CZ20002681A3 - Cyklické tyrosinové dipeptidy - Google Patents

Abstract

Cyklické tyrosinové dipeptidy obecného vzorce I představují sloučeniny, kde fenolická skupina tyrosinuje esterifikována kyselinou máselnou. Jde tedy o protrahovaný typ léčiva, ve kterém se terapeuticky uplatňuje jak nosič 2,5- dioxopiperazinový derivát, tak i esterově fenolicky vázáná mastná kyselina, např. kyselina máselná. Uváděné sloučeniny lze použít k výrobě farmaceutických přípravků v pevných nebo tekutých dávkovačích formách, určených k inhibici a/nebo léčení maligní proliferace buněk a/nebo stimulaci specifické proteosyntézy a diferenciaci buněk.

Description

Oblast techniky

Vynález se týká cyklických tyrosinových dipeptidů obec-

spojené chemickou vazbou, přičemž jeden z těchto substituentů, popř. oba mohou značit atom vodíku, R₂ značí fenylmetyl, 4-hydroxyfenylmetyl, fenyl, 4-hydroxyfenyl, karboxymetyl, 2-karboxyetyl, é>-aminobutyl anebo metylthioetylen, je-li R₂ atom vodíku, může R^ tvořit trimetylenový, popř. metylenthiometylenový řetězec s atomem dusíku v poloze 1, A značí zbytek alkankarboxylové kyseliny C₂ až Ογ.

Tyto nové sloučeniny jsou vhodné k inhibici buněčné proliferace a/nebo ke stimulaci specifické proteosyntézy.

Dosavadní stav techniky

Kyselina máselná anebo její sole mají zajímavé biologické vlstnosti: ovlivňují morfologii, rychlost růstu a genovou expresi u ssavčích buněk (Life Sci. 27, 1351-1358 /1980/). Pozitivní vliv byl prokázán i u imunitního systému, ale byl i zjištěn také protivirový účinek a inhibice bakteriálního růstu u

různých kmenů (Life Sci. 63, 1739-1760 /1980/).

Použití samotné kyseliny máselné anebo jejích solí má velké omezení pro její nepříjemný zápach a vysoký clearens.

Proto jistým pokrokem byly sloučeniny s kyselinou máselnou kovalentně vázanou (esterovou vazbou) na různé cukry (manosa, glukosa) (Eur. J. Med. Chem. 24, 471-474 /1989/ anebo jen na samotný o-niti’obenzylalkohol (Int. J. Cancer 45, 744-751 /1990/). Nejúspěšnějším derivátem z této skupiny je pivaloyloxymetyl butyrát (Pivanex ). Zcela nesporným pokrokem jsou deriváty tyrosinu, jehož fenolická skupina je esterifikována kyselinou máselnou (PV-2000 - 1654; 05.05*2000); esterolyzou (ubikvitní esterázou) je in šitu uvolněna kyselina máselná. Toto překvapivé zjištění bylo prokázáno u sloučenin typu N-acyl-O-butyryltyrosin etylesterů, původně připravených jako enzymatické substráty. Chymotrypsin tento typ sloučenin neštěpil; po inkubaci s homogenáty pankreatu anebo homogenátem tenkého střeva, došlo k pronikavému štěpení etylesterové vazby v důsledku esterolýzy butyrátu (Acta Universitatis Carolinea - Enzymology and its clinical use - Part III, 139-143 /1975/), obdobně se choval derivát N-acetyl-O-butyryl-3-nitrotyrosin-etylester; chymotrypsin štěpí C-tyrosinou vazbu (esterovou anebo amidovou) pouze tehdy, je-li fenolická skupina tyrosinu volná, tj. nesubstituovanná.

Podstata vynálezu

Další pokrok ve zmíněné oblasti představují cyklické tyrosinové dipeptidy uvedeného obecného vzorce, v němž obecné substituenty mají stejný význam jako výše.

Jsou to sloučeniny, kde fenolická skupina tyrosinu je esterifikována kyselinou máselnou. Kombinací 2,5-ůioxopiperazinové struktury se zbytkem tyrosinu, který slouží jako nosič esterově vázané kyseliny máselné se získají sloučeniny, ve kterých se biologicky, kromě samotné kyseliny máselné uplatní i tzv. nosič, tj. 2,5-dioxopiperazinový skelet. Nebot jak bylo zjištěno, soubor cyklických dipeptidů, tj. derivátů 2,5-dioxopiperazinu s aromatickými aminokyselinami (ale i prolinem), má podobné biologické účinky jako samotná kyselina máselná, tj. indukci diferenciace neoplastických buněk a stimulaci jejich regenerace (J. Pharm. Pharmacol. 52, 75-82 /2000/).

-3Protože tento synergismus obou komponent v léčivu je ojedinělý, tj. kombinace účinného farmaka, ale i tzv. nosiče, před stavují tyto sloučeniny obecného vzorce podle vynálezu možnost

Širokého uplatnění v terapii maligního bujení.

Všechny meziprodukty a konečné látky byly připraveny syntézou v roztoku obvyklými metodami užívaných v chemii peptidů. Tyto sloučeniny je možné také připravovat syntézou v pevné fázi, popř. syntézou pomocí enzymů.

Vynález cyklických tyrosinových dipeptidů je blíže ilustrován, ale nijak omezen, v následujících příkladech provedení.

Použité zkratky a symboly mají následující význam:

Boc = tert.butyloxykarbonyl

Z = benzyloxykarbonyl

Btr = butyryl

Bzl = benzyl

DídFA = dimetylformamid

Glu = kyselina glutámová

Lys = lysin

Pro = prolin

Val = valin

Tyr = tyrosin

-4• · ··· ···· ···· ··· ·· · ·· ··

Příklady provedení

Příklad 1

Cyklo(Valyl-O-butyryltyrosyl)

K roztoku 265 mg cyklo(Val-Tyr) (1 mmol) v 5 ml pyridinu b$l prí teplotě místnosti 0,2 ml anhydridu kyseliny máselné.

Po 1 h míchání při teplotě místnosti byl roztok odpařen a nekrystalický odparek byl rozpuštěn v octanu etylnatém a postupně vytřepán vodou, 5^,% hydrogenuhličitanem sodným, vodou a odpa řen. Krystalizaci z 2-propanolu a vody bylo získáno 170 mg (42 % hmot.) produktu o t.t. 166-169 °G.

Příklad 2

Cyklo(Prolyl-O-butyryltyrosyl)

Byl připraven obdobným způsobem jako valinový derivát uvedený v příkladě 1. ve výtěžku 51 % hmot. a t.t. 155-156 °C.

Příklad 3

Cyklo((d -Glutamyl-O-butyryltyrosyl)

Boc-Glu(0Bzl-Tyr-0Me

K roztoku 17 g Boc-Glu(OBzl) (50 mmolů) v 50 ml LMPA bylo přidáno 7 ml W-etylpiperidinu, reakční roztok byl ochlazen na

-5 °C a za míchání bylo přidáno 5 ml chlormravenčanu etylnatého; po 8 min míchání (-5 °C) byl přidán Tyr-OMe v 30 ml DMPA uvolněný z 11,6 g (50 mmol) odpovídajícího hydrochloridu. Po 2 h míchání za teploty místnosti byl reakční roztok odpařen, odparek byl rozpuštěn v octanu etylnatém a postupně byl vytřepán 1% kyselinou citrónovou, vodou, 5% hydrogenuhličitanem sodným, vodou a organická fáze byla odpařena a azeotropicky vysušena toluenem. Bylo získáno 17,5 g (68 % hmot.) nekrystalické látky.

Cyklo(Glu(OBzl)-Tyr)

K roztoku 5,2 g Boc-Glu(OBzl)-Tyr-OMe (10 mmolů) ve 20 ml ledové kyseliny octové bylo za teploty místnosti přidáno 33 ml

0,9M HCl v kyselině octové. Po 2 h míchání za teploty místnosti byl reakční roztok odpařen, odparek byl rozpuštěn v metanolu a deionizován na slabě bazickém anexu (L 150). Spojené metanolické eluáty byly odpařeny a azeotropicky vysušeny toluenem. Nekrystalický odparek byl rozpuštěn ve 20 ml octanu etylnatém a po přídavku 0,2 ml kyseliny octové byl roztok zahříván 30 min pod zpětným chladičem. Po 3 h (3 °C) byla krystalická látka odfiltrována a krystalizací z kyseliny octové a octanu etylnatého bylo získáno 2,1 g (55 % hmot.) látky o t.t. 190 -193 °C.

Cyklo(<-Glu/0Bzl/-Tyr/Btr/)

K roztoku 1,95 g cyklo('V-Glu/0Bzl/-Tyr) v 10 ml pyridinu by]o za teploty místnosti přidáno 1 ml anhydridu kyseliny máselné. Po 1 h míchání za teploty místnosti byl roztok odpařen a krystalizací z 2-propanolu a petroleteru bylo získáno 1,8 g látky (80 % hmot.) a t.t. 187-188 °C.

Cyklo(c\-Glu-Tyr/Btr/)

1,8 g cyklo(-Glu/OBzl/-Tyr/Btr/) (4 mmoly) ve 100 ml DKFA byl v přítomnosti 5% Pd/C (0,2 g) hydrogeno ván za tlaku 2 MPa po dobu 1 h. Potom byla reakční směs za horka zfiltrována a roztok odpařen. Bylo získáno 1,1 g (30 % hmot.) konečného produktu o t.t. 226-230 °C.

Příklad 4

Cyklo (</-lysyl-0-butyryltyrosyl)

Bo c-Ly s(Z)-Tyr-OMe

Byl připraven anhydridovou metodou z Boc-Lys(Z) obdobným způsobem jako glutamylový dipeptid uvedený v příkladě 3· ve výtěžku 63 % hnft. jako nekrystalická látka.

Cyklo(/-Lys/Z/-Tyr/)

Byl připraven acidolyzou a následnou cyklizaci z Boc-lys(Z)Tyr-OMe jako glutamylový dipeptid uvedený v příkladě 3 ve výtěžku 63 % hmot. a t.t. 238-239 °C.

Cyklo( ?(-lys/Z/-Tyr/Btr/)

Byl připraven obdobným způsobem z cyklo(^-Lyg/Z/-Tyr) jako glutamylový dipeptid ve výtěžku 72 % hmot. a t.t. 232-230°C jak je uvedeno v příkladě 3.

Cyklo (í\-Iiys-Tyr/Bt r/)

Byl přípraven tlakovou hydrogenolyzou z výchozího cyklo(<Á“Lys/Z/-Tyr/Btr/) jako glutamylový dipeptid uvedený v příkladě 3 , s tím rozdílem , že hydrogenolýza byla provedena při 35 °C Konečný produkt byl získán ve výtěžku 4l % hmot. a t.t. 214-217 °C.

Průmyslová využitelnost

Tento vynález se týká cyklických tyrosinových dipeptidů uvedeného obecného vzorce k výrobě farmaceutických přípravků, určených k inhibici a/nebo léčení maligní proliferace buněk a/nebo stimulace specifické proteosyntézy a diferenciaci buněk pro perorální nebo rektální aplikaci, v pevných nebo tekutých dávkovačích formách, které lze vyrábět způsoby, běžnými ve farmaceutickém průmyslu a které usnadňují aplikaci, zejména perorální.

Claims (1)

1. PATENTOVÉ NÁROKY

   Cyklické tyrosinové dipeptidy obecného vzorce spojené chemickou vazbou, přičemž jeden z těchto substituentů, popř. oba mohou značit atom vodíku, R₂ značí fenylmetyl, 4-hydroxyfenylmetyl, fenyl, 4-hydroxyfenyl, karboxymetyl, 2-karboxyetyl, £ -aminobutyl anebo metylthioetylen, je-li R2 atom vodíku, může R^ tvořit trimetylenový, popř. metylenthiometylenový řetězec s atomem dusíku v poloze 1,

   A značí zbytek alkankarboxylové kyseliny C₂ až Ογ.