CZ2004579A3 - Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou - Google Patents
Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou Download PDFInfo
- Publication number
- CZ2004579A3 CZ2004579A3 CZ2004579A CZ2004579A CZ2004579A3 CZ 2004579 A3 CZ2004579 A3 CZ 2004579A3 CZ 2004579 A CZ2004579 A CZ 2004579A CZ 2004579 A CZ2004579 A CZ 2004579A CZ 2004579 A3 CZ2004579 A3 CZ 2004579A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- hyaluronan
- group
- derivatives
- compound
- hydrophobizing
- Prior art date
Links
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical class CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 title abstract 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 230000004913 activation Effects 0.000 claims abstract description 8
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims abstract description 5
- AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N hydroxylamine group Chemical group NO AVXURJPOCDRRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N hyaluronan Chemical class CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)C1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H](C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-MNSSHETKSA-N 0.000 claims description 26
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 claims description 25
- 229940099552 hyaluronan Drugs 0.000 claims description 18
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 claims description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 13
- -1 tetrafluoroborate Chemical compound 0.000 claims description 12
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 claims description 9
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 claims description 7
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 7
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 6
- 150000003973 alkyl amines Chemical class 0.000 claims description 5
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 claims description 4
- AGSPXMVUFBBBMO-UHFFFAOYSA-N beta-aminopropionitrile Chemical class NCCC#N AGSPXMVUFBBBMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229940042795 hydrazides for tuberculosis treatment Drugs 0.000 claims description 2
- 150000002429 hydrazines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002443 hydroxylamines Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 claims 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 abstract description 8
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract description 4
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 abstract 1
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M Carbamate Chemical group NC([O-])=O KXDHJXZQYSOELW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N cyanogen bromide Chemical compound BrC#N ATDGTVJJHBUTRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical compound CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 2
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 2
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N butan-1-amine Chemical compound CCCCN HQABUPZFAYXKJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 2
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 2
- JRBPAEWTRLWTQC-UHFFFAOYSA-N dodecylamine Chemical compound CCCCCCCCCCCCN JRBPAEWTRLWTQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N octan-1-amine Chemical compound CCCCCCCCN IOQPZZOEVPZRBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DPBLXKKOBLCELK-UHFFFAOYSA-N pentan-1-amine Chemical compound CCCCCN DPBLXKKOBLCELK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N Decylamine Chemical compound CCCCCCCCCCN MHZGKXUYDGKKIU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000722985 Fidia Species 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WJYIASZWHGOTOU-UHFFFAOYSA-N Heptylamine Chemical compound CCCCCCCN WJYIASZWHGOTOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010003272 Hyaluronate lyase Proteins 0.000 description 1
- 102000001974 Hyaluronidases Human genes 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Chemical group CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical group CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- OZBFLQITCMCIOY-FOUAGVGXSA-N OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO Chemical compound OC[C@H]([C@H]([C@@H]([C@H]1O)O)O[C@H]2O[C@@H]([C@@H](O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O[C@H]3O[C@H](CO)[C@H]([C@@H]([C@H]3O)O)O3)[C@H](O)[C@H]2O)CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]3O[C@@H]1CO OZBFLQITCMCIOY-FOUAGVGXSA-N 0.000 description 1
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical group O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 150000001719 carbohydrate derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000009087 cell motility Effects 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- ZDVOVXJBWWKMSA-UHFFFAOYSA-N cyano(triethyl)azanium Chemical class CC[N+](CC)(CC)C#N ZDVOVXJBWWKMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 125000000600 disaccharide group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000000569 multi-angle light scattering Methods 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 229940100684 pentylamine Drugs 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
(54) Název přihlášky vynálezu:
Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou
Anotace:
Způsob přípravy hydrafobizovaných derivátů hyaluronanu obsahujících substituent vázaný karbamátovou vazbou spočívá v tom, že v alkalickém prostředí reagují hydroxylové skupiny hyaluronanu, aktivované pomocí aktivační sloučeniny, s hydrofobizující sloučeninou obsahující volnou aminoskupinu, hydrazidovou, hydrazinovou nebo hydroxylaminovou skupinu.
CO <
O)
CM
N
O • 9 ·· 99 • 9 9 9 9 • ···· 9 9 • ·· · 9 9 ·
9 9 9 « ·
99 99
Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou
Oblast techniky
Vynález se týká způsobu přípravy hydrofobizovaných derivátů hyaluronanu, obsahujících substituent vázaný karbamátovou vazbou, které nabízí nové použití v kosmetice nebo farmacii.
Dosavadní stav techniky
Hyaluronová kyselina je přírodní lineární polysacharid tvořený β-1,4-vázanými opakujícími se disacharidovými jednotkami D-glukuronové kyseliny a TV-acetyl-Dglukosaminu spojenými β-1,3-vazbou.
Tento glykosaminoglykan má molekulovou hmotnost 1 až 10 000 kDa a je jedním z glykosaminoglykanů přítomných v extracelulární matrix, synoviální tekutině kloubu a strukturní části chrupavky. Hraje významnou roli při pohybu buněk, buněčné diferenciaci, hojení ran a rakovinné metastázi (Prestwich G. D., Marecak D. M., Mareček D. F. et al.: Controlled Chemical modification of hyaluronic acid: synthesis, applications, and biodegradation of hydrazide derivatives. Journal of Controlled Release 1998, 53,93-103).
Dosud byly převážně studovány hydrofobní deriváty kyseliny hyaluronové nebo její soli, jejichž substituent byl vázán esterovou (Della Valle F., ROMEO A. (Fidia S.p.A.): US 4965353 (A61K31/70; C07G3/00; C07H1/00) nebo amidovou vazbou (Hamilton R., Fox E. M., Acharya R. A. et al. (Genzyme Corporation): US 4937270 (A61K47/26)).
Hydrofobní substituenty se k hyaluronanu připojují přes karboxylovou skupinu, čímž dochází k výrazné změně rozložení elektrických nábojů u takto substituovaného hyaluronanu, která je spojena nejen se změnou fyzikálních vlastností, ale i biologické aktivity. Proto byly vyvinuty přípravky, jejichž substituent je vázán přes hydroxylovou skupinu hyaluronanu.
Podle Ellwood D. C. (Scandigen AB): EU 0296740 (C08B37/00; A61K31/70) byly vytvořeny konjugáty hyaluronové kyseliny s fyziologicky aktivními nebo chemoterapeutickými látkami. Tyto konjugáty byly připraveny na základě reakce aktivované hydroxylové skupiny hyaluronové kyseliny s látkou obsahující aminoskupinu. Sloučení fyziologicky aktivní nebo chemoterapeutické látky s hyaluronovou kyselinou zpomaluje uvolňování této látky in vivo a in vitro a může mít vliv na penteraci skrz kůži. Podle Hanushewky M. (Baxter Laboratories): US 3876501 (C07G7/00; C08B37/02) byly pomocí aktivace hydroxylových skupin bromkyanem a následným připojením enzymů nebo proteinů přes aminoskupinu připraveny deriváty vodorozpustných sacharidů. Stávající příprava minimalizuje vznik nežádoucích vedlejších produktů a zabývá se přípravou také ve vodě nerozpustných derivátů.
Podstata vynálezu
Úkolem vynálezu je odstranit nedostatky dosavadního stavu techniky a poskytnout způsob přípravy hydrofobizovaných derivátů hyaluronanu, jež je možné použít jako aktivní látku v kosmetice, nosič nízkomolekulárních látek, součástí složitějších systémů (například liposomy, mikroemulze) nebo nosič aktivních látek cíleným transportem a dále jako stabilizující látku v oftalmologii. Takto připravené hydrofobizované deriváty jsou hyaluronidasou hůře degradovány, vykazují tedy vyšší stabilitu při působení enzymy.
Derivát hyaluronanu o molekulové hmotnosti 1 až 10 000 kDa, obsahující substituent vázaný karbamátovou vazbou, se připraví ve dvou krocích. Nejprve se provede aktivace OH skupiny hyaluronanu v alkalickém prostředí pomocí aktivační sloučeniny, načež se aktivovaný hyaluronan nechá reagovat v alkalickém prostředí s hydrofobizující sloučeninou v teplotním rozmezí 0 až 50 °C.
Aktivace OH skupiny hyaluronanu podle vynálezu se s výhodou provádí v alkalickém prostředí při pH vyšším než 8. Hodnota pH alkalického prostředí je výhodněji počátkem aktivace alespoň 10.
Aktivační sloučenina podle vynálezu je výhodně vybrána ze skupiny obsahující halogenkyany, dimethylaminopyridium tetrafluoroborát nebo N-kyanoethylamonnou sůl.
Hydrofobizující sloučenina podle vynálezu je vybrána ze skupiny obsahující aminosloučeniny, výhodně alkylaminy, hydroxylaminy, dále hydrofobizující sloučeniny zahrnují hydraziny, hydrazidy, oximy a jejich deriváty.
Alkylamin podle vynálezu je výhodně vybrán ze skupiny obsahující butylamin, pentylamin, hexylamin, heptylamin, oktylamin, decylamin nebo dodecylamin.
Pro reakci může být použitý hyaluronan o molekulové hmotnosti 1 až 10 000 kDa.
Při přípravě derivátů hyaluronanu dochází k navázání alkylaminu nebo jiných aminů na aktivovanou hydroxylovou skupinu hyaluronanu.
Pro aktivaci této hydroxylové skupiny může být použit bromkyan nebo některý z jiných halogenkyanů. Použité množství halogenkyanu závisí na požadovaném stupni substituce. Množství použitého halogenkyanu není nijak omezeno, výhodně se však použije 0,5 až 2,0 ekvivalentního množství na dimerovou jednotku hyaluronové kyseliny. Stejně může být použit pro aktivaci hydroxylové skupiny stabilnější dimethylaminopyridinium tetrafluoroborát (CDAP) nebo A-kyanotriethylamonná sůl (CTEA).
• ···
Neboť hyaluronan není rozpustný v nevodném rozpouštědle, je pro tuto reakci využívána demineralizovaná voda. Reakce probíhá v alkalickém prostředí, pH roztoku může být upraveno přídavkem hydroxidu alkalických kovů. Do reakční směsi je přidáváno takové množství alkálií, aby pH bylo vyšší než 8.
Na počátku přípravy je žádoucí, aby do roztoku hyaluronanu bylo přidáno takové množství alkálií, aby pH bylo alespoň 10, neboť po aktivaci tohoto glykosaminoglykanu dochází ke spotřebě alkálie během reakce. Do reakční směsi je po aktivaci hydroxylové skupiny přidán alkylamin (butyl-, pentyl-, hexyl-, heptyl-, oktyl-, decyl-, dodecylamin) nebo jiné látky obsahující aminoskupinu. Reakční podmínky jsou dále charakterizovány reakční teplotou v rozmezí 0 až 50 °C.
Výsledný produkt je v závislosti na délce alkylového řetězce a stupni substituce rozpustný ve vodě. Stupeň substituce je roven 100 %, když je modifikována jedna hydroxylová skupina dimeru hyaluronové kyseliny. Připravený derivát je izolován dialýzou nebo ultrafiltrací proti destilované vodě a následně lyofilizován, nebo vakuově sušen. Pro odstranění látek nižší molekulové hmotnosti byla použita dialyzační celulózová střeva se zadržovanou molekulovou hmotností 12 kDa, případně polyetersulfonová ultrafiltrační membrána Pall (Omega 10K) se zadržovanou molekulovou hmotností 10 kDa. Derivát může být přečištěn také běžnými metodami jako je srážení alkoholem, či gelová filtrace.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
1,0 g hyaluronanu o molekulové hmotnosti 450 kDa se rozpustilo ve 140 ml destilované vody a pH roztoku se upravilo na 10,5 pomocí 1M NaOH. Do roztoku se přidalo 0,23 g bromkyanu v lml acetonitrilu a po 5 minutách míchání při pokojové teplotě se přidalo 0,37 g oktylaminu v 5 ml acetonitrilu. PH se udržovalo v rozmezí 9,5 až 10,5. Reakční směs se míchala po dobu 23 hodin. Poté byla reakční směs dialyzována a produkt lyofilizován.
DS (z ‘HNMR): 0,21
Mw (z HPLC, SEC-MALLS): 394 kDa • ·· • · · • · · · · ··· • · * · · · · · · • · · · · ··· ·· ·
Příklad 2
1,0 g hyaluronanu o molekulové hmotnosti 450 kDa se rozpustilo v 150 ml destilované vody a pH roztoku se upravilo na 10,5. Do tohoto roztoku se přidalo 0,22 g bromkyanu v 1 ml acetonitriíu a za udržování pH mezi 9,5-10,5 se po 5 minutách míchání přidalo 0,256 g hexylaminu. PH reakční směsi se upravovalo 1M NaOH. Reakční směs se míchala po dobu 22 h. Produkt se izoloval dialýzou s následnou lyofilizací.
DS(z*HNMR): 0,41
IR: pro vyšší stupeň substituce delším alkylovým řetězcem je výrazný pás valenční vibrace v(CH) při 2926 cm'1 a důkazem aktivace je vas(C=N=O) při 2250 cm'1.
Příklad 3
0,1 g hyaluronanu o molekulové hmotnosti 450 kDa se rozpustilo v 10 ml demineralizované vody a pH roztoku se upravilo pomocí 0,lM NaOH na 9,5 a přidalo se 0,0248 g CDAP (dimethylaminopyridinium tetrafluoroborát) v 0,3 ml acetonitriíu a pH se udržovalo při této hodnotě po dobu 3 minut. Následně se přidalo 0,100 g ó-amino-p-cyklodextrinu a po 23 hodinách se reakční směs neutralizovala 0,2M kyselinou octovou. Produkt se izoloval dialýzou a lyofilizací.
• · · * ·· φφφφ ·· φ • · · ··· ··· • · · · · · φφφφ · · · · • ·· ··· · ··· « · · · · c · φ · φ φ φ « · φ ·
J φφφφ φφφφφ φφ φ
Elementární analýza: 3,0 % Ν, 38,62 % C, 6,2 % Η
IR: substituent vázaný karbamátovou vazbou se projevil navýšením amidových pásů zejména Amid I a Amid II při vlnočetech 1655 cm'1 a 1565 cm'1
Claims (8)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Způsob přípravy derivátů hyaluronanu, vyznačující se tím, že v alkalickém prostředí reagují hydroxylové skupiny hyaluronanu, aktivované pomocí aktivační sloučeniny, s hydrofobizující sloučeninou obsahující volnou aminoskupinu, hydrazidovou, hydrazinovou nebo hydroxylaminovou skupinu.
- 2. Způsob dle nároku 1, vyznačující se tím, že molekulová hmotnost hyaluronanu se pohybuje v rozmezí 1 000 a ž 2 500 000 g.mof1.
- 3. Způsob dle nároku 1, vyznačující se tím, že hyaluronan může být volná kyselina hyaluronová nebo kterákoli její farmakologicky přijatelná sůl.
- 4. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že pH alkalického prostředí během aktivace OH skupiny hyaluronanu je vyšší než 8.
- 5. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že aktivační sloučenina je vybrána ze skupiny obsahující halogenkyany, dimethylaminopyridium tetrafluoroborát nebo N-kyanoethylamonnou sůl.
- 6. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že hydrofobizující sloučenina je vybrána ze skupiny obsahující aminosloučeniny, hydraziny, hydrazidy, oximy a jejich deriváty.
- 7. Způsob podle nároku 5, vyznačující se tím, že hydrofobizující sloučenina, obsahující volnou aminoskupinu, je vybrána ze skupiny obsahující alky laminy a hydroxy laminy.
- 8. Způsob podle nároku 1, vyznačující se tím, že může být proveden ve vodném prostředí i v organickém rozpouštědle.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20040579A CZ297658B6 (cs) | 2004-05-06 | 2004-05-06 | Zpusob prípravy derivátu hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CZ20040579A CZ297658B6 (cs) | 2004-05-06 | 2004-05-06 | Zpusob prípravy derivátu hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ2004579A3 true CZ2004579A3 (cs) | 2005-12-14 |
| CZ297658B6 CZ297658B6 (cs) | 2007-02-28 |
Family
ID=35458103
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ20040579A CZ297658B6 (cs) | 2004-05-06 | 2004-05-06 | Zpusob prípravy derivátu hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CZ (1) | CZ297658B6 (cs) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4716224A (en) * | 1984-05-04 | 1987-12-29 | Seikagaku Kogyo Co. Ltd. | Crosslinked hyaluronic acid and its use |
| US5616568A (en) * | 1993-11-30 | 1997-04-01 | The Research Foundation Of State University Of New York | Functionalized derivatives of hyaluronic acid |
| IT1301994B1 (it) * | 1998-08-05 | 2000-07-20 | Jasper Ltd Liability Co | Derivati dell'acido ialuronico. |
| RU2191782C2 (ru) * | 2000-09-21 | 2002-10-27 | Институт нефтехимии и катализа АН РБ и УНЦ РАН | Способ получения модифицированной гиалуроновой кислоты |
-
2004
- 2004-05-06 CZ CZ20040579A patent/CZ297658B6/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CZ297658B6 (cs) | 2007-02-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2510016B1 (en) | A method of preparation of an oxidized derivative of hyaluronic acid and a method of modification thereof | |
| JP5945504B2 (ja) | ヒアルロン酸の酸化誘導体，その調製方法及びその修飾方法 | |
| US11643509B2 (en) | Carbohydrate crosslinker | |
| US7879818B2 (en) | Hyaluronic acid-based cross-linked nanoparticles | |
| Rathinam et al. | Selective synthesis of N, N, N-trimethylated chitosan derivatives at different degree of substitution and investigation of structure-activity relationship for activity against P. aeruginosa and MRSA | |
| FR2934999A1 (fr) | Polysaccharides fonctionnalises par des derives du tryptophane | |
| JP6649892B2 (ja) | ヒアルロン酸オリゴマーの複合体又はその塩，その調製法及びその使用 | |
| KR20150040966A (ko) | 히알루론산 유도체, 이의 제조 방법, 이의 변형 방법, 및 이의 용도 | |
| Dionísio et al. | Charged pullulan derivatives for the development of nanocarriers by polyelectrolyte complexation | |
| Biswas et al. | Biomedical applications carboxymethyl chitosans | |
| RU2708327C2 (ru) | Производные сульфатированных полисахаридов, их способ получения, модификация и применение | |
| CA3063986A1 (en) | Water-soluble polysaccharide derivatives, process for their preparation, and their uses | |
| JP4958368B2 (ja) | 架橋ヒアルロン酸 | |
| CZ2004579A3 (cs) | Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných karbamátovou vazbou | |
| JP4310967B2 (ja) | 多糖類複合体の製造方法 | |
| JP3955652B2 (ja) | 合成アミノ糖類誘導体及びその製造方法 | |
| JP2000109502A (ja) | 複合キトサン化合物及びその用途 | |
| CZ2004580A3 (cs) | Způsob přípravy derivátů hyaluronanu vázaných éterovou nebo aminovou vazbou |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20120506 |