylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin.
Předmětem vynálezu je s výhodou použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adeninu obecného vzorce I při stimulaci organogeneze u rostlin vedoucí ke zvětšení kořenového systému. Na rozdíl od dosud známých cytokininů, které ve vyšších koncentracích inhibují růst a vývoj kořene, 6-substituované 9-halogenalkyl deriváty adeninu obecného vzorce I nemají ve vysokých koncentracích negativní vliv na růst kořene vůbec, nebo je tento efekt výrazně potlačen.
Předmětem vynálezu je dále s výhodou použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adeninu obecného vzorce I pro urychlení nalévání semen a zvětšení velikosti semene a plodů jednoděložných rostlin a pro zkrácení doby klíčení semen rostlin.
Předmětem vynálezu je také s výhodou použití 6—substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adenir-».i 1 i . L·» i l+ι L· 1I OA o mnrťnfTíinťiTa O L· senescence a stresu. Zvlášť výhodné jsou nové deriváty při použití v kalusových kulturách, neboť na rozdíl od dosud známých cytokininů nevykazují inhibiční účinek na růst a dělení rostlinných buněk při vysokých koncentracích a vykazují minimální toxicitu pro tyto buňky, což umožňuje v porovnání s cytokininy známými ze stavu techniky použití v širokém koncentračním rozmezí bez negativních účinků. Při příjmu 6-substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adeninu obecného vzorce I intaktní rostlinou nedochází na rozdíl od dosud známých cytokininů ke stresové odpovědi projevující se zvýšenou expresí stresových genů.
Předmětem vynálezu je s výhodou použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adeninu obecného vzorce 1 k oddálení degradace chlorofylu a stárnutí rostlinných pletiv. Tento pozitivní vliv na růst rostlin je způsoben unikátním inhibičním účinkem těchto derivátů na peroxidaci membránových lipidů. 9-halogenalkyl skupina těchto derivátů funguje jako protektivní skupina,
-4CZ 303054 Β6 která tlumí negativní vliv cytokininů na degradaci membrán, aniž by snížila jejich obecně pozitivní účinky.
Předmětem vynálezu je dále s výhodou použití 6—substituovaných 9-halogen alkyl derivátů adeninu obecného vzorce I jako antagonistů cytokin i nových receptorů, zejména pro zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů u jednoděložných rostlin.
Předmětem vynálezu je s výhodou použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl derivátů adeninu obecného vzorce I při produkci užitkových rostlin, výhodně jednoděložných. Jednoděložné rostliny (Liliopsida, Monocotyledonae) jsou třídou krytosemenných rostlin. Hospodářský význam jednoděložných pro člověka je naprosto zásadní. Patří sem totiž všechny pravé obilniny, z nichž nejrozšířenější je pšenice setá (Triticum aestivum), ječmen setý (Hordeum vulgare), oves setý (Avena sativa}, proso seté (Panicům sativum), rýže setá (Oryza sativa) a kukuřice setá (Zea mays), vše z čeledi li pníc ovité (Poaceae), do této čeledi také patří cukrová třtina. Další důležité hospodářské rostliny jsou palmy, např. kokosovník ořechoplodý (Cocos nucifera) nebo datlovník pravý (Phoenix dactylifera) aj., mnoho dalších známých i méně známých hospodářských rostlin je roztroušeno v jiných Čeledích, např. banánovník (Musa), ananasovník chocholatý (Ananas comosus), chřest lékařský (Asparagus officinalis}, česnek kuchyňský (Allium sativum}. cibule kuchyňská (Allium cepa), vanilka (Vanilla), zázvor (Zingiber) a mnohé další. Mnoho jednoděložných je také pěstování jako okrasné rostliny, pro ozdobné květy i listy, mnozí původem tropičtí zástupci jsou také rostlinami pokojovými.
Předmětem vynálezu je také s výhodou použití 6-substituovaných 9-halogenaIkyl derivátů adeninu obecného vzorce I při přípravě přípravků pro klonování rostlinných buněk, orgánů, zárodečných buněk a embryí.
Vynález dále zahrnuje přípravky pro klonování rostlinných buněk, orgánů, zárodečných buněk a embryí obsahující alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I a pomocné látky.
Předmětem vynálezu je konkrétněji použití 6-substituovaných 9-halogen alkyl derivátů adeninu obecného vzorce I pří přípravě růstově—regulačních přípravků k ošetřování rostlin ajejich orgánů či buněk.
Vynález rovněž zahrnuje růstově-regu lační přípravky obsahující alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I a pomocné látky.
Sloučeniny obecného vzorce I jsou používány v nemodifikované formě či ve formě soli, s výhodou společně s pomocnými látkami běžně využívanými v přípravcích, např. rozpouštědly, plnivy ČÍ nosiči, které jsou běžně užívané v zemědělství a jsou odborníkovi v oboru dobře známé. Jsou přednostně používány koncentráty aktivních látek a dále také suspenze nebo disperze, obzvláště izotonické vodné roztoky, suspenze a disperze, ředěné emulze, rozpustné prášky, prach, granuláty, krémy, gely, olejové suspenze a rovněž enkapsulované produkty, např. polymerní substance. Ve vztahu k typu přípravku je určena i metoda aplikace, například sprejování, atomizace, poprach, rozptyl, nátěr a polévání, která je zvolena ve vztahu k předurčenému použití a převažujícím okolnostem. Přípravky mohou být sterilizovány anebo obsahují další přídavné látky neutrální povahy, například konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadia anebo emulgátory, rozpouštěcí činidla, hnojivá, Či donory mikrohnojiv nebo další přípravky za účelem získání speciálních účinků.
Sloučenina obecného vzorce I může být smíchána s dalšími růstovými regulátory za účelem dosažení synergického účinku.
Předmětem předloženého vynálezu jsou dále sloučeniny obecného vzorce la,
-5 CZ 303054 B6
Re
da), kde
R6 je vybráno ze skupiny zahrnující -NH-furfuryl, -NH-(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-l-yl), -NH-(3-methylbut-2-en-l-yl), -NH-(4-hydroxy-3-methylbutyl), -NH-(4-hydroxy-l ,3-dimethylbut-2-en-l-yl), -NH-(4-hydroxy-l .3-dimethylbutyl), -NH-benzyl, -NH-fenyl, přičemž furfuryl může být nesubstituovaný nebo substituovaný 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, halogen, methyl a methoxy, a benzyl a fenyl mohou být nesubstituované nebo substituované 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny zahrnující halogen, methyl a methoxy,
Ro je vybrán ze skupiny zahrnující C1-C3 alkyl a CHJ alkenyl, přičemž každá z těchto skupin je substituována jedním nebo více atomy halogenu, za předpokladu, že: je-li R9 2-chlorethyl, Rft není -NH-furfuryl, -NH-benzyl, je-li R9 3 —chlorpropyl či 2-bromethyl, RŘ není -NH-benzyl.
Přípravky
Přípravky obsahující sloučeniny obecného vzorce I (aktivní složka) nebojejich soli a pokud je třeba, jednu nebo více pevných nebo kapalných pomocných látek, jsou připraveny známými způsoby, například smísením nebo mletím účinné látky s pomocnými látkami, jako jsou např. rozpouštědla nebo pevné nosiče. Do přípravků mohou být přidávány povrchově aktivní látky (surfaktanty).
V závislosti na povaze sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, která má být formulována, vhodné povrchově aktivní látky jsou neiontové, kationtové a/nebo aniontové povrchově aktivní látky a jejich směsi mající dobré emulzifikační, dispergaění a zvlhčovači vlastnosti. Příklady vhodných aniontových, neiontových a kationtových smáčedel jsou shrnuty například ve WO 97/34 485.
O-,— '------- ---..1 í _ 1 _ „ . X „ _ Z I M -11 1 j-w zn Λ 1 nm» 1 TtÍa/A *-»**»
A I AJ piipiťLVU ICllllUiaiwl aiUUVVIJinj vuwnvnv VZ.VIVV ijavw |7WIV LVI1VIV rjMUlVijU T Uiiw Lř4l*k4 čedla konvečně používaná při přípravách přípravků, které jsou popsány, např. v „McCutcheons Detergents and Emulsifiers Annual“ MC Publishíng Corp., Ridgewood New Jersey, 1981, Stache, H., „Tensid- Taschenbuch“, Carl Hanser Verlag, MunichNienna, 1981 and M. and
J. Ash, „Encyclopedia of Surfactants“, Vol-111, Chemical Publishing Co., New York, 1980 až 81.
Formulace přípravku obsahuje váhově od 0,1 do 99 % (w/w), zejména pak od 0,1 do 95 % (w/w) aktivní složky odpovídající látce nebo směsi látek obecného vzorce I, přičemž obsahuje i od 5 do
99,9 % směsi přísad či farmaceutických nosičů, a to v závislosti na způsobech aplikace, a popřípadě obsahuje i váhově od 0,1 do 25 % smáěedla.
Ačkoliv jsou komerční produkty obvykle připravovány ve formě koncentrátů, konečný uživatel upotřebí naředěný přípravek. Kompozice může proto obsahovat i další přísady, jakými jsou stabi-6CZ 303054 B6 lizátory, např. rostlinné oleje nebo epoxidizované rostlinné oleje (epoxidizovaný palmový olej 0;l, řepkový nebo olivový olej), odpěňovaČe, např. silikonový olej, konzervační přípravky, stabilizátory, zvlhčovadla nebo emulgátory, viskozitní činidla, pojivá, lepidla, a také hnojivá a další aktivní přísady. S výhodou jsou využívány přípravky následujícího složení: (% = hmotnostní procento).
Emulgované koncentráty:
aktivní složka: smáčedlo: kapalný nosič: Prášky:
aktivní složka: pevný nosič:
l až 90 %, s výhodou 5 až 20 % až 30 %, s výhodou 10 až 20 % 5 až 94 %, s výhodou 60 až 85 %
0,1 až 10 %, s výhodou 0,1 až 5 %
99,9 až 90 %, s výhodou 99,9 až 95 %
Suspenzní koncentráty:
aktivní složka:
voda;
smáčedlo:
Smáčivé prášky aktivní složka: smáčedlo: pevný nosič:
Granule:
aktivní složka: pevný nosič:
až 75 %, s výhodou 10 až 50 % 94 až 24 %, s výhodou 88 až 30 % 1 až 40 %, s výhodou 2 až 30 %
0,5 až 90 %, s výhodou 1 až 80 % 0,5 až 20 %, s výhodou 1 až 15 % 5 až 95 %, s výhodou 15 až 90 %
0,1 až 30 %, s výhodou 0,1 až 15 %
99,9 až 70 %, s výhodou 99,9 až 85 %
Kompozice mohou rovněž obsahovat další příměsi, jakými jsou stabilizátory, například rostlinné oleje nebo epoxidizované rostlinné oleje (epoxidizovaný kokosový olej, řepkový olej nebo sojový olej), odpěftovače, např. silikonový olej, konzervační látky, regulátory viskozity, pojivá, zahušťovadla, a také hnojivá a další aktivní látky. Pro použití sloučenin obecného vzorce I nebo jejich solí, nebo kompozic je obsahujících, se používají rozdílné metody a technologie, kterými jsou například následující:
i) Obalování osiva
a) Obalování osiva smáčivou práškovou formulací sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, a to mícháním v nádobě až do stejnorodé distribuce na povrchu semen (suché obalování). Při takové proceduře je přibližně 1 až 500 g sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, (4 g až 2 kg smáčivého prášku) používáno na 100 kg osiva.
b) Obalování osiva emulzifíkovaným koncentrátem sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, v souladu s metodou a) (mokré obalování).
c) Obalování osiva cestou máčení semen po dobu 1 až 72 h v tekutině obsahující od 100 do 1000 ppm sloučeniny obecného vzorce I nebo její soli, a s výhodou následného usušení semen (imerzní obalování).
Obecně jsou látky vzorce I nebojejich soli používány v množství od 1 do 1000 g, s výhodou od 5 do 250 g, na 100 kg semen, avšak v závislosti na metodice, která rovněž umožňuje přidání dalších aktivních látek nebo mikroživin; určené koncentrační limity se mohou pohybovat nahoru nebo dolů (opakované obalování).
ii) Aplikace cisternové směsi
Kapalná formulace směsi růstového regulátoru a antidotaje používána ve váhovém poměru jednoho k druhému od 10:1 do 1:100, rychlost aplikace růstového regulátoru od 0,005 do 5,0 kg na hektar. Taková cisternová aplikace směsi se provádí před anebo po setí.
iii) Aplikace do semenné brázdy
Sloučenina obecného vzorce I nebo její sůl, je zavedena do otevřené brázdy oseté semenem ve formě emulzifíkovaného koncentrátu, smáčivého prášku nebo granulí. Jakmile je semenná brázda zaklopena, je růstový regulátor aplikován cestou obvykle používanou při preemergentním procesu.
iv) Kontrolované uvolňování aktivních látek
Sloučeniny obecného vzorce 1 nebojejich soli, jsou aplikovány v roztoku k minerálním granulovaným nosičům nebo polymerizovaným granulím (močovina, formaldehyd) a jsou vysušeny. V případě, že je to žádoucí, tak se provádí obalování, které umožňuje postupné uvolňování látky v měřitelných množstvích po určitou specifickou periodu (obalované granule).
Přehled obrázků na výkresech
Obr. 1 ukazuje vliv nových sloučenin na růst cytokin i n-dependentního kalusu tabáku. A, vliv kinetinu a N9-substituovaných derivátů kinetinu; B, vliv iP na N9_substituovaných derivátů iP. Červené šipky naznačují koncentrační rozsah, ve kterém nové sloučeniny (plná čára), nebo kinetin a iP (čárkovaná čára) stimulují růst kalusu na úroveň vyšší než 50 % maximálního růstu indukovaného dosud známými rodičovskými cytokininy. Chybové úsečky naznačují směrodatnou odchylku (n=6).
Obr. 2 naznačuje porovnání účinku sloučeniny 1 a 2 ajejich dosud známého rodičovského cytokininu kinetinu. Vliv nových sloučenin na retenci obsahu chlorofylu v dekapdováných segmentech listů TriiÍcum aestivum cv. Hsreward v průběhu ssnsscence na světle. Chybové naznačují směrodatnou odchylku (n=3).
Obr. 3 ukazuje fenotyp kinetin N9-substituovanými deriváty kinetinu ošetřené semenáčky Z. mays. A a B zleva do prava: DMSO kontrola; 5 μΜ sloučeniny 1; 10 μΜ sloučeniny 1; 5 μΜ kinetin. Celé semenáčky kukuřice (A) s detaily laterálních kořenů (B).
Příklady provedení vynálezu
Výchozím materiálem pro přípravu sloučenin obecného vzorce l je 6-chlorpurin nebo 6-brompurin. Halogenované uhlovodíky byly získány ze Sigmy Aldrich. Výchozí substituované benzylaminy, které nebyly komerčně dostupné (ostatní získány od Sigma Aldrich nebo Olchemim), byly připraveny z odpovídajících aldehydů v přítomnosti katalyzátoru. Ty, které mají více methy-8CZ 303054 B6 lových skupin, mohou být s výhodou připraveny z příslušných methylbenzaldehydů. Hydroxyderiváty se připravují demethylací odpovídajících methoxy der i vátu 48% HBr v N2 atmosféře.
Elementární analýzy (C, H a N) byly měřeny na EA1108 CHN analyzátoru (Thermo). Na zjišťování teploty tání byl použit přístroj BUCHI Melting Point B-540. Analytická tenkovrstvá chromatografíe (TLC) byla prováděna na destičkách silikagelu 60 WF?54 (Merck), v mobilní fázi CHCI3:MeOH:konc. NH4OH (8:2:0,2, v/v/v). ES+ hmotová spektra byla naměřena za použití přímého nástřiku na Waters ZMD 2000 hmotovém spektrometru. Hmotnostní interval při měření byl 10 až 1500 u. Spektra byla měřena za použití cyklických skenů o délce 3,0 sekundy, při napětí na vstupní štěrbině 25 V a teplotě vypařovacího bloku 150°C, desolvatační teplotě 80 °C a průtoku desolvatační ho plynu 200 1/hodínu. Získaná data byla zpracována pomocí programu MassLynx data systém. NMR spektra byla měřena na přístroji Bruker Avance A V 300 při teplotě 27 °C a frekvenci 300,3 MHz ( H) respektive 75,48 MHz (' C). Vzorky byly připraveny rozpuštěním daných látek v DMSO-d,;. Tetramethylsilan (TMS) byl použit jako interní standard.
Příklad 1
Příprava 6-furfurylamino-9-(2-chlorethyl)purinu (1)
Kinetin (2 g, 9,3 mmol), l-brom-2-chlorethan (1,3 g, 9,1 mmol) a uhličitan draselný (2,5 g, 24 mmol) byly míchány ve 100 ml dimethylsulfoxidu (DMSO) po 18 hodin. Směs byla nalita na 200 ml ledové tříště, extrahována do ethylacetátu a sušena nad Na2SO4. Ethylacetátová frakce byla odpařena na odparce do úplného oddestilování rozpouštědla. Surový produkt v podobě bílé prásko vité látky byl krystalizován z methanolu. Výtěžek 80 %, *H NMR (DMSO-ύή;): 4,07 (2H, t. J = 5,82), 4,52 (2H, t, J - 5,82), 4,70 (2H, s(br)). 6,23 (1H, d, J ’ 2,67), 6,35 (1H, m), 7,53 (1H, d, J = 2,67), 8,22 (2H, m), 8,25 (IH, s)
Příklad 2
Příprava 6—furfurylamino--9 {2 bromethyl)purinii (2)
Kinetin (2 g, 9,3 mmol) a uhličitan draselný (2,4 g, 23 mmol) byly míchány ve 100 ml dimethylformamidu (DMF). K reakční směsi byl přidán 1,2-dibromethan (5,2 g, 27,6 mmol) a reakční směs byla míchána při pokojové teplotě po 12 h, vstupu vlhkosti bránila sušicí trubička naplněná CaCl2. Rozpouštědlo bylo odpařeno na žlutě zbarvený odparek a bylo přidáno 100 g ledu. Směs byla míchána 1 hodinu, dokud se nevyloučila bílá sraženina a nerozpustil led. Pevná látka byla odfiltrována, promyta studenou vodou a sušena při 50 °C. Produkt byl pře krystalován z methanolu. Výtěžek 60 %, *H NMR (DMSO-^): 3,95 (2H, t, J = 5,91), 4,58 (2H, t, J = 5,91), 4,69 (2H s(br)), 6,23 (IH, d, J = 2,94), 6,36 (IH, t, J = 2,94), 7,54 (IH, d, J - 2,94), 8,15 -(2H, m), 8,24 (IH, s).
Příklad 3
Příprava 6-[(3-methylbut-2-en-l~yl)amino]-9-(2-bromethyl)purmu (3)
Směs 6--[(3 rnethylbut-2- en -l -yl)amino]purinu (2 g, 9,8 mmol), 1,2-dibromethanu (12,94 g, 6 ml, 69 mmol) a uhličitanu draselného (2,5 g, 24 mmol) byla míchána v 50 ml DMSO po 12 h. Reakční směs pak byla nalita na ledovou tříšť a po rozpuštění ledu bylo přidáno 30 ml ethylacetátu. Ethylacetátová vrstva byla přečištěna aktivním uhlím a SiO2 a pak bylo odpařeno rozpouštědlo. Surový produkt byl krystalizován z methanolu, byla získána žlutá látka. Výtěžek: 70 %. lH NMR (DMSO-4í): L75 (3H, s), 1,59 (3H, s), 4,12 (2H, t, J = 5,76), 4,10 (2H, s(br)),
4,6 (2H, t, J = 5,76), 5,3 (IH, t, J = 6,57), 8,1 (IH, s(br)), 8,3 (IH, s).
Příklad 4
Příprava 6-[(3-methylbut-2-en-l-yl)amino]-9-(2-chlormethyl)purinu (4)
Směs 6~[(3-Methylbut-2-en-l-yl)amino]purÍn (2 g, 9,8 mmol), 1-brom-2-chlorethan (1,4 g, 9,8 mmol) a K2CO3 (3 g, 29 mmol) byly míchány v 50 ml DMSO 12 h. Reakční směs byla nalita na led (200 ml) a extrahována do ethylacetátu (50 1). Rekry stal izaci z hexanu byly získány bílé krystaly. Výtěžek: 60 %. lH NMR (DMSO-x/J: 1,66 (3H, s), 1,70 (3H, s), 4,06 (2H, t, J = 5,76),
4,10 (2H, s(br), H12), 4,50 (2H, t, J = 5,76), 5,31 (IH, t, J = 6,57), 7,767 (IH, s(br)), 8,15 (IH, s),
8,20 (IH, s).
Příklad 5
Příprava 6-benzylamino-9-(2-bromethyl)purinu (20)
Benzylaminopurin (1 g, 4,43 mmol), K2CO3 (2,45 g, 17,8 mmol) a 1,2-dibromethan (1,15 ml, 13,3 mmol) bylo mícháno 16 hodin za teploty místnosti pod CaCb zátkou v DMF (30 ml).
Odparek, po zakoncentrování na rotační vakuové odparce, byl rozředěn vodou (30 m l) a extrahován do ethylacetátu (EtOAc) (3x 15 ml). Organické frakce byly spojeny, promyty vodou (2x 10 ml), vysušeny Na^SO^ přečištěny karbofiltrací a zakoncentrovány na RVO. Surový produkt byl purifikován pomocí Flash chromatografie - chloroform:methanol (9:1) byl použit jako eluent. Výtěžek 82 %.
- 10CZ 303054 B6
Tabulka 1: Látky připravené způsobem podle příkladů 1 až 5
| R6 | R9 | Elementární analýza vypočteno/nalezeno | ||||
| %C | %H | %N | ES MS [M+H]+ | |||
| 5 | furfurylamino | chlormethyl | 50,1/49,9 | 3,8/3,8 | 26,6/26,7 | 264 |
| 6 | furfurylamino | brommethyl | 42,9/43,0 | 3,3/3,4 | 22,7/22,5 | 309 |
| 1 | furfurylamino | 2-chlorethyl | 51,9/52,0 | 4,4/4,5 | 25,2/25,2 | 278 |
| 2 | furfurylamino | 2-bromethyl | 44,7/44,8 | 3,8/3,9 | 21,7/21,9 | 323 |
| 7 | furfurylamino | 3-chlorpropyl | 53,5/53,6 | 4,8/4,7 | 24,0/23,7 | 292 |
| 8 | furfurylamino | 3-brompropyl | 46,4/46,1 | 4,2/4,2 | 20,8/21,1 “Ί | 337 |
| 9 | furfurylamino | 2-chlorvinyl | 52,3/52,1 | 3,7/3,6 | 25,4/25,2 | 276 |
| 10 | furfurylamino | 2-brom vinyl | 45,0/45,1 | 3,2/3,2 | 21,9/21,6 | 321 |
| 11 | furfurylamino | 2,2- dichlorethyl | 46,2/46,5 | 3,6/3,4 | 22,4/22,7 | 313 |
| 12 | (3-methy lbut-2-en-1 - yl)amino | chlormethyl | 52,5/52,4 | 5,6/5,5 | 27,8/27,5 | 252 |
| 13 | (3-methylbut-2-en-l- yl)amino | brommethyl | 44,6/44,9 | 4,8/4,6 | 23,7/24,0 | 297 |
| 3 | (3 -methy lbut-2-en-1 - yl)amino | 2-bromethyl | 46,5/46,3 | 5,2/5,2 | 22,6/22,1 | 310 |
| 4 | (3-methy lbut-2-en-1 - yl)amino | 2-chlorethyl | 54,2/54,6 | 6,1/6,2 | 26,4/26,2 | 266 |
| 14 | (3 -methy Íbut-2-en-1 - yl)amino | 3-brompropyl | 48,2/48,2 | 5,6/5,6 | 21,6/21,3 | 325 |
| 15 | (3-methylbut-2-en-l - yl)amino | 3-chlorpropyl | 55,8/56,0 | 6,5/6,1 | 25,0/24,6 | 280 |
| 16 | (3-methylbut-2-en- i - yl)amino | 2-chlorvinyl | 54,7/54,3 | 5,4/5,3 | 26,6/26,3 | 264 |
| 17 | (3 -methy lbut-2 -en-1 - yl)amino | 2-brom vinyl | 46,8/46,7 | 4,6/4,3 | 22,7/22,4 | 309 |
| 18 | (3 -methy lbut-2-en-1 - yl)amino | 2,2- dichlorethyl | 48,0/48,4 | 5,0/5,2 | 23,3/23,0 | 301 |
| 19 | benzylamino | chlormethyl | 57,0/58,3 | 4,4/4,5 | 25,6/25,7 | 274 |
| 20 | benzy lamino | 2-chlorethyl | 58,4/58,7 | 4,9/5,0 | 24,3/24,2 | 288 |
- 11 CZ 303054 B6
| 21 | benzylamino | 3-chlorpropyl | 59,7/60,1 | 5,3/5,5 | 23,2/23,5 | 302 | Z] |
| 22 | benzylamino | brommethyl | 49,1/49,1 | 3,8/3,9 | 22,0/21,8 | 319 | |
| 23 | benzylamino | 2-bromethyl | 50,6/50,5 | 4,3/4,2 | 21,1/21,4 | 333 | |
| 24 | benzylamino | 3-brompropyl | 52,0/52,3 | 4,7/4,9 | 20,2/20,5 | 347 | |
| 25 | benzylamino | 2-chlorvinyl | 58,9/59,8 | 4,2/4,1 | 24,5/24,2 | 286 | |
| 26 | benzylamino | 2-bromvinyl | 50,9/50,7 | 3,7/3,6 | 21,2/21,5 | 331 | |
| 27 | benzylamino | 2,2- dichlorethyl | 52,2/52,5 | 4,1/4,3 | 21,7/21,4 | 323 | |
| 28 | fenylamino | chlormethyl | 55,5/55,1 | 3,9/3,7 | 27,0/27,3 | 260 | |
| 29 | fenylamino | 2-chlorethyl | 57,0/57,1 | 4,4/4,5 | 25,6/25,4 | 274 | |
| 30 | fenylamino | 3-chlorpropyl | 58,4/58,4 | 4,9/4,9 | 24,3/24,2 | 288 | |
| 31 | fenylamino | brommethyl | 47,4/47,8 | 3,3/3,5 | 23,0/23,2 | 305 | |
| 32 | fenylamino | 2-bromethyl | 49,1/49,2 | 3,8/3,9 | 22,0/22,3 | 319 | |
| 33 | fenylamino | 3-brompropyl | 50,6/50,4 | 4,3/4,5 | 21,1/21,4 | 333 | |
| 34 | fenylamino | 2-bromvinyl | 49,4/49,1 | 3,2/3,0 | 22,2/21,8 | 317 | |
| 35 | fenylamino | 2-chlorvinyl | 57,5/57,9 | 3,7/3,9 | 25,8/26,0 | 272 | |
| 36 | fenylamino | 2,2- dichlorethyl | 50,7/50,5 | 3,6/3,7 | 22,7/22,8 | 309 | |
| 37 | 3 -methoxy benzylamino | chlormethyl | 55,4/55,2 | 4,7/4,7 | 23,1/23,4 | 304 | |
| 38 | 3-methoxybenzylamino | 2-chlorethyl | 56,7/56,4 | 5,1/5,2 | 22,0/22,1 | 318 | |
| 39 | 3-methoxybenzylamino | 3-chlorpropyl | 57,9/58,0 | 5,5/5,2 | 21,1/21,5 | 332 | |
| 40 | 3 -methoxy benzylami no | brommethyl | 48,3/48,3 | 4,1/4,2 | 20,1/20,0 | 349 | |
| 41 | 3 -methoxy benzylamino | 2-bromethyl | 49,7/49,6 | 4,5/4,4 | 19,3/19,1 | 363 | |
| 42 | 3-methoxybenzylamino | 3-brompropyl | 51,1/51,3 | 4,8/4,9 | 18,6/19,0 | 377 | |
| 43 | 3 -methoxybenzy lamino | 2-chlorvinyl | 57,1/57,3 | 4,5/4,5 | 22,2/22,6 | 316 | |
| 44 | 3 -methoxy benzylamino | 2-bromvinyl | 50,0/49,7 | 3,9/3,6 | 19,4/19,1 | 361 | |
| 45 | 3-methoxybenzylamino | 2,2- dichlorethyl | 51,2/51,5 | 4,3/4,3 | 19,9/20,1 | 353 | |
| 46 | 3-hydroxy benzylamino | chiormetnyi | 53,9/34,2 | 4 rf Z | 2no | ||
| 47 | 3-hydroxy benzylamino | 2-chlorethyl | 55,4/55,3 | 4,7/4,8 | 23,1/23*2 | 304 | |
| 48 | 3-hydroxy benzylamino | 3-chlorpropyl | 56,7/56,4 | 5,1/5,0 | 22,0/21,8 | 318 | |
| 49 | 3 -hydroxybenzylamino | brommethyl | 46,7/46,8 | 3,6/3,6 | 21,0/21,3 | 335 |
- 12 CZ 303054 B6
| 50 | 3-hydroxybenzylamino | 2-bromethyl | 48,3/48,0 | 4,1/4,4 | 20,1/20,5 | 349 |
| 51 | 3-hydroxybenzylamino | 3-brompropyl | 49,7/49,5 | 4,5/4,4 | 19,3/19,1 | 363 |
| 52 | 3 -hydroxybenzylamino | 2-chlorvinyl | 55,7/55,8 | 4,0/4,1 | 23,2/23,5 | 302 |
| 53 | 3 -hydroxybenzylamino | 2-bromvinyl | 48,6/48,4 | 3,5/3,7 | 20,2/21,9 | 347 |
| 54 | 3 -hydroxybenzylamino | 2,2- dichlorethyl | 49,7/49,8 | 3,9/4,0 | 20,7/20,8 | 339 |
| 55 | 2-methoxybenzylamino | chlormethyl | 55,4/55,1 | 4,7/4,4 | 23,1/22,8 | 304 |
| 56 | 2- methoxy benzy lamino | 2-chlorethyl | 56,7/56,8 | 5,1/5,2 | 22,0/22,1 | 318 |
| 57 | 2- methoxy benzy 1 amino | 3-chlorpropyl | 57,9/57,8 | 5,5/5,5 | 21,1/21,0 | 332 |
| 58 | 2-methoxybenzylamino | brommethyl | 48,3/48,2 | 4,1/4,0 | 20,1/20,3 | 349 |
| 59 | 2-methoxybenzylamino | 2-bromethyl | 49,7/50,0 | 4,5/4,7 | 19,3/19,4 | 363 |
| 60 | 2-methoxybenzylamino | 3-brompropyl | 51,1/51,4 | 4,8/4,9 | 18,6/18,4 | 377 |
| 61 | 2-methoxybenzylamino | 2-bromvinyl | 50,0/49,9 | 3,9/3,9 | 19,4/19,4 | 361 |
| 62 | 2-methoxybenzylamino | 2-chlorvinyl | 57,1/57,4 | 4,5/4,6 | 22,2/22,6 | 316 |
| 63 | 2 -methoxy benzylamino | 2,2- dichlorethyl | 51,2/51,0 | 4,3/4,5 | 19,9/20,3 | 353 |
| 64 | 2-hydroxybenzylamino | chlormethyl | 53,9/53,7 | 4,2/4,1 | 24,2/24,1 | 290 |
| 65 | 2-hy droxy benzy lamino | 2-chlorethyl | 55,4/55,3 | 4,7/4,8 | 23,1/23,2 | 304 |
| 66 | 2-hydroxybenzylamino | 3-chlorpropyl | 56,7/56,8 | 5,1/5,1 | 22,0/21,9 | 318 |
| 67 | 2-hydroxy benzy 1 amino | brommethyl | 46,7/46,8 | 3,6/3,7 | 21,0/21,3 | 335 |
| 68 | 2-hydroxybenzylamino | 2-bromethyl | 48,3/48,1 | 4,1/4,3 | 20,1/20,4 | 349 |
| 69 | 2-hydroxybenzylamino | 3-brompropyl | 49,7/49,3 | 4,5/4,2 | 19,3/19,5 | 363 |
| 70 | 2-hydroxybenzylamino | 2-chlorvinyl | 55,7/56,0 | 4,0/4,1 | 23,2/23,7 | 302 |
| 71 | 2-hydroxybenzylamino | 2-bromvinyl | 48,6/48,9 | 3,5/3,7 | 20,2/20,1 | 347 |
| 72 | 2-hydroxybenzylamino | 2,2- dichlorethyl | 49,7/49,6 | 3,9/3,9 | 20,7/20,9 | 339 |
| 73 | 2-fluorbenzylamino | chlormethyl | 53,5/53,4 | 3,8/3,8 | 24,0/23,7 | 292 |
| 74 | 2-fluorbenzy lamino | 2-chlorethyl | 55,0/55,1 | 4,3/4,3 | 22,9/23,1 | 306 |
| 75 | 2-fluorbenzylamino | 3-chlorpropyl | 56,3/56,7 | 4,7/4,9 | 21,9/21.9 | 320 |
| 76 | 2-fluorbenzylamino | brommethyl | 46,5/46,1 | 3,3/3,0 | 20,8/20,6 | 337 |
| 77 | 2-fluorbenzylamino | 2-bromethyl | 48,0/48,2 | 3,7/3,8 | 20,0/20,4 | 351 |
| 78 | 2-fluorbenzylamino | 3-brompropyl | 49,5/49,6 | 4,2/4,2 | 19,2/19,6 | 365 |
-13CZ 303054 B6
| 79 | 2-fluorbenzylamino | 2-bromvinyl | 48,3/48,3 | 3,2/3,1 | 20,1/19,8 | 349 |
| 80 | 2-fluorbenzy 1 am ino | 2-chlorvinyl | 55,4/55,6 | 3,7/3,8 | 23,1/23,4 | 304 |
| 81 | 2-fluorbenzylamino | 2,2- dichlorethyl | 49,4/49,1 | 3,6/3,4 | 20,6/20,2 | 341 |
| 82 | 3 -fluorbenzy lamino | chlormethyl | 53,5/53,7 | 3,8/4,0 | 24,0/24,3 | 292 |
| 83 | 3 -fluorbenzy lamino | 2-chlorethyl | 55,0/55,2 | 4,3/4,3 | 22,9/23,1 | 306 |
| 84 | 3 -fluorbenzy lamino | 3-chlorpropyl | 56,3/56,5 | 4,7/4,7 | 21,9/22,2 | 320 |
| 85 | 3-fluorbenzylamino | bronunethyl | 46,5/46,1 | 3,3/2,9 | 20,8/20,5 | 337 |
| 86 | 3-fluorbenzylamino | 2-bromethyl | 48,0/48,0 | 3,7/3,7 | 20,0/20,2 | 351 |
| 87 | 3 -fluorbenzylammo | 3-brompropyl | 49,5/49,4 | 4,2/4,2 | 19,2/19,5 | 365 |
| 88 | 3 -fluorbenzy lamino | 2-chlorvinyl | 55,4/55,5 | 3,7/3,7 | 23,1/23,4 | 304 |
| 89 | 3-fluorbenzylamino | 2-bromvinyl | 48,3/48,2 | 3,2/3,0 | 20,1/19,8 | 349 |
| 90 | 3 -fluorbenzy lamino | 2,2- dichlorethyl | 49,4/49,9 | 3,6/3,6 | 20,6/20,8 | 341 |
| 91 | 2-chlorbenzylamino | chlormethyl | 50,7/50,8 | 3,6/3,9 | 22,7/23,1 | 309 |
| 92 | 2-chlorbenzylamino | 2-chlorethyl | 52,2/51,9 | 4,1/3,8 | 21,7/21,5 | 323 |
| 93 | 2-chlorbenzylamino | 3-chlorpropyl | 53,6/53,2 | 4,5/4,4 | 20,8/20,5 | 337 |
| 94 | 2-chlorbenzylamino | brommethyl | 44,3/44,1 | 3,1/3,0 | 19,9/19,7 | 353 |
| 95 | 2-chlorbenzy lamino | 2-bromethyl | 45,9/46,2 | 3,6/3,7 | 19,1/19,3 | 367 |
| 96 | 2-chlorbenzyIamino | 3-brompropyl | 47,3/47,5 | 4,0/4,2 | 18,4/18,7 | 381 |
| 97 | 2-chlorbenzy lamino | 2-chlorvinyl | 52,5/52,2 | 3,5/3,3 | 21,9/21,6 | 321 |
| 98 | 2-chlorbenzylamino | 2-bromvinyl | 46,1/46,3 | 3,0/3,1 | 19,2/19,4 | 365 |
| 99 | 2-chlorbenzylamino | 2,2- dichlorethyl | 47,2/47,3 | 3,4/3,4 | 19,6/19,9 | 357 |
| 100 | 3-chlorbenzy lamino | chlormethyl | 50,7/50,5 | 3,6/3,3 | 22,7/22,4 | 309 |
| 101 | 3 -chlorbenzy lamino | 2-chlorethyl | 52,2/52,2 | 4,1/4,0 | 21,7/22,0 | 322 |
| 102 | 3 -chlorbenzy lamino | 3-chlorpropyl | 53,6/53,7 | 4,5/4,5 | 20,8/21,0 | 337 |
| 103 | 3 -chlorbenzy lami no | brommethyl | 44,3/44,3 | 3,1/3,0 | 19,9/197 | 353 |
| 104 | 3 -chlorbenzy lamino | 2-bromethyl | 45,9/45,9 | 3,6/3,6 | 19,1/19,0 | 367 |
| 105 | 3-chlorbenzy lamino | 3-brompropyl | 47,3/47,1 | 4,0/3,8 | 18,4/18,1 | 381 |
| 106 | 3-chlorbenzy lamino | 2-chlorvinyl | 52,5/53,7 | 3,5/3,8 | 21,9/22,2 | 321 |
| 107 | 3-chlorbenzy lamino | 2-bromvinyl | 46,1/46,3 | 3,0/3,0 | 19,2/19,6 | 365 |
- 14CZ 303054 B6
| 108 | 3 -chlorbenzy lamino | 2,2- dichlorethyl | 47,2/47,3 | 3,4/3,4 | 19,6/19,8 | 357 |
| 109 | (Z)-(4-hydroxy-3- methy lbut-2-en-1 -yl)amino | brommethyl | 42,3/42,3 | 4,5/4,2 | 22,4/22,1 | 313 |
| 110 | (Z>(4-hydroxy-3- methy lbut-2-en-1 -y l)amino | 2-bromethyl | 44,2/44,2 | 4,9/5,1 | 21,5/21,5 | 327 |
| lil | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 3-brompropyl | 45,9/45,7 | 5,3/5,1 | 20,6/20,3 | 341 |
| 112 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -y l)amino | chlormethyl | 49,4/49,7 | 5,3/5,5 | 26,2/25,4 | 268 |
| 113 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-l -yl)amino | 2-chlorethyl | 51,2/51,2 | 5,7/5,7 | 24,9/25,1 | 282 |
| 114 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 3-chlorpropyl | 52,8/52,8 | 6,1/6,3 | 23,7/24,0 | 296 |
| 115 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 2-chlorvinyl | 51,5/51,8 | 5,0/5,3 | 25,0/25,4 | 280 |
| 116 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 2-bromvinyl | 44,5/44,7 | 4,4/4,5 | 21,6/21,9 | 325 |
| 117 | (Z)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 2,2- dichlorethyl | 45,6/45,4 | 4,8/4,8 | 22,2/21,9 | 317 |
| 118 | (E)-(4-hydroxy-3- methyibut-2-en-1 -y l)amino | brommethyl | 42,3/42,1 | 4,5/4,3 | 22,4/22.1 | 313 |
| 119 | (E)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-l-yl)amino | 2-bromethyl | 44,2/44,2 | 4,9/5,1 | 21,5/21,5 | 327 |
| 120 | (E)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 3-brompropyl | 45,9/45,8 | 5,3/5,1 | 20,6/20,4 | 341 |
| 121 | (E)-(4-hy droxy-3 - methylbut-2-en-l -yl)amino | chlormethyl | 49,4/49,5 | 5,3/5,4 | 26,2/26,4 | 268 |
| 122 | (E)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 2-chlorethyl | 51,2/51,4 | 5,7/5,9 | 24,9/25,1 | 282 |
| 123 | (E)-(4-hydroxy-3- methylbut-2-en-1 -yl)amino | 3-chlorpropyl | 52,8/52,4 | 6,1/6,0 | 23,7/23,4 | 296 |
- 15CZ 303054 B6
| 124 | (E)-(4-hydroxy-3 - methylbut-2-en- 1-y l)amino | 2-chlorvinyl | 51,5/51,4 | 5,0/5,0 | 25,0/24,6 | 280 |
| 125 | (E)-(4-hydroxy-3 - methy lbut-2-en-1 -y l)amino | 2-bromvinyl | 44,5/44,7 | 4,4/4,5 | 21,6/21,8 | 325 |
| 126 | (E)-(4-hydroxy-3- methy lbut-2-en-1 -yl)amino | 2,2- dichlorethyl | 45,6/45,7 | 4,8/5,0 | 22,2/22,6 | 317 |
| 127 | 6-(Z)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-l - ylamino) | chlormethyl | 51,2/51,5 | 5,7/5,6 | 24,9/24,7 | 282 |
| 128 | 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 2-chlorethyl | 52,8/52,9 | 6,1/6,1 | 23,7/23,9 | 296 |
| 128 | 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 3-chlorpropyl | 54,3/54,0 | 6,5/6,2 | 22,6/22,3 | 310 |
| 129 | 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3- dimethylbut-2-en-l - ylamino) | brommethyl | 44,2/44,5 | 4,9/4,7 | 21,5/21,3 | 327 |
| 130 | 6-(Z)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 2-bromethyl | 45,9/45,7 | 5,3/5,1 | 20,6/20,4 | 341 |
| 131 | 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3- dimethy lbut-2-en-1 - ylamino) | 3-brompropyl | 47,5/47,4 | 5,7/5,7 | 19,8/19,6 | 355 |
| 132 | 6-(Z)-(4-hydroxy-l,3- dimethy lbut-2-en-1 - ylamino) | 2-chlorvinyl | 53,2/53,5 | 5,5/5,4 | 23,8/24,0 | 294 |
| 133 | 6-(Z>(4-hydroxy-1 ,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 2-bromvinyl | 46,2/46,1 | 4,8/5,0 | 20,7/21,0 | 339 |
| 134 | 6-(Z)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-l -ylamino | 2,2- dichlorethyl | 47,3/47,1 | 5,2/5,3 | 21,2/21,0 | 331 |
- 16CZ 303054 B6
| ylamino) | ||||||
| 135 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | chlormethyl | 51,2/51,4 | 5,7/5,9 | 24,9/24,6 | 282 |
| 136 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3- dimethy Ibut-2-en-1 - ylamino) | 2-chlorethyl | 52,8/52,5 | 6,1/5,9 | 23,7/23,4 | 296 |
| 137 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3dimethylbut-2-en-l - ylamino) | 3-chlorpropyl | 54,3/54,5 | 6,5/6,7 | 22,6/22,8 | 310 |
| 138 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3 - methyíbut-2-en-1 -ylamino) | brommethyl | 44,2/44,1 | 4,9/4,8 | 21,5/21,3 | 327 |
| 139 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3- dimethy lbut-2-en-1 - ylamino) | 2-bromethyl | 45,9/46,2 | 5,3/5,5 | 20,6/20,9 | 341 |
| 140 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 3-brompropyl | 47,5/47,3 | 5,7/5,3 | 19,8/19,4 | 355 |
| 141 | 6-(E)-(4-hy droxy-1,3 - dimethy lbut-2-en-1 - ylamino) | 2-chlorvinyl | 53,2/53,6 | 5,5/5,8 | 23,8/24,0 | 294 |
| 142 | 6-(E)-(4-hy droxy-1,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 2-brom vinyl | 46,2/46,1 | 4,8/4,6 | 20,7/20,5 | 339 |
| 143 | 6-(E)-(4-hydroxy-1,3- dimethylbut-2-en-1 - ylamino) | 2,2- dichlorethyl | 47,3/47,6 | 5,2/5,4 | 21,2/21,5 | 331 |
| 144 | 3-methoxyfenylamino | chlormethyl | 53,9/53,8 | 4,2/4,2 | 24,2/24,1 | 290 |
| 145 | 3-methoxyfenylamino | 2-chlorethyl | 55,4/55,5 | 4,7/4,6 | 23,1/23,2 | 304 |
| 146 | 3 -methoxyfenylamino | brommethyl | 46,7/46,9 | 3,6/3,9 | 21,0/21,4 | 335 |
| 147 | 3 -methoxyfenylamino | 2-bromethyl | 48,3/48,7 | 4,1/4,3 | 20,1/20,2 | 349 |
| 148 | 3 -methoxyfenylamino | 3-brompropyl | 49,7/49,6 | 4,5/4,5 | 19,3/19,1 | 363 |
- 17CZ 303054 B6
| 149 | 3 -methoxy feny lamino | 3-chlorpropyI | 56,7/56,4 | 5,1/5,2 | 22,0/22,1 | 318 |
| 150 | 3 -methoxyfeny lamino | 2-chlorvinyl | 55,7/55,8 | 4,0/4,2 | 23,2/23,5 | 302 |
| 151 | 3 -methoxyfeny lamino | 2-bromvinyl | 48,6/48,9 | 3,5/3,8 | 20,2/20,5 | 347 |
| 152 | 3-methoxyfeny lamino | 2,2- dichlorethyl | 49,7/49,9 | 3,9/3,8 | 20,7/20,4 | 339 |
| 153 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | chlormethyl | 49,0/48,2 | 6,0/5,8 | 26,0/26,3 | 270 |
| 154 | 4-hydroxy-3- methylbutylamino | 2-chlorethyl | 50,8/50,5 | 6,4/6,1 | 24,7/24,3 | 284 |
| 155 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | 3-chlorpropyl | 52,8/52,7 | 6,1/6,0 | 23,7/23,6 | 296 |
| 156 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | brommethyl | 42,1/42,3 | 5,1/5,4 | 22,3/22,5 | 315 |
| 157 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | 2-bromethyl | 43,9/44,0 | 5,5/5,6 | 21,3/21,4 | 329 |
| 158 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | 3-brompropyl | 45,6/45,8 | 5,9/6,0 | 20,5/20,2 | 343 |
| 159 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | 2-chlorvinyl | 51,2/51,1 | 5,7/5,9 | 24,9/25,2 | 282 |
| 160 | 4-hydroxy-3- methylbuty lam ino | 2-bromvinyl | 44,2/44,4 | 4,9/5,1 | 21,5/21,8 | 327 |
| 161 | 4-hydroxy-3- methylbuty lamino | 2,2- dichlorethyl | 45,3/45,1 | 5,4/5,3 | 22,0/21,7 | 319 |
| 162 | 4-hydroxy-l,3- dimethylbutylamino | chlormethyl | 50,8/50,7 | 6,4/6,3 | 24,7/24,5 | 284 |
| 163 | 4-hydroxy-l,3- dimethylbutylamino | 2-chlorethyl | 52,4/52,3 | 6,8/6,7 | 23,5/23,1 | 298 |
| 164 | 4-hydroxy-l,3- j;„ j - | 3-chlorpropyl | 53,9/54,2 | 7,1/7,4 | 22,5/22,7 | 312 |
| 165 | 4-hydroxy-l,3- dimethylbutylamino | brommethyl | 43,9/43,7 | 5,5/5,3 | 21,3/21,1 | 329 |
- 18CZ 303054 B6
| 166 | 4-hydroxy-1,3- dimethylbutylamino | 2-bromethyl | 45,6/45,8 | 5,9/6,1 | 20,5/20,7 | 343 |
| 167 | 4-hydroxy-l,3- dimethy Ibuty lamino | 3-brompropyl | 47,2/47,0 | 6,2/6,2 | 19,7/19,4 | 357 |
| 168 | 4-hydroxy-1,3- dimethylbutylamino | 2-chlorvinyl | 52,8/52,7 | 6,1/6,1 | 23,7/23,9 | 296 |
| 169 | 4-hydroxy-l,3- dimethyibutylamino | 2-bromvinyl | 45,9/45,7 | 5,3/5,2 | 20,6/20,4 | 341 |
| 170 | 4-hydroxy-1,3- dimethylbutylamino | 2,2- dichlorethyl | 47,0/46,9 | 5,8/5,7 | 21,1/21,4 | 333 |
Příklad 6
Testování vlivu nových látek na buněčné dělení rostlinných buněk
Stimulační vliv nově připravených derivátů byl testován v kalusovém biotestu za použití cytokinin-dependentního kalusu tabáku. Tento cytokinin-dependentní tabákový kalus Nicotiana io tabacum L. cv, Wisconsins 38 byl udržován při 25 °C na modifikovaném médiu MurashigeSkoog (MS) obsahujícím na 1 litr; 4 μιηοΐ kys. nikotinové, 2,4 μπιοί pyridoxin hydrochloridu,
1,2 μιηοΐ thiaminu, 26,6 μπιοί glycinu, 1,37 μιηοΐ glutaminu, 1,8 μπιοί myoinositolu, 30 g sacharosy, 8 g agaru, 5,37 μηιοί α-naftyloctové kyseliny a 0,5 μπιοί 6-benzylaminopurinu. Subkuitivace probíhala každé 3 týdny. Čtrnáct dní před započetím biotestu byl kalus přenesen na médium bez 6-benzylaminopurinu. Stimulační růstová aktivita byla stanovena na základě nárůstu čerstvé hmoty kalusu po 4 týdnech kultivace. Šest replikátů bylo připraveno pro každou testovanou koncentraci a druhý test byl opakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byly testovány nové sloučeniny, které byly porovnány s aktivitou jejich N9-nesubstituovaných rodičovských cytokininů Kin a iP, které je známý jako velmi aktivní cytokininy. Testované cytokininy byly rozpuštěny v dimethylsulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10~3M. Tento zásadní roztok byí dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10”8 až 10“* M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu.
Ze získaných dat byla opět vypočítána maximální účinná koncentrace testované látky. Byla vypočtena relativní účinnost látky při této koncentraci (tabulka 2). Aktivita získaná při 10 6 M N9-substituováných rodičovských cytokininů Kin a 10“5M iP byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
Látka účinkující jako cytokinin by měla mít stimulační vliv na buněčné dělení rostlinných buněk. Výsledky v tabulce 2 naznačují, že nově připravené substituované deriváty obecného vzorce I vykazovaly silnou cytokininovou aktivitu v kalusovém biotestu ve srovnání s dosud známým cytokininy Kin a iP.
- 19CZ 303054 B6
Tabulka 2: Vliv nových sloučenin na růst cytokinin-dependentního tabákového kalusu Nicotiana tabacum L. cv. Wisconsins 38
| č. | Testovaná sloučenina | nej účinnější koncentrace (mol.r1) | aktivita (%) [10-6 mol.!1 Kin = 100%] | aktivita (%) [10s mol.r1 iP = 100%] |
| 6-furfurylamínopurm (Kin) | io-6 | 100 | ||
| 1 | 6- furfury lamino-9-(2-ch 1 orethy l)purin | IO3 | 120 (±6) | |
| 2 | 6-furfurylamino-9-(2-bromethy l)purin | IO’5 | 110 (±3) | |
| 6-(3-methylbut-2-en-l -yl)aminopurin (iP) | 10'3 | 100 | ||
| 3 | 6-((3-methylbut-2-en-l-yl)amino)-9-(2“ bromethyl)purin | 10’3 | 103(+4) | |
| 4 | 6-((3 -methy lbut-2-en-1 -y l)amino)-9-(2chlorethyl)purin | 105 | 112 (±7) |
Příklad 7 io Stimulace buněčné proliferace při vysokých koncentracích
Cytokininy jsou známé jako látky se stimulační aktivitou na buněčnou proliferaci při optimální koncentraci, avšak typicky při koncentracích převyšujících 10 μΜ se jejich účinky na buněčné dělení mění v inhibiční (Holub et al, 1998, Plant Growth Regul, 26, 109 až 115, 1998). Z těchto důvodů byl testován i účinek vysokých koncentrací nově připravených derivátů s pomocí cytokinin-dependentního kalusu tabáku tak, jak je popsáno v příkladu 6. Nové sloučeniny 1, 2 a 4 byly testovány ve vysokých koncentracích (1 až 100 μΜ) ajejich aktivity byly porovnány s aktivitami s příslušnými N9-nesubstituovanými rodičovskými cytokininy. Jak je ukázáno na obr.l. N9-alkyl substituce mají preventivní účinky vůči typické inhibiční cytokininové aktivitě na buněčnou proliferaci ve vysokých koncentracích převyšujících 10 μΜ a dokonce i v nej vyšší aplikované koncentraci (100 μΜ) vykazují sloučeniny 1, 2 a 4 dále silný stimulační efekt, zatímco jejich N9-nesubstituované rodičovské cytokininy (Kin, iP) inhibovaly silně růst kalusu (Obr. 1).
Nové sloučeniny obecného vzorce I jsou proto schopné stimulovat buněčnou proliferaci v mnohem širším koncentračním rozpětí než dosud známé cytokininy a na rozdíl proti nim nemaj í negativní (inhibiční) efekt když jsou aplikovány ve vysokých koncentracích. Z těchto důvodů jsou oproti látkám známým ze stavu techniky mnohem vhodnější pro praktické použití v metlínnvch biotechnologiích.
Příklad 8
Antisenescenční aktivity nových látek při testování v senescenčním biotestu na segmentech listů pšenice
Semena ozimé pšenice Triticum aestivum cv. Hereward byla promyta pod tekoucí vodou po 24 h a poté vyseta do vermikulítu nasyceného Knopovým živným roztokem. Nádoby se semeny byly umístěny do klimatizované růstové komory s 16/8 hodinovou světelnou periodou (světelná inten40 žita 50 mmol.mXs'1) a teplotou 15 °C. Po 7 dnech měly semenáčky vyvinutý první praporcový list a druhý list začínal prorůstat. Z prvních listů vždy od 5 rostlin byly odebrány vrcholové sekce
-20CZ 303054 B6 dlouhé přibližně 35 mm, které byly zkráceny tak, aby jejich váha byla přesně 100 mg. Bazální konce těchto 5 listových segmentů byly umístěny do jamek mikrotitracních polystyrénových destiček obsahujících 150 ml roztoku testovaného derivátu. Destičky byly umístěny do plastového boxu vystlaného fdtračním papírem, který byl nasycen vodou za účelem maximální vzdušné vlhkosti. Po 96 hodinách inkubace ve tmě při 25 °C byly listové sekce vyjmuty a chlorofyl extrahován v 5 ml 80% ethanolu zahřátím při 80 °C po dobu 10 min. Objem vzorku byl poté doplněn na 5 ml přidáním 80% ethanolu. Absorbance extraktů byla měřena při 665 nm. Jako kontroly byly měřeny rovněž chlorofylové extrakty z listů a listových vrcholů inkubované v deionizované vodě. Vypočtené hodnoty jsou průměrem z 5 opakování a celý experiment byt zopakován minimálně 2-krát. V každém experimentu byla otestována aktivita nových sloučenin a porovnána s aktivitou N9-nesubstituovaného rodičovského cytokininu, který je znám velmi vysokou cytokin i novou aktivitou. Testované cytokininy byly rozpuštěny v d imethy 1 sulfoxidu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10-3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu 10'8 až 10 4 M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. 10 4 M koncentrace kontrolní látky Kin byla postulována jako 100 % biologické aktivity.
Látky účinkující jako cytokininy by měly mít pozitivní vliv na oddálení senescence v segmentech listů pšenice ve tmě. Nově připravené substituované cytokininy obecného vzorce I vykazovaly silnější cytokininové aktivity ve srovnání s dosud známým cytokininem kinetinem (Kin).
Tabulka 3
Vliv nových sloučenin na oddálení senescence v de kap ito váných segmentech listů Triticum aestivum cv. Hereward ve tmě.
| č. | Testovaná sloučenina | nej účinnější koncentrace (mol.l'1) | aktivita (%) [lO^molT1 Kin = 100%] |
| 6-furfury laminopurin | 100 | ||
| 1 | 6-furfurylamino-9-(2-chlorethyl)purin | I0-4 | 120 (±15) |
| 2 | 6 - furfury lamino-9-(2 -bromethy l)purin | 1(J | 102 (±3) |
Příklad 9
Antisenescenční aktivita nových sloučenin pri testování v senescenčním biotestu na segmentech listů pšenice při působení světla
Schopnost nových sloučenin bránit degradaci chlorofylu v dekapitovaných listech pšenice byla rovněž testována za přítomnosti světla. Tento experiment byl proveden jak je popsáno v příkladu 7 v následující modifikaci - inkubace listů se sloučeninou byla realizována za konstantního světla (100 gmol.m ís 4) pri 22 °C. Jak je ukázáno na obr. 2 nové sloučeniny vykazovaly silnější pozitivní účinky na oddálení senescence v segmentech listů pšenice za přítomnosti světla v porovnání s N9-nesubstituovaným rodičovským cytokininem Kin. Sloučenina 1 a 2 bránila degradaci chlorofylu s vysokou účinností, která dosáhla 32-krát a 18-krát menší EC50 než dosud známý cytokinin Kin. Nově připravené substituované cytokininy obecného vzorce I vykazovaly silnější antisenescenční aktivity na světle ve srovnání s dosud známým cytokininem kinetinem (Kin).
•2! CZ 303054 B6
Tabulka 4
Vliv nových sloučenin na oddálení senescence v dekapitovaných segmentech listů Triticum 5 aestivum cv. Hereward ve světle.
| e. | Testovaná sloučenina | nejúčinnější koncentrace (mol.1·*) | aktivita (%) [lO^mol.r1 Kin = 100%] |
| 6-furfurylaminopurin | 10* | 100 | |
| 1 | 6-furfury lamino-9-(2-chlorethyl)purin | i O'5 | 116 (±7) |
| 2 | 6-fiirfurylamino-9-(2-bromethyl)purin | i(Z | 121 (±8) |
io Příklad 10
Ochrana před peroxidací membránových lipidů v pšenici
Typickým projevem provázejícím senescenci je zvýšení hladiny reaktivních kyslíkových derivátů i5 a následná peroxidace membránových lipidů. Proto byly stanoveny hladiny MDA, oxidativního markéru poškození membránových lipidů, v extirpováných listech pšenice vystavených působení připravených derivátů a kinetinu po dobu čtyř dnů v temnu, jak bylo popsáno v příkladu 7. Hladiny MDA byly stanoveny pomocí kyseliny thiobarbiturové (TBA). 100 mg čerstvého rostlinného materiálu bylo homogenizováno pomocí oscilačního mlýnu (MM301, Retsch, Germany) s 1 ml
80% methanolu. Surový extrakt byl centrifugován při lOOOOxg po dobu 5 minut, Ι00μ1 alikvot supernatantu byl protřepán se 100 μί 0,5% (w/v) TBA obsahujícími 0,1% (w/v) trichloroctovou kyselinu, a výsledný roztok byl inkubován 30 minut při 95 °C. Vzorky byly rychle ochlazeny na ledu a centrifugovány 5 minut při lOOOxg. Absorbance supernatantu byla změřena při 532 nm s korekcí při 600 nm a množství vzniklého komplexu MDA-TBA bylo vypočítáno z extinkčního koeficientu 155 mM^cm’1.
Nové deriváty 1 a 2 významně snižovaly peroxidací membránových lipidů ve srovnání s neošetřenou kontrolou (Tabulka 5 - hodnoty vyjadřují obsah MDA, oxidativního markéru poškození membránových lipidů). Látky 1 a 2 snižovaly míru peroxidace membránových lipidů v extirpo30 váných listech pšenice na 67, resp. 69 % původní hodnoty.
Nově připravené deriváty obecného vzorce I tak chrání před negativním účinkem reaktivních kyslíkových derivátů, které jsou akumulovány v tkáních během senescence listu v temnu.
Tabulka 5
Efekt nových na peroxidací membránových lipidů v průběhu senescence extirpovaných listů Triticum aestivum cv. Hereward v temnu.
| No | Testovaná sloučenina | MDA (nmol/g FW) |
| Neošetřená kontrola | 18,9 (±2,2) | |
| 1 | 6-furfury lamino-9-(2-chlorethy l)purin | 12,8 (±1,0) |
| 2 | 6-furťury lamino-9-(2-bromethy l)purin | 13,2 (±1,5) |
-22CZ 303054 B6
Příklad 11
Testování nových látek v amarantovém biotestu
Pro studium cytokininové aktivity byl rovněž použit „amarantový“ biotest v následující modifikaci. Semena Amaranthus caudatus var. Atropurpurea byla povrchově sterilizována 10% Nchlorbenzensulfonamidem (w/v) po dobu 10 min a poté promyta 5-krát deionizovanou vodou. Semena byla rozmístěna v 15cm Petriho miskách s filtračním papírem saturovaným destilovanou vodou. Po 72 hodinách kultivace pri 25 °C ve tmě byly ze semenáčků odstraněny kořeny. Tyto explantáty obsahující 2 kotyledony a hypokotyl byly umístěny do 5 cm Petriho misek na 2 vrstvy filtračního papíru nasyceného 1 ml inkubačního média obsahujícím 10 pmol Na2HPO4-KH2PO4, pH 6,8, 5 μ mol tyrosinu a testovaný cytokin in. Na misku bylo umístěno 20 exp lan tátů. Veškeré manipulace byly prováděny pod zeleným světlem v temné komoře. Po 48 hodinách inkubace při 25 °C ve tmě byl betacyanin extrahován cestou zmražení explantátů ve 4 ml 3,33 μΜ kyselině octové. Koncentrace betacyaninu byla stanovena porovnáním absorbancí při 537 a 620 nm a vypočtena pomocí vzorce AA = A537nm — A620nm· Hodnoty byly vyneseny do grafů závislosti ΔΑ na koncentraci. Pět replikátů bylo připraveno pro každou testovanou koncentraci a daný test byl opakován minimálně 2—krát. V každém experimentu byla otestována aktivita nových sloučenin a porovnána s aktivitou N9-nesubstituovaného rodičovského cytokininu iP, který je znám velmi vysokou cytokin inovou aktivitou. Testované cytokin i ny byly rozpuštěny v d i methyl sul fox idu (DMSO) a zásobní roztok doplněn vodou na 10“3 M. Tento zásobní roztok byl dále ředěn testovacím médiem v koncentračním rozsahu IO-8 až 1CT* M. Finální koncentrace DMSO v médiu nepřevýšila 0,2 % a v této koncentraci neovlivňovala biologickou aktivitu testu. Aktivita získaná při 10 4 M iP byla postulována jako 100 %.
Látka účinkující jako cytokinin by měla mít stimulační vliv na indukci betacyaninu v amarantovém biotestu. Výsledky v Tab. 6 ukázaly, že nově připravené substituované cytokíniny obecného vzorce I vykazovaly silnější cytokininové aktivity v amarantovém biotestu ve srovnání s dosud známým cytokininem iP.
Tabulka 6
Vliv nových sloučenin na tvorbu betacyaninu v hypokotylech Amaranthu ve tmě
| č. | Testovaná sloučenina | nej účinnější koncentrace (rnolT1) | aktivita (%) [10-mol.r1 iP = 100%] |
| 6-(3 -methy lbut-2 -en-1 -y l)aminopurin (iP) | 10'4 | 100 | |
| 3 | 6-((3-methylbut-2-en~l-yl)amino)-9-(2- bromethyl)purin | io- | 116 (±9) |
| 4 | 6-((3-methylbut-2-en-l-yl)amino)-9-(2- chlorethyOpurin | io- | 128 (±11) |
Příklad 12
N9-halogenalkyl substituent cytokininu zabraňuje inhibičnímu efektu dosud známého cytokininu na růst kořene kukuřice
Cytokininy jsou známé jako negativní regulátory prodlužování kořene a tvorby postranních kořenů (Werner et al. 2001) a jejich exogenní aplikace v koncentracích převyšujících 1 μΜ často vede
- 23 CZ 303054 B6 ke kompletní inhibici růstu kořene. Abychom prozkoumaly in vivo efekt nových derivátů na růst a vývoj kořene, semena kukuřice (Zea mays cv. CELLUX, Morseva, Česká republika) byly nabobtnány ve vodovodní vodě a ponechány ke klíčení ve tmě na zvlhčeném filtračním papíře. Po dvou dnech byly vyklíčené semenáčky přeneseny do provzdusnovaných hydroponických nádob naplněných Hoaglandovým roztokem (15 rostlin na 1 litr Hoaglandova roztoku). Rostliny byly pěstovány v komoře při režimu 16 h světlo (250 pE.rnXs ') při 27 °C a 8 h tma při 20 °C. Živný roztok obsahoval 5 μΜ a 10 μΜ koncentraci 6~furfurylamino-9-(2-chlorethyl)purinu nebo 5μΜ cytokinin kinetin (Kin). Všechny roztoky včetně negativní kontroly obsahovaly DMSO ve výsledné koncentraci 0,01 %.
Obr. 3 dokumentuje, že po aplikaci 5μΜ látky 1 byl fenotyp kořene i prýtu rostlin kukuřice téměř identický s negativní kontrolu ošetřenou DMSO (Obr. 3). Když byla látka 1 aplikovaná v koncentraci 10 μΜ, byla detekována pouze slabá redukce délky hlavního a vedlejších kořenů, zatímco již 5 μΜ koncentrace kinetinu způsobila dramatické ztloustnutí a zkrácení hlavního kořene a úplnou inhibici tvorby postranních kořenů (Obr. 3).
VP14 je gen kódující 9-cis-epoxykarotenoid dioxygenasu, enzym zodpovědný za biosyntézu kys. abscisové (Schwarz et al., 2003, Plant Phys., 131, 1591-1601). Kys. abscisová slouží kromě jiného jako spouštěč exprese genů odpovědi na stres (Tan et al., 1997, Proč. Nati. Acad Sci USA, 94, 12235 až 40). Zvýšená exprese tohoto genu tak ukazuje na to, že rostlina se vyskytuje ve stresových podmínkách. 5-týdenní rostliny kukuřice byly vyjmuty šetrně ze substrátu a po dobu 3 dnů byly kultivovány ve vodném roztoku testované látky v koncentraci 5 μΜ. Poté byl metodou kvantitativní polymerázové řetězové reakce detekován a vyhodnocen počet transkriptů genu VP14 v kořenech a listech rostlin. Tab. 7 dokumentuje, že zatímco dosud známý cytokinin kinetin výrazně zvyšuje expresi VP14 v kořenech i listech kukuřice, látka 1 nezpůsobovala žádnou stresovou odpověď.
To naznačuje, že nově připravené substituované deriváty obecného vzorce I nemají negativní efekt na růst a vývoj kořene ve vysokých koncentracích, na rozdíl od dosud známých cytokininů, a mohou tak být s výhodou užity pro kořenové aplikace v širším koncentračním rozmezí než dosud známé cytokininy.
Tabulka 7
Vliv nových sloučenin na expresi stresového genu VP14 v intaktních rostlinách kukuřice Zea mays. (Relativní hodnoty počtu transkriptů, vztaženo k neošetřené kontrole.)
| No | Testovaná sloučenina | relativní množství transkriptů | |
| kořen | list | ||
| Neušetřená Runiroia | 1 | 1 | |
| 6-furfiiry laminopurin | 3,4 (±0,8) | 16,3 (±4,0) | |
| 1 | 6-furťurylamino-9-(2-chlorethyl)purin | 0,4 (±0,1) | 1,1 (±0,3) |
Příklad 13
Přípravky
Aktivní složkou v přípravcích může být kterákoliv sloučenina obecného vzorce I.
-24CZ 303054 B6
| A1. Emulgovatelné koncentráty | a) | b) | c) | d) |
| Aktivní složka | 5% | 10% | 25% | 50% |
| dodecyl benzensulfonát vápenatý polyoxyethylovaný ricinový olej | 6% | 8% | 6% | 8% |
| (polyglykol ether ricinového oleje) (36 mol ethylenoxid) | 4% | — | 4% | 4% |
| oktyl fenol polyglykol ether(7 až 8 mol ethylenoxid) | 2% | — | 2% | |
| cyklohexanon | - | - | 10% | 20% |
| směs aromatických uhlovodíků | 83 % | 82% | 53% | 18% |
Cq~C]2
Emulze o vyžadované finální koncentraci mohou být získány z takového koncentrátu zředěním vodou.
| A2. Roztoky | a) | b) | c) | d) |
| 20 Aktivní složka | 5 % | 10% | 50% | 90% |
| 1 -methoxy-3-(3-methoxypropoxy)propan | 20% | 20% | — | |
| polyethylenglykol MW 400 | 20% | 10% | - | - |
| N-methyl-2-pyrrolidon | - | - | 30% | 10% |
| 25 směs aromatických uhlovodíků | 75 % | 60% | - | - |
Roztoky jsou vhodné k aplikaci ve formě mikrokapének.
| 30 | A3. Smáčivé prášky | a) | b) | c) | d) |
| Aktivní složka | 5% | 25% | 50% | 80% | |
| lignosulfonát sodný | 4% | - | 3% | - | |
| laurylsulfát sodný | 2% | 3 % | - | 4% | |
| 35 | diisobutylnaftalensulfonát sodný | — | 6% | 5% | 6% |
| oktylfenol polyglykol ether - | 1 % | 2% | - | ||
| (7 až 8 mol ethylenoxid) vysoce disperzní kyselina křemičitá | l % | 3% | 5% | 10% | |
| 40 | kaolin | 87% | 61 % | 37% | — |
Aktivní složka je důkladně promísena s pomocnými látkami a směs je důkladně rozemleta ve vhodném mlýnu. Suspenzi libovolné koncentrace je možné získat smísením vzniklého prachu s vodou.
- 75 CZ 303054 B6
| A4. Potahové granule | a) | b) | c) |
| Aktivní složka | 0,1 % | 5% | 15% |
| vysoce disperzní kyselina křemičitá | 0,9 % | 2% | 2 % |
| anorganický nosič | 99,0 % | 93% | 83 % |
(0,1 až 1 mm) např. CaCO-s nebo SiO2
Aktivní složka je rozpuštěna v methylenchloridu a nasprejována na nosič. Rozpouštědlo je odpařeno ve vakuu.
| A5. Potahované granule | a) | b) | c) |
| Aktivní složka | 0,1 % | 5% | 15% |
| polyethylenglykol MW 200 | 1,0% | 2% | 3% |
| vysoce disperzní kyselina křemičitá | 0,9 % | 1 % | 2% |
| anorganický nosič | 98,0 % | 92% | 80% |
(AE 0,1 až 1 mm) např. CaCO3 nebo SiO2
Jemně rozemletá aktivní složka je v mixéru stejnoměrně nanesena na nosič zvlhčený polyethylenglykolem. Takto jsou získány neprašné granule.
| A6. Extrudované granule | a) | b) | c) | d) |
| Aktivní složka | 0,1 % | 3 % | 5% | 15% |
| lignosulfonát sodný | 1,5 % | 2% | 3% | 4% |
| karboxymethylcelulosa | 1,4% | 2% | 2% | 2% |
| kaolin | 97,0 % | 93% | 90% | 79% |
Aktivní složka je smísena a rozemleta s pomocnými látkami a složka je zvlhčena vodou. Směs je extrudována a usušena v proudu vzduchu.
| A7. Prachy | a) | b) | c) |
| Aktivní složka | 0,1 % | 1 % | 5% |
| s 1 1 LaiCN | 39,9 % | 49 % | 35 % |
| kaolin | 60,0 % | 50% | 60% |
Prachy k přímému použití jsou získány rozemletím aktivní složky s nosičem ve vhodném mlýnu.
| A8. Suspenzní koncentrát | a) | b) | c) | d) |
| Aktivní složka | 3 % | 10% | 25% | 50% |
| ethylenglykol | 5% | 5% | 5 % | 5% |
| nonylfenol polyglykol ether(15 mol ethylenoxid) | 1 % | 2% | — | |
| lignosulfonát sodný | 3% | 3 % | 4% | 5% |
-26CZ 303054 B6
| karboxy methy lcelulosa | l % | 1 % | 1 % | 1 % |
| 37 % vodný roztok formaldehydu | 0,2 % | 0,2 % | 0,2 % | 0,2 % |
| emulze silikonového oleje | 0,8 % | 0,8 % | 0,8 % | 0,8 % |
| voda | 86% | 78% | 64% | 38% |
Jemně rozemletá aktivní složka je smíchána s pomocnými látkami. Vzniklý suspenzní koncentrát umožňuje přípravu suspenze o požadované koncentraci zředěním vodou.
Příklad 14
Gel
Názvy složek jsou uváděny v souladu s terminologií registračních úřadů. Obsah složek je uváděn ts v gramech na 100 g.
| Gel | /100 g | |
| Aktivní látka 6-furfurylamino-9-(2-chlorethyl)purin) | ÚO g | |
| butyl hydroxy toluen | (Nipanox BHT) | 0,2 g |
| butylparaben | (Nipabutyl) | 0,2 g |
| diethylenglykol monoethyl ether | (Transcutol P) | 10,0g |
| bezvodá koloidní silika | (Zeopharm 177) | 5,0 g |
| propylenglykol laurát | (Lauroglycol FCC) | 83,6 g |
Konzistence gelu může být dále modifikována přidáním bezvodé koloidní siliky.
Účinek aktivní látky může být zvýšen pomocí transdermálního systému Transcutol P/Lauroglycol FCC. Bezvodá koloidní silika pravděpodobně zpomalí penetraci účinné látky, což povede k protrahovanému účinku.
Claims (12)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Použití sloučeniny obecného vzorce I, «9 (η kdeRé je vybráno ze skupiny zahrnující -NH-furfuryl, -NH-(4—hydroxy-3-methylbut-2-en-lyl), -NH--(3-methyÍbut-2-en-l-yl)1 -NH—(4-hydroxy-3-methylbutyl), -NH—(4-hydroxy-l ,3dímethylbut-2-en-l-yl), -NH-(4—hydroxy-1,3—dimethyl butyl), -NH-benzyl, -NH-fenyl, přičemž benzyl, furfuryl a fenyl mohou být nesubstituované nebo substituované 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny zahrnující hydroxy, halogen, methyl a methoxy,Roje vybrán ze skupiny zahrnující C]-C3 alkyl a Ci-C3 alkenyl, přičemž každá z těchto skupin je substituována jedním nebo více atomy halogenu, pro regulaci růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk.
- 2. Použití podle nároku 1, kde sloučenina obecného vzorce I je vybrána ze skupiny zahrnující 6-(furfurylamino)-9-(chlonnethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-chlorbenzylammo)-9(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3-chlorbenzy lam ino)-9-( chlormethyl, 2—chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvÍnyl)purin, 6-(3-fluorbenzylamino)-9—(chlormethyl, 2—chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6(3-hydroxy benzy lam ino)-9-{chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(3-methoxybenzy 1amino)-9-(chlonnethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyk 2—chlor1/iny!, 2—bromv!ny!)purin, 6—(3—methy !but—2—en—1—y lam ino)—9—(chíormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-benzylamino-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2—chlorvínyl, 2-bromvinyl)purin, 6— (4-hydroxy-3-methylbut-2-en-l-ylamÍno)-9-(chIormethyl, 2-chlorethyl, 3—chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyI)purin, 6-(Z)(4-hydroxy-3-methylbut-2-en-l-ylamÍno)-9-(chlonnethyl, 2—chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(E)(4-hydroxy-3-methylbut-2-en~l-ylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvínyl)purin, 6-(Z)(4-hydroxy-l ,3-dimethylbut-2-en~l-ylamino)-9~(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6(E)-(4-hydroxy-l ,3-dimethylbut-2-en-l-ylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)-28CZ 303054 B6 purin, 6-(4-hydroxy-l,3-dimetehy Ibuty lamino) -9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6(4-hydroxy-3-methylbutylamino)-9~(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-fenylamino-9(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyI)purin, 6-(3-methoxyfenylamino)-9-(chlormethyl, 2chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-methoxy benzy lam ino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-hydroxybenzylamino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyl)purin, 6-(2-fluorbenzyl· amino)-9-(chlormethyl, 2-chlorethyl, 3-chlorpropyl, brommethyl, 2-bromethyl, 3-brompropyl, 2,2-dichlorethyl, 2-chlorvinyl, 2-bromvinyí)purin.
- 3. Použití podle nároku 1, kde regulace růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk zahrnuje stimulaci organogeneze u rostlin vedoucí ke zvětšení kořenového systému.
- 4. Použití podle nároku 1, kde regulace růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk zahrnuje urychlení nalévání semen a zvětšení velikosti semene a plodů jednoděložných rostlin a zkrácení doby klíčení semen rostlin.
- 5. Použití podle nároku 1, kde regulace růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk zahrnuje regulaci proliferace a morfogeneze a inhibici senescence a stresu.
- 6. Použití podle nároku 1, kde regulace růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk zahrnuje oddálení degradace chlorofylu a stárnutí rostlinných pletiv.
- 7. Použití podle nároku 1, kde regulace růstu a vývoje rostlin, rostlinných orgánů a buněk zahrnuje zvýšení výnosu a kvality zemědělských produktů u jednoděložných rostlin.
- 8. Použití sloučenin obecného vzorce 1 podle nároku l při přípravě přípravků pro klonování rostlinných buněk, orgánů, zárodečných buněk a embryí.
- 9. Použití sloučenin obecného vzorce í podle nároku 1 při přípravě růstově-regulačních přípravků k ošetřování rostlin a jejich orgánů či buněk.
- 10. Přípravky pro klonování rostlinných buněk, orgánů, zárodečných buněk a embryí, vyznačené tím, že obsahují alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I, jak je definována v nároku 1, a pomocné látky.
- 11. Růstově-regu lační přípravky, vyznačené tím, že obsahují alespoň jednu sloučeninu obecného vzorce I, jakje definována v nároku l, a pomocné látky.
- 12. Sloučeniny obecného vzorce la,
Priority Applications (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100670A CZ303054B6 (cs) | 2010-09-07 | 2010-09-07 | Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny |
| EP11781999.5A EP2613631B1 (en) | 2010-09-07 | 2011-09-02 | Use of 6-substituted 9-halogenalkyl purines for regulation of growth and development of whole plants, plant cells and plant organs; novel 6-substituted 9-halogenalkyl purines |
| PCT/CZ2011/000086 WO2012031574A1 (en) | 2010-09-07 | 2011-09-02 | Use of 6 - substituted 9 - halogenalkyl purines for regulation of growth and development of whole plants, plant cells and plant organs; novel 6 - substituted 9 -halogenalkyl purines |
| US13/821,163 US9220269B2 (en) | 2010-09-07 | 2011-09-02 | Use of 6-substituted 9-halogenalkyl purines for regulation of growth and development of whole plants, plant cells and plant organs; novel 6-substituted 9-halogenalkyl purines |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20100670A CZ303054B6 (cs) | 2010-09-07 | 2010-09-07 | Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2010670A3 CZ2010670A3 (cs) | 2012-03-14 |
| CZ303054B6 true CZ303054B6 (cs) | 2012-03-14 |
Family
ID=44946903
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20100670A CZ303054B6 (cs) | 2010-09-07 | 2010-09-07 | Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US9220269B2 (cs) |
| EP (1) | EP2613631B1 (cs) |
| CZ (1) | CZ303054B6 (cs) |
| WO (1) | WO2012031574A1 (cs) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2016095881A1 (en) * | 2014-12-15 | 2016-06-23 | Univerzita Palackeho V Olomouci | Substituted 6-anilino-9-heterocyclylpurine derivatives for inhibition of plant stress |
| PH12018502599B1 (en) | 2016-06-14 | 2023-05-10 | Syngenta Participations Ag | Use of 6-anilino purine derivatives to improve heat stress tolerance of rice seedlings |
| CR20200259A (es) * | 2017-12-12 | 2020-11-12 | Syngenta Participations Ag | Regulación del crecimiento de plantas |
| CN110407836B (zh) * | 2019-08-15 | 2022-03-29 | 沈阳化工研究院有限公司 | 一种9-（2-甲氧基乙基）-9h-嘌呤-6-胺衍生物及其应用 |
| CN110642859B (zh) * | 2019-10-11 | 2021-11-09 | 青岛科技大学 | 一种含嘧啶硫酮嘌呤类化合物及其用途 |
| CZ309368B6 (cs) * | 2020-05-17 | 2022-10-12 | Univerzita Palackého v Olomouci | Mesylátové soli heterocyklických cytokininů, přípravky obsahující tyto deriváty a jejich použití |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA657337A (en) * | 1963-02-05 | D. Zwahlen Kenneth | Substituted adenines | |
| GB953897A (en) * | 1960-03-31 | 1964-04-02 | Shell Int Research | Substituted adenines and living plant materials preserved therewith |
| GB1027756A (en) * | 1963-07-17 | 1966-04-27 | Shell Int Research | Compounds, compositions and method for promoting growth and/or preventing decay processes of plants or plant tissues |
| GB2041359A (en) * | 1979-01-10 | 1980-09-10 | Ici Ltd | Purine derivatives and their use in the defoliation of cotton plants |
| EP0155911A1 (de) * | 1984-03-19 | 1985-09-25 | Ciba-Geigy Ag | Purinderivate zur Regulierung des Pflanzenwachstums |
| WO1990009178A1 (en) * | 1989-01-31 | 1990-08-23 | Whitby Research, Inc. | N6-substituted 9-methyladenines: a new class of adenosine receptor antagonists |
| WO2001049688A1 (en) * | 2000-01-07 | 2001-07-12 | Universitaire Instelling Antwerpen | Purine derivatives, process for their preparation and use thereof |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3213095A (en) | 1963-04-04 | 1965-10-19 | American Cyanamid Co | N-benzylation of adenine |
| EP0888057B1 (en) | 1996-03-15 | 2001-09-05 | Syngenta Participations AG | Herbicidal synergistic composition and method of weed control |
| CZ294535B6 (cs) | 2001-08-02 | 2005-01-12 | Ústav Experimentální Botaniky Avčr | Heterocyklické sloučeniny na bázi N6-substituovaného adeninu, způsoby jejich přípravy, jejich použití pro přípravu léčiv, kosmetických přípravků a růstových regulátorů, farmaceutické přípravky, kosmetické přípravky a růstové regulátory tyto sloučeniny obsahující |
| PL1746889T3 (pl) * | 2004-05-12 | 2010-01-29 | Bayer Cropscience Ag | Regulacja wzrostu roślin |
| US7960397B2 (en) * | 2007-12-28 | 2011-06-14 | Institute Of Experimental Botany, Academy Of Sciences Of The Czech Republic | 6,9-disubstituted purine derivatives and their use as cosmetics and cosmetic compositions |
-
2010
- 2010-09-07 CZ CZ20100670A patent/CZ303054B6/cs not_active IP Right Cessation
-
2011
- 2011-09-02 US US13/821,163 patent/US9220269B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-09-02 WO PCT/CZ2011/000086 patent/WO2012031574A1/en active Application Filing
- 2011-09-02 EP EP11781999.5A patent/EP2613631B1/en not_active Not-in-force
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA657337A (en) * | 1963-02-05 | D. Zwahlen Kenneth | Substituted adenines | |
| GB953897A (en) * | 1960-03-31 | 1964-04-02 | Shell Int Research | Substituted adenines and living plant materials preserved therewith |
| GB1027756A (en) * | 1963-07-17 | 1966-04-27 | Shell Int Research | Compounds, compositions and method for promoting growth and/or preventing decay processes of plants or plant tissues |
| GB2041359A (en) * | 1979-01-10 | 1980-09-10 | Ici Ltd | Purine derivatives and their use in the defoliation of cotton plants |
| EP0155911A1 (de) * | 1984-03-19 | 1985-09-25 | Ciba-Geigy Ag | Purinderivate zur Regulierung des Pflanzenwachstums |
| WO1990009178A1 (en) * | 1989-01-31 | 1990-08-23 | Whitby Research, Inc. | N6-substituted 9-methyladenines: a new class of adenosine receptor antagonists |
| WO2001049688A1 (en) * | 2000-01-07 | 2001-07-12 | Universitaire Instelling Antwerpen | Purine derivatives, process for their preparation and use thereof |
Non-Patent Citations (6)
| Title |
|---|
| Eugene Fox J. et al.: Phytochemistry 1973, 12 (7), str. 1531-1533 * |
| Eugene Fox J. et al.: Plant Physiology 1971, 47, str. 275-281 * |
| Matsubara S.: Phytochemistry 1980, 19 (11), str. 2239-2253 * |
| Nisler J., et al.: Phytochemistry 2010, 71, str. 823-830; tab. 1 a 3 * |
| Ren Zhnag et al.: Journal of Plant Growth regulation 1989, 8, str. 181-197 * |
| Shaw G. et al.: Experentia 1968, 24 (11), str. 1089-1184 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ2010670A3 (cs) | 2012-03-14 |
| EP2613631A1 (en) | 2013-07-17 |
| US9220269B2 (en) | 2015-12-29 |
| WO2012031574A1 (en) | 2012-03-15 |
| EP2613631B1 (en) | 2016-04-13 |
| US20130210632A1 (en) | 2013-08-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2203451B1 (en) | Substituted 6-(alkylbenzylamino)purine derivatives for use as cytokinin receptor antagonists and preparations containing these derivatives | |
| JP5539866B2 (ja) | サイトカイニンのオキシダーゼ／デヒドロゲナーゼの阻害剤としての置換６−アニリノプリン誘導体および該置換６−アニリノプリン誘導体を含む製剤 | |
| CZ303054B6 (cs) | Použití 6-substituovaných 9-halogenalkyl purinu pro regulaci rustu a vývoje rostlin, rostlinných orgánu a bunek, nové 6-substituované 9-halogenalkyl puriny | |
| US10662194B2 (en) | Substituted 6-anilino-9-heterocyclylpurine derivatives for inhibition of plant stress | |
| CA2831688C (en) | Composition and method for stress mitigation in plants using the plant hormone cytokinin | |
| CN107980784A (zh) | 5-氨基吡唑类化合物在调节植物生长方面的应用 | |
| Bíbová et al. | New generation of Arabidopsis thaliana cytokinin oxidase/dehydrogenase inhibitors affect shoot/root growth and seed yield | |
| EP4121415B1 (en) | Inhibitors of cytokinin oxidase derived from 1-[2-(hydroxyalkyl)phenyl]-3-ylurea, use thereof and preparations containing these derivatives | |
| EP4153592B1 (en) | Mesylate salts of heterocyclic cytokinins, compositions containing these derivatives and use thereof | |
| US10550144B2 (en) | 6-aryl-9-glycosylpurines and use thereof | |
| CZ310363B6 (cs) | Krystalická forma 1-fenyl-3-(4H-1,2,4-triazol-4-yl)močoviny, přípravky ji obsahující, a její použití | |
| NZ617147B2 (en) | Composition and method for stress mitigation in plants |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20220907 |