CZ20004359A3 - Mutant strain Lactobacillus bulgaricus - Google Patents

Mutant strain Lactobacillus bulgaricus Download PDF

Info

Publication number
CZ20004359A3
CZ20004359A3 CZ20004359A CZ20004359A CZ20004359A3 CZ 20004359 A3 CZ20004359 A3 CZ 20004359A3 CZ 20004359 A CZ20004359 A CZ 20004359A CZ 20004359 A CZ20004359 A CZ 20004359A CZ 20004359 A3 CZ20004359 A3 CZ 20004359A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
leu
ala
gly
ser
wall
Prior art date
Application number
CZ20004359A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ302175B6 (cs
Inventor
Laurent Benbadis
Pierre Brignon
Francois Gendre
Original Assignee
Gervais Danone Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=9526604&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ20004359(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gervais Danone Sa filed Critical Gervais Danone Sa
Publication of CZ20004359A3 publication Critical patent/CZ20004359A3/cs
Publication of CZ302175B6 publication Critical patent/CZ302175B6/cs

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING OR TREATMENT THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/225—Lactobacillus

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

Předkládaný vynález se týká nových variant L. bulgaricus a jejich použití k výrobě kvašených mléčných výrobků. Uvedené kmeny a kvas lze použít k získání kvašených mléčných výrobků z mléka doplněného glukózou.
Dosavadní stav techniky
Jogurty se běžně získávají kvašením mléka kombinací kmenů Streptococcus thermophilus a Lactobacillus bulgaricus. Během kvašení, které se provádí při teplotě přibližně 40 až 45°C, používají tyto bakterie jako energetický substrát především laktózu a produkují kyselinu mléčnou, která působí srážení mléka. Tento krok kvašení (nazývaný také acidifikace, okyselování) je ukončen ochlazením výrobku, jakmile jeho pH dosáhne hodnoty přibližně 4,8 až 4,5. Výrobek se pak během zbylého výrobního procesu, procesu balení a až do doby konzumace uchovává v chladu.
Ochlazení samozřejmě nezastaví kvašení mléčné kyseliny úplně; dokonce i pokud je výrobek uchováván při 4°C, je v průběhu času pozorováno postupné zvyšování jeho kyselosti.
Tento jev, známý jako postacidifikace, dodatečné okyselování, je zodpovědný za degradaci organoleptických kvalit (týkajících se chuti a vůně) výrobku během jeho uchovávání.
Dodatečné okyselování je výsledkem zejména toho, že bakterie, zvláště L. bulgaricus, využívají laktózu, zbývající ve výrobku na konci řízeného kroku okyselování. K odstranění tohoto jevu bylo navrženo použití kmenů L. bulgaricus, které kvasí laktózu jen obtížně nebo vůbec.
• · · · ·· · · ···
Jedním z enzymů, které jsou pro kvašení laktózy nezbytné, je β-galaktosidáza, která hydrolyzuje laktózu na glukózu a galaktózu. Pro získání kmenů L. bulgaricus, nevytvářejících dodatečné okyselování, bylo proto navrženo vyrobit umělé mutanty, nebo vybrat přírodní mutanty, u nichž je aktivita tohoto enzymu nepříznivě ovlivněna.
Například patent EP 402 450 (Genencor) popisuje výrobu, prováděnou umístěnou mutagenezí genu β-galaktosidázy, podmíněných mutantů L. bulgaricus, u nichž β-galaktosidáza, která je aktivní během kvašení při 40°C, ztrácí svou aktivitu při teplotě anebo při pH, které odpovídají podmínkám uchovávání kvašených mléčných výrobků.
Patentová přihláška JP 90053437 popisuje výrobu umělého mutantu L. bulgaricus, který zcela ztratil schopnost kvasit laktózu, a výběr přírodního mutantu se sníženou schopností kvasit laktózu; tyto mutanty jsou ovšem oba schopné normálního vývoje a okyselování v přítomností S. thermophilus, pod podmínkou, že je médium doplněno glukózou. Vedlejší kultury takových mutantů zachovávají jejich charakteristiky okyselování, v mléku postrádajícím glukózu, i po deseti pasážování (subkultivacích).
Patent EP 0518 096 (Societě des Produits Nestlé) navrhuje použít pro výrobu jogurtu chabě dodatečně okyselující mutanty L. bulgaricus, které byly předem vybrány podle kriteria delece (vypadnutí) fragmentu β-galaktosidázového genu. Plošné testování (screening) a charakterizace těchto mutantů je usnadněno skutečností, že přítomnost této delece může být snadno ověřena na restrikčních profilech. Navíc jsou delece známé jako nezvratné mutace, což umožňuje snadné získání stálých mutantních kmenů z rodičovského kmenu. Patent 0518 096 popisuje dva typy slabě dodatečně okyselujících mutantů, vybraných tímto způsobem. První vykazuje deleci, ovlivňující pouze gen β-galaktosidázy; pokud jsou takové mutanty kombinovány se S. thermophilus a kultivovány na mléce, vykazují i bez přídavku glukózy růstové a okyselující vlastnosti, které jsou srovnatelné s týmiž vlastnostmi u divokých kmenů, z nichž pocházejí. Druhý typ vykazuje širší deleci, prostírající se po genu β-galaktisidázy v rozsahu nejméně lkb; pokud jsou takové mutanty kombinovány se S. ťhermophilus, rostou mnohem pomaleji a mnohem méně okyselují než divoké kmeny, z nichž pocházejí. Přidání glukózy do kultivačního média mělo na jejich okyselující a dodatečně okyselující vlastnosti pouze slabý vliv.
Přírodní mutanty, u nichž je β-galaktosidáza neaktivní, je mnohem obtížnější vybrat a udržovat jako čisté kultury v případě bodových mutací než v případě delečních mutací; to se vysvětluje nižší pravděpodobností bodových mutací, vytvářejících neaktivní bílkovinu, větší obtížností lokalizace a charakterizace bodových mutací za použití restrikčních profilů a velmi vysokou rychlostí zvratu.
Podstata vynálezu
Autoři vynálezu nyní našli jiné přírodní mutanty L. bulgaricus, které nenesou deleci v genu kódujícícm β-galaktosidázu a které mají výhodné technické charakteristiky. V souvislosti s předkládaným vynálezem byl z kultury divokého typu L. bulgaricus isolován nonsensní mutant, neschopný asimilovat glukózu. Pokud je kombinován se S. thermophilus, při kultivaci na mléce, roste a okyseluje mnohem pomaleji než kmen divokého typu, ze kterého byl získán. Pokud je mléko doplněno glukózou, jsou naopak jeho růst a a schopnost okyselování vlastně normální.
Předmětem předkládaného vynálezu je mutantní kmen L. bulgaricus postrádající aktivitu β-galaktosidázy, vyznačující se tím, že nese mutaci, která zavádí nonsensní kodon do jedné z kódujících sekvencí laktózového operonu, a zvláště do sekvence kódující β-galaktosidázu.
. 4 - ··· ···· ·· ···· ·· ·
Kmen L. bulgaricus podle vynálezu byl uložen, podle Budapešťské smlouvy, 14. ledna 1998 v CNCM (Collection Nationale de Cultures de Mikroorganismes, Národní sbírce kultur mikroorganismů), uchovávané Pasteurovým ústavem v Paříži (Pasteur Institute, 25 rue du Docteur Roux, Paris) pod číslem 1-1968.
Tento kmen má následující morfologické a biochemické charakteristiky:
- morfologie: Gram-positivní mikroorganismus, nepohyblivý, isolovaný nebo o krátkém řetězci, asporogenní, pleomorfní, tenké bacily;
- metabolismus: homofermentativní (samokvasný), kataláza (-);
- kvašení cukrů: D-glukóza (+), D-fruktóza (-), (D-mannóza (+), eskulin (+).
Autoři vynálezu sekvenovali laktózový operon mutantu 1-1968. Odpovídající sekvence je představována v připojeném seznamu sekvencí pod označením sekvence identifikačního čísla 1 (sekv. id. č. 1). Sekvence translačních produktů (permeáza a β-galaktosidáza) jsou představovány pod označením sekv. id. č. 2 a sekv. id. č. 3.
Analýza této sekvence odkryla dvě bodové mutace: jedna, v permeázovém genu (poloha 122 na sekvenci id. č. 1), indukuje výměnu aminokyseliny (Lys —» Asn); druhá, v genu β-galaktosidázy, (poloha 4519 na sekvenci id. č. 1) vkládá tzv. stop-kodon. Třebaže zachovává svá aktivní místa (polohy 464 a 531), je β-galaktosidáza produkovaná tímto mutantem inaktivní. Autoři vynálezu rovněž zaznamenali, že tato mutace zůstává stálá po několika sériích pasážování, v kultivačním médiu obsahujícím glukózu. Na druhé straně v kultivačním médiu bez obsahu glukózy se tato nonsensní mutace velmi rychle navrací do původního stavu (revertuje) tempem přibližně 10’6.
Předkládaný vynález rovněž zahrnuje mutantní kmeny, které jsou neschopné asimilovat laktózu a které jsou odvozeny od kmene 1-1968. Takové kmeny mohou být například získány indukováním jiných mutací na laktózovém operonu kmene 1-1968, místně řízenou mutagenezí.
Předmětem tohoto vynálezu je rovněž mléčný zákvas, konkrétně jogurtový zákvas, který se vyznačuje tím, že zahrnuje alespoň jeden kmen L. bulgaricus podle vynálezu jak byl výše definován, s výhodou v kombinaci s alespoň jedním kmenem S. thermophilus.
K produkci zákvasu podle vynálezu může být použit jakýkoli kmen S. thermophilus, hodící se pro výrobu jogurtu; výběr jednoho nebo více kmenů S. thermophilus může být činěn jako funkce přídavných charakteristik, které je volitelně žádoucí poskytnout konečnému výrobku.
Jako příklad kmenů S. thermophilus, jež mohou být použity v kombinaci s kmenem L. bulgaricus podle vynálezu, lze zmínit následující kmeny, uložené v CNCM (Collection Nationale de Cultures de Mikroorganismes, Národní sbírce kultur mikroorganismů), uchovávané Pasteurovým ústavem v Paříži (Pasteur Institute, 25 rue du Docteur Roux, Paris):
- kmen uložený 25. srpna 1994 pod číslem 1-1470 a kmen uložený 23. srpna 1995 pod číslem 1-1620; tyto dva kmeny jsou popsány v Evropské patentové přihlášce, zveřejněné pod číslem 96/06924;
- kmeny uložené 30. prosince 1994 pod čísly 1-1520 a 1-1521; tyto dva kmeny jsou popsány v PCT mezinárodní přihlášce WO 96/20607;
- kmen uložený 24. října 1995 pod číslem 1-1630; charakteristiky tohoto kmene jsou popsány v PCT mezinárodní přihlášce WO 96/01701.
Tyto kmeny mohou být kombinovány spolu navzájem anebo s jedním či více z dalších průmyslových kmenů S. thermophilus.
•· ···· ·· ·
Kmen (kmeny) S. thermophilus je (jsou) kombinován (kombinovány) s kmenem (kmeny) L. bulgaricus podle vynálezu, stejným způsobem a ve stejných poměrech jako v běžných jogurtových zákvasech; populace bakterie L. bulgaricus podle vynálezu může například představovat 10 až 90 % a lépe 20 až 50 % celkové bakteriální populace.
Předmětem předkládaného vynálezu je také způsob výroby kvašeného mléčného výrobku, který se vyznačuje tím, že zahrnuje krok, během něhož se mléko kvasí za použití zákvasu, zahrnujícího alespoň jeden kmen L. bulgaricus podle vynálezu, v přítomnosti alespoň jednoho cukru, který může být asimilován uvedeným kmenem; zvláště se může jednat o fruktózu, mannózu, a s výhodou glukózu. Uvedený kvašený výrobek je s výhodou jogurt.
Způsob podle vynálezu je podobný běžným způsobům výroby jogurtu s ohledem na hlavní způsoby provedení kroku řízeného okyselování; konkrétně se toto okyselování provádí při teplotě mezi 20 a 45°C a s výhodou mezi 30 a 45°C, vsádkově, tj. v jediném kroku a za použití jednoho kvasného tanku.
Trvání tohoto kroku řízeného okyselování je obecně 6 až 24 hodin a s výhodou 6 až 16 hodin; je tedy delší než v případě běžných způsobů výroby jogurtů (kde je to 3 až 5 hodin při 44°C). Kmeny L. bulgaricus podle tohoto vynálezu, i v kombinaci se S. thermophilus, rostou a okyselují mnohem pomaleji než kmeny divokého typu.
Navíc se rychlost růstu a okyselování kmenů L. bulgaricus podle tohoto vynálezu liší velmi významně v závislosti na množství glukózy přidané do mléka. Tato vlastnost umožňuje řídit jejich růst a okyselování jednoduchým přidáním požadovaného množství glukózy na počátku kvašení.
Autoři vynálezu rovněž pozorovali, že pokud jsou použity kmeny L. bulgaricus nebo zákvas podle tohoto vynálezu, okyselování se značně zpomaluje, pokud pH dosáhne hodnot v rozmezí 4,8 až 4,5 (což odpovídá • · · · · · · · ·
- 7rozmezí hodnot pH, v němž je okyselování zastaveno v případě běžných způsobů) a stabilizuje se, i když se mléko udržuje při teplotě kvašení, na minimálním pH. Hodnota tohoto minimálního pH zásadně závisí na množství přidané glukózy.
Tato vlastnost umožňuje snížit, nebo dokonce odstranit, fázi chlazení, používanou v běžných způsobech výroby jogurtů k zastavení kvašení. Odstraňuje také nutnost měření pH pro stanovení optimálního okamžiku k zastavení kvašení; u daného zákvasu a za daného množství přidané glukózy je možné, bez rizika překyselení, zastavit kvašení na konci daného časového období, vypočítaného jako funkce času, požadovaného pro dosažení miminálního pH. To umožňuje lepší kontrolu pravidelnosti konečného pH a struktury výrobku na konci kvašení.
Pro uskutečnění způsobu podle vynálezu a v závislosti na stupni okyselení, kterého je žádoucí dosáhnout, činí výhodně množství glukózy přidávané do mléka před kvašením 0,5 až 10 g.l'1 a lépe 0,5 až 5 g.l'1.
Kvašený výrobek získaný tímto způsobem může být uchováván po několik hodin při teplotě blízké teplotě kvašení, bez poklesu pH, což umožňuje odstranit zařízení pro uchovávání meziproduktu v chladu a zvýšit kapacity kvasných tanků.
Uplatňování způsobu podle vynálezu umožňuje snížení dodatečného okyselení v kvašených výrobcích během jejich delší doby uchovávání. Stupeň dodatečného okyselení se může lišit v závislosti na složení zákvasu a na množství použité glukózy. Ovšem dodatečné okyselení je vždy jasně nižší než to, které je pozorováno v případě jogurtů, získaných s běžným zákvasem a běžnými způsoby.
Například pokusy, prováděné autory vynálezu, ukázaly, že za stejných podmínek uchovávání (28 dnů uchovávání při 10°C) je Δ pH (rozdíl mezi pH v den O, tj. DO a pH v den 28, tj. D28) mezi 0,05 a 0,4 v případě výrobků získaných za použití zákvasu podle vynálezu, zatímco v případě kontrolního zákvasu, kdy je kmen L. bulgaricus podle vynálezu nahražen kmenem divokého typu, je Δ pH vždacky větší než 0,7.
Toto slabé dodatečné okyselování je doprovázeno dobrým přežíváním kmenů zahrnutých v zákvasu; populace L. bulgaricus j ev kvašeném výrobku získaném podle vynálezu na konci uchovávání pouze mírně menší než v kontrolním výrobku.
Předmětem předkládaného vynálezu jsou také kvašené mléčné výrobky, které mohou být získány prováděním způsobu podle vynálezu.
Tyto výrobky mohou být uchovávány po dlouhou dobu a při vyšších teplotách než výrobky získané za použití běžných metod, a jejich organoleptické vlastnosti zůstávají během uchovávání stálé.
Příklady provedení vynálezu
Příklad 1
Biochemické testování β-galaktosidázové aktivity mutantu podle vynálezu
Aktivita β-galaktosidázy kmene 1-1968 byla srovnána s toutéž aktivitou u kmene divokého typu L. bulgaricus (dále zde označovaného LbS), od něhož byl odvozen.
Bakterie se kultivují přes noc na MRS agarovém médiu (Merck) při 37°C, v anaerobní nádobě (Merck) v přítomnosti zprostředkovatele kyslíku (AnaerocultA, Merck).
• 99 9« ·· 99 * • · 9 9 · ·« 9 · ·«· » 9 9 C · 9 t
99· ·· 9 · 9 9 99 99
Klička bakterií, mající objem 10 μΐ (Nunc), byla resuspendována v 1 ml sterilní vody. Bakterie byly lyžovány 2 cykly důkladného protřepávání, 20 sekund při rychlosti otáčení 5000 otáček za minutu v přítomnosti skleněných perliček (0,5 mm v průměru, BIOSPEC PRODUCTS) a poté přidáním 0,15 ml chloroformu. Směs byla protřepávána 30 minut při 37°C a objem byl upraven na 2 ml sterilní vodou při 4°C. Poté byla měřena aktivita β-galaktosidázy. Reakce byla započata tak, že k 0,2 ml buněčné suspenze bylo přidáno 1,2 ml 0,067 mol.l'1 NaH2PO4 pufru o pH 6,8, poté 0,05 ml L-cysteinu (SIGMA) a v čase t=0 0,05 ml o-nitrofenyl^-D-galaktopyranosidu (SIGMA). Enzymová reakce byla zastavena po 0, 2, 5 nebo 10 minutách přidáním 1 ml 10% Na2CO3 pufru a po odstředění reakčního média bylo v supernatantu prováděno měření OD (optické hustoty) při 400 nm.
Galaktosidázové aktivity u LbS rodičovského kmene a u mutantu 1-1968 podle vynálezu, měřené jako funce času, jsou uvedeny na obr. 1.
Tyto výsledky ukazují, že β-galaktosidáza je u mutantu podle vynálezu zcela inaktivní.
Příklad 2
Stálost 1-1968 mutantního kmene L. bulgaricus
Stálost mutantu 1-1968 byla testována v médiu, obsahujícím jako zdroj uhlíku buď směs glukózy a laktózy, nebo pouze laktózu.
Kultura 1-1968, získaná v médiu MRS obsahujícím glukózu, byla pěstována ve vedlejší kultuře na sterilizovaném mléku, doplněném kvasnicovým autolyzátem (2 g/1), která mohla nebo nemusela být doplněna glukózou (20 g/1). Po dosažení pH v hodnotě 5,2 (srážení mléka) byly z každé vedlejší kultury odebrány vzorky, z nichž se určovala schopnost bakterií kvasit
- 10• *
cukry a přítomnost β-galaktosidázové aktivity (X-gal deskové stanovení: bílé kolonie = β-galaktosidáza mínus; modré kolonie = β-galaktosidáza plus).
Výsledky jsou uvedeny níže v Tabulce 1.
Tabulka 1
médium mléko + glukóza (20 g/1) mléko
doba k dosažení pH 5,2 6 hodin 20 hodin
kvašení cukrů glukóza, fruktóza, mannóza laktóza, glukóza, fruktóza, mannóza
X-gal deskové stanovení 100 % bílých kolonií 20 % bílých kolonií 80 % modrých kolonií
Tyto výsledky ukazují, že v přítomnosti glukózy se kmen 1-1968 nemění na kmen, schopný využívat laktózu. Naproti tomu v médiu, obsahujícím laktózu jako jediný zdroj uhlíku, byl pozorován rychlý zvrat kmene 1-1968 do původního stavu.
Příklad 3
Okyselování, dodatečné okyselování a podmínky přežití varianty 1-1968 L. bulgaricus v symbióze se S. thermophilus'. Způsob výroby stabilizovaného jogurtu (kvašení ve větrané sušárně).
Jogurtové zákvasy byly připraveny spojením kmene 1-1968 podle vynálezu s různými průmyslovými kmeny S. thermophilus (použité kmeny S. thermophilus jsou zde dále nazývány STÍ, ST2 a ST3).
Pro srovnání byly zákvasy připraveny také spojením LbS rodičovského kmene a stejných kmenů S. thermophilus.
Pro přípravu zákvasů byly kmeny zakvašeny odděleně na 1% na následující směsi:
složení pro 1 litr:
135 g práškového odstředěného mléka g kvasnicového autolyzátu
920 ml destilované vody g glukózy (pouze pro kmen 1-1968) hydratace: 10 minut pasterizace: 30 minut při 95°C
Mléko bylo poté ochlazeno na 44°C a zaočkováno a následně inkubováno při teplotě 44°C až k dosažení kyselosti 85°D (Dornicovy stupně) pro streptokoky a 80°D pro laktobacily.
Kultury pak byly ochlazeny k zisku zákvasu, obsahujícího 80 % Streptococcus thermophilus a 20 % Lactobacillus bulgaricus.
Takto připravené zákvasy byly použity k zaočkování následujícího přípravku:
složení pro 1 litr:
% mléka 0, 1 nebo 2 g/1 glukózy hydratace: 10 minut pasterizace: 10 minut při 95°C
Mléko pak bylo ochlazeno na 44°C a zaočkováno na 1%.
Složení zákvasu a množství přidané glukózy je pro každý pokus uvedeno níže v Tabulce II.
Tabulka II
pokus glukóza (g/1) kmeny procenta
1 0 ST3 64 %
ST2 16 %
LbS 20 %
2 0 ST3 64 %
ST2 16 %
1-1968 20 %
3 1 ST3 64 %
ST2 16 %
1-1968 20 %
4 0 STÍ 80 %
LbS 20 %
5 0 STÍ 80 %
1-1968 20 %
6 2 STÍ 80 %
1-1968 20 %
Po zaočkování bylo mléko umístěno do baněk s kulatým dnem a inkubováno při teplotě 44°C. Během inkubace byl monitorován profil okyselování. Výrobky byly při pH 4,6 zachovány nesražené ochlazením v chladící jednotce (16 hodin při 4°C).
Poté byly výrobky podrobeny testu uchovávání při 10 °C. V tomto testu byla měřena hodnota pH a Dornicova kyselost po 1, 14, 21 a 28 dnech uchovávání.
Výsledky okyselování (doba k dosažení pH 4,6 a hodnota pH v čase 24 hodin) jsou uvedeny níže v Tabulce III:
- 13 Tabulka III
pokus doba k dosažení pH 4,6 (min) doba k dosažení pH 4,5 (min) pH v čase 24 hodin
1 215 236 3,67
2 550 778 4,33
3 416 507 4,26
4 225 241 3,67
5 660 > 1500 4,54
6 390 465 4,35
Výsledky testu uchovávání při 10 °C (monitorování pH a Dornicovy kyselosti) a testu přežití (populace S. thermophilus a L. bulgaricus} po 28 dnech jsou uvedeny níže v Tabulce IV:
Tabulka IV
pokus doba skladování (dny) PH Dornicova kyselost S. thermophilus (buňky/ml) L. bulgaricus (buňky/ml)
1 1 4,41 101 7,25E+08 3,35E+08
14 3,98 140 ND ND
21 3,95 145 ND ND
28 3,9 148 7,35E+08 3,30E+08
2 1 4,5 93 5,60E+08 2,90E+07
14 4,23 110 ND ND
21 4,18 112 ND ND
28 4,19 114 5,65E+O8 l,87E+07
3 1 4,49 96 6,90E+08 7,45E+07
14 4,14 115 ND ND
21 4,15 117 ND ND
28 4,15 120 8,65E+08 6,30E+07
4 1 4,39 105 6,30E+07 4,40E+08
14 3,91 145 ND ND
21 3,9 151 ND ND
28 3,85 157 4,70E+08 6,30E+08
5 1 4,6 85 9,05E+08 6,70E+07
14 4,58 80 ND ND
21 4,53 80 ND ND
28 4,61 79 9,40E+08 7,00E+07
6 1 4,51 89 1,05E+09 l,96E+08
14 4,38 90 ND ND
21 4,39 96 ND ND
28 4,42 90 l,62E+09 l,91E+08
ND = nestanoveno • « · ·
Tyto výsledky ukazují, že jogurty, vyráběné za použití symbiózy, spojující kmen 1-1968 s jedním nebo dvěma kmeny S. thermophilus, vykazují výrazně snížené dodatečné okyselování vzhledem ke stejné symbióze s rodičovským kmenem LbS, a současně uchovávají bohatou populaci až do konce kvašení a dobré přežívání po 28 dní při 10° C.
Zastavení okyselování a udržování pH kolem 4,6 až 4,5 po alespoň 24 hodin při 44°C umožňuje, v kontextu výroby míchaného jogurtu, snížit nebo dokonce odstranit běžně používanou fázi ochlazování v tanku.
Zasť
SEZNAM SEKVENCÍ .........’ ·:· <110> COMPAGNIE GERVAIS DANONE GENDRE, Franpois BENBADIS, Laurent BRIGNON, Pierre <120> MUTANTNÍ KMENY LACTOBACILLUS BULGARICUS POSTRÁDAJÍCÍ β-GALAKTOSIDÁZOVOU AKTIVITU <130> MJPcbl91/143 <140>
<14 1>
<150> FR9806456 <151> 1998-05-22 <160> 3 <170> Patentln Ver. 2.1 <210> 1 <211> 5059 <212> DNA <213> Lactobacillus bulgaricus <220>
<221> CDS <222> (122). . (1873) <220>
<221> CDS <222> (1877)..(4519) <400> 1 gcttgtctca cgcttgtcgt acgcggccgg tgcctttggc aacgacgtct tctacgcgac 60 tctgtcaacc tactttatcg tcttcgtcac cacccacctc tttaatgccg gtgaccacaa 120 g atg atc ttt atc atc acc aac ttg atc acc gcc atc cgg atc ggg gaa 169 Met Ile Phe Ile Ile Thr Asn Leu Ile Thr Ala Ile Arg Ile Gly Glu
10 15
gtc Val ctg Leu ctc Leu gac Asp 20 ccc Pro ttg Leu atc Ile ggt Gly aac Asn 25 gcc Ala atc Ile gac Asp cgg Arg acc Thr 30 gaa Glu agc Ser 217
cgg tgg ggg aag ttc aag ccc tgg gtt gtg ggc ggg ggg atc atc agc 265
Arg Trp Gly Lys Phe Lys Pro Trp Val val Gly Gly Gly Ile Ile Ser
35 40 45
tca tta gcc ctc tta gcc ctc ttt acc gac ttt ggc ggc att aac caa 313
Ser Leu Ala Leu Leu Ala Leu Phe Thr Asp Phe Gly Gly Ile Asn Gin
50 55 60
agc aac ccc gtt gtt tac tta gta atc ttc ggt att gtt tac ttg att 361
Ser Asn Pro Val Val Tyr Leu Val Ile Phe Gly Ile Val Tyr Leu Ile
65 70 75 80
atg gat atc ttc tac tca ttt aaa gac act ggc ttc tgg gcc atg atc 409
Met Asp Ile Phe Tyr Ser Phe Lys Asp Thr Gly Phe Trp Ala Met Ile
85 90 95
ccg gcc ttg tcc ctg gat tcc cgg gaa aga gag aag acc tcc acc ttc 457
Pro Ala Leu Ser Leu Asp Ser Arg Glu Arg Glu Lys Thr Ser Thr Phe
100 105 110
gcc aga gtc ggc tcc acc atc ggg gcc aac ctg gtc ggg gta gtc atc 505
Ala Arg Val Gly Ser Thr Ile Gly Ala Asn Leu Val Gly Val Val Ile
• ·
115 120
acc cca atc atc ctc ttc ttc tcg gcc
Thr Pro 130 Ile Ile Leu Phe Phe 135 Ser Ala
gat aag cag ggc tgg ttc ttc ttt gcc
Asp 145 Lys Gin Gly Trp Phe 150 Phe Phe Ala
atc ttg acc tca att acc gtt ggt ctt
Ile Leu Thr Ser Ile 165 Thr Val Gly Leu
gcc ctg cgg gaa agc aat gaa aag acc
Ala Leu Arg Glu 180 Ser Asn Glu Lys Thr 185
gtc ctg ggg caa aac gac cag ctc ctc
Val Leu Gly 195 Gin Asn Asp Gin Leu 200 Leu
ttt tac ggc ctg ggt atc aac acc ctg
Phe Tyr 210 Gly Leu Gly Ile Asn 215 Thr Leu
ttc tca tac atc tta ggc gat gcc cgc
Phe 225 Ser Tyr Ile Leu Gly 230 Asp Ala Arg
atc aac acc ttt gtc ggt tta atc tet
Ile Asn Thr Phe Val 245 Gly Leu Ile Ser
gcc aag aag ttc aac aga aat cgc ctc
Ala Lys Lys Phe 260 Asn Arg Asn Arg Leu 265
atg ctg tta ggg atc ggg gtc ttc tcc
Met Leu Leu 275 Gly Ile Gly Val Phe 280 Ser
ctg tcc ctt gtt ggg gca gaa ttc ttc
Leu Ser 290 Leu Val Gly Ala Glu 295 Phe Phe
ttc ctg gtc gtt ttg atg atc atc tet
Phe 305 Leu Val Val Leu Met 310 Ile Ile Ser
ctg aaa act ggc cac aga gac gaa gct
Leu Lys Thr Gly His 325 Arg Asp Glu Ala
ttg gtc gat aag ctg ggc ggg gcc ttg
Leu Val Asp Lys 340 Leu Gly Gly Ala Leu 345
att gcc tta act gcc ggc atg acc act
Ile Ala Leu 355 Thr Ala Gly Met Thr 360 Thr
aca gct cat ggc cag atg gtc ttc aag
Thr Ala 370 His Gly Gin Met Val 375 Phe Lys
gca gtc atg ctc ttg atc gct gtt tet
Ala 385 Val Met Leu Leu Ile 390 Ala Val Ser
125 • • · • · • · « · · • · · • · • · • · · · ·
agc aag gcc aac ccc aac ggg 553
Ser Lys Ala 140 Asn Pro Asn Gly
ttg atc gtg gcc att gtc ggc 601
Leu Ile 155 Val Ala Ile Val Gly 160
ggt act cac gaa gta aaa tcc 649
Gly 170 Thr His Glu Val Lys 175 Ser
act ttg aag cag gtc ttt aag 697
Thr Leu Lys Gin Val 190 Phe Lys
tgg ctg gcc ttt gcc tac tgg 745
Trp Leu Ala Phe 205 Ala Tyr Trp
aac gct ctg caa ctt tac tac . 793
Asn Ala Leu 220 Gin Leu Tyr Tyr
ggc tac agc ctg ctt tac acc 841
Gly Tyr 235 Ser Leu Leu Tyr Thr 240
gca tcc ttc ttc cca tca ctg 839
Ala 250 Ser Phe Phe Pro Ser 255 Leu
ttc tac gcc tgc atc gcg gtg 937
Phe Tyr Ala Cys Ile 270 Ala Val
gtg gcc agc ggt tet ctg gcc 985
Val Ala Ser Gly 285 Ser Leu Ala
ttt att ccg cag cct ctg gcc 1033
Phe Ile Pro 300 Gin Pro Leu Ala
gac gct gtt gaa tac ggc cag 1081
Asp Ala 315 Val Glu Tyr Gly Gin 320
ttg acc ctg tet gtc cgg cca 1129
Leu 330 Thr Leu Ser Val Arg 335 Pro
tcc aac tgg ttt gtt tcc ttg 1177
Ser Asn Trp Phe Val 350 Ser Leu
ggg gcg act gcc tca aca att 1225
Gly Ala Thr Ala 365 Ser Thr Ile
tta gct atg ttt gcc tta ccg 1273
Leu Ala Met 380 Phe Ala Leu Pro
att ttc gcc aaa aag gtc ttc 1321
Ile Phe 395 Ala Lys Lys Val Phe 400
• * * · ·
ttg act Leu Thr gaa Glu gaa Glu aag Lys 405 cac His qcq qaa atc lle gtc gac cag Gin ctg Leu gaa Glu act Thr 415 caa Gin • · · · · « 1369
Ala Glu Val 410 Asp
ttc agc caa agc cat gcc caa aag ccg gcg caa gct gaa agc ttc act 1417
Phe Ser Gin Ser His Ala Gin Lys Pro Ala Gin Ala Glu Ser Phe Thr
420 425 430
ttg gcc agc cca gtc tcc gga caa tta atg aac ctg gac atg gtt gac 1465
Leu Ala Ser Pro Val Ser Gly Gin Leu Met Asn Leu Asp Met Val Asp
435 440 445
gac ccg gtc ttt gcc gac aaa aag tta ggc gac ggc ttt gcc ctg gtg 1513
Asp Pro Val Phe Ala Asp Lys Lys Leu Gly Asp Gly Phe Ala Leu Val
450 455 460
cca gca gac ggt aag gtc tac gcg cca ttt gcc ggt act gtc cgc cag 1561
Pro Ala Asp Gly Lys Val Tyr Ala Pro Phe Ala cly Thr Val Arg Gin
465 470 475 480
ctg gcc aag acc cgg cac tcg atc gtc ctg gaa aat gaa cat ggg gtc 1609
Leu Ala Lys Thr Arg His Ser lle Val Leu Glu Asn Glu His Gly Val
485 490 495
ttg gtc ttg att cac ctt ggc ctg ggc acg gtc aaa tta aac ggg act 1657
Leu Val Leu lle His Leu Gly Leu Gly Thr Val Lys Leu Asn Gly Thr
500 505 510
ggc ttt gtc agc tat gtt gaa gag ggc agc cag gta gaa gcc ggc cag 1705
Gly Phe Val Ser Tyr Val Glu Glu Gly Ser Gin Val Glu Ala Gly Gin
515 520 525
cag atc ctg gaa ttc tgg gac ccg gcg atc aag cag gcc aag ctg gac 1753
Gin lle Leu Glu Phe Trp Asp Pro Ala lle Lys Gin Ala Lys Leu Asp
530 535 540
gac acg gta atc gtg acc gtc atc aac agc gaa act ttc gca aat agc 1801
Asp Thr Val lle Val Thr Val lle Asn Ser Glu Thr Phe Ala Asn Ser
545 550 555 560
cag atg ctc ttg ccg atc ggc cac agc gtc caa gcc ctg gat gat gta 1849
Gin Met Leu Leu Pro Lle Gly His Ser Val Gin Ala Leu Asp Asp Val
565 570 575
ttc aag tta gaa ggg aag aat tag aaa atg agc aat aag tta gta aaa 1897
Phe Lys Leu Glu Gly Lys Asn Met Ser Asn Lys Leu Val Lys
580 585 590
gaa aaa aga gtt gac cag gca gac ttg gcc tgg ctg act gac ccg gaa 1945
Glu Lys Arg Val Asp Gin Ala Asp Leu Ala Trp Leu Thr Asp Pro Glu
595 600 605
gtt tac gaa gtc aat aca att ccc ccg cac tcc gac cat gag tcc ttc 1993
Val Tyr Glu Val Asn Thr lle Pro Pro His Ser Asp His Glu Ser Phe
610 615 620
caa agc cag gaa gaa ctg gag gag ggc aag tcc agt tta gtg cag tcc 2041
Gin Ser Gin Glu Glu Leu Glu Glu Gly Lys Ser Ser Leu Val Gin Ser
625 630 635
ctg gac ggg gac tgg ctg att gac tac gct gaa aac ggc cag gga cca 2089
Leu Asp Gly Asp Trp Leu lle Asp Tyr Ala Glu Asn Gly Gin Gly Pro
640 645 650 655
gtc aac ttc tat gca gaa gac ttt gac gat agc aat ttt aag tca gtc 2137
Val Asn Phe Tyr Ala Glu Asp Phe Asp Asp Ser Asn Phe Lys Ser Val
660 665 670
aaa gta ccc ggc aac ctg gaa ctg caa ggc ttt ggc cag ccc cag tat 2185
Lys Val Pro Gly Asn Leu Glu Leu Gin Gly Phe Gly Gin Pro Gin Tyr
« · · · · ·
675 680 685
gtc aac gtc caa tat cca tgg gac ggc agt gag gag att ttc ccg ccc 2233
Val Asn Val Gin Tyr Pro Trp Asp Gly Ser Glu Glu lle Phe Pro Pro
690 695 700
caa att cca age aaa aat ccg ctc get tet tat gtc aga tac ttt gac 2281
Gin lle Pro Ser Lys Asn Pro Leu Ala Ser Tyr Val Arg Tyr Phe Asp
705 710 715
ctg gat gaa get ttc tgg gac aag gaa gtc age ttg aag ttt gac ggg 2329
Leu Asp Glu Ala Phe Trp Asp Lys Glu Val Ser Leu Lys Phe Asp Gly
720 725 730 735
gcg gca aca gcc atc tat gtc tgg ctg aac ggc cac ttc gtc ggc tac 2377
Ala Ala Thr Ala lle Tyr Val Trp Leu Asn Gly His Phe Val Gly Tyr
740 745 750
ggg gaa gac tec ttt acc cca age gag ttt atg gtt acc aag ttc ctc 2425
Gly Glu Asp Ser Phe Thr Pro Ser Glu Phe Met Val Thr Lys Phe Leu
755 760 765
aag aaa gaa aat aac cgc ctg gca gtg get ctc tac aag tat tet tcc 2473
Lys Lys Glu Asn Asn Arg Leu Ala Val Ala Leu Tyr Lys Tyr Ser Ser
770 775 780
gcc tec tgg ctg gaa gac cag gac ttc tgg cgc atg tet ggt ttg ttc 2521
Ala Ser Trp Leu Glu Asp Gin Asp Phe Trp Arg Met Ser Gly Leu Phe'
785 790 795
aga tea gtg act ctt cag gcc aag ccg cgt ctg cac ttg gag gac ctt 2569
Arg Ser Val Thr Leu Gin Ala Lys Pro Arg Leu His Leu Glu Asp Leu
800 805 810 815
aag ctt acg gcc age ttg acc gat aac tac caa aaa gga aag ctg gaa 2617
Lys Leu Thr Ala Ser Leu Thr Asp Asn Tyr Gin Lys Gly Lys Leu Glu
820 825 830
gtc gaa gcc aat att gcc tac cgc ttg cca aat gcc age ttt aag ctg 2665
Val Glu Ala Asn lle Ala Tyr Arg Leu Pro Asn Ala Ser Phe Lys Leu
835 840 845
gaa gtg cgg gat agt gaa ggt gac ttg gtt get gaa aag ctg ggc cca 2713
Glu Val Arg Asp Ser Glu Gly Asp Leu Val Ala Glu Lys Leu Gly Pro
850 855 860
atc aga age gag cag ctg gaa ttc act ctg get gat ttg cca gta get 2761
lle Arg Ser Glu Gin Leu Glu Phe Thr Leu Ala Asp Leu Pro Val Ala
865 870 875
gcc tgg age gcg aaa aag cct aac ctt tac cag gtc cgc ctg tat tta 2809
Ala Trp Ser Ala Glu Lys Pro Asn Leu Tyr Gin Val Arg Leu Tyr Leu
880 885 890 895
tac cag gca ggc age ctc tta gag gtt age cgg cag gaa gtg ggt ttc 2857
Tyr Gin Ala Gly Ser Leu Leu Glu Val Ser Arg Gin Glu Val Gly Phe
900 905 910
cgc aac ttt gaa cta aaa gac ggg att atg tac ctt aac ggc cag cgg 2905
Arg Asn Phe Glu Leu Lys Asp Gly lle Met Tyr Leu Asn Gly Gin Arg
915 920 925
atc gtc ttc aag ggg gcc aac cgg cac gaa ttt gac agt aag ttg ggc 2953
lle Val Phe Lys Gly Ala Asn Arg His Glu Phe Asp Ser Lys Leu Gly
930 935 940
cgg get atc aca gaa gag gat atg atc tgg gat atc aag acc atg aag 3001
Arg Ala lle Thr Glu Glu Asp Met lle Trp Asp Tle Lys Thr Met Lys
945 950 955
ega Arg 960 age Ser aac Asn atc Ile aat Asn get Ala 965 gtc Val ege Arg tgc Cys tet Ser cac tac ccg Pro aac Asn cag Gin tcc Ser 975 3049
His 970 Tyr
ctc ttt tac cgg ctc tgt gac aag tac ggc ctt tac gtc att gat gaa 3097
Leu Phe Tyr Arg Leu Cys Asp Lys Tyr Gly Leu Tyr Val Ile Asp Glu
980 985 990
get aac ctg gaa age cac ggc acc tgg gaa aaa gtg ggg ggg cac gaa 3145
Ala Asn Leu Glu Ser His Gly Thr Trp Glu Lys Val Gly Gly His Glu
995 1000 1005
gat cct age ttc aat gtt cca ggc gat gac cag cat tgg ctg gga gcc 3193
Asp Pro Ser Phe Asn Val Pro Gly Asp Asp Gin His Trp Leu Gly Ala
1010 1015 1020
age tta tcc cgg gtg aag aac atg atg get cgg gac aag aac cat get 3241
Ser Leu Ser Arg Val Lys Asn Met Met Ala Arg Asp Lys Asn His Ala
1025 1030 1035
tea atc ctg atc tgg tet tta ggc aat gag tet tac gcc ggc act gtc 3289
Ser Ile Leu Ile Trp Ser Leu Gly Asn Glu Ser Tyr Ala Gly Thr Val
1040 1045 1050 1055
ttt gcc caa atg get gat tac gtc cgg aag get gat ccg acc cgg gtt 3337
Phe Ala Gin Met Ala Asp Tyr Val Arg Lys Ala Asp Pro Thr Arg Val
1060 1065 1070
cag cac tat gaa ggg gtg acc cac aac cgg aag ttt gac gac gcc acc 3385
Gin His Tyr Glu Gly Val Thr His Asn Arg Lys Phe Asp Asp Ala Thr
1075 1080 1085
cag att gaa age cgg atg tat get ccg gcc aag gta att gaa gaa tac 3433
Gin Ile Glu Ser Arg Met Tyr Ala Pro Ala Lys Val Ile Glu Glu Tyr
1090 1095 1100
ttg acc aat aaa cca gcc aag cca ttt atc tea gtt gaa tac get cac 3481
Leu Thr Asn Lys Pro Ala Lys Pro Phe Ile Ser Val Glu Tyr Ala His
1105 1110 1115
gcc atg ggc aac tcc gtc ggt gac ctg gcc gcc tac acg gcc ctg gaa 3529
Ala Met Gly Asn Ser Val Gly Asp Leu Ala Ala Tyr Thr Ala Leu Glu
1120 1125 1130 1135
aaa tac ccc cac tac cag ggc ggc ttc atc tgg gac tgg att gac caa 3577
Lys Tyr Pro His Tyr Gin Gly Gly Phe Ile Trp Asp Trp Ile Asp Gin
1140 1145 1150
gga ctg gaa aaa gac ggg cac ctg ctt tat ggg ggc gac ttc gat gac 3625
Gly Leu Glu Lys Asp Gly His Leu Leu Tyr Gly Gly Asp Phe Asp Asp
1155 1160 1165
cgg cca acc gac tat gaa ttc tgc ggg aac ggc ctg gtc ttt get gac 3673
Arg Pro Thr Asp Tyr Glu Phe Cys Gly Asn Gly Leu Val Phe Ala Asp
1170 1175 1180
cgg act gaa tcg ccg aaa ctg get aat gtc aag gcc ctt tac gcc aac 3721
Arg Thr Glu Ser Pro Lys Leu Ala Asn Val Lys Ala Leu Tyr Ala Asn
1185 1190 1195
ctt aag tta gaa gta aaa gat ggg cag ctc ttc ctc aaa aac gac aat 3769
Leu Lys Leu Glu Val Lys Asp Gly Gin Leu Phe Leu Lys Asn Asp Asn
1200 1205 1210 1215
tta ttt acc aac age tea tet tac tac ttc ttg act agt ctt ttg gtc 3817
Leu Phe Thr Asn Ser Ser Ser Tyr Tyr Phe Leu Thr Ser Leu Leu Val
1220 1225 1230
gat ggc aag ttg acc tac cag age cgg cct ctg acc ttt ggc ctg gag 3865
Asp Gly Lys Leu Thr Tyr Gin Ser Arg Pro Leu Thr Phe Gly Leu Glu
« ·
1235 1240 1245
cct ggc gaa tcc ggg acc ttt gcc ctg cct tgg ccg gaa gtc gct gat 3913
Pro Gly Glu Ser Gly Thr Phe Ala Leu Pro Trp Pro Glu Val Ala Asp
1250 1255 : 1260
gaa aaa gga gag gtc gtc tac cgg gta acg gcc cac tta aaa gaa gac 3961
Glu Lys Gly Glu Val Val Tyr Arg Val Thr Ala His Leu Lys Glu Asp
1265 1270 1275
ttg cct tgg gcg gat gag ggc ttc act gtg gct gaa gca gaa gaa gta 4009
Leu Pro Trp Ala Asp Glu Gly Phe Thr Val Ala Glu Ala Glu Glu Val
1280 1285 1290 1295
gct caa aag ctg ccg gaa ttt aag ccg gaa ggg cgg cca gat tta gtt 4057
Ala Gin Lys Leu Pro Glu Phe Lys Pro Glu Gly Arg Pro Asp Leu Val
1300 1305 1310
gat tcc gac tac aac cta ggc ctg aaa gga aat aac ttc caa att ctc 4105
Asp Ser Asp Tyr Asn Leu Gly Leu Lys Gly Asn Asn Phe Gin Ile Leu
1315 1320 1325
ttc tcc aag gtc aag ggc tgg ccg gtt tcc ctc aag tat gcc ggt agg 4153
Phe Ser Lys Val Lys Gly Trp Pro Val Ser Leu Lys Tyr Ala Gly Arg
1330 1335 1340
gaa tac ttg aag cgg ctg ccg gaa ttt acc ttc tgg cgg gcc ctg acg 4201
Glu Tyr Leu Lys Arg Leu Pro Glu Phe Thr Phe Trp Arg Ala Leu Thr
1345 1350 1355
gac aac gac cgg gga gct ggt tac ggc tat gat ctg gcc cgg tgg gaa 4249
Asp Asn Asp Arg Gly Ala Gly Tyr Gly Tyr Asp Leu Ala Arg Trp Glu
1360 1365 1370 1375
aat gcc ggc aag tat gcc cgc ttg aaa gac atc agc tgc gag gtc aag 4297
Asn Ala Gly Lys Tyr Ala Arg Leu Lys Asp Ile Ser Cys Glu Val Lys
1380 1385 1390
gaa gac tcc gtt ttg gtc aag act gcc ttt acg ttg cct gtc gcc tta 4345
Glu Asp Ser Val Leu Val Lys Thr Ala Phe Thr Leu Pro Val Ala Leu
1395 1400 1405
aag ggt gat tta act gtg acc tat gaa gtc gat gga cgg ggc aag att 4393
Lys Gly Asp Leu Thr Val Thr Tyr Glu Val Asp Gly Arg Gly Lys Ile
1410 1415 1420
gct gta aca gct gac ttc cca ggc gcg gaa gaa gcc ggt ctc ttg cca 4441
Ala Val Thr Ala Asp Phe Pro Gly Ala Glu Glu Ala Gly Leu Leu Pro
1425 1430 1435
gcc ttt ggc ttg aac ctg gcc ctg cca aaa gaa ctg acc gat tac cgc 4489
Ala Phe Gly Leu Asn Leu Ala Leu Pro Lys Glu Leu Thr Asp Tyr Arg
1440 1445 1450 1455
tac tat ggt ctg gga cct aat gag agc taa ccagaccgct tggaaggtaa 4539
Tyr Tyr Gly Leu Gly Pro Asn Glu Ser
1460 1465 ttacctgggc atctaccagg gagcggtaaa aaagaacttt agcccatacc tgcgtccgca 4599 ggaaacgggc aaccggagca aggttcgctg gtaccagctc tttgatgaaa agggcggctt 4659 ggaatttacg gccaatgggg cagacttgaa cttgtctgct ttgccatatt ctgccgccca 4719 aattgaagca gcggaccacg cttttgaact gactaacaat tacacttggg ttagagcctt 4779 aagcgcccag atgggggtcg gcggggatga ctcctggggg cagaaggtcc acccggaatt 4839 ctgcctggat gctcaaaaag cccgccagct ccgcctggtg attcagcccc ttttactaaa 4899 ♦ * * · • · ······· ·· ataaatgcta caattgactt aacaggatga aattttagta aaagcaaagc gagtgaggaa gatggcaacg atcagagaag tgccaaggca gccggcgtgt cgctagcgac ggtttcccgc gtcttgaact atgaccagac cctgtcagtc aatgaggcaa
4%’9
5019
5059 <210> 2 <211> 583 <212> PRT <213> Lactobacillus bulgaricus <400> 2
Met 1 Ile Phe Ile Ile 5 Thr Asn Leu Ile Thr 10 Ala Ile Arg Ile Gly 15 Glu
Val Leu Leu Asp Pro Leu Ile Gly Asn Ala Ile Asp Arg Thr Glu Ser
20 25 30
Arg Trp Gly Lys Phe Lys Pro Trp Val Val Gly Gly Gly Ile Ile Ser
35 40 45
Ser Leu Ala Leu Leu Ala Leu Phe Thr Asp Phe Gly Gly Ile Asn Gin
50 55 60
Ser Asn Pro Val Val' Tyr Leu Val Ile Phe Gly Ile Val Tyr Leu Ile
65 70 75 80
Met Asp Ile Phe Tyr Ser Phe Lys Asp Thr Gly Phe Trp Ala Met Ile
85 90 95
Pro Ala Leu Ser Leu Asp Ser Arg Glu Arg Glu Lys Thr Ser Thr Phe
100 105 110
Ala Arg Val Gly Ser Thr Ile Gly Ala Asn Leu Val Gly Val Val Ile
115 120 125
Thr Pro Ile Ile Leu Phe Phe Ser Ala Ser Lys Ala Asn Pro Asn Gly
130 135 140
Asp Lys Gin Gly Trp Phe Phe Phe Ala Leu Ile Val Ala Ile Val Gly
145 150 155 160
Ile Leu Thr Ser Ile Thr Val Gly Leu Gly Thr His Glu Val Lys Ser
165 170 175
Ala Leu Arg Glu Ser Asn Glu Lys Thr Thr Leu Lys Gin Val Phe Lys
180 185 190
Val Leu Gly Gin Asn Asp Gin Leu Leu Trp Leu Ala Phe Ala Tyr Trp
195 200 205
Phe Tyr Gly Leu Gly Ile Asn Thr Leu Asn Ala Leu Gin Leu Tyr Tyr
210 215 220
Phe Ser Tyr Ile Leu Gly Asp Ala Arg Gly Tyr Ser Leu Leu Tyr Thr
225 230 235 240
Ile Asn Thr Phe Val Gly Leu Ile Ser Ala Ser Phe Phe Pro Ser Leu
245 250 255
Ala Lys Lys Phe Asn Arg Asn Arg Leu Phe Tyr Ala Cys Ile Ala Val
260 265 270
Met Leu Leu Gly Ile Gly Val Phe Ser Val Ala Ser Gly Ser Leu Ala
275 280 285
Leu Ser Leu Val Gly Ala Glu Phe Phe Phe Ile Pro Gin Pro Leu Ala 290 295 300 ♦ « «·
Phe 305 Leu Val Val Leu Met 310 Ile Ile Ser Asp Ala 315 Val Glu Tyr Gly Gin 320
Leu Lys Thr Gly His Arg Asp Glu Ala Leu Thr Leu Ser Val Arg Pro
325 330 335
Leu Val Asp Lys Leu Gly Gly Ala Leu Ser Asn Trp Phe Val Ser Leu
340 345 350
Ile Ala Leu Thr Ala Gly Met Thr Thr Gly Ala Thr Ala Ser Thr Ile
355 360 365
Thr Ala His Gly Gin Met Val Phe Lys Leu Ala Met Phe Ala Leu Pro
370 375 380
Ala Val Met Leu Leu Ile Ala Val Ser Ile Phe Ala Lys Lys Val Phe
385 390 395 400
Leu Thr Glu Glu Lys His Ala Glu Ile Val Asp Gin Leu Glu Thr Gin
405 410 415
Phe Ser Gin Ser His Ala Gin Lys Pro Ala Gin Ala Glu Ser Phe Thr
420 425 430
Leu Ala Ser Pro Val Ser Gly Gin Leu Met Asn Leu Asp Met Val Asp
435 440 445
Asp Pro Val Phe Ala Asp Lys Lys Leu Gly Asp Gly Phe Ala Leu Val
450 455 460
Pro Ala Asp Gly Lys Val Tyr Ala Pro Phe Ala Gly Thr Val Arg Gin
465 470 475 480
Leu Ala Lys Thr Arg His Ser Ile Val Leu Glu Asn Glu His Gly Val
485 490 495
Leu Val Leu Ile His Leu Gly Leu Gly Thr Val Lys Leu Asn Gly Thr
500 505 510
Gly Phe Val Ser Tyr Val Glu Glu Gly Ser Gin Val Glu Ala Gly Gin
515 520 525
Gin Ile Leu Glu Phe Trp Asp Pro Ala Ile Lys Gin Ala Lys Leu Asp
530 535 540
Asp Thr Val Ile Val Thr Val Ile Asn Ser Glu Thr Phe Ala Asn Ser
545 550 555 560
Gin Met Leu Leu Pro Ile Gly His Ser Val Gin Ala Leu Asp Asp Val
565 570 575
Phe Lys Leu Glu Gly Lys Asn
580 <210 3 <211> 880 <212> PRT
<213> Lactobacillus bulgaricus
<400 3 Met Ser Asn Lys Leu Val Lys Glu Lys Arg Val Asp Gin Ala Asp Leu
1 5 10 15
Ala Trp Leu Thr Asp Pro Glu Val Tyr Glu Val Asn Thr Ile Pro Pro
25 30
His Ser Asp His Glu Ser Phe Gin Ser Gin Glu Glu Leu Glu Glu Gly 35 40 45 * · v · * • · ’ · · · · ··· ·« ♦«·· « · · a ·
Lys Ser 50 Ser Leu Val Gin Ser 55 Leu Asp Gly Asp Trp Leu Ile Asp 60 Tyr
Ala Glu Asn Gly Gin Gly Pro Val Asn Phe Tyr Ala Glu Asp Phe Asp
65 70 75 80
Asp Ser Asn Phe Lvs Ser Val Lys Val Pro Gly Asn Leu Glu Leu Gin
85 90 95
Gly Phe Gly Gin Pro Gin Tyr Val Asn Val Gin Tyr Pro Trp Asp Gly
100 105 110
Ser Glu Glu Ile Phe Pro Pro Gin Ile Pro Ser Lys Asn Pro Leu Ala
115 120 125
Ser Tyr Val Arg Tyr Phe Asp Leu Asp Glu Ala Phe Trp Asp Lys Glu
130 135 140
Val Ser Leu Lys Phe Asp Gly Ala Ala Thr Ala Ile Tyr Val Trp Leu
145 150 155 160
Asn Gly His Phe Val Gly Tyr Gly Glu Asp Ser Phe Thr Pro Ser Glu
165 170 175
Phe Met Val Thr Lys Phe Leu Lys Lys Glu Asn Asn Arg Leu Ala Val
180 185 190
Ala Leu Tyr Lys Tyr Ser Ser Ala Ser Trp Leu Glu Asp Gin Asp Phe
195 200 205
Trp Arg Met Ser Gly Leu Phe Arg Ser Val Thr Leu Gin Ala Lys Pro
210 215 220
Arg Leu His Leu Glu Asp Leu Lys Leu Thr Ala Ser Leu Thr Asp Asn
225 230 235 240
Tyr Gin Lys Gly Lys Leu Glu Val Glu Ala Asn Ile Ala Tyr Arg Leu
245 250 255
Pro Asn Ala Ser Phe Lys Leu Glu Val Arg Asp Ser Glu Gly Asp Leu
260 265 270
Val Ala Glu Lys Leu Gly Pro Ile Arg Ser Glu Gin Leu Glu Phe Thr
275 280 285
Leu Ala Asp Leu Pro Val Ala Ala Trp Ser Ala Glu Lys Pro Asn Leu
290 295 300
Tyr Gin Val Arg Leu Tyr Leu Tyr Gin Ala Gly Ser Leu Leu Glu Val
305 310 315 320
Ser Arg Gin Glu Val Gly Phe Arg Asn Phe Glu Leu Lys Asp Gly Ile
325 330 335
Met Tyr Leu Asn Gly Gin Arg Ile Val Phe Lys Gly Ala Asn Arg His
340 345 350
Glu Phe Asp Ser Lys Leu Gly Arg Ala Ile Thr Glu Glu Asp Met Ile
355 360 365
Trp Asp Ile Lys Thr Met Lys Arg Ser Asn Ile Asn Ala Val Arg Cys
370 375 380
Ser His Tyr Pro Asn Gin Ser Leu Phe Tyr Arg Leu Cys Asp Lys Tyr
385 390 395 400
Gly Leu Tyr Val Ile Asp Glu Ala Asn Leu Glu Ser His Gly Thr Trp
405 410 415
Glu Lys Val Gly Gly His Glu Asp Pro Ser Phe Asn Val Pro Gly Asp
420 425 • 430 • « • » · P · 4 1 » · ·
Asp Gin His 435 Trp Leu Gly Ala Ser 440 Leu Ser Arg Val Lys 445 Asn Met Met
Ala Arg 450 Asp Lys Asn His Ala Ser 455 Ile Leu Ile Trp 460 Ser Leu Gly Asn
Glu Ser 465 Tyr Ala Gly Thr 470 Val Phe Ala Gin Met 475 Ala Asp Tyr Val Arg 480
Lys Ala Asp Pro Thr 485 Arg Val Gin His Tyr 490 Glu Gly Val Thr His Asn 495
Arg Lys Phe Asp 500 Asp Ala Thr Gin Ile 505 Glu Ser Arg Met Tyr 510 Ala Pro
Ala Lys Val 515 Ile Glu Glu Tyr Leu 520 Thr Asn Lys Pro Ala 525 Lys Pro Phe
Ile Ser 530 Val Glu Tyr Ala His Ala 535 Met Gly Asn Ser 540 Val Gly Asp Leu
Ala Ala 545 Tyr Thr Ala Leu 550 Glu Lys Tyr Pro His 555 Tyr Gin Gly Gly Phe 560
Ile Trp Asp Trp Ile 565 Asp Gin Gly Leu Glu 570 Lys Asp Gly His Leu Leu 575
Tyr Gly Gly Asp 580 Phe Asp Asp Arg Pro 585 Thr Asp Tyr Glu Phe 590 Cys Gly
Asn Gly Leu 595 Val Phe Ala Asp Arg 600 Thr Glu Ser Pro Lys 605 Leu Ala Asn
Val Lys 610 Ala Leu Tyr Ala Asn Leu 615 Lys Leu Glu Val 620 Lys Asp Gly Gin
Leu Phe 625 Leu Lys Asn Asp 630 Asn Leu Phe Thr Asn 635 Ser Ser Ser Tyr Tyr 640
Phe Leu Thr Ser Leu 645 Leu Val Asp Gly Lys 650 Leu Thr Tyr Gin Ser Arg 655
Pro Leu Thr Phe 660 Gly Leu Glu Pro Gly 665 Glu Ser Gly Thr Phe' 670 Ala Leu
Pro Trp Pro 67 5 Glu Val Ala Asp Glu 680 Lys Gly Glu Val Val 685 Tyr Arg Val
Thr Ala 690 His Leu Lys Glu Asp Leu 695 Pro Trp Ala Asp 700 Glu Gly Phe Thr
Val Ala 705 Glu Ala Glu Glu 710 Val Ala Gin Lys Leu 715 Pro Glu Phe Lys Pro 720
Glu Gly Arg Pro Asp 725 Leu Val Asp Ser Asp 730 Tyr Asn Leu Gly Leu Lys 735
Gly Asn Asn Phe 740 Gin Ile Leu Phe Ser 745 Lys Val Lys Gly Trp 750 Pro Val
Ser Leu Lys 755 Tyr Ala Gly Arg Glu 760 Tyr Leu Lys Arg Leu 765 Pro Glu Phe
Thr Phe 770 Trp Arg Ala Leu Thr Asp 775 Asn Asp Arg Gly 780 Ala Gly Tyr Gly
Tyr Asp 785 Leu Ala Arg Trp 790 Glu Asn Ala Gly Lys 795 Tyr Ala Arg Leu Lys 800
• ·» • « a * • · · • » » · * · ·
Asp Ile Ser Cys Glu 805 Val Lys Glu Asp Ser 810 Val Leu Val Lys Thr Ala 815
Phe Thr Leu Pro 820 Val Ala Leu Lys Gly 825 Asp Leu Thr Val Thr 830 Tyr Glu
Val Asp Gly 835 Arg Gly Lys Ile Ala 840 Val Thr Ala Asp Phe 845 Pro Gly Ala
Glu Glu 850 Ala Gly Leu Leu Pro 855 Ala Phe Gly Leu Asn 860 Leu Ala Leu Pro
Lys 865 Glu Leu Thr Asp Tyr 870 Arg Tyr Tyr Gly Leu 875 Gly Pro Asn Glu Ser 880
a·

Claims (10)

1. Mutantní kmen Lactobacillus bulgaricus postrádající β-galaktosidázovou aktivitu, vyznačující se tím, že nese nonsensní mutaci na alespoň jedné z kódujících sekvencí laktózového operonu.
2. Mutantní kmen Lactobacillus bulgaricus podle nároku 1, vyznačující se tím, že uvedenou kódující sekvencí je sekvence, kódující β-galaktosidázu.
3. Mutantní kmen Lactobacillus bulgaricus podle nároku 1 nebo 2, vyznačující se tím, že byl uložen 14. ledna 1998 v CNCM, Collection Nationale de Cultures de Mikroorganismes, pod číslem 1-1968.
4. Mléčný zákvas, vyznačující se tím, že zahrnuje alespoň jeden kmen L. bulgaricus podle kteréhokoli z nároků 1 až 3.
5. Mléčný zákvas podle nároku 4, vyznačující se tím, že uvedený kmen L. bulgaricus je spojen s alespoň jedním kmenem S. thermophilus.
6. Způsob výroby zakvašeného mléčného výrobku, vyznačující se t í m , že zahrnuje krok, během něhož se mléko kvasí za použití mléčného zákvasu, zahrnujícího alespoň jeden kmen L. bulgaricus podle kteréhokoli z nároků 1 až 3, v přítomnosti alespoň jednoho cukru, který může být asimilován uvedeným kmenem.
7. Způsob výroby podle nároku 6, vyznačující se tím, že uvedeným cukrem, který může být asimilován, je glukóza.
17
8. Způsob výroby podle kteréhokoli z nároků 6a 7, vyznačující se t i m , že zastavení kvašení se provádí bez ochlazení uvedeného mléčného výrobku.
9. Zakvašený mléčný výrobek, vyznačující se tím, že může být získán za použití způsobu podle kteréhokoli z nároků 6 až 8.
10. Zakvašený mléčný výrobek podle nároku 9, vyznačující se tím, že uvedeným výrobkem je jogurt.
CZ20004359A 1998-05-22 1999-05-17 Mutantní kmen Lactobacillus bulgaricus CZ302175B6 (cs)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR9806456A FR2778921B1 (fr) 1998-05-22 1998-05-22 Souches mutantes de lactobacillus bulgaricus depourvues d'activite beta-galactosidase

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ20004359A3 true CZ20004359A3 (en) 2001-05-16
CZ302175B6 CZ302175B6 (cs) 2010-12-01

Family

ID=9526604

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ20004359A CZ302175B6 (cs) 1998-05-22 1999-05-17 Mutantní kmen Lactobacillus bulgaricus

Country Status (18)

Country Link
US (2) US6875601B1 (cs)
EP (1) EP1078074B2 (cs)
JP (2) JP4576047B2 (cs)
AR (1) AR016496A1 (cs)
AT (1) ATE288492T1 (cs)
AU (1) AU772004B2 (cs)
CA (1) CA2329494C (cs)
CZ (1) CZ302175B6 (cs)
DE (1) DE69923554T3 (cs)
DK (1) DK1078074T3 (cs)
ES (1) ES2237099T5 (cs)
FR (1) FR2778921B1 (cs)
HU (1) HUP0102019A3 (cs)
IL (3) IL139812A0 (cs)
PL (1) PL202208B1 (cs)
PT (1) PT1078074E (cs)
RU (1) RU2232816C2 (cs)
WO (1) WO1999061627A2 (cs)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2778921B1 (fr) * 1998-05-22 2001-05-11 Gervais Danone Sa Souches mutantes de lactobacillus bulgaricus depourvues d'activite beta-galactosidase
MY143693A (en) 2004-03-24 2011-06-30 Nestec Sa Shelf stable product wih living micro-organisms
FR2877012B1 (fr) * 2004-10-22 2010-09-10 Gervais Danone Sa Souches de streptococcus thermophilus ami deficientes a post-acidification reduite
FR2876874B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation d'ingredients leurres
FR2876876B1 (fr) * 2004-10-22 2007-02-16 Gervais Danone Sa Protection d'ingredients alimentaires bioactifs par l'utilisation de microorganismes presentant une capacite de metabolisation reduite
FR2886313B1 (fr) * 2005-05-31 2007-08-17 Gervais Danone Sa Souches mutantes de bacteries lactiques possedant une lactose permease non phosphorylable.
FR2895877B1 (fr) * 2006-01-06 2012-06-22 Gervais Danone Sa Poudre de lait fermente ou yaourt a haute densite en ferments lactiques
EP1820851B9 (fr) * 2006-02-20 2012-06-27 Compagnie Gervais Danone Souches de Lactobacillus helveticus ne fermentant pas le lactose
EP2258205A1 (en) * 2009-06-03 2010-12-08 Yoplait France Process for manufacturing of a fermented dairy product
US8555933B2 (en) * 2009-07-24 2013-10-15 Tyco Electronics Corporation Wire untwisting tool
US20140220177A1 (en) 2011-04-29 2014-08-07 Compagnie Gervais Danone Use of Nisin Resistant Mutant Strains of Lactobacilli for Reducing the Post Acidification in Food Products
EP3006555A4 (en) * 2013-05-31 2017-01-11 Meiji Co., Ltd. Fermented milk that does not undergo increase in acid level, and method for producing same
CN103275953B (zh) * 2013-06-25 2014-06-18 山东大学 一种转苷底物特异性拓宽的β-半乳糖苷酶
PL2957180T3 (pl) * 2014-06-19 2018-08-31 Chr. Hansen A/S Sposób wytwarzania fermentowanego produktu mlecznego z ulepszoną kontrolą zakwaszenia po fermentacji
BR112016029357B1 (pt) * 2014-06-19 2022-02-08 Chr. Hansen A/S Produto de alimento fermentado e seu método de produção e cepa de lab isolada
EP3405040B1 (en) * 2016-01-21 2021-08-04 Chr. Hansen A/S Method of producing a fermented milk product using lactobacillus casei
EP3568024B1 (en) 2017-01-13 2020-11-25 Chr. Hansen A/S Process for producing a fermented milk product
EA201991967A1 (ru) * 2017-03-28 2020-03-02 Кхр. Хансен А/С Композиция молочнокислых бактерий для получения ферментированных пищевых продуктов с улучшенной природной сладостью и вкусом
US11479763B2 (en) * 2017-04-07 2022-10-25 Dupont Nutrition Biosciences Aps Bacillus host cells producing β-galactosidases and lactases in the absence of p-nitrobenzylesterase side activity
AU2020236909A1 (en) * 2019-03-14 2021-09-16 International N&H Denmark Aps New lactic acid bacteria
EP3938546A1 (en) 2019-03-14 2022-01-19 DuPont Nutrition Biosciences ApS New lactic acid bacteria
BR112022024304A2 (pt) * 2020-05-29 2023-01-24 Chr Hansen As Composição de bactérias ácido-láticas para preparar produtos alimentícios fermentados.
WO2023275582A1 (en) * 2021-07-01 2023-01-05 Compagnie Gervais Danone Lactobacillus bulgaricus for use in preparation of fermented products
CN115960757B (zh) * 2022-10-11 2024-04-09 南京工业大学 一株可以耐受低pH生产L-乳酸的乳酸菌及其应用

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL8801529A (nl) 1988-06-15 1990-01-02 Nl Zuivelonderzoek Inst Werkwijze voor het selecteren en stabiel handhaven van recombinant dna in melkzuurbacterien.
JP2589553B2 (ja) * 1988-08-18 1997-03-12 雪印乳業株式会社 発酵乳の製造方法
US5639648A (en) * 1988-11-21 1997-06-17 Genencor International, Inc. Production of fermented food
CA2002796C (en) * 1988-11-21 1999-02-16 Stanley E. Mainzer Production of fermented food products
EP0382332A3 (en) * 1989-01-06 1990-11-14 Collaborative Research Inc. Improved supersecreting mutants of saccharomyces cerevisiae
EP0518096B1 (fr) * 1991-06-14 1995-09-27 Societe Des Produits Nestle S.A. Yogourt contenant des microorganismes vivants
US5691185A (en) * 1993-10-08 1997-11-25 Chr. Hansen A/S Lactic acid bacterial suppressor mutants and their use as selective markers and as means of containment in lactic acid bacteria
AU732858B2 (en) * 1996-03-27 2001-05-03 Johns Hopkins University, The Stationary phase, stress response sigma factor from mycobacterium tuberculosis, and regulation thereof
US5840556A (en) * 1996-05-08 1998-11-24 The United States Of America As Represented By The Department Of Agriculture Molecular genetic construction of vaccine strains of pasteurellaceae
FR2778921B1 (fr) * 1998-05-22 2001-05-11 Gervais Danone Sa Souches mutantes de lactobacillus bulgaricus depourvues d'activite beta-galactosidase

Also Published As

Publication number Publication date
DK1078074T3 (da) 2005-06-06
IL200443A0 (en) 2011-07-31
AU772004B2 (en) 2004-04-08
JP4576047B2 (ja) 2010-11-04
IL139812A0 (en) 2002-02-10
WO1999061627A2 (fr) 1999-12-02
ES2237099T3 (es) 2005-07-16
US7563436B2 (en) 2009-07-21
CA2329494A1 (fr) 1999-12-02
AR016496A1 (es) 2001-07-04
IL200443A (en) 2016-08-31
CZ302175B6 (cs) 2010-12-01
DE69923554T2 (de) 2006-02-16
FR2778921A1 (fr) 1999-11-26
ATE288492T1 (de) 2005-02-15
WO1999061627A3 (fr) 2000-02-03
ES2237099T5 (es) 2014-02-05
CA2329494C (fr) 2011-08-23
RU2232816C2 (ru) 2004-07-20
PL202208B1 (pl) 2009-06-30
US20050196388A1 (en) 2005-09-08
EP1078074B1 (fr) 2005-02-02
PT1078074E (pt) 2005-05-31
JP2010166932A (ja) 2010-08-05
DE69923554T3 (de) 2014-03-20
AU3714799A (en) 1999-12-13
EP1078074B2 (fr) 2013-10-09
US6875601B1 (en) 2005-04-05
JP2002516110A (ja) 2002-06-04
IL139812A (en) 2010-11-30
FR2778921B1 (fr) 2001-05-11
DE69923554D1 (de) 2005-03-10
HUP0102019A2 (hu) 2001-09-28
EP1078074A2 (fr) 2001-02-28
PL345223A1 (en) 2001-12-03
HUP0102019A3 (en) 2006-03-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CZ20004359A3 (en) Mutant strain Lactobacillus bulgaricus
KR101695908B1 (ko) 파지 내성에 기초하여 선별된 식품의 텍스처 조절용 유산균
EP2473058B2 (en) Lactic bacterium with modified galactokinase expression for texturizing food products by overexpression of exopolysaccharide
CA2070591C (en) Yogourt
EP3599877B1 (en) Lactic acid bacteria composition for preparing fermented food products with increased natural sweetness and flavor
MX2008015834A (es) Bacterias acidolacticas de postacidificion baja.
KR20110069796A (ko) 발효유 제품 중의 비피도박테리아의 생장을 증진시키는 방법
EP3675642B1 (en) Process for producing a mesophilic fermented milk product
US6056979A (en) Streptococcus Thermophilus strain, fermentation process using such strain and product obtained
CA2291878C (en) Lactic acid bacterial starter cultures and compositions thereof
AU753558B2 (en) Production of L(+)-Lactate
US20190320673A1 (en) New bacteria
US11910803B2 (en) Lactobacillus plantarum strain imparting high thickness and/or high ropiness and/or high mouth thickness to a dairy product produced therewith and uses thereof
KR20230148251A (ko) 발효제품 제조용 유산균 조성물
MXPA00011491A (en) Mutant lactobacillus bulgaricus
WO2023082047A1 (en) Compositions and methods for producing fermented dairy prod-ucts for storage at ambient temperature
HK1130631B (en) Low post-acidifying lactic acid bacteria
HK1130631A (en) Low post-acidifying lactic acid bacteria

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20190517