CZ302828B6

CZ302828B6 - Kolagenový prípravek pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace, zpusob jeho výroby a jeho použití

Info

Publication number: CZ302828B6
Application number: CZ20060409A
Authority: CZ
Inventors: Galatík@Antonín; Galatík@Jan
Original assignee: Hypro Otrokovice, S. R. O.; Biora, S. R. O.
Priority date: 2006-06-22
Filing date: 2006-06-22
Publication date: 2011-11-30
Also published as: CA2655901C; EP2032629A2; WO2007147369A2; CA2655901A1; WO2007147369A3; CZ2006409A3; EP2032629B1

Abstract

Rešení se týká kolagenového prípravku pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace jako jsou hojivé nebo hemostatické obvazy, implantovatelné separující bariéry, fólie a membrány pro rízenou tkánovou a kostní regeneraci, pevné nebo injektovatelné nosice farmakologicky nebo kosmeticky úcinných látek nebo kosmetické prostredky a pletové masky. Tento kolagenový prípravek obsahuje biopolymery ze skupiny glykosaminoglykátu, navázané na kolagenovou substanci alespon z cásti chemickými vazbami zprostredkovanými kationty vícemocných kovu. Chemické vazby jsou zprostredkovány koordinacne vázanými slouceninami kovu ze skupiny prechodových prvku, predevším Cr, Zr, Al, Fe, Mn, Ti a/nebo s vícemocnými kationty kovu alkalických zemin, predevším Ca, Mg, Zn, Ba, Sr. Dále se rešení týká zpusobu výroby výše uvedeného kolagenového prípravku a jeho použití.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká kolagenového přípravku pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace jako jsou hojivé nebo hemostatické obvazy, implantovatelné separující bariéry, fólie a membrány pro řízenou tkáňovou a kostní regeneraci, pevné nebo injektovatelné nosiče farmakologicky nebo kosmeticky účinných látek nebo kosmetické prostředky a pleťové masky. Dále se vynález týká způsobu výroby výše uvedeného kolagenového přípravku a jeho použití.

Dosavadní stav techniky

K přípravě kosmetických, hojivých a hemostatických prostředků, separujících bariér a nosičů farmako logicky účinných látek se používá řada polymerů, které vykazují ve styku s živou tkání přijatelnou kompatibilitu a jsou biologicky odbouratelné v přijatelné dlouhé době.

Mezi polymery přicházejícími do úvahy zaujímá významné místo kolagen, který je, zejména po zbavení telopeptidů - např. postupem popsaným v patentu CS 276891, výborně tolerován v živé tkáni a vyznačuje se významnou hemostatickou aktivitou a podporou hojení. V některých případech je ale rychlost vstřebávání nativních kolagenů příliš velká a k dosažení požadovaného účinku je vhodné ji zpomalit. Za tím účelem bylo již dříve zavedeno tzv. síťování kolagenu kovalentními příčnými intramolekulámími vazbami s využitím aldehydů. Později bylo ale od těchto postupů upuštěno, protože se ukázalo, že aldehydicky síťované kolageny implantované do živé tkáně podléhají kalcifikaci a mění se postupně v nežádoucí tvrdé mineralizované útvary.

K prodloužení doby vstřebávání kolagenových chirurgických nití, např. tzv. cat gut je s dobrými výsledky běžně používáno jejich síťování chromitými solemi. Používání kovových solí, nejčastěji chromitých, hlinitých, zirkoničitých a titaničitých, pro síťování kolagenu kůže je známou praxí široce využívanou v koželužském průmyslu. Někdy se k síťování kolagenu používá i ultrafialové záření (UV), které však jen mírně zvyšuje odolnost ozářené kolagenové substance k degradaci kolagenázami a nevýhodou je i vznik volných radikálů, které mohou degradovat různé aktivní složky, např. depolymerizovat glukózáminoglykány. Ve farmacii se využívá i různých reaktivních organických činidel, jako jsou isokyanáty, vinylové sloučeniny nebo karboimidy. Tento postup však do tkání vnáší cizorodé deriváty, které nejsou organismům vlastní, není zcela objasněn jejich metabolismus a tedy ani vyloučena možnost případných vedlejších nežádoucích účinků. Nevýhodou je i toxicita nezreagovaných zbytků nebo produktů vznikajících při postupném uvolňování použitých organických síťujících činidel.

Početné byly také pokusy vložit do kolagenové matrice různé biologicky aktivní látky, mezi nimiž významné postavení zaujímají glukózám inogly kány, zejména hyaluronan, které příznivě ovlivňují hojení ran. Byl např. popsán komplex želatiny a dvou glykosam inogly kánu, hyaluronanu a chondroitin sulfátu (víz Bychov S. M., Nikolajeva S. S., Charlamova V. N. v Biull. Eksp. Biol Med., 1976; 82(10), str. 1211 až 1213). Zejména hyaluronan vyvolává příznivé zvýšení migrace a proliferace kožních fíbroblastů. Směsné přípravky hyaluronanu s nativním kolagenem jsou předmětem mnoha patentů, např. patentové přihlášky PV 1991-2025.

Hyaluronany i jiné glukózaminoglykány mohou být před použitím v zdravotnických, kosmetických i jiných přípravcích dimenzovány, nebo síťovány různými činidly. Mezi nimi jsou známy i kovokomplexní deriváty. Jejich příprava a farmaceutické použití jsou předmětem několika patentových postupů, např. dle patentu CS 264 719 nebo CS 267 079. Takovým způsobem je možno zvýšit velikost makromolekul, a tak podpořit jejich fyziologický účinek.

Nevýhodou všech řešení založených na směsi biopolymerů, je postupné vyplavování glukózaminogíykánů z kolagenové, nebo želatinové matrice, takže implantáty nebo obvazy postupně ztrácí příslušnou aktivitu. Pro zlepšení stálosti kompozitů bylo proto navrženo spojení obou biopolymerů chemickými vazbami pomocí různých organických syntetických činidel, např.

hexametylendiisokyanátu (viz např. Bakoš D., Jorge—Herrero E., Koller J. v Polim Med. 2000, 30 (3—4), 57 až 64). nebo l-ethyl-3-(3-dimethinamÍnopropyl karbodiimidu (viz Hong S. R., Chong M. S., Lee S. B., Lee Y. M., Song K. W., Park Μ. H., Hong S, H. v J. Biomater Sci Polym Ed. 2004; 15(2):201 až 214) aj.). Takto se sice dosáhne zvýšené stálosti kompozitu, ale zůstává otevřená otázka možných nežádoucích vedlejších účinků metabolitů vznikajících z použitých io cizorodých organických síťujících látek a problém toxicity u vinylových derivátů i kancerogenity nezreagovaných zbytků síťujících činidel.

Podstata vynálezu

K odstranění výše uvedených nedostatků přispívá kolagenový přípravek pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace podle vynálezu, s obsahem glykosaminoglykánů navázaných na kolagenovou substanci alespoň zčásti iontovými vazbami zprostředkovanými kationty vícemocných kovů. Podstata vynálezu spočívá v tom, že zmíněné biopolymery jsou ještě zesíťovány a vzájemně naroubovány stálými koordinačními vazbami, vytvořenými mezi donorovými karboxytovými skupinami biopolymerů a akceptorovými skupinami sloučenin vícemocných kovů, s výhodou obsahujících volné hydroxylové skupiny.

Kolagenová substance a/nebo b i póly měrní gly kosám inogly káno vá substance může být s výhodou chemicky zesíťovaná, molekulární struktura kolagenové substance pak s výhodou zbavena telopeptidů, popř. molekulární prostorová struktura kolagenové substance s výhodou alespoň zčásti pozměněna na neuspořádanou, tzv. želatinovou konformaci.

Biopolymemím glykosaminoglykánem je s výhodou sodná sůl kyseliny hyaluronové a/nebo její deriváty.

Uvedené chemické vazby mohou být s výhodou zprostředkovány koordinačně vázanými sloučeninami jednoho nebo více kovů ze skupiny Cr, Zr, Al, Fe, Mn, Ti, Ca, Mg, Zn, Ba a Sr.

Chemické vazby kolagenové a biopolymemí substance, zprostředkované kationty vícemocných kovů, mohou být také kombinovány s vazbami organických síťujících činidel, jako jsou aldehydy nebo třísloviny.

Výše uvedené je výsledkem vlastního výzkumu mechanismu síťování a roubování biopolymerů kovokomplexními vazbami. Zjištěný významný poznatek se týká schopnosti polyfunkčních kationtů vícemocných kovů vytvářet koordinační vazby a kovokomplexní můstky spojující pevnou chemickou vazbou kolagen s glukózaminoglykány. Takové spojování je označováno jako mezipolyměrové síťování, roubování nebo kopolymerování. Analyticky to prokazuje snížení obsahu extrahovatelného glukózaminoglykánu z kovokomplexně roubovaných kolagenových kompozitů (viz tabulka 1 v příkladové části). Z těchto údajů je také zřejmé, že druh použitého kationtu významně ovlivňuje pevnost koordinační vazby. Chromíte kationty vykazovaly ze zkoušených kovů největší stabilitu vytvořených kompozitů a umožnily i nejmenší obsah extrahovatelného glukózaminoglykánu. Protože kationty vícemocných kovů představující tato nová anorganická roubující činidla, jsou často i součástí sloučenin tvořících přirozenou složku buněk a tkání živých organizmů, je jejich metabolismus většinou známý a analyticky snadno sledovatelný. Během těchto studií bylo také zjištěno, že přítomnost glykosaminoglykánů v kolagenu působí za určitých podmínek inhibici ossifikace stehenních šlach krocanů (viz graf 1 v příkladové části). Kolagenglukózaminoglykánový komplex tak řeší i problém nežádoucí kalcifikace u aldehydícky síťovaných kolagenů.

. 2 CZ 302828 B6

S využitím těchto poznatků, zejména schopnosti karboxylových skupin kyselých aminokyselin v kolagenu a karboxylů kyseliny glukuronové přítomných v hyaluronanu, vytvářet pevné koordinační vazby s atomy hydratovaných sloučenin vícemocných kovů, je možné řešit obě hlavní nevýhody dosud známých postupů.

Nový postup neutralizuje nežádoucí kalcifíkační tendenci aldehydicky síťovaného kolagenu v implantátech, ale hlavně nově řeší způsob vytváření fyziologicky bezpečnějších intermolekulámích i intramolekulámích příčných vazeb, což je významné zvláště u farmaceutických a kosmetických kompozitů. Síťující a roubující reakce tu nejsou zprostředkovány cizorodými organickými činidly jako u dosud známých postupů, ale anorganickými ionty, které jsou fyziologicky i metabolicky vlastní živým organismům. S výhodou je tu možno zvolit i takové vícemocné kovové ionty, které jsou pro organismy nezbytné, tj. esenciální a ty, které jsou v metabolismu často nedostatkové.

Příklad provedení vynálezu

V příkladném provedení obsahuje přípravek podle vynálezu kolagen, na jehož proteinovou strukturuje koordinační vazbou kovovými ionty přes karboxylové skupiny navázán biopolymemí glukózám i nogly kán. Pod názvem glukózám i nogly kán se rozumí skupina biopolymeru, které obsahují opakovaně glukózamin, vázaný pomoci glykosidické vazby s některým kyselým jednoduchým cukrem, v případě hyaluronanu s kyselinou glukuronovou. Přípravek může obsahovat i pomocné látky, jako prostředky pro regulaci viskozity, hydratační látky, pojivá, změkčovadla, urychlovače penetrace, konzervační prostředky, dezinfekční prostředky, regulátory pH, antioxidanty, stabilizátory účinných látek, oleje, tuky, vosky, emulgátory, vonné látky, barviva a/nebo inertní plniva.

V příkladném provedení je kolagen v přípravku typu I, alespoň částečně zbavený telopeptidů, jeho struktura není významně zesíťovaná. Obsahuje navázaný glykosamínoglykán hyaluronan sodný, přičemž koordinační vazba je zprostředkována solemi hořčíku.

Kolagenový přípravek může být ve formě prášku, mikročástic, vláken, vloček, pěny, plsťoví té hmoty, houby, jehliček, tyčinek, tablet, gelu, viskózního roztoku, krémů, filmů nebo laminátů.

Postup výroby kolagenového přípravku v příkladném provedení zahrnuje sušení ve s prásko vací sušárně, mrazové sušení, povlékání nebo lití s následujícím sušením, postupy separace a srážení fází, plnění do nádob včetně tlakových pro vytváření pěn a/nebo aerosolů.

Kolagenové prostředky s obsahem vázaných glykosaminoglykánů jsou podle stavu techniky zpravidla vyráběny zesíťováním a kovalentním spojováním biopolymemích složek organickými reaktivními činidly obsahujícími isokyanátové, viny love nebo karboimidové skupiny, nebo UV zářením. Naproti tomu u přípravku podle vynálezu je ke spojení a/nebo zesíťování biopolymerů využíváno kovokomplexní reakce, v níž karboxylové skupiny biopolymerů vystupují jako donorový ligand a hydratované, s výhodou hydroxy I ováné kat ionty vícemocných kovů jsou akceptorem elektronového páru karboxylů, za vzniku velmi stabilní tzv. koordinační vazby. Protože bílkoviny obsahují mnoho volných karboxylových skupin patřících vedlejším řetězcům aminokyselinových zbytků kyseliny asparagové a glutamové, je reakce velmi rychlá a je proto vhodné ji retardovat snížením pH, které potlačuje dissociaci a reaktivitu karboxylových skupin. Tímto způsobem vznikají jak intermolekulámí příčné vazby, tak extramolekulámí „roubování“ neboli vzájemné navázání polymemích řetězců jednotlivých biopolymerů. Množstvím navázaných kovových komplexů a kyselostí reakěního prostředí je možno jednoduše regulovat stupeň příčného síťování kolagenu. Při pH reakce pod hodnotou kolem 2,0 nastává převážně jen jednobodová vazba kovových iontů a téměř nulové zesíťování kolagenu, což je zřejmé i z toho, že nenastane zvýšení jeho denaturační teploty. Pro farmaceutické i kosmetické účely je vhodné nízké zesíťování, které zvyšuje denaturační teplotu přeměny kolagenu na želatinu asi o 1 až 5 °C.

Rozhodujícím krokem po vznik koordinačně vázaného glukózaminoglykánu je spojující vazba polyfunkčního akceptorového kat iontu vícemocného kovu přes karboxylové skupiny kyselých sacharidových jednotek a aminokyselin, kyseliny glutamové a asparagové, v kolagenu. Použitý roztok kovové soli by měl mít velký stupeň čistoty a nízký obsah neutrálních solí. Reakce probí5 há obvykle v slabě kyselém prostředí a je doprovázena zvýšením viskozity, v případě vyššího stupně zesíťování vznikem vláknité sraženiny. Dalším důležitým krokem je reakce kolagenu obsahujícího navázané glukózáminoglykány s dalším nadbytkem kolagenu. Provádí se s výhodou pomalým přidáváním suspenze již vytvořeného komplexu ke koloidnímu roztoku nativního kolagenu za míchání. Zpočátku nastává srážení reakční směsi, ale další přídavky vedou k postupné io dispergaci a vzniku viskózního koloidního roztoku.

Rozdíly ve stupni zesíťování kolagenu, obsahu vázaného hyaluronanu a v případném obsahu volného kolagenu mají zřetelný vliv na vlastnosti kolagenového přípravku, např. ovlivňují stabilitu gelu a pěny a rychlosti vstřebávání implantátů. Volbou druhu kovokomplexních iontů, obsa15 hem hyaluronanu a stupněm zesíťování lze v širokých mezích plynule regulovat vlastnosti přípravku podle požadavků daných jeho použitím.

Kolagenový přípravek v příkladném provedení podle vynálezu nalézá uplatnění přednostně jako vstřebatelné hemostatikum s prodlouženou dobou vstřebání, jako implantované vstřebovatelné

2o membrány pro řízenou kostní a tkáňovou regeneraci, pro separaci tkání a vytváření srů sto vých bariér při chirurgických výkonech, jako hojivý obvaz pro léčení kožních lézí a jako povrchový . nebo implantovatelný nosič farmakologicky účinných látek umožňující postupné a cílené řízení kinetiky jejich uvolňování.

K účinným látkám podávaným prostřednictvím kolagenového přípravku podle vynálezu patří např. antibiotika, antiseptika, anestetika, analgetika, cytostatika, hormony, steroidy, cytokiny a stimulátory, faktory pro uvolňování a inhibici uvolňování hormonů, prostaglandinů, enzymů, růstových aosteoinduktivních faktorů.

Kolagenový přípravek podle vynálezu je použitelný na kůži ve formě kosmetických prostředků, ve formě pěnových masek, nebo filmů k ošetření např. zestárlé, vrásčité nebo nečisté pleti, k ošetřování a ochraně pokožky vystavené nepříznivému prostředí nebo záření.

Kolagenový přípravek může obsahovat také další pomocné látky:

- hydratační, jako jsou glycerin, sorbitol, polyethylenglykol, pólypropylenglykol nebo volné glykosaminoglykány;

- změkčující, jako např. estery kyseliny citrónové, vinné nebo glycerinové;

- konzervační, jako deriváty krezolu, fenylethylalkohol, fenoxyethylalkohol, chlorbutanol, methyl a ethyl nebo propyl ester kyseliny hydroxy benzoové, benzalkoniumchlorid, cetyl40 pyridiniumchlorid, diacetát nebo diglukonát chlorhexidinu, etanol isopropanol nebo propylengiykol;

-- dezinfekční prostředky, jako jód, bróm, polyvidon-jód, halogenované sloučeniny jako chlornan sodný, tosy(chlorid sodný, oxidační prostředky, jako peroxid vodíku, manganistan draselný, sloučeniny arylrtuti a alkylrtuti, organociničité, sloučeniny jako tri-n-butylcínbenzoan, sloučeniny stříbra jako acetylstanát stříbrný, alkoholy, fenoly nebo organické sloučeniny dusíku, jako 8-hydroxychinoIín, chlorguinadol, clioquinol, ethakridin, hexetidin, chlorhexidin nebo ambazon;

- regulátory pH, jako citrátový, borátový, fosfátový pufr a jejich směsi;

- antioxidanty, jako kyselina askorbová, askorbylpalmitát, tokoferolacetát, propylgalát, butyl50 hydroxyanisol nebo butyl hydroxy toluen;

- stabilizátory účinných látek, jako mannitol, glukóza, laktosa. Fruktóza, nebo sacharóza;

- emulgovatelné pomocné látky, jako oleje, tuky a vosky;

- vonné látky, barviva, čistící látky, prostředky pro péči o pleť;

-4CZ 302828 B6

- stabilizátory emulsí, jako neionogenní emulgátory, amfotemí, kationické a anionické tenzidy;

-- plniva, jako např. mikrokrystalická celulóza, oxid hlinitý, oxid zinečnatý, titaničitý, mastek, oxid křemičitý, křemičitan hořečnatý, křemičitan hlinito-hořečnatý, kaolín, deriváty škrobu, stearát zinečnatý nebo vápenatý a fosforečnan vápenatý;

Účinné i pomocné látky je do přípravku podle vynálezu možno vnášet tak, že se látka rozpustí nebo disperguje v hotové disperzi kolagenu s navázaným hyaluronanem ještě před tvářecím procesem. Pokud je použito více látek je možno některé z nich vnášet až po tvářecím procesu povlékáním, nastříkáním, impregnováním, ponořováním nebo jinými absorpčními procesy.

Pri použití kolagenového přípravku podle vynálezu k dermální, intradermální a transdermální aplikaci farmaceuticky účinných látek nebo kosmeticky účinných látek se dává přednost plochým formám provedení, jako jsou fólie, membrány, pěny nebo houby. Tyto ploché formy mohou mít laminátovou strukturu, tvořenou oddělujícími vrstvami bez účinné látky, propustné oddělující vrstvy, regulující membrány a vrstvy lepidla. Přednostně se tyto jedno, nebo vícevrstvé kolagenové přípravky opatřují zadní vrstvou a na opačné straně uvolnitelnou ochrannou vrstvou, přičemž zadní i ochranná vrstva mohou sestávat z materiálů pro odborníka běžných, jaké se používají např. při výrobě náplasti a samolepících pásků.

ίο V provedení kolagenového přípravku podle vynálezu, určeného na povrchové rány i nitrotělně, je forma přípravku pórovitá, např. penovitá, vláknitě-plsťovitá nebo houbovitá. Velikost pórů a struktura přípravku je uspořádána tak, že umožňuje vnikání buněk, např. fibroblastů nebo osteoblastů do struktury přípravku ajejich orientace podobným způsobem jako u kolagenové vazivové tkáně.

Tabulka l: Obsah vodou extrahovatelného hyaluronanu v 500 mg kolagenového kompozitu (dokumentuje snížení obsahu extrahovatelného glukózaminoglykánu z kovokomplexně roubovaných kolagenových kompozitu)

	Množství hyaluronanu (mg)
Obsah hyaluronanu přimíšeného do gelu s 500 mg kolagenu	0	25	50	100
Výtěžek extrakce z nezesíťovaného vzorku	0	22	47	93
Výtěžek extrakce ze vzorku síťovaného Mg (10 mg MgO)	0	0	8	14
Výtěžek extrakce ze vzorku síťovaného Cr³⁺ (10 mg Cr₂ 0₃)	0	0	0	7

Graf 1: Kolorimetricky stanovený obsah hyaluronanu podél stehenní šlachy krocana (dokumentuje jak oblast inhibované ossifikace významně koreluje s přítomností hyaluronanu v kolagenovém vazivu)

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Kolagenový přípravek pro zdravotnické nebo kosmetické aplikace s obsahem glykosaminoglykánů navázaných na kolagenovou substanci alespoň zčásti iontovými vazbami zprostředkovanými kationty vícemocných kovů, vyznačující se tím, že zmíněné biopolymery jsou ještě zesíťovaný a vzájemně naroubovány stálými koordinačními vazbami, vytvořenými mezi donorovými karboxylovými skupinami biopolymerů a akceptorovými skupinami sloučenin vícemocných kovů, s výhodou obsahujících volné hydroxylové skupiny.
2. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že jeho kolagenová substance a/nebo biopolymemí glykosaminoglykánová substance je chemicky zesíťovaná.
3. Kolagenový přípravek podle nároků 1 a 2, vyznačující se tím, že molekulární struktura jeho kolagenové substance je zbavena telopeptidů.
4. Kolagenový přípravek podle nároků laž3, vyznačující se tím, že molekulární prostorová struktura jeho kolagenové substance je alespoň zčásti pozměněna na neuspořádanou, tzv. želatinovou konformaci.
5. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že biopolymerním glykosaminoglykánem je sodná sůl kyseliny hyaluronové a/nebo její deriváty.
6. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že chemické vazby jsou zprostředkovány koordinačně vázanými sloučeninami jednoho nebo více kovů ze skupiny Cr, Zr, AI, Fe, Mn, Ti, Ca, Mg, Zn, Ba a Sr.
7. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že chemické vazby kolagenové a biopolymemí substance, zprostředkované kationty vícemocných kovů, jsou kombinovány s vazbami organických síťujících činidel, jako jsou aldehydy nebo třísloviny.
8. Kolagenový přípravek podle nároku 1, vyznačující se tím, že obsahuje pomocné látky, jako jsou konzervační prostředky, dezinfekční a bakteriostatické prostředky, antibiotika, regulátory pH, antioxidanty, farmakologicky a/nebo kosmeticky účinné látky, oleje, tuky, vosky, stabilizátory emulzí, vonné látky, barviva nebo plniva.
9. Kolagenový přípravek podle nároků laž8, vyznačující se tím, že je v konzistenci/formě prášku, vláken, vloček, pěn, tkanin, pletenin, netkaných plstí, hub, tyčinek, tablet, gelů, krémů, prostorově vytvarovaných objektů, jednovrstvých filmů nebo laminátů a/nebo je nanesen či impregnován do tkaných, pletených nebo netkaných textilních materiálů na bázi přírodních, a/nebo syntetických vláken.
10. Způsob výroby kolagenového přípravku podle nároku 1, vyznačující se tím, že kolagenová surovina se nejdříve postupnou extrakcí v kyselých a alkalických roztocích zbaví nekolagenových bílkovin, vypráním se z ní odstraní rozpustné složky a soli, rozmělní se mechanickou desintegrací a rozpustí v kyselém prostředí na koloidní gel, načež se do oddělené části gelu vmíchá roztok síranu hořečnatého a hyaluronanu a za mírného míchání ponechá reagovat až do vzniku jemné vláknité suspenze, která se oddělí s výhodou odstředěním a opakovaným promýváním se zbaví nezreagovaných hořečnatých sloučenin a síranových solí, potom se zamíchá do zbylého roztoku kolagenu, takže vytvoří viskózní gel, v němž v prostředí o kontrolovaném pH v rozmezí 3 až 5,5 probíhá zvolna rekuperace a další koordinační reakce mezi karboxylovými skupinami hyaluronanu a kovovými komplexy vázanými na kolagen, načež po skončení těchto procesů se připravený produkt suší vymražením, rozprašováním, nanáší se nebo odlévá s násled-6CZ 302828 B6 ným sušením, separuje nebo plní do nádobek na vytváření prášků, vloček, vláken, pěn, hub, tyčinek, tablet, gelů, krémů jednovrstvých filmů nebo laminátů.
11. Způsob podle nároku 10, vyznačující se tím, že se ke kolagenové disperzi ve 5 fázi před sušením a plněním přidají pomocné látky, jako změkčovadla, konzervační prostředky, dezinfekční nebo bakteriostatické prostředky, regulátory pH, antioxidanty, farmaceuticky aktivní látky, stabilizátory aktivních látek, emulgátory, vonné látky, barviva nebo plniva.
12. Použití kolagenového přípravku podle některého z nároků 1 až 8 pro přípravu obvazů určeio ných k hojení kožních lézí, bércových vředů a jako dočasných krytů po odebrání kožních štěpů a/nebo pro hemostatické účely.
13. Použití kolagenového přípravku podle některého z nároků l až 8 pro přípravu jednovrstvých nebo laminovaných bariér pro řízenou tkáňovou a nebo kostní regeneraci.
14. Použití kolagenového přípravku podle některého z nároků 1 až 8 pro přípravu farmaceutického prostředku určeného pro implantování nebo injekční vstřikování do živého organismu.
15. Použití kolagenového přípravku podle některého z nároků 1 až 8 pro přípravu farmaceutic20 kého prostředku pro řízené uvolňování aktivních látek.
16. Použití kolagenového přípravku podle některého z nároků 1 až 8 pro přípravu kosmetického prostředku pro řízené uvolňování aktivních látek.