CZ299799A3

CZ299799A3 - Selektivní způsob epoxidace pro přípravu Z > farmaceutických sloučenin

Info

Publication number: CZ299799A3
Application number: CZ19992997A
Authority: CZ
Inventors: David Warren Hoard; Eric David Moher; Bryan Hurst Norman; Vinod Francis Patel
Original assignee: Eli Lilly And Company; University Of Hawaii; Wayne State University
Priority date: 1998-02-25
Filing date: 1998-02-25
Publication date: 2000-04-12

Abstract

Řešení se týká selektivního způsobu epoxidace pro přípravu Kryptofycinových sloučenin, které obsahují β-epoxidovou část amohou být vyrobeny s vysokou stereoselektivitou v různých krocích celého způsobu syntézy. Toto řešení také poskytuje nové meziprodukty, použitelné pro přípravu Kiyptofycinových sloučenin.

Description

Vynález se týká selektivního způsobu epoxidace pro přípravu farmaceutických sloučenin.

Dosavadní stav techniky

Neoplastická onemocnění, charakterizovaná proliferací buněk, které nejsou vystaveny normálnímu řízení růstu buněk, jsou hlavní příčinou smrti u člověka a dalších savců. Klinická zkušenost v rakovinové chemoterapii dokázala, že pro léčbu těchto onemocnění jsou potřebná nová a účinnější léčiva. Taková klinická zkušenost také dokázala, že látky, které přerušují mikrotubulový systém cytoskeletu, mohou být účinné pro inhibici proliferace neoplastických buněk.

Kryptofycinové sloučeniny mohou být nyní připraveny použitím plně syntetického způsobu; mnoho užitečných kryptofycinových sloučenin však obsahuje labilní epoxidová skupina. Barrow, R.A. a kol., J. Am. Chem. Soc. 117, 2479 (1995).

Přihlašovatelé zjistili, že beta-epoxid může být obzvláště žádoucí. Nicméně při syntéze některých kryptofycinových sloučenin obecného vzorce (I) uvedených níže podle Barrow a kol. se epoxidace provádí v posledním kroku, který poskytuje pouze 2:1 selektivita pro požadovaný epoxid. Kromě toho je v

4 · · « · · 4 4 • 4 4 9>

• 4 4 4 této etapě obtížné separovat diasteromery. I když by bylo žádoucí epoxidovat v tomto způsobu dřívější meziprodukty, epoxidy jsou citlivé na řadu reakčních podmínek. Navíc zde zůstává požadavek procesu s větší stereoselektivitou pro vyloučení obtížné separace diastereomerů.

Předložený vynález se týká velmi žádoucích nových a účinných způsobů přípravy kryptofycinových sloučenin, které mají epoxidové funkční skupiny. Epoxidace je selektivní a může být prováděna v různých etapách celého způsobu syntézy.

Podstata vynálezu

Předložený vynález se týká způsobu přípravy sloučeniny obecného vzorce

ve kterém

G představuje C_x-Ci₂ alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou

2* ς, skupinu;

R³ představuje Ci-Cg alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C6 alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, C₂-C6 alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl;

R^u představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, 0, NH, SO, S0₂ nebo (C1-C3) alkylamino;

R⁶ představuje C1-C6 alkyl, substituovaný (C3—Cg) cykloalkyl, substituovaný (C₃-C₈) (Ci-C₆.) alkyl, cykloalkyl, heteroaromatickou nebo substituovanou heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC):

R^6a, R^6b a R^6c představují halogenu nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle nezávisle na sobě na sobě atom vodíku, atom vodíku, atom atom * · f* « · · · « 0 · « · · · ♦ * · · »··· • · · · · ···« • · · · · · 4 · · · · • · · · · · · · · • · · · · « · · « « φ « « « «6 halogenu, (C_x-C₆) alkyl, OR¹⁸, O-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, NO2, OPO₄H₂, (Ci~C₆ alkoxy) fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PC>3H₂, SO₂R²³ nebo Z' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (Ci-C₃) alkyl;

Y představuje - (CH₂)_n- nebo (C3-C5) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2; a

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

zahrnující epoxidaci sloučeniny obecného vzorce

ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴ a R⁵⁰ mají význam definovaný výše a Y představuje Y' nebo S; oxidantem a chirálním ketonem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a případné vytvoření její farmaceuticky přijatelné soli.

Tento vynález se dále týká způsobu výroby sloučeniny obecného vzorce

9 9 · • · 9 f

9 9 9

ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C2-C12 alkenyl, C2-C12 alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje C_x-C6 alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁸³ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, trichlorethyl nebo -CH₂SR⁸¹;

R³⁰ představuje atom vodíku, alkoholovou ochrannou skupinu nebo skupinu obecného vzorce

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, C₂-C₆ alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl;

R^u představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, 0, NR¹², S, SO, S0₂, kde R¹² představuje atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R⁶ představuje Ci-C₆ alkyl, substituovaný (Ci-C_e) alkyl, (C₃C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou substituovaný nebo substituovanou (C₃-C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC)

R^Da, R^U1J a R°^u představují nezávisle na sobě atom vodíku, (Ci-C₆) alkyl, halo NR¹⁸R¹⁹ nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom

18_n19 halogenu, (Ci-C₆) alkyl, OR¹⁸, 0-aryl, NH2, NR^iBR^ia, N02, OPO₄H₂, (Ci-C₆ alkoxy)fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z ' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci~C₆alkyl;

·«·· ·

R²³ představuje atom vodíku nebo (C1-C3) alkyl;

Y představuje -(CH₂)_n- nebo (C3-C5) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2; a

Y' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

R⁸¹ představuje Ci-C₆ alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl; a

R⁸² představuje bázicky labilní ochrannou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

s dodatečnou podmínkou, že pokud R⁸³ představuje -CH₂SR⁸¹, R³⁰není atom vodíku nebo alkoholová ochranná skupina; s další dodatečnou podmínkou, že pokud R⁸³ představuje trichlorethyl, R³⁰ není alkoholová ochranná skupina;

zahrnující epoxidaci sloučeniny obecného vzorce

ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R¹⁴, R³⁰ a R⁸³ mají význam definovaný výše; oxidantem a chirálním ketonem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (II); a případné vytvoření její farmaceuticky přijatelné soli.

Sloučeniny obecného vzorce (II) jsou použitelné jako meziprodukty pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I).

Předložený vynález se dále týká nových sloučenin obecných vzorců (lid), (18) a (19), které zde budou popsány, které jsou použitelné pro přípravu sloučenin obecného vzorce (I).

Detailní popis vynálezu

Následují definice výrazů, které jsou používány v předložené přihlášce vynálezu:

(a) označení se vztahuje k vazbě, která vystupuje vpřed rovinou tiskové stránky;

(b) označení se vztahuje k vazbě, která vystupuje dozadu za rovinu tiskové stránky; a (c) označení se vztahuje k vazbě, pro kterou není stereochemie určena.

Jak je zde používán, výraz farmaceuticky přijatelná sůl se vztahuje buď k adičním solím kyselin nebo k adičním solím bází.

Výraz farmaceuticky přijatelná adiční sůl kyseliny se vztahuje k libovolné netoxické organické nebo anorganické adiční soli kyseliny sloučenin obecného vzorce I nebo kteréhokoli z jejich meziproduktů. Ilustrativní anorganické kyseliny, které vytvářejí vhodné bromovodí kovou, kyselé soli soli zahrnují kyselinu sírovou a fosforečnou kovů jako je chlorovodíkovou, kyselina a monohydrogenorthofosforečnan sodný a hydrogensíran draselný.

« ·

• · · · ·· · · · «·

Ilustrativní organické kyseliny, které vytvářejí vhodné soli zahrnují mono-, di- a trikarboxylové kyseliny. Ilustrativní příklady takových kyselin jsou například kyselina octová, glykolová, mléčná, hroznová, malonová, jantarová, glutarová, fumarová, malonová, vinná, citrónová, askorbová, maleinová, hydroxymaleinová, benzoová, hydroxybenzoová, fenyloctová, skořicová, salicylová, 2-fenoxy-benzoová a sulfonová jako je p-toluensulfonová kyselina, methansulfonová kyselina a 2hydroxyethansulfonová kyselina. Takové soli mohou existovat buď v hydratované nebo v zásadě bezvodé formě.

Výraz farmaceuticky přijatelná adiční sůl báze se týká jakékoli netoxické organické nebo anorganické adiční soli báze sloučenin obecného vzorce I nebo kteréhokoli jejich meziproduktu. Ilustrativní báze, které vytvářejí vhodné soli zahrnují hydroxidy alkalických kovů nebo kovů alkalických zemin jako je hydroxid sodný, draselný, vápenatý, hořečnatý nebo barnatý; amonium a alifatické, cyklické nebo aromatické organické aminy jako je methylamin, dimethylamin, trimethylamin, diethylamin, triethylamin, isopropyldiethylamin, pyridin a pikolin.

Jak je zde používán, výraz C1-C12 alkyl se vztahuje k nasycené uhlovodíkové skupině s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující od jednoho do dvanácti atomů uhlíku. Pod tento výraz spadají například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.-butyl, terc.-butyl, pentyl, neopentyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, hexyl, heptyl, oktyl, nonyl, decyl a podobně. Pod tento výraz také spadá výraz CJ-C6 alkyl, který se vztahuje k nasycenému nebo nenasycenému uhlovodíkovému zbytku s přímým nebo • · · 9 9 · 9 · ·· · · ··· 9 9 9 · 9 « · rozvětveným řetězcem, obsahujícímu od jednoho do šesti atomů uhlíku. Pod tento výraz spadají například methyl, ethyl, npropyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl, sek.-butyl, terc.butyl, pentyl, neopentyl, 2-methylbutyl, 3-methylbutyl, hexyl a podobně. Pod výrazy C1-C12 alkyl a Ci-C₆ alkyl také spadá výraz C1-C3 alkyl, který se vztahuje k nasycenému nebo nenasycenému uhlovodíkovému zbytku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahujícímu od jednoho do tří atomů uhlíku. Pod tento výraz spadají například methyl, ethyl, isopropyl a podobně.

Substituovaný (Ci~C₆) alkyl se vztahuje k Ci-C₆ alkylové skupině, která může nést až tři (3) substituenty, obsahující jeden nebo více heteroatomů. Příklady takových substituentů jsou OH, NH₂, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂ a SO₂R²¹ kde R²¹ představuje atom vodíku, C1-C3 alkyl nebo aryl.

Výraz (C3-C8) cykloalkyl se vztahuje k nasycené C₃-C₈cykloalkylové skupině. V této skupině jsou zahrnuty cyklopropyl, cyklobutyl, cyklohexyl, cyklooktyl a podobně.

Substituovaná (C₃-C₈) cykloalkylová skupina se vztahuje k (C₃-Cs)cykloalkylové skupině, která nese až tři substituenty tvořené C₃-C₃ alkylovou skupinou, atomem halogenu nebo skupinou OR²¹. Substituenty mohou být vázány na kterýkoli dostupný atom uhlíku. Cyklohexyl je obzvláště výhodná cykloalkylová skupina. Výraz (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl, kde m je celé číslo rovné jedné, dvěma nebo třem se vztahuje k cyklopropylovému, cyklobutylovému nebo cyklopentylovému kruhu, vázanému k methylidenovému, ethylidenovému nebo propylidenovému substituentu.

··· ·

Výraz C₂-Ci₂ alkenyl se vztahuje k nenasycenému uhlovodíkovému zbytku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahujícímu od dvou do dvanácti atomů uhlíku, který má jednu až tři dvojné vazby. Pod tento výraz spadají například ethenyl, propenyl, isopropenyl, n-butenyl, isobutenyl, pentenyl, 2-methylbutenyl, 3-methylbutenyl, hexenyl, oktenyl, nonenyl, decenyl a podobně. Obzvláště výhodný je případ, kdy alkenyl má pouze jednu dvojnou vazbu.

Výraz C₂-Ci₂ alkinyl se vztahuje k nenasycenému uhlovodíkovému zbytku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahujícímu od dvou do dvanácti atomů uhlíku, který má jednu až tři trojné vazby. Pod tento výraz spadají například ethinyl, propinyl, isopropinyl, 2-methypropinyl, hexinyl, decinyl a podobně. Obzvláště výhodný je případ, kdy alkinyl má pouze jednu trojnou vazbu.

Výraz C1-C6 alkoxy se vztahuje k alkoxy skupině s přímým nebo rozvětveným řetězcem, obsahující od jednoho do šesti atomů uhlíku, jako je methoxy, ethoxy, n-propoxy, isopropoxy, n-butoxy, isobutoxy, pentoxy, 2-methylpentoxy a podobně. Výraz (Ci-Cg alkoxy)fenyl se vztahuje k fenylové skupině substituované Ci-C₆ alkoxy skupinou na libovolném dostupném uhlíku fenylového kruhu.

Výraz atom halogenu se vztahuje k atomu chloru, bromu, fluoru nebo jodu.

Výrazy aromatická skupina a heteroaromatická skupina se vztahuje k obvyklým aromatickým kruhům, které mají 4n + 2 pi ♦ · elektrony v monocyklickém nebo bicyklickém konjugovaném systému: Výraz aryl se vztahuje k aromatické skupině a výraz aralkyl se vztahuje k aryl (Ci-C₆-alkyl) ové skupině. Příklady aromatických skupin jsou fenyl, benzyl a naftyl. Heteroaromatické skupiny obsahují v kruhu jeden nebo více atomů kyslíku, dusíku a/nebo síry. Příklady heteroaromatických skupin zahrnují furyl, pyrrolyl, thienyl, pyridyl a podobně. Pokud je aromatická nebo heteroaromatická skupina substituovaná, může nést jeden až tři substituenty, které jsou nezávisle zvoleny ze souboru, zahrnujícího Ci-Cé alkyl, Ci-C₆-alkoxy nebo atom halogenu. Aromatické skupiny mohou být dále substituovány skupinami trifluormethyl, COOR⁵⁷(kde R⁵⁷ představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl) , PO₃H, SO3H, SO2R⁵⁷, N(R⁵⁹) (R⁶⁰) (kde R⁵⁹ představuje atom vodíku nebo Ci-Cg alkyl a R⁶⁰ představuje atom vodíku, 0χ-06 alkyl, BOC nebo FMOC) , -CN, -N02, -OR⁵⁷, -CH2OC (0) (CH₂) _ra-NH₂ (kde m' je celé číslo od 1 do 6) nebo -CH₂-O-Si (R⁵⁷) (R⁵⁸) (R⁵⁹) (kde R⁵⁸představuje atom vodíku nebo Ci~C₆ alkyl). Obzvláště výhodné substituenty aromatických skupin zahrnují methyl, atom halogenu, N(R⁵⁹) (R⁶⁰) a -OR⁵⁷. Substituenty mohou být vázána na libovolném dostupném atomu uhlíku.

Obzvláště výhodné heterocyklické nebo heterocyklické skupiny zahrnují substituované

kde R²⁰ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl.

Výraz aryl se vztahuje k aromatické skupina obsahující od 6 do 12 atomů uhlíku, jako jsou fenylové nebo naftylové skupiny, přičemž uvedené skupiny jsou popřípadě substituované jedním, dvěma nebo třemi substituenty zvolenými ze souboru, zahrnujícího C1-C4 alkyl, atomem halogenu substituovaný C1-C4 alkyl, atom halogenu nebo C1-C4 alkoxy. Výrazy nižší alkoyl skupina nebo Ci-C₆ alkoxy se vztahují k zbytku alkyloxy, který je vytvořen kyslíkovým radikálem, který nese nasycený uhlovodíkový zbytek s přímým nebo rozvětveným řetězcem, který obsahuje od jednoho do pěti atomů uhlíku a konkrétně zahrnuje methoxy, ethoxy, propyloxy, isopropyloxy, n-butyloxy, isobutyloxy, sek.butyloxy, terč.-butyloxy, pentyloxy a podobně. Pod výraz aryl konkrétně spadají fenyl, p-toluoyl, p-methoxyfenyl, p-chlorfenyl, naftyl a podobně.

Jak je zde používán, výraz heteroaryl se vztahuje k substituovanému nebo nesubstituovanému heteroaromatickému zbytku, který obsahuje jeden nebo více neuhlíkových substituentů uvnitř kruhu, přičemž uvedené substituenty jsou zvoleny ze souboru, který zahrnuje atom kyslíku, atom dusíku a atom síry. Celkový počet atomů uhlíku a atomů jiných než uhlík v kruhu je v rozmezí od čtyř do dvanácti atomů. Pod rozsah výrazu heteroaryl konkrétně spadají monocyklické konjugované systémy jako je furyl, pyrrolyl, thienyl, pyridyl a podobně a bicyklické konjugované systémy jako je indol.

Jak je zde používán, výraz epoxidový kruh znamená tříčlenný kruh, jehož páteř je tvořena dvěma atomy uhlíku a jedním atomem kyslíku. Jak je zde používán, výraz aziridinový kruh znamená tříčlenný kruh, jehož páteř je tvořena dvěma atomy uhlíku a jedním atomem dusíku. Jak je zde používán, výraz sulfidový kruh znamená tříčlenný kruh, jehož páteř je tvořena dvěma atomy uhlíku a jedním atomem síry. Jak je zde používán, výraz episulfidový kruh znamená tříčlenný kruh, jehož páteř je tvořena dvěma atomy uhlíku a jedním atomem síry. Jak je zde používán, výraz sulfátová skupina znamená pětičlenný kruh, sestávající z páteře uhlík-uhlík-kyslík-síra-kyslík se dvěma dalšími atomy kyslíku připojenými k atomu síry. Jak je zde používán, výraz cyklopropylový kruh znamená tříčlenný kruh, který je tvořen třemi atomy uhlíku. Jak je zde používán, výraz, monoalkylfosfátový kruh znamená pětičlenný kruh, jehož páteř je tvořena atomy uhlík-uhlík-kyslík-fosfor-kyslík se dvěma dodatečnými atomy kyslíku, přičemž jeden nese nižší • t·· · ·♦ ·· • · ·· · 9 · · • · · · · · · ···· • · ♦ · ···· • · · ·· · ·9 · · Ο alkylovou skupinu, a jsou oba připojeny k atomu fosforu.

Jak je zde používán, výraz (=0) v kombinaci s atomem uhlíku v kruhu, ke kterému je připojen, se vztahuje ke karbonylové skupině obecného vzorce

Λ

Výraz 0-aryl se vztahuje ke skupině aryloxy nebo arylové skupině, vázané na skupinu oxy.

Jak je zde používán, výraz Ph se vztahuje k fenylové skupině.

Jak je zde používán, výraz TBS se vztahuje k terc.butyldimethylsilylu, který je reprezentován obecným vzorcem

Jak je zde používán, výraz NHS se vztahuje k Nhydroxysukcinimidové skupině obecného vzorce • ·

Jak je zde používán, výraz bázicky labilní aminová ochranná skupina se vztahuje k běžným aminovým ochranným skupinám, které jsou známy jako bázicky labilní. Odborník může konsultovat známé publikace jako je Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Viz obzvláště kapitola 7 monografie Greene. Obzvláště výhodná bázicky labilní aminová ochranná skupina je fluorenylmethoxykarbonyl (Fmoc).

Výraz vhodná aktivovatelná karboxy ochranná skupina se vztahuje ke karboxy ochranným skupinám obsahujícím aktivovatelné esterové substituenty a známým odborníkovi v oboru a popsaným například v Greene, T.W., citováno výše. Vhodné karboxy ochranné skupiny jsou ty, které jsou představované aktivovatelnými esterovými substituenty, mezi něž patří N-hydroxysukcinimid, N-hydroxysulfosukcinimid a jejich soli, 2-nitrofenyl, 4-nitrofenyl, 2,4-dichlorfenyl a podobně. Obzvláště výhodná aktivovatelná karboxy ochranná skupina je N-hydroxy-sukcinimid (NHS).

Jak je zde používán, výraz oxidant má význam, který mu obvykle přisuzuje odborník v oboru. Například oxidant je činidlo schopné přeměnit alkenovou část chemického meziproduktu podle předloženého vynálezu na epoxidovou část.

• · · «

Vhodné oxidanty zahrnují peroxomonosulfát draselný (Oxone), m-CPBA, methyltrioxorhenium (VII), trifluorper-octovou kyselinu a monoperoxyftalát horečnatý. Výhodný oxidant je peroxomonosulfát draselný (Oxone).

Jak je zde používán, výraz chirální keton se vztahuje ke ketonu, který má následující obecné znaky:

1) stereogenní centra jsou blízká reakčním centrům; a

2) keton má kondenzovaný kruh a kvarterní centrum v poloze a ke karbonylové skupině; a

3) jedna strana ketonu je stericky blokována. Jeden obzvláště výhodný chirální keton má následující strukturu:

(7) .

Jak je zde používán, výraz alkoholová ochranná skupina může být zvolena vycházejíce ze známých prací. Výraz se vztahuje k alkoholovým ochranným skupinám, které je možno zvolit z prací, jako je monografie Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Viz obzvláště kapitola 2 v Greene. Výhodné alkoholové ochranné skupiny se volí ze silylových a acylových skupin. Obzvláště výhodná skupina je terč.-butyldimethylsilyl (TBS).

Obecný způsob syntézy pro přípravu sloučeniny obecného vzorce (I) je popsán ve Schématu A. Ve Schématu A jsou

9 • * ·· • ·

9 • 9 ···· 999 <9 9 • 9 9 9 • 9 · • 99

9 9

999 ·· 99 • 9 9 9 • 9 9 9 • 9 9 9

9 tf 9 «9 všechny substituenty, pokud není uvedeno jinak, jako bylo definováno výše. Reagenty, způsoby a procedury používané ve Schématu A jsou dobře známy a běžné pro odborníka v oboru.

Ve Schématu A se chirálním ketonem obecného vzorce (I) alken obecného vzorce (4) a oxidantem pro vytvoření epoxiduje β-epoxidu • ·

Například sloučenina obecného vzorce (4) může být stereoselektivně epoxidována pro vytvoření β-epoxidu obecného vzorce (I) použitím chirálního ketonu s oxidantem v přítomnosti vhodné báze jako je NaHCO₃ použitím způsobů analogických způsobům, které popsali Tu, Y. a kol., J. Am. Chem. Soc. 118, 9806 (1996); Wang, Z-X a kol. J. Org. Chem. 62, 2328 (1997); Wang, Z-X a kol., J. Am chem. Soc. 119, 11224 (1997). Výhodné sloučeniny obecného vzorce (4) pro tuto reakci zahrnují ty sloučeniny, ve kterých G představuje fenyl, R³ představuje methyl, R⁴ a R⁵ vytvářejí druhou vazbu, R¹⁴ představuje atom vodíku, R^u představuje atom vodíku, R⁵⁰je (=0) a Y představuje 0. Výhodný oxidant je Oxone a výhodný chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7).

Tento výhodný chirální keton může být připraven z D-fruktózy ketalizací a oxidací za obvyklých podmínek. Například ketalizace může být provedena použitím acetonu, HC10₄ a tento způsob je prováděn při teplotě zhruba 0 °C. Například oxidace může být provedena použitím pyridinium chlorchromátu při teplotě okolí. Tyto reakce jsou odborníkům známé; viz například: Tu, Y. a kol., citováno výše, a Wang, Z-X a kol., citováno výše. Asymetrická epoxidace může být prováděna při hodnotě pH v rozmezí od přibližně 7,0 do přibližně 11,5.

. .1

- 20 • · · · • » · · • ♦ · ·

V * A · I • · * «

*) · · ·

Ačkoliv jsou nutné 3-4 ekvivalenty chirálního ketonu pro ne z

95% mnoha přitom

Reakční dosažení poměru přeměny většího kryptofycinových meziproduktů při hodnotě pH přibližně 8,0, je možné používat méně chirálního ketonu (přibližně 1-2 ekvivalenty) při hodnotě pH přibližně 9,0 nebo více. Vhodná rozpouštědla použitelná pro epoxidační krok zahrnují H₂O, DMF, glyme, dioxan, CH₃CN, alkoholy, THF, EtOAc, halogenované uhlovodíky, chlorbenzen a toluen, kombinace rozpouštědel CH₃CN/H₂O je preferovaná, teploty mohou být v rozmezí od přibližně -20 °C do přibližně 25 °C přičemž rozmezí od přibližně -10 °C do přibližně 10 °C je výhodné, β-epoxid obecného vzorce (I), může být isolován a čištěn způsoby dobře známými v oboru jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace. Výhodná stereoselektivní epoxidace používá chirální keton struktury (7) pro získání směsi epoxidů (a a β) v surovém produktu (I) v poměru přibližně α:β 1:5. Tento způsob může také být použit analogicky pro získání α-epoxidového derivátu obecného vzorce (I).

Alkeny obecného vzorce (4) jsou známy a mohou být připraveny způsoby a procedurami známými v oboru. Barrow, R.A. a kol.

• ·

J. Am. Chem. Soc. 117, 2479 (1995); zveřejněná PCT přihláška č. WO 97/07798, publikovaná 6. března 1997, zveřejněná PCT přihláška č. WO 96/40184, publikovaná 19. prosince 1996.

Obecný způsob syntézy pro přípravu sloučeniny obecného vzorce (II), použitelné jako meziprodukt výrobu β-epoxidů obecného vzorce (I), je popsán ve Schématu B. Ve Schématu B, R⁸³' představuje atom vodíku nebo Ci~C₆ alkyl; R⁸² představuje bázickou labilní ochrannou skupinu; R³⁰' představuje alkoholovou ochrannou skupinu; a q je celé číslo rovné 1 nebo 2. Všechny další substituenty, pokud není uvedeno jinak, jsou jak bylo definováno výše. Reagenty, způsoby a procedury použité ve Schématu B jsou dobře známy a běžné pro odborníka v oboru.

·· ♦

9 9 · 9 9 »99

9*99 9 9 • * 9 *

99« 9· 999

9 9 9 9 9

9

Schéma B

Epoxidace

Krok 1

Deprotekae

Krok 2

Oxidace

Krok 5

Q

.0

NHR”

S(O)_qR«>

Schéma Β (pokračování)

Amino deprotekae

Krok 6

Cyklizaoe

(I)

Krok 7

Ve Schématu B, krok 1, se alken obecného vzorce (5a) epoxiduje chirálním ketonem a oxidantem způsobem uvedeným ve Schématu A pro vytvoření fragmentu A-B β-epoxidu obecného vzorce (Ha) .

Ve Schématu B, krok 2, se fragment A-B β-epoxidu obecného vzorce (Ha) zbaví ochrany použitím vhodného alkoxy deprotekčního činidla pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (lib).

Vhodně alkoxy deprotekční činidlo je činidlo, které odstraňuje hydroxy ochranná skupina představovanou substituentem R³⁰' a přitom je inertní k epoxidové části fragmentu A-B sloučeniny obecného vzorce (Ila). Výhodný deprotekční činidla zahrnují bázické fluoridové zdroje jako je tetrabutylamoniumfluorid, pyridiniumfluorid, triethylamoniumfluorid, cesiumfluorid a podobně, přičemž ·· ·· • · · výhodný je tetrabutylamoniumfluorid. Deprotekční reakce probíhá v přítomnosti vhodného organického rozpouštědla jako je tetrahydrofuran, popřípadě v přítomnosti vhodné báze, jako je hydrogenuhličitan sodný (NaHCO₃) . Reakce probíhá při teplotě od přibližně 0 °C do přibližně 80 °C přičemž rozmezí od přibližně 20 °C do přibližně 70 °C je výhodné. Reakce probíhá po dobu v rozmezí od přibližně 3 do 24 hodin. Surový produkt (lib) může být použit bez dalšího čištění. Alternativně může být sloučenina obecného vzorce (lib) isolována a čištěna způsoby dobře známými v oboru jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Ve Schématu B, krok 3, se sloučenina obecného vzorce (lib) přivede do kontaktu s činidlem vytvářejícím thioester pro získání thioesteru obecného vzorce (líc).

Výraz činidlo vytvářející thioester zahrnuje jakýkoli vhodný prostředek nebo podmínku pro vytváření thioesterové skupiny obecného vzorce (líc). Do této definice spadají podmínky jako jsou popsány a/nebo jsou analogické těm, které popsali Ono, N. a kol., Bull. Chem. Soc. Jpn. 51 (8), 2401 (1978); Ho, Tse-Lok, Synth. Comm. 9(4), 267-270 (1979); Narasaka, K. a kol., J. Am. Chem. Soc. 106 (10), 2954-2960 (1984); L.G. Wade, Jr. a kol., Tetrahedron Lett. 731-732 (1978); Mora, N. a kol., Tetrahedron Lett. 34 (15), 24612464 (1993); a Dossena, A. a kol. J. Chem Soc. Perkin Trans. I, 2737 (1981).

Například sloučenina obecného vzorce (lib) může být zpracována stericky bráněným alkylhalogenidem jako je terc.butylbromid a rozpouštědlem obecného vzorce (R⁸¹) (Me)SO, kde

R⁸¹ je jako bylo definováno výše, v přítomnosti vhodné báze, jako je hydrogenuhličitan sodný (NaHCO₃) . Výhodné rozpouštědlo pro reakci je dimethylsulfoxid (DMSO). Jak sféricky bráněný alkylhalogenid, tak i vhodná báze jsou přidány v molárním přebytku přibližně 7,0 až 12,0 ve srovnání se sloučeninou obecného vzorce (lib). Reakce probíhá při teplotách v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 60 °C, přičemž rozmezí od přibližně 10 °C do přibližně 30 °C je výhodné. Reakce probíhá po dobu v rozmezí od přibližně 1 do 24 hodin. Surový produkt (líc) může být použit bez dalšího čištění. Alternativně může být thioester obecného vzorce (líc) isolován a čištěn způsoby dobře známými v oboru jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

V těch případech, kdy substituent R⁸³’ je skupina jiná než atom vodíku, sloučenina obecného vzorce (lib) musí být napřed zbavena karboxy ochrany. Odstranění karboxy ochrany za bázických podmínek je známo odborníkům v oboru. Například může být sloučenina obecného vzorce (lib) zpracována vhodnou bází, jako je hydroxid lithný (LiOH) po dobu dostatečnou k odstranění karboxy ochranné skupiny, například od přibližně 1 do 24 hodin.

Ve Schématu B, krok 4, se β-epoxythioester obecného vzorce (líc) kopuluje s karboxylovou kyselinou obecného vzorce

• · ·· ··

R

NHR” ₍₁₀a) kde R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R⁵⁰ a R⁸² mají význam definovaný výše pro získání sloučeniny obecného vzorce (8).

Například může být karboxylová kyselina obecného vzorce (10a) rozpuštěna ve vhodném organickém rozpouštědle jako je DMF, glyme, dioxan, THF, CH₃CN, EtOAc a halogenované uhlovodíky, přičemž dichlormethan je výhodný. Tento roztok je potom zpracován kopulačním reagentem. Možné kopulační reagenty zahrnují DCC, EDCI a podobné reagenty, jako je DMAP, které aktivují karboxylové kyseliny k esterifikaci s alkoholy. Tento roztok může potom popřípadě být zpracován vhodnou bází jako je pevný hydrogenuhličitan sodný a potom uveden do kontaktu s β-epoxythioesterem obecného vzorce (líc). Koncentrace sloučeniny (10a) po těchto adicích by měla být v rozmezí od přibližně 0,1 M do přibližně 2,0 M. Reakce probíhá při teplotách v rozmezí od přibližně -30 °C do přibližně 60 °C, přičemž rozmezí od přibližně 10 °C do přibližně 30 °C je výhodné. Reakce probíhá po dobu v rozmezí od přibližně 0,5 do 12 hodin. Surový produkt (8) může být použit bez dalšího čištění. Alternativně může být sloučenina obecného vzorce (8) isolována a čištěna způsoby dobře známými v oboru jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Ve Schématu B, krok 5, se β-epoxythioester obecného vzorce (8) oxiduje vhodným oxidačním činidlem pro získání sulfonu nebo sulfoxidu obecného vzorce (9).

Vhodné oxidační činidlo je činidlo schopné přeměnit sulfid * obecného vzorce (8) na sulfon nebo sulfoxid obecného vzorce (9) , zatímco je inertní vzhledem k epoxidové části molekuly.

Vhodná oxidační činidla zahrnují peroxomonosulfát draselný (Oxone), m-CPBA, methyltrioxorhenium (VII) a monoperoxyftalát hořečnatý, přičemž Oxone je preferován.

Například sulfid obecného vzorce (8) se zpracovává vhodnou bází, jako je hydrogenuhličitan sodný, následovanou vhodným oxidačním činidlem, jako je Oxone. Reakce se provádí ve vhodném rozpouštědle jako je aceton, DMF, glyme, dioxan, CH₃CN, alkoholy, THF, EtOAc, halogenované uhlovodíky, chlorbenzen a toluen, přičemž aceton je výhodný. Obecně se reakce provádí při teplotách od přibližně -30 °C do přibližně 50 °C, přičemž rozmezí od přibližně -10 °C do přibližně 10 °C je výhodné. Obecně reakce vyžaduje dobu od přibližně 15 minut do přibližně 5 hodin. Surový sulfon nebo sulfoxid (9) mohou být použity bez dalšího čištění. Alternativně sulfon nebo sulfoxid obecného vzorce (9) mohou w, být isolovány a čištěny způsoby dobře známými v oboru jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

·· ·· • · · • · · • · ·

Ve Schématu B, krok 6, se sulfon nebo sulfoxid obecného vzorce (9) zbaví ochrany vhodným deprotekčním činidlem pro získání aminu obecného vzorce (10).

Vhodné deprotekční činidlo je činidlo schopné odstranit bázicky labilní substituent R⁸² sloučeniny obecného vzorce (9), zatímco je inertní k epoxidové části molekuly. Vhodná deprotekční činidla zahrnují báze jako jsou sekundární a terciární aminy a anorganické báze, například piperidin, morfolin, dicyklohexylamin, p-dimethylaminopyridin, diisopropylethylamin a podobně, přičemž piperidin je výhodný. Reakce se provádí ve vhodném rozpouštědle jako je DMF, glyme, dioxan, CH3CN, alkoholy, THF, EtOAc, halogenované uhlovodíky, chlorbenzen nebo toluen. Obecně reakce se provádí při teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 120 °C. Obecně reakce vyžaduje dobu od přibližně 1 do 72 hodin. Sloučenina obecného vzorce (I) může být isolována a čištěna způsoby dobře známými v oboru, jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace. Alternativně může být sloučenina obecného vzorce (10) isolována a může být dále cyklizována pomocí cyklizačního činidla pro získání sloučeniny obecného vzorce (I).

Typicky jakmile se sloučenina obecného vzorce (9) zbaví ochrany, podstoupí spontánní cyklizaci. Nicméně některé konkrétní sloučeniny obecného vzorce (9) mohou vyžadovat dodatečný cyklizační krok. Například sulfid obecného vzorce (8), ačkoli je mnohem méně aktivní než jeho oxidovaný protějšek, může být po odstranění bázicky labilní ochranné skupiny cyklizován vhodným cyklizačním činidlem jako je 2hydroxypyridin pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I). Například sulfid obecného vzorce (8) nebo alternativně vybraná sloučenina obecného vzorce (10), se hydrogenuje ve vhodném rozpouštědle, jako je DMF při teplotě přibližně 60 °C po několik dní v přítomnosti piperidinu a 2hydroxypyridinu. Sloučenina obecného vzorce (I) se isolován a čistí způsoby dobře známými v oboru, jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Alternativně může být sloučenina obecného vzorce (9) vytvořena postupem podle Schématu Bl. Ve Schématu Bl jsou všechny substituenty jak bylo definováno výše, s výjimkou případu, kdy je uvedeno jinak.

• · · · • · · · · · · · ·· ··

Schéma B1

Ve Schématu B1 se alken obecného vzorce (11) epoxiduje chirálním ketonem a oxidantem způsobem popsaným ve Schématu A pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (9). Alken obecného vzorce (11) může být připraven odborníkem v oboru postupem analogickým známým způsobům a procedurám. V průběhu epoxidační reakce se sulfidová část sloučeniny (11) oxiduje pro vytvoření sulfoxidové nebo sulfonové části sloučeniny (9) .

Popřípadě se u těch sloučenin obecného vzorce (I) , které obsahují bázické nebo kyselé funkční skupiny, může vytvořit farmaceuticky přijatelná sůl sloučeniny obecného vzorce (I) použitím standardních způsobů. Například může být volná báze rozpuštěna ve vodném nebo vodném-alkoholickém roztoku nebo dalším vhodném rozpouštědle, obsahujícím vhodnou kyselinu a sůl může být isolována odpařením roztoku. Alternativně může být volná báze ponechána reagovat v organickém rozpouštědle, obsahujícím vhodnou kyselinu a sůl může být isolována odpařením roztoku. Dále může být volná báze ponechána reagovat v organickém rozpouštědle a v tomto případě může být sůl separována přímo nebo může být získána koncentrací roztoku nebo v rozpouštědle jako je voda, která pak může být odstraněna ve vakuu nebo vymrzáním nebo kationtovou výměnou existující soli s dalším kationtem na vhodné iontoměničové pryskyřici.

Syntetické schéma přípravy karboxylových kyselin obecného vzorce (10a) je popsáno ve Schématu C. Reagenty a výchozí materiál jsou pro odborníka v oboru snadno dostupné. Ve Schématu C jsou všechny substituenty, pokud není uvedeno jinak, jako bylo definováno výše.

Schéma C

(14) (15)

Bazicky labilní ochranná skupina

Krok 2

(10a)

Ve Schématu C, krok 1, Boc-chráněný amin obecného vzorce (14) se zbaví ochrany pro získání deprotektovaného aminu obecného vzorce (15).

Například deprotekční reakce zahrnuje odstranění aminové ochranné skupiny způsoby a procedurami dobře známými a běžnými pro odborníka v oboru. Volba, použití a odstraňování ochranných skupin jsou popsány například v Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Například Boc-chráněný amin obecného vzorce (14) se rozpustí ve vhodné kyselině, jako je trifluoroctová kyselina nebo chlorovodíková kyselina. Obecně se reakce provádí při

• · · · · • · · · φ · · · teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 60 °C.

Obecně reakce vyžaduje dobu od přibližně 1 do 24 hodin. Deprotektovaný amin obecného vzorce (15) může být isolován a čištěn způsoby dobře známými v oboru, jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Boc-chráněný amin obecného vzorce (14) je popsán v Barrow, R.A. a kol. J. Tůn. Chem. Soc. 117, 2479 (1995); zveřejněné PCT přihlášce č. WO 96/40184, publikované 19. prosince 1996; a zveřejněné PCT přihlášce č. WO 97/07798, publikované 6. března 1997.

Ve Schématu C, krok 2, se deprotektovaný amin obecného vzorce (15) aminově chrání bázicky labilní aminovou ochrannou skupinou pro získání karboxylové kyseliny obecného vzorce (10a).

Například ochrana aminové skupiny bázicky labilní aminovou ochrannou skupinou zahrnuje přidání bázicky labilní aminové ochranné skupiny způsoby a procedurami dobře známými a běžnými pro odborníka v oboru. Volba, použití a odstraňování bázicky labilních aminových ochranných skupin jsou popsány v Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Výhodná bázicky labilní aminová ochranná skupina je Fmoc. Například se do roztoku deprotektovaného aminu obecného vzorce (15) ve vhodném rozpouštědle, jako je dioxan, přidá vhodná báze, jako je hydrogenuhličitan sodný, následovaná sloučeninou obecného vzorce R⁸²-C1 nebo R⁸²-NHS, jako je Fmoc-Cl nebo Fmoc-NHS sukcinimid. Směs může být popřípadě zředěna malým množstvím vody a míchán po dobu v • 9 9

9 9

9 9 9

9 9 rozmezí od 12 do 48 hodin při teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 60 °C. Reakce může být zastavena vhodnou kyselinou, jako je kyselina chlorovodíková. Karboxylová kyselina obecného vzorce (10a) může být isolována a čištěna způsoby dobře známými v oboru, jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Syntetické schéma pro přípravu sloučeniny obecného vzorce (II), kde R⁸³ představuje trichlorethyl, je popsáno ve Schématu D. Reagenty a výchozí materiál jsou pro odborníka v oboru snadno dostupné. Ve Schématu D jsou všechny další substituenty, pokud není uvedeno jinak, jako bylo definováno výše.

Schéma D

_Λ R’ ,R^!

OH <Iíd>

ŇC ' R*

X tf^OCHjCCI,

Krok 2A

Cyklizace (I) —-.

Krok 4

Kopulace Krok 2

Epoxidace

Ve Schématu D, krok 1, se alken obecného vzorce (16) epoxiduje chirálním ketonem a oxidantem způsobem popsaným ve Schématu A pro vytvoření β-epoxy sloučeniny obecného vzorce (lid).

Ve Schématu D, krok 2, se β-epoxy sloučenina obecného vzorce

« · • · · · ·· ·· (lid) kopuluje s karboxylovou kyselinou obecného vzorce (10a) způsoby popsanými ve Schématu B, krok 4, pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (18).

Ve Schématu D, krok 2A, se alken obecného vzorce (17) se epoxiduje chirálním ketonem a oxidantem způsobem popsaným ve Schématu A pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (18).

Ve Schématu D, krok 3, se sloučenina obecného vzorce (18) bázicky deprotektuje vhodným deprotekčním činidlem pro získání sloučeniny obecného vzorce (19).

Vhodný bázicky deprotekční činidlo je činidlo, které je schopné odstranit bázicky labilní substituent R⁸² sloučeniny obecného vzorce (18), zatímco je inertní k epoxidové části molekuly. Vhodná bázicky deprotekční činidla zahrnují báze jako jsou sekundární a terciární aminy a anorganické báze, například piperidin, morfolin, dicyklohexylamin, pdimethylaminopyridin, diisopropyl-ethylamin a podobně, přičemž výhodný je piperidin. Tato činidla jsou popsána v Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Reakce se provádí ve vhodném rozpouštědle jako je DMF, glyme, dioxan, CH3CN, alkoholy, THF, EtOAc, halogenované uhlovodíky, chlorbenzen nebo toluen. Obecně se reakce provádí při teplotě v rozmezí od přibližně 0 °C do přibližně 120 °C. Obecně reakce vyžaduje dobu od přibližně 1 do 72 hodin. Sloučenina obecného vzorce (19) může být isolována a čištěna způsoby dobře známými v oboru, jako je extrakce, odpařování, chromatografie a rekrystalizace.

Typicky sloučenina obecného vzorce (18), jakmile se zbaví

ochrany, podstoupí spontánní cyklizaci, kterou se získá sloučenina obecného vzorce (I). U některých konkrétních sloučenin obecného vzorce (18) však se sloučenina obecného vzorce (19) může získat po deprotekci a vyžadovat dodatečný krok uzavření kruhu, jak je popsáno ve Schématu D, krok 4.

Ve Schématu D, krok 4, se sloučenina obecného vzorce (19) cyklizuje použitím činidla uzavírajícího kruh pro získání sloučeniny obecného vzorce (I).

Reakce uzavírání kruhu může být prováděna intramolekulární aminolýzou. Například se sloučenina obecného vzorce (19) zpracovává vhodným cyklizačním činidlem jako je 2hydroxypyridin analogicky k deprotekčním a cyklizačním podmínkám, popsaným ve Schématu B, kroky 6 a 7 pro získání sloučeniny obecného vzorce (I).

Farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I), připravené postupem popsaným ve Schématu D, mohou být popřípadě vytvořeny způsoby popsanými ve Schématu B.

Některé výhodné znaky a vlastnosti předloženého vynálezu jsou popsány následující tabulární formou, ve které mohou být znaky voleny navzájem nezávisle pro získání výhodných provedení předloženého vynálezu. Předložený vynález není dále popsanými provedeními nikterak omezen:

A) R⁸ představuje ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl nebo isopentyl;

B) R⁷ představuje ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl nebo isopentyl;

• »

C) R⁷ představuje atom vodíku, R⁸ představuje methyl, R³představuje methyl a X a Y nejsou oba rovny 0;

D) R³ představuje ethyl, propyl, isopropyl, butyl, isobutyl, pentyl nebo isopentyl;

E) R⁹ představuje methyl, ethyl, propyl, butyl, isobutyl, pentyl nebo isopentyl;

F) R¹⁰ představuje methyl, ethyl, propyl, butyl, isobutyl, pentyl nebo isopentyl;

G) Ar představuje fenyl popřípadě substituovaný substituent zvolený ze souboru, zahrnujícího atom vodíku, atom halogenu a jednoduchý alkyl;

H) sloučenina ve které Y je zvoleno ze souboru, zahrnujícího 0, NH, S, SO a S0₂;

I) sloučenina ve které Y představuje C; R⁷, R⁸, R⁹ a R¹⁰ představují každý atom vodíku; a R¹ a R² vytvářejí epoxid;

J) R⁷, R⁸ představují každý atom vodíku;

K) R⁷ a R⁸ jsou každý zvolen ze souboru, zahrnujícího atom vodíku nebo OH;

1) Y představuje NH;

M) R je zvolen ze souboru, zahrnujícího methyl, ethyl, npropyl a fenyl;

N) X představuje 0 a Y představuje NH;

O) R⁴ a R⁵ vytvářejí dvojnou vazbu;

P) R⁶ představuje substituovaný benzyl, kde jeden substituent je atom halogenu a druhý je OR¹² skupina, kde R¹²představuje nižší alkyl;

Q) oxidant je Oxone;

R) způsob je používán pro přípravu kryptofycinové sloučeniny;

S) epoxidace je selektivní;

T) keton je obecného vzorce:

U) R^p představuje NHS; a

V) R⁷ a R⁸ představuje každý methyl.

Aby byl odborníkovi poskytnut další návod, jsou podána následující schémata:

9 9 9 9 9 9

999 99 999 99

Schéma I

Schéma I'

Jak jsou používány ve Schématu I představuje atom halogenu, a v celé popisné části, R^rskupiny SH, amino, φ φ φ φ φ φ φ • φφφ » « «φ φ φφ φ φφ «φφ φφφφ ε φφφφ φφφφφφ φ φφφφ φφφφ — 41 — φφφφ φφφ φφ φφφ φφ ·· monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát, fosfát nebo chráněnou skupinu OH nebo SH; R² představuje OH nebo SH; R²⁶ představuje alkoholovou ochrannou skupinu vloženou v průběhu části způsobu syntéza pro ochranu alkoholové skupiny, která by jinak mohla ragovat v průběhu chemických manipulací a která je potom odstraněna v další části syntézy. Četné reakce vytváření a odstraňování takových ochranných skupin jsou popsány v množství standardních prací, mezi nimi například Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Odborník může zvolit odpovídající alkoholovou ochrannou skupinu obzvláště na základě informací, které poskytuji takové práce. Jedna konkrétní použitelná alkoholová ochranná skupina je terc.butyldimethylsilyl (TBS).

EDO. CH₂Cl>, DMAP

Schéma 3 (i)

NHBoc

CH₃ i HN .*^K °γ % co₂H nhboc

v · · · 9 ·· • 9 9 9 · 9 9 *

9 9 9 9 9 · 9 ♦ « 9 9 9 9 9 9 9 * 9 9 • 9 » 9 · 9 9 9

999 99 999 99 99

Jak je používán ve Schématu 1' a v celé popisné části přihlášky, R¹' představuje atom halogenu, skupiny SH, amino, monoalkylamino, dialkylamino, trialkylamonium, alkylthio, dialkylsulfonium, sulfát nebo fosfát; R² představuje OH nebo SH; R²⁶ představuje alkoholovou ochrannou skupinu vloženou v průběhu části způsobu syntéza pro ochranu alkoholové skupiny, která by jinak mohla ragovat v průběhu chemických manipulací a která je potom odstraněna v další části syntézy. Četné reakce vytváření a odstraňování takových ochranných skupin jsou popsány v množství standardních prací, mezi nimi například Protective Groups in Organic Chemistry, Plenům Press, (London a New York, 1973); Greene, T.W. Protecting Groups in Organic Synthesis, Wiley (New York, 1981). Odborník může zvolit odpovídající alkoholovou ochrannou skupinu obzvláště na základě informací, které poskytují takové práce. Jedna konkrétní použitelná alkoholová ochranná skupina je terč.-butyldimethylsilyl (TBS).

Produkty takových reakčních schémat mohou být derivatizovány použitím standardních způsobů pro získání dalších kryptofycinových sloučenin.

R⁶ má význam definovaný výše.

·· · «· · ·· ·· ·«·· ♦ · · · 9 9 9 9

9 9 9 9 · » · · • 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • « · · · 9 9 9 9

9999 999 99 999 99 99 ν χ

zz

Produkty takových reakčních schémat mohou být derivatizovány

4 44

4 4 4 4 4 ·

4 · · • · · 4 ·

4444 444 44 444 použitím standardních způsobů pro získání dalších kryptofycinových sloučenin.

Odborník může použít odpovídající výchozí materiály a reagenty pro přípravu požadovaných sloučenin použitím návodů, podaných ve výše uvedených schématech a v následujících příkladech.

Esterové výchozí materiály mohou být připraveny například následujícím způsobem:

OH

Krok 3 SAE

OH

9 · · · · ·· · · • · ·· ···· «··· • · · · · 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9

9999 999 99 999 99 99

Krok 5 Bu₂Sn=O TsCI, TEA

ΟΜθ · ·· · ·· 99

9 9 9 · · · · 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 · 9 ·

9999 ··· 99 999 99 99

R⁶ má význam definovaný výše.

Schéma přípravy esteru je dále vysvětleno v oddílu věnovaném Přípravám, který je uveden dále a poskytuje odborníkovi konkrétní aplikace zde uvedených schémat.

Schéma pro přípravu esteru je možno aplikovat pro substituenty Ar, které jsou nárokovány podle předloženého vynálezu. Ilustrace daná schématem není zamýšlena jako omezení způsobů syntézy jenom na ukázaný příklad fenylového kruhu. Odborník může naopak aplikovat uvedený způsob pro získání požadovaných výchozí materiálů pro sloučeniny uvedené v patentových nárocích.

Schéma E pro přípravu esteru je možno aplikovat pro substituenty Ar, které jsou nárokovány podle předloženého vynálezu. Ilustrace daná schématem není zamýšlena jako omezení způsobů syntézy jenom na ukázaný příklad fenylového kruhu. Odborník může naopak aplikovat uvedený způsob pro získání požadovaných výchozí materiálů pro sloučeniny uvedené v patentových nárocích.

Nutná doba pro provádění reakce je dána výchozími materiály a operační teplotou. Optimální reakční doba pro daný způsob je jako vždy kompromisem, který je dán uvážením celkových cílů, které zahrnují výkonnost reakce, která vyžaduje

4 44 4 ·· ·· • · ·· · · ·· 4 4 4 4

4 4 4 4 * 4 4 · • · 4 · · ······ • 4 4 4 4 4···

4444 444 44 444 44 44 krátkých reakčních časů a maximálního výtěžku, které upřednostňuje dlouhé reakční časy.

Příklady provedení vynálezu

Pro další ilustraci vynálezu jsou podány následující příklady. Rozsah předmětu předloženého vynálezu není v žádném případě redukován na následující příklady ani jimi není nikterak omezen.

Příprava 1

Krok 1. Methyl-5-phenylpent-2(E)-enoát.

Roztok trimethylfosfonoacetátu (376 g, 417 ml, 2,07 mol) v THF (750 ml) byl míchán při teplotě 0 °C v 3L tříhrdlé baňce vybavené mechanickým míchačem a přívodem N₂. Do chlazeného roztoku byl přidán po kapkách samotný tetramethylguanidin (239 g, 260 ml, 2,07 mol) dodatečnou nálevkou. Chlazený čirý bledě žlutý roztok byl míchán po dobu 25 minut při teplotě 0 °C. Roztok hydrocinnamaldehydu (90%, 253 g, 248 ml, 1,9 mol) v THF (125 ml) byl pomalu přidán po kapkách do reakčního roztoku. Po ukončení adice byla reakční směs míchána po dobu 10 hodin a teplota rostla na teplotu okolí. GC ukázalo 95:5 poměr produktu k výchozímu materiálu. 500 ml vody bylo • ·

				• · ·	·· ·	·· ··
				• ·	• · ·	• · · «
			51 -	• ·	• · ·	• · · ·
			···· ···	• · · · ·	·· ··
přidáno	do reakční	nádoby a	reakční	směs byla	míchána	přes
noc a	rozdělila se	do dvou	vrstev.	Organická	vrstva	byla

isolována a vodná vrstva byla extrahována t-BuOMe. Organické vrstvy byly sloučeny a sušeny nad MgSO₄, potom koncentrovány ve vakuu a tím se získal oranžový olej. Surový produkt byl destilován při teplotě a tlaku 129 °C/0,3mm Hg, což dalo

360,59, 91,7% výtěžek, čirého mírně žlutého oleje.

EIMS m/z 190(13; M+) , 159(410, 158(39), 131(90), 130(62),

117(22), 104(12), 95(57), 91(100), 77(21), 65(59);

HREIMS m/z 190,0998 (C₁₂Hi₄O₂ D -0,4 mnu);

UV 4a_Z (e) 210 (8400), 260 (230) nm;

IR nmax 3027, 2949, 1723, 1658, 1454, 1319, 1203, 978, 700 cm'¹;

^XH NMR d (CDC1₃) 7,15-7,3 (Ph-H5;bm), 7,00 (3-H;dt,

15,6/6,6), 5,84 (2-H;dt, 15,6/1,2), 3,70 (OMe;s), 2,76 (5H2;t, 7,2), 2,51 (4-H2; bdt, 6,6/7,2) ;

¹³C NMR d (CDC1₃) 166, 9 (1), 148,3 (3), 140, 6 (Ph-1' ) ,

128,4/128,2 (Ph2’/3’/5’6’), 126,1 (Ph 4’), 121,4 (2), 51,3 (OMe), 34,2/33,8 (4/5).

4444 ·

44

4 4 « • 4 » 4

4 4 4

44

Krok 2. 5-fenyl-pent-2-en-l-ol,

vybavené termočlánkem,

N₂, byl vložen roztok mol) v THF (1,5 1) a

Do 12L čtyřhrdlé kulaté baňky mechanickým míchačem a přívodem enoátového esteru (310,5 g, 1,5 ochlazen na -71 °C v lázni i-PrOH/CO₂. Do reakční nádoby byl přidán po kapkách DIBAL (2,5 1, 1,5 M v toluenu, 3,75 mol) rychlostí, která udržovala reakční teplotu < -50 °C. Po ukončení adice byla reakční směs míchána přes noc s reakční teplotou < -50 °C TLC (3:1 hexany:EtOAc, SiO₂) indikovalo absenci výchozího materiálu po uplynutí 16 hodin. Reakční teplota byl ponechána zvýšit se na -15 °C. Reakce byla pomalu ukončena přidáním IN HCl (150 ml). V tomto okamžiku reakční směs vytvořila želatinovitou pevnou látku. Pro rozrušení polotuhé látky byla použita lopatka a IN HCl (200 ml) bylo přidáno pro vytvoření tekutější směsi. Koncentrovaná HCl (625 ml) byla přidána pro vytvoření dvoufázového systému. Vrstvy byly odděleny a produkt byl extrahován pomocí t-BuOMe. Organická vrstva byla sušena nad MgSO₄ a koncentrována ve vakuu a tím se získal čirý bledě žlutý olej, 247,89. Surový produkt byl destilován při teplotě 145 °C/0,25mm Hg, což dalo 209,79, 86,2%.

* ·· · ·· *· • ··· 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 e ···*> ··♦···

EIMS m/z 162 (1:M+) 144 (16), 129 (7), 117 (9) 108 (6), 92 (17), 91 (100), 75 (5), 65 (12);

HREIMS m/z 162, 1049 (C_nH₁₄O, D -0,4 mmu) ;

UV l_max (e) 206 (9900), 260 (360);

IR nmax 3356, 2924, 1603, 1496, 1454, 970, 746, 700 cm'¹;

^XH NMR d 7,15-7,3 (Ph-H5;m) , 5,70 (3-H;dt, 15,6/6,0), 5,61 (2-H;dt, 15,6/4,8), 4,02 (1-H2;d 4,8), 2,68 (5-H2; t, 7,2), 2,40 (OH;bs), 2,36(4-H2; dt, 6,0/7,2),¹³C NMR d 141,6 (Ph 1'), 131,8(3), 129, 5 (2), 128,3/128,2 (Ph 2'/3'/5'/6'), 125,7 (Ph 4'), 63,3 (1), 35,4/33,8 (4/5).

Krok 3. (2S,3S)-2,3-epoxy-5-fenyl-l-pentanol.

Do 1L tříhrdlé kulaté baňky vybavené mechanickým míchačem, termočlánkem a přívodem dusíku byl přidán CH₂C1₂ (350 ml), sušená 4 Angstrom molekulární síta (30 g) a L-(+)diethyltartrát (7,62 g, 0,037 mol). Výsledná směs byla ochlazena na teplotu -20 °C a zpracována Ti(O-i-Pr)₄ (9,2 ml, 0,031 mol), s následnou adicí t-butylhydroperoxidu (4,0 M v CH₂C1₂, 182 ml, 0,78 mol) rychlostí, která udržovala teplotu v rozmezí 2-20 °C. Po ukončení adice byla reakční směs míchána po dobu dalších 30 minut a potom zpracována roztok allylového alkoholu (50 g, 0,31 mol) v CH₂C1₂ (30 ml) rychlostí, která udržovala teplotu v rozmezí 2-20 °C;

reakční směs byla míchána při téže teplotě po dobu 5 hodin, potom filtrována do roztoku heptahydrátu síranu železitého • 4 • · » · »

»· d

• · « 9

99

9 9

9 t> « · · · ·· ·· (132 g) a vinné kyseliny (40 g) ve vodě (400 ml) při teplotě 0 °C. Směs byla míchána po dobu 20 minut, potom přenesena do separační nálevky a extrahována pomocí t-BuOMe (2x200 ml) . Sloučené organické fáze byly míchány s 30% NaOH roztokem obsahujícím NaCl po dobu 1 hodiny při teplotě 0 °C. Vrstvy byly znovu odděleny a vodná fáze byla extrahována pomocí tBuOMe. Sloučené organické fáze byly promývány solankou, sušeny nad MgSO₄ a koncentrovány a tím se získalo 52,8 g v formě jantarově zbarveného oleje.

Krok 4. (2R, 3R)-2-hydroxy-3-methyl-5-fenylpentan-l-ol.

Do 5L tříhrdlé kulaté baňky vybavené mechanickým míchačem, termočlánkem a přívodem dusíku byly přidány hexany (1L) a směs byla ochlazena na teplotu 0 °C. Byl přidán 2,0M roztok Me₃Al v hexanech (800 ml, 1,6 mol), následovaný roztokem epoxidu (120 g, 0, 677 mol) v hexanech (250 ml)/CH₂Cl₂ (50 ml), udržujíce teplotu pod 20 °C. Po ukončení adice byla kalná reakční směs míchána při teplotě 5 °C po dobu 35 minut, potom byl přidán roztok 10% HC1 (300 ml) po kapkách, následovaný adicí koncentrované HC1 (350 ml) . Vrstvy byly odděleny a organická fáze byla promývána solankou a sušena nad MgSO₄. Po odstranění těkavých látek ve vakuu bylo získáno 122,1 gramů oleje.

A ·		• ·		•	• ·		• A
Φ φ	• A	•	A	• A	A	A	A
•	•	•	♦		A	A	A	A

•	•	•	·	•	A	A	A	•
• ·» ·		A ·		A* ·	··		• A

Krok 5. (2R,3R)-2-hydroxy-3-methyl-5-fenylpent-l-yl, tosylát.

Do 2L tříhrdlé kulaté baňky vybavené mechanickým míchačem a přívodem dusíku byl přidán diol (58 g, 0,30 mol), oxid dibutylcínu (1,5 g, 0,006 mol, 2 molárních procent), toluensulfonylchlorid (57,5 g, 0,30 mol), CH₂C1₂ (580 ml) a triethylamin (42,0 ml, 0,30 mol). Výsledná směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 2 hodin (ačkoliv reakce byla ukončena za 1 hodinu), filtrována, promývána vodou a sušena nad MgSO₄. Koncentrace těkavých látek ve vakuu poskytlo 104,1 gramů mírně jantarově zbarveného oleje.

9 • 99

9 ••99 999 • 9 9 9 9 9 9

9 99 9 · 9 9

9 9 9 9 9 9

9 9 99 99 9

9 9 9 9 9 9 • 9 999 >9 99

Krok 6. (2R,3R)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3-methyl5-fenylpent-l-yl, tosylát.

Roztok tosylátu (100 g, 0,29 mol) a triethylaminu (81,0 ml, 0,58 mol) v CH2CI2 (1200 ml) byl zpracován bezvodým TBS-OTf (99 ml, 0,43 mol) po kapkách s neustálým mícháním po dobu dalších 20 minut. Reakční směs byla promývána dvakrát solankou, sušena nad MgSO₄ a koncentrována do sucha. Olej byl rozpuštěn v minimálním množství hexanů a filtrován přes vrstvu oxidu křemičitého, vymývajíce směsí hexany:EtOAc (9:1) a tím se získal mírně jantarově zbarvený olej, 134 g.

Krok 7. (2R,3R,5RS)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3methyl-5-brom-5-fenylpent-l-yl, tosylát.

OTs

OTBS

Do 5L tříhrdlé kulaté baňky vybavené mechanickým míchačem, refluxním kondenzátorem a přívodem dusíku byl přidán CC1₄(1680 ml), TBS Ts (140 g, 0,30 mol), NBS (65g, 0,365 mol) a

AIBN (16,5 g, 0,10 mol). Směs byla zbavována plynů odsátím do úplného vakua s mícháním a zpětným naplněním dusíku (3x). Reakční směs byla potom zahřívána na teplotu zpětného toku, poté se barva stala tmavě hnědou. Po uplynutí 15 minut za prudkého refluxu se reakční směs stala světle žlutou a chromatografická analýza ukázala, že reakce byla ukončena. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs filtrována a filtrát byl koncentrován do sucha. Residuum bylo znovu rozpuštěno v hexanech a filtrováno znovu a koncentrováno do sucha což poskytlo 170,3 gramů produktu v formě jantarově zbarveného oleje.

Krok 8. (2R,3R)-2-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-3-methyl5-fenylpent-4(E)-en-l-yl, tosylát.

Do 2L tříhrdlé kulaté baňky vybavené mechanickým míchačem, refluxním kondenzátorem a přívodem dusíku byl přidán roztok bromidu (100 g, 0,186 mol) v acetonitrilu (700 ml). Byl přidán DBU (83,6 ml, 0,557 mol) a výsledný tmavě hnědý roztok byl míchán za teploty zpětného toku po dobu 15 minut. Po ochlazení na teplotu okolí bylo rozpouštědlo odstraněno ve vakuu a residuum bylo digestováno v CH₂C1₂ (200 ml) a filtrováno přes vrstvu oxidu křemičitého. Těkavé látky byly znovu odpařeny a residuum bylo rozpuštěno v EtOAc a promýváno vodou, solankou a sušeno nad MgSOz] a koncentrováno do sucha. Preparativní mplc (Prep 500) chromatografie »9 9 99 * ·· ·· • · 9 · ···· · · · « • · · 9 9 9 9 9 ·

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 »» 9 9 9 9 9

9999 999 99 999 99 99 poskytla požadovanou nenasycenou sloučeninu (50,3 g, 60% výtěžek ve 4 krocích).

Krok 9. (3S, 4R)-3-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-4-methyl6-fenylhex-5(E)-en-l-nitril.

Tosylát (50 g, 0,11 mol) byl rozpuštěn v DMSO (1 1) a zpracován KCN (14,2 g, 0,22 mol) a vodou (25 ml) a výsledná směs byla míchána při teplotě 60 °C pod atmosférou dusíku po dobu 18 hodin. Po ochlazení na teplotu okolí byla reakční směs rozdělena mezi EtOAc (1 1) a vodu (1 1) . Vodná fáze byla extrahována pomocí EtOAc (500 ml) a sloučené organické fáze byly promývány solankou a sušeny nad Na₂SO₄. Mžiková chromatografie na oxidu křemičitém s CH₂C1₂ poskytla požadovaný nitril s 92% výtěžkem.

• 9 9 «9 « '* * · ·

9 · · 9··· 9 · 9 »

9 9 9 9 · · · «

999 9 · 9 9 9 9 9

9 999 9999

9999 999 99 »99 99 «9

Krok 10. Methyl (5S,6R)-5-[(terc.-butyldimethylsilyl)oxy]-6methyl-8-fenylokta-2(E),7(E)-dienoát.

Nitril (14,67 g, 46,5 mmol) byl rozpuštěn v toluenu (200 ml) a ochlazen na teplotu -78 °C pod atmosférou dusíku. Po kapkách byl přidán za intenzivního míchání 1,5M roztok DIBAL v toluenu (37,2 ml, 55,8 mmol). Po ukončení adice byla chladicí lázeň odebrána a reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 1 hodin. Reakční směs byla opatrně vlita do 1N HC1 a směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 30 minut. Vrstvy byly odděleny a organická fáze byla promýván nasyceným vodným roztokem vínanu sodno draselného (2x), solankou a sušena nad Na₂SO₄. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a surový bledě žlutý olej byl používán přímo v následné kondenzaci.

Surový aldehyd popsaný výše byl rozpuštěn v THF (90 ml) a zpracován trimethylfosfonoacetátem (9,03 ml, 55,8 mmol) a tetramethylguanidinem (7,0 ml, 55,8 mmol) při teplotě okolí pod atmosférou dusíku. Reakční směs byla míchán po dobu 16 hodin, potom rozdělena mezi EtOAc (200 ml) a vodu (100 ml). Vodná fáze byla zpětně extrahována pomocí EtOAc (100 ml) a sloučené organické fáze byly promývány vodou, solankou a sušeny nad Na₂SO₄. Těkavé látky byly odstraněny ve vakuu a surový žlutý olej (17,0 g) byl chromatografován na • A • · • ·· ·

AA A ·» AA • A A · A * · A • · A A A · ·

AA A A AA AA A

A A A A A A A

A A· AAA AA AA silikagelu směsí CH₂C1₂: cyklohexan (1 : 1 až 2 : 1) což dalo 13,67 gramů požadovaného esteru, 78,5%.

Příprava 2 (5S,6R)-5-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-6-methyl-8fenylokta-2(E),7(E)-dienová kyselina

Methyl-(5S,6R)-5-[(terč.-butyldimethylsilyl)oxy]-6-methyl-8fenylokta-2(E),7(E)-dienoát z Přípravy 1, krok 10 (1,00 g, 2,673 mmol) byl rozpuštěn v acetonu (44 ml) a potom byl přidán IN vodný LiOH (26 ml) při teplotě okolí. Kalná směs byla dále zředěna acetonem (20 ml) a výsledná žlutá směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 23,5 hodin. Reakční směs byla zředěna diethyletherem (400 ml) a organické složky byly promýván IN HC1 (120 ml), solankou (200 ml) a H₂O (160 ml). Organické složky byly sušeny (MgSOJ a koncentrovány ve vakuu což ponechalo žlutý olej, který byl čištěn sloupcovou chromatografií (gradientově vymývání: 5% ACOH + 20%-40%

EtOAc/hexany), což dalo karboxylovou kyselinu ve formě žlutého oleje (960 mg, 100%).

[a]_D ⁵⁸⁹ +87,6° (c 10,5, CHC1₃) ;

^XH NMR (CDC1₃) d 7,38-7,19 (m, PhH₅) , 7,09 (ddd, J = 15,2,

7,6 a 7,9 Hz, 3-H) , 6,38 (d, J = 16 Hz, 8-H) , 6,16 (dd, J = ·· · ·* · ·Φ· · · · · • · · · · • · · · · · • · · · · • ·· · ·« · · * ♦··

9 9 • · ·

9 9

99 a 8 Hz, 7-H), 5,85 (d, J = 15,8 Hz, 2-H) , 3,81-3,75 (m, 5-H), 2,49-2,37 (m, 6- Η, 4-HH’), 1,12 (d, J = 6,7 Hz, 6Me) , 0,91 (s, 9H, SiCMe₃) , 0,065 (s, SiMe), 0,068 (s, SiMe) ppm;

IR (CHC1₃) X_max 2957, 2930, 2858, 1697, 1258, 1098, 838 cm’¹;

MS (FD) 360,2 (M⁺,100);

Elementární analýza pro C21H32O3 dává: C, 69,95; H,8,95%. Nalezeno: C,69,19; H,8,39%.

Příprava 3

Do míchaného roztoku karboxylové kyseliny z Přípravy 2 (720 mg, 2 mmol) v bezvodém dimethylformamidu (5,50 ml) byl při teplotě okolí přidán l-ethyl-3-(3dimethyaminopropyl)karbodiimid (459 mg, 2,4 mmol) a Nhydroxysukcinimid (299 mg, 2,6 mmol). Směs byla míchána po dobu 28 hodin a potom zředěna EtOAc (100 ml) a promývána 1N vodným HC1 (2x50 ml), H₂O (75 ml), sušena (MgSO₄) a koncentrována ve vakuu, což zanechalo olej. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (gradientově vymývání: 5-30% EtOAc/hexany) což dalo aktivní ester ve formě bledě žlutého oleje (724 mg,80%).

[a]_D ⁵⁸⁹ +7 1 , 3 ° (c 10,1, CHC1₃) ;

^XH NMR (CDC1₃) d 7,36-7,20 (m, PhH₅, 3-H) , 6,38 (d, J = 16

Hz, 8-H), 6,14 (dd, J = 16,1 a 8,0 Hz, 7-H), 6,03 (d, J = 16 Hz, 2-H) , 3,79 (q, J = 4,3 Hz, 5-H), 2,94 (brs, CH₂C1₂) ,

2,58-2,42 (m, 6-H, 4-HH'), 1,10 (d, J= 6,8 Hz, 6-Me), 0,90 (s, 9H, SiCMe3) , 0,05 (s, 6H, SiMe₂) ppm;

IR (CHCI3) Xmax 2957, 2931, 2858, 1772, 1741, 1648, 1364, 1254, 1092, 1069, 838 cm^-1;

MS (FD) 457 (M⁺,100);

Elementární analýza pro C₂₅H₃₅NO5 dává: C,65,61; H,7,71;

N,3,06%.

Nalezeno: C,65,51; H,7,56; N,3,02%.

Příprava 4

Do míchaného roztoku aktivního esteru z Přípravy 3 (2,50g,

5,47 mmol) v CH₃CN (130 ml) byl přidán při teplotě 0 °C 48% vodný HF (15 ml) . Roztok byl míchán při teplotě 0 C po dobu 0,75 hodin a potom při teplotě okolí po dobu 4 hodin. Reakční směs byla zředěna diethyletherem (300 ml) a promývána H₂O dokud nebylo dosaženo pH přibližně 7. Organické složky byly sušeny (MgSOJ a koncentrovány ve vakuu což dalo žluté residuum, které bylo rekrystalizováno z Et₂O a to dalo alkohol ve formě bílých krystalů (l,46g, 78%) .

9999 999 • 99 9 9· · · · · · · • 9 9 · 9 9 *

9 9 9 9 9

999 99 99 ^XH NMR (CDC1₃) d 7,41-7,20 (m, PhH₅,3-H) , 6,48 (d, J=16Hz,8H), 6,15-6,07 (m,7-H,2-H), 3,71-3,65 (m,5-H), 2,83 (brs,CH₂Cl₂) , 2,60-2,33 (m, 6-H, 4-CH₂) , 1,95 (brs, 5-OH) , 1,14 (d, J=6,8Hz,6-Me) ppm;

IR u (KBr) 3457, 1804, 1773, 1735, 1724, 1209, 1099, 1067, 1049, 975, 744, 694 cm¹;

UV (EtOH) X_max 250 (e =20535) nm;

MS (FD) 343,2 (M⁺,100);

[a]_D -57,8° (c 10,56, CHCI3);

Elementární analýza pro Ci9H₂₁NO₅S dává: C, 66, 46; H,6,16;

N,4,08%.

Nalezeno: C,66,49; H,6,16; N,4,07%.

4 4

4 44

Příprava 5

CH₃

.O

OTBS

ONHS

Aceton (10 ml) byl přidán do roztoku aktivního esteru z Procedury 3 (2,90 g, 6,35 mmol) v dichlormethanu (20 ml) a roztok byl ochlazen na teplotu 0 °C. Vodný roztok Oxone (11,7 g, 19 mmol) v H₂0 (30 ml) byl pomalu přidán do míchaného roztoku vodného NaHCO3 (5,3 g, 63,5 mmol) v H₂O (30 ml) (byl pozorován vývin plynu!). Výsledný roztok byl přidán do reakční směsi a míchán při teplotě 0 °C po dobu 7 hodin (tle - 50% přeměna). Byly přidány další Oxone (6 g) a aceton (15 ml) a směs byla míchána po dobu 1,5 hodin (tle - všechen výchozí materiál spotřebován). Reakční směs byla zředěn H₂O (5 objemů) a produkt extrahován pomocí CH₂C1₂ (5 x 100 ml) . Sloučené a sušené (MgSO₄) organické složky byly koncentrovány ve vakuu což dalo produkt ve formě žluté gumovité pevné látky (2,88 g) . Tle a NMR ukázaly 90% požadovaného epoxidového produktu (a:b =1:1,62): 10% výchozího materiálu. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂: gradientově vymývání: 15%-25% EtOAc:hexany) což dalo zpětně získaný styren (389 mg, 13%) a epoxid ve formě žlutého oleje (2,38 g, 80%). Epoxidy (2 g, a:b =1:1,50) byly odděleny pomocí HPLC což dalo b-epoxid ve formě bílé krystalické pevné látky (1,17 g, 59 % gg, 8 % ee) a a-epoxid ve formě bílé krystalické pevné látky (0,864 g, 43,2 %, 99% ee).

·· ·· · 9 » 9 · ·

Příprava 6

HPLC: Cie reverzní fáze, průtok velikosti 1 ml/min,

60:4O-CH3CN:H₂0, 1= 254 nm, b-epoxid Rt=17,2 minut (AUC 1,5); [a]_D ⁵⁸⁹ +77,36 (c 1,06, CH₂C1₂) ;

^XH NMR (CDCI3) d 7,35-7,24 (m, 6H, ArH₅, 3- H) , 6,08 (d, J= 15,8 Hz, 2-H), 3,91-3,88 (m, 5-H), 3,70 (s, 8-H), 2,97 (dd, J=6 a 0,9 Hz, 7-H), 2,85 (s, 4H, CH₂C1₂) , 2,56-2,51 (n, 4HH' ), 1,78-1,76 (m, 6-H), 1,06 (d, J=6,9 Hz, 6-Me), 0,86 (s, SH, SiCMe₃) , 0,05 (s, SiMe), 0,01 (s, SiMe) ppm;

IR (CHCI3) v 2957, 2931, 1742, 1773, 1200, 1069, 839 cm'¹;

UV (EtOH) k_max 217 (e = 21180) nm;

MS (FD) m/z 474 (M⁺, 10), 416 ( [M-CMe₃] ⁺, 100);

Elementární analýza pro C₂₅H₃5NO₆ dává: C, 63, 40; H, 7,45; N, 2,96 %.

Nalezeno: C, 63,45; H, 7,31; N, 3,21 %.

9 • 9

99 9

9 9 9

Příprava 7

HPLC: C_i8 reverzní fáze, průtok velikosti 1 ml/min,

60:40-CH₃CN:H₂0, l=254nm, a-epoxid Rt=21,0 minut (AUC 1,0); [a]_D ⁵⁸⁹ +10, 68 ° (c 1,03, CH₂C1₂) ;

^XH NMR (CDCI3) d 7,38-7,26 (m, 6H, ArH₅, 3- H) , 6,13 (d, J = 15,7 Hz, 2-H), 3,94-3,89 (m, 5-H), 3,60 (s, 8-H), 2,99 (dd, J= 7,3 a 1,3 Hz, 7-H) , 2,85 (s, 4H, CH₂C1₂) , 2,76-2,71 (m, 4H), 2,61-2,54 (m, 4-H'), 1,64 (dt, J = 7,2 a 2,8 Hz, 6-H) , 1,03 (d, J = 7 Hz, 6-Me), 0,90 (s, 9H, SiMe₃) , 0,08 (s,

SiMe), 0,05 (s, SiMe) ppm;

IR (CHCI3) v 2957, 2931, 1741, 1773, 1649, 1254, 1200, 1125, 1095, 1069, 891, 839 cm’¹;

UV (EtOH) λ_ΜΧ 218 (e = 21727) nm;

MS (FD) m/z 474 (M⁺, 10), 416 ([M-CMe3]+, 100);

Elementární analýza pro C₂5H₃₅NO₆ dává: C, 63, 40; H, 7,45; N, 2,96%.

Nalezeno: C, 63,20; H, 7,63; N, 3,07%.

9 ·· · ·· ·· · 99 · 9 ·· ···· ·· ··· · · · · • 9 9 9 9 · · 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 • 999 999 99 999 99 99

Příprava 8

Příprava β-epoxy fragmentu A kyseliny.

Roztok 2a' (1,91 g, 5,30 mmol) obecného vzorce

v CH2CI2 (18 ml) byl zpracován m-chlorperbenzoovou kyselinou (0,96 g, 5,6 mmol) a směs byla míchána po dobu 4 hodin před odpařením těkavých látek což dalo bezbarvý olej (2,88 g) . Preparativní HPLC byla použita pro separaci epoxidů (1,2:1 β:α) pro získání požadovaného β-epoxidu ve formě bezbarvé pevné látky (42%) .

^XH NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 7,37-7,27 (m, 5H) , 7,11 (ddd, 1H, J = 15,5 7,6, 7,6 Hz), 5,92 (d, 1H, J = 15,5 Hz), 3,90 (ddd, 1H, J = 5,6 5,6 5,4 Hz), 3,70 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 3,00 (dd, 1H, J = 6,6, 2,1 Hz), 2,51 (dd, 2H, J = 6,5, 6,5 Hz), 1,771,73 (m, 1H) , 1,10 (d, 3H, J = 6,8 Hz), 0,89 (s, 9H) , 0,07 (s, 3H), 0,03 (s, 3H).

MS (FD) m/z 377 (M+l, 43),

319 (M-57, 100).

• · · · • ·

Alternativní příprava β-epoxy fragmentu A kyseliny.

Do míchaného roztoku kyseliny 2a' (100 mg, 0,277 mmol) v

CH₃CN (3,7 ml) při teplotě 0 °C byl přidán roztok Na₂EDTA (lxlO^-4 M v H₂O, 2,8 ml, 0,28 pmol) a tetrabutylamonium hydroxidu (1M v MeOH, 28 μΐ, 28 pmol) . Po přidání NaHCO₃(23,3 mg, 0,277 mmol) bylo pH upraveno na hodnotu 8,0 pomocí 2 M NaOH a byla připravena směs Oxone (1,70 g, 2,77 mmol) a NaHCO₃ (722 mg, 8,59 mmol). 100 mg dávka směsi Oxone/ NaHCO₃byla přidána následovaná ketonem (7) (143 mg, 0,554 mmol).

pH bylo okamžitě upraveno na hodnotu 7,8-8,0 pomocí 2 M NaOH. Pak byl přidán zbytek směsi Oxone/ NaHCO₃ v 95 mg dávkách v 10 minutových intervalech a roztok (7) (143 mg, 0,554 mmol) v CH₃CN (500 μΐ) byl přidán do směsi během této doby stříkačkovou pumpou. V průběhu pokusu bylo pH udržováno na hodnotě 7,8-8,0 pomocí 2 M NaOH a 1 N H₂SO₄. HPLC analýza (Cis reverzní fáze, detekce při 220 nm, průtok velikosti 1 ml/min, CH₃CN (0,05% TFA) / H₂O (0,05% TFA) - % CH₃CN: 80% až 90% během 10 minut) 3 hodin po adici Oxone ukázala, že přeměna byla větší než 95% s poměrem β/α, epoxidů rovném 5,0:1. Směs byla filtrována a mokrý filtrační koláč byl promýván CH₂C1₂ (15 ml). Filtrát byl promýván H₂O (15 ml) a vodná fáze byla zpětně extrahována pomocí CH₂C1₂ (15 ml).

Sloučené organické fáze byly promývány 0,1 M HC1 (10 ml) a H₂O (10 ml), sušeny (MgSO₄) a koncentrovány, což dalo surový produkt ve formě žlutého oleje (104 mg, 100%).

Příprava 10

Alternativní příprava β-epoxy fragmentu A Nhydroxysukcinimidového esteru.

Epoxidace N-hydroxysukcinimidového esteru z Přípravy 3 (127 mg, 0,277 mmol) byla prováděna stejným způsobem jak bylo popsáno v Přípravě 9, s výjimkou, že pH bylo sníženo na 5,6 pomocí 1 N H₂SO₄ po přidání hydroxidu tetrabutylamonného a před adicí hydrogenuhličitanu sodného. HPLC analýza (stejný způsob, jako byl použit pro analýzu v Přípravě 9) 3,5 hodin po přidání Oxone prokázala, že přeměna byla větší než 95% s poměrem β/α epoxidů rovným 6,3:1. Po přidání CH₂C1₂ (6 ml) byla směs filtrována a mokrý filtrační koláč byl promýván CH₂C1₂ (14 ml) . Filtrát byl promýván H₂O (10 ml) a vodná fáze byla zpětně extrahována pomocí CH₂C1₂ (2 X 20 ml). Sloučené organické fáze byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány na bezbarvý olej. Chromatografie na silikagelu směsí EtOAc/hexan (1:3) dala sloučeninu z názvu ve formě bezbarvé pevné látky (8:1 β/α epoxidová směs, 82 mg, 63%).

Příprava 11

4 44 4 ·· 44

4 44 · 4 44 4 4 4 4 ·· · · · 4 4 · 4 ·> 444 4 444 44 4

4 444 4444

4444 444 44 444 44 44

Příprava β-epoxy fragmentu A methylesteru.

Epoxidace methylesteru z Příprava 1, krok 10 (104 mg, 0,278 mmol) byla prováděna stejným způsobem jako bylo popsáno v Přípravě 9 s tou výjimkou, že pH bylo sníženo na hodnotu 3,3 pomocí 1 N H₂SO₄ po přidání hydroxidu tetrabutylamonného a před přidáním hydrogenuhličitanu sodného. HPLC analýza (stejný způsob jaký byl použit pro analýzu produktu Přípravy 9 s výjimkou % CH₃CN: 95%, isokraticky) 2 hodin po přidání Oxone prokázala, že přeměna byla větší než 95% s poměrem β/α epoxidů 4,9:1. Po přidání CH₂C1₂ (6 ml) byla směs filtrována a mokrý filtrační koláč promýván CH₂C1₂ (14 ml) . Filtrát byl promýván H₂O (10 ml) a vodná fáze byla zpětně extrahována CH₂C1₂ (2 X 20 ml) . Sloučené organický fáze byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány, což dalo surový produkt ve formě žlutého oleje (123 mg, 113%).

^XH NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 7,38-7,26 (m, 5H) , 6,99 (ddd, 1H, J

-	15,8, 7,6,	7,6 Hz) , 5, 91	(d, 1H,	J	= 1	5,8 Hz), 3,	87	(ddd,
1H	, J = 5,6,	5,6, 5,4 Hz) ,	3,75 (	s,	3H)	, 3,70 (d,	1H,	J =
2,	1 Hz), 3,00	(dd, 1H, J =	6,8, 2,	1	Hz) ,	2,49-2,45	(m,	2H) ,
1,	75-1,69 (m,	1H), 1,10 (d,	3H, J	=	6, 8	Hz), 0,88	(s,	9H) ,
o,	06 (s, 3H),	0,02 (s, 3H).

MS (FD) m/z 391 (M+l, 8), 333 (M-57, 100).

«« « ·· · ·< ·· ···· · · · · « « · « • · · · · « ♦ · · • · · · · ···« ·*·· ··· ·· ·*· ·· ··

Příprava 12

Boc amin (1,69 g,

zveřejněná PCT přihláška č. WO 97/07798, publikovaná 6. března 1997; byl rozpuštěn v trifluoroctové kyselině (17 ml) a roztok byl míchán při teplotě okolí pod suchou dusíkovou atmosférou po dobu 4,75 hodin a potom koncentrován ve vakuu a sušen za vysokého vakua po dobu 24 hodin, což dalo aminovou sůl ve formě žlutého viskózního oleje (l,76g, 100%).

[a]_D ⁵⁸⁹ -11, 54 ° (c 1,04, MeOH) ;

^XH NMR (CDC13) δ Jednotka C' : 7,43 (br s, 3H, NH3⁺) , 3,34-3,28 (m, 3-H), 3,18-3,12 (m, 3-H'), 1,42 (s, 2-Me) , 1,36 (s, 2Me); Jednotka D: 10,94 (br s, CO2H) , 5,23-5,20 (m, 2H),1,92-1,77 (m, 3H, 3-HH', 4-H) , 1,10 (d, J = 5,8 Hz, 5H₃) , 0,98 (d, J = 5,8 Hz, 4-Me) ppm;

::::

• · « ·

IR (CHC1₃) v 2963, 1746, 1710, 1678, 1192, 1172 cm'¹; MS (FAB) 232,2 ([M+l]⁺, 100).

Příprava 13

NHFmoc

Do míchaného roztoku aminové soli z Přípravy 12 (5,09 mmolů) v dioxanu (20 ml) byl přidán hydrogenuhličitan sodný (2,14 g, 25,5 mmolů) následovaný FmocCl (l,58g,6,ll mmolů) při teplotě okolí. Směs byla zředěna H₂O (4 ml) a míchána po dobu 19 hodin. Reakce byla zastavena IN vodným HC1 (150 ml) a extrahována pomocí EtOAc (2x100 ml) . Sloučené organické složky byly promývány H₂O (100 ml), sušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu, což dalo žlutou gumovitou pevnou látku. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (Bíotage-Si0₂: gradientově vymývání; 10%- 75% EtOAC: hexany) a to dalo Fmoc amin ve formě bledě žluté pevné látky (850 mg, 37%) . Produkt byl kontaminován aminokyselinou, která byla odstraněna rozpuštěním produktu v EtOAc a mícháním s IN HC1 aq po dobu několika hodin. Organické složky byly sušeny a koncentrovány, což dalo produkt (85:15 produkt: aminokyselina).

[a]_D ⁵⁸⁹ -15, 95 ° (c 0,50, CH₂C1₂) ;

⁷H NMR (CDC1₃) δ Jednotka C' : 7,59 (d, J = 7,4 Hz, ArH₂) , 7,67-7,61 (m, ArH₂) , 7,43 (t, J = 7,3 Hz, ArH₂) , 7,36- 7,30 (m, ArH₂), 5,88 (t, J = 5,8 Hz, NH) , 4,41-4,38 (m, 3'-HH'), 4,35-4,28 (m,4'-H), 3,42 (d, d = 6,5 Hz, 3-HH'), 1,27 (s, 2Me) , 1,26 (s, 2-Me) ; Jednotka D: 8,40 (br s, CO₂H) , 5,185,13 (m, 2-H), 1,87-1,69 (m, 3H, 3-HH', 4-H) , 0,97 (d, J = 5,8 Hz, 5-H3), 0,93 (d, J = 6,1 Hz, 4-Me) ppm;

IR (KBr) t 2959, 2937, 1730, 1540, 1471, 1451, 1307, 1268,

1145, 1128, 759, 741 cm¹;

UV (EtOH) X_max 299 (e = 5851), 288 (e = 4773), 265 (e =

18369), 227 (e = 4813) nm;

MS (FAB) 454 ([M+l]⁺, 26);

Elementární analýza pro C₂₆H₃iNO6 dává: C, 68,86; H, 6,89; N, 3,09%.

Nalezeno: C, 68,92; H, 7,01; N, 3,34%.

4 ·	•		4 4	f	4 4		4 4
« ·	• ·	4		4 4 4	4	4	4 4
•	4	4		4 4	4	4	4 4
4
•	•	•		4 4	4	4	4 4
• · · ·	4 4 4		4 4	(e 44	\* 4		4 4

Příprava 14

Příprava Fmoc Seco.

Do směsi fragmentu A-B sloučeniny (4')

(600 mg, 1,01 mmol, Barrow, R.A. a kol., J. Am. Chem. Soc. 117, 2479-2490 (1995)), sloučeniny z Přípravy 13 (618 mg,

1,36 mmol) a DMAP (24,7 mg, 0,202 mmol) v CH₂C1₂ (3,6 ml) byl při teplotě 0 °C přidán roztok DCC (281 mg, 1,36 mmol) v CH₂C1₂ (1,2 ml) a reakční směs byla ponechána za míchání 5 minut při teplotě 0 °C a 30 minut při teplotě zpětného toku. Po zředění směsi EtOAc/hexanem (1:1, 15 ml) byla tato · »· · ·* ·· «09 9 · · 9 9 <9 » • Λ 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9999 999 99 999 99 99 filtrována přes celit a filtrační koláč byl promýván EtOAc/hexanem (1:1, 15 ml). Filtrát byl promýván 1 M HC1 (10 ml), nasyceným roztokem NaHCCb (10 ml), solankou (10 ml), sušen (MgSO₄) a koncentrován na žlutou pěnu. Chromatografie na silikagelu s EtOAc/hexanem (1:2,5 to 1:1) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvé pěny (864 mg, 83,5%).

^XH NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 7,78 (d, 2H, a = 7,5 Hz), 7,69-7,66

(ir	h 2H),	7,40 (dd, 2H, 0 =	7,5,	7,4 Hz),	7,34-7,22	(m,	7H)
7,	19 (d,	1H, J = 1,8 Hz),	7,05	(dd, 1H,	0 = 8,5,	1,8	Hz)
6,	86-6,80	(m, 1H), 6,82 (d,	1H,	J = 8,4	Hz), 6,45 (	d,	1H,
=	8,4 Hz	), 6,44 (d, 1H, d	= 1	5,5 Hz),	6,11-6,03	(m,	2H)
5,	91 (d,	1H, J = 15,7 Hz),	5,18	(m, 1H) ,	5,08-5,01	(n,	2H)
4,	77 a 4,	67 (AB kvartet, 2H,	, J =	-- 11, 9 Hz)	4 43-4,33	(m,	2H)
4,	27 (dd,	1H, J = 7,4, 7,2	Hz) ,	3,86 (s,	3 H), 3,43	(d	, 2H
d	= 6,65	Iz), 3,21 (dd, 1H,	J =	14,1, 5,7	Hz), 3,07	(dd	, 1H
J	= 14,2	, 6,7 Hz), 2,69-2,	, 58	(m, 3H),	1,79-1,72	(m,	2H)
i,	67-1,61	(η, 1H), 1,29 (s,	3H)	, 1,20 (s	, 3H), 1,17	(d	, 3H

J = 6,8 Hz), 0,91 (d, 3H, J = 6,4 Hz), 0,87 (d, 3H, J = 6,4 Hz) .

Elementární analýza pro C53H58CI4N2O10 dává C, 62,11; H, 5,70; N, 2,73.

Nalezeno: C, 62,21; H, 5,68; N, 2,50.

• · * í

A • · · · «4 « «· ·» • · · · « 4 · * • · 4 · · · t • 4 · 4 4 4 4 ·

4 4 4 4 4 · »· 444 »· 44

Příklad 1

Příprava β-epoxy fragmentu A-B.

Epoxidace fragmentu A-B obecného vzorce (4') (653 mg, 1,11 mmol, Barrow, R.A. a kol., J. Am. Chem. Soc. 117, 2479-2490 (1995) ) byla prováděna stejným způsobem jak bylo popsáno v

Proceduře 9 s tou výjimkou, že pH bylo sníženo na hodnotu 4,4 pomocí 1 N H₂SO₄ po přidání hydroxidu tetrabutylamonného a před adicí hydrogenuhličitanu sodného. Reakce byla ukončena dříve než byla přidána směs 0xone/NaHC0₃ a keton. HPLC analýza (stejný způsob jaký byl použit pro analýzu produktu Procedury 9 s výjimkou % CH₃CN: 70% až 85% během 15 minut) prokázala, že fragment A-B výchozího materiálu byl spotřebován, což dalo 5:1 β/α epoxidovou směs po přidání 80% směsi 0xone/NaHC0₃ (1,6 ekvivalentů 2 ekvivalentů (7), které byly pomalu přidány) . Po přidání CH₂C1₂ (24 ml) byla směs filtrována a mokrý filtrační koláč byl promýván CH₂C1₂ (56 ml) . Filtrát byl promýván H₂0 (40 ml) a vodná fáze byl zpětně extrahována CH₂C1₂ (2 X 40 ml). Sloučené organický fáze byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány, což dalo surový produkt ve formě světle žlutý pěnu (798 mg, 119%), která byla používána přímo v následující reakci bez čištění.

4 «4 ···· 4 44 44

4 4

44 ^ςΗ NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 7,39-7,29 (m, 5H) , 7,21 (d, 1H, J =

	2,2 Hz), 7,06 (dd, 1H, J	= 8,4, 2,1 Hz), 6,93	(ddd, 1H,	J =
	15,4, 7,4, 7,4 Hz), 6,88	(d, 1H, J = 8,4 Hz) ,	5,94 (d, 1H, J
	= 15,4 Hz), 5,90 (d, 1H	, J = 7,8 Hz), 5,09	(ddd, 1H,	J =
V	7,7, 6,0, 5,9 Hz), 4,82	a 4,7 6 (AB kvartet,	2H, J =	11,8
	Hz), 3,90 (s, 3H) , 3,83	(d, 1H, J = 2,1 Hz),	3,78-3,74	(m,
«	1H), 3,25 (dd, 1H, J =	14,2, 5,9 Hz), 3,15	(dd, 1H,	J =
	14,2, 6,0 Hz), 3,02 (dd,	1H, J = 6,7, 2,1 Hz) ,	2,58-2,52	(br
	η, 1H), 2,39 (ddd, 1H, J	= 14,8, 7,6, 7,6 Hz) ,	1,79 (n,	1H) ,
	1,14 (d, 3H, J = 6,9 Hz).

MS (FD) m/z 603 (M⁺) .

Příklad 2

Příprava β-epoxy Fmoc Seco z Fmoc Seco.

Do míchaného roztoku sloučeniny z Přípravy 14 (382 mg, 0,373 mmol) v CH₃CN (4,7 ml) při teplotě 0 °C byl přidán roztok Na₂EDTA (lxlO^-4 M v H₂O, 3,7 ml, 0,37 μιηοΐ) a hydroxid tetrabutylamonný (1 M v MeOH, 37 μΐ, 37 μ mol). pH bylo sníženo na hodnotu 3-6 pomocí 1 N H₂SO₄ před přidáním NaHCO₃(31,3 mg, 0,373 mmol). Po přípravě směsi Oxone (2,29 g, 3,72 mmol) a NaHCO₃ (975 mg, 11,6 mmol) bylo pH upraveno na hodnotu 8,2 pomocí 1 N H₂SO₄ a byl přidán keton (7) (385 mg, 1,49 mmol). Směs Oxone/ NaHCO₃ směs potom byla přidána v 128 mg dávkách v 10 minutových intervalech a pH bylo udržováno na 7,8-8,2 pomocí 2 M NaOH a 1 N H₂SO₄. HPLC analýza (stejný způsob jaký byl použit pro analýzu produktu Procedury 9 s výjimkou % CH₃CN: 95%, isokraticky) 1 hodinu po přidání Oxone prokázala, že přeměna byla 85% s poměrem β/α epoxidů rovným 9,5:1. Po přidání CH₂C1₂ (8 ml) byla směs filtrována a mokrý filtrační koláč byl promýván CH₂C1₂ (19 ml) . Filtrát byl promýván H₂O (13 ml) a vodná fáze byla zpětně extrahována pomocí CH₂C1₂ (2 X 27 ml). Sloučené organické fáze byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány, což dalo surový produkt ve formě béžové pěny (375 mg, 97%).

9 * 99 < 99 99

999» 9999 9999 • 9 99« 9999 «99 9 9» 9 99 9 • 9 «99 999»

9999 999 «9 «99 «· 99

Příklad 3

Příprava β-epoxy Fmoc Seco z β-epoxy fragmentu A-B.

Roztok epoxidového produktu z Příkladu 1 (788 mg, 1,09 mmol teoreticky) v CH2CI2 (3,7 ml) byl přidán do kyseliny z Přípravy 13 (742 mg, 1,64 mmol) následovaný DMAP (26,6 mg, 0,218 mmol) a směs byl okamžitě ochlazena na teplotu 0 °C. Po přidání roztoku DCC (338 mg, 1,64 mmol) v CH₂C1₂ (1,2 ml) byla směs ponechána za míchání po dobu 5 minut při teplotě 0 °C a po dobu 1 hodiny při teplotě zpětného toku. Směs byla potom zředěna EtOAc/hexanem (1:1, 20 ml), filtrována přes celit a koncentrována na žlutou pěnu. Chromatografie na silikagelu s EtOAc/hexan (1;3 to 1:2) poskytla sloučeninu z názvu ve formě světle žluté pěny (7,8:1 β/α epoxidová směs, 772 mg, 68% z fragmentu A-B korigováno na 55% v důsledku kontaminace vedlejším produktem).

NMR (500 MHz, CDC1₃) δ 7,77 (d, 2H, J = 7,5 Hz), 7,66-7,60

(m,	2H) ,	7,40-7,24 (m, 9H),	7,19	(s,	1H), 7,05 (d,	1H,	8,4
HZ)	, 6,86	-6,79 (m, 1H), 6,82	(d,	1H,	J = 8,4 Hz),	6, 44	(d,
1H,	J =	8,0 Hz), 5,98-5,94	(br	m, 1	H), 5,91 (d,	1H,	J =
15,	6 Hz) ,	5,23-5,20 (m, 1H),	5, 09	-5,04	(m, 1H), 5,0	(dd,	1H,

• · · * * « ·· · ♦ • · ·· · ··· · · · · • · · · · ···· * · ♦ · ♦ ··»··» • · · · · t · · · ···· ·♦« «· ··· ·» ·«

J = 9,8, 3 2 Hz), 4,77 a 4,68 (AB kvartet, 2H, J = 11,8 Hz), 4,43-4,34 (m, 2H) , 4,27-4,23 (m, 1H), 3,85 (s, 3H) , 3,73 (d,

1H	/	J =	1,7 Hz), 3,44-3,38 (m, 2H), 3,20	(dd, 1H, J	= 14,2,
5,	7	Hz) ,	3,07 (dd, 1H, J = 14,2, 6,7 Hz),	2,94 (dd,	1H, J =
6,	9,	1,7	Hz), 2,66-2,57 (m, 2H) , 1,97-1,	90 (m, 1H)	, 1,80-
1,	71	(m,	2H), 1,60-1,55 (m, 1H) , 1,25 (s,	3H), 1,19	(s, 3H),
i,	15	(d,	3H, J = 6,9 Hz), 0,93 (d, SH, J =	6,4 Hz),

MS (FD) m/z 1038 (M⁺) .

Příklad 4

Příprava β-epoxy Fmoc Seco z fragmentu A-B:

Epoxidace při pH 10,5 následovaná kopulací s předem aktivovanou Fmoc C'D kyselinou.

Epoxidace: Do míchané směsi fragmentu A-B (4') (650 mg, 1,10 mmol), pufru tetraboritanu sodného (0,05 Μ v 4xl0“⁴ M vodném Na₂EDTA, 11,2 ml), hydrogensíránu tetrabutylamonného (14,9 mg, 43,9 μπιοί) a ketonu (7) (568 mg, 2,20 mmol) v CH₃CN (16,8 ml) při teplotě 0 °C byl přidán roztok Oxone (2,61 g, 4,24 mol) ve vodném Na₂EDTA (4 X 10’⁴ M, 20 ml) a roztok K₂CO₃ (0,89 M, 20 ml) během 2 hodin. HPLC analýza (stejný způsob ·· · ·< · ·· ·· ♦ · ·♦ · · · · · φ · · * · φ · φ φ φ φ φ • φ φ · · φ φ φ · φ φ • φ φ * φ φ φ φ φ φφφφ φφφ φφ ··· ·· φφ jaký byl použit pro analýzu produktu Přípravy 9 s výjimkou % CH₃CN: 70% až 85% během 15 minut) po ukončení adice prokázala, že přeměna byla větší než 95% s poměrem β/α epoxidů 6,5:1. Směs byla zředěna CH2CI2 (30 ml) a promývána H₂O (20 ml). Vodná vrstva byla zpětně extrahována CH₂C1₂ (2 X 30 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány na slabě žlutou pěnu (995 mg), která byla použita v následujícím kroku bez dalšího čištění.

Kopulace: Do roztoku kyseliny (10a) (723 mg, 1,60 mmol) a

DMAP (26,9 mg, 0,220 mmol) v CH₂C1₂ (1,7 ml) při teplotě 0 °C byl přidán roztok DCC v CH₂C1₂ (1,3 ml). Po míchání směsi po dobu 5 minut byl přidán roztok surového alkoholu v CH₂C1₂(1,5 ml) a reakční směs byla míchána po dobu 5 minut při teplotě 0 °C a 1 hodinu při teplotě zpětného toku. Směs byla potom zředěna EtOAc/hexanem (1:1, 20 ml), filtrována přes celit a koncentrována na žlutou pěnu. Chromatografie na silikagelu s EtOAc/hexan (1:3 to 1:2) poskytla sloučeninu z názvu ve formě světle žluté pěny (10,3:1 β/α epoxidová směs, 820 mg, 71% kontaminována pouze 4% vedlejším produktem).

·· 4 4· 4 44 44

4444 4444 4444

44 4 4444

444 4 444 44 4

4 444 4444

4444 444 44 444 44 44

Příklad 5

Příprava Kryptofycinu 52 z Kryptofycinu 51.

Epoxidace Kryptofycinu 51 (181 mg, 0,277 mmol) byla prováděna stejným způsobem jako bylo popsáno v Přípravě 9 s tou výjimkou, že pH bylo sníženo na hodnotu 7,8 pomocí 1 N H₂SO₄ po přidání hydroxidu tetrabutylamonného a před přidáním hydrogenuhličitanu sodného. HPLC analýza (stejný způsob jaký byl použit pro analýzu produktu Přípravy 9 s výjimkou % CH₃CN: 60% až 90% během 20 minut) ke konci přidávání Oxone prokázala, že přeměna byl menší než 10% s poměrem β/α epoxidů 5-7:1.

• 4» * · · · · · · » · 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

Příprava Kryptofycinu 52 z β-epoxy Fmoc Seco.

Do roztoku β-epoxy Fmoc Seco z Příkladu 3 (767 mg, 0,737 mmol upraveného na 0,54 mmol v důsledku kontaminace aepoxidem a vedlejším produktem) v DMF (74 ml) byl přidán piperidin (364 μΐ, 3,69 mmol) a reakce byla ponechána za míchání po dobu 20 hodin před zředěním pomocí EtOAc (200 ml) a promýváním H₂O (3 x 200 ml) . Sloučené vodné vrstvy byly zpětně extrahovány EtOAc (60 ml) a sloučené organické vrstvy byly sušeny (MgSO₄) a koncentrovány na oranžový olej. Krystalizace z toluenu (2,5 ml, očkováno Kryptofycinem 52) poskytla sloučeninu z názvu ve formě bezbarvé pevné látky (171 mg, 47%) .

9 9 9« 9 «9 99

99 99 99 9999

999 9999

999 9 999 99 9

9 999 9999

9999 999 99 999 99 99

Příklad 7

Do roztoku β-epoxidu z Přípravy 6 (473 mg, 1,0 mmol) v bezvodém DMF (6,7 ml) byla přidána aminokyselina HBH (459 mg, 2,0 mmolů), reprezentovaná obecným vzorcem

zveřejněná PCT přihláška č. WO 97/07798, publikovaná 6. března 1997; následovaná N,O-bis-(trimethylsilyl)acetamidem (618 μΐ, 2,5 mmolů) při teplotě okolí pod dusíkovou atmosférou. Výsledná směs byla zahřívána na teplotu 55 °C (vytvořen roztok) po dobu 8 hodin, zředěna EtOAc (250 ml) a promývána IN vodným HC1 (3x80 ml), H₂0 (100 ml). Sloučené a sušené (MgSO<i) organické složky byly koncentrovány ve vakuu,

9 9 99 9 99 99

9999 9999 9999

9 99 9 9999

999 9 999 99 9

9 999 9999

9999 999 99 999 99 99 což dalo žlutou pěnu (590 mg), která byla dále čištěna sloupcovou chromatografií (SiO₂, gradientově vymývání; CH₂C1₂- 5%-10% MeOH: CH₂C1₂) , což dalo silyletherový produkt ve formě bílé pěnu (489 mg, 89%).

[a]_D ⁵⁸⁹ +28,33° (c 1,06, MeOH);

^XH NMR (DMSO-d6) δ Jednotka A: 7,33-7,17 (E, ArH₅) , 6,55-6,40 (m, 3-H) , 6,03 (d, J = 15,3 Hz, 2-H), 3, 83-3,76 (E, 5-H), 3,71 (s, 8-H), 2,90 (d, J = 6,8 Hz, 7-H), 2,46-2,27 (m, 4HH'), 1,50-1,44 (m, 6-H), 0,94 (d, J = 6,7 Hz, 6-Me), 0,74 (s, 9H, SiMe₃) , -0,54 (s, SiMe), -0,13 (s, SiMe); Jednotka

B: 7,76 (d, J = 7,3, NH) , 7,33-7,17 (m, ArH) , 7,04 (d, J =

8,5, ArH), 6,90 (d, J = 8,5, ArH), 4,27- 4,23 (m, 2-H), 3,72 (s, 3H, OMe), 3,02 (dd, J = 13,3 a 4,3 Hz, 3-H), 2,78 (dd, J

= 13,5 a 7,8 Hz,	3-H' )	ppm;
IR (KBr) v 2955,	2930,	2857	, 1668, 1605, 1504, 1463, 1454,
1279, 1258, 1067,	1026,	837,	77 6 cm'¹;
UV (EtOH) l_max 27 8	(e =	2219)	nm.

ΦΦ φφ • φ φ φ « « φ «

Příklad 8

Způsob A

Do roztok silyletheru z Příkladu 7 (160 mg, 0,272 mmolů) v bezvodém DMF (3,5 ml) byl přidán hydrogenuhličitan sodný (228 mg, 2,72 mmolů) následovaný pevným hydrátem fluoridu tetrabutylamonného (TBAF) (358 mg, 1,36 mmolů). Směs byla zahřívána na teplotu 60 °C po dobu 17 hodin a potom byl přidán další TBAF (358 mg, 1,36 mmolů) a směs byla zahřívána po dobu 9 hodin a nakonec byl přidán roztok 1M TBAF v THF (360 μΐ, 1,36 mmolů) což změnilo barvu reakční směsi na hnědou. Směs byla zahřívána po dobu 20 minut a potom reakce byla ukončena vodou (100 ml) a extrahována pomocí EtOAc (3x50 ml) . Sloučené sušené (Na₂SO₄) organické složky byly koncentrovány ve vakuu, což dalo hnědou olejovitou gumu (248 mg). Surová karboxylátová sůl byla používána v následujícím kroku bez dalšího čištění.

·· * ·* · ·· ·* • · ·· · · 99 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 ···» ·«»··· • · «·· · · · · ♦··· ··» ·· 999 99 99

Příklad 9

Způsob B

Do roztok silyletheru z Příkladu 7 (145 mg, 0,247 mmolů) v bezvodém tetrahydrofuranu (3,0 ml) byl přidán 1M roztok fluoridu tetrabutylamonného (800 μΐ, 0,8 mmolů) pod sucho dusíkovou atmosférou. Výsledný roztok byl zahříván na teplotu 60 °C po dobu 7 hodin a potom bylo provedeno zpracování jak bylo popsáno výše, což dalo hnědé residuum (166 mg, 94%). Surová karboxylátová sůl byla použita v následujícím kroku bez dalšího čištění.

Příklad 10

Do bezvodého roztoku surové karboxylátové soli (0,272 mmolů) v DMSO (3,5 ml) byl přidán hydrogenuhličitan sodný (274 mg, 3,26 mmolů) následovaný pomalou adicí roztoku t-butylbromidu (373 mg, 2,72 mmolů) v DMSO (1,5 ml) v průběhu přibližně 2 hodin při teplotě okolí a pod atmosférou dusíku. Směs byla míchána po dobu dalších 21 hodin a potom byla reakce ukončena solankou (50 ml) a extrahována pomocí EtOAc (3x 30 ml). Sloučené organické složky byly promývány vodou (50 ml), sušeny (Na₂SO₄) a koncentrovány ve vakuu, což dalo surový ester ve formě gumovité pevné látky (117 mg, 81%). Surový alkohol A-B byl používán v následujícím kroku bez dalšího čištění.

4 44 4 44 ··

4·· · 444 4 44 4

4 444 4444

444 4 444 44 4

4 444 4444

4444 444 44 444 44 44

Příklad 11

Do míchaného roztoku karboxylové kyseliny D-C' z Přípravy 13 (129 mg, 0,285 mmolů) v bezvodém dichlormethanu (1,0 ml) byl přidán DMAp (5,4 mg, 0,044 mmolů) a DCC (59 mg, 0,285 mmolů) při teplotě okolí pod suchou dusíkovou atmosférou. Roztok byl míchán po dobu 0,5 hodin a potom byl přidán pevný hydrogenuhličitan sodný (37 mg, 0,44 mmolů) následovaný roztokem surového alkoholu A-B z Příkladu 10 (117 mg, 0,22 mmolů) v bezvodém dichlormethanu (1,2 ml). V průběhu 10 minut se vytvořil precipitát a směs byla míchána po dobu dalších 50 minut. Surová reakční směs byla přímo aplikována na kolonu SÍO2 a čištěna (gradientově vymývání; 10%-40% EtOAc:hexany), což dalo methylsulfidový produkt ve formě bledě žluté pevné látky (122 mg, 46% ve 3 krocích).

^XH NMR (CDCI3) δ Jednotka A: 7,43-7,20 (m, ArH₅) , 6,90-6,81 (m, 2H, 3-H, ArH), 5,93 (d, J = 15,6 Hz, 2-H), 5,14-4,93 (m, 5-H), 3,05 (dd, J = 14,5 a 8,3 Hz, 7-H) , 2,65- 2,63 (m, 4HH' ), 2,00-1, 95 (m, 6-H), 1,17 (d, J = 7,0, 6-Me); Jednotka B: 7,43-7,20 (m, ArH), 7,06 (d, J = 8,1 Hz, ArH), 6,90-6,81

9 99 · 99 99 · · · · 9 9 9 · 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 • · · · · 9 9 9 9 9 9 • 9 ··· 9 9 9 9

9··· 999 99 999 99 99 (m, ArH), 6,44 (d, J = 7,7 Hz, NH) , 5,19 (q, J_AB = 11,8 Hz,

1'- HH), 5,14-4,93 (m, 2-H) , 3,87 (s, OMe), 3,20-3,10 (m, 3HH’), 2,21 (s, SMe); Jednotka C': 7,79 (d, J = 7,4 Hz, ArH₂) , 7,67 (d, J = 6,9 Hz, ArH₂) , 7,43-7,20 (m, ArH₄) , 6,04 (d, J = 7,7 Hz, NH), 4,42-4,34 (m, 3'-HH'), 4,30-4,25 (m, 4'-H, 3,42 (d, J = 6,2 Hz, 3-HH'), 1,27 (s, 2-Me) , 1,20 (s, 2-Me); Jednotka D: 5,22-5,18 (m, 2-H), 1,82-1,58 (m, 3H, 3HH',4-H), 0,96 (s, 5-H3), 0,94 (s, 4-Me) ppm.

Příklad 12

Do míchaného roztoku methylsulfidu z Příkladu 11 (56 mg,

0,058 mmolů) v acetonu (10 ml) byl přidán hydrogenuhličitan sodný (64 mg, 0,764 mmolů) následovaný vodným roztokem Oxone (234 mg, 0,382 mmolů) ve vodě (3,0 ml). Reakční směs byla míchána při teplotě okolí po dobu 20 minut (výchozí materiál se rychle měnil na velmi polární sulfoxid a potom časem na méně polární sulfonový produkt). Reakce byla ukončena ve vodě (40 ml) a směs byla extrahována pomocí EtOAc (3x20 ml). Organické složky byly promývány solankou (30 ml), sušeny (MgSO₄) a koncentrovány ve vakuu, což dalo pevnou látku. Surový produkt byl čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂:

«· · «· 9 ·· ·· • · ·· ···· · 9 · · · · · 9 9 9 9 9 • 9 9 9 · 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 9 9 ···· 999 ·· ··· 99 99 gradientově vymývání; 25%-60% EtOAc:hexany), což dalo sulfon ve formě bílé pěnovité pevné látky (43 mg, 74%).

’ή NMR (CDC1₃) δ Jednotka A; 7,58-7,17 (m, ArH₅) , 6,82-6,75 (m, 3-H), 5,87 (d, J = 16Hz, 2-H) , 4,98-4,86 (m, 5-H), 3,70 (d, d = 1,1 Hz, 7-H), 2,92-2,89 (m,7-H), 2,61-2,58 (m,4HH'), 1,94-1,89 (m, 6-H), 1,13 (d, d = 7,1 Hz, 6-Me);

Jednotka B; 7,58-7,17 (n, ArH) , 7,04 (d, J = 7,7 Hz, ArH) ,

6,81 (d, J = 8,1 Hz, ArH), 6,54 (d, J = 7,5 Hz, NH) , 4,984,86 (m, 2-H), 3,84 (s, 7-OMe) , 3,17-2,98 (dq, J_AB = 14 a 6,6

Hz, 2-HH'); Jednotka C'; 7,75 (d, J = 7,4 Hz ArH₂) , 7,62 (d

J = 6,8 Hz, ArH₂) , 7,58-7,17 (m, ArH₄) , 5,97 (t, J = 5,5 Hz, NH), 5,00 (s, SO₂Me), 4,98-4,86 (m, 2H, l’-HH'), 4,38-4,33 (m, 3'-HH'), 4,25-4,20 (n, 4'-H), 3,40-3,36 (η, 3-HH'), 1,22 (s, 2- Me) , 1,15 (s, 2-Me) ; Jednotka D; 5,19 (q, J_AB = 5 Hz, 2-H), 1,80-1,61 (m, 2H, 3-H, 4-H), 1,57-1,49 (m, 3-H'), 0,91 (s, 5-H3), 0,89 (s, 4-Me) ppm.

·· · ·· · ·♦ ·· • · ·· · » ·· ··«· ·« 9·· · · · · • · · 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9

9999 999 99 999 99 99

Příklad 13 Kryptofycin 52

Do míchaného roztoku sulfonu z Příkladu 12 (18 mg, 17,98 (imolů) v bezvodém DMF (2,0 ml) byl přidán samotný piperidin (8,9 μΐ, 90 gmolů) při teplotě okolí a pod atmosférou dusíku. Výsledný roztok byl míchán po dobu 5 hodin a potom koncentrován ve vakuu, což dalo surový amin ve formě pěny. Amin byl rozpuštěn v toluen (3 ml) a zahříván na teplotu 60 °C pod atmosférou dusíku po dobu 40 minut. Reakční roztok byl přímo čištěn sloupcovou chromatografií (SiO₂; gradientově vymývání; 20%-75% EtOAc:hexany), což dalo kryptofycin 52 ve formě bílého skla (6,1 mg, 51% ve 2 krocích) .

^XH NMR (CDCI3) δ Jednotka A: 7,45-7,38 (m, ArH₃) , 7,31-7,23

(m,	ArH₂) , 6, 85-6, 76 (m, 3-H),	5,76	(d,	J - 15,6 Hz,	2-H) ,
5,27	- 5,23 (m, 5-H), 2,97 (	dd,	d = 7	, 5 a	1,7 Hz, 7-H),	2,66-
2,44	(m, 4-HH'), 1,86-1,67	(m,	6-H) ,	1,19	(d, J = 6,9	Hz, 6-
Me) ;	Jednotka B: 7,31-7,23	(m,	ArH) ,	7,09	(dd, J = 8,3	a 2,0

Hz, ArH) , 6,88 (d, J = 8,4 Hz, ArH) , 5,50 (d J = 7,8 Hz,

NH), 4,79 (q,	J = 6,4 Hz 2-H), 3,92	(s, OMe:	1 ,	3,73 (d, J =
1,5 Hz, 8-H),	3,17-3,11 (m, 3-HH'); Jednotka	C'	: 3,47 (dd, J
= 13,4 a 8,7 ]	Hz, 3-H), 3,17-3,11 (m,	3'-H),	1,	27 (s, 2-Me),
1,20 (s, 2-Me)	; Jednotka D: 4,87 (dd,	J = 10	a	3,3 Hz, 2-H),

1,86- 1,67 (m, 2H, 3-H, 4-H), 1,40-1,30 (m, 3-H'), 0,88 (app t, J = 6,3 Hz, 6H, 5-H3, 4-Me) ppm.

Poměry přeměny a poměry β/α jsou uvedeny v Tabulce 1 uvedené níže. Epoxidace byly prováděny v CH₃CN/aq. H₂O při teplotě 0 °C a pH 7,8-8,2 použitím 4 ekvivalentů (7) (2 za 4 ekvivalentů přidány v průběhu 4 hodin) a směsi Oxone (10 ekvivalentů) a NaHCO3 (31 ekvivalentů), které byly přidán v průběhu 4 hodin. Pro položku 2 byl veškerý keton (7) byl přidán na začátku.

• «

Tabulka 1

Asymetrická epoxidace kryptofycinových meziproduktů

Č. Substrát

Produkt β/α poměr

Přeměna

Rl=3-Cl-4-methyoxyfenyl

Přiklad 1

5:1 >95 %

Rl=3-Cl-4-methyoxyfenyl

Přiklad 2

9,5:1 %

Rl=3-Cl-4-methyoxyfenyl

Příklad 2

5-7:1 <10 %

Zastupuje:

Dr. Otakar Švorčík

JUDr. Otakar Švorčík advokát

120 00 Praha 2, Hálkova 2

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C2-C12 alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje Ci~C₆ alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C6 alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, Ci-Cé alkyl, C₂-Ce alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂) _m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo C_x-C₆ alkyl;

R¹¹ představuje atom vodíku, C1-C6 alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo C_x-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, 0, NH, SO, S0₂ nebo (C1-C3) alkylamino;

R⁶ představuje Ci-C₆ alkyl, substituovaný (Ci~C₆)alkyl, (C₃-Cb) cykloalkyl, substituovaný (C3-C8) cykloalkyl, heteroaromatickou nebo substituovanou heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC):

(IB) (IC)

R^6a, R^6b a R^6c představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, (Cx-C6) alkyl, OR¹⁸, 0-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, N0₂, OPO₄H₂, (Ci-Cg alkoxy) fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z’;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci~C₆alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (C1-C3) alkyl;

Z představuje - (CH₂)_n- nebo (C3-C5) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2; a

Z¹ představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

• · · · nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

vyznačující se tím, obecného vzorce že zahrnuje epoxidaci sloučeniny ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R^u, R¹⁴ a R⁵⁰ mají význam definovaný výše a Y představuje Y' nebo S; oxidantem a chirálním ketonem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a případné vytvoření její farmaceuticky přijatelné soli.
2. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC(O) (CH₂)_m'NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci~C6 alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0); Y představuje 0; R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA).
3. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedený • · « 9« 9 9· *999 9 9 9 9

9· 999 999«

9 9999 999 99 9

9 9 999 9999

9999 999 99 999 99 99 oxidant je Oxone obecného vzorce a uvedený chirální keton je sloučenina
4. Způsob podle představuje fenyl.
5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.

9 ·

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 99 9 9 9 9 9 9 ·· • 9 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 · «··· ···· «99 99 999 «9 99
6. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce ve kterém

G představuje Ci~Ci₂ alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje Ci-C₆ alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁸³ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, trichlorethyl nebo -CH₂SR⁸¹;

R³⁰' představuje atom vodíku, alkoholovou ochrannou skupinu nebo skupinu obecného vzorce

NHR“

- 100 -

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo

Ci-C₆ alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, C1-C6 alkyl, C₂-C₆ alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

Rⁿ představuje atom vodíku, C1-C6 alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, 0, NR¹², S, SO, atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

S0₂, kde R¹² představuje

R⁶ představuje Ci-Cď alkyl, substituovaný Cg) cykloalkyl, substituovaný heteroaromatickou nebo substituovanou (Ci-C₆) alkyl, (C₃(C₃-C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC):

R^6a, R^6b a R^6c představují (C1-C6) alkyl, atom halogenu R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují n> halogenu, (Ci~ Ce)alkyl, nezávisle na sobě atom vodíku, NR¹⁸R¹⁹ nebo OR¹⁸;

závisle na sobě atom vodíku, atom OR¹⁸, O-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, NO2,

- 101 • 4 4 4 4 4 «

4 444 4 44 · • 4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4

4 44 444 44 44

OPO₄H₂, (Ci-Cg alkoxy)fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z ' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-C₆alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (C₃-C₃) alkyl;

Z představuje —(CH₂)_n— nebo (C3-C5) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2; a

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

R⁸¹ představuje Ci-Cg alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl; a

R⁸² představuje bázicky labilní ochrannou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

s dodatečnou podmínkou, že pokud R⁸³ představuje -CH₂SR⁸¹, R³⁰není atom vodíku nebo alkoholová ochranná skupina;

- 102 vyznačuj ící se tím, že obecného vzorce zahrnuje epoxidaci sloučeniny ve kterém G, R³,

R¹⁴,

30'

O O _z

R mají vyznám definovaný výše; oxidantem a chirálnim ketonem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (II); a případné vytvoření její farmaceuticky přijatelné soli.
7. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH2OC(O) (CH₂)m'NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R^{8 9}představuje Οχ-Οβ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0); Y představuje O; R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA), R³⁰' představuje atom vodíku.
8. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce

- 103 ·· 9 99 9 • · ·· 9 9 99 • 9 9 9 9
9 9 9 9 9 9 • · 9 9 · ···· ··· ·· ··«

9. Způsob podle nároku 7, vyznačující se tím, že G představuje fenyl a R⁸³ představuje trichlorethyl.
10. Způsob podle nároku 6, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (II) je reprezentována obecným vzorcem

Ί ?^H3 M ÓH ^NHv'Y% _XCI j (1 I (Χ'Ο Ύ· -ch₃ Yci₃ • 11. Způsob podle zahrnuje vytvoření nároku 6, sloučeniny vyznačující se obecného vzorce tím, že dále (I) ·
12. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 6, vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky:

9 ·

- 104 ·· • · • · • · * • ·· ··· (a) přivedení sloučeniny obecného vzorce (11), kde R³⁰’ představuje atom vodíku a R⁸³ představuje kationt, do kontaktu s činidlem vytvářejícím thioester pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (IXc) ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R¹⁴ mají význam definovaný výše a R⁸¹ představuje Ci-Ce alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

(b) kopulace sloučeniny obecného vzorce (líc) se sloučeninou obecného vzorce (10a) kde R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹ a R⁵⁰ mají význam definovaný výše a R⁸²představuje bázicky labilní ochrannou skupinu, pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce

- 105 - ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴, R⁵⁰, R⁸¹, R⁸² a Y mají význam definovaný výše;

(c) oxidace sloučeniny obecného vzorce (8) činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce oxidačním ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R^u, R⁸² a Y mají význam definovaný výše a q je celé nebo 2;

R¹⁴, R⁵⁰, R⁸¹ a číslo rovné 1 (d) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (9) vhodným

- 106 -

99 99 • 9 9 9

9 9 9 9

9 9 9 9

9 9 9 9 deprotekčním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce ve kterém G, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R^{13 14}, R⁵⁰, Y, q a

R⁸¹ mají význam definovaný výše; a popřípadě kontakt sloučeniny obecného vzorce (10) s cyklizačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a (e) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).
13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC(O) (CH₂)_m-NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-
14; R⁹představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje O; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené deprotekční činidlo je piperidin; uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone

- 107 ·· ·· • · · · • · · · a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7) a pH epoxidačního kroku je udržováno v rozmezí od přibližně 7,0 do přibližně 11,5.

* 14. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.
15. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 6, vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky:

(a) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (II), kde R³⁰' představuje alkoholovou ochrannou skupinu, vhodným alkoxylovým deprotekčním činidlem a další karboxy deprotekce sloučeniny obecného vzorce (II), pokud R⁸³ představuje Ci~C₆alkyl, vhodnou bází pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R¹⁴ mají význam definovaný výše a M⁺ představuje kationt;

(b) přivedení sloučeniny obecného vzorce (lib) do kontaktu s činidlem vytvářejícím thioester pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce

- 108 * «· ·· · · « • · · ·« * · * • · · • · · · ·«* ·· «·· • · · · »· ·· (XIc) ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R¹⁴ mají význam definovaný výše a R⁸¹ představuje Ci-C₆ alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

(c) kopulace sloučeniny obecného vzorce (líc) se sloučeninou obecného vzorce (10a) kde R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹ a R⁵⁰ mají význam definovaný výše a R⁸²představuje bázicky labilní ochrannou skupinu, pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce

- 109 4 »4 · 4

4 4 4 4 4 4

4 4 4 4 4 »444 444 44 444 (8) ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R^u, R¹⁴, R⁵⁰ R⁸¹,

R⁸² a Y mají význam definovaný výše;

(d) oxidace sloučeniny obecného vzorce (8) oxidačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce <9) ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴, R⁵⁰, R⁸¹ a R⁸² a Y mají význam definovaný výše a q je celé číslo rovné 1 nebo 2;

(e) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (9) vhodným deprotekčním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného • 9

9 999 9 999 9 99 9 ve kterém G, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴, R⁵⁰, Y, q a R⁸¹ mají význam definovaný výše; a popřípadě kontakt sloučeniny obecného vzorce (10) s cyklizačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a (f) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).
16. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC (O) (CH₂)m'NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje O; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené deprotekční činidlo je piperidin; uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7).

i ·

- 111 » to· » · • · » · • · • f* *·
17. Způsob podle nároku 15, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.
18. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 6 vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky:

(a) oxidace sloučeniny obecného vzorce (II) kde R³⁰' je sloučenina obecného vzorce a R⁸³ představuje -CH₂SR⁸¹, oxidačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, Rⁿ, R¹⁴, R⁵⁰, R⁸¹ a »0 ·

- 112 ·* ♦ · · «

9 1 · í • * · ·

4 * · · ** ··

R⁸² a Y mají význam definovaný výše a q je celé číslo rovné 1 nebo 2;

(b) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (9) vhodným deprotekčním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (10) ve kterém G, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, Rⁿ, R¹⁴, R⁵⁰, Y, q a

R⁸¹ mají význam definovaný výše; a popřípadě kontakt sloučeniny obecného vzorce (10) s cyklizačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a (c) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).
19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC(O) (CH₂)_m- NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R^su je

- 113 9h 9 9 9 9 9 9 9 9

9999 9 9 99 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 * 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 6

999 9 99 9 9 9 9·· 9 « *· (=0) ; Y představuje 0; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené deprotekčni činidlo je piperidin; uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7).
20. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.
21. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 6, vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky (a) kopulace sloučeniny obecného vzorce (II), kde R³⁰' představuje atom vodíku a R⁸³ představuje trichlorethyl, se sloučeninou obecného vzorce (10a) ve kterém R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹ a R⁵⁰ mají význam definovaný výše a R⁸² představuje bázicky labilní ochrannou skupinu, pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce

114 - (18) • · * c < φ φ r

Φ · · Φ φ Φ φ Φ φ φ a · * * · · ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴, R⁵⁰, R⁸² a Y mají význam definovaný výše;

(b) zpracování sloučeniny obecného vzorce (18) vhodným bázickým deprotekčním činidlem pro získání sloučeniny obecného vzorce mají význam definovaný výše;

(c) cyklizace sloučeniny obecného vzorce (19) s vhodným činidlem pro uzavírání kruhu pro získání sloučeniny obecného

9 · • «

- 115 vzorce (I) ; a (d) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).
22. Způsob podle nároku 21, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC(O) (CH₂)_m'NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje 0; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7).
23. Způsob podle nároku 21, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.
24. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 6, vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky (a) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (II) kde R³⁰' je sloučenina obecného vzorce

- 116 a R⁸³ představuje deprotekčním činidlem vzorce trichlorethyl, pro vytvoření vhodným sloučeniny bázickým obecného (19) ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶ a R¹⁴ mají význam definovaný výše;

(b) cyklizace sloučeniny obecného vzorce (19) s vhodným činidlem pro uzavírání kruhu pro získání sloučeniny obecného vzorce (I) ; a (c) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).

- 117 • · · 4 4 4 » « · · · * 44 F « · 4 4 4 4 « • 4 4 4 · 4 4 · *

4 4 4 · 4 4 «

4 · 4 4 4» ι 4 4 4
25. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH2OC(O) (CH₂)_m-NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje 0; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7) .
26. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.
27. Sloučenina obecného vzorce ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

- 118 R³ představuje C1-C6 alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku;

nebo R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C14;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl;

R⁶ představuje Ci-C₆ alkyl, substituovaný (Ci-C₆)alkyl, (C₃C₈) cykloalkyl, substituovaný (C₃-C₈)cykloalkyl, heteroaromatickou nebo substituovanou heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (IA), (IB) nebo (IC):

(IA) (IB) (IC) _R6a, _R6b _{a r}6c př_ec}_stavují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, (C3- Cg) alkyl, OR¹⁸, O-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, N0₂,

OPO₄H₂, (Ci-C₆ alkoxy)fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z ' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-Ce alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (C1-C3) alkyl;

Z představuje -(CH₂)_n- nebo (C₃-C₅) cykloalkyl;

n je rovno 0,1 nebo 2; a

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.
28. Sloučenina podle nároku 27, kde G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC(O) (CH₂)_m,NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R¹⁴ představuje atom vodíku; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA).
29. Sloučenina podle nároku 27, kde uvedená sloučenina je reprezentována obecným vzorcem
30. Sloučenina obecného vzorce

- 121 • ♦ · · 4 ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C₂-C_i2 alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje C1-C6 alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C6 alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, C₂-C₆ alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl;

R¹¹ představuje atom vodíku, Ci-Cg alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo Ci-Cď alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, 0, NH, S, SO, S0₂ nebo (C1-C3)alkylamino;

R⁶ představuje Ci-C₆ alkyl, substituovaný (Ci-Cg) alkyl, (C₃C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou substituovaný nebo substituovanou (C3-C8) cykloalkyl, heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC)

- 122 • 4 • 94

9 4 •999 499

99 44

9 9 9 · • 9 9 4

9 9 9 4

9 9 4 9

9 4 9« (IB) (IC)

R^6a, R^6b a R^6c představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, (Ci-C6) alkyl, OR¹⁸, 0-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, N0₂, OPO₄H₂, (Ci-C₆ alkoxy) fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-C₆alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (Ci~C₃) alkyl;

Z představuje - (CH₂)_n- nebo (C₃-C₅) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2;

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu; a

R⁸² představuje bázicky labilní ochrannou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli.
31. Sloučenina podle nároku 30, kde G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou

-CH₂OC(O) (CH₂)_m-NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹ představuje Ci-C₆alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R^u představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje O; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce

- 123 • 9 · 9

999

9 9 « 9

9 9

9 9 • 9

9 · • t

9 9 • · 99 (ΙΑ) .
32. Sloučenina podle nároku 30, kde uvedená sloučenina je reprezentována obecným vzorcem
33. Sloučenina obecného vzorce (19)

- 124 O · <» 9 99 «9

9 999 9 999 9 99 9

9 9 99 9 999· • 999 9 999 99 ·

9 9 999 9999

9999 999 99 999 9· 99 ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C2-C12 alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje Ci-C₆ alkyl;

R⁴ a R⁵ představují každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, C1-C6 alkyl, C₂-Cg alkenyl, C₂-Cg alkinyl, - (CH₂)_m- (C3-C5) cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

<¹⁰ ill

R^xu představuje atom vodíku nebo Ci-C₆ alkyl;

R představuje atom vodíku, C1-C6 alkyl, fenyl nebo benzyl;

R představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, O, NH, S, SO, S0₂ nebo (C1-C3)alkylamino;

R⁶ představuje Ci-Cď alkyl, substituovaný (Ci~C₆) alkyl, (C₃-Cg) cykloalkyl, substituovaný (C₃-C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou nebo substituovanou heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC):

- 125 • · 9 9 9 9 9 9 9 9 • * 9 9 9 9 99 · 99 9

99 999 9999

9 9999 999 999

9 9 999 9999

9999 999 99 999 99 99

R^6a, R^6b a R^6c představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, (Ci— C6) alkyl, OR¹⁸, O-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, N0₂,

OPO₄H₂, (Ci-C₆ alkoxy)fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z ' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Οχ-Οβ alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (C1-C3) alkyl;

Z představuje -(CH₂)_n- nebo (C3-C5) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2; a

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli.

Λ u
34. Sloučenina podle nároku 33, kde G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou

-CH₂OC(O) (CH₂)_m<NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹ představuje C₂-C₆alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R^u představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje 0; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce

- 126 «« » .« · ·· ·· • · ·· 4 4 44 4 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 4 4 • · · · 4 444 *4 4 • · · · · · · · · ···« ··· ·♦ ··· ·· ·♦ (ΙΑ) .
35. Sloučenina podle nároku 33, kde uvedená sloučenina je reprezentována obecným vzorcem
36. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce ve kterém

G představuje C1-C12 alkyl, C₂-Ci₂ alkenyl, C₂-Ci₂ alkinyl nebo Ar;

- 127 ·· · ·· ·· * * ·· »»♦· «·♦· • · ··· · · · · • ···· «♦···· _a a · · · · · · · aaaa aaa ·· ··· ·· ··

Ar představuje aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu nebo substituovanou aromatickou nebo heteroaromatickou skupinu;

R³ představuje Ci-Cg alkyl;

R⁴ a R⁵ představuji každý atom vodíku; nebo

R⁴ a R⁵ společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14;

R⁷ a R⁸ představují každý nezávisle na sobě atom vodíku nebo C1-C6 alkyl; nebo

R⁷ a R⁸ společně vytvářejí cyklopropylový nebo cyklobutylový kruh;

R⁹ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, C₂-C₆ alkenyl, C₂-C₆alkinyl, - (CH₂)m-(C3-C5)cykloalkyl nebo benzyl, kde m je celé číslo v rozmezí od jedné do tří;

R¹⁰ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R¹¹ představuje atom vodíku, Ci-C₆ alkyl, fenyl nebo benzyl;

R¹⁴ představuje atom vodíku nebo C1-C6 alkyl;

R⁵⁰ představuje atom vodíku nebo (=0) ;

Y představuje CH, O, NR¹², S, SO, S0₂, kde R¹² představuje atom vodíku nebo C1-C3 alkyl;

R⁶ představuje Ci-Cň alkyl, substituovaný (Ci~C₆) alkyl, (C₃—C₈) cykloalkyl, substituovaný (C₃-C₈) cykloalkyl, heteroaromatickou nebo substituovanou heteroaromatickou skupinu nebo skupinu obecného vzorce (ΙΑ), (IB) nebo (IC):

'R6c (IA) (IB) (IC)

- 128 4444 • · 4 4 4 4 4 4 • · 4 4 4 4 4

44 444 44 44

R^6a, R^6b a R^6c představují nezávisle na sobě atom vodíku, (Ci-C₆) alkyl, atom halogenu, NR¹⁸R¹⁹ nebo OR¹⁸;

R¹⁵, R¹⁶ a R¹⁷ představují nezávisle na sobě atom vodíku, atom halogenu, (Οχ-Οβ) alkyl, OR¹⁸, O-aryl, NH2, NR¹⁸R¹⁹, N02,

OPO₄H₂, (Cx-C₆ alkoxy) fenyl, S-benzyl, CONH₂, CO₂H, PO₃H₂, SO₂R²³ nebo Z ' ;

R¹⁸ a R¹⁹ představují nezávisle na sobě atom vodíku nebo Ci-C₆alkyl;

R²³ představuje atom vodíku nebo (0χ-0₃) alkyl;

R⁸¹ představuje Οχ-Οβ alkyl, C₃-C₈ cykloalkyl, fenyl nebo benzyl;

R⁸² představuje bázicky labilní ochrannou skupinu;

Z představuje -(CH₂)_n- nebo (C₃-C₅) cykloalkyl;

n se rovná 0, 1 nebo 2;

q je celé číslo rovné 1 nebo 2; a

Z' představuje aromatickou nebo substituovanou aromatickou skupinu;

nebo její farmaceuticky přijatelné soli;

vyznačující se tím, že zahrnuje oxidaci sloučeniny obecného vzorce

- 129 - ve kterém G, R³, R⁴, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R¹¹, R¹⁴, R⁵⁰, R⁸¹, R⁸² a Y mají význam definovaný výše, oxidačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (9) a popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (9).
37. Způsob podle nároku 36, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH₂OC (0) (CH2)_m'NH₂; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci~C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R^upředstavuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0); Y představuje 0; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA) a oxidační činidlo je Oxone.
38. Způsob přípravy sloučeniny obecného vzorce (I) podle nároku 36, vyznačující se tím, že dále zahrnuje následující kroky:

(a) deprotekce sloučeniny obecného vzorce (9) vhodným deprotekčním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného

- 130 » · · I ·· ·· ve kterém G, R³, R⁵, R⁶, R⁷, R⁸, R⁹, R¹⁰, R^u, R¹⁴, R⁵⁰, Y, q a R⁸¹ mají význam definovaný výše; a popřípadě kontakt sloučeniny obecného vzorce (10) s cyklizačním činidlem pro vytvoření sloučeniny obecného vzorce (I); a (b) popřípadě vytvoření farmaceuticky přijatelné soli sloučeniny obecného vzorce (I).
39. Způsob podle nároku 38, vyznačující se tím, že G představuje fenyl, para-fluorfenyl nebo fenyl substituovaný skupinou -CH2OC (0) (CH₂) m'NH2; R³ představuje methyl; R⁴ a R⁵společně vytvářejí druhou vazbu mezi C-13 a C-14; R⁹představuje Ci-C₆ alkyl; R¹⁰ představuje atom vodíku; R¹¹představuje atom vodíku; R¹⁴ představuje atom vodíku; R⁵⁰ je (=0) ; Y představuje O; a R⁶ představuje skupinu obecného vzorce (IA); uvedené deprotekční činidlo je piperidin; uvedené oxidační činidlo je Oxone; uvedený oxidant je Oxone a uvedený chirální keton je sloučenina obecného vzorce (7).

- 131 - • · • · · · ···· ··· ·· ·· ··
40. Způsob podle nároku 38, vyznačující se tím, že uvedená sloučenina obecného vzorce (I) je Kryptofycin 52.