CZ20021984A3

CZ20021984A3 - Nové (aminopropyl)methylfosfinové kyseliny

Info

Publication number: CZ20021984A3
Application number: CZ20021984A
Authority: CZ
Inventors: Kosrat Amin; Thomas Elebring; Peter Guzzo; Thomas Olsson; Marianne Swanson; Unge Sverker Von
Original assignee: Astrazeneca Ab
Priority date: 1999-12-09
Filing date: 2000-12-04
Publication date: 2002-11-13
Also published as: KR100752010B1; AR033350A1; CO5261538A1; EE200200287A; IL150090A; HUP0300386A3; TWI225415B; CN1413104A; UA73149C2; HK1053066A1; AU780259B2; NO20022729L; HUP0300386A2; AU2241201A; EP1239843A1; IS6409A; SE9904507D0; NZ519377A; BR0016291A; MXPA02005537A

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká nových sloučenin majících afinitu k jednomu nebo více GABA_b receptorům, stejně jako jejich farmaceuticky přijatelných solí, solvátů a stereoizomerů. Vynález se také týká způsobů jejich výroby, farmaceutických kompozic obsahujících uvedené terapeuticky aktivní sloučeniny a také použití uvedených aktivních sloučenin při terapii.

Dosavadní stav techniky

Reflux

Gastroezofageální reflux (Gastro-oesophageal reflux disease - GORD) je nejčastější choroba horní části gastrointestinálního traktu. Stávající terapie je zaměřena na snížení sekrece žaludeční kyseliny nebo na snížení expozice ezofageální kyselinou zvýšením ezofageální clearance, tonus spodního ezofageálního (jícnového) svěrače a na gastrické vyprazdňování. Dříve se prosazoval názor, že hlavní mechanismus, který stojí za refluxem, je závislý na hypotonickém spodním ezofageálním svěrači. Avšak pozdější výzkumy (např. Halloway & Dent (1999) Gastroenterol. Clin. N. Amer. 19, 517 - 535) ukázaly, že většina refluxových epizod se vyskytuje během krátkodobých relaxací spodního ezofageálního svěrače, dále označovaných jako TLOSR, tj. relaxací nevyvolaných polknutím. Ukázalo se také, že sekrece gastrické kyseliny je obvykle normální u pacientů s GORD.

Existuje tudíž potřeba sloučenin, které snižují výskyt TLOSR a tím předcházejí refluxu.

Farmaceutická kompozice obsahující lokální anestetika přizpůsobená k zamezení relaxace spodního ezofageálního svšrače je popsána ve WO 87/04077 a US 5 036 057. Nověji se ukázalo, že agonisté GABA_B-receptoru inhibují TLOSR, jak je popsáno ve WO 98/11885.

Agonisté GABA_b receptoru

GABA (kyselina 4-aminobutanová) je endogenní neuropřenašeč v centrálním a periferním nervovém systému. Receptory GABA se tradičně rozdělují do receptorových subtypů GABA_a a GABA_b. GABA_b receptory patří do nadskupiny receptorů vázajících G-protein. Agonisté GABA_b receptoru se popisují jako užiteční při léčení chorob CNS, jako je svalová relaxace u spinální spasticita, kardiovaskulárních chorob, astmatu, chorob pohybu střev, jako je dráždivý střední syndrom (IBS - irritable bowel synrome) a jako prokinetická a antitusivni činidla. Bylo objeveno, že agonisté GABA_b receptoru jsou užiteční při léčení zvracení (WO 96/11680) a nověji, jak bylo uvedeno výše, u inhibice TLOSR (WO 98/11885).

Nejvíce studovaným agonistou GABA_b receptoru je baclofen (kyselina 4-amino-3-(chlorfenyl)butanová) popsaná ve švýcarském patentu č. CH 449 046. Baclofen byl po několik let používán jako antispastické činidlo. EP 0356128 popisuje použití specifické sloučeniny kyseliny (3-aminopropyl)methylfosfinové jako silného agonisty GABA_breceptoru v terapii. EP 0181833 popisuje substituované 3-aminopropylfosfinové kyseliny, u kterých bylo zjištěno, že mají vysokou aktivitu k místům GABA_b receptorů. Analogicky jako u baclofenu mohou být tyto sloučeniny použity jako například muskulární relaxanty. EP 0399949 popisuje deriváty kyseliny (3-aminopropyl)methylfosfinové, které jsou popsány jako silné agonisty GABA_b receptoru.

• ·

Tyto sloučeniny jsou uváděny jako užitečné jako muskulární relaxanty. EP 0443969 a FR 2722192 jsou přihlášky týkající se derivátů kyseliny 4-aminobutanové mající různé heterocyklické substituenty na uhlíku 3 butanového řetězce Vztahy mezi strukturou a aktivitou několika analogů kyseliny fosfinové s ohledem na jejich afinitu ke GABA_breceptoru stejně jako jejich účinek jako muskulární relaxant jsou popsány v J. Med. Chem. (1995) 38,

3297 - 3312. Závěr tohoto článku je, že s (S)-enantiomerem kyseliny 3-amino-2-hydroxypropylmethylfosfinové může být dosažena znatelně vyšší muskulární relaxace než s baclofenem a bez výskytu nežádoucích účinků na CNS.

Podstata vynálezu

Tento vynález poskytuje nové sloučeniny vzorce I

kde

Ri představuje vodík, hydroxyskupinu, nižší alkyl, nižší alkoxyskupinu nebo halogen;

R₂ představuje hydroxyskupinu, merkaptoskupinu, halogen nebo oxoskupinu;

R₃ představuje vodík nebo nižší alkyl (případně substituovaný hydroxyskupinou, merkaptoskupinou, nižší alkoxyskupinou, arylem nebo nižší thioalkoxyskupinou);

• · • · • · ► · · · » · · · » · · · β » · · · • · · · • · · 4 · • · • · • · · ·

R4 představuje vodík, nižší alkyl (případně substituovaný arylem) nebo aryl;

Rs představuje methyl, fluormethyl, difluormethyl nebo trifluormethyl;

a jejich farmaceuticky přijatelné soli, solváty a jejich stereoizomery, s výjimkou:

i) racemátu kyseliny (3-amino-2-hydroxypropyl)methylfosfinové ii) kyseliny (S)-(3-amino-2-hydroxypropyl)methylfosfinové, iii) kyseliny (R)-(3-amino-2-hydroxypropyl)methylfosfinové, iv) kyseliny (3-amino-2-hydroxypropyl)difluormethylfosfinové, a

v) kyseliny (3-amino-2-oxopropyl)methylfosfinové.

Výhodně je sloučeninou kyselina (3-amino-2fluorpropyl)methyl)fosfinová, (2R)-(3-amino-2fluorpropyl)methyl)fosfinová, (2S)-(3-amino-2fluorpropyl)(methyl)fosfinová, (3-amino-2-fluor-1methylpropyl)(methyl)fosfinová nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli, solváty nebo stereoizomery.

V souladu s tímto vynálezem se rozumí, že když R₂ je oxoskupina, vazba mezi R₂ a uhlíkem je dvojná vazba.

V souladu s tímto vynálezu se dále rozumí pojmem „nižší radikály a sloučeniny, například ty, které mají až 7 včetně, zvláště až 4 včetně, uhlíkové atomy. Všechny obecné pojmy mají následující významy:

Nižší alkyl je například C1-C4 alkyl, jako je methyl, ethyl, n-propyl nebo n-butyl, také isopropyl, isobutyl • · • ·

sekundární butyl nebo terciární butyl, ale může to také být C5-C7 alkylová skupina, jako je pentylová, hexylová nebo heptylová skupina.

Nižší alkoxyskupina je například C1-C4 alkoxyskupina, jako je methoxyskupina, ethoxyskupina, n-propoxyskupina nebo n-butoxyskupina, také isopropoxyskupina, isobutoxyskupina, sekundární butoxyskupina nebo terciární butoxyskupina, ale může to také být C5-C7 alkoxyskupina, jako je pentoxyskupina, hexoxyskupina nebo heptoxyskupina.

Nižší thioalkoxyskupina je například C1-C4 thioalkoxyskupina, jako je thiomethoxyskupina, thioethoxyskupina, n-thiopropoxyskupina nebo nthiobutoxyskupina, také thioisopropoxyskupina, thioisobutoxyskupina, sekundární thiobutoxyskupina nebo terciární thiobutoxyskupina, ale může to také být C5-C7 thioalkoxyskupina, jako je thiopentoxyskupina, thiohexoxyskupina nebo thioheptoxyskupina.

Halogenem je halogen o atomovém čísle až 35 včetně, jako je fluor nebo chlor a méně výhodně brom.

Sloučeniny vzorce I podle vynálezu jsou amfoterní povahy a mohou být přítomny ve formě vnitřních solí. Mohou také tvořit adiční soli s kyselinami a soli s bázemi. Tyto soli jsou zvláště farmaceutické kyselé adiční soli, stejně jako farmaceuticky přijatelné soli tvořené s bázemi. Vhodné kyseliny pro tvorbu těchto solí zahrnují například minerální kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová a fosforečná, nebo organické kyseliny, jako jsou sulfonové kyseliny a karboxylové kyseliny. Soli s bázemi jsou například soli alkalických kovů, například sodné nebo draselné soli, nebo soli kovů alkalických zemin, například vápenaté nebo hořečnaté soli, stejně jako amonné soli, jako jsou soli amoniaku nebo • · • · • · • · • · · « · • · « · · • · · · «· ·· ···· organických aminů. Tyto soli mohou být připraveny běžnými metodami.

Když je v molekule přítomno jedno nebo více stereocenter, sloučeniny vzorce I mohou být ve formě stereoizomerních směsí, tj. směsí diastereomerů a/nebo racemátů, nebo ve formě jednotlivých stereoizomerů, tj. jednotlivých enantiomerů a/nebo diastereomerů. Tyto sloučeniny mohou být také ve formě solvátu, například hydrátů.

Všechny sloučeniny vzorce I mohou být použity pro inhibici TLOSR a tak pro ošetření chorob spojených s gastroezofageálním refluxem. Uvedená inhibice TLOSR také zahrnuje to, že všechny sloučeniny vzorce I mohou být použity pro ošetření regurgitace u dětí. Účinné zvládnutí regurgitace u dětí by mohlo znamenat důležitou cestu u zvládnutí nepříjemností v důsledku přílišných ztrát pozřených nutričních látek. Nové sloučeniny mohou být navíc použity pro ošetření s GORD- nebo non-GORD spojeným astmatem, říhání, kašle, bolesti, závislostí na kokainu, škytavky, IBS, dyspepsie, zvracení a nocicepce.

Tento vynález poskytuje sloučeniny, které mají překvapivě vysoký potenciál a/nebo terapeutickou hodnotu.

Příprava

Sloučeniny vzorce I podle tohoto vynálezu mohou být připraveny jedním z následujících způsobů.

A) Sloučenina vzorce II ⁰ II

Z —R₅ (II)

OY

kde Ri, R₃ a R5 jsou definovány stejně jako ve vzorci I,

Z je chránící skupina, jako je t-butoxykarbonyl, a Y je vodík nebo chránící skupina, jako je nižší alkyl, přičemž sloučenina vzorce II může být syntetizována kondenzační reakcí podle schématu 1 za použití vhodného esteru Nchránéné aminokyseliny, kde R3 je definována stejně jako výše u vzorce I, W je chránící skupina, jako je nižší alkyl, a Z je definována stejně jako ve vzorci II, a vhodného chráněného derivátu fosfinové kyseliny, kde Ri a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, Y je definována stejně jako u vzorce II, a báze, jako je lithiumdiisopropylamid,

je

a) přeměněna případně N-alkylační reakcí za účelem zavedení R₄, pokud se u R₄ požaduje, aby to nebyl vodík, a poté hydrolytickou reakcí pro získání sloučeniny vzorce III

kde.Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se přemění výše uvedená výsledná sloučenina III na jinou chemickou sloučeninu vzorce III a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce III a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná • · • « • · • · · ·

volná sloučenina III na sůl v souladu s výše uvedenou definicí, nebo

b) přeměněna redukční reakcí, případně N-alkylační reakcí, pokud se u R₄ požaduje, aby nebyla vodík, a konečně hydrolytickou reakcí na sloučeninu vzorce IV

kde Ri, R₃, R₄ a R5 jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se přemění výše uvedená výsledná sloučenina IV na jinou chemickou sloučeninu vzorce IV a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce IV a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina IV na sůl v souladu s výše uvedenou definicí, nebo

c) přeměněna redukční reakcí následovanou deoxohalogenační reakcí, případně N-alkylační reakci za účelem zavedení R₄, pokud se u R₄ požaduje, aby nebyla vodík, a konečně hydrolytickou reakcí na sloučeninu vzorce VI

(VI) kde Ri, R₃ a R₄ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a Halo je atom halogenu, a případně výše uvedená výsledná sloučenina VI se přemění na jinou chemickou sloučeninu vzorce VI a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na • ····· ·· ··· · · • · · · · · · · · ··· ·· ·· ♦ · ·· ···· jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce VI a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina VI na sůl v souladu s výše uvedenou definicí;

nebo B) sloučenina vzorce VII

(VII) kde Ri, R₃ a R₅ jsou definovány stejně jako ve vzorci I,

U je skupina, která může být převedena na skupinu NH₂, a Y je vodík nebo chránící skupina, jako je nižší alkyl, přičemž sloučenina vzorce VII může být syntetizována kondenzační reakcí podle schématu 2 za použití derivátu 2,3-epoxypropylu, jako je vhodný N-chráněný derivát 2,3epoxypropylaminu nebo epichlorhydrinu, kde Ri a R₃ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a vhodného chráněného derivátu fosfinové kyseliny aktivovaného O-silylací, kde R5 a Y jsou definovány stejně jako u vzorce VII, a Lewisovy kyseliny, jako je bezvodý ZnCl₂,

Schéma 2 t * ·· 9· 9 9 99

9 9 9 9· · · ····· · · · · · · * je

a) přeměněna reakcí, kde trimethylsilylová skupina je nahrazena atomem vodíku, reakcí, kde U skupina definovaná u vzorce VII je přeměněna na -NHR₄, kde R₄ je definována stejně jako výše u vzorce I, a konečně hydrolytickou reakcí za účelem získání sloučeniny vzorce IV

(IV) kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se přemění výše uvedená výsledná sloučenina IV na jinou chemickou sloučeninu vzorce IV a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce IV a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina IV na sůl v souladu s výše uvedenou definicí, nebo

b) přeměněna reakcí, kde trimethylsilylová skupina je nahrazena atomem vodíku, oxidační reakcí, reakcí, kde U skupina definovaná u vzorce VII je přeměněna na -NHR-₄, kde R₄ je definována stejně jako výše u vzorce I, a konečně hydrolytickou reakcí za účelem získání sloučeniny vzorce III

Rd

P—R,

OH (III) * · • · « · • · · · · · · · · · ·· · e · · ·· · ····· ·· ··· · · • ···· · · · • » · · · · · · · · · · · kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se přemění výše uvedená výsledná sloučenina III na jinou chemickou sloučeninu vzorce III a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce III a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina III na sůl v souladu s výše uvedenou definicí, nebo

c) přeměněna reakcí, kde trimethylsilylová skupina je nahrazena vodíkem, deoxohalogenační reakcí, reakcí, kde U skupina, jak je definována u vzorce VII, se přeměnění na NHR₄, kde R₄ je definována stejně jako výše u vzorce I, a konečně hydrolytickou reakcí za účelem získání sloučeniny vzorce VI

(vr kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a Halo je atom halogenu, a případně výše uvedená výsledná sloučenina VI se přemění na jinou chemickou sloučeninu vzorce VI a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce VI a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina VI na sůl v souladu s výše uvedenou definicí;

nebo C) sloučenina vzorce VIII

Λ * • »

kde Ri a R₅ jsou definovány stejně jako ve vzorci I, Q je elektrony přitahující skupina, jako je například -CN nebo CO₂Et, která může být převedena na skupinu -CH₂NH₂, a Y je vodík nebo chránící skupina, jako je nižší alkyl, a Halo je atom halogenu, přičemž sloučenina vzorce VIII může být syntetizována adiční reakcí podle schématu 3 za použití nenasycené sloučeniny, kde Ri je definována stejně jako výše u vzorce I, Q a Halo jsou definovány stejně jako u vzorce VIII, a vhodného chráněného derivátu fosfinové kyseliny aktivovaného O-silylací, kde R₅ a Y jsou definovány stejně jako u vzorce VIII,

Schéma 3 je přeměněna reakcí, kde skupina Q se přeměňuje na -NHR₄, kde R₄ je definována stejně jako výše u vzorce I, a hydrolytickou reakcí za účelem získání sloučeniny vzorce IX

H *^al° Π ^R4 f—^R5 (IX)

OH •» » · · • · · 1 « · η » · * * · • ί» · * · *

9·· ·» ·» 1· < · * « · · • » « ·« tot « · kde Ri a R₄ jsou definovány stejně jako ve vzorci I a Halo je atom halogenu, a případně se přemění výše uvedená výsledná sloučenina IX na jinou chemickou sloučeninu vzorce IX a/nebo výsledná směs izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce IX a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina IX na sůl v souladu s výše uvedenou definicí;

nebo D) sloučenina vzorce X, případně jako individuální stereoizomer,

kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako ve vzorci I,

Z je chránící skupina, jako je t-butyloxykarbonyl, a Halo je atom halogenu, přičemž sloučenina vzorce X může být syntetizována substituční reakcí podle schématu 4 za použití elektrofilní sloučeniny, kde Ri, R₃ a R₄ jsou definovány stejně jako výše, L je odstupující skupina, jako jod, Z a Halo jsou definovány stejně jako výše, a derivátu methylfosfinové kyseliny aktivovaného O-silylací, kde R₅ je definována stejně jako výše,

Schéma 4 • ···«· ·· · · * · · • · * · · · ··· ··· ·· ·· 9 9 ·· ···· se převede hydrolytickou reakcí na sloučeninu vzorce VI

kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se výše uvedená výsledná sloučenina VI převede na jinou chemickou sloučeninu vzorce VI a/nebo výsledná směs jednotlivých izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce VI a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina VI na sůl v souladu s výše uvedenou definicí;

nebo E) sloučenina vzorce XI, případně jako individuální stereoizomer,

jako ve vzorci I, (XI)

Z je chránící skupina, jako je t-butyloxykarbonyl, a Halo je atom halogenu, přičemž sloučenina vzorce XI může být syntetizována substituční reakcí podle schématu 5 za použití elektrofilní sloučeniny, kde Ri, R₃ a R₄ jsou definovány stejně jako výše, L je odstupující skupina, jako jod, Z a Halo jsou definovány stejně jako výše, a derivátu fosfinové kyseliny aktivovaného O-silylací, • ····· · · · · · · · • · · · · · · · · • · · · » «* · »· ·· ····

Schéma 5 se převede hydrolytickou reakcí a poté P-alkylační reakcí na sloučeninu vzorce VI

kde R_lf R₃, R₄ a R5 jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se výše uvedená výsledná sloučenina VI převede na jinou chemickou sloučeninu vzorce VI a/nebo výsledná směs jednotlivých izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce VI a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina VI na sůl v souladu s výše uvedenou definicí;

nebo F) sloučenina vzorce XII

Rú

P—Re

OY (XII) kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, Y je vodík nebo chránící skupina, jako je nižší alkyl, přičemž sloučenina vzorce XII může být syntetizována adiční reakcí podle schématu 6 reakcí nenasyceného derivátu fosfinové kyseliny, kde Ri, R₃, R₄ a R5 jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, s H2S, merkaptidovým iontem (HS^_) nebo chráněnou merkaptosloučeninou, jako je benzylthiol, přičemž v tomto případě se poté chránící skupina odstraní,

Schéma 6 se převede hydrolytickou reakcí na sloučeninu vzorce XIII,

kde Ri, R₃, R₄ a R₅ jsou definovány stejně jako výše u vzorce I, a případně se výše uvedená výsledná sloučenina XIII převede na jinou chemickou sloučeninu vzorce XIII a/nebo výsledná směs jednotlivých izomerů se rozdělí na jednotlivé izomery a/nebo výsledná sůl se přemění na volnou sloučeninu vzorce XIII a/nebo na jinou sůl a/nebo se přemění výsledná volná sloučenina XIII na sůl v souladu s výše uvedenou definicí.

Vynález bude nyní popsán detailněji pomocí následujících příkladu, které nejsou zamýšleny jako omezení vynálezu.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

Kyselina (3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinová

K roztoku BH₃-THF (1M 22,2 ml, 22,2 mmol) při 0 °C byl přidán roztok ehtyl-(3-amino-2-fluor-3oxopropyl)(methyl)fosfinatu (2,00 g, 10,1 mmol) v THF (15 ml). Výsledná roztok byl zahříván k varu pod zpětným chladičem 2 h. Roztok byl ochlazen na pokojovou teplotu a poté byl pomalu přidán 6 N roztok HCI (60 ml). THF byl odstraněn odpařením za vakua a byla přidána další část 6 N HCI (20 ml). Roztok byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 2,5 h, ochlazen na pokojovou teplotu a odpařen. Zbytek byl přečištěn iontově výměnnou chromatografií (DOWEX® ROWX 8-200, H⁺ forma, 3,5 x 4,0 cm). Pryskyřice byla předběžně promyta směsí methanol/voda 1 : 1 (200 ml). Surový produkt byl rozpuštěn ve směsi methanol/voda 1:1a nanesen na kolonu. Kolona byla promyta směsí methanol/voda 1 : 1 (400 ml). Eluční činidlo bylo změněno za směs methanol/voda/koncentrovaný hydroxid amonný 2:1:1. Dvě frakce (150 ml) byly spojeny a odpařeny za vzniku 1,28 g lepkavého oleje. Zbytek byl přečištěn chromatografií na za vlhka plněné silikagelové koloně (4 x 28 cm) za eluce pomocí směsi methanol/methylenchlorid/hydroxid amonný 50 : 50 : 1. Odpovídající frakce byly spojeny a odpařeny za vzniku 730 mg (46 %) kyseliny (3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinové jako bílé pevné látky.

Vlastnosti: t. t. 78 - 84 °C; Rf = 0,26 (methanol, methylenchlorid, koncentrovaný hydroxid amonný : 40 : 1); ^XH NMR (300 MHz, D2O) δ 5,01 (dm, J = 49,5 Hz, 1H), 3,09 - 3,32 (m, 2H), 1,76 - 2,18 (m, 2H), 1,28 (d, J = 14 Hz); ¹³C NMR (75 MHz, D2O + dioxan) δ 91,3 (d,

J = 169 Hz), 47,1 (d, J = 12 Hz), 37,2 (dd, J = 209, 89 Hz), 19,8 (d, J = 95 Hz); APIMS: m/z = 156 (M + H)⁺.

Příklad 2

Kyselina (3-amino-2-fluor-l-methylpropyl)(methyl)fosfinová

Do roztoku ethyl-3-amino-2-fluor-l-methyl-3oxopropyl(methyl)fosfinatu (2,1 g, 10 mmol) v THF (25 ml) chlazeného v ledové lázni pod hladinou argonu byl přidán 1 M BH₃-THF (23 ml, 23 mmol). Po 10 minutách byl roztok zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 h. Roztok byl ochlazen na pokojovou teplotu a po kapkách byl přidán roztok 6 N HCI (30 ml). THF byl odstraněn na rotační odparce a byla přidána další porce 6 N HCI (30 ml). Směs byla vařena pod zpětným chladičem po dobu 2 h a poté byla míchána při pokojové teplotě přes noc. Roztok byl ochlazen, odpařen, spoluodpařen s vodou a poté s ethanolem. Zbytek byl rozpuštěn v methanolu (25 ml) a poté byl po kapkách přidán propylenoxid (4 ml). Po 3 hodinách při pokojové teplotě bylo rozpouštědlo odpařeno a produkt byl přečištěn chromatografií na za vlhka plněné silikagelové koloně za eluce směsí voda/methanol (2 % - 4 % vody). Odpovídající frakce byly spojeny a odpařeny za vzniku oleje, který se srážel, když byl přidán diethylether. Produkt byl izolován filtrací a poté bylo získáno 580 mg (35 %) diastereomerní směsi kyseliny (3-amino-2-fluor-lmethylpropyl ) (methyl)fosfinové jako bílá pevná látka.

⁴H NMR (400 MHz, D₂0) δ 4,8 - 5,2 (m, 1H) , 3,2 - 3,5 (m,

2H), 1,8 - 2,2 (m, 1H), 1,0 - 1,3 (m, 6H); MS: m/z = 170 (M + H)⁺.

• ·

Příklad 3

Kyselina (2R)-(3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinová

Suspenze sloučeniny (2R)-(3-amino-2fluorpropyl)fosfinové kyseliny (1,0 g, 7,1 mmol) v HMDS (7,47 ml, 35,4 mmol) byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 h. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu, podrobena reakci s diglymem (8,0 ml) a zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 6 h. Poté, co byla směs ochlazena na pokojovou teplotu, byla přidána Hunigova báze (1,23 ml, 7,1 mmol) a poté byl po kapkách přidán methyljodid (1,32 ml, 21,2 mmol). Reakční směs byla míchána 23,5 h, poté byla zředěna methylenchloridem a extrahována 2 N roztokem HC1. Vodná vrstva byla promyta methylenchloridem a diethyletherem a poté odpařena za sníženého tlaku. Surový produkt byl převeden přes kolonu Dowex 50WX8-200 mesh, forma H⁺, za eluce směsí methanol/voda v poměru 1 : 1, dokud byla TLC detekována další látka. Produkt byl poté podroben eluci směsí koncentrovaný roztok hydroxidu sodného/methanol 1 : 3.

Další přečištění kolonovou chromatografií na silikagelu za eluce methylenchloridem, methanolem, koncentrovaným roztokem hydroxidu sodného (6:3:1), dalo kyselinu (2R)-(3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinovou jako bílou pevnou látku (720 mg, 65 %).

³Η NMR (300 MHz, D₂O) δ 5,20 (m, 0,5H), 5,03 (m, 0,5 Η) ,

3,20 - 3,42 (m, 2H), 1,80 - 2,22 (m, 2H) , 1,30 (d, J = 14,0 Hz, 3H).

Příklad 4

Kyselina (2S)-(3-amino-2-fluor(propyl)(methyl)fosfinová • ····» ·· · · · · · • · ···· «·· < · · · » ·· «V ·· ··«·

Suspenze sloučeniny (2S)-(3-amino-2fluorpropyl)fosfinové kyseliny (1,2 g, 8,5 mmol) v HMDS (8,96 ml, 42,4 mmol) byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 15 h. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu, podrobena reakci s diglymem (9,6 ml) a zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 7 h. Poté, co byla směs ochlazena na pokojovou teplotu, byla přidána Hiinigova báze (1,47 ml, 8,4 mmol) a poté byl po kapkách přidán methyljodid (1,58 ml, 25,4 mmol). Reakční směs byla míchána přes noc a poté byla zředěna methylenchloridem a extrahována 2 N roztokem HC1. Vodná vrstva byla promyta methylenchloridem a diethyletherem a poté odpařena za sníženého tlaku. Surový produkt byl převeden přes Dowex 50WX8-200 mesh, forma H⁺, kolonu za eluce směsí methanol/voda v poměru 1 : 1, dokud byla TLC detekována další látka. Produkt byl poté podroben eluci směsí koncentrovaný roztok hydroxidu sodného/methanol 1 : 3.

Další přečištění kolonovou chromatografii na silikagelu za eluce methylenchloridem, methanolem, koncentrovaným roztokem hydroxidu sodného (6:3:1), dalo kyselinu (2S)(3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinovou jako bílou pevnou látku (540 mg, 38 %).

^ΧΗ NMR (300 MHz, D₂0) δ 5,20 (m, 0,5H), 5,03 (m, 0,5 Η) ,

3,20 - 3,42 (m, 2H), 1,80 - 2,22 (m, 2H), 1,30 (d, J = 14,0 Hz, 3H).

Meziprodukty

Příklad II

Ethyl-3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorpropanoat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 1)

Ethylmethylfosfinat (12,8 g, 118 mmol) byl vařen pod zpětným chladičem s 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazenem (HMDS) (24,9 ml, 118 mmol) 2 h pod argonovou atmosférou. Roztok byl ochlazen na pokojovou teplotu a poté byl k roztoku přidán fluorakrylát (13,3 g, 113 mmol). Po míchání při pokojové teplotě 60 h pod atmosférou argonu byla směs zředěna methyienchloridem (200 ml) a promyta 1 N HC1 (200 ml). Vodná vrstva byla extrahována methyienchloridem (200 ml). Spojené organické vrstvy byly promyty solankou (150 ml), vysušeny síranem sodným, přefiltrovány a odpařeny, čímž bylo získáno 2é,0 g oleje. Zbytek byl poroben chromatografíí na za vlhka plněné silikagelové koloně (7,5 x 40 cm) za eluce směsí methylenchlorid/methanol (95 : 5). Odpovídající frakce byly spojeny a odpařeny, čímž bylo získáno 12,6 g (50 %) ethyl[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorpropanoatu jako žlutý olej.

Vlastnosti: ³H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 5,11 - 5,43 (m, 1H), 4,23 - 4,34 (m, 2H), 4,03 - 4,19 (m, 2H), 2,26 - 2,53 (m, 2H), +,58 (d, J = 14 Hz, 3H), 1,28 - 1,39 (m, 3H).

Příklad 12

Ethyl-(3-amino-2-fluor-3-oxopropyl)(methyl)fosfinat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 1)

Roztok ethyl-3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2fluorpropanoatu (12,6 g, 55,6 mmol), ethanolu (15 ml) a koncentrovaného chloridu amonného (14,8 N, 5,6 ml, 83 mmol) byl míchán při pokojové teplotě 16 h. Rozpouštědlo byloodpařeno a zbytzek byl podroben chromatografii na za vlhka plněné silikagelové koloně (5,5 x 31 cm) za eluce směsí methylenchlorid/methanol 90 : 10. Odopvídající frakce byly spojeny a odpařeny, čímž bylo získáno 9,5 g (86 %) ethyl(3-amino-2-fluor-3-oxopropyl)(methyl)fosfinatu jako čirý olej.

«· · · ···· ^ΤΗ NMR ¢300 MHz, CDCI3) δ 6,62 (s, 1H) , 6,33 (s, 1H) , 5,10 - 5,42 (m, 1H), 4,02 - 4,18 (m, 2H), 2,19 - 2,70 (m, 2H), 1,60 (d, J = 14 Hz, 3H), 1,34 (m, 3H).

Příklad 13

Ethyl-3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorbutanoat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 2)

Směs ethyl(methylfosfinatu (3,2 g, 30 mmol) a 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu

4,8 g, 30 mmol) byla zahřívanáa k varu pod zpětným chladičem 2 h pod atmosférou argonu. Směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a byla přidána diastereomerní směs ethyl 2-fluorbut-2-enoatu (4,0 g, 30 mmol). Reagenty byly zahřátý na 70 °C po dobu tří dnů a poté na pokojovou teplotu 4 dny pdo atmosférou argonu. Směs byla zředěna methylenchloridem (200 ml). Roztok byl promyt IN HC1 (200 ml) a vodný roztok byl extrahován methylenchloridem (200 ml). Spojené organické roztoky byly promyty nasyceným chloridem sodným, vysušeny síranem hořečnatým, přefiltrovány a odpařeny. Zbytek byl přečištěn chromatografií na za vlhka plněné silikagelové koloně za eluce směsí methylenchlorid/methanol (99 : 1-97 : 3). Odpovídající frakce byly spojeny a odpařeny, čímž bylo získáno 2,9 g (40 %) ethyl-3[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorbutanoatu jako čirý olej.

²Η NMR (400 MHz, CDC1₃) δ 4,8 - 5,6 (m, 1H) , 4,2 - 4,4 (m, 2H), 4,0 - 4,2 (m, 2H), 2,4 - 2,6 (m, 1H), 1,1 - 1,5 (m, 12H)

Příklad 14

Ethyl 3-amino-2-fluor-l-methyl-3-oxopropyl(methyl)fosfinat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 2)

K roztoku ethyl-3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2fluorbutanoatu (š,0 g, 12,4 mmol) v ethynolu (15 ml) byl přidán koncentrovaný hydroxid amonný (14,8 M, 1,3 ml, 19 mmol). Roztok byl míchán 24 h při pokojové teplotě a poté při 50 °C 2 hodiny. Byla přidána další porce hydroxidu amonného (14,8 M, 0,5 ml, 7 mmol) a a směs byla míchána při pokojové teplotě tři dny a poté byla podařena, čímž bylo získáno 2,4 g (91 %) diasteromerní směsi ethyl 3-amino-2fluor-l-methyl-3-oxopropyl(methyl)fosfinatu jako čirý olej.

NMR (400 MHz, CDCI3) δ 5,9 - 6,7 (m, 2H) , 4,9 - 5,6 (m, ÍH) , 4,0 - 4,2 (m, 2H) , 2,5 - 2,8 (m, ÍH) , 1,2 - 1,6 (m,

9H)

Příklad 15

Kyselina (2R)- (3-amino-2-fluorpropyl)fosfinová (meziproduk sloučeniny uvedené v příkladu 3)

Do tříhrdlé dvoulitrové baňky vybavené mechanickým míchadlem, teploměrem, nálevkou a argonovým probublávačem byl přidán fosfornan amonný. Baňka byla umístěna do vodní lázně pro pokojové teplotě a byl přidán N,O-bis(trimethylsilyl)acetamid (215 ml, 0,87 mol-BSA) takovou rychlostí, aby vnitřní teplota byla udržována pod 38 °C (přibližně 30 minut) za použití chlazení ledovou lázní. Po dokončení přídavku BSA byla reakční směs zahřáta na 45 - 48 °C a udržována při této teplotě 1 h. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a k reakční směsi byl přidán roztok terč.butyl-(2R)-2-fluor-3-jodpropylkarbamatu (27,3 g, 0,09 mol) v methylenchlorídu (300 ml). Reakční směs byla poté ponechána míchat při pokojové teplotě 18 h. Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a poté byla opatrně zředěna methanolem (275 ml) a poté vodou (32 ml). Reakční směs byla míchána 30 min, poté byla reakční směs přefiltrována a pevná látka byla promyta methanolem. Filtrát byl odpařen a • ·· ·· ·· ·· ·· ·«« · Λ · · · » « · · zbytek byl umístěn do vysokého vakua (0,1 mm Hg) přes noc. Surový zbytek byl triturován s methylenchloridem, methanolem, koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného (80 : 20 :1) a byl přefiltrován. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a triturace byla zopakována. Surový koncentrát byl převeden do 2 1 baňky, rozpuštěn v methanolu (375 ml) a umístěn do vodní lázně při pokojové teplotě. Byl přidán nasycený roztok plynného chlorovodíku v ethylacetátu (500 ml) a směs byla míchána 3 h. Reakční směs byla poté přefiltrována a pevné látky byly promyty směsí methanolu a ethylacetátu (90 : 10). Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a surový produkt byl převeden přes kolonu Dowex® 50WX8-200 mesh H⁺ forma (500 g, 8 x 15 cm) za eluce směsí methanol/voda 1 : 1, dokud nebyla detekována analýzou TLC žádná další látka. Výsledný surový produkt byl poté podroben eluci pomocí směsi koncentrovaný hydroxid amonný/methanol 1:3. Produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií za eluce směsí chloroform, methanol, koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (6:3:1), čímž byla získána kyselina (2R)-(3-amino-2-fluorpropyl)fosfinová jako bílá pevná látka (3,12 g, 24 %).

³Η NMR (300 MHz, D₂O) δ 7,90 (s, 0,5H), 6,15 (s, 0,5 Η) ,

5,12 - 5,29 (m, 0,5 Η), 4,92 - 5,10 (m, 0,5 Η) , 3,12 - 3,42 (m, 2H), 1,74- 2,26 (m, 2H).

Příklad 16 (2R)-(3-Dibenzylamino)-2-fluor-l-propanol (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 3)

Tetrahydroboritan sodný (5,3 g, 0,24 mol) byl převeden do suspenze v THF (200 ml) pod dusíkovou atmosférou a ochlazen na -15 °C za míchání. Methyl (2S)—3— (dibenzylamino)-2-fluorpropanoat (56,6 g, 0,19 mol) byl převeden do suspenze v THF (250 ml) a byl po kapkách přidán ·· ·· ·· ·· · · • ····· ·· ··· · · • · ···· *·· · · · 9 · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 do směsi během 1 h; vnitřní teplota byla udržována během přídavku pod -10 °C. Po dokončení přídavku byla reakční směs ponechána ohřát na pokojovou teplotu a byla míchána při této teplotě 17 h. Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a opatrně zředěna nasyceným vodným roztokem chloridu amonného (300 ml). Reakční směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 200 ml) a organická fáze byla odpařena za sníženého tlaku. Surový zbytek byl rozpuštěn v 2N kyselině chlorovodíkové (200 ml, pH = asi 2) a vodná fáze byla promyta etherem (2 x 200 ml). Vodná fáze byla zalkalizována (pH = asi 10) pomocí 80% hydroxidu amonného v solance, extrahována ethylacetátem (3 x 200 ml), vysušena bezvodým síranem sodným (10 g), přefiltrována a odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán (2R)-(3-dibenzylamino)-2fluor-l-propanol (48 g, 93 %) jako žlutý olej.

⁷Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,15 - 7,38 (m, 10H) , 4,65 - 4,78 (m, 0,5 Η), 4,48 - 4,58 (m, 0,5 Η), 3,50 - 3,82 (m, 6H), 2,70 - 2,88 (m, 2H).

Příklad 17 (2R) - (3-Amino-2-fluor-l-propanol (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 3) (2R)-(3-Dibenzylamino)-2-fluor-l-propanol (29,2 g,

0,11 mol) byl rozpuštěn v ethanolu (300 ml). Bylo přidáno 10 % hmotn. hydroxidu palladnatého (5,0 g) a směs byla umístěna na protřepávač Parr® pod atmosférou vodíku (55 psi) po dobu 6 h. Když nebyla pozorována další spotřeba vodíku, směs byla přefiltrována přes lože Celit® (20 g). Byla přidána další čerstvá várka hydroxidu palladnatého (5 g) a ethanolová směs byla opět podrobena hydrogenačním podmínkách, jak jsou popsány výše, po dobu 17 h. Surová reakční směs byla přefiltrována přes Celit® a odpařena za • · «· ·»·· ···· • · ···· · · « ····· ·· ··· · · • · · · · · · · • · · · · · · · · · · · sníženého tlaku, čímž byl získán (2R)-3-amino-2-fluor-lpropanol jako bledě žlutý olej (9,6 g, 96 %).

²H NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 4,78 - 5,00 (bs s, 3H) , 4,49 4,62 (m, 0,5 Η) , 4,32 - 4,46 (m, 0,5 H(, 3,54 - 3,70 (m,

2H), 2,70 - 2,96 (m, 2H).

Příklad 18 terč.Butyl(2R)-2-fluor-3-hydroxypropylkarbamat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 3) (2R)-3-amino-2-fluor-l-propanol (4,6 g, 49 mmol) byl rozpuštěn v 25% vodném dioxanu (160 ml), byl přidán uhličitan draselný (,1 g, 51 mmol) a směs byla ochlazena na 0 °C. Ve dvou dávkách byl poté přidán diterc.butyldikarbonat (11,6 g, 53 mmol). Směs byla poté ponechána ohřát na pokojovou teplotu přes noc. Surová reakčni směs byla odpařena do sucha, byla přidána voda (150 ml) a poté nasycený vodný roztok hydrogensíránu draselného (dokud pH = asi 3). Organická látka byla extrahována methylenchloridem (2 x 150 ml), vysušena síranem sodný, přefiltrována a odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán terč.butyl (2R)-2-fluor-3-hydroxypropylkarbamat (9,5 g,100 %) jako bezbarvý olej.

²H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4,82 - 5, 04 (br s, 1H) , 4,62 4,72 (m, 0,5 Η), 4,48 - 4,58 (m, 0,5 Η), 3,62 - 3,72 (m,

2H) , 3,32 - 3,62 (m, 2H(, 3,20 - 3,44 (br s, 1H) , 1,48 (s, 9H) .

• · ·· ···· · v · ····· ·· ··· · · ··· · 9 · · · · 9 · · · · ·

Příklad 19 terč.Butyl(2R)-2-fluor-3-jodpropylkarbamat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 3)

Imidazol (26,6 g, 0,39 mol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (400 ml) při pokojové teplotě. Byl přidán jod (102,5 g, 0,39 mol) a reakční směs byla míchána 10 min při pokojové teplotě a poté byla ochlazena na 0 °C. Po dávkách byl během 10 minut přidán trifenylfosfin (102,5 g, 0,39 mol) tak, aby vnitřní teplota zůstala pod 10 °C.

Po kapkách byl přidán roztok terc.butyl (2R)-2-fluor-2hydroxypropylkarbamatu (60,4 g, 0,31 mol) v methylenchloridu (100 ml). Na dokončení přídavku terč.butyl(2R)-2-fluor-2-hydroxypropylkarbamatu byl přidán další methylenchlorid (200 ml). Reakční směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu a v míchání se pokračovalo 17 h. Reakční směs byla přefiltrována přes lože Celit® (50 g) a byla promyta dalším methylenchloridem. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a přečištěn silikagelovou kolonovou chromatografií za eluce methylenchloridem. Tato procedura dala terč.butyl(2R)-2-fluor-3-jodpropylkarbamat jako bílou pevnou látku (64,7 g, 68 %).

^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4,80 - 5,10 (br s, 1H) , 4,58 4,72 (m, 0,5 Η), 4,42 - 4,56 (m, 0,5 Η) , 3,48 - 3,70 (m,

1H), 3,20 - 3,46 (m, 3H), 1,48 (s, 9H).

Příklad 110

Kyselina (2S)-(3-amino-2-florpropyl)fosfinová (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 4)

Do tříhrdlé dvoulitrové baňky vybavené mechanickým míchadlem, teploměrem, nálevkou a argonovým probublávačem byl přidán fosfornan amonný (58,1 g, 0,70 mmol). Byl přidán N,O-bis-(trimethylsilyl)acetamid (175,9 ml, 0,71 mol-BSA) • ····· ·· · · · · · • · · · · · ··· ··· ·· *· ·· ·· ·»·♦ takovou rychlostí, aby vnitřní teplota byla udržována mezi 35 až 40 °C. Po dokončení přídavku BSA byla reakční směs zahřáta na 35 - 40 °C a udržována při této teplotě 45 min. Byl přidán methylenchlorid (150 ml) a směs byla míchána při 35 až 40 °C dalších 45 min. Reakční směs byla ochlazena na pokojovou teplotu a k reakční směsi byl přidán roztok terč.butyl-(2S)-2-fluor-3-jodpropylkarbamatu (42,5 g, 0,14 mol) v methylenchloridu (300 ml). Reakční směs byla poté ponechána míchat při pokojové teplotě přes noc. Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a poté byla opatrně zředěna methanolem (150 ml) a poté vodou (60 ml). Reakční směs byla odpařena a zbytek byl umístěn pod vysoké vakuum. Zbytek byl upraven na pH přibližně 8 přídavkem koncentrovaného hydroxidu amonného (50 ml), poté byl přidán methylenchlorid (400 ml) a methanol (250 ml). Výsledné pevné látky byly odfiltrovány a filtrát byl odpařen. Zbytek byl triturován s methylenchloridem, methanolem, koncentrovaným roztokem hydroxidu amonného (80 : 20 : 1; 400 ml) a byl přefiltrován. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a surový koncentrát byl rozpuštěn v methanolu (400 ml). Byl přidán nasycený roztok plynného chlorovodíku v ethylacetátu (400 ml) a směs byla míchána 3 h. Reakční směs byla poté přefiltrována a filtrát byl odpařen za sníženého tlaku. Surový produkt byl převeden přes kolonu Dowex® 50WX8-200 mesh H⁺ forma (500 g, 8 x 15 cm) za eluce směsí methanol/voda 1 : 1, tak dlouho, dokud byla detekována analýzou TLC jakákoli látka. Výsledný surový produkt byl poté podroben eluci pomocí směsi koncentrovaný hydroxid amonný/methanol 1:3. Produkt byl přečištěn kolonovou chromatografií za eluce směsí chloroform, methanol, koncentrovaný roztok hydroxidu amonného (6 : 3 : 1), čímž byla získána kyselina (2S)-(3-amino-2-fluorpropyl)fosfinová jako bílá pevná látka (3,46 g, 17 %).

³Η NMR (300 MHz, D₂O) δ 7,90 (s, 0,5H), 6,15 (s, 0,5 Η) ,

5,12 - 5,29 (m, 0,5 Η) , 4,92 - 5,10 (m, 0,5 Η) , 3,12 - 3,42 (m, 2H), 1,74 - 2.

Příklad 111

Methyl (2S)-(3-dibenzylamino)-2-fluorpropanoat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 4)

Methyl (2R)-(dibenzylamino)-3-hydroxypropanoat (231,7 g, 0,77 mol) byl rozpuštěn v THF (850 ml) a po kapkách byl pomalu přidán roztok DAST (196 g, 1,2 mol) v THF (400 ml). Jakmile byl přídavek u konce, reakční směs byla míchána dalších 1,5 h. TLC analýzou byla indikována spotřeba výchozí látky. Reakční směs byla poté ochlazena na 0 °C a poté byla zředěna pomalým přídavkem vody (1,5 1) a poté neutralizována přídavkem pevného hydrogenuhličitanu sodného. Jakmile byla směs neutrální, byla přidána směs koncentrovaný hydroxid amonný/nasycený roztok chloridu sodného 1:1a reakční směs byla extrahována ethylacetátem a odpařena za sníženého tlaku. Surová směs byla přečištěna silikagelovou kolonovou chromatografií za eluce směsí ethylacetát : hexany (1 : 4), čímž byla získána požadovaná sloučenina (188,3 g, 62 %) jako olej.

^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,18 - 7,38 (m, 10 Η) , 5,12 5,17 (m, 0,5 Η) , 4,95 - 5,00 (m, 0,5 Η) , 3,81 - 3,87 (m, 2H), 3,69 (s, 3H), 3,49 - 3,55 (, 2H), 2,90 - 3,12 (m, 2H).

Příklad 112 (2S)-3-(Dibenzylamino)-2-fluor-l-propanol (meziprodukt sloučeniny podle příkladu 4)

Tetrahydroboritan lithný (17,7 g, 0,81 mol) byl převeden do suspenze v THF (400 ml) pod dusíkovou

atmosférou a ochlazen na -15 °C za míchání. Methyl (2S)-3(dibenzylamino)-2-fluorpropanoat (188,3 g, 0,62 mol) byl převeden do suspenze v THF (400 ml) a byl po kapkách přidán do směsi. Po dokončení přídavku byla reakční směs ponechána ohřát na pokojovou teplotu a míchat při této teplotě 3h.

TLC analýza indikovala dokončení reakce spotřebování výchozí látky. Reakční směs byla ochlazena na 0 °C a opatrně zředěna nasyceným vodným roztokem chloridu amonného (300 ml). Byla přidána další voda (400 ml) a reakční směs byla extrahována ethylacetátem (2 x 200 ml) a organická fáze byla odpařena za sníženého tlaku. Surový zbytek byl rozpuštěn v 2N kyselině chlorovodíkové a vodná fáze byla promyta dvakrát etherem. Vodná fáze byla zalkalizována (pH = asi 10) pomocí 80% hydroxidu amonného v solance, extrahována ethylacetátem, vysušena bezvodým síranem sodným, přefiltrována a odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán (2S)-(3-dibenzylamino)-2-fluor-l-propanol (156,6 g, 92 %) jako žlutý olej.

³Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,15 - 7,38 (m, 10H), 4,65 - 4,78 (m, 0,5 H), 4,48 - 4,58 (m, 0,5 H), 3,50 - 3,82 (m, 6H), 2,70-2,88 (m, 2H).

Příklad 113 (2S)-(3-Amino-2-fluor-l-propanol (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 4) (2S)-(3-Dibenzylamino)-2-fluor-l-propanol (39,1 g,

0,14 mol) byl rozpuštěn v ethanolu (300 ml). Bylo přidáno 10 % hmotn. hydroxidu palladnatého (5,0 g) a směs byla umístěna na protřepávač Parr® pod atmosférou vodíku (55 psi) přes noc. Když nebyla pozorována další spotřeba vodíku, směs byla přefiltrována přes lože Celit®. Do ethanolového roztoku byla přidána další čerstvá várka hydroxidu palladnatého (5 g) a směs byla opět podrobena t · · ·· ·· · · · « • · · · · ·« · · ·» · • ····· ·· ··« · · » · ···· ··· ··· «· · · ·· ««·· hydrogenačním podmínkách, jak jsou popsány výše, po dobu 12 h. Když nebyla pozorována další spotřeba vodíku, směs byla přefiltrována přes Celit®. Opět byla k ethanolovému roztoku přidána čerstvá dávka hydroxidu palladnatého (5 g) a znovu byl podroben výše popsaným hydrogenačním podmínkám po dobu 12 h. Surová reakční směs byla přefiltrována přes Celit® a odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán (2S)-3-amino2-fluor-l-propanol jako bledě žlutý olej (13,3 g, 100 %).

NMR (300 MHz, CD₃OD) δ 4, 78 - 5,00 (bs s, 3H) , 4,49 4,62 (m, 0,5 H), 4,32 - 4,46 (m, 0,5 H) , 3,54 - 3,70 (m,

2H), 2,70- 2,96 (m, 2H).

Příklad 114 terč.Butyl (2S)-2-fluor-3-hydroxypropylkarbamat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 4) (2S)-3-Amino-2-fluor-l-propanol (38,6 g, 0,41 mmol) byl rozpuštěn v 25% vodném dioxanu (1,4 ml), byl přidán uhličitan draselný (60,1 g, 0,46 mmol) a poté diterc . butyldikarbonat (99,5 g, 0,46 mol). Směs byla míchána přes noc. TLC analýza indikovala naprostou spotřebu výchozí látky. Surová reakční směs byla odpařena do sucha, byla přidána voda (300 ml) a poté nasycený vodný roztok hydrogensíranu draselného (dokud pH = asi 3). Organická látka byla extrahována dvakrát methylenchloridem, vysušena síranem sodným, přefiltrována a odpařena za sníženého tlaku, čímž byl získán terč.butyl (2S)-2-fluor-3hydroxypropylkarbamat (79,5 g, 99 %) jako žlutý olej.

⁴Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4, 82 - 5,04 (br s, 1H) , 4,62 4,72 (m, 0,5 H), 4 , 48 - 4 , 58 (m, 0,5 H) , 3,62 - 3,72 (m,

2H) , 3,32 - 3,62 (m, 2H) , 3,20 - 3,44 (br s, 1H) , 1,48 (s, 9H) .

Příklad 115 terč.Butyl (2S)-2-fluor-3-jodpropylkarbamat (meziprodukt sloučeniny uvedené v příkladu 4)

Imidazol (19,8 g, 0,29 mol) byl rozpuštěn v methylenchloridu (900 ml) při pokojové teplotě. Byl přidán jod (73,9 g, 0,29 mol) a reakční směs byla míchána 10 min při pokojové teplotě a poté byla ochlazena na 0 °C. Po dávkách byl během 10 minut přidán trifenylfosfin (76,3 g, 0,29 mol) tak, aby vnitřní teplota zůstala pod 10 °C.

Po kapkách byl přidán roztok terč.butyl (2S)-2-fluor-3hydroxypropylkarbamatu (45,0 g, 0,23 mol) v methylenchloridu (300 ml). Reakční směs byla ponechána ohřát na pokojovou teplotu a v míchání se pokračovalo 12 h. Reakční směs byla přefiltrována přes lože Celit® a byla promyta dalším methylenchloridem. Filtrát byl odpařen za sníženého tlaku a přečištěn silikagelovou kolonovou chromatografií za eluce methylenchloridem. Tato procedura dala terč.butyl (2S)-2-fluor-3-jodpropylkarbamat jako bílou pevnou látku (42,5 g, 62 %).

³Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 4,80 - 5,10 (br s, 1H) , 4,58 4,72 (m, 0,5 Η) , 4,42 - 4,56 (m, 0,5 Η) , 3,48 - 3,70 (m,

1H), 3,20 - 3,46 (m, 3H), 1,48 (s, 9H) .

Farmaceutické přípravky

Sloučenina vzorce (I) podle tohoto vynálezu může být použita jako aktivní složka farmaceutického přípravku pro orální, rektální, epidurální, intravenózní, intramuskulární, subkutánní, nazální podávání a podávání infuzí nebo jakýmkoli jiným vhodným způsobem podávání. Výhodný způsob podávání je orální nebo injekcí/infúzí.

Farmaceutické přípravky obsahují sloučeninu podle tohoto vynálezu v kombinaci s jednou nebo více farmaceuticky přijatelnými složkami. Konečné dávkovači formy se vyrábí známými farmaceutickými způsoby. Obvykle je množství aktivních složek mezi 0,1 a 95 % hmotnosti přípravku, výhodně mezi 0,2 a 20 % hmotnosti u přípravků pro parenterální použití a výhodně mezi 1 a 50 % hmotnosti u přípravků pro orální podávání.

U přípravy farmaceutických přípravků obsahujících sloučeninu podle tohoto vynálezu ve formě pevné dávkové jednotky pro orální podávání může být vybraná sloučenina smíchána s pevnými, práškovými farmaceuticky přijatelnými složkami (mezi nimi například s rozvolňovadly a lubrikanty). Směs se poté lisuje do granulí, tablet, kapslí nebo pastilek.

Dávkové jednotky pro rektální podávání mohou být připraveny ve formě čípků; ve formě želatinové rektální kapsle; ve formě snadno připravitelného mikroklystýru; ve formě suché kompozice pro klystýr k rekonstituci ve vhodném rozpouštědle před podáváním.

Kapalné přípravky pro orální podávání mohou být připraveny ve formě sirupů nebo suspenzí, nebo ve formě suché směsí k rekonstituci s vhodným rozpouštědlem před použitím.

Roztoky pro parenterální podávání mohou být připraveny jako roztok sloučeniny podle vynálezu ve farmaceuticky přijatelném rozpouštědle a jsou rozděleny do jednotkových dávek ve formě ampulí. Mohou být také připraveny jako suché přípravky k rekonstituci s vhodným rozpouštědlem bezprostředně před použitím.

Typické denní dávky aktivní sloučeniny budou záviset na různých faktorech, jako například na individuálních požadavcích každého pacienta, způsobu podávání a chorobě. Obecně platí, že dávky budou v rozmezí 1 pg až 100 mg na fe* i fefefefe# ·· · fefe» i* fe • · fe · Λ fe «*>« ·»· · * ♦· ♦ fefe » fe · * · fe den a kg tělesné hmotnosti, výhodně 10 pg až 20 mg na den a kg tělesné hmotnosti.

Biologické testy

Vazebné zkoušky [³H]GABA radioligandu

Krysí synaptické membrány byly připraveny z celých mozků samců krys Sprague Dawley v podstatě dříve popsaným způsobem (Zukin, et al. (1974) Proč. Nati. Acad. USA 71, 4802 - 4807). Kompetitivní zkouška [³H]GABA, modifikovaná oproti Olpe et al. (1990) Eur. J. Pharmacol. 187, 27 - 38) byla provedena v 200 μΐ TCI (Tris Calcium Isoguvacine) pufru (50 mM Tris (tri(hydroxymethyl)aminomethan), pH 7,4, 2,5 mM CaCl₂ a 40 μΜ isoguvacinu) obsahujícím 20 nM [³H]GABA (specifická aktivita: 3 Tera Becquerel (TBq)/mmol), testovanou sloučeninu nebo rozpouštědlo a 80 pg synaptického membránového proteinu za použití 96 jamkových destiček. Po inkubaci po dobu 12 - 20 min při pokojové teplotě byla inkubace ukončena rychlou filtrací přes filtr ze skleněných vláken (Printed filtermat B filtry, Wallac), které byly předzpracovány pomocí 0,3% polyethyleniminu za použití harvesteru 96 jamkové destičky (Skatron nebo Tomtec). Filtry byly promyty pufrem obsahujícím 50 mM Tris (tris(hydroxymethyl)aminomethanu) a 2,5 mM CaCl₂, pH 7,4, při 4 °C a poté vysušeny při 55 °C. Scintilační desky MeltiLex B/HS (Wallac) byly připevněny k filtru a radioaktivita byla stanovena scintilačním čítačem Microbeta (Wallac).

Výsledky a diskuse

Bylo zjištěno, že sloučeniny podle tohoto vynálezu mají překvapivě vysoké afinity a potenci pro GABA_Breceptor, jak bylo jištěno nízkými IC₅₀ a EC₅₀ ve vazebných zkouškách a ileových zkouškách. Potence ve vztahu k inhibici TLOSR se týkala afinity a aktivity ke GABA_breceptoru. Vedlejší účinky na CNS (jak bylo stanoveno snížením tělesné teploty u myší) byly pozorovány pouze u dávek vyšších než jsou terapeutické dávky inhibující TLOSR u psích modelů. Rozdíl mezi terapeutickou dávkou (inhibice TLOSR) a dávkou způsobující vedlejší účinky je proto neočekávaně vysoký.

Claims

1. Sloučenina obecného vzorce I kde

Ri představuje vodík nebo nižší alkyl;

R₂ představuje atom fluoru;

R₃ představuje vodík;

R₄ představuje vodík;

R_s představuje methyl, fluormethyl, difluormethyl nebo trifluormethyl;

a její farmaceuticky přijatelné soli, solváty a stereoizomery.

2. Sloučenina podle nároku 1, kterou je kyselina (3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinová.

3. Sloučenina podle nároku 2, kterou je kyselina (2R) — (3 — -amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinová.

4. Sloučenina podle nároku 2, kterou je kyselina (2S)-(3-amino-2-fluorpropyl)(methyl)fosfinová.

·· ·· ·* ·<· ·· • · ···· ···· ·· · · · · · · · • · · · · · · · · ♦ · · • ··«· ··· ··· ·· ·· · 4 · fc · · * · (náhradní strana)

5. Sloučenina podle nároku 1, kterou je kyselina (3-amino-2-fluor-l-methylpropyl)(methyl)fosfinové.

6. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro použití v terapii.

7. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro inhibici přechodných relaxací spodního ezofageálního svěrače.

8. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro ošetření chorob spojených s gastroezofageálním refluxem.

9. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro ošetření regurgitace u dětí.

10. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5 pro výrobu léčiva pro ošetření s GORD- nebo non-GORD spojeným astmatem, říhání, kašle, bolesti, závislostí na kokainu, škytavky, IBS, dyspepsie, zvracení a nocicepce.

11. Způsob ošetření krátkodobých relaxací spodního ezofageálního svěrače, vyznačující se tím, že zahrnuje ošetření subjektu trpícího tímto stavem pomocí farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5.

12. Způsob ošetření chorob spojených s gastroezofageálním refluxem, vyznačující se tím, že zahrnuje ošetření subjektu trpícího tímto stavem pomocí farma38 ··· ···· «« · • · · · · · * · · · · · t «4 · I» # · « Φ 4 · « » t. · (náhradní strana) ceutického prostředku obsahujícího sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5.

13. Způsob ošetření regurgitace u dští, vyznačuj ίο i se t i m, že zahrnuje ošetření subjektu trpícího tímto stavem pomocí farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5.

14. Způsob ošetření s GORD- nebo non-GORD spojeného astmatu, říhání, kašle, bolesti, závislostí na kokainu, škytavky, IBS, dyspepsie, zvracení nebo nocicepce, vyznačující se tím, že zahrnuje ošetření subjektu trpícího tímto stavem pomocí farmaceutického prostředku obsahujícího sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 5.

15. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje jako aktivní složku terapeuticky přijatelné množství sloučeniny definované v kterémkoli z nároků 1 až 5, případně ve spojení s ředidly, vehikuly nebo inertními nosiči.

16. Sloučenina vybraná ze souboru sestávajícího z z ethyl-[3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorpropanoatu], ethyl-[(3-amino-2-fluor-3-oxopropyl)(methyl)fosfinatu], ethyl-[3-[ethoxy(methyl)fosforyl]-2-fluorbutanoatu], ethyl-[3-amino-2-fluor-l-methyl-3-oxopropyl(methyl)fosfinatu], kyseliny (2R)-(3-amino-2-fluorpropyl)fosfinové, (2R)-(3-dibenzylamino)-2-fluor-l-propanolu, (2R)-(3-amino-2-fluor-l-propanolu, terc-butyl-[(2R)-2-fluor-3-hydroxypropylkarbamatu], terc-butyl-[(2R)-2-fluor-3-jodpropylkarbamatu], kyseliny (2S)-(3-amino-2-fluorpropyl) fosfinové, methyl-[(2S)-(3-dibenzylamino)-2-fluorpropanoatu] , (2S)-3-(dibenzylamino)-2-fluor-l-propanolu, • '* to « a « · · * » • · * ···. · » · • ··*«>· to · toto· <

• · ···· ··«

9 9 1 · · · * to »· «· · to (náhradní strana (2S)-3-amino-2-fluor-l-propanolu, terc-butyl-[(2S)-2-fluor-3-hydroxypropylkarbamatu] a terc-butyl-[(2S)-2-fluor-3-jodpropylkarbamatu].