CZ206698A3 - Amidinové inhibitory proteas - Google Patents

Amidinové inhibitory proteas Download PDF

Info

Publication number
CZ206698A3
CZ206698A3 CZ982066A CZ206698A CZ206698A3 CZ 206698 A3 CZ206698 A3 CZ 206698A3 CZ 982066 A CZ982066 A CZ 982066A CZ 206698 A CZ206698 A CZ 206698A CZ 206698 A3 CZ206698 A3 CZ 206698A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
alkyl
hydrogen
carboxyalkyl
hydroxyalkyl
cycloalkyl
Prior art date
Application number
CZ982066A
Other languages
English (en)
Inventor
Tianbao Lu
Bruce E. Tomczuk
Carl Illig
Richard M. Soll
Original Assignee
3- Dimensional Pharmaceuticals, Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 3- Dimensional Pharmaceuticals, Inc. filed Critical 3- Dimensional Pharmaceuticals, Inc.
Publication of CZ206698A3 publication Critical patent/CZ206698A3/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/195—Radicals derived from nitrogen analogues of carboxylic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/18—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for pancreatic disorders, e.g. pancreatic enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C257/00—Compounds containing carboxyl groups, the doubly-bound oxygen atom of a carboxyl group being replaced by a doubly-bound nitrogen atom, this nitrogen atom not being further bound to an oxygen atom, e.g. imino-ethers, amidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/63—Esters of sulfonic acids
    • C07C309/72—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/73—Esters of sulfonic acids having sulfur atoms of esterified sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C311/00—Amides of sulfonic acids, i.e. compounds having singly-bound oxygen atoms of sulfo groups replaced by nitrogen atoms, not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C311/15—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
    • C07C311/21—Sulfonamides having sulfur atoms of sulfonamide groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings having the nitrogen atom of at least one of the sulfonamide groups bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/20—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D211/22—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by singly bound oxygen or sulphur atoms by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/04—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/06—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D211/08—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms
    • C07D211/18—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D211/26—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms with hydrocarbon radicals, substituted by nitrogen atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Detergent Compositions (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)

Description

Amidinové inhibitory proteáz
Oblast techniky
Tento vynález se týká nových sloučenin, jež působí jako inhibitory enzymů, a zvláště se týká nové třídy nepeptidických inhibitorů proteolytických enzymů.
Dosavadní stav techniky
Proteázy jsou enzymy, které štěpí proteiny v jediné specifické peptidické vazbě. Lze je rozdělit do čtyř druhových tříd: serinové, thiolové (cysteinyl), s karboxylovou skupinou (aspartyl) a metaloproteázy (Cuypers a další, J.Biol.Chem., s. sv. 257, s. 7086, 1982). Protázy jsou důležité pro mnoho biologických aktivit jako je trávení, tvorba nebo rozpouštění krevních sraženin, rozmnožování a imunitní reakce vůči cizím buňkám a organismům. Aberující proteolýza souvisí s mnoha chorobnými stavy lidí a jiných savců. Lidským neutrofilním proteázám elastáze a katepsinu G byla prokázána účast na chorobných stavech provázených destrukcí tkání. Tyto chorobné stavy zahrnují emfyzem, revmatickou artritidu, korneální (rohovkové) vředy a glomerulární záněty ledvin (Barret, Enzyme Inhibitors as Drugs, University Park Press,
Baltimore, 1980). Další proteázy jako plasmin, C-l esteráza, C-3 konvertáza, urokináza, plasminogenní aktivátor, akrosin a kalikreiny hraji klíčovou roli v normálních biologických funkcích savců. V mnoha případech je výhodné v průběhu terapeutického léčení savců přerušit působení jednoho nebo více proteolytických enzymů.
Proteázy skupiny šeřinu zahrnují takové enzymy jako je elastáza (lidské leukocyty), katepsin G, plasmin, C-l esteráza, C-3 konvertáza, urokináza, plasminogenní aktivátor, akrosin, chymotripsin, trypsin, trombin, faktor • ·
Xa a kalikreiny.
Elastáza lidských leukocytů je uvolňována polymorfonukleárními leukocyty v místech zánětů a tím přispívá ke vzniku mnoha chorobných stavů. Katepsin G je další lidská neutrofilní protáza serinové skupiny. Od sloučenin schopných inhibovat aktivitu těchto enzymů se očekává, že mají protizánětlivý účinek použitelný při léčbě dny, revmatické artritidy a jiných zánětlivých chorob a při léčbě emfyzemu. Chymotripsin a trypsin jsou trávicí enzymy. Inhibitory těchto enzymů jsou použitelné při léčbě pankreatitidy. Inhibitory urokinázy a aktivátoru plasminogenu jsou užitečné při léčbě chorobných stavů vyznačujících se bujením buněk, jako je benigní hypertrofie prostaty, karcinom prostaty a psoriáza.
Serinová proteáza trombin hraje ústřední roli v hemostazi a trombóze a jako mnohostranná bílkovina vyvolává množství účinků na krevní destičky, endotelové buňky, buňky hladkého svalstva, leukocyty, srdce a neurony (Taparelli a další, Trends in Pharmaceutical Science, sv. 14, s. 366-376, 1993; Lefkowitz a Topol, Circulation, sv. 90 (3), s. 15221536, 1994; Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis, sv. 5. (Dopl. 1), s. 47-58, 1994). Aktivace koagulační kaskády buď vnitřní cestou (kontaktní aktivace), nebo vnější cestou (aktivace expozicí neendotelového povrchu plasmatu, poškození cévních stěn nebo uvolnění některého tkáňového faktoru) vede k řadě biochemických událostí jež vyústí akcí trombinu. Trombin štěpí fibrinogen, což nakonec vede ke vzniku hemostatické zátky (tvorba sraženiny), účinně aktivuje krevní destičky specifickým proteolytickým štěpením receptoru trombinu na povrchu buněk (Coughlin, Seminars in hematology, sv. 31 (4), s. 270-277, 1994) a mechanismem zpětné vazby zmnohonásobuje svou vlastní produkci. Proto
• · mají inhibitory působení trombinu terapeutický potenciál ve velkém množství kardiovaskulárních a nekardiovaskulárních onemocnění včetně infarktu myokardu, nestabilní angíny, mrtvice, restenózy, hluboké žilní trombózy, diseminované intravaskulární koagulace traumatického původu, sepse nebo metastázujícího nádoru, hemodialýzy, chirurgického kardiopulmonárního použiti bypassu, syndromu respirační úzkosti dospělých, endotoxického šoku, reumatické artritidy, vředovité kolitidy, zatvrdnutí tkáně (indurace), metastázy, nadměrné krevní srážlivosti při chemoterapii, Alzheimerovy choroby, Downova syndromu.
Faktor Xa je další serinová proteáza na koagulační cestě. Faktor Xa se spojuje s faktorem Va a vápníkem na fosfolipidové membráně za vzniku protrombinázového komplexu. Tento protrombinázový komplex potom mění protrombin na trombin (Claeson, Blood Coagulation and Fibrinolysis, sv. 5, s. 411-436, 1994, Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis, sv 5, (Dopl.l), s. 47-58, 1994). Inhibitorům faktoru Xa.je zřejmě třeba dát přednost před činidly, jež přímo inhibují trombin, protože přímé inhibitory trombinu stále ještě umožňují značnou tvorbu nového trombinu (Lefkovits a Topol, Ciculation, sv 90 (3), s. 1522-1536, 1994; Harker, Blood Coagulation and Fibrinolysis, sv. 5 (Dopl. 1), s. 47-58, 1994).
Trvá potřeba nepeptidických sloučenin, které by byly účinnými a selektivními inhibitory proteázy, měly lepší biologickou dostupnost a méně vedlejších účinků než běžně dosažitelné inhibitory proteázy. Z toho důvodu jsou nové třídy účinných inhibitorů proteázy s vysokou ihibiční účinností a nízkou toxicitou pro savce potenciálně cennými terapeutickými činidly v řadě případů včetně léčení četných proteolytických chorobných stavů u savců.
i
Podstata vynálezu
Tento vynález je zaměřen na nové sloučeniny vzorce I až III (níže). Rovněž zahrnuje způsoby přípravy sloučenin I až III. Nové sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou účinné inhibitory proteáz, zvláště serinových proteáz trypsinového typu jako je chymotrypsin, trypsin, trombin, plazmin a faktor Xa. Některé z těchto sloučenin vykazují cestou přímé inhibice trombinu antitrombotickou aktivitu, nebo jsou meziprodukty použitelnými při tvorbě sloučenin s antitrombotickou aktivitou. Ostatní sloučeniny jsou inhibitory trypsinu a/nebo chymotrypsinu a proto jsou účinné při léčbě pankreatitidy. Patří sem i způsoby inhibice léčby aberantní proteolýzy savců a způsoby léčby trombózy, ischemie, mrtvice, restenózy nebo zánětu savců podáním účinného množství sloučeniny vzorce I až III. Rovněž je zaměřen na farmaceutické kompozice zahrnující sloučeninu vzorce I až III a jeden nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů nebo ředidel.
Podrobný popis výhodných provedení Sloučeniny podle tohoto vynálezu zahrnují sloučeniny vzorce I až III
•··· · · • ·
nebo jejich solváty, hydráty nebo farmaceuticky přijatelné soli, kde:
Z je jedna ze skupin -NR10SO2 -, -SO2NR10-, -NR10C(RyR2)-,C (RyRz) NR10-, -OSO2-,—S020-,—OC (RyRz)-, -C (RyRz) O-,-NR10CO- nebo — CONR10-;
Ry a Rz může být nezávisle na sobě vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, hydroalkyl, karboxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl, dialkylaminoalkyl nebo karboxyl;
R1 může být alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl nebo heteroaryl, z nichž kterýkoliv může být podle potřeby substituován;
R2, R3 a R4 jsou nezávisle na sobě jeden ze skupiny: vodík, alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyanová skupina, nitroskupina, karboxamid, -CO2RX , -CH2ORX nebo -0Rx, nebo v případě substituce sousedních uhlíkových atomů mohou být R2 a R3 spojeny buď na -CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 je definováno výše;
Rx je v každém případě jedna ze skupin: vodík, alkyl • 9
9999 9
99 99 ·· • 99 · · ·· * • 9 9 9 9 9 9 9 • 9 9 9 9 9··· 9 • 9 9 9 9 9 9
99 99 99 nebo cykloalkyl, kde uvedený alkyl nebo cykloalkyl mohou volitelně obsahovat jednu nebo více nenasycených vazeb;
Y je jedna ze skupin -0-, -NR10-, -S-, -CHR10 - nebo kovalentní vazba;
W je N nebo CR10;
R5 je jedna ze skupin: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl nebo karboxyalkyl;
R6 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, ara^xyskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, kyanoskupina nebo -C02Rw, kde Rw je alkyl nebo cykloalkyl;
R7 a R® jsou oba nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl nebo karboxyalkyl, nebo jsou R7 a R® spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s výhradou, že když W je N, y nemůže být nula nebo 1;
R9 je jeden ze substituentů: vodík, alkyl, cykloalkyl nebo aryl, kde uvedený alkyl, cykloalkyl nebo aryl může být volitelně substituován amino-, monoalkylamino-, dialkylamino-, alkoxy-, hydroxy-, karboxy-, alkoxykarbonyl-, aryloxykarbonyl-, aralkoxykarbonyl-, aryl-, heteroaryl-, acylamino-, kyanovou nebo trifluoromethylskupinou;
R10 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylamino (C2-io) alkyl, dialkylamino (C2_i0) alkyl nebo karboxyalkyl;
R1 je jeden ze skupiny substituentů: vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyan, nitro-, karboxamid, karboxyl, alkoxykarbonyl nebo alkoxyalkyl;
n je 0 až 8 s tou výhradou, že když W je N a Y je jiný než -CHR10-, potom je n 2 až 8; a m je 1 až 4 za předpokladu, že když W je N, potom m • · ·· »· ·· ·· »♦ · · * · * * · · ♦ • · · · · ·· · · ·· • ··«··« ·· ·· ···· · • · · · · ♦ ··· ·· ft · ·· ·· · * ·· není 1.
Doporučená skupina sloučenin patřících do rozsahu tohoto vynálezu zahrnuje sloučeniny vzorce I až III, kde:
Z je jedna ze skupin -S020-, -SO2NR10-, -C(RyRz)O- nebo -OC(RyRz)-, kde Ry je stejně jako Rz vodík;
R1 je jeden ze skupiny substituentů: C6-io aryl, pyridinyl, chinizolinyl, chinolinyl nebo tetrahydrochinolinyl, z nichž kterýkoliv může být volitelně substituován jednou nebo dvěma skupinami: hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, Cl-g alkyl, Cx-g alkoxy, Ci_6 aminoalkyl, Ci_6 aminoalkoxy, amino, mono (Ci_4) alkylamino, di (Ci_4) alkylamino, C2_6 alkoxykarbonylamino, C2_e alkoxykarbonyl, karboxy, Ci_g hydroxyalkyl, C2_6 hydroxy alkoxy, C2-io mono (karboxyalkyl) amino, di(C2_i0 karboxyalkyl) amino, C6-i4 ar (Ci_6) alkoxykarbonyl, C2_6 alkynylkarbonyl, Ci_6 alkylsulfonyl, C2.6 alkenylsulfonyl, C2_6 alkynylsulfonyl, Ci_6 alkylsulf inyl, Ci-6 alkylsulfonamido, amidino, guanidino, Ci-6 alkyliminoamino, formyliminoamino, C2_6 karboxyalkoxy, C2.6 karboxyalkyl, C2_6karboxyalkylamino, kyan, trifluormethoxy a perfluorethoxy;
R2, R3 a R4 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-6 alkyl, C3_8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci-8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, Ci-4 alkoxykarbonyl, Ci-4 alkoxymethyl, nebo Ci_4 alkoxy; nebo alternativně lze R2 a R3 , pokud jsou na sousedních uhlíkových atomech, spojit za vzniku buď CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 již bylo definováno výše;
Y může být -0-, -S-, -NR10-, nebo kovalentní vazba;
W je N nebo CR10;
R5 je jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, C2_io karboxyalkyl, nebo C2_i0 hydroxyalkyl;
• « ···· ·· ·· ·· ·* • · · · · ·· · • · 99 · · ··
9 · · · · ···· * • · · » · ··· • 99 99 99 99
R6 je ve všech případech jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-4 alkyl, hydroxy, Ci_4 alkoxy, fenoxy, Cx_4 alkyloxykarbonyl nebo kyan;
R7 a R8 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-6 alkyl, C2-io karboxyalkyl, C2-io hydroxyalkyl, nebo R7 a R® jsou spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2, pokud však W je N, y nemůže být 0 nebo 1;
R9 je vodík nebo Cx-10 alkyl, volitelně substituovaný skupinami: amino, mono(Ci_4 ) al kýlami no, Ci_6 alkoxy, hydroxy, karboxy, fenyl, alkyloxykarbonyl, aralkoxykarbonyl, Ci-6 acylamino, kyan nebo trifluormethyl;
R10 je ve všech případech nezávisle vodík, Ci_6 alkyl, benzyl, fenyl, C2-10 hydroxyalkyl, C2-i0 aminoalkyl, Ci_4 monoalkylamino (C2_8) alkyl, Cx-4 dialkylamino (C2_8) alkyl nebo C2_io karboxyalkyl;
R1 je jeden substituent ze skupiny: vodík, Cx_6 alkyl, C3_8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trif luormethyl, halogen, hydroxy (Ci_8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, alkoxykarbonyl, alkoxymethyl nebo alkoxy;
n je 0 až 8, s výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 8, a m je 1 až 4, s tím, že když W je N, potom m není 1.
Zvláště výhodná skupina sloučenin zahrnuje sloučeniny vzorce I až III, kde:
Z může být -SO2O-, -SO2NR10-, -CH2O- nebo -OCH2-;
R1 může být fenyl nebo naftyl, volitelně substituovaný jedním nebo dvěma chlory nebo dimethylaminovými skupinami;
R2 a R3 mohou být vodík nebo lze spojit R2 a R3 za vzniku -CH=CH-CH=CH-;
R4 může být vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl;
Y je buď O nebo NR10;
W je N nebo CR10;
·· ...·· ’Λΰ.
:
• · · « · · · · · • · ··· · · • · · ·· ··
R5 může být vodík, C^g alkyl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2_10 karboxyalkyl;
R6 je ve všech případech vodík nebo hydroxyskupina;
R7 a R8 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-6 alkyl, C2_i0 hydroxyalkyl nebo C2_i0 karboxyalkyl, nebo se R7 a R8 spojí za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s tou výhradou, že když W je N, y nemůže být 0 nebo 1/
R9 je vodík nebo Ci_4 alkyl;
R10 je ve všech případech nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, C2.4 hydroxyalkyl, C2_4 karboxyalkyl, C2_4 aminoalkyl, dimethylamino (C2_8) alkyl, methylamino (C2_8) alkyl;
R1 je vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl; n je 0 až 4, s tou výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 4, a m je 1, 2 nebo 3.
Použitelné sloučeniny v rozsahu, který pokrývá vzorec I, zahrnují sloučeniny s jedním ze vzorců IV až VI:
Y
NR6 b
• ··· · • · · ·
nebo jejich solváty, hydráty, nebo farmaceuticky přijatelné soli;
kde:
Z, R1, R2, R3, R4, Y, R6 , R9 a R10 jsou definovány stejně jako pro vzorce I až III;
R18 může být vodík, alkyl, aralkyl, aryl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2-io karboxyalkyl;
a je 1 až 8 s výhradou, že když Y je jiný než -CHR10-, potom a je 2 až 8;
b je 1 až 8; a c je 1 až 13, s výhradou, že když Y je jiné než -CHR10-, potom c je 2 až 13.
Doporučené sloučeniny spadající do rozsahu vzorce II zahrnují sloučeniny se vzorcem VII až IX:
• · ·· c
• · ···· ·
nebo jejich solváty, hydráty nebo farmaceuticky přijatelné soli.
kde:
Z, R1, R2, R3, R4, Y, R6 , R9 a R10 jsou definovány stejně jako pro vzorce I až III;
R18 může být vodik, alkyl, aralkyl, aryl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2-io karboxyalkyl;
a je 1 až 8 s výhradou, že když Y je jiný než -CHR10-, potom a je 2 až 8;
b je 1 až 8; a c je 1 až 13, s výhradou, že když Y je jiné než -CHR10-, potom c je 2 až 13.
Doporučené sloučeniny spadající do rozsahu vzorce III zahrnuji sloučeniny se vzorcem X až XI:
• · · · · · « • · · · · · · Λ • · · · ··· · 1 • · » · · <
► ·· ·· ··
nebo jejich solváty, hydráty nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, kde
Z, R1, R2, R3, R4, Y, R6 , R9 a R10 odpovídají výše uvedeným definicím pro vzorce I až III;
R18 je buď alkyl, aralkyl, aryl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2-io karboxyalkyl;
d je 1 až 8; a e je 1 až 8.
Funkční skupina -Z-R1 vzorce I až XI je připojena na benzenové jádro v poloze orto-, meta-, nebo para- k Y.
Amidinová funkční skupina (-C (=NR6) NR6R6) vzorce III, X a XI může být připojena v orto-, meta- nebo para-poloze.
Preferované sloučeniny tohoto vynálezu jsou ty sloučeniny podle vzorce I až XI, kde Y je buď dvojmocný kyslík (-0-) nebo -NR10- a Z může být -SO2NR10-, -S020-, nebo -ch2o-.
Výhodné sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou sloučeniny vzorce I až XI, kde R1 může být Ci_i2 alkyl, C4-7 cykloalkyl, C2-8 alkenyl, C2_8 alkynyl nebo C6-n aryl, lépe C6-io aryl, z nichž kterýkoliv může být podle přání substituován. Substituenty, které mohou být podle přání na funkčních skupinách R1 zahrnují buď jeden nebo více, raději však jeden nebo dva: hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, alkoxy, aminoalkoxy, aminoalkyl, hydroxyalkyl, ·· hydroxyalkoxy, kyan, amino, monoalkylamino, dialkylamino, karboxy, karboxyalkyl, karboxyalkoxy, mono(hydroxyalkyl)amino, di(hydroxyalkyl)amino, mono(karboxyalkyl)amino, di(karboxyalkyl)amino, alkoxykarbonylamino, alkoxykarbonyl, aralkoxykarbonyl, alkenylkarbonyl, alkynylkarbonyl, alkylsulfonyl, alkenylsulfonyl, alkynylsulfonyl, alkylsulfinyl, alkylsulfonamido, amidino, guanidino, alkyliminoamino, formyliminoamino, trifluormethoxy nebo perfluorethoxy. Další substituenty na arylových, cykloalkylových, alkenylových, alkynylových a aralkylových funkčních skupinách R1 zahrnují jednu nebo více, raději ale jednu nebo dvě alkylové skupiny. Výhodné typy volitelných substituentů na R1 zahrnují hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, Ci_6 alkyl, Ci_6 alkoxy, Ci-6 aminoalkyl, Ci_6 aminoalkoxy, amino, mono(Ci-4 )alkylamino, di (Ci_4) alkyl amino,
C2-6 alkoxykarbonylamino, C2_6 alkoxykarbonyl, karboxy,
Ci_6 hydroxyalkyl, C2_i0 mono (karboxyalkyl) amino, di (C2-io karboxyalkyl) amino, C6_i4 ar (Ci_6 alkoxy) karbonyl,
C2-6 alkynylkarbonyl, Ci-6 alkylsulfonyl, C2_6 alkenylsulfonyl, C2_6 alkynylsulf onyl, Ci_6 alkylsulfinyl,
Ci_6 alkylsulfonamido, amidino, guanidino, Ci_6 alkyliminoamino, formyliminoamino,
C2_6 karboxyalkoxy, karboxyalkylamino, kyan, trifluormethoxy a perfluorethoxy.
Další doporučenou skupinou sloučenin jsou sloučeniny vzorce I až XI, kde R1 je heteroaryl nebo substituovaný heteroaryl. Výhodné heteroarylové skupiny R1 zahrnují pyridyl, thienyl, chromenyl, benzoxazolyl, chinazolinyl, chinolinyl a tetrahydrochinolinyl, přičemž jsou nejvýhodnější skupiny pyridyl, chinazolinyl, chinolinyl a tetrahydrochinolinyl. Výhodné sloučeniny, když R1 je substituovaný heteroaryl, zahrnují sloučeniny, jež mají jednu z heteroarylových skupin uváděných jako výhodné, které mají jeden nebo více, s výhodou jeden nebo dva, substituenty uvedené výše.
Použitelné typy R1 zahrnují fenyl, chlorfenyl, jodfenyl, dichlorfenyl, bromfenyl, trifluormethylfenyl, di(trifluormethyl)fenyl, methylfenyl, terc.butylfenyl, methoxyfenyl, dimethoxyfenyl, hydroxyfenyl, karboxyfenyl, aminofenyl, methylaminofenyl, n-butylaminofenyl, amidinofenyl, guanidinofenyl, formyliminoaminofenyl, acetimidoylaminofenyl, methoxykarbonylfenyl, ethoxykarbonylfenyl, karboxymethoxyfenyl, naftyl, hydroxynaftyl, cyklohexyl, cyklopentyl, 2-propylbutyl, chinolinyl a tetrahydrochinolinyl.
Skupiny R2, R3 a R4 ve vzorcích I až XI po připojení funkční skupiny -Z-R1 nahrazují kterýkoliv zbývající vodíkový atom na benzenovém kruhu. Výhodné sloučeniny jsou ty, ve kterých R2, R3 a R4 jsou nezávisle vodík, Ci_4 alkyl,
C4-7 cykloalkyl, C6-h aryl, zvláště C6-io aryl,
C6-io ar (C1-4) alkyl, trif luormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyan nitro, karboxamid, karboxy, alkoxykarbonyl, karboxymethyl, alkoxykarbonylmethyl nebo cykloalkyloxykarbonyl. Alternativně R2 a R3 na sousedních uhlíkových atomech na benzenovém kruhu mohou být buď -CH=CH-CH=CH-, nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6, přičemž vytvoří kondenzovaný kruh. Výhodné typy R2 spojeného s R3 jsou -CH=CH-CH=CH-, -CH2-CH2-CH2- a -CH2-CH2-CH2-CH2-. Když R2 a R3 společně tvoří kondenzovaný kruh, potom R4 je výhodně vodík.
Výhodné typy R2, R3 a R4 zahrnují H, methyl, ethyl, chlor, brom, trifluormethyl, hydroxymethyl, methoxy, ethoxy, karboxamid, nitro, fenyl, cyklopropyl, hydroxy, isopropyl, methoxykarbonyl, ethoxykarbonyl a benzyl. Použitelné typy pro R2, R3 a R4 také zahrnují R2 a R3 společně vytvářející -CH=CH-CH=CH nebo -CH2-CH2-CH2- přičemž R4 je vodík.
Výhodné typy R6 ve vzorcích I až XI jsou vodík, hydroxy, Ci_6 alkyl, Ci-6 alkoxy, kyan nebo=-C02Rw, kde Rw je ve všech případech s výhodou buď Cx-4 alkyl nebo C4_7 cykloalkyl. Vhodné typy R6 zahrnují vodík, methyl, ethyl, propyl, n-butyl, hydroxy, methoxy, ethoxy, kyan -CO2CH3, -CO2CH2CH3 a -CO2CH2CH2CH3. V nej výhodně j ším provedení je každé R6 vodík.
Výhodné sloučeniny zahrnují sloučeniny vzorce I a II, kde R7 a R8 jsou nezávisle jeden ze substituentů: vodík, Ci_6 alkyl, C6-io ar (Ci_6) alkyl, C6_10 aryl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2_7 karboxyalkyl nebo R7 a R8 jsou spojeny za vzniku -(CH2)y-, kde y je nej výhodněji 2. Použitelné typy R7 a R8 zahrnují vodík, methyl, ethyl, propyl, n-butyl, benzyl, fenylethyl,
2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, 2karboxymethyl, 3-karboxyethyl a 4-karboxypropyl.
Výhodné sloučeniny jsou sloučeniny podle vzorce I, IV,
V a VI, kde R9 je Ci -ίο, vodík nebo alkyl podle přání substituovaný jednou, dvěma nebo třemi skupinami (výhodně jednou) amino, monoalkylamino, dialkylamino, alkoxy, hydroxy, alkoxykarbonyl, aryloxykarbonyl, aralkoxykarbonyl, karboalkoxy, fenyl, kyan, trifluormethyl, acetylamino, pyridyl, thienyl, furyl, pyrrolyl nebo imidazolyl.
Vhodné typy R9 zahrnují vodík, methyl, ethyl, propyl, n-butyl, benzyl, fenethyl, 2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, karboxymethyl a karboxyethyl.
Výhodné typy pro R10 ve vzorcích I až XI zahrnují vodík, Ci-6 alkyl, C6-io ar (Ci-6) alkyl, C6_i0 aryl, C2-io hydroxyalkyl,
C2.10 aminoalkyl, C2_7 karboxyalkyl, mono(Ci_4 alkyl) amino • · (Ci_8) alkyl, a di (Ci_4 alkyl) amino (Ci_8) alkyl. Vhodné typy pro R10 zahrnují methyl, ethyl, propyl, n-butyl, benzyl, fenylethyl, 2-hydroxyethyl, 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl, 2-aminoethyl, 2-karboxymethyl, 3-karboxyethyl, 4karboxypropyl a 2(dimethylamino)ethyl.
Výhodné hodnoty pro n ve vzorcích I až III zahrnují 1 až 6, výhodněji 1 až 4, a nej výhodněji 1 nebo 2, s tou výhradou, že když W je N a Y je jiné než -CHR10-, potom n není 1. Výhodné hodnoty pro m zahrnují 1 až 4, raději 1, 2 nebo 3, za předpokladu, že když W je N, potom m není 1.
Výhodné typy pro R5 ve vzorci III zahrnují jeden ze substituentů: vodík, Ci_4 alkyl, fenyl, benzyl, fenethyl, C2-io karboxyalkyl, a C2-io hydroxyalkyl. Zvláště výhodné typy jsou vodík, Ci_6 alkyl, C2_i0 hydroxyalkyl a C2_io karboxyalkyl. Vhodné typy R5 zahrnují vodík, methyl, hydroxymethyl, hydroxyethyl, karboxymethyl a karboxyethyl.
Výhodné typy pro R1 ve vzorci III zahrnují vodík, Ci_6 alkyl, C3_8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci_8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, alkoxykarbonyl, alkoxymethyl a alkoxy. Vhodné typy pro R1 zahrnují vodík, methyl, methoxy a trifluormethyl;
Výhodné typy pro a ve vzorci IV a VII jsou 1 až 6, výhodněji 1 až 4, nej výhodněji 1 až 2, a to s výhradou, že když Y je jiné než -CHR10-, potom n není 1.
Výhodné typy pro ”b ve vzorci V a VIII zahrnují 1 až 6, výhodně 1 až 4, nej výhodněji 1 nebo 2.
Výhodné typy pro c ve vzorcích VI a IX zahrnují 1 až 8, výhodněji 1 až 6, nej výhodněji 1, 2, 3 nebo 4.
Výhodné typy pro d” a e ve vzorcích V a XI zahrnují 1 až 6, výhodně 1 až 4 a nejvýhodněji 1 nebo 2.
Výhodné sloučeniny podle vzorců VI, IX a XI jsou ty sloučeniny, kde R18 je nezávisle jeden ze substituentů:
«· vodík, Ci-6 alkyl, C6-io ar (C^e) alkyl, C6-io aryl, C2-io hydroxyalkyl a C2-7 karboxyalkyl. Použitelné typy R18 zahrnují vodík, methyl, ethyl, propyl, n-butyl, benzyl, fenylethyl, 2-hydroxyethyl 3-hydroxypropyl, 4-hydroxybutyl,
2-karboxymethyl, 3-karboxyethyl a 4-karboxypropyl.
Nejvýhodnější sloučeniny jsou ty, v nichž R18 je vodík. Specifické sloučeniny v rozsahu pokrytém vynálezem zahrnují následující příklady:
Hydrochlorid 3-[(l-acetimidoyl)piperidin-4-yl)methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
Diacetát 3- (2-chlorbenzyloxy)5-methyl-l-[2-(1acetimidoyl)piperazin-4-yl]ethoxybenzenu;
Dihydrochlorid N-[2-(N, N-dimethylamino)ethyl]-N-[2-[[4-(1acetimidoyl)amino]butoxy]-4-methylfenyl]benzensulfonamidu; N-Benzyl-N-[[[3-(1-acetimidoyl)piperidin-4yl]methylamino]fenyl]-benzensulfonamid;
Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylesteru 3-chlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 3-[(3-amidinofenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorobenzensulfonové kyseliny;
Hydrochlorid 3-[[3-(N-hydroxy)amidinofenyl]methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylesteru 2,3-dichlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 2-chloro-N-[[3—[(1-acetimidoyl)piperidin-4yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu; 2-chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3-[(1acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5trifluormethylfenyl]benzensulfonamid;
Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-3-yl]methoxy]-5methoxyfenylesteru 1-(5-((N,Ndimethylamino)naftalensulfonové kyseliny;
· ·
» « 44 • 4 *« • · · <
« * ··
4 · 4 • 4 4
9· ··
Acetát 1—[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]naftalen-3ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
Acetát 3-[(2-chlorfenoxy)methyl]-[[(1-acetimidoyl)piperidin4-yl]methoxy]benzenu;
Hydrochlorid 3-(4-amidinofenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
Hydrochlorid 3-[(3-amidinofenyl)methoxy]fenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny;
Acetát 3-[5-amidinopentyloxy]-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny;
Hydrochlorid 3-[3-amidinopropyloxy]-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny; a
Hydrochlorid 3-[[3-(N-methylamidino)fenyl]methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
Je třeba chápat že se předpokládá, že tento vynález zahrnuje stereoizoméry i optické izoméry, to znamená směsi enatiomérů i individuálních enantiomérů a diastereoizomérů, které vznikají jako důsledek strukturální asymetrie v některých sloučeninách uvedené série.
Sloučeniny vzorců I až XI mohou být solvatačně vázány, zvláště hydratovány. K hydrataci může dojít během výroby sloučenin nebo kompozic obsahujících tyto sloučeniny, nebo časem, vlivem hygroskopické povahy sloučenin.
Termín aryl užívaný zde sám o sobě nebo jako část jiné skupiny se vztahuje k monocyklickým nebo bicyklickým aromatickým skupinám obsahujícím 6 až 12 uhlíků v cyklické části, nejraději 6 až 10 uhlíků v cyklické části, jako je fenyl, naftyl nebo tetrahydronaftyl.
Zde používaný termín heteroaryl se týká skupin s 5 až 14 atomy v cyklu, 6, 10 nebo 14 π elektrony sdílenými v cyklickém seskupení; a obsahujících uhlíkové atomy a 1, 2 nebo 3 kyslíkové, dusíkové nebo sírové heteroatomy (přičemž ♦ * * · · « · « <w «·
příklady heteroarylových skupin jsou: thienyl, benzo(b)thienyl, nafto(2,3-b)thienyl, thianthrenyl, furyl, pyranyl, isobenzofuranyl, benzoxazolyl, chromenyl, xanthenyl, fenoxathiinyl, 2íř-pyrrolyl, pyrrolyl, imidazolyl, pyrazolyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, indolizinyl, isoindolyl, 3íf-indolyl, indolyl, indazolyl, purinyl, 4íf-chinolizinyl, isochinolyl, chinolinyl, tetrahydrochinolinyl, ftalazinyl, naftyridinyl, chinazolinyl, cinnolinyl, pteridinyl, 4a#-karbazolyl, karbazolyl, β-karbolinyl, fenantridinyl, akridinyl, perimidinyl, fenantrolinyl, fenazinyl, isothiazolyl, fenothiazinyl, isoxazolyl, furazanyl a fenoxazinyl).
Termín aralkyl nebo arylalkyl zde používaný buď sám o sobě nebo jako část jiné skupiny se týká C!_6 alkylových skupin s arylovým substituentem jako je benzyl, fenylethyl nebo 2-naftylmethyl.
Termín cykloalkyl zde používaný buď sám o sobě nebo jako část jiné skupiny se týká cykloalkylových skupin obsahujících 3 až 9 uhlíkových atomů, výhodně 4 až 7 uhlíkových atomů. Typickými příklady jsou cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl, cyklooktyl a cyklononyl.
Termín halogen nebo halo zde používaný buď sám o sobě nebo jako část jiné skupiny se týká chloru, bromu, fluoru nebo jodu, přičemž se přednost dává chloru.
Schéma Ia znázorňuje přípravu sloučenin v příkladech 1, 5, 8, 9, 11 a 12.
• * «· « « * * < >··· * • · « · · * ·· * · w * · * · * * * * * * « » « * <* *· ·« ·♦
9 · 9 « ··
«. »*· 9 * • 9 ·
99
Schéma Ia R®
1. odstranění chránící skupiny
2. ' amidinace
ÍTolé
R1 až R3 , R6 až R9, stejně jako n a m již byly definovány výše; Pa je chránící skupina hydroxylu, Pb chráněná skupina aminu.
Fenoly 1 (když P je H) jsou reakcí s vhodnými sulfonylchloridy převedeny na monosulfonáty 2. Výhodné podmínky představuje působení na fenol I sulfonylchloridem v dvoufázovém systému složeném z etheru a vodné fáze nasycené NaHCO3. Alternativně lze tuto reakci provést v prvním stupni deprotonací 1 silnou bází, nejraději NaH, v polárním organickém rozpouštědle jako je DMF nebo tetrahydrofuran, v • »
W * • · · · • · ·· ·«· * « • « » ♦ » * * * * ♦· ♦ * ♦ « • ► « «
«.· «* fenol.
2ΐ ,:. :
dalším působením sulfonylchloridu na deprotonovaný Stále ještě alternativně může být fenol 1 v typickém organickém rozpouštědle jako je methylenchlorid konvertován na 2 reakcí fenolu se sulfonylchloridem v přítomnosti aminové báze jako je N-methylmorfolin.
Fenoly 1 mohou být chráněny jednou skupinou (Pa je chránící skupina) řadou chránících skupin známých odborníkům, jako jsou estery a benzylethery (Green, T.W. a Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vydání, J.Wiley and Sons, lne., New York, 1991). Odstranění chránících skupin hydroxylů se rutinně děje s použitím reakčních podmínek známých odborníkům. Například odstranění chránící skupiny benzyletherů lze uskutečnit katalytickou hydrogenací s palladiem na uhlí jako katalyzátorem v rozpouštědlech jako je ethanol nebo tetrahydrofuran. Odstranění chránící skupiny acetátu se děje zásaditou hydrolýzou, nejraději hydroxidem sodným ve vodném tetrahydrofuranu.
Fenoly 2 jsou spojovány s 3 (pro L=OH) použitím spojovacího způsobu Mitsunobu (O.Mitsunobu, Synthesis 1, 1981) za vzniku 4. Výhodné podmínky pro spojování zahrnují použití trialkylfosfinu nebo triarylfosfinu, jako je trifenylfosfin, ve vhodném rozpouštědle jako je tetrahydrofuran nebo methylenchlorid a dialkylazodikarboxylát, jako je diethylazodikarboxylát. V některých případech je výhodné přidat aminovou bázi jako je N-methylmorfolin. Aminová koncová skupina 3 je chráněna chránící skupinou Pb, jež se dobře odstraňuje z 4. Odborníci dobře znají chránící skupiny aminů (T.W.Green a P.G.M.Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd. J.Willey and Sons, New York, 1991). Odstranění chránící aminové skupiny se děje s použitím reakčních podmínek dobře známých • 4 • t · ·
1· · « • ·· ► » » 4
I · « « <· ·♦ · * é ·· ·«« · • · « ·· *· odborníkům. Například terc.butoxykarbonyl (BOC) lze odstranit stykem s mediem na bázi silné kyseliny jako je chlorovodík ve vhodném rozpouštědle jako je dioxan nebo smíšený rozpouštědlový systém trifluoroctová kyselina/methylenchlorid. Benzyloxykarbonylové skupiny (CBz) lze odstranit vodíkem za použití palladia na uhlí jako katalyzátoru v rozpouštědle jako je ethanol nebo tetrahydrofuran. Výsledný amin se potom konvertuje na amidin 5 způsobem podobným způsobu, který popsal Nagahara a ostatní, (J.Med.Chem., sv. 37 (8), s. 1200-1207, 1994), kde se na amin působí vhodným imidátem v přítomnosti báze jako je N,N-diisopropylethylamin v přítomnosti rozpouštědla jako je DMF. Alternativně se na amin působí vhodným imidátem v přítomnosti báze jako je hydroxid sodný ve vhodném rozpouštědle jako je methanol.
Schéma Ib ilustruje přípravu sloučenin podle příkladů 2 a 13, ale není na ně omezen.
Ib
R2
R8
4. odstranění chránící skupiny amidinace
R2
R3
R8
R1CH2—ó φ · ♦ ·«» ·* • · « · ♦ * ·· * · ♦ » « · ·· ·♦ -r·......
« · » • ·· ·«· · « • · · ·· ··
R1 - R3, R6 - R8, n, m, Pa a Pb odpovídají výše uvedeným definicím.
Arylethery 8 se synthetizují způsobem analogickým jako syntéza 5. Fenol 1 (P je H) se konvertuje na derivát 6 reakcí 1 se silnou bází, nejraději NaH, ve vhodném rozpouštědle jako je DMF, načež následuje addice reaktivní alkylové nebo benzylové sloučeniny R1CH2X (kde X je reaktivní funkční skupina jako je jod, chlor, brom nebo alkylsufonát). Alternativně lze použit reakce Mitsunobu s vhodným RxCH2X (X=OH) za podmínek uvedených výše. Použiti vhodných chránících skupin (Pa), jako jsou estery, pro alkohol v zájmu potlačení nadměrné alkylace je v oboru dobře známo (Green, T.W. a Wuts, P.G.M., Protective Groups in Organic Synthesis, 2. vyd., J. Wiley and Sons, lne., New York,
1991). Chránící skupina se pak může odstranit za použití dobře známých způsobů, například hydrolýzou vodným NaOH při použití esterové chránící skupiny. Fenol 6 se potom konvertuje na amidin 8 za použití podmínek popsaných pro přípravu 5.
Schéma II ilustruje přípravu sloučenin podle příkladů 3, 9 a 10, ale není na ně omezeno.
Významy:
Schéma II
R8
4» • 41 •
* · « ·<
» · 9 • ·«
9 9
9 9
• ♦ ·
9
99 9 9 «
·* ·· ·· «« % - odstranění chránící skupiny • · • ·*· • «
··· · · » · · ·· ·· • * · · ·«
R1 - R3, R6 - R10, n, m, Pa a Pb odpovídají výše uvedeným definicím.
Podle schématu II se nitrofenol 9 může spojit se sloučeninou 3 standardními způsoby. Je výhodné, když se tato reakce provede reakcí Mitsunobu (kde L je OH). Alternativně se na 9 může působit bází jako je NaH ve vhodném rozpouštědle jako je DMF nebo THF, načež následuje addice 3 (kde L je reaktivní skupina jako Cl, Br, I nebo alkylsulfonát). Nato se nitroskupina redukuje například katalytickou redukcí s použitím palladia na uhlí jako katalyzátoru ve vhodném rozpouštědle jako je ethanol nebo tetrahydrofuran. Na výsledný produkt se potom působí vhodným sulfonylchloridem (R^ChCl) za vzniku 11. Odstranění chránící skupiny pro amin Pb se docílí způsoby známými v oboru. Například terč.butoxykarbonyl (BOC) se odstraní působením media na bázi silné kyseliny jako je chlorovodík ve vhodném rozpouštědle jako je dioxan nebo trifluoroctová kyselina v methylenchloridu. Benzyloxykarbonylové skupiny (CBz) se odstraňují katalytickým vodíkem za použití palladia na uhlí jako katalyzátoru v rozpouštědlech jako je ethanol nebo tetrahydrofuran.
Výsledný amin se potom konvertuje na amidin 12 způsobem podobným způsobu, který popsal Nagahara a ostatní, (J.Med.Chem., sv. 37 (8), s. 1200-1207, 1994), kde se na amin působí vhodným imidátem v přítomnosti báze jako je N,Ndiisopropylethylamin v rozpouštědle jako je DMF.
Alternativně se na amin působí vhodným imidátem v přítomnosti báze jako je hydroxid sodný ve vhodném rozpouštědle jako je methanol. N-substituovaný derivát sulfonamidu 13 se získá alkylací 11 za použití vhodného alkylačního činidla (R10X) v přítomnosti báze, nej raděj i «· ♦ · * • 9 ···· ♦
*
9 9
9 9 · ♦ · ·· ♦ ♦ ·· ♦ 9 ·
999 9 9 9 99
Cs2CO3 v polárním rozpouštědle jako je DMF. Odstranění ochranné skupiny a amidinace se potom provedou způsobem podobným konverzi 11 na 12.
Schéma III ilustruje přípravu sloučenin podle příkladu 4, ale není na ně omezen.
Schéma III • Μ ·· ··'- ** • #··· · · · ·
Je ♦ · ·♦ · · ·♦ *··♦ · · · · * · ···; * • ··«· ·· · • ·· ♦· ·♦ ·♦
V nh2
R1SO2CI
R10X
NR10 s( n^O 15
1. reduction
2. HO^ y(CHj)n-1 W
Á’
JCHjJn
Y
R8
N—Pb
R2
R3
R®
SteT R'-X„ /(CHjb-1 CH2 W-(CH2)m R7 ,N—pb reduífcC
R3
R1—s o/Z XX·
NR2 Z
2. amldinace· R—< //%
Y*
R8
I
W-ICH,)/ R7
1. NaH
2. R10X
R®
R3
N—Pb whchj/ d9 ;Ύ
NH
R2 R1—SC o/z XX /(Μ,,
I ϊτ vy-(°h2)<
R®
N—Pb
R3 redufož.
R2
R3
R2
Vy
NR10
R® .N—Pb fc ťSc/íZrane/,/
1· MUfiihy
2. amidinaoň
Υ*Λ—Γ /ch=<»·’ A » \l/ XH, W-(CHj£ V
IR” k jlH R—SC // \ O c • · • · · * • · ·· • · ♦ ♦
9· ·
99 ·· • · · ·♦ ··
Významy:
R1 - R3,R7 - R10, n, m a Pb odpovídají výše uvedeným definicím.
Ve shodě se schématem III se nitroanilin 14 konvertuje na sulfonamid působením vhodného sulfonylchloridu R1SO2C1 v přítomnosti slabé báze jako je N-methylmorfolin. Dusík výsledného sulfonamidu je alkylován vhodným alkylačním činidlem (R10X) v přítomnosti báze, výhodně uhličitanu alkalického kovu jako je Cs2CO3 nebo K2CO3 , za vzniku meziproduktu 15 v polárním rozpouštědle jako je DMF. Po redukci nitroskupiny je výsledný anilin spojen s karboxylovou kyselinou 16 za vzniku amidu 17. Toto spojení za vzniku amidu se může provést kterýmkoliv z četných běžných peptidových spojovacích činidel. Je výhodné použít jednoho z 1,3-dicyklohexylkarbodiimidů (Castrovo činidlo BOP) (B. Castro a další, Tetrahedron Lett., s.1219, 1975). Alternativně lze připravit 17 spojením anilinu s odpovídajícím acylchloridem kyseliny 16 v přítomnosti scavangeru (látky vážící přechodné meziprodukty) kyselin, jako je N-methylmorfolin. Amid 17 se konvertuje na amin 18 redukcí amidové funkce vhodným hydridovým reagentem, s výhodou komplexu boran-THF nebo chlortrimethylsilanu a lithium borohydridu. K této reakci dochází ve vhodném polárním rozpouštědle jako je THF. Odstraněním chránící skupiny aminu Pb a vznikem amidinu, jak popisuje schéma II, se vytváří požadovaná sloučenina 19. Alternativně se může dusík amidu alkylovat za použití silné báze jako je hydrid sodný ve vhodném polárním rozpouštědle jako je DMF, ·· ·· * * · • · ·· • · · · ·
9 9 ·
99
99
9 9 · • · ·· ··« · 9
9 9
99 následuje působení alkylačního činidla (R10X) za vzniku meziproduktu 20. Redukce amidu stejným způsobem jako při tvorbě 18 poskytuje 21, načež následuje odstranění chránící skupiny a amidinace, jak bylo již dříve popsáno, a vznik analogické sloučeniny 22.
Schéma IV ilustruje přípravu sloučenin z příkladů 6, 7, 14, 15, 16, 17 a 18.
Schéma IV
R3 R3
NH • * ·« ♦ • · · • ·♦·· · • · ··· * ·* « « ♦ · · · • · ·· • · · · · ♦ ♦ · · ·· ·· ·· #· • · · * • · ·· ··· · · • · · *« · ·
R1, R3, R6, a n odpovídají výše uvedeným definicím.
Monosulfonáty 2 se konvertují na kyanoderiváty 24 působením báze, nejvýhodněji hydridu sodného ve vhodném rozpouštědle jako je DMF, načež následuje addice 23, kde L je reaktivní skupina jako jodid, chlorid, bromid, alkylsulfonát nebo arylsulfonát. Alternativně lze použít Mitsunobovu reakci s vhodným alkoholem 23, kde L = OH. Nitril se podrobí podmínkám vzniku amidinu jako jsou podmínky, jež popsal Nagahara a další, (J. Med. Chem., sv. 37 (8), s. 1200-1207, 1994), kde se na nitril nejdříve působí silnou kyselinou, výhodně hydrochloridem ve vhodném alkoholickém rozpouštědle, výhodně methanolu nebo ethanolu, přičemž se nitril konvertuje na imidát. Po izolaci se na imidát působí vhodným aminem NHR6R6 za vzniku 25. Podobně se připravují benzamidiny 28 z 2 za použití vhodných benzonitrilových derivátů 26.
Stojí za zmínku, že ve všech výše zmíněných schématech může být na fenylovém kruhu výchozí látky další substituent R4.
Pro lékařské účely se dává přednost farmaceuticky přijatelným addičním solím kyselin, to znamená solím, ve kterých anion podstatně nepřispívá toxicitě nebo farmakologické aktivitě organického kationtu. Addiční soli kyselin se získávají buď reakcí organické báze podle vzorců I až Xf s organickou nebo anorganickou kyselinou, výhodně v roztoku, nebo kterýmkoliv ze standardních způsobů publikovaných v literatuře dosažitelné pracovníkům v oboru. Příklady použitelných organických kyselin jsou karboxylové kyseliny jako maleinová, octová, vinná, propionová, fumarová, isethionová, jantarová, cyklámová, pivalová ap; použitelné anorganické kyseliny jsou halogenvodíkové kyseliny jako HC1, HBr, HI, kyselina sírová, fosforečná aj.
Výhodné kyseliny pro tvorbu kyselých addičních solí zahrnují HCl a octovou kyselinu.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu představují novou třídu účinných inhibitorů kyselých, thiolových, serinových a metaloproteáz. Příklady serinových proteáz inhibovaných sloučeninami v rozsahu tohoto vynálezu zahrnují neutrofilní leukocytovou elastázu, což je proteolytický enzym zúčastněný na patogenezi emfysemu; chymotrypsin a trypsin, což jsou trávicí enzymy; elastázu pankreatu a katepsin G, proteázu chymotrypsinového typu, rovněž vázanou na leukocyty; trombin a faktor Xa, proteolytické enzymy ovlivňující koagulaci krve; uvažovanými aplikacemi sloučenin podle tohoto vynálezu je i inhibice termolysinu (metaloproteázy) a pepsinu (jedné z kyselých proteáz). Sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou výhodně používány pro inhibici proteáz trypsinového typu.
Léčení pankreatitidy je jednou z aplikací sloučenin, jež inhibují chymotrypsin a trypsin. Pro toto cílové použití se účinnost a ostatní biochemické parametry inhibice enzymů zjišťuje standardními biochemickými způsoby dobře známými odborníkům. Dávkování při jejich specifické aplikaci ovšem závisí na povaze a vážnosti chorobného stavu léčeného pacienta nebo zvířete, jak je určí ošetřující lékař. Má se zato, že rozsah dávkování pro zjevný terapeutický účinek má být asi 0,01 až 10 mg na kg hmotnosti pacienta denně.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu, jež se vyznačují schopností inhibovat buď faktor Xa nebo trombin, lze použít pro řadu terapeutických účelů. Jako inhibitory faktoru Xa nebo trombinu sloučeniny podle tohoto vynálezu inhibují produkci trombinu. Proto jsou tyto sloučniny použitelné pro léčbu nebo profylaxi stavů charakterizovaných abnormálních žilnou nebo cévní trombózou, týkající se buď tvorby nebo působení trombinu. Tyto stavy zahrnují, aniž by se na ně
9
9 9 9
omezovaly, hlubokou žilnou trombózu, diseminovnou intravaskulární koagulopathii, k níž dochází při septickém šoku, virové infekce a rakovinu, infarkty myokardu, mrtvici, bypass koronárních cév, vykloubení kyčelního kloubu, a vznik trombu buď při trombolytické terapii nebo perkutánní transluminální koronární angioplastice (PCTA) . Sloučeniny podle tohoto vynálezu se mohou použít i jako antikoagulant pro mimotělní krevní okruhy.
V důsledku účinků jak faktoru Xa tak trombinu na řadu buněčných typů, jako jsou buňky hladkého svalstva, endothelové a neutrofilní buňky, mají sloučeniny podle tohoto vynálezu další použití v léčbě a profylaxi syndromu respiračního distresu (úzkosti) dospělých, odezvy zánětů jako je edém, poškození reperfúzí, aterosklerózy, restenózy v důsledku poškození balónkovou angioplastikou, odstranění cévy a instalace cévního stentu.
Sloučeniny podle vynálezu se mohou použít při léčbě neoplazie a metastáz a neurodegenerativních chorob, jako Alzheimerova nebo Parkinsonova choroba.
Při použití jako inhibitory trombinu nebo faktoru Xa mohou být sloučeniny podle vynálezu podávány v účinném množství při dávkách v rozmezí asi 0,1 až 500 mg na kg tělesné hmotnosti pacienta, s výhodou mezi 0,1 až 10 mg/kg tělesné hmotnosti, v režimu buď jedné nebo 2 až 4 rozdělených denních dávek.
Při použití jako inhibitory trombinu mohou být sloučeniny podle vynálezu použity v kombinaci s trombolytickými činidly jako je aktivátor tkáňového plasminogenu, streptokináza a urokináza. K tomu mohou být sloučeniny podle vynálezu použity v kombinaci s dalšími antitrombotickými nebo antikoagulačními léky jako jsou antagonisté fibrinogenu a antagonisté receptoru tromboxanu.
Elastáza lidských leukocytů je uvolňována » · · » ·· · · ·· «*·· * · · · · · ··· · · • ·«·· «·· polymorfonukleárními leukocyty v místech zánětů a tím přispívá k řadě chorobných stavů. Proto se očekává, že sloučeniny podle vynálezu mají protizánětlivé účinky použitelné při léčení dny, revmatické artritidy a jiných zánětlivých chorob a při léčení emfysemu. Rovněž katepsin G hraje roli při chorobných stavech artritidy, dny a emfysemu a navíc při glomerulonefritidě a napadení plic parazity v důsledku infekce. Pro účely konečného použití se charakteristiky inhibice enzymů sloučenin podle vzorců I až XI dobře zjišťují standardními biochemickými způsoby známými odborníkům.
Inhibiční vlastnosti sloučenin v rozsahu tohoto vynálezu vůči neutrofilní elastáze se stanovují následujícím způsobem. Neutrofilní elastáza se připraví způsobem, který popsal Baugh a další, (Biochemistry, sv. 15, s. 836, 1979.) Zkoušky s enzymem se provádějí v podstatě způsobem, který popsal Nakajima a další, (J.Biol. chem., sv. 254, s. 4027, 1979), ve zkušebních směsích obsahujících 0,10M ústoje Hepes (N-2-hydroxyethylpiperazin-N'-2-ethansulfonová kyselina) při pH 7,5, 0,5M NaCl, 10% dimethylsulfoxidu a 1,50 x 10’4 M MeOSuc-Ala-Ala-Pro-Val-p-nitroanilid jako substrát. Inhibitory se hodnotí srovnáním enzymatické aktivity jednak v přítomnosti, jednak v nepřítomnosti inhibitoru.
Inhibiční vlastnosti sloučenin v rozsahu tohoto vynálezu vůči katepsinu G se určují následujícím způsobem. Preparát částečně přečištěného lidského katepsinu G se získá způsobem, který popsal Baugh a další, (Biochemistry sv. 15, s. 836, 1979). Leukocytové granule jsou hlavní zdroj pro přípravu leukocytové elastázy a katepsinu G s aktivitou chymotrypsinového typu. Leukocyty se podrobí lýze a granule se izolují. Leukocytové granule se extrahují 0,20M octanem sodným při pH 4,0 a extrakty se dialyzují proti ústoji 0,05M • · ·· · • · · • ···· • · ··· · • · · · • · ·· • · · · · • · · · ·· *· ·· • · · • · • ··· · • · *· ·· ·· ··
Tris při pH 8, který jako substrát obsahuje 0,05M NaCl, při 4 °C přes noc. Proteinová frakce se při dialýze sráží a izoluje se odstředěním. Tato frakce obsahuje většinu chymotrypsinové aktivity leukocytových granulí. Pro každý enzym se připravují specifické substráty, zejména MeOSucAla-Ala-Pro-Val-p-nitroanilid a Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pnitroanilid, který se leukocytovou elastázou nehydrolyzuje. Enzymové preparáty jsou zkoušeny v 2,00 mL 0,10M ústoje Hepes při pH 7,5, obsahujícího 0,50 M NaCl, 10% dimethylsulfoxidu a 0,0020 M Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pnitroanilidu jako substrát. Hydrolýza p-nitroanilidového substrátu se monitoruje při 405 nm a 25 ’C.
Použitelné dávkování při aplikaci sloučenin podle tohoto vynálezu jako inhibitorů neutrofilní elastázy a katepsinu G pochopitelně závisí na povaze a závažnosti chorobného stavu jak jej určí ošetřující lékař, přičemž pro výše zmíněné chorobné stavy je vhodná dávka v rozsahu 0,01 až 10 mg na kg tělesné hmotnosti pacienta.
Sloučeniny podle tohoto vynálezu, jež inhibují urokinázu nebo aktivátor plasminogenu, jsou potenciálně použitelné při léčbě chorobných stavů vyznačujících se bujením buněk. Proto mohou být sloučeniny podle tohoto vynálezu použity i při léčbě benigní hypertrofie prostaty, karcinomu prostaty, lupénky a jako prostředky pro vyhnání plodu. Pro tyto konečné aplikace se inhibiční účinnost pro enzymy a jiné biochemické charakteristiky sloučenin podle vynálezu dobře zjišťují standardními biochemickými způsoby známými v oboru. Skutečné dávky při těchto konečných aplikacích ovšem závisejí na povaze a závažnosti chorobného stavu léčeného pacienta nebo zvířete, jež určí ošetřující lékař. Lze očekávat, že všeobecně platná aplikační dávka pro potřebný terapeutický účinek bude přibližně od 0,01 do 10 mg • ·
na kg tělesné hmotnosti pacienta denně.
Další použití pro sloučeniny podle vynálezu představuje analýza komerčních enzymatických činidel z hlediska koncentrace aktivních míst. Například chymotrypsin se dodává jako standardní reagent pro použití v klinickém kvantitativním vyjádření chymotrypsinové aktivity v pankreatických šťávách a stolici. Takové testy slouží k diagnóze pro gastrointestinální a pankreatické poruchy. Pankreatická elastáza se též dodává komerčně jako reakční činidlo pro kvantitativní stanovení (Xi-antitrypsinu v plasmatu. Obsah (Xi-antitrypsinu v plasmatu stoupá při různých zánětlivých onemocněních a α,ι-antitrypsinový deficit je spojen se zvýšeným výskytem plicních chorob. Sloučeniny podle vynálezu mohou být použity pro zvýšení přesnosti a reprodukovatelnosti těchto testů titrimetrickou standardizací komerční elastázy dodávané jako reagent, viz patent USA č. 4,499.082.
Aktivita proteázy v určitých proteinových extraktech při přečišťování některých proteinů je stále se vracející problém, který může komplikovat výsledky způsobů isolace proteinů a ohrožovat jejich přesnost. Určité proteázy přítomné v takových extraktech mohou být inhibovány při jednotlivých stupních čištění sloučeninami podle vynálezu, jež vytvářejí těsné vazby na různé proteolytické enzymy.
Farmaceutické kompozice podle vynálezu se mohou podávat kterémukoliv živočichu, který může zakusit příznivé účinky sloučenin podle vynálezu. Mezi nimi je na prvním místě člověk, i když záměrem vynálezu není omezovat se na humánní lékařství.
Farmaceutické kompozice na základě vynálezu lze podávat jakýmikoliv prostředky, jež vedou k požadovanému cíli.
Podávání může být například parenterální, subkutánní, intravenózní, intramuskulární, intraperitoneální, transdermální, bukální nebo okulární. Alternativně nebo konkurenčně je lze podávat orálně. Podávané množství závisí na věku, zdravotním stavu a hmotnosti příjemce, povaze eventuální konkurenční léčby a povaze požadovaného účinku.
Kromě farmakologicky aktivních sloučenin mohou nové farmaceutické preparáty obsahovat vhodné farmaceuticky přijatelné nosiče zahrnující například vehikula a pomocné přísady, jež usnadňují zpracování aktivních sloučenin na preparáty farmaceuticky použitelné.
Farmaceutické preparáty na základě tohoto vynálezu se vyrábějí známými způsoby, například prostředky běžného míchání, granulace, přípravy dražé, rozpouštění a lyofilizace. Farmaceutické přípravky pro orální aplikaci lze proto získat spojením aktivních sloučenin s pevnými vehikuly, volitelně mletím výsledné směsi a zpracováním směsi granulí, v případě potřeby nebo přání s přídavkem vhodných pomocných látek na tablety nebo základy dražé.
Vhodná vehikula jsou zvláště plniva jako sacharidy, například laktóza nebo sacharóza, mannit nebo sorbit, celulózové preparáty a/nebo fosfáty vápníku, například fosforečnan vápenatý nebo hydrofosforečnan vápenatý, stejně jako pojivá, například škrobová pasta na bázi kukuřičného, pšeničného, rýžového, bramborového škrobu, želatina, tragant, methylcelulóza, hydroxypropylmethylcelulóza, karboxymethylcelulóza sodná a/nebo polyvinylpyrrolidon.
Podle přání lze přidat desintegrační činidla jako například výše zmíněné škroby nebo také karboxymethylovaný škrob, zesítěný polyvinylpyrrolidon, agar nebo alginovou kyselinu nebo její soli jako alginát sodný. Pomocné přísady představují především relogické přísady a maziva, například oxid křemičitý, talek, stearová kyselina a její soli jako stearát hořečnatý nebo vápenatý a/nebo polyethylenglykol. Základy dražé se opatřují vhodnými povlaky, které jsou v případě potřeby odolné proti žaludečním šťávám. Pro tento účel se může použít koncentrovaných roztoků sacharidů, které mohou volitelně obsahovat arabskou gumu, talek, polyvinylpyrrolidon, polyethylenglykol a/nebo oxid titaničitý, roztoky laků a vhodná organická rozpouštědla nebo směsi rozpouštědel. Při přípravě povlaků odolných proti žaludečním šťávám se užívají vhodné celulózové preparáty jako ftalát acetylcelulózy nebo ftalát hydroxypropylmethylcelulózy. K povlakům tablet nebo dražé se mohou přidávat barviva nebo pigmenty, například pro identifikaci nebo charakterizaci dávek kombinací aktivních sloučenin.
Ostatní farmaceutické preparáty pro ústní podávání zahrnují želatinové stiskací (push-fit) tobolky stejně jako měkké zatavené tobolky z želatiny a změkčovadla, jako je glycerin nebo sorbit. Stiskací tobolky mohou obsahovat aktivní sloučeniny ve formě granulí, jež mohou být smíšeny s plnidly jako je laktóza, pojivý jako jsou škroby a/nebo mazivy jako je talek nebo stearát hořečnatý a podle přání i se stabilizátory. Je výhodné, když jsou aktivní sloučeniny v měkkých tobolkách rozpuštěny nebo suspendovány ve vhodných kapalinách jako jsou mastné kyseliny nebo kapalný parafin. Navíc lze přidat stabilizátory.
Vhodné formulace pro parenterální podávání zahrnují vodné roztoky ve vodě rozpustných forem aktivních sloučenin, například ve vodě rozpustných solí, alkalických roztoků a inkluzních komplexů cyklodextrinu. Zvláště výhodnými alkalickými roztoky jsou amoniové soli připravené například s Tris, cholinhydroxidem, bis-Tris-propanem, N38
* · · • ·· • · · · ·· · · ·· methylglukaminem nebo argininem. Jeden nebo více modifikovaných nebo nemodifikovaných cyklodextrinů se může použít pro stabilizaci sloučenin podle vynálezu a zvýšení jejich rozpustnosti ve vodě. Použitelné cyklodextriny pro tento účel popisují patenty USA č. 4,727.064, 4,764.604 a 5,024.998.
Kromě toho lze podávat suspenze aktivních sloučenin v podobě vhodných olejových injekcí. Vhodná lipofilní rozpouštědla nebo vehikula zahrnují mastné kyseliny, například sezamový olej nebo syntetické estery mastných kyselin, například ethyloleát nebo triglyceridy nebo polyethylenglykol-400 (sloučeniny jsou rozpustné v PEG-400). Suspenze vodných roztoků mohou obsahovat látky které zvyšují viskozitu suspenzí, například sodnou karboxymethylcelulózu, sorb.it a/nebo dextran. Podle přání může suspenze obsahovat i stabilizátory.
Následující příklady ilustrují ale neomezují methody a kompozice na základě tohoto vynálezu. Ostatní vhodné modifikace a adaptace různých podmínek a parametrů, s nimiž se odborníci běžně setkávají a jsou pro ně samozřejmé, spadají pod ducha a rozsah tohoto vynálezu.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Hydrochlorid 3- [ (l-acetimidoylpiperidin-4-yl)methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzenové kyseliny
a) N-terc.Butoxykarbonylisonipekotová kyselina
Di-terc.butyldikarbonát (6,55 g, 30 mmolů) se přidalo ke směsi isonipekotové kyseliny (3,90 g, 30 mmol) a NaHC03 ·· ·· ·· • * • · ·· • · · · · · • · · ·· ·· (5,05 g, 60 mmol) ve směsi 1:1 1,4-dioxan/voda (100 ml), a směs se přes noc míchala při pokojové teplotě. Směs se vakuově odpařila, okyselila 10% citrónovou kyselinou na pH 6 a extrahovala ethylacetátem (3 x 100 ml). Organická fáze se promyla solným roztokem (2 x 50 ml) a usušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se odpařilo za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé pevné hmoty, (výtěžek 6,25 g, 91 %). 1H-NMR(300 MHz, CDC13) δ l,43(s, 9H), 1, 63 (m, 2H), 1, 88 (dd, 2H, J = 1,5, 6,6 Hz), 2,45(m, 1H) , 2,83(t, 2H, J = 11,4 Hz) a 4,00 (d, 2H, J = 6,7 Hz) .
b) N-1 erc .But oxykarbonyl - 4 -piper i dinme thanol
Směs borovodík-tetrahydrofuran (1 M, 25 ml, 25 mmol) se pomalu přidávala během 30 minut při 0 °C (ledová lázeň) k N-terc.butoxykarbonylisonipekotové kyselině (5,73 g, 25 mmol) (připravené v předešlém stupni) v 50 ml tetrahydrofuranu. Směs se míchala přes noc při 0 °C a potom 6 hodin zahřívala na pokojovou teplotu. Pomalu se přidalo 10 ml vody a potom K2CO3 (5 g v 50 ml vody). Směs se extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se postupně promyla nasyceným roztokem NaHCO3 (2 x 50 ml) a solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu a zbytek se se čistil sloupcovou flash chromatografií (hexan:ethylacetát, 1:1) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílých krystalů (4,55 g, 84 %). 1H-NMR, (300 MHz, CDC13) δ 1,13 (m, 2H) , l,42(s, 9H) , 1, 67 (m, 4H), 2,67(t, 2H, J = 12,5 Hz), 3,46(d, 2H, J = 3,0 Hz)
4,09 (d, 2H, J = 3, 6 Hz) .
c) 3-Hydroxy-5-methylfenylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
Orcin monohydrát (1,42 g, 10 mmolů) a
2-chlorbenzensulfonylchlorid (2,43 g, 11 mmolů) se smísily s nasyceným roztokem NaHCO3 (30 ml) a diethyletherem (30 ml). Dvoufázová směs se dva dny intenzivně míchala při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila 50 ml vody a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se promyla solankou (2 x 50 ml) a usušila nad Na2SO4. Po vakuovém odtažení rozpouštědla se zbytek přečistil sloupcovou flash chromatografií (2% ethylacetát v methylenchloridu) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě světle žluté kapaliny (2,15 g, 71 %). 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,22 (s, 3H) ,
5,24 (s, 1H), 6,43(s, 1H) , 6,52(s, 2H) , 7,38(m, 1H) , 7,60(m, 2H) a 7,96(dd, -fff J = 0, 6, 3,9 Hz).
d) 3-[ [N- (terč. Butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5methylfenylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
Diethylazodikarboxylát (349 mg, 2,0 mmoly) se přidal k roztoku 3-hydroxy-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (600 mg, 2,0 mmoly) připraveného v minulém stupni, dále N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidinmethanol (430 g, 2,0 mmoly) připravený ve stupni (b), stejně jako při 0 °C trifenylfosfin (525 mg, 2,0 mmoly) v tetrahydrofuranu (15 ml). Reakční směs se míchala dvě hodiny při 0 °C a 3 hodiny při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou (50 ml) pro zastavení reakce a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se vyprala nasyceným HaHCO3 (2 x 50 ml), solným roztokem a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se čistil sloupcovou flash” chromatografií (2:1 ethylacetát/hexan) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé syrupovité látky (895 mg, 90 %). XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 1,24 (m, 2H) , 1,47 (s, 9H) , 1,76 (d, 2H, J = 6,6 Hz), 1,89 (m, 1H) , 2,24 (s, 3H), 2,72 (t, 2H, ·· r « • ·
J = 2,4 Hz), 3,68 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 4,13 (m, 2H) , 6,47 (t, 1H, J = 2,2 Hz), 6,52 (t, 1H, J = 0,7 Hz), 6,58 (d, 1H, J = 0,8 Hz), 7,38 (dd, 1H, J = 0,6, 0,8 Hz), 7,61 (m, 2H) a 7,97 (dd, 1H, J = 0,8, 4,0 Hz).
e) 3-[ (Piperídín-4-yl) methoxy]-5-methylfenylester 2chlorbenzensulfonové kyseliny
Na 3-[[N-(terč.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]5-methylfenylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (745 mg, 1,5 mmolu) připravený v předchozím stupni se 2 hodiny při pokojové teplotě působilo 4 N HC1 v 1,4 dioxanu (20 ml). Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se čistil sloupcovou flash chromatografií (10% methanol v methylenchloridu nasyceném čpavkem) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé syrupovité látky (570
mg, 95 %) . 1H-NMR (300 MHz, CDCI3) δ 1,45 (m, 1H), 1,94 (m,
3H), 2,23 (s, 3H), 2,45, (m, 1H), 2,71 (dt , 2H , J = 1,2,
12,3 Hz) , 3,51 (m, 2H) , 3,76 (m, 2H), 6,46 (t, 1H, J = 2 ,1
Hz), 6, 53 (s, 1H), 6,58 (s, 1H), 7,40 (t, 1H, J = 6,5 Hz ) ,
7, 62 (m, 2H) a 7,97 (dd, 1H, J = 1,4, 7,9 Hz) . Hmotové
spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina). Pro C19H22NO4SCI vypočteno : 396, 1 (M+H); nalezeno: 396, 4.
f) Hydrochlorid 3-[(l-acetimidoylpiperidin-4-yl) methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
Triethylamin (0,5 ml) a hydrochlorid ethylacetimidátu (247 mg, 2,0 mmolu) se přidaly k roztoku 3-[(piperidin-4yl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (396 mg, 1,0 mmolu), připraveného v předchozím stupni, v N,N-dimethylformamidu (10 ml). Reakční směs se přes noc míchala při reakční teplotě. N,N-dimethylformamid se vakuově odtáhl a zbytek se rozdělil mezi methylenchlorid • 4 ·
4444 · ·
44 · «
44
4 4
44 » 4 4 <
► 4 44
4 4 <
4 4
44 (200 ml) a 50 ml 10% K2CO3. Organická fáze se promývala 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a sušila nad K2CO3. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo, přidala se směs HCl-methanol (30 ml) a roztok se vakuově zahustil. Zbytek vykrystalizoval ze směsi methanolethylacetátu za vzniku sloučeniny uvedené v titulku jako bílé krystaly (405 mg, 86 %.) ^-NMR (300 MHz, DMSO-d6) 8 1,30 (m, 2H), 1,82 (d, 2H, J= 7,0 Hz), 2,05 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,29 (s, 3H), 3,16 (m, 2H) , 3,77 (d, 2H, J= 3,0 Hz), 3,92 (d, 1H, J = 6,5 Hz), 4,17 (d, 1H, J = 6,5 Hz),
6,46 (d, 1H, J = 2,5 Hz), 6,49 (s, 1H), 7,59 (t, 1H, J = 8,0 Hz), 7,87 (m, 2H) , 7,95 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 8,77 (br s, 1H) a 9,35 (br s, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina). Pro C2iH25N2O4SCl vypočteno : 437,1 (M+H); nalezeno: 436,8.
Příklad 2
Diacetát 3- (2-chlorbenzyloa<y) -5-methyl-l- [2- (1acefcimidoyl)piperazin-4-yl]ethoxybenzenu
a) N- (terč.Butoxykarbony1) -1- (2-hydroxyethyl)piperazin K roztoku 1-(2-hydroxyethyl)piperazinu (5,20 g, 40 mmolů) a triethylaminu (6 ml, 43 mmolu) v 1,4 dioxanu (100 ml) se pomalu přidával di-terc.butyldikarbonát (8,72 g, 40 mmolů). Reakční směs se 2 hodiny míchala při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát k 2% methanolu v ethylacetátu) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé olejovité kapaliny. (8,32 g, 90 %) . XH-NMR (300 MHz, CDC13) 8 l,46(s, 9H) , 2,46(t, 4H) ,
2,55(t, 2H), 2,75(br s, 1H), 3,44(t, 4H) a 3,63(t, 2H) .
• ·· ·· • · · · »’ • 4 · · · · ••••·· ·· · • · · * * • ·· ·· ·· ·· »- ' - ·-·- · • · ·· ·· · · * • · · ·· ··
b) 3-(2-Chlorbenzyloxy)-5-methyl fenol
K 1,31 g (9,22 mmolu) orcinmonohydrátu ve 20 ml bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře přidalo 220 mg (9,17 mmolu) 100% NaH. Po 5 minutách se přidalo 1,30 ml (10,0 mmolu) 2-chlorbenzylbromidu. Reakční směs se míchala 2 hodiny a pak rychle ochladila 1N HCl. Reakční směs se extrahovala ethylacetátem (200 ml).
Organická fáze se promyla vodou (4 x 100 ml), vysušila nad MgSO4 a vakuově zahustila. Přečištění sloupcovou flash chromatografií (diethyéter/hexan 50:50 ke 100:0) poskytlo výtěžek 656 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě sklovité látky. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,54(dd, 1H, J =
3,7 Hz), 7,39(dd, 1H, J= 3,7 Hz), 7,2-7,3(m, 2H) , 6,41(s, 1H), 6, 29-6,30 (m, 2H) , 5,29(s, 2H) a2,28(s, 3H) .
c) 3-(2-Chlorbenzyloxy)-5-methyl-l-[2-[N(terc.butoxykarbonyl) piperazin-4-yl ] ]ethoxybenzen
K roztoku 210 mg (0,845 mmolu) 3-(2-chlorbenzyloxy)-5methylfenolu připraveného v předchozím stupni, 204 g (0,887 mmolu) N- (terc.butoxykarbonyl)-1-(2-hydroxyethyl)piperazinu připraveného ve stupni a) tohoto příkladu, 287 mg (1,10 mmolu) trifenylfosfinu a 280 μΐ (2,5 mmolu) Nmethylmorfolinu ve 3 ml tetrahydrofuranu se přidalo 160 μΐ (1,09 mmolu) N,N-diethylazodikarboxylátu. Po míchání přes noc při teplotě okolí se reakční směs rychle ochladila vodou, extahovala ethylacetátem, vysušila nad MgSO4 a přečistila sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid/diethyléter 8:1 ku 4:1) za vzniku 270 mg (výtěžek 59 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě gumovité látky. XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,55(dd, 1H) , 7,377,41(m, 1H), 7,22-7,3(m, 2H) , 6,43(s, 1H) , 6,37(d, 2H), 5,12(d, 2H), 4,08(t, 2H, J= 6,7 Hz), 3,45(t, 4H) , 2,80(t, *· 9· • · · · · · · · • · ·♦ · · ·· «··»··· · · · • · ♦ · · · ··· · ** ♦· • · · ·· *·
2Η, J = 6 Ηζ), 2,51(t, 4Η) a l,46(s, 9Η). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina) . Pro C25H33CIN2O4 vypočteno : 461,2 (M+H); nalezeno: 460,9.
d) 3-(2-Chlorbenzyloxy)-5-methyl-l-[2-[piperazin-4yl]]ethoxybenzendihydrochlorid
Roztok 251 mg (0,544 mmolu) 3-(2-chlorbenzyloxy)-5methyl-1-[2-[N-(terc.butoxykarbonyl)piperazin-4yl]]ethoxybenzenu připraveného v předchozím stupni ve 3 ml methylenchloridu a 500 δ 4N HCl v dioxanu se míchal 1 hodinu. Po dalších 15 minutách míchání se reakční směs triturovala (rozetřela) s diethyléterem. Produkt byl shromážděn filtrací jako 127 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé pevné látky. XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,50(br s, 2H), 7,58-6, 61 ( (m, 1H), 7,51-7,57(m, 1H) , 7,377,40(m, 2H) 6,53(s, 1H) , 6,49(s, 3H) , 5,12 (s, 2H) , 4,35(br s, 2H) a 2,27(s, 3H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice oc-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina) . Pro C2OH25CIN2O2 vypočteno : 361,2 (M+H); nalezeno: 360,9.
e) Diacetát 3-(2-chlorbenzyloxy) -5-methyl-l-[2-[1(acetimidoyl)pipetrazin-4-yl] ]ethoxybenzenu
Roztok 104 mg (0,240 mmolu) 3-(2-chlorbenzyloxy)-5methyl-1-[2-[N-(terc.butoxykarbonyl)piperazin-4yl]]ethoxybenzenu připraveného v předchozím stupni (c) byl míchán 2 dny při teplotě okolí spolu s 90 mg (0,732 mmolu) ethylacetimidáthydrochloridu v 1 ml N,N-dimethylformamidu obsahujícího 260 μΐ Ν,Ν-diisopropylethylaminu. Rozpouštědlo se odtáhlo vakuově. Ke zbytku se pro zastavení reakce přidal roztok 1N hydroxidu sodného, extrahoval se methylenchloridem, sušil na K2CO3 a zahustil. Zbytek se rozpustil v 1 ml methylenchloridu a zreagoval s 500 μΐ • · ···· ·· ·· • · · · • · ·· • · · · · · • ♦ · · ·· »· ·· ·· • · · 9 • · ·· • 9 9 9 9
9 9 ·9 ledové kyseliny octové. Potom se roztok přečistil preparativní chromatografií na tenké vrstvě za použití methylenchloridu/ledové kyseliny octové/methanolu (poměr 53:13:34) jako vyvíjejícího činidla za vzniku 32,6 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé pěny po opakovaném zahušťování ze směsi diethylether/methylenchlorid/hexan. XH-NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 9-9,0(br s, 2H), 7,50-7,60(m, 2H), 7,38-7,41(m, 2H), 6,48(s, 1H), 6,39(s, 2H), 5,ll(s, 2H) , 4,06(t, 2H) , 3,533,56(m, 4H), 2,74(t, 2H), 2,60(t, 4H), 2,27(s, 3H) , 2,24(s, 3H) a l,85(br s, 6H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina) . Pro C22H28CIN3O2 vypočteno : 402,2 (M+H); nalezeno: 401,8.
Příklad 3
Dihydrochlorid N- [2- (Ν,Ν-dimethylamino) ethyl] -N~ [2-{ [4- (1acetimidoyl) amino]butoxy] -4-methylfenyl]benzensulfonaniidu
a) 2-[4 - (terč.Butoxykarbonylamino)butoxy]-4methylnitroben zen
K 252 mg (1,33 mmolu) 4(terč.butoxykarbonylamino)butanolu, 407 mg (2,66 mmolu) 4methyl-2-nitrofenolu a 383 mg (1,46 mmolu) trifenylfosfinu v 1,0 ml bezvodého tetrahydrofuranu se v atmosféře dusíku přidalo 336 μΐ (1,46 mmolu) diethylazodikarboxylátu. Následovalo míchání 1 hodinu a směs se zahustila na žlutý sirup. Chromatografií v koloně Sep-Pak SPE s 10 g oxidu křemičitého firmy Waters Associates a promytím 10-12% ethylacetátem se získalo 422 mg (98 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvého oleje.
1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,64 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,30 (dd, • ·« «· ·· ·· • ·*·* »··» • · « · ·· * « ·· ·*«· « · · · · » ··· · ♦ « «♦·· ·«« * «· «· · · ··
1H, J = 8,5, 2,2 Hz), 6,95 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 4,64 (br s, 1H), 4,09 (t, 2H, J = 6,1 Hz), 3,19 (q, 2H, J = 6,5 Hz), 2,34 (s, 3H), 1,86 (m, 2H) , 1,69 (m, 2H) a 1,44 (s, 9H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro C16H24N2O5 vypočteno : 347,2 (M+H); nalezeno: 347,3.
b) 2-[4- (terč.Butoxykarbonylamino)butoxy]-4-methylanilin K roztoku 390 mg (1,20 mmolů) 2—[(4— (terc.butoxykarbonylamino)butoxy]-4-methylnitrobenzenu připraveného v předchozím stupni se přidá v 1,5 ml tetrahydrofuranu 39 mg 10% palladia na uhlí a směs se míchá ve vodíkové atmosféře 20 hodin. Směs se sfiltrovala (Celíte), promyla 3 ml tetrahydrofuranu a zahustila na 339 mg (96%) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé
olejovité kapaliny. 1 H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 6, 66 (d, 1H, J
= 8,0 Hz), 6,55 (dd, 1H, J = 2,0 Hz) , 6,49 (d, 1H, J = 8,0
Hz), 4,59 (br s, 1H), 3,98 (t, 2H, J = 6,3 Hz), 3, 19 (q, 2H,
J = 6,6 Hz), 2,21 (s, 3H), 1,82 (m, 2H) , 1, 67 (m, 2H) 1,57
(br s, 2H) a 1,44 (s, 9H) . Hmotové spektrum (MALDI -TOF,
matrice gentisová kyselina). Pro Ci6H26N2O5 vypočteno : 317,2 (M+H); nalezeno: 317,2.
c) N-[2-[4-(terč.Butoxykarbonylamino)butoxy]-4methyl fenyl ]benzensulfonamid K 216 mg (0,734 mmolu)
2- [(4-(terc.butoxykarbonylamino)butoxy]-4-methylanilinu připravenému v předešlém stupni a 101 μΐ (0,918 mmolu) 4methylmorfolinu v 3,0 ml dichlormethanu se přidalo 143 μΐ (0,807 mmolu) benzensulfonylchloridu. Roztok se míchal 45 minut, zředil 30 ml dichlormethanu a promyl 10% kyselinou citrónovou (2 x 30 ml), nasyceným NaHCO3 (2 x 30 ml) a solankou (30 ml). Roztok se sušil (Na2SO4) a zahustil na 342 t· · «
mg světle jantarové pevné látky. Chromatografií v koloně Sep-Pak SPE s 10 g oxidu křemičitého firmy Waters Associates a elucí činidlem ethylacetát-dichlormethan se stoupající koncentrací 0 - 4 % bylo získáno 282 mg (88 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé krystalické pevné látky. ’ΉNMR (300 MHz, CDC13) δ 7,72 (m, 2H) , 7,50 (m, 1H) 7,40 (m,
3H) 6,94 (s, 1H) 6,83 (dd, 1H, J= 8,3, 2,1 Hz), 6,59 (d,
1H, J = 8,3 Hz), 4,54 (br s, 1H) , 3,70 (t, 2H, J = 6,3 Hz),
3,19 (q, 2H, J= 6,5 Hz), 2,27 (s, 3H), 1,62 (m, 2H) , 1,48 (m, 2H) a 1,46 (s, 9H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro C22H30N2O5S vypočteno : 457,2 (M+Na); nalezeno: 457,7.
d) N-[2- (Ν,Ν-Dimethyalmino) ethyl]-N- [2-[4(terc.butoxykarbonylamino)butoxy]-4methylfenyljbenzensulfonamid
K roztoku 82,2 mg (0,189 mmolu) N—[2—[4— (terc.butoxykarbonylamino)butoxy]-4methylfenyl]benzensulfonamidu připraveného v předešlém stupni v 1,5 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se přidalo 78,3 mg (0,567 mmolu) práškového bezvodého uhličitanu draselného a 30 mg (0,208 mmolu) N,Ndimethylaminoethylchlorid hydrochloridu. Po míchání při 50 °C po dobu 21 hodin se směs rozdělila mezi 10 ml ethylacetátu a 10 ml vody. Organická vrstva se promyla vodou (10 ml) a solankou (10 ml), vysušila Na2SO4 a zahustila na 93,7 mg bezbarvého oleje. Chromatografií na koloně Sep-Pak SPE s 10 g oxidu křemičitého firmy Waters Associates a elucí činidlem ethylacetát-dichlormethan koncentrace 50 % bylo získáno malé množství (7,4 mg) nezreagovaných vstupních látek, načež eluce činidlem (10%) methanol - dichlormethan poskytla 67,2 mg (77 % vstupních látek) sloučeniny uvedené v
99 • 9 9 9
9 99 • 9 9 9 9 • 9 9 9
99 · ·
9
999 9 9 9
99 titulku jako bezbarvou pryskyřici. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,67 (m, 2H), 7,53(m, 1H) , 7,43(m, 2H) , 7,ll(d, 1H, J=2,0 Hz), 7,06(dd, 1H, J = 8,4, 1,7 Hz), 6,66(d, 1H, J = 8,4 Hz), 4,53(br s, 1H), 3,4-3,8 (br m, 4H) , 3,04 (q, 2H, J= 6,3 Hz), 2,88 (m, 2H), 2,28 (s, 3H) , 2,22(s, 6H) , 1,46 (s, 9H) a 1,33 (m, 4H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina). Pro C26H39N3O5S vypočteno : 506,3 (M+H), 528,3 (M+Na); nalezeno: 506,5, 528,8.
e) N- [2- (Ν,Ν-Dimethylmíno) ethyl]-N-[2-[[4- (1acetlmldoyl) aminoJbutoxy] - 4-methyl feny 1 ]benzensulfonamid dlhydrochlorid
K roztoku 82,0 mg (0,162 mmolu) N-[2-(N,Ndimethyalmino)ethyl]-N-[2-[4(terc.butoxykarbonylamino)butoxy]-4methylfenyl]benzensulfonamidu připraveného v předešlém stupni v 2,0 ml bezvodého dichlormethanu se přidalo 2,0 ml trifluoroctové kyseliny. Po míchání po dobu 15 minut se roztok zahustil a umístil ve vakuu (0,5 torr/1 hod) za vzniku bezbarvého oleje. Tento zbytek byl v 0,75 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu spojen s 30,0 mg (0,243 mmolu) ethylacetimidát hydrochloridu a 127 μΐ (0,729 mmolu)
N,N-diisopropylethylaminu a tato směs se míchala 20 hodin při pokojové teplotě. Bylo přidáno 10 ml 1N NaOH a směs se extrahovala ethylacetátem (3 x 10 ml). Spojené extrakty se promyly 10 ml směsi solanka - 1N NaOH (9:1), sušily na Na2SO4 a zahustily na 88 mg bledě žluté pryskyřice. Na výše uvedenou pryskyřici v 1,0 ml bezvodého dichlormethanu se působilo 101 μΐ (0,405 mmolu) 4M HC1 v dioxanu a roztok se vakuově zahustil na bledě žlutou pryskyřici. Čtyřnásobné zahuštění z 2,0 ml dichlormethanu a umístění ve vakuu (0,5 torr/3hod) poskytlo 77,0 mg (91 %) pevné bělavé pěny.
• · ···· »· · ·* ·· • · · · • · ·· • · · · • · · · ·» «« ·· ·· • · · * • · ·· • ··· · · • · · ·· ··
Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina) . Pro C23H34N4O3SC1 vypočteno : 447,2 (M+H); nalezeno: 447,3.
Příklad 4
N-Benzyl-N- [ [ [3- (l-acetimidoyl)piperidin-4yl]methylantino] fenyl] benzen sulfonamid
a) N- (3-Nitrofenyl)benzensulfonamid
K 6,17 g (44,7 mmolu) 3-nitroanilinu a 8,41 ml (48,2 mmolu) N, N-diisopropylethylaminu ve 150 ml bezvodého diethyletheru se přidalo 5,14 ml (40,2 mmolu) benzensulfonylchloridu. Směs byla za míchání zahřívána pod zpětným chladičem v dusíkové atmosféře 16 hodin, ochlazena a výsledná dvoufázová směs podrobena krystalizaci z nerozpustného oleje stimulované škrábáním. Po dekantaci etherové vrstvy se získaný pevný produkt rozpustil v 300 ml dichlormethanu a roztok se promyl 2N HC1 (3 x 200 ml) nasyceným NaHCO3 (200 ml), solankou (200 ml), vysušil (Na2SO4) a zahustil na 9,62 g (86 %) sloučeniny uvedené v titulku jako světle hnědá pevná látka. XH-NMR (300 MHz,
CDC13) δ 7,96(m, 2H) , 7,86(m, 2H), 7,41-7, 63 (m, 5H) 7,30(br s, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro Ci2Hi0N2O4S vypočteno : 301,0 (M+Na); nalezeno: 301,1.
b)N-Benzyl-N- (3-nitrofenyl)benzensulfonamíd
K 6,00 g (21,6 mmolu) N-(3-nitrofenyl)benzensulfonamidu z předešlého stupně v 15 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se pod dusíkem přidaly 4,48 g (32,4 mmoly) práškového bezvodého uhličitanu draselného a 2,83 ml (23,8 mmolu) • * 9999 ·* ·· • · · · • · ·· • · · · 9 9
9 9 9
99
99
9 9 9
9 99
9 9 9
9 9
9' 9 9 benzylbromidu. Po míchání po dobu 3,5 hodin se směs rozdělila mezi 200 ml ethylacetátu a 250 ml vody. Vodná vrstva se extrahovala 50 ml ethylacetátu a spojené organické fáze se promyly 1M K2CO3 (2 x 100 ml). K organické fázi se přidalo 50 ml hexanu, potom byla organická fáze promyta vodou (3 x 150 ml), solankou (100 ml), vysušena Na2SO4 a zahuštěna na 8,2 g žluté krystalické látky. Překrystalování z rozpouštědla ethylacetát-hexan dalo 7,45 g (94 %) sloučeniny uvedené v titulku jako krémově zbarvené krystalické látky. XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,06(d, 1H, J = 7,4 Hz), 7,76(s, 1H), 7, 64-7, 67 (m, 3H), 7,51-7,56(m, 2H) ,
7, 38-7, 46 (m, 2H) , 7,21(s, 5H) a 4,77(s, 2H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro C19Hi6N2O4S vypočteno : 369, 1 (M+H) , 391,1 (M+Na), 407,0 (M+K) ; nalezeno: 368,8, 391,3, 407,4.
c) N-Benzyl-N- (3-aminofenyl)benzensulfonamid K 3,01 g (8,17 mmolu) N-benzyl-N-(3nitrofenyl^benzensulfonamidu připraveného v předchozím stupni v 60 ml směsi methanol-tetrahydrofuranu (1:1) se přidalo 200 mg 10% palladia na uhlí. Po míchání směsi v atmosféře vodíku po dobu 1,7 hodin se přidalo dalších 200 mg 10% palladia na uhlí a míchání pokračovalo dalších 2,5 hodiny. Filtrace přes Celit a zahuštění poskytlo tmavozelenou pryskyřici, jež se rozpustila v ve 40 ml směsi ethylacetát-hexan (poměr 1:1), přefiltrovala přes Celit a zahustila na 2,9 g žluté pevné látky. Překrystalování z rozpouštědla ethylacetát-ether poskytlo 2,21 g (80 %) sloučeniny uvedené v titulku jako světle oranžový krystalický prášek. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,68-7,71(m, 2H), 7,56-7, 62(m, 1H), 7,46-7,51(m, 2H), 7,18-7,2(m, 5H), 6,97(t, 1H, J = 8,0 Hz), 6,58(dd, 1H, J = 8,0, 1,6 Hz), 6,47 ·· ·· • · ♦ * • » · « • · · · * » · · · *« ·· ·· ·· ·· · · · • ♦ · »· ·· (t, 1H, J = 2,1 Hz), 6,32(dd, 1H, J = 8,0, 1,3 Hz) a 4,70(s, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro Ci9Hi8N2O2S vypočteno : 339, 1 (M+H) , 361,1 (M+Na); nalezeno: 339,5, 361,5.
d) N-Benzyl-N-[[3- (N-terc.butoxykarbonylpiperidin-4yl)karbonylamino]-fenyl ]benzensulfonamid
Ke 149 mg (0, 650 mmolu) Nterc.butoxykarbonylisonipekotové kyseliny připravené ve stupni (a) příkladu 1 a 287 mg (0,650 mmolu) Castrova reakčního činidla benzotriazol-1yloxytris(dimethylamino)fosfoniumhexafluorfosfátu(BOP) v 1,5 ml bezvodého Ν,Ν-dimethylformamidu se přidalo 155 μΐ (0,887 mmol) N,N-diisopropylethylminu a směs se pod dusíkem míchala 5 minut. Byl přidán roztok 200 mg (0,591 mmolu) N-benzyl-N(3-aminofenyl)benzensulfonamidu, připraveného v předchozím stupni, v 0,5 ml Ν,Ν-dimethylformamidu. Po míchání po dobu 16 hodin se přidalo 10 ml nasyceného roztoku NaHCO3. Směs se rozdělila mezi 25 ml ethylacetátu a 25 ml vody. Organická vrstva se promyla 10% citrónovou kyselinou (2 x 20 ml), solankou (20 ml) a vysušila (Na2SO4) . Zahuštění poskytlo 360 mg žluté pryskyřice,jež byla chromatograficky zpracována na koloně Sep-Pak SPE s 10 g oxidu křemičitého firmy Waters Associates. Eluce činidlem ethylacetát-dichlormethan s koncentračním gradientem 5-10 % poskytla 268 mg (82 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé pěny. 1H-NMR (300
MHz, CDC13) δ 7,56-7, 66 (m, 4H) , 7,47(m, 2H) , 7, 09-7,22 (m,
8H), 6, 60 (br d, 1H, J = 8,0 Hz), 4,70(s, 2H, ) 4,14(br s,
2H), 2,74(br t, 2H, J = 12 Hz), 2,24-2,34 (m, 1H) , 1,84 (br s, 1H), 1,81( br s, 1H) , l,69(td, 2H, J = 12,2, 4,1 Hz) a 1,44 (s, 9H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina). Pro C30H35N3O5S vypočteno : 450, 6 (M-BOC+2H) ;
·· · ·· • · ·«·· * ·· «« ·9 ·· • · · · » · · · • V ·· · · ·· • « > · · *·· · 9
9 9 9 9 9 9
99 99 99 nalezeno: 450,3.
e) N-Benzyl-N-[[[3- (1-terc .butoxykarbonyl) piperidin-4yljmethylamíno] -fenyl Jbenzensulfonamid
Ke 404 μΐ (0,807 mmolu) roztoku 2M borohydridu lítného v tetrahydrofuranu se přidalo 1,0 ml tetrahydrofuranu, potom 204 μΐ (1,61 mmolu) chlortrimethylsilanu. Po míchání po dobu 4 minuty se přidalo 148 mg (0,269 mmolu) N-benzyl-N-[[3-(1terc.butoxykarbonylpiperidin-4-yl)karbonylamino]fenyl]benzensulfonamidu připraveného v předchozím stupni ve 2,0 ml tetrahydrofuranu a směs se 2 hodiny zahřívala pod dusíkem při 50 °C. Po zastavení reakce pomocí 0,16 ml MeOH se přidal 1,0 ml roztoku 2N NaOH, směs se 10 minut míchala a extrahovala ethylacetátem (2 x 10 ml). Spojené extrakty byly promyty solankou, vysušeny Na2SO4 a zahuštěny na 150 mg světle žluté pryskyřice, jež byla chromatograficky zpracována na koloně Sep-Pak SPE s 10 g oxidu křemičitého firmy Waters Associates. Eluce činidlem 5% ethylacetátdichlormethan (koncentrace 5 %) poskytla 143 mg (99 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvé pryskyřice. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,70-7,74 (m, 2H), 7,59(m, 1H) , 7,48(m, 2H), 7,22(m, 5H), 6,95(t, 1H, J= 8,0 Hz), 6,40(dd, 1H, J = 8,1, 2,2 Hz), 6,25 (t, 1H, J = 2,1 Hz), 6,17 (dd, 1H, J= 7,2, 1,8 Hz), 4,70(s, 2H) , 4,ll(br s, 2H) , 3,66(br s,
1H), 2,85 (br s, 2H), 2,66(t, 2H, J= 13,3 Hz), l,65(d, 2H,
J = 13,3 Hz), l,47(s, 9H) a l,09(m, 2H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina) . Pro C30H37N3O4S vypočteno : 435, 6 (M-BOC+H); nalezeno: 435, 6.
f) N-Benzyl-N-[[ [3-(1-acetimidoyl) piperidin-4ylJmethylamino]fenylJbenzensulfonamid
Ke 140 mg (0,261 mmolu) N-benzyl-N-[[[3-(153
• - • · ·· • · · · • · · • · ·· ··· « · • · » • ··· • · ·· ·
• · · ·· ·· terč.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methylamino]fenyl]benzensulfonamidu připravenému v předchozím stupni v 3,0 ml bezvodého dichlormethanu se přidalo 0,75 ml trifluoroctové kyseliny. Po míchání po dobu 15 minut se roztok zahustil a umístil pod vakuum (0,1 torr/1 hod.) do vzniku bezbarvé pryskyřice. Na tento zbytek v 1,0 ml bezvodého N,N-dimethylformamidu se působilo 64,5 mg (0,522 mmolu) ethylacetimidát hydrochloridu a 182 μΐ (1,04 mmolu)
N, N-diisopropylethylaminu a směs se míchala 48 hodin. Potom se přidala další dávka 64,5 mg (0,522 mmolu) ethylacetimidáthydrochloridu a 91,0 μΐ (1,04 mmolu) N,Ndiisopropylethylaminu a směs se míchala při 50 ’C 20 hodin. Ke směsi se přidalo 20 ml ethylacetátu a roztok se promyl
O, lN NaH (2 x 20 ml). Spojené vodné vrstvy se extrahovaly ethylacetátem (4 x 10 ml) a pět spojených organických vrstev se promylo 25 ml solanky, vysušilo na Na2SO4 a zahustilo na 91,4 mg světle žluté pryskyřice. Tento materiál se překrystalizoval a dal tři dávky z rozpouštědla methanolethylacetát a dvě dávky z rozpouštědla methanol-ethylacetátdiethylether s výtěžkem 54,8 mg (44 %) sloučeniny uvedené v titulku jako smetanově zbarveného prášku. XH-NMR (300 MHz,
CDC13) δ 7,65-7,72(m, 3H), 7,54-7,58(m, 2H), 7,18-7,24(m,
5H), 6,90(t, 1H, J = 8,1 Hz), 6,46(dd, 1H, J = 8,2, 2,0 Hz) 6,25 (t, 1H, J = 2,1 Hz), 6,13 (d, 1H, J = 7,8, Hz), 4,73(s, 2H), 4,02(m, 2H) , 3,05-3,25(m, 2H) , 2,88(d, 2H, J = 6,2 Hz)
2,31(s, 3H) , l,89(m, 3H) a l,30(m, 2H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina). Pro C27H32N4O2S vypočteno : 477,2 (M+H); nalezeno: 477,2.
Příklad 5
Hydrochlorid 3- [ [ (l-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5• 9 « · · ··· 4 · · · ······ · · · · ··· · · • ···· · · · « · « · · · · · · · methylfenylesteru kyseliny 3-chlorbenzensulfonové
a) 3-Hydroxy-5-methylfenylester 3-chlorbenzensulfonové kyseliny
Monohydrát orcinu (1,42 g, 10 mmolu) a 3chlorbenzensulfonylchlorid (2,43 g, 11 mmolu) se smíchaly v 30 ml nasyceného NaHCO a 30 ml diethyletheru. Dvoufázová směs se intenzivně míchala 2 dny při pokojové teplotě. Po přidání 50 ml vody ke směsi byla směs extrahována ethylacetátem (3 x 50 ml). Potom byla organická fáze promyta solankou (2 x 50 ml) a vysušena nad Na2SO4. Rozpouštědlo bylo vakuově odtaženo, zbytek byl přečištěn sloupcovou flash chromatografií (2% ethylacetát v methylenchloridu) a poskytl sloučeninu uvedenou v titulku jako světle žlutou kapalinu (2,08 g, &?%.) 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,24(s, 3H) ,
5,32(s, 1H), 6,33(t, 1H, J=2,2 Hz), 6,40(s, 1H), 6,57(s, 1H), 7,48(t, 1H, J =8,0 Hz), 7,65(m, 1H) , 7,73(m, 1H) a 7,86(t, 1H, J = í, 8 Hz) .
b) 3-[[N- (terč. Butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5methylfenylester kyseliny 3-chlorbenzensulfonové
Diethylazodikarboxylát (349 mg, 2,0 mmolu) se přidal k roztoku 3-hydroxy-5-methylfenylesteru 3-chlorbenzensulfonové kyseliny (600 mg, 2,0 mmolu) připravenému v předchozím stupni, N-terc.butoxykarbonyl-4-piperidinmethanolu (430 mg, 2,0 mmolu) připravenému ve stupni (b) příkladu 1 a trifenylfosfinu (525 mg, 2,0 mmolu) v tetrahydrofuranu (20 ml) při 0 °C. Směs se při 0 °C míchala 2 hodiny a při pokojové teplotě 3 hodiny. Reakce byla zastavena přídavkem vody (50 ml), následovala extrakce ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se promyla nasyceným NaHCO3 (2 x 50 ml), solankou (2 x 50 ml) a vysušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se • · • · · ··· « · • · · ·· ·· vakuově odtáhlo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát/hexan, 1:3) a poskytl sloučeninu uvedenou v titulku jako bezbarvou kapalinu (800 mg, 81 %) . ^-NMRPOO MHz, CDC13) 8 1,24 (m, 2H) , l,47(s, 9H), l,75(m, 2H), l,90(m, 1H), 2,25(s, 3H) , 2,73(t, 2H, J = 12,5 Hz), 3,68(d, 2H, J = 3,1 Hz), 4,13(m, 2H) , 6,34(t, XH, J = 2,2 Hz), 6,39(s, 1H), 6,61 (s, 1H) , 7,49(t, 1H, J=7,8Hz),
7,63 (d, 1H, J = 0,7 Hz), 7,75(d, 1H, J = 3,9 Hz) a 7,86 (t, 1H, J = 1,8 Hz) .
c) Hydrochlorid 3-[[ (1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy] 5-methylfenylesteru 3-chlorbenzensulfonové kyseliny
3-[[N-(terc.Butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylester kyseliny 3-chlorbenzensulfonové (496 mg,
1,0 mmolu) připravený v předchozím stupni se 2 hodiny při pokojové teplotě míchal s 4N HC1 v 1,4-dioxanu (15 ml). Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se několikrát odpařoval s methylenchloridem až byla získána aminhydrochloridová sůl. Na sůl aminhydrochloridu se v dalším působilo triethylaminem (1,0 ml) a ethylacetimidáthydrochloridem (247 mg, 2,0 mmolu) v N,Ndimethylformamidu (10 ml) a následovalo míchání přes noc při pokojové teplotě. N,N-dimethylformamid se vakuově odtáhl. Zbytek se rozdělil mezi methylenchlorid (200 ml) a 10% K2CO3 (50 ml). Organická fáze se promyla 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a vysušila nad K2CO. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo, na zbytek se působilo HC1 v methanolu (30 ml) a pak se vakuově zahustil. Pak se zbytek chromatograficky přečistil (15% methanol v methylenchloridu) a překrystaloval (ze směsi methanol-ethylacetát) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílých krystalů. (275 mg, 58 %) . XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6) 6 l,34(m, 2H) , 1,84 (d, 2H, J = 7 Hz), 2,06(m, 1H) , ·· —.......···'
W ···· · · · · • · ···· · · · · ····«· · · · · · · · · · • ···· · · * • · ·· *· ·· *·
2H, J = 3,1 6,5 Hz) ,
1H), 7,72(t, >(m, 2H),
2,22(s,3H), 2,28(s, 3H), 3,16(m, 2H), 3,78(d,
Hz), 3,93(d, 1H, J = 6,5 Hz), 4,12(d, 1H, J =
6,43(t, 1H, J = 2,1 Hz), 6,49(s, 1H), 6,77 (s,
1H, J = 7,5 Hz), 7,85(t, 1H, J = 1,4 Hz), 7,9;
8,67(br s, 1H) a 9,24 (br s, 1H). Hmotové spektrum (MALDITOF, matrice sinapinová kyselina) , pro C21H25N2O4SCI vypočteno: 437,1 (M+H); nalezeno: 436,8.
Příklad 6
Hydrochlorid 3- [ (3-aniidinofenyl)iaethoxy] -5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonove kyseliny
a) 3-[(3-Kyanfenyl)methoxy]-5-methylfenylester kyseliny 2-chlorbenzensulfonové
Diethylazodikarboxylát (349 mg, 2,0 mmolu) se přidal k roztoku 3-hydroxy-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (900 mg, 3,0 mmolu) připraveného ve stupni (c) příkladu 1, dále 3-kyanbenzylalkoholu (400 mg, 3,0 mmolu, viz Yoon a další, (J.Org.Chem., sv. 38, s. 2786-2792, 1973), a trifenylfosfinu (525 mg, 2,0 mmolu) v tetrahydrofuranu (20 ml) při 0 °C. Směs se míchala 2 hodiny při 0 °C a 3 hodiny při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou pro ukončení reakce (50 ml)a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se promyla nasyceným NaHCO3 (2 x 50 ml) a vysušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát:hexan, poměr 2:1) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé pevné látky (1,10 g, 89 %). 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,26(s, 3H) , 4,99(s, 2H) , 6,55(t, 1H, J =
2,3 Hz), 6,60(t, 1H, J = 0,7 Hz), 6,67(t, 1H, J = 0,7 Hz), 7,39(m, 1H), 7,50(t, 1H, J = 7,7 Hz), 7,61(m, 5H) 7,96(d, • · • · }·· ·· ·· ·· • ·· · · ·· 4 • « t · · · · ··· ···· · · · · · · ··· · 4 • ···· · · 4 ♦ *· · É· ·· ·· ··
1H, J = 1,3 Hz) .
b) Hydrochlorid 3-[ (3~amidinofenyl)methoxy]
-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
K roztoku 3-[(3-kyanfenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové (207 mg, 0,5 mmolů) připraveného v předchozím stupni v methylenchloridu (10 ml) se při 0 °C přidala 37% HC1 v ethanolu (10 ml). Směs se nechala stát tři dny při 0 °C. Rozpouštědlo se vakuově odpařilo a zbytek se několikrát odpařil společně s methylenchloridem. Zbytek se rozpustil v ethanolu (10 ml) a při 0 ’C se přidal uhličitan amonný (192 mg, 2,0 mmolů).
Směs se přes noc míchala při pokojové teplotě. Ke směsi se přidal methylenchlorid (150 ml). Roztok v methylenchloridu se promyl 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a sušil nad K2CO3. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo, přidala se HC1 v methanolu (30 ml) a rozpouštědlo se opět vakuově odstranilo. Zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (10% methanolu v methylenchloridu) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku jako bílé pevné látky (112 mg, 48 %) . 1H-NMR (300 MHz, DMSO- d6) δ 2,23(s, 3H) , 5,11 (s, 2H^ 6,54(s, 1H) ,
6,56(s, 1H) , 6,56(s, 1H) , 6,88(s, 1H) , 7,58(t, 1H, J= 6,5 Hz), 7,61(t, 1H, J = 12,2 Hz), 7,66 (d, 1H, J = 3,9 Hz),
7,73-7,95(m, 5H) a 9,40(br s, 4H). Hmotové spektrum (MALDITOF, matrice sinapinová kyselina) , pro C2iHi9N2O4SC1 vypočteno: 431,1 (M+H), 453,1 (M+Na); nalezeno: 431,0,
452,9.
Příklad 7
Hydrochlorid 3- [ [3- (N-hydroxy) amidinofenyl]methoxy] -5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny • · • · · · · • · · · · · • · ··· · · • · · · ·· ·· ··
K roztoku 3-[(3-kyanfenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové (207 mg, 0,5 mmolu) připravenému ve stupni (a) příkladu 6 v methylenchloridu (10 ml) se při 0 °C přidal 37% roztok HC1 v ethanolu (10 ml). Směs se nechala 3 dny stát při 0 °C. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo a zbytek se několikrát odpařil společně s methylenchloridem. Potom se zbytek rozpustil v ethanolu (10 ml) a nechal zreagovat s hydroxylaminhydrochloridem (140 mg, 2,0 mmolu) a Na2CO3 (106 mg, 1,0 mmolu). Reakční směs se 2 dny míchala při pokojové teplotě. Ke směsi se přidal methylenchlorid (150 ml), promyl se 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a sušil nad K2CO3. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo, přidala se HC1 v methanolu (30 ml) a rozpouštědlo se znovu vakuově odstranilo. Zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát/methylenchlorid, poměr 1:1) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé pěny (95 mg, 39 %) . 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,25(s, 3H) , 4,89 (br s, 1H) , 4,98(d, 2H, J= 10,7 Hz), 5,58 (br s, 1H) , 6,15(br s, 1H), 7,33-7,64(m, 6H), 7,76-7,83(m, 1H) a 7,92(d, 1H, J=
4,0 Hz); Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina), pro C2iHi9N2O5SC1 vypočteno: 447, 1 (M+H), 469,1 (M+Na); nalezeno: 447,1, 469,2.
Příklad 8
Hydrochlorid 3- [ [ (1 -acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5methylfenylesteru 2,3-dichlorbenzensulfonové kyseliny
a) 3-Hydroxy-5-methylfenylester 2,3-dichlorbenzensulfonové kyseliny
Roztok monohydrátu orcinu (0,71 mg, 5,0 mmolu) a 2,3dichlorbenzensulfonylchloridu (1,23 g, 5,0 mmolu) v • · · · · ·· · · * 4 4 4 4 4 4 4 4 • · 4 · · » 4 4·· •44444 44 44 4444 4 • 4444 444 nasyceném NaHCO3 (20 ml) a diethyletheru (20 ml) se 2 dny míchal při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou pro zastavení reakce (50 ml) a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se promyla solankou (2 x 50 ml) a vysušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odpařilo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid a 2% ethylacetát v methylenchloridu) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku jako světle žlutý olej (0,89 g, 55 %) . 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,24 (s, 3H) ,
5,23(s, 1H), 6,43(t, 1H, J=2,2Hz), 6,54(d, 2H, J=l,l Hz), 7,34(t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,75(dd, 1H, J = 0,8, 4,0 Hz) a 7,91(dd,lH, J = 0,8, 4,0 Hz).
b) 3-[[N- (terč.Butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5methylfenylester kyseliny 2,3-dichlorbenzensulfonové
K roztoku 3-hydroxy-5-methylfenylesteru 2,3dichlorbenzensulfonové kyseliny (644 mg, 2,0 mmolu) připraveného v předchozím stupni se při 0 °C přidal diethylazodikarboxylát (349 mg, 2,0 mmolu), Nterc.butoxykarbonyl-4-piperidinmethanol (430 mg, 2,0 mmolu) připravený ve stupni (b) příkladu 1 a trifenylfosfin (525 mg, 2,0 mmolu) v tetrahydrofuranu (20 ml). Směs se míchala 2 hodiny při 0 °C a 3 hodiny při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou (50 ml) pro zastavení reakce a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se promyla nasyceným NaHCO3 (2 x 50 ml), solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát/hexan, poměr 1:3) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvého syrupu (930 mg, 88 %). 7ΗNMR(300 MHz, CDC13) δ 1,26 (m, 2H) , 1,47 (s, 9H), l,75(m, 2H) , • · ··« · · · · ···· • · · · · ·» · · ·· • ···· · · · · · « ··· · · l,90(m, 1H), 2,25(s, 3H), 2,73(t, 2H, J = 2,0 Hz), 3, 68 (d, 2H, J = 3,2 Hz), 4,13(m, 2H) , 6,47(d, 1H, J = 1,1 Hz), 6,53(d, 1H, J = 0,4 Hz), 6,59(s, 1H), 7,34(t, 1H, J = 8,2 Hz), 7,75(m, 1H) a 7,92(m, 1H) .
c) Hydrochlorid 3-[[ (l-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy] 5-methylfenylesteru 2,3-dlchlorbenzensulfonové kyseliny
3- [ [N-(terc.Butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylester kyseliny 2,3-dichlorbenzensulfonové (530 mg, 1,0 mmol) připravený v předchozím stupni se 2 hodiny při pokojové teplotě míchal s 4N HC1 v 1,4 dioxanu (10 ml). Rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu a zbytek se několikrát odpařil společně s methylenchloridem za vzniku aminhydrochloridu. Přidal se triethylamin (0,5 ml) a ethylacetimidáthydrochlorid (247 mg, 2,0 mmolu) k roztoku výše uvedeného aminu v N,N dimethylformamidu (10 ml) a reakční směs se míchala 2 dny při pokojové teplotě. N,N dimethylformamid se odstranil ve vakuu a zbytek se rozdělil mezi methylenchlorid (200 ml) a 10% K2CO3 (50 ml) . Organická fáze se promyla 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a vysušila nad K2CO3.
Po vakuovém odpaření rozpouštědla se přidala HC1 v methanolu (30 ml) a roztok se zahustil. Zbytek byl pak překrystalován z rozpouštědla methanol-ethylacetát na bílé krystaly sloučeniny uvedené v titulku (420 mg, 83 %) . ^-NMRÍSOO MHz, DMSO-d6) δ l,34(m, 2H) , l,84(d, 1H, J= 8,6 Hz), 2,04(m,
1H), 2,22(s, 3H), 2,29(s, 3H) , 3,16 (m, 2H) , 3,78(d, 2H, j = 3,2 Hz), 3,92(d, 1H, J = 7,0 Hz), 4,15(d, 1H, J = 7,0 Hz), 6,46(t, 1H, J=2,2Hz), 6,52(s, 1H) , 6,77 (s, 1H) , 7,62(t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,96(d, 1H, J = 4,0 Hz), 8,14(d, 1H, J =
4,0 Hz), 8,74(br s, 1H) a 9,32(br s, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina) , pro C2iH24N2O4SCl2 vypočteno: 471,1 (M+H); nalezeno: 471,1.
• ·· ·· ·· ·· v · · · · · « · # * · · *·· · «·· ···· · · V · · 4 ··· · · * · · » · ··· • · <*· ·· ·· «·
Příklad 9
Hydrochlorid 2-chloro-N-[[3-[(l-acetimidoyl)piperidin-4yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu
a) 3-(Trifluormethyl)-5-nitrofenol
3-Methoxy-5-nitrobenzotrifluorid (5 g, 23 mmolu) se rozpustil v bezvodém methylenchloridu (100 ml) a ochladil na -80 °C v atmosféře dusíku. K tomuto roztoku se kapačkou přidal 1M roztok BBr3 v methylenchloridu (68 ml, 68 mmolu). Tento roztok se nechal ohřát na pokojovou teplotu a tři dny se míchal. Pomalu se přidávala voda ke směsi a dobře se míchala, aby eliminovala nadbytek BBr3. K této směsi se přidal ether (500 ml). Organická vrstva se oddělila a extrahovala 2N NaOH (240 ml). Alkalický extrakt se neutralizoval zředěnou HC1 a extrahoval diethyletherem (3 x 300 ml). Etherové extrakty se spojily, promyly nasyceným roztokem NaCl a sušily nad bezvodým MgSO4. Odpaření diethyletheru poskytlo hnědožlutý olej, který byl zpracován chromatograficky ve sloupci s oxidem křemičitým na 1,6 g (34 %) žluté pevné látky.
XH-NMR (CDC13/CD3OD; 300 MHz) δ 7, 38 - 7,40(m, 1H), 7,82(t,
1H, J = 2,2 Hz) a 7, 95-7,96 (m, 1H) .
b) 3-[ [ 1- (terč. Butoxykarbony1)piperldin--4-yl]methoxy] -5nitrobenzotrifluorid
- Sloučenina uvedená v titulku se připravila zpracováním 3-(trifluormethyl)-5-nitrofenolu (1,47 g, 7,1 mmolu) z předchozího stupně způsobem analogickým stupni (d) příkladu 1 na 2,17 g (76 %) olejovité látky. 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ l,24-l,38(m, 2H) , l,48(s, 9H) , 1, 82-1, 87 (m, 2H), 1,9662 • · * · • · ·* • · · · « • · · · ·· ·♦ • » · · • * · · ·· t · · • · · ·· «·
2,10(m, 1H), 2,73-2,81 (m, 2H) , 3,93(d, 2H, J= 6,3 Hz),
4,09-4,21 (m, 2H) , 7, 45-7, 46(m, 1H) , 7,89(t, 1H, J= 2,2 Hz)
8, 07-8, 08 (m, 1H).
c) 2-Chloro-N-[[3-[(1-terč.butoxykarbonyl )piperidin-4yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamid
Roztok 3-[(piperidin-4-yl)methoxy]-5nitrobenzotrifluořidu (2,17 g, 200 ml) v methanolu, připraveného v předchozím stupni, a 10% Pd/C (300 mg) se míchaly 20 hodin ve vodíkové atmosféře.Filtrací se oddělil katalyzátor a methanol se odpařil za vzniku bílé pěny. Pěna se přes noc usušila ve vysokém vakuu a rozpustila v bezvodém methylenchloridu (10 ml). Methylenchloridový roztok se ochladil v ledové lázni pod dusíkem a přidal se 2chlorbenzensulfonylchlorid (1,17 g, 5,50 mmolu) a Nmethylmorfolin (6,05 mmolu) a směs se nechala ohřát na pokojovou teplotu. Směs se 2 dny míchala, pak se přidal Nmethylmorfolin (200μ1) a směs se 3 hodiny zahřívala pod zpětným chladičem. Roztok v methylenchloridu se zředil dalšími 50 ml methylenchloridu a extrahoval 10% citrónovou kyselinou a nasyceným NaHCO3. Oddělila se organická vrstva, promyla se nasyceným NaCl a usušila nad bezvodým MgSO4. Odpařením methylenchloridu vznikla olejovitá kapalina, která byla zpracována chromatograficky ve sloupci s oxidem křemičitým na 2,4 g (80 %) bílé pevné látky. XH-NMR (CDC13, 300 MHz) δ l,17-l,31(m, 2H), l,47(s, 9H), l,75-l,80(m, 2H) , l,83-l,98(m, 1H) , 2, 69-2,78(m, 2H) , 3,74(d, 1H, J= 6,2 Hz), 4,09-4,16(m, 2H), 6,81(bs, 1H), 6, 87-6, 89(m, 1H), 6,90(br s, 1H), 7,34-7,43(m, 2H), 7,50-7,54(m, 2H), 8,05-8, 08 (m,
1H) .
d) Trifluoracetát 2-chlor-N-[ [3-[piperidin-4-yl]methoxy]-5trifluormethyl fenyl ] benzensulfonami du ·· 99 « · ♦ ·
9 ·· • · « 9 9 • 9 9 9 • 9 99
99. ,· .·:·-·.
9 '9
99
999 9 9
9 9
9 9
2-Chlor-N-[[3-[(1-terc.butoxykarbonyl)piperidin-4yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamid (0,33 g, 0,64 mmolu) reagoval s 25% trifluoroctovou kyselinou v methylenchloridu (5 ml) 0,5 hod při teplotě okolí. Reakční směs se odpařila do sucha a třikrát azeotropicky oddestilovala s acetonitrilem. Zbytek se dvakrát rozetřel (trituroval) s hexanem a diethyletherem a přes noc umístil pod vysoké vakuum. Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina), pro C19H20N2O3SCIF3 vypočteno: 449,1 (M+H); nalezeno: 449,8.
e) Hydrochlorid 2-chlor-N-[[3-[ (l-acetimidoyl)piperidin-4yljmethoxy] -5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu
Trifluoracetát 2-chlor-N-[[3-[piperidin-4-yl]methoxy]5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu ze stupně (d) tohoto příkladu se rozpustil v N,N-dimethylformamidu (10 ml) a zreagoval s ethylacetimidáthydrochloridem (0,16 g, 1,28 mmolu) a triethylaminem (0,27 ml, 1,92 mmolu). Reakční směs se míchala přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se zředila vodou (bod zákalu) pro iniciaci krystalizace. Pevná fáze se přes noc sušila pod vysokým vakuem a poskytla 0,218 g sloučeniny uvedené v titulku. XH-NMR (DMSO-d6, 300 MHz) δ l,33(m, 2H), l,84(d, 3H), 2,04-2,12(m, 1H), 2,26 (s, 3H),
3,10-3,33(m, 2H), 3,74(d, 2H), 3,91-4,02(m, 2H), 6,32(br s, 1H), 6,57(s, 1H), 6, 67 (br s, 1H) , 7,28-7,42 (m, 3H) , 7,93(dd,
1H), 8,48(br s, 1H) a 9,04 (br s, 1H) .
Přiklad 10
2-Chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3-[(1acetimidoyl)piperidin-4-ylJmethoxy]-5trifluormethylfehyl]benzensulfonamid
9 ·· ♦
• · 9 · ··
9 9 9
9 9
9 9 · 9 9
9 9
99
a) 2-Chloro-N- (5-ethoxykarbonylpentyl) -N-[[3-[ (1terc. butoxykarbonyl)piperidin-4-yl Jmethoxy] -5trifluormethyl f enyl ]benzensulfonamid
Na roztok 2-chloro-N-[[3-[(lterc.butoxykarbonyl)piperidin-4-yljmethoxy]-5trifluormethylfenyl]benzensulfonamid (0,6 g, 1,1 mmolu) v N,N-dimethylformamidu (10 ml) se působilo uhličitanem draselným (0,15 g, 1,1 mmol) a ethyl-6-bromhexanoátem (0,20 ml, 1,1 mmolu). Reakční směs se dva dny zahřívala na 50 - 60 °C. Reakční směs se zředila vodou, neutralizovala 5% chlorovodíkovou kyselinou a třikrát extrahovala ethylacetátem. Ethylacetát se vypral solankou, vysušil na Na2SO4 a odpařil do sucha. Zbytek se přečistil extrakcí v pevné fázi za použití kolony (10 g) Sep-Pak firmy Waters Associates, eluce byla provedena kombinací 20% ethylacetáthexany s výtěžkem 0,70 g, 92 %. 1H-NMR (CDC13, 300 MHz) δ l,26-l,43(m, 2H) , l,44(s, 9H) , l,45-l,96(m, 9H) , 2,24(t,
2H), 2,72(br t, 2H) , 3,73-3,81(m, 4H) , 4,05-4,16(m, 4H) , 6,89(br s, 1H) , 6,96(m, 2H) , 7,24(dt, 1H) , 7,40-7, 50(m, 2H) a 7,81 (dd, 1H) .
b) 2-Chloro-N- (5-karboxypentyl) -N-[[3-[ (1terc.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy] -5trifluořmethylfenylJbenzensulfonamid
2-Chloro-N-(5-ethoxykarbonylpentyl)-N-[[3-[(1terc.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5trifluormethylfenyl]benzensulfonamid připravený v předchozím stupni (0,70 g, 1 mmol) se rozpustil ve směsi dioxan/voda (4:1) (12 ml) a pak se na něj působilo monohydrátem hydroxidu lithného (0,042 g, 1 mmolu). Tato reakční směs se • * * · ♦ · φ« · · ··· · * · · · f · « • * · «·#« · a ·· • ··«· * ♦ « · · * ··· · ♦ • · * · « · ··» ··· * ·» *· ♦· «· dny míchala při teplotě okolí, pak se přes noc zahřívala na 50 °C. Přidala se další dávka 0,042 g monohydrátu hydroxidu lithného a teplota se udržovala 5 hodin na 50 °C. Reakční směs se extrahovala methylenchloridem. Spojené methylenchloridové extrakty se promyly solankou, vysušily na Na2SO4 a odpařily do sucha na výtěžek 0,68 g sloučeniny uvedené v titulku. 1H-NMR(CDC13, 300 MHz) δ 1,20-2,00 (m,
20H), 2,32(t, 2H), 2,75(brt, 2H) , 3,76-3, 84(m, 4H) ,
4,16(m, 2H), 6,92(br s, 1H) , 6,99(m, 2H) , 7,28(dt, 1H) , 7,44(dd, 1H), 7,49(dd, 1H) a 7,84(dd, 1H
c) 2-Chloro-N- (5-karboxypentyl) -N-[[3-[ (1acetimidoyl)piperidin-4-yl Jmethoxy] -5triflu ořme thyl f enyl ] benzensul f onami d
Roztok 2-chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3-[(1terc.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu připraveného v předchozím stupni (0,68 g, 1 mmol) v 25% trifluoroctové kyselině v methylenchloridu (15 ml) se 0,5 hodiny míchal při teplotě okolí. Reakční směs se odpařila do sucha, třikrát azeotropicky oddestilovala s acetonitrilem, dvakrát roztírala s hexanem a dvakrát se směsí hexany/diethylether v poměru 2:1. Zbytek se umístil ve vysokém vakuu a poskytl 0,6 g 2-chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3-[piperidin-4yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamid trifluoracetát.
Na roztok 2-chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3-[piperidin4-yl]methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamid trifluoracetátu (0,3 g, 0,5 mmolu) v N,N-dimethylformamidu (10 ml) se působilo triethylaminem (0,21 ml, 1,5 mmolu) a ethylacetimidáthydrochloridem (0,13 g, 1 mmolu) při teplotě
44 44 •4 » * · 4 * 4 4 4 4
4*4 *444 4 4 4* ·«*· * 4 4 4 4 4 44* 4 4
4 *44* 44* *44 * 44 44 44 44 místnosti. Reakční směs se zředila vodou za vzniku olejovité gumy. Vodná vrstva se slila, k olejovité gumě se přidalo malé množství methanolu, pak se zředila vodou za účelem krystalizace. Pevná fáze se sfiltrovala, promyla vodou a usušila pod vysokým vakuem na výtěžek 7,4 mg sloučeniny uvedené v titulku ve formě bílé pevné látky. ^-NMR(CDC13, /TFA, 300 MHz) δ 1,26-2,44(m, 16H), 2,9-3,4(m, 2H), 3,624,55(m, 6H), 6,90(d, 1H) , 7,04-7,08 (m, 2H) , 7,33(dt, 1H) , 7,55(m, 2H) a 7,84(d, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice ot-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina), pro C27H33N3O5SC1F3 vypočteno: 604,2 (M+H) ; nalezeno: 604, 3.
Příklad 11
Hydrochlorid 3 - [ [ 1-acetimidoyl) piperidin-3-yl ] methoxy] -5 methoxyfenylesteru 1-(5-(Ν,Ν-dimethylamino)naftalensulfonove kyseliny
a)3-Hydroxy-5-methoxyfenylester 1-(5- (Ν,Νdimethylamino) naftalensulfonové kyseliny
Dvoufázový roztok 1,08 g (7,78 mmolu) 5methoxyresorcinu, 2,10 g (7,78 mmolu) dansylchloridu, 30 ml diethyletheru a 30 ml nasyceného hydrogenuhličitanu sodného se přes noc intenzivně míchal při pokojové teplotě. Reakce se zastavila úpravou pH na 7 ústojem, směs se extrahovala diethyletherem, vysušila MgSO4 a přečistila sloupcovou flash chromatografií (1-2% ether/methylenchlorid), jež poskytla 605,5 mg (21 %) sloučeniny uvedené v titulku jako světle žlutého prášku. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,59(d, 1H,
J = 8,5 Hz), 8,43(d, 1H, J = 8 Hz), 8,12(dd, 1H, J = 1,7 Hz), 7,66(dd, 1H, J = 8, 8,5 Hz), 7,46(dd, 1H, J = 7,4, 8,5 Hz), 7,25(d, 1H, J = 7,5 Hz), 6,20(t, 1H, J = 2,2 Hz), • · ·· ·· 4« 4 » · · • · · · · *· ·4·4 * » » · • » « · · · «4» * · ♦ 4 4 ·« • · · • · • ·· 4 • · ·· *
··
4· · ·
6,04 (t, J = 2,2 Hz), 6,01(t, 1H, J = 2,2 Hz), 5, 62 (br s,
1H), 3,55(s, 3H) a 2,99(s, 6H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina) , pro C19Hi9NO5S vypočteno: 374,1 (M+H), 396,1 (M+Na); nalezeno: 373,7,
395,7.
b) N-(terč.Butoxykarbonyl)-3 piperidinmethanol
K roztoku 3-piperidinmethanolu (4,60 g, 40 mmolu) a triethylaminu (6 ml) v 1,4-dioxanu (100 ml) se pomalu přidal di-terc.butyldikarbonát (8,72 g, 40 mmolu). Po dvouhodinovém míchání při pokojové teplotě se rozpouštědlo vakuově odtáhlo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (hexan/ethylacetát, poměr 2:1) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bílé pevné látky (7,81 g, 91 %). XH-NMR (300 MHz, CDC13) 5 1,25-1, 39(m, 2H) , l,46(s, 9H) , 1,60l,81(m, 3H), 1,94(br s, 1H) , 2, 98-3, 08 (m, 2H) , 3,51(d, 2H) a 3^66-3,77 (m, 2H) .
c) 3-[[N-terc.Butoxykarbonyl)piperidin-3-yl]methoxy] -5methoxyfenylester kyseliny l-(5-(N,Ndimethy lamino)naftalensulfonové
K roztoku 379 mg (1,05 mmolu) 3-hydroxy-5methoxyfenylesteru kyseliny l-(5-(N,Ndimethylamino)naftalensulfonové kyseliny připraveného ve stupni a) tohoto příkladu 11 v tetrahydrofuranu (10 ml) obsahujícím 275 mg (0,347 mmolu) N-(terc.butoxykarbonyl(-3piperidinmethanolu připraveného v předchozím stupni, 358 mg (1,36 mmolu) trifenylfosfinu a 350 μΐ (3,18 mmolu) Nmethylmorfolinu se přidalo 215 μΐ (1,36 mmolu) diethylazodikarboxylátu. Reakční směs se hodinu míchala při teplotě místnosti, reakce se zastavila úpravou pH na 7 ústojem, směs se extrahovala diethyletherem, vysušila na • · t··· ·· 99 99 99
9 9 9 9 9 9 9
9 99 9 9 99
9 9 9 9 9 99 9 9 9
9 9 9 9 9 9
99 99 99
MgSO4 a vakuově zahustila. Produkt se přečistil sloupcovou flash chromatografií za vzniku výtěžku 245,7 mg (38 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě žluté pěny. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,60(d, 1H, J = 8,6 Hz), 8,45(d, 1H, J = 8,7 Hz), 8,13(dd, 1H, J= 1,2, 7,3 Hz), 7,67(dd, 1H)
7,47(dd, 1H, J = 7,4, 8,5 Hz), 7,24(1H, J = 8,5 Hz), 6,24(t, 1H, J = 2,2 Hz), 6,10(t, 1H, J =1,9 Hz), 5,99(t, 1H, J = 2,1 Hz), 3,88(br d, 2H) , 3,55(s, 3H) , 2,90(s, 6H) , l,58(s, 3H) a l,44(s, 9H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina), pro C39H3eN2O7S vypočteno: 593,2 (M+Na); nalezeno: 593,0.
d) Hydrochlorid 3-[ (piperidin-3-yl)methoxy] -5methoxyfenylesteru kyseliny l-(5-(N,Ndimethylamino)naftalensulfonové
K 245 mg 3-[[N-terc.butoxykarbonyl)piperidin-3yl]methoxy]-5-methoxyfenylesteru kyseliny l-(5-(N,Ndimethylamino)naftalensulfonové připravenému v předchozím stupni v methylenchloridu (1 ml) se přidalo 500 μΐ 4N HC1 v dioxanu. Reakční směs se míchala 1 hodinu. Na reakční směs se působilo dalším 1 ml 4N HC1 v dioxanu a další hodinu pokračovalo míchání. Reakční směs se opakovaně zahustila ze směsi diethylether/methanol/hexan a poskytla 237,7 mg sloučeniny uvedené v titulku jako zatvrdlé pěny. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 9, 19 (d, 1H) , 9,03(q, 1H) , 8,72(d, 1H, J =
8, 5 Hz), 8,35(d, 1H, J = 8, 6 Hz), 8,17(dd, 1H, J = 1,1, 7,3
Hz), 7,84(t, 1H, J = 7,9 Hz), 7,69(dd, 1H, J = 7,6, 8,5 Hz) ,
7,51(1H, J = 7,7 Hz), 6,41(t, 1H, J = 2,2 Hz) , 6,08(t, 1H, J
= 2,1 Hz) 5, 92 (t, 1H, J = 2,1 Hz) , 3, 57-3,76(m, 2H) , 3,53(s,
3H) , 3,2-3,23(m, 2H) , 2,94(s, 6H) , 2,58-2,8(m, 2H) , 2,14 (br
s, 1H), 1, 62-1, 80 (m, 2H) , 1,17-1, 3(m, 1H). Hmotové spektrum
(MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina), ♦ » ·♦ ·· ·· ·· Φ· » ··«· · · · · »·« · · ·· β · ·· • ··*· * · · · · « ··· · · • · « · * · ··· *«* * ·# ·· »· ·· pro C25H3oN205S vypočteno: 471,2 (M+H), 493,2 (M+Na);
nalezeno: 470,9, 492,9.
e) Hydrochlorid 3-[[(l-acetimidoyl)piperidin-3-yl]methoxy]5-methoxyfenylesteru kyseliny 1-(5-(N,Ndimethylamino)naftalensulfonové
K roztoku 204,7 mg hydrochloridu 3-[(piperidin-3yl)methoxy]-5-methoxyfenylesteru kyseliny l-(5-(N,Ndimethylamino)naftalensulfonové, připravenému v předchozím stupni, ve 2 ml Ν,Ν-dimethylformamidu obsahujícího 380 μΐ (3,42 mmolu) N,N-diisopropylethylaminu se přidalo 190 mg (1,54 mmolu) ethylacetimidáthydrochloridu. Reakční směs se míchala 2 dny při teplotě okolí. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo a zbytek se stabilizoval přídavkem 2N hydroxidu sodného. Reakční směs se extrahovala methylenchloridem, vysušila na K2CO3 a vakuově zahustila. Zbytek se rozpustil v methylenchloridu (1 ml), zreagoval s 500 μΐ ledové octové kyseliny a podrobil sloupcové flash chromatografii (methylenchlorid/methanol/ledová octová kyselina, poměr 92,6:6,5:0,9), jež poskytla acetát produktové sloučeniny v podobě gumy. Ta se rozpustila v methylenchloridu a zreagovala s 1N hydroxidu sodného. Organická fáze se vysušila na K2CO3 a zahustila vakuově. Zbytek se rozpustil v methylenchloridu, přidal se roztok 4N HC1 v dioxanu a opakovaně se zahuštoval ze směsi diethylether/methylenchlorid/hexan na 177 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě světle žlutého prášku.
^-NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 9,37 a 9,33(br s, 1H) , 8,78(s, 1H), 8,71(d, 1H, J = 7,8 Hz), 8,34(d, 1H, J = 8,6 Hz), 8,148,18(m, 2H), 7,84(t, 1H, J = 7,8 Hz), 7,69(dt, 1H, J = 1,1, 8,8 Hz), 7,49(d, 1H, J = 7,6 Hz), 6,45 a 6,42 ( (t, 1H) , 6,16 a 6,10(t, 1H), 5,92 a 5,89(t, 1H) , 3,53(s, 3H) , 2, 92 (t, 6H) ,
ΊΟ φ· ·· • · · • · ·· • · * · • »9 · φ· ·· ·· ·· • · · · • · ·· ·· · · · • · · ·· ··
2,28 a 2,22(s, 3Η) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice αkyan-4-hydroxyskořicová kyselina), pro C27H33N3O5S vypočteno: 512,2 (M+H); nalezeno: 511,5.
Příklad 12
Acetát 1- [ [ (l-acetimidoyl) piperid±n-4-yl]iaetho3cy] naf talen-3ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
a) l-Hydroxynaftalen-3-ylester kyseliny 2chlorbenzensulfonové
K 1,0 g (6,24 mmolu) 1,3-naftalendiolu v tetrahydrofuranu (20 ml) obsahujícímu 1,5 ml 2,6-lutidinu se při 0 °C přidalo 1,35 g (6,40 mmolu) 2chlorbenzensulfonylchloridu. Reakční směs se míchala přes noc při teplotě místnosti, reeakce se zastavila 3N chlorovodíkovou kyselinou, extrahovala methylenchloridem a sušila na MgSO4. Přečištění sloupcovou flash chromatografií (2% ethylacetát/methylenchlorid) dalo 277 mg (13 %) sloučeniny uvedené v titulku jako bezbarvou pevnou látku. XH-NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 10,75(s, 1H) , 8,06(d, 1H, J= 1,7 Hz), 7,78-7, 95{m, 4H) , 7, 43-7,57(m, 3H) , 7,ll(d, 1H, J = 2 Hz) a 6,63 (d, 1H, J = 2 Hz).
b) 1~[[(l-N-terc.Butoxykarbonyl)piperidín-4yl]methoxy]naftalen-3-ylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
K 277 mg (0,881 mmolu) 1-hydroxynaftalen-3-ylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové připravenému v předchozím stupni, 180 mg (0,837 mmolu) N-terc.butoxykarbonyl-4piperidinmethanolu, připravenému ve stupni (b) příkladu 1, 260 mg (0,99 mmolu) trifenylfosfinu a 270 μΐ (2,45 mmolu) N·· • ·· « · ·· · • · » · ·· ·*·· · · ·« · · • · · · · * μ ·· .···:-, *·- — * · · ·
methylmorfolinu v 2 ml tetrahydrofuranu se přidalo 160 μΐ (1,02 mmolu)diethylazodikarboxylátu. Reakční směs se míchala při teplotě místnosti 1 hodinu. Potom se zředila vodou pro zastavení reakce, extrahovala diethyletherem, sušila na MgSO4 a přečistila sloupcovou flash chromatografií (2% diethylether/methylenchlorid) za vzniku 325 mg (79 % výtěžek) bezbarvé pěny. ^-NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,17(d, 1H, J = 7 Hz), 7,96(dd, 1H, J = 1,4, 8 Hz), 7,41-7,67(m, 5H), 7,34(dt, 1H, J = 1,7 Hz), 7,08(d, 1H), 6,64(d, 1H, J = 2 Hz), 4,18(b r, 2H) , 3,89(d, 2H, J= 6,2 Hz), 2,79(t, 2H, J = 12 Hz), 2,0-2,2(m, 1H) , l,76(d, 2H, J = 8 Hz) a l,49(s, 9H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina), pro C27H30ClNO6S vypočteno: 554,1 (M+Na); nalezeno: 554,2.
c) Hydrochlorid 1-[ (piperidin-4-yl)methoxy]naftalen-3ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
K roztoku 319 mg (0,596 mmolu)
1-[[1-N-terc.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]naftalen3-ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny připraveného v předchozím stupni v 2 ml methylenchloridu se přidalo 1,5 ml (6 mmolu) 4N HC1 v dioxanu. Reakční směs se míchala 1 hodinu a roztírala s diethyletherem, čímž poskytla 281 mg sloučeniny uvedené v titulku jako bezbarvý prášek. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) 5 8,94 (bd, 1H, J = 9 Hz), 8, 68 (bd, 1H, J = 10 Hz), 8,6(d, 1H, J = 8 Hz), 7,8-7,98(m, 4 Hz), 7,50,7,6(m, 3H) ,
7,18(d, 1H, J = 2 Hz), 6,69(d, 1H, J = 2 Hz), 3,94(d, 2H, J = 7 Hz), 2,93(q, 2H) , 2,16(bm, 1H) , l,96(d, 2H) a 1,57l,71(m, 2H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice gentisová kyselina), pro C22H22C1NO4S vypočteno: 432, 1 (M+H); nalezeno:
431,5.
4444 . *· 44 .
• · · · • 4 44
4 4 4 4 4 • · 4 4 4 • ·· ·4
... 4 4 , Λ»,-,4 ·'·'*·'
4 44 • 44 4 4
4 4
d) Acetát 1-[[ l-acetimidoyl)piperidin-4-yl] methoxy] naf talen3- ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
Směs 100 mg (0,214 mmolu) hydrochloridu 1-[(piperidin4- yl)methoxy]naftalen-3-ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny připraveného v předchozím stupni v N, řídíme thylformamidu (2 ml) obsahujícím 55 mg (0,45 mmolu) ethylacetimidáthydrochloridu a 125 μΐ Ν,Νdiisopropylethylaminu se přes noc míchalo při teplotě místnosti. K reakční směsi se přidalo dalších 125 μΐ Ν,Νdiisopropylethylaminu a 55 mg (0,45 mmolu) ethylacetáthydrochloridu. Reakční směs se míchala další 4 hodiny. Reakční směs se zahustila do sucha, stabilizovala pro ukončení reakce 1N hydroxidem sodným (2 ml), extrahovala methylenchloridem, sušila na K2CO3 a vakuově zahustila.
Zbytek se zředil methylenchloridem (1 ml), přidal se 1 ml ledové kyseliny octové a přímo se přečistil preparativní chromatografií na tenké vrstvě s použitím směsi methylenchlorid/methanol/ledová kyselina octová (93,6:6,5:0,5) jako vyvíjecího rozpouštědla, což poskytlo sloučeninu uvedenou v titulku. XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,14(d, 1H, J = 8 Hz), 7,8-7,97(m, 4H), 7,50-7, 59 (m, 3H), 7,19(s, 1H), 6, 68 (d, 1H, J = 2 Hz), 4,ll(d, 2H, j = 6 Hz), 3,92(d, 2H, J = 6 Hz), 3,ll(t, 2H, J = 2,6 Hz), 2,2(m, 1H), l,92(d, 2H) , l,75(br s, 3H) a 1,41 (q, 2H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice ot-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina) , pro C23H24CIN3O4S vypočteno: 474,1 (M+H); nalezeno: 473,8.
Přiklad 13
Acetát 3- [ (2-chlorfenoxy)methyl] - [ [ (l-acetimidoyl)piperidin4 -yl ] methoxy ] benzenu *» · · • · · • · ·· • · · · • · · · * * ··· · ·· ·· • « ·· ·· rc------r·-• · · · • · · · ·· · · • · ·· «
a)3-[(2-Chlorfenoxy)methyl]fenol
K 616 mg (2,35 mmolu) trifenylfosfinu a 400 μΐ (3,84 mmolu) 2-chlorfenolu ve 20 ml methylenchloridu se přidalo 370 ml (2,35 mmolu) diethylazodikarboxylátu, pak následoval po kapkách roztok 233 mg (1,9 mmolu) 3-hydroxybenzylalkoholu ve 2 ml tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchala 1 hodinu při teplotě 0 °C až teplota prostředí. Pak se zředila vodou pro zastavení reakce, extrahovala diethyletherem, sušila na MgSO4 a přečistila sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid/hexan, poměr 2:1 až 4:1) s výtěžkem 227 mg (44 %) sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvého oleje. XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,39(dd, 1H, J = 1,6, 7,8 Hz), 7,25(t, 1H) , 7,15. -7,21 (m, 1H) , 6,88-7,01(m, 4H) , 6,79(dd, 1H, J = 2,5, 8,1 Hz), 5,12 (s, 2H) a 4,97(s, 1H) .
b) 1-[ (2-Chlorfenoxy)methyl]-3[[N(t erc .but oxykarbony1)píperidin-4 -yl ] me thoxy] benzen
K roztoku 272 mg (0,809 mmolu) 3-[(2chlorfenoxy)methyl]fenolu připraveného v předchozím stupni v methylenchloridu (5 ml), obsahujícího 275 mg (1,05 mmolu) trifenylfosfinu a 208 mg (0,97 mmolu) N(terc.butoxykarbonyl)-4-piperidinmethanolu připraveného ve stupni (b) příkladu 1, se pomalu přidalo 165 μΐ (1,04 mmolu) diethylazodikarboxylátu. Reakční směs se míchala při teplotě místnosti 1 hodinu. Reakční směs se zředila vodou pro zastavení reakce, extrahovala diethyletherem, sušila na MgSO4, a zpracovala sloupcovou flash chromatografií (hexan/ethylacetát) (1:4 k 1:2) na 221 mg (58 %) sloučeniny uvedené v titulku jako bezbarvý olej. 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,38(dd, 1H, J = 1,5, 7,8 Hz), 7,28(t, 1H, J = 8,1 Hz), 7,15-7,21(m, 1H) , 8,82-7,03(m, 5H) , 5,13(s, 2H) , 3,82(d, 2H,
• τ ·· *· ·· • · · * · · · * • · ·· » · ·· • « 4 · »4 ·«·· · • > « 0 · « · *· ·· ·· 4«
J= 6,4 Hz), 2,74(t, 2H), 1,91-2,00 (m, 1H) , 1,84 (d, 2H) a l,47(s, 9H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice ot-kyan-4hydroxyskořicová kyselina), pro C24H30ClNO4S vypočteno: 454,2 (M+Na); nalezeno: 454,4.
c) Hydrochlorid 1-[ (2-chlorfenoxy)methyl]-3-[(piper±din-4yl) methoxy] benzenu
Na roztok 215 mg 1-[(2-chlorfenoxy)methyl]-3[[N(terč.butoxykarbonyl)piperidin-4-yl]methoxy]benzenu připraveného v předchozím stupni v methylenchloridu (2 ml) se působilo 1,5 ml 4N HC1 v dioxanu. Reakční směs se míchala 1 hodinu při teplotě prostředí a potom opakovaně zahušťovala z rozpouštědla diethylether/hexan/methanol na 183 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarého prášku. 1HNMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,51(br s, 2H) , 7,45(dd, 1H, J =
1,3, 7,9 Hz), 7,27-7, 35(m, 2H) , 7,21(d, 1H) , 6, 90-7,05(m,
4H), 5,18(s, 2H), 3,87(d, 2H) , 2,90 (t, 2H, J = 10 Hz),
2,05(m, 1H), l,91(d, 2H, J= 13,8 Hz) a l,5-l,54(m, 2H) .
Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina), pro ΟΧ9Η22Ο1ΝΟ2 vypočteno: 332,1 (M+H); nalezeno: 332,0.
d) Acetát 3-[ (2-chlorfenoxy)methyl]-[[(1acetímldoyl)piperidin-4-yl]methoxy]benzenu
K 40 mg (0,109 mmolů) l-[(2-chlorfenoxy)methyl]-3[(piperidin-4-yl)methoxy]benzenhydrochloridu připraveného v předchozím stupni v 1 ml N,N-dimethylformamidu obsahujícím 100 μΐ (0,908 mmolů) N,N-diisopropylethylaminu se přidalo 40 mg (0,325 mmolů) ethylacetimidáthydrochloridu. Reakční směs se míchala tři dny při teplotě prostředí. Reakční směs se vakuově zahustila a zbytek se stabilizoval pro ukončení reakce 1N hydroxidem sodným, extrahoval methylenchloridem, • 4 «4 44 44
44 4 4 44 4
4 44 4 4 44
4 4 4 4 4 444 4 4
4 4 4 «44 • 4
4«·· sušil (K2CO3) a zahustil. Zbytek se rozpustil v 1 ml methylenchloridu a pak se přidalo 500 μΐ ledové kyseliny octové. Potom se roztok zpracoval preparativní chromatografií na tenké vrstvě za použití vyvíjecího rozpouštědla methylenchlorid/methanol/ledová kyselina octová (83:15:2) s výtěžkem 33,8 mg sloučeniny uvedené v titulku ve formě gumy. ^-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,45(dd, 1H, J =
1,5, 7,9 Hz), 7,27-7, 34(m, 2H) , 7,20-7,23 (dd, 1H, J= 1,4, 8,3 Hz), 6, 89-7, 04(m, 4H) , 5,76(s, 2H), 4,07(d, 2H, J = 14 Hz), 3,87(d, 2H, J = 6,2 Hz), 3,05(t, 2H, J = 13 Hz),
2,22(s, 3H), 2,05-2,13(m, 1H), l,85(d, 2H) , l,71(br s, 3H) , a 1,18-1,38(m, 2H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice akyan-4-hydroxyskořicová kyselina) , pro C2iH25N2O2 vypočteno: 373,2 (M+H); nalezeno: 373,0.
Příklad 14
Hydrochlorid 3-[3-amidinopropoxy]-5-methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové
a) 3-[3-Kyanpropoxy]-5-methyl fenylester 2chlorbenzensulfonové kyseliny
Při 0 °C se k 250 mg (0,796 mmolu) 3-hydroxy-5methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové připravené ve stupni (c) příkladu 1 v N,N-dimethylformamidu (3 ml) přidalo 20 mg (0,833 mmolu) 100% hydridu sodného. Reakční směs se míchala 5 minut. K reakční směsi se přidalo 100 μΐ (1,01 mmolu) 4-brombutyronitrilu. Reakční směs se přes noc míchala při teplotě okolí, reakce se zastavila 1N chlorovodíkovou kyselinou a směs se extrahovala diethyletherem. Reakční směs se vysušila (MgSO4), umístila v silikagelové koloně sloupcové flash chromatografie a • · ·· ·· ·· ·· ·· · ···· ···· ··· · · ·· ···· £ · ···· · · ·· · · ··· · <* •Ό ······ ·· · ·*· · ·· ·· ·· ·· promyla methylenchloridem s výtěžkem 127 mg nečisté sloučeniny v podobě olejovité kapaliny, jež byla použita v příští reakci. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,94(dd, 1H, J =
1,5, 9 Hz), 7,54-7, 63 (m, 2H) , 7,34-7,40(m, 1H) , 6,57(m, 1H) ,
6,55(m, 1H) a 6,48(t, 1H, J = 2 Hz). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina), pro C17H16CINO4S vypočteno: 388.0 (M+Na); nalezeno: 387,8.
b) Hydrochlorid 3-[3-amidinopropoxy] -5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny
Roztok 115 mg 3-[3-kyanpropoxy]-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny v 10 ml 37% HC1 v ethanolu se přes noc míchal při 0 °C. Reakční směs se zahustila do sucha, zředila ethanolem (5 ml) a přidal se 1 g uhličitanu amonného. Reakční směs se míchala 40 min. Reakce se zastavila 2N hydroxidem sodným, směs se extrahovala methylenchloridem, vysušila (K2CO3) a zahustila do sucha.
Zbytek se roztíral se směsí methylenchlorid/methanol/hexan a poskytl 64 mg sloučeniny uvedené v titulku jako bezbarvý prášek. 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,02(br s, 2H) , 8,68(br s, 2H), 7,95(dd, 1H, J = 1,7 Hz), 7,81-7, 90 (m, 2H) , 7,56 7,62(m, 1H) , 6,75(s, 1H) , 6,50(s, 1H) , 6,44(t, 1H, J = 1 Hz), 3,89(s, 2H, J= 6 Hz), 2,21(s, 2H) 2,02(pentet, 2H) .
Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4hydroxyskořicová kyselina) , pro Ci7Hi9ClN2O4S vypočteno:
383,1 (M+H); nalezeno: 382,8.
Příklad 15
Hydrochlorid 3- [ [3- (N-methylamidinofenyl]methoxy] -5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
K roztoku 3-[(3-kyanfenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru ·· ·· ** ·· **- · · · ·· · ί · ·· kyseliny 2-chlorbenzensulfonové (414 mg, 1,0 mmolu) připraveného ve stupni (a) příkladu 6 v methylenchloridu (10 ml) se přidalo 37 % HC1 v ethanolu (15 ml) při 0 °C. Směs se nechala stát 3 dny při 0 °C. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se několikrát vakuově zahustil z methylenchloridu. Zbytek se rozpustil v ethanolu (10 ml), přidal se methylaminhydrochlorid (270 mg, 4,0 mmol) a Na2CO3 (212 mg, 2,0 mmolu) a pak se 2 dny míchal při pokojové teplotě. Reakční směs se rozdělila mezi methylenchlorid (150 ml) a 10% K2CO3. Organická fáze se promyla 10% K2CO3 (50 ml) a sušila nad K2CO3. Po vakuovém odstranění rozpouštědla se přidala chlorovodíková kyselina v methanolu (30 ml) a rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu. Potom se zbytek přečistil sloupcovou flash chromatografií (10% methanol/methylenchlorid) a překrystalizoval ze směsi methanol/ethylacetát za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílých krystalů (145 mg, 30 %) . 1H-NMR 300 MHz, DMSO-dg) δ 2,22(s, 3H) , 3,01(s, 3H) , 5,10(s, 2H) , 6,53(s,
1H), 6,56(s, 1H), 6,87(s, 1H) , 7,58(t, 1H, J=7,0Hz), 7,63(t, 1H, J = 7,6 Hz), 7,73(m, 2H) , 7,86(m, 3H) , 7,94(d,
1H, J = 4,0 Hz), 9,05(br s, 1H) , 9,55(br s, 1H) a 9,94 (br s, 1H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina), pro C22H21C1N2O4S vypočteno: 455,1 (M+H); nalezeno: 445, 0.
Příklad 16
Hydrochlorid 3-[(4-amidinofenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
a) Hydrochlorid 3-[ (4-kyan fenyl) methoxy] -5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny • ·
Diethylazodikarboxylát (524 mg, 3,0 mmolu) se při 0 °C přidal k roztoku 3-hydroxy-5-methylfenylesteru kyseliny 2chlorbenzensulfonové (900 mg, 3,0 mmolu) připraveného ve stupni (c) příkladu 1, dále 4-kyanobenzylalkoholu (400 mg, 3,0 mmolu) (Yoon a další, J.Org.Chem., sv. 38, s. 2786 až 2792, 1973) a trifenylfosfinu (790 mg, 3,0 mmolu) v tetrahydrofuranu (20 ml). Směs se 2 hodiny míchala při 0 °C a 3 hodiny při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou (50 ml) pro přerušení reakce a extrahovala ethylacetátem (3 x 50 ml). Organická fáze se postupně promyla nasyceným NaHCO3 (2 x 50 ml) a solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (2:1 ethylacetát:hexan) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bílé pevné látky (0,95 g, 76 %) . 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,26(s, 3H), 5,03(s, 2H) , 6,57(t, 1H, J = 2,2 Hz), 6,59(s, 1H), 6,67(s, 1H) , 7,38(t, 1H, J = 5,8 Hz), 7,49(d, 2H, J = 4,2 Hz), 7,60(m, 2H) , 7,67(d, 2H, J = 3,5 Hz) a 7,96(d, 1H,
J = 3, 6 Hz) .
b) Hydrochlorid 3-[ (4-amidinofenyl)methoxy] -5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
K roztoku 3-[(4-kyanfenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny připraveného v předchozím stupni v methylenchloridu (10 ml) se při 0 °C přidal 37% roztok chlorovodíkové kyseliny v ethanolu (20 ml). Směs se 2 dny míchala při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se několikrát společně odpařoval s methylenchloridem. Potom se zbytek rozpustil v ethanolu (20 ml) a při 0 °C se přidal uhličitan amonný (385 mg, 4,0 mmolu). Směs se přes noc míchala při pokojové teplotě. Reakční směs se rozdělila mezi methylenchlorid a 10% K2CO3 (50 ml) . Organická fáze se • · ···· . · · ·*, « · ··· · promyla 50 ml 10% K2CO3 a sušila nad K2CO3. Rozpouštědlo se odstranilo ve vakuu. Zbytek se zředil CH2C12, přidala se HC1 v methanolu (30 ml) a zahustil se. Zbytek se přečistil krystalizaci (z methanolu a ethylacetátu), jež poskytla sloučeninu uvedenou v titulku jako bílou pevnou látku (345 mg, 74 %) . XH-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 2,21 (s, 3H) , 5,16(s, 2H), 6,53(t, 2H, J= 9,3 Hz), 6,86(s, 1H) , 7,55-7, 62 (m, 3H) , 7,82-7, 89(m, 4H) , 7,93(d, 1H, J = 4,0 Hz), 9,24(br s, 2H) 9,44(br s, 2H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina), pro C21Hi9C1N2O4S vypočteno: 431,1 (M+H); nalezeno: 431,1.
Příklad 17
Hydrochlorid 3-[(3-amidinofenyl)methoxy]fenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny
a) 3-Benzyloxyfenylacetát
Resorcinmonoacetát (6,10 g, 40 mmolu) v DMF (10 ml) se po kapkách přidal ke směsi NaH (95%, 0,92 g, 40 mmolu) v DMF (50 ml). Směs se 10 minut míchala při pokojové teplotě.
Potom se po kapkách přidal benzylbromid (6,85 g, 40 mmolu) v DMF (10 ml) a směs se při pokojové teplotě dvě hodiny míchala. Reakční směs se zředila vodou (100 ml) pro přerušení reakce a pak extrahovala ethylacetátem (3 x 100 ml). Organická fáze se promyla solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (hexan/methylenchlorid, 1:1) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bílé pevné látky (5,30 g, 55 %). 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 2,28(s, 3H), 5,03(s, 2H), 6,72(m, 2H) ,
6,85(dd, 1H, J = 1,2, 4,1 Hz), 7,27(t, 1H, J = 7,9 Hz) a ···· *
7,41(m, 5H) .
b) 3-Benzyloxyfenol
Na 3-benzyloxyfenylacetát (4,84 g, 20 mmolu) připravený v předchozím stupni v tetrahydrofuranu (50 ml) se tři hodiny působilo 1N NaOH (30 ml) při pokojové teplotě. Směs se okyselila 1N HC1 a extrahovala ethylacetátem (3 x 100 ml). Organická fáze se promyla solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bezbarvé kapaliny (3,80 g, 96 %) . XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 5,01(s, 2H) ,
5,09(s, 1H), 6,47(t, 2H, J = 2,2 Hz), 6,56(dd, 1H, J = 1,1,
4,1 Hz), 7,ll(t, 1H) a 7,39(t, 5H) .
c) 3-Benzyloxyfenylester kyseliny 2-chlorbenzensulfonové 3-Benzyloxyfenol (2,97 g, 15 mmolu) připravený v předchozím stupni v methylenchloridu (50 ml) reagoval s diisopropylethylaminem (2 ml)a 2chlorbenzensulfonylchloridem (3,27 g, 15,5 mmolu) 2 hodiny při pokojové teplotě a 0 °C. Reakční směs se zředila 200 ml methylenchloridu, promyla postupně nasyceným NaHCO3 (2 x 50 ml) a solankou (2 x 50 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se vakuově odstranilo a zbytek se přečistil sloupcovou flash” chromatografií (hexan/methylenchlorid, 1:1) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bezbarvé kapaliny (5,35 g, 95 %) . XH-NMR (300 MHz, CDC13) 8 4, 97 (s, 2H) , 6,71(dd, 1H, J = 1,1, 4,1 Hz), 6,78(t, 1H, J = 2,3 Hz), 6,85(dd, 1H, J = 1,1, 4,1 Hz), 7,17(t, 1H, J = 8,3 Hz), 7,37(m, 5H), 7,58(m, 2H) a 7,91 (dd, 1H, J= 1,1, 4,1 Hz).
· • · «4 • * «4 *
4*
4 <·
d) 3-Hydroxyfenylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny
3-Benzyloxyfenylester 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (3,75 g, 10 mmolu) připravený v předchozím stupni se v tetrahydrofuranu (80 ml) hydrogenoval ve vodíkové atmosféře za katalýzy Pd/C (10%) (350 mg). Katalyzátor se zfiltroval přes Celíte a promyl tetrahydrofuranem. Spojený tetrahydrofuranový roztok se odpařil ve vakuu a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bezbarvého oleje (2,75 g, 95 %) . 1H-NMR (300 MHz, CDC13) δ 6,68(m, 3H) , 7,12(t, 1H, J = 6,5 Hz), 7,37(t, 1H, J = 7,1 Hz), 7,60(m, 2H), 7,94(dd, 1H, J = 0,6, 4,0 Hz).
e) 3-[(3-Kyanfenyl)methoxy]fenylester kyseliny 2chlorbenzensulfonové
Diethylazodikarboxylát (174 mg, 1,0 mmolu) se při 0 °C přidal k roztoku 3-hydroxyfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny (285 mg, 1,0 mmolu) připraveného v předchozím stupni, 3-kyanobenzylalkoholu (133 mg, 1,0 mmolu) (Yoon a další, J.Org.Chem., sv. 38, s. 2786-2792, 1973), a trifenylfosfinu (263 mg, 1,0 mmolu) v tetrahydrofuranu (10 ml). Směs se 2 hodiny míchala při 0 °C a 3 hodiny při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila vodou (30 ml) pro přerušení reakce a extrahovala ethylacetátem (3 x 30 ml). Organická fáze se promyla nasyceným NaHCO3 (2 x 30 ml) , solankou (2 x 30 ml) a sušila nad Na2SO4. Rozpouštědlo se odstranilo vakuově a zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (ethylacetát/hexan, 2:1) na sloučeninu uvedenou v titulku v podobě bledě žlutého oleje (375 mg, 93 %). XH-NMR (300 MHz, CDC13) δ 5,02(s, 2H) , 6,78 (m, 2H) , 6,85(dd, 1H, J = 4,2, 1,3 Hz), 7,20(t, 1H, J = 8,2 Hz), 7,38(t, 1H, J = 5,8 Hz), 7,51(t, 1H, J = 7,7 Hz), 7,5982 i
f ♦ ·< ·
7,68(m, 5H) a 7,93(dd, 1H, J = 4,0, 0,7 Hz).
f) Hydrochlorid 3-[ (3-amidinofenyl)methoxy] fenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové
K roztoku 3-[(3-kyanfenyl)methoxy]fenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové (280 mg, 0,7 mmolu) připraveného v předchozím stupni v methylerichloridu se při 0 °C přidala 37% HC1 v ethanolu (15 ml). Směs se 2 dny míchala při pokojové teplotě. Rozpouštědlo se odpařilo a zbytek se několikrát odpařoval společně s methylenchloridem. Potom se zbytek rozpustil v ethanolu (10 ml) a při 0 ’C se přidal uhličitan amonný (300 mg, 3,0 mmolu). Směs se přes noc míchala při pokojové teplotě. Reakční směs se zředila methylenchloridem (150 ml), promyla 10% K2CO3 (2 x 50 ml) a sušila nad K2CO3. Rozpouštědlo se vakuově odtáhlo, přidala se HC1 v methanolu (30 ml) a následovalo zahuštění ve vakuu. Zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (10% methanol v methylenchloridu) za vzniku sloučeniny uvedené v titulku v podobě bílé pěny (238 mg, 75 %) . 1H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 5,15(s, 2H), 6,67(d, 1H, J= 4,0 Hz), 6,81(s, 1H) , 7,03(d, 1H, J = 4,0 Hz), 7,32(t, 1H, J = 8,3 Hz), 7,58(t, 1H, J =
7,5 Hz), 7,65(t, 1H, J = 7,7 Hz), 7,75-7, 94(m, 6H) , 9,27(br s, 2H) a 9,45(br s, 2H). Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice sinapinová kyselina) , pro C2oHi7ClN204S vypočteno:
417,1 (M+H), 439,0 (M+Na) ; nalezeno: 417,4, 439,1.
Příklad 18
Acetát 3-[5-amidinopentyloxy]-5-methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové
a) 3-[5-Kyanpentyloxy]-5-methylfenylester kyseliny 2• · ’ · · 1
I · · 4
4· chlorbenzensulfonové
Hydrid sodný (24 mg, 1 mmol; 100%) se přidal k roztoku 250 mg (0,855 mmolu) 3-hydroxy-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny, připraveného ve stupni (c) příkladu 1, ve 2 ml N,N-dimethylformamidu. Po 5 minutách se k reakční směsi přidalo 130 μΐ (0,93 mmolu) 6bromhexannitrilu. Reakční směs se 2 hodiny míchala při teplotě prostředí, reakce se přerušila solankou (50 ml), směs se extrahovala diethyletherem (50 ml), promyla vodou (3 x 10 ml), vysušila (MgSO4) a zahustila ve vakuu. Zbytek se přečistil sloupcovou flash chromatografií (methylenchlorid/petrolether, 4:1 - 100:0) na 250 mg sloučeniny uvedené v titulku v podobě bezbarvého oleje, který stáním ztuhl. ^-NMR (300 MHz, CDC13) δ 7, 97 (dd, 1H, J = 1,4, 7,8 Hz), 7,56-7, 65 (m, 2H) , 7,36-7,41(m, 1H) , 6,59(br s, 1H), 6,53(br s, 1H) , 6,48(t, 1H, J= 1,1 Hz), 3,85(t,
2H), 2,38(t, 2H) , 2,24 (s, 3H) a l,6-l,8(m, 6H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice a-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina), pro Ci9H20C1NO4S vypočteno: 416,1 (M+Na); nalezeno: 416,1.
b) Acetát 3-[5-amidinopentyloxy] -5-methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové
Roztok 138 mg (0,351 mmolu) 3-[5-kyanpentyloxy]-5methylfenylesteru kyseliny 2-chlorbenzensulfonové, připravené v předchozím stupni, v 10 ml 37% roztoku HC1 v ethanolu se míchal přes noc při pokojové teplotě. Reakční směs se zahustila na olej, zředila 5 ml ethanolu a smíchala s 1,0 g uhličitanu amonného. Po půlhodinovém míchání při okolní teplotě se reakce přerušila přídavkem 2N NaOH, směs se extrahovala methylenchloridem, vysušila (K2CO3) a zahustila. Na zbytek se působilo 500 μΐ ledové kyseliny octové a vytřením (triturací) ze směsi diethylether/methylenchiorid se získalo 3,9 mg sloučeniny uvedené v titulku. ^-NMR (300 MHz, DMSO d6) δ 7,79-7, 95 (m, 3H), 7,55-7,60(t, 1H) , 6,73(s, 1H) , 6,49(s, 1H) , 6,38(s,
1H), 3,85(t, 2H), 2,29(t, 2H) a 2,20(s, 3H) . Hmotové spektrum (MALDI-TOF, matrice ot-kyan-4-hydroxyskořicová kyselina), pro C19H23C1N2O4S vypočteno: 411,1 (M+H); nalezeno: 411,3.
Příklad 19
Inhibice přečištěných enzymů in vitro
Reagenty
Všechny soli s funkcí ústojů byly získány od firmy Sigma Chemical Company (St. Louis, MO) a měly maximální dosažitelnou čistotu. Enzymové substráty: N-benzoyl-Phe-ValArg-p-nitroanilid (Sigma B7632), N-benzoyl-Ile-Glu-Gly-Argp-nitroanilid (Sigma B2291), N-p-tosyl-Gly-Pro-Lys-pnitroanilid (Sigma T6140) a N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-pnitroanilid (Sigma S7388) byly všechny získány u firmy Sigma.
Lidský α-trombin a lidský faktor Xa byly získány u firmy Enzyme Research Laboratories (South Bend, Indiana). Bovinní (hovězí) trypsin byl získán od Sigmy.
Stanovení
Všechny experimenty jsou založeny na schopnosti zkoušené sloučeniny inhibovat enzymaticky katalyzovanou hydrolýzu substrátu na bázi peptid-p-nitroanilidu. Při typickém stanovení Ki se substrát připravuje v DMSO a ředí ve specifickém ústoji sestávajícím z 50 mM HEPES a 200 mM • * • ·
* *·*
NaCl s pH 7,5. Konečná koncentrace každého substrátu je uvedena níže. Všeobecně platí, že koncentrace substrátů jsou nižší než experimentálně stanovené hodnoty pro Km. Zkoušené sloučeniny se připravují jako roztoky 0,16 mg/mL v DMSO. Rovněž zředění se děje v DMSO a výsledkem je 8 koncentrací v koncentračním rozsahu 1 - 200násobek. Roztoky enzymů se připravují při koncentracích uvedených níže ve zkušebním pufru.
Při typickém stanoveni Κχ se pipetuje do každého absorpčního kalíšku plotny s 96 kalíšky 280 μΐ roztoku substrátu, 10 μΐ roztoku inhibitoru a plotna se ponechá dosáhnout teplotní rovnováhy na 37 °C za dobu kratší než 10 minut ve snímacím zařízení pro plotny firmy Molecular Device. Reakce jsou iniciovány přídavkem 20 μΐ alikvotního množství enzymu a 15 minut se na hodnotě 405 nm zaznamenává vzrůst absorbance. Při výpočtu se užívají hodnoty odpovidající méně než 10% hydrolýze veškerého substrátu. Poměr rychlosti (rychlost změny absorbance jako funkce času) pro vzorek neobsahující žádný inhibitor se dělil rychlostí vzorku obsahujícího inhibitor a je vynášen v grafu jako funkce koncentrace inhibitoru. Údaje odpovídají lineární regresi a vypočtené hodnotě strmosti křivky. Inverzní hodnota strmosti je experimentálně stanovená hodnota Κχ.
Trombin
Aktivita trombinu byla zjišťována ze schopnosti hydrolyzovat substrát Suc-Ala-Ala-Pro-Arg-pNa. Roztoky substrátu se připravily ve zkušebním ústoji při koncentraci 20 μΜ (20 μΜ « Km=180 μΜ) . Konečná koncentrace DMSO byla 0,3 %. Přečištěný lidský α-trombin se zředil zkušebním pufrem na koncentraci 450 nM. Konečné koncentrace reakčního činidla byly: [trombin] =0,5 nM, [Suc-Ala-Ala-Pro-Arg-pNa] = 20 μΜ.
Faktor Xa
Aktivita faktoru Xa byla zjištována schopnosti hydrolyzovat substrát Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA. Roztoky substrátu byly připraveny při koncentraci 51 μΜ (51 μΜ « Km=l,3 mM) ve zkušebním pufru. Konečná koncentrace DMSO byla 0,3 %. Přečištěný aktivovaný lidský faktor Xa se zředil zkušebním pufrem na koncentraci 300 nM. Konečné koncentrace byly: [FXa] = 20 nM, [Bz-Ile-Glu-Gly-Arg-pNA] = 51 μΜ.
Trypsin
Aktivita trypsinu byla zkoušena schopností hydrolyzovat substrát Bz-Phe-Val-Arg-pNA. Roztoky substrátu se připravily v koncentraci 14 μΜ (14 μΜ « Km = 291 μΜ) ve zkušebním pufru. Konečná koncentrace DMSO byla 0,3 %. Přečištěný bovinní trypsin se zředil zkušebním ústojem na koncentraci 150 nM. Konečné koncentrace reagentů byly: [trypsin] = 10 nM, [Bz-Phe-Val-Arg-pNA]=14 μΜ.
Chymotrypsín
Aktivita chymotrypsinu byla zjištována schopností hydrolyzovat substrát Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA. Roztoky substrátu byly ve zkušebním ústoji připravovány v koncentracích 14 μΜ (14 μΜ << Km = 61 uM) . Konečná koncentrace DMSO byla 0,3 %. Přečištěný bovinní achymotrypsin byl zředěn ve zkušebním ústoji na koncentraci 45 nm. Konečné koncentrace byly: [chymotrypsin] = 3 nM, [Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA] = 14 μΜ.
Získané výsledky použití syntetizovaných sloučenin jsou v tabulce 1.
• »* »»*·
I
Produkt příkladu číslo Enzym K (μΜ)
1 trombin 1, 65
5 trombin 4,86
6 faktor Xa 2,72
7 trypsin 5,23
8 trombin 1,72
14 trombin 0,57
18 chymotrypsin 6,29
Výsledky udávají, že sloučeniny podle tohoto vynálezu jsou inhibitory proteáz. Sloučeniny podle vynálezu inhibují řadu proteáz včetně faktoru Xa, trombinu, chymotrypsinu a trypsinu.
Po tomto úplném popisu tohoto vynálezu je osobám s běžnou znalostí oboru zřejmé, že totéž lze provést v širokém a rovnocenném oboru podmínek, formulací a dalších parametrů bez narušení záměru vynálezu nebo kteréhokoliv jeho provedení. Všechny zde citované patenty a publikace jsou ve své úplnosti zahrnuty na základě těchto odkazů.

Claims (19)

  1. V·..'
    PATENTOVÉ NÁROKY
    1. Sloučenina podle vzorce I:
    nebo její solváty, hydráty nebo farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že
    Z je jedna ze skupin -NR10SO2 -, -SO2NR10-, -NR10C(RyRz)-,C (RYRZ) NR10-, -OSO2-, SO2O-, OC(RyRz)-, -C(RyRz)O-, NR10CO- nebo CONR10-;
    Ry a Rz může být nezávisle na sobě vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, hydroalkyl, karboxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl, dialkylaminoalkyl nebo karboxyl;
    R1 může být alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl nebo heteroaryl, z nichž kterýkoliv může být podle potřeby substituován;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle na sobě jeden ze skupiny: vodík, alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyanová skupina, nitroskupina, karboxamid, -CO2RX , -CH2ORX nebo -0Rx, nebo v případě substituce sousedních uhlíkových atomů mohou být R2 a R3 spojeny buď na -CH=CH-CH=CH~ nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 je definováno výše;
    Rx je v každém případě jedna ze skupin vodík, alkyl nebo cykloalkyl, kde uvedený alkyl nebo cykloalkyl mohou volitelně obsahovat jednu nebo více nenasycených vazeb;
    Y je jedna ze skupin -0-, -NR10-, -S-, -CHR10 - nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R6 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů vodík, alkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, aralkoxyskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, kyanoskupina nebo -CO2RW, kde Rw je alkyl nebo cykloalkyl;
    R7 a R8 jsou oba nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl nebo karboxyalkyl, nebo jsou R7 a R8 spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s výhradou, že když W je N, y nemůže být nula nebo 1;
    R9 je jeden ze substituentů: vodík, alkyl, cykloalkyl nebo aryl, kde uvedený alkyl, cykloalkyl nebo aryl může být volitelně substituován amino-, monoalkylamíno-, dialkylamino-, alkoxy-, hydroxy-, karboxy-, alkoxykarbonyl-, aryloxykarbonyl-, aralkoxykarbonyl-, aryl-, heteroaryl-, acylamino-, kyanovou nebo trifluoromethylskupinou;
    R10 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylamino (C2_io) alkyl, dialkylamino (C2_i0) alkyl nebo karboxyalkyl;
    n je 0 až 8 s tou výhradou, že když W je N a Y je jiný než -CHR10-, potom je n 2 až 8; a m je 1 až 4 za předpokladu, že když W je N, potom m není 1.
  2. 2. Sloučenina podle nároku 1, vyznačuj ící se t i m, že
    Z je jedna ze skupin -SO2O-, -SO2NR10-, -C(RyRz)O-, nebo OC(RyRz)-, kde Ry je stejně jako Rz vodík;
    R1 je jeden ze skupiny substituentů: C6-io aryl, • 4 pyridinyl, chinizolinyl, chinolinyl nebo tetrahydrochinolinyl, z nichž kterýkoliv může být volitelně substituován jednou nebo dvěma skupinami: hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, Ci_6 alkyl, Ci_6 alkoxy, Ci_6 aminoalkyl, Ci-6 aminoalkoxy, amino, mono (Ci_4) alkylamino, di (Ci_4) alkylamino, C2.6 alkoxykarbonylamino, C2-6 alkoxykarbonyl, karboxy, Ci_e hydroxyalkyl, C2_6 hydroxyalkoxy, C2_i0 mono (karboxyalkyl) amino, di (C2_10 karboxyalkyl) amino, C6_i4 ar (Ci_6) alkoxykarbonyl, C2_6 alkynylkarbonyl, Ci-6 alkylsulfonyl, C2_6 alkenylsulfonyl, C2-6 alkynylsulfonyl, Ci_6 alkylsulfinyl, Ci-6 alkylsulfonamido, amidino, guanidino, Ci_6 alkyliminoamino, formyliminoamino, C2-6 karboxyalkoxy, C2_6 karboxyalkyl, C2-6 karboxyalkylamino, kyan, trifluormethoxy a perfluorethoxy;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_6 alkyl, C3-8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci-8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, Cx_4 alkoxykarbonyl, Ci_4 alkoxymethyl, nebo Cx_4 alkoxy; nebo alternativně lze R2 a R3, pokud jsou na sousedních uhlíkových atomech, spojit za vzniku buď -CH=CHCH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 již bylo definováno výše;
    Y může být -0-, -S-, -NR10-, nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R6 je ve všech případech jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, hydroxy, Cx_4 alkoxy, fenoxy, Ci_4 alkyloxykarbonyl nebo kyan;
    R7 a R8 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-6 alkyl, C2-i0 karboxyalkyl, C2_10 hydroxyalkyl, nebo R7 a R8 jsou spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2, pokud však W je N, y nemůže být 0 nebo 1;
    R9 je vodík nebo Ci_10 alkyl, volitelně substituovaný ♦· ♦·.
    » · · * » ♦ ·♦ ♦ · · ;
    •· ** «* ·« Λ » · · · » · ♦* ··· * · • · 4 *· ♦* skupinami: amino, mono(Ci-4 )alkylamino, Ci-6 alkoxy, hydroxy, karboxy, fenyl, alkyloxykarbonyl, aralkoxykarbonyl, Ci_G acylamino, kyan nebo trifluormethyl;
    R10 je ve všech případech nezávisle vodík, Ci_6 alkyl, benzyl, fenyl, C2_10 hydroxyalkyl, C2_10 aminoalkyl, Cx_4 monoalkylamino (C2.8) alkyl, Cx_4 dialkylamino (C2_8) alkyl nebo C2-io karboxyalkyl;
    n je 0 až 8, s výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 8, a m je 1 až 4, s tím, že když W je N, potom m není 1.
  3. 3. Sloučenina podle nároku 1, vyznačující s e t í m, že
    Z může být -S020-, -SO2NR10-, -CH2O- nebo -OCH2-;
    R1 může být fenyl nebo naftyl, volitelně substituovaný jedním nebo dvěma chlory nebo dimethylaminovými skupinami;
    R2 a R3 mohou být vodík nebo lze spojit R2 a R3 za vzniku -CH=CH-CH=CH-;
    R4 může být vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl;
    Y je buď 0 nebo NR10;
    W je N nebo CR10;
    R6 je ve všech případech vodík nebo hydroxyskupina;
    R7 a R® jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_6 alkyl, C2_io hydroxyalkyl nebo C2_i0 karboxyalkyl, nebo se R7 a R® spojí za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s tou výhradou, že když W je N, y nemůže být 0 nebo 1;
    R9 je vodík nebo Ci_4 alkyl;
    R10 je ve všech případech nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, C]_4 alkyl, C2_4 hydroxyalkyl, C2_4 karboxyalkyl, C2.4 aminoalkyl, dimethylamino (C2_8) alkyl, methylamino (C2_8) alkyl;
    n je 0 až 4, s tou výhradou, že když W je N, potom n ···* ♦· • · * • ·♦. • * 1 ·♦ ·· ·« ·« a » · · · • · ··.
    ··:: : <« ·· je 2 až 4, a m je 1, 2 nebo 3.
  4. 4. Sloučenina charakterizovaná vzorcem II nebo jejich solváty, hydráty nebo farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že
    Z je jedna ze skupin -NR10SO2 -, -SO2NR10-, -NR10C (RyRz)-, -C(RyRz)NR10-, -OSO2-,«-SO2O-, OC(RyRz)-, -C (RyRz) 0-,—NR10CO- nebo
    -CONR10-;
    Ry a Rz může být nezávisle na sobě vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, hydroalkyl, karboxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl, dialkylaminoalkyl nebo karboxyl;
    R1 může být alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl nebo heteroaryl, z nichž kterýkoliv může být podle potřeby substituován;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle na sobě jeden ze skupiny: vodík, alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyanová skupina, nitroskupina, karboxamid, -C02Rx , -CH2ORX nebo -0Rx, nebo v případě substituce sousedních uhlíkových atomů mohou být R2 a R3 spojeny buď na -CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 je definováno výše;
    Rx je v každém případě jedna ze skupin vodík, alkyl ’· ··.
    • ··*. ♦ · ϊ :
    » * · ·
    ♦. »» #« • · · * • » ··.
    » ·** · ϊ · · · .« ·« nebo cykloalkyl, kde uvedený alkyl nebo cykloalkyl mohou volitelně obsahovat jednu nebo více nenasycených vazeb;
    Y je jedna ze skupin -0-, -NR10-, -S-, -CHR10 - nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R5 6 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů vodík, alkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, aralkoxyskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, kyanoskupina nebo -CO2Rw, kde Rw je alkyl nebo cykloalkyl;
    R7 a R8 jsou oba nezávisle jeden ze substituentů vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl nebo karboxyalkyl, nebo jsou R7 a R8 spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s výhradou, že když W je N, y nemůže být nula nebo 1;
    R10 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, mono alky lamino (C2-io) alkyl, dialkylamino (C2-i0) alkyl nebo karboxyalkyl;
    n je 0 až 8 s tou výhradou, že když W je N a Y je jiný než -CHR10-, potom je n 2 až 8; a m je 1 až 4 za předpokladu, že když W je N, potom m není 1.
  5. 5. Sloučenina podle nároku 4, vyznačuj ící se t i m, že
    Z je jedna ze skupin -S020-, -SO2NR10-, -C(RYRZ)O-, nebo 0C(RyRz)-, kde Ry je stejně jako Rz vodík;
    R1 je jeden ze skupiny substituentů: C6-io aryl, pyridinyl, chinizolinyl, chinolinyl nebo tetrahydrochinolinyl, z nichž kterýkoliv může být volitelně substituován jednou nebo dvěma skupinami: hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, Ci_6 alkyl, Ci_6 alkoxy, Ci_6 aminoalkyl, Ci_6 aminoalkoxy, amino, mono (Ci-4) alkylamino,
    -····*?
    : ··· :
    «4 • **·*« ·« 44 di (Ci_4) alkylamino, C2-6 alkoxykarbonylamino, C2_6 alkoxykarbonyl, karboxy, Ci_6 hydroxyalkyl, C2-6 hydroxyalkoxy, C2-i0 mono (karboxyalkyl) amino, di (C2_i0 karboxyalkyl)amino, C6-i4 ar (Ci_6) alkoxykarbonyl, C2-6 alkynylkarbonyl, Ci_6 alkylsulfonyl, C2-6 alkenylsulfonyl, C2_6 alkynylsulfonyl, Ci-6 alkylsulfinyl,Ci_e alkylsulfonamido, amidino, guanidino, Ci_6 alkyliminoamino, formyliminoamino, C2-6 karboxyalkoxy, C2_6 karboxyalkyl, C2-6karboxyalkylamino, kyan, trifluormethoxy a perfluorethoxy;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-6 alkyl, C3-8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci_8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, Ci_4 alkoxykarbonyl, Ci_4 alkoxymethyl, nebo Ci_4 alkoxy; nebo alternativně lze R2 a R3 , pokud jsou na sousedních uhlíkových atomech, spojit za vzniku buď CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 již bylo definováno výše;
    Y může být -0-, -S-, -NR10-, nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R6 je ve všech případech jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, hydroxy, Ci_4 alkoxy, fenoxy, Ci-4 alkyloxykarbonyl nebo kyan;
    R7 a R8 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_6 alkyl, C2-io karboxyalkyl, C2~i0 hydroxyalkyl, nebo R7 a R8 jsou spojeny za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2, pokud však W je N, y nemůže být 0 nebo 1;
    R10 je ve všech případech nezávisle vodík, Ci_6 alkyl, benzyl, fenyl, C2_i0 hydroxyalkyl, C2-io aminoalkyl, Ci_4 mono alkyl amino (C2_8) alkyl, Ci_4 dialkylamino (C2_e) alkyl nebo C2_io karboxyalkyl;
    n je 0 až 8, s výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 8, a l
    i i
    i s
    t
    I m je 1 až 4, s tím, že když W je N, potom m není 1.
  6. 6. Sloučenina podle nároku 4, vyznačující se t í m, že
    Z může být -S020-, -SO2NR10-, -CH2O- nebo -OCH2-;
    R1 může být fenyl nebo naftyl, volitelně substituovaný jedním nebo dvěma chlory nebo dimethylaminovými skupinami;
    R2 a R3 mohou být vodík nebo lze spojit R2 a R3 za vzniku -CH=CH-CH=CH-;
    R4 může být vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl;
    Y je buď 0 nebo NR10;
    W je N nebo CR10;
    R6 je ve všech případech vodík nebo hydroxyskupina;
    R7 a R8 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_e alkyl, C2-i0 hydroxyalkyl nebo C2-10 karboxyalkyl, nebo se R7 a Re spojí za vzniku -(CH2)y -, kde y je 0, 1 nebo 2 s tou výhradou, že když W je N, y nemůže být 0 nebo 1;
    R10 je ve všech případech nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, C2_4 hydroxyalkyl, C2_4 karboxyalkyl, C2.4 aminoalkyl, dimethylamino (C2_8) alkyl, methylamino (C2_8) alkyl;
    n je 0 až 4, s tou výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 4, a m je 1, 2 nebo 3.
  7. 7. Sloučenna charakterizovaná vzorcem III
    NR5 lil '2 • · 44·· «· .·· ·»* * * • · · ♦♦ ·♦ *· nebo jejich solváty, hydráty nebo farmaceuticky přijatelné soli, vyznačující se tím, že
    Z je jedna ze skupin -NR10SO2 -, -SO2NR10-, -NR10C (RYRZ)C (RYRZ)NR10-, -OSO2-, SO2O-, 0C(RyR2)-, -C(RYRZ)O-, -NR10COnebo -CONR10-;
    Ry a Rz může být nezávisle na sobě vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, hydroalkyl, karboxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylaminoalkyl, dialkylaminoalkyl nebo karboxyl;
    R1 může být alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl nebo heteroaryl, z nichž kterýkoliv může být podle potřeby substituován;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle na sobě jeden ze skupiny: vodík, alkyl, cykloalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyanová skupina, nitroskupina, karboxamid, -CO2RX , -CH2ORX nebo -0Rx, nebo v případě substituce sousedních uhlíkových atomů mohou být R2 a R3 spojeny buď na -CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 je definováno výše;
    Rx je v každém případě jedna ze skupin: vodík, alkyl nebo cykloalkyl, kde uvedený alkyl nebo cykloalkyl mohou volitelně obsahovat jednu nebo více nenasycených vazeb;
    Y je jedna ze skupin -0-, -NR10-, -S-, -CHR10 - nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R5 je jedna ze skupin: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl nebo karboxyalkyl;
    R6 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů vodík, alkyl, hydroxyskupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, aralkoxyskupina, alkoxykarbonyloxyskupina, kyanoskupina nebo -CO2Rw, kde Rw je alkyl nebo cykloalkyl;
    • * ···· • * ♦· · · • · · « ♦ · · · • · · 1 • · · * ♦♦ *· ·· **«.
    ♦·:: : • · ·*
    R10 je v každém případě nezávisle jeden ze substituentů: vodík, alkyl, aralkyl, aryl, hydroxyalkyl, aminoalkyl, monoalkylamino (C2_10) alkyl, dialkylamino (C2-io) alkyl nebo karboxyalkyl;
    R1 je jeden ze skupiny substituentů: vodík, alkyl, cykloalkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, trifluormethyl, halogen, hydroxyalkyl, kyan, nitro-, karboxamid, karboxyl, alkoxykarbonyl nebo alkoxyalkyl;
    n je 0 až 8 s tou výhradou, že když W je N a Y je jiný než -CHR10-, potom je n 2 až 8.
  8. 8. Sloučenina podle nároku 7, vyznačuj ící se t i m, že
    Z je jedna ze skupin -SO2O-, -SO2NR10-, -C(RYRZ)O-, nebo OC(RyRz)-, kde RY je stejně jako Rz vodík;
    R1 je jeden ze skupiny substituentů: C6-io aryl, pyridinyl, chinizolinyl, chinolinyl nebo tetrahydrochinolinyl, z nichž kterýkoliv může být volitelně substituován jednou nebo dvěma skupinami: hydroxy, nitro, trifluormethyl, halogen, Ci_6 alkyl, Ci-6 alkoxy, Ci_6 aminoalkyl, Ci-6 aminoalkoxy, amino, mono (C1-4) alkyl amino, di (C1-4) alkylamino, C2_6 al koxykarbonyl amino, C2_6 alkoxykarbonyl, karboxy, Ci_6 hydroxyalkyl, C2_6 hydroxyalkoxy, C2_i0 mono (karboxyalkyl) amino, di (C2_i0 karboxyalkyl) amino, C6-i4 ar (Ci-β) alkoxykarbonyl, C2_6 alkynylkarbonyl, Ci-6 alkylsulfonyl, C2_6 alkenylsulfonyl, C2_6 alkynylsulfonyl, C1-6 alkylsulfinyl,C1-6 alkylsulfonamido, amidino, guanidino, Ci_6 alkyliminoamino, formyliminoamino, C2-6 karboxyalkoxy, C2_6 karboxyalkyl, C2_6 karboxyalkyl amino, kyan, trifluormethoxy a perfluorethoxy;
    R2, R3 a R4 jsou nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_6 alkyl, C3-8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci_8)alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, Cx-4 alkoxykarbonyl, Cx_4 alkoxymethyl, nebo Ci_4 alkoxy; nebo alternativně lze R2 a R3 , pokud jsou na sousedních uhlíkových atomech, spojit za vzniku buď CH=CH-CH=CH- nebo -(CH2)q-, kde q je 2 až 6 a R4 již bylo definováno výše;
    Y může být -0-, -S-, -NR9 10-, nebo kovalentní vazba;
    W je N nebo CR10;
    R5 j© jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, C2_io karboxyalkyl, nebo C2-10 hydroxyalkyl;
    R6 je ve všech případech jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci_4 alkyl, hydroxy, Ci_4 alkoxy, fenoxy, Ci_4 alkyloxykarbonyl nebo kyan;
    R10 je ve všech případech nezávisle vodík, Ci_6 alkyl, benzyl, fenyl, C2-lo hydroxyalkyl, C2-io aminoalkyl, Cx_4 monoalkylamino (C2_8) alkyl, Ci_4 dialkylamino (C2.8) alkyl nebo C2_io karboxyalkyl;
    rI je jeden substituent ze skupiny: vodík, Cx-6 alkyl, C3_8 cykloalkyl, fenyl, benzyl, trifluormethyl, halogen, hydroxy (Ci-8) alkyl, kyan, nitro, karboxamid, karboxy, alkoxykarbonyl, alkoxymethyl nebo alkoxy;
    n je 0 až 8, s výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 8.
  9. 9. Sloučenina podle nároku 7, vyznačující s e t i m, že
    Z může být -S020-, -SO2NR10-, -CH2O- nebo -OCH2-;
    R1 může být fenyl nebo naftyl, volitelně substituovaný jedním nebo dvěma chlory nebo dimethylaminovými skupinami;
    R2 a R3 mohou být vodík nebo lze spojit R2 a R3 za vzniku -CH=CH-CH=CH-;
    R4 může být vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl;
    Y je buď O nebo NR10;
    W je N nebo CR10;
    R5 může být vodík, Ci_6 alkyl, C2-io hydroxyalkyl nebo C2_ 10 karboxyalkyl;
    R6 je ve všech případech vodík nebo hydroxyskupina;
    R10 je ve všech případech nezávisle jeden substituent ze skupiny: vodík, Ci-4 alkyl, C2-4 hydroxyalkyl, C2-4 karboxyalkyl, C2_4 aminoalkyl, dimethylamino (C2-e) alkyl, methylamino (C2.8) alkyl;
    R'je vodík, methyl, methoxy nebo trifluormethyl; a n je 0 až 4, s tou výhradou, že když W je N, potom n je 2 až 4.
  10. 10. Sloučenina podle nároku 1, vyznačuj ící se tím, žejíje:
    Hydrochlorid 3-[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl)methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
    Diacetát 3-(2-chlorbenzyloxy)-5-methyl-l-[2-[1acetimidoyl)piperazin-4-yl]]ethoxybenzenu;
    Dihydrochlorid N-(2-(N,N-dimethylamino)ethyl)-N-[2-[[4-(1acetimidoyl)amino]butoxy]-4-methylfenyl]benzensulfonamidu; N-Benzyl-N-[[[3-(1-acetimidoyl)piperidin-4yl]methylamino]fenyl]-benzensulfonamid;
    Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylesteru 3-chlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5methylfenylesteru 2,3-dichlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 2-chloro-N-[[3-[(1-acetimidoyl)piperidin-4yl] methoxy]-5-trifluormethylfenyl]benzensulfonamidu; 2-chloro-N-(5-karboxypentyl)-N-[[3—[(l— acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]-5trifluormethylfenyl]benzensulfonamid;
    Hydrochlorid 3-[[(1-acetimidoyl)piperidin-3-yl]methoxy]-5100
    9« ·*· ·· •
    • ·· methoxyfenylesteru 1-(5-(N,N-dimethylamino)naftalensulfonové kyseliny;
    Acetát 1-[[(1-acetimidoyl)piperidin-4-yl]methoxy]naftalen-3ylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny; nebo Acetát 3-[(2-chlorfenoxy)methyl]-[[(1-acetimidoyl)piperidin4-yl]methoxy]benzenu.
  11. 11. Sloučenina podle nároku 4, vyznačuj ící se t i m, že jí je:
    Hydrochlorid 3-[3-amidinopropoxy]-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny; nebo
    Acetát 3-[5-amidinopentyloxy]-5-methylfenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny;
  12. 12. Sloučenina podle nároku 7, vyznačuj ící se tím, žejíje:
    Hydrochlorid 3-[(3-amidinofenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny;
    Hydrochlorid 3-[[3-(N-(hydroxy)amidinofenyl]methoxy)-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 3-[[3-(N-methylamidino)fenyl]methoxy]-5methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny; Hydrochlorid 3-[(4-amidinofenyl)methoxy]-5-methylfenylesteru 2-chlorbenzensulfonové kyseliny; nebo
    Hydrochlorid 3-[(3-amidinofenyl)methoxy]fenylesteru 2chlorbenzensulfonové kyseliny;
  13. 13. Farmaceutická komozice pro inhibici proteolýzy v organismu savců, vyznačující se tím, že obsahuje jisté množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12 schopné účinně inhibovat proteolýzu.
    ·· ··.
    • · ··. ·«· · · • · · ·· ··
    101
  14. 14. Farmaceutická kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že dále obsahuje farmaceuticky přijatelný nosič nebo ředidlo.
  15. 15. Farmaceutická kompozice podle nároku 13, vyznačující se tím, že obsahuje jisté množství sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 12, schopné inhibovat proteázu trypsinového typu.
  16. 16. Způsob inhibice proteolýzy v organismu savce, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání kompozice podle nároku 13 savci.
  17. 17. Způsob podle nároku 16, vyznačuj ící se t i m, že jde o inhibici proteázy trypsinového typu.
  18. 18. Způsob léčby pankteatitidy, trombózy, ischemie, mrtvice, restenosy, emfyzemu nebo zánětů u savců, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání kompozice podle nároku 13 savci.
  19. 19. Způsob inhibice trombinem vyvolané agregace krevních destiček a srážení fibrinogenu v plasmatu, vyznačující se tím, že zahrnuje podávání kompozice podle nároku 13 savci.
CZ982066A 1995-12-29 1996-12-20 Amidinové inhibitory proteas CZ206698A3 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US943195P 1995-12-29 1995-12-29

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ206698A3 true CZ206698A3 (cs) 1998-11-11

Family

ID=21737595

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ982066A CZ206698A3 (cs) 1995-12-29 1996-12-20 Amidinové inhibitory proteas

Country Status (19)

Country Link
US (5) US6034127A (cs)
EP (1) EP0883405B1 (cs)
JP (1) JP2000503010A (cs)
KR (1) KR19990076817A (cs)
AT (1) ATE260112T1 (cs)
BR (1) BR9612360A (cs)
CA (1) CA2256309C (cs)
CZ (1) CZ206698A3 (cs)
DE (1) DE69631692T2 (cs)
DK (1) DK0883405T3 (cs)
ES (1) ES2213786T3 (cs)
HU (1) HUP9902256A3 (cs)
IL (1) IL124883A0 (cs)
MX (1) MX9805152A (cs)
NO (1) NO982987L (cs)
NZ (1) NZ326076A (cs)
PL (1) PL327986A1 (cs)
PT (1) PT883405E (cs)
WO (1) WO1997024135A1 (cs)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997024135A1 (en) 1995-12-29 1997-07-10 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amidino protease inhibitors
SE9602646D0 (sv) 1996-07-04 1996-07-04 Astra Ab Pharmaceutically-useful compounds
TW499412B (en) 1996-11-26 2002-08-21 Dimensional Pharm Inc Aminoguanidines and alkoxyguanidines as protease inhibitors
AU8270698A (en) 1997-06-26 1999-01-19 Eli Lilly And Company Antithrombotic agents
DE69819349T2 (de) * 1997-08-29 2004-07-22 Tularik Ltd. 1-amino-7-isochinolin-derivate als serin protease inhibitoren
US6740682B2 (en) 1997-08-29 2004-05-25 Tularik Limited Meta-benzamidine derivatives as serine protease inhibitors
US6998245B1 (en) 1998-11-20 2006-02-14 Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. Serine protease BSSP5
AR023510A1 (es) 1999-04-21 2002-09-04 Astrazeneca Ab Un equipo de partes, formulacion farmaceutica y uso de un inhibidor de trombina.
US6586617B1 (en) 1999-04-28 2003-07-01 Sumitomo Chemical Takeda Agro Company, Limited Sulfonamide derivatives
JP2001026506A (ja) * 1999-04-28 2001-01-30 Takeda Chem Ind Ltd スルホンアミド誘導体
EP1307432A1 (en) * 2000-08-04 2003-05-07 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Cyclic oxyguanidine protease inhibitors
JP4399160B2 (ja) * 2000-11-03 2010-01-13 ザ ジェイ． デビッド グラッドストーン インスティテューツ ａｐｏＥに関連する疾患を治療する方法
US8394813B2 (en) 2000-11-14 2013-03-12 Shire Llc Active agent delivery systems and methods for protecting and administering active agents
PT1383756E (pt) * 2001-04-24 2008-06-19 Aryx Therapeutics Derivados de cumarina a utilizar como anticoagulantes
AU2003302238A1 (en) 2002-12-03 2004-06-23 Axys Pharmaceuticals, Inc. 2-(2-hydroxybiphenyl-3-yl)-1h-benzoimidazole-5-carboxamidine derivatives as factor viia inhibitors
WO2005095326A2 (en) * 2004-03-25 2005-10-13 Elan Pharmaceuticals, Inc. 2-amino- and 2-thio-substituted 1,3-diaminopropanes
GB0815781D0 (en) * 2008-08-29 2008-10-08 Xention Ltd Novel potassium channel blockers
GB0815782D0 (en) 2008-08-29 2008-10-08 Xention Ltd Novel potassium channel blockers
GB0815784D0 (en) * 2008-08-29 2008-10-08 Xention Ltd Novel potassium channel blockers
CN104857005B (zh) 2010-12-31 2019-04-26 阿斯利康公司 精氨酸酶抑制剂及其使用方法
EP2989080A1 (en) * 2013-04-22 2016-03-02 Reuter Chemische Apparatebau KG Process for preparing enantiomerically enriched 3-hydroxymethylpiperidine

Family Cites Families (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3577432A (en) * 1968-12-23 1971-05-04 Robins Co Inc A H 1-substituted-3-phenoxypyrrolidines
CH526535A (de) 1970-02-05 1972-08-15 Sandoz Ag Verfahren zur Herstellung neuer Pyrrolidin-1-carboxamidinderivate
JPS537436B2 (cs) * 1974-04-16 1978-03-17
JPS5175042A (ja) * 1974-12-26 1976-06-29 Ono Pharmaceutical Co Guanijinoshibosanamidojudotaino seizohoho
HU177098B (en) * 1979-01-04 1981-07-28 Gyogyszerkutato Intezet Process for producing new peptidyl-n-carboxy-l-arginin-a
US4316899A (en) 1979-08-24 1982-02-23 Beecham Group Limited Chromanone derivatives, a process for their preparation and compositions containing them
US4433152A (en) * 1981-05-25 1984-02-21 Nippon Chemiphar Co., Ltd. Amidinopiperidine derivatives
JPS58194861A (ja) * 1982-05-10 1983-11-12 Nippon Chemiphar Co Ltd 新規ピペリジン誘導体およびその製造法
JPS62145060A (ja) 1985-12-17 1987-06-29 Tanabe Seiyaku Co Ltd ピペラジン誘導体及びその製法
US5039805A (en) * 1988-12-08 1991-08-13 Hoffmann-La Roche Inc. Novel benzoic and phenylacetic acid derivatives
DE3913597A1 (de) 1989-04-25 1990-11-08 Heumann Pharma Gmbh & Co Diazinderivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel
TW201303B (cs) * 1990-07-05 1993-03-01 Hoffmann La Roche
DE4127404A1 (de) 1991-08-19 1993-02-25 Thomae Gmbh Dr K Cyclische iminoderivate, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und verfahren zu ihrer herstellung
DK0902013T3 (da) 1992-02-05 2002-03-25 Boehringer Ingelheim Pharma Hidtil ukendte amidinderivater, deres fremstilling og anvendelse som lægemidler med LTB4-antagonistisk virkning
TW223629B (cs) * 1992-03-06 1994-05-11 Hoffmann La Roche
TW257757B (cs) * 1993-03-03 1995-09-21 Boehringer Mannheim Gmbh
US5466811A (en) * 1994-07-18 1995-11-14 Merck & Co., Inc. Dioxolenylmethyl carbamates pro moieties for amine drugs
DE4430757A1 (de) * 1994-08-30 1996-03-07 Boehringer Mannheim Gmbh Neue 4-Aminopyridazine, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
DE4430755A1 (de) * 1994-08-30 1996-03-07 Boehringer Mannheim Gmbh Neue Phosphanoxide, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel
EP0859607B1 (en) * 1995-09-29 2002-12-18 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Guanidino protease inhibitors
WO1997024135A1 (en) 1995-12-29 1997-07-10 3-Dimensional Pharmaceuticals, Inc. Amidino protease inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
DE69631692D1 (de) 2004-04-01
PT883405E (pt) 2004-06-30
BR9612360A (pt) 1999-07-13
US6414020B2 (en) 2002-07-02
US6133315A (en) 2000-10-17
KR19990076817A (ko) 1999-10-15
CA2256309C (en) 2006-08-15
ES2213786T3 (es) 2004-09-01
US20010025041A1 (en) 2001-09-27
IL124883A0 (en) 1999-01-26
ATE260112T1 (de) 2004-03-15
NO982987D0 (no) 1998-06-26
EP0883405A4 (en) 1999-04-28
NZ326076A (en) 1999-02-25
EP0883405A1 (en) 1998-12-16
JP2000503010A (ja) 2000-03-14
NO982987L (no) 1998-08-28
US6034127A (en) 2000-03-07
CA2256309A1 (en) 1997-07-10
AU1432397A (en) 1997-07-28
HUP9902256A3 (en) 2000-01-28
HUP9902256A1 (hu) 1999-10-28
MX9805152A (es) 1998-10-31
AU706145B2 (en) 1999-06-10
DK0883405T3 (da) 2004-06-28
PL327986A1 (en) 1999-01-04
EP0883405B1 (en) 2004-02-25
US6225302B1 (en) 2001-05-01
WO1997024135A1 (en) 1997-07-10
US6281206B1 (en) 2001-08-28
DE69631692T2 (de) 2004-12-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ206698A3 (cs) Amidinové inhibitory proteas
US6235778B1 (en) Aminoguanidines and alkoxyguanidines as protease inhibitors
US5891909A (en) Amidinohydrazones as protease inhibitors
US5792769A (en) Guanidino protease inhibitors
EP0859607B1 (en) Guanidino protease inhibitors
WO1997047299A1 (en) Amidino and guanidino heterocyclic protease inhibitors
AU706145C (en) Amidino protease inhibitors
JP2004505956A (ja) 環式オキシグアニジンプロテアーゼインヒビター

Legal Events

Date Code Title Description
PD00 Pending as of 2000-06-30 in czech republic