CZ200113A3 - Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují - Google Patents

Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují Download PDF

Info

Publication number
CZ200113A3
CZ200113A3 CZ200113A CZ200113A CZ200113A3 CZ 200113 A3 CZ200113 A3 CZ 200113A3 CZ 200113 A CZ200113 A CZ 200113A CZ 200113 A CZ200113 A CZ 200113A CZ 200113 A3 CZ200113 A3 CZ 200113A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
group
pentanedioic acid
formula
compound
acid
Prior art date
Application number
CZ200113A
Other languages
English (en)
Inventor
Paul F. Jackson
Keith M. Maclin
Eric Wang
Barbara S. Slusher
Rena S. Lapidus
Pavel Majer
Original Assignee
Guilford Pharmaceuticals Inc.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=27380804&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ200113(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Priority claimed from US09/110,262 external-priority patent/US6395718B1/en
Priority claimed from US09/228,391 external-priority patent/US6265609B1/en
Application filed by Guilford Pharmaceuticals Inc. filed Critical Guilford Pharmaceuticals Inc.
Publication of CZ200113A3 publication Critical patent/CZ200113A3/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C319/00—Preparation of thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/17—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing carboxyl groups bound to the carbon skeleton
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/24—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/10—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/11—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/12—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and singly-bound oxygen atoms bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/52—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton being acyclic and saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C323/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups
    • C07C323/50—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C323/51—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton
    • C07C323/56—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides substituted by halogen, oxygen or nitrogen atoms, or by sulfur atoms not being part of thio groups containing thio groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having the sulfur atoms of the thio groups bound to acyclic carbon atoms of the carbon skeleton the carbon skeleton containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/18—Dithiocarboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C327/00—Thiocarboxylic acids
    • C07C327/36—Esters of dithiocarboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C329/00—Thiocarbonic acids; Halides, esters or anhydrides thereof
    • C07C329/12—Dithiocarbonic acids; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C333/00—Derivatives of thiocarbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C333/14—Dithiocarbamic acids; Derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C333/00—Derivatives of thiocarbamic acids, i.e. compounds containing any of the groups, the nitrogen atom not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C333/14—Dithiocarbamic acids; Derivatives thereof
    • C07C333/18—Esters of dithiocarbamic acids
    • C07C333/20—Esters of dithiocarbamic acids having nitrogen atoms of dithiocarbamate groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/54—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D213/55—Acids; Esters

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují
Oblast techniky
Předkládaný vynález se týká inhibitorů N-acylované a-vázané kyselé dipeptidázy (NAALADázy), farmaceutických kompozic, které obsahují tyto inhibitory a způsobů jejich použití pro inhibici enzymové aktivity NAALADázy, a tedy ovlivnění nerových aktivit, inhibice angiogeneze a léčení glutamátových abnormalit, kompulzních onemocnění, onemocnění prostaty, bolesti a diabetické neuropatie.
Dosavadní stav techniky
Nedávné studie zahrnují NAALADázu do pathogeneze onemocnění zprostředkovaných glutamátem. Neuropathologické studie na posmrtné tkáni pacientů s amyotrofní laterální sklerózou (ALS) naznačují velký pokles koncentrace N-acetylaspartátu (NAA) a Nacetylaspartylglutamátu (NAAG) v tkáni, vyskytující se v souvislosti s degenerací neuronů, a vzrůst NAA a NAAG v mozkomíšním moku (CSF) u pacientů s ALS. V souladu s těmito zjištěními byly abnormální hladiny NAAG a aktivita NAALADázy také pozorovány v posmrtné prefrontální a limbické mozkové tkáni schizofrenních pacientů. Pitevní studie také naznačily značnou souvislost mezi NAA.G/NAA a Alzheimerovou nemocí. V posmrtné mozkové tkáni byly nalezeny hladiny NAA a NAAG selektivně snížené v těch oblastech mozku (hippokampus a amygdala), které jsou ovlivněny patologií Alzheimerovy nemoci.
Glutamát slouží v centrálním nervovém systému (CNS) jako převládající excitační neuropřenašeč. Protože neurony uvolňují glutamát ve velkém množství, když mají nedostatek kyslíku, může se vyskytovat při ischemickém poškození mozku, jako je mrtvice ······ ··· ··· • · · · · · ···· • · · ···· ··· • · ··· ······· ·· ···· ··· · ·· • · · · · · * · · ··· nebo srdeční záchvat. Toto přebytečné uvolňování glutamátu tedy způsobuje nadměrnou stimulaci (excitotoxicitu) receptorú N-methyl-D-aspartázy (NMDA), ΆΜΡΑ, kainátu a metabotropického glutamátu (mGlu). Když se glutamát váže k těmto receptorům, iontové kanály v receptorech se otevírají nebo se stimulují druhé mesenžerové systémy umožňující toky iontů přes jejich buněčné membrány, například vápenatých a sodných iontů do buněk a draselných iontů z buněk. Tyto toky iontů, zejména vtékání vápenatých iontů, způsobují nadměrnou stimulaci neuronů. Nadměrně stimulované neurony vylučují více glutamátu, čímž dochází k dominovému efektu, o kterém se předpokládá, že nakonec vede k buněčné smrti prostřednictvím produkce proteáz, lipáz a volných radikálů.
Nadměrná aktivace receptorú glutamátu je zahrnuta do různých neurologických onemocnění a stavů, včetně poranění míchy, epilepsie, mrtvice, Alzheimerovy choroby, Parkinsonovy choroby, amyotrofní laterální sklerózy (ALS), Huntingtonovy choroby, diabetické neuropathie, akutní a chronické bolesti, ischémie a ztráty neuronů po hypoxii, hypoglykémie, ischémii, šoku a poškození nervů.
Glutamatergní abnormality souvisejí zejména se schizofrenií. Například fencyklidin (PCP) a další antagonisté receptorú N-methyl-D-aspartátu (NMDA), indukují psychotomimetické stavy u zdravých jedinců a vyvolávají preexistenční symptomy schizofrenie, což naznačuje, že by potlačení přenosu glutamátu mohlo přispívat ke schizofrenii. Dále bylo uvedeno, že antagonisté receptorú non-NMDA nebo předběžná léčba, která oslabuje uvolňování glutamátu, snižuje paměťové a další behaviorální vlivy antagonistů receptorú NMDA. Studie také ukázaly, že stimulace určitých podtypů receptorú mGlu zprostředkuje presynaptické potlačení a snižuje vyvolání uvolňování glutamátu. V roce 1998 • · · bylo popsáno, že agonista receptoru mGlu snižuje PCP vyvolané uvolňování glutamátu u krys, což naznačuje, že agonista zlep šuje behaviorální vlivy PCP ztlumením presynaptické glutamater gické aktivity.
Nedávné studie také naznačují glutamatergickou bázi u kompulzivních onemocnění, zejména závislosti na drogách. Například bylo zjištěno, že neuropsychologické a patologické vlivy ethanolu jsou zprostředkovány prostřednictvím glutamatergního systému. Akutní expozice ethanolu přesněji přeruší glutaminergickou neurotransmisi prostřednictvím inhibice iontového toku přes kanály receptoru glutamátu, zatímco chronická expozice zvyšuje počet receptoru glutamátu a tedy zvyšuje iontový tok. Akutní odejmutí ethanolu vede k přecitlivělosti a záchvatu v přítomnosti kanálů regulovaných směrem vzhůru, čímž dochází k tomu, že se stanou postsynaptické neurony citlivé k excititoxickému poškození.
Posmrtné zkoumání histologicky normálních mozků alkoholiků ukázalo, že chronický alkoholismus středně zvyšuje hustotu NMDA podtypu receptoru glutamátu ve frontální kůře. Toto zvyšování může představovat stupeň chronické neurotoxicity vyvolané ethanolem. Jako takové mohou být neurobiologické vlivy alkoholismu, včetně intoxikace, záchvatů při abstinenci, delirium tremens, Wernicke-Korsakoffův syndrom a zárodečný alkoholový syndrom, chápány jako škála následků vlivu ethanolu na glutamatergický systém. V tomto ohledu může být alkholismus považován za dalšího člena zvětšující se skupiny neurologických onemocnění souvisejících s glutamátem.
Glutamatergický systém je také zahrnut do behaviorálních vlivů jiných zneužívaných drog. Studie například ukázaly, že glutamatergičtí antagonisté blokují aktivity stimulující motoriku vyvolanou amfetaminem a kokainem a glutamatergičtí agonisté zpú4 ······ ··· ·· · • · » · · · · *· · • · · · · · Λ ··· •· ··· ······· · · • · · · · · · « ·* • · · · « ·> 9 ««··· sobují stejné stereotypy, jako způsobuje amfetamin. Tyto výsledky představují farmakologický důkaz, že exprese stereotypických vlivů psychomotorických stimulantů zahrnuje glutamatergický systém.
Epidemiologické studie také ukázaly silný vztak mezi závislostí na drogách a dalšími kompulzivními chorobami. Dále byla mezi lidmi s alkoholismem, závislostí na kokainu, závislostí na nikotinu, u patologických hráčů, u lidí s poruchou nedostatku pozornosti (ADD), Tourettovým syndromem, kompulzivním přejídáním a obezitou, zjištěna obecná genetická anomálie. Předpokládá se, že jsou tato onemocnění výrazem vlivu excitotoxicity.
Na základě výše uvedených zjištění autoři vynálezu testovali a nalezli inhibitory NAALADázy, které jsou účinné při farmakoterapii glutamátových abnormalit, jako je závislost na drogách, diabetická neuropathie, bolest a schizofrenie.
Většina výzkumů a vývojových aktivit byla dodnes zaměřena na blokování postsynaptických receptorú glutamátu sloučeninami, jako jsou antagonisté NMDA, antagonisté glycinu a jiných látek blokujících receptory postsynaptických excitačních aminokyselin (EAA) . Tato činidla jsou bohužel vážně toxická dokonce za normálních podmínek, což omezuje jejich klinické použití. Ačkoli to není podloženo žádnou konkrétní teorií, předpokládá se, že inhibitory NAALADázy blokují uvolnění glutamátu presynapticky, bez interakce s postsynaptickými receptory glutamátu. Protože se neukázalo, že inhibitory NAALADázy nemění bazální hladiny glutamátu, nemusí mít behaviorální toxicitu související s postsynaptickými antagonisty glutamátu.
Ukázalo se, že kromě glutamátu také NAALADáza souvisí s membránovým antigenem specifickým pro prostatu (PSMA). Zejména se ukázalo, že PSMA cDNA uděluje aktivitu NAALADáze a že NAALADáza *····· · · · ·· · • · · ······· • · · · · · · ··· • · · · · ······· ·· • · · · ··· · ·· • · · · ·· 9 · ·· »· a PSMA vykazují shodnost homologní sekvence nejméně z 86 %:
Carter a kol., Proč. Nati. Acad. Sci., díl 93, strana 749-753 (1996). Je popsáno, že molekulární klonování PSMA je potenciálním ukazatelem rakoviny prostaty a předpokládá se, že slouží jako cíl při zobrazení a cytotoxických způsobech léčby rakoviny prostaty. Dále jsou popsané a klinicky testované PSMA protilátky, zejména PSMA protilátky značené indiem 111 a itriem, pro diagnózu a léčení rakoviny prostaty. PSMA se vylučuje v duktálním epitelu prostaty a je přítomno v seminální plasmě, prostatické kapalině a moči.
Podle předkládaného vynálezu byly nalezeny inhibitory NAALADázy, které jsou účinné při léčení onemocnění prostaty, zejména rakoviny prostaty. Ačkoli se to neopírá o jakoukoli teorii, předpokládá se, že inhibitory NAALADázy inhibují aktivitu PSMA. Protože bylo zjištěno, že mAbs až PSMA zasahují 23 neprostatický karcinom (Lui a kol., Science Research, díl 57, strana 3629-34 (1997)), vynálezci se domnívají, že by inhibitory
NAALADázy mohly být také účinné při léčení neprostátického karcinomu, zejména tkání, kde se vyskytuje NAALADáza, jako je mozek, ledviny a varlata.
NAALADáza byla také nalezena v neovaskulatuře (nové cévy). Vynálezci zjistili, že inhibitory NAALADázy inhibují nebo preventivně působí proti růstu neovaskulatury (angiogenezi), a nabízejí tedy potenciální terapeutické použití při léčení onemocnění závislých na angiogenezi. Mezi příklady onemocnění závislých na angiogenezi patří revmatoidní arthritida, kardiovaskulární onemocnění, neovaskulární onemocnění očí, periferní vaskulární onemocnění a dermatolofické vředy, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Angiogeneze je také zasadní pro normální fyziologické procesy, jako je růst, plodnost a hojení poranění měkkých tkání.
Rakovina je dalším onemocněním závislým na angiogenezi. Rakovinné nádorové buňky vylučují nebo uvolňují angiogenické látky, které aktivují sousední buňky endotelu. Tyto buňky endotelu reagují expresí buněčného autonomního vzorce chování, která vrcholí vznikem nových cév. Protože výzkum ukázal, že je angiogeneze nutná pro zachování růstu, invaze a metastázování rakovinných nádorů, inhibiční aktivita inhibitorů NAALADázy vzhledem k neovaskulatuře dále podporuje jejich využitelnost při léčení všech typů rakoviny.
Ještě před několika lety bylo identifikováno pouze několi inhibitorů NAALADázy a tyto inhibitory se používaly při neklinickém výzkumu. Příklady těchto sloučenin zahrnují obecné inhibitory metalopeptidázy, jako je o-fenantrolin, látky chelatující kovy, jako je EGTA a EDTA a analoga peptidů, jako je chischalová kyselina a β-NAAG. Tyto sloučeniny mají buď toxické vedlejší účinky nebo se nemohou podávat ve farmaceuticky účinném množství. Vzhledem k širokému rozmezí potenciálních aplikací tedy existuje potřeba inhibitorů NAALADázy, farmaceutických kompozic, které obsahují tyto inhibitory a způsobů jejich použití.
Podstata vynálezu
Předkládaný vynález se týká inhibitorů enzymu N-acylované avázané kyselé dipeptidázy (NAALADázy) a kompozic vhodných pro ovlivnění nervových aktivit, inhibici angiogeneze a léčení glutamátových abnormalit, kompulzních poruch, onemocnění prostaty, bolesti a diabetické neuropathie.
Přesněji se předkládaný vynález týká sloučeniny vzorce I
nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde:
X je skupina vzorce II, III nebo IV
Ru
II
III
man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4;
Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15;
B je atom dusíku nebo skupina CR16;
A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17Rig nebo skupina (CR17R18)mS;
R9 a R13 jsou atom vodíku;
Rg, R10, Rn, R12, R14, R15, R16, R17 a R18 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylové skupina, karbonylové skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, • ·· · · · ·· ··· · · · · · « sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a
Ar1 je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty;
pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4.
Dále se předkládaný vynález týká sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, která je účinná při léčení mrtvice u savců, když se podá více, než 60 minut po začátku mrtvice.
Předkládaný vynález se také týká způsobu inhibice aktivity enzymu NAALADázy u savců, zahrnujícího podávání účinného množství tomuto savci.
se dále týká způsobu léčení glutamátové abzahrnujícího podávání účinného množství tomuto savci.
vynález týká způsobu léčení glutamátové ab normality vybrané ze skupiny, kterou tvoří kompulzivní onemocnění, mrtvice, demyelinační onemocnění, schizofrenie, Parkinsonova nemoc a ALS u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
sloučeniny vzorce I
Předkládaný vynález normality u savců, sloučeniny vzorce I
Dále se předkládaný ····· · · · ·· · • · · · · · · « · · • · · · · · · · · · • · ··· ·····♦· · · • · · · * · · ·« · • · «· ·· · ·· ···
Předkládaný vynález se také týká způsobu ovlivnění nervové aktivity u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení onemocnění prostaty u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Předkládaný vynález se tedy týká způsobu léčení rakoviny u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Předkládaný vynález se také týká způsobu léčení mrtvice u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinou více, než 60 minut po začátku mrtvice těmto savcům.
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení mrtvice u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinou více, než 60 minut po začátku mrtvice těmto savcům.
Dále se vynález týká způsobu inhibice angiogeneze u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Předkládaný vynález se také týká způsobu léčení bolesti u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení diabetické neuropathie u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Předkládaný vynález se tedy týká způsobu přípravy sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, zahrnujícího krok • · · · reakce thiolaktonu se substituovaným esterem za vzniku sloučeniny vzorce VI
VI
D je skupina (CR21R22)n;
n j e 0, 1, 2, 3 nebo 4; a
R20, R21 a R22 jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomu uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylové skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylové skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylové skupina a cykloalkenylové skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a
Ar, je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty.
Předkládaný vynález se také týká způsobu přípravy sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, zahrnující kroky:
(i) reakce Meldrumovy kyseliny s reaktantem obsahujícím síru za vzniku derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru; a (ii) reakce derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru s esterem za vzniku sloučeniny vzorce VII
kde:
E je skupina obsahující síru; a
F je skupina obsahující ester propionová kyseliny.
Konečně se předkládaný vynález týká farmaceutické kompozice obsahuj ící:
(i) účinné množství sloučeniny vzorce I; a (ii) farmaceuticky přijatelný nosič.
Popis obrázků na výkresech
Obr. 1Ά je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk
Obr. 1B je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk po ošetření kyselinou askorbovou.
Obr. 1C je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk po ošetření kyselinou askorbovou a sloučeninou 3.
······ · · · · · · ··· ··· · ·· · v · · ···· · ··
9 999 9999999 99
9 9 9 9 9 · · ·· ·· ·· ·· · ♦ ·9 9 9
Obr. 2A je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk
Obr. 2B je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk po ošetření kyselinou askorbovou.
Obr. 2C je mikrofotografie kokultury imunoznačených buněk dorsálních kořenů míšních a Schwannových buněk po ošetření kyselinou askorbovou a sloučeninou 2.
Obr. 3 je grafický záznam in vivo průměrného objemu nádoru
LNCaP proti počtu dní po subkutánním ošetření různými dávkami sloučeniny 3.
Obr. 4 je sloupcový graf poměru nádor:kontrola u myší subkutánně léčených vehikulem nebo sloučeninou 3 po injekci buněk
LNCaP.
Obr. 5 je grafický záznam in vivo průměrného objemu nádoru Dunning G proti počtu dní po subkutánním ošetření různými dávkami sloučeniny 3.
Obr. 6 je sloupcový graf poměru nádor:kontrola u krys subkutánně léčených vehikulem nebo sloučeninou 3 po injekci buněk Dunning G.
Obr. 7 je grafický záznam in vivo průměrného objemu nádoru Dunning G proti počtu dní po intratumorální léčbě různými dávkami sloučeniny 3.
Obr. 8A je soubor mikrofotografií zátek z Matrigelu™ subkutánně injektovaných myším a léčených samotným vehikulem po injekci angiogenního faktoru.
······ · · · · · · ··· ··· · · * · • · · ···· · · · • · · · · · ···· · · · · • · · · ··· ··· • · · · · · · · · · · ·
Obr. 8B je soubor mikrofotografií zátek z Matrigelu™ subkutánně injektováných myším a léčených denně dávkami 3 mg/kg sloučeniny 3 po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 8C je soubor mikrofotografií zátek z Matrigelu™ subkutánně injektovaných myším a léčených denně dávkami 30 mg/kg sloučeniny 3 po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 9 je mikrofotografie zátky z Matrigelu™ subkutánně injektované myši a léčené kontinuální koncentrací dávky samotného vehikula po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 10 je mikrofotografie zátky z Matrigelu™ subkutánně injektované myši a léčené kontinuálně dávkou 1 qg/den sloučeniny 3 po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 11 je mikrofotografie zátky z Matrigelu™ subkutánně injektované myši a léčené kontinuálně dávkou 10 μg/den sloučeniny 3 po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 12 je mikrofotografie zátky z Matrigelu™ subkutánně injektované myši a léčené kontinuálně dávkou 100 pg/den sloučeniny 3 po injekci angiogenního faktoru.
Obr. 13 je grafický záznam latence reflexního odtažení diabetických krys proti počtu dní po léčbě sloučeninou 2.
Obr. 14 je grafický záznam ucuknutí vyvolaného formalinem u krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 3 proti času po léčbě.
Obr. 15 je sloupcový graf kroucení vyvolaného kyselinou octovou u krys proti dávce vehikula nebo sloučeniny 3, kterou se krysy léčily.
Obr. 16 je sloupcový graf kroucení vyvolaného kyselinou octovou u krys proti dávce vehikula nebo sloučeniny 2, kterou se krysy léčily.
Obr. 17 je sloupcový graf kroucení vyvolaného kyselinou octovou u krys proti dávce vehikula nebo sloučeniny 1, kterou se krysy léčily.
Obr. 18 je sloupcový graf hyperalgesie vyvolané chronickým konstriktivním poškozením u krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 3 proti dnům po dévkování.
Obr. 19A je sloupcový graf výsledků rozdílů latence odtažení nediabetických krys, STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 2, proti dnům po podání STZ.
Obr. 19B je sloupcový graf výsledků rozdílů latence odtažení nediabetických krys, STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 1, proti dnům po podání STZ.
Obr. 20 je sloupcový graf výsledků rozdílu latence odtažení normálních (neoperovaných) krys a krys s chronickým konstriktivním poškozením léčených vehikulem nebo sloučeninou 3, proti dnům po operaci.
Obr. 21A je sloupcový graf rychlosti vedení motorickým neuronem nediabetických krys a STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 2 proti dnům po podání STZ.
Obr. 21B je sloupcový graf rychlosti vedení sensorickým neuronem nediabetických krys a STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 2 proti dnům po podání STZ.
Obr. 22A je sloupcový graf rychlosti vedení motorickým neuronem nediabetických krys a STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 1 proti dnům po podání STZ.
······ · · · · · · • · · · · · ···· • · · · · 9 9999 9 9 9 9 *·· ·· ·· · ·· ···
Obr. 22B je sloupcový graf rychlosti vedení sensorickým neuronem nediabetických krys a STZ diabetických krys léčených vehikulem nebo sloučeninou 1 proti dnům po podání STZ.
Obr. 23 je grafický záznam pohybové aktivity vyvolané kokainem (20 mg/kg) u krys proti dnům po léčbě slouninou 3 s kokainem, salinem s kokainem a salinem se salinem.
Obr. 24 je grafický záznam latence odtažení nediabetických krys a BB/W diabetických krys léčených vehikulem, sloučeninou 1 nebo sloučeninou 2, proti týdnům léčby.
Obr. 25 je grafický záznam rychlosti vedení neuronem nediabetických krys a BB/W diabetických krys léčených vehikulem, sloučeninou 1 nebo sloučeninou 2, proti týdnům léčby.
Obr. 26 je grafický záznam výsledků průměrného kroucení hlavou PCP léčených krys dále léčených vodou nebo sloučeninou 2 proti času po podání PCP.
Obr. 27 je grafický záznam výsledků průměrného kroucení hlavou PCP léčených krys dále léčených vodou nebo sloučeninou 1 proti času po podání PCP.
Podrobný popis vynálezu
Definice „Kyselinová skupina zahrnuje skupiny, mezi které patří skupina -COOH, skupina -SO3H, skupina -SO2HNH, skupina -PO2H2, skupina CN, skupina -PO3H2, skupina -SH, skupina -NHCOH, skupina -NH2, skupina CONH2, skupina -CONHOH, skupina -CONHNHSO2H, skupina COHNSO2H, a skupina -CONHCN.
• · ··· ··· · · ··· · · · ♦ · · „Sloučenina 1 je čistá a nečistá forma 2-(2-sulfanylethyl)pentandiové kyseliny nebo sloučenina připravená podle postupu popsaného v příkladu 10.
„Sloučenina 2 je 2 -[[(2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina.
„Sloučenina 3 je 2-(fosfonomethyl)pentandiová kyselina (PMPA).
„Účinné množství znamená množství potřebné pro dosažení požadovaného efektu. „Terapeuticky účinné množství znamená množství potřebné pro inhibici enzymové aktivity NAALADázy, ovlivnění neuronální aktivity, inhibici angiogeneze a/nebo léčení glutamátové abnormality, kompulzního onemocnění, onemocnění prostaty, bolesti a/nebo diabetické neuropathie.
„IP nebo „i.p. znamená intraperitoneálně.
„Isostery znamená prvky, molekuly nebo ionty, které mají podobné nebo stejné fyzikální vlastnosti. Typicky mají dvě isosterní molekuly podobné nebo stejné objemy a tvary. V ideálním případě mohou být isosterní sloučeniny isomorfní a schopné společné krystalizace. Mezi další fyzikální vlastnosti, které u isosterních sloučenin obvykle kryjí, patří teplota varu, hustota, viskozita a tepelná vodivost. Avšak určité vlastnosti se obvykle liší: dipolární momenty, polarita, polarizace, velikost a tvar, protože vnější orbitaly mohou být různě hybridizovány. Termín „isostery zahrnuje také „bioisostery.
„Bioisostery jsou isostery, které mají kromě podobností ve fyzikálních vlastnostech, také podobné biologické vlastnosti. Typicky bioisostery interagují se stejným rozpoznávacím místem nebo mají velmi podobné biologické účinky.
• · • · „Isostery karboxylových kyselin zahrnují přímé deriváty, jako jsou hydroxamové kyseliny, acylkyanamidy a acylsulfonamidy; planární kyselé heterocykly, jako jsou tetrazoly, merkaptoazoly, sulfinylazoly, sulfonylazoly, isoxazoly, isothiazoly, hydroxythiadiazoly a hydroxychromy; a neplanární kyselé funkční skupiny odvozené od síry nebo fosforu, jako jsou fosfináty, fosfonáty, fosfonamidy, sulfonáty, sulfonamidy a acylsulfonamidy.
„Derivát znamená látku připravenou z jiné látky bud' přímo nebo modifikací nebo částečnou substitucí.
„Meldrumova kyselina je 2,2-dimethyl-1,3-dioxan-4,6-dion, „Metabolit je látka vzniklá metabolismem nebo metabolickým procesem.
„Farmaceuticky přijatelný ekvivalent zahrnuje farmaceuticky přijatelné soli, hydráty, metabolity, proléčiva a karboxylové isostery. Předpokládá se, že mnoho farmaceuticky přijatelných ekvivalentů má stejnou nebo podobnou in vitro nebo in vivo aktivitu, jako sloučeniny vzorců I-V.
„Farmaceuticky přijatelná sůl je sůl sloučeniny podle vynálezu, která má požadovanou farmakologickou aktivitu a která není biologicky ani jinak nevhodná. Soli mohou vzniknout s anorganickými kyselinami nebo organickými kyselinami, a jsou to například acetát, adipát, alginát, aspartát, benzoát, benzensulfonát, bisulfát, butyrát, citrát, kamforát, kafrsulfonát, cyklopentanpropionát, diglukonát, dodecylsulfát, ethansulfonát, fumarát, glukoheptanoát, glycerofosfát, hemisulfát, heptanoát, hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2-hydroxyethansulfonát, laktát, maleát, methansulfonát, 2-naftalensulfonát, nikotinát, oxalát, thiokyanát, tosylát a undekanoát.
·····« ··· ·· · ·*· ·· ···· ··· · · · * ·· · • · ··« ······· · · ···« ··· · · · 18 ·· ·· ·· · ·· ···
Příklady bazických solí jsou amoniové soli, soli alkalických kovů, jako jsou sodné a draselné soli, soli kovů alkalických zemin, jako jsou soli vápníku a hořčíku, soli s organickými bázemi, jako jsou soli dicyklohexylaminu, N-methyl-D-glukaminu a soli s aminokyselinami, jako je arginin a lysin. Také se mohou skupiny obsahující bazický atom dusíku kvarternizovat činidly, mezi která patří: nižší alkylhalogenidy, jako jsou methyl, ethyl, propyl a butyl chloridy, bromidy a jodidy; dialkylsulfáty, jako jsou dimethyl, diethyl, dibutyl a diamylsulfáty; halogenidy s dlouhým řetězcem, jako jsou decyl, lauryl, myristyl a stearyl chloridy, bromidy a jodidy; a arylalkylhalogenidy, jako jsou benzyl a fenethylbromidy.
„Farmaceuticky přijatelná proléčiva znamenají deriváty sloučenin podle předkládaného vynálezu, které podléhají před projevením farmakologického účinku biologické transformaci. Proléčivo se připravuje za účelem zlepšení chemické stability, zlepšení snášenlivosti u pacienta, zlepšení biologické využitelnosti, prodloužení doby působení, zlepšení orgánové selektivity, vhodnějšího prostředku (například lepší rozpustnosti ve vodě) a/nebo snížení vedlejších účinků (například toxicity). Proléčivo se může ze sloučenin podle předkládaného vynálezu snadno připravit za použití postupů, které jsou odborníkům v této oblasti známé a které jsou popsané například v Burgerově Medicinal Chemistry and Drug Chemistry, páté vydání, Vol. 1, str. 172-178, 949-982 (1995), nebo podle způsobů, které jsou odborníkům v této oblasti zřejmé. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou například transformovat na proléčiva převedením jedné nebo více hydroxylových nebo karboxylových skupin na esterové skupiny.
„Radiosenzitizér znamená nízkomolekulární sloučeninu podávanou živočichům v terapeuticky účinném množství, aby se podpořila • · • · • · » · · · *
• · · · · · • · · · · · ·
léčba onemocnění, které je možné léčit elektromagnetickým zářením. Onemocnění, která lze léčit elektromagnetickým zářením, zahrnují neoplastická onemocnění, benigní a maligní nádory a rakovinné buňky. Předkládaný vynález také zahrnuje léčení elektromagnetickým zářením jiných onemocnění, než jsou zde uvedená.
„Alkylová skupina je rozvětvený nebo nerozvětvený nasycený uhlovodíkový řetězec obsahující uvedený počet atomů uhlíku. Například přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku zahrnuje (pokud není uvedeno jinak) například následující skupiny: methylová skupina, ethylová skupina, propylová skupina, isopropylová skupina, butylová skupina, isobutylová skupina, terc-butylová skupina, n-pentylová skupina, n-hexylová skupina a podobně, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
„Alkenylová skupina je rozvětvený nebo nerozvětvený nenasycený uhlovodíkový řetězec obsahující uvedený počet atomů uhlíku. Například přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, obsahujííc nejméně jednu dvojnou vazbu zahrnuje například (pokud není uvedeno jinak) následující skupiny: ethenylová skupina, propenylová skupina, iso-propenylová skupina, butenylová skupina, iso-butenylová skupina, terc-butenylová skupina, n-pentenylová skupina, n-hexenylová skupina a podobně.
„Alkoxyskupina je skupina -0R, kde R je alkylová skupina, která je definovaná výše. S výhodou je R rozvětvený nebo nerozvětvený uhlovodíkový řetězec obsahující 1 až 6 atomů uhlíku.
„Atom halogenu je atom fluoru, atom chloru, atom bromu nebo atom jodu.
• 4 « · 9 • M • 4 • · 4 9 • 4 4 • 9 9 9
• •
9 • • 4 4 Š • 9 9· 4 4 • 4
• · » · • • «4 4 4 • 4 • 4 4 9 4 • • 4 4 4
„Izomery jsou sloučeniny, které mají stejný počet a druh atomu a tedy stejnou molekulovou hmotnost, ale liší se v uspořádání nebo konfiguraci atomů.
„Stereoizomery jsou sloučeniny, které mají stejnou chemickou stavbu, ale liší se v uspořádání atomů nebo skupin v prostoru.
„Optické izomery jsou dva druhy stereoizomerů. Jeden druh představuje struktury, které jsou zrcadlovými obrazy, nazývají se enantiomery, a vznikají, pokud je přítomen jeden nebo více asymetrických atomů uhlíku ve sloučenině (glyceraldehyd, kyselina mléčná, cukry, kyselina vinná, aminokyseliny). Druhým druhem jsou například diastereoizomery, které nejsou zrcadlovými obrazy. Vyskytují se u sloučenin obsahujících dva nebo více asymetrických atomů uhlíku; tyto sloučeniny mají tedy 2n optických izomerů, kde n je počet asymetrických atomů uhlíku.
„Enantiomery jsou stereoizomery, které jsou vzájemně neztotožnitelnými zrcadlovými obrazy.
„Enantiomerně obohacený znamená směs, ve které převažuje jeden enantiomer.
Termín „racemický znamená směs obsahující stejné podíly jednotlivých enantiomerů.
Termín „neracemický znamená směs obsahující nestejné podíly jednotlivých enantiomerů.
„Živočich znamená živý organismus, který se může volně pohybovat a potřebuje ke svému životu kyslík a organickou potravu. Mezi neomezující příklady patří savci, jako je člověk, kůň, vepř, skot, myš, pes nebo kočka. V případě člověka se termín „živočich může zaměnit za termín „pacient.
···· ·· ·· · ·· * • · · · t · · · ·· ··· · » » ♦ · · · • · · · · · ···· · · · · • · · · ·« · · · · ·· 99 99 9 99 999 „Onemocnění znamená jakoukoli odchylku nebo přerušení normální struktury nebo funkce jakékoli části, orgánu nebo systému (nebo jejich kombinace) těla, které se projevuje charakteristickou skupinou symptomů a znaků a jehož etiologie, patologie a prognóza může být známá nebo neznámá (Dorlanďs Illustrated Medical Dictionary, W.B. Saunders Co., 27. vydání, 1988).
„Porucha znamená jakoukoli poruchu nebo abnormalitu funkce; chorobný fyzický nebo mentální stav (Dorlanďs Illustrated Medical Dictionary, W.B. Saunders Co., 27. vydání, 1988).
„Glutamátová abnormalita znamená jakékoli onemocnění, poruchu nebo stav, při kterém je zahrnut glutamát, včetně patologických stavů zahrnujících zvýšenou hladinu glutamátu. Mezi příklady glutamátových abnormalit patří poškození míchy, epilepsie, Alzheimerova nemoc, mrtvice, Parkinsonova nemoc, amyotrfní laterální skleróza (ALS), Huntingtonova nemoc, schizofrenie, akutní bolest, chronická bolest, ischémie, neuronální poškození a kompulzní porucha.
„Ischémie znamená lokalizovanou anemii tkáně způsobenou zabráněním toku krve tepnou. Globální ischémie se vyskytuje tehdy, když ustane na určitou dobu tok krve do celého mozku, například jako následek zástavy srdce. K fokální ischémii dochází, když je část mozku bez normální dodávky krve, což může být důsledkem tromboembolické okluze mozkových cév, traumatické srdeční příhody, edému nebo nádoru mozku. Dokonce i při přechodné, ať již globální nebo fokální ischémii může dojít k rozsáhlému neuronálnímu poškození. Ačkoli k poškození nerové tkáně dochází během hodin nebo dokonce dnů po začátku ischémie, některá trvalá poškození nervové tkáně se mohou vyvinout v úvodních minutách po uzavření průtoku krve do mozku. Většina takových poškození se přisuzuje toxicitě glutamátu a sekundárním následkům reperfuze tkáně, jako je uvolnění vasoaktivních látek poškozeným en22 ·· «·· ······· · · ······ · · · ·· ·· · ·· · ·· dotelem a uvolnění cytotoxických látek, jako jsou volné radikály a leukotrieny, poškozenou tkání.
„Nervová funkce znamená různé funkce nervového systému, které mimo jiné poskytují vědomí vnitřního a vnějšího prostředí těla, umožňují dobrovolné a reflexní činnosti mezi různými strukturními prvky organismu a vyvažují odezvu organismu na změny prostředí.
„Nervové poškození znamená jakékoli poškození nervové tkáně a jakoukoli slabost nebo smrt, která je tímto poškozením způsobena. Důvod nervového poškození může být metabolický, toxický, neurotoxický, iatrogenní, tepelný nebo chemický a zahrnuje ischémii, hypoxii, mozkově cévní příhody, šok, chirurgický zákrok, tlak, vliv hmoty, krvácení, záření, vasospasmus, neurodegenerativní onemocnění, neurodegenerativní proces, infekci, Parkinsonovu nemoc, ALS, myelinační/demyelinační proces, epilepsii, poruchy rozpoznání, glutamátovou abnormalitu a jejich sekundární vedlejší efekty. Naproti tomu neexistuje žádný známý účinný způsob léčení poškození nervové tkáně.
„Nervová tkáň znamená různé složky, které tvoří nervový systém, včetně neuronů, nervových podpůrných buněk, glií, Schwannových buněk, vaskulatury obsažené v těchto strukturách, centrální nervový systém, mozek, mozkový kmen, míchu, spojení centrálního nervového systému s periferním nervovým systémem, periferní nervový systém a podobné struktury.
„Neuroprotektivní účinek znamená efekt snížení, zastavení nebo zmírnění nervového poškození a ochranu, resuscitaci nebo znovuoživení nervové tkáně, která je zasažena nervovým poškozením.
„Bolest znamená lokalizovaný pocit nepohody, úzkosti nebo utrpení vznikající stimulací specializovaných nervových zakončení.
······ ··· ·· · • · · · · · · · · ·
Slouží jako ochranný mechanismus, protože vyvolá u pacienta odstranění nebo odtažení od zdroje (Dornalďs Illustrated Medical Dictionary, W.B. Saunders Co. 27. vydání, 1988) . Mezi příklady bolesti patří akutní bolest, chronická bolest, rakovinná bolest, bolest způsobená popálením, bolest způsobená říznutím, zánětlivá bolest, diabetická neuropatická bolest a bolest zad, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
„Mentální porucha znamená klinicky významný behaviorální nebo psychologický syndrom charakterizovaný přítomností stresujících symptomů nebo významným narušením fungování. Předpokládá se, že mentální poruchy jsou výsledkem některých psychologických nebo organických dysfunkcí pacienta; pojem nezahrnuje duševní poruchy, které jsou v podstatě konfliktem mezi pacientem a společností (společenské deviace).
„Kompulzivní porucha znamená jakoukoli poruchu vyznačující se neodolatelným impulzivním chováním. Mezi příklady kompulzivních poruch patří například drogové závislosti, poruchy spojené s jídlem, patologické hráčství, ADD a Tourettův syndrom.
„Porucha nedostatku pozornosti znamená poruchu charakterizovanou vývojově nevhodnou nepozorností a impulživností, s nebo bez hyperaktivity. Nepozornost znamená neschopnost dokončit započaté úkoly, snadnou možnost rozptýlení, viditelný nedostatek pozornosti a obtížné soustředění na úkoly vyžadující delší pozornost. Impulzivnost znamená, že člověk jedná dříve, než myslí, má obtíže při organizované činnosti, potíže při organizaci práce, a neustálé odbíhání od jedné činnosti ke druhé. Hyperaktivita znamená nemožnost zůstat sedět a nadměrné pobíhání a pohyb.
„Závislost na drogách znamená psychologický návyk nebo fyzickou toleranci k droze. Tolerance znamená potřebu progresivně ······ ·«· · · ··· · · · · · · ··· φ · · · ·· ·· · « * ······· · 24 '·»·· · · » · · · zvyšovat dávku, aby se dosáhlo účinku původně získaného při menším množství.
„Abstinenční syndrom znamená poruchu charakterizovanou necílenými fyzikálními změnami, ke kterým dochází, když se přeruší přísun drogy nebo když její účinek ruší specifický antagonista.
„Poruchy jídla znamenají kompulzivní přejídání, obezitu nebo závažnou obezitu. Obezita znamená tělesnou hmosnost o 20 % vyšší, než je standard uvedený v tabulkách. Závažná obezita znamená více, než 100% nadváhu.
„Patologické hráčství znamená stav charakterizovaný potřebou hrát. Podobně jako při zneužívání psychoaktivních látek, jeho vliv zahrnuje vývoj tolerance s potřebou hrát se stále větším množstvím peněz, abstinenční symptomy a pokračování v hraní bez ohledu na negativní vlivy na rodinu a zaměstnání.
„Schizofrenie znamená mentální poruchu nebo skupinu mentálních poruch vyznačujících se poruchami formy a obsahu myšlení (ztráta asociace, přeludy, halucinace), nálady (otupělost, oploštělost a nepřiměřený afekt), pocit vnímání sebe sama a vztah k vnějšímu prostředí, ztráta hranic osobnosti, dereistické myšlení a autistické uzavření do sebe) a chování (podivínské, zjevně neúčelné a stereotypní aktivita a nečinnost). Mezi příklady schizofrenie patří akutní, ambulantní, neohraničená, katatonická, dětská, neorganizovaná, hebefrenická, latentní, jaderná, paranoidní, parafrenická, prepsychotická, procesní, pseudoneurotická, pseudopsychopatická, reziduální, schizoafektivní, nediferencovaná schizofrenie.
„Tourettův syndrom znamená autosomální tikovou poruchu charakterizovanou kompulzivním klením, mnohočetným svalovými tiky a hlasitým hlukem. Tiky jsou krátké, rychlé, nedobrovolné pohyby, • · ··* ······* « · «··· 9·· ··· ··>€”· ·· 4 ·· ·*· které mohou být jednoduché nebo složité; jsou stereotypní a opakované, ale ne rytmické. Jednoduché tiky, jako je mrkání oka, jsou často nervovým manýrismem. Komplexní tiky se často podobaj í normálnímu chování.
„Angiogeneze je proces, při kterém vznikají nové vlásečnice.
„Onemocnění závislé na angiogenezi zahrnuje rakovinu, revmatoidní arthritidu, kardiovaskulární onemocnění, neovaskulární onemocnění oka, periferní vaskulární onemocnění a dermatologické vředy.
„Inhibice angiogeneze se může podle předkládaného vynálezu měřit pomocí mnoha parametrů, například se může hodnotit pomocí opožděného vzhledu neovaskulární struktury, zpomaleného vývoje neovaskulární struktury, sníženého výskytu neovaskulární struktury, zpomalené nebo snížené závažnosti účinků onemocnění závislého na angiogenezi, zastavení angiogenického růstu nebo potlačení dřívějšího angiogenického růstu. V extrémním případě se předkládaný vynález týká úplné inhibice.
V souvislosti s angiogenezi nebo angiogenickým růstem znamená termín „prevence žádnou angiogenezi nebo angiogenický růst, když se před tím žádný nevyskytl nebo žádnou další angiogenezi nebo angiogenický růst, když se před tím vyskytl.
„Rakovina zahrnuje nádory produkující ACTH, akutní lymfocytickou leukémii, akutní nelymfocytickou leukémii, rakovinu kůry nadledvinek, rakovinu močového měchýře, rakovinu mozku, rakovinu krku, chronickou lymfocytickou leukémii, chronickou myelocytickou leukémii, rakovinu konečníku a tračníku, kožní lymfom buněk T, rakovinu dělohy, rakovinu jícnu, Ewingův sarkom, rakovinu žlučníku, leukémii vlasových buněk, rakovinu hlavy a krku, Hodgkinův lymfom, Kaposiho sarkom, rakovinu ledvin, • ♦ ·
• 99 ·
· 9 • 9 9 · • ···· * · • · · rakovinu jater, rakovinu plic (malých a/nebo nemáalých buněk), maligní peritoneální efuzi, maligní pleurální efuzi, melanom, mesotheliom, mnohočetný myelom, neuroblastom, non-Hodgkinův lymfom, osteosarkom, rakovinu vaječníků, rakovinu vaječníkú (zárodečných buněk), rakovinu slinivky břišní, rakovinu penisu, rakovinu prostaty, retinoblastom, rakovinu kůže, sarkom měkké tkáně, karcinomy šupinatých buněk, rakovinu žaludku, rakovinu varlete, rakovinu štítné žlázy, trofoblastický neoplasmus, rakovinu dělohy, rakovinu vagíny, rakovinu vulvy a Wilmúv nádor.
„Metastáze znamená „schopnost rakovinných buněk se roztrušovat a tvořit nová ohniska růstu na nesousedících místech (t.j. tvořit metastázy). Viz. Hill, R.P., kapitola 11, „Metastasis, strany 178-195 v The Basic Science of Oncology, Tannock a kol., vyd. McGraw-Hill, New York (1992) , což je zde uvedeno jako odkaz. „Přechod od in šitu nádorového růstu k metastatickému onemocnění je definován schopností nádorových buněk primárního místa přestoupit lokální tkáně a přejít přes bariéry tkání... Pro iniciaci metastatického procesu musí rakovinné buňky nejprve projít přes bazální membránu epitelu a potom napadnout intersticiální stroma... V případě vzdálených metastáz intravazace vyžaduje proniknutí nádorových buněk do bazální membrány subendotelia, která musí být překonána v průběhu extravazace nádorových buněk ... Maligní proces je spojen s nádorem indukovanou angiogenezi, která nejen, že umožňuje expanzi primárních nádorů, alr také dovoluje snadný přístup do cévního kompartmentu v důsledku poškození bazálních membrán nově vytvořených cév. Viz. Aznavoorian a kol., Cancer 71: 1368-1383 (1993), což je zde uvedeno jako odkaz.
„Elektromagnetické záření zahrnuje záření o vlnových délkách 1O'20 až 10° metru, vynález se však neomezuje pouze na tyto pří27 klady. Výhodné provedení podle předkládaného vynálezu využívá elektromagnetické záření gama (10‘2° až 10'13 m) , rentgenové záření (10-11 až 10‘9 m) , ultrafialové světlo (10 nm až 400 nm) , viditelné světlo (400 až 700 nm) , infračervené záření (700 nm až 1,0 mm) a mikrovlnné záření (1 mm až 30 cm).
*····· · · · · · • · v ··· · ·· s · · ···· «ř • * e · · ········ • · · · ·· · ·· · „Onemocnění prostaty znamená jakékoli onemocnění ovlivňující prostatu. Mezi příklady onemocnění prostaty patří rakovina prostaty, jako je adenokarcinom a metastatická rakovina prostaty; a stavy charakterizované abnormálním růstem epiteliálních buněk prostaty, jako je benigní hyperplazie prostaty.
„Léčení znamená podávání sloučeniny nebo kompozice podle předkládaného vynálezu za účelem:
(i) prevence onemocnění, poruchy nebo stavu u živočicha, který může mít dispozici k onemocnění, poruše a/nebo stavu, ale ještě u něj nebyl diagnostikován;
(ii) inhibice onemocnění, poruchy nebo stavu, tj . zastavení jeho vývoje; a/nebo (iii) zmírnění onemocnění, poruchy a/nebo stavu, tj. potlačení onemocnění, poruchy a/nebo stavu.
V souvislosti se závislostí na drogách zahrnuje „léčení podávání sloučeniny nebo kompozice podle předkládaného vynálezu za účelem potlačení psychologické závislosti nebo psychologické tolerance k zneužívané droze a/nebo zmírnění a/nebo prevence abstinenčního syndromu vznikajícího při závislosti na droze.
Pokud jde o mrtvici „terapeutické okno možností nebo „okno znamená maximální zpoždění mezi začátkem ischémie a začátkem účinné terapie.
„NAAG znamená N-acetyl-aspartyl-glutamát, což je důležitá peptidická složka mozku, s hladinou srovnatelnou s hlavním inhi bičním neuropřenašečem gama-aminobutanové kyseliny (GABA). NAAG je neurospecifický, přítomný v synaptických měchýřcích a uvolňuje se při neuronální stimulaci složitými systémy, o kterých se předpokládá, že jsou glutamatergické.
Studie naznačují, že
NAAG může v centrálním nervovém systému působit jako neuro přenašeč a/nebo neuromodulátor nebo jako prekurzor neuropřena šeče glutamátu.
„NAALADáza znamená N-acylovanou α-vázanou kyselou dipeptidázu, což je metalopeptidáza vázaná na membránu, která katabolizuje NAAG na N-acetylaspartát („NAA) a glutamát („GLU):
Katabolismus NAAG prostřednictvím COOH
AcHN A.
Y Ν’ 'COOH 'COOH
NAALADáza
NAALADázy:
AcHN. A
Y OH
ΆθΟΗ
COOH J
JL NH/' COOH
NAAG
NAA
Na základě homologie aminokyselinové sekvence řazena do M28 peptidázové skupiny. NAALADáza
GLU je NAALADáza zaje také nazývána jako membránový entigen specifický pro prostatu (PSMA) nebo humánní glutamátová karboxypeptidáza II (GPC II), EC číslo
3.4.17.21. Předpokládá se, že NAALADáza je ko-katalytická zinek/zinková metalopeptidáza. NAALADáza vykazuje velkou afinitu k NAAG při Km 540 nM. Pokud je NAAG bioaktivní peptid, potom NAALADáza může sloužit k inaktivaci NAAG synaptického působení. Alternativně, pokud NAAG funguje jako prekurzor glutamátu, může být primární funkcí NAALADázy regulace synaptické dostupnosti glutamátu.
• · · 4 · 4 4 4 ··· ·
4 Λ t · · · ·· · ··« » · · 4 4 4· * · 4·· ······· ·· « · 4 · · · · 4 44 • 4 44 «4 4 4*· „Inhibitor NAALADázy znamená jakoukoli sloučeninu, která inhibuje enzymovou aktivitu NAALADázy.
„Inhibice v souvislosti s enzymy znamená reverzibilní inhibici enzymu, jako je kompetitivní, nekompetitivní a non-kompetitivní inhibice. Kompetitivní, nekompetitivní a non-kompetitivní inhibice se mohou rozlišit účinky inhibitoru na kinetiku reakce enzymu. Ke kompetitivní inhibici dochází, když se inhibitor spojuje vratně s enzymem takovým způsobem, že soutěží s normálním substrátem pro vazbu na aktivní místo. Afinita mezi inhibitorem a enzymem se může měřit pomocí inhibiční konstanty Kiz která je definovaná následujícím způsobem:
ME1 [£/] kde [E] je koncentrace enzymu, [I] je koncentrace inhibitoru a [El] je koncentrace komplexu enzym-inhibitor vzniklého reakcí enzymu s inhibitorem. Pokud není uvedeno jinak, „K/' znamená podle vynálezu afinitu mezi sloučeninami podle předkládaného vynálezu a NAALADázou. „IC50 je podobný termín používaný k definování koncentrace nebo množství sloučeniny, které je potřebné pro dosažení 50% inhibice cílového enzymu.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu
Předkládaný vynález se týká sloučenin vzorce I
nebo farmaceuticky přijatelných ekvivalentů, kde:
X je skupina vzorce II, III nebo IV
III
II
SOR,3,
B je atom dusíku nebo skupina CR16;
A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18) mS ;
Rs a R13 jsou atom vodíku;
R8, R1o, Rn, R12, R14, R15, R16, R17 a R18 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomu uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomu uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylové skupina, karbonylové skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformanilidoskupina, sulfhy • · drylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a
Ar! je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty;
pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18) mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4.
Možnými substituenty jmenované alkenylové skupiny, cykloalkylové skupiny, cykloalkenylové skupiny a skupiny Arx zahrnují například substituenty, mezi které patří: přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, nitrososkupina, nitriloskupina, isonitriloskupina, iminoskupina, azoskupina, diazoskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina a karbocyklická skupina a heterocyklická skupina. Karbocyklické skupiny zahrnují alicyklické a aromatické struktury.
• · · ·
Příklady vhodných karbocyklických a heterocyklických skupin jsou fenylová skupina, benzylová skupina, naftylová skupina, indenylová skupina, azulenylová skupina, fluorenylová skupina, anthracenylová skupina, indolylová skupina, isoindolylová skupina, indolinylová skupina, benzofuranylová skupina, benzothiofenylová skupina, indazolylová skupina, benzimidazolylová skupina, benzothiazolylová skupina, tetrahydrofuranylová skupina, tetrahydropyranylová skupina, pyridylová skupina, pyrrolylová skupina, pyrrolidinylová skupina, pyridinylová skupina, pyrimidinylová skupina, purinylová skupina, chinolinylová skupina, isochinolinylová skupina, tetrahydrochinolinylová skupina, chinolizinylová skupina, furylová skupina, thiofenylová skupina, imidazolylová skupina, oxazolylová skupina, benzoxazolylová skupina, thiazolylová skupina, isoxazolylová skupina, isotriazolylová skupina, oxadiazolylová skupina, triazolylová skupina, thiadiazolylová skupina, pyridazinylová skupina, pyrimidinylová skupina, pyrazinylová skupina, triazinylová skupina, trithianylová skupina, indolizinylová skupina, pyrazolylová skupina, pyrazolinylová skupina, pyrazolidinylová skupina, thienylová skupina, tetrahydroisochinolinylová skupina, cinnolinylová skupina, ftalazinylová skupina, chinazolinylová skupina, chinoxalinylová skupina, naftyridinylová skupina, pteridinylová skupina, karbazolylová skupina, akridinylová skupina, fenazinylová skupina, fenothiazinylová skupina a fenoxazinylová skupina.
S výhodou je X skupina vzorce II; n je 0, 1 2 nebo 3; Z je skupina SH, skupina SO3H, skupina SO2H, skupina SOH nebo skupina S (NRHR14) 2R15; a A je atom kyslíku, síry nebo skupina CR17R18.
Výhodněji je Z skupina SH.
• · ’·'*’··* '··’ » ’·» ·
Nejvýhodněji, když Z je skupina SH, potom R8 je skupina (CH2)2COOH.
V jiném výhodném provedení, když X je skupina vzorce II, R8 je skupina - (CH2) 2COOR19 nebo skupina (CH2) 2CONHR19, A je skupina CH2, n je 0, Z je skupina SRn, potom R13 není atom vodíku nebo skupina COR19; a když X je skupina vzorce III, B je atom dusíku, a R8 je skupina -(CH2)2COOH, potom RX1 není atom vodíku.
Výhodná skupina sloučenin vzorce I je vybraná ze skupiny, kterou tvoří:
2- (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina;
3- (2-sulfanylethyl)-1,3,5-pentantrikarboxylová kyselina;
2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanyl-2-fenylethyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanylhexyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanyl-l-methylethyl)pentandiová kyselina;
2-[1-(sulfanylmethyl)propyl]pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanylpentyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-2-fenylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina;
2-[3-sulfanyl-2-(fenylmethyl)propyl]pentandiová kyselina;
2-[2-(sulfanylmethyl)butyl]pentandiová kyselina;
2-[2-(sulfanylmethyl)pentyl]pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-4-methylpentyl)pentandiová kyselina; a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
Nejvýhodnější sloučeniny vzorce I jsou vybrány ze skupiny, kterou tvoří 2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina, 2-(2-sulfa• · · · *·» ·· ·· » · nylpropyl)pentandiová kyselina, 2 -(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty. V ideálním případě jsou sloučeniny vzorce I enantiomery nebo enantiomerně obohacené směsi.
Mezi příklady sloučenin vzorce I, kde X je skupina vzorce III, R8 je skupina -(CH2)2COOH, R9 je atom vodíku, a B je skupina CR16, patří:
2-(dithiokarboxymethyl)pentandiová kyselina; 2-(1-dithiokarboxyethyl)pentandiová kyselina; a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Mezi příklady sloučenin vzorce I, kde X je skupina vzorce III, R8 je skupina -(CH2)2COOH, R9 je atom vodíku, a B je atom dusíku, patří: 2-dithiokarboxyaminopentandiová kyselina; 2-[(N-methyldithiokarboxy)amino]pentandiová kyselina; a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Mezi příklady sloučenin vzorce I, kde X je skupina vzorce IV, patří:
2- benzyl-4-sulfanylbutanová kyselina; 2-benzyl-4-sulfanylpentanová kyselina; 2-(3-pyridylmethyl)-4-sulfanylpentanová kyselina; 2-(3-pyridylmethyl)-4-sulfanylhexanová kyselina; 2-benzyl-
3- sulfanylpropanová kyselina; 2-benzyl-3-sulfanylpentanová kyselina; 2-(4-pyridylmethyl)-3-sulfanylpentanová kyselina; a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
• · · · • ♦
Struktury některých příkladů sloučenin vzorce I jsou uvedeny dále:
Struktura
Název
2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina
2-[2-(methylsulfanyl)-3fenylpropyl]pentandiová kyselina
• · ·
2-(l-benzyl-2-sulfoethyl)pentandiová kyselina
2-(l-ethyl-2-sulfopropyl)pentandiová kyselina
2-(l-fenyl-2-sulfobutyl)pentandiová kyselina
2-(dithiokarboxymethyl) pentandiová kyselina
2-(2-dithiokarboxy-l-fenylethyl)pentandiová kyselina
2-[dithiokarboxy(fenyl)methyl]pentandiová kyše lina • · «· « • ·
2-(1-dithiokarboxyethyl)pentandiová kyselina
2-{ [ethylthio(thiokarbonyl)]methylJpentandiová kyselina
2-[(ethylsulfanylthiokarbonyl)amino]pentandiová kyselina
OH
2-[(dithiokarboxy)amino] pentandiová kyselina ···· ··
2-benzyl-4-sulfanylbutanová kyselina
2-benzyl-4-sulfanylpentanová kyselina
2- (3-pyridylmethyl)-4sulfanylpentanová kyselina
2-(3-pyridylmethyl)-4sulfanylhexanová kyselina • · · •444 ♦· • ·
2-benzyl- 3 - sulfanylpropanová kyselina
2-benzyl-3-sulfanylpentanová kyselina
2- (4-pyridylmethyl)-3sulfanylpentanová kyselina ♦ · · • · • · ···« ♦· • ·
···· • • ·· • 4 »4 • • « ' ·· • · • • ·
• • « • • • · • • •
• • • • 4 • ···· 9 · • •
• · • • • • • • 4 •
• 4 • · 4· 4 99 4··
2- (l-ethyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyše lina
2-(2-naftyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselí na
2- (3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina
• · · ·
• ·
- [ [ (2-sulfanylpropyl) thio]methyl]pentandiová kyselina
2-[[(2-sulfanyl-2-fenylethyl)thio]methyl-pentandiová kyselina
2- [ [ (2-sulfanyl-3-fenylpropyl)thio]methyl]pentandiová kyselina
- [2 - [ (3,5-dikarboxypentyl)dithio]ethyl] pentandiová kyselina • · ··· ······· · · ······· ··· • · · · · · · ·· ·· ·
Některé sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají jedno nebo více asymetrických uhlíkových center a jsou tedy schopné existovat ve formě optických izomerú a také ve formě racemických nebo neracemických směsí optických izomerů. Optické izomery se mohou získat rozštěpením racemických směsí pomocí postupů, které jsou odborníkům v této oblasti známé, například prostřednictvím vzniku diastereoizomerních solí reakcí s opticky aktivní kyselinou nebo báuí. Mezi příklady vhodných kyselin patří kyselina vinná, kyselina diacetylvinná, kyselina dibenzoylvinná, kyselina ditoluylvinná a kyselina kafrsulfonová a potom se směs diastereoizomerů rozdělí pomocí krystalizace a následného uvolnění opticky aktivních bází z těchto solí. Různé procesy separace optických izomerů zahrnují použití chirální chromatografické kolony optimálně vybrané tak, aby bylo rozdělení enantiomerů maximální. Ještě dalším vhodným způsobem je syntéza kovalentních diastereoizomerních molekul, například esterů, amidů, acetalú, ketalú a podobně, reakcí sloučeniny použité ve způsobech a farmaceutických kompozicích podle vynálezu s opticky aktivní kyselinou v aktivované formě, opticky aktivním diolem nebo opticky aktivním isokyanátem. Syntetizované diastereoizomery se mohou rozdělit běžnými způsoby, jako je chromatografie, destilace, krystalizace nebo sublimace a potom hydrolýzou za získání enantiomerně čisté sloučeniny. V některých případech se hydrolýza na mateřské aktivní léčivo nemusí provádět před podáváním pacientovi, protože se chová jako proléčivo. Opticky aktivní sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou také získat za použití opticky aktivních výchozích látek.
Rozumí se, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu zahrnují optické izomery a racemické a neracemické směsi.
Jak je diskutováno podrobněji dále, mají sloučeniny podle předkládaného vynálezu různé farmakologické a farmaceutické vlast51 ······ ··· ·· ··· · · · · · · nosti. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu zejména inhibují enzymovou aktivitu NAALADázy. Předpokládá se, že prostřednictvím inhibice enzymové aktivity NAALADázy sloučeniny podle předkládaného vynálezu regulují presynaptické uvolňování glutamátu, ke kterému dochází během neurodegenerace.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu také chrání proti neurodegeneraci na in vitro a také in vivo zvířecích modelech. Bylo prokázáno, že některé sloučeniny podle vynálezu jsou neuroprotektivní na modelech tkáňové kultury ischémie, když se podávají jak před, tak po ischémii. Některé sloučeniny podle předkládaného vynálezu poskytují významné neuroprotektivní účinky, když se podávají do 60 minut po ischemickém poškození na in vitro modelu.
Dále bylo prokázáno, že některé sloučeniny podle předkládaného vynálezu poskytují významnou ochranu na in vivo modelu mrtvice MCAO krys a jsou protektivní, když se podávají 60, 120, 180 a 360 minut po ischémii. V takových případech jsou sloučeniny podle předkládaného vynálezu účinné při léčení mrtvice u živočichů, když se podávají více, než 60 minut, více, než 12 0 minut, více, než 180 minut a více, než 360 minut po začátku mrtvice. Odborník pracující v této oblasti může očekávat, že takové sloučeniny podle předkládaného jsou stejně, pokud ne více, účinné, když se podávají během 60 minut po začátku mrtvice. U sloučenin, které jsou účinné při léčení mrtvice, když se podávají více, než 360 minut po začátku mrtvice, je možné očekávat, že jsou to sloučeniny, které jsou účinné, když se podávají kdykoli před uplynutím 360 minut po začátku mrtvice. Kromě toho, že jsou sloučeniny podle vynálezu neuroprotektivní, je také možné, že jsou účinné při léčení mrtvice tím, že poskytují obnovení behaviorálních funkcí po mrtvici.
• · · · · · r- o ······· ··
DZ ···· ·· · ··
Předkládaný vynález se dále týká sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, která je účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 60 minut po začátku mrtvice.
S výhodou je sloučenina účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 120 minut po začátku mrtvice. Výhodněji je sloučenina účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 180 minut po začátku mrtvice. Nejvýhodněji je sloučenina účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 360 minut po začátku mrtvice.
Farmaceutické kompozice podle předkládaného vynálezu
Předkládaný vynález se také týká farmaceutických kompozic, které obsahuj í:
(i) účinné množství sloučeniny vzorce I; a (ii) farmaceuticky přijatelný nosič.
S výhodou je sloučenina vzorce I přítomna v množství účinném pro inhibici enzymové aktivity NAALADázy, léčení glutamátové abnormality, ovlivnění neuronální aktivity, léčení kompulzního onemocnění, léčení onemocnění prostaty nebo inhibici angiogeneze u savců.
Výhodné sloučeniny vzorce I jsou uvedeny výše.
Způsoby podle předkládaného vynálezu
Způsob inhibice enzymové aktivity NAALADázy
Předkládaný vynález se dále týká způsobu inhibice enzymové aktivity NAALADázy u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
····*· ··· ·· ··· · ♦ · · · · • · · · · ······· · ··»· · · · ···
Způsob léčení glutamátové abnormality
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení glutamátové abnormality u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Glutamátovou abnormalitou může být jakékoli onemocnění, porucha nebo stav, při kterém je zahrnut glutamát, včetně patologických stavů zahrnujících zvýšenou hladinu glutamátu. Mezi příklady glutamátových abnormalit patří epilepsie, mrtvice, Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc, amyotrofní laterální skleróza (ALS), Huntingtonova nemoc, schizofrenie, akutní bolest, chronická bolest, ischémie, periferní neuropathie (včetně diabetické neuropathie), traumatické poškození mozku a fyzikální poškození míchy. Ve výhodné provedení je glutamátové abnormalita vybrána ze skupiny, kterou tvoří ischémie, mrtvice, Parkinsonova nemoc, amytrofní laterální skleróza (ALS) a poškození míchy, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Ačkoli to není vymezeno žádnou konkrétní teorií, předpokládá se, že sloučeniny vzorce I modulují hladiny glutamátu působením na formu ukládání glutamátu, a předpokládá se, že působí proti efektům zprostředkovaným receptorem NMDA.
K terapeutické aktivitě může také přispívat to, že sloučeniny jsou schopné odchytávat volné radikály thiolové funkční skupiny. Lapače volných radikálů jsou zahrnuty v různých typech akutních a chronických patologických stavů mozku a nervové tkáně. Nedávné studie ukázaly, že lapače volných radikálů mají neuroprotektivní účinky při ischemické reperfuzi mozku, excitotoxickém aminokyselinovém poškození mozku, mitochondriální dysfunkci, diabetů, diabetické neuropatii, vrozených chybách metabolismu a dalších důvodech akutního nebo chronického poškození mozku nebo nervové tkáně. Krishan a kol., Pharmacological Re• · • · ···· ·· • · search, díl 37, č. 1, str. 23-9 (leden 1998); Noda a kol., Research Communications in Molecular Pathology and Pharmacology, díl 96, č. 2, str. 125-36 (květen 1997); Anderson a kol., Canadian Journal of Cardiology, díl 12, č. 10, str. 1099-104 (říjen 1996); Mizuno a kol., Generál Pharmacology, díl 30, č. 4, str. 575-8 (duben 1998); de la Torre a kol., Brain Research, díl 779, č. 1-2, str. 285-8 (leden 1998); Yuki a kol., Molecular and Chemical Neurapathology, díl 32, č. 1-3, str. 123-8 (září prosinec 1997); Yamamoto a kol., Brain Research, díl 762, č. 12, str. 240-2 (červenec 11, 1997). Sloučeniny podle vynálezu mohou být tedy zvláště účinné při léčení poruch mozku zahrnujících volné radikály.
Způsob léčení kompulzního onemocnění
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení kompulzního onemocnění, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I pacientovi, který takovou léčbu potřebuje.
Kompulzním onemocněním může být jakékoli onemocnění, které se vyznačuje neodolatelným impulzivním chováním. Mezi příklady kompulžních onemocnění, která lze léčit způsoby podle předkládaného vynálezu, patří závislost na drogách, poruchy jídla, patologické hráčství, ADD a Tourettův syndrom.
S výhodou je kompulzním onemocněním závislost na drogách. Běžnými drogami, které mohou vyvolat závislost, jsou CNS depresanty (opioidy, syntetická narkotika, barbituráty, glutethimid, methyprylon, ethchlorvynol, methaqualon, alkohol); anxiolytika (diazepam, chlordiazepoxid, alprazolam, oxazepam, temazepam); stimulanty (amfetamin, methamfetamin, kokain); a halucinogeny (LSD, meskalin, peyot, marihuana).
··«··· tet ··· ·«· · · · «· ··· · · · 4 · ·· • · · ♦ · · ···· · · ·· ······· · ·4 t · ·· ·· · · ·· · ·
S výhodou je závislostí na drogách závislost na alkoholu, nikotinu, heroinu nebo kokainu.
Způsob ovlivnění nervové aktivity
Autoři vynálezu také zjistili, že inhibice NAALADázy podporuje regeneraci nervů a vznik myelinu.
Předkládaný vynález se tedy dále týká způsobu ovlivnění neuronální aktivity u savců, zahrnující podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Neuronální aktivita, která je ovlivněna způsbem podle vynálezu, může být vybrána ze skupiny, kterou tvoří: stimulace poškozených neuronů, podpora regenerace neuronů, prevence neurodegenerace a léčení neurologických poruch.
Mezi příklady neurologických poruch, které lze léčit způsoby podle předkládaného vynálezu, patří: trigeminální neuralgie; glossofaryngeální neuralgie; Bellova paréza; myastenia gravis; svalová dystrofie; amyotrofní laterální skleróza; prograsivní svalová atrofie; progresivní bulbární dědičná svalová atrofie; proniklý, syndrom prasklé nebo vyhřeznuté meziobratlový ploténky; krční spondylitida; onemocnění nervového pletence; destrukční syndromy hrudního výstupu; periferní neuropathie, jako jsou ty způsobené olovem, dapsonem, klíštětem, porfyrií nebo syndromem Guillain-Barré; Alzheimerova nemoc; a Parkinsonova nemoc.
Způsob podle předkládaného vynálezu je zvláště vhodný pro léčení neurologických onemocnění vybraných ze skupiny, kterou tvoří: periferní neuropatie způsobená fyzikálním poškozením nebo onemocněním, traumatické poškození mozku, fyzikální poškození míchy, mrtvice spojená s poškozením mozku, demyelinační onemocnění a neurologická onemocnění související s neurodegenerací. Mezi příklady demyelinačních onemocnění patří mnohočetná skle···· ·4 > · · ·· t · ·· f • · · • · · · · · ···· · · • · · · · · · ·· ·· ·· · ·· · róza a periferní demyelinační onemocnění, jako je periferní neuropatie a onemocnění Charlote-Marie Tooth. Mezi příklady neurologických onemocnění souvisejících s neurodegenerací patří Alzheimerova nemoc, Parkinsonova nemoc a amytrofní laterální skleróza (ALS).
Způsob léčení onemocnění prostaty
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení onemocnění prostaty u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny vzorce I těmto savcům.
Ve výhodném provedení je onemocněním prostaty rakovina prostaty, jako je adenokarcinom a metastatická rakovina prostaty nebo stavy vyznačující se abnormálním růstem buněk epitelu prostaty, jako je benigní hyperplazie prostaty.
Způsob léčení rakoviny
Kromě rakoviny prostaty předkládaný vynález zahrnuje léčení jiných forem rakoviny pomocí sloučenin podle vynálezu a mezi tato onemocnění patří například: nádory produkující ACTH, akutní lymfocytická leukémie, akutní nelymfocytická leukémie, rakovina kúry nadledvinek, rakovina močového měchýře, rakovina mozku, rakovina prsu, rakovina krku, chronická lymfocytická leukémie, chronická myelocytická leukémie, rakovina konečníku a tračníku, kožní lymfom buněk T, rakovina dělohy, rakovina jícnu, Ewingův sarkom, rakovina žlučníku, leukémie vlasových buněk, rakovina hlavy a krku, Hodgkinův lymfom, Kaposiho sarkom, rakovina ledvin, rakovina jater, rakovina plic (malých a/nebo nemalých buněk), maligní peritoneální efuze, maligní pleurální efuze, melanom, mesotheliom, mnohočetný myelom, neuroblastom, non-Hodgkinův lymfom, osteosarkom, rakovina vaječníků, rakovina vaječníků (zárodečných buněk), rakovina slinivky břišní, rakorn *······ · ' Í3 / c··· · * · · · vina penisu, retinoblastom, rakovina kůže, sarkom měkké tkáně, karcinomy šupinatých buněk, rakovina žaludku, rakovina varlete, rakovina štítné žlázy, trofoblastický neoplasmus, rakovina dělohy, rakovina vagíny, rakovina vulvy a Wilmúv nádor.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou zvláště vhodné pro léčení rakoviny tkáně, ve které se nachází enzym NAALADáza. Mezi takové tkáně patří prostata a také mozek, ledviny a varle.
Způsob léčení mrtvice
Předkládaný vynález se dále týká způsobů léčení mrtvice u savců, zahrnujícího podávání účinného množství sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu těmto savcům více, než 60 minut po začátku mrtvice.
S výhodou se sloučenina podává těmto savcům více, než 180 minut po začátku mrtvice.
Výhodněji se sloučenina podává těmto savcům více, než 360 minut po začátku mrtvice.
Příklady sloučenin obsahujících jak síru, tak kyselinovou skupinu zahrnují sloučeniny vzorce I, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Způsob inhibice angiogeneze
Neočekávaně bylo zjištěno, že inhibitory NAALADázy mohou ovlivňovat angiogenezi u tkání obsahujících NAALADázu. Nedávné výzkumy ukázaly, že NAALADáza je obohacená v synaptické plazmatické membráně a je primárně lokalizovaná v nervové tkáni a tkáni ledvin. Bylo také zjištěno, že se NAALADáza vyskytuje v tkáních prostaty a varlat. Dále nedávné výzkumy prokázaly přítomnost NAALADázy v neovaskulatuře. Protože se NAALADáza objevuje • · v dalších tělesných tkáních, budou inhibitory NAALADázy také účinné při inhibici angiogeneze těchto tkání.
Předkládaný vynález se tedy také týká způsobu inhibice angiogeneze u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Angiogeneze může být nezbytná pro množení nebo metastázování nádorových buněk nebo může souviset s onemocněními závislými na angiogenezi. Mezi angiogenická onemocnění, která lze léčit způsoby podle vynálezu tedy patří například revmatoidní arthritida, kardiovaskulární onemocnění, neovaskulární onemocnění oka, periferní vaskulární onemocněl a rakovinný růst, invaze a metastázování nádoru.
Způsoby podle předkládaného vynálezu jsou zvláště vhodné pro inhibici angiogeneze rakovinných nádorů tkání, ve kterých se vyskytuje enzym NAALADáza. Mezi tyto tkáně patří mozek, ledviny, prostata, varlata a krvinky, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Způsob léčení bolesti
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení bolesti u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Inhibitory NAALADázy jsou zvláště účinné při blokování tolerance k morfinu a snížení množství morfinu potřebného k léčení bolesti.
Příklady bolesti, kterou lze léčit pomocí způsobů podle vynálezu jsou například akutní bolest, chronická bolest, rakovinná bolest, bolest z popálení, bolest po říznutí, zánětlivá bolest, « · diabetická neuropatická bolest a bolest zad, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Výhodným inhibitorem NAALADázy je sloučenina vzorce I, jejíž příklady jsou uvedeny výše.
Jiným výhodným inhibitorem NAALADázy je sloučenina vzorce V:
nebo farmaceuticky přijatelný ekvivalent, kde:
Y je skupina CR3R4, skupina NRS nebo atom kyslíku;
R, je vybrána ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylové skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Ar, skupina COOR, skupina NR6R7 skupina OR, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty nezávisle na sobě vybranými ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, cykloalkylové skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, atom halogenu, hydroxylové skupina, nitroskupina, trifluormethylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, skupina COOR, skupina NR6R7 a skupina Ar;
·· · · ·· · ·· • * · · · · ·· ··· · · · · ·· * « · o · · ··♦· · ·· Λ ······· · · 60 *·
R2 je vybraná ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomu uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Ar, atom halogenu a karboxylová skupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty nezávisle na sobě vybranými ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, nitroskupina, trifluormethylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, skupina NR6R7 a skupina Ar;
R3 a R4 jsou nezávisle na sobě atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku;
Rs atom vodíku nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku;
R, R6 a R7 jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku a skupina Ar, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty nezávisle na sobě vybranými ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, • · • · · · · · · · • · * · · · · ·· ··· ······· » »······ * - * 61 .· ·« ·♦ · ·· cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, nitroskupina, trifluormethylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina a skupina Ar; a
Ar je vybrána ze skupiny, kterou tvoří 1-naftylová skupina, 2naftylová skupina, 2-indolylová skupina, 3-indolylová skupina, 4-indolylová skupina, 2-furylová skupina, 3-furylová skupina, tetrahydrofuranylová skupina, tetrahydropyranylová skupina, 2thienylová skupina, 3-thienylová skupina, 2-pyridylová skupina, 3-pyridylová skupina, 4-pyridylová skupina a fenylová skupina, kde jmenovaná skupina Ar je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty nezávisle na sobě vybranými ze skupiny, kterou tvoří atom halogenu, hydroxylová skupina, nitroskupina, trifluormethylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, karboxylová skupina a skupina NRjR.,.
S výhodou je Y skupina CH2.
Nejvýhodněji, když Y je skupina CH2, potom R2 je skupina - (CH2) 2cooh.
Nejvýhodněj i, pokud Y je skupina CH2 a R2 je skupina (CH2)2COOH, potom Rx je atom vodíku, alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 4 atomy uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, benzylová skupina, fenylová skupina nebo skupina OR, kde jmenovaná • · « · · ······· · • · · · · · ί alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylové skupina, cykloalkenylové skupina, benzylová skupina a fenylová skupina jsou nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty nezávisle na sobě vybranými ze skupiny, kterou tvoří karboxylová skupina, cykloalkylové skupina obsahující 3 až 8 atomu uhlíku, cykloalkenylové skupina obsahující 5 až 7 atomu uhlíku, atom halogenu, hydroxylová skupina, nitroskupina, trifluormethylová skupina, alkylová skupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenylová skupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, alkoxyskupina obsahující 1 až 6 atomů uhlíku, alkenyloxyskupina obsahující 2 až 6 atomů uhlíku, fenoxyskupina, benzyloxyskupina, skupina NRSR7, benzylová skupina a fenylová skupina.
Výhodné sloučeniny vzorce V jsou vybrány ze skupiny, kterou tvoří:
2-(fosfonomethyl)pentandiová kyselina;
2-[[(2-karboxyethyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[(benzylhydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
2-[(fenylhydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
2-[[((hydroxy)fenylmethyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[(butylhydroxyfosfinyl)methyl)pentandiová kyselina;
2-[[(3-methylbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[(3-fenylpropylhydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(4-fluorfenyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[(methylhydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
2-[(fenylethylhydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(4-methylbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
• ·
2-[[(4-fluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(4-methoxybenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(3-trifluormethylbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[4-trifluormethylbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl] pentandiová kyselina;
2-[[(2-fluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina; 2-[[(2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
Výhodněji je sloučeninou vzorce V 2-[[(2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl) hydroxyfosf inyl] methyl] pentandiová kyselina nebo farmaceuticky přijatelné ekvivalenty. Nejvýhodněji je sloučeninou vzorce V enantiomer nebo enantiomerně obohacená směs.
Příklady sloučenin vzorce V, kde Rx je substituovaná skupinou
COOR, jsou například následující sloučeniny:
2-[[2-karboxypropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina ;
2-[[2-karboxybutyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(2-karboxypentyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(2-karboxy-3-fenylpropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[2-karboxy-3-naftylpropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[2-karboxy-3-pyridylpropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[2-benzyloxykarbonyl)-3-fenylpropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
• · · · · · • · » · ·· • · · ···· ·· «« · · · ········
CA .··*··· ’’ · » · · »····
2-[(2-methoxykarbonyl)-3-fenylpropyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(3-karboxy-2-methoxykarbony1)propyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
2-[[(4-karboxy-2-methoxykarbonyl)butyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina;
a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Příklady sloučenin vzorce V, kde RT je subtituovaná skupinou
NR6R7 zahrnují následující sloučeniny:
- [ ({[benzylamino]benzyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[karboxyamino]benzyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[benzylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[acetylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[difenylamino]methyl)(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[fenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-({[(fenylkarboxamido)methyl](hydroxyfosfinyl)jmethyl)pentandiová kyselina;
2-({[(fenylsulfonamido)methyl](hydroxyfosfinyl)}methyl)pentandiová kyselina;
2-[({[(4-fluorfenyl)amino]methyl} (hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
2-[({[(4-methoxyfenyl)amino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
• · · · *
•
0 • *
2- [ ({ [ (4-methylfenyl) amino] methyl} (hydroxyfosfinyl) ) methyl] pentandiová kyselina;
2-[({[(4-terc-butylfenyl)amino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl] pentandiová kyselina;
2- [({ [(thioformanilido)amino]benzyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina;
- [ ({ [1,3-dioxo-2,3-dihydro-lH-2-isoindolyl]methyl}hydroxyfosfinyl)methyl]pentandiová kyselina;
a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
Další inhibitory NAALADázy jsou uvedeny v US patentech číslo 5,672,592, 5,795,877, 5,863,536, 5,880,112 a 5,902,817, zveřejněných U.S. patentových přihláškách č. 08/825,997, 08/833,628,
08/842,360 a 08/899,319, za které byly zaplaceny poplatky za zveřejnění a v Mezinárodních patentových přihláškách č. WO 97/48399, WO 97/48400, WO 97/48409 a WO 98/53812, přičemž celé obsahy těchto patentu, přihlášek a zveřejněných přihlášek jsou zde uvedeny j ako odkaz.
Ve výhodném provedení se inhibitor NAALADázy podává společně s morfinem.
Způsob léčení diabetické neuropatie
Předkládaný vynález se dále týká způsobu léčení diabetické neuropatie u savců, zahrnujícího podávání účinného množství inhibitoru NAALADázy těmto savcům.
Příklady vhodných inhibitorů NAALADázy jsou uvedeny výše.
Způsob přípravy sloučeniny obsahující jak atom síry, tak kyselinovou skupinu
Předkládaný vynález se dále týká způsobu přípravy sloučeniny obsahující jak atom síry, tak kyselinovou skupinu, zahrnujícího « · krok reakce thiolaktonu se substituovaným esterem za vzniku sloučeniny vzorce VI kde
VI
D je skupina (CR21R22)n;
n j e 0, 1, 2, 3 nebo 4; a
R2o, R21 a R22 jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomu uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě substituovány jedním nebo více substituenty; a
Ar, je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty.
S výhodou způsob zahrnuje krok reakce sloučeniny vzorce VI s alkylačním činidlem za vzniku derivátu pentandiové kyseliny.
• · • ·
Výhodněji je thiolaktonem skupina
kde R10 je definovaná výše.
Nejvýhodněji je esterem ethylester 3-(brom)propionové kyseliny.
Dále se předkládaný vynález týká způsobu přípravy sloučeniny obsahující jak atom síry, tak kyselinovou skupinu, zahrnujícího kroky:
(i) reakce Meldrumovy kyseliny s činidlem obsahujícím síru za vzniku derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru; a (ii) reakce derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru s esterem za vzniku sloučeniny vzorce VII
VII
E je skupina obsahující síru; a
F je skupina obsahující ester propionové kyseliny.
S výhodou způsob dále zahrnuje krok derivatizace funkční skupiny sloučeniny vzorce VII.
Výhodněji je reaktantem obsahujícím thioskupinu 3 -[(trifenylmethyl)thio]propionová kyselina.
Nejvýhodněji je esterem methylester 3-(brom)propionové kyseli ny.
Předkládaný vynález se také týká sloučeniny připravené jakýmkoli způsobem uvedeným výše. Mezi příklady takových sloučenin patří sloučeniny vzorce I.
Syntéza inhibitorů NAALADázy
Některé inhibitory NAALADázy používané ve způsobech podle předkládaného vynálezu se mohou snadno připravit pomocí standardních postupu používaných v organické chemii, za použití obecných syntetických přístupů popsaných v US patentech číslo 5,672,592, 5,795,877, 5,863,536, 5,880,112 a 5,902,817, zveřejněných US patentových přihláškách 08/825, 997, 08/833,628, 08/842,360 a 08/899,319, za které byl zaplacen zveřejňovací poplatek a v Mezinárodních patentových přihláškách číslo WO 97/48399, WO 97/48400, WO 97/48409 a WO 98/53812, přičemž celý obsah patentů zveřejněných přihlášek a přihlášek je zde uveden jako odkaz.
Inhibitory NAALADázy vzorce V se mohou snadno připravit pomocí postupů, které jsou v oblasti organické chemie běžné, za použití obecných přístupů, které jsou popsány ve schématech IIX níže. Prekurzory sloučenin se mohou připravit známými postupy, které jsou například popsány v Jackson a kol., J. Med.
Chem., Vol. 39, č. 2, str. 619-622 (1996) a Froestl a kol., J.
Med. Chem., díl 38, str. 3313-3331 (1995).
• ·
Schéma I
NaH, THF
Rx-X
Způsob substituce
HCI, Var
------------------>.
skupiny R je
o
II
Η—P—R, I OH odborníkům pracujícím v této oblasti známý. Další způsoby syntézy esterů fosfinové kyseliny jsou popsané v J. Med. Chem. , díl 31, str. 204-212 (1988) a jsou uvedeny níže, ve schématu II.
• · · ·
Schéma II
Způsob A
NaH2?O4 il
R—ch=ch2 ----------------->- R— (CH2) — P—H
AIBN 1 ·
h2so4 OH
EtOH
III
II
R,—P—H ‘ I
OH
A. R, = (CH2)3Ph H. Rx = n-C7H15
B. (CH2)4Ph I. n- CeH17
C. (CH2) 5Ph J. n-C9H19
D. (CH2)4 (P-F-Ph) K. CH2CHCH3C4H9
(CH2)4- (3-pyridyl) L. CH2(CH3)C(CH3)2
F. n-C5Hu
G. n-C6H13
Způsob B
i. h2o
R,—P(OEt)2 --------2. NaOH (aq)
O
CH
N. R. = n-C4H9
O. CHCH2C5Hn • · • · · · · ·
9· 9 · · · • 9 9 9· · ···
9 » · · · * · · · · ·
Když se vyjde z výše uvedených esterů fosfinové kyseliny, nabí···· ·· zí se mnoho způsobů syntézy sloučenin vzorce
V.
Obecný postup je popsán například v J. Med. Chem., díl
39,
619-622 (1996) a je uveden ve schématu
III níže:
Schéma
III
Pd/C
Další způsoby syntézy sloučenin vzorce V jsou uvedeny níže ve schématu IV a schématu V. Schémata IV a V obsahují jako výchozí látku derivát fosfinové kyseliny a jako R je přítomen jakýkoli chemicky vhodný substituent zahrnující substituenty uvedené u schématu II a v popise, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady.
Schéma IV
Schéma V
0 II Η—Ρ—H + RjBr
ONH/
1. HMDS 2. HC1 0 II Rx—Ρ— H 1 osn NaH, THF
3. BnOH, EDC
i
HjO. Pd/C
EtOH
Další způsob přípravy sloučenin vzorce V umožňuje aromatickou substituci na Rx a je uveden níže, ve schématu VI.
• ·
Schéma VI
CO2Bn
COjBn . 6
COjBn
DCC, BnOH
THF
0 1 x 'COjBn
ϋ .1 b-' OBn NaH, THF
'CO2Bn Benzaldehyd·
Hj, Pd/C h2o
Jiný způsob přípravy sloučenin vzorce V umožňuje aromatickou substituci v poloze R2 a je uveden níže ve schématu VII.
···· ·<·
Schéma VII
0 1 0 1 NaOH
EtCT^ -^^OEt RBl
HCHO
Et2NH (R-Bn)
K2CO3
(Bn)(BnO)POH
Bu4NHSO4
Jiný způsob přípravy sloučenin vzorce V, kde Y je skupina NR5 je uveden níže, ve schématu VIII.
····
Schéma VIII ο
R,—Ρ—Η +
I OH
Ο
Rj—P —H | CO.Bn
/=\ .0
HjN^^COjBn
Η2, Pd/C η2ο
Jiný způsob přípravy sloučenin vzorce V, kde Y je atom kyslíku, je uveden ve schématu IX níže.
Schéma IX
DMAP
NaIO4
CO2Bn
Hj, Pd/C
H20
COzH ···· ·· ·· ♦ »· • · * · · · · ·· • · · · · · ··· • · · · · * ··*· ·· · «r ········· /6 e»·· ♦·····
Sloučeniny vzorce V, kde Rx je substituovaná skupinou COOR se mohou snadno připravit pomocí standardních postupů, které se používají v oblasti organické syntézy, za využití obecných syntetických přístupů uvedených níže, ve schématu X. Prekurzorní sloučeniny se mohou připravit prostřednictvím postupů, které jsou odborníkům v této oblasti známé a jsou popsané například v Jackson a kol., J. Med. Chem. , díl 39, č. 2, str. 619-622 (1996) a Froestl a kol., J. Med. Chem., díl 38, strany 33133331 (1995).
• ·
Schéma X
^γΟΗ
----------------►EDC, DMAP, CHaClj
O
OtBu
TFA, DCM
----------------->.
tBu tBu
EtOAc
OtBu
OtBu
O
• ·
Sloučeniny vzorce V, kde Rx je substituovaná skupinou NR6R7, se mohou snadno připravit pomocí standardních postupů používaných v organické syntéze, za použití obecných syntetických přístupů uvedených ve schématech XI a XII. Prekurzorní sloučeniny se mohou připravit pomocí postupů, které jsou odborníkům v této oblasti známé.
Schéma XI
C02-t-Bu /
| \
O-t-Bu CO2-t-Bu
--------► toluen
Schéma XII
C0,-t-Bu /
Pd/C, H2 ( O-t-Bu CO2-t-Bu
EtOH
PhCOCl
TFA
co2h
0
1! θ
Ρη'/'νΝ'ΖΧ'ρ/'' I 1 \ co2h
1 1 H OH
Sloučeniny vzorce I, kde X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18, se mohou snadno připravit pomocí postupu standardních v organické syntéze, za použití obecných syntetických přístupů uvedených ve schématech XIII až XXII. Prekurzorní sloučeniny se mohou připravit pomocí postupů, které jsou orborníkům v této oblasti známé.
• ·
Schéma XIII
1) LDA, THF
Schéma XIV
O
O
Schéma XV
HgClj, CaCOj
CH3CN/H2O
1. NaBHí/THF
2. TsCl
3. KSAc/DMF
CO2tBu
CO2H
SAc
TFA
SH
OtBu .OH
Schéma XVI
-OH
1. TsCl/EtjN
HO'
•SH
2. KSAc/DMF
3. NaOH/THF • ·
Schéma XVIII
Schéma XIX
1. TltS(CH2)3. .OH /-(CH2)2STrt 1
Vr° Y 0
X 2 NaBH4, AcOH X
(I)
Br (CH2)2COOCH3
NaOCHj
NaOH (II)
DMSO, Heat (III)
(IV) (V)
Schéma XX
Schéma XXI
cs2
------------->-
s
1. KSAc/DMF
2. NaOH/THF
Sloučeniny vzorce I, kde X je skupina vzorce II a A je skupina (CR1?R1S) mS, se mohou snadno připravit pomocí standardních syntetických postupu, jako je oxidace odpovídajícího thiolu.
Sloučeniny vzorce I, kde X je skupina vzorce II a A je atom síry, se mohou snadno připravit pomocí standardních syntetických postupů. Například se může postup popsaný ve schématu XXII modifikovat tak, že se nahradí výchozí látka za vhodně substituovanou thiosloučeninu. Dále se sloučeniny z této třídy mohou také připravit pomocí Michaelovy adice vhodně substituovaného thiolového derivátu na α,β-nenasycený ester.
Sloučeniny vzorce I, kde X je skupina vzorce III se mohou snadno připravit za použití standardních syntetických přístupů, jako je reakce derivátu glutamátu s oxidem siřičitým.
» · · » • » ···· · · · • · ♦ · · ···
• · · · ··
·· ··
Způsob podávání
Při způsobech podle předkládaného vynálezu se mohou sloučeniny podávat jakýmkoli známým způsobem: orálně, parenterálně, pomocí inhalačního spreje, místně, rektálně, nasálně, bukálně, vaginálně nebo prostřednictvím implantovaného zásobníku v dávkovačích prostředcích obsahujících netoxické, farmaceuticky přijatelné nosiče, přísady a vehikula. Termín parenterální podávání zahrnuje subkutánní, nitrožilní, intramuskulární, intraperitoneální, intrathekální, intraventrikulární, intrasternální, intrakraniální nebo intraoseální a infuzní techniky. Výhodné jsou invazivní techniky, zejména přímé podávání do poškozené nervové tkáně.
Tiby byly sloučeniny obzvláště terapeuticky účinné v centrálním nervovém systému, měly by s výhodou při periferním podávání snadno přecházet přes bariéru krev-mozek. Sloučeniny, které neprocházejí snadno přes bariéru krev-mozek, se mohou účinně podávat intravetrikulární cestou.
Sloučeniny se mohou také podávat ve formě sterilních injektovatelných přípravků, například jako sterilní injektovatelná vodná nebo olejová suspenze. Tyto suspenze se mohou připravit pomocí postupů, které jsou odborníkům v této oblasti známé, za použití vhodných dispergačních nebo zvlhčujících činidel a suspendujících činidel. Sterilnímu injektovatelnými přípravky mohou být také sterilní injektovatelné roztoky nebo suspenze v netoxických parenterálně přijatelných ředidlech nebo rozpouštědlech, například to mohou být roztoky v 1,3-butandiolu. Mezi přijatelná vehikula a rozpouštědla, která se mohou použít, patří voda, Ringerův roztok a isotonický roztok chloridu sodného. Dále se jako rozpouštědla nebo suspendující média používají sterilní fixované oleje. Pro tento účel se může použít jakákoli směs fixovaného oleje, jako jsou syntetické mono- nebo di-gly • · ceridy. Pro přípravu injektovatelných přípravků se mohou použít mastné kyseliny, jako je kyselina olejová a její glyceridové deriváty, včetně olivového oleje a ricínového oleje, zejména jejich polyethoxylované formy. Tyto olejové roztoky nebo suspenze mohou také obsahovat jako ředidla nebo dispergační činidla alkoholy s dlouhým řetězcem.
Dále se mohou sloučeniny podávat orálně ve formě tobolek, tablet, vodných suspenzí nebo roztoků. Tablety mohou obsahovat nosiče, jako je laktóza a kukuřičný škrob a/nebo lubrikační činidla, jako je stearát hořečnatý. Tobolky mohou obsahovat ředidla, včetně laktózy a sušeného kukuřičného škrobu. Vodné suspenze mohou obsahovat emulgační a suspendující činidla kombinovaná s aktivní složkou. Orální dávkovači formy mohou dále obsahovat sladidla a/nebo příchutě a/nebo barviva.
Sloučeniny se mohou dále podávat rektálně, ve formě čípků. Tyto kompozice se mohou připravit smísením léčiva s vhodnými nedráždivými přísadami, které jsou pevné při teplotě místnosti, ale kapalné při rektální teplotě tak, že tají v rektu za současného uvolňování léčiva. Mezi takové přísady patří kakaové máslo, včelí vosk a polyethylenglykoly.
Dále se mohou sloučeniny podávat místně, zejména když mezi cíle léčby patří místa nebo orgány, které jsou snadno dostupné prostřednictvím místní aplikace, včetně neurologických onemocnění očí, kůže nebo dolní části trávicího traktu.
Pro místní aplikaci do oka nebo oftalmické použití se mohou sloučeniny formulovat jako mikronizované suspenze v isotonickém, sterilní šalinu s upraveným pH, s výhodou jako roztok v isotonickém sterilní šalinu s upraveným pH bud' s nebo bez konzervačních látek, jako je benzalkoniumchlorid. Alternativně se mohou sloučeniny formulovat do mastí, jako je vazelína.
• · • ·
• · · · · · ······· · · • · · · · •· · ·· ···
Pro místní aplikaci na pokožku se mohou sloučeniny formulovat do vhodných mastí obsahujících sloučeniny suspendované nebo rozpuštěné například ve směsích s jednou nebo více následujícími látkami: minerální olej, kapalná vazelína, bílá vazelína, propylenglykol, sloučenina polyoxyethylenu a polyoxypropylenu, emulgační vosk a voda. Alternativně se může sloučenina formulovat do vhodných lotionů nebo krémů obsahujících aktivní sloučeninu suspendovanou nebo rozpuštěnou například v směsi jedné nebo více následujících látek: minerální olej, sorbitan monostearát, polysorbát 60, cetylesterový vosk, cetearylalkohol, 2oktyldodekanol, benzylalkohol a voda.
Místní aplikace do spodní části trávicího traktu se může provádět pomocí rektálních čípkových prostředků (viz. výše) nebo pomocí vhodného klystýrového prostředku.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou podávat pomocí jedné dávky, více oddělených dávek nebo pomocí nepřetržité infuze. Protože jsou sloučeniny malé, snadno difundovatelné a relativně stabilní, jsou také vhodné pro podávání prostřednictvím nepřetržité infuze. Pro kontinuální infizi jsou zajímavé pumpovací zařízení, zejména subkutánní pumpovací zařízení.
Dávkování
Pro léčení onemocnění uvedených výše jsou vhodné dávkovači hladiny 0,1 mg až 10 000 mg aktivní sloučeniny, výhodně 0,1 mg až 1 000. Přesná dávka pro jakéhokoli pacienta se bude měnit v závislosti na mnoha faktorech, včetně aktivity příslušné použité sloučeniny; věku, tělesné hmotnosti, celkového zdravotního stavu, pohlaví a diety pacienta; doby podávání; rychlosti vylučování; kombinaci s jinými léky; závažnosti konkrétního léčeného onemocnění; a formy podávání. Typicky výsledky vlivu dávky in vitro poskytují vhodné vodítko k tomu, jako dávkování použít
• · · · · · · • · · · · · · • ······· · · • · · · · · ·· · ·· ··· pro příslušného pacienta. Vhodné jsou také studie na zvířecích modelech. Podmínky pro určení správné dávkovači hladiny jsou odborníkům v této oblasti známé.
Ve výhodném provedení se sloučeniny podávají v lyofilizované formě. V tomto případě může být v jedné viálně lyofilizováno 1 až 100 mg sloučeniny podle předkládaného vynálezu, společně s nosičem a pufrem, jako je mannitol a fosforečnan sodný. Sloučenina se může před podáváním ve viálně rekonstruovat bakteriostatickou vodou.
Při léčení globální ischémie se sloučeniny podle předkládaného vynálezu s výhodou podávají orálně, rektálně, parenterálně nebo místně, nejméně 1 až ókrát denně, a mohou obsahovat počáteční jednorázovou dávku o vyšší koncentraci.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou podávat v kombinaci s jedním nebo více terapeutickými činidly, včetně chemoterapeutických činidel. Tabulka I uvádí známé střední dávky vybraných chemoterapeutických činidel. Konkrétní dávkovači hladiny těchto činidel a jiných terapeutických činidel budou záviset a posouzeních, která jsou uvedená výše pro sloučeninu podle předkládaného vynálezu.
Tabulka I
Chemoterapeutické činidlo Střední dávka
Aldesleukin 22 milionů jednotek
Asparaginase 10 000 jednotek
Bleomycin Sulfáte 15 jednotek
Carboplatin 50-450 mg
Carmustine 100 mg
Cisplatin 10-50 mg
Cladribine 10 mg
Cyclophosphamide (lyofilizovaný) 100 mg-2 g
Cyclophosphamide (nelyofilizovaný) 100 mg-2 g
• · • ·
Chemoterapeutické činidlo Střední dávka
Cytarabine (lyofilizovaný prášek) 100 mg-2 g
Dacarbazine 100 mg-200 mg
Dactinomycin 0,5 mg
Daunorubicin 2 0 mg
Diethylstilbestrol 2 50 mg
Doxorubicin 10-150 mg
Epoetin Alfa 2 000-10 000 jednotek
Etidronate 3 00 mg
Etoposide 100 mg
Filgrastim 300-480 mcgm
Floxuridine 500 mg
Fludarabine Fosfát 50 mg
Fluorouracil 500 mg-5 g
Goserelin 3,6 mg
Granisetron Hydrochlorid 1 mg
Idarubicin 5-10 mg
Ifosfamide 1-3 g
Immune Globulin 500 mg-10 g
Interferon Alpha-2a 3-36 milionů jednotek
Interferon Alpha-2b 3-50 milionů jednotek
Leucovorin Calcium 50-350 mg
Leuprolide 3,75-7,5 mg
Levamisole 50 mg
Mechlorethamine 10 mg
Medroxyprogesterone 1 g
Melphalan 50 g
Methotrexate 20 mg-1 g
Mitomycin 5-40 mg
Mitoxantrone 20-30 mg
Octreotide 1 000-5 000 mcgm
Ondansetron Hydrochlorid 4 0 mg
Paclitaxel 3 0 mg
Pamidronate Disodium 3 0 - * 9 0 mg
Pegaspargase 750 jednotek
Plicamycin 2 500 mcgm
Sargramostim 250-500 mcgm
Streptozocin i g
Teniposide 50 mg
Thiotepa 15 mg
Vínblastine 10 mg
Vincristine 1-5 mg
• ·· · ·♦ ·· · • · · · · · • · · · · · · • · ··· ····· _ . ······· ·· ·· ·· ·
Režim podávání
Při způsobech podle předkládaného vynálezu se může použít jakýkoli režim podávání upravující časování a posloupnost podávání léčiva a může se podle potřeby opakovat, aby se dosáhlo požadované léčby. Tento režim může zahrnovat předběžnou léčbu a/nebo současnou léčbu s dalšími terapeutickými činidly.
Aby se maximalizovala ochrana nervové tkáně před poškozením nervů, mohou se sloučeniny podávat postiženým buňkám co nejdříve je to možné. V situacích, kdy se očekává poškození nervů se mohou sloučeniny podávat před očekávaným poškozením nervu. Tyto situace zvýšené pravděpodobnosti poškození nervů zahrnují chirurgické zákroky (karotidní endarterektomie, srdeční, cévní, aortální, ortopedické zákroky); endovaskulární postupy, jako je arteriální kateterizace (karotidní, vertebrální, aortická, srdeční, renální, spinální, Adamkiewiczova); injekce embolických činidel; spirály nebo balónky pro hemostazi; přerušení vaskularity při léčení lézí mozku; a predispoziční medicinální stavy, jako jsou crescendo přechodné ischemické záchvaty, embolie nebo následné mrtvice. Pokud je předběžná léčba mrtvice nebo ischémie nemožná nebo nepraktická, je důležité dodat sloučeniny k postiženým buňkám jakmile je to možné během nebo po záchvatu. Rozmezí doby mezi mrtvicí, diagnózou a léčbou je potřeba zkrátit na minimum, aby se buňky ochránily před dalším poškozením a smrtí.
Je zřejmé, že jak na zvířecích modelech mrtvice, tak u člověka, se účinky mozkové ischémie projevují na metabolismu mozku rychle, v časových periodách měřených v minutách nebo hodinách. Jakákoli forma potenciální neuroprotektivní léčby by se tedy měla provést nej rychlejší účinnou cestou, což prakticky znamená nitrožilně. Optimální trvání a způsob podávání léčiva bude záviset na individuálních farmakokinetických vlastnostech neuro95
protektivní sloučeniny, na profilu nepříznivého vlivu léčiva a na povaze poškození vznikajícího z mrtvice. Excitotoxické poškození po mrtvici se vyvine během nejméně 4 hodin u hlodavců a pravděpodobně za 48 hodin u člověka. Dyker a kol., „Duration of Neuroprotective Treatment for Ischemic Stroke, Stroke, díl 29, strany 535-542 (1998). Může být tedy vhodné provést neuroprotekci během této kritické doby. V ideálním případě by jakákoli sloučenina pro léčení mrtvice měla vhodně procházet přes bariéru krev-mozek a poskytnout dostatečnou terapeutickou hladinu v mozku a CSF.
U pacientů s rakovinou prostaty, která není ani pokročilá, ani metastatická, se sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou podávat (i) před operační nebo radiační léčbou, aby se snížilo nebezpečí metastazí; (ii) během operace nebo společně s radiační léčbou; a/nebo (iii) po operační nebo radiační léčbě, aby se snížilo nebezpečí opětovného výskytu a aby se inhiboval růst jakýchkoli zbývajících nádorových buněk.
U pacientů s pokročilou nebo metastatickou rakovinou prostaty se mohou sloučeniny podle předkládaného vynálezu podávat jako kontinuální další složka k (nebo místo) hormonální ablace, aby se zpomalil růst nádorových buněk jak u neléčených primárních nádorových buněk, tak u existujících metastatických lézí.
Způsoby podle předkládaného vynálezu jsou zvláště vhodné, když není možné odloučené buňky chirurgicky odstranit. Po chirurgickém odstranění se mohou být způsoby podle předkládaného vynálezu účinné při snížení nebezpečí opětovného výskytu nádoru z těchto odloučených buněk.
Kombinace s jiným druhem léčby
a. Poškození nervů
Při způsobech léčby poškození nervů (zvláště při akutní ischemické mrtvici a celkové ischémii způsobené utopením a poraněním hlavy) se mohou sloučeniny podle předkládaného vynálezu podávat společně s jedním nebo více terapeutickými činidly, s výhodou s činidly, která snižují nebezpečí mrtvice (jako je aspirin) a výhodněji s činidly, která mohou snížit nebezpečí druhé ischemické příhody (jako je ticlopidine).
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou podávat společně s jedním nebo více terapeutickými činidly buď (i) společně v jednom prostředku nebo (ii) odděleně v jednotlivých prostředcích navržených pro optimální rychlost uvolňování příslušných aktivních činidel. Každý prostředek může obsahovat 0,01 až 99,99 % hmotnostních, s výhodou 3,5 až 60 % hmotnostních, sloučeniny podle předkládaného vynálezu, a také jednu nebo více farmaceutických přísad, jako jsou zvlhčující látky, emulgační činidla a pH pufrující činidla.
b. Onemocnění závislá na angiogenezi
Inhibitory NAALADázy se mohou podávat společně s jedním nebo více terapeutickými činidly buď (i) společně v jednom prostředku nebo (ii) odděleně v jednotlivých prostředcích navržených pro optimální rychlost uvolňování příslušných aktivních činidel. Každý prostředek může obsahovat 0,01 až 99,9 % hmotnostních, s výhodou 3,5 až 60 % hmotnostních, inhibitoru NAALADázy, a také jednu nebo více farmaceutických přísad, jako jsou zvlhčující látky, emulgační činidla a pH pufrující činidla.
Obecně se chirurgická a radiační léčba používají jako potenciální léčebné terapie u pacientů s lokalizovanou rakovinou, kterým je méně, než 70 let a očekává se, že budou žít ještě nejméně dalších 10 let.
c. Rakovina
Chirurgická a radiační léčba
Pokud se však pacienti léčí pouze chirurgicky, často se stává, že se rakovina objeví znovu. Radiační léčba může být také problematická, protože jsou radioterapeutická činidla toxická k normální tkáni a často dochází k vedlejším účinkům ohrožujícím život.
Použití podle předkládaného vynálezu společně s chirurgickou a radiační léčbou by mohlo preventivně působit proti remisi a umožnit nižší dávkovači hladiny toxických radioterapeutických činidel. Na základě výše uvedené statistiky je toto vhodná příležitost použít předkládaný vynález společně s (nebo jako alternativu k) chirurgickou a/nebo radiační léčbou.
Radiosenzitizéry radiosenzitizérech je známo, že zvyšují citlivost rakovinných buněk k toxickým vlivům elektromagnetického záření. V literatuře je uvedeno několik mechanismů způsobu působení radiosenzitizérů: radiosenzitizéry hypoxických buněk (například 2-nitroimidazolové sloučeniny a benzotriazinové dioxidové sloučeniny) podporují reoxygenaci hypoxické tkáně a/nebo katalýzují vznik poškozujících kyslíkových radikálů; radiosenzitizéry nehypoxických buněk (například halogenované pyrimidiny), které mohou být analogy DNA bází, se nej častěji začleňují do DNA rakovinných buněk a tak podporují radiačně vyvolané narušování molekul DNA a/nebo předcházejí normálnímu mechanismu obnovy
• · β ·· ·
DNA; a dále byly navrženy různé jiné mechanismy působení radiosenzitizérů při léčení onemocnění.
Mnoho postupů léčení rakoviny v současné době využívá radiosenzitizéry aktivované elektromagnetickým rentgenovým zářením. Příklady radiosenzitizérů aktivovaných rentgenovým zářením zahrnují: metronidazol, misonidazól, desmethylmisonidazol, pimonidazol, etanidazol, nimorazol, mitomycin C, RSU 1069, SR 4233, EO9, RB 6145, nikotinamid, 5-bromodeoxyuridin (BUdR), S-joddeoxyuridin (IUdR), bromodeoxycytidin, fluordeoxyuridin (FudR), hydroxymočovina, cisplatin, a terapeuticky účinná analoga a deriváty těchto látek.
Fotodynamická léčba (PDT) využívá viditelné světlo jako aktivátor elektromagnetického záření senzitizujícího činidla. Mezi příklady fotodynamických elektromagnetických radiosenzitizérů patří: deriváty hematoporfyrinu, Photofrin, deriváty benzoporfyrinu, NPe6, cín etioporfirin SnET2, feoborbid-a, bakteriochlorofyll-a, naftalokyaniny, fthalokyaniny, fthalokyaniny zinku a terapeuticky účinná analoga a deriváty těchto látek.
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou podávat v kombinaci s elektromagnetickými radiosenzitizéry pro zvýšení citlivosti rakovinných buněk k toxickým účinkům elektromagnetického záření. Použití podle předkládaného vynálezu společně s elektromagnetickými radiosenzitizéry může předcházet remisi a umožnit nižší dávkovači hladiny elektromagnetického záření. Kombinace elektromagnetického záření se sloučeninami, kompozicemi a způsoby podle předkládaného vynálezu může být při léčení rakoviny účinnější, než samotné elektromagnetické záření.
Když se sloučeniny podle předkládaného vynálezu kombinují s elektromagnetickými radiosenzitizéry, mohou se také podávat společně s jednou nebo více následujícími sloučeninami: sloučeni99 ···· ·· ··9
9 9 99 9
9 9 9 9 99
999 9 9999
9 9 9 9 99
99 999 námi, které podporují začlenění radiosenzitizéru do cílové buňky; sloučeninami, které kontrolují tok léčiva, živiny a/nebo kyslíku to cílových buněk; chemoterapeutickými činidly, které působí na nádor s nebo bez dalšího elektromagnetického záření; nebo dalšími terapeutickými činidly pro léčení rakoviny nebo jiných onemocnění. Mezi příklady takových činidel patří: 5fluoruracil, leucovorin, 51-amino-51-deoxythymidin, kyslík, carbogen, transfuze červených krvinek, perfluorované uhlovodíky (například Fluosol-DA), 2,3-DPG, BW12C, činidla blokující vápníkový kanál, pentoxyfyllin, hydralazin a L-BSO, vynález se však neomezuje pouze na tyto příklady. Příklady chemoterapeutických činidel jsou uvedeny v tabulce I.
Hormonální léčba
K blokování hormonů, které podporují další růst a metastázování rakoviny, se používá hormonální ablace pomocí medikace a/nebo orchiektomie. Časem se stanou jak primární, tak metastatické nádory, v podstatě všech těchto pacientů nezávislé na hormonech a odolné vůči léčbě. Pro prevenci nebo zvrácení tohoto stavu potenciálně umožňujícího metastázování se může použít kontinuální podávání sloučenin podle předkládaného vynálezu.
Ch emo t erapi e
Chemoterapie je úspěšná při léčení některých forem rakoviny. Avšak u jiných forem rakoviny se chemoterapie použije pouze jako poslední možnost. V každém případě může být chemoterapie problematická, protože jsou chemoterapeutická činidla toxická k normální tkáni a často mají vedlejší účinky ohrožující život. Dále má chemoterapie často vysoký stupeň selhání a/nebo remise.
Použití podle předkládaného vynálezu ve spojení s chemoterapií by mohlo preventivně působit proti remisi a umožnit nižší dáv100 ······ ·· · ·· • » · · · · ··· kování toxických chemoterapeutických činidel. Kombinace chemoterapie se způsoby podle předkládaného vynálezu by mohla být při léčení rakoviny účinnější, než samotná chemoterapie.
Imunoterapie
Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se mohou také za účelem léčení rakoviny použít v kombinaci s monoklonálními protilátkami. Předkládaný vynález se může také použít při imunoterapii založené na polyklonálních nebo monoklonálních činidlech odvozených od protilátek. Tato činidla jsou odborníkům pracujícím v této oblasti známá a zahrnují radioznačené monoklonální protilátky, jako jsou monoklonální protilátky konjugované se stronciem-89.
In vivo toxicita inhibitorů NAALADázy
Toxikologický vliv inhibice NAALADázy in vivo se testoval na myších. Výsledky ukazují, že inhibitory NAALADázy jsou u myší netoxické, což naznačuje, že mohou být podobně netoxické pro člověka, pokud se podávají v terapeuticky účinném množství. Příklady postupů jsou uvedeny například v US patentech číslo 5,672,592, 5,795,877, 5,804,602, 5,824,662, 5,863,536, 5,880, 112 a 5,902,817, a zveřejněných US patentových přihláškách 08/825,997, 08/833,628, 08/842,360 a 08/899,319, za které byly zaplaceny zveřejňovací poplatky, přičemž obsah patentů a patentových přihlášek je zde uveden jako odkaz.
In vitro inhibice aktivity NAALADázy
U různých sloučenin vzorce I-V se testovala inhibiční aktivita vůči NAALADáze in vitro. Některé výsledky jsou uvedeny v US patentech číslo 5,672,592, 5,795,877, 5,863,536, 5,880,112 a 5,902,817, zveřejněných US patentových přihláškách 08/825,997, 08/833,628, 08/842,360 a 08/899,319, za které byly zaplaceny
101 ....... *’ zveřejňovací poplatky, přičemž obsah patentů a patentových přihlášek je zde uveden jako odkaz. Další výsledky jsou uvedeny v tabulce II níže.
102
Tabulka II
IN VITRO INHIBICE AKTIVITY NAALADÁZY
Sloučenina
(xiM)
2000
234
O
104
co2h
• ·
OH
90.0
co2h
108 ···· ·· • · • · ·
CO?H
510 (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
(2 - sulfanylhexyl)pentandiová kyselina • · ♦·
2-(l-methyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
158
2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina
4650
2-(2-fenyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
110 ·«··«· ··· ·· · ··· · · « · · · · • · · ···· ·· · • · · · · ······· · · • · · · ·· · ·· · • φ · · ·· · · · ···
1550 (1-ethyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
10000
2-(2-naftyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
100
2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina
239
2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina
2-(4-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina
2-[2-[(3,5-dikarboxypentyl)dithio]ethyl]pentandiová kyselina ···· «· ·<· · ·· • · · · · · · * A • · ··· ·«·»·«· · · ····*·· ··· ·· ·· ·· · ·· ···
In vitro test inhibitorů NAALADázy při ischéxnii
Při testování in vitro vlivu inhibitorů NAALADázy na ischémii se kortikální buněčné kultury ošetří různými inhibitory NAALADázy během ischemického poškození (kyanid draselný a 2-deoxyglukóza) a potom po jedné hodině (podrobnosti pokusu viz. Vornov a kol., J. Neurochem. , díl 65, č. 4, str. 1681-1691 (1995)) . Některé výsledky jsou uvedeny v US patentech číslo 5,672,592, 5,795,877, 5,863,536, 5,880,112 a 5,902,817, zveřejněných patentových přihláškách 08/825,997, 08/833,628, 08/842, 360 a 08/899,319, za které byly zaplaceny zveřejňovací poplatky, přičemž obsah patentů a patentových přihlášek je zde uveden jako odkaz. Další výsledky jsou uvedeny níže v tabulce III. Neuroprotektivní účinek je vyjádřen jako EC50, což je koncentrace, která potřebná aby došlo k 50% snížení toxicity glutamátu po ischemickém poškození.
113
Tabulka III
ECSO (nM)
SLOUČENINA
• · • ·
114
792
OH
O
• ·
116
O . 04
2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
2-(2 sulfanylhexyl)pentandiová kyselina • ·
117
OH
141
2-(l-methyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
2-(2-fenyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
2-(1-ethyl-2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
118
2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina
2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina
2-(4-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina
119
-Í2-Γ(3,5-dikarboxypentyl)dithiol ethyl 1 pentandiová kyselina
Odezva při tomto účinku na dávku, která se měří pomocí procentuální toxicity při různých koncentracích sloučeniny 3 jako inhibitoru NAALADázy, je uvedena v US patentech číslo 5,672, 592, 5,795,877, 5,804,602, 5,824,662, 5,863,536, 5,880, 112 a 5,902,817, a zveřejněných US patentových přihláškách číslo 08/825,997, 08/833,628, 08/842,360 a 08/899,319, za které byly zaplaceny zveřejňovací poplatky, přičemž obsah patentů a patentových přihlášek je zde uveden jako odkaz.
In vivo test inhibitorů NAALADázy při poškození mozku po MCAO u krys Sprague-Dawley
Při testování neuroprotektivního účinku inhibitorů NAALADázy na poškození mozku in vivo se ošetří krysy Sprague-Dawley vehikulem a buď sloučeninou 1 nebo 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiovou kyselinou.
Kontrolní skupina dostává Hepes pufrovaný salinem.
Čtyři skupiny léčené léčivem dostávají sloučeninu 1. U každé krysy se léčba zahájí 60 minut po uzavření střední mozkové tepny (MCAO) injekcí bolu IV, po kterém okamžitě následuje infuze IV po dobu 4 hodin v množství 0,5 ml/hodina. Skupina 1 (n = 9) • · · · • · ·· ♦ ·♦ • · · · · · • · · · · · • ······· · 120 ’·· '·· *··’ * ’** * dostává dávku 100 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 20 mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin. Skupina 2 (n = 11) dostává dávku 30 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 6 mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin. Skupina 3 (n = 9) dostává dávku 10 mg/kg bolu IV, po které následuje infuze 2 mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin. Skupina krys 3 se také léčí v čase 120 minut, 180 minut a 360 minut po okluzi. Skupina 4 (n = 8) dostane dávku 3 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 3 mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin.
Další dvě skupiny léčené léčivem dostanou 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiovou kyselinu. U každé krysy začne léčba 120 minut po okluzi střední mozkové tepny (MCAO) injekcí bolu IV, po kterém následuje infuze IV po dobu 4 hodin v množství 0,5 ml/hod. Skupina 5 dostane 30 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 6 mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin. Skupina 6 dostane dávku 10 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 2 mg/kg/hodina IV.
Dvacetdva hodin po reperfuzi se krysy usmrtí a vyjmou se jim mozky. Odebere se sedm koronálních sekcí (tloušťka asi 2 mm) a barví se 1% roztokem 2,3,5-trifenyltetraxoliumchloridu (TTC) 2 0 minut a potom se fixují 10% formalinem. Zobrazí se anteriorní a posteriorní povrch většiny rostrální části mozku a posteriorní povrch všech zbývajících 6 sekcí. Kvantifikace velikosti infarktu se dosáhne za použití počítačového analytického digitálního zobrazovacího systému (LOATS). Oblasti mozku, které zcela neobsahují TTC barvivo se označí jako odumřelé tkáně. Celkový objem infarktu pro každou krysu se vypočte numerickou integrací příslušných ploch částí mozku.
Celkový objem infarktu pro každou skupinu krys je uveden v tabulkách IV(a) a IV(b).
121
Tabulka IV(a)
Krysy léčené sloučeninou 1
Dávka (mg/kg) Čas podávání (minuty) % ochrany hodnota p
100 60 po 44 0,0142
30 60 po 52 0,0020
10 60 po 50 0,0058
10 12 0 po 33 0,021
10 180 po 47 0,014
10 3 60 po 50 0,002
3 60 po 52 0,0037
1 60 po 20 0,3611
Tabulka IV(b)
Krysy léčené 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiovou kyselinou
Dávka (mg/kg) Čas podávání (minuty) % ochrany hodnota p
30 120 po 52 0,0003
10 12 0 po 21 0,29
Krysy léčené vehikulem měly průměrný celkový objem infartku mozku 2 65 ± 33 mm3.
Krysy léčené sloučeninou 1 mají daleko menší velikost infarktu. Průměrný celkový objem infarktu mozku pro čtyři skupiny léčené sloučeninou 1 je: 123 ± 31 mm3 pro skupinu 1 (p = 0,014 oproti skupině léčené vehikulem) ; 141 ± 78 mm3 pro skupinu 2 (p =
0,002 oproti skupině léčené vehikulem); 152 ± 32 mm3 pro skupinu 3 (léčenou 60 minut po okluzi; p = 0,0058 oproti skupině léčené vehikulem); 117 ± 22 mm3 pro skupinu 4 (p = 0,0037 oproti skupině léčené vehikulem). Tyto výsledky ukazují, že sloučenina 1 je neuroprotektivní na krysím modelu MCAO mrtvice, pokud se podává 60 minut, 12 0 minut, 18 0 minut a 3 60 minut po okluzi.
Krysy léčené 2-(3-sulfanylpropyl)-pentandiovou kyselinou v množství 30 mg/kg bolu IV, po kterém následuje infuze 6
122
mg/kg/hodina IV po dobu 4 hodin, také vykazují značně nižší velikost infarktu, než skupina krys léčená vehikulem. Při této konkrétní dávkovači hladině je 2-(3-sulfanylpropyl)-pentandiová kyselina neuroprotektivní na krysím modelu MCAO mrtvice, pokud se podává 120 minut po okluzi.
U pacientu s mrtvicí často dochází k značnému časovému způždění mezi začátkem ischémie a začátkem léčby. Existuje tedy potřeba neuroprotektivních léčiv s dlouhým terapeutickým oknem. Údaje uvedené výše ukazují, že sloučeniny podle vynálezu mají na modelu mrtvice MCAO u krys terapeutické okno nejméně 6 hodin. Odborníkům pracujícím v této oblasti bude zřejmé, že u člověka bude toto „okno větší.
Postup in vivo testu inhibitorů NAALADázy při poškození mozku
Použijí se samci krys Sprague-Dawley o hmotnosti 260-320 g. Rozdělí se po jedné a nechá se jim volný přístup k potravě a vodě. Dva dny před pokusem se omezí potrava, pokud je to nutné, aby si krysy udržely tělesnou hmotnost. Každé kryse se provedou dva zákroky: kanylace femorální žíly pro IV infuzi a MCAO. Během zákroků se krysy anestetizují 1,5% halotanem dodávaným pomocí kyslíku přes inhalačni masku. Monitoruje se tělesná teplota a reguluje se normometrická hladina za použití homeotermního zahřívacího systému. Nejprve se do levé femorální žíly vloží katétr. Za 30 minut se krysa reanestetizuje za účelem zákroku MCAO. MCAO se provede za použití způsobu endovaskulárního sešití popsaného v Long a kol., Stroke, díl 20, strany 84-91 (1989). Přesněji se pravá vnější krkavice (ECA) odhalí, koaguluje a příčně rozřízne. Do proximálního konce ECA se pomocí arteriotomie zavede 3-0 nylonová sutura s jedním vláknem s tupou špičkou a povlakem 0,05% poly-l-lysinu. Umístí se 22 mm od rozdvojení krkavice dokud se nedostane do proximálního úseku horní mozkové artérie, čímž uzavře začátek MCA. Krysy se potom • · • · • · · ··· ·· ··· · · · · ·· • · · · ·· · ·· 123 .........
nechají probudit; o 2 hodiny později se anestetizují za účelem reperfuze, během které se nylonová sutura vyjme z části ECA a umožní se tok krve do MCA.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na vzrůst hladiny glutamátu způsobený mrtvicí
U sloučeniny 3 se testuje její vliv na hyperglutamatergní poruchy in vivo u krys při zvýšení extracelulárního glutamátu vyvolaného mrtvicí. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění bylo zaplaceno a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že léčba sloučeninou 3 významně snižuje vzrůst extracelulárního glutamátu způsobený mrtvicí ve striatu; a úplně předchází současným změnám glutamátu v temnní kúře.
In vitro test inhibitorů NAALADázy na myelinaci v buněčné kokultuře buněk ganglií dorsálních kořenů a Schwannových buněk
Inhibice NAALADázy vede k významnému zvýšení počtu myelinovaných axonů a tloušťky myelinu ve srovnání s myšmi léčenými vehikulem po kryolesi sedacího nervu (Soc. Neurosci. Abstr., díl 23, č. 2, strana 2302 (1997)). Předpokládá se, že NAALADáza může hrát při signalizaci vzniku myelinu a inhibice NAALADázy může usnadnit myelinaci. Pro ověření této hypotézy se testoval vliv několika inhibitorů NAALADázy na in vitro modelovém systému myelinace. Jak bylo uvedeno výše, použila se kokultura buněk ganglií dorsálního kořene a Schwannových buněk (Einheber a kol., J. Velí. Biol., díl 123, strana 1223). Po 7 dnech v kultuře se myelinace vyvolá přidáním séra a kyselina askorbové při různých dávkách inhibitoru NAALADázy (1 nM až 10 μΜ) nebo progesteronu (20 nM; pozitivní kultura) . Rozsah myelinace se testuje mezi dny 14 až 21 za použití imunocytochemického barvení myelinového bazického proteinu (MBP), který je • · · ·
124 .........
známým myelinovým markérem. Kvalitativní analýza imunoznačené kultury ukáže značnou odezvu na dávku související se vzrůstem počtu myelinovaných axonú po přidání inhibitorů NAALADázy ve srovnání s kulturami ošetřenými vehikulem. Jak je uvedeno na obrázcích 1A-C a 2A-C, dvoutýdenní léčba inhibitory NAALADázy sloučeninami 3 a 2 (1 nM) způsobí značný nárůst imunoznačení MBP. Kultury ošetřené vysokou dávkou sloučeniny 3 a sloučeniny 2 (1 μΜ) mají větší rozsah myelinace než kultury, léčené maximální dávkou kyseliny askorbové a progesteronu. Tyto výsledky naznačují, že inhibice NAALADázy může usnadnit myelinaci a může být klinicky vhodná při léčení demyelinačních onemocnění.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na vzniku myelinu po kryolesi sedacího nervu
U sloučeniny 3 se testuje in vivo vliv na regeneraci nervu a myelinaci po kryolesi sedacího nervu u samců myší. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že sedací nerv u myší léčený sloučeninou 3 vykazuje zvýšení počtu myelinovaných axonů a vzrůst tloušťky myelinu.
In vivo test inhibitorů NAALADázy při Parkinsonově nemoci
U sloučeniny 3 se testuje in vivo její vliv na Parkinsonovu nemoc u MPTP lesionovaných myší. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že MPTP lesionované myši, které dostávají sloučeninu 3, vykazují výrazné obnovení TH barvených dopaminergních neuronů což naznačuje, že sloučenina 3 chrání proti toxicitě MPTP.
• · 9 «· 9 9 9 9999999 9 ···· ·· · ··
125 .........
In vivo test inhibitorů NAALADázy na poškození míchy vyvolané dynorfinem
U sloučeniny 3 se testuje její in vivo vliv na excitotoxické poškození míchy u krys vyvolané dynorfinem. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899, 319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že pokud se sloučenina 3 podává společně s dynorfinem A, dojde k značnému zlepšení motorických výsledků 24 hodin po injekci, což naznačuje, že sloučenina 3 poskytuje účinnou ochranu proti poškození míchy způsobenému dynorfinem.
In vitro test inhibitorů NAALADázy na amyotrofní laterální skleróze (ALS)
U sloučeniny 3 se testuje její in vitro vliv na amyotrofní laterální sklerózu (ALS) na organotypické kultuře míchy. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že sloučenina 3 vykazuje ochranu závislou na dávce proti toxicitě vyvolané ΊΉΑ.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na spotřebu ethanolu u krys závislých na alkoholu
U sloučeniny 3 se testuje její in vivo vliv na spotřebu ethanolu u krys závislých na alkoholu. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že sloučenina 3 výrazně snižuje spotřebu alkoholu aniž by to ovlivnilo tělesnou hmotnost nebo 24hodinou spotřebu vody což naznačuje, že NAALADáza • · · · • ·
může být obsažena v nervovém systému regulujícím chování související s pitím alkoholu.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na spotřebu nikotinu u samců krys Long-Evans
U sloučeniny 3 se testuje její in vivo vliv na spotřebu nikotinu u krys. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že sloučenina 3 snižuje spotřebu nikotinu a také kumulativní přijímání potravy. Ačkoli výsledky ukazují, že mohou být za snížení spotřeby nikotinu zodpovědné i jiné faktory, než inhibitor NAALADázy, nevyvracejí, že je NAALADáza zahrnuta v nervovém systému regulujícím užívání nikotinu. Vliv na spotřebu potravy u krys může být připsán toxicitě způsobené nadměrnou dávkou léku.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na behaviorální senzitizaci ke kokainu u krys Sprague-Dawley
NAALADáza hydrolyzuje neuropeptid NAAG za uvolnění glutamátu (GLU) . Předpokládá se, že by inhibice NAALADázy mohla snížit senzitizaci tím, že působí preventivně proti tomuto zdroji GLU. Hodnotil se vliv sloučeniny 3 při senzitizaci, která vede k psychomotorickým stimulačním efektům kokainu. Samci krys Sprague-Dawley dostávají injekce kokainu (20 mg/kh/den x 5 dní; i.p.) nebo šalin (1 ml/kg). Patnáct minut před injekcí dostanou sloučeninu 3 v dávkách 10 a 50 mg/kg. Pohybová aktivita vyvolaná kokainem (20 mg/kg) se hodnotí po 3 dnech. Akutní dávka kokainu zvýšila aktivitu při expozici kokainu (například senzitizace). U zvířat, která dostala sloučeniny 3 s kokainem bylo bylo zvýšení aktivity značně nižší. Sloučenina 3 jako taková nemění bazální pohybovou aktivitu nebo odezvu na šalin.
·· φ · φφ ·· φ
127
Výsledky jsou graficky zpracované na obrázku 23. Údaje ukazují, že sloučenina 3 snižuje vznik senzitizace vyvolané kokainem. Na základě postulované úlohy GLU při senzitizaci se předpokládá, že inhibitory NAALADázy mohou předcházet změnám v chování, ke kterým dochází následkem opakovaného podávání kokainu.
In vitro test inhibitorů NAALADázy na rakovině
U sloučeniny 3 a chischalové kyseliny se testoval na buňkách LNCaP jejich vliv na rakovinu prostaty. Postup a výsledky jsou uvedeny ve zveřejněné US patentové přihlášce číslo 08/899,319, za jejíž zveřejnění byly uhrazeny poplatky a jejíž celý obsah je zde uveden jako odkaz. Výsledky ukazují, že se proliferace buněk LNCaP značně sníží , když se zvýší koncentrace sloučeniny 3 a chischalové kyseliny což naznačuje, že by inhibitory NAALADázy mohly být účinné při léčení rakoviny, zejména rakoviny prostaty.
Postup in vitro testu u rakoviny
Buňky v médiu RPMI 1640 obsahujícím 10% fetální bovinní sérum (FCS) se nanesou na 24jamkové mikrotitrační destičky a nechají se 24 hodin přilnout a potom se přidá chischalové kyselina (10‘9 až 10'6) nebo sloučenina 3 (1011 až 10’8) na 7 dní. V sedmém dni se buňky ošetří pulsem 3H-thymidinu po dobu 4 hodin, sklidí se a měří se radioaktivita. Hodnoty představují průměr ± směrodatnou odhcylku 6 oddělených jamek s buňkami při každém testu. Všechny pokusy se provádějí nejméně dvakrát.
Jako kontrola nespecifického cytostatického efektu chischalové kyseliny a sloučeniny 3 se činidla současně testují na linii buněk prostaty neobsahující NAALADázu, DU145 (Carter a kol., Proč. Nati. Acad. Sci. USA, (93) 749-753, 1996) . Pokud léčení chischalovou kyselinou a sloučeninou 3 nemají významný vliv
128 • · · · ♦ · * ·· • φ * · · · ···· · ·· • · · · · · · ** ·· ·· ·· · ♦· na růst buněk, je inhibiční aktivita činidel vůči NAALADáze jednoznačně zodpovědná za jejich cytostatický vliv na buněčnou linii rakoviny prostaty.
Buněčné kmeny a tkáňové kultury
LNCaP buňky se získají od Dr. Williama Nelsona z Johns Hopkins School of Medicine v Baltimoru, MD. Buňky DU145 se získají od Američan Type Culture Collection (Rockville, MD) . Buňky se kultivují v médiu RPMI-1640 obsahujícím 5% teplem inaktivované fetální telecí sérum, 2 mM glutaminu, 100 jednotek/ml penicillinu a 100 μg/ml streptomycinu (Paragon) ve vlhkém inkubátoru při 37 °C v atmosféře obsahující 5 % oxidu uhličitého a 95 % vzduchu.
Test zabudování [3H] thymidinu
Buňky se suspendují při koncentraci 1 x 103 buněk/ml v médiu RPMI-1640 a umístí se 24jamkových destiček při 500 μΐ na jamku. Po 24 hodinách inkubace se do jamek přidají různé koncentrace chischalové kyseliny (Sigma) nebo účinný inhibitor NAALADázy, sloučenina 3 (syntetizovaná podle postupu popsaného v Jackson a kol., J. Med. Chem., díl 39, číslo 2, strany 619-622) a destičky se vrátí do inkubátoru. Ve dnech 3, 5 a 7 se médium a léčivo vymění. V osmém dni se jamky ošetří pulsem 1 μCi 3H-thymidinu (New England Nuclear) 4 hodiny. Médium se potom odstraní a jamky se promyjí dvakrát salinem pufrovaným fosfátem (pH = 7,4). Obsahy všech jamek se postupně solubilizují 250 μΐ 0,2N hydroxidu sodného a převedou se do scintilačních viálek. Přidá se 5 ml scintilační směsi UltimaGold (Packard) a za použití scintilačního počítadla Beckman LS6001 se určí hodnota radioaktivity .
129
Čistota a/nebo identita všech syntetických sloučenin se určí pomocí tenkovrstvé chromatografie, vysokotlaké kapalinové chro matografie (HPLC), hmotové spektroskopie a elementární analýzy.
Protonová spektra nukleární magnetické resonance se získají za použití spektrometru Bruker. Chemické posuny jsou uvedeny jako části z milionu vzhledem k tetramethylsilanu jako vnitřnímu standardu. Analytická tenkovrstvá chromatografie (TLC) se provádí na silikagelových destičkách GHLF (Analtech, Newark, DE). Destičky se vizualizují pomocí UV světla, směsi fosfomolybdenové kyseliny a ethanolu a/nebo spálení s jodoplatičitanem. Velmi rychlá chromatografie se provádí na Kieselgel 60, zrnitost 230-400 (E. Měrek, Darmstadt, Německo). Rozpouštědla jsou bud' čistá nebo HPLC čistá. Pokud není uvedeno jinak, reakce se provádějí při teplotě místnosti a v atmosféře dusíku. Rozpouštědla se odpařují za sníženého tlaku na rotační odparce Buchi.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na rakovině
Za účelem testování vlivu inhibitorů NAALADázy na rakovinu in vivo se ner samci myší injektují buňkami LNCaP a syngenickým krysám kmene Copenhagan injektovaným buňkami Dunning G se podávají subkutánně a/nebo intratumorálně různé dávky sloučeniny 3. Střední objem nádoru (mm3) a poměr nádor .-kontrola (% T/C) po léčbě je graficky znázorněn na obrázcích 3-7.
Výsledky ukazují, že LNCaP nádory reagují na subkutánní léčbu sloučeninou 3. Nižší dávky 1 a 3 mg/kg a vyšší dávky 30 mg/kg nemají zřejmě žádný vliv na růst nádoru (Obr. 3) . Dávka 10 mg/kg značně inhibuje růst nádoru na 24 % vzhledem ke kontrole ve dni 86 (p = 0,006) (obr. 4).
Nádory Dunning G také reagují na subkutánní léčbu sloučeninou 3. Nižší dávky 1 a 3 mg/kg nemají žádný vliv na růst nádoru, zatímco dvě vyšší dávky, 10 a 30 mg/kg, značně snižují velikost
130 nádoru (obr. 5) . Velikost nádoru se sníží na 39 % vzhledem ke kontrole (p = 0,03) při dávce 10 mg/kg a na 22 % vzhledem ke kontrole při dávce 30 mg/kg (obr. 6).
LNCaP nádory také reagují na intratumorální léčbu sloučeninou 3. Tři nižší dávkové hladiny (0,025, 0,25 a 2,5 μg/den) zpomalí růst nádoru, ačkoli k největšímu zmenšení došlo při 0,025 gg/ den (tabulka V) . Objem nádoru po 42 dnech léčby u kontrolní skupiny byl 807,3 ± 197,3 mm3, zatímco u skupiny léčené 0,025 μg/den (obr. 7) byl 465,7 ± 176 mm3.
Tabulka V
Léčená skupina Optimální % T/C Regrese
Kontrola 100 0/7
Prot inádorová
sloučenina 3
25,0 μg/den 76 0/7
2,5 μg/den 45 0/7
0,25 μg/den 51 1/7
0,025 μg/den 42 1/7
Postup rakovinových testů in vivo
Subkutánní podávání léčiva
LNCaP model (sloučenina 3):
Samci nahých ncr myší ve věku 5 až 6 týdnů se injektují do pravé slabiny 5 x 106 buněk LNCaP v Matrigel™ (celkový injektovaný objem 0,1 ml) . Dva týdny po injektování buněk se začne denně subkutánně (s.c.) injektovat sloučenina 3 v následujících dávkách: 1, 3, 10 a 30 mg/kg. Kontrolní skupina dostává denně 50 mM HEPES s.c. Jakmile jsou nádory hmatatelné, měří se dvakrát' týdně.
131 ······ · · · · · · ··· ♦ · · » ·*· • · · ···· · ·· ·· · « · «······ ·· « · · · 9 · · · ·· • · 9 9 ¢9 · · 9· 9 ·
Model Dunning G (sloučenina 3):
Samci syngenických krys Copenhagen ve věku 8 až 10 týdnů, se injektují do obou slabin 107 buňkami Dunning G. Dva týdny po injektování buněk se začne denně subkutánně (s.c.) injektovat sloučenina 3 v následujících dávkách: 1, 3, 10 a 30 mg/kg. Kontrolní skupina dostává denně 50 mM HEPES s.c. Jakmile jsou nádory hmatatelné, měří se dvakrát týdně.
Intratumorální podávání léčiva
Model LNCaP (sloučenina 3):
Samci nahých myší ncr ve věku 5 až 6 týdnů se injektují do pravé slabiny 107 buněk LNCaP v Matrigel™ (celkový injektovaný objem 0,1 ml). Když nádory dosáhnou předem určené velikosti (50 až 60 mm3) , myši se náhodně umístí do léčebných skupin obsahujících 6 až 8 myší. Sloučenina 3 se podává intratumorálně denně v objemu 0,05 ml v následujících dávkách: 25, 2,5, 0,25 a 0,025 μ9. Kontrolní skupina dostává denně intratumorálně 50 μΐ 50 mM HEPES. Nádory se měří dvakrát týdně.
Odezva na léčbu se monitoruje dvěma způsoby. Při prvním se průměrný objem nádoru pro každou skupinu vyjádří jako poměr nádor:kontrola (% T/C) a tyto hodnoty se porovnají v jednom časovém bodě. Při druhém způsobu se sleduje objem nádoru proti času.
In vivo test vlivu denního podávání inhibitorů NAALADázy na angiogenezi
Samice myší C57B1 ve věku 8 až 10 týdnů (5/skupina) se injektují subkutánně 0,5 ml Matrigelu™, 150 ng/ml bazického angiogenního faktoru FGF (bFGF) a 0, 0,47 μΜ nebo 4,7 μΜ sloučeniny 3. Injektovaný Matrigel™ se rychle mění na gel. Ve stejném
132 dni, jako se injektuje Matrigel™, se zahájí denní subkutánní podávání sloučeniny 3 okolo zátky z Matrigelu™. Sedm dní po injektování Matrigelu™ se Matrigelové™ zátky vyjmou a provede se histologie.
Koncentrace denních dávek a také odpovídající původní složení Matrigelových™ zátek jsou uvedeny níže v tabulce VI.
Tabulka VI
Koncentrace denních dávě inhibitorů NAALADázy
Denní subkutánní inj ektovaná koncentrace Počáteční koncentrace v Matrige’ lu™
Vehikulum 50 mM Hepes
3 mg/kg 0,47 μΜ sloučeniny 3 v 50 mM Hepes
30 mg/kg 4,7 μΜ sloučeniny 3 v 50 mM Hepes
Jak je podrobně uvedeno na obrázku 8A, k dobré angiogenické odezvě došlo u skupin dávkovaných vehikulem. Snížení množství cév nebo angiogenze v Matrigelových™ zátkách u skupin, kterým byly denně podávány dávky 3 mg/kg a 30 mg/kg, je uvedeno na obrázcích 8B a 8C.
In vivo test vlivu kontinuálního podávání inhibitorů NAALADázy na angiogenezi
Samicím myší C57B1 byly implantovány miniosmotické pumpy při koncentracích sloučeniny 3 uvedených v tabulce VII níže. Současně byly implantovány také minipumpy obsahující vehikulum (50 mM Hepes). Po dvacetičtyřech hodinách se každá myš subkutánně injektuje 0,5 ml Matrigelu™ a 150 ng/ml angiogenického faktoru, basického FGF (bFGF). Třicet dní po injekci Matrigelu™/ bFGF se gely vyjmou, fixují ve formalinu a části se barví barvou Trichrome-Masson.
133
Φ Φ Φ Φ Φ · · · · · · φφφ · φ · φφφ ·· · φ · φφφφφφφ φ φφφφ φφ φ φφ φφ «· * φφ φ φφ φ
Tabulka VII
Koncentrace kontinuálně podávaných inhibitoru NAALADázy
Sloučenina 3 uvolněná minipumpou mM Hepes gg/den gg/den
100 gg/den
K silné angiogenní odezvě došlo u vehikula a skupiny dávkované 1 mg/den, což je uvedeno na obrázcích 9 a 10. Jak je podrobně uvedeno na obrázcích 11 a 12, podávání 10 gg/den a 100 gg/den sloučeniny 3 výrazně snížilo angiogenezi u gelů Matrigel™/ bFGF.
Tn vivo test inhibitorů NAALADázy na diabetické neuropatii
Studovala se inhibice NAALADázy na in vivo modelu periferní diabetické neuropatie vyvolané atreptozotocinem (STZ). Samci krys Sprague-Dawley o hmotnosti 200 až 250 g se diabetizují pomocí nitrožilní injekce 60 mg/kg STZ do ocasní žíly. Hladina glukózy v plazmě se určí 3 týdny po podání STZ. Pro studii se použijí pouze STZ zvířata s hladinou glukózy v plasmě vyšší, než 300 mg/dl (17 mM). Pro hodnocení stavu senzorických neuronů ganglií malých dorsálních kořenů (DRG) se použije práh tepelné bolesti a latence odtažení. Bolest se monitoruje za použití plantárního testu (Hargreavesova metoda) za použití zařízení Basile Plantar vyrobeného Ugo Basilem, Vaarese, Itálie.
Dva měsíce po podání STZ byla diabetická zvířata hyperalgetická ve srovnání s nediabetickými kontrolními zvířaty, což se určilo pomocí rozdílu v latenční době odtažení. V tomto čase se krysám intraperitoneálně začal podávat jednou denně po dobu 20 dní bud' inhibitor NAALADázy, sloučenina 2 (50 mg/kg), nebo vehikulum.
Odezva na bolest způsobenou teplem se měřila 3, 5, 12 a 19 dní po dávkování. Jak je uvedeno na obrázku 13, po 5 dnech od dáv134 ······ · · r· · <
«φφ · φ · « · φ φ • φφ · · · ··· φ ·· · · · φφφφφφ· ·· • · · · ·· φ·· φ • · ·· φφ > ·· φφφ kování zvířata, která dostávala sloučeninu 2 vykazují významný vzrůst latenční doby odtažení ve srovnání se zvířaty, která dostávala vehikulum. Tento rozdíl se zachoval po celou dobu sledování.
Tyto údaje naznačují, že inhibitory NAALADázy chrání proti experimentální diabetické senzorické neuropatii a mohou být vhodné pro léčení periferní neropatie.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na modelech bolesti hyperalgesie ve formalinu, kyselině octové a způsobené chronickou konstrikcí (CCI)
Nedávné výzkumy naznačují, že excitační aminokyselina glutamát hraje hlavní roli jak při centrálně, tak periferně zprostředkované nocicepci. Předpokládá se, že jedním zdrojem nervového glutamátu je neuropeptid NAAG, který se hydrolyzuje NAALADázou za uvolnění volného glutamátu. Vynálezci se domnívají, že by inhibice NAALADázy mohla omezit bolest preventivním působením na tento zdroj glutamátu. Pro ověření této hypotézy vynálezci testovali možné antinocipetivní vlivy některých inhibitorů NAALADázy na modelech bolesti způsobené formalinem, kyselinou octovou a chronickým konstriktivním poškozením (CCI; „Bennetův model). Při formalinovém modelu se krysám i.p. podává denně sloučenina 3 (50 mg/kg) nebo vehikulum po dobu 7 dní. V sedmém dni do hřbetní části zadní končetiny krysy injektuje 5% formalin. Výsledky jsou graficky uvedeny na obrázcích 14-19. Předběžná léčba sloučeninou 3 značně snižuje ucukávání při bolesti jak v časné, tak pozdní fázi formalinového modelu (13,8 ± 6,4 sníženo na 2,5 ± 3, p = 0,02 a 58,0 ± 9,8 sníženo na 0,5 ± 0,58, p = 0,0001, v tomto pořadí; obr. 14). Léčba sloučeninou 3 byla účinnější, než akutní předběžná léčba morfinem (5 mg/kg). Na modelu bolesti s kyselinou octovou (0,6 %) , bylo kroucení ·
135 vyvolané kyselinou octovou (0,6 %) značně sníženo u myší předem léčených sloučeninou 3 (obr. 15) , sloučeninou 2 (obr. 16) , sloučeninou 1 (obr. 17), ve srovnání s kontrolními zvířaty lé čenými vehikulem. Konečně při CCI indukovaném modelu bolesti se zvířatům podávala i.p. denně sloučenina 3 (50 mg/kg), přičemž se léčba zahájila 10 dní po operaci a trvala 18 dní. Sloučenina 3 dramaticky snížila hyperalgesii po konstrikci sedacího nervu, což se určilo pomocí odezvy na bolest vyvolanou teplem. Ve dni 18 byla bolest snížena o 98 % v porovnání s podobně operovanými krysami léčenými vehikulem (výsledné rozdíly -0,2 ± 1,9 proti 4,75 ± 2,4; p = 0,0001; obr. 18). Tyto údaje naznačují, že inhibice NAALADázy může být vhodná při léčení modality jak při akutní, tak při chronické bolesti.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na neuropatické bolesti
Samci krys Sprague-Dawley (200-225 g) se diabetizují pomocí nitrožilního podávání streptozotocinu (STZ, 70 mg/kg v šalinu pufrovaném fosfátem). Diabetická zvířata se rozdělí do pěti skupin: jedna skupina dostává sloučeninu 2 (10 mg/kg nebo 1 mg/kg), sloučeninu 1 (10 mg/kg nebo 1 mg/kg) nebo vehikulum. Další skupina zvířat (neošetřená STZ) slouží jako nediabetická kontrola. Léčba léčivem/vehikulem se zahájí u diabetických zvířat 45 dní po podání STZ. U STZ indukovaných diabetických krys se testuje citlivost na zdroj tepla jakmile hladina glukózy v krvi vzroste na 320 mg/dl nebo výše (30 dní po STZ). Krysy se potom aklimatizují na Hargreavesovo zařízení a termální nocicepce se monitoruje za použití infračerveného zdroje tepla nasměrovaného na hřbetní stranu zadní končetiny a čas, který zvíře potřebuje pro odtažení končetiny, se zaznamenává s přesností na 0,1 s (podrobnosti způsobu viz. Hargreaves a kol., 1998). Intenzita zdroje záření se upraví tak, aby průměrná latence u kontrolních zvířat (neošetřených STZ) byla asi 10 sekund. Každé • · · • · • · zvíře se testovalo osmkrát a průměrný výsledek rozdílu (mezi průměrem latence nediabetické kontroly a průměrem latence diabetických zvířat) je uveden na obrázcích 19A a 19B. Diabetické krysy vykazují hyperalgesii (kratší latency odezvy) ve srovnání s nediabetickou kontrolou od 30 dne po ošetření STZ a progresivně se zhoršuje u krys léčených vehikulem. Tato hyperalgetická odezva byla úplně opačná u diabetických krys léčených sloučeninou 1 nebo 2 (10 mg/kg i.p. denně). Výsledky tedy ukazují, že inhibice NAALADázy snižuje neuropatickou bolest.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na progresi neuropatické bolesti
Sloučenina 3
U krys se provede podvázání sedacího nervu, které se skládá ze 4 ligatur uvázaných volně okolo sedacího nervu v intervalech 1 mm proximálně k rozdělení do tří větví. Po tomto ošetření krysy vykazují tepelnou hyperalgesii a allodinii. Zvířata se umístí do Hargreavesova zařízení a infračervený zdroj tepla se nasměruje na hřebetní část zadní končetiny a zaznamenává se čas potřebný k tomu, aby zvířata odtáhla končetinu. Zaznamená se výsledek rozdílu (mezi latencí odezvy končetiny na operované straně proti kontrolní straně). Zvířata dostávají sloučeninu 3 (50 mg/kg i.p., denně) nebo vehikulum, přičemž se léčba zahájí 10 dní po zákroku. Léčba sloučeninou 3 významně normalizuje výsledek rozdílu mezi dvěma končetinami ve srovnání s pokračující hyperalgesii u kontrolní skupiny léčené vehikulem. Normální (neoperované) krysy mají přibližně stejné latence u obou končetin. Tento efekt byl významný od 11 dne léčení léčivem a trval až do konce studie (21 dní denního dávkování). Výsledky rozdílu jsou graficky znázorněny na obrázku 20. Výsledky ukazují, že inhibice NAALADázy snižuje hyperalgesii související s CCI.
137
Sloučeniny 1 a 2
U Samců krys BB/W (BRI, Mass) se spontánně vyvinula autoimunní destrukci buněk B slinivky břišní, která vedla ke vzniku na insulinu závislého diabetů typu I (Guberski 1994). Tyto krysy jsou charakterizované a ukázalo se, že vykazují neuropatii s doprovodnými neurálními deficity, jako je úbytek vláken a degenerace, což jsou změny, které odpovídají změnám v periferních nervech lidských diabetických pacientů (Yagihasi, 1997). Toto umožňuje použití těchto krys pro testování nových sloučenin pro budoucí použití při léčení tohoto závažného onemocnění. Při tomto testu se u sloučeniny 1 a sloučeniny 2 testovala jejich schopnost měnit postup diabetické neuropatie. Krysy dostávaly denně injekci sloučeniny 1 a sloučeniny 2 (10 mg/kg i.p.) nebo vehikula, přičemž se začalo při začátku diabetů (hyperglykemii) a pokračovalo se 6 měsíců. Testovala se také další skupina nediabetických krys, které dostaly vehikulum. U všech zvířat se průběžně sledovala jejich tělesná hmotnost, objem moči, krevní cukr a glykovaný hemoglobin. V prvním měsíci studie se u všech zvířat jednou týdně testovala v Hargreavesově zařízení tepelná nocicepce. Testování sestávalo z nasměrování infračerveného zdroje tepla na zadní část zadní končetiny krysy a zaznamenání doby potřebné k tomu, aby zvíře odtáhlo končetinu (podrobnosti jsou uvedeny v Hargreaves a kol., 1998). Všechna zvířata se testovala osmkrát a zaznamenala se průměrná latence odtažení.
Výsledky jsou graficky znázorněny na obrázku 24. Výsledky naznačují, že diabetické krysy vykazují hyperalgesii (kratší latenční odezvu) v porovnání s nediabetickou kontrolou. Diabetické krysy léčené léčivem (jak sloučeninou 1, tak sloučeninou 2) vykazují delší latence odtažení, než diabetické krysy léčené vehikulem, a to od 4 týdnů od začátku léčby až do šesti měsíců od začátku léčby.
• ·
Každé dva týdny během prvních osmi týdnů léčby a potom každý měsíc až do šesti měsíců léčby se také měřila rychlost vedení nervového vzruchu (podrobnosti způsobu viz. De Koning a kol., 1987). Výsledky jsou graficky uvedeny na obrázku 25. Diabetická zvířata obecně vykazují snížení rychlosti vedení nervového vzruchu v porovnání s nediabetickou kontrolou. Avšak, diabetická zvířata, která denně dostávala injekci inhibitoru NAALADázy (buď sloučeninu 1 nebo sloučeninu 2 v dávkách 10 mg/kg) vykazují významně nižší závažnost deficitu vedení nervového vzruchu, než diabetická kontrola, která dostávala vehikulum. Tento výsledek byl zřejmý po 8 týdnech léčby a trval v podobném rozsahu až do ukončení studie po 6 měsících. Diabetické krysy, které dostávaly vehikulum na druhou stranu vykazovaly postupné zhoršení rychlosti vedení nervového vzruchu v době 6 až 16 týdnů po začátku podávání vehikula a tento stav se nezměnil až do 6 měsíců po začátku.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na diabetické neuropatii
U STZ diabetických zvířat se také po 4, 8 a 12 týdnech léčby měřila motorická a senzorická rychlost vedení nervového vzruchu (podrobnosti způsobu viz. De Koning a Gispen, 1987). V krátkosti se anestetizovaným krysám umístí stimulační jehlové elektrody blízko sedacího a holenního nervu a záznamová elektroda se umístí podkožně podél distálních svalů chodidla. Výsledky jsou graficky znázorněny na obrázcích 21A, 21B, 22A a 22B. Diabetická zvířata dostávající vehikulum vykazují značné snížení jak motorické, tak senzorické nervové vodivosti v porovnání s nediabetickými zvířaty. Léčení 10 mg/kg sloučeniny 2 denně po dobu 4, 8 a 12 týdnů vždy vede k zlepšení (vzrůstu) jak motorické, tak senzorické rychlosti vedení nervového vzruchu a k významnému zlepšení motorické a senzorické rychlosti vedení nervového vzruchu dochází po 12 týdnech a 8 týdnech
139 (obr. 31A) . Nižší dávka testované sloučeniny 2 (1 mg/kg) měla podobný vliv (obr. 31B). Léčení zvířat sloučeninou 1 při každé dávce také zvýšilo jak motorickou, tak senzorickou rychlost vedení nervového vzruchu, v porovnání s diabetickou kontrolou. K významnému zlepšení však došlo po 12 týdnech léčby u skupiny léčené 10 mg/kg a kratších časových periodách po léčení dávkou 1 mg/kg (obr. 32A a 32B) . Tyto výsledky tedy ukazují, že inhibice NAALADázy mění postup diabetické neuropatie.
In vivo test inhibitorů NAALADázy na schizofrenii
U krysy byly pomocí PCP vyvinuty symptomy, jako je zuřivé běhání a neustálé kroucení hlavou, které odpovídají psychotickým symptomům u člověka. Pro testování vlivu inhibice NAALADázy na schizofrenii se tedy krysy léčily intraperitoneálně sloučeninou 1 (50 mg/kg), sloučeninou 2 (50 mg/kg) nebo vehikulem (voda) před tím, než dostaly PCP (5 mg/kg) . Výsledky kroucení hlavou se měřily po 2 hodinách po injekci PCP. Výsledky jsou graficky zaznamenány na obrázcích 26 a 27. Výsledky ukazují, že předběžná léčba sloučeninou 1 (obr. 27) nebo 2 (obr. 26) významně snižuje aktivační vlivy PCP na pohyb. Protože se ukázalo, že PCP zvyšuje uvolňování glutamátu v prefrontální kůře, snížení pohybové aktivity vyvolané PCP naznačuje, že inhibice NAALADázy snižije behaviorální vlivy PCP prostřednictvím zeslabení presynaptické glutamatergní aktivity. Ukázalo se tedy, že jsou inhibitory NAALADázy účinné na PCP modelu schizofrenie .
Příklady provedení vynálezu
Předkládaný vynález bude dále ilustrován příklady, které neomezují jeho rozsah. Pokud není uvedeno jinak, všechny procentuální hodnoty jsou vztaženy ke 100 % hmotnostním konečného produk tu.
• · · • · · · « · ·
140
Příklad 1
Příprava 2-[[(2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl] pentandiové kyseliny
Schéma V: Rx = 2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl
21,1 ml (100 mmol) Hexamethyldisilazanu se přidá k 8,30 g (100 mmol) silně míchaného fosfinátu amonného a získaná suspenze se míchá 2 hodiny při 105 °C. Potom se k suspenzi při 0 °C přikape 5,0 g (27,0 mmol) 2,3,4,5,6-pentafluorbenzylbromidu. Směs se míchá 19 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se potom zředí 50 ml dichlormethanu a promyje se 50 ml IN roztoku kyseliny chlorovodíkové. Organická vrstva se oddělí, suší se nad síranem sodným a odpaří se za získání 4,72 g bílé pevné látky. Ta se rozpustí v 50 ml dichlormethanu a k roztoku se přidá 3,24 g (30 mmol) benzylalkoholu. K roztoku se při 0 °C přidá 6,19 g (30 mmol) 1,3-dicyklohexyl-karbodiimidu (DCC) a suspenze se míchá 14 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se suspenduje v ethylacetátu. Získaná suspenze se filtruje a filtrát se odpaří. Zbytek se čistí pomocí chromatografie na silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 4:1 až 1:1 a získá se 2-[[(2,3,4,5,6-pentafluorbenzyl)hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina ve výtěžku 34 %.
Rf 0,69 (i-PrOH: H2O, 7:3).
ΤΗ NMR (deuterovaná voda): δ 1,8-2,0 (m, 3H), 2,1-2,3 (m, 1H),
2,3-2,5 (m, 2H), 2,7-2,9 (m, 1H), 3,29 (d, 2H).
Elementární analýza
Vypočteno C13H12F5O6P, 0,45 H2O: C, 39,20; H, 3,26.
Nalezeno: C, 39,17; H, 3,28.
Příklad 2
Příprava 2-(fosfonomethyl)pentandiové kyseliny
141
Schéma III
Dibenzyl-2-methylenpentandioát
500 g (3,0 mol) benzylakrylátu se zahřívá v olejové lázni na 100 °C. Zahřívání se ukončí a za udržování vnitřní teploty pod 140 °C se přikape 10 g (61 mmol) HMPT. Jakmile se dokončí přidávání, směs se míchá a ochladí se na teplotu místnosti. Přidá se suspenze silikagelu (5:1 hexan:ethylacetát) a směs se nanese na kolonu obsahující sloupec suchého silikagelu. Kolona se promyje směsí hexanu a ethylacetátu 1:1 a frakce se spojí a odpaří za získání 450 g čiré, světle zlatavé, kapaliny. Kapalina se destiluje za vysokého vaku (27 Pa) při 185 °C a získá se 212 g (42 %) čiré a bezbarvé kapaliny.
NMR (deuterochloroform) : 7,3 ppm (m, 10H), 6,2 ppm (s, 1H) , 5,6 ppm (s, 1H) , 5,2 ppm (s, 2H) , 5,1 ppm (s, 2H) , 2,6 ppm (m, 4H) .
Dibenzyl 2-[[bis(benzyloxy)fosforyl]methyl]pentandioát
9,5 g (36 mmol) Dibenzylfosfinátu v 350 ml dichlormethanu se ochladí na 0 °C. K tomuto míchajícímu se roztoku se přidá 18,2 ml (2,0M roztok v hexanu, 36,4 mmol) trimethylaluminia. Po 30 minutách se během 10 minut přikape 6,0 g (2, 37 mmol) dibenzyl2-methylenpentandioátu v 90 ml dichlormethanu. Čirý a bezbarvý roztok se potom ohřeje na teplotu místnosti a nechá se míchat přes noc. Směs se potom rozloží pomalým přidáním 5% roztoku kyseliny chlorovodíkové. Po další 1,5 hodině míchání se spodní organická vrstva oddělí a vodná vrstva se extrahuje 100 ml dichlormethanu. Organické vrstvy se spojí, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se za získání světle zlatavé kapaliny. Kapalina se chromatograficky čistí na silikagelu (4 cm x 30 cm) za eluce gradientem směsi hexanu a ethylacetátu 4:1 až 1:1.
• 4
142
Kapalina se destiluje na krátké dráze na zařízení Kugelrohr při 67 Pa a 195 až 200 °C. Destilát se vylije a zbývající světle zlatý olej se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 1:1 a získá se 2,9 g dibenzyl-2[[bis(benzyloxy)fosforyl]methyl]pentandioátu ve formě čirého a bezbarvého oleje.
TLC Rf 0,5 (1:1, hexan:ethylacetát).
XH NMR (deuterochloroform) : δ 7,1-7,4 (m, 20H) , 5,05 (s, 2H) ,
4,8-5,3 (m, 6H) , 2,8 (1H) , 2,22-2,40 (m, 3H) , 1,80-2,02 (m,
3H) .
2-(Fosfonomethyl)pentandiová kyselina
2,9 g (4,9 mmol) benzylpentandioátu se přidá ke směsi 20 ml methanolu obsahujícího 0,29 g (6 % molárních) 10% palladia na uhlí. Tato směs se hydrogenuje v Parrově hydrogenátoru při tlaku 0,28 mPa 24 hodin, filtruje se a odpaří se za získání 1,0 g (3, 90 %) světle zlatavého viskózního oleje.
1H NMR (deuterovaná voda): δ 2,6-2,78 (m, 1H) , 2,25-2,40 (m,
2H), 1,75-2,15 (m, 4H).
Příklad 3
Příprava 2-[[[2-(karboxy)propyl]hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiové kyseliny
Schéma X
Di-terč-butyl-2-methylenpentandioát
465 g (3,628 mol) Terc-butylakrylátu se v dusíkové atmosféře zahřeje na 100 °C, potom se přikape 10 g (61,2 mmol) hexamethylfosfortriamidu a rychlost přidávání se upraví tak, aby se reakční teplota udržovala pod 100 °C. Reakční směs se nechá
143 • · vychladnout, potom se nalije na sloupec silikagelu (asi 1000 ml) a úplně se vymyje ze silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 4:1. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získaný olej se destiluje. Trocha látky se jímá při teplotě od teploty místnosti do 50 °C za vysokého vakua a tento podíl se vylije. Teplota se potom zvýší asi na 80 °C a jímá se 300 g (65 %, teplota varu 67-70 °C při 40 Pa) produkt ve formě čirého oleje. 1H NMR (deuterochloroform): δ 1,4 (m, 18H), 2,4 (t, 2H), 2,6 (t, 2H), 5,5 (s, 1H), 6,0 (s, 1H).
Di-terc-butyl 2-[(hydroxyfosfinyl)methylj pentandioát
Směs 162,6 g (1,96 mol) amoniumf osf inátu a 316 g (1,96 mol) 1,1,1,3,3,3-hexamethyldisilazanu se 2 hodiny zahřívá na 105 °C. Reakční směs se ochladí v ledové lázni a přikape se 251 g (0,979 mol) di-terc-butyl-2-methylenpentan-l,5-dioátu rozpuštěného v 1000 ml dichlormethanu. Reakční směs se nechá přes noc ohřát na teplotu místnosti. Reakční směs se rozloží přidáním 500 ml destilované vody a organická vrstva se oddělí. Vodná vrstva se podruhé promyje dichlormethanem a spojené organické vrstvy se suší nad síranem hořečnatým. Potom se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku a získá se 315 g (100 %) světle žlutého oleje. Ukázalo se, že je tento produkt dostatečně čistý pro použití při další reakci. XH NMR (deuterochloroform) : δ 1,4 (m, 18H) , 1,9 (m, 3H) , 2,1 (m, 1H) , 2,3 (m, 2H) , 2,7 (m, 1H) , 6,5 & 7,9 (d, 1H, P-H), 11,0 (s, 1H).
Di-terč-butyl-2 -[(terč-butoxyfosfinyl)methyl]pentandioát
K roztoku 315 g (0,977 mol) di-terc-butyl-2-[(hydroxyfosfinyl)methyl]pentan-1,5-dioátu v 1000 ml dichlormethanu, ochlazenému v ledové lázni a pod dusíkovou atmosférou se přidá 123,1 g (1,66 mol) terc-butanolu, 1 g (8,2 mmol) 4-dimethylaminopyridinu a 281 g (1,47 mol) l-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)karbodi144 ···· ·· ·· · ·· • · · · · · ··· imidu. Reakční směs se nechá míchat přes noc. Přidá se voda a dichlormethanová vrstva se oddělí a suší a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získaný zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 1:1 až 2:3. Frakce obsahující produkt se odpaří za sníženého tlaku a získá se 260 g (70 %) čirého oleje. XH NMR (deuterochloroform) : δ 1,4 (m, 27H) , 1,8 (m, 1H) , 1,9 (m, 2H) , 2,1 (m, 1H) , 2,3 (m, 2H) , 2,7-2,8 (m, 1H) , 6,7 & 8,0 (d, 1H, P-H) .
Di-terc-butyl-2-[[[2-(benzylkarboxy)propyl]tercbutoxyfosfinyl]methyl]pentandioát
K roztokul3,62 g (36,0 mmol) di-terc-butyl-2-[(terc-butoxyfosfinyl)methyl]pentan-1,5-dioátu a 6,35 g (36,0 mmol) benzylmethakrylátu ve 100 ml tetrahydrofuranu se v dusíkové atmosféře přidá 0,14 g (60% disperze v oleji, 3,60 mmol) hydrodu sodného. Po 3 hodinách se reakční směs nalije do 300 ml vody a přidá se 100 ml etheru. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se znovu extrahuje 100 ml etheru. Spojené organické extrakty se suší nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získaný zbytek se čistí pomocí kolonové chromatograf ie a produkt se eluuje směsí ethylacetátu a hexanu 2:3. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 10,5 g (53 %) čirého oleje. *Η NMR (deuterochloroform): δ 1,3 (m, 3H), 1,5 (m, 27H) , 1,7 (m, 2H) , 1,9 (m, 2H) , 2,2 (m, 4H) , 2,6 (m, 1H) , 2,9 (m, 1H), 5,1 (m, 2H), 7,3 (m, 5H).
2-[[[2-(Benzylkarboxy)propyl]hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina
K roztoku 1,6 g (2,89 mmol) di-terc-butyl-2-[[[2-(benzylkarboxy) propyl] terc-butoxyfosf inyl] methyl] pentan-1 , 5-dioátu v 10 ml dichlormethanu se pod dusíkovou atmosférou přidá 10 ml kyseliny trifluoroctové. Reakční směs se míchá 2 hodiny a potom se
145 odpaří za sníženého tlaku. K reakčnímu zbytku se přidá další dichlormethan a odpaří se za sníženého tlaku. Produkt se rozpustí v ethylacetátu a promyje se vodou, organická vrstva se suší nad síranem horečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a získá se 800 mg (72 %) čirého oleje. NMR (deu-
terovaná voda): δ 1,2 (m, 3H), 1,6-1,8 (m, 4H) , 2,1 (m,
2,2 (m, 2H), 2,6 (m, 1H) , 2,8 (m, 1H) , 5,0 (m, 2H) , 7,3
5H) . Elementární analýza vypočtena pro (-17^23^08 1,0 h2o
50,50; H, 6,23; nalezeno: C, 50,52; H, 5,92.
Di-terc-butyl-2-[[[2-(karboxy)propyl]terc-butoxyfosfinyl]methyl] pentandioát
Roztok 8,9 g (16,1 mmol) di-terc-butyl-2-[[[2-(benzylkarboxy)propyl]terc-butoxyfosfinyl]methyl]pentan-1,5-dioátu, 1,0 g 10% palladia na uhlí a 100 ml ethylacetátu se třepe ve vodíkové atmosféře při tlaku 0,41 MPa 16 hodin. Reakční směs se filtruje přes křemelinu a filtrát se odpaří za sníženého tlaku a získá se 7,5 g (100 %) čirého oleje. 1H NMR (deuterochloroform) : δ
1,3 (d, 3H) , 1,4-1,5 (m, 27H) , 1,8 (m, 2H) , 1,9 (m, 2H) , 2,2 (m, 4H), 2,7 (m, 1H), 2,9 (m, 1H).
2-[[[2-(Karboxy)propyl]hydroxyfosfinyl]methyl]pentandiová kyselina
K roztoku 2,1 g (4,53 mmol) di-terc-butyl-2-[[[2-(karboxy)propyl] terc-butoxyfosf inyl] methyl] pentan-1, 5-dioátu v 10 ml dichlormethanu se přidá 10 ml trifluoroctové kyseliny. Reakční směs se míchá 2 hodiny a potom se odpaří za sníženého tlaku. Přidá se další dichlormethan a znovu se odpaří ve vakuu. Získaný zbytek se trituruje acetonitrilem, potom se suší za sníženého tlaku a získá se 1,2 g (89 %) hustého čirého oleje. :H NMR (deuterovaná voda): δ 1,2 (d, 3H) , 1,9 (m, 4H) , 2,2 (m, 2H) , 2,4 (m, 2H) , 2,8 (m, 2H) . Elementární analýza vypočtena pro ···· ·· • 9
146
C10H17PO8 0,2 CH3CN: C, 41,03; H, 5,83; nalezeno: C, 41,05; H,
5,92 .
Příklad 4
Příprava [({[benzylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiové kyseliny
Schéma XI
Di-terc-butyl-2-[((tert-butoxy){[benzylamino]methyl}fosforyl)methyl]pentan-1,5-dioát
Roztok 14,30 g (40,0 mmol) 1,3,5-tribenzylhexahydro-l,3,5-triazinu a 37,85 g (100 mmol) di-terc-butyl-2-([(terc-butoxy)fosforyl]methyl}pentan-l,5-dioátu v 200 ml toluenu se míchá 14 hodin při 110 °C. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbývající žlutý olej se čistí pomocí chromatografie na silikagelu za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 2:1 a získá se 23,40 g (43 %) světle žlutého oleje. NMR (deuterochloroform) δ
1,40-1,48 (m, 27H), 1,7-2,1 (m, 4H), 2,2-2,4 (m, 3H), 2,6-3,0 (m, 3H) , 3,8-4,0 (m, 2H) , 7,2-7,4 (m, 5H) .
2-[({[Benzylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina
K roztoku 0,498 g (1,0 mmol) di-terc-butyl-2-[((terc-butoxy){[benzylamino]methyl}fosforyl)methyl]pentan-1,5-dioátu v 10 ml dichlormethanu se při 0 °C přidá 5 ml trifluoroctové kyseliny a směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbývající olej se převede do 10 ml dichlormethanu a odpaří se. Tento postup se zopakuje třikrát, aby se úplně odstranila kyselina trifluoroctová. Získaný olej se krystalizuje z methanolu a získá se 0,174 g (53 %) bílé, pevné látky. NMR (deuterovaná voda) δ 1,40-1,48 (m, 27H), ···· ·· • 4 » · • ·
147 • 44
1,7-2,1 (m, 4Η), 2,2-2,4 (m, 3Η), 2,6-3,0 (m, 3Η), 3,8-4,0 (m,
2Η), 7,2-7,4 (m, 5Η).
Příklad 5
Příprava 2-[({[fenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiové kyseliny
Za použití postupu popsaného v příkladu 4 se syntetizuje 2[({[fenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina: 1H NMR (deuterovaná voda) δ 1,4-1,6 (m, 1H), 1,7-1,9 (m, 3H) , 2,2-2,4 (m, 2H) , 2,2-2,4 (m, 2H) , 2,5-2,7 (m, 1H) ,
3,53 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,3-7,5 (m, 5H).
Příklad 6
Příprava 2-[({ [4 -fluorfenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl] pentandiová kyselina
Za použití postupu popsaného v příkladu 4 se připraví 2-[({[4fluorfenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina: ;H NMR (deuterovaná voda) δ 1,5-1,7 (m, 1H) , 1,8-2,0 (m, 3H), 2,3-2,5 (m, 2H), 2,6-2,7 (m, 1H), 3,84 (d, J = 9,0 Hz,
2H), 7,2-7,5 (4H).
Příklad 7
Příprava 2-[({[4-Methoxyfenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl] pentandiové kyseliny
Za použití podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 4 výše, se připraví 2-[({[4-methoxyfenylamino]methyl}(hydroxyfosfinyl))methyl]pentandiová kyselina: :H NMR (deuterovaná voda) δ
1,2-1,3 (m, 1H) , 1,6-1,7 (m, 3H) , 2,22-2,23 (m, 2H) , 2,3-2,5 (m, 1H) , 3,4 (d, J = 8,9 Hz, 2H) , 3,7 (s, 3H) , 7,0 (d, J = 12 Hz, 2H), 7,4 (d, J= 12 Hz, 2H).
148 ······ ·· · · · ··· · · · ··· • · ··· ······· · ♦ · · · ·· · · · ·· c · · · · · · ·
Příklad 8
Příprava 2- ({ [ (fenylsulfonamido)methyl] (hydroxyfosfinyl)}methyl)pentandiové kyseliny
Za použití podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 4 výše, se připraví 2-({[ (fenylsulfonamido)methyl] (hydroxyfosfi nyl)}methyl)pentandiová kyselina: XH NMR (deuterovaná voda) δ 1,6-2,1 (m, 4H), 2,3-2,4 (m, 2H), 2,5-2,7 (m, 1H), 2,9-3,1 (m,
2H), 7,7-8,0 (m, 5H).
Příklad 9
Příprava 2-({ [ (fenylkarboxamido)methyl] (hydroxyfosfinyl)}methyl)pentandiové kyseliny
Schéma XII
Di-terc-butyl-2-{ [ (aminomethyl) (terc-butoxy)fosforyl]methyl}pentan-1,5-dioát
K roztoku 8,20 g (16,5 mmol) di-terc-butyl-2-{[(terc-butoxy){[benzylamino]methyl}fosforyl)methyl]pentan-1,5-dioátu ve 100 ml ethanolu se přidá 0,50 g palladia na uhlí a suspenze se třepe ve vodíkové atmosféře při tlaku 0,34 MPa 4 dny. Katalyzátor se odfiltruje přes křemelinu. Filtrát se odpaří za získání 6,629 g (99 %) bezbarvého oleje. XH NMR (deuteromethanol) δ 1,40-1,60 (m, 27H), 1,80-2,00 (m, 3H), 2,2-2,4 (m, 3H), 2,73,0 (m, 3H).
Di-terc-butyl-2-({(terc-butoxy)[(fenylkarboxamido)methyl]fosforyl}methyl)pentan-1,5-dioát
K roztoku 1,222 g (3,0 mmol) di-terc-butyl-2-{ [(aminomethyl)(terc-butoxy)fosforyl]methylJpentan-1,5-dioátu a 0,46 ml (4,0 mmol) benzoylchloridu v 10 ml dichlormethanu se při 0 °C přidá
149
0,56 ml (4,0 mmol) triethylaminu a směs se míchá 16 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí 15 ml dichlormethanu, promyje se 2 5 ml IN kyseliny chlorovodíkové, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Surová látka se čistí pomocí chromatograf ie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a hexanu 2:1 a získá se 1,259 g (74 %) bezbarvého oleje. XH NMR (deuterochloroform) δ 1,30-1,60 (m, 27H) , 1,60-2,00 (m, 3H) , 2,20-2,40 (m, 3H) , 2,70-2,90 (m, 3H) , 3,5-4,2 (m, 2H) , 7,0-7,3 (m, 1H) , 7,47,6 (m, 3H), 7,8-7,9 (m, 1H)
2-({[(Fenylkarboxamido)methyl](hydroxyfosfinyl)}methyl)pentandiová kyselina
K roztoku 1,230 g (2,4 mmol) di-terč-butyl-2-({(terc-butoxy)[(fenylkarboxamido)methyl]fosforyl}methyl)pentan-1,5-dioátu v 10 ml dichlormethanu se při teplotě místnosti přidá 5 ml trifluoroctové kyseliny a směs se míchá 18 hodin při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Zbývající olej se převede do 10 ml dichlormethanu a odpaří se. Tento postup se zopakuje třikrát, aby se úplně odstranila kyselina trifluoroctová. Získaný olej se krystalizuje ze směsi acetonitrilu a vody a získá se 0,620 g (75 %) bílé pevné látky. XH NMR (deuterovaná voda) δ 1,9-2,1 (m, 3H), 2,2-2,4 (m, 1H), 2,42,6 (m, 2H), 2,8-3,0 (m, 1H), 3,7-3,9 (m, 2H), 7,5-7,9 (m, 5H).
Příklad 10
Příprava 2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyseliny
Schéma XIII, R10 je atom vodíku
150 ······ ♦ · · ·· · ··· · · · ···· « · · ···· · · · • · ··· ·····«· * · • · · · ·· · · · · « · · · · · · · · 99 9
-(2-Oxotetrahydro-3-thiofenyl)propanoát
K roztoku 98 mmol lithiumdiisopropylamidu (LDA) ve 100 ml tetrahydrofuranu ochlazenému na -78 °C se přikape 10 g (98 mmol) γ-thiobutyrolaktonu. Po 15 minutách míchání se přidá 35,4 g (196 mmol) 3-brompropanoátu a reakční směs se nechá ohřát přes noc na teplotu místnosti. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie a získají se 3 g (16 %) čirého oleje. ΧΗ NMR (deuterochloroform) δ 1,2 (t, 3H) , 1,7 (m, 1H) , 1,9 (m, 1H) , 2,1 (m, 1H) , 2,4 (t, 2H) , 2,5 (m, 2H), 3,3 (t, 2H), 4,2 (kv, 2H).
2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina
NaOH, THF
K roztoku 0,77 g (3,81 mmol) ethyl-3-(2-oxotetrahydro-3thiofenyl)propanoátu v 5 ml tetrahydrofuranu se přidá 5 ml (1M roztok ve vodě) hydroxidu sodného. Směs se nechá míchat dva dny, potom se tetrahydrofuran odpaří za sníženého tlaku, vodná vrstva se promyje etherem, potom se okyselí kyselinou chlorovodíkovou na pH 1 a extrahuje se ethylacetátem. Spojené ethylacetátové ex·· · ·
9 9 9 · · · ·9 · «99 9 9 9 e 999
999 9999999 ··
151 .... ·· *.....
trakty se suší nad síranem hořečnatým a rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Získaný zbytek se čistí pomocí kolonové
chromatografie za získání 150 mg (20 % ) čirého oleje. XH NMR
(perdeuterodimethylsulfoxid) δ 1,7 (m, 3H), 1,8 (m, 1H) , 2,2
(m, 2H) , 2,3-2,5 (m, 4H) . Elementární analýza vypočtena pro
C7H12SO4: C, 43,74; H, 6,29; S, 16,68. Nalezeno: C, 43,61; H,
6,39; S, 16,55.
Příklad 11
Příprava 2-(3-sulfanylpronyl)pentandiová kyselina
Schéma XIX
2.2- dimethyl-5-[3-[(trifenylmethyl)thiojpropyl]-1,3-dioxan-4,6dion (I)
6,9 g (20 mmol) 3-[ (trifenylmethyl)thio]propionové kyseliny se rozpustí s 3,2 g (22 mmol) Meldrumovy kyseliny (2,2-dimethyl-
1.3- dioxan-4,6-dion) a 3,85 g (31 mmol) 4-dimethylaminopyridinu (3,85 g) ve 100 ml dichlormethanu. Reakční směs se ochladí na -5 °C a během 1 hodiny se přikape roztok 4,74 g (22 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu v 50 ml dichlormethanu. Směs se nechá přes noc při teplotě nižší, než 0 °C a během této doby se vyloučí drobné krystaly dicyklohexylmočoviny. Po filtraci se reakční směs promyje čtyřikrát 10% roztokem hydrogensíranu draselného, jednou solankou a suší se 2 hodiny nad síranem hořečnatým. Tento roztok se použije v druhém kroku bez charakterizace nebo bez dalšího čištění.
Roztok z předchozí reakce se ochladí na -5 °C a přidá se 13,3 ml (220 mmol) 98% kyseliny octové. Potom se za míchání, během 1 hodiny po částech přidá 1,85 g (50 mmol) tetrahydridoboritanu sodného. Reakční směs se nechá přes noc v lednici a potom se třikrát promyje vodou a dvakrát solankou. Organická fáze se
152
9····· ·· · · ·
49« · · · * · · suší nad síranem horečnatým, filtruje se a odpaří se do sucha. Zbytek se rozpustí v ethylacetátu, vysrážené malé množství dicyklohexylmočoviny se odfiltruje a filtrát se nechá krystalizovat po přídavku hexanu. Získá se 7,5 g 2,2-dimethyl-5-[3-[(trifenylmethyl)thio]propyl]-1,3-dioxan-4,6-dionu (I) (86 % - dva kroky). 13C-NMR δ 20,0(kv), 26,2(kv), 27,2(t), 28,9(t), 32,0 (t), 46,2 (d), 67,0 (s) , 105,3 (s), 127,0 (d), 128,3 (d), 130,0 (d), 145,2 (s), 165,6 (s).
methylester 2,2-dimethyl-4,6-dioxo-5-[3-[(trifenylmethyl)thio]propyl]-1,3-dioxane-5-propanové kyseliny (II)
2.3 g (5 mmol) 4,6-dionu 2,2-dimethyl-5-[3-[(trifenylmethyl)thio]-propyl]-1,3-dioxan-5-propanové kyseliny (I) se rozpustí s 3,34 g (2,18 ml, 20 mmol) methyl-3-brompropionátu a 4,6 ml (20 mmol) 4,37M methanolického roztoku methoxidu sodného v 10 ml methanolu. Reakční směs se zahřívá přes noc na 60 °C a potom se podle TLC za eluce směsí hexanu a ethylacetátu 1:1 zjistí, že není přítomna žádná výchozí látka. Směs se potom odpaří do sucha a smísí se s 40 ml 10% vodného roztoku hydrogensíranu draselného. Organická látka se extrahuje třikrát ethylacetátem, organické vrstvy se spojí, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se krystalizuje ze směsi hexanu a ethylacetátu a získá se 2,1 g (77 %) methylesteru 2,2-dimethyl-4,6-dioxo5 -[3 -[(trifenylmethyl)thio]propyl]-1,3-dioxan-5-propanové kyseliny (II), 13C-NMR (deuterochloroform) δ 24,6, 29,4, 29,5, 29,6, 31,4, 32,6, 37,7, 51,9, 52,8, 66,8, 105,7, 126,7, 127,9, 129,5, 144,7, 168,4, 172,0.
6-[(trifenylmethyl)thio]-1,3,3-hexantrikarboxylová kyselina (III)
1.4 g (2,56 mmol) methylesteru 2,2-dimethyl-4,6-dioxo-5-[3[(trifenylmethyl)thiojpropyl]-1,3-dioxan-5-propanové kyseliny
153 ••••·· ··· ·· • · · · · · ··· (II) s 0,72 g (18 mmol) hydroxidu sodného se rozpustí ve směsi 5 ml 1,4-dioxanu a 5 ml vody. Směs se potom 1 hodinu zahřívá na 100 °C, odpaří se do sucha, rozpustí se ve vodě a sráží se přidáním 1M kyseliny sírové. Sraženina se odfiltruje, promyje se vodou a suší se v exsikátoru. Získá se 1,36 g 6-[ (trifenylmethyl)thio]-1,3,3-hexantrikarboxylové kyseliny (III) (asi 100 %) , 13C NMR (methanol) δ 25,4, 29,2, 30,7, 33,5, 33,7, 58,0, 68,3, 128,1, 129,3, 131,2, 146,7, 174,9, 176,9.
6-[(trifenylmethyl)thio]-1,3-hexandikarboxylová kyselina (IV)
1,36 g (2,56 mmol) 6-[ (trifenylmethyl)thio]-1,3,3-hexantrikarboxylové kyseliny (III) se rozpustí v 5 ml dimethylsulfoxidu a roztok se 1 hodinu zahřívá na 100 °C, odpaří se do sucha, rozpustí se ve vodě a sráží se přidáním 1M kyseliny sírové. Vysrážený olej po 1 hodině v ultrazvukové lázni tuhne. Pevná látka se filtruje, promyje se vodou a suší se v exsikátoru. Získá se 1,1 g 6-[(trifenylmethyl)thio]-1,3-hexandikarboxylové kyseliny IV ve výtěžku 89 % po dvou krocích ze sloučeniny II. 13C-NMR (methanol) δ 27,9, 28,6, 33,0 (dva uhlíky), 33,1, 45,9, 68,1, 128,1, 129,2, 131,2, 146,8, 177,1, 179,4.
2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina V
1,1 g (2,46 mmol) 6-[(trifenylmethyl)thio]-1,3-hexandikarboxylové kyseliny IV s 0,79 g (5 mmol) triisopropylsilanu se rozpustí ve směsi 3 ml dichlormethanu a 3 ml kyseliny trifluoroctové a nechá se 1 hodinu stát při teplotě místnosti. Směs se potom odpaří do sucha a třikrát se promyje hexanem. Olej ovitý zbytek se rozpustí ve vodě, filtruje se a lyofilizuje a získá se 0,35 g 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiové kyseliny V ve výtěžku 76 %. 13C-NMR (methanol) δ 25,2 (t) , 28,8 (t) , 32,4 (t) , 33,0 (t), 33,2 (t), 45,9 (d), 177,2 (s), 179,6 (s).
154 ·····* · · · · ♦ · · » ♦ · · »· • · · · · ·····*· · ♦ · · · · · · ·· • · · · ·· 4 · ··
Příklad 12
Příprava 2-(4-sulfanylbutyl)pentandiová kyseliny
2-(4-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina se připraví pomocí způsobů popsaných výše pro přípravu 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiové kyseliny. 13C-NMR (methanol) δ 25,1 (t) , 27,4 (t) ,28,8 (t) , 33,0 (t) , 33,2 (t) , 35,4 (t) , 46,3 (d) , 177,2 (s) ,179,7 (s) .
Příklad 13
Příprava 2- (3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyseliny
2-(3-Sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina (směs dvou diastereoizomerú) se připraví za použití způsobů popsaných výše pro přípravu 2 -(3-sulfanylpropyl)pentandiové kyseliny. 13C-NMR
(methanol) δ 18,9 (kv) , 19,5 (kv) , 29,1 (t) , 29,6 (t) , 31,7
(t) , 32,6 (t) , 32,9 (t), 33,0 (t) , 35,5 (d) , 35,9 (d) , 39,2
(t) , 39,7 (t) , 44,2 (d), 44,3 (d) , 177,0 (s) , 177,l(s), 179,7
(s), 179,9(s).
Příklad 14
2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina a 2 -(3-sulfanylpropyl) pentandiová kyselina se testují podle všech příkladů a in vitro a in vivo testů popsaných výše. Ukázalo se, že obě sloučeniny mají in vitro a in vivo aktivitu při všech těchto testech a příkladech.
Je zřejmé, že je možné předkládaný vynález různými způsoby obměňovat. Tyto obměny nelze považovat za vybočení z myšlenky a rámce předkládaného vynálezu a všechny tyto modifikace tvoří součást rozsahu přiložených nároků.

Claims (2)

••00 ·· 00 0 0 · · 0 · · 0 0 • · · 0 · • 0 · · · · 162 je skupina Rio a n jsou nezávisle na sobě 0, 3 nebo 4; je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, B je atom dusíku nebo skupina CR16; A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17Rie nebo skupina (CR17R1B) mS; R9 a R13 jsou atom vodíku; R8, R10, R1X, R12, R14, R15, RX6, Rx7 a R18 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylové skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylové skupina, karboxylové skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydry• · · · 163 ·· ** ** · ·· lová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituovaná nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce III, B je atom dusíku a R8 je skupina - (CH2) 2COOH, potom RX1 není atom vodíku; pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4 a pod podmínkou, že pokud X je skupina II, R8 je skupina -(CH2)2COOH, A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18 a n je 0, potom Z není skupina SO2R13, skupina SOR13 nebo skupina SO(NR13)R14 · 13. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že Z je skupina SH; a Re je skupina -(CH2)2COOH. 14. Způsob podle nároku 12, vyznačující se tím, že glutamátovou abnormalitou je ischémie. 15. Způsob léčení glutamátové abnormality vybrané ze skupiny, kterou tvoří kompulzní onemocnění, mrtvice, demyelační onemocnění, schizofrenie, Parkinsonova nemoc a ALS u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I • 9 • 9 nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde: B je atom dusíku nebo skupina CR16; A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18) mS ; R9 a R13 jsou atom vodíku; Rs, R10, Rn, R12, R14, R15, R16, R17 a R18 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomu uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahují• ·· · ·· • · ·· • « · • · ··· ······· 9 165 **·**··* Σ . cí 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomu uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a ArT je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina II a A je skupina (CR17R18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4 a pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II, Ra je skupina -(CH2)2COOH, A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18 a n je 0, potom Z není SO2R13, skupina SOR13 nebo skupina SO(NR13)R14. 16. Způsob podle nároku 15, že glutamátovou abnormalitou je č u j ící schizofrenie. 17. Způsob podle nároku 15, jící že glutamátovou abnormalitou je kompulzní onemocnění. 18. Způsob podle nároku 17, že kompulzní onemocnění je vyzná vybráno jící se ze skupiny, kterou tvoří drogová závislost a poruchy přij ímání potravy. 166 19. Způsob podle nároku 18, vyznačující se tím, že drogovou závislostí je závislost na alkoholu, závislost na nikotinu nebo závislost na kokainu. 20. Způsob ovlivnění nervové aktivity u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde: X je skupina vzorce II, III nebo IV Π Rn II III man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4; Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15 ; B je atom dusíku nebo skupina CR1S; 167 9 · 9 ·· 9 99 * 4 • 99 9 9 • • • 99 9 • * · • a ···· • · 9 9 • • • • • • 9 9 9 9 99 a 99 99 A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18) mS; Rg a R13 jsou atom vodíku; Re, R10, Rx1, R12, R14, R1s, R16, R17 a R1S jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4 a pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II, R8 je skupina -(CH2)2COOH, A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18 a n je 0, potom Z není skupina SO2R13, skupina SOR13 nebo skupina SO(NR13)R14. 21. Způsob podle nároku 20, vyznačující se tím, že nervová aktivita je vybraná ze skupiny, kterou tvoří stimu- 168 láce poškozených neuronu, podpora nervové regenerace, prevence neurodegenerace a léčení neurologických onemocnění. 22. Způsob podle nároku 21, vyznačující se tím, že neurologické onemocnění je vybráno ze skupiny, kterou tvoří periferní neuropatie způsobená fyzikálním poškozením nebo onemocněním, traumatické poškození mozku, fyzikální poškození míchy, mrtvice spojená s poškozením mozku, demyelinační onemocnění a neurologické onemocnění související s neurogegenerací. 23. Způsob podle nároku 22, vyznačující se tím, že neurologické onemocnění související s neurogegenerací je vybráno ze skupiny, kterou tvoří Parkinsonova nemoc a ALS. 24. Způsob léčení onemocnění prostaty u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde: X je skupina vzorce II, III nebo IV R II IV; III 169 ······ ·· · ·* ··· · · · ··· man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4; Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15; B je atom dusíku nebo skupina CRlg; A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18) mS ; R9 a R13 jsou atom vodíku; Rs, R1o, Rx1, R12, R14, R15, R16, R17 a R1B jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupína, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cyklcalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce: II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18)raS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4. 4 » 170 4 4 4 4 ·· ··· • · · 4 ·♦ • · 4 4 4 44 44 444«4444 25. Způsob podle nároku 24, vyznačující se tím, že onemocněním prostaty je rakovina prostaty. 26. Způsob léčení rakoviny u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde: X je skupina vzorce II, III nebo IV ZII III man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4; Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15 ; B je atom dusíku nebo skupina CR16; A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 (CR17R18) mS ; nebo skupina ··· ·· · ·> • 9 9 9 9 9 9 9 9 171 R9 a R13 jsou atom vodíku; R8, R10, R11Z R12, R14, R15, Rlg, R17 a R18 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Ar! je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (cr17r 18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4. 27. Způsob podle kteréhokoli z nároků 11, 12, 15, 20, 24 nebo 26, vyznaču jící s e tím, že: Z je skupina SH; a R8 je skupina -(CH2)2COOH. 28. Způsob podle nároku 27, v y z n a č U j í c í se tím, že sloučenina vzorce I je vybraná ze skupiny, kterou tvoří: 172 ·····* ·· · ·o ··· · · · · · · 2- (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina; 3- (2-sulfanylethyl)-1,3,5-pentantrikarboxylová kyselina; 2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanyl-2-fenylethyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylhexyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanyl-1-methylethyl)pentandiová kyselina; 2-[1-(sulfanylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpentyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-2-fenylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-[3-sulfanyl-2-(fenylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)butyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)pentyl]pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-4-methylpentyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty. 29. Způsob léčení mrtvice u savců, vyznačující se tím, že se podává účinné množství sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu těmto savcům více, než 60 minut po začátku mrtvice. 30. Způsob podle nároku 29, vyznačující se tím, že se sloučenina podává jmenovaným avcům více, než 180 minut po začátku mrtvice. 31. Způsob inhibice angiogeneze u savce, vyznačuj ící se tím, že se tomuto savci podává účinné množství inhibitoru NAALADázy. 173 ······ ··· · ι» • · · · · · ··· 32. Způsob léčení bolesti u savce, vyznačující se tím, že se tomuto savci podává účinné množství inhibitoru NAALADázy. 33. Způsob podle nároku 32, vyznačující se tím, že inhibitorem NAALADázy je sloučenina vzorce I podle nároku 1. 34. Způsob podle nároku 32, vyznačující se tím, že jmenovanou bolestí není chronická bolest a jmenovaným inhibitorem NAALADázy není sloučenina vzorce I podle nároku 1. 35. Způsob podle nároku 32, vyznačující se tím, že bolestí je diabetická neuropatická bolest. 36. Způsob léčení diabetické neuropatie u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství inhibitoru NAALADázy. 37. Způsob podle kteréhokoli z nároků 29, 31, 32 nebo 36, vyznačující se tím, že sloučenina obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu a inhibitor NAALADázy je sloučenina vzorce I, kde: Z je skupina SH; a Ra je skupina ~(CH2)2COOH. 38. Způsob podle nároku 37, vyznačující se tím, že sloučenina vzorce I je vybrána ze skupiny, kterou tvoří: 2- (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina; 3- (2-sulfanylethyl)-1,3,5-pentantrikarboxylová kyselina; 2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanyl-2-fenylethyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylhexyl)pentandiová kyselina; • · · · 174 2-(2-sulfanyl-l-methylethyl)pentandiová kyselina; 2- [1-(sulfanylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpentyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-2-fenylpropyl)pentandiová kyselina; 2- (3 - sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-[3-sulfanyl-2-(fenylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)butyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)pentyl]pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-4-methylpentyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty. 39. Způsob přípravy sloučeniny obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, vyznačující se tím, že zahrnuje krok reakce thiolaktonu se substituovaným esterem za vzniku sloučeniny vzorce VI kde D je skupina (CR21R22)n; n j e 0, 1, 2, 3 nebo 4; a R20, R21 a R22 jsou nezávisle na sobě vybrány ze skupiny, kterou tvoří atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylové skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylové skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylová skupina, 175 ······ · · ··«, Φ • · · φφφφφφφ ΦΦΦ ·Φ·Φ φφ· φφ ··· ······· ·· • ΦΦΦ φφφ φφφ • Φ ·· Φ* Φ ·« · · · karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty. 40. Sloučenina připravená způsobem podle nároku 39. 41. Způsob přípravy sloučeniny obsahující jak atom síry, tak kyselinovou skupinu, vyznačující se tím, že zahrnuje kroky: (i) reakce Meldrumovy kyseliny s činidlem obsahujícím síru za vzniku derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru; a (ii) reakci derivátu Meldrumovy kyseliny obsahujícího síru s esterem za vzniku sloučeniny vzorce VII kde: E je skupina obsahující síru; a F je skupina obsahující ester kyseliny propionové. 42. Sloučenina připravená způsobem podle nároku 41. 176 43. Farmaceutická kompozice, vyznačující se tím, že obsahuje: (i) účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde: B je atom dusíku nebo skupina CR18; Ά je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17Rls)mS; R9 a R13 jsou atom vodíku; 177 ······ · · · · » • · · ··· ··· R8, R10, RX1, R12, RX4, R15, Rx6, R17 a R1B jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arx, hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhvdrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty; pod podmínkou, že: (i) pokud X je skupina vzorce II, R8 je skupina - (CH2) 2COOR19 nebo skupina - (CH2) 2CONHR19, A je skupina CH2 a n je 0, potom Z není skupina SR13; (ii) pokud X je skupina vzorce III, B je atom dusíku a R8 je skupina -(CH2)2COOH, potom Rxx není atom vodíku; (iii) pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CRX7RX8)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4; 178 ······ ··· ·» · • · · ······· • · · · « · · · ·· • · · · · ······· ·· • · · · · · · ··· • · ·· · · · ·· · ·« (iv) pokud X je skupina vzorce II, R8 je skupina -(CH2)2COOH, A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18 a n je 0, potom Z není skupina SO2R13, skupina SOR13 nebo skupina SO(NR13)R14; (v) pokud X je skupina vzorce II, R8 je atom vodíku nebo ne- substituovaná alkylová skupina a A je skupina CH2, potom n není 0; (vi) pokud X je skupina vzorce II, R8 je methylová skupina nebo benzylová skupina, A je skupina CH2 a Z je skupina SO3H, potom n není 0; (ii) farmaceuticky přijatelný nosič. 44. Farmaceutická kompozice podle nároku 43, vyznaču- jící se tím, že Z je skupina SH; a R8 je skupina -(CH2)2COOH. 45. Farmaceutická kompozice podle nároku 44, vyznaču- jící se tím, že sloučenina vzorce I je vybraná ze skupiny, kterou tvoří: 2- (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina; 3- (2-sulfanylethyl)-1,3,5-pentantrikarboxylová kyselina; 2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanyl-2-fenylethyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanylhexyl)pentandiová kyselina; 2-(2-sulfanyl-l-methylethyl)pentandiová kyselina; 2-[1-(sulfanylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpentyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina; 179 ···· ·· ·· · ·» • · · · · · ··· • · · · ♦ · ···· « · · · ······· ··· ·· ·· ·· · ·» ··» 2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanyl-2-fenylpropyl)pentandiová kyselina; 2-(3-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina; 2-[3-sulfanyl-2-(fenylmethyl)propyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)butyl]pentandiová kyselina; 2-[2-(sulfanylmethyl)pentyl]pentandiová kyselina;
1. Sloučenina vzorce I nebo její farmaceuticky přijatelný ekvivalent, kde:
IV;
man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4;
Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SOR13, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15;
B je atom dusíku nebo skupina CR16;
A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18)mS;
R9 a R13 jsou atom vodíku;
·♦· ♦ ♦· • ·
156
R8, R1o, Ru, R12, R14, R15, R16, R17, R18 a R19 jsou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomů uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a
Arx je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty;
pod podmínkou, že:
(i) pokud X je skupina vzorce II, Rs je skupina - (CH2) 2COOR19 nebo skupina - (CH2) 2CONHR19, A je skupina CH2 a n je 0, potom Z není skupina SR13;
(ii) pokud X je skupina vzorce III, B je atom dusíku a R8 je skupina -(CH2)2COOH, potom Ru není atom vodíku;
(iii) pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CR17R18) mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4;
······ · · · ·· • · · · · · · ·· • « « · β · ··· « · · · · ······· ·
157 «*»« ·· ···· (iv) pokud X je skupina vzorce II, R8 je skupina -(CH2)2COOH, A je atom kyslíku nebo skupina CR17R18 a n je 0, potom Z není skupina SO2R13, skupina SOR13 nebo skupina SO(NR13)R14;
(v) pokud X je skupina vzorce II, R8 je atom vodíku nebo nesubstituovaná alkylová skupina a A je skupina CH2, potom n není 0;
(vi) pokud X je skupina vzorce II, Rs je naftylmethylová skupina, cyklohexylmethýlova skupina, 1-(1-fenylethylová) skupina, 1-(1-fenylpropylová) skupina nebo benzylová skupina, kde tato benzylová skupina je nesubstituovaná nebo substituovaná atomem fluoru, atomem chloru, atomem bromu, methylovou skupinou, A je skupina CH2 a Z je skupina SH, potom n není 0;
(vii) pokud X je skupina vzorce II, R8 je benzylová skupina, A je skupina CH2, Z je skupina SH a n je 3, potom R10 a R1X nejsou obě atom vodíku;
(viii) pokud X je skupina vzorce II, R8 je benzylová skupina, A je atom síry nebo skupina CH2S, Z je skupina SH a n je 2, potom R10 a Ru nejsou obě atom vodíku;
(ix) pokud X je skupina vzorce II, Rs je atom vodíku nebo methylová skupina, A je skupina CR17R18, R17 je atom vodíku, R1B je atom vodíku nebo methylová skupina a n je 0, potom Z není skupina SO2RX3;
(x) pokud X je skupina vzorce II, Rs je skupina CH2COOH, A je skupina CH2 a n je 0, potom Z není skupina SO3H;
(xi) pokud X je skupina vzorce II, R8 je methylová skupina nebo benzylová skupina, A je skupina CH2 a Z je skupina SO3H, potom n není 0;
158 • ♦ * · · · · · · · · · (xii) pokud X je skupina vzorce III, B je atom dusíku, R1X je atom vodíku a R10 je atom vodíku, potom R8 není atom vodíku, methylová skupina, skupina CHOHCH3, skupina CH2CH2COOH nebo βindolylmethylová skupina; a (xiii) pokud X je skupina vzorce III, B je atom dusíku, Rn je atom vodíku a R10 je ethylová skupina, potom R8 není methylová skupina, sek-butylová skupina, skupina CH(CH3)2, skupina CH2CH2COOH, skupina (CH2) 4NH(C=S)S-Et, benzylová skupina, p-hydroxybenzylová skupina, skupina CH2COOH, skupina CH2CONH2, skupina CH2OH, skupina CH2OCOCH3, skupina CHOHCH3, nebo β-indolylmethylová skupina.
2. Sloučenina podle nároku 1, kde:
X je skupina vzorce II;
n j e 0, 1, 2 nebo 3;
Z je skupina SH, skupina SO3H, skupina SO2H, skupina SOH nebo skupina S (NRHR14) 2R15; a
A je atom kyslíku, atom síry nebo skupina CR17R18.
3 . Sloučenina podle nároku 2, kde Z je skupina SH. 4 . Sloučenina podle nároku 3, kde Ra je skupina -(CH2)2COOH. 5 . Sloučenina podle nároku 3, kde sloučenina vzorce I je vybrá na ze skupiny, kterou tvoří:
2- (2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina;
3- (2-sulfanylethyl)-1,3,5-pentantrikarboxylová kyselina;
2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanyl-2-fenylethyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanylhexyl)pentandiová kyselina;
2-(2-sulfanyl-l-methylethyl)pentandiová kyselina;
·· · · • · · • · 4 · · · ··· • · · · · ······· ·
159 · · · v · « «··
2-[1-(sulfanylmethyl)propyl]pentandiová kyselina;
2-(3 - sulfanylpentyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-2-methylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-2-fenylpropyl)pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanylbutyl)pentandiová kyselina;
2-[3-sulfanyl-2-(fenylmethyl)propyl]pentandiová kyselina;
2-[2-(sulfanylmethyl)butyl]pentandiová kyselina;
2-[2-(sulfanylmethyl)pentyl]pentandiová kyselina;
2-(3-sulfanyl-4-methylpentyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
6. Sloučenina podle nároku 5, kde sloučenina I je vybraná ze skupiny, kterou tvoří 2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina, 2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina, 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
7. Sloučenina podle nároku 6, kde sloučenina I je vybraná ze skupiny, kterou tvoří 2-(2-sulfanylethyl)pentandiová kyselina, 2-(2-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina, 2-(3-sulfanylpropyl)pentandiová kyselina.
8. Sloučenina podle nároku 6, kde sloučenina vzorce I je enantiomerem nebo enantiomerně obohacenou směsí.
9. Sloučenina obsahující jak síru, tak kyselinovou skupinu, která je účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 60 minut po začátku mrtvice.
10. Sloučenina podle nároku 8, která je účinná při léčení mrtvice u savců, když se podává více, než 180 minut po začátku mrtvice.
160
11. Způsob inhibice enzymové aktivity NAALADázy u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde:
X je skupina vzorce II, III nebo IV
II
III man jsou nezávisle na sobě 0, 1, 2, 3 nebo 4;
Z je skupina SR13, skupina SO3R13, skupina SO2R13, skupina SORI3, skupina SO(NR13)R14 nebo skupina S (NR13R14) 2R15 ;
B je atom dusíku nebo skupina CR1S;
A je atom kyslíku, atom síry, skupina CR17R18 nebo skupina (CR17R18) mS ;
R9 a R13 jsou atom vodíku;
······ ·*· · · ··· · · · · · · ·· · · · ······ · • · · · ·· · ·· ···· ·· · ··· 161 Rs» Rio' Rnz Ri2 / Ri4z Ri5z Ri6z R17 a R18 j sou nezávisle na sobě atom vodíku, přímá nebo rozvětvená alkylová skupina obsahující 1 až 9 atomu uhlíku, přímá nebo rozvětvená alkenylová skupina obsahující 2 až 9 atomů uhlíku, cykloalkylová skupina obsahující 3 až 8 atomů uhlíku, cykloalkenylová skupina obsahující 5 až 7 atomů uhlíku, skupina Arlz hydroxylová skupina, karboxylová skupina, karbonylová skupina, aminoskupina, amidoskupina, kyanoskupina, isokyanoskupina, nitroskupina, sulfonylová skupina, sulfoxyskupina, thioskupina, thiokarbonylová skupina, thiokyanoskupina, formanilidoskupina, thioformamidoskupina, sulfhydrylová skupina, atom halogenu, halogenalkylová skupina, trifluormethylová skupina nebo oxyskupina, kde jmenovaná alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina a cykloalkenylová skupina jsou nezávisle na sobě nesubstituované nebo substituované jedním nebo více substituenty; a
Ar! je karbocyklická nebo heterocyklická skupina, která je nesubstituovaná nebo substituovaná jedním nebo více substituenty;
pod podmínkou, že pokud X je skupina vzorce II a A je atom kyslíku, potom n je 2, 3 nebo 4; pokud X je skupina vzorce II a A je atom síry, potom n je 2, 3 nebo 4; a pokud X je skupina vzorce II a A je skupina (CRi7R18)mS, potom n je 0, 2, 3 nebo 4.
12. Způsob léčení glutamátové abnormality u savců, vyznačující se tím, že se těmto savcům podává účinné množství sloučeniny vzorce I nebo jejího farmaceuticky přijatelného ekvivalentu, kde:
2-(3-sulfanyl-4-methylpentyl)pentandiová kyselina a farmaceuticky přijatelné ekvivalenty.
CZ200113A 1998-07-06 1999-07-02 Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují CZ200113A3 (cs)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US11018698A 1998-07-06 1998-07-06
US09/110,262 US6395718B1 (en) 1998-07-06 1998-07-06 Pharmaceutical compositions and methods of inhibiting angiogenesis using naaladase inhibitors
US09/228,391 US6265609B1 (en) 1998-07-06 1999-01-12 Thio-substituted pentanedioic acid derivatives

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CZ200113A3 true CZ200113A3 (cs) 2001-08-15

Family

ID=27380804

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ200113A CZ200113A3 (cs) 1998-07-06 1999-07-02 Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují

Country Status (21)

Country Link
US (2) US6458775B1 (cs)
EP (2) EP1571141A2 (cs)
JP (1) JP4503836B2 (cs)
KR (1) KR100672965B1 (cs)
CN (1) CN1314882A (cs)
AT (1) ATE305449T1 (cs)
AU (1) AU770258B2 (cs)
BR (1) BR9912516A (cs)
CA (1) CA2337797C (cs)
CZ (1) CZ200113A3 (cs)
DE (1) DE69927502T2 (cs)
ES (1) ES2251204T3 (cs)
HK (1) HK1036617A1 (cs)
HU (1) HUP0103382A3 (cs)
IL (1) IL140499A0 (cs)
MX (1) MXPA01000144A (cs)
NO (1) NO20010052L (cs)
NZ (1) NZ508978A (cs)
PL (1) PL346762A1 (cs)
TR (1) TR200100025T2 (cs)
WO (1) WO2000001668A2 (cs)

Families Citing this family (20)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7105159B1 (en) 1992-11-05 2006-09-12 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Antibodies to prostate-specific membrane antigen
US6953668B1 (en) 1992-11-05 2005-10-11 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Prostate-specific membrane antigen
US7070782B1 (en) 1992-11-05 2006-07-04 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Prostate-specific membrane antigen
US6569432B1 (en) * 1995-02-24 2003-05-27 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Prostate-specific membrane antigen and uses thereof
ATE317435T1 (de) 1995-02-24 2006-02-15 Sloan Kettering Inst Cancer Prostataspezifisches membranes antigen und seine anwendungen
US20040253246A1 (en) * 1996-02-23 2004-12-16 Israeli Ron S. Prostate-specific membrane antigen and uses thereof
US6395718B1 (en) * 1998-07-06 2002-05-28 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of inhibiting angiogenesis using naaladase inhibitors
US6444657B1 (en) 1998-12-31 2002-09-03 Guilford Pharmaceuticals Inc. Methods for treating certain diseases using naaladase inhibitors
US6228888B1 (en) * 1999-07-01 2001-05-08 Guilford Pharmaceuticals Inc. Methods for treating anxiety, anxiety disorders and memory impairment using naaladase inhibitors
WO2001092273A2 (en) * 2000-05-30 2001-12-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Benzenedicarboxylic acid derivatives
AU2001265119A1 (en) * 2000-05-30 2001-12-11 Guilford Pharmaceuticals Inc. Naaladase inhibitors for treating amyotrophic lateral sclerosis
WO2001092274A2 (en) * 2000-05-30 2001-12-06 Guilford Pharmaceuticals Inc. Naaladase inhibitors for treating retinal disorders and glaucoma
EP1353903A2 (en) 2001-01-17 2003-10-22 Guilford Pharmaceuticals Inc. Thiol-based naaladase inhibitors
MXPA03010328A (es) * 2001-05-11 2004-02-17 Guilford Pharm Inc Acidos hidroxinamicos y acil hidroxaminasas como inhibidores de naaladasa.
CA2448089C (en) * 2001-05-30 2010-10-19 Guilford Pharmaceuticals Inc. Thiolalkyl benzoic acid derivatives
US20050215472A1 (en) 2001-10-23 2005-09-29 Psma Development Company, Llc PSMA formulations and uses thereof
EP3184539A3 (en) 2001-10-23 2017-09-13 PSMA Development Company L.L.C. Psma antibodies
US7148250B2 (en) * 2001-12-28 2006-12-12 Guilford Pharmaceuticals Inc. Indoles as NAALADase inhibitors
WO2004078180A2 (en) * 2003-03-03 2004-09-16 Guilford Pharmaceuticals Inc. Naaladase inhibitors for treating opioid tolerance
JP4773951B2 (ja) * 2003-03-03 2011-09-14 エーザイ インコーポレーテッド チオラクトン

Family Cites Families (89)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5018886B2 (cs) * 1971-10-13 1975-07-02
SU548609A1 (ru) * 1975-04-19 1977-02-28 Предприятие П/Я Г-4236 СОЛИ БИС-(у-СУЛЬФОПРОПИОНАТПРОПИЛ-ИЛИ СУЛЬФОИЗОБУТИРАТПРОПИЛ)-ПОЛИДИМЕТИЛ-СИЛОКСАНА, ОБЛАДАЮЩИЕ ПОВЕРХНОСТНО-АКТИВНЫМИСВОЙСТВАМИ1Изобретение относитс к новым химическим соединени м, а именно к сол м бис-(у-сульфо-0нропионатпропил- или сульфонзобутиратпро- пил)-нолидиметилснлоксана общей формулыСНз СНзСН, \КОз5СН2СН(р.)С(о)о(СН2)з-31-0-[81-о]-81-((:Н5,)зО(о)ССН(к)СН2бОзМ\<т\сн, ш,сн3где R = H, СНз; M = Na, К, NH4;m = 4, 8, 12, 16, обладающим поверхност- 5 но-активными свойствами.Соли бис-(•у-сульфопроиионатпропил- н сульфоизобутиратиропил) - нолидиметнлсилок- сана указанной формулы, обладающие повы- щенной поверхностной активностью могут 10 примен тьс в качестве эффективных поверх- ностио-активных веществ (ПАВ).Р1звестны ПАВ на основе кремнийорганнче- ских сульфоэфиров ^[1], сульфатов [2] или сульфонатов [3], снижающие поверхностное 15 нат жение воды до 20—30 дин/см.Наиболее близкими по технической сущности к описываемым соединени м вл ютс Na, К или NH4 соли 1,3-бис-(сульфопропионатал- кил- или сульфоизобутираталкил-1,1,3,3-тетра- 20 метилдисилоксана [4].Однако указанные соединени имеют недостаточную активность на границах фаз: вода — воздух (снижают поверхностное нат жение с 72,5 до 25—30 дин/см) и вода — кремний — органическа жидкость (снижают межфазовое нат жение с 47 до 6—14 дин/см).Целью изобретени вл етс синтез соединений, обладающих высокой эффективностью действи в качестве ПАВ.Дл этого используемые в качестве ПАВ соли бис- (i'-сульфопропионатнроиил- или сульфоизобутнратпропил) - иолидиметилсил- оксана содержат в своем составе удлиненную силоксановую день.Введение солей указанной формулы в концентраци х 1-10~з — 5-10~2 моль/л приводит к резкому снижению поверхностного нат л<е- ни воды (с 72,5 до 17 дин/см) и межфазного нат жени на границе вода — полиднметил- силоксан (с 47,7 до 4,3 дин/см).Соли бис-(у-сульфоироинонатпропнл- и сульфонзобутиратиропил) - полидиметилсил-
US4151172A (en) 1977-08-11 1979-04-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonoacyl prolines and related compounds
DE2860317D1 (en) * 1977-12-02 1981-02-19 Troponwerke Gmbh & Co Kg Medicines with sulfur containing esters, and their preparation
US4316896A (en) 1978-09-07 1982-02-23 Merck & Co., Inc. Aminoacid derivatives as antihypertensives
US4168267A (en) 1978-10-23 1979-09-18 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylalkanoyl prolines
US4337201A (en) 1980-12-04 1982-06-29 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylalkanoyl substituted prolines
US4374131A (en) 1981-04-27 1983-02-15 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino and substituted amino phosphinyl-alkanoyl compounds
US4716155A (en) 1981-12-24 1987-12-29 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphorus containing compounds and hypotensive use thereof
US4555506A (en) 1981-12-24 1985-11-26 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphorus containing compounds and use as hypotensives
US4867973A (en) 1984-08-31 1989-09-19 Cytogen Corporation Antibody-therapeutic agent conjugates
US4671958A (en) 1982-03-09 1987-06-09 Cytogen Corporation Antibody conjugates for the delivery of compounds to target sites
US4950738A (en) 1984-09-13 1990-08-21 Cytogen Corporation Amine derivatives of anthracycline antibiotics
US5156840A (en) 1982-03-09 1992-10-20 Cytogen Corporation Amine-containing porphyrin derivatives
US5162512A (en) 1982-03-09 1992-11-10 Cytogen Corporation Amine derivatives of anthracycline antibodies
US5140104A (en) 1982-03-09 1992-08-18 Cytogen Corporation Amine derivatives of folic acid analogs
US4560680A (en) 1982-03-15 1985-12-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Aminoalkyl and related substituted phosphinic acid angiotensin converting enzyme inhibitors
US4452791A (en) 1982-03-15 1984-06-05 E. R. Squibb & Sons, Inc. Aminoalkyl and related substituted phosphinic acid angiotensin converting enzyme inhibitors
US4448772A (en) 1982-04-22 1984-05-15 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylmethylaminocarbonyl imino acid compounds useful for treating hypertension
US4560681A (en) 1982-04-22 1985-12-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylmethylaminocarbonyl imino acid compounds useful for treating hypertension
US4468519A (en) 1982-06-14 1984-08-28 E. R. Squibb & Sons, Inc. Esters of phosphinylalkanoyl substituted prolines
US4616005A (en) 1982-06-23 1986-10-07 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensives
US4703043A (en) 1982-06-23 1987-10-27 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensive
US4452790A (en) 1982-06-23 1984-06-05 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphonyl hydroxyacyl amino acid derivatives as antihypertensives
US4444765A (en) 1982-07-14 1984-04-24 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino and substituted amino phosphinylalkanoyl compounds useful for treating hypertension
US4567166A (en) 1982-07-14 1986-01-28 E. R. Squibb & Sons, Inc. Amino and substituted amino phosphinylalkanoyl compounds useful for treating hypertension
US4547324A (en) 1982-07-29 1985-10-15 Stauffer Chemical Company Method for preparation of N-phosphonomethylglycine
US4741900A (en) 1982-11-16 1988-05-03 Cytogen Corporation Antibody-metal ion complexes
FR2590674B1 (fr) 1985-11-25 1989-03-03 Inst Nat Sante Rech Med Nouveaux reactifs de diagnostic
US5190976A (en) 1986-07-10 1993-03-02 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University And University Of Oregon N,N'-disubstituted guanidines and their use as excitatory amino acid antagonists
US5093525A (en) 1986-07-10 1992-03-03 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University N,N'-disubstituted guanidines and their use as excitatory amino acid antagonists
US4906779A (en) 1986-07-10 1990-03-06 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University N,N'-disubstituted guanidines and their use as excitatory amino acid antagonists
US5143908A (en) 1986-11-05 1992-09-01 Merck & Co., Inc. Antibacterial agents and potentiators of carbapenem antibiotics
US5099063A (en) 1986-11-05 1992-03-24 Merck & Co., Inc. Certain phosphinic acid derivatives having antibacterial activity
US4715994A (en) 1986-11-05 1987-12-29 Merck & Co., Inc. Novel antibacterial agents and potentiators of carbapenem antibiotics
ZW23187A1 (en) 1986-12-15 1988-06-29 Hoffmann La Roche Phosphinic acid derivatives
US4758584A (en) 1987-02-05 1988-07-19 Ciba-Geigy Corporation Antihypertensive 5-amino-4-hydroxyvaleryl derivatives substituted by sulphur-containing groups
US4927966A (en) * 1987-06-04 1990-05-22 The Research Foundation Of State University Of New York 2-mercaptomethylglutaric acid derivatives
US5010103A (en) * 1987-06-04 1991-04-23 The Research Foundation Of State University Of N.Y. Compositions and methods comprising 2-mercaptomethylglutaric acid derivatives
CA1305177C (en) 1987-06-30 1992-07-14 Yasufumi Ohfune Carboxycyclopropylglycine and process for producing the same
JPS6413097A (en) 1987-07-06 1989-01-17 Mitsubishi Chem Ind Phosphonic acid derivative
US5041644A (en) 1987-07-06 1991-08-20 Merck & Co., Inc. Peptide derivatives of β-chloro-L(Z)-dehydro-glutamic acid
US4849525A (en) 1987-09-21 1989-07-18 E. R. Squibb & Sons, Inc. Phosphinylcycloalkylcarbonyl and phosphinylcycloalkenylcarbonyl dipeptides
US4918064A (en) 1987-10-21 1990-04-17 G. D. Searle & Co. Phenyl glycines for use in reducing neurotoxic injury
US5871472A (en) 1987-11-17 1999-02-16 Brown University Research Foundation Planting devices for the focal release of neuroinhibitory compounds
US4937183A (en) 1988-02-03 1990-06-26 Cytogen Corporation Method for the preparation of antibody-fragment conjugates
US5047227A (en) 1988-02-08 1991-09-10 Cytogen Corporation Novel and improved antibodies for site specific attachment of compounds
US5030732A (en) 1988-03-03 1991-07-09 Merck & Co., Inc. Aminoethylphosphinic acid derivatives
US5162504A (en) 1988-06-03 1992-11-10 Cytogen Corporation Monoclonal antibodies to a new antigenic marker in epithelial prostatic cells and serum of prostatic cancer patients
US4966999A (en) 1988-06-07 1990-10-30 Cytogen Corporation Radiohalogenated compounds for site specific labeling
DE68925240T2 (de) 1988-06-23 1996-06-13 Banyu Pharma Co Ltd Phosphinsäure-Derivate
US5145990A (en) 1988-10-28 1992-09-08 Merck & Co., Inc. Phosphorous containing dhp enzyme inhibitors
US4962097A (en) 1988-10-28 1990-10-09 Merck & Co., Inc. Method of treating bacterial infection with phosphorus containing DHP enzyme inhibitors
US5147867A (en) 1988-10-28 1992-09-15 Merck & Co., Inc. Phosphorus containing enzyme inhibitors
US5196510A (en) 1988-12-29 1993-03-23 Cytogen Corporation Molecular recognition units
US4994446A (en) 1989-01-03 1991-02-19 Ramot - University Authority For Applied Research And Industrial Development Ltd. Drug system
CA2023099A1 (en) * 1989-09-04 1991-03-05 Quirico Branca Amino acid derivatives
US5136080A (en) 1989-12-04 1992-08-04 Burroughs Wellcome Co. Nitrile compounds
US5262568A (en) 1990-03-02 1993-11-16 State Of Oregon Tri- and tetra-substituted guanidines and their use as excitatory amino acid antagonists
US5336689A (en) 1990-03-02 1994-08-09 State Of Oregon, Acting By And Through The Oregon State Board Of Higher Education, Acting For And On Behalf Of The Oregon Health Sciences University And The University Of Oregon Tri- and tetra-substituted guanidines and their use as excitatory amino acid antagonists
JP2632754B2 (ja) 1991-05-21 1997-07-23 塩野義製薬株式会社 脳内グルタミン酸遊離抑制剤
DE4141928A1 (de) 1991-12-19 1993-06-24 Boehringer Mannheim Gmbh Neue phosphonobernsteinsaeurederivate, verfahren zu deren herstellung und diese verbindungen enthaltende arzneimittel
US5326856A (en) 1992-04-09 1994-07-05 Cytogen Corporation Bifunctional isothiocyanate derived thiocarbonyls as ligands for metal binding
USH1312H (en) 1992-05-28 1994-05-03 Cytogen Corporation Method for the preparation of gyk-dtpa
US5489525A (en) 1992-10-08 1996-02-06 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies to prostate cells
US5807884A (en) * 1992-10-30 1998-09-15 Emory University Treatment for atherosclerosis and other cardiovascular and inflammatory diseases
DK0668777T3 (da) 1992-11-05 2007-02-19 Sloan Kettering Inst Cancer Prostataspecifikt membran-antigen
US5449761A (en) 1993-09-28 1995-09-12 Cytogen Corporation Metal-binding targeted polypeptide constructs
US5495042A (en) 1993-11-04 1996-02-27 Cytogen Corporation Non-alkaline purification of aminophosphonic acids
US5500420A (en) 1993-12-20 1996-03-19 Cornell Research Foundation, Inc. Metabotropic glutamate receptor agonists in the treatment of cerebral ischemia
US5508273A (en) 1993-12-30 1996-04-16 Ortho Pharmaceutical Corporation Substituted phosphonic acids and derivatives useful in treating bone wasting diseases
GB9403909D0 (en) 1994-03-01 1994-04-20 Erba Carlo Spa Ureido derivatives of naphthalenephosphonic acids and process for their preparation
US5698402A (en) 1995-02-23 1997-12-16 Dianon Systems, Inc. Methods for diagnosing benign prostatic hyperplasia
ATE317435T1 (de) 1995-02-24 2006-02-15 Sloan Kettering Inst Cancer Prostataspezifisches membranes antigen und seine anwendungen
US5795877A (en) * 1996-12-31 1998-08-18 Guilford Pharmaceuticals Inc. Inhibitors of NAALADase enzyme activity
US5804602A (en) 1996-06-17 1998-09-08 Guilford Pharmaceuticals Inc. Methods of cancer treatment using naaladase inhibitors
US6046180A (en) * 1996-06-17 2000-04-04 Guilford Pharmaceuticals Inc. NAALADase inhibitors
US5824662A (en) 1996-09-27 1998-10-20 Guilford Pharmaceuticals Inc. Treatment of global and focal ischemia using naaladase inhibitors
US6025344A (en) * 1996-06-17 2000-02-15 Guilford Pharmaceuticals Inc. Certain dioic acid derivatives useful as NAALADase inhibitors
US5902817A (en) 1997-04-09 1999-05-11 Guilford Pharmaceuticals Inc. Certain sulfoxide and sulfone derivatives
US6017903A (en) * 1996-09-27 2000-01-25 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of treating a glutamate abnormality and effecting a neuronal activity in an animal using NAALADase inhibitors
KR20000016750A (ko) * 1996-06-17 2000-03-25 토마스 씨. 서 Naaladase 억제를 이용한 암의 치료방법.
US5863536A (en) 1996-12-31 1999-01-26 Guilford Pharmaceuticals Inc. Phosphoramidate derivatives
US5672592A (en) 1996-06-17 1997-09-30 Guilford Pharmaceuticals Inc. Certain phosphonomethyl-pentanedioic acid derivatives thereof
US5977090A (en) * 1996-09-27 1999-11-02 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of treating compulsive disorders using NAALADase inhibitors
ID18382A (id) 1996-09-27 1998-04-02 Guilford Pharm Inc Komposisi sediaan farmasi dan metoda pengobatan gangguan kompulsif dengan menggunakan inhibitor naaladase
US6395718B1 (en) * 1998-07-06 2002-05-28 Guilford Pharmaceuticals Inc. Pharmaceutical compositions and methods of inhibiting angiogenesis using naaladase inhibitors
US6265609B1 (en) * 1998-07-06 2001-07-24 Guilford Pharmaceuticals Inc. Thio-substituted pentanedioic acid derivatives
US6228888B1 (en) * 1999-07-01 2001-05-08 Guilford Pharmaceuticals Inc. Methods for treating anxiety, anxiety disorders and memory impairment using naaladase inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
DE69927502D1 (de) 2005-11-03
KR100672965B1 (ko) 2007-02-28
ATE305449T1 (de) 2005-10-15
WO2000001668A3 (en) 2000-09-21
KR20010099586A (ko) 2001-11-09
CA2337797A1 (en) 2000-01-13
US20030083374A1 (en) 2003-05-01
DE69927502T2 (de) 2006-07-06
EP1093453A1 (en) 2001-04-25
MXPA01000144A (es) 2002-10-17
TR200100025T2 (tr) 2001-12-21
WO2000001668A2 (en) 2000-01-13
CN1314882A (zh) 2001-09-26
NO20010052D0 (no) 2001-01-04
JP2002519408A (ja) 2002-07-02
NO20010052L (no) 2001-03-02
HK1036617A1 (en) 2002-01-11
ES2251204T3 (es) 2006-04-16
IL140499A0 (en) 2002-02-10
EP1093453B1 (en) 2005-09-28
HUP0103382A3 (en) 2002-12-28
US6458775B1 (en) 2002-10-01
PL346762A1 (en) 2002-02-25
BR9912516A (pt) 2001-09-18
EP1571141A2 (en) 2005-09-07
CA2337797C (en) 2009-04-14
NZ508978A (en) 2005-03-24
AU4858399A (en) 2000-01-24
HUP0103382A2 (en) 2002-06-29
AU770258B2 (en) 2004-02-19
JP4503836B2 (ja) 2010-07-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2268881C2 (ru) Производные пентадикарбоновой кислоты, фармацевтическая композиция на их основе и способы лечения
CZ200113A3 (cs) Inhibitory NAALAdázy využitelné jako léčiva a farmaceutické kompozice, které je obsahují
AU733880B2 (en) Naaladase compositions and methods for treating glutamate abnormality and effecting neuronal activity in animals
US6017903A (en) Pharmaceutical compositions and methods of treating a glutamate abnormality and effecting a neuronal activity in an animal using NAALADase inhibitors
US6313159B1 (en) Metabotropic glutamate receptor ligand derivatives as naaladase inhibitors
JP2001521512A (ja) Ｎａａｌａｄａｓｅインヒビターとしてのチオ誘導体類
JP2001527084A (ja) Ｎａａｌｄアーゼ阻害剤のプロドラッグ
US6452044B2 (en) Benzenedicarboxylic acid derivatives
US6265609B1 (en) Thio-substituted pentanedioic acid derivatives
EP1066297B1 (en) Phosphinic acid derivatives
WO2003057670A2 (en) Indoles as naaladase inhibitors
WO1999033847A9 (en) Phosphinic alkanoic acid derivatives
US6348464B1 (en) Pyrrolecarbonylimino derivatives as naaladase inhibitors
CA2264158A1 (en) Pharmaceutical compositions and methods of treating compulsive disorders using naaladase inhibitors
JP2004535398A (ja) ＮＡＡＬＡＤａｓｅ阻害剤としてのヒドロキサム酸およびアシルヒドロキサミン
JP2005503353A (ja) チオールアルキル安息香酸誘導体
IL140499A (en) Nalladase inhibitors useful as pharmaceutical compounds and compositions
MXPA00006283A (en) Prodrugs of naaladase inhibitors