CZ201637A3 - Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2 - Google Patents

Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2 Download PDF

Info

Publication number
CZ201637A3
CZ201637A3 CZ2016-37A CZ201637A CZ201637A3 CZ 201637 A3 CZ201637 A3 CZ 201637A3 CZ 201637 A CZ201637 A CZ 201637A CZ 201637 A3 CZ201637 A3 CZ 201637A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
porcine circovirus
protein
vaccine based
capsid protein
nanoparticle
Prior art date
Application number
CZ2016-37A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ307133B6 (cs
Inventor
Jitka Forstová
Martin Fraiberk
Hana Španielová
Ivan Pšikal
Original Assignee
Přírodovědecká Fakulta Univerzity Karlovy V Praze
Dyntec Spol. S R.O.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Přírodovědecká Fakulta Univerzity Karlovy V Praze, Dyntec Spol. S R.O. filed Critical Přírodovědecká Fakulta Univerzity Karlovy V Praze
Priority to CZ2016-37A priority Critical patent/CZ307133B6/cs
Publication of CZ201637A3 publication Critical patent/CZ201637A3/cs
Publication of CZ307133B6 publication Critical patent/CZ307133B6/cs

Links

Classifications

    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02ATECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2, kdy nanočástice je složena z nosiče, který tvoří pentamer kapsidového proteinu VPI myšího polyomaviru, na který jsou kovalentně připojeny molekuly kapsidového proteinu prasečího cirkoviru 2, přičemž tento neobsahuje genom (DNA) prasečího cirkoviru 2, ani genom myšího papilomaviru, a dále je připojena His-tag kotva. Vakcína má kapsidový protein tvořen kmenem prasečího cirkoviru 2B.

Description

Vakcína založená na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2
Oblast techniky
Vynález se týká vakcíny založené na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2, která nahrazuje inaktivovanou virovou vakcínu proti uvedenému viru.
Dosavadní stav techniky
Ke dnešku jsou na trhu 4 vakcíny proti prasečímu cirkoviru 2. Francouzká firma Merial vyvinula vakcínu Circovac založenou na inaktivovaném PCV2 viru. Firma Fořt Dodge připravila vakcinu spočívající v chimérickém viru PCV1 ve kterém byl gen pro Cap (kapsidový protein) zaměněn za protein z PCV2. Produkty Circoflex (Boehrinhger, Ingelheim) a Circumvent (Intervet) jsou založeny na inaktivováných chimérických bakulovirech produkujících cirkovirový Cap protein. Vzhledem k vysokým cenám těchto vakcín ani v České republice ani v celé řadě dalších zemí nedochází k plošné vakcinaci. Po levnější účinné vakcinaci je stále poptávkao čemž svědčí provedený průzkum trhu. Chimérická nanočástice - pentamer fůzního proteinu VP1 myšího polyomaviru a Cap proteinu prasečího cirkoviru 2 je produkována ve velkých množstvích v hmyzích buňkách z rekombinantního bakuloviru a díky připojené His-tag kotvě je snadno izolovatelná. Vzhledem k tomu, že se nejedná o virus, není třeba inaktivace. Při podobných vakcinačních účincích jako má nejlepší z dostupných vakcín (Circoflex), bude cena nižší.
Úkolem vynálezců bylo vyvinout vakcínu založenou na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2, která nahrazuje inaktivovanou virovou vakcínu proti uvedenému viru.
Podstata technického řešení
Uvedené nedostatky odstraňuje vakcína založená na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2, podle tohoto vynálezu, jehož podstata spočívá vtom, že nanočástice je složena z nosiče, který tvoří pentamer kapsidového proteinu VP1 myšího polyomaviru, na který jsou kovalentně připojeny molekuly kapsidového proteinu prasečího cirkoviru 2, neobsahující genom (DNA) prasečího cirkoviru 2, ani genom myšího
papilomaviriy a dále je připojena His-tag kotva, protein tvořen kmenem prasečího cirkoviru 2B.
Chimérická nanočástice má kapsidový
K největším výhodám tohoto vynálezu patří jednoduchá příprava, dále to, že chimérická nanočástice není vůbec virulentní z důvodu chybějící genové virové informace. Další výhodou je snadná izolovatelnost.
Příklady uskutečnění vynálezu
Nanočástice je složena z nosiče, který tvoří pentamer kapsidového proteinu VP1 myšího polyomaviru, na který jsou kovalentně připojeny molekuly kapsidového proteinu prasečího cirkoviru 2 a dále je připojena His-tag kotva. His-tag kotva je řetězec po sobě jdoucích aminokyselin hystidinu. Tento řetězec je schopen vázat dvoumocné ionty kovů, nejčastěji Ni2+, Cu2+, Zn2+. Tyto ionty jsou ukotveny na nosiči v koloně a umožňují isolaci proteinu. Kapsidový protein je ve výhodném provedení tvořen prasečím cirkovirem 2B (v současnosti nej rozšířenějším kmenem). Chimérická nanočástice se připraví následujícím postupem:
Rekombinantní bakulovirus pro produkci chimérické nanočástice (složené zpentameru fůzního proteinu VP1 myšího polyomaviru a Cap proteinu prasečího cirkoviru) v hmyzích buňkách byl připraven metodou „Bac to Bac“ (Invitrogen). Hmyzí buňky Sf 9 adaptované na kultivaci v bezsérovém mediu se infikují v bioreaktoru inokulem rekombinantního bakuloviru s multiplicitou infekce 10. Po 5 dnech se buněčná suspenze lyžuje, opracuje DNasou a pentamery se izolují afmitní chromatografií s využitím His-tag kotvy. Rekombinantní bakulovirus není přítomen ve finálním produktu. Pracuje se pouze s geny pro kapsidové proteiny myšího polyomaviru a prasečího cirkoviru 2. Při výrobním procesu se nikde nepracuje s kompletními genomy myšího polyomaviru a prasečího cirkoviru 2. Nemůže tudíž dojít k replikaci virů.
Průmyslová využitelnost
Uvedený vynález je využitelný pro prevenci virových chorob v chovech hospodářských zvířat, kde není dostupná (příliš drahá) vakcína, nebo je použití vakcíny riskantní z hlediska možného rozvoje choroby po její aplikaci.

Claims (1)

1. Vakcína založená na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2, vyznačující se tím, že nanočástice je složena z nosiče, který tvoří pentamer kapsidového proteinu VP1 myšího polyomaviru, na který jsou kovalentně připojeny molekuly kapsidového proteinu prasečího cirkoviru 2, přičemž tento neobsahuje genom (DNA) prasečího cirkoviru 2, ani genom myšího papilomaviru, a dále je připojena His-tag kotva.
CZ2016-37A 2016-01-26 2016-01-26 Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2 CZ307133B6 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2016-37A CZ307133B6 (cs) 2016-01-26 2016-01-26 Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CZ2016-37A CZ307133B6 (cs) 2016-01-26 2016-01-26 Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ201637A3 true CZ201637A3 (cs) 2017-08-02
CZ307133B6 CZ307133B6 (cs) 2018-01-31

Family

ID=59519931

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ2016-37A CZ307133B6 (cs) 2016-01-26 2016-01-26 Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2

Country Status (1)

Country Link
CZ (1) CZ307133B6 (cs)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112011556A (zh) * 2020-08-06 2020-12-01 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) 一种猪圆环病毒2b、2d型二价病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104043117B (zh) * 2013-03-11 2018-02-13 普莱柯生物工程股份有限公司 一种疫苗组合物及其制备方法和应用
CN103540605A (zh) * 2013-09-22 2014-01-29 重庆市畜牧科学院 重组ⅱ型猪圆环病毒的衣壳蛋白噬菌体展示颗粒及其制备方法与应用
CN104098657B (zh) * 2014-07-07 2017-06-27 南京农业大学 一种猪圆环病毒2型免疫保护多肽与疫苗

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112011556A (zh) * 2020-08-06 2020-12-01 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) 一种猪圆环病毒2b、2d型二价病毒样颗粒疫苗及其制备方法和应用

Also Published As

Publication number Publication date
CZ307133B6 (cs) 2018-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Xu et al. Self-assembly of virus-like particles of canine parvovirus capsid protein expressed from Escherichia coli and application as virus-like particle vaccine
Hadj Hassine et al. Virus‐like particles as powerful vaccination strategy against human viruses
CN106479986B (zh) 一种o型口蹄疫病毒样颗粒及其制备方法和用途
CN104404074A (zh) 口蹄疫病毒衣壳蛋白串联共表达和病毒样颗粒的制备方法
Ribeiro-Müller et al. Prophylactic papillomavirus vaccines
CN104073473B (zh) 一种pcv2病毒样颗粒及其制备方法和裂解及vlp组装缓冲液
KR101919002B1 (ko) 구제역 바이러스의 가용성 다가 항원단백질 및 이의 용도
Moreno et al. Rabbit hemorrhagic disease virus capsid, a versatile platform for foreign B-cell epitope display inducing protective humoral immune responses
CN105349562B (zh) 表达猪细小病毒vp2蛋白的重组载体、重组菌及其应用
CN103146751A (zh) 新城疫病毒株rLX/H9HA及其构建方法和应用
CZ201637A3 (cs) Vakcína založená na proteinové chimerické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2
CN116041547A (zh) O型口蹄疫病毒多表位病毒样颗粒抗原及其制备方法和应用
CN102526718B (zh) 一种重组h5n1禽流感病毒细胞苗及应用
CN111303251B (zh) 一种口蹄疫病毒样颗粒体外组装的方法及其应用
CZ29310U1 (cs) Vakcína založená na proteinové chimérické nanočástici proti prasečímu cirkoviru 2
CN103333916A (zh) 适应鸡新城疫病毒增殖的bhk细胞系的建立方法及其应用
CN111773383A (zh) 一种o型口蹄疫亚单位疫苗及其制备方法和应用
Qin et al. Biological characteristics and immunological properties in Muscovy ducks of H5N6 virus-like particles composed of HA-TM/HA-TMH3 and M1
CN102370976B (zh) 猪流感病毒和猪口蹄疫病毒的混合病毒样颗粒、制备方法和应用
TWI447226B (zh) 用於增殖病毒之二步驟溫度型態
CN101948850A (zh) 登革病毒病毒样颗粒的制备方法及应用
TW202031893A (zh) Vlp表現cho細胞株之建構
EP3707250B1 (en) So3 chromatography for use in a method for virus purification
Gao et al. Preparation and immunogenicity studies of NvIBDV VP2-ferritin nanoparticles
WO2018012498A1 (ja) リアソータントインフルエンザウイルス作出方法