CZ125994A3 - Biologically degradable polyester micro-particle pharmaceutical preparations injectable in bird's eggs and process for preparing thereof - Google Patents
Biologically degradable polyester micro-particle pharmaceutical preparations injectable in bird's eggs and process for preparing thereof Download PDFInfo
- Publication number
- CZ125994A3 CZ125994A3 CZ941259A CZ125994A CZ125994A3 CZ 125994 A3 CZ125994 A3 CZ 125994A3 CZ 941259 A CZ941259 A CZ 941259A CZ 125994 A CZ125994 A CZ 125994A CZ 125994 A3 CZ125994 A3 CZ 125994A3
- Authority
- CZ
- Czechia
- Prior art keywords
- microparticles
- egg
- somatogenin
- agent
- polyester
- Prior art date
Links
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 title claims abstract description 190
- 229920000728 polyester Polymers 0.000 title claims abstract description 23
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 5
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 title abstract description 83
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 title 1
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 76
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 38
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 31
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims abstract description 27
- 101710142969 Somatoliberin Proteins 0.000 claims abstract description 17
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000000095 Growth Hormone-Releasing Hormone Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000013508 migration Methods 0.000 claims abstract description 8
- 230000005012 migration Effects 0.000 claims abstract description 8
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims abstract description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims abstract description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 5
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims abstract description 4
- 102000038461 Growth Hormone-Releasing Hormone Human genes 0.000 claims abstract 6
- 229920000747 poly(lactic acid) Polymers 0.000 claims description 62
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims description 57
- 229920000954 Polyglycolide Polymers 0.000 claims description 54
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 33
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 20
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Polymers OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 claims description 13
- 229920000229 biodegradable polyester Polymers 0.000 claims description 9
- 239000004622 biodegradable polyester Substances 0.000 claims description 9
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 8
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 8
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 7
- 239000007972 injectable composition Substances 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 abstract description 48
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 37
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 abstract description 36
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 abstract description 14
- 230000012447 hatching Effects 0.000 abstract description 13
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 abstract description 10
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 7
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 abstract description 4
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 abstract description 2
- 239000012867 bioactive agent Substances 0.000 abstract 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 81
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 78
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 75
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 65
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 52
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 52
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 25
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 24
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000000047 product Substances 0.000 description 21
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 20
- 239000000463 material Substances 0.000 description 18
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 17
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 description 15
- 230000008569 process Effects 0.000 description 14
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 description 14
- 239000012591 Dulbecco’s Phosphate Buffered Saline Substances 0.000 description 13
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 13
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 12
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 12
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 12
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 11
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 11
- 102100022831 Somatoliberin Human genes 0.000 description 11
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 11
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 11
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 238000000935 solvent evaporation Methods 0.000 description 11
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 10
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 9
- 238000011161 development Methods 0.000 description 9
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 9
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 9
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 9
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 8
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 8
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 8
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 8
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 8
- 239000005297 pyrex Substances 0.000 description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 8
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 8
- 102000018997 Growth Hormone Human genes 0.000 description 7
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 7
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 7
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 7
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 7
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 7
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 7
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 7
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 7
- 229920001610 polycaprolactone Polymers 0.000 description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N Bilirubin Chemical compound N1C(=O)C(C)=C(C=C)\C1=C\C1=C(C)C(CCC(O)=O)=C(CC2=C(C(C)=C(\C=C/3C(=C(C=C)C(=O)N\3)C)N2)CCC(O)=O)N1 BPYKTIZUTYGOLE-IFADSCNNSA-N 0.000 description 6
- PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N [N].NC(N)=O Chemical compound [N].NC(N)=O PNNCWTXUWKENPE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 6
- XNSAINXGIQZQOO-UHFFFAOYSA-N L-pyroglutamyl-L-histidyl-L-proline amide Natural products NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 5
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 5
- 239000000627 Thyrotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 5
- 102400000336 Thyrotropin-releasing hormone Human genes 0.000 description 5
- 101800004623 Thyrotropin-releasing hormone Proteins 0.000 description 5
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 5
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004632 polycaprolactone Substances 0.000 description 5
- XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N protirelin Chemical compound NC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CN=CN1 XNSAINXGIQZQOO-SRVKXCTJSA-N 0.000 description 5
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 5
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 5
- 229940034199 thyrotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 4
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- -1 cholecystocinin Proteins 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 4
- 238000011049 filling Methods 0.000 description 4
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 4
- JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N lactide Chemical compound CC1OC(=O)C(C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 4
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 3
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 3
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 3
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N Cyanamide Chemical compound NC#N XZMCDFZZKTWFGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 241000288147 Meleagris gallopavo Species 0.000 description 2
- 229920001244 Poly(D,L-lactide) Polymers 0.000 description 2
- 102100027467 Pro-opiomelanocortin Human genes 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101000857870 Squalus acanthias Gonadoliberin Proteins 0.000 description 2
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012644 addition polymerization Methods 0.000 description 2
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 2
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N diazinon Chemical compound CCOP(=S)(OCC)OC1=CC(C)=NC(C(C)C)=N1 FHIVAFMUCKRCQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 2
- 230000013020 embryo development Effects 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 2
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 2
- 150000003278 haem Chemical class 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 2
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000003760 magnetic stirring Methods 0.000 description 2
- 239000012457 nonaqueous media Substances 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 239000011236 particulate material Substances 0.000 description 2
- 239000008024 pharmaceutical diluent Substances 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003488 releasing hormone Substances 0.000 description 2
- 238000007142 ring opening reaction Methods 0.000 description 2
- 235000019812 sodium carboxymethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 229920001027 sodium carboxymethylcellulose Polymers 0.000 description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 231100000041 toxicology testing Toxicity 0.000 description 2
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 2
- 210000001325 yolk sac Anatomy 0.000 description 2
- RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 1,4-dioxane-2,5-dione Chemical group O=C1COC(=O)CO1 RKDVKSZUMVYZHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 4511-42-6 Chemical compound C[C@@H]1OC(=O)[C@H](C)OC1=O JJTUDXZGHPGLLC-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 5,5-dimethyl-2,4-dioxo-1,3-oxazolidine-3-carboxamide Chemical compound CC1(C)OC(=O)N(C(N)=O)C1=O QCVGEOXPDFCNHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 52906-92-0 Chemical compound C([C@H](N)C(=O)N[C@H](C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)C(C)C)C1=CC=CC=C1 LVRVABPNVHYXRT-BQWXUCBYSA-N 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N Arg-Asn Chemical compound NC(N)=NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(O)=O JSLGXODUIAFWCF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N Arg-Gln Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102400000748 Beta-endorphin Human genes 0.000 description 1
- 101800005049 Beta-endorphin Proteins 0.000 description 1
- 102400000967 Bradykinin Human genes 0.000 description 1
- 101800004538 Bradykinin Proteins 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000027312 Bursal disease Diseases 0.000 description 1
- MGHKBNIJFYVIRW-UHFFFAOYSA-N C[N+](C)(C)Cl Chemical group C[N+](C)(C)Cl MGHKBNIJFYVIRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100228200 Caenorhabditis elegans gly-5 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100315624 Caenorhabditis elegans tyr-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 description 1
- 101800000414 Corticotropin Proteins 0.000 description 1
- 108010022152 Corticotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 102000012289 Corticotropin-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 239000012892 Dulbecco solution Substances 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102400000921 Gastrin Human genes 0.000 description 1
- 108010052343 Gastrins Proteins 0.000 description 1
- 239000000579 Gonadotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N H-Arg-Pro-Pro-Gly-Phe-Ser-Pro-Phe-Arg-OH Natural products NC(N)=NCCCC(N)C(=O)N1CCCC1C(=O)N1C(C(=O)NCC(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CO)C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CC=2C=CC=CC=2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000581940 Homo sapiens Napsin-A Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N L-Arginyl-L-glutamin-acetat Natural products NC(=N)NCCCC(N)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(O)=O PMGDADKJMCOXHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N Leu-Glu Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)N[C@H](C(O)=O)CCC(O)=O NFNVDJGXRFEYTK-YUMQZZPRSA-N 0.000 description 1
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 101800001751 Melanocyte-stimulating hormone alpha Proteins 0.000 description 1
- 102400001357 Motilin Human genes 0.000 description 1
- 101800002372 Motilin Proteins 0.000 description 1
- 102100027343 Napsin-A Human genes 0.000 description 1
- 108090000189 Neuropeptides Proteins 0.000 description 1
- 241000237988 Patellidae Species 0.000 description 1
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 description 1
- 102100022239 Peroxiredoxin-6 Human genes 0.000 description 1
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 description 1
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 description 1
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 description 1
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 description 1
- 102000005726 Pituitary Hormone-Releasing Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010031037 Pituitary Hormone-Releasing Hormones Proteins 0.000 description 1
- 229920002732 Polyanhydride Polymers 0.000 description 1
- 108010040201 Polymyxins Proteins 0.000 description 1
- 229920001710 Polyorthoester Polymers 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- 102100028255 Renin Human genes 0.000 description 1
- 108090000783 Renin Proteins 0.000 description 1
- 108010056088 Somatostatin Proteins 0.000 description 1
- 102000005157 Somatostatin Human genes 0.000 description 1
- 208000005392 Spasm Diseases 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 101150006914 TRP1 gene Proteins 0.000 description 1
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 1
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 1
- LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N Trp-P-1 Chemical compound N1C2=CC=CC=C2C2=C1C(C)=C(N)N=C2C LVTKHGUGBGNBPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010003205 Vasoactive Intestinal Peptide Proteins 0.000 description 1
- 102400000015 Vasoactive intestinal peptide Human genes 0.000 description 1
- GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N Vasopressin Natural products N1C(=O)C(CC=2C=C(O)C=CC=2)NC(=O)C(N)CSSCC(C(=O)N2C(CCC2)C(=O)NC(CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CC1=CC=CC=C1 GXBMIBRIOWHPDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010004977 Vasopressins Proteins 0.000 description 1
- 102000002852 Vasopressins Human genes 0.000 description 1
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 1
- 230000003187 abdominal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000011759 adipose tissue development Effects 0.000 description 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 1
- 229920003232 aliphatic polyester Polymers 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 108010008355 arginyl-glutamine Proteins 0.000 description 1
- KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N argipressin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N1)=O)N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCN=C(N)N)C(=O)NCC(N)=O)C1=CC=CC=C1 KBZOIRJILGZLEJ-LGYYRGKSSA-N 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- WOPZMFQRCBYPJU-NTXHZHDSSA-N beta-endorphin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CC=1C=CC(O)=CC=1)[C@@H](C)O)[C@@H](C)O)C(C)C)[C@@H](C)O)C1=CC=CC=C1 WOPZMFQRCBYPJU-NTXHZHDSSA-N 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 230000008468 bone growth Effects 0.000 description 1
- QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N bradykinin Chemical compound NC(=N)NCCC[C@H](N)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N1[C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)CCC1 QXZGBUJJYSLZLT-FDISYFBBSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N chembl413654 Chemical compound C([C@H](C(=O)NCC(=O)N[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC=CC=1)C(N)=O)NC(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AOXOCDRNSPFDPE-UKEONUMOSA-N 0.000 description 1
- 210000003837 chick embryo Anatomy 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 229960000258 corticotropin Drugs 0.000 description 1
- IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N corticotropin Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)C1=CC=C(O)C=C1 IDLFZVILOHSSID-OVLDLUHVSA-N 0.000 description 1
- 229940041967 corticotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N corticotropin-releasing hormone (human) Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CO)[C@@H](C)CC)C(C)C)C(C)C)C1=CNC=N1 KLVRDXBAMSPYKH-RKYZNNDCSA-N 0.000 description 1
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 239000002274 desiccant Substances 0.000 description 1
- RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N dicetyl hydrogen phosphate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOP(O)(=O)OCCCCCCCCCCCCCCCC RNPXCFINMKSQPQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940093541 dicetylphosphate Drugs 0.000 description 1
- AGANSXYIEFDATK-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;sodium Chemical compound [Na].ClCCl AGANSXYIEFDATK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 210000003278 egg shell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000969 egg white Anatomy 0.000 description 1
- 235000014103 egg white Nutrition 0.000 description 1
- 229920001971 elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000007720 emulsion polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 1
- 230000003826 endocrine responses Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000008175 fetal development Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 1
- 239000003292 glue Substances 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 229940035638 gonadotropin-releasing hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000003966 growth inhibitor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- DWGUHNCXZYYHHT-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid oxepan-2-one Chemical compound O=C1CCCCCO1.CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O DWGUHNCXZYYHHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical group 0.000 description 1
- 230000001788 irregular Effects 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 208000019756 lichen disease Diseases 0.000 description 1
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N methyl (2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-5-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-6-amino-2-[[(2s)-1-[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]hexanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5 Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)OC)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC=CC=1)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@@H](N)CCCN=C(N)N)C1=CC=CC=C1 CWWARWOPSKGELM-SARDKLJWSA-N 0.000 description 1
- 239000011325 microbead Substances 0.000 description 1
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 1
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 238000005191 phase separation Methods 0.000 description 1
- 230000006461 physiological response Effects 0.000 description 1
- 229920000771 poly (alkylcyanoacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920001308 poly(aminoacid) Polymers 0.000 description 1
- 229920002959 polymer blend Polymers 0.000 description 1
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 1
- 229940041153 polymyxins Drugs 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000007542 postnatal development Effects 0.000 description 1
- 239000011164 primary particle Substances 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 description 1
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 239000005060 rubber Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 210000000998 shell membrane Anatomy 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical class O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229920002545 silicone oil Polymers 0.000 description 1
- 230000009645 skeletal growth Effects 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M sodium fluoride Chemical compound [F-].[Na+] PUZPDOWCWNUUKD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000553 somatostatin Drugs 0.000 description 1
- NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N somatostatin Chemical compound C([C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@@H](C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2C3=CC=CC=C3NC=2)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)[C@@H](C)O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)N)C(O)=O)=O)[C@H](O)C)C1=CC=CC=C1 NHXLMOGPVYXJNR-ATOGVRKGSA-N 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 238000001694 spray drying Methods 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 229920006301 statistical copolymer Polymers 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960000874 thyrotropin Drugs 0.000 description 1
- 230000001748 thyrotropin Effects 0.000 description 1
- 230000001550 time effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 210000005239 tubule Anatomy 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 229960003726 vasopressin Drugs 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 description 1
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 1
- WHNFPRLDDSXQCL-UAZQEYIDSA-N α-msh Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 WHNFPRLDDSXQCL-UAZQEYIDSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/25—Growth hormone-releasing factor [GH-RF], i.e. somatoliberin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
- A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
- A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
- A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
- A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Processes Of Treating Macromolecular Substances (AREA)
Description
(57) Způsob podávání biologických činidel do vajec v částicovém nosiči vstřikováním nosiče do vzduchových komůrek vajec s výhodou uchovávaných ve svislé poloze se vzduchovou komůrkou nahoře k usnadnění migrace částicového nosiče mezi vnitřní a vnější blanou ke spodnímu konci vejce. Částicový nosič uvolňuje bilogické činidlo obklopující kapaliny a do krve. Nosič přechází do ptáka po vylíhnutí z vejce a uvolňuje biologické činidlo do ptáka po vylíhnutí. Používaný mikročásticový farmaceutický prostředek obsahuje 5 až 25 % biologicky aktivního, ve vodě rozpustného peptidu ze souboru zahrnujícího faktor uvolňující růstový hormon, syntetické analogy faktoru uvolňujícho růstový hormon a jeho farmakologicky aktivní fragmenty, dispergovaného v polyesterové matrici na polylaktidcvé bázi. Prostředek sc připravuje rozpouštěním polyesteru v organickém rozpouštědle, suspendováním biologicky aktivního činidla v roztoku polyesteru, emulgováním suspenze ve vodném médiu, v némž je činidlo nerozpustné a odpařováním rozpouštědla z emulze k vytvoření mikročástic. Prostředek se do organismu podává vstřikováním po suspendování mikročástic ve vhodné kapalině.
Biologicky odbouratelný polyesterový mikročásticový farmaceutický prostředek vstři kovátelný do ptačích vajec, způsob jeho přípravy a jeho použití
Oblast techniky
Vynález se týká biologicky odbouráte1ného polyesterového mikročásticového farmaceutického prostředku vstřikovatelného do ptačích vajec před jejich líhnutím a způsobu jeho přípravy.
Dosavadní stav techniky
Již před určitou dobou se přišlo na to, že by bylo vhodné vstřikovat do vajec biologicky účinné látky. Zpočátku se pro tento účel připravovaly různé vakciny, používající vajec jako růstového prostředí pro vakcinu. Vakcina se pak z vajec vytěžila a byla použita podle potřeby. Injektáže vajec se také použilo v toxikologických studiích- Později bylo účelem injektáže vajec zprostředkování určitých blahodárných nebo terapeutických účinků na ptáky, jež by se případně z vajec vylíhli. Výhody injektování vajec spíše než živých ptáků souvisí se snadností injektáže. Vejce mohou být udržena v nehybné poloze a lze s nimi manipulovat účinněji ve srovnání s právě vylíhlými nebo staršími ptáky. Dále kromě mechanické snadnosti injektáže vajec, jeví se také určité terapeutické přednosti očkování nebo jiného ošetřování zárodků spíše než živých ptáků. Tyto přednosti se staly obzvlášt významnými v drůbežářském průmyslu, například u kuřat a krocanů.
Při dané žádoucnosti injektování vajec k popsaným a jiným účelům bylo zkoušeno několik základních technik- Mezi ně obecně patří jak prohánění kapalin skořápkou za použití určitých tlakovacích systémů, nebo fyzické otevření skořápky vejce a pak přidání žádané kapaliny. Jednou ze základních technik fyzického otevírání vejce k takovým účelům bylo používání několika typů uspořádán í j ehe 1.
V minulosti byly žádané kapaliny přidávány buď do vzduchově komůrky vejce, nebo přímo do · žloutkového vaku nebo plodové vody. Kapaliny dodané do vzduchové komůrky proniknou jednoduše vnitřní blanou vejce do blízkosti krevních prostor. Tento postup má tu přednost, že nevyžaduje, aby přístroje pronikly vnitřní blanou, což by vyžadovalo sterilní postup a sterilní nástroje. Dodávání do plodové vody také zvyšuje riziko, že vstřikovájí nástroj, obvykle jehla, může poškodit nebo dokonce zničit živý zárodek. Dalším potenciálním problémem souvisejícím s dodáváním činidel k vývoji zárodku je načasování. Některá činidla se optimálně dodávají v určitých stádiích vývoje. Zárodky se však mohou vyvíjet různě rychle. Tudíž podání do jednoho vejce může být výhodné 17. den vývoje, zatímco načasování u jiného vejce může být 16. nebo 18. den. Není však prakticky možné monitorovat vejce individuálně, má-li jich být ošetřeno velké množství. Některá činidla může být žádoucí dodávat po určitou dobu, což vyžaduje včasné dodání opakované dávky.
Je tedy potřeba vyvinout způsob dodávání biologických činidel do vajec, která by splňovala různé zmíněné podmínky. Například metoda by měla být s výhodou jednoduchá a měla by vylučovat potřebu sterilní techniky. Dále by se technika měla s výhodou vyhnout problému rozdílné rychlosti vývoje zárodků a obejít potřebu opakovaného dodávání činidla. Tento vynález splňuje zmíněné potřeby a poskytuje přednosti, jež nebyly dosažitelné metodami dosud známými ze stavu techniky.
Jak bylo uvedeno, týká se vynález také mikročásticových kompozic vhodných k provádění zmíněných způsobů a jiných způsobů podávání materiálů zvířatům.
Mikročástice jsou kulovité polymerní útvary, jejichž velikost je od více než jeden mikrometr až 2000 mikrometrů. Mikročástice jsou tvořeny mikrokaps1emi, v jejichž dutině je rovnoměrně rozděleno biologické činidlo, a mikroskopickými kuličkami, v nichž je činidlo dispergováno v celé mikročástici. K přípravě mikročástic lze použít mnoha způsobů, včetně vypařování roztoků, separace organické fáze, mezi fázové polymerace, emulzní polymerace nebo rozprašovacího sušení. K přípravě pept.idových mikročástic se však
yiayrw.·« hodí jen několik způsobů- Fyzikálně chemické vlastnosti mnohých peptidů znesnadňují jejich formulaci a při jejich vnášení do mikročástic je možná jejich inaktivace.
Jako matrice pro mikročástice bylo použito četných polymerů, včetně polysacharidů, polyesterů a biologicky neodbouratelných syntetických polymerů. Většina způsobů pro vytváření mikrokapslí peptidů používá polyesterů, zvláště póly CD, L-laktidkoglykolidu ) . Polyestery jsou k tomu účelu žádoucí vzhledem k tomu, že jsou bilogicky odbouratelné nebo biologicky erodovatelné, snadno dostupné, snadno se zpracovávají a jsou netoxické.
Mikroku1 íčky mléčné nebo glykolové kyseliny lze snadno získat způsobem odpařování roztoků, který je, přes určitá omezení, kompatibilní s manipulací s četnými peptidy- Hlavní nesnází při vytváření částic peptidů je vysoká rozpustnost takových molekul ve vodě. Typické procesy uzavírání do mikrokapslí jsou založeny na afinitě sloučeniny k polymeru nebo k lipofilní fázi emulze. Výsledkem je, že při vypařovacích procesech používaných v minulosti byl obsah drogy peptidů typicky menší než 10 %.
Dřívější snahy jak čelit těmto problémům používaly do značné míry techniky dvojí emulze a procesu oddělování fází, vyvolaného přísadou silikonového oleje. Zbývala však potřeba způsobů pro přípravu bilogicky odbourátelných mikročástic obsahujících peptidy, jež by byly stabilní a aktivní a jež se uplatní požadovanou rychlostí během času.
Podstata vynálezu
Podstatou vynálezu je biologicky odbouratelný polyesterový mikročásticový farmaceutický prostředek vstřikováte1ný do ptačích vajec, jehož biologicky aktivní činidlo je volené ze souboru zahenujícího faktor uvolňujícím růstový hormon, syntetický analog faktoru uvolňujícího růstový hormon a jejich farmakologicky účinné fragmenty a polyesterem je polylaktid volený ze souboru zahrnujícího samotnou kyselinu mléčnou, kopolymer kyseliny mléčné a kyseliny glykolové, směsi takových kopolymerů nebo směsí takových polymerů a kopolymerů.
Způsob přípravy biologicky odbourátelných polyesterových mikročástic obsahujících biologicky aktivní činidlo spočívá podle vynálezu v tom, že
a. se rozpustí polyester v organickém rozpouštědle.
b. přidává se vodou rozpustné biologicky aktivní činidlo do roztoku připraveného podle odstavce (a) k vytvoření suspense,
c. emulguje se suspense podle odstavce Cb) ve vodném prostředí, v němž je činidlo nerozpustné,
d. odpařuje se rozpouštědlo z emulse za vytvoření mikročástic,
e. mikročástice se pddělují.
Vynález se týká způsobu dodávání biologického činidla do vejce, jenž spočívá ve vnesení částicového nosiče, obsahujícího účinnou látku, do vzduchové komůrky vejce. Cásticový nosič migruje mezi vnitřní a vnější blanou Cjež definují vzduchovou komůrku na zaobleném konci) do polohy vzdálené od vzduchové komůrky. S výhodou se biologické činidlo časem z nosiče uvolní. Nadto se cásticový nosič vnese do ptáka po vysezení, čímž je zajištěno kontinuální podávání biologického činidla mladému ptáčeti.
Vynález se týká způsobu dodávání biologického činidla do vejce a dále ovlivňování vývoje mladého ptáčete. Vynález se týká snadno provedlteného způsobu podávání biologického činidla, který nevyžaduje sterilní techniku a minimalizuje riziko narušení vývoje zárodku ve vejci. Vynález se rovněž týká způsobu dodávání biologického činidla vyvíjejícímu se zárodku a mladému ptáčeti, jež z něho vznikne po delší dobu. Další přednosti a výhody vynálezu vyplynou z následujícího popisu výhodného provedení.
Vynález blíže objasňuje následující podrobný popis doplněný obrázky.
Na obr. 1 a 2 jsou grafy výsledků studie in vitro, jež ukazují rychlost uvolňování GHRH z mikospopických kuliček, jím naplněných .
Na obr.l je perfuze s O,1N octovou kyselinou při průtočné rychlosti 200 pl/min
Na ose y jsou ug uvolněného GHRH, na ose x čas v minu-
tách plné kolečko mikročástice <l98,38mg), dávka tt M08-2RV-84, 5¾ plnění prázdný trojúhelník s vrcholem dole -
| mikročástice <200,87 | mg) , | dávka | 4 | M08-2RV-84, | 5¾ plnění |
| plný trojúhelník s vrcholem dole - | |||||
| mikročástice <202,85 | mg) , | dávka | tt | M08-2RV-84, | 5¾ plnění |
| prázdný čtvereček - | |||||
| mikročástice <101.71 | mg) , | dávka | tt | M08-2RV-80, | 10¾ plnění |
| plný čtvereček - | |||||
| mikročástice <102,22 | mg) , | dávka | tt | M08-2RV-80, | 10¾ plnění |
| prázdný trojúhelník : | s vrcholem | nahoře | |||
| mikročástice <100,94 | mg) , | dávka | tt | M08-2RV-80, | 10¾ plnění |
5¾ plnění
1(3¾ plnění
Na obr-2 je perfuze s O,1N octovou kyselinou při průtočné rychlosti 200 μΐ/κίη
Na ose y jsou pg uvolněného GHRH, na ose x čas v minu tách plné kolečko mikročástice (199,1 mg), dávka tt M08-2RV-79 prázdný trojúhelník s vrcholem dole mikročástice <106,6 mg), dávka tt M08-2RV-80 plný trojúhelník s vrcholem dole mikročástice <102,4 mg), dávka tt M08-2RV-80, 10¾ plnění prázdný čtvereček mikročástice <40,4 mg), dávka tt M08-2RV-81, 25¾ plnění plný čtvereček mikročástice <39,8 mg), dávka tt M08-2RV-81, 25¾ plnění Na obr.3 je porovnání různých koncentrací 293404 v mikročásticových formulacích PLA/PGA v případě vepřů B6V679206Na ose y je vylučovaný močovinový dusík v g/den na ose x den zkoušky kastrovaných kanců na ošetření.
<' ošetření podáním 0 kontrola
kolečko kolečko mikročástice CULLY, 85/15, 1O%
293404. 42 MG plný čtvereček plný čtvereček mikročástice CULLY.
85/15, 25% 293404, 42 MG
Naobr.4 je porovnání různých koncentrací 293404 v mikročásticových formulacích PLA/PGA ve vepřích B6V679206. Na ose y je sérum růstového hormonu NG/ml, na ose x den zkoušky 5 kastrovaných kanců na ošetření < ošetření podáním
O O kontrola čtvereček prázdný čtvereček prázdný mikročástice
CULLY, 85/15, 5% 293404, 42 MG kolečko kolečko mikročástice CULLY, 85/15, 1O%
293404, 42 MG plný čtverec plný čtverec mikročástice CULLY,
85/15, 25% 293404, 42 MG čtvereček plný čtvereček plný mikročástice
CULLY, 85/15, 5% 293404, 42 MG
Na obr.5 ie profil výtěžnosti 293404 při podání kastrovaným kancům v různých mikročásticových formulacích PLA/PGA Na ose y ie vylučovaný močovinový dusík v g/den na ose x den zkoušky kastrovaných kanců na ošetření o stření hmotnosti 90 kg kg * 0,003 mg χ 28 dní = 7,56 mg < ošetření podáním
0 kontrola čtverec čtverec 293404 (3,0 pg/kg/den s.g. BID troiúhelník s vrcholem nahoře ~~ troiúhelník s vrcholem nahoře 293404 (50/50 BPI, molekulová hmotnost 60700,
22,68 mg/PIG) čtvereček čtvereček 293404 (50/50 BPI, molekulová hmotnost 29000, 7,56 mg/PIG) kolečko — kolečko· 293404 <50/50 BPI, molekulová hmotnost. 29000, 22,68 mg/PIG)
U — U 293404 <85/15 BPI, molekulová hmotnost 90900,
7,56 mg/PIG) trojúhelník s vrcholem nahoře trojúhelník s vrcholem nahoře 293404 <85/15 BPI, molekulová hmotnost 90900,
22,68 mg/PIG)
Na obr.6 je profil výtěžnosti 293404 při podání kastrovaným kancům v různých mikročásticových formulacích PLA/PGA Na ose y je sérum růstového hormonu ng/ml, na ose x den zkouš ky.
kastrovaných kanců na ošetření < ošetření podáním
0 kontrola čtverec čtverec 293404 <3,0 pg/kg/den s.g. BID trojúhelník s vrcholem nahoře trojúhelník s vrcholem nahoře 293404 <50/50 BPI, molekulová hmotnost 60700,
22,68 mg/PIG) čtvereček čtvereček 293404 <50/50 BPI, molekulová hmotnost 29000, 7,56 mg/PIG) kolečko — kolečko 293404 <50/50 BPI, molekulová hmotnost 29000, 22,68 mg/PIG)
U U 293404 <85/15 BPI, molekulová hmotnost 90900,
7,56 mg/PIG) trojúhelník s vrcholem nahoře trojúhelník s vrcholem nahoře 293404 <85/15 BPI, molekulová hmotnost 90900,
22,68 mg/PIG)
K objasnění a pochopení principů vynálezu je dále pojednáno o výhodném provedení za použití specifického názvosloví- Nicméně je zřejmé, že tím není vynález nikterak omezován, takže jsou možné úpravy, modifikace, a další aplikace principů vynálezu pracovníky v oboru.
Vynález poskytuje výhodný způsob podávání biologických činidel. Jde o částicový nosič, který obsahuje jedno nebo několik biologických činidel ve tvaru, ve kterém má být předáno vyvíjejícímu se zárodku a mladému ptáčeti, jež se z něho vylíhne. Ve ptačím vejci jsou dvě hlavní skořápkové blány. Tuto vnější a vnitřní blánu jež spolu sousedí kromě oblasti širšího konce, kde jsou od sebe vzdáleny k vytvoření vzduchové komůrky, odděluje jen tenká vrstva bílku. Způsobem podle vynálezu se umisťuje obecně částicový nosič do vzduchové komůrky vejce. S překvapením se zjistilo, že částicový nosič migruje ze vzduchové komůrky mezi vnitřní a vnější blanou na opačný konec vejce.
Částicový nosič a biologické činidlo je možno volit tak, aby bylo zajištěno postupné uvolňování činidla po delší dobu. Když se zárodek vyvine do stádia ptáčete, je částicový nosič vnesen do ptáka. Nosič je proto schopen dodávat biologické činidlo nejenom do vejce, ale také do ptáka, který se z vejce vylíhne. Prodloužené uvolňování čelí problému vystihnutí specifické doby k dodání biologického činidla. Jestliže se například cílová doba dodání činidla pohybuje od 16. do 18. dne po vzniku zárodku <E16-E18), v závislosti na rychlosti vývoje zárodku, může být činidlo podáno podle vynálezu dne E15 a doba uvolňování činidla v časovém intervalu několika dní zaručí, že činidlo je k dispozici v požadovanou dobu. Vynález podobně čelí problému, kdy může být potřeba, aby bylo činidlo přítomno po obzvlášť dlouhou dobu v průběhu vývoje plodu, zejména v pozdějích dnech, kdy je plod citlivější na manipu1ac i.
Jak známo, obsahuje ptačí vejce vnitřní a vnější blánu, mezi nimiž je na jednom konci vzduchová komůrka. Vnější blána přiléhá typicky těsně k relativně tvrdé skořápce, která chrání zárodek v průběhu jeho vývoje. Vnitřní blána také značnou měrou chrání zárodek, jelikož je štítem proti četným škodlivým látkám, jako jsou bakterie, jež by jinak mohly zárodek nakazit- Způsobem podle vynálezu se vnáší částicový nosič do vzduchové komůrky mezi vnitřní a vnější blánu vejce.
Vnášení částicového nosiče do vzduchové komůrky skýtá významné přednosti
K umístění částicového nosiče do tohoto místa uvnitř vejce jsou snadno dostupné způsoby a nástroje. Kromě toho je snížena kritičnost umístění, jelikož vzduchovou komůrku lze snadno lokalizovat a vnášení například vstřikováním lze spolehlivě a bezpečně provádět. Jelikož vnitřní blána zůstane neporušena, není potřeba sterilní techniky. Neexistuje také nebezpečí poškození zárodku.
ry. kuřata, krocany,
K vnášení materiálu do vzduchové komůrky vejce jsou známé různé techniky. Způsob není náročný a kromě toho je výhodné minimální narušení vejce. Výhodné je přímé vstřikování do vzduchové komůrky. Typicky se k tomu účelu hodí injekční stříkačka opatřená jehlou velikosti asi 18 až 22. Ke vstříknutí do vzduchové komůrky je třeba jehlu zasunout do vejce do hloubky jen několika milimetrů. Před zavedením jehly může být vodicí otvor ve skořápce proražen nebo vyvrtán, aby se zabránilo poškození nebo otupení jehly. Případně může být otvor ve vejci znovu uzavřen vhodným materiálem, jako lepidlem, voskem nebo jiným materiálem, nebo může být ponechán otevřený.
Výhodou vynálezu je, že ho lze snadno adaptovat k použití s velmi rychlými automatizovanými vstřikovacími systémy. Nyní je k dispozici řada takových systémů,popsaných například v amerických patentových spisech číslo 5 136979, Paul a kol., číslo 5 056464, Lewis a kol., čísla 4 681063, 4 903635, Hebrank a číslo 4 040388, 4 469047, 4 593646, Miller, jež jsou všechny společnosti Embrex, lne. Severní Karolina. Tato zařízení zajištují vnášení materiálů do vzduchových komůrek vajec poměrně velkou rychlostí. Kromě toho, dostupná zařízení, jako zařízení podle Paula, mohou zpracovávat vejce různých velikostí, tvarů a orientací. S dobrými výsledky byl používán vstřikovací automatizovaný systém Embrex, lne., prodávaný pod názvem INOVQJECT.
Vynález se hodí k podávání různých biologicky aktivních činidel ptákům nebo ptačím vejcím. Pod pojmem ‘pták se zde rozumí veškeré ptačí druhy, zejména drůbež, která se komerčně chová pro vejce a maso. Tento pojem zahrnuje tedy slepice kachny, husy kohouty a kače křepelky a bažanty.
Podávaná činidla zahrnují všechna činidla určená k podávání zárodkům nebo mladým ptákům, kompatibilní s použitým nosičem a uvolnitelná z nosiče.. Mezi biologická činidla mohou patřit neuropeptidy, peptidové napodobeniny, antigeny, geny (DNA nebo RNA), enzymy, hormony, antibiotika a různé jiné biochemické látky, jež mohou být podávány jednotlivě nebo v kombinacích- Kromě toho mohou činidla zahrnovat látky určené ke studiu, jako ke zkoušení sloučenin ve studiích toxicity. Jelikož vynález působí hlavně jako fyzikální jev, to je umístění a migrace částicového nosiče, zdůrazňuje se, že zvolené biologické činidlo není rozhodující.
Taková biologická činidla jsou v oboru dobře známa a jsou citována v četných článcích a patentových spisech. Například v americkém patentovém spise číslo 5 106617, Fredericksen a kol-, se popisuje podávání in ovo růstového faktoru T-cell obsahujícího Interleukin-2 asi 18. dne inkubace. Fredericksen popisuje také souběžné podávání vakciny in ovo, zahrnující jak živé vakciny, jako je vakcina proti viru krůtího lišeje a vakciny proti Bursalově nemoci, Lukertově křeči a nereplikujících vakcin jako jsou mrtvé viry. peptidy, proteiny a antiidiotypické protilátky. V přihlášce vynálezu číslo V091/12016, zveřejněné 22- srpna 1991 se popisuje podávání fyziologicky účinných peptidů. Například slizovité peptidy zahrnují růstový hormon, thyrotropin, alfa-melanocyt stimulující hormon, prolactin, luteinizujicí hormon, adrenokortikotropin a β-endorfin. Například hypothalamické uvolňující hormony zahrnují thyrotropin uvolňující hormon (TRH), hormon uvolňující gonadotropin, somatostatin, hormon uvolňující kortikotropin a hormon uvolňující růstový hormon. Například gastrointestinální peptidy zahrují vazoaktivní intestinální polypeptid, cholecystocinin, gastrin, látku P, neurotestin, bombestin, secterin a motilin. Jsou známa četná jiná činidla a pokračuje identifikace ještě dalších. V americkém patentovém spise číslo 4 917045 , Viegland, se popisuje použití fyziologicky přijatelných organických sloučenin křemíku nebo kyseliny křemičité ke stimulaci růstu kostní tkáně. Senzibi1izace imunitního systému lze dosáhnout injektováním in ovo dinitrofeny1ováného keyhole limpet hemokyaninu (DNP-KLH) nebo dextranu (DNP-D). Elícitation of delayed type hy11 i
f persensitivity in chicks after in ovo sensitization vith different moleeular forms of the same hapten (Vybuzení hypersenzitii vity kuřat opožděného typu po senzitizaci in ovo různých moleku!/
I lamích forem téhož hapten) O. Moryia, Y. Ichikava, Microbiol f Immunol., 27 (9). str. 779 až 785 <1983). Podávání in ovo růstového hormonu vajec (OGH) v isotonické soli pufrované na pH 8,3 hydrogenuhličitaném sodným kuřatům ve dni Eli zvyšuje, jak se ukázalo tělesnou hmotnost, růst kostry a využití krmiv. In Ovo Grovth Hormone Alters Grovth and Adipose Tíssue Development of Chickens (Růstový hormon podávaný in ovo mění růst a vývoj tukových tkání kuřat), P.S Hargis, S.L. Pardue, A.M- Lee a G-V. Sandel, Grovth, Development & Aging, 1989, 53, str. 93 až 99.
V literatuře existují četné další zprávy popisující látky, jejichž podávání in ovo by bylo žádoucí. Viz například Effects od Diazinon on the Anatomical and Embryological Changes in the Developing Chick Embryo (Účinky diazinonu na anatomické a embryologické změny ve vývoji kuřecího zárodku), J.H. Cho, C.E- Lee, Res. Rep. Rural Dev. Adm. (Suveon), 32 <3 vet.) 1990, str. 35 az 47 (diazinon dne E3), Bilirubin and Herae as Grovth Inhibitors of Chicken Embryos In Ovo (Bilirubin a heme jakožto růstové inhibitory kuřecích zárodků in ovo), R. Vassilopoulou-Se11 i η, P.Eoster, C-0- Oyedeji, Pediatr. Rs. 27 (6) 199(3, str. 617 až 621 (bilirubin and heme), Boiler Safety Studies of Marek s Vaccination In Ovo Using the Inovoject (Studie bezpečnosti boilerů při Markově vakcinaci in ovo pomocí Inovojectu) C.M. Hoyle, R.P.Gildersleeve, . Poult. Sci, 69 (dodatek 1) 1990, str. 65 (Marek s disease vaccine), Post-Natal Development of Male and Female Broilers After líne or Several Thyrotropin Releasing Hormone THR Injections During Egg Incubation” (Postnatální vývoj samčích a samiččích broilerů po jednorázové nebo několikanásobné injektáži hormonu THR uvolňujícího thyrotropin v průběu inkubace vajec) J.C. Blum, M.R. Sa 1 ichon, J.P. Vigneron, Arch. Geflůgelkd., 53 (6), 1989, str. 265 až
268 (thyrotropin releasing hormone), Increased Hatchability of Turkey Eggs by Biotin Egg Injection (Zvýšené líhnutí krůtích vajec injektováním biotinu do vajec), E.J. Robel, V.L. Christensen,
Poult. Sci., 65 (dodatek 1) 1986, str. 112 (biotin).
Biologické činidlo je obsaženo ve vhodném biokompatibilním (fyziologicky přijatelném) částicovém nosiči- Nosičem může být kterýkoli z rozmanitých částicových materiálů, zde označovaný obecně jako mikročástice jako jsou mikroskopické kuličky, lipidové váčky, nebo jejich modifikované tvary. Mikroskopické kuličky jsou zpravidla tvořeny oxidem křemičitým, sklem, různými biologicky odbouráte1nými vyššími polymery (například pólylaktidovými a polyglykolidovými polymery a jejich kopolymery, polyhydroxymáselnou kyselinou, celulózou, škroby, uhlohydrátovými kaučuky) nebo proteiny (například želatinou, albumin). Lipidové váčky (například liposomy) se jeví jako ideální předávací nosiče k injektování do vajec, jelikož mohou být upraveny k požadované aplikaci a biologickému činidlu, například vyrobeny z odlišné šarže (negativní, pozitivní, neutrální), vhodnou volbou fosfolipidu se mohou stát fusagenickými vůči vaječným blanám, mohou nést vodou rozpustné i vodou nerozpustné sloučeniny a používat přírodních excipientů nebo excipientů podobných přírodním. Liposomy mohou být buď fosfolipidní nebo nefosfolipidni. Výhodnými nefosfolipidními liposomovýroi nosiči jsou málo lamelární liposomy vyráběné společností Micro Vesicular Systems, lne., nazývané váčky Novasome, jež mají tu přednost, že minimalizují problémy s oxidací.
Biologické činidlo je v mikročásticích zajištěno známými technikami, jako je vnášení do částic v průběhu jejich tvoření, adsorpci uvnitř mikročástic nebo povlékáním na mikročásticích. Začlenění biologického činidla v kterémkoli z těchto tvarů zajištuje činidlo takovým způsobem, že činidlo se z mikročástic uvolňuje během doby. Výsledkem je, že částicový nosič a způsob jakým je biologické činidlo v něm obsaženo lze volit k zajištění uvolňování činidla v požadovaném čase a požadovanou rychlostí, které se mohou vyskytnout v průběhu vývoje zárodku a/nebo růstu mladého ptáka po vylíhnutí.
S výhodou jsou částice tak husté jako kapalina mezi blanami. Vyšší hustota ovlivní jednoduše rychlost migrace částic ke spodnímu konci vejce. Částice mající hustotu menší než kapalina mezi blanami by mohla způsobit vyplouvání kapalinou při obrácení vejce, to však není výhodné, jelikož to vyžaduje další krok, který není nutný při správné volbě hustoty částic. Také by to dusilo zárodek, jelikož vzduchový prostor umožňuje výměnu plynů.
Velikost částicového materiálu tvořeného nosičem se mění v závislosti na zvoleném materiálu, jakož i na jiných činitelích. Velikost mikročástic se volí taková, aby se umožnila migraci mikročástic mezi vnitřní a vnější blanou vejce. V důsledku toho se mikročástice pohybují ze vzduchové komůrky do polohy vzdálené od vzduchové komůrky, což vede k tomu, že mikročástice se vnesou do ptáka při líhnutí. Velikost mikročástic se volí tak, aby mohly volně migrovat mezi vnitřní a vnější blanou vejce. Vhodně jsou například voleny velikosti mikročástic tak, aby nebyly, větší než je typická vzdálenost mezi přiléhajícími Částmi vnitřní a vnější blány, s výhodou nepřeshující polovinu této vzdálenosti. Typické velikosti jsou přibližně 5 až přibližně 500 mikrometrů. S výhodou je velikost mikročástic přibližně 125 až přibližně 250 mikrometrů. Zdůrazňuje se, že výhodné velikosti závisí na typu mikročástice a na vzdálenosti mezi vnitřní a vnější blanou vejce různých druhů ptáků.
Do vzduchové komůrky se vnáší biologicky účinné množství činidla. Zdůrazňuje se, že použité množství činidla závisí na . použitém činidle a na požadovaném účinku. Při podávání se uvažuje mnoství, požadovaná rychlost uvolňování, koncentrace a záměrné trvání podávání, stejně jako ostatní podmínky známé z oboru. Podobně závisí množství nosiče na velikosti mikročástic, ma množství a koncentraci činidla obsaženého v mikročásticích, na rychlosti uvolňování činidla z mikročástic a ostatních typických fyktorech.
Kromě toho se doba dodání částicového nosiče s biologickým činitelem do vejce volí k dosažení požadovaného výsledku. Načasování závisí na známých faktorech, jako je podávané činidlo, vývojové stádium zárodku a požadovaný účinek. Tyto faktory jsou v oboru dobře známy a výhodné dny podávání různých biologických činidel jsou popsány v literatuře nebo jsou zjistitelné bez zbyteč14 ného experimentování- Požaduje-li se obzvlášť výhodné datum, jako šestnáctý den inkubace, dodává se částicový nosič zpravidla den nebo dva dny před tímto datem. To zaručuje, že bude biologické činidlo k dispozici k požadovanému datu a jsou umožněny variace rychlosti uvolňování mikročástic k dosažení vrcholné koncentrace .
Cásticový nosič migruje mezi vnitrní a vnější blanou do polohy vzdálené od vzduchové komůrky, do které byl nosič původně umístěn- Je výhodné, jsou-li vejce orientována ve svislé poloze, se vzduchovou komůrkou nahoře, po alespoň určitou dobu po dodání nosiče do vzduchové komůrky- Doba svislé ortientace nastává s výhodou bezprostředně po vstříknutí mikročástic a trvá po dobu dostatečně dlouhou k podpoření migrace mikročástic do spodního konce vejce naproti vzduchové komůrce- Taková doba se s výhodou prodlužuje, ačkoli to není požadováno. Z důvodu pohodlí může být doba dodání koordinována s normální manipulací s vejci založené na jiných úvahách- Je například běžné ponechávat vejce v inkubátoru po dobu několika dní, typicky 17 dní u kuřat, a během této doby se s vejci periodicky pohybuje. Často bývají pak vejce dopravována do líhně a během této doby se s nimi podstatně nepohybuje. Zdůrazňuje se, že převod z inkubátoru do líhně je často vhodnou dobou k vnesení částicového nosiče a v něm obsaženého biologického činidla do vajec. Tento časový úsek se však volí spíše pro pohodlnost než z důvodů nutnosti a jiná doba podání před touto dobou nebo po ní by byla přijatelná.
Vhodná data podání byla identifikována pro velký počet sloučenin. Datum podání se volí tak, aby bylo biologické činidlo schopno vyvolat žádoucí fyziologickou odezvu v zárodku nebo v později se vyvíjejícím ptákovi. Uvádí se například, že schopnost líhnutí oplodněných krůtích vajec se zvýší podáním účinného množství exogenního pyridoxinu (vitaminu Bo> přibližně ve dni E25 inkubační doby.
Uvádí se, že fyziologicky účinné peptidy, včetně slizových peptidů, hypothalmických uvolňujících hormony a gastrointestiná1nich peptidů, obzvláště vyvolávajících endokrinní odezvu, se po15 dávají kuřatům in ovo s výhodou v poslední čtvrtině inkubaení doby. Pracovníci v oboru mohou pro různá činidla zvolit požadovaně datum podání. Vhodnou dobu podání lze stanovit pro různá zvolená činidla.
Následující příklady vynález objasňují, nijak ho však neomezuj i .
K objasnění provádění vynálezu se připraví ke zkouškám mikročástice pomocí DL-laktidkoglykolidu CPLA/PGA), statistického kopolymerů mléčné kyseliny a glykolové kyseliny. Jeden použitý polymer PLA/PGA má poměr PLA k P6A 85:15, vnitřní viskozitu 0,58 dl/g a molekulovou hmotnost přibližně 90 900 daltonů. Tento polymer je obchodním produktem společnosti Birmingham Polymers, Incorporated CBPI) a připravuje se iontovou kruh otevírající adiční polymerací příslušných cyklických dimerů kyseliny mléčné a kyseliny glykolové. Po vystavení působení vody se tento alifatický polyester rozpadá hydrolýzou esterových vazeb, čímž se získají biologicky kompatibilní produkty kyseliny mléčné a kyseliny glykolové. IJ polymeru 85: 15 se uvádí, že má dobu biologického rozpadu přibližně 5 měsíců, v závislosti na povrchu, porozitě a molekulové hmotnosti- Jiné směsi PLA/PGA mají doby rozpadu 2 až 24 měsíců. Alternativně se použije polymeru PLA/PGA 50:50 s uváděnou dobou rozpadu 2 měsíce.
Příklady provedeni vynálezu
Příklad 1
Příprava červeně/ze leně zbarvených prázdných mikročástic PLA/PGA C vyhodnocení ve slepicích vejcích se připraví prázdné mikročástice PLA/PGA. První sada mikročástic se obarví červeně barvou
Calco Gil Red N-1700 společnosti American Cyanamid Company a druhá sada mikročástic se obarví zeleně barvou Calco Victoria Green též společnosti American Cyanamid Company Způsob přípravy mikročástic je v podstatě týž. Rozpustí se 3 g PLA/PGA ¢85/15) o vnitřní viskozitě 0,58 dL/g v chloroformu při teplotě 30 0 CMw =
o.
000 daltonů, Mn = 50 100 da-ltonů) , BPI se rozpustí v přibližně 40 ml dichlormethanu. Do roztoku polymeru se přidá malé množství barviva, přičemž každé barvivo je rozpustné v oleji. Organická fáze se emulguje vmíšením do 250 ml deionizované vody obsahující 0,25 % (hmotnost/objem) polyvinylalkoholu Air Products V-205. V míšení se pokračuje 1G hodin při teplotě místnosti a za tlaku okolí k dosažení úplného odstranění dichlormethanu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací. Mikročástice se vysuší ve vakuu a za sucha se prosejí.
Příklad 2
Příprava žlutě zbarvených prázdných mikročástic PLA/PGA
Připraví se prázdné žlutě zbarvené mikročástice pomocí 50/50 PLA/PGA (BPI) technikou přípravy mikročástic odpařováním roztoku solanky pufrované fosfátem Dulbecco. Do 250 ml roztoku solanky pufrované fosfátem Dulbecco (PBS) se přidá 0,625 g polyviny lalkoholu V-205 Air Products (PVA) k získání 25%^ (hmotnost/ objem) roztoku polyvinyla1koholu v PBS- Do PBS se za teploty místnosti přidá polyvinylalkohol, rozpouštění se napomůže ohřátím na 55 C za stálého míchání- Před použitím se roztok nechá vychladnout na teplotu místnosti.
Rozpustí se 2,00 g PLA/PGA ¢50/50) s vnitřní viskozitou 0,42 dL/g v HFIP při 30 °C (Mv = 29 000 daltonů, Mn = 20 000 daltonů), BPI se rozpustí v přibližně 40 ml methylenchloridu. Do tohoto roztoku polymeru se přidá stopové množství (méně než 0,1 g) barvy FLUOROL YELLOV 088, BASF «205671 k obarvení roztoku polymeru na fluorescenční žluté zbarvení- Veškerý roztok polymeru se přidá do mísiče roztoku polyviny1alkoholu míchaného při 300 otáčkách za minutu. V míšení se pokračuje přes noc k dosažení úplného odpaření methylenchloridu. Výsledné žluté mikročástice se získají vakuovou filtrací. Mikročástice se několikrát promyjí PBS Dulbecco a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší.
Získá se 1,98 g vysušených mikročástic, které po přesátí na sítech (IJ.S. Standard) dají podíl >250 mikrometrů (který se vy loučí) a podíl 0,34 g o velikosti 250 až 125 mikrometrů a podíl 1,64 g <125 mikrometrůPříklad 3
Zabarvených mikročástic se použije k vizuální kontrole umístění částic po vstríknutí in ovo v průběhu pozdějších period inkubace a po vylíhnutí. Do vzduchových komůrek zárodečných vajec se dne E14 vstríkne 5 mg červeně zbarvených mikročástic o velikosti 125 až 250 mikrometrů podle příkladu 1 ve 100 ml 0,15 M sacharozového roztoku. Každý následný den inkubace se otevře tři až pět vajec. Kromě toho se usmrtí 3-5 kuřat ve dni vylíhnutí stejně jako v každý z následujících třech dnů života. Dvacet čtyři hodiny po vstríknutí migruje většina mikročástic mezi dvěma blanami do místa na ostrém nebo kaudálním (spodním) konci vejce naproti vzduchové komůrce. Mikročástice plují v bílku a umístí se mezi dvě tenké vysoce překrvené blány. V této poloze se mikročástice udržují po celou dobu inkubace.
S blížící se dobou zrození zárodku se v poslední den inkubace částice začínají soustřeďovat v břišní části spolu s vnitřní blanou a žloutkovým váčkem. Mikroskopické zkoumání kulových mikročástic ukazuje, že se pomalu v týdnu inkubace rozpadají. Kromě toho se tvary stávají s časem nepravidelnými a většími, jako kdyby se mikročástice spojovaly. Po usmrcení vylíhnutých kuřat se miročástice nacházejí na pobřišnici kolem pupku. Významná množství nedotčeného polymeru jsou přítomna i po třech dnech života.
Skutečnost, že nedotčené biologicky odbouratelné mikročástice jsou identifikovány v kuřeti po vylíhnutí naznačuje, že takové podání in ovo účinně uvolní žádoucí sloučeninu v průběhu života zárodku a v neonatální periodě. Zeleně zbarvené mikročástice o velikosti 125 až 250 mikrometrů podle příkladu 1, migrují podobně mezi dvěma blanami v průběhu 24 hodin po vstríknutí do vzduchové komůrky, avšak zárodky hynou v průběhu 43 hodin vlivem toxicity barvy.
Příklad 4
Nefosfolipidové liposomy se rovněž připraví s hormonem uvolňujícím růstový hormon, nazývané dále podle výboru United States Adopted Names Council (USÁN) somatogenin. Zde použitý název sómatogenin se týká 4-methylhippuroy1C1jporcinu GHRH C2-76j-0H, což je analog přírodního porcinu GHRH- Tato sloučenina má molekulovou hmotnost 8846,89 daltonů a její molekulární vzorec je C379 H62-4Ni2v0i ie . Způsoby přípravy somatogeninu jsou popsány v americkém přihlášce vynálezu číslo 07/692090 podané 26. dubna 1991 s názvem Superactive GRF Analogs CSuperaktivní GRF analogy. Struktura somatogeninu je popsána následovně xGly . Ala. Asp. Ala. I le. Phe. Thr. Asn. Asn. Tyr. Arg. Arg. Val . Leu. Thr. Gin. Leu.Ser.
5 10 15
Ala.Arg.Arg.Leu.Leu-Gin.Asp.11e.Leu.Ser.Arg-Gln.Gln.Gly.Glu. Arg Asn.Gln.Glu.
25 30 35
Gin.Gly.Ala. Arg .Val. Arg. Leu . Gly . Arg .Gin - Va 1 . Asp . Ser . Leu . Trp .Ala. Asp.Gin.Arg.
45 50 55
Gin . Leu . Ala . Leu -Glu. Ser. I le. Leu . A la . Thr. Leu . Leu .Gln.Glu.His. Arg. Asn.Ser.Gin.
65 70 75
Gly-OH χ acyiová skupina = pMebenzoyl
| Tabu 1ka | složení | ||||
| Ala | 7 | Gly | 5 | Pro | 0 |
| Arg | 11 | His | 1 | Ser | 5 |
| Asp | 4 | Ile | 3 | Thr | 3 |
| Asn | 4 | Leu | 12 | Tyr | 1 |
| Cys | 0 | Lys | 0 | Trp | 1 |
| G1 u | 4 | Met | 0 | Val | 3 |
Gin
Phe
Liposomy se připraví následujícím postupem:
Negativně nabité lipidové váčky se připraví z polyoxyethylencetyletheru (0,696 g), z cholesterolherníjantaranu (0,073g), z dicetylfosfátu (0,055 g) a ze somatogeninu v 0,01 M octové kyselině (10 ml © přibližně 1 mg/ml). Pozitivně nabité liposomy se připraví z těchže materiálů s tou výjimkou, že dičety 1fosfát se nahradí četyltrimethylamoniem (0,036 g) Lipidové materiály se napřed vnesou do kádinky a zahřejí se na přibližně 30 C. Somatogenin se rozpustí v 10 ml 0,01 M kyseliny octové k získání 1 mg/ml. Na teplé desce se předehřejí 30 cm3 injekční stříkačky a 3-cestný kohout na přibližně 80 C. Roztok somatogeninu se rovněž zahřeje na přibližně 80 C. Pak se do různých injekčních stříkaček natáhnou lipidové a vodné roztoky a umístí se navzájem kolmo v trojcestném kohoutu. Lipidové fáze se vstříkne do vodné fáze protlačením trojcestným kohoutem. Materiál se pak protlačuje co nejrychleji zpět a dopředu po dobu dvou minut. Pak se materiál převede do vakuované trubice, načež se odstředuje při 2500 otáčkách za minutu po dobu 20 minut - aniž dojde k oddělování- Malý vzorek (přibližně 1 ml) se odstřeďuje při počtu otáček 10 000/rain po dobu 15 minut, aniž opět dojde k oddělování- Materiál se kombinuje a zmrazí k dalšímu použití. Lipidové váčky se pak vstřikují do vzduchových komůrek vajec a zjištuje se, že migrují mezi oběma blanami uvnitř vejce podobně jako v případě mikročástic PLA/PGA.
Příklad 5
Mikročástice somatogenin/PLA/PGA (85/15)
Připraví se mikroskopické kuličky pomocí PLA/PGA, 85/15, BPI způsobem přípravy mikroskopických kuliček odpařováním rozpouštědla ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem (PBS) obsahující polyvinyl a 1 koho 1 (PVA). Do 25G ml čerstvě připravené solanky Dulbecco PBS (v/o chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu i
i
Airvol 205 společnosti Air PrQducts k přípravě 0,4¾ <hmotnost/objem) roztoku PVA v PBS. PVA se disperguje v PBS za teploty raístj nosti magnetickým míšením a teplota se zvýší na 45 C k úplnému t rozpuštění polyvinylalkoholu. Roztok Dulbecco obsahující polyvinylalkohol se před použitím nechá vychladnout na teplotu místnosti .
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,80 g PLA/PGA, 85/15, BPI, s vnitrní viskozitou 0,58 mL/g v chloroformu Θ 30 C <Mw = 90 900 daltonů, Mn = 50 100 daltonů). Do tohoto polymerního roztoku se přidá přibližně 0,20 g na vzduchu mletého somatogeninu- Aktivní somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného víření a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Polymerní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče s míchaným roztokem PBS Dulbecco obsahujícím polyvinylalkohol. Otáčky mísiče jsou 280/min. K pojmutí a míšení výsledné emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastové míchací tyčinky. V míšení se pokračuje přes noc s úplným odpařením methylenchloridu a s následným vytvořením mikroskopických kuliček, jež se získají vakuovou filtrací. Mikroskopické kuličky se umístí na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší- Získá se 1,80 g 1,85 g <3,65 g) sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly^ >250 mikrometrů - stopy
125-250 mikrometrů - 2,66 g <125 mikrometrů - 0,94 g
Zkouška kombinovaného produktu vykazuje hmotnostně 9,8¾ <10,2, 9,4, 9,7) v porovnání s teoretickými 10¾.
Příklad 6
Mikročástice somatogenin/PLA/PGA <85/15)
Pomocí PLA/PGA, 85/15, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem <PBŠ) obsahující polyvinylalkohol. Do 250 ml solanky Dulbecco PBS <v/o chloridu vápenatého) se přidá 1,02 g po 1yviny1 a 1 koho 1u Airvol 205 společ21 nosti Air Products k získání-0,4¾ <hmotnost/objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS- Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 ’c. Před použitím se roztok PBS obsahující polyvinylalkohol nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,75 g PLA/PGA, B5/15, BPI, s vnitřní viskozitou 0,58 mL/g v chloroformu 6 30 °C (Mw = 90 900 daltonů, Mn = 50 100 daltonů). Do tohoto polymerního roztoku se přidá asi 0,25 g na vzduchu mletého somatogeninu. Somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Polymerní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče s míchaným roztokem PBS Dulbecco obsahujícím polyvinylalkohol a v míšení se pokračuje přes noc. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,81 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly - >250 mikrometrů - žádné
125 -250 mikrometrů - 0,96 g <125 mikrometrů - 0,08 g
Zkouška podílu 250-125 mikrometrů vykazuje hmotnostně 12,9 % sosomatogeninu <12,5 % teoreticky).
Příklad 7
Mikročástice somatogenin/PLA/PGA <85/15)
Pomocí PLA/PGA, 85/15, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem <PBS) obsahující polyvinylalkohol. Do 250 ml solanky Dulbecco PBS <v/o chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4¾ <hmotnost/objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45
C. Před použitím se roztok PBS obsahující polyvinylalkohol nechá vychladnout na teplotu místnosti
V přibližně 50 ml.methylenchloridu se rozpustí 1,52 g PLA/PGA, 85/15, BPI, s vnitřní viskozitou 0.58 mL/g v chloroformu Θ 30 C (Mw = 90 900 daltonů, Mn = 50 1OO daltonfl). Do tohoto polymerního roztoku se přidá asi 0,50 g na vzduchu mletého somatogeninu a aktivní somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Polymérní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísíce s míchaným roztokem PBS Dulbecco obsahujícím polyvinylalkohol- K pojmutí a míšení výsledné emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastové míchací tyčinky. V míšení se pokračuje přes noc s úplným odpařením methylenchloridu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru,kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,80 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly:
>250 mikrometrů - žádné 125 - 250- mikrometrů - 1,30 g <125 mikrometrů - 0,17 g
Zkouška podílu 125 - 250 mikrometrů vykazuje hmotnostně 24,9 %£ somatogeninu (25% teorie).
Příklad 8
Mikročástice somatogenin/PLA/PGA (85/15)
Pomocí PLA/PGA, 85/15, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco (PBS) obsahující polyvinylalkohol. Do 250 ml čerstvě připravené solanky Dulbecco pufrované fosfátem PBS (v/o chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyviny1 a 1 koho lu Airvol V-205 společnosti Air Products k získání 0,4% (hmotnost/ objem) roztoku polyvinyla1koholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS, obsahující polyvinylalkohol, nechá vychladnout na teplotu místnosti- Tento roztok obsahuje 0,4% (hmotnost/objem) polyvinylalkoholu v PBS.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,5 g PLA/PGA, 85/15, BPI, s vnitřní viskozitou 0.58 mL/g v chlorofor mu θ 30 °C (Mw = 90 900 daltonů, Mm - 50 100 daltonfi). Do tohoto polymerního roztoku se přidá asi 0.5 g mikronizovaného somatogeninu. (Veškeré skleněné nádoby a míchcí hřídel se před stykem se somatogeninem opláchnou acetonitrilem). Somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty (při teplotě místnosti). Polymerní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísíce s míchaným roztokem PBS Dulbecco obsahujícím polyvinylalkohol- V míšení se pokračuje přes noc k úplnému odpaření dichlormethanového rozpouštědla. Mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší- Získá se 1,84 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly >250 mikrometrů - 0,01 g (vyloučí se)
125-250 mikrometrů - 0,80 g <125 mikrometrů - 0,94 g
Opakováním uvedeného postupu se získá 1,87 g sušených mikročástic, jež po prosátí na sítech (U.S. Standard) poskytují následující podíly'· >250 mi krom etrů - stopy (vyloučí se)
125 - 250 mikrometrů - 1,10 g <125 mikrometrů - 0,71 g Tyto částice poskytují následující výsledky:
125 - 250 mikrometrů = 15,7 ± 2,1 % vsázky (somatogeninu) <125 mikrometrů = 15,2 ± 0,8 % vsázky (somatogeninu)
Příklad 9
Materiály ke studiím vstřikování in ovo s použitím produktu podle příkladu 8 se připraví tímto způsobem. Připraví se následující upravovači materiály (Trt):
Trt A: voda pro kontrolu
Trt B: mikronizovaný somatogenin dispergovaný v 50 ml čištěné vody na koncentraci 60 mg somatogeninu na 100 ml vody,
Trt C- raikronizovaný somatogenin dispergovaný v 50 ml čištěné vody na koncentraci 600 mn somatogeninu na 100 ml vody.
Tri. D: mikročástice (somatogenin PLA/PGA, 125 až 250 mikrometrů) dispergované v 50 ml 2¾ (hmotnost/objem) natřiumkarboxy24 methylcelulozy (NaCMC 330) k získání suspenze obsahující mikročástice ekvivalentní 60 mg somatogeninu/lQO ml (dispergované množství vztažené k plnění).
Trt E: mikročástice (Somatogenin PLA/PGA. 125 až 250 mikrometrů) dispergované v 50 ml 2% (. hmotnost /ob jem) natriumkarboxymethylcelulozy (NaCMC 330) k získání suspenze obsahující mikročátstice ekvivalentní 600 mg somatogeninu/100 ml (dispergované množství vztažené k plnění),
Trt F- prázdné mikročástice (PLA/PGA. 125 až 250 mikrometrů), dispergované v 50 ml 2¾ (hmotnost/ohjem) natriumkarboxymethylcelulozy (NaCMC 330) přibližně ekvivalentní vysoké dávce somatogeninu PLA/PGA (Trt E) .
Po vstríknutí uvedených materiálů do vzduchových komůrek vajec migrují částice ke spodu vajec zpravidla v průběhu několika hodin. U žádného ošetření není patrný pokles líhnutí.
Příklad 10
Připraví se 10¾ (hmotnost/hmotnost) somatogeninové mikroskopické kuličky rozpuštěním 1,8 g 85/15 pólylaktidkoglykolidu o vnitřní viskozitou 0,58 ml/g v chloroformu 6 30 C (Mw — 90 900 daltonů, Mn = 50 100 daltonů) společnosti Birmingham Polymers, lne. v přibližně 50 ml methylenchloridu a přidáním 0,2 g g mikronizovaného somatogeninu. Systém polymerní roztok/suspenze somatogeninu se emulguje ve fosfátem pufrované solance obsahující polyvinylalkohol. Emulze oleje ve vodě se míchá po dobu přibližně 16 hodin k úplnému odpaření rozpouštědla a k následnému vytvoření mikroskopických kuliček. Vakuovou filtrací se mikroskopické kuličky shromáždí a vysuší se v desikátoru pod vakuem a prosejí se na správnou velikost.
Příklad 11
Mikročástic připravených podle příkladu 10 se použije k demonstrování jevu časového uvolňování obsahu somatogeninu. Studie
: 1 i v .VMrťSVn, > 1W -» se provádějí in vitro pomocí . perfuze s 0,1 N octovou kyselinou při průtočné rychlosti 200 ml/min. Výsledky těchto studií obsahují jsou uvedeny na obr. 1 a 2. Tyto výsledky ukazují, že mikročástice časem uvolňují obsažené činidlo a dále, že rychlost uvolňování je řízena procentem obsahu činidla.
I když je shora vynález objasněn a podrobně popsán, jde toliko o objasnění a nikoliv o omezování vynálezu, přičemž jde o popis výhodného provedení a vynález se týká také obměn a modifikací uvedených výhodných provedení.
Vynálezu se rovněž týká kompozic tvořených biologicky kompatibilními, biologicky odbouráte1nými mikročásticemi s polyesterovou matricí a obsahujících přibližně hmotnostně 5 až 25 % biologicky aktivního ve vodě rozpustného peptidů dispergovaného v matrici. Vynález se rovněž týká způsobu přípravy mikročástic, obsahujících biologicky aktivní peptidy, rozpuštěním polyesteru v organickém rozpouštědle, suspendováním biologicky aktivního činidla v polyesterovém roztoku, emulgováním suspenze ve vodném prostředí, v němž je činidlo nerozpustné a odpařením rozpouštědla z emulze k vytvoření mikročástic. Jednou předností vynálezu je jeho vhodnost k pohodlné přípravě mikročástic, jež mají poměrně vysoký poměr peptidů k polyesteru. Vynález se dále týká způsobu podávání biologicky účinného činidla organismu, jež spočívá v suspendování mikročástic ve vhodné kapalině a vstřikování do organ i smu.
Podstatou vynálezu jsou mikročástice obsahující biologicky aktivní činidla, například peptidy, v biologicky odbouratelné a biologicky kompatibilní matrici.
Podstatou vynálezu jsou rovněž tpůsoby přípravy mikročástic, jež obsahují peptidová činidla, přičemž těmito způsoby je dosahováno až 25%^ náplně těchto činidel .
Podstatou vynálezu jsou rovněž mikročástice obsahující peptidová činidla, jež se uvolňují za podmínek in vivo. ustálenými předpovidate1nými rychlostmi.
Podstatou vynálezu jsou rovně způsoby přípravy mikročástic obsahujících peptidová činidla, přičemž tyto způsoby nevedou
2G k destabi 1 izaci, destrukci nebo inaktivaci peptidů.
Podstatou vynálezu jsou rovněž mikročástice a způsoby jejich přípravy, jež umožňují modifikaci uvolňovacích charakteristik mikročástic nastavováním vlastností matrice.
Shora uvedeného se dosahuje složením a způsoby následujícího výhodného provedení vynálezu.
Na obr. 3 až 6 jsou grafy znázorňující výsledky studie in vivo v případě vepřů, dekládající biologické důsledky řízeného uvolňování somatogeninu z mikročástic.
K objasnění a pochopení principů vynálezu je dále pojednáno o výhodném provedení za použití specifického názvosloví. Nicméně je zřejmé, že tím není vynález nikterak omezován, takže jsou možné úpravy, modifikace a další aplikace principů vynálezu pracovníky v oboru.
Vynález se týká formulace mikročástic, obsahující polyestery jako nosnou matrici a peptidy jako obsažené biologicky aktivní činidlo- Mikročástice se připravují technikou vypařování rozpouštědla, kterou se vnášejí peptidy vé stabilní a aktivní formě. Mikročástice jsou biologicky odbouratelné a poskytují řízené, soustavné uvolňování peptidů. Rychlost uvolňování drogy se řídí nastavením faktorů, jako je stupeň náplně peptidů, molekulová hmotnost biologicky odbouráteIného polymeru a v některých případech poměr složek kopolymeru. Mikročástice a způsoby jejich přípravy podle vynálezu se liší od dřívějšího stavu techniky tím, že poskytují formulace, v nichž jsou peptidy chemicky stálé, fyzikálně stabilní (konformace) a biologicky aktivní- Způsoby podle vynálezu se také dosahuje většího podílu peptidů k polymeru než u technik odpařování rozpouštědla pro mikročástice obsahující vodou rozpustné polypeptidy podle známého stavu techniky.
Mikročástice podle vynálezu zajišťují soustavné uvolňování obsažených peptidů. Výsledkem způsobu přípravy mikročástic je, že biologicky aktivní sloučeniny, například peptidy a podobné, jsou v průběhu výroby zachyceny v sítoví polymeru. V průběhu rozpadu matrice se pak peptidy časem uvolňují a v omezené míre se uvolňují také difúzí síťovím polymeru.
--------- .... . .
Profil uvolňování lze nastavit vhodnou volbou nebo řízením různých parametrů. Charakteristiky uvolňování se například mění se složením polymeru, zejména s typem a podílem polymerů; s molekulovou hmotností polymerů; s hmotnostní střední molekulovou hmotností CMw); s rozsahem molekulově hmotnosti (nebo polydisperzitou) měřenou poměrem hmotnostní střední molekulová hmotnost (Mw) k číselné střední molekulové hmotnosti CMn), to je Mw/Mr»; s velikostí a tvarem mikročástic a s poměrem peptidů k polymeru, to je s plněním.
Mikročástice podle vynálezu lze připravovat z polyesterů, jako jsou například poly(D,L-laktid) , póly(D,L-laktidkoglykolid), póly(epsilon-karbolaktcm), polyamino kyseliny, polyorthoestery, polyanhydridy, polyalkylkyanoakryláty. Zahrnuty jsou veškeré polyestery, které jsou biologicky odbouratelné a/nebo biologicky erodovatelné a poskytují po rozpadu biologicky kompatibilní materiály .
K použití podle vynálezu se obzvlášť hodí polylaktidy. Polymerní materiály k přípravě mikročástic jsou obchodně dostupné. Výrazu polylaktid je použito v obecném smyslu a zahrnuje polymery a směsi polymerů samotné kyseliny mléčné, kopolymery mléčné kyseliny a kyseliny glykolové a směsi takových kopolymerů a směsi takových polymerů s kopolymery, přičemž kyselina mléčná může být buď v racemické nebo opticky aktivní formě. Zde používaný výraz PLA/PGA znamená různé kopolymery kyseliny mléčné a kyseliny glykolové- Molekulová hmotnost polymerů je 29 000 daltonů až přibližně 90 900 dealtonů. Poměr laktidových jednotek ke glykolidovým jednotkám je 100 - 0 až 50 ; 50- Například použitý polymer PLA/PGA má poměr PLA ku PGA 85 - 15, vnitřní viskozitu 0,58 dL/g a molekulovou hmotnost přibližně 90 900 daltonů. Tento cásticový polymer je obchodním produktem společnosti Birmingham Polymers, Incorporate (BPI) a připravuje se iontovou adiční polymerací otevírající kruh příslušných cyklických dimerů mléčné a glykolové kysel i ny .
Při vystavení působení vody se polyestery rozpadají hydrolyzou esterových vazeb na biologicky kompatibilní výrobky. Napřík lad výhodné polymery PLA/PGA se rozpadají na kyselinu mléčnou a kyselinu glykolovou- Uvádí se, že kopolymer 85 : 15 PLA/PGA má dobu rozpadu přibližně 5 měsíců v závislosti na povrchu, porozitě a molekulové hmotnosti- Jiné směsi PLA/PGA mají doby rozpadu 2 až 24 měsíců- Alternativně použitý polymer 50 50 PLA/PGA má uváděnou dobu rozpadu dva měsíce- Podobně jiné použité polyestery podle vynálezu mají vhodnou biologickou snášenlivost a vhodné doby rozpadu Mikročástice připravené způsoby podle vynálezu se hodí k použití při podávání různých peptidových činidel- Výhodou tohoto vynálezu je, že poskytuje mikročástice obsahující malé, biologicky aktivní polypeptidy. Obvykle se peptidy s molekulovou hmotností do 10 OOO daltonů nazývají polypeptidy, zatímco peptidy s molekulovou hmotností nad 10 000 daltonů se nazývají proteiny. V minulosti byly výsledkem techniky vypařování rozpouštědla k přípravě mikročástic malé, ve vodě rozpustné peptidy s nízkým plněním vzhledem k nekompatibilitě takových peptidů s tímto procesem. Zpravidla se uvádělo plnění nižší než 10 Nízké plnění mikročástic nemůže zajistit správnou dávku. Avšak i přes toto omezení je postup odpařování rozpouštědla výhodný, jelikož je snadný a spolehlivý. Způsoby podle vynálezu používají vodné prostředí, v němž je biologické činidlo nerozpustné a proces vede k mikročásticím s plněním až 25 %. Tento vynález uspokojuje potřebu vhodných způsobů k vnášení polypeptidů do mikročástic s plněním 5 až 25 %Způsob přípravy podle vynálezu objasňují následující příklady. Obecně se polymerní materiál rozpustí ve vhodném organickém rozpouštědle, například v methylenchloridu nebo v chloroformu a biologiocky aktivní, vodou rozpustný peptid, například somatogenin se pak k němu přidá. S výhodou se velikost částic soraatogeninu zmenší mletím ve vzduchu. Takový způsob je popsán například v americkém patentovém spise číslo 5 021554, jehož podstatné části se zde uvádějí. Suspenze systému polymerní roztok/pepřid se s výhodou podrobuje ultrazvukové vibraci k získání velikosti primárních částic. Suspenze se pak emulguje ve vhodném vodném mediu.
v němž ie biologicky akbivní pepbid nerozpustný, například v solance pilířované fosfábem. Médium může obsahovat sbabilizábor jako například polyvinylalkohol, nabriumdodecylsulfáb, cebylmebhylamoniumbromid, mebhylcelulózu nebo želabinu. Lze přidávab různé excipienby do koncenbrace až 10 Jakožbo excipienby se uváděli příkladně masbné kyseliny, jako ie kyselina sbearová, myrisbová, laurová a s výhodou palmibová. Rozpoušbědlo se nechá odpařib za současného vybváření raikročásbic. Odpařování se s výhodou napomůže mícháním- Cásbice se oddělí, s výhodou vakuovou filbrací a vysuší se v desikáboru ve vakuu a proseli se na správnou velikost.
Vynález ie aplikovabelný pro polypepbidy a následující seznam, kberý si nečiní nárok na úplnosb, ie indikabivní pro polypepbidy, jichž lze použíb pro formulace podle vynálezu- fakbor uvolňující růsbový hormon, somabogenin. oxybocin, vasopressin, adrenokorbikobrofický hormon CACTH), epidermální růsbový fakbor CEGF), prolakbin, luliberin, nebo lubeinizující hormon uvolňující hormon CLH-RH), bransformační růsbový fakbor, inzulín, somabosbabin, inberferon, gasbrin, bebragasbrin, penbagasbrin, urogasbron, sekrebin, kalcibonln, encefaliny, endofiny, angiobenziny, renin, bradykinin, bacibraciny, polymyxiny, kolisbiny, byrocidiny, gramicidiny a synbebické analogy a modifikace a jejich farmakologicky účinné fragmenby.
Po izolaci mikročásblc je možno přímo proséváním získab řadu velikosbí čásbic. Kromě boho lze cásbice mlíb, například ulbraodsbředivýnm mlýnem. Velikosb čásbic je s výhodou menší než 200 mikromebrů. výhodně asi 120 až 250 mikromebrů.
K podání se čásbice kombinují s vhodnou kapalinou. Mikročásbice mohou být, dispergovány, například suspendovány v jiných známých vhodných kapalných nosičích k podání, jako je voda, dexbrinový roztok, glycerol, nebo voda obsahující 2 % Chmobnosb/objem) nabriumkarboxylmebhylcelulozy 330 (NaCMC) nebo hydroxypropylmebhy lcelulozy (HPMC) ke zvýšení viskoziby, aby se zabránilo usazení mi kročásbic ze suspenze. Čásbice je možno podávat, živým organizmům, například vepřům nebo jiným savcům a pbákům, jako jsou kuřaba nebo krůby. Například mikročásbicové formulace somatogeni30 nu je možno uvádět do suspenze a injektovat je subkutánně do boku vepřů. Mikročásticové formulace lze také vstřikovat přímo do ptáků nebo je podávat nepřímo do ptačích zárodků injektováním do vzduchové komůrky vajec, jak bylo shora popsáno.
Pracovníci v oboru dále ocení, že mikročástice, obsahující vnesené drogy k uvolnění v cílových buňkách nebo tkáních, je možno podávat samotné nebo ve směsi s vhodnými farmaceutickými ředidly, nosiči, excipienty nebo přísadami vhodně volenými s ohledem na cestu podání a běžné farmaceuické praktiky. Tyto inertní farmaceuticky aktivní přísady jsou v oboru dobře známé. Například pro parenterální vstřikování je možno využít dávkovačích jednotek pro intravenozní, intramuskulární nebo subkutánní podávání a pro takové parenterální podávání se používá vhodných sterilních vodných nebo nevodných roztoků nebo suspenzí, obsahujících s výhodou rozpoutědla k ovlivnění isotonicity.
Následující specifické příklady vynález opět toliko objasňuňují aniž ho jakkoli omezují.
Příklad 12 % somatogeninu v mikročásticích PLA/PGA (85/15)
Pomocí PLA/PGA, 85/15, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštěla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem (PBS) obsahující polyvinylalkohol (PVA). Do 250 ml čerstvě připravené solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4¾ (hmotnost/objem) roztoku polyvinyla1koholu v PBS. Polyvinyla1kohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti magnetickým mícháním a pro usnadnění rozpouštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS obsahující polyviny1a 1koho1 nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,80 g
PLA/PGA, 85/15, BPI. s vnitrní viskozitou 0.58 mL/g v chloroformu 6 30 C (Mw = 90 900 dal tonů, Mn = 50 100 daltonů). Do tohoto
nu je možno uvádět do suspenze a injektovat je subkutánně do boku vepřů. Mikročásticové formulace lze také vstřikovat přímo do ptáků nebo je podávat nepřímo do ptačích zárodků injektováním do vzduchové komůrky vajec, jak bylo shora popsáno.
Pracovníci v oboru dále ocení, že mikročástice, obsahující vnesené drogy k uvolnění v cílových buňkách nebo tkáních, je možno podávat samotné nebo ve směsi s vhodnými farmaceutickými ředidly, nosiči, excipienty nebo přísadami vhodně volenými s ohledem na cestu podání a běžné farmaceuické praktiky. Tyto inertní farmaceuticky aktivní přísady jsou v oboru dobře známé. Například pro parenterální vstřikování je možno využít dávkovačích jednotek pro intravenozní, intramuskulární nebo subkutánní podávání a pro takové parenterální podávání se používá vhodných sterilních vodných nebo nevodných roztoků nebo suspenzí, obsahujících s výhodou rozpoutědla k ovlivnění isotonicity.
Následující specifické příklady vynález opět toliko objasnuňují aniž ho jakkoli omezují.
Příklad 12 % somatogeninu v mikročásticích PLA/POA <50/50)
Pomocí PLA/POA, 50/50, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem CPBS) obsahující polyviny1a1 koho1. Do 250 ml čerstvě připravené solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinyla1koho 1 u Airvol 205 společnosti Air Products k získáni 0,4% <hmotnost/objem) roztoku po1yviny1 a 1 koho1u v PBS. Polyvinyla1kohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k dokonalému rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS obsahující polyviny1a1 koho1 nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1.50 g
PLA/POA, 50/50. BPI, s vnitřní viskozitou 0,42 d1/g v chloroformu 9 30 C <Mw = 90 900 da 1 tonů, Mn = 50 100 dal tonů). Do tohoto polymerního roztoku se přidá 0,50 g na vzduchu mletého somatogeninu. Aktivní somatogenin se disperguje na primáni velikost čás- 31 - jďr tic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Roztok polymeru - stomatogeninová suspenze se přidá do víru míchaného Dulbecco PBS obsahujícího polyvinyla 1 kohol. Rychlost míchání je dána počtem otáček 270 až 280/min. K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije kádinky Pyrex o obsahu 400 ml a plastového trojramenného míchadla a hřídele. V míchání se pokračuje přes noc k úplnému odpaření methylenchloridu a k vytvoření mikročástic, které se získají vakuovou filtrací- Mikročástice a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,92 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly (U.S. Standard)>250 mikrometrů - stopy (vyhozeno)
125 - 250 mikrometrů - 1,11 g <125 mikrometrů - 0,77 g
Příklad 13 % somatogeninu v mikročásticích poly(DL-laktidu)
Pomocí póly(DL-laktidu) PLA/PGA, 85/15, BPI se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem (PBS) obsahující polyvinyla1kohol. Do 250 ml solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4% (hmotnost/ objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS, obsahující polyvinyla1kohol, nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,80 g póly(OL-laktidu), BPI, s vnitřní viskozitou 0,34 mL/g v chloroformu e 30 °C (Mw = 38 300 daltonů, Mn = 24 300 dal tonů). Do tohoto polymerního roztoku se přidá 0,20 g na vzduchu mletého somatogeninu. Somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně nedné minuty. Polymerní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče míchaného PBS Dulbecco obsahujícího polyuiny1a 1kohol35
K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastického trojramenného míchadla a hřídele. V míchání se pokračuje pres noc k úplnému odpaření methylenchloridu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší-Získá se 1,68 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly < IJ . S. Standard >
>250 mikrometrů - 0,02 g
125 - 250 mikrometrů - 1.36 g <125 mikrometrů - 0,18 g
Příklad T8.
% somatogeninu v mikročásticích pólyCkaprolaktonu)
Pomocí pólyCkaprolaktonu), BPI, se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem CPBS) obsahující polyvinylalkohol. Do 250 ml solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4^ (hmotnost/objem) roztoku polyviny la 1 koho lu v PBS- Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45
C. Před použitím se roztok PBS, obsahující polyvinylalkohol nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,80 g póly(OL-laktidu), BPI, s vnitřní viskozitou 1,27 mL/g v chloroformu Ř 30 C (Mw = 143 000 daltonů, Mn = 83 300 daltonů). Do tohoto polymemího roztoku se přidá 0,50 g na vzduchu mletého somatogeninu. Somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Polymerní roztok a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče míchaného PBS Dulbecco obsahujícího polyvinylalkohol. K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastového trojramenného míchadla a hřídele. V míchání se pokračuje přes noc k úplnému odpaření methylenchloridu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na mmR!·
II
- 36 talíř desikátoru. kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,35 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly (U.S.Stan! dard): >250 mikrometrů - stopy | 125 - 250 mikrometrů - 1,27 g • <125 mikrometrů - 0,58 g
Příklad Γ9 % somatogeninu v mikročásticích poly(kaprolakon)palmítové kyseliny (1¾)
Pomocí póly(kapralaktonu), BPI, se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem (PBS) obsahující polyvinylalkohol (PVA). Do 250 ml solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0.4¾ (hmotnost/objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS, obsahující polyvinylalkohol, nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,78 g polykaprolaktonu. Polysciences s nízkou molekulovou hmotností- Do tohoto polymerního roztoku se přidá 0,02 g palmitové kyseliny. Do tohoto roztoku polymeru a mastné kyseliny se přidá 0.20 g na vzduchu mletého somatogeninu a aktivní somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Roztok polymeru a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče míchaného PBS Dulbecco obsahujícího polyvinylalkohol. K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastového trojramenného míchadla a hřídele. V míchání se pokračuje přes noc k úplnému odpaření methylenchloridu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,85 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly (U.S.Standard):
>250 mikrometrů - 0,03 g
125 - 250 mikrometrů - 1,15 g <125 mikrometrů - 0,74 g
Pří k1ad % somatogeninu v mikročásticích poly<kaprolakon)palmitové kyseliny < 5% )
Pomocí pólyCkaprolaktonu), BPI, se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví sonatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem CPBS) obsahující polyvinylalkohol (PVA). Do 250 ml solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4¾ (hmotnost/objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS, obsahující polyvinylalkohol , nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,70 g polykaprolaktonu, Polysciences s nízkou molekulovou hmotností- Do tohoto polymerního roztoku se přidá 0,10 g palmitové kyseliny. Do tohoto roztoku polymeru a mastné kyseliny se přidá 0,20 g na vzduchu mletého somatogeninu a aktivní sonatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Roztok polymeru a suspenze somatogeninu se přidá do mísíce míchaného PBS Dulbecco obsahujícího polyvinyla1kohol. K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastového trojramenného míchadla a hřídele- V míchání se pokračuje přes noc k úplnému odpaření methylenchloridu- Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,93 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly <U.S.Standard>:
>250 mikrometrů - 0,01 g 125 - 250 mikrometrů - 1,06 g <125 mikrometrů - 0,82 g
Příklad
% somatogeninu v mikročásticích póly(kaprolakon)palmitové kyselině (1Q%)
Pomocí poly(kaprolaktonu) , BPI, se technikou přípravy mikročástic odpařováním rozpouštědla připraví somatogenin obsahující mikročástice ze solanky Dulbecco pufrované fosfátem (PBS) obsahující polyvinylalkohol (PVA). Do 250 ml solanky Dulbecco PBS (bez chloridu vápenatého) se přidá 1,0 g polyvinylalkoholu Airvol 205 společnosti Air Products k získání 0,4% (hmotnost/objem) roztoku polyvinylalkoholu v PBS. Polyvinylalkohol se disperguje v PBS při teplotě místnosti a k usnadnění rozpuštění se teplota zvýší na 45 C. Před použitím se roztok PBS obsahující PVA nechá vychladnout na teplotu místnosti.
V přibližně 50 ml methylenchloridu se rozpustí 1,60 g polykapro1aktonu, Polysciences s nízkou molekulovou hmotností. Do tohoto polymerního roztoku se přidá 0,20 g palmitové kyseliny. Do tohoto roztoku polymeru a mastné kyseliny se přidá 0,20 g na vzduchu mletého somatogeninu a aktivní somatogenin se disperguje na primáni velikost částic pomocí mírného míchání a ultrazvukové vibrace po dobu přibližně jedné minuty. Roztok polymeru a suspenze somatogeninu se přidá do mísiče míchaného PBS Dulbecco obsahujícího polyvinyla1kohol. K pojmutí a k míšení emulze oleje ve vodě se použije 400 ml kádinky Pyrex a plastového trojramenného míchadla a hřídele. V míchání se pokračuje přes noc k úplnému odpaření methylenchloridu. Výsledné mikročástice se získají vakuovou filtrací a umístí se na talíř desikátoru, kde se ve vakuu vysuší. Získá se 1,91 g sušených mikročástic, jež se prosejí na následující podíly (IJ. S. Standard ) ^ >250 mikrometrů - stopy
125 - 250 mikrometrů - 1,17 g <125 mikrometrů
0,69 g
Pří klad ůlSš^
Vliv koncentraci? soiaatogen i nu na profil účinku
Mikročástic, připravených podle předchozích příkladů, se použije ke zjištění účinku koncentrace somatogeninu (LY293404) v různých koncentracích mikročástic PLA/PGA. Profily účinku se měří exkrecí močovinověho dusíku v moči a růstem sérové úrovně hormonů v případe vepřů. E'ormulace mikročástic se zavedou do suspense pomocí '2% ( hmotnost/ob jem ) natr i ummethy lee 1 u 1 ozy 330 (NaCMC) v čištěné vodě Nano-pure II- Suspense se vstřikuje subkutánně do
Trh C
Trt D: boku.
Trt A; voda jako kontrola
Trt B'- částice 5% somatogeninu PLA/PGA ¢85/15), 125 - 250 mikrometrů, Mw = 90 900, viskozita = 0,58 dL/g v CHCI3 0 30 °C) suspendované ve vodě obsahující 2 % (hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvoření dávky 42 mm somatogeninu na zvíře částice 10% somatogeninu PLA/PGA (85/15). 125 - 250 mikrometrů, Mw = 90 900, viskozita = 0,58 dL/g v CHCI3 0 30 O suspendované ve vodě obsahující 2 % (hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvoření dávky 42 mm somatogeninu na zvíře částice 25% somatogeninu PLA/PGA (85/15), 125 - 250 mikrometrů. Mw = 90 900, viskozita = 0,58 dL/m v CHCI3 30 G) suspendované ve vodě obsahující 2 % (hmotnost/objem) NaCMC 33G k vytvoření dávky 42 mg somatogeninu na zvíře Výsledky této studie ukazují účinek mikročástic na prodloužené uvolňování obsažených peptidů. Snižování močovinověho dusíku je měřítkem růstového hormonu, který je stimulován uvolňováním somatogeninu z mikročástic- Jak vyplývá z obr. 3, došlo u všech prasat, ošetřených mikročásticemi, ke snížení vylučovaného močovinového dusíku v moči v prvních šesti dnech po ošetření. K největšímu snížení došlo u mikročástic s největším plněním (25%) a k nejnižšímu snížení u mikročástic s nejnižším plněním (5%). Na obr. 4 ie znázorněno přímé měření sérového růstového hormonu u prasat ošetřených mikročásticemi a vyplývá uvol nov .1111 sumatogen1 nu z mikročástic něho ustálené během času. Svislé sloupce na obrázcích představují relativní směrodatné odchylky.
Příklad ~24
X
Profily účinku soraatoqeninu s různými formulacemi PLA/PGA v mikročástic ich
Mikročástic, připravených podle předchozích příkladů, se použije ke zjištění účinku koncentrace somatogeninu (LY293404) v různých koncentracích mikročástic PLA/PGA. Profily účinku se měří exkrecí mocovinového dusíku v moči a růstem sérové úrovně hormonů ve vepřích. Formulace mikročástic se zavedou do suspense pomocí 2 % <hmotnost/objem) natřiummethy1celulózy 330 (NaCMC) v čištěné vodě Nano-pure II. Suspense se vstřikuje subkutánně do boku. Připraví se následné ošetřovací materiály <Trt).
Trt A = voda jako kontrola
Trt B = somatogenin <3 mi krogramy /kg/deri vstřikovaný dvakrát denně) jako pozitivní kontrola
Trt C = mikročástice 11,7 % somatogeninu PLA/PGA <50=50) <125-250 mikrometrů, Mw = 60 700) suspendované ve vodě obsahující 2 % <hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvoření dávky 22,68 mg somatogeninu na zvíře
Trt D = mikročástice 11.4 % somatogeninu PLA/PGA (50=50) <125-250 mikrometrů, Mw — 29 000) suspendované ve vodě obsahující 2 % <hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvoření dávky 7.56 ma somatogeninu na zvíře
Trt E = mikročástice 11,4 % somatogeninu PLA/PGA <50=50) <125-250 mikrometrů, Mw = 29 000) suspendované ve vodě obsahující 2 % <hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvořeni dávky 22,68 ma somatogeninu na zvíře
Trt F= mikročástice 13,6 % somatogeninu PLA/PGA <85=15) <125-250 mikrometrů, Mw = 90 900) suspendované ve vodě obsahující 2 % <hmotnost/objem) NaCMC 330 k vytvoření dávky 7,56 ma somatogeninu na zvíře
Trt. G= mikročástice 13,6 % somatogeninu PLA/PGA <85=15) <125-250.
mikrometrů. Ma = 90 900) suspendované ve vodě obsahující 2 (hmotnost/nbjem) NaCMC 330 k vy tvořeni dávky 22,68 mg somatogeninu na zvíře.
Jak patrno z obr. 5a 6, dochází u všech kastrovaných kanců (BID) injektovaných ke snížení vylučovaného močovinového dusíku v moči a ke zvýšení sérové úrovně GH ve všech 15-denních periodách po ošetření. Snížení vylučovaného močovinového dusíku v moči. a zvýšení sérové úrovně GH nastává u všech vepřů ošetřených mikročásticemi v prvních 6 dnech po ošetření. Úrovně vylučovaného močovinového dusíku v moči a sérového GH se vracejí na základní hodnotu přibližně 9. den po ošetření.
Vynález je objasněn a podrobně popsán na případech zvlášť vhodného provedení, která však vynález nijak neomezují a vynálezu zahrnuje veškeré obměny a modifikace odpovídajících duchu vynálezu Průmyslová využitelnost
Způsob podávání biologických činidel do vajec v částicovém nosiči vstřikováním nosiče do vzduchových komůrek vajec s výhodou uchovávaných ve svislé poloze se vzduchovou komůrkou nahoře k usnadnění migrace částicového nosiče mezi vnitřní a vnější blanou ke spodnímu konci vejce. Cásticový nosič uvolňuje biologické činidlo do obklopující kapaliny a do krve. Nosič přechází do ptáka po vylíhnutí z vejce a uvolňuje biologické činidlo do ptáka po vy1 ihnutí.
Claims (7)
- PATENTOVÉ NAROK Ϋ1- Použití mikročástic k výrobě vstřikovatelné formulace upraveně ke vstřikování do vejce s vnější a vnitřní blanou a s kapalinou mezi blanami s výjimkou na jednom konci, kde blány definují vzduchovou komůrku, přičemž částice odpovídají svou velikostí a hustotou migraci kapalinou mezi blanami ke konci vejce na protilehlé straně vzduchové komůrky.
- 2. Použití podle nároku 1 částic upravených ke vstřikování do vzduchové komůrky vejce umístěné ve vejci nahoře a majících hustotu nejméně stejnou, jako je hustota kapaliny mezi blanami.
- 3. Použití podle nároku 1 nebo 2 částic o střední velikosti menší než 500 mikrometrů.
- 4. Použití podle nároku 1 až 3 částic uvolňujících biologicky aktivní činidlo volené ze souboru zahrnujícího faktor uvolňující růstový hormon, syntetické analogy faktoru uvolňujícího růstový hormon a jejich farmakologicky účinné fragmenty.
- 5. Použití podle nároku 1 až 4 částic tvořených polymerem voleným ze souboru zahrnujícího pólylaktidové polymery, polyglykolidové polymery a kopolymery kyseliny mléčné a glykolové.
- 6. Způsob přípravy biologicky odbouráte 1ných polyesterových mikročástic obsahujících biologicky aktivní činidlo , vyznačující se tím, žea. se rozpustí polyester v organickém rozpouštědle,b. přidává se vodou rozpustné biologicky aktivní činidlo do roztoku připraveného podle odstavce (a),c. suspense vytvořená podle odstavce (b) se emulguje ve vodném prostředí, v němž je činidlo nerozpustné,d. odpařuje se rozpouštěli 1 o z emulse ae. vytvořené mikročástice se oddělují.Ί . Biologicky odbouráte1ný polyesterový mikročásticový farmaceutický prostředek .vyznačující se tím, ze je přepravitelný způsobem podle nároku 6.3. Biologicky odbouratelný polyesterový mikročásticový farmaceutický prostředek .vyznačující se tím, ze biologicky aktivní činidlo je volené ze souboru zahrnujícího faktor uvolňující růstový hormon, syntetické analogy faktoru uvolňujícího růstový hormon a jejich farmakologicky účinné fragmenty.
- 9. Biologicky odbouratelný polyesterový mikročásticový farmaceutický prostředek .vyznačující se tím, ze polyesterem je polylaktid volený ze souborou zahrnujícího samotnou kyselinou mléčnou, kopolymer kyseliny mléčné a kyseliny glykolové, směsi takových kopolymerů nebo směsi takových polymerů a kopolymerů.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US6841393A | 1993-05-27 | 1993-05-27 | |
| US08/168,941 US5635216A (en) | 1993-12-16 | 1993-12-16 | Microparticle compositions containing peptides, and methods for the preparation thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CZ125994A3 true CZ125994A3 (en) | 1994-12-15 |
Family
ID=26748947
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CZ941259A CZ125994A3 (en) | 1993-05-27 | 1994-05-23 | Biologically degradable polyester micro-particle pharmaceutical preparations injectable in bird's eggs and process for preparing thereof |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0628307A2 (cs) |
| JP (1) | JPH0797314A (cs) |
| CN (1) | CN1097984A (cs) |
| AU (1) | AU6329894A (cs) |
| BR (1) | BR9402078A (cs) |
| CA (1) | CA2124277A1 (cs) |
| CZ (1) | CZ125994A3 (cs) |
| HU (1) | HUT75467A (cs) |
| IL (1) | IL109730A0 (cs) |
| NO (1) | NO941938L (cs) |
| NZ (1) | NZ260577A (cs) |
| PE (1) | PE12995A1 (cs) |
| YU (1) | YU30194A (cs) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105123601B (zh) * | 2014-05-28 | 2018-02-27 | 贵州梦润鹌鹑有限公司 | 一种鹌鹑蛋的孵化方法 |
-
1994
- 1994-05-23 NZ NZ260577A patent/NZ260577A/en unknown
- 1994-05-23 EP EP94303655A patent/EP0628307A2/en not_active Withdrawn
- 1994-05-23 PE PE1994242893A patent/PE12995A1/es not_active Application Discontinuation
- 1994-05-23 IL IL10973094A patent/IL109730A0/xx unknown
- 1994-05-23 CZ CZ941259A patent/CZ125994A3/cs unknown
- 1994-05-24 AU AU63298/94A patent/AU6329894A/en not_active Abandoned
- 1994-05-25 NO NO941938A patent/NO941938L/no unknown
- 1994-05-25 BR BR9402078A patent/BR9402078A/pt not_active Application Discontinuation
- 1994-05-25 CA CA002124277A patent/CA2124277A1/en not_active Abandoned
- 1994-05-25 HU HU9401579A patent/HUT75467A/hu unknown
- 1994-05-25 CN CN94105759A patent/CN1097984A/zh active Pending
- 1994-05-25 JP JP6110886A patent/JPH0797314A/ja not_active Withdrawn
- 1994-05-25 YU YU30194A patent/YU30194A/sh unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO941938D0 (no) | 1994-05-25 |
| EP0628307A2 (en) | 1994-12-14 |
| NO941938L (no) | 1994-11-28 |
| CA2124277A1 (en) | 1994-11-28 |
| CN1097984A (zh) | 1995-02-01 |
| HUT75467A (en) | 1997-05-28 |
| BR9402078A (pt) | 1994-12-13 |
| IL109730A0 (en) | 1994-08-26 |
| YU30194A (sh) | 1997-01-08 |
| NZ260577A (en) | 1996-01-26 |
| HU9401579D0 (en) | 1994-09-28 |
| JPH0797314A (ja) | 1995-04-11 |
| AU6329894A (en) | 1994-12-01 |
| PE12995A1 (es) | 1995-05-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Mylonas et al. | Preparation and evaluation of polyanhydride microspheres containing gonadotropin-releasing hormone (GnRH), for inducing ovulation and spermiation in fish | |
| KR101245919B1 (ko) | 옥트레오티드 및 ２종 이상의 폴리락티드-코-글리콜리드중합체를 포함하는 서방형 제제 | |
| US4675189A (en) | Microencapsulation of water soluble active polypeptides | |
| Winzenburg et al. | Biodegradable polymers and their potential use in parenteral veterinary drug delivery systems | |
| US5603960A (en) | Preparation of microparticles and method of immunization | |
| US5635216A (en) | Microparticle compositions containing peptides, and methods for the preparation thereof | |
| US20210161806A1 (en) | Octreotide Depot Formulation with Constantly High Exposure Levels | |
| CA2321102A1 (en) | Regulation of estrus and ovulation in gilts | |
| JP5675798B2 (ja) | バイオポリマーハイブリッドゲルデポー送達システム | |
| JPH09505994A (ja) | 初期胚の卵内注射の方法と装置 | |
| JP2004502720A (ja) | 有効成分の経口吸収を改善するための粒子状担体 | |
| RU2688136C1 (ru) | Композиция для пероральной доставки биоактивных агентов | |
| UA99830C2 (uk) | Фармацевтична композиція з пролонгованим вивільненням, виготовлена з мікрочастинок | |
| ES2662927T3 (es) | Composiciones farmacéuticas de microesferas de triptorelina | |
| Crim | Methods for acute and chronic hormone administration in fish | |
| US20100266704A1 (en) | Octreotide depot formulation with constantly high exposure levels | |
| US20110003002A1 (en) | Sustained release formulation comprising octreotide and three linear polylactide-co-glycolide polymers | |
| US5788978A (en) | Injectable pulsatile ivermectin composition | |
| Giacomello et al. | Chitosan-coated alginate micro-particles delivery of active principles through conventional pelleted food-A study in Tilapia (Oreochromis niloticus) | |
| CZ125994A3 (en) | Biologically degradable polyester micro-particle pharmaceutical preparations injectable in bird's eggs and process for preparing thereof | |
| USRE37224E1 (en) | Method to prevent fertilization in mammals by administering a single dose of zona pellucida derived antigens, liposome and adjuvant | |
| WO1994027718A1 (en) | Preparation of microparticles and method of immunization | |
| KR100355517B1 (ko) | 수성의지속성방출제제 | |
| CZ255293A3 (en) | Somatotropic agent with controlled release, and process for preparing thereof same | |
| Breton et al. | Non invasive man-made modulation of gonadotropin secretion and maturation in teleost fish. New strategies to study induced fish spawning |