CZ187698A3 - Implantovatelný hydrogel z akrylamidového kopolymeru pro terapeutické účely - Google Patents
Implantovatelný hydrogel z akrylamidového kopolymeru pro terapeutické účely Download PDFInfo
- Publication number
- CZ187698A3 CZ187698A3 CZ981876A CZ187698A CZ187698A3 CZ 187698 A3 CZ187698 A3 CZ 187698A3 CZ 981876 A CZ981876 A CZ 981876A CZ 187698 A CZ187698 A CZ 187698A CZ 187698 A3 CZ187698 A3 CZ 187698A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- tissue
- polymer
- hydrogel
- cells
- polymer hydrogel
- Prior art date
Links
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 title claims abstract description 92
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 title claims description 10
- 229920006322 acrylamide copolymer Polymers 0.000 title description 2
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 83
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- -1 N-substituted methacrylamide Chemical class 0.000 claims abstract description 12
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 11
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims abstract description 10
- 208000031737 Tissue Adhesions Diseases 0.000 claims abstract description 7
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 claims abstract description 7
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims abstract description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 63
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 37
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 29
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 20
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 claims description 20
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 11
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 9
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 9
- OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 2-(2-cyanopropan-2-yldiazenyl)-2-methylpropanenitrile Chemical compound N#CC(C)(C)N=NC(C)(C)C#N OZAIFHULBGXAKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 claims description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 8
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000003376 axonal effect Effects 0.000 claims description 7
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 claims description 6
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 6
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 claims description 6
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 claims description 6
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 claims description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 6
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 claims description 6
- 230000001537 neural effect Effects 0.000 claims description 6
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 6
- 210000000578 peripheral nerve Anatomy 0.000 claims description 6
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 claims description 5
- 210000001328 optic nerve Anatomy 0.000 claims description 5
- KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N Butadiene Chemical group C=CC=C KAKZBPTYRLMSJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000003999 initiator Substances 0.000 claims description 4
- 208000014674 injury Diseases 0.000 claims description 4
- ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N n,n'-methylenebisacrylamide Chemical compound C=CC(=O)NCNC(=O)C=C ZIUHHBKFKCYYJD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000000379 polymerizing effect Effects 0.000 claims description 4
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 claims description 4
- SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N N-acetyl-beta-neuraminic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)O[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-PFQGKNLYSA-N 0.000 claims description 3
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 3
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 3
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 3
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 claims description 3
- 239000007870 radical polymerization initiator Substances 0.000 claims description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 2
- 150000003926 acrylamides Chemical class 0.000 claims description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 claims description 2
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 claims description 2
- 150000003254 radicals Chemical class 0.000 claims description 2
- 230000008733 trauma Effects 0.000 claims description 2
- 125000003047 N-acetyl group Chemical group 0.000 claims 2
- 239000003106 tissue adhesive Substances 0.000 claims 2
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 claims 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims 1
- CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N neuraminic acid Natural products NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO CERZMXAJYMMUDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003505 polymerization initiator Substances 0.000 claims 1
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 claims 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 abstract description 24
- 230000017423 tissue regeneration Effects 0.000 abstract description 12
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 abstract description 5
- 230000008439 repair process Effects 0.000 abstract description 5
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 101
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 77
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 27
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 17
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 16
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 9
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 8
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 8
- 210000000944 nerve tissue Anatomy 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 8
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 7
- 239000012981 Hank's balanced salt solution Substances 0.000 description 7
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 6
- 208000020431 spinal cord injury Diseases 0.000 description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 5
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 5
- VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N alprazolam Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N2C(C)=NN=C2CN=C1C1=CC=CC=C1 VREFGVBLTWBCJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 210000001130 astrocyte Anatomy 0.000 description 5
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 5
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 description 4
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 4
- 210000003050 axon Anatomy 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 4
- 230000035876 healing Effects 0.000 description 4
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 4
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 4
- VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxypropyl methacrylate Chemical compound CC(O)COC(=O)C(C)=C VHSHLMUCYSAUQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 3
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- 230000008614 cellular interaction Effects 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 210000003722 extracellular fluid Anatomy 0.000 description 3
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 3
- QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N mercury Chemical compound [Hg] QSHDDOUJBYECFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052753 mercury Inorganic materials 0.000 description 3
- ZTUGCJNAJJDKDC-UHFFFAOYSA-N n-(3-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)NCCCO ZTUGCJNAJJDKDC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 3
- 230000035699 permeability Effects 0.000 description 3
- 229920002959 polymer blend Polymers 0.000 description 3
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 2
- 102000007350 Bone Morphogenetic Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010007726 Bone Morphogenetic Proteins Proteins 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 108010085895 Laminin Proteins 0.000 description 2
- 102000007547 Laminin Human genes 0.000 description 2
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 description 2
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 description 2
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 2
- 201000010829 Spina bifida Diseases 0.000 description 2
- 208000006097 Spinal Dysraphism Diseases 0.000 description 2
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 2
- ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N ammonium peroxydisulfate Substances [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O ROOXNKNUYICQNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VAZSKTXWXKYQJF-UHFFFAOYSA-N ammonium persulfate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[O-]S(=O)OOS([O-])=O VAZSKTXWXKYQJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910001870 ammonium persulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000227 bioadhesive Substances 0.000 description 2
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 2
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 2
- 239000003181 biological factor Substances 0.000 description 2
- 239000013060 biological fluid Substances 0.000 description 2
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 235000011089 carbon dioxide Nutrition 0.000 description 2
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000007334 copolymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 239000006260 foam Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 2
- 230000036244 malformation Effects 0.000 description 2
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 2
- OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N n-(2-hydroxypropyl)-2-methylprop-2-enamide Chemical compound CC(O)CNC(=O)C(C)=C OKPYIWASQZGASP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 210000002220 organoid Anatomy 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 229920001562 poly(N-(2-hydroxypropyl)methacrylamide) Polymers 0.000 description 2
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 description 2
- 239000004633 polyglycolic acid Substances 0.000 description 2
- 239000004626 polylactic acid Substances 0.000 description 2
- 238000002459 porosimetry Methods 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 238000007634 remodeling Methods 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 210000004116 schwann cell Anatomy 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000025366 tissue development Effects 0.000 description 2
- 230000009772 tissue formation Effects 0.000 description 2
- 230000007838 tissue remodeling Effects 0.000 description 2
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 2
- 239000011800 void material Substances 0.000 description 2
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 2
- XQQUSYWGKLRJRA-RABCQHRBSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-6-amino-2-[[(2s,3s)-2-amino-3-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-methylbutanoic acid Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O XQQUSYWGKLRJRA-RABCQHRBSA-N 0.000 description 1
- 229920002818 (Hydroxyethyl)methacrylate Polymers 0.000 description 1
- JVJUWEFOGFCHKR-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl 1-(3,4-dimethylphenyl)cyclopentane-1-carboxylate;hydrochloride Chemical class Cl.C=1C=C(C)C(C)=CC=1C1(C(=O)OCCN(CC)CC)CCCC1 JVJUWEFOGFCHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LTHJXDSHSVNJKG-UHFFFAOYSA-N 2-[2-[2-[2-(2-methylprop-2-enoyloxy)ethoxy]ethoxy]ethoxy]ethyl 2-methylprop-2-enoate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCOCCOCCOCCOC(=O)C(C)=C LTHJXDSHSVNJKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXDQROPOJYHQLE-OXNFMAJFSA-N 2-methyl-n-[(3r,4r,5s,6r)-2,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]prop-2-enamide Chemical compound CC(=C)C(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O LXDQROPOJYHQLE-OXNFMAJFSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 206010051290 Central nervous system lesion Diseases 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000483002 Euproctis similis Species 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 206010061431 Glial scar Diseases 0.000 description 1
- 206010018341 Gliosis Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 208000023105 Huntington disease Diseases 0.000 description 1
- WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N Hydroxyethyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCCO WOBHKFSMXKNTIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051364 Hyperuricosuria Diseases 0.000 description 1
- 238000004566 IR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 101710167839 Morphogenetic protein Proteins 0.000 description 1
- KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N N,N,N',N'-tetramethylethylenediamine Chemical compound CN(C)CCN(C)C KWYHDKDOAIKMQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N N-Acetyl-D-Galactosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-CBQIKETKSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N N-acetyl-D-galactosamine Natural products CC(=O)NC(C=O)C(O)C(O)C(O)CO MBLBDJOUHNCFQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 102000010803 Netrins Human genes 0.000 description 1
- 108010063605 Netrins Proteins 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 206010053159 Organ failure Diseases 0.000 description 1
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 1
- 102000014105 Semaphorin Human genes 0.000 description 1
- 108050003978 Semaphorin Proteins 0.000 description 1
- 229920001963 Synthetic biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000000738 acetamido group Chemical group [H]C([H])([H])C(=O)N([H])[*] 0.000 description 1
- 229940008309 acetone / ethanol Drugs 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 1
- 230000002502 anti-myelin effect Effects 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002902 bimodal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 229940112869 bone morphogenetic protein Drugs 0.000 description 1
- 230000010478 bone regeneration Effects 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000012292 cell migration Effects 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 210000003710 cerebral cortex Anatomy 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 210000004720 cerebrum Anatomy 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- GRFFKYTUNTWAGG-UHFFFAOYSA-N chloroethene;prop-2-enenitrile Chemical compound ClC=C.C=CC#N GRFFKYTUNTWAGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000001612 chondrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000000512 collagen gel Substances 0.000 description 1
- 239000000501 collagen implant Substances 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 230000037029 cross reaction Effects 0.000 description 1
- 239000000495 cryogel Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 1
- 238000011833 dog model Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000007849 functional defect Effects 0.000 description 1
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N glycidyl methacrylate Chemical compound CC(=C)C(=O)OCC1CO1 VOZRXNHHFUQHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000000025 haemostatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023597 hemostasis Effects 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000007654 immersion Methods 0.000 description 1
- 230000003100 immobilizing effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000012151 immunohistochemical method Methods 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 108010088381 isoleucyl-lysyl-valyl-alanyl-valine Proteins 0.000 description 1
- 239000000644 isotonic solution Substances 0.000 description 1
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 108010082117 matrigel Proteins 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 230000006386 memory function Effects 0.000 description 1
- 238000000520 microinjection Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000004264 monolayer culture Methods 0.000 description 1
- 230000001338 necrotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 210000003061 neural cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 210000004923 pancreatic tissue Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L peroxydisulfate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)OOS([O-])(=O)=O JRKICGRDRMAZLK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 230000001817 pituitary effect Effects 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920001432 poly(L-lactide) Polymers 0.000 description 1
- 229920002338 polyhydroxyethylmethacrylate Polymers 0.000 description 1
- 229920005597 polymer membrane Polymers 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 239000012966 redox initiator Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000008521 reorganization Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000004626 scanning electron microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000036573 scar formation Effects 0.000 description 1
- 239000000565 sealant Substances 0.000 description 1
- 210000001044 sensory neuron Anatomy 0.000 description 1
- 229920002379 silicone rubber Polymers 0.000 description 1
- 239000004945 silicone rubber Substances 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 1
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 1
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 description 1
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229920001897 terpolymer Polymers 0.000 description 1
- 230000000542 thalamic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 239000003104 tissue culture media Substances 0.000 description 1
- 230000025934 tissue morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
- A61L27/3839—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells characterised by the site of application in the body
- A61L27/3878—Nerve tissue, brain, spinal cord, nerves, dura mater
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/14—Macromolecular materials
- A61L27/26—Mixtures of macromolecular compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/36—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix
- A61L27/38—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses containing ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. transplant tissue, natural bone, extracellular matrix containing added animal cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
- A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L27/52—Hydrogels or hydrocolloids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/04—Macromolecular materials
- A61L31/041—Mixtures of macromolecular compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L31/00—Materials for other surgical articles, e.g. stents, stent-grafts, shunts, surgical drapes, guide wires, materials for adhesion prevention, occluding devices, surgical gloves, tissue fixation devices
- A61L31/14—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
- A61L31/145—Hydrogels or hydrocolloids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Surgery (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Dispersion Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Zoology (AREA)
- Botany (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Neurology (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Neurosurgery (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Addition Polymer Or Copolymer, Post-Treatments, Or Chemical Modifications (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Compositions Of Macromolecular Compounds (AREA)
Description
Implaritovatelný hydrogel z akiylamidového kopolymeru pro terapeutické účely
Oblast techniky
Výnález se týká polymemího hydrogelu. Přesněji se tento vynález týká porézních implantovatelných polymerních hydrogelů pro terapeutické účely, které mohou být například použity pro vnitřní tkáňové náhrady jakéhokoliv párenchymatózního Orgánu, pro hojení zranění, pro regenerace tkání, a obecně pro orgánové reparace, zvláště ve vyvíjejícím se i dospělém nervovém systému, a přo jiné podobné terapie. Vynález je zvláště zaměřen na polymemí hydrogel, který po implantaci vytvoří porézní matrix, kterou prostoupí biologické tekutiny a molekuly a vytvoří tzv. organoidní hydrogel, který je progresivně začleněný do hostitelské tkáně následným prorůstáním krevních cév a tkáně. Vynález se rovněž týká způsobu zavádění živých tkáňových buněk, prekurzorových buněk nebo geneticky modifikovaných buněk do takového polymemího hydrogelu, aby se vytvořily biohybridni materiály, které lze použít v trojrozměrných tkáňových kulturách nebo pro tkáňové rekonstrukce. Vynález se dále týká způsobu výroby polymemího hydrogelu podle tohoto vynálezu a biohybridních materiálů vyrobených způsobem uvedeným výše. Konečně se vynález týká způsobu léčby poškozených Částí centrálního nervového systému, zvláště míchy a optického nervu, nebo periferních nervů, nebo jiných tkání pomocí implantace polymerového hydrogelu nebo biohybridních materiálů podle tohoto vynálezu do těchto tkání.
Dosavadní stav techniky
Transplantace orgánů jsou v současnosti jediným způsobem léčby orgánových selhání, používané rovněž pro obnovení nebo zlepšení funkce a výkonnosti orgánů. Mezi některé • t · · · · >lt · ·'· ·· ·' nevýhody orgánové transplantační léčby patří možnost přenosu onemocnění z donora na recipienta, nedostatek a omezená dostupnost donorových orgánů, a možné imunologické zkřížené reakce
Proto například transplantaci míchy nelze uskutečnit ani z klinického ani z biologičkého hlediska, a v důsledku toho neexistuje žádná dostupná léčba pro pacienty s poraněním míchy, přičemž jen v USA existuje 250 000 chronicky paralyzovaných pacientů a každým rokem přibývá dalších 10 000.
Na druhé straně implantací, transplantací, nebo injekcí buněk do organismu za účelem náhrady nebo obnovy chybějících buněk či části orgánových tkání nelze úspěšně dosáhnout správně tvorby nových tkání z důvodu nedostatku podpůrné extracelulámí matrix, představující nezbytnou tkáňovou kostru pro expanzi a organizaci tkáně do integrální struktury v kontaktu s hostitelským orgánem. Kromě toho buňky potřebují být umístěny ve fyziologicky odpovídajícím prostředí, usnadňujícím difúzi živin, kyslíku, humorálníčh a buněčných komponent tak, aby se udržela vysoká životaschopnost a růstový potenciál buněk po implantaci.
Porézní hydrogely podle tohoto vynálezu jsou deformovatelné porézní polymemí matrice nasycené mezibuněčnou tekutinou nebo vodou a takto poskytují nezbytnou tkáňovou ‘'kostru” a hydratovaný prostor, skrze který mohou buňky proliferovat a sestavit se do histologicky správné supracelulámí struktury a vytvořit tak novou funkční tkáň.
Různé experimentální , strategie intraspinálních transplantací byly popsány v literatuře • * jako pokusy napravovat poškození míchy (modely na zvířatech) s použitím různých implantačních materiálů, které lze rozčlenit do dvou Širokých kategorií implantátů: (1) biologické tkáně a (2) protetické materiály.
V kategorii (1) se k přemostění míšní leze fetální nervovou tkání používá donorových tkáňových štěpů, ať už syngenních autoštěpů nebo homoštěpů, aloŠtěpů nébo xenoŠtěpů, buď v podobě (a) pevného štěpu (např. Bregman, Dev. Brain Res., 34,265, 1987; Houle and Reier, J.
Comp. Neurol., 269, 535, 1988) nebo (b) suspenze zahrnující smíšené kultury buněk nervové tkáně (např. Goldberg and Berstein, J. Neuroscience Res., 19, 34, 1988; Hoovier and Wrathall, Acta Neuropathol, 81, 303,1991); Schwannovy buňky rekombinovanés kulturou senzorických neuronů (Kuhlengěl et al., J. Comp. Neurol., 293,74, 1990); nezralé astrocyty (např. Bemstein and Goldberg, Res, Neurol. Neurosči., 2,261, 1991); prékurzory buněk nervové tkáně (Monteros ét al., Dev. Neurosči., 14,98, 1992) a nesmrtelné buněčné linie (Zómpa et al., Int. J. Ďev. Neurosči., 11, 535, 1993), segment periferního nervu zahrnující pěstované buňky tkání jiných než nervových (Wrathall et al., Acta Neuropathol., 57, 59, 1982) nebo s embryonální nervovou tkání (Horvat et al., Res. Neurol. Neurosči., 2, 289,1991). Objevené protetické materiály náležející do kategorie (2) zahrnují čisté kolagenové matrice (de la Torre and Goldsmith, Brain Res., Bull, 35,418, 1994; Marchand and Woerly, Neurosči. 36,45, 1990; Gelderg, Brain Res., 511,80,1990], které obsahují neuroaktivní látky (Goldsmith and de la Torre, Brain Rés., 589,2Í7, 1992) nebo které zahrnují kultivované nervově štěpy (Bernstein and Goldberg, Brain Res. 377,403, 1986); upravené nitrocelulózové implantáty (Schreyer a Jones, Dev, Brain Res. 35, 291, 1987; Houlé and Johnson, Neurosči. Lett. 103, 17, 1989); kolagenové implantáty (Paino et al., J. Neuročytol., 23,433, 1991) a půlymemí vodící kanály z poly(akrylonitril-vinyl chloridu) (Xu et al., J. Comp. Neurol., 351, 145,1995) obalující Schwanovy buňky.
Tyto přístupy se přesně zaměřují na podporu axonálrií regenerace s použitím různých tkáňových substrátů jako zdrojů nových axůnů nebo komplexních protetických substrátů pro podporu a vedení rostoucích axonů a opomíjejí klinicky závažnou otázku reparace míšní nebo mozkové tkáně pomocí regenerace velkého Štěpu hostitelské tkáně a remodelace zhojené rány, např. po odstranění nekrotické nebo jizevnatě tkáně vytvořené po zranění,
Polymemí hydrogely bylý objeveny jako implantáty v nervovém systému (Woerly et al., Biomaterials, 11,97, 1990; Woerly et al,, Biomaterials, 12,197,1991, Woerly et al., J. Neural
Transpl. Plast., 3,21, 1992; Woerly et al., Cell Transpl., 2,229, 1993; Woerly et al., J. Néural Transpl. Plast., 5,245, 1995).Tyto hydrogely byly připraveny polymerizací volných radikálů ve vodě, s použitím persulfátu amonného a metabisulfitu sodného nebo persulfatu a kyseliny askorbové jako redoxních iniciátorů s hydroxyetylmetakrylátem (pHEMA), glycidylmetakrylátem (pGMA) nebo N-hydroxypropylmetakrylamidem (pHPMA) nebo sloučeninou obsahující uvedené monomery s agens vytvářejícím příčné vazby, kterým je buď etylenglykol a tetráetylenglykoldimetakrylát nebo metylenbisakrylamid. Tyto gely jsou typicky homogenní a opticky transparentní s bimodální porožitou včetně otevřených (dostupný objem pórů) a zavřených pórů, jak bylo prokázáno pomocí rtuťové porozimetrie a scanovacího elektronového mikroskopu. Porézní struktura těchto gelů je typicky tvořena paralelními válcovitými kapilárami s okrouhlým průřezem, jak je ukázáno na obr. 1, které mají průměrný poloměr pórů 7 až 13 mikrometrů. Frakční porozita se pohybuje mezi 50 až 85 % u pHEMA hydrogelů, 60 až 65 % u pGMA hydrogelů a 70 až 94 % u pHPMA hydrogelů Nejméně 50 % objemu pórů představují póry o velikosti 1,2 až 4 mikrometry u pHEMA, 6 až 13 mikrometrů u pGMA a 10 až 14 mikrometrů u pHPMA. Bylo zjištěno, že jejich biologická aktivita závisí na vnesení nebo kopolymérizacikolagenu do sítě obsahující příčné vazby. Žadatel provedl experimenty implantace do mozku, které ukázaly, že může být dosaženo určitého stupně tkáňové reparace podle stupně prorůstání tkáně do homogenní gelové matrice. Tato reakce se mění podle monomerového složeni a přidaných funkčních skupin. Homogenní hydrogely často vyvolávají vytvoření fibrózní kapsy, která má tendenci izolovat implantát od hostitele. Je to v důsledku jak mechanických vlastností gelů, které se neshodují dostatečně s vlastnostmi živé nervové tkáně, tak malé objemově frakce makropórů. V míše se tyto homogenní hydrogely nézačleňují do hostitelské tkáně a jsou rychle obklopeny pojivovou tkání a gliální jizvou bez prorůstání axonů nebo jiných tkáňových Složek, jak je ukázáno na obr. 2. Dále je nutno brát v úvahu fyzikální činitel, omezující povrchovou plochu, která může vznikat a která představuje
Γ· »··
• * • *
• · · ♦ ·· ,····♦· významný parametr pro úspěšnou interakci tkání vyvolanou Válcovitými póry homogenního hydrogelu. Pro určitý objem gelu dosahuje povrchová plocha určité limitní hodnoty, která je dána maximálním poloměrem jednoho póru zaujímajícího celkový objemu gelu. Na druhé straně, zvyšování povrchové plochy zmenšováním velikosti pórů vede k poklesu celkového prázdného objemu, který je inkompatibilní s prorůstáním tkáně a akumulací biomasy.
Harvey a spolupracovníci (Brain Res., 671, 119, 1995) popisují houbovitý polymer z poly(2-hydroxyetylmetakrylátu), který se používá jako mozkový implantát pro regeneraci tkáně a růst axonů. Tento produkt je riejlepší používat s přídavkem kolagenu do polymemí sítě jako tkáňovým bioadhezívní faktorem a po přidání Schwannových buněk.
U.S. patent č. 4 902 295 popisuje způsob výroby umělé tkáně z buněk pankreatické tkáně. Způsob zahrnuje polymerizaci prekurzorů matrice, gelových prekurzorů a promotorů s živými buňkami ve vodní fázi. Všechny polymerové prekurzory a promotory jsou biologickými sloučeninami podléhajícími v těle rychlé biodegradaci, které po implantaci nevykazují dlouhodobou stabilitu.
Bellakomda, R.; Ranieri, J.P., Bouche, N.·; Aebischer, P. (“Hydrogel-Based Threedimensional Matrix for Neural Celíš”, J. Biomed. Mat. Res. 1995,29,663-671) popisují techniku imobilizace buněk nervové tkáně v agaróze a gelech ekvivaletňích s extracellulárním prostředím (Matrigel ®),
Tyto materiály jsou biologické a biodegradovatelné.
Krewson, CE; Chuňg, S.W., Dai, W.; Saltzman, W.M. (“Cell Aggregation and Neurite Growth in Gels of Extracellular Matrix Molecules”. Biofechnol. Bioeng. 1994,43, 555-562) popisují techniku, ve které jsou buňky P12 suspendovány v gelech tvořených čistým kolegeňem nebo kolagenem v kombinaci s fibronektinem či lamiriinem, a v gelech z agarózy a kolagenu. Tyto gely jsou biodegradovatelné.
Cascone, M. G., Laus, M.; Ricci, Ď,; Sbarbati del Guerra, R. (“Evaluation ofPoly(vinyl aicohol) Hydrogels as a Component of Hybrid Artificial Tissues”, J. Mat. Sci. Mat. Med. 1995, 6,71-75) popisují technologii použití polyvinylalkoholových hydrogelů s fyzikálními příčnými vazbami, do kterých jsou fibroblastové buňky zavedeny během jednoho cyklu zmrazení a tání.
Wald, H. L.; Sarakinos, G., Lyman M.D.; Mikos A. G.; Vacanti J. P,; Langer, R. (“Cell Seeding in Porous Transplantation”, Biomat. 1993, 14,270-278) popisuji způsob uzavírání hepatocytů do degradovatelných polymemích pěn z póly L-mléčné kyseliny pomocí mikroinjekČní techniky. Tato technika neposkytuje nedegradovatelnou matrix a nedovoluje rovnoměrnou distribuci buněk v polymemí matrici.
Mikos, A.G.; Bao, Y., Cima, L. G; Ingber, D.E.; Vacanti, J.P.; Langer, R. (“Preparation of Poly(glycolic acid) Bonded Fiber Structures for Cell Attachment and Transplantation”, J. Biomed. Mat. Res. 1993,27, 183-189) popisují způsob vytvoření sítě z polyglykolové kyseliny s vazbou mezi vlákny na kultivaci hepatocytů. Tento polymer je biodegradovatelný a způsob vnášení buněk do matrice se liší od způsobu zvaného “entrapment”.
Puerlacher, W.C.; Mooney, D.; Langer, Ř.; Upton, I; Vacanti, J. P.; Vacanti, C. A. (Design óf Nasoseptal Čartilage Replacements Synthesized from Biodegradable Polymers and Chondrocytes, Biomat. 1994, 15, 774-778) á Freěd, L. E., Marquis, J. C.; Nohria, A.
V
Emmanual; Mikos, A. G.; Langer, R. (Neocartilage Formation In Vitro and In Vivo Ušing
Čells Cultured on Synthetic Biodegradable Polymers”,!. Biomed. Mat. Res. 1993,27,11-23).
k
Tyto reference popisují techniku zavádění choňdrocytů do polyglykolové (PGA) nebo polymléčné (PLLA) kyseliny nebo do PGA-PLLA matric způsobem zvaným capillary actioii. Výsledkem tohoto postupu jsou biodegradovatelné polymemí materiály, avšak buňky nejsou rovnoměrně distribuovány v polymeru a nelze kontrolovat denzitu buněk.
Cao, Y.; Vacanti, J.P.; Ma, X.; Paige, K.T.; Upton, J; Chowanski, Z.; Schloo, B,, Langer, R.; Vacanti, C. A. (“Generation of Neo-Tendon Using Synthetic Polymers Seeded with τ
Tenocytes”, Transpl. Proč. 1994,26, 3390-3391) popisují způsob, kterým se tenocyty zaoČkovávají do vypouklé netkané sítě (“embossed noůwoven mesh”) tvořené kyselinou polyglykolovou.
Mooney, D.J.; Park, S.; Kauíman, Ρ. M., Sáno, K.; McNamára, K.; Vacanti, I P, Langer, R.; (“Biodegradable Sponge for Hepatocyte Transplantation”, J Biomed. Mat. Res. 1995,29, 959-965) a Takeda, T., Kim, Τ. H.; Lee, S. K., Langer, R., Vacanti, J. O. (“Hepatocyte Transplantation in Biodegradable Polymer Scaífolds Úsing Baltimatian Dog Model of Hyperuricosuria”, Transpl. Proč. 1995,27,635-636) popisují způsob absorbce hepatocytů pomocí adsorpce a kapilárního působení (capillary action) na listy plstěné matrice vytvořené z polymeru kyseliny polyglykolové nebo do houbovité polymerní matricě vyrobené z kyseliny polymléčné a polyvinyl alkoholu anebo z kyselin polymléčné a glykolové. Tento způsob poskytuje biodegradovatelné polymemí materiály, ale neumožňuje ani rovnoměrnou distribuci buněk v polymeru ani kontrolu buněčné denzity.
Woerly, S., Plant, G. W.; Harvey, A. R. (“Cultured Rat Neuronal and Glial Gells Entrapped within Hydrogél Polymer Matrices; A Potential Tool for Neural Tišsue Replaceměnt”,
Ňeurosci. Létt. 1996, 205, 197-201) popisují způsob zachycení buněk nervové tkáně do homogenního průhledného polymemího gelu připraveného z poIy[N-(2-hydroxypropyl)metakrylamidu}, který může obsahovat kolagen jako substrát pro připojení (attachment substráte). Tento způsob zahrnuje přidání buněčné suspenze k polymerové směsi a polymerizaci směsi buňky-polymer při teplotě místnosti nebo v inkubátoru při teplotě 37°C. Výsledný gel je opticky transparentní a buňky jsou náhodně rozptýlené uvnitř gelu obsahujícího příčné vazby. Imunocytochemické studie udávají, že viabilita buněk po 6-ti dnech v podmínkách in vitro se pohybuje mezi 0 a 6 %.
ϊ” · • ♦ ·
Podstata vynálezu
Předmětem tohoto vynálezu je odstranění nedostatků dosavadních způsobů v oboru používaných použitím nebiologického protetického prostředku, jako je nedegradovatelný polymemíhydrogel, který plní funkcí materiálu vyplňujícího volný prostor a stavební kostry stimulující regeneraci tkáně, morfogenezi a remodelaci implantátu na integrovanou orgánovou strukturu (integrated stmcture-to-organ).
Dále se vynález týká zlepšení zhojení tkáně tak, aby došlo ke skutečné tvorbě tkáně, čehož je dosahováno kontrolou buněčné proliferace, infiltrací buněk a organizací tkáně uvnitř stabilní polymerové matrice.
Dále se vynález týká regenerace tkáně pomocí polymerových matric, což představuje významný klinický a ekonomický přínos při léčbě lidí s poraněním míchy (SCI) nebo mozku nebo lidí trpících vrozenými defekty míchy (spina bifida).
Dále se vynález týká přípravy polymerních matricí pro regeneraci optického nervu a periferních nervů.
Dále se vynález týká přípravy nedegradovatelné syntetické matrice z polymemího hydrogelu mající anizotroptií porézní strukturu, efektivní povrchovou plochu a dobrou tkáňovou adhezivitu a kompatibilitu, která je navrhována pro použití při implantaci do měkkých tkáňových struktur, zvláště v nervovém systému, a která je progresivně zabudovávána do orgánu a stává se jeho součástí.
. Dále se vynález týká přípravy syntetických polymerních matricí s kontrolovanou strukturou pórů, které nesou povrchově aktivní agens, pro terapeutické účely.
Hlavním předmětem vynálezu je příprava polymemí matrice připravené z nového, ve vodě nerozpustného polymemího hydrogelu, který je používán v nabobtnalém stavu jako protetický přípravek pro regeneraci tkáně při reparaci parenchymatózních orgánů.
ί
Dále se vynález týká způsobu přípravy hydrogelového produktu ve formě mající tvar konečného protetického přípravku.
Dále se vynález týká odstranění jednoho nebo několika nedostatků způsobů používaných v oboru s cílem připravit polymefní neuroproťézu, kterou lze pomočí standardních chirurgických postupů implantovat do mozku nebo míchy.
Dále se vynález týká způsobu, který umožňuje vnesení buněk nebo geneticky modifikovaných buněk do sítí polymeru.
Dále se vynález týká přípravy polymerové směsi, kterou lze smíchat s živými buňkami a tak zkombinovat fyzikální charakteristiky polymerové matrice vykazující chování hydrogelového typu (porozita, stabilita, vodící povrchy, permeabilita) s vlastnostmi buněčných biologických faktorů (např: růstové faktory).
Dále se vynález týká výroby biohybridních přípravků, které lze použít jako náhradu částí tkáně parenchymatózních orgánů.
Dalším předmětem vynálezu je trojrozměrný kultivační systém, který lze použít pro dlouhodobé kultivace různých buněk in vitro.
Dále se vynález týká přípravy podpůrných matricí pro připojení biologicky aktivních molekul ke tkáni nebo orgánům.
Dále se vynález týká přípravy porézních hydrogelů představujících deformovatelné porézní pólymemí matrice nasycené mezibuněčnou tekutinou nebo vodou, které poskytují nezbytnou tkáňovou kostru a hydratovaný prostor Skrze nějž mohou buňky proliferovat a sestavovat se do histologicky správné struktury nadbuněčné úrovně a vytvořit tak funkční tkáň.
a makromolekul, zvláště protizánětlivých látek jako je indometacin, stimulátory cytokinů, jako jsou bakteriální lipopolysacharidy, steroidy, jako např. metylprenisolon, a neuroaktivní faktory, jako např. růstové faktory pro fibroblasty.
ίο ·· * ··..♦·····.
Iν 4-44 4 444 · 4 4 4 * 4444 4 4 '4 « · · 444 4 « 4,4' 444 4 44 4
444 ,4 44 44 44 44
Dále se vynález týká přípravy materiálu se silnými bioadhézivními a hemostatickými vlastnostmi, který je vhodný.pro umístění uvnitř pareiíchymatózního orgánů, pro rychlé připojení a zároveň pro hemostázu.
Hlavním předmětem vynálezů je příprava polymerové matrice s dostatečnou mechanickou a chemickou stabilitou, aby vydržela dlouhodobou implantaci v organismu bez degradace, která může jinak poškodit nově utvořenou síť tkáně, která prorostla do mátrice při nahrazování části orgánu.
Dále se vynález týká přípravy matrice vykazující mechanickou poddajnost, která dovoluje operatérovi řezat, upravit velikost a jinak zacházet s polymerovou matricí, aniž by došlo ke změně vnitřní struktury a mechanických vlastností matrice.
Dále se vynález týká přípravy materiálu, který je schopen bobtnání, a vykazuje vysokou kapacitu bobtnání ve vodném prostředí, který dokáže absorbovat značná množství látek biologicky zajímavých pro účel tohoto vynálezu, jako jsou adhezní molekuly (např. CAM a LI molekuly) nebo “navádějící” (guidance) molekuly ( např. semaforiny nebo netriny rozpuštěné ve vhodném roztoku), takže uvedené molekuly jsou následně adsorbovány na povrch sítě polymerové matrice.
Podle tohoto vynálezu jsou připravovány nové hydrofilní polymemí hydrogěly, schopné vytvořit porézní, měkké polyměrní matrice s vysokou ábsorpční.schopností, které jsou elasticky deformovatelné a mají rovnovážný obsah vody alespoň 80 %, výhodně alespoň 96 °/o.
Podlé tohoto vynálezu jsou rovněž připravovány polymemí směsi, které lze míchat s živými buňkami.
Vynález se týká polymemího hydrogélu pro terapeutické účely, který je kopolymerem zahrnujícím (a) N-substituovaný metakrylamid nebo akrylamid, (b) agens vytvářející příčné vazby, a (c) polymerizovatélný materiál vybraný že skupiny zahrnující cukr, derivát cukru, tkáňový adhezní peptid, molekuly proteinů tkáňové diferenciace (např. kostní morfogenetické /1 • · proteiny) a konjugát polymeru s protilátkami proti lipidovým derivátům, který je elasticky deformovatelný, a má rovnovážný obsah vody alespoň 80 %, výhodněji alespoň 96 %
Výhodně je N-substituovaný metakrylamid nebo akryíamid (a) vybrán ze skupiny zahrnující N-monoalkyl- a Ν,Ν-dialkylmetakrylamidy a akrylamidy, agens vytvářející příčné vazby, (b) zahrnuje akryíamid nebo jeho prekurzor a polymerizovatelný materiál, (c) představuje cukr, který je vybrán ze skupiny obsahující glukosamin, N-acetylglukosamin a N-acetyl derivát neuramiňové kyseliny a jejich polymerové formý jako je polysialová kyselina.
Vynález se rovněž týká způsobu přípravy polymemího hydrogelu pro terapeutické použití, který zahrnuje (a) rozpuštění agens tvořícího příčné vazby v póry vytvářejícím rozpouštědle obsahujícím polýmeřizační iniciátor na bázi volných radikálů (free radical polymerization initiator) za vytvoření roztoku, (b) přidání N-substituovaného meťakrylamidu nebo akrylamidu k roztoku připravenému v bodě (a) za vytvoření směsi, a (c) přidání roztoku cukru, derivátu cukru, tkáňového adhezního peptidu, morfogenetíckých proteinů nebo odvozených bioaktivních peptidů nebo konjugátu polymeru s protilátkami proti derivátům lipidů k směsi, získané, v bodě (b)·
Podle výhodného provedení, způsob zahrnuje rozpuštěni ažobisizobutyronitrilu a metylenbisakrylamidu v rozpouštědle za vytvoření roztoku, smíchání roztoku s N-2(hydróxypropyl)metakrylamidem, přidání glukosaminu nebo N-acetylglukosaminu nebo Nacetylneuraminové kyseliny ke směsi, a odstranění reziduálních produktů s nízkou molekulovou hmotností a stopových množství iniciátoru z uvedené směsi:
Podle dalšího provedení, způsob rovněž zahrnuje přidání živých tkáňových buněk nebo geneticky modifikovaných buněk k produktu získanému v bodě (c) a zachycení buněk pomocí pólymerizace uvnitř uvedeného produktu.
Podle dalšího provedení, obsahuje polymemí hydrogel podle tohoto vynálezu buňky nebo geneticky modifikované buňky, které jsou do něj vpolymerovány.
/t toto to b to to * ··· · « b to toto to · • · · • toto· • to· toto • 4 · · to· ·* • * · » ···· ·· · · · * · to . · · to·
Podle dalšího provedení se vynález týká způsobu léčby poškozených mozkových tkání nebo poranění míchy odstraněním poškozených mozkových tkání nebo míchy u člověka nebo zvířete a nahrazením poškozených mozkových tkání nebo míchy polymemím hydrogelem podle tohoto vynálezu.
Hydrogel podle tohoto vynálezu obsahuje kovalentní příčné vazby, je neprůhledný a heterogenní, a výhodně vykazuje strukturu jasně oddělených fází, tvořenou Částicemi polymeru o velikosti 1 až 10 mikrometrů, výhodně 3 až 5 mikrometrů, takže vznikne oblast s relativně hrubou porozitou (makropóry), ve které se hydrogel stýká s tkání hostitele, a oblast s relativně jemnou porozitou (mezopóry), kde se hydrogel stýká s prorůstající tkání.
Výsledkem je výhodná houbovitá struktura obsahující makropóry; s frakční porozitou, například, nejméně 80 až 90 % (objem rtuťové intruze k celkovému objemu gelu); s oblastí specifického povrchu v rozsahu výhodně stovek metrů Čtverečních na gram gelu; se střední hodnotou průměru póru (objemem), např. přibližně 15 až 35 mikrometrů; s objemem pórů rovným nebo větším než 10 mikrometrů (90 až 95 % frakční porozity hydrogelu), zatímco největší frakce celkového objemu pórů gelu má charakter pórového režimu od 10 do 50 mikrometrů, a s hypěrporéznímcharakterem od 20 do 30 mikrometrů (frakční porozita gelu alespoň 50 % objemu gelu).
Makrostrukturu a porozitu hydrogelu lze měnit tím, že kontrolujeme velikost částic a porézní stmktuni, které závisejí na složení a vlastnostech použitého porotvómého rozpouštědla, na objemové frakci polymeru, na interakci mezí polymerem a rozpouštědlem, na polymerizační teplotě a na vlastnostech použitého monomeru tvořícího příčné vazby. Úspěšná akumulace biomasy a buněčná interakce je výsledkem takové optimální povrchově-objemové interakce, jak dokládají výsledky rtuťové porozimctrie vyplývající z mikroporozity a mezoporózity Částic polymeru.
í\ ··· ···· ι * > * · · · 4 ·· · 4 *·«· 4 * · ♦ 4 4 ··· I 4 4 4 4 4 · «i ··* · ·· ’ 4« 44
Důležitým finálním aspektem materiálu je jeho otevřená povaha á propojitelnost, která je vhodná pro akumulaci buněčné biomasy a molekulární buněčné interakce s živou tkáni. Použijeme-li metody rastrovací elektronové mikroskopie (viz obr. 3), tyto heterogenní buňky typicky ukazují trojrozměrnou strukturu koloidálního typu s neokrouhlým pórem a stěnou porézního systému, který je reprezentován bezprostřední blízkostí povrchu polymemích agregátů, tak jak je ukázáno na vyobrazeních: Účinná oblast povrchu je funkcí porozity povrchu Částice. Na rozdíl od homogenních gelů, hlavní výhodou takových heterogenních gelů je to, že oblast povrchu tvořená částicemi je ve skutečnosti neomezená, jak velikost agregátů (1) klesá, takže oblast povrchu je nepřímo úměrná hodnotě 1. Ve srovnání s homogenními hydrogely, rovněž heterogenní hydrogely podle tohoto vynálezu mají rovněž mnohem větší objem pórů a proto jsou mnohem účinnější při infiltraci buněk a akumulaci biomasy. Navíc, a ve srovnání s homogenními hydrogely, jsou hydrogely podle tohoto vynálezu mechanicky poddajné a tím se vhodně doplňují s vlastnostmi dospělé a vyvíjející se nervové tkáně.
TýtO hydrogelové matrice mají skutečnou, tkáňovč-specifickou strukturu, protože výsledkem buněčné interakce jsou organizované tkáňové sítě napříč gelovými strukturami, tzv. organoidní hydrogely.
Polymemí matrice se mohou vytvářet simultánní precipitací nebo precipitaČní polyměrizací a kopolymerizací používající příčných vazeb účinného množství každé z následujících složek: (i) N-substituovaných metakrylamidů jako jsou Nmonoalkylmetákrylainidy nebo N-substituovaných akrylamidů jako N-monoalkylakrylamidy, nebo Ν,Ν-disubstituovaných akiylamidů jako Ν,Ν-dialkylakrylamidy, (ii) agéns vyvolávajícího divinylové Sloučeniny, apod ; (iii) iniciátoru polymerizace na bázi volných radikálů (free radical polýmerization initiator) jako je azobisizobutyronitril, různé peroxidy, kyselina askorbová, peroxysulfáty, substituované azoslouČeniny, apod., které jsou dobře známy odborníkům v f> Η * ϊ · ·♦·» i t ··»· · * * * φ φ φφφ φ φ * » φ * φ φ Φφφ • •Φ · φφ φφ φφ φφ oboru, v množstvích pohybujících se od 0,01 do 2 hmotnostních % vzhledem ke kopolymeru nebo terpolymeru; (iv) komplexních cukrů jako jsou glukosamin nebo N-acetylglukosamin nebo N-acetylgalaktosamin nebo kyselina N-acetylneuraminová nebo kyselina polysialová nebo jiné deriváty cukrů nebo tkáňové adhezní olígopeptidy obsahující sekvence jako je Arg-Giy-Asp, IleLys-Val-Ala-Val, Ála-His-Ala-Val-Ser-Glu, Tyr-lle-Gíy-Ser-Arg, olígopeptidy odvozené od molekul uplatňujících se pri diferenciaci tkání (např. kostní morfogenetické proteiny) nebo konjugát polymeru s protilátkami proti myeiinu a lipidům asociovaným s axonem a jejich deriváty v rozpouštědle, výhodně v acetonu/dimethylsulfoxidu, acetonu nebo acetonu/etanolu.
Alkylové skupiny mají výhodně jeden až dva atomy uhlíku, např. C l až C2 hydroxyalkylové a aminoalkylové radikály. Termín N-substituovaný, tak jak je zde užíván, zahrnuje Cl-8 substituenty, které obsahují OH, aminoskupinu nebo jejich kombinaci.
Reakce se obecně provádí při teplotě 40 až 60 stupňů Celsia v polymerizačních nádobách sestávajících se z uzavřených ampulí po dobu přibližně 12 hodin.
Krátký popis obrázku.
Obr. 1 je mikroskopické zobrazení homogenního gelu,
Obr. 2 je mikroskopické zobrazení homogenního gelu implantovaného do míchy;
i*
Obr. 3 je mikroskopické zobrazení heterogenního gelu HPMA;
Obr. 4 je mikroskopické zobrazení gelu z obr.3 implantovaného do nervové tkáně.
• ’ s ·
Příklady provedení vynálezu
Vynález je vysvětlen pomocí následujícího Příkladu.
* * * - * *· * *»·»·» · · * · « · • · · · · · · *
Příklad 1
ΑΙΒΝ (azobisizobutyronitril) (1,2 hmotnostních %) a metyfenbisakrylamid (1 molámí %) jsou rozpuštěny v bezvodém acetonu. Roztok je smíchán s N-2(hydroxypropyl)metakrylamidem v objemovém poměru 30 % HPMA se směsí aceton/dimetylsulfoxid (objemový poměr 93:7). N-metakřyloylglukosamin (5 hmotnostních %) nebo l-metyl-2-metakryloylamidoetyl-2-acetamÍdo-2-deoxy-beta-D-glukosid (6,5 hmotnostních %) nebo 2-[l -metyl-2-metakryloylámidoetyl] 5-acetamido3,5-dideoxy-D-glycero-alfa-Dgalakto-2-nonulopyranosidonová kyselina (5,2 hmotnostních %) nebo metakryloylglyčylglycylargynylglycýlasparagová kyselina (1,4 hmotnostních %) jsou rozpuštěny v dimetylsulfoxidu a přidány k polymerizaČni směsi. Směs jě důkladně homogenizována a pomocí injekční stříkačky vpravena do ampulí. Reakční směs je poté probublána dusíkem a ámpule jsou zataveny v plameni. Z důvodu zabránění odpaření rozpouštědla, může být směs nejprve zmrazená ve směsi suchého ledu a etanolu a poté ampule zatavena. Zatavené ampule jsou potom ponořeny na dobu 24 hodin do vodní lázně o teplotě 50 stupňů Celsia,
Výhodně podle tohoto vynálezu jsou reziduální produkty o nízké molekulově hmotnosti, jako jsou ňezreagované monomery, oligoměry nezřetězené do sítě a stopová množství iniciátoru, odstraněny z hydrogelového produktu před jeho použitím. Toho lze dosáhnout ponořením xerogelů do etanolu na dobu 20 hodin, potom do směsi etanol/voda (1:1 v/v) na dobu 20 hodin a posléze do destilované vody na dobu 1 týdne, kdy je voda často vyměňována, dokud není dosaženo rovnováhy z hlediska bobtnání a extrakčrtí reakce je pomalá, nejlépe nulová. Dalším důležitým aspektem tohoto vynálezu je snaha vyhnout se kontaminaci. Příprava polymemího gélu se výhodně provádí v laminámiiri boxu (biohazard chamber) vybavené vzdušným filtrem. Promývaeí kroky jsou s výhodou prováděny s použitím sterilních materiálů a gely jsou uskladněny při teplotě 4 stupně Celsia ve sterilní destilované vodě.
» ·
- - - - - --- -- - — — , * t ,···· ti · 4 4 ·« «·
Aby bylo možné vytvořit hybridní přípravek zahrnující jak polymerní přípravek tak buňky donorové tkáně, lze buňky inokulovat do porézní struktury polymemího hydrogelu pomocí mikrovpichů do polymerní sítě Hamiltonovou injekční stříkačkou obsahující uvedenou suspenzi buněk. Vnesení buněk do uvedeného polymemího hydrogelu lze provést jak in vitro tak in vivo, jestliže dodržíme správný čas po implantaci hydrogelu do oblasti cílového orgánu. Buňky lze izolovat z lidského mozku nebo svalové tkáně nebo z materiálu z pitvy.
Příklad 2
Inokulace buněk do PHPMA hydrogelu in vitro.
Neurony byly izolovány z cerebrálňích hemisfér potkaních embryí zbavených mozkových plen a cév v DMEM, které byly rozděleny na malé fragmenty tkáně. Tkáně byly mechanicky odděleny pomocí Pasteuróvy pipety v centrifugační zkumavce obsahující DMEM, Supematant byl oddělen a sedimentované fragmenty tkáně byly dále rozbity pomocí Pasteuróvy pipety, jejíž špička byla zúžena a zaČiŠtěna v plameni. Po několika cyklech střídavé resuspendace a ďisociace buněk, byly spojené siipematanty zcentriíugovány a buňky zkoncentrovány na hodnotu 106 buněk na 100 mikrolitrů media. Frakce je udržována na ledu, dokud není použita pro zachycení buněk (cell entrapment) Aby bylo dosaženo účinného a spolehlivého průniku buněk do polymemího hydrogelu, buňky byly nabrány do Hamiltonovy injekční stříkačky připojené na mikromanipulačiií zařízení a inokulovány za minimálního; poškození tlakem v potřebné koncentraci do nabobtnaíých PHPMA hydrogelu pod binokulární lupou za aseptických podmínek. Hydrogely obsahující buňky jsou udržovány v minimálním objemu kultivačního media a inkubovány při 37 stupních Celsia a 5 % CO2 ve zvlhčené atmosféře. Když buňky dosáhly vhodného stupně růstu, lze hybridní přípravek transplantovat do mozku, aby se usnadnila reparace tkáně a její zhojení.
* * ·
Polymemi strukturu lze rovněž smíchat s živými buňkami a tím kombinovat fyzikální charakteristiky polymemi matrix s chováním hydrogelového typu (porozita, stabilita, vodící povrchy, permeabilita) a buněčných biologických faktorů (např. růstových faktorů).
Vnesení buněk do polymemi matrice je dosaženo způsobem gel-entrapment” při teplotě nižší než 0 stupňů Celsia, tj. kryopolymerizací, kdy vzniká porézní matrice v níž jsou buňky imobilizovány a mohou tak dosáhnout reorganizace, růstu a/nebo diferenciace pro následnou transplantaci. Solventem by měl být izotonický roztok nebo medium pro kultivaci tkaní typu, který je běžně používán v buněčných a tkáňových kulturách, a který je kombinován s vhodným kryoprotektantem (glycérol/dimetylsulfoxid nebo glycerol nebo DMSO nebo polyviňylpyrrolidoii nebo hydroxyetylŠkrpb, karboxymetylcelulosa). Způsob dovoluje kontrolu konečných buněčných densit, které mají hodnotu od několika buněk až do těch, které se blíží buněčné densitě tkáně, tj. přibližně 109 až 1O10 buněk na cm3. Způsob rovněž dovoluje měnit a kontrolovat porozitu matrice tím, že se mění rychlost chlazení a teplota pólymerizační směsi obsahující buňky (tekutý dusík nebo chlazený izopentan). Způsob poskytuje makropórézní houbovitou strukturu typickou pro kryogel s velikostí pórů, která dovoluje difúzi živin a makromolekul (např. růstových faktorů) k buňkám a od buněk zachycených v polymemi gelové matrici i migraci buněk, a dovoluje vytvořit takový objem póru, který je vhodný pro účinnou akumulaci biomasy, její expanzi (buněčné dělení) a organizaci (vzájený kontakt buněk) během vývoje a maturáce tkáně.
Příklad 3
Zachycení astrocytů v gelu pomocí kryopolymerizace HPMA.
♦ * · »·· * • ·*· · v • ♦ · *· <·
Astrocyty byly získány inkubací mozkové kůry dvoudenních potkanů v roztoku obsahujícím 0,1 % trypsin-EDTA, 0,001 % DNasu v HEPĚS-pufrovaném DMEM podobu 30 minut při teplotě 37 stupňů Celsia a mechanické disociaci. Byl proveden výsev buněk s použitím umělohmotných lahví (106 buněk na 10 ml) a kultura byla udržována při teplotě 37 stupňů Celsia v DMEM obsahujícím 10 % fetální bovinní sérum. Po 7 dnech kultivace in vitro byly astrocyty sklizeny a resuspendovány v Hankově vyváženém roztoku solí (HBSS, pH 7,4) obsahujícím 20 % glycerol, zkoncentrovány na hodnotu 106 na 100 mikrolitrů a uchovávány při teplotě 6 stupňů Celsia. Zachyceni buněk (entrapment proceduře) bylo provedeno v laminámím boxu za použití sterilních materiálů. Prepolymerizační roztok obsahoval 0,69 g N-(2hydroxypropyl)metakrylamidu a 0,010 g metylenbisakrylamidu rozpuštěných v objemu 2,3 ml HBSS obsahujícího 20 % glycerol, a jako iniciátory persulfát amonný (100 mg/ml HBSS; 4,3 x 103 M) s N,N,N\N'-tetrametyletylendiaminem rozpuštěného v HBSS (1:1 v/v HBSS; 3,3 x 10'5 M). pH bylo upraveno na hodnotu 7,0 pomocí 0,1 N HCl a kyslík byl z prepolymerizačního roztoku odstraněn pomocí dusíku. Roztok byl před použitím ochlazen na teplotu 4 stupně Celsia. Buňky byly resuspendovány ve směsi prepolymeru o vysoké hustotě (1Ό6 buněk na ml) a směs byla důkladně míchána a injektována pomocí Hamíltonovy injekční stříkačky mezi dvě předchlazené skleněné desky oddělené mezerou 0,75 mm zajištěné pomočí silikonkaučukového těsnícího prostředku. Konečný objem byl 3 ml. Forma byla zchlazena na teplotu -170 stupňů Celsia během 1 minuty ponořením do tekutého dusíku a buňky byly ponecháhy v tekutém dusíku po. dobu 3. minut předtím než byla převedena do vodní lázně ochlazené na -15 stupňů Celsia. PolymerizaČní reakce probíhala po dobu 5 hodin v chlazené vodní lázni, poté byla forma ohřátá v lázni ó teplotě 37 stupňů Celsia až došlo k roztátí polymeru. Po rozbití ledu byl gel vyňat z formy, omyt pomocí HBSS aby bylo odstraněno kryoprotektivní agens a nezreagované reakční produkty a upraven do okrouhlého, tvaru o průměru 0,8 mm. Gelové disky bylý inkubovány při
··· 0 0 0 • · · ·* 00 teplotě 37 stupňů Celsia a 5 % CO2 ve zvlhčené atmosféře v DMEM obsahujícím 10 % FBS a 1 % antibiotikum (streptomycin-penicilin).
Tento přístup přípravy hybridních tkání s polymemím hydrogélem má dvě hlavní výhody v porovnání s postupem popsaným Woerlym et al. (1996): prevenci poškození buněčné membrány polymerizací při nízké teplotě a tvorbu krystalů ledu okolo buněk, která má za následek vyšší porozitu a pevnou pórovou strukturu (heterogenní hydrogel). Výsledkem je to, že buňky jsou zachyceny uvnitř polymemí matrice, která představuje strukturální oporu pro vznik oblasti s velkým vnitřním povrchem, dostatečné volné prostory pro buněčnou expanzi a zvýšenou permeabilitu. Kromě toho může být směs buněk a polymeru uchovávána ye zmraženém stavu pro následné polymerizace, tak jak je popsáno výše.
V kterémkoli stadiu vývoje buněk se výsledná hybridní matrice skládá z pevné fáze, která obsahuje porézní matrici, buňky a buněčnou extracelulámí matricí a tekutou fázi odpovídající buněčnému kultivačnímu mediu a extracelulámím tekutinám.
Jak ocení odborník v daném oboru, tento způsob je odlišný od takzvaného způsobu enkapsulace buněk (cell encapsulation), který používá mikroenkapsulační nebo makroenkapsulační techniky a kde buňky jsou. jednoduše uzavřeny v membráně polymeru, která má okrouhlý tvar ó různém poloměru.
V této přihlášce termín buňka nebo buňky zahrnuje fragmenty tkáně, shluky buněk, jednotlivé buňky embryonálního, neonatálňího nebo dospělého původu, geneticky modifikované buňky, buď primární nebo nesmrtelné (immortalized) buňky, nesmrtelně buněčné linie původem buď z existujících nádorových buněčných linií nebo nesmrtelné prékurzorové buněčné linie, kmenové nebo progenitórové buňky, a prékurzorové buněčné linie selektované na růstový faktor z kterýchkoli tkání a orgánů. Způsob a produkt tohoto vynálezu jsou vhodné pro přípravu řady umělých tkání nebo orgánů pro transplantáči nebo trojrozměrných kultivačních systémů.
9 9 »
9 «·
9 9 9 » * 9 9 τ·ϋ· h
k *
··* ··· «
• · · 9 • ♦ 9« »•9 « · » 9 9 ·· 9«
Test 1
Biologická tolerance polymerních hydrogelů podle tohoto vynálezu byla studována pomocí implantace příčně rozříznuté míchy a v mozkových lezích potkanů. Vzorky pro testování byly odebírány od 1 týdne do 10 měsíců po implantaci. Biologická tolerance byla vynikající. Makroskopicky se gely integrují do hostitelské tkáně a vykazují dobrou stabilitu, a v některých případech se hostitelský orgán zdá být intaktní. Z mikroskopického hlediska studie ukázaly, že toto složení polymemího gelu podporuje restrukturalizaci tkáně a regeneraci axonů v místě implantace v hemi- a úplně příčně rozříznuté míše potkanů, a tak se dociluje až 100 % restaurace kontinuity tkáně (obr. 4). Data lze sumarizovat takto, (i) integrace hydrogelu a restaurace orgánové kontinuity, hydrogel udržuje objem leze konstantní, takže se nová tkáň může vyvinout a nahradit lézi adhezí jejího porézního povrchu k ráně; (ii) hladký povrch s celkovým dostupným polymemím povrchem; (iii) minimální tvorba jizev a nepřítomnost cystických kavitací v přilehlé hostitelské tkáni, (iv) vrůstání gliální tkáňové sítě do polymemí sítě posilující přihojení implantátu k hostitelskému organismu; (v) vrůstání buněk heterogenního původu; (ví) vrůstání kapilár; (vii) depozice molekul extracelulámí matrix (kolagen, fibronektin a laminin) ná povrch polymemí sítě, které může být sledováno imunohistochemíckými metodami, a (viii) axonální růst skrz bioimplantát. Studie explantovaných hydrogelů prováděné *
pomocí infračervené spektroskopie ukazují, že infračervené spektrum nativního hydrogelu bílkovinných sloučenin, které jsou podobné přilehlé míšní tkáni, což potvrzuje, žé elementy míšní tkáně jsou integrovány do porézní sítě hydrogelu.
Test 2
Kryopolymerízační postup dovoluje vytvářet heterogenní gely s fixovanou makropórézní strukturou, v níž jsou buňky imobilizovány. Studie, které používají techniku značení buněk, jako například buněčné značení nebo imunocytochemičké metody, ukazují, že buňky jsou ' · * ·· · · ·* '.
• fc · « *«· ♦ · ·« fc ♦··· ♦ Φ ♦ · · · φφφ Φ Φ
·. ·· · · · · φφφ •fc · ·· ·· ΦΦ «Φ rovnoměrně rozmístěné v síti polymeru a na různých úrovních v gelech, a to buď jako jednotlivé izolované buňky, nebo jako malé shluky složené z několika buněk. Buňky, které přežívají še pozitivně barví pomocí imunometod během třítýdenní inkubace in vitro a vykazují antigenní profily vyvíjejících se buněk nervové tkáně. Proto astrocyty, které jsou izolovány z neonatálního mozku potkanů, lze zakotvit v hydrofilních hydrogelech pomocí kryópolymerizační reakce s vysokou hladinou retence a zakotvené buňky přežívají a normálně diferencují, podobně jako v podmínkách jednovrstevné kultury: po 10 dnech in vitro Činí životnost zmobilizovaných buněk 90 %, jak jé stanoveno pomocí techniky značení buněk. Kromě toho jsou buňky fúnkčiií, neboť syntetizují laminin a fibronektin v polymemí matrici, podobně jako v jednovrstevných kulturách.
Polymemí hydrogel byl vyvinut převážně jako nástroj napomáhající růstu tkáně (tissue expander) a jako témplát na němž se tkáň vytváří (tisšue formation template) za účelem nápravy defektu tkáně nebo tkáňového deficitu parenchymatózního orgánu, což je situace, která může být důsledkem traumatu, chirurgické manipulace nebo vrozené malformace, a tato metoda podpoří tvorbu nové, funkčně integrované tkáně, která dále vytváří patřičný orgán. S použitím této metody rovněž počítáme při léčbě poranění, remodělaci tkání, regeneraci tkání, rozvoji tkání parenchymátózních orgánů jako jsou játra, pankreas, kůže a svaly. Lze ji rovněž použít v kombinaci s jinými materiály pro regeneraci a hojení kostní tkáně.
specifických lidských neurologických poruch a uvedený polymemí hydrogel lze použít dvěma různými způsoby podlé povahy a typu onemocnění a rozsahu funkčního defektu. Za prvé, polymemí hydrogel lze použít jako templát pro regeneraci tkáně nebo jako nosič buněk po inkorpóraci buněčného štěpu. S polymerním hydrogelem podle tohoto vynálezu se například počítá pro použití při léčbě dědičných defektů nebo defektů vzniklých poškozením specifických oblastí mozku a míchy ve stadiu vývoje anebo v dospělosti (např, poranění míchy). Typicky tento postup spočívá v odstranění poškozené tkáně, tkáně jizvy nebo jiné nefunkční části 'L'b • · « • ♦« *· ♦ ·* * · « · « · ·· t t · ♦ * · « • · » * · ·«· · • λ nervové tkáně a v nahrazení mozkové tkáně nebo tkáně míchy polymemím hydrogelem popsaným výše. Polymemí hydrogel podle tohoto vynálezu je rovněž užitečný pro rekonstituci neuronálních okruhů spojených s axonálními drahami v centrálním nervovém systému ve vyvíjejícím se nebo dospělém organismu. Lze jmenovat, například, septo-hipokampální okruhy, které se podílejí na funkci paměti, která je poškozena například při Alzheimerově chorobě, nebo nigro-štriatální okruhy podílející se na Parldnsonově chorobě, nebo Část striata podílející se na Huntingtonově chorobě, nebo hormonálriě/reprodukční dysfunkce zahrnuté v hypofyzohypůthalamovém systému. Postup spočívá v chirurgickém odstranění defektní části mozkové tkáně a implantaci gelu podle tohoto vynálezu, výhodně dohromady se štěpem nervových buněk za účelem indukce tvorby nových funkčních axonálních okruhů. Podobně lze léčit malformace, které mají za následek špatnou funkci míšních okruhů (např. spina bifida), a to tak, žě odstraníme abnormálně vytvořenou část orgánu a tuto defektní Část nahradíme neurogelem podle tohoto vynálezu, výhodně spolu se štěpem nervových buněk. Další použití hydrogelu podle tohoto vynálezu spočívá v léčbě optického nervu a periferních nervů tím, že stejným způsobem indukujeme opětný růst axonů uvnitř polymemího hydrogelu podle tohoto vynálezu.
Je třeba říci, že tento vynález není žádným způsobem omezen na výhodná provedení popsaná výše, a že lže uvažovat o modifikacích v rámci ducha a zaměření tohoto vynálezu.
Vynález týká porézních implantovatelných polymerních hýdrogelů pro terapeutické účely, které mohou být například použity pro vnitřní tkáňově náhrady jakéhokoliv parenehymatózniho orgánu, pro hojení zranění, pro regenerace tkání, a obecně pro orgánové reparace, zvláště ve vyvíjejícím se i dospělém nervovém systému, a pro jiné podobné terapie.
·· 4 4 4 4 ·» 9 4 49
4'· 4 4·4 4 9 • ·' » 4 . 4
4'4. » 4 4 *» * »4 • 49 4 · • ♦ 4 4 9 · 4 4 • »1 · ·' «»· 4 44
Vynález je zvláště zaměřen na pólymemí hydrogel, který po implantaci vytvoří porézní matrici, kterou prostoupí biologické tekutiny a molekuly a vytvoří tzv. orgahoidní hydrogelj který je progresivně začleněný do hostitelské tkáně následným prorůstáním krevních cév a tkáně. Vynález se rovněž týká způsobu zavádění, živých tkáňových buněk, prekurzorových buněk nebo geneticky modifikovaných buněk do takového polymemího hydrogelů, aby se vytvořily biohybridní materiály, které lze použít v trojrozměrných tkáňových kulturách nebo pro tkáňové rekonstrukce. Vynález še dále týká způsobu výroby polymemího hydrogelů podle tohoto vynálezu a biohybridních materiálů vyrobených způsobem uvedeným výše. Konečně se vynález týká způsobu léčby poškozených Částí centrálního nervového systému, zvláště míchy á optického nervu, nebo periferních nervů, nebo jiných tkání pomocí implantace polymerového hydrogelů nebo biohybridních materiálů podle tohoto vynálezu do těchto tkání.
Claims (24)
- PATENTOVÉ NÁROKY1. Polymemí hydrogel pro terapeutické použití, vyznačující se t í m, že je kopolymerem (a) N-substituovaného metakrylamidu nebo akrylamidu, (b) agens vytvářejícího ’ příčné vazby a (c) kopůlymerizovatelného materiálu vybraného ze Skupiny zahrnující komplexní cukr, cukerný derivát, tkáňově adhezní peptid a konjugát polymeru s protilátkami proti derivátům lipidů, uvedený polymerrií hydrogel je heterogenní, pružně deformovatelný a má rovnovážný obsah vody alespoň 80 %.
- 2. Polymemí hydrogel podle nároku 1, v y z n a č u j í c í se t í m, že (a) N-substituovaný metakrylamid nebo akrylamid jsou vybrány ze skupiny zahrnující N-monoalkyl- a'N,Ndialkylmetakrylamidý a akrylamidy, (b) uvedené agens vytvářející příčné vazby zahrnuje akrylamid nebo jeho prekursory, a (c) uvedený polymerizovatelný materiál je cukr, který je vybrán ze skupiny obsahující glukosamin, N-acetylglukosamín a N-ačetylderivát kyseliny něuraminové.
- 3. Polymemí hydrogel podle nároku 2, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedený .alkyl obsahuje 1 až 2 atomy uhlíku.
- 4. Polymemí hydrogel podle nároku 3, v y z n a Č u j í c í se t í m, že uvedený alkyl je hydroxyalkylovýnebo amihoalkylový radikál.
- 5. Polymemí hydrogel podle nároku 1,vyznačující se t í m, že uvedený rovnovážný obsah vody je alespoň 96 %.i. i *··«*«·*« ·>* ···«»» * · ·» ··« * • ·> · · · · * * « ··· « *· · «· ,*
- 6. Polymemí hydrogel podle nároku 1, vyznačující se t í m, že uvedený hydrogel obsahuje kovalentní příčné vazby, je v podstatě netransparentní a tvoří heterogenní materiál.
- 7, Polymemí hydrogel podle nároku 6, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedený hydrogel vykazuje strukturu jasně oddělených fází zahrnující jednak oblast s relativně hrubou porozitou tvořenou Částicemi polymeru o rozměru 1 až 10 mikrometrů, tam, kde hydrogel má nasedat na hostitelskou tkáň, a oblast s relativně jemnou porozitou, tam, kde se očekává jeho kontakt s vrůstající tkání.
- 8. Polymemí hydrogel podlé nároku 1, v y z n a Č u j í c í se t í m, že má makroporézní strukturu s frakční porozitou alespoň 80 až 90 %, oblastí specifického povrchu alespoň 100 čtverečních metrů na gram, středním průměrem póru přibližně 15 až 35 mikrometrů, pórovým objemem póru měřících alespoň 10 mikrometrů rovnajícím se 100 % frakční porozity hydrogelu a hypěrporézním charakterem v rozsahu 20 až 30 mikrometrů.
- 9. Způsob přípravy polymemího hydrogelu pro terapeutické použití, vyznačující se t í m, že zahrnuje (a) rozpuštění agens vytvářejícího příčné vazby v solventu s volným iniciátorem radikálové polymerizace tak, že sé vytvoří roztok, (b) přidání N-substituovaného metakrylamidu nebo akrylamidu k roztoku získanému v kroku (a) tak, že se vytvoří směs, (c) přidání roztoku polymerizovatélňého materiálu zahrnujícího komplexní cukr, derivát komplexního cukru, tkáňově adhezní peptid nebo konjugát polymeru s protilátkami proti derivátům lipidů ke směsi získané v kroku (b) za podmínek, které umožní vznik uvedeného polymemího gelu.·♦ « φ * » • »«·· * φ ·· φ φ
» * • φ Φ · * * • • ·· ♦ · • Φ'. Φ • • Φ·Φ « Φ • · Φ Φ φ • · ♦ · · • ·- ΦΦ • Φ - 10. Způsob podle nároku 9, v y z n a č u j í c i se t í m, že zahrnuje rozpuštění azobišizobutyronitrilu a métylenbisakrylamidu v uvedeném rozpouštědle tak, aby došlo k vytvoření roztoku, smíchání tohoto roztoku s N-2-(hydroxypropyl)metakrylamidem, přidání glukosaminu nebo N-acetylglukosaminu nebo N-acetylneuraminové kyseliny a odstranění nízkomolekulárních reziduálních produktů a stop iniciátoru z výsledného roztoku.
- 11. Způsob podle nároku 9, vyznačující se tím, že uvedené agens tvořící příčné vazby je vybráno ze skupiny zahrnující akrylamid, jeho prekurzory a agens vytvářející příčné vazby na bázi divinylu.
- 12. Způsob podle nároku 9, v y z n a č u j í c í se t í m, že uvedený iniciátor pólymerizace j e vybrán ze skupiny zahrnující azobisizobutyronitril, peroxidy, kyselinu askorbovou, peřoxysulfáty a substituované azosloučeniny, a je používán v koncentraci. 0,01 až 2 hmotnostní % vzhledem k vytvářenému polymemímu hydrogelu.
- 13. Způsob podle nároku 12, v y z n a č u j i c í se t í m, že uvedený roztok polymerizovatelného materiálu obsahuje komplexní cukr. p
- 14. Způsob podle nároku 13, v y z η a č u j í c í se t í m, že uvedený komplexní cukr je vybrán ze skupiny zahrnující glukosamin, N-acetylglukosamin, N-acetylderiváty kyseliny neuraminově, kyselinu polysialovou a galaktosen.
- 15 Způsob podle nároku 12, v y z n a č u j í c i se t í m, že uvedený roztok polymerizovatelného materiálu obsahuje tkáňově adhezní peptid.·· * » · · » • to · , · 4 44' ·····*» 4 4 4.• «Ι'ι 4 • 44 4 44 44 • · 4 • 4 444 44 4 to4 4
- 16. Způsob podle nároku 12, vyznačující se t í m, že uvedený roztok polymerizovatelného materiálu obsahuje konjugát polymeru s protilátkami proti derivátům lipidů.i
- 17. Způsob podle nároku 12, v y znač u j í č í s e t í m, že se provádí při teplotě 40 až 60 stupňů Celsia po dobu 12 hodin.
- 18. Způsob podle nároku 9, v y z n a č u j í c í se t í m, že zahrnuje přidání živých tkáňových buněk nebo geneticky modifikovaných buněk k produktu, získanému v kroku (c) a uskutečnění polymerizace uvedených buněk s daným produktem.
- 19, Kopolymerizovaný polymemí hydrogel podle nároku 1, v y z n a Č u j í c í se t í m, že živé tkáňové buňky nebo geneticky modifikované buňky jsou s ním polymerizovány.
- 20. Způsob léčby poškozených mozkových tkání nebo míchy, vyznačující se t í m, že zahrnuje odstranění uvedených poškozených mozkových tkání nebo míchy ů člověka nebo zvířete, a nahrazení poškozených mozkových tkání nebo míchy polymerním hydrogelem podle nároku 1.
- 21. Kqpolytnemí hydrogel pro terapeutické použití, vyznačující s e t í m, že uvedený hydrogel je kopolymerem (a) N-substituovaného metakrylamidu nebo akrylamidu, (b) agens vytvářejícího příčné vazby, a (c) polymerizovatelného, tkáňově adhezního materiálu.·· *4 4 4 • 44 4 • «ι44 4 4·. · 4 · 4 4 9« • 4 ·· 4 4 44 • 4 4 41 4 44 4 4 44 4 4 4 4 4 44 4·· «4 4 ' 4 4
- 22. Způsob léčby jizvy a poškozené nebo funkčně defektní tkáně u savců, vyznačující se t í m, že zahrnuje odstranění uvedené jizvy a poškozené nebo funkčně poškozené tkáně, a jejich nahrazení polymemím hydrogelem podle nároku 1.I
- 23. Způsob podle nároku 22, v y z n a č u j ící se tím, že se použije pro rekonstituci neuronových okruhů, které jsou spojeny s axonálními drahami v centrálním nervovém systému.
- 24. Způsob podle nároku 22, v y z n a č u j í c í se t í m, že se použije pro léčbu traumatických poraněni optického nervu a periferních nervů.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/731,484 US5863551A (en) | 1996-10-16 | 1996-10-16 | Implantable polymer hydrogel for therapeutic uses |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ187698A3 true CZ187698A3 (cs) | 1998-11-11 |
Family
ID=24939700
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ981876A CZ187698A3 (cs) | 1996-10-16 | 1997-10-15 | Implantovatelný hydrogel z akrylamidového kopolymeru pro terapeutické účely |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5863551A (cs) |
| EP (1) | EP0929323B1 (cs) |
| JP (1) | JP3542810B2 (cs) |
| KR (1) | KR100377520B1 (cs) |
| CN (1) | CN1211194A (cs) |
| AT (1) | ATE284717T1 (cs) |
| AU (1) | AU744666B2 (cs) |
| BR (1) | BR9706835A (cs) |
| CA (1) | CA2240721C (cs) |
| CZ (1) | CZ187698A3 (cs) |
| DE (1) | DE69731959T2 (cs) |
| HU (1) | HUP9902027A3 (cs) |
| IL (1) | IL124894A (cs) |
| NZ (1) | NZ330664A (cs) |
| PL (1) | PL327454A1 (cs) |
| RU (1) | RU2198686C2 (cs) |
| SK (1) | SK79698A3 (cs) |
| WO (1) | WO1998016266A1 (cs) |
Families Citing this family (116)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6642363B1 (en) * | 1996-09-19 | 2003-11-04 | The Regents Of The University Of Michigan | Polymers containing polysaccharides such as alginates or modified alginates |
| US8003705B2 (en) * | 1996-09-23 | 2011-08-23 | Incept Llc | Biocompatible hydrogels made with small molecule precursors |
| US6566406B1 (en) * | 1998-12-04 | 2003-05-20 | Incept, Llc | Biocompatible crosslinked polymers |
| US20030008396A1 (en) * | 1999-03-17 | 2003-01-09 | Ku David N. | Poly(vinyl alcohol) hydrogel |
| AU745302B2 (en) | 1998-05-23 | 2002-03-21 | Bieniarz, Andre | Method of treatment for premature rupture of membranes in pregnancy (PROM) |
| US6165193A (en) | 1998-07-06 | 2000-12-26 | Microvention, Inc. | Vascular embolization with an expansible implant |
| US6117293A (en) * | 1998-07-31 | 2000-09-12 | Biowhittaker Molecular Applications, Inc. | Method for producing hydrophilic monomers and uses thereof |
| US6464850B1 (en) * | 1998-07-31 | 2002-10-15 | Biowhittaker Molecular Applications, Inc. | Method for producing hydrophilic monomers and uses thereof |
| US6818018B1 (en) | 1998-08-14 | 2004-11-16 | Incept Llc | In situ polymerizable hydrogels |
| US6511650B1 (en) * | 1999-04-09 | 2003-01-28 | The Regents Of The University Of Michigan | Preparing porous hydrogel products |
| US6264695B1 (en) * | 1999-09-30 | 2001-07-24 | Replication Medical, Inc. | Spinal nucleus implant |
| WO2001043726A1 (en) * | 1999-12-16 | 2001-06-21 | Trident Technologies, Llc | System and method for extended delivery of a therapeutic agent with its receptor loading dose |
| AU2001281906A1 (en) * | 2000-06-27 | 2002-01-08 | Bia Separations D.O.O. | A chromatography material and a process of manufacturing that material |
| US6638312B2 (en) * | 2000-08-04 | 2003-10-28 | Depuy Orthopaedics, Inc. | Reinforced small intestinal submucosa (SIS) |
| US8366787B2 (en) * | 2000-08-04 | 2013-02-05 | Depuy Products, Inc. | Hybrid biologic-synthetic bioabsorbable scaffolds |
| US7503936B2 (en) * | 2000-08-30 | 2009-03-17 | Warsaw Orthopedic, Inc. | Methods for forming and retaining intervertebral disc implants |
| US6620196B1 (en) | 2000-08-30 | 2003-09-16 | Sdgi Holdings, Inc. | Intervertebral disc nucleus implants and methods |
| US20020026244A1 (en) * | 2000-08-30 | 2002-02-28 | Trieu Hai H. | Intervertebral disc nucleus implants and methods |
| US7204851B2 (en) * | 2000-08-30 | 2007-04-17 | Sdgi Holdings, Inc. | Method and apparatus for delivering an intervertebral disc implant |
| CA2549320A1 (en) | 2000-08-30 | 2002-03-07 | Sdgi Holdings, Inc. | Intervertebral disc nucleus implants and methods |
| US6878384B2 (en) | 2001-03-13 | 2005-04-12 | Microvention, Inc. | Hydrogels that undergo volumetric expansion in response to changes in their environment and their methods of manufacture and use |
| KR100444944B1 (ko) * | 2001-05-24 | 2004-08-18 | 선바이오(주) | 생체 접착제용 폴리에틸렌글리콜 수화젤 |
| EP1416888A4 (en) * | 2001-07-16 | 2007-04-25 | Depuy Products Inc | DEVICE AND METHOD FOR REGENERATING THE MENISCUS |
| US8025896B2 (en) * | 2001-07-16 | 2011-09-27 | Depuy Products, Inc. | Porous extracellular matrix scaffold and method |
| AU2002316694B2 (en) | 2001-07-16 | 2007-09-06 | Depuy Products, Inc. | Hybrid biologic/synthetic porous extracellular matrix scaffolds |
| JP4302515B2 (ja) * | 2001-07-16 | 2009-07-29 | デピュイ・プロダクツ・インコーポレイテッド | 単体型外科装置および方法 |
| US8012205B2 (en) * | 2001-07-16 | 2011-09-06 | Depuy Products, Inc. | Cartilage repair and regeneration device |
| JP4197158B2 (ja) * | 2001-07-16 | 2008-12-17 | デピュイ・プロダクツ・インコーポレイテッド | 天然に発生する生物学的に誘導されている材料による装置 |
| US7819918B2 (en) * | 2001-07-16 | 2010-10-26 | Depuy Products, Inc. | Implantable tissue repair device |
| US7201917B2 (en) | 2001-07-16 | 2007-04-10 | Depuy Products, Inc. | Porous delivery scaffold and method |
| US20040047843A1 (en) * | 2002-02-12 | 2004-03-11 | Uab Research Foundation | Method for spinal cord reconnection |
| AU2003216379A1 (en) * | 2002-02-22 | 2003-09-09 | Control Delivery Systems, Inc. | Method for treating otic disorders |
| JP2005526879A (ja) * | 2002-03-11 | 2005-09-08 | ファースト ウォーター リミテッド | 吸収性ハイドロゲル |
| IL163941A0 (en) * | 2002-04-10 | 2005-12-18 | Obschestvo S Ogranichennoy Otv | Polyfunctional biocompatible hydrogel and method for the production thereof |
| US20040166169A1 (en) * | 2002-07-15 | 2004-08-26 | Prasanna Malaviya | Porous extracellular matrix scaffold and method |
| US20060034807A1 (en) * | 2002-08-09 | 2006-02-16 | Ottawa Health Research Institute | Innervated artificial tissues and uses thereof |
| US7569222B2 (en) * | 2002-11-18 | 2009-08-04 | Woerly Stephane | Hydrogel membrane composition and use thereof |
| US20040161444A1 (en) * | 2002-12-18 | 2004-08-19 | The Regents Of The University Of California | Biocompatible hydrogel bone-like composites |
| WO2004071336A2 (en) * | 2003-02-06 | 2004-08-26 | The General Hospital Corporation D/B/A Massachusetts General Hospital | Hydrophilic fibrous capsule resistant prosthetic device |
| US7785769B2 (en) * | 2003-07-25 | 2010-08-31 | The United States of America as reprsented by the Secretary of the Navy | Immobilization of oligonucleotides and proteins in sugar-containing hydrogels |
| WO2005077304A1 (en) * | 2004-02-06 | 2005-08-25 | Georgia Tech Research Corporation | Load bearing biocompatible device |
| WO2005077013A2 (en) * | 2004-02-06 | 2005-08-25 | Georgia Tech Research Corporation | Surface directed cellular attachment |
| US20050249772A1 (en) * | 2004-05-04 | 2005-11-10 | Prasanna Malaviya | Hybrid biologic-synthetic bioabsorbable scaffolds |
| US7569233B2 (en) * | 2004-05-04 | 2009-08-04 | Depuy Products, Inc. | Hybrid biologic-synthetic bioabsorbable scaffolds |
| US20050278025A1 (en) * | 2004-06-10 | 2005-12-15 | Salumedica Llc | Meniscus prosthesis |
| US7303074B2 (en) * | 2004-09-22 | 2007-12-04 | Dombrowski Trudy M | Foldable organizer device |
| US20070142326A1 (en) * | 2004-09-30 | 2007-06-21 | Youe-Kong Shue | Treatment of a condition in a mammal with administration of aminosugar and uses thereof |
| US20060089719A1 (en) * | 2004-10-21 | 2006-04-27 | Trieu Hai H | In situ formation of intervertebral disc implants |
| US7313829B1 (en) * | 2004-10-29 | 2008-01-01 | Payload Systems, Inc. | Sealing device for body suit and sealing method using hydrogels |
| US7513866B2 (en) * | 2004-10-29 | 2009-04-07 | Depuy Products, Inc. | Intestine processing device and associated method |
| US7354627B2 (en) * | 2004-12-22 | 2008-04-08 | Depuy Products, Inc. | Method for organizing the assembly of collagen fibers and compositions formed therefrom |
| KR20080036217A (ko) * | 2005-08-26 | 2008-04-25 | 신세스 게엠바하 | 수핵용 수화겔 풍선 보철물 |
| WO2007043973A1 (en) * | 2005-10-13 | 2007-04-19 | Dso National Laboratories | Method of enhancing a fluorescent signal |
| US8067237B2 (en) | 2005-12-13 | 2011-11-29 | President And Fellows Of Harvard College | Scaffolds for cell transplantation |
| BRPI0711784B8 (pt) | 2006-06-15 | 2021-06-22 | Microvention Inc | dispositivo de embolização construído de polímero expansível e seu método de preparação |
| US8066750B2 (en) | 2006-10-06 | 2011-11-29 | Warsaw Orthopedic, Inc | Port structures for non-rigid bone plates |
| US7871440B2 (en) * | 2006-12-11 | 2011-01-18 | Depuy Products, Inc. | Unitary surgical device and method |
| EP2149581A4 (en) * | 2007-04-20 | 2010-04-14 | Uchrezhdenie Rossiiskoi Akadem | MONOMER AND COMPOSITION FOR PREPARING A LOW-PROPER HYDROGEL AND / OR A HYDROGEL WITH A LOW CROSS-LINKING CONTENT, HYDROGEL, AND BIOCHIP BASED THEREFROM |
| WO2008130068A1 (en) * | 2007-04-23 | 2008-10-30 | Modern Cell & Tissue Technologies Inc. | Method for preparing a porous polymer scaffold using dry ice |
| US8067028B2 (en) * | 2007-08-13 | 2011-11-29 | Confluent Surgical Inc. | Drug delivery device |
| WO2009086208A2 (en) | 2007-12-21 | 2009-07-09 | Microvention, Inc. | Hydrogel filaments for biomedical uses |
| WO2009102465A2 (en) | 2008-02-13 | 2009-08-20 | President And Fellows Of Harvard College | Continuous cell programming devices |
| WO2009108760A2 (en) | 2008-02-26 | 2009-09-03 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Dendritic macroporous hydrogels prepared by crystal templating |
| US8586086B2 (en) | 2008-05-29 | 2013-11-19 | Politecnico Di Milano | Hydrogel capable of containing and conveying cells |
| WO2010062734A1 (en) * | 2008-11-03 | 2010-06-03 | University Of Maryland, Baltimore | Blood coagulation inducing polymer hydrogel |
| FR2942408B1 (fr) | 2009-02-24 | 2012-01-27 | Stephane Woerly | Hydrogel heterogene hybride et son utilisation therapeutique |
| US10639396B2 (en) | 2015-06-11 | 2020-05-05 | Microvention, Inc. | Polymers |
| FR2945293B1 (fr) * | 2009-05-11 | 2011-06-17 | Teoxane | Procede de preparation d'un gel reticule. |
| BR112012009287A2 (pt) | 2009-10-26 | 2017-06-06 | Microvention Inc | dispositivo de embolização feito de polímero expansível |
| AU2011311904B2 (en) | 2010-10-06 | 2016-02-25 | President And Fellows Of Harvard College | Injectable, pore-forming hydrogels for materials-based cell therapies |
| US9095558B2 (en) | 2010-10-08 | 2015-08-04 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anti-adhesive barrier membrane using alginate and hyaluronic acid for biomedical applications |
| WO2012048283A1 (en) | 2010-10-08 | 2012-04-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | One-step processing of hydrogels for mechanically robust and chemically desired features |
| US11291483B2 (en) | 2010-10-20 | 2022-04-05 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants |
| US20120101593A1 (en) * | 2010-10-20 | 2012-04-26 | BIOS2 Medical, Inc. | Implantable polymer for bone and vascular lesions |
| US11058796B2 (en) | 2010-10-20 | 2021-07-13 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants, and novel composite structures which may be used for medical and non-medical applications |
| WO2015095745A1 (en) | 2010-10-20 | 2015-06-25 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants, and novel composite structures which may be used for medical and non-medical applications |
| US11484627B2 (en) | 2010-10-20 | 2022-11-01 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants, and novel composite structures which may be used for medical and non-medical applications |
| US11207109B2 (en) | 2010-10-20 | 2021-12-28 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants, and novel composite structures which may be used for medical and non-medical applications |
| US9320601B2 (en) | 2011-10-20 | 2016-04-26 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants |
| US10525169B2 (en) | 2010-10-20 | 2020-01-07 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants, and novel composite structures which may be used for medical and non-medical applications |
| WO2012145431A2 (en) | 2011-04-18 | 2012-10-26 | Microvention, Inc. | Embolic devices |
| ES2878089T3 (es) * | 2011-04-28 | 2021-11-18 | Harvard College | Armazones tridimensionales macroscópicos preformados inyectables para administración mínimamente invasiva |
| US9675561B2 (en) | 2011-04-28 | 2017-06-13 | President And Fellows Of Harvard College | Injectable cryogel vaccine devices and methods of use thereof |
| US9155543B2 (en) | 2011-05-26 | 2015-10-13 | Cartiva, Inc. | Tapered joint implant and related tools |
| EP2714073B1 (en) | 2011-06-03 | 2021-03-10 | President and Fellows of Harvard College | In situ antigen-generating cancer vaccine |
| RU2521194C2 (ru) * | 2011-11-16 | 2014-06-27 | Общество с ограниченной ответственностью предприятие "Репер" | Матрица для клеточной трансплантологии |
| CN102600067B (zh) * | 2012-04-10 | 2013-08-21 | 武汉大学 | 含氨基葡萄糖单元的糖肽水凝胶的制备方法及其在制备术后疤痕抑制剂上的应用 |
| DK2838515T3 (da) | 2012-04-16 | 2020-02-24 | Harvard College | Mesoporøse siliciumdioxidsammensætninger til modulering af immunresponser |
| DE102012019984A1 (de) * | 2012-10-11 | 2014-04-17 | Leibniz-Institut für Oberflächenmodifizierung e.V. | Verfahren zur Herstellung von porösen Gelen mit inkorporierten katalytisch oder biologisch aktiven Materialien sowie damit hergestellte Gele und deren Verwendung |
| US11565027B2 (en) | 2012-12-11 | 2023-01-31 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Hydrogel membrane for adhesion prevention |
| US10010609B2 (en) | 2013-05-23 | 2018-07-03 | 206 Ortho, Inc. | Method and apparatus for treating bone fractures, and/or for fortifying and/or augmenting bone, including the provision and use of composite implants |
| CN110433326A (zh) | 2014-04-29 | 2019-11-12 | 微仙美国有限公司 | 包含活性剂的聚合物 |
| US10682400B2 (en) | 2014-04-30 | 2020-06-16 | President And Fellows Of Harvard College | Combination vaccine devices and methods of killing cancer cells |
| US9840553B2 (en) | 2014-06-28 | 2017-12-12 | Kodiak Sciences Inc. | Dual PDGF/VEGF antagonists |
| US9947242B2 (en) | 2014-07-22 | 2018-04-17 | Synaptive Medical (Barbados) Inc. | Method for producing anatomical phantoms with constituents having variable densities |
| CA2958155A1 (en) | 2014-08-14 | 2016-02-18 | The Secant Group, Llc | Composition, methods and devices useful for manufacturing of implantable articles |
| EP3250250A4 (en) | 2015-01-30 | 2019-05-22 | President and Fellows of Harvard College | PERITUMORAL AND INTRATUMORAL MATERIALS FOR CANCER THERAPY |
| AU2016243659B2 (en) | 2015-03-31 | 2020-04-23 | Cartiva, Inc. | Hydrogel implants with porous materials and methods |
| CA2981064C (en) | 2015-03-31 | 2024-01-02 | Cartiva, Inc. | Carpometacarpal (cmc) implants and methods |
| JP7094533B2 (ja) | 2015-04-10 | 2022-07-04 | プレジデント アンド フェローズ オブ ハーバード カレッジ | 免疫細胞捕捉デバイスおよびその製造および使用方法 |
| AU2016248062B2 (en) | 2015-04-14 | 2020-01-23 | Cartiva, Inc. | Tooling for creating tapered opening in tissue and related methods |
| RU2594427C1 (ru) * | 2015-06-10 | 2016-08-20 | Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт элементоорганических соединений им. А.Н. Несмеянова Российской академии наук (ИНЭОС РАН) | Композиция для формирования макропористого носителя, используемого при трехмерном культивировании клеток животных или человека, и способ получения указанного носителя |
| IL260323B1 (en) | 2015-12-30 | 2024-09-01 | Kodiak Sciences Inc | Antibodies and their conjugates |
| DE102016000458A1 (de) * | 2016-01-12 | 2017-07-27 | Friedrich-Schiller-Universität Jena | Poröse Glycopolymer-funktionalisierte Cryogele und deren Verwendung |
| CN115531609A (zh) | 2016-02-06 | 2022-12-30 | 哈佛学院校长同事会 | 重塑造血巢以重建免疫 |
| EP3484448A4 (en) | 2016-07-13 | 2020-04-01 | President and Fellows of Harvard College | MIMETIC SCAFFOLDS OF CELLS HAVING ANTIGEN AND METHODS OF PREPARING AND USING THEM |
| WO2018165327A1 (en) | 2017-03-08 | 2018-09-13 | Alafair Biosciences, Inc. | Hydrogel medium for the storage and preservation of tissue |
| CN107096065B (zh) * | 2017-04-05 | 2019-11-15 | 浙江大学 | 含多聚唾液酸复合纳米纤维膜及制备方法和应用 |
| CN108187137A (zh) * | 2018-02-27 | 2018-06-22 | 崔友军 | 一种可生物降解神经修复支架的制备方法 |
| US12071476B2 (en) | 2018-03-02 | 2024-08-27 | Kodiak Sciences Inc. | IL-6 antibodies and fusion constructs and conjugates thereof |
| PL241064B1 (pl) | 2018-10-01 | 2022-08-01 | Dolniak Blazej | Sposób wytwarzania lepko-sprężystego żelu uzupełniającego maź stawową i lepko-sprężysty żel uzupełniający maź stawową |
| US11912784B2 (en) | 2019-10-10 | 2024-02-27 | Kodiak Sciences Inc. | Methods of treating an eye disorder |
| EP4084802A4 (en) * | 2020-01-03 | 2024-03-13 | Repertoire Immune Medicines, Inc. | COMPOSITIONS OF HYDROGELS AND METHODS OF USE THEREOF |
| FR3108260B1 (fr) * | 2020-03-17 | 2024-01-05 | Neurobiomat | Hydrogel hétérogène hybride, procédé de fabrication et utilisation comme implant de comblement non-dégradable in-situ |
| CN113599566B (zh) * | 2021-08-30 | 2022-10-25 | 重庆市沙坪坝区中智医谷研究院 | 一种疏水性高分子止血修复材料、其制备方法及应用 |
| CN113729654B (zh) * | 2021-09-14 | 2023-03-28 | 华中科技大学 | 术后皮瓣与重建肢体血流状态检测表皮贴附式传感系统 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8418772D0 (en) * | 1984-07-24 | 1984-08-30 | Geistlich Soehne Ag | Chemical substances |
| GB8422950D0 (en) * | 1984-09-11 | 1984-10-17 | Warne K J | Hydrogel |
| US4902295A (en) * | 1985-08-26 | 1990-02-20 | Hana Biologics, Inc. | Transplantable artificial tissue |
-
1996
- 1996-10-16 US US08/731,484 patent/US5863551A/en not_active Expired - Lifetime
-
1997
- 1997-10-15 JP JP51786898A patent/JP3542810B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1997-10-15 NZ NZ330664A patent/NZ330664A/en unknown
- 1997-10-15 DE DE69731959T patent/DE69731959T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1997-10-15 CZ CZ981876A patent/CZ187698A3/cs unknown
- 1997-10-15 KR KR10-1998-0704544A patent/KR100377520B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1997-10-15 BR BR9706835-7A patent/BR9706835A/pt not_active IP Right Cessation
- 1997-10-15 AT AT97944663T patent/ATE284717T1/de not_active IP Right Cessation
- 1997-10-15 HU HU9902027A patent/HUP9902027A3/hu unknown
- 1997-10-15 CA CA002240721A patent/CA2240721C/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-15 PL PL97327454A patent/PL327454A1/xx unknown
- 1997-10-15 EP EP97944663A patent/EP0929323B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1997-10-15 CN CN97191715A patent/CN1211194A/zh active Pending
- 1997-10-15 AU AU46126/97A patent/AU744666B2/en not_active Ceased
- 1997-10-15 SK SK796-98A patent/SK79698A3/sk unknown
- 1997-10-15 RU RU98113303/14A patent/RU2198686C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1997-10-15 WO PCT/CA1997/000766 patent/WO1998016266A1/en not_active Application Discontinuation
- 1997-10-15 IL IL12489497A patent/IL124894A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2000503884A (ja) | 2000-04-04 |
| SK79698A3 (en) | 1999-01-11 |
| IL124894A (en) | 2004-06-20 |
| NZ330664A (en) | 1999-10-28 |
| AU744666B2 (en) | 2002-02-28 |
| DE69731959D1 (de) | 2005-01-20 |
| HUP9902027A2 (hu) | 1999-10-28 |
| CA2240721A1 (en) | 1998-04-23 |
| AU4612697A (en) | 1998-05-11 |
| US5863551A (en) | 1999-01-26 |
| IL124894A0 (en) | 1999-01-26 |
| JP3542810B2 (ja) | 2004-07-14 |
| CN1211194A (zh) | 1999-03-17 |
| RU2198686C2 (ru) | 2003-02-20 |
| EP0929323B1 (en) | 2004-12-15 |
| CA2240721C (en) | 2007-01-09 |
| BR9706835A (pt) | 1999-12-28 |
| KR19990072185A (ko) | 1999-09-27 |
| ATE284717T1 (de) | 2005-01-15 |
| HUP9902027A3 (en) | 2001-04-28 |
| DE69731959T2 (de) | 2006-04-13 |
| WO1998016266A1 (en) | 1998-04-23 |
| KR100377520B1 (ko) | 2003-06-09 |
| EP0929323A1 (en) | 1999-07-21 |
| PL327454A1 (en) | 1998-12-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| AU744666B2 (en) | Implantable acrylamide copolymer hydrogel for therapeutic uses | |
| US7601525B2 (en) | Alginate gel scaffold having a plurality of continuous parallel microtubular copper capillaries | |
| Woerly et al. | Neural tissue engineering: from polymer to biohybrid organs | |
| EP0772466B1 (en) | Compositions and methods for a bioartificial extracellular matrix | |
| EP0707498B1 (en) | Implantable prosthesis, kit and device for manufacturing the same | |
| Griffith et al. | Regenerative approaches as alternatives to donor allografting for restoration of corneal function | |
| JP2019510753A (ja) | マイクロｒｎａ遺伝子を介した新規な組織工学的な神経構築及びその神経欠陥修復における使用 | |
| JP2004535836A (ja) | 架橋ヒアルロン酸−ラミニンゲル並びに細胞培養及び医療用移植組織におけるその使用 | |
| Woerly et al. | Cultured rat neuronal and glial cells entrapped within hydrogel polymer matrices: a potential tool for neural tissue replacement | |
| Sipehia et al. | Enhanced attachment and growth of human endothelial cells derived from umbilical veins on ammonia plasma modified surfaces of PTFE and ePTFE synthetic vascular graft biomaterials | |
| Giannetti et al. | Acrylic hydrogel implants after spinal cord lesion in the adult rat | |
| WO2003026489A2 (en) | Biopolymer and biopolymer-cell compositions for nerve tissue repair | |
| KR102194155B1 (ko) | 온도 감응성 폴리머가 접합된 홍합 접착 단백질을 포함하는 온도 감응성 생체 소재 | |
| JPH1147258A (ja) | ゼラチンとコラーゲンとを含有する医用基材 | |
| KR101909328B1 (ko) | 조직 재생 컨스트럭트 및 조직 재생 컨스트럭트의 제조 방법 | |
| JP2003126236A (ja) | 損傷された眼球組織の再生のための生分解性高分子から製造された多孔性支持体 | |
| Woerly et al. | Synthetic polymer matrices for neural cell transplantation | |
| RU2521194C2 (ru) | Матрица для клеточной трансплантологии | |
| Thanos et al. | On the use of hydrogels in cell encapsulation and tissue engineering systems | |
| MXPA98004836A (es) | Hidrogel de copolimero de acrilamida implantablepara usos terapeuticos | |
| KR100231279B1 (ko) | 치주조직을 복원하기 위한 골아세포 이식용 조직성장인자를 함유한 생분해성 폴리사카라이드 스폰지제제 | |
| Stevanovic et al. | Biomaterials and scaffolds for cell replacement therapy | |
| KR20030006787A (ko) | 트리칼슘포스페이트를 함유한 골대체제용 키토산 비드 | |
| Stopek et al. | Opportunities for axon repair in the CNS: use of microglia and biopolymer compositions | |
| No | BERNICE WRIGHT* AND CHE J. CONNON |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PD00 | Pending as of 2000-06-30 in czech republic |