CZ20013950A3

CZ20013950A3 - Deriváty thiooxindolu

Info

Publication number: CZ20013950A3
Application number: CZ20013950A
Authority: CZ
Inventors: Anrew Fensome; Puwen Zhang; Marci C. Koko; Jay E. Wrobel; James P. Edwards; Todd K. Jones; Christopher M. Tegley; Lin Zhi; Edward G. Melenski
Original assignee: American Home Products Corporation; Ligand Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 1999-05-04
Filing date: 2000-05-01
Publication date: 2002-06-12
Also published as: EP1181275A1; HUP0200993A2; MXPA01011285A; BG106078A; NO20015380L; EA200101180A1; NO320912B1; HUP0200993A3; NO20015380D0; KR20020000636A; TR200103288T2; PL351407A1; AU4681400A; EA005034B1; SK15902001A3; CN1349499A; NZ515351A; CA2371633A1; JP2002543182A; GEP20043266B

Description

Oblast techniky

Tento vynález se týká sloučenin, které působí jako agonisté receptoru pro progesteron, jejich přípravy a použití.

Dosavadní stav techniky

Intracelulární receptory (IR) tvoří skupinu strukturálně známých pod ligandu (R. M.

příbuzných genových regulátorů transkripční faktory závislé na Science, 240, 889, 1988). Rodina steroidních receptorů je podskupina rodiny IR, včetně receptoru pro progesteron (PR) , receptoru pro estrogen (ER) , receptoru pro androgen (AR) , receptoru pro glukokortikoid (GR) a receptoru pro mineralokortikoid (MR) .

Přirozený hormon nebo ligand pro PR je steroid progesteron, ale byly vytvořeny syntetické sloučeniny, jako je například medroxyprogesteronacetát nebo levonorgesfrel, které také slouží jako ligandy. Jakmile se ligand vyskytuje v tekutině obklopující buňku, přechází přes membránu prostřednictvím pasivní difúze a váže se na IR za tvorby komplexu receptor/ligand. Tento komplex se váže ke specifickým genovým promotorům přítomným v buněčné DNA. Jak je komplex navázán k DNA, moduluje produkci mRNA a proteinu, který je tímto genem kódován.

J

Sloučenina, která se váže na IR a napodobuje účinek přirozeného hormonu, se nazývá agonista, zatímco sloučenina, která účinek hormonu inhibuje, je antagonista.

Je známo, že PR agonisté (přírodní a syntetičtí) mají důležitou úlohu ve zdravotním stavu žen. PR používají v přípravcích pro názvem

Evans, agonisté se kontrolu početí, typicky ··· ·· ·· *· ·· ···· v přítomnosti ER agonisty, nebo mohou být použiti ve spojení s PR antagonistou. ER agonisté jsou používáni pro léčení menopauzálních příznaků, ale byli spojováni s proliferativním účinkem na uterus, který může vést ke zvýšenému riziku karcinomu dělohy. Současné podávání PR agonisty toto riziko snižuje nebo ruší.

Bylo prokázáno, že sloučeniny podle tohoto vynálezu působí jako kompetitivní inhibitory vazby progesteronů k PR a působí jako agonisté. Tyto sloučeniny mohou být použity pro antikoncepci a pro hormonální substituční terapii u pacientek po menopauze.

Jones, et al., popsali v patentu Spojených Států č. 5 688 810 PR antagonistu dihydrochinolin A.

Jones, et al., popsali enolether B (patent Spojených Států č. 5 693 646) jako PR ligand.

B • · · · · · · »· ·· ♦ · · ·

Jones, et al., popsali sloučeninu C (patent Spojených Států č. 5 696 127) jako PR ligand.

Zhi, et al., popsali laktony D, E a F jako PR antagonisty (J. Med. Chem., 41, 291, 1998).

Zhi, et al., popsali ether G jako PR antagonistů (J. Med. Chem., 41, 291, 1998).

• 4 4 4 4 4 4 ··· · 44 ·· ·· 4 · 4 4 44··

4 444 44 ·

4444 4444 4 • 44 4944 444

944 44 44 49 44 4494

Combs, et al., popsali amid H jako ligand pro PR Chem. , 38, 4880, 1995) .

(J. Med.

Perlman, et. al., popsali analog vitaminu D I ligand (Tet. Letters, 35, 2295, 1994).

jako PR

I • 4*44 4 4 4 44 4 44 4 4 • · · 4 4 · · 4 4 4 • · 4 4 4 44 ·

4444 4444 4

444 44 44 44 44 4444

Hamann, et al., popsali PR antagonistů J (Ann. N.Y. Acad. Sci., 761, 383, 1995).

Chen, et al., popsali PR antagonistů K (Chen, et al., POI37, 16. Int. Cong. Het.' Chem., Montana, 1997).

Kurihari, et. al., popsali PR ligand L (J. Antibiotics, 50, 360, 1997) .

Kuhla, et al., popsali oxindol M jako kardiotonikum (WO

86/03749) .

• ···« ·· ·»·· ftft ftft • ft ftftft · · 4 · · ft ···· ftftft· ft ftft· ···· ftftft • ftft ftft ftft ftft ftft ftft··

Weber popsal oxindol N pro kardiovaskulární indikace (WO 91/06545) .

Fischer, et al., nárokovali způsob výroby sloučenin, které obsahují generickou strukturu O (patent Spojených Států č. 5 453 516).

R = různý

Singh, et al., popsali PDE III inhibitor P (J. Med. Chem.,

37, 248, 1994) .

♦ ·*· •· ·*4» <· ·· • · · · 9 9 «49« • « · » · · 9 9 • · 9 · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 99 99 99 9999

Andreani, et al., popsali cytotoxický přípravek Q (Acta. Pharm. Nord., 2, 407, 1990).

Binder, et al., popsali strukturu R, což je meziprodukt pro přípravu COX II inhibitorů (WO 97/13767).

Walsh (A.H. Robins), popsali oxindol S jako meziprodukt (patent Spojených Států č. 4 440 785, patent Spojených Států č. 4 670 566) .

Ri = F, Cl, Br, alkylová skupina, NH₂

R₂ = alkylová skupina, alkoxyskupina, F, Cl, NH₂, CF₃

Bohm, et al., nárokovali oxindol T jako kardiovaskulární přípravek (WO 91/06545).

Bohm, et al., popsali generickou strukturu U (WO 91/04974).

JP 63112584 A obsahuje generickou strukturu V:

Boar, et al., popsali dioxolan W jako meziprodukt pro přípravu inhibitoru acetyl-cholinesterázy (WO 93/12085 Al).

Kende, et al., popsali metodologii pro přípravu 3,3 substituovaných oxindolů, např. X, který byl použit v předkládaném vynálezu (Synth. Commun., 12, 1, 1982).

X

Tento vynález poskytuje sloučeniny vzorců 1 nebo 2:

Rj ^R₂\=rř nebo • ·« ·· ·«

Podstata vynálezu

kde:

Ri a R₂ jsou vybrány nezávisle ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, OH, skupina O(alkyl), skupina O(alkyl) substituovaná na alkylové skupině, skupina OAc, arylová skupina, volitelně substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, volitelně substituovaná heteroarylová skupina, alkylarylová skupina, alkylheteroarylová skupina, 1-propynylová skupina nebo

3-propynylová skupina, nebo Ri a R₂ jsou spojeny a vytvářejí kruh obsahující jednu z následujících skupin: skupina -CH₂ (CH₂) _nCH₂-, skupina

-CH₂CH₂CMe₂CH₂CH₂-, skupina - O(CH₂)_mCH₂-, skupina -O(CH₂)_PO-, skupina -CH₂CH₂OCH₂CH₂- nebo skupina -CH₂CH₂N(H nebo alkyl) CH₂CH₂-, m je celé číslo 1 až 4, n je celé číslo 1 až 5, p je celé číslo 1 až 4 nebo Ri a R₂ společně obsahují dvojnou vazbu s jednou z následujících skupin: skupina CMe₂, skupina C(cykloalkyl), O, skupina C(cykloether).

R₃ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, skupina OH, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, alkynylová ···· ·· ···· ·· ·· • · · · · · · skupina nebo substituovaná alkynylová skupina nebo skupina COR^A,

R^a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R₄ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku nebo substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku,

R₅ je vybrán ze skupin a), b) nebo c):

a) R5 je trisubstituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X, Y a Z, jak je ukázáno níže:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina OH, skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, thioalkylová skupina obsahující 1 thioalkylová skupina S(0)alkylová skupina, skupina obsahující 1 až 3 atomy obsahující 1 S(0)₂-alkylová až 3 atomy uhlíku, substituovaná až 3 atomy uhlíku, skupina, aminoalkylová uhlíku, substituovaná

ΦΦΦΦ ·| aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s heteroatomy, skupina nebo 6 členy obsahující 1 až 3

CONH2, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina COR^B, skupina OCOR^B, skupina NR^cCOR^B,

R^b je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R^c je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y a Z jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující uhlíku nebo thioalkylová skupina obsahující 1 až uhlíku nebo

b) R5 je heterocyklický kruh s pěti nebo šesti členy s 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybranými ze skupiny, kterou tvoří 0, S, skupina SO, skupina S0₂ nebo skupina NR₆ a obsahující jeden nebo dva nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂ a alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina COR° nebo skupina NR^ECOR^D,

R° je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina až 3 atomy 3 atomy ♦ ··· ·* ···· ·· ·· • · * · · · · · • · · · · · · · · ·· ···· ··· ·· ·· ·· ······ obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R^E je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, R₆ je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo

c) R₅ je indol-4-ylová skupina, indol-7-ylová skupina nebo benzo-2-thiofenová skupina, tato skupina je volitelně substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny, kterou tvoří halogen, nižší alkylová skupina, skupina CN, skupina N0₂, nižší alkoxyskupina nebo skupina CF₃,

Q¹ je S, skupina NR₇, skupina CRgRg,

R₇ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina, skupina SO₂CF₃, skupina OR¹¹ nebo skupina NRⁿR¹²,

R₈ a Rg jsou nezávislé substituenty vybrané ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN nebo skupina C0₂Rio,

R10 je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo • ···· ·· ···· ·φ «· ·· · · · A · A A · • A A A AAA A A ·· AA AA AA A A

CRgRg obsahuje kruh se šesti členy, jak je ukázáno strukturou níže

Q² je vybrán ze skupin:

Ϊ11

N—O—R¹² d11 r12 ΐ ΐ

N—N—R¹³ nebo

R¹¹, R¹² a R¹³ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina nebo substituovaná aroylová skupina nebo sulfonylová skupina nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Výhodný seznam substituentů představovaných R¹¹, R¹² a R¹³ve skupinách sloučenin popsaných v tomto textu tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, skupina -C(0)-(alkyl) obsahující 1 až 6 atomů uhlíku v alkylové části, skupina -S(0)2-(alkyl) obsahující 1 až 6 atomů uhlíku v alkylové části, fenylová skupina nebo benzylová skupina.

Je nutné rozumět, že tento vynález zahrnuje všechny tautomerní formy sloučenin, chemických vzorců a substituentů popsaných v tomto textu.

Dvě výhodné skupiny sloučenin podle tohoto vynálezu jsou zobrazeny strukturami 2 a 3, v daném pořadí:

»444

44 ♦ · 4 4 · 4

4 4

4 4 ·· 4444

4 44 4

4 4 · • 4 4 4

4 4 4 4 • 4 4 4 4 • 44 »4

kde v každé struktuře je R₅obsahující substituenty X a Y, disubstituovaný benzenový kruh jak je ukázáno níže

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je substituent v poloze 4' nebo 5' ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodnou skupinu vzorce 2 tvoří ty sloučeniny, kde

R₅ je kruh s pěti členy se strukturou ukázanou níže

• *444 • ·	• *	• ·*	• •	« · ♦ 4	• 4 4 4
•	•
• · ·	•	•		• 4	• 4	4
• · · • 4 · ·	•	• 4·	• 4·	•	• · • 4	• «•94

U je O, S nebo skupina N^R6,

R_s je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂/ skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y' je ze skupiny, kterou tvoří H, F nebo alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodnou podskupinu sloučenin uvedených výše tvoří ty sloučeniny, kde R5 je thiofenový nebo f uranový kruh substituovaný X' a Y', jak byly popsány výše.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorců 2 a 3 tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je kruh se šesti členy se strukturou:

kde X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina N0₂,

Q¹ je S, skupina NR₇, skupina CRaRg,

R₇ je ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina

9999 «9 99*9

9 9

9 9 9

9 9 · ·

99 99 • 4 «9 • 9 4 9 9 • 9 9* • 9 9 · 9 • 9 9 9

99 9999 obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina nebo skupina SO₂CF₃,

R₈ a R₉ jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina CO₂Ri₀,

Rio je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

CRgRg jsou v kruhu se šesti členy, jak je ukázáno strukturou uvedenou níže

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Ještě další výhodnou skupinu těchto sloučenin tvoří sloučeniny mající obecné vzorce:

kde každý R5 je disubstituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl) ₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je substituent v poloze 4' nebo 5' ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorců:

strukturou:

• · kde X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON (alkyl) ₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina N0₂,

Q² je, jak je definováno výše,

R₇ je ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina nebo skupina SO₂CF3,

Rg a Rg jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina C0₂R_Xo,

Rio je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodná skupina sloučenin podle tohoto vynálezu je zobrazena strukturou 4

• · · · · · • · · • · ·

kde R14 je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina, sulfonylová skupina, substituovaná sulfonylová skupina.

Kde R₅ je disubstituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNHOH, skupina CNH₂NOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina NO₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je substituent v poloze 4' nebo 5' ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina NO₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

• · • · · • · · · · ·

Další výhodnou skupinu vzorce 4 tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je kruh s pěti členy se strukturou ukázanou níže

U je 0, S nebo skupina NR₆,

R6 je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CNHNHOH, skupina CNH₂N0H, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)_2ř alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Další výhodnou podskupinu sloučenin uvedených výše tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je thiofenový nebo furanový kruh substituovaný X' a Y', jak byly popsány výše.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorce 4 tvoří ty sloučeniny, kde Rs je kruh se šesti členy se strukturou:

kde X¹ je N nebo skupina CX²,

R₇ je ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina nebo skupina SO₂CF₃,

Rg a Rg jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina C0₂Rio<

Rio je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodná skupina sloučenin podle tohoto vynálezu je zobrazena strukturou 5,

kde R5 je disubstituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže

X

tt ··· · • 9

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON (alkyl) ₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Další výhodnou skupinu vzorce 5 tvoří ty sloučeniny, kde

Rs je kruh s pěti členy se strukturou ukázanou níže

U je 0, S nebo skupina NR6,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

• ·· · • » ··· ·

Další výhodnou podskupinu sloučenin uvedených výše tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je thiofenový nebo furanový kruh substituovaný X' a Y', jak bylo popsáno výše.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorce 5 tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je kruh se šesti členy se strukturou:

kde X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina NO₂,

R₈ a R₉ jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina C0₂Rio,

Další výhodná skupina sloučenin podle tohoto vynálezu je zobrazena strukturou 6,

44·· • 4

4 4 <4··

kde R15 je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, skupina Me, skupina CO₂R, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina CN.

Kde R5 je disubstituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže,

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoraikylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Další výhodnou skupinu vzorce 6 tvoří ty sloučeniny, kde

R₅ je kruh s pěti členy se strukturou ukázanou níže ·· ·<·· • · · · • 4 ··

U je O, S nebo skupina NRg,

Ré je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

Další výhodnou podskupinu sloučenin výše tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je thiofenový nebo furanový kruh substituovaný X' a Y', jak bylo popsáno výše.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorce 6 tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je kruh se šesti členy se strukturou:

kde X¹ je N nebo skupina CX²,

R₇ je ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová «· skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná heterocyklické skupina nebo skupina SO2CF3,

Rg a Rg jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná heterocyklické skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina C0₂Rio,

R10 je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Další výhodná skupina sloučenin podle tohoto vynálezu je

kde R5 je disubstituovaný benzenový substituenty X a Y, jak je ukázáno níže

X

4· kruh obsahující

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl) ₂, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

999 9

9 9 9 9 9 9 9 9 • · 9 9 9 9 9 · • «··· 4··· 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

444 44 ·· ·· ·· 9999 heterocyklický kruh s 5 členy obsahující 1 až 3 heteroatomy nebo thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Další výhodnou skupinu vzorce 7 tvoří ty sloučeniny, kde

R₅ je kruh s pěti členy se strukturou ukázanou níže

U je 0, S nebo skupina NR₆,

Rg je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

Další výhodnou podskupinu sloučenin výše tvoří ty sloučeniny, kde R5 je thiofenový nebo furanový kruh substituovaný X' a Y', jak bylo popsáno výše.

Další výhodnou podskupinu sloučenin vzorce 7 tvoří ty sloučeniny, kde R₅ je kruh se šesti členy se strukturou:

4444

···· • 4 44

I 4 4 4 kde X¹ je N nebo skupina CX²,

Rg a Rg jsou nezávislé substituenty ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN, skupina C0₂Rio,

Sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou obsahovat asymetrický atom uhlíku a některé sloučeniny podle tohoto vynálezu mohou obsahovat jedno nebo více asymetrických center a vznikají z nich tedy optické izomery a diastereomery. I když je ve vzorcích 1 a 2 vynález ukázán bez ohledu na stereochemii, zahrnuje předkládaný vynález tyto optické izomery a diastereomery, a také racemické a rozštěpené, • 9 999 9

9« • · » · • 4 9 • 9 · · · » · 9 9 · • · 9 9 9994 enantiomerně čisté R a S stereoizomery, a také další směsi R a S stereoizomerů a jejich farmaceuticky přijatelné soli.

Termín alkylová skupina je použit v tomto textu k označení skupin saturovaných alifatických uhlovodíků jak s přímým tak i s rozvětveným řetězcem, které mají 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina zahrnuje alkylové skupiny jak s přímým tak i s rozvětveným řetězcem s 1 nebo 2 dvojnými vazbami mezi dvěma atomy uhlíku a obsahující 2 až 8 atomů uhlíku, výhodně 2 až 6 atomů uhlíku, alkynylová skupina pokrývá alkylové skupiny jak s přímým tak i s rozvětveným řetězcem s alespoň 1 nebo 2 trojnými vazbami mezi dvěma atomy uhlíku a obsahující 2 až 8 atomů uhlíku, výhodně 2 až 6 atomů uhlíku.

Termín acylová skupina se týká karbonylového substituentu obsahujícího saturované alifatické uhlovodíkové skupiny jak s přímým tak i s rozvětveným řetězcem mající 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku. Termín substituovaná acylová skupina se týká acylové skupiny, jak byla právě popsána, volitelně substituované 1 až 6 skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina OH a skupina NO₂.

Termín aroylová skupina se také týká karbonylového substituentu nesoucího fenylovou skupinu nebo heteroaromatickou skupinu. Heteroaromatické skupiny zahrnují 2-, 3- nebo 4-pyridinylovou skupinu, 2- a 3-furanylovou skupinu, 2- nebo 3-thiofenylovou skupinu nebo 2- nebo 4pyrimidinylovou skupinu. Termín substituovaná aroylová skupina se také týká aroylové skupiny, jak byla popsána, volitelně substituované 1 až 6 skupinami vybranými ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina OH a skupina NO₂.

Termíny substituovaná alkylová skupina, substituovaná alkenylová skupina a substituovaná alkynylová skupina se týkají alkylové skupiny, alkenylové skupiny a alkynylová

4 4

444 · • 4

4 4

4 · 4

4

4444 skupiny, jak byly právě popsány, které mají jeden nebo více substituentů vybraných ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina OH, skupina N0₂, aminoskupina, arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná arylová skupina, substituovaná heterocyklické skupina, alkoxyskupina, aryloxy, substituovaná alkyloxyskupina, alkylkarbonylová skupina, alkylkarboxyskupina, alkylaminoxyskupina, arylthioskupina. Tyto substituenty mohou být připojeny k jakémukoliv uhlíku alkylové skupiny, alkenylové skupiny nebo alkynylové skupiny za předpokladu, že připojení vytvoří stabilní chemickou skupinu.

Termín arylová skupina je použit v tomto textu k označení aromatického systému, který může být jednoduchý kruh nebo několikanásobný aromatický kruh fúzovaný nebo spojený dohromady tak, že alespoň jedna část fúzovaných nebo spojených kruhů tvoří kondenzovaný aromatický systém. Arylové skupiny bez omezení tvoří fenylová skupina, naftylová skupina, bifenylová skupina, antrylová skupina, tetrohydronaftylová skupina, fenantrylová skupina.

Termín substituovaná arylová skupina se týká arylové skupiny, jak byla právě definována, mající jeden až čtyři substituenty ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina OH, skupina N0₂, aminoskupina, alkylová skupina, cykloalkylová skupina, alkenylová skupina, alkynylová skupina, alkoxyskupina, aryloxyskupina, substituovaná alkyloxyskupina, alkylkarbonylová skupina, alkylkarboxyskupina, alkylaminoxyskupina nebo arylthioskupina.

Termín heterocyklické skupina je použit v tomto textu k označení stabilního monocyklického kruhu se 4 až 7 členy nebo stabilního multicyklického heterocyklického kruhu, který je saturovaný, částečně nesaturovaný nebo nesaturovaný a který se skládá z atomů uhlíku a z jednoho až čtyř heteroatomů vybraných ze skupiny, kterou tvoří atomy N, 0 a S. Atomy N a S

• Α·ΑΑ	A A		A A* ·	A*		• A
• A ·	•	•	•	A	A	A A
• A	•	•	•	A	A	A
9 A A AAA AA	• AA	•	• ··	A A AA	•	A ··»·

mohou být oxidovány. Heterocyklický kruh také zahrnuje každý multicyklický kruh, ve kterém je každý z výše definovaných heterocyklických kruhů fúzován k arylovému kruhu. Heterocyklický kruh může být připojen na každém heteroatomů nebo atomu uhlíku za předpokladu, že výsledná struktura je chemicky stabilní. Takové heterocyklické skupiny zahrnují například tetrahydrofuranový kruh, piperidinylový kruh, piperazinylový kruh, 2-oxopiperidinylový kruh, azepinylový kruh, pyrolidinylový kruh, imidazolylový kruh, pyridylový kruh, pyrazinylový kruh, pyrimidinylový kruh, pyridazinylový kruh, oxazolylový kruh, isoxazolylový kruh, morfolinylový kruh, indolylový kruh, chinolinylový kruh, thienylový kruh, furylový kruh, benzofuranylový kruh, benzothienylový kruh, thiamorfolinylový kruh, thiamorfolinylsulfoxidový kruh a isochinolinylový kruh.

Termín substituovaná heterocyklické skupina je použit v tomto textu k označení právě definovaného heterocyklického kruhu majícího 1 až 4 substituenty vybrané ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina OH, skupina NO₂, skupina, substituovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, skupina, alkynylová skupina, aminoskupina, alkylová skupina, cykloalkylová substituovaná alkenylová alkoxyskupina, aryloxy, alkylkarbonylová skupina, alkynylová substituovaná alkyloxyskupina, alkylkarboxyskupina, alkylaminoxyskupina nebo arylthioskupina.

Termín thioalkylová skupina je použit v tomto textu k označení skupiny SR, kde R je alkylová skupina nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku. Termín alkoxyskupina je použit v tomto textu k označení skupiny OR, kde R je alkylová skupina nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku. Termín aryloxyskupina je použit v tomto textu k označení skupiny OR, kde R je ··»· φ φ « · ··»· • · *· • · · • » · · ·· ·· «* ··

Φ Φ « β • · « • · · · • · · ·· ·♦♦· arylová skupina nebo substituovaná arylová skupina, jak byly definovány výše. Termín alkylkarbonylová skupina je použit v tomto textu k označení skupiny RCO, kde R je alkylová skupina nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku. Termín alkylkarboxyskupina je použit v tomto textu k označení skupiny COOR, kde R je alkylová skupina nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku. Termín aminoalkylová skupina se týká jak sekundárního, tak terciárního aminu, kde alkylová skupina nebo substituovaná alkylová skupina, obsahující 1 až 8 atomů uhlíku, výhodně 1 až 6 atomů uhlíku, mohou být buď stejné nebo odlišné, a bod připojení je na atomu dusíku. Termín halogen se týká Cl, Br, F nebo I.

Sloučeniny podle podle metod popsaných tohoto níže.

vynálezu mohou být připraveny

Schéma 1

• · AAAA · A A A • A · · · ·

A · AAAA

Podle schématu 1 je komerčně dostupný oxindol 3 podroben působení silné organokovové báze (např. butyllithia, diisopropylamidu lithného, hexamethyldisilazidu draselného) v inertním rozpouštědle (např. THF, diethylether) v dusíkové atmosféře při snížené teplotě (přibl. -20 °C) (Kende, et al., Synth. Commun., 12, 1, 1982) v přítomnosti chloridu lithného nebo Ν,Ν,Ν', N'-tetramethylethylendiaminu. Výsledný dianion je poté podroben působení nadbytku elektrofilu, jako je například alkylhalogenid, výhodně jodid. Jestliže Ri a R₂ mají být spojeny, například produkt 4 obsahuje spirocyklický kruh v poloze 3, pak by elektrofil měl být dvoj funkční, tj. dijodid. Následná bromace 4 pokračuje hladce s bromem v octové kyselině (je-li nezbytné, může být přidáno organické rozpouštědlo, jako je například dichlormethan), v přítomností acetátu sodného, za vzniku arylbromidu 5. Bromid 5 reagoval se solí palladia (např. tetrakis(trifenylfosfin)palladiem(O) nebo acetátem palladnatým), ve vhodném rozpouštědle (např. THF, dimethoxyethan, aceton, ethanol nebo toluen) při teplotě místnosti v inertní atmosféře (argon, dusík). Směs je poté podrobena působení arylboronové nebo heteroarylboronové kyseliny nebo esteru boronové kyseliny a báze (uhličitan sodný, triethylamin, fosfát draselný) ve vodě nebo zdroje fluoridu (fluorid česný) v bezvodých podmínkách. Požadovaný produkt 6 je poté izolován a purifikován standardními prostředky.

Reakce indolin-2-onu 6 buď s Lawessonovým činidlem nebo pentasulfidfosforem ve vhodném organickém rozpouštědle (pyridin, THF, dioxan, dimethoxyethan, dichlormethan, benzen, toluen, xylen) při teplotě mezi teplotou místnosti a teplotou varu rozpouštědlá pod zpětným chladičem poskytuje thiokarbonylový derivát 7. Mohou také být použita aditiva, jako je například hydrouhličitan sodný.

• ·

Jestliže Ri a R₂ jsou různé, poté je meziprodukt 4 připraven reakcí dianionu 3 s jedním ekvivalentem elektrofilu Ri-X (X = odstupující skupina, např. jod). Výsledná mono-

alkylovaná	sloučenina pak může být	izolována a opět podrobena
reakčním podmínkám s použitím R₂-X	nebo alternativně použita
in sítu pro	druhou alkylaci s R₂-X	. Nebo jestliže požadovaný
produkt 7	obsahuje R₂ = H, pak	izolovaný mono-alkylovaný
meziprodukt	prochází následnými kroky.
Schéma 2
^R(	1


1 1
kZ-	N 0 Λ	\«Ο
	H	N
5	6	H
Pro	kondenzaci připojené	arylové skupiny nebo

heteroarylové skupiny, Ar, k základní oxindolové struktuře, jsou také k dispozici další metody, například reakce

Ol sloučeniny 5 s arylstannanem nebo heteroarylstannanem, arylzinkem nebo heteroarylzinkem nebo arylmagnesiumhalogenidem či heteroarylmagnesiumhalogenidem v přítomnosti katalyzátoru palladia nebo niklu (schéma 2) . Požadovaná arylkovové nebo heteroarylkovové sloučeniny popsané výše jsou vytvářeny standardními technikami.

Další funkční skupiny mohou být také zavedeny do polohy 3 základní indolinové struktury podle schématu 3. Oxidace nesubstituovaného indolinu 8, výhodně v neutrálních nebo kyselých podmínkách (např. oxid seleničitý v suchém dioxanu ve varu pod zpětným chladičem) dává vznik isatinu 9. Sloučenina 9 může být dále funkcionalizována za vzniku ketalu 11 působením alkoholu a kyselého katalyzátoru za dehydratačních podmínek. Alternativně reakce 9 s druhým ketonem ve vhodných podmínkách (piperidin v toluenu ve varu pod zpětným chladičem nebo TiCl₄/Zn v THF ve varu pod zpětným chladičem) dává vznik alkylidenovým derivátům 11. Reakce isatinu 9 s Grignardovým činidlem nebo organolithiem poskytuje terciární alkoholy 12 (R = H) . Tyto alkoholy mohou pak být dále funkcionalizovány alkylaci nebo acylací.

Schéma 3

rozpouštědle dichlormethan,

Reakce indolin-2-onového derivátu 6 činidlem nebo pentasulfidfosfořem ve (pyridin, THF, benzen, toluen, buď s Lawessonovým vhodném organickém dioxan, dimethoxyethan, xylen) při teplotě mezi teplotou místnosti a teplotou varu rozpouštědla pod zpětným chladičem poskytuje thiokarbonylové deriváty 7. Mohou také být použita aditiva, jako je například hydrouhličitan sodný.

Alternativním způsobem přípravy je reakce sloučeniny 5 buď s Lawessonovým činidlem nebo pentasulfidfosforem ve vhodném organickém rozpouštědle (pyridin, THF, dioxan, dimethoxyethan, dichlormethan, benzen, toluen, xylen) při teplotě mezi teplotou místnosti a teplotou varu rozpouštědla pod zpětným chladičem, v inertní atmosféře (dusík nebo argon) za vzniku thiokarbonylového derivátu 13. Poté reakce bromidu 13 v bezvodém rozpouštědle (např. THF, Et₂O) se silnou bází (výhodný hydrid sodný, hexamethyldisilazid sodný, hydrid draselný) následovaná reakcí při snížené teplotě (-50 až -20 °C) s n-butyllithiem a N,N,N,Ν'-tetramethylethylendiaminem následovaná po uplynutí vhodné doby reakcí s trialkylborátem (trimethylborátem nebo triisopropylborátem) dala po působení kyselinou boronovou kyselinu 14 (schéma 4). Sloučenina 14 může pak reagovat v podmínkách katalyzovaných palladiem (tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O) nebo acetát palladnatý, báze (NaHCO₃, Na₂CO₃, K₂CO₃, triethylamin, CsF) , rozpouštědlo (toluen/EtOH/voda, THF/voda, dimethoxyethan/voda, bezvodý dimethoxyethan) s arylbromidem nebo heteroarylbromidem, aryljodiem nebo heteroaryljodidem, aryltrifluormethan• ···· 44 4·44 44 ·'♦ «4 4 4 4 · 4 4 4 4 • · 4 4 4 4 4 ·

4449 4499 9

944 4444 444

444 44 44 44 44 4444 sulfonátem nebo heteroaryltrifluormethansulfonátem nebo aryltrifluorsulfonátem nebo heteroaryltrifluorsulfonátem, za vzniku požadované sloučeniny 7.

Nebo reakce sloučeniny 13 v podmínkách katalyzovaných palladiem (tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) nebo acetát palladnatý) , báze (NaHCO₃, Na₂CO₃, K₂CO₃, triethylamin, CsF) rozpouštědlo (aceton/voda, toluen/EtOH/voda, THF/voda, dimethoxyethan/voda, bezvodý dimethoxyethan) s arylbromidem nebo heteroarylbromidem, aryljodiem nebo heteroaryljodidem, aryltrifluormethansulfonátem nebo heteroaryltrifluormethansulfonátem nebo aryltrifluorsulfonátem nebo heteroaryltrif luorsulfonátem, za vzniku požadované sloučeniny 7.

Schéma 5

Ošetření bromidu 5 v bezvodém rozpouštědle (např. THF, Et₂O) se silnou bází (výhodný hydrid sodný, hexamethyldisilazid sodný, hydrid draselný) následované reakcí při snížené teplotě (-50 až -20 °C) s n-butyllithiem a Ν,Ν,Ν,Ν'-tetramethylethylendiaminem následovaná po uplynutí vhodné doby reakcí s trialkylborátem (trimethylborátem nebo triisopropylborátem) dala po působení kyselinou boronovou kyselinu 15 (schéma 5) .

• ft

Sloučenina 15 může pak reagovat v podmínkách katalyzovaných palladiem (tetrakis(trifenylfosfin)palladium(O), báze (NaHCO₃,

Na₂CO₃, K₂CO₃, (toluen/EtOH/voda, rozpouštědle dichlormethan, triethylamin, CsF) rozpouštědlo

THF/voda, dimethoxyethan/voda, bezvodý dimethoxyethan) s arylbromidem nebo heteroarylbromidem, aryljodiem nebo heteroaryljodidem, aryltrifluormethansulfonátem nebo heteroaryltrifluormethansulfonátem nebo aryltrifluorsulfonátem nebo heteroaryltrifluorsulfonátem, za vzniku požadované sloučeniny 6.

Alternativní strategií je připravit organozinkové nebo organohořčíkové činidlo ze sloučeniny 5 a nechat je reagovat in sítu s arylbromidem nebo heteroarylbromidem, aryljodiem nebo heteroaryljodidem, aryltrifluormethansulfonátem nebo heteroaryltrifluormethansulfonátem nebo aryltrifluorsulfonátem nebo heteroaryltrifluorsulfonátem, v podmínkách katalyzovaných palladiem za vzniku sloučeniny 6. Tyto organozinkové nebo organohořčíkové sloučeniny mohou být připraveny ošetřením bromidu 57 v bezvodém rozpouštědle (např. THF, Et₂O) se silnou bází (výhodný hydrid sodný, hexamethyldisilazid sodný, hydrid draselný) následované reakcí při snížené teplotě (-50 až -20 °C) s n-butyllithiem a Ν,Ν,Ν,Ν'-tetramethylethylendiaminem následovaná po uplynutí vhodné doby reakcí s bezvodým chloridem zinečnatým nebo magnesiumbromidem.

Reakce indolin-2-onového derivátu 6 buď s Lawessonovým činidlem nebo pentasulfidfosforem ve vhodném organickém (pyridin, THF, dioxan, dimethoxyethan, benzen, toluen, xylen) při teplotě mezi teplotou místnosti a teplotou varu rozpouštědla, v inertní atmosféře (dusík nebo argon) poskytla thiokarbonylový derivát

15. Mohou také být hydrouhličitan sodný.

použita aditiva, jako je například •« · · * · · · · • · · · · · · • «»·· · · · ·

Schéma 6

Y = CHNQ>

= NCN = NSQCF₃

Podle schématu 6 thioamidové deriváty 7 mohou být konvertovány na enaminové deriváty 16 (Wrobel, et al., J. Med. Chem., 1989, 2493) .

Tak reakce thioamidu 7 (Pg = H,2-(trimethylsilyl) ethoxymethyl, benzyl, apod.) s triethyloxoniumtetrafluorborátem (nitromethan, kyanamid, kyselina, apod.), pak skupiny ve vhodných následovaná reakcí s nukleofilem trifluormethansulfonamid, Meldrumova následovaná odstraněním chránící podmínkách (např. tetrabutylamoniumfluorid v THF pro Pg =

2-(trimethylsilyl)ethoxymethyl), pak poskytla enaminové deriváty 16. Vhodná rozpouštědla pro tyto dva kroky jsou vybírána ze skupiny, kterou tvoří dichlormethan, THF, dioxan, 1,2-dichlorethan a reakce byla prováděna při teplotě od -78 °C k bodu varu rozpouštědla v inertní atmosféře (dusík nebo argon).

• ···· ·* ···· ·· ·· ·· ♦·· ···· • · · · · · · • «··· · · · · ·

Podle schématu 7 ošetření meziproduktu 7 alkylačním činidlem, např., methyljodidem, ethyljodidem, 2,4-dinitrofluorbenzenem nebo 4-nitrofluorbenzenem, v přítomnosti vhodné báze (např. aminová báze, jako je například pyridin, triethylamin nebo diisopropylethylamin nebo uhličitan lithný, sodný, draselný nebo česný) ve vhodném organickém rozpouštědle (např. DMF, THF, DMSO, dioxan nebo acetonitril) při teplotě od -78 °C k bodu varu rozpouštědla, pak poskytlo thioiminoethery 17. Následná reakce meziproduktu 17 s hydroxylaminem nebo kyselou solí hydroxylaminu (např. hydrochloridem) ve vhodném rozpouštědle (například, ale bez omezení, pyridinmethanol, ethanol, isopropanol, DMF, THF nebo DMSO a volitelně v přítomnosti aditiva, jako je například terciární aminová báze nebo acetát sodný či draselný) při teplotě od -78 °C k bodu varu rozpouštědla pak poskytla N-hydroxyamidiny 18.

Podobně ošetření meziproduktu 17 uhlíkovým nukleofilem, jako je například derivát malonátu (např., malononitril, kyanoacetátester, nitroacetátester nebo malonát) v přítomnosti • 4444 99 9999 99 99

9 9 9 9 9 9 9 9 «4 4* 44 4 · vhodné báze (např. aminová báze, jako je například pyridin, triethylamin nebo diisopropylethylamin nebo uhličitan lithný, sodný, draselný nebo česný) nebo Lewisovy kyseliny (např. etherát fluoridu boritého, dvojmocné soli olova, chlorid titaničitý, dvojmocné soli hořčíku nebo soli stříbra) v rozpouštědle kompatibilním s vybranou bází nebo Lewisovou kyselinou (např. DMF, THF, DMSO, dioxan nebo acetonitril, chloroform, benzen, toluen nebo dichlormethan) pak poskytlo adiční sloučeninu 19. Jestliže skupina R₃ v adiční sloučenině 19 je ester karboxylové kyseliny, pak může být dekarboxylována přímo za vzniku enaminového derivátu 20 působením např. jodidu sodného v DMSO při teplotě mezi teplotou místnosti a bodem varu rozpouštědla. Nebo ester může být nejdříve hydrolyzován na karboxylovou kyselinu (působením vodné báze (např. hydroxid lithný, sodný nebo draselný) ve vhodném rozpouštědle (např. THF, dioxan, acetonitril, methanol nebo ethanol), pak následuje dekarboxylace v přítomnosti kyseliny (např. kyselina chlorovodíková nebo sírová), ve vhodném rozpouštědle (např. acetonitril, THF, dioxan) za vzniku derivátů 20. Nebo xantogenátester karboxylové kyseliny může být připraven reakcí s bází, jako je například hydrid sodný nebo draselný, v THF, pak následuje ošetření sirouhlíkem. Následná reakce s tributylcínhydridem při zvýšené teplotě v rozpouštědle, jako je například benzen nebo toluen, v inertní dusíkové nebo argonové atmosféře v přítomnosti radikálového iniciátoru, jako je například benzoylperoxid nebo azo-bis-isobutyronitril, pak poskytla produkt 20.

ft · · · · • ft · · · · • ♦ ft ftftftft ftftftft ft ··· ···· ftftft ·· ftft ftft ·· ftft ftftftft

Schéma 8

Alternativní strategie syntézy produktu 18 je ilustrována schématem 8. Tak bromid 13 (může být také použit odpovídající chlorid, jodid nebo triflátester) je podroben působení alkylačního činidla, např. methyljodidu, ethyljodidu, 2,4-dinitrofluorbenzenu nebo 4-nitrofluorbenzenu, v přítomnosti vhodné báze (např. aminová báze, jako je například pyridin, triethylamin nebo diisopropylethylamin nebo uhličitan lithný, sodný, draselný nebo česný) ve vhodném organickém rozpouštědle (např. DMF, THF, DMSO, dioxan nebo acetonitril) při teplotě od -78 °C k bodu varu rozpouštědla, za vzniku thioiminoetherů 21. Následná reakce meziproduktu 21 s hydrpxylaminem nebo kyselou solí hydroxylaminu (např. hydrochlorid, hydrobromid) ve vhodném rozpouštědle (například, ale bez omezení, pyrídinmethanol, ethanol, isopropanol, DMF, THF nebo DMSO a volitelně v přítomnosti aditiva, ,jako je například terciární aminová báze nebo acetát sodný či draselný) při teplotě od -7 8 °C k bodu varu rozpouštědla, pak poskytla N-hydroxyamidin • · 44 · 44 4 44 4 *4 ·· ·· 4 4 4 4 4 4 4 9 • · · · 4 4 4 · • · · 4 · · 4 4 · · «·· ·« «4 44 4· 4444

22. Meziprodukt 22 pak může být chráněn kompatibilní skupinou (např. benzylether, acylový derivát, tetrahydropyranylether, methoxymethylether, silylether) za vzniku derivátu 23. Nebo sloučenina 21 může reagovat přímo s chráněným hydroxylaminovým derivátem (vybraným, ale bez omezení, z chránících skupin popsaných výše) za přímého zisku derivátu 23. Sloučenina 23 pak může reagovat se solí palladia (např. tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0) nebo acetát palladnatý), ve vhodném rozpouštědle (např. THF, dimethoxyethan, aceton, ethanol nebo toluen) při teplotě místnosti v inertní atmosféře (argon, dusík). Směs je poté podrobena působení arylboronové nebo heteroarylboronové kyseliny nebo esteru boronové kyseliny a báze (uhličitan sodný, triethylamin, fosfát draselný) ve vodě nebo zdroje fluoridu (fluorid česný) v bezvodých podmínkách a reakce pak může být zahřívána k bodu varu rozpouštědla. Požadovaný produkt 24 je poté izolován a purifikován standardními prostředky.

Sloučenina 24 pak může být zbavena chránící skupiny za podmínek daných povahou chránící skupiny. Například, jestliže chránící skupina je benzylether, pak by působení bromidu boritého nebo trimethylsilyljodidu ve vhodném rozpouštědle (například dichlormethan) poskytlo sloučeninu 18. Další metody pro odstranění benzyletheru zahrnují hydrogenaci (plynný vodík nebo další zdroj vodíku, jako je například cyklohexadien nebo formiát amonný) v přítomnosti katalyzátoru palladia. Rozpouštědla vhodná pro tento postup zahrnují methanol, ethanol, THF, ethylacetát a dioxan, při teplotě mezi teplotou místnosti a bodem varu rozpouštědla. Jestliže chránící skupina byla acetalový derivát (tetrahydropyranyl nebo methoxymethylether) , pak může být hydrolýza prováděna v kyselých podmínkách (chlorovodíková kyselina, sírová kyselina, p-toluensulfonová kyselina nebo kyselá iontoměničová pryskyřice) v rozpouštědle, jako je například methanol, • Φ φφφφ φ φ

ethanol, THF, dioxan nebo acetonitril. Jestliže chránící skupina byla acylový derivát (například acetát nebo benzoát), pak může být hydrolýza prováděna v kyselých podmínkách, jak bylo popsáno výše, nebo v zásaditých podmínkách (hydroxid lithný, sodný nebo draselný) v rozpouštědle, jako je například alkohol, THF, dioxan nebo acetonitril při teplotě mezi teplotou místnosti a bodem varu rozpouštědla. Jestliže chránící skupin byla silylether, poté sloučenina 18 může být připravena hydrolýzou meziproduktu 24 v kyselých podmínkách popsaných výše nebo alternativně vystavením sloučeniny 24 zdroji fluoridu (např. fluorid draselný, fluorid česný nebo tetrabutylamoniumfluorid) v rozpouštědle, alkohol, THF, dioxan nebo acetonitril, teplotou místnosti a bodem varu rozpouštědla. Může být nutná inertní dusíková nebo argonová atmosféra.

Další metodou syntézy sloučeniny 18 je konverze chráněného N-hydroxyamidinu 23 na boronovou kyselinu nebo ester boronové kyseliny (výměnou halogenidu lithného následovanou zastavením reakce triisopropylborátem nebo palladiem katalyzovanou kondenzací s dibórpínakolátem), a poté kondenzace této boronové kyseliny nebo esterového derivátu bromidem, jodídem nebo triflátem ve katalyzovaném palladiem, jak bylo popsáno výše. Následné odstranění chránící skupiny, jak bylo popsáno pro schéma 8, poskytne požadované sloučeniny 18.

jako je například při teplotě mezi s arylchloridem, vhodném systému

Schéma 9

N-hydroxyamidinu 18 v redukčních podmínkách (např. katalytická hydrogenace, železo v kyselině octové nebo katalytický Raneyův hydrazin-nikl) pak poskytlo meziprodukt 25. Rozpouštědla vhodná pro tento postup zahrnují methanol, ethanol, THF, ethylacetát a dioxan, při teplotě mezi teplotou místnosti a bodem varu rozpouštědla. Protekce sekundárního dusíku (jako neomezující příklad je ukázán terciární butylkarbamát) za standardních podmínek pak poskytla sloučeninu 26. Reakce sloučeniny 26 s elektrofilním kyanačním činidlem (např. bromkyan, N-kyanobenzotriazol nebo komplex bromkyanu a 4-dimethylaminopyridinu) ve vhodném rozpouštědle (THF, acetonitril nebo DMF, volitelně v přítomnosti báze, jako je například pyridin nebo hydrid sodný nebo terc-butoxid draselný) může pak poskytnout požadované sloučeniny 27. V některých případech může kyanace nastat se současným odstraněním skupiny chránící sekundární dusík, jestliže tato deprotekce nenastane in šitu, pak je dále nezbytná hydrolýza.

4 4 · 4 · * ⁴ • 44·· ···· · ··· ···· ···

4·· ·· ·· ·· ·· ····

Alternativní syntéza sloučeniny 27 může sledovat syntézu sloučeniny 18, schéma 8, když N-kyanoamidinbromid 28, připravený ze sloučeniny 22 přijetím podobné strategie k reakcím ukázaným ve schématu 9, může být kondenzován s vhodně funkcionalizovanou arylboronovou kyselinou nebo esterem boronové kyseliny za vzniku sloučeniny 27. V další strategii může být meziprodukt 28 konvertován na odpovídající boronovou kyselinu nebo ester boronové kyseliny a kondenzován v Suzukiho reakci nebo v kondenzaci Suzukiho typu s palladiem s vhodně funkcionalizovaným arylbromidem.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být použity ve formě solí odvozených z farmaceuticky nebo fyziologicky přijatelných kyselin či baží. Tyto soli zahrnují, bez omezení, následující soli s anorganickými, kyselinami, jako je například chlorovodíková kyselina, sírová kyselina, dusičná kyselina, fosforečná kyselina, a popřípadě takovými organickými kyselinami, jako je octová kyselina, oxalová kyselina, jantarová kyselina a maleinová kyselina. Další soli zahrnují soli s alkalickými kovy nebo kovy alkalických zemin, jako je například sodík, draslík, vápník nebo hořčík, ve formě esterů, karbamátů a další obvyklých forem prekurzorů léčiv, které se, když jsou podávány v takové formě, přeměňují na účinnou skupinu in vivo.

Tento vynález zahrnuje farmaceutické přípravky a léčení, které zahrnuje podávání savci farmaceuticky účinného množství jedné nebo více sloučenin, jak byly popsány výše, nebo jejich

4444 44 4444 ·· ·· ·· 4 4 · · * · · · * 4 4*· 4444 4

444 4444 444

444 44 ** ·* ** 4444 farmaceuticky přijatelných solí, jako agonistů receptoru pro progesteron.

Agonisté receptoru pro progesteron podle tohoto vynálezu, použiti samotní nebo v kombinaci, mohou být použiti pro antikoncepci a léčení a/nebo prevenci dysfunkčního krvácení, dysfunkčního krvácení, děložních leiomyomat, endometriózy, syndromu polycystických vaječníků, karcinomů a adenokarcinomů endometria, vaječníků, prsu, tračníku a prostaty. Další použití vynálezu se týkají stimulace příjmu potravy.

Když jsou sloučeniny použity pro výše uvedený účel, mohou být spojené s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči nebo excipienty, například rozpouštědly, ředidly apod. a mohou být podávány perorálně v této formě jako tablety, tobolky, dispergovatelné prášky, granule nebo suspenze obsahující například přibližně 0,05 až 5% suspendujícího činidla, sirupy obsahující například přibližně 10 až 50% sacharidy a elixíry obsahující například přibližně 20 až 50% ethanolu apod. nebo parenterálně ve formě sterilních roztoků nebo suspenzí pro injekci obsahujících přibližně 0,05 až 5% suspendujícího činidla v izotonickém médiu. Tyto farmaceutické přípravky mohou obsahovat například přibližně 25 až přibližně 90% účinné složky v kombinaci s nosičem, obvykleji mezi přibližně 5% až 60% hmotnostními.

Účinné dávkování použité účinné složky kolísá v závislosti na konkrétní použité sloučenině, způsobu podávání a závažnosti léčeného chorobného stavu. Ale obecně jsou dosaženy uspokojivé výsledky, když jsou sloučeniny podle vynálezu podávány v denní dávce přibližně 0,5 až přibližně 500 mg/kg tělesné hmotnosti zvířete, výhodně podávané v rozdělených dávkách dvakrát až čtyřikrát denně nebo ve formě s prodlouženým uvolňováním. Pro většinu větších savců je celková denní dávka přibližně 1 až 100 mg, výhodně přibližně 2 až 80 mg. Léková forma vhodná pro vnitřní použití obsahuje přibližně 0,5 až 500 mg aktivní φ« ··« · • »« ·

ΦΦ φ · φ ····· • · · · · · · 4 • ···· Φ φ φ Φ ·

Φ Φ Φ φ φ · Φ φ Φ Φ

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦ ΦΦ ···· sloučeniny v dokonalé směsi s pevným nebo tekutým farmaceuticky přijatelným nosičem. Tento dávkový režim může být upraven tak, aby byla zajištěna optimální terapeutická odpověď. Například denně může být podáváno několik rozdělených dávek nebo dávka může být proporcionálně redukována dle potřeb terapeutické situace.

Tyto účinné sloučeniny mohou být podávány perorálně, a také intravenózně, intramuskulárně nebo subkutánně. Pevné nosiče jsou škrob, laktóza, fosfát vápenatý, mikrokrystalícká celulóza, sacharóza a kaolin, zatímco tekuté nosiče jsou sterilní voda, polyethylenglykoly, neiontové surfaktanty a jedlé oleje, jako je například kukuřičný, arašídový a sezamový olej, jak odpovídá povaze účinné složky a konkrétní požadované formě podávání. Výhodně mohou být zahrnuta adjuvans obvykle používaná pro přípravu farmaceutických přípravků, jako jsou například aromatizační činidla, barviva, konzervační činidla a antioxidanty, například, vitamin E, askorbová kyselina, BHT a BHA.

Výhodné farmaceutické přípravky, co se týče snadnosti přípravy a podávání, jsou pevné přípravky, konkrétně tablety a tobolky plněné pevnou látkou nebo tobolky plněné tekutinou. Je výhodné perorální podávání sloučeniny.

Tyto aktivní sloučeniny mohou být také podávány parenterálně nebo intraperitoneálnš. Roztoky nebo suspenze těchto aktivních sloučenin jako volných baží nebo farmakologicky přijatelných solí mohou být připraveny ve vodě vhodně smíchané se surfaktantem, jako je například hydroxypropylcelulóza. Mohou být také připraveny disperze v glycerolu, tekutině, polyethylenglykolech a jejich směsí v olejích. V obvyklých podmínkách skladování a použití obsahují tyto přípravky konzervační činidla, aby se zabránilo růstu mikroorganizmů.

4···

4« 4444

44

4 4 ' 4 · 44· 44 4

4444 4444 4

444 4444 444

444 44 44 44 4· 4444

Farmaceutické formy vhodné pro injekční použití zahrnují sterilní vodné roztoky nebo disperze a sterilní prášky pro nepředvídanou přípravu sterilních roztoků nebo disperzí pro injekci. Ve všech případech musí být formy sterilní a musí být tak tekuté, aby bylo snadné použít je v injekční stříkačce. Ve výrobních podmínkách a při skladování musí být stabilní a musí být chráněny proti kontaminačnímu působení mikroorganismů, jako jsou například bakterie a plísně. Nosič může být rozpouštědlo nebo dispergační médium obsahující například vodu, ethanol (např. glycerol, propylenglykol a tekutý polyethylenglykol), jejich vhodné směsi a rostlinné oleje.

Pro porozumění tomuto vynálezu následují neomezující příklady.

Příklady provedení vynálezu

Příklad 1

5' - (3-chlorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' -[3H] indol] -2' (1Ή) thion

Spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' - (1Ή) -on

Roztok 25 g (0,19 mol) oxindolu v 800 ml bezvodého tetrahydrofuranu byl ochlazen na -20°C, poté bylo pomalu přidáno 152 ml (0,38 mol) 2,5M n-butyllithia v hexanu, pak následovalo 51 ml (0,38 mol) N,N,Ν',N'-tetramethylethylendiaminu. Po 15 minutách bylo pomalu přidáno 174 g (0,54 mol)

1,5-dijodpentanu a směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Po míchání po dobu 16 hodin byl přidán 1 1 saturovaného vodného roztoku chloridu amonného a 1 1 EtOAc. Po 15 minutách byly vrstvy odděleny a vodná fáze byla dvakrát φφ φφφφ φφ · • · φ • φ φ • φ φ • φ φ φ φφ φφ • Φ φφ φ φ φ φ φ φ φ φφφ φφφ φφ φφφφ extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly extrahovány IN kyselinou chlorovodíkovou, poté promyty 500 ml solanky, usušeny (MgSO₄) a koncentrovány za vzniku oleje. Olej byl triturován 200 ml hexanu a 20 ml benzenu. Precipitát byl sebrán a usušen ve vakuu za vzniku 26,3 g (69,6 %) sloučeniny z názvu jako bezbarvých krystalů: tt 110-114°C, ¹H NMR (DMSO-d₆) 8 1,67 (m, 10H) , 6,84 (d, 1H, J = 8 Hz) 6,94 (t, 1H,

J = 8 Hz) , 7,17 (t, 1H, J

10,3 (S, 1H).

Hz) ,

7,44 (d, 1H, J = 8 Hz),

5'-bromspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)-on

K roztoku 17,6 g (0,09 mol) spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'(1Ή)-onu ve 300 ml kyseliny octové bylo za míchání přidáno 8,0 g (0,1 mol) acetátu sodného a 14,6 g (0,091 mol) bromu. Po 30 minutách při teplotě místnosti byla reakční směs rozdělena mezi vodu a EtOAc. Vodná fáze byla dvakrát extrahována s EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty vodou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány a zbytek byl triturován hexanem. Precipitát byl sebrán a usušen ve vakuu za vzniku 16,5 g (67 %) sloučeniny z názvu jako špinavé bílých krystalů: tt 196-199 °C, ’Ή NMR (DMSO-d₆) 8 1,62 (m, 10H) , 6,8 (d, 1H, J = 6,8 Hz), 7,36 (d, 1H, J = 8,2, 1,8 Hz), 7,58 (dd, 1H, J = 8,2, 1,8 Hz), 10,44 (S, 1H).

5-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-on

Roztok 0,32 g (1,14 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)-onu a 0,14 g (0,12 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) v 6 ml dimethoxyethanu byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 20 minut. K této směsi bylo poté přidáno 0,21 g (1,37 mmol) 3-chlorfenylboronové kyseliny a 0,36 g (3,4 mmol) uhličitanu sodného ve 3 ml vody. Roztok byl přiveden k varu pod zpětným chladičem po dobu 6 hodin, a poté ochlazen na teplotu místnosti, nalit do vody a extrahován 3x byly promyty vodou,

Zbytek byl purifikován •4 4···

4 · • · • ·

4 4 ·· • · 4 · • 4 · >444 4

4 «4 4444 • 99·· ·

• * • · ♦ • · · • 4« ··

EtOAc. Spojené organické extrakty solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány.

chromatografií na koloně (SiO₂, směs ethylacetátu a hexanu 1:3) za vzniku 0,28 g (0,89 mmol, 80 %) sloučeniny z názvu jako žluté pevné látky: tt. 164-165 °C, ¹H NMR (CDC13) δ 1,60-1,78 (m, 6H) , 1,81-1,99 (m, 4H) , 7,04 (d, J = 8,1 Hz, IH) , 7,227,47 (m, 4H) , 7,53 (s, IH) , 7,61 (s, IH) , 9,28 (br s, IH) , ¹³CNMR (CDC13) 20,17, 24,12, 31,92 (t), 47,22 (s), 109,21, 121,94, 124,06, 125,50, 125,79, 125, 97, 126, 38, 128,96 (d) , 132,88,

133,59, 135,60, 139,14, 142,17, 182,89 (s), MS (El) m/z 310,

312 [M-H], Anal. (Ci₉Hi₈C1NO) C, Η, N.

K roztoku 0,63 g (2,0 mmol) S^-íS-chlorfenylJspiro[cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή)-onu ve 20 ml suchého xylenu v dusíkové atmosféře bylo přidáno 0,8 9 g (2,2 mmol)

2,4-bis(4-methoxyfenyl)-1,3-dithia-2,4-difosfetan-2,4-disulfidu a směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 72 hodinách byla směs evaporována a zbytek byl podroben chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku pevné látky, která byla rekrystalizována ze směsi diisopropyletheru a hexanu za vzniku 0,17 g (0,51 mmol, 26 %) sloučeniny z názvu jako žlutých krystalů: tt. 223-227 C, (CDC1₃) δ 1,53-1, 66 (m, 8H), 1,83-2,05 (m, 4H) , 2,07-2,17 (m, 2H) , 7,11 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,31-7,53 (m,

3H), 7,54 (s, IH), 7,86 (S, IH) , 9,93 (s, IH, br) : MS ((+APCI) m/z 328 [M+H]⁺.

Příklad 2

3-(1',2'-dihydro-2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' yl)benzonitril

K roztoku 1,00 g (3,57 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan-l,3'[3H]indol]-2'(l'H)-onu ve 20 ml dímethoxyethanu bylo přidáno (0,20 g (O,Í7 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia. Po 15 minutách byl přidán 1,00 g (6,93 mmol) 3-formylfenylboronové kyseliny, a pak následovalo 2,90 g (21 mmol) uhličitanu draselného v 10 ml vody. Po 20 hodinách ve varu pod zpětným chladičem byla směs ochlazena nalitím do vody a extrahována 3x EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty saturovanou solankou, usušeny (MgSOU a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SÍO2, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku sloučeniny 0,66 g (2,15 mmol, 60 %)

z názvu jako bílé	pevné látky,	^ΧΗ NMR (CDCI3)	Ó 1,65-1,85	(m,
6H), 1,86-2,08 (m,	4H), 7,22 (d	, 1H, J = 8 Hz)	, 7,48 (dd,	1H,
J = 8, 2 Hz) , 7,61	(t, 1H, J =	8 Hz) , 7,66 (d,	1H, J = 2	Hz) ,
7,81-7,88 (m, 2H),	8,06 (t, 1H,	J = 2 Hz) , 8,	30 (s, 1H,	br) ,

MS ((+)ESI) m/z 306 [M+H]⁺.

3-(1',2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'yl)benzaldehyd-oxim

K roztoku 0,59 g (1,95 mmol) 3-(l^ř,2^,-dihydro-2^řoxospirocyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl)benzaldehydu v 10 ml směsi EtOH a H₂O (8:2) bylo přidáno 0,17 g (2,5 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu a 0,20 g (2,5 mmol) acetátu sodného. Po 20 minutách byla směs koncentrována, byla přidána voda a produkt byl extrahován 2x EtOAc. Spojené organické vrstvy byly promyty saturovaným roztokem hydrouhličitanu sodného, vodou, saturovanou solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány za vzniku 0,63 g (1,95 mmol, 100 %) oximu z názvu, který byl použit bez další purifikace. ¹H NMR (CDCI3) δ 1,601.84 (m, 6H), 1,85-2,00 (m, 4H), 6,86 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,36 (dd, 1H, J = 8, 2 Hz), 7,43-7,50 (m, 1H) , 7,57-7,67 (m, 2H) ,

7.85 (s, 1H, br), 8,25 (s, 1H), 8,68 (s, 1H, br) , 8,94 (s, 1H, br), MS ((-)ESI) m/z 319 [M-H]’.

• ·· ·

3-(1', 2' -dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl) benzonitril

Roztok 0,48 g (1,49 mmol) 3-(1',2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklo-hexan-1,3[3H]indol-5'-yl)benzaldehyd-oximu v 10 ml chloroformu byl podroben působení 0,38 g (3,50 mmol) oxidu seleničitého a byl zahříván k varu pod zpětným chladičem. Po 16 hodinách byla směs koncentrována a zbytek purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu 1:4) a produkt rekrystalizován ze směsi EtOAc a hexanu za vzniku 0,161 g (0,53 mmol, 35 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné

látky: tt	. 190-191 °C, ^XH	NMR	(CDCls) δ 1,59-1,87	(m,	6H) ,
1,88-2,09	(m, 4H) , 7,03 (d,	1H,	J = 8 Hz) , 7,42 (dd	, 1H,	J =
8, 2 Hz),	7,54 (t, 1H, J =	8 Hz)	, 7,58-7,65 (m, 2H) ,	7,78	(dt,
1H, J = 7,	2 Hz), 7,83 (m,	1H) ,	8,26 (s, 1H, br) , MS	(( + )	ESI)

m/z 303 [M+H]⁺.

Reakce 3- (1',2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'[3H] indol-5'-yl)benzonitrilu a Lawessonova činidla podle postupu v příkladu 1 poskytla sloučeninu z názvu: tt. >231 °C (rozklad), Y NMR (DMSO-d₆) δ 1,38-1,55 (m, 3H) , 1,82-1,99 (m,

7H), 7,16 (d, 1H, J. = 8,1 Hz), 7,63-7,69 (m, 2H) , 7,80 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 8,01 (d, 1H, J = 8 Hz) a 12,76 (s, 1H) , MS ( (-)-APCI) m/z 317 [M-H]'.

Příklad 3

4-(1', 2' -dihydro-2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' yl)-2-thiofenkarbonitril

3-(trimethylstannyl)-2-thiofenkarbonitril

Roztok 0,8 g (4,3 mmol) 3-brom-2-thiofenkarbonitrilu, 0,25 g (0,2 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a 1,4 g (4,3 mmol) hexamethyldicínu v 5 ml dimethoxyethanu byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 14 hodin, a • · · · • ·· · • · • ·

poté ochlazena na teplotu místnosti. Reakční směs byla absorbována na florisil a purifikována chromatografií na koloně (SiO₂, směs methylenchloridu a hexanu 1:9) za vzniku 1,04 g (3,8 mmol, 90 %) sloučeniny z názvu jako čirého viskózního oleje: ^XH NMR (CDC1₃) δ 0,35 (s, 9H) , 7,56 (d, J =

0,9 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 0,9 Hz, 1H).

4-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2thiofenkarbonitril

Roztok 0,53 g (1,9 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2' (1'H)-onu, 0,1 g (0,14 mmol) dichlorbis(trifenylfosfin) palladia (II) a 0,14 g (0,47 mmol) trifenylarsinu v 8 ml dimethoxyethanu byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 20 minut. K této směsi bylo poté přidáno 0,64 g (2,35 mmol)

3-(trimethylstannyl)-2-thiofenkarbonitrilu. Roztok byl přiveden k varu pod zpětným chladičem po dobu 32 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byla reakční směs absorbována na florisil a purifikována chromatografií na koloně (SiO₂, směs ethylacetátu a hexanu 2:3) za vzniku 0,43 g (1,39 mmol, 74 %) sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (CDCls) δ 1,56-2,1 (m, 10H) , 6,97 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 7,39 (dd, J - 8,03, 1, 45 Hz, 1H) , 7,57 (d, J = 1,45 Hz, 1H) , 7,59 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 1,4 Hz, 1H) , 8,32 (br s, 1H) , ¹³C-NMR (CDC1₃) δ 22,07, 26, 56, 34,4 (t) , 48,13 (s) , 110,18 (d), 111,3, 114,75 (s), 122,92, 126,76 (d), 128,44 (s), 137,55 (d) , 138,11, 142,71, 144,49, 182,13 (s), MS (El) m/z 307 [M-H]“ Anal. (Ci₈Hi₆N₂OS) , C, Η, N.

Roztok 1,0 g (3,2 mmol) 4-(l,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2-thiofenkarbonitrilu a 1,3 g (3,2 mmol) Lawessonova činidla ve 20 ml o-xylenu byl zahříván po dobu dvě a půl hodiny. Reakční směs byla promyta destilovanou vodou (5x 100 ml), usušena nad MgSO₄ a evaporována. Produkt byl purifikován chromatografií na koloně (SÍO2, směs EtOAc a hexanu, 1:5) za vzniku 0,2 g (20 %) sloučeniny z názvu jako bledě žluté pevné látky: tt. 230232 °C, . ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 12,72 (s, 1H) , 8,52 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,36 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,00 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,69 (dd, 1H, J = 6,4, 1,8 Hz), 7,10 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 1,98-1,77 (m, 7H) , 1, 43 = 1,33 (m, 3H), MS (El) M⁺ @ m/z 324.

Příklad 4

3-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)5-fluorbenzonitril

K roztoku 11 g (0,04 mol) 5'-bromspiro[cyklohexan-l,3'[3H] indol]-2'- (1Ή)-onu ve 200 ml suchého tetrahydrofuranu bylo přidáno 1,6 g (0,04 mol) hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji). Po 30 minutách míchání při teplotě místnosti byla směs ochlazena na -78 °C a pomalu bylo přidáno 23,2 ml (0,04 mol) 1,7M butyllithia v hexanu. Po 30 minutách bylo přidáno 25 ml (0,11 mol) diisopropylborátu a směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Po 2 hodinách bylo přidáno 500 ml IN kyseliny chlorovodíkové a 500 ml ethylacetátu. Vodná fáze byla extrahována ethylacetátem, a poté byly spojené organické vrstvy promyty vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl triturován hexanem a precipitát byl usušen ve vakuu za vzniku 8,3 g (86 %) (2'-oxo2,3-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' -yl)boronové kyseliny jako špinavě bílé pevné látky, která byla použita bez další purifikace. Vzorek, který byl dále triturován ethylacetátem, měl následující vlastnosti: tt. 255-260°C rozklad, ³H NMR (DMSO-d₆) δ 1,50 (m, 2H) , 1,73 (m, 8H) , 6,82 (d, 1H, J = 7,72 Hz), 7,66 (d, 1H, J = 7,72 Hz) 7,91 (s, 3H, br), 10,36 (s, 1H), MS ((-)ESI) m/z 244 [M-H].

• · · · • · • · • · · »

3-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-5fluorbenzonitril

K	roztoku	3,5	-dibromfluorbenzenu	ve 100 ml diethyletheru
v -78	°C bylo	PO	kapkách přidáno	8 ml (20 mmol)	2,5 M
n-butyllithia.	Po	30 minutách byla	směs podrobena	působení
20 ml	DMF v	10	ml diethyletheru	a pokračovalo	míchání

v -78 °C. Po 30 minutách byla směs zastavena naředěnou vodnou HCl, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována EtOAc. Organické vrstvy byly spojeny, promyty vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány za vzniku 4,0 g (19,7 mmol, 100 %) 3-fluor-5-brombenzaldehydu jako oleje: ¹H NMR (CDCI3) δ inter alia 7,50-7,53 (m, 2H), 7,82 (s, ÍH) a 9,93 (m, ÍH) , MS (El) m/z 202, 204 [M⁺] .

K roztoku 4,0 g (19,7 mmol) poslední uvedené sloučeniny v 50 ml směsi ethanolu a vody (8:2), bylo přidáno 1,72 g (21 mmol) acetátu sodného a 1,45 g (21 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu a směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 30 minutách byla směs ochlazena, evaporována a zbytek byl rozdělen mezi vodu a EtOAc. Vodná vrstva byla znovu extrahována EtOAc a spojené organické vrstvy byly promyty vodou, saturovaným roztokem hydrouhličitanu sodného, solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány za vzniku 3,76 g (17,24 mmol, 87 %) 3-fluor-5-brombenzaldehyd-oximu, který byl použit bez další purifikace: ¹H NMR (CDC1₃) 6 7,24-7,27 (m, 2H) , 7,50 (s,

ÍH), 7,68 (s, ÍH) a 8,04 (s, ÍH), MS (El) m/z 217 [M⁺] .

3,76 g (17,24 mmol) výše uvedeného oximu a 370 mg acetátu měďnatého bylo rozpuštěno ve 100 ml acetonitrilu v dusíkové atmosféře a bylo zahříváno k varu pod zpětným chladičem. Po 5 hodinách byla směs evaporována, zbytek přenesen do EtOAc, promýt IN kyselinou sírovou, vodou, solankou, usušen (MgSO₄) a evaporován za vzniku 3,08 g (15,39 mmol, 89 %) 3-fluor-5brombenzonitrilu, který byl použit bez další purifikace.

• ·· · • · · ·

3,0 g (15 mmol) výše uvedeného bromidu a 0,86 g (0,75 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) byly rozpuštěny ve 130 ml dimethoxyethanu v dusíkové atmosféře. Po 15 minutách bylo přidáno 2,82 g (11,5 mmol) (2'-oxo-2,3dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny a 3,1 g (29,3 mmol) uhličitanu sodného rozpuštěného ve 40 ml vody a směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 8 hodinách byla směs ochlazena, nalita do vody a 3x extrahována EtOAc. Spojené organické vrstvy byly poté promyty vodou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl pak purifikován chromatografií na koloně (směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) a produkt byl rekrystalizován z methanolu za vzniku 1,78 g (5,55 mmol, 48 %) 3-(1,2-dihydro-2oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-5-fluorbenzonitrilu: tt 199-205 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 1, 64-2,03 (m, 10H) , 7,03 (d,

1H, J = 8 Hz), 7,31 (dt, 1H, J = 7,7 a 1,6 Hz), 7,41 (dd, 1H,

J = 8, 1,7 Hz), 7,49 (dt, 1H, J = 9,6, 2 Hz), 7,58 (d, 1H, J =

Hz), 7,64 (s, 1H) a 8,37 (s, 1H) : MS (El) m/z 320 [M⁺] .

K roztoku 0,32 g (1,0 mmol) 3-(1,2-dihydro-2oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-5-fluorbenzonitrilu v 10 ml xylenu v dusíkové atmosféře bylo přidáno 0,89 g (2,22 mmol) Lawessonova činidla a reakce byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 4 hodinách byla směs ochlazena, evaporována a zbytek byl podroben chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,143 g (0,42 mmol, 42 %) jako bílé pevné látky: tt. 236-250 °C, ¹H NMR (CDCI3) δ 1,54-1,66 (m, 3H) , 1,86-2,18 (m, 7H) , 7,16 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,33-7,36 (m, 1H), 7,46-7,52 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,85 (d, 1H, J = 1 Hz), 10,05 (s, 1H) , MS (( + )-APCI) m/z 337 [M+H]⁺.

• ·· · « ·

Příklad 5

4-methyl-5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-5 yl)-2-thiofenthioamid

Směs 2,45 g (10 mmol) 2'-oxo-2',3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny, 2,4 g (12 mmol) 2-brom-5-kyano-3-methylthiofenu, 4 g (29 mmol) draslíku a 0,6 g (0,5 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 130 ml směsi dimethoxyethan:voda:ethanol (10:2:1) byla zahřívána na 80°C po dobu 16 hodin, a poté byla nalita do 1 1 vody a extrahována EtOAc. Organická vrstva byla promyta solankou, usušena (MgSO₄) a koncentrována. Hrubý produkt byl podroben chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, 1:1) za vzniku 0,9 g (28 %) sloučeniny z názvu: tt. 200-203°C, ¹HNMR (DMSO-d₆) δ 1,63 (m, 8H) , 1,87 (m, 2H) , 2,27 (s, 3H) , 6,95 (d, 1H, J = 8,13 Hz), 7,34 (dd, 1H, J = 8,13,

1,98 Hz) 7,54 (d, 1H, J = 1,98 Hz), 7,82 (S, 1H) , 10,50 (S,

1H), MS ((+)APCI) m/z 323 [M+H]⁺.

Roztok 0,61 g (1,9 mmol) 4-methyl-5-[2'-oxo-2' 3'dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' -yl)-2-thiofenkarbonitrilu a 0,92 g (2,1 mmol) pentasulfidfosforu v 17 ml dioxanu byla zahřívána na 85 °C po dobu 30 minut. Reakční směs byla nalita do destilované vody a promyta vodným NaHCO₃, destilovanou vodou, usušena nad MgSO₄ a evaporována do sucha. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (2,5% směs MeOH a CH₂C1₂) za vzniku 0,05 g (8 %) sloučeniny z názvu jako oranžovohnědé pevné látky: tt. 244-249 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 12,75 (s, 1H), 9,54 (s, 1H) , 9,34 (s, 1H) , 7,76 (d, 1H, J =

1,5 Hz), 7,58 (s, 1H), 7,45 (dd, 1H, J = 6,4, 1,8 Hz), 7,14 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 2,26 (s, 3H) , 1,98-1,89 (m, 7H) , 1,831,81 (m, 3H), MS ((+)APCI) [M+H]⁺ @ m/z 373.

• ·· · ·· ··♦·

Příklad 6

Farmakologie

Progestační aktivita sloučenin podle předkládaného vynálezu byl vyhodnocena v testech in vitro a in vivo popsaných níže. Účinnost in vitro leží v rozmezí 0,01 nM až 10,000 nM a účinnost in vivo leží v rozmezí 1 gg/kg až 30 mg/kg.

A. In vitro biologie

Biologie in vitro byla vyšetřována (1) kompetitivní vazbou radioligandu: s použitím A-formy humánního receptoru pro progesteron s progesteronem jako radioligandem, (2) testem kotransfekce (společné transfekce) , který poskytuje funkční aktivitu vyjádřenou jako hodnoty agonisty EC₅₀ a antagonisty IC₅₀, (3) proliferace T47D buněk, což je další funkční test, který také poskytuje data o agonistech a antagonistch a (4) test T47D buněk s alkalickou fosfatázou, který je další funkční test, který také poskytuje data agonistech a antagonistech.

1. Test vazby hPR - Tento test je prováděn podle autorů: Pathirana, C., Stein, R.B., Berger, T.S., Fenical, W., Ianiro, T., Mats, D.E., Torres, A., Glodman, M.E., Nonteroidal human progesterone receptors modulators from the marine alga cymoplia barbata, J. Steroid Biochem. Mol. Biol., 41, 733-738, 1992.

2. PRE-luciferázový test v buňkách CV -1

Cílem tohoto testu je zjištění progestační nebo antiprogestační účinnosti sloučenin, test je založen na účinku • ft ftftftft ftft · ♦ · ft • · ftftft • ftftftft · ftftft ftftftft • ftft ftft ftft ·· • ft ftft • · · · ftft ♦ • ftft • ftft • · ftftftft sloučenin na PRE-luciferázou reportérovou aktivitu CV -1 buněk co-transfekovaných s plazmidy s humánním PR a PRE-luciferázou. Materiál a metody v testu použité jsou uvedeny dále.

a. Růstové médium: DMEM (BioWhittaker) obsahující 10% (objem/objem) fetální bovinní sérum (inaktivované teplem), 0,1 mM MEM neesenciální aminokyseliny, 100 U/ml penicilín, 100 mg/ml streptomycin a 2 mM GlutaMax (GIBCO, BRL). Experimentální médium: DMEM (BioWhittaker) , bez fenolové červeni, obsahující 10% (objem/objem) fetální bovinní sérum ošetřené přes aktivní uhlí (inaktivované teplem), 0,1 mM MEM neesenciální aminokyseliny, 100 U/ml penicilín, 100 mg/ml streptomycin a 2 mM GlutaMax (GIBCO, BRL).

elektroporací byly buňky a naneseny na 96 jamkovou

b. Buněčná kultura, transfekce, ošetření a luciferázový test

Zásobní roztok CV -1 buněk je udržován v růstovém médiu.

Ko-transfekce je prováděna s použitím l,2xl0⁷ buněk, 5 mg pLEM plazmidů s hPR-B vloženým do míst Sphl a BamHl, 10 mg pGL3 plazmidů s dvěma PRE v protisměru od luciferázové sekvence a 50 mg sonikované DNA telecího thymu jako DNA nosič ve 250 ml. Elektroporace byla prováděna při 260 Val 000 mF v přístroji Biorad Gen Pulser II. Po resuspendovány v růstovém médiu destičku v množství 40 000 buněk/jamku v 200 μΐ. Po inkubaci přes noc bylo médium zaměněno na experimentální médium. Buňky poté byly podrobeny působení referenčních nebo testovaných sloučenin v experimentálním médiu. Antiprogestační aktivity sloučenin byla testována v přítomnosti 3 nM progesteronu. 24 hodin po ošetření bylo médium odstraněno, buňky byly třikrát promyty s D-PBS (GIBCO, BRL). Do každé jamky bylo přidáno 50 μΐ pufru pro lýzi buněk (Promega, Madison, WI) a destičky byly třepány po dobu 15 minut na třepačce mikrotitračních destiček (Lab Line Instrument, lne.).

·· ····

Luciferázová aktivita byla měřena s použitím luciferázové reagencie od firmy Promega.

c. Analýza výsledků:

Každé ošetření spočívalo v alespoň 4 opakováních. Logaritmicky transformovaná data byla použita pro analýzu rozptylu a vytvoření nelineární křivky závislosti reakce na dávce jak pro agonistu tak pro antagonistu. Huberovy váhy byly užity k potlačení vlivu extrémních hodnot. Hodnoty EC₅₀ nebo IC₅₀ byly vypočteny z transformovaných hodnot. Byl použit JMP software (SAS Institute, lne.) jak pro jednofaktorovou analýzu rozptylu, tak pro analýzy nelineární reakce.

d. Referenční sloučeniny:

Progesteron a trimegeston byly referenční progestiny a RU486 byl referenční antiprogestin. Všechny referenční sloučeniny byly použity pro stanovení křivek závislosti reakce na dávce v plném rozsahu a byly vypočteny hodnoty EC50 nebo IC50.

Tabulka 1

Zjištěné EC50, standardní chyba (SE) a 95% intervaly

spolehlivosti jednotlivých	(Cl) studií	pro refí	irenční	progestiny	ze t
Sloučenina	Pokus	EC50 (nM)	SE	95% spodní	Cl horní
Progesteron	1	0, 616	0,026	0,509	0,746
	2	0,402	0,019	0,323	0,501
	3	0,486	0,028	0,371	0,637
Trimegeston	1	0,0075	0,0002	0,0066	0,0085
	2	0,0081	0,0003	0,0070	0,0094
	3	0,0067	0,0003	0,0055	0,0082

«4 « «4 444 4 44 ··

Tabulka. 2

Zjištěné IC₅o, standardní chyba (SE) a 95% intervaly spolehlivosti (Cl) pro antiprogestin RU486 ze tří jednotlivých studií

Sloučenina	Pokus	IC50 (nM)	SE	95% Cl
spodní	horní
RU486	1	0,028	0,002	0,019	0, 042
	2	0,037	0,002	0,029	0,048
	3	0,019	0,001	0, 013	0,027
Progestační	aktivita:	sloučeniny	, které významně	(p<0,05)
zvyšují PRE-	luciferázovou aktivitu ve	srovnání s	vehikulem

ošetřenou kontrolou, jsou považovány za aktivní.

Antiprogestační aktivita: sloučeniny, které významně (p<0,05) snižují PRE-luciferázovou aktivitu indukovanou 3 nM progesteronem.

EC50: koncentrace sloučeniny, která dává polovinu maximálního zvýšení PRE-luciferázové aktivity (standard-nM) s SE.

IC50: koncentrace sloučeniny, která dává polovinu maximálního snížení PRE-luciferázové aktivity indukované 3 nM progesteronem (standard-nM) s SE.

3. Test proliferace T47D buněk

Cílem tohoto testu je zjištění progestační a antiprogestační účinnosti při použití buněčného proliferačního testu T47D buněk. Měří se účinek sloučeniny na syntézu DNA v buňkách T47D. Materiál a metody v testu použité jsou uvedeny dále.

a. Růstové médium: DMEM:F12 (1:1) (GIBCO, BRL) obsahující 10% (objem/objem) fetální bovinní sérum (které nebylo inaktivované teplem), 100 U/ml penicilín, 100 mg/ml streptomycin a mM GlutaMax (GIBCO, BRL).

9 9 *

• · • 9

9999 • · · · · ·

9 99 • ·· » · · • · < • 9 9 9

9 9 ·

9

b. Ošetřovací médium: minimální základní médium - Minimum Essential Medium (MEM) (kat. č. 51200-038 GIBCO, BRL) bez fenolové červeni, obsahující 0,5% fetální bovinní sérum ošetřené přes aktivní uhlí, 100 U/ml penicilin, 200 mg/ml streptomycin a 2 mM GlutaMax (GIBCO, BRL) .

c. Buněčná kultura

Zásobní roztok T47 D buněk je udržován v růstovém médium. Pro test inkorporace BrdU byly buňky naneseny na 96 jamkové destičky (Falcon, Becton Dickinson Labware) v množství 10 000 buněk/jamku v růstovém médiu. Po inkubaci přes noc bylo médium zaměněno na ošetřovací médium a buňky byly pěstovány dalších 24 hodin před ošetřením. Zásobní roztoky sloučenin byly rozpuštěny v příslušném vehikulu (100% ethanol nebo 50% ethanol/50% DMSO), pak naředšny v ošetřovacím médiu a přidány k buňkám. Referenční sloučeniny progestinu a antiprogestinu byly použity pro křivky závislosti reakce na plné dávce. Konečná koncentrace vehikula byla 0,1%. V kontrolních jamkách dostaly buňky pouze vehikulum. Antiprogestiny byly testovány v přítomnosti 0,03 nM trimegestonu, referenčního progestinového agonisty. 24 hodin po ošetření bylo médium odstraněno a buňky byly značeny s 10 mM BrdU (Amersham Life Science, Arlington Heights, IL) v ošetřovacím médiu po dobu 4 hodin.

d. Test proliferace buněk

Na konci značení BrdU bylo médium odstraněno a BrdU inkorporace byla měřena s použitím soupravy ELISA pro měření buněčné proliferace (kat. č. RPN 250, Amersham Life Science) podle instrukcí výrobce. Stručně, buňky byly fixovány v ethanolu obsahujícím fixativ po dobu 30 minut, pak následovala inkubace v blokovacím pufru po dobu 30 minut, aby se snížilo pozadí. Do jamek byla přidána protilátka anti-BrdU značená peroxidázou a inkubována po dobu 60 minut. Buňky byly ·· ··«* • ·» ·

třikrát promyty s PBS a inkubovány se substrátem, 3,3'5,5'tetramethylbenzidinem (TMB), po dobu 10-20 minut v závislosti na účinnosti testované sloučeniny. Pak bylo do každé jamky přidáno 25 μΐ 1M kyseliny sírové k zastavení barevné reakce a byla odečítána optická denzita v přístroji na odečítání destiček ve 450 nm během 5 minut.

e. Analýza výsledků:

Data transformovaná na druhou odmocninu byla použita pro analýzu rozptylu a vytvoření nelineární křivky závislosti reakce na dávce jak pro agonistu, tak pro antagonistu. Huberovy váhy byly užity k potlačení vlivu extrémních hodnot. Hodnoty EC₅o nebo IC₅₀ byly vypočteny z transformovaných hodnot. Byl použit JMP software (SAS Institute, lne.) jak pro jednofaktorovou analýzu rozptylu, tak pro analýzy nelineární reakce ve studiích s jednou dávkou i ve studiích závislosti reakce na dávce.

f. Referenční sloučeniny:

Trimegeston a medroxyprogesteronacetát (MPA) byly referenční progestiny a RU486 byl referenční antiprogestin. Všechny referenční sloučeniny byly použity pro stanovení křivek závislosti reakce na dávce v plném rozsahu a byly vypočteny hodnoty EC₅o nebo IC₅o.

Tabulka 3

Zjištěné EC₅₀, standardní chyba (SE) a 95% intervaly spolehlivosti (Cl) pro jednotlivé studie

Sloučenina

Pokus

EC₅o (nM)

95% Cl

Trimegeston

MPA

0,017

0,014

0,019

0,017

0,003 0,001 0,001 0, 001 0,001

SE spodní horní

0,040

0,017

0,024

0,027

0,024

0,007

0,011

0,016

0,013

0,011 ftft ftft ft ft· ftftft· ββ ftft · · ft ftftft ft < · · · ftft • ftft · · · · • ftft ftft ftft ftft *··· «

• · · • · • · • · ftft ftftft*

Tabulka 4

Zjištěné IC50, standardní chyba a 95% interval spolehlivosti pro antiprogestin RU486

Sloučenina	Pokus	ic₅₀ (nM)	SE	95% Cl
spodní	horní
RU486	1	0,011	0,001	0,008	0,014
	2	0, 016	0, 001	0,014	0, 020
	3	0,018	0,001	0,014	0, 022

EC50: koncentrace sloučeniny, která dává polovinu maximálního zvýšení při BrdU inkorporaci s SE,

IC50: koncentrace sloučeniny, která dává polovinu maximálního snížení při BrdU inkorporaci s SE indukované 0,1 trimegestonem

4. Test alkalické fosfatázy v T47D buňkách

Účelem tohoto testu je identifikovat progestiny nebo antiprogestiny zjišťováním účinku sloučeniny na aktivitu alkalické fosfatázy v T47D buňkách. Materiál a metody v testu použité jsou uvedeny dále.

a. Kultivační médium: DMEM:F12 (1:1) (GIBCO, BRL) obsahující 5% (objem/objem) fetální bovinní sérum ošetřené přes aktivní uhlí (které nebylo inaktivované teplem), 100 U/ml penicilin, 100 gg/ml streptomycin a 2 mM GlutaMax (GIBCO, BRL).

b. Testovací pufr pro alkalickou fosfatázu:

I. 0,1 M Tris-HCl, pH 9,8, obsahující 0,2% Triton X-100

II. 0,1 M Tris-HCl, pH 9,8, obsahující 4 mM p-nitrofenylfosfát (Sigma).

c. Buněčná kultura a ošetření:

Zmražené T47D buňky byly rozmraženy ve vodní lázni ve 37°C a naředěný na 280 000 buněk/ml v kultivačním médiu. Do každé • ·· · jamky 96 jamkových destiček (Falcon, Becton Dickinson Labware) bylo přidáno 180 μΐ naředěné buněčné suspenze. Pak bylo do každé jamky přidáno 20 μΐ referenční nebo testované sloučeniny naředěné v kultivačním médiu. Při testování pro progestinové antagonistické aktivity byly přidány referenční antiprogestiny nebo testované sloučeniny v přítomnosti 1 nM progesteronu. Buňky byly inkubovány ve 37°C v 5% C0₂/zvlhčované atmosféře po dobu 24 hodin.

d. Enzymový test alkalické fosfatázy:

Na konci ošetření bylo médium odstraněno z destičky a do každé jamky bylo přidáno 50 μΐ testovacího pufru I. Destičky byly třepány na třepačce pro mikrotitrační destičky po dobu 15 minut, a poté bylo přidáno 150 μΐ testovacího pufru II do každé jamky. Optická denzita byla měřena v intervalech 5 minut po dobu 30 minut v testované vlnové délce 405 nM.

e. Analýza výsledků: Analýza dat závislosti reakce na dávce

Pro referenční a testované sloučeniny byly vytvořeny křivky závislosti reakce na dávce pro dávku (osa X) oproti rychlosti enzymové reakce (sklon) (osa Y). Data transformovaná na druhou odmocninu byla použita pro analýzu rozptylu a vytvoření nelineární křivky závislosti reakce na dávce jak pro agonistů, tak pro antagonistu. Huberovy váhy byly užity k potlačení vlivu extrémních hodnot. Hodnoty EC₅₀ nebo IC₅₀ byly vypočteny z transformovaných hodnot. Byl použit JMP software (SAS Institute, lne.) jak pro jednofaktorovou analýzu rozptylu, tak pro analýzy nelineární reakce ve studiích s jednou dávkou i ve studiích závislosti reakce na dávce.

♦ * • · í . :

4 4 4» • · · 4 4 · 4 4 · · • 4 4 4 4 4 • · 4 · ·

4 4 4 4 4 •4 44 44 ····

f. Referenční sloučeniny:

Progesteron a trimegeston byly referenční progestiny a RU486 byl referenční antiprogestin. Všechny referenční sloučeniny byly použity pro stanovení křivek závislosti reakce na dávce v plném rozsahu a byly vypočteny hodnoty EC₅o nebo

IC₅₀.

Tabulka 5

Zjištěné EC50, standardní chyba (SE) a 95% intervaly spolehlivosti (Cl) pro referenční progestiny ze tří jednotlivých studií

Sloučenina	Pokus	EC₅₀ (nM)	SE	95% Cl
spodní	horní
Progesteron	1	0,839	0,030	0,706	0,996
	2	0, 639	0,006	0,611	0, 669
	3	1,286	0,029	1,158	1, 429
Trimegeston	1	0,084	0,002	0,076	0,091
	2	0,076	0,001	0,072	0, 080
	3	0,160	0,004	0,141	0, 181
Tabulka 6
Zjištěné IC₅₀,	standardní chyba a	95% interval spolehlivosti
pro referenční	antiprogestin RU486	ze tří	jednotlivých studií
Sloučenina	Pokus	ic₅₀ (nM)	SE	95% spodní	Cl horní

RU486 1	0,103	0,002	0,092	0,115
2	0,120	0,001	0,115	0,126
3	0,094	0,007	0,066	0,134
B. In vivo Biologie
Primárním in vivo	testem	je model decidualizace (přeměna
děložní sliznice na	děložní	sliznice	těhotné	samice) u
laboratorního potkana,	který	může být použit pro zjišťování
progestačního působení jak	agonistů,	tak	antagonistu.
Sekundárním in vivo	testem	je model	inhibice	ovulace u

• · to · · to

Í to · to to · • · · · · v ► · · · · · · ·» * · · I • to · • to to » « laboratorního potkana, který je ve vývoji a protokol je tudíž nedostupný.

1. Test decidualizace u laboratorního potkana

Cílem tohoto postupu je vyhodnotit účinek progestinu a antiprogestinu na děložní decidualizaci laboratorního potkana a srovnat relativní účinnost různých testovaných sloučenin. Materiál a metody v testu použité jsou uvedeny dále.

a. Metody: Testované sloučeniny byly rozpuštěny ve 100% ethanolu a smíchány s kukuřičným olejem (vehikulum) . Zásobní roztoky testovaných sloučenin v oleji (Mazola™) byly poté připraveny zahříváním (~80 °C) směsi, aby se odpařil ethanol. Testované sloučeniny pak byly naředěný 100% kukuřičným olejem nebo 10% ethanolem v kukuřičném oleji před ošetřením zvířat. Nebyl zjištěn žádný rozdíl deciduální reakce, když byla srovnána tato dvě vehikula.

b. Zvířata (RACUC protokol č. 5002)

Dospělé samice laboratorního potkana kmene Sprague-Dawley s provedenou ovariektomií (staré ~60 dnů a o hmotnosti 230 g) byly získány od firmy Taconic (Taconic Farms, NY) po chirurgickém výkonu. Ovariektomie byla prováděna alespoň 10 dnů před ošetřením, aby se snížila cirkulace pohlavních steroidů. Zvířat byla chována v cyklu 12 hodin světlo/tma a byla jim podávána standardní potrava pro laboratorní potkany a voda ad libitum.

c. Ošetření

Laboratorní potkani byly zváženi a náhodné rozřazeni do skupin po 4 nebo 5 před ošetřením. Testované sloučeniny v 0,2 ml vehikula byly podávány subkutánní injekcí v týle nebo žaludeční sondou s použitím objemu 0,5 ml. Zvířata byla • · · ·

• 4 *4 • · 4 4

4 ·

4** · 4 • 4 44 4 4 ošetřována jednou denně po dobu sedmi dnů. Pro testování antiprogestinu byly zvířatům podávány testované sloučeniny a dávka progesteronu způsobující EC50 (5,6 mg/kg) během prvních tří dnů ošetření. Po deciduální stimulaci pokračovalo podávání progesteronu zvířatům až do provedení nekropsie čtyři dny pozděj i.

d. Dávkování

Dávky byly připraveny na základě mg/kg průměrné tělesné hmotnosti skupiny. Ve všech studiích byla zahrnuta kontrolní skupina dostávající vehikulum. Určování křivek závislosti reakce na dávce bylo prováděno s použitím dávek s polovičním logaritmickým zvýšením (např. 0,1, 0,3, 1,0, 3,0 mg/kg...).

e. Deciduální indukce

Přibližně 24 hodin po třetí injekci byla indukována decidualizace v jednom děložním rohu poškrábáním antimesometriálního luminálního epitelu tupou jehlou kalibru 21 G. Kontralaterální roh nebyl poškrábán a sloužil jako nestimulovaná kontrola. Přibližně 24 hodin po posledním ošetření byly laboratorní potkani utraceni C0₂ asfyxií a byla určena tělesná hmotnost. Dělohy byly odstraněny a zbaveny tuku. Decidualizovaný (D-roh) a kontrolní (C-roh) děložní roh byly zváženy odděleně.

f. Analýza výsledků:

Nárůst hmotnosti decidualizovaného děložního rohu byl vypočten poměrem D-roh/C-roh a pro maximalizaci normality a homogenity rozptylu byla použita logaritmická transformace. Huberův M-faktor byl použit k potlačení vlivu extrémních hodnot po transformaci jak pro vytvoření křivky závislosti reakce na dávce, tak pro jednofaktorovou analýzu rozptylu. Byl použit JMP software (SAS Institute, lne.) jak pro • · · · · ·· · · · · «· · · · · • · · · · · ♦ » · · • · · « · · · • · · » · « · * · jednofaktorovou analýzu rozptylu, tak pro analýzy nelineární reakce.

. Referenční sloučeniny:

Všechny referenční sloučeniny byly použity pro stanovení křivek závislosti reakce na dávce v plném rozsahu a byly vypočteny hodnoty EC₅₀ pro dané čerstvé hmotnosti dělohy.

Tabulka 7

Zjištěné EC50, standardní chyba (SE) a 95% intervaly spolehlivosti (Cl) pro jednotlivé studie

Sloučenina

EC50

Pokus (mg/kg, s.c.) SE

95% Cl spodní horní

Progesteron	1 2	5,50 6,21	0, 77 1,12	4,21 4,41	7,20 8,76
3-Ketodesogestrel	1	0,11	0,02	0,07	0,16
	2	0,10	0,05	0,11	0,25
	3	0,06	0,03	0,03	0,14
Levonorgestrel	1	0,08	0,03	0,04	0,16
	2	0,12	0,02	0,09	0,17
	3	0,09	0,02	0,06	0,13
	4	0,09	0, 02	0,06	0,14
MPA	1	0,42	0,03	0,29	0,60
	2	0,39	0,05	0,22	0,67
	3	0,39	0,04	0,25	0,61

Tabulka 8

Zjištěné průměrné spolehlivosti pro

EC₅₀, standardní chyba a 95% křivky závislosti reakce na intervaly dávce 3 referenčních sloučenin

Sloučenina	EC₅o (mg/kg, s.c.)	SE	95% Cl
spodní	horní
Progesteron	5,62	0,62	4,55	7,00
3-Ketodesogestrel	0,10	0,02	0,07	0,14
Levonorgestrel	0,10	0,01	0,08	0,12

···· ·· ···· ·» ·· * · * · * *

Tabulka 9

Zjištěné IC₅₀, standardní chyba a 95% interval spolehlivosti pro antiprogestin RU486

IC₅o 95% Cl

Sloučenina Pokus (mg/kg, s.c.)_SE_spodní_horní

RU486 1 0,21 0,07 0,05 0,96

0,14 0,02 0,08 0,27

Koncentrace: koncentrace sloučeniny v testu (standard mg/kg tělesné hmotnosti).

Způsob podávání: způsob,	jakým byla sloučenina	podávána
zvířatům.
Tělesná hmotnost: průměrná (standard kg).	celková tělesná	hmotnost	zvířete
D-roh: čerstvá hmotnost (standard mg).	decidualizovaného	děložního rohu

C-roh: čerstvá hmotnost kontrolního děložního rohu (standard mg)

Deciduální reakce: [(D-C)/C] x 100%.

Progestační aktivita: sloučeniny, které významně (p<0,05) indukují decidualizaci ve srovnání s vehikulem ošetřenou kontrolou, jsou považovány za aktivní.

Antiprogestační aktivita: sloučeniny, které významně (p<0,05) snižují decidualizaci indukovanou progesteronem v EC₅₀.

EC50 pro děložní hmotnost: koncentrace sloučeniny, které dává polovinu maximálního zvýšení deciduální reakce (standard mg/kg).

IC₅o pro děložní hmotnost: koncentrace sloučeniny, která dává polovinu maximálního snížení deciduální reakce indukované progesteronem v EC50 (standard mg/kg).

• · 4 · 4 4 · 4 4 4 4 4 4 44

4 4 44 * 4444 • 4 4 4 4 4 4 4 • «4·· 4444 4

444 44 44 44 4· 4 4 4 4

Tabulka 10

Data representativních sloučenin

	Inhibice
Příklad	Ki/nM	CV -1	ovulace
č.	EC50/nM	ED100 (mg/kg)

5		0,3
3	0,1	0,2
1	0,2	0,8
4	0,06	0,1	0,1

Příklad 7

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5'yl)-lH-pyrol-2-karbonitril

5- (2'-oxo-2',3'-dihydrospiro[cyklopentan-1,3'-[3H]indol]-5'yl-2-kyanopyrol

Roztok 2,0 g (7,5 mmol) 5'-bromspiro[cyklopentan-l,3'[3H] indol]-2' (1Ή)-onu a 430 mg (0,3 mmol) tetrakis(trifenylfosf in) palladia ( 0 ) v 50 ml ethylenglykoldimethyletheru byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 15 minut. K roztoku bylo postupně přidáno 2,1 g (9,7 mmol) l-t-butoxykarbonylpyrol-2boronové kyseliny a 2,4 g (17 mmol) uhličitanu draselného v 10 ml vody. Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 3 hodin a ponechána vychladnout. Reakční směs byla nalita do 50 ml vody a extrahována 3x 50 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 30 ml solanky a usušeny nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován a koncentrován ve vakuu. Krystalizace z 20% směsi ethylacetátu a hexanu poskytla 2,2 g (83 %) terc-butylesteru 2-(1', 2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklopentan-1, 3' -[3H]indol]-5'-yl)-ΙΗ-pyrol-l-karboxylové kyseliny jako bílého prášku, tt 179-180,5 °C. ^XH NMR (DMSO-d₆, 400 MHz) δ 1,30 (s, 9H), 1,75-1,98 (m, 8 Η), 6,16 (dd, 1H, J= 1,8, 3,3 • 4 4 4 · 4

4 4 4 4 4 4 4 ·

					·'» 4	4 4	4 4	4 4	4 · 4 4
					74
Hz) ,	6,22	( 'V	, 1H, J =	3,3,	3,3 Hz), 6,79	(d,	1H,	J =	7,9
Hz) ,	7,08	(dd,	1H, J =	1,8,	7,9 Hz), 7,14 (	'ď ,	1H,	J =	1,5
Hz) ,	7,28	(dd,	J = 1,9,	3,3	Hz), 10,30 (s,	1Η) .	MS	(El)	m/z
352	[M+] .	Anal	. výpočet	pro	C₂iH₂₄N₂O₃: C, 71	,57,	H,	6,86,	N,
7,95	Změřeno:	C, 71,08,	H, 6,	83, N, 7,74.

K roztoku 2,2.g (6,0 mmol) terc-butylesteru 2-(l',2'dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' -yl)-1Hpyrol-l-karboxylové kyseliny ve 25 ml bezvodého THF bylo přidáno 0,63 ml (7,0 mmol) chlorsulfonylisokyanátu v -78 °C. Po 90 minutách bylo přidáno 11 ml (140 mmol) dimethylformamidu a reakce byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Reakční směs byla nalita do 50 ml vody a extrahována 2x 50 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty .50 ml solanky, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (30% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 1,7 g (75 %) terc-butylesteru 5-(2'-oxo2',3'-dihydrospiro[cyklopentan-1,3'-[3H]indol]-5' -yl-2-kyanopyrol-l-karboxylové kyseliny jako bílých krystalů, tt 1679 °C. ³H NMR (DMSO-dg, 400 MHz) δ 1,34 (s, 9H) , 1,75-1,98 (m, 8 Η) , 6,39 (d, 1H, J = 3,7 Hz), 6,84 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,17 (dd, 1H, J = 1,8, 7,9 Hz), 7,28 ('ť , 2 Η) , 10,41 (s, 1H) . MS (ESI) m/z 376 [M-H]. Anal. výpočet pro C22H23N3O3: C, 70,01, H, 6,14, N, 11,13. Změřeno: C, 69,67, H, 6,38, N, 11,04.

g (2,7 mmol) terc-butylesteru 5-(2'-oxo-2',3'-dihydrospiro [cyklopentan-1,3' -[3H]indol]-5' -yl-2-kyanopyrol-l-karboxylové kyseliny byl vložen do baňky s kulatým dnem o objemu 25 ml uzavřené gumovou zátkou vybavenou přívodem dusíku a jehlou umožňující výtok plynu. Byl udržován prudký to.k dusíku, když byla baňka vložena do olejové lázně a zahřívána na 165 °C. Po 20 minutách v této teplotě byla baňka odstraněna z olejové lázně a ponechána vychladnout. Krystalizace z ethyletheru poskytla 600 mg (79 %) sloučeniny z názvu jako ··· <

« ·*· · ·»

Μ « ·· * ♦ * * · • · · · · ·· · * · β · · Φ··Φ ·

9 9 · · « Φ · 4 · »» 9 ·9 9 9 9 9 99 99 9 9 žlutého prášku, tt 285-286 °C. ^XH NMR (DMSO-d₆, 400 MHz) δ 1,75-2,03 (m, 8 Η), 6,60 (dd, 1H, J = 2,4, 3,7 Hz), 6,84 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,94 (dd, 1H, J = 2,4, 3,7 Hz), 7,52 (dd, 1H, J = 1,8, 8,1 Hz), 7,60 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 10,38 (s, 1H) ,

12,45 (s, 1H) . MS (ESI) m/z 276 [M-H]^-. Anal. výpočet pro

C17H15N3O: C, 73, 63, H, 5,45, N, 15,15. Změřeno: C, 73,24, H, 5,34, N, 14,96.

K 0,18 g (0,7 mmol, 1 ekv) 5-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5'-yl)-lH-pyrol-2-karbonitrilu ve 20 ml p-xylenu bylo přidáno 0,14 g (0,36 mmol, 0,5 ekv) Lawessonova činidla a reakce byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Reakce byla ochlazena na teplotu místnosti a adsorbována na silikagel. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (20% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla produkt jako oranžový prášek. Další purifikace HPLC poskytla 0,144 g (70 %) sloučeniny z názvu jako zelené pevné látky, tt 275-276 °C (rozklad) . *Η NMR (d_s-

DMSO,	300	MHz)	δ 1,81-2,16	(m, 8	H), 6,69	(dd, 1H, J = 2,3, 3,7
Hz) ,	6, 98	(dd,	1H, J = 1,8	, 3,1	Hz), 7,04	(d, 1H, J = 8,2 Hz) ,
7,63	(dd,	1H,	J = 1,6, 8	, 2 Hz)	, 7,72 (d, 1H, J = 1,3 Hz),
12,57	(s,	1H)	, 12,65 (s,	1H) .	MS (ESI)	[M-H]’ = 292. Anal.

výpočet pro C₁₇Hi₅N₃S: C, 69,6, H, 5,15, N, 14,32. Změřeno: C, 69, H, 5,31, N, 13,81.

Příklad 8

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)1-(terc-butoxykarbonyl)-pyrol-2-karbonitril

K roztoku 3,4 g (12 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan-1,3'indolin]-2'-onu ve 100 ml 1,2-DME v dusíkové atmosféře bylo přidáno 70 mg (5 mol%) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0). Po 15 minutách bylo postupně přidáno 3,31 g (15,6 mmol, 1,3 ekv) • · · · • » • » 4 ♦

4*4 4

1-tert-butylesteru 2-borono-lH-pyrol-l-karboxylové kyseliny, a roztok 3,83 g (27,6 mmol, 2,3 ekv) K₂CO₃ v 5 ml vody. Roztok byl zahříván na 80 °C po dobu 3 hodin a ponechán vychladnout. Reakční směs byla nalita do 200 ml vody a extrahována 2x 100 ml EtOAc. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 150 ml solanky a usušeny nad MgSO₄. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (za eluce 30% směsí EtOAc a hexanu) za vzniku 3,4 g (76 %) terc-butylesteru 2-(1',2'-dihydro-2'oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-lH-pyrol-l-karboxylové kyseliny jako bílého prášku, tt 177 °C. ¹H NMR (CDC13, (300 MHz) δ 1,38 (s, 9 Η) , 1,59-1,93 (m, 10 Η) , 6,18 (m, 1H) , 6,23 ('ť, 1H, 3 Hz), 6,91 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,21 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,34 (m, 1H), 7,44 (s, 1H), 8,33 (br s, 1H, D2O ex). MS (( + )-APCI) m/z 367 [[M+H]⁺], Anal. výpočet pro C22H₂₆N₂O3: C, 72,11, H, 7,15, N, 7,64. Změřeno: C, 71,7, H, 7,16, N, 7,5.

K roztoku 0,75 g (2 mmol) terc-butylesteru 2-(l',2'~ dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-1Hpyrol-l-karboxylové kyseliny ve 20 ml bezvodého THF bylo v -78 °C přidáno 0,23 ml (2,3 mmol, 1,15 ekv) chlorsulfonylisokyanátu. Po 90 minutách bylo přidáno 3,6 ml (46 mmol, 20 ekv) DMF a reakce byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Reakční směs byla nalita do 50 ml vody a extrahována 2x 50 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 50 ml solanky, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (30% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 0,5 g (63 %) tercbutylesteru 5-(2' -oxo-2',3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-5'-yl)-2-kyanopyrol-l-karboxylové kyseliny jako oleje, který byl krystalizován z acetonu za vzniku bílých krystalů, tt 156 °C. ^XH NMR (d₆-DMSO, 400 MHz) δ 1,32 (s, 9H) , 1,50 (m, 3 Η) , 1,60-1,70 (m, 5 Η) , 1,75-1,85 (m, 2 Η) , 6,38

4 · · t «

4 4 · * «

k 4

(d, IH,	J = 3,7	Hz) ,	6,87 (d,	IH, J = 7,9 Hz), 7,18 (dd, IH, J
= 1,5, 7	,9 Hz) ,	7,27	(d, IH,	J = 3,7	Hz	) , 7,48 (d, IH, J =	1,8
Hz), 10,	42 (bs,	IH) .	MS (El)	m/z 391	(M⁺) . Anal. výpočet	pro
C23H25N3O3	: C, 70	,57,	H, 6,44,	N, 10,	73.	Změřeno: C, 69,82,	H,
6,46, N,	10,43.
K	roztoku	0,7	g (1,8	mmol,	1	ekv) terc-butylesteru

2-kyano-5-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5yl)-ΙΗ-pyrol-l-karboxylové kyseliny v 70 ml toluenu bylo přidáno 0,47 g (1,1 mmol, 0,65 ekv) Lawessonova činidla a reakce byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 1 hodiny. Reakce byla ochlazena na teplotu místnosti, nalita do 100 ml vody a extrahována 2x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 50 ml solanky, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (20-30% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 0,7 g (96 %) sloučeniny z názvu jako žluté pevné látky. ¹H NMR (d6~ DMSO, 500 MHz) δ 1,30-1,98 (m, 19 Η) , 6,45 (d, IH, J = 3,7 Hz), 7,09 (d, IH, J = 7,9 Hz), 7,31-7,34 (m, 2 Η), 7,81 (d, IH, J = 1,4 Hz), 12,74 (s, IH) . MS (ESI) [M-H]' = 406. Anal. výpočet pro C23H25N3O2S: C, 67,79, H, 6,18, N, 10,31. Změřeno: C, 67,86, H, 5,99, N, 10,25.

Příklad 9

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl) l-H-pyrol-2-karbonitril

K roztoku 0,5 g 1,2 mmol, 1 ekv) 5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1, 3-[3H]indol]-5-yl)-1-(terc-butoxykarbonyl)pyrol-2-karbonitrilu v 5 ml THF bylo přidáno 0,25 g (3,6 mmol, 3 ekv) NaOEt v 5 ml EtOH a reakce byla zahřívána na 80°C po dobu 24 hodin. Rozpouštědla byla odstraněna ve vakuu a zbytek • ft • · • ft byl rozdělen mezi 50 ml ethylacetátu a 50 ml vody. Vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována 50 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 50 ml solanky, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (30% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 0,27 g (68 %) sloučeniny z názvu jako žlutého prášku. ¹H NMR (d₆-DMSO, 500 MHz) δ 1,32-1,99 (m, 10 Η), 6,71 (d, 1H, J = 3,7 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 3,7 Hz), 7,09 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,70 (dd, 1H, J = 1,6, 8,4 Hz), 8,05 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 12,67 (s, 1H), 12,73 (s, 1H) . MS (ESI) [M-H]“ = 306. Anal. výpočet pro C18H17N3S: C,

70,33, H, 5,57, N, 13,67. Změřeno: C, 69, 64, H, 5,79, N,

13,04.

Příklad 10

5-(2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-1methylpyrol-2-karbonitril

K roztoku 0,55 g (1,8 mmol, 1 ekv) 5-(2'~ oxospiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-5'-yl)-l-methyl-pyrol-2karbonitrilu v 50 ml toluenu bylo přidáno 0,47 g (1,1 mmol, 0,65 ekv) Lawessonova činidla a reakce byla zahřívána na 80 °C po dobu 1 hodiny. Reakce byla ochlazena na teplotu místnosti, nalita do 100 ml vody a extrahována 2x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 50 ml solanky, usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem poskytla 0,32 g (55 %) produktu jako bílé pevné látky. ³H NMR (d₆-DMSO, 500 MHz) δ 1,36-1,99 (m, 10H) , 3,7 (s,

Η), 6,35 (d, 1H, J = 4,2 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 4,2 Hz), 7,16 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,44 (dd, 1H, J = 1,6, 8,1 Hz), 7,83 (d, 1H, J = 1,6 Hz), 12,75 (s, 1H) . MS (ESI) [M-H] = 320. Anal.

• * » ♦ » «·· · výpočet pro C₁₉Hi₉N₃S : C, 70, 99, H, 5,96, N, 13,07. Změřeno: C, 68,69, H, 5,36, N, 12,27.

Příklad 11

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5-yl)3-thiofenkarbonitril krystalizovat, filtrát byl

5-brom-2-thiofenkarbonitril

Směs 96,0 g (500 mmol) 5-brom-2-thiofenkarboxaldehydu, 111,9 g (500 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu, 500 ml pyridinu a 500 ml ethanolu byla zahřívána v dusíkové atmosféře pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Hrubý produkt byl dvakrát triturován ledovou vodou a získaná pevná látka byla sebrána na filtr. Směs dávky 44,31 g (215 mmol) výše uvedené pevné látky, 4,2 g (21 mmol) monohydrátu acetátu měďnatého v 1,4 1 acetonitrilu byla zahřívána pod zpětným chladičem po dobu tří hodin. Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu. Roztok byl promýt 5% vodnou kyselinou sírovou (2x 30 ml), vodou (2x 30 ml), 20 ml solanky a usušen (MgSCU) . Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v minimálním množství chloroformu (1 1) a ponechán

Získané krystaly byly sebrány na filtr a koncentrován a purifikován chromatografií (silikagel, chloroform) za vzniku 31,5 g (spojeno, 58 %) sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky. IR (film), cm¹ 2200. ^XH NMR (CDC1₃) δ 7,39-7,38 (d, ÍH, J = 4. 1 Hz) , 7,10 (d, ÍH, J = 4,0 Hz), MS (El) m/z 187 (M+, 98 %), 189 (M⁺, 100 %) .

5-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklopentan-1,3-[[3H]indol]-5yl)-3-thiofenkarbonitril byl připraven podle postupu

z příkladu 5 s použitím 5-brom-2-thiofenkarbonitrilu a (2'oxo-2', 3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boro-

nové kyseliny: tt. 225-228°C,	^XH NMR (DMSO-d₆) δ 1,63	(m,	8H) ,
1,90 (m, 2H), 6,91 (d, ÍH, J	= 8,13 Hz), 7,55 (dd,	ÍH,	J =
8,13, 1,76 Hz), 7,60 (d, ÍH,	J = 4,17 Hz), 7,75 (d,	1H,	J =
1,76 Hz), 7,93 (d, 1H, J =	4,17 Hz), 10,51 (s,	1H)	, MS
((+)APCI) m/z 309 [M+H]⁺.

Roztok 0,66 g (2,4 mmol) 5-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklopentan-1,3-[[3H]indol]-5-yl)-3-thiofenkarbonitrilu a 0,97 g (2,4 mmol) 2,4-bis(4-methoxyfenyl)-1,3-dithia-2,4difosfetan-2,4-disulfidu ve 250 ml toluenu byl míchán v 80°C po dobu 2 hodin. Roztok byl koncentrován ve vakuu. Zbytek byl extrahován ethylacetátem, ethylacetátový roztok byl promyt vodou, usušen nad sulfátem hořečnatým a koncentrován. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (silikagel, směs ethylacetátu a hexanu 20/80) za vzniku sloučeniny z názvu, tt. 269-272 °C 0,24 g (32 %) . ^XH NMR (DMSO-d_s) 5 2,09 (m, 8H) , 7,05 (d, J = 8,1 Hz, ÍH), 7,55 (dd, J = 8,1, 1,7 Hz, ÍH) , 7,7 (d, J = 1,7 Hz, ÍH) , 7,95 (d, J = 1,3 Hz, ÍH), 8,49 (d, J = 1,3 Hz, ÍH), 8,49 (d, J = 1,3 Hz, ÍH), 12,68 (s, 1H) , MS (El NEG) m/z 309 [M-H]~.

Příklad 12

5-(1,2-dihydrothioxospiro(cyklopentan-1,3-[3H]indol)-5-yl)-2thiofenkarbonitril

Sloučenina z názvu byla připravena z 2 g (6,8 mmol) 5(1,2-dihydrooxospiro(cyklopentan-1,3-[3H]indol)-5-yl)-2-thiofenkarbonitrilu a 3,32 g (8,2 mmol) Lawessonova činidla zahříváním k varu pod zpětným chladičem ve 150 ml toluenu po dobu 3 hodin. Výtěžek 1,5 g (48,3 %) . tt. 250-253 °C, ³Η NMR • «444 ·· 4449 «4 44

4« 4 44 4 4 > 4 4

4499 4*4* 4

494 49«· 499

44* 44 44 ·· 44 4444

(DMSO-d₆) δ 12,75 (S,	1H) ,	7,98-7,97 (d, 1H, J = 3,9 Hz), 7,71-
7,70 (d,	1H, J = 5,2	Hz) ,	7,65-7,62 (d,	1H, J = 8,1	Hz), 7,09-
7,07 (d,	1H, J = 8,1	Hz)	, 2,13-2,08 (m,	, 6H), 1,99-	-1,85 (m, 2
H) , MS	[M-H]' = 309.	IR	(SPATR) 1430,	1620, 2220	cm^-1. Anal.
C17H14N2S2	. Vypočteno:	c,	65,77, H, 4,55	, N, 9,02.	Změřeno: C

65,27, Η, 4,41, Ν, 8,84.

Příklad 13

5-(3-fluor-4-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(1H)-thion

5-(3-fluor-4-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(1H)-on

Připraven z 4-brom-2-fluoranisolu a (2'-oxo-2',3'dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny podle postupu z příkladu 5 za vzniku sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky, tt. 178-180 °C, ^XH NMR (DMSO-dg) δ 10,4 (s, 1H) , 7,65 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 7,5-7,4 (m, 3H) , 7,2 (t, 1H, J = d, J = 8,8 Hz), 3,9 (s, 3H), 1,9 (m, 2H), 1,7-1,6 (m, 8H), MS (APCI (-)) m/z 324 [M-H], Anal. výpočet pro C20H2OFNO2: C, 73,83, H, 6,20, N, 4,30. Změřeno: C, 73,55, H, 6,23, N, 4,40.

Sloučenina z názvu byla připravena zahříváním přes noc ve varu pod zpětným chladičem směsi 5-(3-fluor-4-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a stejné hmotnosti pentasulfidfosforu v pyridinu. Odstranění pyridinu ve vakuu následované ošetřením zbytku roztokem 5N chlorovodíkové kyseliny a následná rekrystalizace v ethanolu poskytla šedou pevnou látku, tt 228-229°C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 12,7 (s, 1H), 7,9 (s, 1H), 7,6-7,5 (m, 2H), 7,5-7,4 (m, 1H) , 7,2 (t, 1H, J = 8,8 Hz), 7,1 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 3,9 (s, 3H), • toto ♦ to· toto·· toto ·· toto · toto to to ♦ to · • · to · · ·· · • >··· ···· · ··· ···· ··· ·· · · · ·· ♦· ······

1,9-1,8 (m, 7H), 1,4-1,3 (m, 3H) , MS (APCI(-)) [M-H]m/z 324.

Anal. výpočet pro C₂₀H₂₀FNOS 0,25 H₂0, C, 69, 44, H, 5,97, N, 4,05. Změřeno: C, 69,43, H, 5,75, N, 4,32.

Příklad 14

5-(2-amino-5-pyrimidinyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(1H)-thion

Připraven zahříváním přes noc ve varu pod zpětným chladičem směsi 5-(2-amino-5-pyrimidinyl)spiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-2(1H)-onu a stejné hmotnosti pentasulfidfosforu v pyridinu. Odstranění pyridinu ve vakuu následované ošetřením zbytku roztokem 5N chlorovodíkové kyseliny a následná rekrystalizace v ethanolu poskytla šedou pevnou látku, tt 274277 °C (rozklad), ^ΧΗ NMR (DMSO-d₆) δ 12,7 (s, 1H) , 8,6 (s, 2H) , 7,9 (s, 1H), 7,5 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,1 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 6,8 (s, 2H), 1,9-1,8 (m, 7H) , 1,4-1,3 (m, 3H) . MS (APCI(-)) [M-H] m/z 309.

Příklad 15

3-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5-yl) 5-fluorbenzonitril

Spiro[cyklopentan-1,3'-[3H]indol]-2'[1Ή]-on

K roztoku 2,0 g (15,0 mmol) oxindolu ve 40 ml bezvodého

THF v dusíkové atmosféře při teplotě -25 °C bylo., po kapkách přidáno 19,7 ml (31,5 mmol) 1,6M n-butyllithia v hexanu. K výslednému mléčnému roztoku bylo přidáno 4,75 ml (31,5 mmol) Ν,Ν,Ν',N'-tetramethylethylendiaminu. Po 30 minutách bylo přidáno 21,9 g (70,6 mmol) roztoku 1,4-dijodbutanu ve 3 ml THF a reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti a • ···♦ 44 ·*«· 44 44

4 44 4 4444 «444 4444 4

444 4444 444

444 44 44 44 44 4444 míchána po dobu 14 hodin. Reakční směs byla nalita do vody, extrahována 2x EtOAc, spojené organické vrstvy byly promyty naředěnou HC1 (pH 1) a 2x vodou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu 1:4) za vzniku 1,4 g (7,5 mmol, 50 %) sloučeniny z názvu jako žlutohnědé pevné látky: ^ΧΗ NMR (CDCI3) δ 1,8-2,2 (m, 8H), 6,94 (dd, J = 7,5, 1,0 Hz, 1H) , 7,01 (dd, J = 7,5, 1,0 Hz, 1H), 7,14-7,25 (m, 2H), 9,30 (br s, 1H).

5-bromspiro [cyklopentan-1,3' - [3H] indol] -2’ (1Ή) -on

Roztok 0,27 g (1/4 mmol) spiro[cyklopentan-l,3'[3H] indol]-2' (1Ή)-onu a 0,12 g (1,46 mmol) acetátu sodného v 10 ml octové kyseliny byl podroben působení 0,24 g (1,51 mmol) bromu ve 2 ml octové kyseliny. Po 30 minutách byla směs nalita do saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného a extrahována 2x EtOAc, spojené organické vrstvy byly promyty vodou, saturovaným roztokem hydrouhličitanu sodného, vodou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány za vzniku 0,37 g (1,47 mmol,

%) sloučeniny z názvu jako špinavě bílá pevné látky, která byla použita bez další purifikace: ¹H NMR (CDCI3) δ 1,8-2,27 (m, 8H) , 6,79 (d, J = 8 Hz, 1H) , 7,30-7,39 (m, 2H) , 8,63 (br s, 1H) .

5'-(3-kyano-5-fluorfenyl)-spiro[cyklopentan-1,3' -[3H]indol]2' (l'H)-on

Roztok 0,5 g (2,6 mmol) 3-kyano-5-fluorbrombenzenu a 0,2 g tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 20 ml ethylenglykoldimethyletheru byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 20 minut. K této směsi pak bylo přidáno 0,9 g (3,9 mmol) (spiro [cyklopentan-1, 3' - [3H] indol] -2' (1Ή) -on-5-yl) boronové kyseliny a 0,8 g (7,8 mmol) uhličitanu sodného v 5 ml vody. Roztok byl přiveden k varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin, a poté ochlazen na teplotu místnosti, nalit do 2N NaOH • ftftftft ftft ftftftft ftft ·· ft· ftftft ftftft·· « · ftftft ftft · ft ftftftft ftftftft · ftftft ftft ftft ftft ftft ftftftft a extrahován 3x EtOAc. Spojené extrakty byly promyty vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, EtOAc, hexan) za vzniku 0,35 g

%) sloučeniny z názvu jako bílých jehliček, tt:	235-
°C, ¹H NMR (DMSO-dg) δ 10,5 (s, 1H) , 8,1 (s, 1H) , 8,0	(dt,
J = 1,7, 2,0, 7,0 Hz), 7,8-7,7 (m, 2H), 7,6 (dd, 1H,	J =
6,4 Hz), 6,9 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,0-1,9 (m, 8H)	, MS
M⁺ @ m/z 306.

Obecný postup A

Sloučenina z názvu byla připravena ze 40 mg 5'-(3-kyano-5fluorfenyl)-spiro[cyklopentan-1,3'-[3H]indol]-2' (l'H)-onu a 50 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem v uzavřené zkumavce po dobu 16 hodin. Směs byla koncentrována a zbytek byl rozpuštěn v minimálním množství THF, a poté purifikován HPLC (SiO₂, 30 cm x 2,5 cm, směs EtOAc a hexanu 2:8 při 20 ml/min.) za vzniku 0,022 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: tt. 236-238 °C, ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 12,66 (br s, 1H) , 8,11 (s, 1H) , 7,97 (dt, 1H, J = 10,1 a 2,2 Hz), 7,79-7,76 (m, 2H), 7,68 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,7 Hz), 7,07 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,10-2,05 (m, 6H) a 1,97-1,88 (m, 2H), MS (El) m/z 322 [M]⁺.

Příklad 16

5-(3-chlorfenyl)-3,3-dimethyl-l,3-dihydro-2H-indol-2-thion

5-(3-chlorfenyl)-3,3-dimethyl-l,3-dihydroindol-2-on

0,98 g (4,07 mol) 5-brom-l,3-dihydro-3,3-dimethyl-2Hindol-2-onu a 0,239 g tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) byly míchány v dusíkové atmosféře ve .35 ml dimethoxyethanu. Po 15 minutách bylo přidáno 1,27 g (8,13 mol) 3-chlorfenylboronové kyseliny, pak následovalo 3,40 g (45 mmol) uhličitanu • · · • · • ·

9 » 99 9 9 draselného v 15 ml vody. Reakce byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 2 hodin, a poté míchána přes noc při teplotě místnosti. Směs byla naředěna saturovaným chloridem amonným a extrahována 3x EtOAc. usušeny (MgSO₄) , filtrovány

Spojené organické vrstvy byly a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, 1:3) za vzniku 0,284 g (25 %)sloučeniny z názvu: tt 188-189 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 3,34 (s, 6 Η) , 6,93 (d, 1H, J =

8,04 Hz), 7,38-7,35 (m, 1H), 7,53-7,43 (m, 2H) , 7,61 (d, 1H, J = 7,68 Hz), 7,70 (s, 2 Η), 10,40 (s, 1H), IR (KBr) 3420, 3150, 3050, 1700 cm^-1, MS (El) m/z 270 [M-H], CHN vypočteno pro C16H14CINO + 0,lC₄HgO₂: C, 70,21, H, 5,32, N, 4,99, Změřeno: C, 70,3, H, 5,44, N, 4,93.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5-(3-chlorfenyl) -3, 3-dimethyl-l, 3-dihydroindol-2-onu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,031 g

sloučeniny z	názvu jako	špinavě	bílé pevné látky:	: tt. 158-
160 °C, ^XH NMR	(CDCI3) δ	9,67 (br	s, 1H) , 7,55 (s,	1H), 7,47-
7,43 (m, 3H),	7,40-7,30	(m, 2H) ,	7,08 (d, 1H, J =	8,7 Hz) a

1,50 (s, 6H), MS (El) m/z 287/289 [M]⁺.

Příklad 17

3-benzyl-5-(3-chlorfenyl)-3-methyl-l,3-díhydro-2H-indol-2thion

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 3-benzyl-5(3-chlorfenyl)-3-methyl-l,3-dihydroindol-2-onu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,022 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: tt. 168• ···♦ »· ··«· 99 99 ♦ · 4 9 9 · 9 9 9 · • · 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

170 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 9,23 (br s, 1H) , 7,49 (s, 1H) , 7,497,30 (m, 4H), 7,21 (s, 1H) , 7,15-7,09 (m, 3H) , 6, 96-6, 94 (m, 2H), 6,89 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 3,19 (dd, 2H, J = 40,5 a 13 Hz) a 1,57 (s, 3H), MS (El) m/z 363/365 [M]⁺.

Příklad 18

4-(3,3-dimethyl-2-thioxo-2,3-dihydro-lH-indol-5-yl)-2furonitril

4-(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indol-5-yl)-furan-2karbonitril

Připraven podle postupu z příkladu 5 s použitím 354 mg (1,7 mmol) (2'-oxo-[2,3-dihydro-3,3-dimethyl-l,3'[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny a 200 mg (1,2 mmol) 4-bromfuran-2-karbonitrilu za vzniku 76 mg (0,3 mmol, 26 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky: tt 199,6-201,4 °C, ^XH NMR (DMSO-ds) δ 1,28 (s, 6H) , 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 1H) , 7,48 (dd, J = 8,0, 1,8 Hz, 1H) , 7,65 (d, J = 1,5 Hz, 1H) , 8,1 (s, 1H), 8,5 (s, 1H), 10,46 (s, 1H), MS (ESI) m/z 251 [M-H]', Anal. C15H12N2O2 ‘ 0,6 H₂O

Sloučenina z názvu byla připravena ze 73 mg 4-(3,3dimethy1-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indol-5-yl)-furan-2-karbonitrilu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,003 g sloučeniny z názvu' jako špinavě bílé pevné látky: tt. 188191 °C, ^XH NMR (CDCI3) δ 9,63 (br s, 1H) , 7,83 (s, 1H) , 7,367,33 (m, 3H), 7,06 (d, 1H, J = 7,9 Hz) a 1,48 (s, 6H), MS (El) m/z 268 [M]⁺.

····

Α· 99

I Λ · · » · Α • «Α ·

9

Příklad 19 ♦ Α ΑΑΑ·

5-(3-methoxyfenyl)-3,3-dimethyl-l,3-dihydro-2H-indol-2-thion (4,07 mmol) kyseliny, a

5-brom-l,3-dihydro-3,3-dimethyl-2H-indol-2-on

0,65 g (4,03 mmol) 3,3-dimethylindol-2-onu a 0,33 g acetátu sodného byly míchány v 5 ml octové poté bylo po kapkách do reakční směsi přidáno

0,66 g (4,13 mmol) bromu v 5 ml octové kyseliny. Reakce byla míchána po dobu 50 minut, a poté nalita do vody. Směs byla alkalizována uhličitanem sodným, extrahována 3x ethylacetátem, usušena (MgSO₄) , filtrována a evaporována za vzniku 0,89 g (92 %) sloučeniny z názvu, ^XH NMR (DMSO-dg) δ 1,21 (s, β Η) ,

6,76 (d, 1H, J = 8,22 Hz), 7,29 (dd, 1H, J = 2,12 Hz, 8,23

Hz), 7,49 (d, 1H, J = 2,03 Hz), 10,4 (s, 1H).

0,33 g (1,38 mmol) 5-brom-l,3-dihydro-3, 3-dimethyl-2Hindol-2-onu a 0,094 g tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) byly míchány v dusíkové atmosféře ve 12 ml dimethoxyethanu. Po 15 minutách bylo přidáno 0,42 g (2,76 mmol) 3-methoxyfenylboronové kyseliny, pak následovalo 1,15 g (8,34 mmol) uhličitanu draselného v 5 ml vody. Reakce byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin, a poté ochlazena na teplotu místnosti. Byl přidán saturovaný vodný chlorid amonný a EtOAc a směs byla filtrována. Vodná vrstva byla extrahována 2x EtOAc a spojené organické vrstvy byly usušeny (MgSO₄) , filtrovány a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu 1:3) za vzniku 0,11 g (31 %) 5-(3-methoxyfenyl)-3,3-dimethyl-l,3dihydroindol-2-onu, tt = 157-158 °C, ^XH NMR (DMSO-dg) δ 3,34 (s, 6 Η) , 3,82 (s, 3 Η) , 6, 87-6, 93 (m, 2 Η) , 7,20-7,15 (m, 2 H), 7,37-7,32 (m, 1H) , 7,49-7,46 (m, 1H) , 7,63 (d, 1H, J = 1,14 Hz), 10,4 (s, 1H) , MS (El) m/z 266 [M-H], CHN vypočteno

• ·*··	««	···*
• «	• ·	«	• «	• t
• · ·	• ·	• ·	• ·	•
• · ·	• ·	• ·	• ·	•
·· ··	··		·«	·*· ·

pro C17H17NO2: C, 76, 38, H, 6,41, N, 5,24, Změřeno: C, 76,02, H, 6,49, N, 5,02.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5-(3-methoxyfenyl)-3,3-dimethyl-l,3-dihydroindol-2-onu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,022 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: tt. 149150 °C, ^XH NMR (CDCI3) 5 9, 69 (br s, 1H) , 7,49-7,46 (m, 2H) ,

7,37 (t, 1H, J = 8,0 Hz), 7,16 (d, 1H, J = 7,7 Hz), 7,09-7,06 (m, 2H), 6,90 (dd, 1H, J = 8,2 a 2,3 Hz), 3,88 (s, 3H) a 1,50 (s, 6H), MS (El) m/z 283 [M]⁺.

Příklad 20

3- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)4- fluorbenzonitril

3-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4fluorbenzonitril

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt. 205-206 °C. ¹HNMR (DMSO-d₆) 510,47 (s, 1H), 8,08-8,06 (dd, 1H), 7,89-7,85 (m, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,54-7,49 (m, 1H), 7,43-7,40 (tt, 1H) , 6, 95-6, 93 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 1, 97-1,83 (m, 2H) , 1,69-1,55 (m, 8H) , MS (El) m/z 320 (M⁺) .

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 3-(1,2dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4-fluorbenzonitrilu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,037 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: tt. 230-233 °C, ^XH NMR (CDCI3) 5 9, 82 (br s, 1H) , 7,86 (s, 1H) , 7,77 (dd, 1H, J = 7,0 a 1,8 Hz), 7,68-7,63 (m, 1H) , 7,45 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,31 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 7,15 (d, 1H, J =

8,1 Hz), 2,17-1,84 (m, 7H) a 1, 60-1, 54 (m, 3H) , « ···· *< *··· ·· »· ·· · · » ····« « · · · A ♦ · · • · · · · ···· · • · · · · · » «·· ··· 9t *· ·· «· «·Α·

MS (El) m/z

336 [M] ⁺ .

Příklad 21

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)3-pyridinkarbonitril

Roztok 2,79 g (15,26 mmol) 3-brompyridin-5-karbonitrilu, 5,00 g (15,26 mmol) hexamethyldicínu a 0,20 g (0,17 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 30 ml bezvodého dimethoxyethanu v dusíkové atmosféře byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 16 hodinách byla směs koncentrována a purifikována chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu 5:95) za vzniku 2,82 g (10,55 mmol, 69 %) 3-kyanopyridin-5-trimethylstannanu: ¹H NMR (CDCI3) δ 0,40 (s, 9H) , 8,01 (m, 1H), 8,80 (m, 2H), MS ((+)APCI) m/z 269 [M+H]⁺.

Roztok 1,97 g (7,05 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan-l,3'[3H] indol]-2' (1Ή)-onu, 2,26 g (8,46 mmol) 3-kyanopyridin-5trimethylstannanu, 0,33 g (0,47 mmol) bis(trifenylfosfin)palladium(II)chloridu a 1,48 g (35 mmol) chloridu lithného ve 30 ml bezvodého toluenu byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem. Po 16 hodinách byla směs ochlazena, rozdělena mezi EtOAc a vodu, vodná vrstva byla znovu extrahována 2x EtOAc, spojené organické extrakty byly promyty vodou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl podroben chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, 1:2) a poté dále purifikován preparativní LC (Primesphere C18, 10 μ, 50 x 250 mm, MeCN:H₂O, 1:1, 100 ml/min, teplota místnosti, 7,92 minut) za vzniku 0,56 g (1,84 mmol, 26 %) 3-(1',2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1, 3' - [3H] indol-5' -yl) pyridinkarbonitrilu jako bílých krystalů: tt. 232-234 °C, NMR (CDC1₃) δ 1, 68-1,89 (m, 6H) , • 9

1,93-2,13	(m, 4H) ,	7,12	(d, IH, J = 8 Hz) ,	7,49	(dd,	IH,
8, 2 Hz),	7,66 (d,	IH, 2	Hz), 8,15 (t, IH, J	= 2	Hz) ,	8,39
IH, br),	8,89 (d,	IH, J	= 2 Hz), 9,06 (d,	IH,	J = 2	Hz)
((+)ESI)	m/z 304	[M+H]⁺,	Anal. C19H17N3O, CHN.
Sloučenina z	názvu	byla připravena ze	100	mg 3	-ď

dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl)pyridinkarbonitrilu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,004 g sloučeniny z názvu jako žluté pevné látky: tt. 237238 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 9,56 (br s, IH) , 9,03 (d, IH, J = 1,9 Hz), 8,87 (d, IH, J = 1,4 Hz), 8,12 (s, IH) , 7,87 (s, IH) , 7,50 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,17 (d, IH, J = 8,1 Hz), 2,19-1,85 (m, 7H) a 1,59-1,54 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 318 [M-H]“.

Příklad 22

5-(3, 4-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(IH)thion

5'-(3,5-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(1'H)on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt 180-183 °C, ¹H NMR (CDCla) δ 8,35 (s, IH) , 7,59 (d, IH, J = 2,0 Hz), 7,40 (dd, IH, J = 6,2, 2,0 Hz), 7,10-7,03 (m, 2H) , 6,99 (d, IH, J = 8,1 Hz), 7,76 (tt, IH, J = 4,3, 2,3 Hz), 2,05-1, 62 (m, 10H) ,

MS ((+)APCI) m/z 314 [M+H]⁺.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5'-(3,5difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-onu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,020 g produktu jako žluté pevné látky: tt. 232-233 °C, ¹H NMR (CDC1₃) δ 10,05 (br s, IH), 7,83 (s, IH) , 7,44 (dd, IH, J = 8,1 a 1,4 Hz), • · ···· ·· · ♦ • · · * ·

7,38-7,30 (m, 1H) , 7,26-7,19 (m, 3H) ,

Hz), 2,17-1,82 (m, 7H) a 1,66-1,53 (m,

7,11 3H) , (d, 1H, J =

MS ((-)-APCI)

8,1 m/z

328 [M-H]^-.

Příklad 23

5-[5-chlor-2-thienyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

5-(5-chlor-2-thienyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt. 191-192°C, ²H NMR (CDC1₃) 5 1,6-2,1 (m, 10H) , 6, 85-6, 95 (m, 2H) , 6,98 (d,

J = 4,0 Hz, 1H) , 7,36 (dd, J = 7,5, 1,6 Hz, 1H) , 7,53 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 7,80 (br s, 1H) , ⁿC-NMR (THF-dg) δ 21,35, 25,33, 33,12 (t), 48,32 (s) , 110,40, 121,66, 121,96, 125, 44, 127,25 (d), 128,17, 128,43, 136, 92, 140,20, 143, 43, 183,72 (s) , MS (El) m/z 318 [M+H]⁺, Anal. (Ci₇Hi₆C1NOS) , C, Η, N.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5-(5-chlor-2thienyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,041 g produktu jako žluté pevné látky: tt. 231-232 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 9,75 (br s, 1H), 7,82 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 7,43 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,6 Hz), 7,04-7,02 (m, 2H), 6,89 (d, 1H, J.= 3,8), 2,15-1,84 (m, 7H) a 1,59-1,52 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 332/334 [M-H]^-.

Příklad 24

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)3-furankarbonitril

5-(1',2'-dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'yl)-3-furankarbonitril

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt. 243-245 °C. ¹HNMR (DMSO-dg) δ 10,48 (s, IH) , 8,62 (d, IH, J = 0,7 Hz),

7,76 (d, IH J = 1,5 Hz), 7,58-7,55 (dd, IH) , 7,33 (d, IH, J =

0,7 Hz), 6, 92-6, 90 (d, IH, J = 8,1 Hz), 1, 87-1,83 (m, 2H) ,

1,73-1,53 (m, 8H) . MS ( ( + )EI) m/z 292 (M⁺) .

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5-(l',2'dihydro-2'-oxospiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-5'-yl)-3-furankarbonitrilu a 120 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,020 g produktu jako žluté pevné látky: tt. 264-268 °C, ¹H NMR (CDC1₃) δ 9,66 (br s, IH) , 7,98 (s, 2H) , 7,59 (dd, IH, J = 8,2 a 1,5 Hz), 7,08 (d, IH, J = 8,2 Hz), 6,78 (s, IH) , 2,16-1,85 (m, 7H) a 1,56-1,52 (m, 2H): MS ((-)-APCI) m/z 307 [M-H]'.

Příklad 25

5-(3-chlor-4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(IH)thion

5'-3-chlor-4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]2' (1'H)-on

	Připraven	podle	postupu z příkladu 5:	tt 188-189	°C,
²H NMR (CDCI3)	δ 7,97	(s, IH), 7,57-7,54 (m, 2H)	, 7,41-7,34	(m,
2H) ,	7,20 (t,	IH, J =	8,7 Hz) , 9,96 (d, IH, J =	8,1 Hz), 2,	04-
1,65	(m, 10H),	MS ((+)APCI) m/z 330 [M+H]⁺.

• · · » ·· ···· ·· ·» • ·· * · · · · • · · · · · · ··· · · · · · ·

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5'-(3-chlor4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-onu a 100 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,036 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ^ΧΗ NMR (DMSO-ds) δ 12,74 {br s, 1H) , 7,92 (d, 1H, J = 1,4 Hz), 7,87 (dd, 1H, J = 7,1 a 2,3 Hz), 7,70-7,65 (m, 1H), 7,61 (dd, 1H, J = 7,1 a 1,5 Hz), 7,49 (t, 1H, J = 8,9 Hz), 7,14 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1,99-1,82 (m, 7H) a 1,40-1,37 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 344/346 [M-H]~.

Příklad 26

5-(3-chlor-5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

5'-(3-chlor-5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]2' (1Ή) -on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt 178-180 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 8,50 (s, 1H) , 7,57 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 7,39 (dd, 1H, J = 6,2, 1,9 Hz), 7,33-7,32 (m, 1H) , 7,15 (dq, 1H, J = 5,7, 1,7, 0,7 Hz), 7,06 (dq, 1H, J = 4,2, 1,9, 0,4 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,05-1, 64 (m, 10H) , MS ((-)ESI) [M-H] ’ @ m/z 328.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5'-(3-chlor5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-onu a

100 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,039 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 12,76 (br s, 1H), 7,97 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 7,67 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,4 Hz), 7,60-7,54 (m, 2H), 7,40 (dt, 1H, J = 8,65 a 2,0 Hz), 7,14 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1,99-1,83 (m, 7H) a 1,41-1,38 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 344/346 [M-H]'.

Příklad 27 ·· ···· ·· ·» • * · · «► · • · 9 9 9 · 9 · · · « C ·· 9 9 999 9

5-(3,5-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

5'-(3,5-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol] -2'(1'H)on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt 180-183 °C, ^XH NMR (CDCls) δ 8,35 (s, 1H) , 7,59 (d, 1H, J = 2,0 Hz), 7,40 (dd, 1H, J = 6,2, 2,0 Hz), 7,10-7,03 (m, 2H) , 6,99 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,76 (tt, 1H, J = 4,3, 2,3 Hz), 2,05-1,62 (m, 10H) ,

MS ((+)APCI) m/z 314 [M+H]⁺.

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5^ř-(3,5-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-onu a

100 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,029 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 12,76 (br s, 1H) , 7,84 (s, 1H) , 7, 64-7,56 (m, 1H) , 7,46 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,40-7,32 (m, 1H) , 7,22-7,15 (m, 2H), 1,99-1,80 (m, 7H) a 1,38-1,35 (m, 3H) , MS ((-)-APCI) m/z 328 [M-H]’.

Příklad 28

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)4-propyl-2-thiofenkarbonitril

1,24 g (5 mmol) [3H]indol]-5-boronové

5-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4propyl-2-thiofenkarbonitril

Sloučenina z názvu byla připravena podobně jako v příkladu (

z 1,17 g (5 mmol) 5-brom-4-n-propylthiofen-2-karbonitrilu, 1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3kyseliny, tetrakis(trifenylfosfin) • · • · • · · ·

palladia, 2,75 g (21 mmol) uhličitanu draselného, 10 ml vody a 50 ml dimethoxyethanu zahříváním k varu pod zpětným chladičem přes noc, za vzniku 0,7 g (40 %) produktu: tt. 168-171 °C, ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 10,56 (s, ÍH) , 7,93 (s, ÍH) , 7,52-7,51 (d,

ÍH, J = 1,5 Hz), 7,33-7,29 (dd, ÍH, J = 1,6 Hz), 7,00-6,96 (d,

ÍH, J = 8,0 Hz) ,	2,62-	2,57	(t, 2H) , 1,86 (m, 2H) ,	1,70-1,56
(m, 11H), 0,88-0,	84 (t,	Η) ,	MS m/z (APCI ( + ) ) 351	[M+H]⁺. IR
(KBr) 1620, 1700,	2200	cm^-1.	Anal. C21H22N2OS· 1/2 H₂O	vypočteno
C, 70,2, H, 6,39	, N,	7,79.	Změřeno: C, 70,67, H,	6,34, N,
7,62.
Sloučenina z	názvu	byla	připravena z 90 mg 5— (1,	2-dihydro-

2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4-propyl-2-thiofenkarbonitrilu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,037 g sloučeniny z názvu jako oranžové pevné látky: ¹H NMR (DMSO-de) δ 12,83 (br s, ÍH) , 7,96 (s, ÍH) , 7,77 (s, ÍH) , 7,44 (d, ÍH, J = 7,7 Hz), 7,19 (d, ÍH, J = 8,0 Hz), 2,60 (t, 2H, J = 8,0 Hz), 1,98-1,79 (m, 7H), 1,64-1,56 (m, 2H), 1,39-1,35 (m, 2H) a 0,87 (t, 3H, J = 7,3 Hz): MS ((-)-APCI) m/z 365 [M-H].

Příklad 29

5-(3-fluor-4-nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion

5-(3-fluor-4-nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)on

Připraven z 3,2 g (12,5 mmol) (2'-oxo-2,3-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny a 3 g (13,6 mmol) 4-brom-2-fluor-nitrobenzenu, jak bylo popsáno v příkladu 5, za vzniku 0,7 g (16 %) sloučeniny z názvu jako žluté pevné látky: tt. 213-215 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 1,5-1,8 ««·· #» 4·»4 »· 9» · » 1 · · ·

9 11 1 1

11 1 19 9 1 1

			« · · «4 96	4 * · 1	4 ·	4 4 4 4
(m,	8H)	, 1,8-2,0 (m, 2H), 6,	96 (d, 1H, J	= 8,13	Hz) ,	7,68	(dd,
1H,	J =	8,13, 1,76 Hz), 7,74	(dd, 1H, J	= 8,68,	1,76	Hz) ,	7,86
(d,	1H,	J = 1,98 Hz) , 7,92	(dd, 1H, J =	13,4,	1,76	Hz) ,	8,18
(t,	1H,	J = 8,46 Hz) a 10,52	(s, 1H), MS	(El) m/	z = 340 (M+).

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-(3-fluor-4nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,021 g produktu jako žluté pevné látky: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 12,82 (br s, 1H) , 8,21 (t, 1H, J = 8,4 Hz), 8,07 (d, 1H, J = 1 Hz), 7,98 (dd, 1H, J = 13,1 Hz), 7,79 (dt, 1H, J = 8,1 a 2,6 Hz), 7,19 (1H, J = 8,2 Hz), 1,99-1,83 (m, 7H) a 1,42-1,39 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 355 [M-H].

Příklad 30

4-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5furankarbonitril

4-(1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1, 3-[3H]indol]-5-yl)-2furankarbonitril

Roztok 0,75 g (4,4 mmol) 3-brom-5-kyanofuranu a 0,4 g tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 20 ml ethylenglykoldimethyletheru byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 20 minut. K této směsi pak bylo přidáno 1,6 g (6,5 mmol) (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1' H)-on-5-yl)boronové kyseliny a 1,4 g (13,1 mmol) acetátu sodného v 5 ml vody. Roztok byl přiveden k varu pod zpětným chladičem po dobu 18 hodin, a poté ochlazen na teplotu místnosti, nalit do 2N NaOH a extrahován 3x EtOAc. Spojené extrakty byly promyty vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, EtOAc, hexan) za vzniku 0,45 g (36 %) produktu jako špinavě bílé pevné látky, tt: 240-242 °C, «· · ·

4· · · · · « · » «· «· ·· ·· ···· ¹Η NMR (DMSO-d₆) δ 10,4 (s, 1Η) , 8,5 (s, 1H) , 8,2 (s, 1H) , 7,7 (s, 1H), 7,5 (dd, 1H, J = 1,5, 6,5 Hz), 6,9 (d, 1H, J = 8,0

Hz), 2,0-1,6 (m, 10H), MS (El) M⁺ @ m/z 292.

Sloučenina z názvu byla připravena z 67 mg 4-(1,2-dihydro2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2-furankarbonitrilu a 67 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,018 g sloučeniny z názvu jako žluté pevné látky: ^XH NMR (DMSO-d₅) δ 12,74 (s, 1H), 8,68 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,62 (dd, 1H, J = 8,0 a 1,0 Hz), 7,10 (s, 1H, J = 8,1 Hz), 1,941,78 (m, 7H) a 1,35-1,32 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 307 [M-H].

Příklad 31

5- (3-chlorfenyl]spiro(cyklobutan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

5-bromspiro[cyklobutan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-on

K míchanému roztoku 1,0 g (6 mmol) spiro[cyklobutan-1,3'[3H] indol] -2' (1Ή) -onu (J. Med. Chem., 824-9, 1987) v 10 ml ledové octové kyseliny bylo po kapkách přidáno 0,30 ml (6 mmol) roztoku bromu v. 6 ml ledové octové kyseliny při teplotě místnosti. Po míchání po dobu 10 minut bylo přidáno 0,47 g (6 mmol) bezvodého acetátu sodného a roztok byl koncentrován ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v 50 ml ethyletheru a promyt postupně 50 ml vody, 50 ml vodného saturovaného roztoku hydrouhličitanu sodného, 50 ml vody a 30 ml solanky. Organická vrstva byla usušena nad sulfátem hořečnatým, filtrována a koncentrována ve vakuu. Krystalizace z ethyletheru poskytla 1,1 g (73 %) produktu jako bílé chmýřovité pevné látky, tt 235-7 °C. ¹H NMR (DMSO-d₆, 300 MHz) 2,15-2,41 (m, 6 H) , 6,74 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 7,33 (dd, 1H, J = 2, 8,2 Hz), 7,75 (d, 1H, J = 2 Hz), 10,36 (bs, 1H) . MS (El) • ···« *· 4 · · 4 · 4 4 4

4 4 4 4 4 4 4 4 • · 444 44 ·

4*44 4444 4 «4 4· 4444 m/z 251 [Μ+] . Anal. výpočet pro CnHioBrNO: C, 52,41, H, 4,00, N, 5,56. Změřeno: C, 51,98, H, 4,24, N, 5,42.

K roztoku 0,6 g (2 mmol) 5-bromspiro[cyklobutan-1,3[3H]indol]-2(1H)-onu v 50 ml ethylenglykoldimethyletheru v dusíkové atmosféře bylo přidáno 140 mg (0,1 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0). K roztoku bylo postupně přidáno 0,48 g (3 mmol) 3-chlorfenylboronové kyseliny a 0,76 g (5 mmol) uhličitanu draselného v 5 ml vody. Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 3 hodin a ponechána vychladnout. Reakční směs byla nalita do 100 ml vody a extrahována 3x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny, promyty 50 ml solanky a usušeny nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován HPLC (Zorbax PRO, C18, 10 μ, 15A, 50 X 250 mm, 35 % voda/65 % AcCN, 254NM, teplota místnosti) za vzniku 200 mg (35 %) 5-(3-chlorfenyl)spiro[cyklobutan-1,3-[3H]indol)-2(1H)-onu jako bílého prášku, tt 199, 5-201 °C. ^XH NMR (DMSO-d₆, 300 MHz) 2,21-2,28

(m, 2H), 2,40-2,45	(m, 4 H),	6,87	(d, 1H,	J = 8,1	Hz), 7,37
Cd', 1H), 7,44-7,!	52 (m, 2H) ,	7,65	(bd, 1H,	J = 7,8	Hz), 7,76
(bs, 1H) , 7,92 (bs	, 1H), 10,35	(s,	1H) . MS	(El) m/z	283 [M+].
Anal. výpočet pro	CnHuCINO:	c,	71,96, H	, 4,97,	N, 4,94.
Změřeno: C, 70,75,	H, 5,07, N,	4,68	•
Sloučenina z	názvu byla	připravena z	55 mg 5	-(3-chlor-

fenyl)spiro[cyklobutan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a 55 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,016 g sloučeniny z názvu jako oranžové pevné látky: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 12,58 (br s, 1H), 8,07 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,82 (t, 1H, J = 1,7 Hz), 7,70 (d, 1H, J = 7,74 Hz), 7,60 (dd, 1H, J = 8,12 a 1,71 Hz), 7,49 (t, 1H, 7,9 Hz), 7,41 (d, 1H, J = 8,32 Hz), 7,05 (d, 1H, J = 8,14 Hz) a 2,57-2,27 (m, 6H) , MS ((-)-APCI) m/z 298/300 [M-H].

Příklad 32 * «··· ·· ·»·* ·· «» * · ♦ ♦» » »»»· • · ··· ·» · • ···· « · · · · •·· ·» »» »· ♦» ····

5-(2-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-(2-chlorfenyl) spiro [cyklohexan-1, 3- [3H] indol] -2 (1H) -thionu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,042 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 12,75 (br s, 1H), 7,80 (d, 1H, J = 1,1 Hz), 7,58-7,55 (m, 1H) , 7,48-7,36 (m, 4H) , 7,16 (d, 1H, J = 8,0 Hz), MS ((-)-APCI) m/z 326/328 [M-H]^-.

Příklad 33

5-(4-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol-2(1H)-thion

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-(4-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,035 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 12,74 (br s, 1H) , 7,91 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,69 (d, 2H, J = 5,5 Hz), 7,60 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,4 Hz), 7,50 (d, 2H, J = 8,5 Hz), 7,15 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1,99-1,83 (m, 7H) a 1,50-1,36 (m, 3H) , MS ((-)-APCI) m/z 326/328 [M-H].

Příklad 34

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol-5yl)-4-methyl-2-thiofenkarbonitril ···· •· ···· 4 4 4 4

4 · * * · ♦

4 4 4 4 · · 4*4 4 4 • 4 44 ♦» 4444

100

5-brom-4-methyl-2-thiofenkarboxaldehyd

K roztoku 28 g (0,383 mol) diethylaminu ve 400 ml bezvodého THF bylo přidáno 153 ml (0,383 mol) roztoku 2,5M n-BuLi v hexanu při teplotě -40 °C v dusíkové atmosféře. Po přidání byl roztok míchán po dobu 30 minut v -40 °C v dusíkové atmosféře, ochlazen na -78 °C a po kapkách podroben působení 45 g (0,254 mol) roztoku 2-brom-3-methylthiofenu ve 450 ml bezvodého THF. Reakční roztok byl míchán po dobu 30 minut v -78 °C a podroben působení 100 ml bezvodého DMF. Směs byla ponechán zahřát se na teplotu místnosti a byla zastavena 1 1 vodného roztok IN chlorovodíku. Roztok byl extrahován 3x 450 ml ethylacetátu a extrakty byly promyty vodou, solankou a usušeny (MgSO₄) . Po odstranění rozpouštědla ve vakuu bylo získáno 46 g (88,3 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky. Vzorek produktu byl krystalizován z hexanu: tt 63-

65 °C,	IR (KBr)	1654	cm'¹. ^XH	NMR	(CDC1₃)	5 9,75	(S, 1H), 7,45
(S, 1H)	, 2,26	(S,	3H), MS	(El)	m/z	204/206	(M+). -Anal.
výpočet	pro C₆H₅BrOS:	C, 35,14	, H,	2,46.	Změřeno:	C, 35,00, H,

2,44.

5-brom-4-methyl-2-thiofenkarbonitril

Připraven z 5-brom-4-methyl-2-thiofenkarboxaldehydu s použitím postupu z příkladu 5. Bílá pevná látka: tt 4042 °C, IR (KBr) 2200 cm^-1, ^XH NMR (CDC13) 5 7,29 (S, 1H) , 2,21 (S, 3H) . MS (El) m/z 201/203 (M⁺, 98 %/100 %), Anal. výpočet pro C6H₄BrNS: C, 35,66, H, 1,99, N, 6,93. Změřeno: C, 36,00, H, 2,14, N, 6,76.

Připraven podle postupu z příkladu 5 s použitím 357 mg (1,7 mmol) (2'-oxo-[2,3-dihydro-3,3-dimethyl-l,3'-[3H]indol]5'-yl)boronové kyseliny a 295 mg (1,5 mmol) 5-brom-4methylthiofen-2-karbonitrilu za vzniku 227 mg (0,8 mmol, 55 %) 5-(3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indol-5-yl)-4-methylthiofen-2-karbonitrilu jako bílé pevné látky: tt. 192,39 999 99 ·· 99

9 9 9 9 9

9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 · 9 9 9 9 9 9

101

193	°C, ¹H NMR (DMSO-d₆)	δ 1,29 (s, 6H),	2,29	(s,	3H) ,	6,97	(d,
J =	8,0 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 8,0, 1,8	Hz,	1H) ,	7,49	(d,	J =
1,7	Hz, 1H) , 7,84 (s,	1H), 10,57 (s,	1H) ,	MS	(El)	m/ z	282
(m) +	, Anal. C₁₆Hi₄N₂OS.
	Sloučenina z názvu	byla připravena	z 0	<77	g (2,	39 mmol)

5- (3,3-dimethyl-2-oxo-2,3-dihydro-lH-indol-5-yl)-4-methylthiofen-2-karbonitrilu a 0,42 g (0,96 mmol) pentasulfidfosforu ve 20 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem. Po 3 hodinách byla reakce ochlazena a rozdělena mezi vodu a EtOAc, organická vrstva byla oddělena, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,25 g (0,73 mmol, 30 %) produktu jako oranžové pevné látky: ¹H NMR (DMSO-dg) δ 12,82 (br s, 1H), 7,88 (s, 1H) , 7,82 (d, 1H, 2 Hz), 7,49 (dd, 1H, J = 8,1, 1,6 Hz), 7,18 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1, 99-1,80 (m, 7H) a 1,40-1,36 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 321 [M-H]“.

Příklad 35

5- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5yl)-2-thiofenkarbonitril

5-brom-2-thiofenkarbonitril

Směs 96,0 g (500 mmol) 5-brom-2-thiofenkarboxaldehydu, 111,9 g (500 mmol) hydrochloridu hydroxylaminu, 500 ml pyridinu a 500 ml ethanolu byla zahřívána v dusíkové atmosféře pod zpětným chladičem po dobu dvou hodin. Reakční směs byla ochlazena na teplotu místnosti a koncentrována ve vakuu za vzniku oleje. Hrubý produkt byl dvakrát triturován ledovou vodou a získaná pevná látka byla sebrána na filtr. Směs dávky 44,31 g (215 mmol) výše uvedené pevné látky, 4,2 g (21 mmol) monohydrátu acetátu měďnatého v 1,4 1 acetonitrilu byla zahřívána pod zpětným chladičem po dobu tří hodin.

• ···· ·· ···· 91 11 *· ··· · * · · · • · 9 i 1 9 1 ♦ • 1119 1111 1

102

11111 11 91 11 1111

Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu. Roztok byl promyt 5% vodnou kyselinou sírovou (2x 30 ml) , vodou (2x 30 ml) , 20 ml solanky a usušen (MgSCu) . Rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu a zbytek byl rozpuštěn v minimálním množství chloroformu (1 1) a ponechán

Získané krystaly byly sebrány na filtr a krystalizovat filtrát byl (silikagel, koncentrován purifikován chromatografií chloroform) za vzniku 31,5 g (spojeno, 58 %) sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky. IR (film), cm¹ 2200. NMR (CDC1₃) δ 7,39-7,38 (d, 1H, J = 4,1 Hz), 7,10 (d, 1H, J = 4,0 Hz), MS (El) m/z 187 (M⁺, 98 %), 189 (M⁺,

100 %) .

5-(2'-oxo-2',3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]5'-yl-2-thiofenkarbonitril byl připraven podle postupu z příkladu 5 s použitím 5-brom-2-thiofenkarbonitrilu a (2' oxo-2',3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boro-

nové kyseliny: tt. 225-228°C,	^XH NMR (DMSO-d₆) δ	1,63	(m,	8H) ,
1,90 (m, 2H), 6,91 (d, 1H, J	= 8,13 Hz), 7,55	(dd,	1H,	J =
8,13, 1,76 Hz), 7,60 (d, 1H,	J = 4,17 Hz), 7,75	’ (d,	1H,	J =
1,76 Hz), 7,93 (d, 1H, J =	4,17 Hz), 10,51	(s,	1H)	, MS
((+)APCI) m/z 309 [M+H]⁺.
Sloučenina z názvu byla	připravena z 0,69	g 5-	(2'·	-OXO-

2',3'-dihydrospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5' -yl-2-thiofenkarbonitrilu a 0,4 g pentasulfidfosforu ve 20 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem. Po 3 hodinách byla reakce ochlazena, nalita do saturovaného vodného roztoku hydrouhličitanu sodného a extrahována EtOAc. Organická vrstva byla oddělena, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,215 g sloučeniny z názvu jako oranžové pevné látky: ¹H NMR (DMSO-dg) δ 12,82 (br s, 1H) , 8,00-7,98 (m, 2H), 7,74 (d, 1H, J = 4,1 Hz), 7,69 (dd, 1H, J = *··« « ·· · « 1 • ··

103

8,2 a 1,6 Hz), 7,14 (d, ÍH, J = 8,1 Hz), 1,99-1, 83 (m, 7H) a

1,40-1,37 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 323 [M-H]’.

Příklad 36

5-(3-fluorfenyl)spiro(cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion

5' - (3-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol-2' (1Ή) -on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt 171-172 °C, ^XH NMR (CDC1₃) δ 8,43 (s, ÍH) , 7,62 (d, ÍH, J = 1,8 Hz), 7,42 (dt, ÍH, J = 6,2, 2,0 Hz), 7,39-7,37 (m, ÍH), 7,33 (dt, ÍH, J = 5,1, 1,3 Hz), 7,26 (dq, ÍH, J = 5,9, 2,1 Hz), 7,05-6,99 (m, 2H), 2,03-1,64 (m, 10H), MS ((+)APCI) m/z 296 [M+H]⁺.

Sloučenina z názvu byla připravena z 0,70 g 5'-(3-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή)-onu a 0,4 g pentasulfidfosforu ve 20 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem. Po 3 hodinách byla reakce ochlazena, nalita do saturovaného vodného roztoku hydrouhličitanu sodného a extrahována EtOAc, organická vrstva byla oddělena, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,42 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 12,75 (br s, ÍH), 7,95 (d, ÍH, J = 1,5 Hz), 7,64 (dd, ÍH, J = 8,13 a 1,5 Hz), 7,53-7,48 (m, 3H) , 7,21 = 7,14 (m, 2H), 1,991,83 (m, 7H) a 1,40-1,37 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 310 [M-H]’.

Příklad 37

5-(3-hydroxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)-thion ft ·

104 ··· · 9

9<i 9999

9 «

9 9

9 9 9

99

9 <

5' - (3-hydroxyfenyl) spiro (cyklohexan-1, 3' - [3H] indol] -2' (1Ή) -on

Připraven podle postupu z příkladu 5: tt. 213-216 °C, ^JH NMR (CDC1₃) δ 1,60-1,96 (m, 10H) , 6,78-6, 82 (m, 1H) , 6,94 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,01-7,04 (m, 2H) , 7,23 (t, 1H, J = 7,7

Hz), 7,38 (d, 1H, J = 8 Hz), 7,61 (s, 1H), 8,91 (s, 1H) a 9,73 (s, 1H, br), MS ((+)-APCI) m/z 294 [M+H]⁺,

Sloučenina z názvu byla připravena ze 100 mg 5'—(3— hydroxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (l'H)-on a

110 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,0045 g sloučeniny z názvu jako špinavě bílé pevné látky: ¹H NMR (CDCI3) δ 9,59 (br s, 1H) , 7,89 (s, 1H) , 7,49 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,5 Hz), 7,33 (t, 1H, J = 7,9 Hz), 7,15-7,10 (m, 3H), 6,84 (dd, 1H, J = 8,0 a 2,2 Hz), 2,17-2,05 (m, 2H), 1,98-1,88 (m, 5H) a 1,57-1,53 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 308 [M-H].

Příklad 38

5-(3-chlorfenyl)-3,3-diethyl-l,3-dihydro-2H-indol-2-thion

Roztok 40 g (0,3 mol) oxindolu ve 400 ml suchého THF v dusíkové atmosféře byl ochlazen na -25 °C a po kapkách podroben působení 240 ml (0,6 mol) 2,5M n-butyllithia v hexanu. K výslednému roztoku bylo přidáno 90,4 ml (0,6 mol) Ν,Ν,Ν', N'-tetramethylethylendiaminu. Po 30 minutách bylo přidáno 48 ml (0,6 mol) jodethanu a reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti a míchána přes noc. Reakční směs byla nalita do vodného roztoku NH4CI, extrahována 2x EtOAc a spojené organické vrstvy byly promyty naředěnou HC1, vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a koncentrovány. Zbylý olej byl triturován hexanem za vzniku 24,5 g (51 %) hrubého produktu. Vzorek 3 g byl rekrystalizován ze směs EtOAc a hexanu za vzniku 1,4 g 3-ethylindol-2-onu, tt. 100-101 °C, • 4 ···· • ♦

7,15 (m, IH) , 7,22 (m, IH) , »·· ·

105

^XH NMR (DMSO-	d₆)	δ 0,76 (t, 3H, J = 7,5
3,38	(t, 3H,	J	= 5,7 Hz), 6,8 (dt, IH,
6, 93	(dt, IH,	J	= 7,45, 1,10 Hz), 7,15 (
10,3	(s, IH),	MS	(ESI) m/z 270 [M+H].
	Roztok 16 g	(0,1 mol) 3-ethylindol-2

THF v dusíkové atmosféře byl ochlazen na -25 °C a po kapkách podroben působení 80 ml (0,2 mol) 2,5M n-butyllithia v hexanu. K výslednému roztoku bylo přidáno 30 ml (0,2 mol) Ν,Ν,Ν',Ν'tetramethylethylendiaminu. Po 30 minutách bylo přidáno 8 ml (0,1 mol) jodethanu a reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti a míchána přes noc. Reakční směs byla nalita do vodného roztoku NH₄C1, extrahována 2x EtOAc a spojené organické vrstvy byly promyty naředěnou HC1, vodou, solankou, usušeny (MgSO₄) a koncentrovány. Zbylý olej byl triturován hexanem za vzniku 9 g (45 %) 3,3-diethylindol-2-onu, tt. 156159 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 10,44 (s, IH) , 7,70-7,69 (t, IH) ,

7,62-7,59	(m,	IH) ,	7,58	(d,	IH J
7,45-7,41	(t,	IH) ,	7,36	-7,35	(m,
6,89 (d,	IH,	J =	8,2	Hz) ,	1,87
2H), 0,54-	-0,50	(t,	6H) ,	MS (+ESI)
Roztok	8 g	(40	mmol)	3,

3,3-diethylindol-2-onu a 4 g (48 mmol) acetátu sodného ve 100 ml octové kyseliny byl podroben působení 6,4 g (40 mmol) bromu. Po 30 minutách byla směs naředěna vodou a 2x extrahována EtOAc, spojené organické vrstvy byly promyty vodou, saturovaným roztokem hydrouhličitanu sodného, a poté solankou, usušeny (MgSO₄) a evaporovány za vzniku 7,6 g (75 %) hrubého produktu. Vzorek byl rekrystalizován ze směs EtOAc a hexanu za vzniku 5-brom1,3-dihydro-3,3-diethyl-[2H]-indol-2-onu, tt.

164-165 °C, ²Η NMR (DMSO-dg) δ 10,45 (s, IH) , 7,41-7,40 (d, IH, J = 2,2 Hz), 7,34-7,31 (m, IH), 6,78-6,76 (d, IH, J = 8,2 Hz), 1,781,65 (m, 4H), 0,50-0,46 (m, 6H), MS (-ESI) m/z 266/268 [M-H]

106 • ···· ·Φ ΦΦΦΦ 99 99

ΦΦ φ 9 9 9 9 9 ··

9 9 9 9 9 · · » Φ Φ Φ Φ φφφ· V

Φ · Φ «ΦΦΦ · · ·

ΦΦΦ ΦΦ ΦΦ Φ· ΦΦ ΦΦΦΦ

Roztok 2,7 g (10 mmol) 5-brom-l,3-dihydro-3,3-diethyl[2H]-indol-2-onu, 1,6 g (10 mmol) 3-chlorfenylboronové kyseliny, 4 g . (30 mmol) uhličitanu draselného a 0,5 g (0,4 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 100 ml dimethoxyethanu, 25 ml ethanolu a 25 ml vody byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 6 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byla směs naředěna vodou a 2x extrahována EtOAc. Spojené organické extrakty byly promyty vodou, poté solankou, usušeny (MgSOU a evaporovány. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, 1:3) za vzniku 0,8 g (27 %) 5-(3-chlorfenyl)-3,3-diethyl-l,3-dihydroindol-2-onu, tt. 195-197 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 7,70 (t, 1H, J = 2 Hz), 7,62-7,60 (m, 1H) , 7,58 (d, 1H, J = 1,7 (dd, 1H, J = 8,1, 2 Hz), 7,43 (t, 1H, 7,9 Hz), 7,

1H), 6,90 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1,87-1,70 (m, 4H)

6H, J = 7,4 Hz), MS (+APCI) m/z 300/302 [M-H]

Sloučenina z názvu byla připravena ze 1 fenyl)-3,3-diethyl-l,3-dihydroindol-2-onu a 3 činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,023 g produktu jako žluté pevné

J =	1,7	Hz), 7,52,
Hz)	, 7,	36-7,33 (m,
(m,	4H)	a 0,52 (t,
I]
100	mg	5-(3-chlor-
100	mg	Lawessonova

látky: ^XH NMR (DMSO-d₆)	δ	12,73 (br s, 1H) ,	7,77 (t,	1H, J
1,8 Hz), 7,75 (d, 1H, J		1,6 Hz) , 7,68-7,62	(m, 2H),	7,48 (
1H, J = 7,9 Hz), 7,40	(d,	1H, J = 8,3 Hz),	7,09 (d,	1H, J
8,1 Hz), 2,07-2,00 (m,	2H)	, 1,86-1,79 (m, 2H)	a 0,37	(t, 6H,

= 7,3 Hz): MS ((-)-APCI) m/z 314/316 [M-H]

Příklad 39

5-[4-fluor-3-(trifluormethyl)fenyl]spiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-2(1H)-thion

5-[4-fluor-3-(trifluormethyl)fenyl]spiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-2(1H)-on byl připraven z 2,5 g (10 mmol) (2'-oxo• · ···· • · • · ftftft ·· · ft ···· ftftft· · • ftft ···· ftftft ftftft ftft ftft ftft ftft ····

107

2,3-dihydrospíro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)boronové kyseliny 2 g (8 mmol) a 5-brom-2-fluortrifluormethylbenzenu, jak bylo popsáno v příkladu 5, za vzniku 0,87 g (30 %) sloučeniny z názvu jako pevné látky: tt. 222 °C, ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 1,5-1,8 (m, 8 Η) , 1,8-2,0 (m, 2 Η) , 6,92 (d, 1H, J = 8,13 Hz), 7,51 (dd, 1H, J = 8,13, 1,76 Hz), 7,55 (dd, 1H, J = 10,54, 9,01 Hz) 7,72 (d, 1H, J = 1,76 Hz), 7,90 (dd, 1H, J = 7,03, 2,20 Hz), 7,98 (m, 1H) a 10,39 (s, 1H), MS (El) m/z 363 (M⁺) .

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-[4-fluor-3(trifluormethyl)fenyl]spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)onu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,016 g produktu jako žluté pevné látky: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 12,75 (br s, 1H) , 8,06-8,00 (m, 1H) , 7,96-7,92 (m, 2H) , 7,66-7,56 (m,

2H) , 7,16 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 1,99-1,83 (m, 7H) a 1,41-1,38 (m, 3H): MS ((-)-APCI) m/z 378 [M-H].

Příklad 40

4- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl-2fluorbenzonitril

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 4-(1,2-dihydro2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2-fluorbenzonitrilu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,050 g sloučeniny z názvu jako oranžové pevné látky: ^XH NMR (DMSO-de) δ 12,80 (br s, 1H), 8,04 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 7,98 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,92 (dd, 1H, J = 11,3 a 1,3 Hz), 7,76 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,18 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 1, 99-1,82 (m, 7H) a 1,401,38 (m, 3H), MS ((-)-APCI) m/z 335 [M-H]'.

Příklad 41

• ·· · #			• ·· ·	»«	•
* · ·	*		• ·	*	• ·
• ·	•		• ·	•	•
» ·	• ·		• ♦	• ·	•
·· · ··		··	··	··

108

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)4-n-butyl-2-thiofenkarbonitril

Sloučenina z názvu byla připravena podobně jako v příkladu 5 z 1,24 g (5,1 mmol) 5-brom-4-n-butylthiofenkarbonitrilu,

1,24 g (5,05 mmol) 1,2-dihydro-2-oxospiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-5-boronové kyseliny, 0,25 g tetrakis(trifenylfosfin) palladia, 2,75 g (21 mmol) uhličitanu draselného, 10 ml vody a 50 ml dimethoxyethanu zahříváním k varu pod zpětným chladičem po dobu 5 hodin za vzniku 1 g (54 %) 5-(1,2-dihydro2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4-n-butyl-2-thiofenkarbonitrilu, tt. 130-132° C. ¹H NMR (DMSO-dg) δ 10,56 (s,

1H), 7,92 (s, 1H), 7,52-7,51 (d, 1H, J = 1,2 Hz), 7,32-7,29 (dd, 1H, J = 1,5 Hz), 6,98-6,96 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 2,64-2,59 (t, 2H), 1,99-1,86 (m, 2H), 1,70-1,50 (m, 11H), 1,32-1,22 (m, 2H), 0,86-0,82 (t, 3H) , MS (APCI( + )) m/z 365 [M+H]⁺, IR (KBr)

1620, 1700, 2200 cm'¹, Anal. C₂₂H₂₄N₂OS · 1/4 H₂O. vypočteno: C,

71,61, H, 6,69, N, 7,59. změřeno: C, 71,13, H, 6,61, N, 6,91.

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-(1,2-dihydro2-oxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4-n-butyl-2-thiofenkarbonitrilu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,050 g produktu jako oranžové pevné látky: ¹H NMR (DMSO-dg) δ 12,83 (br s, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,44 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 7,18 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,63 (t, 1H, J,79 = 8,0 Hz), 1,99-1,77 (m, 7H), 1, 60-1,50 (m, 2H), 1,39-1,35 (m, 3H) ,

1,29-1, 22 (m, 2H) a 0,81 (t, 3H, 7,3 Hz): MS ((-)-APCI) m/z

379 [M-H]'.

• »··· A* AAAA • · A A A · ·· A·

A A A A

109 • AA ·· AA AA ·· ·Α·Α

Příklad 42

5-(3-fluor-5-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(1H)-thion

Sloučenina z názvu byla připravena z 90 mg 5-(3-fluor-5methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)-onu a 90 mg Lawessonova činidla v 10 ml toluenu ve varu pod zpětným chladičem podle obecného postupu A za vzniku 0,043 g produktu jako špinavě bílé pevné látky: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 12,74 (br s, 1H), 7,90 (s, 1H) , 7,63 (dd, 1H, J = 8,1 a 1,2 Hz), 7,13 (d,

1H,	J =	8,1	Hz), 7,08	(d,	1H, J = 10	Hz), 7,01	(s, 1H),	6, 83
(dt,	1H,	J	= 11 a 2,0	Hz)	, 1,99-1,83	(m, 7H) a	1,40-1,37	(m,
3H) :	MS	( ()	-APCI) m/z	340	[M-H]~.

Příklad 43

5-(3-chlorfenyl)-n-hydroxyspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2amin

K roztoku 0,74 g (2,25 mmol) 5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή)-thionu v 15 ml suchého THF bylo přidáno 0,1 g (2,5 mmol) hydridu sodného (60% v oleji, při teplotě místnosti). Po 15 minutách bylo přidáno 0,18 ml (2,88 mmol) methyljodidu. Po 1 hodině byla reakční směs rozdělena mezi vodu a EtOAc, organická vrstva byla promyta solankou, usušena (MgSO₄) a evaporována za vzniku 0,80 g (100 %) 5-(3-chlorfenyl)-2-(methylthio)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indolu], který byl použit bez další purifikace.

K roztoku 1,96 g (5,73 mmol) poslední uvedené sloučenina ve 20 ml DMSO bylo přidáno 5 ml hydroxylaminu (60% ve vodě), a směs byla zahřívána na 120 °C. Po 1 hodině byla reakce ochlazena, rozdělena mezi diethylether a roztok saturovaného »kk· ·« ··** * * ·*

4 4 4 « · *r • 4 4

Α4· 44 44 44

4· ·*·

110 vodného chloridu amonného. Organická vrstva byla promyta vodou a solankou, a poté usušena (MgSO₄) a evaporována. Hrubý produkt byl poté krystalizován z MeOH za vzniku 1,67 g (5,08 mmol, 89 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky: ¹H NMR (CDC1₃) δ 7,52 (t, IH, J = 1,7 Hz), 7,43-7,28 (m, 7H) , 6,83 (d, IH, J = 8 Hz) a 1,98-1,51 (m, 10H), MS (ESI (+)) m/z 327/329 [M+H]⁺.

Příklad 44

N-(acetyloxy)-5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2amin

K roztoku 0,23 g (0,71 mmol) 5-(3-chlorfenyl)-n-hydroxyspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2-aminu v 10 ml směsi methylenchloridu a methanolu (9:1) bylo v dusíkové atmosféře přidáno 0,08 ml (0,8 mmol) acetanhydridu a katalytické množství 4-dimethylaminopyridinu. Po 20 minutách byla reakce evaporována a produkt byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs methanolu a methylenchloridu, 5:95). Produkt byl poté triturován diisopropyletherem za vzniku 0,12 g (0,32 mmol, 45 %) sloučeniny z názvu: ^XH NMR (CDC13) δ 7,527,51 (m, 2H), 7,43-7,27 (m, 5H) , 6,88 (d, IH, J = 8 Hz), 2,27 (s, 3H), 2,04-1,92 (m, 4H), 1,84-1,74 (m, 4H) a 1,72-1,57 (m, 2H) , MS (ESI ( + ) ) m/z 369/371 [M+H]⁺, C2iH₂iC1N₂O₂ · 0,5 H₂O vyžaduje C, 66,98, H, 5,64, N, 7,34. Změřeno C, 66,74, Η, 5,86, N, 7,41.

Příklad 45

111

* ··€» * ·	·· •	•	···· •	·· • ·	• ·
• · ·	•	•	♦	• · ·	♦
• · ·	•	•	• ·	• ·	•
·* »·	··		·«	··

5'-(3-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-2'(l'H)-onoxim

Připraven podle postupu z příkladu 43 z 0,59 g (1,90 mmol) 5'-(3-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(1'H)thionu za vzniku 0,053 g (0,17 mmol, 10 %) sloučeniny z názvu: ^XH NMR (DMSO-de) 5 9,59 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 7,57 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 7,46-7,39 (m, 4H), 7,11-7,05 (m, 1H) , 6,80 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,04-1,97 (m, 2H) , 1,82-1,74 (m, 2H) a 1,66-1,42 (m, 6H) : MS (ESI (-) ) m/z 309 [M-H]^-, C19H19FN2O vypočteno C,

73,53, H, 6,17, N, 9,03. Změřeno: C, 73,33, H, 6,07, N, 8,83.

Příklad 46

5'- (2-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)-onoxim

5'-bromspiro{cyklohexan-1,3'-[3H]indol}-2' (l'H)-on-2' (0benzyloxim)

9,0 g (28,98 mmol) 5'-brom-2'-(methylthio)spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indolu] a 13,8 g (86,9 mmol) O-benzylhydrochloridu hydroxylaminu bylo smícháno ve 150 ml methanolu a směs byla zahřívána na 45°C po dobu 6 hodin. Methanol byl evaporován ve vakuu. Ke zbytku byl přidán ethylacetát a tato směs byla promyta roztokem chloridu amonného. Ethylacetát byl usušen nad sulfátem hořečnatým, ethylacetát evaporován ve vakuu a zbytek byl podroben velmi rychlé chromatografií na alumině 90 (9:1, směs hexanu a EtOAc) za vzniku 6,5 g (60 %) požadovaného produktu. ^ΧΗ NMR (DMSO-ds, 300 MHz) δ 1,38-1,70 (m, 8H) , 1,92-2,06 (m, 2H) , 5,06 (s, 2H) , 6,71 (d, 1H, J =

8,26 Hz), 7,22-7,43 (m, 7H), 9,62 (s, 1H).

• ·· · · · ···· ·· ·· • ·· · ·«··

112

Postup A

5'-(2-fluorfenyl)-spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol] -2' (1H)-on2-(O-benzyloxim)

1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]2'(l'H)-on-2'(O-benzyloximu) a 0,14 g (0,12 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) byly míchány v dusíkové atmosféře ve 23 ml ethylenglykoldimethyletheru. Po 15 minutách bylo přidáno 0,72 mg (5,2 mmol) 2-fluorfenylboronové kyseliny, pak následovalo 1,6 g (15,6 mmol) uhličitanu sodného v 6,0 ml vody. Reakce byla přes noc zahřívána k varu pod zpětným chladičem, ochlazena na teplotu místnosti a filtrována přes sloupec Celíte. Byl přidán saturovaný chlorid amonný. Vodná vrstva byla extrahována 3x 100 ml ethylacetátu. Spojené organické vrstvy byly usušeny (MgSO₄) , filtrovány a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10:0,5 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,75 g (1,8 mmol, 72 %) požadované cílové sloučeniny jako viskózního oleje. ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) 5 1,44-1,73 (8H, m) , 1, 93-2,06 (2H, q) , 5,00 (2H, s), 6,88 (1H, d, J = 8,1 Hz), 7,24-7,38 (6H, m) , 7,44-7,56 (5H, m), 9,64 (1H, s), MS (ESI(+ ve)) m/z 399 [M-H]’.

Postup B

Roztok 0,55 g (1,37 mmol) 5'-(2-fluorfenyl)-spiro[cyklohexan-1, 3' - [3H] indol] -2' (1H) -on-2- (O-benzyloximu) v 15 ml ethanolu byl přidán k 0,11 g 10% palladia na uhlí v 10 ml ethanolu. Směs byla míchána ve vodíkové atmosféře (kulatá baňka) po dobu 24 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs byla filtrována přes sloupec Celite a filtrát byl koncentrován ve vakuu. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (směs hexanu a ethylacetátu, eluce gradientem), • · · · • · · · • · • · ··· · · ♦ • · · · · ···· · • · · · · · · ··· ··· ·♦ ·· ·· ee ····

113 za vzniku 0,45 g (1,12 mmol, 82 %) sloučeniny z názvu, tt. 200-203 °C, ^XH NMR (500 MHz, DMSO-d₆) 5 1,45-1,73 (8H, m) ,

1,96-2,00 (2H, q) , 6,83 (ÍH, d, J = 7,9), 7,23-7,50 (6H, m) ,

9,42 (ÍH, s), 9,58 (ÍH, s), MS (ESI(+ ve)) m/z 311 [M+H]⁺.

Příklad 47

5' - (4-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol-2' (ΓΗ) -onoxim

5' - (4-f luor fenyl) -spiro [cyklohexan-1, 3' - [3H] indol] -2' (l'H) -on2'(O-benzyloxim)

Připraven z 1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2'-(l'H)-on-2'(O-benzyloximu) a 0,72 g (5,2 mmol) 4-fluorfenylboronové kyseliny podle postupu A z příkladu 46. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10:0,5 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,70 g (1,7 mmol, 67 %) požadovaného produktu jako viskózního oleje. ^ΧΗ NMR (500 MHz, DMSO-dg) δ 1,42-1, 77 (8H,

m), 1,95-1,99 (2H, q), 5,00 (2H, s), 6,84 (ÍH, d, J = 8,1 Hz), 7,21-7,63 (ÍH, m) , 9,58 (ÍH, s), MS (ESI(-ve)) m/z 399 [M-H]'.

Produkt byl syntetizován s použitím 0,70 g (1,74 mmol) 5'(4-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2'-(l'H) -on2' (O-benzyloximu) podle postupu B z příkladu 46. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (směs hexanu a ethylacetátu, eluce gradientem) za vzniku 0,44 g (1,4 mmol, 81 %) sloučeniny z názvu, tt. 205-208°C, ¹H NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 1,43-1, 77 (8H, m), 2,00-2,05 (2H, q) , 6,80 (ÍH, d, J = 8,2 Hz), 7,21-7,24 (2H, m) , 7,33-7,35 (ÍH, dd, J = 1,9

Hz), 7,49 (1H, s), 7,60-7,63 (2H, m), 9,35 (ÍH, s), 9,56 (ÍH, s), MS (ESI(+ ve)) m/z 311 [M+H]⁺.

• ·

Příklad 48

114

5' - 4-dif luorf enyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) -onoxim

5' - (3, 4-di fluor fenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) on-2'(O-benzyloxim)

Připraven z 1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2'(1'H)-on-2'(O-benzyloximu) a 1,6 g (5,2 mmol)

3,4-difluorfenylboronové kyseliny (50% roztok kyseliny ve směsi THF a vody) podle postupu A z příkladu 46. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10:0,5 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,75 g (1,7 mmol, 69 %) požadovaného produktu jako viskózního oleje. ^XH NMR (500 MHz, DMSO-d₆) 5 1,41-1,78 (8H, m) , 1,95-1,99 (2H,

q) , 5,00 (2H, s), 6,82 (1H, d) , 7,28-7,46 (8H, m) , 7,58 (1H,

q), 7,67-7,71 (1H, m), 9,61 (1H, s), MS (ESI(-ve)) m/z 417 [ΜΗ].

Reakce 0,70 g (1,6 mmol) poslední uvedené sloučeniny podle postupu B z příkladu 46 poskytla 0,44 g (1,3 mmol, 80 %) sloučeniny z názvu, ^XH NMR (500 MHz, DMSO-dg) δ 1,42-1,79 (8H, m) , 2,01-2,05 (2H, q) , 6,78-6, 80 (1H, d) , 7,39-7,46 (3H, m) , 7,55 (1H, s), 7,70 (1H, m) , 9,10 (1H, s) , 9,59 (1H, s) , MS (ESI(+ ve)) m/z 329 [M+H]⁺.

Příklad 49

5' - (3-methoxyfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol-2' (l'H) -onoxim • · · · • · · ·

115

5' -(3-methoxyfenyl)-spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)on-2'(O-benzyloxim)

Připraven z 1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2'(1'H)-on-2'(O-benzyloximu) a 0,79 g (5,2 mmol)

3-methoxyfenylboronové kyseliny podle postupu A z příkladu 46. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10:0,5 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,80 g (1,9 mmol, 75 %) požadovaného produktu jako viskózního oleje. NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 1,43-1, 78 (8H, m) , 1, 95-2,00 (2H, q) , 3,80 (3H, s) , 5,00 (2H, s) , 6,82-6,86 (2H, m), 7,10-7,16 (2H, m) , 7,28-7,53 (10H, m), 9,57 (1H, s) , MS (ESI(-ve)) m/z 411 [M-H]“

Reakce 0,80 g (1,9 mmol) poslední uvedené sloučeniny podle postupu B z příkladu 46 poskytla 0,48 g (1,4 mmol, 77 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky. tt. 101-104°C, ¹H NMR (500 MHz, DMSO-dg) δ 1,44-1,78 (8H, m), 1,99-2,03 (2H, q) , 3,81 (3H, s), 6,78 (1H, d) , 6,85 (1H, d) , 7,10-7,16 (2H, m) , 7,307,38 (2H, m) , 7,50 (1H, d) , 9,35 (1H, s) , 9,56 (1H, s), MS (ESI(+ ve)) m/z 323 [M+H]⁺.

Příklad 50

5'-(3-nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(1'H)-onoxim

5'-(3-nitrofenyl)-spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1' H)-on2'(O-benzyloxim)

Připraven z 1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H] indol}-2' (1Ή) -on-2' (O-benzyloximu) a 0,86 g (5,2 mmol) 3nitrofenylboronové kyseliny podle postupu A z příkladu 46. Purifikace velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10:0,5 směs hexanu a ethylacetátu) poskytla 0,60 g (1,4 mmol, 55 %) požadované sloučeniny jako viskózního oleje. ¹H NMR (500 • · · φ φ

116 • · ·

MHz, DMSO-dg)	δ 1,42-1,82	(8H, m), 2,02-2,04	(2H, q), 5,01	(2H,
s), 6,88 (1H,	d), 7,28-7	,71 (8H, m) , 8,08-8	,13 (2H, m) ,	8,38
(1H, d), 9,69	(1H, s), MS	(ESI(-ve)) m/z 426	[M-H].
Postup C
0,54 g	(1,26 mmol)	poslední uvedené	sloučeniny	bylo

rozpuštěno ve 25 ml suchého methylenchloridu a ochlazeno na -78 °C v dusíkové atmosféře. Po kapkách bylo přidáno 3,8 ml (3,8 mmol) 1,OM bromidu boritého v methylenchloridu po dobu 5 minut. Po 30 minutách byla reakce zastavena 5 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti, vrstvy byly odděleny a vodná vrstva byla extrahována methylenchloridem. Spojené organické vrstvy byly usušeny (Na₂SO₄), filtrovány a rozpouštědlo bylo odstraněno ve vakuu. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 8:1 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,33 g (0,9 mmol, 78 %) sloučeniny z názvu. tt. 221-224 °C, ^XH NMR (500 MHz, DMSO-dg) δ 1,42-1,83 (8H, m) , 1,99-2,07 (2H, q) , 6, 84-6,85 (1H, dd) ,

7,50-7,52 (1H, m), 7,67-7,71 (2H, m), 8,08-8,12 (2H, m), 8,378,38 (1H, d) , 9,48 (1H, s) , 9,64 (1H, s) , MS (ESI (+ ve)) m/z 338 [M+H]⁺.

Příklad 51

5'-(3-kyanofenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)-onoxim

3-[spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-(1'H)-on-2'(O-benzyloxim)]benzonitril[3H]indol]-5-yl]benzonitrii

Připraven z 1,0 g (2,6 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[ 3H]indol}-2'(1'H)-on-2' (O-benzyloximu) a 0,76 g (5,2 mmol)

3-kyanofenylboronové kyseliny podle postupu A z příkladu 46.

117

Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 10: 0,5 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,75 g (1,8 mmol, 71 %) požadovaného produktu jako viskózního oleje. ^XH NMR (500 MHz, DMSO-d₆) δ 1,41-1,81 (8H,

m) , 1, 96-2,03 (2H, q) , 5,01 (2H, s) , 6,86 (1H, d) , 7,28-7,33 (9H, m) , 7,95-7,97 (1H, d) , 8,12 (1H, s) , 9,65 (1H, s) , MS (ESI(-ve)) m/z 406 [M-H]'.

Reakce 0,17 g (0,43 mmol) poslední uvedené sloučeniny a 1,2 ml (1,2 mmol) bromidu boritého podle postupu C z příkladu

50 poskytla 0,06 g	0,2	mmol, 47 %	) sloučeniny	z názvu jako
bílé pevné látky,	tt.	198-200°C,	¹H NMR	(500	MHz, DMSO-d₆)
δ 1,41-1,80 (8H, m) ,	1, 97	-2,04 (2H,	q), 6,80	(1H,	q), 7,45-7,69
(4H, m), 7,93-7,95	(1H,	dd), 8,10	(1H, s),	9, 42	(1H, s), 9,59
(1H, s) , (ESI(+ ve))	m/z	318 [M+H]⁺.

Příklad 52

3-[1',2'-dihydro-2'-(hydroxyimino)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-5'-yl]-5-fluorbenzonitril

K roztoku 0,4 g (2,0 mmol) 3-fluor-5-kyanobrombenzenu v 10 ml suchého DMF bylo přidáno 0,63 g (2,5 mmol) dibórpinakolátesteru, 0,65 g (6,7 mmol) acetátu draselného a 0,2 g PdCl₂ (dppf) a reakce byla zahřívána na 80 °C v dusíkové atmosféře. Po 8 hodinách bylo přidáno 0,2 g (0,5 mmol) 5'bromspiro{cyklohexan-1,3'-[3H]indol}-2'(l'H)-on-2'(O-benzyloximu) , 0,05 g PdCl₂ (dppf) a 1,30 g (12,5 mmol) uhličitanu sodného a zahřívání v 80 °C pokračovalo. Po 8 hodinách byla reakce ochlazena a rozdělena mezi vodu a ethylacetát, organická vrstva byla promyta solankou, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu 1:20) za vzniku 0,14 g (0,33 mmol, 66 %) požadovaného produktu.

• ·· · ·· · ···

118

Reakce 0,14 g (0,33 mmol) poslední uvedené sloučeniny a 1,0 ml (1,0 mmol) bromidu boritého podle postupu C z příkladu 50 poskytla 0,019 g (0,05 mmol, 17 %) sloučeniny z názvu: ^XH NMR (300 MHz, DMSO-d₆) 6 9,65 (s, 1H) , 9,49 (s, ÍH) , 8,04 (m, ÍH), 7,89 (dt, ÍH, J = 10,5 a 2 Hz), 7,72-7,68 (m, 2H) , 7,54 (d, ÍH, J = 8,1 Hz), 6,80 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,84-1,76 (m, 2H) a 1,65-1,44 (m, 6H) , MS (ESI(+ ve)) m/z 336 [M+H]⁺.

Příklad 53

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)4-methyl-2-thiofenkarbonitril

4-methyl-5-trimethylstannanyl-thiofen-2-karbonitril

Připraven z 3,08 g (15,2 mmol) 5-brom-4-methylthiofen-2karbonitrilu, 0,82 g (0,71 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0), 5,0 g (15,2 mmol) hexamethyldicínu a 20 ml ethylenglykoldimethyletheru v dusíkové atmosféře. Směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 14 hodin. Reakční směs byla koncentrována ve vakuu a purifikována velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 2% MeOH: methylenchlorid) za zisku požadovaného produktu 2,8 g 0,01 mmol, 67 %) jako řídkého oleje. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 0,41 (9H, s), 2,28 (3H, s), 7,83 (ÍH, s) .

0,20 g (0,50 mmol) poslední uvedené sloučeniny, 0,02 g dichlorbis(trifenylfosfin)palladia(II) a 0,03 g trifenylarsinu v 8,0 ml DME byly míchány v dusíkové atmosféře po dobu 20 minut. Bylo přidáno 0,18 g (0,64 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-1,3'-[3H]indol}-2' (1'H)on-2'(O-benzyloximu) ve 2,0 ml roztoku DME. Roztok byl přes noc zahříván k varu pod zpětným chladičem. Reakční roztok byl koncentrován ve vakuu a purifikován velmi rychlou (0,03 mmol) (0,13 mmol)

44*4 • · 4·· 4

119 chromatografií na silikagelu (eluent 12:1 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,10 g (0,25 mmol, 50 %) hrubého produktu, který byl použit bez další purifikace.

2,6 ml (2,6 mmol, l,0M roztok v methylenchloridu) bromidu boritého bylo přidáno k roztoku 0,37 g (0,86 mmol) posledního uvedeného produktu v 1,7 ml suchého methylenchloridu v -78°C. Roztok byl míchán po dobu 30 minut a reakce byla zastavena 10 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla usušena (Na₂SO₄) , filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku hrubého produktu, který byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 6:1 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,02 g (24 %) sloučeniny z názvu: tt. 173-176 °C, ¹H NMR (500 MHz, DMSO-de) 5 1,44-1,73 (8H, m) , 1,96-2,00 (2H, m) , 2,28 (3H, s),

6, 82-6, 84 (1H, m) , 7,24-7,26 (1H, dd, J = 1,7 Hz), 7,38 (1H, m) , 7,82 (1H, m) , 9,51 (1H, m) , 9,66 (1H, m) , MS (ESI(+ ve)) m/z 338 [M+H]⁺.

Příklad 54

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)2-thiofenkarbonitrii

K roztoku 1,0 g (9,16 mmol) 2-kyanothiofenu a 2,3 ml (10 mmol) triisopropylborátu ve 30 ml suchého THF v dusíkové atmosféře v -78 °C bylo po kapkách přidáno 10 ml (10 mmol) 1M hexamethyldisilazidu lithného v THF. Po 30 minutách byla reakce zastavena IN HC1, poté extrahována ethylacetátem, organická vrstva byla promyta vodou, usušena (Na₂SO₄) a evaporována za vzniku 1,25 g (8,17 mmol, 89 %) produktu, který byl použit bez další purifikace: ^XH NMR (500 MHz, DMSO-de) ·· ·9·· • * · « · · » · · 4 ·· ··

120 δ 8,75 (br s, 2Η), 7,97 (d, 1Η, J = 8 Hz) a 7,73 (d, 1H, J = 8 Hz): MS (ESI(-ve)) m/z 152 [M-H]^-.

Připraven z 0,91 g (5,95 mmol) posledního uvedeného produktu a 1,53 g (3,97 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2' (1'H)-on-2'(O-benzyloximu) podle postupu A z příkladu 46. Purifikace velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent: 5:1 směs hexanu a THF) poskytla 0,66 g (1,59 mmol) požadovaného produktu, který byl použit bez další purifikace: MS (ESI(-ve)) m/z 412 [M-H]^-.

Reakce 0,60 g (1,45 mmol) poslední uvedené sloučeniny a 5 ml (5 mmol) 1M bromidu boritého v dichlormethanu podle

postupu C z sloučeniny z	příkladu	50 NMR	poskytla 0,036 g	(0,11 δ 9,	mmol, 8 %) 71 (s, 1H),
názvu	: ^XH	(300	MHz, DMSO-dg)
9,62 (s, 1H),	7,92	(d,	1H,	J =	3, 9 Hz) , 7,63	(d,	1H, J = 1,5
Hz) , 7,54 (d,	1H,	J =	3,9	Hz) ,	7,47 (dd, 1H	, J =	= 8,1 a 1,6
Hz) , 6,78 (d,	1H,	J =	8,1	Hz) ,	2,13-1,90 (m,	2H)	a 1,78-1,60
(m, 6H): MS (ESI(+	ve) )	m/ z	324	[M+H]⁺.

Příklad 55

4- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)2-thiofenkarbonitril

4-(trimethylstannyl)-2-thiofenkarbonitril

Roztok 0,8 g (4,3 mmol) 3-brom-2-thiofenkarbonitrilu,

0,25 g (0,2 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) a 1,4 g (4,3 mmol) hexamethyldicínu v 5 ml dimethoxyethanu byl zahříván k varu pod zpětným chladičem po dobu 14 hodin, a poté ochlazen na teplotu místnosti. Reakční směs byla absorbována na florisil a purifikována chromatografií na koloně (SiO₂, směs methylenchloridu a hexanu 1:9) za vzniku 1,04 g (3,8 mmol, 90 %) sloučeniny z názvu jako čirého viskózníhó oleje: ^XH NMR «· »· • · · «

0,9 Hz, 1H) , 7,66 (d, J. = • Ml *· 44··

121 (CDC1₃) δ 0,35 (s, 9Η) , 7,56 (d, J 0,9 Hz, 1H).

K roztoku 1,65 g (4,28 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2'(1'H)-on-2'(O-benzyloximu), 1,48 g (5,44 mmol) 4(trimethylstannyl)-2-thiofenkarbonitrilu, 330 mg trifenylarsinu ve 20 ml suchého dimethoxyethanu v dusíkové atmosféře byl přidán bis(trifenylfosfin)palladium(II)chlorid a směs byla zahřívána k varu pod zpětným chladičem po dobu 16 hodin. Po ochlazení na teplotu místnosti byla směs evaporována a zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,61 g (1,47 mmol, 56 %) požadovaného produktu.

Reakce 0,61 g (1,47 mmol) poslední uvedené sloučeniny a

4,5 ml (4,5 mmol) bromidu boritého (1M v dichlormethanu) podle postupu C z příkladu 50 poskytla 0,084 g (0,26 mmol, 18 %) sloučeniny z názvu: ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 9,61 (s, 1H) , 9,42 (s, 1H) , 8,41 (s, 1H) , 8,18 (s, 1H) , 7,65 (s, 1H) , 7,48 (dd, 1H, J = 8,1 a 0,9 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 8,1 Hz), 2,031,96 (m, 2H) a 1,78-1,42 (m, 6H) : MS (ESI ( + ve)) m/z 324 [M+H]⁺.

Příklad 56

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)lH-pyrol-l-methyl-2-karbonitril terc-butylester 2-{5'[spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-(l'H)on-2'(O-benzyloxim)]}-ΙΗ-pyrol-l-karboxylové kyseliny

Roztok 7,4 g (19,17 mmol) 5'-bromspiro{cyklohexan-l,3'[3H]indol}-2'(l'H)-on-2'(O-benzyloximu) a 2,5 g (2,00 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladia(0) ve 100 ml DME byl míchán v dusíkové atmosféře po dobu 15 minut. K roztoku bylo přidáno

5,5 g (26 mmol) 1-terc-butoxykarbonylpyrolboronové kyseliny a

9999 ·· ··*· »

• · ·· ·« • 9 • 9 • 9 • · 9

9 • • ·

9 « « 9 • 9

9

9999

122 ml 1M uhličitanu sodného. Směs byla zahřívána na 80 °C po dobu 6 hodin a ponechána vychladnout. Reakční směs byla nalita do vody a extrahován 3x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny a usušeny nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován velmi rychlou chromatografií se silikagelem (4,5:1 směs hexanu

a ethylacetátu)	za vzniku 7,7 g	(88	%) produktu	jako bílé
pevné látky. ^XH	NMR (DMSO-d₆, 300	MHz)	δ 1,28 (s,	9H), 1,55-
1,66 (m, 8H), 1	,83-1,98 (m, 2H),	4,99	(s, 2H), 6,	12-6,14 (m,

1H) , 6,22 (t, 1H, J = 3,26 Hz), 6,76 (d, 1H, J = 7,9 Hz), 7,02 (dd, 1H, J = 7,98, 1,4 Hz), 7,19 (s, 1H) , 7,27-7,31 (m, 2H) ,

7,35 (t, 1H, J = 6,8 Hz), 7,43 (d, 1H, J = 8 Hz), 9,55 (s, 1H) .

Terc-butylester 5'-(l-terc-butoxykarbonyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(1'H)-on-2' (O-benzyloxim)-1' karboxylové kyseliny

K roztoku 7,7 g (16,38 mmol) terc-butylesteru 2-{5'[spiro[cyklohexan-1,3’ - [3H] indol] - (1Ή) -on-2' (O-benzyloxim) ] } -1Hpyrol-l-karboxylové kyseliny ve 100 ml bezvodého THF bylo přidáno 0,665 g (17 mmol) hydridu sodného. Když ustal vývoj vodíku, bylo přidáno 10,9 g (50 mmol) di-terc-butyldikarbonátu a 0,20 g DMAP a reakce byla míchána v 65 °C po dobu 18 hodin. Reakční směs byla nalita do vody a extrahována ethylacetátem. Organické vrstvy byly spojeny a usušeny nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu, za vzniku 9,0 g (15,76 mmol) produktu, který byl vzat přímo do dalšího kroku.

K roztoku 9,0 g (15,76 mmol) terc-butylesteru 5'-(l-tercbutoxykarbonyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]2'-(1'H)-on-2'(O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny v 75 ml bezvodého THF v -78° C bylo přidáno 1,55 ml (17,54 mmol) chlorsulfonylisokyanátu. Po 90 minutách bylo přidáno 21 ml • 4 • ·

44 ·

123* (275 mmol) DMF a reakce byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Reakce byla nalita do 200 ml vody a extrahována 2x 100 ml ethylacetátu. Organické vrstvy byly spojeny a usušeny nad sulfátem hořečnatým, filtrovány a koncentrovány ve vakuu. Purifikace velmi rychlou chromatografií na koloně se silikagelem (10% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 7,6 g (82 %) terc-butylesteru 5'-(5-kyano-l-terc-butoxykarbonyl-lHpyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-on-2^ř (0benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny jako bílého prášku. ¹H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) δ 1,30 (s, 9H) , 1,38 (s, 9H), 1,58-1,83 (m, 8H), 1,72-1,73 (m, 2H) , 5,0 (s, 2H) , 6,44-6,45 (d, IH, J =

3,76) , 7,25-1,46 (m, 10H) .

terc-butylester 5'-(5-kyano-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-on-2'(O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny

K roztoku 7,6 g (3,25 g, 48 mmol) terc-butylesteru 5'-(5kyano-l-terc-butoxykarbonyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan1,3'-[3H]indol]-2'(l'H)-on-2'(O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny ve 30 ml bezvodého THF byl přidán roztok ethoxidu sodného ve 120 ml ethanolu. Reakční směs byla zahřívána na 80 °C a míchána přes noc. Směs byla ochlazena na teplotu místnosti a koncentrována ve vakuu. Zbytek byl rozpuštěn v ethylacetátu a promyt vodou, solankou a usušen nad sulfátem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo evaporováno ve vakuu za vzniku

6/1	g (95	%)	produktu. ^ΧΗ NMR (DMSO,	500 MHz) δ	1,38 (s	Z	9H) ,
1, 63	-1,74	(m,	8H) ,	1,88-1,97 (m, 2H) ,	/ 5,08 (s,	2H), 6,	69	-6,7
(d,	IH, J	= /8	Hz) ,	6,98-6,99 (d, IH,	J =,7 Hz),	7,29-7,	37	(m,
IH) ,	7,35	(m,	2H) ,	7,42 (m, 3H), 7,63	(dd, IH,	J = 1,8,	3	Hz) ,

7,76 (d, IH, J =,4 Hz).

• · · · ····

124

Terc-butylester 5'-(5-kyano-l-methyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny

K 6,1 g (12,29 mmol) terc-butylesteru 5'-(5-kyano-lHpyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (l'H)-on-2' (0benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny v 75 ml DMF bylo přidáno

6.5 g (47 mmol) uhličitanu draselného a 1 ml (15,4 mmol) Mel a reakční směs byla míchána při teplotě místnosti po dobu

2.5 hodiny. Reakční směs byla nalita do vody a extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou a rozpouštědlo bylo koncentrováno ve vakuu za vzniku 6,1 g (12,29 mmol) požadovaného produktu, který byl přenesen do příštího kroku bez další purifikace. ¹H NMR (DMSO, 300 MHz) δ 1,38 (s, 9H), 1,62-1,98 (m, 10H) , 3,71 (s, 3H) , 5,08 (s, 2H) , 6,34 (d, 1H, J = 4,1), 7,03 (d, 1H, J = 3,99), 7,30-7,53 (m, 8H) .

- {5'-spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-(1'H)-on-2' (O-benzyloxim)]}-lH-pyrol-l-methyl-2-karbonitril

6,1 g (12,29 mmol) terc-butylesteru 5'-(5-kyano-l-methyllH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny bylo rozpuštěno v 5 ml dioxanu a bylo přidáno 10 ml 4M HCl v dioxanu a reakce byla zahřívána na 45 °C po dobu 3,5 hodin. Směs byla opatrně neutralizována hydrouhličitanem sodným (saturovaným). Reakční směs byla nalita do vody a extrahována ethylacetátem. Organická vrstva byla promyta solankou a usušena nad sulfátem hořečnatým. Rozpouštědlo bylo evaporováno ve vakuu. Purifikace chromatografií na koloně se silikagelem (5% směs ethylacetátu a hexanu) poskytla 4,36 g (94 %) produktu. ¹H NMR (DMSO-dg, 300 MHz) δ 1,57-1,7 (m, 8H), 1,9-2,05 (m, 2H), 3,68 (s, 3H) , 5,00 (s, 2H) , 6,25 (d, 1H, J = 3, 92), 6, 85 (d, 1H, J = 8,03), 7,00 (d, 1H, J = 4,08), 7,2-7,44 (m, 7H), 9,7 (s, 1H).

125

Κ 4,36 g (10,6 mmol) 5-{5'-spiro[cyklohexan-1,3'[3H] indol] - (1Ή) -on-2' (O-benzyloxim) ] }-lH-pyrol-l-methyl-2karbonitrilu v 50 ml methylenchloridu bylo přidáno 35 ml 1M bromidu boritého v methylenchloridu v -78° C. Reakční směs byla ponechána zahřát se na teplotu místnosti. Po 4 hodinách byla reakční směs zastavena 100 ml saturovaného hydrouhličitanu sodného. Organická vrstva byla sebrána a vodná vrstva byla extrahována 2x 100 ml ethylacetátu, organická vrstvy byly spojeny, promyty solankou, usušeny nad sulfátem hořečnatým a rozpouštědlo bylo evaporováno ve vakuu. Zbytek byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (7:3 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 1,35 g (40 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky. ¹H NMR (DMSO-d6, 300

MHz)	δ 1,58-1,71	(m, 8H) ,	1,99-2,00
(d,	1H, J = 4,07	Hz), 6,8	(d, 1H, J
= 4,	01 Hz), 7,20	(dd, 1H,	J = 8,04,
1,12	Hz) , 9,48 (s	, 1H), 9,	62 (s, 1H)

8,05 Hz), 6,99 (d, 1H, J

Příklad 57

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)lH-pyrol-2-karbonitril

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3]indol]-2'(1H)-(O-benzyloxim))-1Hpyrol-2-karbonitril

Připraven z 0,395 g (0,796 mmol) terc-butylesteru 5'-(5kyano-lH-pyrol-2-yl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (l'H)on-2'(O-benzyloxim)-1'-karboxylové kyseliny rozpuštěného ve 2 ml THF a 10 ml 4M HCI ve směsi dioxanu a vody. Podle postupu použitého pro přípravu 5-{5'-spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol](l'H)-on-2'(O-benzyloxim)]}-lH-pyrol-l-methyl-2-karbonitrilu bylo získáno 0,220 g (0,745 mmol, 95 %) požadovaného produktu. ^XH NMR (DMSO-dg, 500 MHz) δ 1,44-1,50 (m, 1H) , 1,61-1,70 (m, • · · · • · · · • · · ♦ · ···· * ··· · · · · · · · ··· ·· »· ·· ······

126

7H) , 1,94-1,99 (m, 2H) , 5,0 (s, 2H) , 6,55 (d, 1H, J = 4 Hz), 6,79 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,95 (d, 1H, J = 4 Hz), 7,27-7,31 (m, 1H), 7,34-7,37 (m, 2H) , 7,42-7,43 (m, 2H) , 7,47 (dd, 1H, J = 8,0, 1,4 Hz), 7,65 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 9,65 (s, 1H) , 12,4 (s, 1H) .

Sloučenina z názvu byla připravena z 0,325 g (0,82 mmol) 5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3]indol]-2'(1H)-(O-benzyloxim))-1Hpyrol-2-karbonitrilu a 6 ml 1M bromidu boritého v methylenchloridu podle postupu pro 5-(spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)-lH-pyrol-l-methyl-2-karbonitril, za vzniku 0,110 g (0,326 mmol, 44 %) produktu jako špinavě bílé pevné látky. ¹H NMR (DMSO-d₆, 500 MHz) δ 1,46-1,5 (m, 1H), 1,62-1,71 (m, 7H), 1,95-2,05 (m, 2H), 6,55 (d, 1H, J = 4,0 Hz), 6,75 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,94 (d, 1H, J = 3,47 Hz), 7,45 (dd, 1H, J = 8,1, 1,73 Hz), 7,63 (d, 1H, J = 1,73), 9,42 (s, 1H), 9,59 (s, 1H), 12,39 (s, 1H).

Příklad 58

4-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(acetoxyimino)-5'-yl)2-thiofenkarbonitril

K roztoku 2,21 g (6,83 mmol) 4-(spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)-2-thiofenkarbonitrilu a 1 ml acetanhydridu v 30 ml směsi dichlormethanu a pyridinu (9:1) bylo přidáno 250 mg 4-dimethylaminopyridinu při teplotě místnosti. Po 3 hodinách byla směs naředěna dichlormethanem, promyta vodou, naředěnou kyselinou chlorovodíkovou, vodou, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (směs EtOAc a hexanu, eluce gradientem) za vzniku 0,84 g (2,29 mmol, 33 %) sloučeniny z názvu jako bílé pevné látky: MS (ESI (+ ve)) m/z 366 [M+H]⁺.

Příklad 59

127

3-fluor-N' -hydroxy-5-[2'-(hydroxyamino)spiro[cyklohexan-1, 3' [3H]indol]-5'-yl]benzenkarboximidamid

5'-(3-kyano-5-fluorfenyl)-2-(methylthio)spiro[cyklohexan-1, 3' [3H]indol]

Připraven z 0,451 g (1,34 mmol) 3-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-5-fluorbenzonitrilu podle postupu popsaného v příkladu 43 za vzniku 0,316 g (0,90 mmol, 67 %) požadovaného produktu: ^XH NMR (DMSO, 300 MHz) δ 7,74 (d, IH, J = 1,7 Hz), 7,68 (t, IH, J = 1,4 Hz), 7,58 (d, IH, J = 8,0 Hz), 7,54 (t, IH, J = 2,3 Hz), 7,50 (dd, IH, J = 8,0 a 1,9 Hz), 7,33-7,29 (m, IH), 2,67 (s, 3H), 2,04-1,78 (m, 7H) a 1,58-1,50 (m, 3H), MS (ESI(+ ve)) m/z 351 [M+H]⁺.

K roztoku 0,30 g (0,88 mmol) posledního uvedeného produktu v 10 ml DMSO byl přidán 1 ml hydroxylaminu (50% vodný roztok) a reakce byla zahřívána na 120 °C. Po 1 hodině byla směs ochlazena, rozdělena mezi saturovaný vodný chlorid amonný a ethylacetát. Organická vrstva byla promyta vodou, solankou, usušena (MgSO₄) a evaporována. Zbytek byl purifikován chromatografií na koloně (SiO₂, 5% MeOH v dichlormethanu) za vzniku 0,079 g (0,23 mmol, 26 %) sloučeniny z názvu jako bílé pěny: ^XH NMR (DMSO, 300 MHz) δ 9,79 (s, IH) , 9,61 (s, IH), 9,42

(s, IH), 7,73	(s,	IH) , 7,61 (d, IH, J = 1,3	Hz), 7,46	(dd, IH,
J = 8,3 a 1,5	Hz)	, 7,34 (d, IH, J = 10 Hz)	, 6,81 (d,	IH, J =
8,0 Hz) , 6, 01	(s,	2H) , 2,11-2,02 (m, 2H) a	1,81-1,56	(m, 8H) :

MS (ESI(+ ve)) m/z 369 [M+H]⁺.

Příklad 60

• · 4 · 44 44··

128

Ν'-hydroxy-5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino) -5'-yl)-4-methyl-2-thiofenkarboximidamid

4-methyl-5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(methylthio)5'-yl]-2-thiofenkarbonitril

K 0,32 g (2,6 mmol) terc-butoxidu draselného v THF bylo přidáno 0,84 g (2,5 mmol) 5-(1',2'-dihydro-2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-5'-yl)-4-methyl-2-thiofenkarbonitrilu. Po 15 minutách bylo přidáno 0,50 g (3,48 mmol) methyljodidu. Po 3 hodinách byla reakce nalita do chloridu amonného (saturovaného) a extrahována ethylacetátem. Organické vrstvy byly spojeny a usušeny nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu a zbytek byl purifikován velmi rychlou chromatografií se silikagelem (4:1 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,530 g (85 %) požadovaného produktu. (DMSO, 300 MHz) δ 1,48 (m, 3H) , 1,70 (m, 2H) , 1,81 (m, 5H) ,

2,32 (s, 3H), 2,62 (s, 3H) , 7,48 (dd, 1H, J = 7,87 Hz, 1,46 Hz), 7,5 (d, 1H, J = 8,05 Hz), 7,77 (d, 1H, J = 1,46 Hz), 7,88 (s, 1H).

K 0,450 g (1,3 mmol) 4-methyl-5-(spiro[cyklohexan-l,3'[3H]indol]-2'-(methylthio)-5'-yl]-2-thiofenkarbonitrilu v 1 ml DMSO byly přidány 2 ml hydrochloridu hydroxylaminu (50% roztok ve vodě) a roztok byl zahříván na 100 °C po dobu 2,5 hodiny. Byla přidávána voda, dokud se roztok nestal slabě turbidní, a pak byla směs ponechána vyhladnout na teplotu místnosti. Bílá pevná látka byla filtrována, sebrána a rozpuštěna v ethylacetátu a usušena nad sulfátem hořečnatým. Roztok byl filtrován, koncentrován ve vakuu, za vzniku 0,320 g (69 %) . (DMSO-dg, 500 MHz) δ 1,4-1,74 (m, 8H) , 1,94-2,4 (m, 2H) , 2,54 (s, 3H), 5,8 (s, 1H), 6,79 (d, 1H, J = 8,0), 7,16 (dd, 1H, J =

129

8,12, 1,83), 7,39 (m, 2H) , 9,42 (s, 1H) , 9,56 (s, 1H) , 9,58 (s, 1H).

Příklad 61

N'-hydroxy-4-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'- (hydroxyimino) -5'-yl-2-thiofenkarboximidamid

0,077 g (0,237 mmol) 4-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]2'-(methylthio)-5'-yl]-2-thiofenkarbonitrilu reagovalo s 1 ml 50% roztoku hydroxylaminu podle postupu z příkladu 60 za vzniku 0,016 g (0,044 mmol, 20 %) sloučeniny z názvu. MS (ESI, (+VE)) m/z 357 [M+H]⁺.

Příklad 62

Ν'-hydroxy-5-(spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-2' -(hydroxyimino) -5'-yl)-2-thiofenkarboxidamid

Sloučenina z názvu byla připravena z 0,500 g (1,5 mmol) 5(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(methylthio)-5'-yl]-2thiofenkarbonitrilu a 2 ml (nadbytek) 50% roztoku hydroxylaminu podle postupu z příkladu 60, za vzniku 0,200 g (0,56 mmol, 56 %) produktu. ^XH NMR (DMSO-d6, 500 MHz) δ 1,45-

1,75	(m,	8H) ,	1/	97-2,06 (m, 2H), 5,89	(s, 1H), 6,74	(d, 1H, J
= 8	Hz) ,	7,3	(d,	1H, J = 3,9 Hz), 7,34	(dd, 1H, J =	8,06, 1,46
Hz) ,	7,4	(d,	1H,	J = 8,0 Hz), 7,5 (d,	1H, 1,95 Hz)	, 9,44 (s,
1H),	9,58	(s,	1H)	, 9,6 (s, 1H).

• · • · · · • · · · · *

130

Příklad 63

5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-kyanamid

5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-amin

K turbidnímu roztoku 0,500 g (1,53 mmol) 5'—(3— chlorfenyl)-n-hydroxyspiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2-aminu ve 25 ml ethanolu bylo přidáno 0,600 ml (12,24 mmol) hydrazinhydrátu. Roztok byl zahříván na 55°C, kdy byl do reakce přidán Raneyův niklový katalyzátor (50% ve vodě) pro udržení konstantního vývoje plynu. Po 45 minutách byla horká reakční směs filtrována přes sloupec Celíte a promyta velkým množstvím horkého methanolu. Filtrát byl koncentrován ve vakuu za vzniku 0,890 g tmavé pevné látky. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (eluent, 2% až 8% směs methanolu a methylenchloridu s 0,1% hydroxidem amonným) za vzniku 0,310 g (65 %) požadovaného produktu jako bílé pevné látky. tt. 118-120 °C C. ^XH NMR δ (300 MHz, DMSO-d₆) 1,31-1,46 (m, 2H), 1,70-1,93 (m, 8H) , 7,0 (d, 1H) , 7,1 (br, 2H, 2NH) ,

7,31-7,34 (dt, 1H, J= 8 Hz), 7,41-7,46 (t, 2H), 7,55-7,58 (d, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), MS (ECI(+ve)) m/z 311 [M+H]⁺.

l-terc-butoxykarbonyl-5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'-amin

K roztoku 0,310 g (0,96 mmol) 5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2'-aminu v suchém methylenchloridu při teplotě 0 °C bylo přidáno 0,252 g (1,15 mmol) diterc-butyldíkarbonátu a 0,117 g (0,96 mmol) 4-dimethylaminopyridinu. Roztok byl ponechán zahřát se na teplotu místnosti a míchán 24 hodin. Reakční roztok byl naředěn 50 mi vody a vrstvy byly odděleny. Organická vrstva byla usušena nad Na₂SO₄, filtrována a koncentrována ve vakuu za vzniku 0,355 g žlutého oleje. Produkt byl purifikován velmi rychlou

131 chromatografií na silikagelu (eluent, 1% až 3% směs methanolu a methylenchloridu) za vzniku 0,081 g (20 %) požadovaného produktu jako bílé pevné látky, ¹H NMR δ (300 MHz, DMSO-dg) 1,58 (m, 2H), 1,63 (s, 9H, Boc), 1,77-1,79 (m, 8H), 7,42-7,48 (m, 2H) , 7,64-7,68 (m, 3H) , 7,70-7,80 (m, 2H) , 9,72 (s, 1H,

NH). MS (ECI(+ve)) m/z 411 [M+H]⁺.

0,120 g (0,29 mmol) 1'-terc-butoxykarbonyl-5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-aminu ve 2,0 ml suchého DMF bylo přidáno k roztoku 0,089 g (0,73 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a 0,077 g (0,73 mmol) bromkyanu ve 4,0 ml suchého DMF při teplotě 0 °C. Žlutý roztok byl zahříván na 40 °C po dobu 16 hodin. Zpracování obsahovalo nalití reakčního roztoku do 50 ml 0,lN NaHCCh a extrakci 3x 50 ml ethylacetátu. Spojené organické vrstvy byly usušeny nad bezvodým Na2SO₄, filtrovány a koncentrovány ve vakuu za vzniku 0,091 g žlutého zbytku. Produkt byl purifikován velmi rychlou chromatografií na silikagelu (postupný gradient 5:1 až 3:1 směs hexanu a ethylacetátu) za vzniku 0,031 g (32 %) produktu jako jasně žluté pevné látky. tt. 225°C (rozklad). ^XH NMR δ (500 MHz, DMSO-d₆) 1,46-1,73 (m, 8H) , 1, 89-1, 90 (m, 2H), 7,137,16 (d, 1H), 7,38-7,41 (dt, 1H, J = 8 Hz), 7,45-7,50 (m, 1H) ,

7,60-7,63 (dd, 2H, J = 6,4 Hz), 7,71 (s, 1H) , 7,85 (s, 1H) ,

12,1 (s, 1H, NH), MS (ECI(-ve)) m/z 336 [M-H].

Další žádoucí sloučeniny, které mohou být vytvořeny podle metod popsaných v tomto textu, zahrnují sloučeniny:

5'-(3-kyano-5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'kyanamid,

5'-(5-kyano-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2kyanamid,

5'-(5-kyano-l-methyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'-kyanamid,

4444

132

44 4 • · 4 4 • 4 4 4

44

444 4

5'-(5-kyanothiofen-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'kyanamid,

5'-(5-kyano-3-methylthiofen-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2'-kyanamid,

5'-(5-kyanothiofen-3-yl)spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-2' kyanamid,

3- (2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl])-5fluorbenzonitril,

5-(2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl])-1Hpyro1-2-karbonitrii,

5- (2' -kyanomethylenspi.ro [cyklohexan-1, 3' - [3H] indol-5' -yl] ) -1methyl-lH-pyrol-2-karbonitril,

5-(2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5' -yl])thiofen-2-karbonitril,

5-(2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5' -yl])-4methylthiofen-2-karbonitril,

4- (2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol-5'-yl])thiofen-2-karbonitril.

Všechny publikace citované v tomto popisu byly zahrnuty do předkládané přihlášky formou odkazu. Zatímco vynález byl popsán s odkazy na konkrétní výhodná provedení, je jasné, že mohou být vytvořeny modifikace, a to bez odchýlení se od vynálezecké myšlenky. Tyto modifikace spadají do rozsahu vynálezu, definovaného připojenými patentovými nároky.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

133 • A A A A A »A ·A AA AAA 1

1. Sloučenina vzorce:

kde:

Ri a R₂ jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina, skupina OH, skupina 0(alkyl), skupina 0(alkyl) substituovaná na alkylové skupině, skupina OAc, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, alkylarylová skupina, alkylheteroarylová skupina, 1-propynylová skupina a 3-propynylová skupina:

nebo Ri a R₂ jsou spojeny a vytvářejí kruh obsahující jednu z následujících skupin: skupina -CH₂ (CH₂)_nCH₂-, skupina -CH₂CH₂C (CH₃) ₂CH₂CH₂-, skupina -0 (CH₂) _mCH₂-, skupina -O(CH₂)_PO-, skupina -CH₂CH₂OCH₂CH₂-, skupina -CH₂CH₂N (H) CH₂CH₂- nebo -CH₂CH₂N (alkyl) CH₂CH₂-, m je celé číslo 1 až 4, n je celé číslo 1 až 5, p je celé číslo 1 až 4 nebo

Ri a R₂ společně obsahují dvojnou vazbu se skupinami -C(CH₃)₂, skupina C(cykloalkyl), 0 nebo skupina C(cykloether),

R3 je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, skupina OH, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, alkynylová skupina, substituovaná alkynylová skupina a skupina C0R^A,

134

R^A je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R₄ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupině CN, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná až 6 atomů uhlíku, aminoalkylová 6 atomů uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 skupina obsahující 1 až aminoalkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku,

R₅ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří a), b) a c): a) substituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X, Y a Z, jak je ukázáno níže:

substituovaná

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina OH, skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná až 3 atomy uhlíku, thioalkylová atomy uhlíku, substituovaná obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

S (0) ₂-alkylová skupina, aminoalkylová až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 skupina obsahující 1 až thioalkylová skupina S(0)alkylová skupina, skupina obsahující 1 aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

135

* · ·· 9 99 9999 99 99 9 9 9 9 9 9 9 • « 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 99 99 99 99 9 9 9 99 9

heterocyklický kruh s 5 nebo 6 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON (alkyl) ₂, skupina CSN (alkyl) ₂, skupina COR^B, skupina OCOR^B a skupina NR^cCOR^B,

R^B je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R^c je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y a Z jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde ne všechny X, Y a Z jsou H,

b) heterocyklický kruh s pěti nebo šesti členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1, 2 nebo 3 heteroatomy vybrané ze skupiny, kterou tvoří 0, S, skupina SO, skupina S0₂ a skupina NRg a obsahující jeden nebo dva nezávislé substituenty vybrané ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina COR^D a skupina NR^EC0R^D, R^d je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina •4 4444

4 4

136

44 obsahuj ící obsahující obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R^e je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, R_g je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo

c) indol-4-ylová skupina, indol-7-ylová skupina nebo benzo-2thiofenová skupina, skupina je volitelně substituovaná 1 až 3 substituenty vybranými ze skupiny, kterou tvoří halogen, nižší alkylová skupina, skupina CN, skupina N0₂, nižší alkoxyskupina a skupina CF₃,

Q¹ je S, skupina NR₇ nebo skupina CRgRg,

R₇ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná heterocyklické skupina, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina, skupina SO₂CF₃, skupina OR¹¹ a skupina NR^1:LR¹², R₈ a Rg jsou nezávislé substituenty vybrané ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná heterocyklické skupina, skupina N0₂, skupina CN a skupina C0₂Rio,

R₁₀ je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo CRgRg je kruh se šesti členy, jak je ukázáno strukturou uvedenou níže ·· 9999 • •ř*·

9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 9

999 99 99 99 99 9999

R¹¹ a R^1Z jsou nezávisle vybrány ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heteroarylová skupina, substituovaná heteroarylová skupina, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina a sulfonylová skupina nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

nebo kde:

R₃ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, skupina OH, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 3 až 6 atomů uhlíku, alkynylová skupina, substituovaná alkynylová skupina a skupina COR^A,

R^A je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, ··· ·

138 • · · <

• · · · • · · · « ř · 9 9 · 4 ·· «· *· • 9 9999

R₄ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina NH₂, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, aminoalkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku a substituovaná aminoalkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku,

R₅ je a) nebo b) :

a) substituovaný benzenový kruh vzorce:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y v poloze 4' nebo 5' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde X a Y nejsou oba H nebo

b) kruh se šesti členy struktury:

· ·

• · *♦··

139 • · • ·· • 99 kde:

X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)_2řskupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina NO₂,

Q¹ je S, skupina NR₇ nebo skupina CR_gR₉,

R₇ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří skupina CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina a skupina SO₂CF₃,

R_g a Rg jsou nezávislé substituenty vybrané ze skupiny, kterou tvoří H, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů, uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklická skupina, substituovaná heterocyklická skupina, skupina N0₂, skupina CN a skupina C0₂Rioz

Rio je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo CRgRg je kruh se šesti členy struktury níže

CH3 .ch₃ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

3. Sloučenina vzorce:

• · · · ·· · · · « ·· ··

140 kde:

R₁₄ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupina, substituovaná aroylová skupina, sulfonylová skupina a substituovaná sulfonylová skupina,

R₅ je a) , b) nebo c) :

a) substituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže:

kde:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)2, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNHOH, skupina CNH₂NOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je v poloze 4' nebo 5' a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina NO₂, alkoxyskupina obsahující 1

141 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde X a Y nejsou oba H,

b) kruh s pěti členy struktury ukázané níže:

kde:

U je 0, S nebo skupina NR₆,

R₆ je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina C0NH₂, skupina CNHNHOH, skupina CNH₂N0H, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen a alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, kde halogen je F nebo

c) kruh se šesti členy struktury:

kde:

X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina N0₂ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

4. Sloučenina vzorce:

··« ·· 44 ·4 4· 4444

142 kde:

R₅ je a), b) nebo c):

a) substituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže:

kde:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina NO₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je v poloze 4' nebo 5' a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde X a Y nejsou oba H,

b) kruh s pěti členy struktury ukázané níže • 444 ·· 4444 ·· ·· • 4 4 · · * · · • · · 4 4 4 *

4 4 · 4 4 4 4 4 kde:

U je O, S nebo skupina NR₅,

R₆ je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen a alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, kde halogen je F nebo

c) kruh se šesti členy struktury:

kde:

X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina NO₂ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

5. Sloučenina vzorce:

« · · · · · ♦ • · 4 4 · · · · ·

144 kde:

Ris je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, skupina CO₂Ri₀, acylová skupina, substituovaná acylová skupina, aroylová skupinu, substituovaná aroylová skupina, alkylová skupina, substituovaná alkylová skupina a skupina CN,

Rio je alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

R₅ je a), b) nebo c) :

a) substituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže kde:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONHž, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)2, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina NO₂, perfluoralkylové skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je v poloze 4' nebo 5' a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

145 kde X a Y nejsou oba H,

b) kruh s pěti členy struktury ukázané níže kde:

U je 0, S nebo skupina NR6,

R₆ je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkyloVá skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y' je vybrán ze. skupiny, kterou tvoří H, halogen a alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku nebo

c) kruh se šesti členy střuktury:

kde:

X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina C0NH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON (alkyl) ₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina N0₂ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

6. Sloučenina vzorce:

AAA « A • A A A « A A ► · AAAA

146 kde:

R5 je a), b) nebo c):

a) substituovaný benzenový kruh obsahující substituenty X a Y, jak je ukázáno níže kde:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONH2, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, skupina CNHNOH, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je v poloze 4' nebo 5' a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina NO₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde X a Y nejsou oba H,

b) kruh s pěti členy struktury ukázané níže ···· 9 9 9999 9 9 9 9

9 9 9 9 · 9

9 9 9 9 9

9 9 9 9 9 9 9 9 kde:

U je O, S nebo skupina NR₆,

R₆ je H, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku nebo C0₂-alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen a alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, kde halogen je F nebo

c) kruh se šesti členy struktury:

kde

X¹ je N nebo skupina CX², a

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina N0₂ nebo její farmaceuticky přijatelná sůl.

7. Sloučenina vybraná ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny

5- (3-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) -onoxim,

148

5' - (2-f luorf enyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2’ (1Ή) -onoxim,

5'-(4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(1'H)-onoxim,

5' - (3, 4-dif luorf enyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) on-oxim,

5' (3-methoxyfenyl) spiro [cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή) -onoxim,

5' (3-nitrofenyl) spiro [cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή)-onoxim

5' (3-kyanofenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1Ή)-onoxim nebo jejich farmaceuticky přijatelná sůl.

8. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 nebo 2 vzorce:

kde:

R₅ je substituovaný benzenový kruh vzorce:

X je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONH-alkylová skupina, CSNHalkylová skupina, skupina CON (alkyl )₂/ skupina CSN(alkyl)₂<

alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, skupina N0₂, perfluoralkylová • ♦ » * • · · · • ftft ftft

149 skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, heterocyklický kruh s 5 členy obsahující ve svém hlavním řetězci 1 až 3 heteroatomy a thioalkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

Y je v poloze 4' nebo 5' a je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halogen, skupina CN, skupina N0₂, alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, a thioalkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, kde X a Y nejsou oba H.

9. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků 1 nebo 2 vzorce:

kde:

R₅ je kruh s pěti členy struktury ukázané níže kde

U je 0, S nebo skupina NR₆,

R₆ je H nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku,

X' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří halogen, skupina CN, skupina N0₂, skupina C0NH₂, skupina CSNH₂, CONH-al kýlová skupina, CSNH-alkylová skupina, skupina CON (alkyl) ₂, skupina CSN(alkyl)₂, alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku a alkoxyskupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku, • ·· » lín • · ··· · • « · · · · · to ♦ · · · ♦

111 1111 111 11 1· *·

150

Ύ' je vybrán ze skupiny, kterou tvoří H, halógen a alkylová skupina obsahující l až 3 atomy uhlíku, kde halogen je F.

10. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků l nebo 2 vzorce:

kde:

R₅ je kruh se šesti členy ukázané struktury .r

X¹ je N nebo skupina CX²,

X² je halogen, skupina CN, skupina CONH₂, skupina CSNH₂, CONHalkylová skupina, CSNH-alkýlová skupina, skupina CON(alkyl)₂, skupina CSN(alkyl)₂ nebo skupina NO₂,

R₇ je vybrán ze skupiny, kterou tvoří CN, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, substituovaná alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová . skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, substituovaná cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, arylová skupina, substituovaná arylová skupina, heterocyklické skupina, substituovaná heterocyklické skupina a skupina SO₂CF₃, «· ·· • · » · ♦ · · • · · • · » ·· ··»· ·· ··· ·

151

11. Sloučenina podle nároku 1 vybraná ze skupiny, kterou tvoří sloučeniny

5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1'H)thion,

3- (1',2’-dihydro-2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'yl)benzonitril,

4- (1',2'-dihydro-2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'yl)-2-thiofenkarbonitril,

3- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)5- fluorbenzonitril,

4- methyl-5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2-thiofenthioamid,

5'-(5-kyano-l-methyl-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2' -ylidenkyanamid,

5- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5'yl)-lH-pyrol-2-karbonitril,

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)lH-pyrol-2-karbonitril,

5-(2'-thioxospiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-1-methylpyro1-2-karbonitrii,

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5-yl)3-thiofenkarbonitril,

5-(1,2-dihydrothioxospiro(cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-2thiOfenkarboňitril

5-(3-fluor-4-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(ÍH)-thion,

5-(2-amino-5-pyrimidinyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(ÍH)-thion,

3-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklopentan-1,3-[3H]indol]-5-yl)5-fluorbenzonitril,

3- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2-yl)4- fluorbenzonitril,

152 • ···· ·· 4··· 4· 44 ·· 4 4 4 9 444 4

4 444 44 4 • 4444 4«44 4

444 4444 444

444 44 44 44 49 4444

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2-yl)3-pyridinkarbonitril,

5-(3,4-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

5-(5-chlor-2-thienyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)3- furankarbonitrii,

5-(3-chlor-4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

5-(3-chlor-5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

5-(3,5-difluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

5-(1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)4- propyl-2-thiofenkarbonitril,

5- (3-fluor-4-nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)thion,

4- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)2-furankarbonitril,

5-(3-chlorfenyl)spiro[cyklobutan-1,3^Π-[3H]indol]-2(1H)thion,

5-(2-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2 (1H) thion,

5-(4-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1”H)thion,

5- (1,2-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5yl)-4-methyl-2-thiofenkarbonitril,

5'-(1,2”-dihydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]5-yl)-2-thiofenkarbonitril,

5-(3-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(1H)thion,

5-(3-hydroxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2(ÍH)-thion, • 444

153 * 44

44 • 4 4 · • · * • · · ♦ · ·

4444

5-[4-fluor-3-(trifluormethy1)fenyl]spiro[cyklohexan-1,3[3H]indol]-2(1H)-thion,

4- (1,2-díhydro-2-thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)2- fluorbenzonitril,

5- (3-fluor-5-methoxyfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]2(1H)-thion,

5-(3-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2’ (l'H)-onoxim,

5' - (2-fluorfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) -onoxim,

5'- (4-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-2' (l^řH)-onoxim,

5' - (3, 4-dif luorf enyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (1Ή) on-oxim,

5' (3-methoxyfenyl) spiro [cyklohexan-1,3' - [3H] indol] -2' (l'H) -onoxim,

5' (3-nitrofenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (1Ή)-onoxim,

5' (3-kyanofenyl) spiro [cyklohexan-1,3'- [3H] indol]-2' (1Ή)-onoxim,

3- [1',2'-dihydro-2'-(hydroxyimino)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-5'-yl]-5-fluorbenzonitril,

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)4- methyl-2-thiofenkarbonitril,

5- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)2-thiofenkarbonitril,

4- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)2-thiofenkarbonitril,

5- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)lH-pyrol-l-methyl-2-karbonitril,

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(hydroxyimino)-5'-yl)lH-pyrol-2-karbonitril, *·

154

4- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-(acetoxyimino)-5'-yl)2- thiofenkarbonitril,

3- fluor-N'-hydroxy-5-[2'-(hydroxyamino)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-5'-yl]benzenkarboximidamid,

N'-hydroxy-5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(hydroxyimino) -5' -yl) -4-methyl-2-thiofenkarboximidamid,

Ν'-hydroxy-4-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'(hydroxyimino)-5'-yl)-2-thiofenkarboximidamid,

N'-hydroxy-5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2' (hydroxyimino)-5'-yl)-2-thiofenkarboximidamid,

5'-(3-chlorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-2'ylidenkyanamid,

5'-(3-kyano-5-fluorfenyl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'ylidenkyanamid,

5'-(5-kyano-lH-pyrol-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'ylidenkyanamid,

5' -(5-kyanothiofen-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3' -[3H]indol]-2'ylidenkyanamid,

5' -(5-kyano-3-methylthiofen-2-yl)spiro[cyklohexan-1,3'[3H]indol]-2’-ylidenkyanamid,

5' (5-kyanothiofen-3-yl)spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'ylidenkyanamid,

3- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)-5-fluorbenzonitril,

5- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2’-kyanomethylen-5'-yl])lH-pyrol-2-karbonitril,

5-(spiro[cyklohexan-1,3’-[3H]indol]-2’-kyanomethylen-5' -yl)-1methyl-lH-pyrol-2-karbonitrii,

5-(2'-kyanomethylenspiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-5'-yl)thiofen-2-karbonitril,

5-(spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-kyanomethylen-5'-yl)-4methylthiofen-2-karbonitril a

4- (spiro[cyklohexan-1,3'-[3H]indol]-2'-kyanomethylen-5'-yl)thiofen-2-karbonitril • ΦΦΦ φφ φφφφ

155 nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

12. Sloučenina podle nároku 2, což je 5-(1,2-dihydro-2thioxospipo[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-1-(tercbutoxykarbonyl) pyrol-2-karbonitril nebo 5-(1,2-dihydro-2thioxospiro[cyklohexan-1,3-[3H]indol]-5-yl)-4-n-butyl2-thiofenkarbonitril nebo jejich farmaceuticky přijatelné soli.

13. Sloučenina podle kteréhokoliv z nároků thiofenový nebo furanový kruh. 3 až 6, kde Rs je 14. Farmaceutický přípravek vyznačuj i c i s e tím, že obsahuje sloučeninu podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl přijatelný nosič nebo excipient. a farmaceuticky 15. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv nebo její přijatelné soli pro výrobu léčiva. z nároků 1 až 13 16. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 nebo její přijatelné soli pro výrobu léčiva použitelného pro

podávání pacientovi, kterým je savec, pro léčbu dysfunkčního krvácení u pacienta.

17. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 nebo její přijatelné soli pro výrobu léčiva použitelného pro podávání pacientovi, kterým je savec, pro léčbu karcinomů a adenokarcinomů endometria, vaječníků, prsu, tračníku nebo prostaty u pacienta.

• 444

156 »« ·

4 ₉ 4 · · • 44 44 * 4 4 9 4 .· • 4 · ··

4944

18. Použití sloučeniny podle kteréhokoliv z nároků 1 až 13 nebo její přijatelné soli pro výrobu léčiva použitelného pro podávání pacientovi, kterým je savec, jako kontraceptiva.