CS621585A2 - Method of analynprolinone derivatives production - Google Patents

Description

Tento vynález se týká způsobu výroby novýchalanylprolinových derivátů a směsí, které je obsahují.Vyráběné sloučeniny nacházejí použití v lékařství.

Sloučeniny vykazující 4-aůrenergieký blokují-cí účinek, například jako sloučeniny popsané v US paten-tu č. 3 705 907» se Široce používají v terapii stavů vy-volaných vysokým tlakem. Jiná skupina prostředků použí-vaných pro oSetřování hypertenze jsou inhibitory enzymukonvergujícího angiotensin (ACE), například jako jsou po ps/ány ve zveřejněné evropské patentové přihlášce » · \> —BP*O 012 401. Autoři nyní usoudili, že sloučeniny, kteréjsou současně jak ft-blokátory, tak ACE inhibitory, jsouzvláště vhodné pro ošetřování a profylaxi hypertenze ajiných stavů.

Autoři lohoto vynálezu s překvapením zjistili,že způsobem podle tohoto vynálezu vyrobitelné sloučeninyobecného vzorce I vymezeného dále a jejich fyziologickypřijatelné soli mají jak A-blokující, tak ACE inhibují-cí účinek.

V obecném vzorci I

kde η g Q a Qaž Q jsou navzájem nezávisle zvoleny ze sou-boru zahrnujícího atom vodíku a alkylovouskupinu 8 1 až 4 atomy uhlíku, A znamená skupmnu obecného vzorce -CO - NQ9 - (CH2)n - , ve kterém n znamená číslo od 1 do 6, o Q znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinua 1 až 4 atomy uhlíku a - 4 - methylenové skupiny v - (0¾* 0®°° nezávislé popřípadě substiuovány jednou nebo dvěma alkylovými skupinami s 1 až 4 atomy uhlí- ku, znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíku

B

E a Z

D (X) jsou navzájem nezávisle zvoleny ze souboruzahrnujícího karboxyskupinu a od ní odvozenýbenzylester nebo alkylester s 1 až 4 atomy uhlíku, hydroxymethylovou skupinu a karbamoylovouskupinu, znavná atom vodíku nebo alkylovou skupinu s 1až 6 atomy uhlíku, která je popřípadě substi-tuována amino skupinou, znamená benzenový kruh nebo naftylový neboindolylový kruhový systém, které jsou popří-padě v libovolné poloze substituoványVjedním•nebe-ffěkÓlik^ substituentý^z voleným^ ze soubo-ru zahrnujícího alkylovou skupinu s 1 až 4atomy uhlíku, která je sama popřípadě substiinována alespoň jedním atomem halogenu, alkoxysku-pinu s 1 až 4 atomy uhlíku, atom halogenu, - 5 - nitroskupinu, aminoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlí ku v alkoxylové části a hydroxyskupinu, a

znamená pyrrolidinový, oxazolidinový nebo thiazolidinový kruh .

Pod obec vzorec I se také zahrnují fyziolo gieky přijatelné soli.

Tento vynález se také vztahuje k solím slouče-niny obecného vzorce I, které nejsou fyziologicky přija-telné, jaké se mohou používat jako prekurzory při výro-bě sloučenin obecného vzorce I a jejich fyziologickypřijatelných solí. Výhodně v definovaném A znamená n číslo 2 až 4, zvláště 4. B může představovat alkylovou skupinu s 1Λ až 4 atomy uhlíku,například methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, isobutyl nebo terc.-butylovou skupinu.Deriváty karboxylové kyseliny při definování E a Z zahr-nují estery, zvláště benzylester a alkylester s 1 až 4atomy uhlíku, hydroxymethyl£i| a karbamoyl. - 6 -

Zvláště výhodné sloučeniny obecného vzorce Ia jejich fyziologicky přijatelné soli jsou látky, ve kterých (X) představuje indolylový kruhový systém.

Jinou podtřídou sloučenin obecného vzorce Ia jejich fyziologicky přijatelných solí, které mohou býtthráněn^ odděleni nebo v libovolné pořadované kombinaci,(p joflnou jinou q/nobo nčlrtcrou ?ibnvn1nnn jinou podulru^<plnuu zde" poygauou\ jsou: 18 I) sloučeniny a jejich soli, kde Q a Q až Qznamenají vždy vodík, (X) je nesubstituovaný , A představuje skupinu vzorce - CO - NQ^ - ÍC^^n “ * ve kterémmá výše uvedený význam, Q znamená vodík, a skupiny - (CH2)n nejsou substituované nějakou alkylovou skupinous 1 až 4 atomy uhlíku, B značí alkylovou skupinu s 1 až4 atomy uhlíku a - N Ϊ představuje pyrrolidinový,oxozolidinový nebo thiazolidinový kruh, II) sloučeniny a soli, kde v A svrchu uvedenéhovýznamu n značí 1, III) sloučeniny a soli, kde

pyrrolidinový kruh, - 7 - IV) sloučeniny a soli, kde - má jiný význam, než pyrrolidánový kruh, V) sloučeniny a soli, kde (X) znamená benzenovýkruh, VI) sloučeniny a soli, kde (X) znamená naftylovýkruhový systém, VII) sloučeniny a soli, kde (X) znamená indolylovýkruhový systém, VIII) sloučeniny a soli, kde (X) je jnsubstituovaný a IX) sloučeniny a soli, kde B znamená alkyl s 1 až4 atomy uhlíku, zvláSté isopropyl a Q a Q až Q3 značívždy vodík, přičemž ve svrchu^ uvedených sloučeninách a solích majíkenkrétně jeevoámé^substituenty význam popsaný pod obecnýmvzorcem I. 1 ,-

Když kruhový systém označený jáo (X)představuje benzenový kruh, místo připojení atomu kyslíkumůže být v poloze ortho, meta nebo para, vzhledem ksubstituentu A. Když (X) představuje indolylový kruhovýsystém, nejvýhodněji je atom kyslíku připojen v poloze4 nebo 5 9 substituent -A- v poloze 2 nebo 3» Pokud (X)představují! naftylový kruhový systém, nejvýhodněji je a™tom kyslíku připojen v poloze 1 nebo 2 a substituent —Α-ν poloze 6 nebo 7. Výhodnou sloučeninou podle toho±o vy-nález-u je N-Cl~karboxy-5“/4*’(3~isopropylamino-2-hydroxyproppžy )indol-2-kai*boxarnido/pentyl3alanylproli-na jeho fyziologicky přijatelné soli a všechny z jehojednotlivých isomerních forem a jejich, směsi. Tyto isome-ry a směsi se pokládají za jednotlivé látky. a—lak vuoliuti být chráflřťty’ jako-jedí^tli^c smyky přítomné— ho --vyn á.i eauj* zahrnují dálexi jatelné soli- ve0 |fet ex·é žto i so.mery

Jiné výhodné sloučeninyuvedené látky a jgjich fyziologicky přivšech isomerních formách a jejich směsi. N-El-karboxy-4-/4-(3-isopropylamino--2 ~hydroxypropýxy )indol-2-karboxamido/butyl]talanylppG-lín, N-El-karboxy-3-/4-(3-isopropylamíno- -2-hydroxypropoxy)indol^-karboxamidoZ^ropylJalanyl“ prolin, l—ΓΝ— Cl-karboxy-3-/4- (3-isopropylamino-- 2 -hy dr o xy pr opo xy) ře ny 1/ $x· o p5713 a lany 13 pr o 1 in, l-DJ-Il-ethoxykarbon.yl.~3--/3~( 3-iaopro-pylaminoT2~hydroxypropoxy)feny1/propy13alany13pro-lin. , l-CN~Cl-karboxy~3-/3- (3-i'sopropylamin.o--2~hydroxypropoxy) fenyl/pr opy 13 alanylj pro lín.} W-C.l-karboxy-4-/ 5- (2~hydroxy-3-isopro-pylaminopropoxy)-2-naftyl/’outyl3alanylprolin, N-El-karboxy-4-/5“ (2-hydroxy-3-isopropyl-aminopropoxy)-l-naftyl/butyl3alanylprolin, N-El-karboxy-4-/4-(2-hydroxy-3-isopro-pylaminopropoxy)-1-naftyl/butyl3 alanylprolin, N-Ekarboxy-/5~ (2-hydroxy~3-ifíop.ropyl~aminopropoxy)-2-naftyl/methyl3alanylprolin, N-Cl-karboxy-2-/4-(2-hydroxy-3-iaopro-pylaminopropoxy)indol~3-yl/ethylj alanylprolin, N~El-karboxy-3-/4-(2-hydroxy-3-isopropyl-aminopropoxy)indol-3-yl/propy13alanylprolin, 10 N- D.-kai’boxy~4-/4“ (S-hydroxy-l-iso“propylaminopropoxy)indol-3-yl/butyl3alanylprolin, N-Cl-karboxy-5-/4-(2-hydroxy-3-isopropyl-aminopropoxy)indol-3-yl/pentylJ alanylprolin, N~Cl“karboxy-2-/4-(S-hydroxy-3-isopropyl-aminopropoxy)indol-2-yl/ethyl!alanylprolin, N-Cl-karboxy-3-/4-(2-hydroxy-3~isopropyl-aminopropoxy)indol-2-yl/propyl3alanylprolin, N-Cl-karboxy-4“/4-(2“hydroκy“3-isopropyl-aminopropoxy ) indol.-2-yl/butyl!alanylprolin a N-Ll-karboxy-5-/|^4-(2-hydroxy-3-isopropyl-aminopropoxy)indol-2-yl/pentylj alanylprolin.

Fyziologicky přijatelné soli sloůéeninobecného vzorce I zahrnují soli odvozené od organickýcha anorganických kyselin, stejně jako od bází. Soliodvozené od kyselin zahrnují acetát, adipát, alginát,aspartát, benzoát, benzensulfonát, hydrogensulfát, buty-rát, citrát, {íamforát, kafrsulfonát, cyklopentanpropionát,diglukonát, dodecylsulfát, ethansulfonát, fumarát,glukoheptanoát, glycerofostát, hemisulfát, heptanoát,hexanoát, hydrochlorid, hydrobromid, hydrojodid, 2--hydroxyethansulfonát, laktát, maleát, methansulfonát,^2-naftalensulfonát, nikotinátip oxalát, palmoát, pek-tinát, persulfát, 3-fenylpropionát, pikrát, pivalát,propionát, sukcióát, tartrát, thiokyanát, tosylát a - 11 undekanoát, Bázické soli zahrnují soli amonné, solialkalických kovů,, jako sodnou a draselnou sůl, solialkalických zemin, jako sůl vápenatou a horečnatou, solis organickými bázemi, jako dicykl&amp;te xylaminovou sůl, sůls ft-methylvD-glukaminem a soli s aminokyselinami, jakos argininem a lysinem,

Kvarterní amoniové soli se mohou tvořit,pokud je přítomna skupina obsahující dusík, napříkladreakcí s nižšími alkylhalogenidý, jako je methyl-, ethyl-,propyl- a butylchlorid, -bromid a -jodid, dialkylsulfáty,halogenidy s/^Llouhým řetězcem, jako jsou decyl-, lau-ryl- , myristyl- a stearylchlorid, -bromid a -jodid,aralkyllaalogenidy podobné benzylhalogenidům a fenetyl-bromidy. Z jiného hlediska se tento vynález týkásloučenin obecného vzorce I a ^jejich fyziologicky při-jatelných solí určených pg^ použití v lékařství,včetně výroby terapeutických prostředků, hvláště když jsoupoužívané za určitých podmínek zde popsaných, aa vláč 14 metody profylaxe nebo ošetřování lidského nebozvířecího těla, terapie nebo diagnózy, Sloučeniny aeWA»1 12 soli se mohou používat kdekoli se indikuje AOE inhibitora/n.ebo éÁa -blokátor. Tak napříklád sloučeniny obecnéhovzorce 1 a jejich fyziologicky přijatelné soli se mohoupoužívat, v terapii kardiovaskulárních chrob, zvláštěpro ošetřování všech forem hypertenze, jak po krátkou,tak po dlouhou dobu (zvláště ve spojeni s vysokou sérovouhladinou reninu) a obecně k ošetřování a profylaxikongestivní nedostatečnosti srdce. Sloučeniny obecnéhovzorce 1 a jejich fyziologicky přijatelné soli se mohoutaké používat při ošetřování, hyperaldosteronie, angínypectoris, glaukomu a migrény.

Množství sloučeniny obecnéhMo vzorce 1nebo jeho fyziologicky přijatelné šili vyžadované k do-sažení požadovaného biologického účinku bude samozřejmězáviset na řadě faktorů, například zvllené specifickésloučenině, zamýšleném použití, cestě podání a příjemci.Obecně se očekává, že denní dávka je v rozmezí od 1 ngdo 100 mg za den na kilogram tělesné hmotnosti, , napříkladod 50 ng do 50 mg/kg/d a zvláště 500 ng až 5 mg/kg/d.

Ku příkladu intravenozní dávka n»přífcanSá v rozmezí od 10 ng do 1 mg/kg, která sd může běžně podávat jakoinfuze v množství od 0,1 ng do 50 /ug na kilogram zaminutu. Infuzní roztok vhodný k tomuto účelu napříkMobsahuje od 0,01 ng do 100 /ug na mililitr. Jednotková - 13 - dávka například obsahuje od 100 ng do 100 mg účinné slož-ky; například ampule pro injekce obsahují od 100 ng do1 mg / orálně podávané formy ááxkgróí:jednotkgrvé dávky,jako tablety nebo kapsle, například obsahují od 0,001do 50 mg, zvláště od 0,02 do 20 mg. U svrchu uvedenýchúdajů v případě fyziologicky přijatelných solí, hmotnostise vztahují k hmotnosti iontu účinné složky, to jestiontu odvozenému od sloučeniny obecného vzorce I.

Pro použití při ošetřování nebo profylaxiza podmínek uvedených výše, pokud sloučeniny obecnéhovzorce I nebo jejich fyziologicky přijatelné soli se ma-jí použít jako samotné sloučeniny, výhodně jsou přítomvny s přijatelným nosičem jako farmaceutické prostředky, feoďte" tbhófo yynážéz^ Nosičmusí být pochopitelně přijatelný v tom smyslu, že musí býtsnášenlivý s ostatními složkami prostředku aúesmídráždit příjemce. Nosič může být pevný nebo kapalný aje výhodně zpracován se sloučeninou ve formě jednotkovédávky, například tablety, která může obsahovat od. 0,05do 95 % hmotnostních sloučeniny. V prostředku mohou býtpřítomny i jiné farmaceuticky účinné látky, jak jeuvedeno výše. Sloučeniny obecného vzorce I a jejichfyziologicky přijatelné soli se mohou zapracovat do 14 - prostředků bu3 ve formě kyseliny* nebo soli nebo svého esteru a prostředky se mohou připravovat některouz dobře známých technik farmacie, spočívajících v pod- statě ve smíchání složek protředku.

Prostředky zahrnují takové, které jsouvhodné pro orální, feektální, lokální, bukální (napříkladsublinguální), parenterální (například subkutánní, intramuekulárná, ’ n kcadermíl r í nebo intra véno zní) podání,třebaže nejvýhodnější cestejá v libovolném daném případěbu.de záviset na povaze a četnosti podmínek podání acharakteru jednotlivé sloučeniny obedného vzorce 1 nebojejí fyziologicky přijatelné soli.

Prostředky vhodné pro orální podání mohoubýt přítomny v oddělených jednotkách, jako jsou kapsle,oplatky se speciálním uzávěrem (kasety), pokroutkynebo tablety, obsahující vždy předem dané množství slou-čeniny obecného vzorce I nebo její fyziologicky přijatel-né soli, jako prášek nebo granule, jako roztok nebosuspenze ve vodné nebo nevodné kapalině, jako emulze olej ve vjáodě nebo jakd^eélUxze voda v oleji. Takovéprostředky se mohou připravovat některou farmaceutickoumetodou, avšak všechny metody zahrnují stupeň smíchánísloučeniny s nosičem., který tvoří jedna nebo několik vedlejších složek. Obecně se prostředky připravujírovnoměrným a důkladným smícháním sloučeniny š kapalnýmnebo jemně rozmělněným pevným posiěem nebo oběma tako-vými nosiči a potom, je-li zapotřebí, se produkt tvarujeďdo požadovaného vnějšího tvaru. Například tablety semohou připravovat slisováním nebo roztavením prášku nebo granulí sloučeniny, popřípadě s jednou nebo několikavedlejšími složkami. Lisované tablety se mohou připravo- vat lisováním ve vhodném stroji, sloučenina ve volnětekoucí formě , jako je prášek nebo granule, se popřípaděsmíchá s pojivém, mazadlem, inertním ředidlem, povrcho-vě aktivní látkou nebo látkami nebo s dispergační látkou nebo látkami. Tavené tablety se mohou vyrábět z taveninyve vhodném stroji, prášková sloučenina se vlhčí inert-nřifcn kapalným ředidlem.

Prostředky vhodné pro bukální (sublingu-ální) podáhí zahrnují pokroutky aahrťwjíeí·sloučeninu obecného vzorce I nebo její fyziologicky přijatelnou sůlv ochucené bázi, obvykle sacharóze a akacii nebotragantu, a dále pastilky zahrnující sloučeninu v inert-ní bázi, jako želatině a glycerinu nebo sacharóze aakacii.

Pros

vhodné

~iF pro parenterální podání obvykle tvoří sterilní vodnépreparátjjsloučeniny obecného vzorce I nebo jeho fyzio-logicky přijatelné soli. Prostředky jsou s výhodou iso-tonické s krví zamýšleného· příjemce. Tyto prostředky ses výhodou podávají intravenozně, třebaže podávat se mohoutaké pomocí subkutánních, intramuskulárních nebo intra-dermálních injekcí. Prostředky se mohou obvykle připravo-vat smícháním sloučeniny s vodou a úpravou produktu nasterilní a isotonický s krví. Injikovatelné prostředkypodle vynálezu obvykle obsahuje 0,1 až 5 % hmotnostníchúčinné složky.

Prostředky vhodné pro rektální podáníjsou s výhodou přítomny jako Čípky v jednotkových dávkách.Tyto prostředky se mohou připravovat smícháním slouče-niny obecného vzorce I nebo jeho fyziologicky přijatelnésoli s alespoň jedním obvyklým pevným nosičem, napříkladkakaovým máslem, a upraví se na výslednou směs. Prostřed-ky vhodné pro lokální aplikaci na kůži s výhodou mají for-mu masti, krému, lotionu, pasty, gelu, postřiku, aerosolunebo oleje. Nosiče, které se mo$pu použít, zahrnujívaselinu, lanolin, polyethylenglykoly, alkoholy a jejichsměsi. Účinná látka je obvykle přítomna v koncentraciod 0,1 do 15 % hmotnostních, vztaženo na hmotnost prostředku, například od asi 0,5 do asi 2 % hmotnostních. - 17 -

Sloůčeniny obecného vzorce I jejichfyziologicky přijatelné soli se mohou připravovat li-bovolným obvyklým způsobem,V^odls—Ι'σΤισtσ~'"vynálezu "seτπττίτσ^ například ^řipravo'valf~n'ěkt»rgí|. metodou popsaifoudále. Sloučeniny obecného vzorce T a jejich fyziologic-ky přijatelné solijá se mohou připravovat některou zestandardních metod z oboru peptidové chemie a mohouzahrnovat kopulaci arylové části, amino(hydroxy)alkoxy-lového bočního řetězce a aminokyselin nebo jejich deri-vátů, které tvoří dohromady sloučeniny obecného vzorce I,v libovolném požadovaném půřadí. Je třeba uznat, že na-příklad arylová část, boční řetězec a aminokyseliny nebojejich deriváty se mohou kopulovat v libovolném pořadíza vzniku dvou oddělených chemických látek, které sev konečném stupni^ (který autpři tohoto vynálezu mohouchránit jaká znak tohoto vynálezu) se potom kopulujina sloučeninu obecného vzorce I nebo její prekurzora je-li to žároucí, převede se prekuraer (jehož konverziautoři tohoto vynálezu mohou chránit jako znak tohotovynálezu) na požadovanou sloučeninu obecného vzorce Ia popřípadě, je-li to* žádoucí, sloučenina obecnéhovzorce I se převede na jinou sloučeninu obecného vzorceI a popřípadě, je-li to žádoucí, převede se libovolnásloučenina obecného vzorce I takto vzniklá na svou fyzio-logicky přijatelnou sůl. 18 - Předmětem tohoto vynálezu je způsob výrobysloučeniny obecného vzorce I nebo její fyzikogicky při-jatelné soli, který spočívá v tom, Se se nechá reagová&amp;tsloučenina obecného vzorce Ha Q Q1 Q3 Q4 B - N —G-C-C-O-(X) ( Ila ), Q2 OH Q5 obecného vzorce lib

Ph

CH

Q

I o c - o \ /o5c - (X) ( lib ), N. /\ —‘ 0 Q' l/ \ 2Qx nebo obecného vzorce líc - 19 -

( líc ), kde n, Q, Q1 až B a (X) mají výěe uvedený význam,

se sloučeninou obecného vzorce III

kde R6 až R9, D, E a

mají výSe uvedený význam, nebo reaktivním derivátem této sloučeniny nebo chráněnýmderivátem této sloučeniny nebo jejíohr reaktivního deri-vátu , - 20 - a potom, je-li to zapotřebí ^provede se^jedna ftebo-něfeo- A fc. -liž( Následující-^ případnými reake/'v libovolném pořadí: I) sloučenina takto vyrobená se o sobě známou me-todou zbaví chránicí skupiny nebo skupin, II) jestliže Se použilo sloučeniny obecného vzorcelib, odstranění chránící skupiny nebo skupin a otevřeníkruhu se provádí působením kyseliny trifluoroctové, III) jestliže se použilo sloučeniny obecného vzorce líc, otevření epoxidového kruhu se provádí působenímtepla ve vhodném rozpouštědle, IV) jestliže se vyrobí sloučenina obecného vzorce I, kde E a/nebo Z znamená karboxyskupinu, získaná slou-čenina se popřípadě převede o sobě známou metodou nasloučeninu, ve které E a/nebo Z znamená od původně pří-tomné skupiny odvozený benzylester nebo alkylester s 1až 4 atomy uhlíku, hydroxymethylovou skupinu nebo karba-moylovou skupinu, V) jestliže se vyrobí sloučenina obeeného vzorce I, kde E a/nebo Z znamená derivát karboxylové kyseliny, - 21 a 22 - tato sloučenina se o sobě známou metodou hydrolýzýje zabázickýeh podmínek na odpovídající sloučeninu, ve kteréE a/nebo Z znamená karboxyskupinu, VI) vyrobená sloučenina obecného vzorce I se zpra- cuje za podmínek, které jsou o sobě známé, s minerálnínebo organickou kyselinou na fyziologicky přijatelnou sůl

vzorc-fch Ila, lib, líc a III>-vztu=-

JmjfeXeh-aer-fc Neaktivními derivátjá sloučeninyVMbovolné-_bo vzorné, zahrnuj^ takové sloučeniny, které jsou substi-tuovány jednou nebo několika reaktivními částmi a/nebotakové sloučeniny, kde jedna nebo několik částí je na-hrazeno jednou nebo někoAka reaktivními částmi. V obeeném vzore® III uvedeném výše, kterákolize skupin "(θϊ^Ρη" tvořících část vzorce meziproduktu,4sou vždy nezávisle popřípadě substituovái^y jednou nebodvěma alkylovými skupinami s 1 až 4 atomy uhlíku. Výše uvedené případné reakce I až VI tvoří další znaky tohoto vynálezu, [a-mohou být chránčny-^ednotlivěnebo jaku libovolná požadovaná kdabinaee.

Vybraná reakce I zahrnuje stav, při kterém$e prekurzor sloučeniny obecného vzorce I analogický jak©sloučenina, ale kde jedna nebo několik částí této sloučeninyje chráněno vhodnou chránící skupinou. Reakce spočívá v tom,že se prekurozr podrobí takovým podmínkám a/nebo zpraco-vání s činidlem nebo činidly, které vedou k odstraněníchránících skupin s následujícím vznikem požadované slou-čeniny obecného vzorce I.

Detaily metod peptidové chemie © jednotlivéaktivující a ochranné skupiny a vhodné reakční podmínkypro výše uvedené postupy lze nalést v dále uvedené lite-ratuře,, která je uvedena čistě za účelem příkladu a nenízamýšlena ani jak© vyčerpávající, ani jako omezující: ©> Schrodera Luebke, "The Peptides", Academie

Press, 1965, b) Bellan a Málek, J. Am. Chem. Soc., 90, 165 (1968), c) Tilak, Tetrahedron Letters, 849 (1970), d) Beyerman, Helv* Chim. Acta, 56, 1729 (1975)» - 24 e) Stewarts^Zoung, "Solid Ptiaee PeptideSynthesis", W»H»Freeínan and Co», 1969, f) "Methoden der organischen Chemie", Houben--Weyl, 4. vydáfií, sv. 15, "Synthese ven Peptiden", část1 a 2, Georg Thieme; Verlag, 1974, g) "The Peptidesí Analysis, Synthesis, Biology",Vyd. E. Gross a J· MeinEofer, sv· 1 až 4, Academie Press,197$, h) "Peptides; Syntesis, Physical Data", W>Voelter and E. Sehmid-Siegmann, sv· 1 až 6, Georg ThiemeVerlag, 1983, i) E. Atherton, M. J· Gaitt R. C· Sheppard a B. J. Williams, Bioorganic Chem«, 8, 351 - 370, 1979, j) R. C· Sheppard, Chemisrty in Britain, 1983,402 - 414, á k) E, Atherton, E. Brown a R. C· Sheppard, d.0. S. Chem. Comau, 1981, 1151 - 1152, - 25 - l) T. W. Greene, Brotective Groups in Organic

Siynthesis, Wiley, New York, 1981 a m) G. C. Barett (vyd.), The Shemistry and

Biochemistry of the Amino Acids, 1. vyd., Chapman andHalí, Londýn a New York, 1985. Výhodné provedení způsobu podle tohoto vynále-zu spočívá v tom, že se použije reaktivního derivátusloučeniny obecného vzorce Ha, lib nebo líc, kde skupi-na (X) je substituována karboxyskupinou nebo skupinou od-vozenou od karboxylové skupiny a ostatní substituenty ma-jí svrchu uvedený význam. Výhodné provedení způsobu podle tohoto vynále-zu spočívá v tom, že se reakce provádí za použití dicyklo-hexylkarbodiimidu v přítomnosti 1-hydroxybenzothiazolu,k potlačení nežádoucích reakcí, ve vhodném rozpouštědlea-^ři vhodné teplotě od snížené teploty až do teplotymístnosti. Výhodné provedení způsobu podle tohoto vyná-lezu spočívá v tom, že se reakce provádí za teplotymezi -15 až 0 GC. 26 - Výhodné provedení způsobu podle tohoto vynále-zu spočívá v tom, že se za použití příslušných výcho-zích látek připravuje sloučenina obecného vzorce I, kdeQ a Q1 až Q8 znamenají vždy atom vodíku, (X) znamená fe-ny lenovou skupinu nebo skupinu vzorce nebo ΟθΝΗ?, A představuje skupinu vzorce -CO-NQ^-CCHg)^, ve kterémg n mé výše uvedený význam, Q představuje atom vodíku aani jedna z methylenových skupin -(CH2)n- není substi-tuována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku,^B_zna-mené alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a -N^__Ύ. znamená pyrrolidinový, oxazolidinový nebo thiazolidinovýkruh, nebo její fyziologicky přijatelná sůl. Výhodné provedení způsobu podle tohoto vynále-zu spočívá v tom, že za použití příslušných výchozíchlátek se připravuje sloučenina obecného vzorce I, kde Q a Q až Q znamenají vždy atom vodíku, ve skupině A,g znamená Q atom vodíku a žádné * methylenových skupinnení substituována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomyuhlíku, B znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy ^líku, E znamená karboxyskupinu, Z znamená karboxys^upinunebo alkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkoxylové části, D znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, (X) znamená fenylenovou skupinu nebo sku pinu vzorce ΟθΝΗγ

znemaná pyrrolidinový kruh - 26a - nebo její fyziologicky přijatelná sůl. , Výhodné provedení způsobu podle tohoto vynále-zu spočívá v tom, že za použiti příslušných výchozíchlátek připravovanou sloučeninou obecného vzorce I nebojejí fyziologicky přijatelnou solí je N-Ll-karboxy-5--/4-(3-isopropylamino-2-hydroxypropoxy)-indol-2-karboxa-mido/ypentyljalanylprolin v některé ze svých jednotlivýchisomerníeh forem nebo v jejich směsi,nebo fyziologickypřijatelná sůl některého takového isomeru nebo směsí. - 27 -

Jako je v peptidové chemii obvyklé, mohou sepoužít rozdílné ochranné skupiny současně na různých částechmolekuly, aby se usnadnilo selektivní odstraňování těch-to skupin v různých reakčních stupních, podle použitýchreakčních složek a reakčních podmínek· Tak například chrá-nící skupiny terc.-4utoxykarbonylová (BOC) a terc.-butyl--dimethylsilylová (TBIMS) se mohou odstranit působenímsilné kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, s výho-dou ve vhodném rozpouštědle, jako je methanol· Chránícíbenzyloxykarbonylová skupina (Z) se může odstranit hydro-genací na palladiu na uhlí, s výhodou aa kyselých xpá,podmínek, ve vhodném rozpouštědle, jako v methanolu. Je-lipotřebné chránit karboxyskupinu, jak je definovaná proskupiny Ba Z uvedené výše, toho se obvykle dosahuje tvor-bou odpovídajícího jednoduchého esteru, jako terc.-butyl-esteru, a odstranění této skupiny se může dosáhnout pro-vedením kyselé hydrolýzy.

Sloučenina obecného vzorce I, kde Z představu-je ester, vzniká tedy reakcí odpovídající sloučeniny obec-ného vzorce I, kde Z představuje karbamoyl, s příslušnýmalkoholem v přítomnosti kyselého katalyzátoru, s výhodouiontoměnišového typu, jako je Amberlyét 15. - 28 Závěrečná reakce může zahrnovat případ, kdyve sloučenině obecného vzorce I E a/nebo Z značí karbo-xyskupinu, a spočívá v převedení této sloučeniny na slou-čeninu ji odpovídající, kde E a/nebo Z značí derivátkarboxylové kyseliny, například zpracováním sloučeninys příslušným alkoholem v přítomnosti vhodné kyseliny,jako je kyselina sírová.

Taková reakce může také zahrnovat případ, kdy ve sloučenině obecného vzorce značí derivát karboxylové kyseliny, a spočívá v převedení sloučeninyna odpovídající sloučeninu, kde E a/nebo Z značí karboxy-skupinu,například hydrolýzou, jako za bázických podmí-nek, například v přítomnosti hydroxidu sodného.

Způsob podle vynálezu může také zahrnovatreakci vzniklé sloučeniny obecného vzorce I s příslušnouminerální nebo organickou kyselinou.

Reakce podle vynálezu se obvykle provádí zapoužití dicyklohexylkarbodiimidu (DCCI) v přítomnostil-hydroxybenzothiazolu (HOBT) k potlačení nežádoucíhoprůběhu reakce, ve vhodném rozpouštědle, jako methylen-chloridu nebo dimethylformamidu (DME) za snížené teplo-ty, například od -15 do 0 °G nebo až za teploty místnosti - 29 až 55 ~ je-li to vhodné. Takový průběh reakce se dále označujejako podmínky "DCCI/HOBT".

Uznává se, že když některý způsob podle tohotovynálezu nemá za výsledek přípravu požadovaných jednotli-vých isomerů sloučeniny obecného vzorce I nebo jeho fyziologicky přijatelné soli, postup může zahrnout oddělováníisomerů, bučí ze samotného konečného produktu nebo z některého vhodného meziproduktu v libovolném běžném stupnireakce.

Vynález bude nyní dále popsán pomocí následu-jících příkladů, ^těcjhto příkladech Teploty jsou udává-ny“ v'é Stupních Cěltíia^ - 56 -

Příklad 1

Způsob výroby N-Cl-(S)-karboxy-5-/4--(3-isopropylaminoS2-hydroxypropoxy)indol-2-karboxami-d o /p e n t y 1 j - D, L- a 1 any 1 - L-pr o 1 i nu a)

Způsob výroby 2-benzyloxybenzaldehydu

Směs 24,5 g salicylaldehydu, 34 g ben- zylbromidu, 15 g bezvodého uhličitanu draselného a acetonu se míchá pod zpětným chladičem 5 hodin. Rozpou n štědSio se odpoaří za sníženého tlaku a jfopaiek se roz-dělí mezi hydroxid alkalického kovu »eaé a ether.Etherová vrstva se promyje vodou, suší síranem Horečnátým a odpaří. Ve formě viskózního oleje se dostaneprodukt. Získaný olej stáním pomalu krystaluje. Pevnálátka takto získaná má teplotu taná 46 b) Způsob výroby ethylazidoacetátu K roztoku 7θ g azidu sodíku ve 200 ml vody se přidá 1$7 g ethylbromacetátu a potom 0,5 g tetrabn lylnsno o.' unbromid o míchá 1 hodinu a potom sese oddělí destilujea suší be parou. Olejo vitý produktjoridem vápenatým. Výtěžek s vodní n „v.,.. i

Oj - 57 - produktu činí 126 g (97 n). c) Způsob výroby metbyl-4-bensyloxyíndol- -2-karboxylátu 9,2 g sodíku se rozpustí ve 270 mlsuchého methanolu a roztok se ochladí na teplotu 0 °£Potom se přidá 42,4 g 2-benzyloxybenzaldehydu ve snešispi,o ethylazidoacetátu. Po pětuhodinovém míchání za teploty 0 až 5 se směs vylije na led a 20 g chloriduaminnébo. Směs se extrahuje §00 ml etheru. Organickáfáze se promyje vodou, suší síranem horečnatým a od~p<»í z ar sníženého tlaku při teplotě 2 5 Žlutá pevnálátka se rozpustí ve 400 ml xylenu a získaný roztok sepo kankách přidává během 2 hodin k 25 ml refluxovaného xylenu. Roztok se refluxuje další hodinu a potom senechá stát přes noc. Získá se 19 g methyl-4-benzyloxy-indol-2-karboxylátu o teplotě tání 193 až 194 °(>.Vzorek krystalovaný z methanolu má teplotu tání 195,5 d) Způsob výroby methyl-4“hydroxýindol-2- "k arbo xylá t u 4,2 g methyl-4~benzyloxyin.dol-2-karboxy-látu a 0,5 g 10η palladia na aktivním uhlí se ve - 58 - 100 ml methanolu třepe s vodíkem po^ doba jddnéhodiny. Potom se katalyzátor odstraní β rozpouštědlose odpaří. Odparek se rekrystaluje ze směsi metbanolua trichlorethylenu s přídavkem, aktivního uhlí. Získáse 2,5 g (87 %) methyl-4-hyároxyindol-2~karboxylátu,ve formě bezbarvých jehliček o teplotě tání 192 až193 °C‘ e) Způsob výroby methyl-4-(2“hydroxy-3- - i s o pr o py 1 ami no pr o po xy) i ndo i- 2 -k ar b o xy 1 á t u 6,5 g methyl-4“hydroxyindol-2-karbox,y-látu se rozpustí v 13,5 ml dioxanu, potom se přidá 33,5ml lfi roztoku hydroxidu sodného a poté 8,1 g epi-chlorhydrinu. Směs se mícMá za teploty 80 °C/po dobu3 hodin, ochladí se a extrahuje 15® ml směsi chlorofor-mu a dioxanu v poměru 5 : 1. Vodná fáze se promyje dal-ším podílem 30 ml směsi chloroformu a dioxanu a spoje-né extrakty se promyjí 150 ml nasyceného roztoku solanky,sůší síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku.Odparek se rozpustí ve směsi 15 ml dioxanu a 13 mlisopropylaminu a roztok se zahřívá ma teplotu 70 °£,jednu hodinu. Potom se roztok odpaří za sníženého tlakua odparek se extrahuje čtyřikrát vždy 60 ml 10% - 59 - kyseliny citrónové. Kyselé extrakty se promyjí ethe-rem, zalkalizují 10% roztokem uhličitanu sodného aextrahují chloroformem. Chloroformové extrakky sesuší síranem hořečnatým a odpaří za sníženého tlaku,aby se dostal produkt ve formě bezbarvého prášku, kterýmá teplotu tání 144 až 145 Výtěžek produktu činí 6,3 g·» Analytický vzorek rekrystalovaný z ethylacetátumá teplotu tání 143 0C*· f) Způsob výroby methyl-4-L3-(N-terc.-bu-tylkarbonyl-N-isopropylamino)-2-hydroxypropoxyj indol-~2~karboxylátu 4,05 g methyl-4-(2-hydroxy-3-isopropoxy amino)propoxyindol>2-karboxylátu se rozpustí ve 20 mldimethylformamidu a přidá se 3,30 g di-terc.-butyldi-karbonátu. Po celonočním míchání se roztok vylije na vodu a několikrát extrahuje ethylacetátem. Spojené

Lddi^ organicTTuttrakty se promy j'17solankou), suší síranemhorečnatým a odpaří za sníženého tlaku na produkt tvo-řený bezbarvým olejem. Výtěžek činí 5,3 g. gy kyseliny

Způsob výroby 4-C3-(N-terc.-butoxykar- bonyl-M-isopropylamino)-2-hydroxypropoxyj indol-2-karboxlove 50 5,37 g esteru se rozpustí v 50 ml ethanolua přidá. sp 13,2 ml 2H hydroxidu sodného* Roztok se zahří-vá na parní lázní 1 hodinu a potom se odpaří do sucha.Odparek se rozppstí ve vodě a roztok promyje ethyl-acetátem* Alkalický roztok ss upraví na pH 3 pomocí kyseliny citrónové. Surový produkt se shromáždí,promyje vodou, suší a rekrystaluje z ethylacetátu, Dosta-ne se 4,8 g bezbarvého prášku o teplotě tání 84 °C.

Způsob výroby N-(D,L-2-brompronionyl)-L- - p r o 1 i n - t e r c. - b u ty1e s t eru

Roztok 1,71 g terc.-butylesteru L-pro-linu a 1,08 g triethylaminu v 10 ml dicftlormethanu seochladí na teplotu -20 a k roztoku se najednou potompřidá roztok 2,16 g 2-broBipropionylbromidu v 5 mldichlormethanu za teploty -20 °C. Roztok se míchá 30minut za teploty -20υ£a pétom. nechá ohřát na teplotumístnosti. Poté se přidá dostatek ethylacetátu, aby sezískaly 2 vrstvy. Horní organická vrstva se důkladněpromyje 10% kyselinou citronovoujiasycenýni roztokemhydrogenuhliéitanu sodného , vodou a nakonec eatry ceným"”ge a kokem solanky. Roz^tk se suší síranem hořečnátýma odpaří za sníženého tlaku.V-e formě oleje se dostane2,8 g produktu. NMR spektrum v deuterochloroformu ukazuje - 61 - methylové protony při 1,5, butylové protony při l?á a prolinové protony přó 2,0, 3,66 a 4,44 cT. u) Způsob výroby terč.-butyle.steru N-Cl-(S)-terč·-butylkarbonyl-5“Qminopentyl3-D,L-alanyl-L--prolinu 0,93 g práškového hydrogenuhličitarmsodného se vnese do roztoku 3,36 g terč.-butyleste.ru£, -bbnzyloxykafebonyl^l—lysinu a 3,08 g terč .-but.yl-este.ru bT-(D,L-2“brompropion.yl)-I<-prolinu v 50 ml suchéhoacetonitrilu. Směe se opatrně refluxuje 24 hodiny. Poochlazení se acetonittii4* odpaří za sníženého tlaku aodparek se rozdělí mezi vodu a ethylacetát. Organickávrstva se promyje vodou, 10% kyselinou citrónovou,nasyceným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, vodoua Iprsye solankou. Roztok se suší síranem hořečna-tým a odpaří na 3,88 g surového produktu. Tento pro-dukt se čistí sloucovou chromatografií na silikagelu(Merck 5734). Bluováním systémem ethylacetát a 3-hexanv poměru 1 : 1 se dostane 3,42 g bezbarvé pevné látky.NMR a hmotnostní spektrum jsou v souladu s terc.-butylesterem. N-Cl-(S)-terč,-butylkarbonyl-5-aminopentylJ--DjL-alanylvLrprolin^. 4,62 g výše uvedené benzylovésloučeniny se podrobí odstranění chránící skupiny 62 hydrogenací ve 100 ml směsi ethylacetátu a methanolu vpoměru 1 : 1 na 0,53 g 10% palladia na uhlí jako kataly-zátoru. Hydrogenace je ukončena po 4 hodinách. /Směsse filtruje a filtrát se odpaří za sníženého tlaku dosucha. Na odparek se působí 5 ml triethylaminu a poté sepřidá 20 ml ethylacetátu. Sraženina se odfilti?uje a roz-pouštědlo se odpaří za sníženého tlaku. Dostane se 3,5 gpožadovaného terc.-butylesteru N-lI-ÍS)- terč.-butj?iy-karbonyl-5-aminopentyl3-D,L-alanyl-L-prolinu. NMR spek-trum v deuterochloroformu je v souladu se strukturou. j) Způsob výroby N-Ll-(S)-terč»-butoxykar- bonyl-5-/4-(N-terc .-butoxykarbonyl-N-isopropylam.ino-2--hydroxypropoxy)indol-2-karboxamido/pentyl3-D,L-alanyl- -L-prolinu 291 mg kyseliny 4-l3- (N-terc .-butoxykar·»bonyl-N-isopropylamino )-2-h$h3roxypropoxyJindol-2-karbo-xylové a 312 mg terc.-butylesteru N-Cl-(S)-terc.-butoxy-karbpny1-5-aminopenty13-D,L-alanyl-E-prolinu se roz-pustí ve 4 ml dimethylfurmamidu s 10 /ul triethylaminu.Roztok se ochladí na teplotu 0 ^a přidá 182 mg 1-hyd-roxybenzothiazolu a potom 170 mg dicyklohexylkarbodiimi-du. Rožtok se míchá za teploty 0 po dobu 4 hodina páté se nechá stát v chladničice po dobu 3 dnů. Sra-ženina se odfiltruje a filtrát zředí 20 ml ethylacetátu. - 63 -

Roztok se třikrát promyje vodou, dvakrát promyje 10%kyselinou citrónovou, dvakrát promyje nasyceným roztokemhydrogenuhličítánu sodného a nakonec promyje jednou solankou a poté suší síranem horečnatým.Odpařením orzpouštědla se dostane 590 mg pevné látky,která se podrobí sloucové chromátografii na'silikagelu.Eluováním systémem ethylacetát a hexan v poměru 1 : 1se dostane 473 mg požadovaného produktu. 360 MHz Ma PAB Iňfmotnostní spektra jsou v souladu s navíjenou strukturou. k) Způsob výroby N-Cl-(S)-karboxy-5-/4-(3- -isopropylamino-2-hydroxypr,opoxy) in.dol-2-karboxaniido/~pentylj-D,L-alanyl-L-prolinu

Smíchá se 100 ml kyseliny trifluoroctové,15 ml vody a 18 ml anisolu a vše se ochladí na teplotumístnosti. 2,13 g chráněného peptidu připraveného adj) se přmdá do roztoku a ten se nechá stát za teplotymístnosti 4 dny. Směs se odpaří za sníženého tlaku aodparek se trituruje třikrát etherem. Zbytek se sušíza tlaku 266 Pa při teplotě 25 Dostane se 2,04 gpožadovaného produktu ve formě své bis-trifluoracetá-tové soli.

Analýza:pro £,52^4 5^'6^5θ12* nalezeno: 48,46 % C, 5,55 % H, 8J56% K, vypočteno: 48,24 % 0, 5,79 % H, 8,40 % N. NMR a FAB hmotnostní spektrum jsou v souladu s navrženoustrukturou· Příklady 2 až 4

Obdobným způsobem, jako je metoiSa z příkladu1., se vyrobí tyto sloučeniny: 2} Polárnější isomer směsi isomerů z příkladu 1, ve formě bis-trifluoracetátové soli. FA® Hmotnostní spektrum, Μ * 1 ion m/e 590.

Analýza: vypočteno: 48,47 % C, 5,55 % H, 8,56 % N,nalezeno: 48,19 % C, 5,92 % H, 8,51 % B. 5) K-Z" l-Karboxy-3-/4- ( 3-isopropyl amino~2- hydroxypropoxy) indol-2-karboxsmid©/propylJ7alanylpr©lin v/e formě bis-trifluoracetátové soli. FAB hmotnostní spektru®, Μ + 1 ion

♦ *· 65 4) N~/^-Ksrb©sy-4-/4--C 3-isopropylamino -2- íydroxypropoxy}indol-2-ksrboxaoido/butyl.í.7alanylprolin,v© formě bis-trifluorac©tátové soli. FAB hmotnostní spektrum, M ♦ 1 ion m/e 576.

Analýza: vypočteno: 47,84 % C, 5,39 % H, 8,71 % W, nalezeno·: 48,48 % C, 5,83 % H, 5,69 % N. Příklady 5 až 7

Vyrobí se také sloučeniny uvedené dále: 5 ) 1<^-/1-( R, S) -kar boxy-3-( 4- ( 3-isopr opy lamino- —2-(R ,S) -hyrdoxypropoxy) fenyl)propyl/-(S)-clanyl_7-( S)--prolin. Bílá lyofilizovaná pevná látka.

Chromstografie na tenké vrstvě: systém chloroform, methe-nol, 32% kyselin^jé octpvá = 12 : 9 : 4,

Rf = 0,5, systém chloroform, methanol, hydroxid amonný (0,880) * = 12 : 9 : 4, « 0,65·

6) l-LN-/l-(R,S)-Bthoxykarbanyl-3-(3-í3-isopropylamino-2-(R, S)-hydroxypropoxy)f enyl)propyl/-(S)-alenylj--(S)-prolin.

Chromatografie na tenké vrstvě: systém chloroform, methanol, 32% kyselina octová = = 12 : 9 : 0,5,

Rf = 0,44, systém n-butanol, kyselina octová, voda =3:1:1,

Rf = 0,26. 7) 1-CN-/1-íR,S)-$arboxy-3-/3-( 3-isopropylamino--2-(R,S)-hydroxypropoxy)fenyl/propy1/-(S)-alany13-í S)--prolin, ve formě dihydrátu. Bílá lyofilizovaná pevná látka.

Analýza dihydrátu: vypočteno: 54,96 %> 0, 8,02 % H, 8,02 % N, nalezeno : 54,77 % C, 7,92 % H, 7,96 % ří. Příklad 8 a

Způsob výroby N-C(S)-l-^arboxy-5-(2-C,5-(3--isopropylamino-(RS)-2-hydroxypropoxy)-1-naftyloxy3-acetamido)pentylj-íRS)-alanyl-(S)-prolinu - 67 -

Způsob výroby ethylCC5-hydroxynafthyl-l-oxyÍ- acetátu 20 g (125 mmol) 1,5-dihydroxynafbalenu se roz-pustí ve 200 ml vysušeného ethanolu a přidá 13,6 g(300 mmol) ethoxidu sodného. Po třicetiminutovém míchá-ní se přikape 15»3 ml (138 mmol) bromacetátu a směs semáchá za teploty místnosti 24 hodiny^.Směs se vylije nazředěnou kyselinu chlorovodíkovou s ledem a výslednásraženina se odfiltruje, promyje vodou a dichlormethanema ]boté suší. Výtěžek činí 16,6 g látky o teplotě tání174 až 177 °C. NMR spSktrum souhlasí se strukturou.

Analýza pro ^44¾ 4^4: vypočteno: 68,28 % C, 5,73 % R, nalezeno : 68,01 % G, 5,82 % H.

Způsob výroby ethyl[^5-(2,3-epoxypropoxy)-naftyl-l-oxy/acetátu3 12 g. (65 mmol) produktu získaného výše, 16,2 ml(195 mmol) ep^chlorhydrinu a 14,2 g (97,5 mmol) uhličita-nu draselného se vaří pod zpětným chladičem v 80 ml vysu-šeného acetonu 20 hodin. Směs se filtruje a odpaří. Odpa-rek se rozpustí v toluenu, promyje třikrát vždy 30 ml vo- 68 - dy, dvakrát vždy 40 ml hydroxidu sodného a dvakrát vždy30 ml vody, potom suší síranem horečnatým a odpaří na su-rový produkt, který tvoří hnědý olej. Výtěžek činí $2 13,7 g. NMR souhlasí se strukrutou. Tento materiál sepoužije přímo, jak je popsáno dále.

Způsob výroby C/5-(2-hydroxy-3-(isopropyl)-aminopropoxyZnaftyl-l-oxy^-acetamiduj 6,37 g (22 mmoů) produktu získaného výše popsa-ným postupem a 9,43 ml (110 mmol) isopropylaminu se vařípod zpqtným chladičem v 9,43 ml vysušeného methanolu podobu 20 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a odparek rozpustíve 350 ml dichlormethanu a třikrát promyje vždy 200 ml0,5-molární kyseliny chlorovodíkové. Spojené kyselé pro-pírací kapaliny se zalkalizují a vysrážený produkt seodfiltrije a suší. Výtěžek činí 4>71 g. NMR souhlasí sestrukturou. Tento produkt se použije přímo, jak je popsá-no dále.

Způsob výroby kyseliny L5-/2-hydroxy-3~(isopro-pylamino)propoxy/nafthyl-l-oxy3acěo vé 4,7 g (12,6 mmol) amidu získaného výše^popsa-ným postupem se zahřívá pod zpětným chladičem ve směsi - 69 - 50 ml 1-molárního roztoku hydroxidu draselného a 100 mlmethanolu po dobu 30 hodin pod dusíkovou atmosférou. Me- thanol se odpaří a zbývající vodná suspenze se ddakrát &amp; ^xtrahuje vždy 50 ml dichlormethanu. Hodnota pH vodnéfáze se ppraví na 6 přikapáním 6-molární kyseliny chlo-rovodíkové. Dvacetičtyřhodinovým stáním se vysrážízwitteriontový produkt. Výtěžek činí 1,34 g produktu oteplotě tání 238 až 245 °C. NMR a hmotnostní spektrumsouhlasní se strukturou.

Analýza pro 01θΗ23Ν©5·0,75 H20: vypočteno: 62,32 % C, 7,12. % Η, 4,04 % N,nalezeno : 62,54 % C, 6,90 % H, 4,08 % N.

Způsob výroby kyseliny C5-/3-(N-terc,-butylo-xykarbonyl-N-isopropylamino )-2-hydroxypropoxy/-l-naftl/y-loxyjoctové

Směs 334 mg (l mmol) kyseliny L5-/3-(N-isopro-pylamino)-2-hydroxypropoxy/l-naftyloxy3octové^ 230 mg(1,05 mmol) di-terc.-butyldikarbonátu110 mg (1,09 mmol)triethylaminu, 3 ml dimethylformamidu a 1 ml vody se mí-chá za teploty místnosti 20 hodin. Rozpouštědlo se odpařía odparek se rozpustí ve 40 ml ethylacetátu a filtruje.Filtrát se promyje třikrát vždy 15 ml podíly 10% kyseliny - 70 - citrónové, třikrát vodou, jednou nasyceným roztokem chlo-ridu sodného a potom suší síranem hořečnatým.^Odpařenímse dostane ledová pevná látka, která se rekrystaluje zesměsi 6 ml ethylacetátu a 20 ml benzinu o teplotě varu60 až 80 °C, aby se získal čistý produkt. Výtěžek činí320 mg (74 % teorie) látky o teplotě tání 150 až 152 °C.NMR spektrum souhlasí se strukturou.

Analýza provypočteno:nalezeno : °23H31NO7:63,73 % 0,63,89 % G, 7,21 % H, 3,23 % W,7,09 % H, 3,26 % N.

Způsob výroby W-C(S)-l-karboxy-5-(2-/5-(3--isopropylamino-(RS)-2-hydroxypropoxy)-l-naftyloxy3acet-amído)penty13-(RS) -alanyl-í S)-prolinu

Roztok 250 mg (0,58 mmol) výše uvedené slouče-niny, 250 mg (0,575 mmol) terc.-butylCN-C(S)-l-terc.--butox^řkarbony 1-5-amino penty 13- (RS)-alanyl- (S)-prolinátu3a 180 mg 1-hydroxybenzotriazolu ve 2 ml dimethylformami-du se och&amp;adí na ledové lázni. Poté se přidá 125 mg(0,61 mmol) dicyklohexylkarbodiimidu a směs se míchá anechá zahřívat na teplotu místnosti 20 hodin. Rozpouštědlose o d^J>ří, odparek vyjme 20 ml ethylacetátu a filtruje.Filtrát se postupně promyje třikrát vždy 10 ml podíly - 71 - 5 % hydrogenuhličitanu sodného, jednou 10% kyselinoucitrónovou, jednou 5% hydrogenuhličítaném sodným, jednouvodou, jednou nasyceným roztokem chloridu sodného a potomsuší síranem horečnatým. Odpařením se dostane surový xx .chráněný produkt ve formě žluté gumy. Čištění se prová-dí mžikovou chromatografií na silikagelu za použitísystému ethylacetát-methanol v poměru 99 · 1. Výtěžekčiní 400 mg. NMR spektrum souhlasí sj>čekávanou struktu-rou. FAB hmotnostní spektrum vykazuje silné 1+1 při m/z843, což potvrzuje očekávanou molekulovou hmotnost 842.Tento materiál se rozpustí ve směsi 1 ml anisolu, 1 mlvody a 9 ml kyseliny trifluoroctové za teploty 0 °G apotom se nechá ohřát na teplotu místnosti za míchájí podobu 20 hodin. Rozpouštědla se odpaří a odparek trituru-je etherem. Získá se surový produkt tvořený bílou pevnoulátkou. Pevná látka se rozpustí v 25 mil vody a dvakrátextrahuje vždy 10 ml etheru, poté se přidá 1 ml 1-molár-ní kyseliny chlorovodíkové a výsledný roztok se lyofili-zuje. Zbytek se opět vymrazí, aby se zbavil vody azíská se tvrdá guma, která se potom zbaví vymrezovánímkyseliny octové (50 ml). Získá se surový produkt, jakoprachovitá bílá látka, líýtěžek činí 297 mg (42 % teorie).FAB hmotnostní spektrum vykazuje silný Μ + 1 při m/áž 631,potvrzující očekávanou molekulovou hmotnost 630 pro vol-nou bázi. NMR spektrum souhlasí s očekávanou strukturou - 72 - a potvrzuje přítomnost CH^CQgH. Příklad 9

Způsob výroby R-((S)-l-karboxy-5-C8-(3-isopro-pylamino-(RS)-2-hydroxypropoχy )naft-2-ylkaΓboχyamido3-pentyl)-(RS)-alanyl-( S)-rprolinu

1) MethylC8-hydroxynaftalen-2-karboxylátJ

Známá sloučenina. s 2. Způsob výroby methylC|-/2,3-epoxypropoxy/nafta

len-2-karboxylátuJ 4,25 g (24 mmol) sloučeniny uvedené výše ve42,5 ml vysušeného demethylformamidu se zpracuje s 2,68(24 mmol) terč.-butoxidu draselného po částech za teplo-ty 25 °C a potom se míchá při 50 °C po dobu 1 hodiny.Poté se přidá 3,24 g (24 mmol) epibromhydrinu po kap-kách a v míchání se pokračuje za teploty 50 °C po dobu2 hodin a za teploty 60 °G další 1 hodinu. Ro^uštědlose odpaří a odjlprek rozdělí mezi vodu a chloroform.Chloroformový extrakt se promyje 2-molárním roztokemhydroxidu sodného a vodou a poté suší síranem hořečna- - 73 - tým a odpaří. Výsledný olej krystaluje po poškrábání ty-činkou a rekrystaluje se ze směsi ethylaeetátu s benzinemfeo teplotě varu 60 až 80 °C. Ve formě světle žlutých hra-nolků se dostane čistý produkt ve výtěžku 3,4 g (55%výtěžek), o teplotě tání 81 °C. <ř 3. Způsob výroby methylD^-/(R§)-2-hydroxy-3-iso- propylaminápropoxy/naftalen-2-karboxylátu3 3,3 g (li,8 mmol) esteru získaného výše popsa-ným postupem se rozpustí v 10 ml dioxanu a přidá se 10ml isopropylaminu. Směs se zahřívá na teplotu 65 až70 °C pod zpětným chladičem během jedné hodiny a potomodpaří. Výsledná pevná látka se rekrystaluje ze směsiethylaeetátu a benzinu o teplotě varu 60 až 80 °C. Dosta-ne se čistý produkt, jako bezbarvé jehličky, ve výtěžku 1,7 g (43 % teorie), o teplotě tání 121 až 122 °C.

Analýza pro C18H23®4: vypočteno: 68,16 % C, 7,30 % H, 4,41 % N, nalezeno : 68,66 % 0, 7,15 % H, 4,36 % N. - 74 - 4. Způsob výroby methyiC8-/3-(N-terc .-butoxy-karbonyl-N-isopropylamino)-(RS)-2-hydroxypropoxy/nafta-len-2-karboxylátu'j

Roztok 1,6 g (5,1 mmol) aminu připraveného po-stupem popsaným výše a 1,3 g (5,94 mmol) di-terc.-butyl-dikarbonátu ve 25 ml dimethylformamidu se míchá za tep-loty místnosti 18 hodin. Rozpouštědlo se odpaří a odparekrozdělí mezi ethylacetát a vodu. Organická fáze se promy-je vodou, suší síranem hořečnatým a odpaří. Odparek serekrystaluje z benzinu o teplotě varu 60 až 80 °G a po-skytne čistý produkt ve formě bezbarvých jehliček. Látkao teplotě tání 109 až 110 °C se dostane ve výtěžku 1,75 g(82 % teorie).

Analýza pro ^23^31^θ6: vypočteno: 66,17 % 0, 7>48 % H, 3,36 % N, nalezeno : 66,14 % C, 7,51 % H, 3,35 % N. <ř 5. Způsob výroby kyseliny ^-C3-(N-terc.-butoxykar-bonyl-N-isopropylamino)-(RS)-2-hydroxypropoxyjnaftalen--2-karboxylo vé

Směs 1,7 g (4,1 mmol) esteru získaného postu-pem popsaným výše, 5 ml 2-molárního roztoku hydroxidu - 75 - sodného a 10 ml methanolu se zahřívá na parní lázni30 minut. Methanol se odpaří a odparek rozpustí ve 100 ml vody a přidává 10% kyselina citrónová do pHR. Pevná sra ženina se odfiltruje, promyje vodou a suší. Výtěžěk činí1,55 g (94 % teorie) sloučeniny o teplotě 158 °C.

Analýza pro ^22^29^61 vypočteno: 65,49 % 0, 7,25 % H, 3,47 % N,nalezeno : 64,94 % 0, 7,04 % H, 3,38 % N.

Způsob výroby N-((3)-l-karboxy-5-L$-(3-isopro- p.ylamino- (RS) -2-hydroxypropoxy)naft-2-ylkarboxamido3pen-ty1)-(RS)-alany1-(S)-prolinu

Roztok 549 mg (1,36 mmol) výše uvedené kyseli- ny, 580 mg (1,36 mmol) terc.-butylCW-C(S)-l-terc.-butoxy-karbonyl-5-aminopentyl3-(RS)-alanyl-(S)-prolinátuj, 368 mg (2,7 mmol) 1-hydroxybenzothriazolu a 640 mg (1,38 mmol) triethylaminu v 8 ml/dimethylformamidu se vy- chladí na ledové lázni. Potom se přidá 308 mg (1,5 mni)dicyklohexylkarbodiimidu a smqs se udržuje za teploty5 °C po dobu 1 týdne. Poté se rozpouštědlo odpaří aodparek výjme do ethylácetátu, promyje postupně 5% roz-tokem hydrogenuhličitanu sodného, 10% kyselinou citróno-vou, vodou a nasyceným roztokem chloridu sodného a pak - 76 - suší síranem hořečnatým. Spojené vndné fázr ertrabuiíobloroformem a ov+rak+ °e ««o « organickou fé^í z^«ka- non výše nve^erv^m nnetunom. RoznouštéHIa «?« nrinař'*'’, ninn--«ek T»nznn«ti v mslém ob Ternu «cetonítri1u, ^iovklohewl-močovina «« odfiTtruie a •Filtrát odnaří» Odrazek «a čjs-t< ohromato afickv na «i li kabelu «Inován^m eve+ém«mewaoe tát -benzen v toowšou 1 : 1 . «! ná«Todui^cím νζ·ού«+«τηobsahu ethylacetátu. Jako bílá pevná látka charakterugumy se získá chráněný produkt o hmotnosti 820 mg. NMRspektrum souhlasí s očekávanou strukturou.

Tato látka se smíchá s 1,5 ml anisolu a ochla-dí na teplotu 0 °C. Poté se vnese předem ochlazená směs.75 ml kyseliny trifluoroctové, 10 ml vody a 8 ml anisolua směs se nechá stát 10 dnů. Rozpouštědlo se odpaří a e odparek trituruje etherem. Dostane se hydroskopická p^b-t^vná látka, která se dále promyje etherem a suší napožadovaný produkt tvořící bílý prášek. Výtěžek činí 190mg (17 % teoerie). WMR spektrum odpovídá očekávanéstruktuře.

Analýza pro •C^1H^^N^0g.2CF^C02H: vypočteno: 50,72 % C, 5,60 % H, 6,76 % N, nalezeno : 30,34 % 0, 5,92 % H, 6,93 % N. - 77 Příklad 10

Způsob výroby N-í(S)-l-karboxy-5-u5-(3-isopropylamino-(RS)-2-hydroxypropoxy)nařt-2-ylkarboxamido3pentyl)-(RS)-alanyl-(S)-prolinu

Tato látka se přopravuje zcela obdobným postupem jako je popsán v příkladu 9. Charakteristiky mezi-produktu jsout takovéto: 1. MethylC5-hydroxynaftalen-2-karboxylát3Známá sloučenina. 2. MethylC5-L.2,3-epoxypropoxy3naítalen-2-karboxylát3

Teplota tání: 81 až 82 °C, analýza pro vypočteno: 69,75 % C, 5,46 % H, nalezeno : 69^56 % C, 5,54 % H. 3. Methylu. 5-C(RS)-2-hydroxy-3-isopropylaminopro-

poxy3naftalen-2-karbox|řlátJ

Teplota tání: 71 °C analýza provypočteno:nalezeno : P πΌ18π2368,1668,52 ' N04: % C, /6 C, 7,30 % H,7,26 % H, 4,14 % N,4,28 % N. - 78 - 4. MethylC5-u3-ÍN-terc.-butoxykarbonyl-N-iso- propylamino)-(RS)-2-hydroxypropoxy3naftalen-3-karboxy-látj

Teplota tání 82 až 84 °C, analýza pro G23H21NO6: vypočteno: 66,17 % C, 7,48 % H, 3,36 % N,nalezeno : 66,52 % C, 7,57 % H, 3,31 % N. 3_ H NMR spektrum souhlasí se strukturou. 5« Kyselina 5-L3-(N-terc.-butoxykarbon,yl-N-iso- propylamino)-ÍRS)-2-hydroxypropoxy3nařtalen-2-karboxylově1.H NMR-^spektrum souhlasí se strukturou. 6. N-( (S)-l-Karbox.y-5-C5-í 3-isopropylamino-»(RS)- -2-hydroxypropoxy)naft-2-yIkarboxamidoJ penty1)-(RS)-ala-nyl-(S)-prolin NMR spektrum souhlasí se strukturou. PSBhmotnostní spektrum vykazuje silný Μ + 1 ion potvrzujícímolekulovou hmotnost volné báze. Chromatografie na tenkévrstvě silikagelu ukazuje skvrnu při 1^0,12 v systému n--butanol-kyselina octová-voda v poměru 3 : 1 : 1 se sto-pou nečistoty při R0,17. - 79 - Příklad 11

Schematické znázornění stupňů syntézy z toho-to příkladu je uvedeno dále, přičemž čísla sloučeninuvedené v následujícím textu, se vztahují k vzorcům zná-zorněným na schématu«|i táM otííslovanýít v závorkácirí

Schéma přípravy sloučenin z příkladu 11

CO2Me >

O /\

< 3 )

I - 80 -

í 5 ) ( 6 )

( 10 ) - 81 -

( 12 ) 82 - V tomto schématu znamená: Me methyl Er propyů Bu butyl BOG terč.-butoxy karbony1 t terciární i iso

Způsob výroby methyl“Cl-hydroxy-7-naftoátu3 vzorce 2

Do 50 ml methanolického roztoku nasyceného ky-selinou chlorovodíkovou se vaese 5,0 g kyseliny 1-hydro-xy-7-naftoové vzorce 1 a výsledná směs se zahřívá podzpětným chladičem 2,5 hodiny, potom se odpaří do suchaa získá se bělavá pevná látka. Tato látka se rozpustíve 100 ml ethylacetátu a promyje postupně 300 ml nasyce-ného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, 300 mlvody a potom 30 ml nasyceného roztoku chůoridu sodného.Organická fáze se suší síranem hořečnatým, filtruje aodpaří do sucha. Dostane se 536 gj(výtěžek 99,7 % teorie)bělavé látky, která je homogenní podle chromatografie natenké vrstvě za použití systému oxid křemičitý, ethyl- - 83 - acetát a ultrafialové záření, jod, přičemž R^ = 0,38.

Způsob výroby methylt(2,3-epoxypropoxy)-7-nafto-átuj vzorce 3 2,02 g »«fctaa±M (0,01 mol) naftolu vzorce 2 serozpustí ve 20 ml dimethylformamidu a ochladí na teplotu5 °G pod dusíkovou atmosférou. K roztoku se přidává 1,12 g(0,01 mol) terč.-butoxidu draselného takovou rychlostí,že teplota reakční směsi nepřekročí 15 °G. Po ukončenípřidávání se směs ohřeje na teplotu 55 °C po dobu 1 hodí-ny a potom se přikape 1,37 g (0,01 mol) epifcrojahydřinu.Potom se směs zahřívá na teplotu 100 °C po dobu 2 hodin,odpaří do polosuchá, zředí vodou a extrahuje etherem.Etherický extrakt se promyje vodou a potom nasyceným roz-tokem chloridu sodného a poté suší síranem hořečnatým.Filtrací a odpařením se dostane viskozní olej jantarovébarvy o hmotnosti 2,48 g (výtěžek 0$,1 % teorie). Produktje homogenní při chromátografii na tenké vrstvě za použi-tí systému oxid křemičitý, n-hexan a ether v poměru 1 *í 9,ultrafialové záření, jod, přičemž R^, = 0,48.

Způsob výroby methyl-Ll-(^S)-C2-hydroxy-3-’iso-propylaminopropoxyl3~7-naftoátu vzorce 4 - 84 -

Směsi 5,50 g (0,0213 mol) epoxidu vzorce 3, 100 ml isopropylaminu a 75 ml 1,4-dioxanu se zahřívá podzpětným chladičem 3 dny a potom se odpaří do sucha, abyse dostala bělavá pevná látka. Tato látka se převede nasvou chloiistanovou sůl. Dostane se 670 g (výtěžek 75,4 %teorie) bílé pevné látky. Sylo shledáno, že volná bázeobsahuje dva produkty, jak bylo rozhodnuto na základěchromatografie na tenké vrstvě. Tyto produkty jsou neod-dělitelné jak chromatografií volné báze, tak xxxh rekry-stalizací chloristanové soli. Získaný materiál se použi-je bez čistění v následujícím stupni.

Způsob výroby methyl-CSl-/3-terc.-butoxykarbony1-- 3- i s opr o py 1 amino - 2- (R, S) -hy dr oxypr o poxy) -7 -nafto átujvzorce 5

Směs 6,70 g (0,0161 mol) aminu vzorce 4 ve forměchloristanové soli, 0,65 (0,0162 mol) hydroxidu sodného a3,52 g (0,0161 mol) di-terc.-butyldikarbonátu v 35 ml di-methylformamidu se míchá za teploty místnosti 20 hodina potom se odpaří do polosuchá. Odparek se zředí vodou,extrahuje ethylacetátem a organická fáze se promyje vodou,suší síranem hořečnatým a filtruje. Dostane se 7,00 g(výtěžek 104 % teorie) viskozního oleje, který stánímtuhgjn na látku o teplotě tání 107 až 109 °C. - 85 -

Analýza pro c24H34l°6; vypočteno: 66,65 % G, 7,92 % H, 3,25 % N, nalezeno : 66,25 % C, 7,61 % H, 3,29 % N.

Způsob výroby methyl-tl-/Jl-C3-terc.-butoxykar-bonyl-3-isopropylamino-2(-(R,S)-terc,-butyldimethylsily-loxy)propoxy3/-7-na£toátu vzorce 6 K míchané směsi 6,7® g (0,0160 mol)alkoholuvzorce 5, 0,10 g (0,8 mmol) 4-dimethylaminpyridinu, 2,10 g(0,0163 mol) DMfeká&amp;xmiigý diisopropylethylaminu ve 30 mldimethylformamidu se přidá 5,50 g (0,0365 mol) terč.--butyldimethylsilylchloridu v jediném podílu. Výslednásměs se míchá 3 dny za teploty místnosti, vylije na Z < 300 mp vody, zpracuje se 300 ny nasyceného vodného roz-toku hydrogenuhličitanu sodného a extrahuje kát ethylace-tátem. Ethylacetátový roztok se promyje vodou a poténasyceným roztokem chloridu sodného a suší síranem horeč-natým. Pitlrací a odpařením se dostane pohyblivá bezbar-vá kapalina, která se čistí sloupcovou chromatografiíza použití systému oxid křemičitý, eluční činidlo 9 dílůn-hexanu a 1 díl ethylacetátu. Dostane se 7,36 g (výtě-žek 89,5 % teorie) bezbarvého oleje, kteru krystalujestáním za vzniku krystalů bílé pevné látky o teplotětání 102 °C. - 86 -

Analýza pro vypočteno: 65,5 % C, 8,52 % 3ff, 2,63 % N, nalezeno : 65,4 % 0, 8,75 % H, 2,59 % 17.

Způsob výroby kyseliny l-/l-(3-terc.-butoxy-^&amp;rbonyl-3-isopropylamino-2-^ (R,S)-terc .-butyldimethyl-silyloxy)propoxyl/-7-naftové vzorce 7

Roztok 6,80 g (¢,0128 mol) methylesteru vzor-ce 6 v 50 ml methanolu se zahřívá pod zpětným chladičemse 2,00 g (0,05 mol) hydroxidu sodného 18 hodin. Vý-sledná směs se odpaří do polosuchá, zředí vodou a upra-ví na hotnostu pH 3,0 pevnou kysdlinou citrónovou. Směsse potom extrahuje ethylacetátem, který se promyje vo-dou, nasyceným roztokem chloridu sodného a suší síranemhořečnatým. Filtrací a odpařením se dostane 5,86 g(výtěžek 88,5 % teorie) bělavé pevné látky, které máteplotu měknutí asi 167 °C a jihne za teploty 196 °C.

Analýza pro °28H43Nl°6Si: vypočteno: 64,96 % C, 8,37 % H, 2,70 % N, nalezeno : 65,37 % 0, 7,98 % H, 2,94 % N. - 87 -

Způsob výroby l-/l-C3-terc.-butoxykarbonyl”3--isopropylamino-2-(-(fí,S)-terc.-butyldimethylsilyloxy)- propoxyl/-7-hydroxymethylnaftalenu vzorce 8 K roztoku 5,32 g (O,Olo3 mol) kyseliny vzorce7 ve 30 ml tetrahydrofuranu se za teploty 5 °G a pod atmosféorou suchého dusíku přidává roztok 18 ml 1-molárníhoroztoku boran-tetrahydrofuranového komplexu takovou ry-chlostí, že teplota nepřestoupí 10 °C. Po ukončení přidá-vání se rakční směs míchá za chlazení 30 minutý á potomza teploty místnosti 2 hodiny. Ke směsi se potom přidávoda, poté se přidá 30 ml nasyceného vodného roztokuhydrogenuhličitanu sodného a vše se odpaří do polopevné-ho stavu. Odparek se extrahuje O etherů a extrakt se popromytí vodou a nasyceným orztokem chloridu sodného fil-truje a odpaří. Dostane se surový alkohol vzorce 8 o hmotnosti 4,90 g (výtěžek 94,7 % teorie) ve formě bezbarvégumy. Surový alkohol vzorce 8 se chromátografuje za pou-žití systému oxid křemičitý, eluování 7 díly n-hexanu a3 díly ethylacetátu. ©ostane se 3,53 g (výtěžek 68 %teorie) čistého alkoholu vzorce 8/ o teplotě tání 81 až82 °C.

Analýza pro CggH^^N^O^Si^: vypočteno: 66,76 % 0, 9,00 % H, 2,78 % W, nalezeno : 67,20 % C, 8,90 % H, 2,73 % N. 88 -

Způsob výroby l-/l-C3-terc.-butoxykarbonyl-3--isopropylamino-2-(- (fí, S)-terč.-butyldimethylsilyloxy)-propoxyl/-7-chlormethylnařtalen vzorce 9 3,32 g (6,6 mmol) alkoholu vzorce 8 se roz-pustí v 50 ml methylenchloridu a 1,10 ml (7,90 mmol)triethylaminu. Dále se přidá 0,62 ml (8,0 mmol) mesylchlo- ridu a směs se zahřívá pod zpětným chladičem 2 hodiny. A'

Chromatografie £a tenké vrstvě ukazuje přítomnostvýchozí látky a tak se přidá ještě 0,5 ml (3,6 mmol)triethylaminu a 0,3 ml (3,9 mmol) mesylchloridu. Směsse opět ohřívá pod zpětným chladičem 1,5 hodiny. Čistýchlorid vzorce 9 se získá chromátogra řií za použitíoxidu křemičitého a ehování 9 díly n-hexanu a 1 díluethylacetátu. Produkt se dostane jako bezbarvý olejo hmotnosti 2,63 g (výtěžek 76 % teorie) &amp;

Způsob výroby terč.-butyl£N-/l-(S)-£arboxy--terc.-butylester-5-Cl-(3-terc.-butoxykarbonyl-3-iso-propylamino-2-(R,S)-t-butyIdiměthylsilyloxy)-propoxy)- -naftl-7-ylméthylaminoj-pentyl/-(R,S)-alanyl-(S)-proli- v nud vzorce 11

Směs 2,43 g (5,69 mmol) l-aminopentyl-S-(S)-karbonyl-terc .-butylester-5-(R, S) -a3ianyl-( S)-prolito- - 89 - -terc.-butylesteru vzorce 10, 1,50 g (2,87 mmol) chlor-methylnaftalenu vzorce 9 a 0,55 g 6,55 mmol) hydrogen-uhličitanu sodného ve 30 ml acetonu se míchá za teplotymístnosti 24 hodiny a potom za teploty 75 °C po dobu 20hodin. Seakční směs se odpaří takřka dosucha, zředí vo-dou a extrahuje ethylacetátem./Extrakt se promyje vodou,

r Z potom nasyceným roztokem ehlodidu sodného a vysxší síra-nem hořečnatým. Filtrací a odpařením se feěhx® dostane3,40 g viskozního oleje, který podle chromatografie natenké vrstvě za použití systému oxid křemičitý, eluent80 dílů chhomaformu, 20 dílů methanolu a 1 díl vodnéhoamoniaku,' se ukazuje jako směs výchozích látek vzorce 9 a vzorec 10 a produktu vzorce 11. Takto získanýmateriál se sloupcovou chromatografií na použití systému oxid křemičitý, eluční sastém n-hexanu, n--hexan a ether v poměru 1:1, ethylacetát a konečný 20%methanol v ethylacetátu. Získá se 1,16 g (výtěžek 44 %teorie) takřka bezbarvé gumy jako směsi diastereomerů.

Způsob výroby N-/l-(S)-karboxy-5-Cl-(3-isopro-pylamino-2-(R,S)-hydroxypropoxy)-naft-7-ylmethylamino3-pentyl/-(S,S)-alanyl-(S)-prolin-tristrifluoracetátuvzorce 12 0,48 g (0,526 mmol) chráněné sloučeniny vzorce 11 - 90 -

v 0,5 ml vody a 4,5 ml kyseliny trifluoroctové se mícháza teploty místnosti 20 hodin a potom odpaří do polosu-chá. Odparek se rozpustí ve vodě a promyje etharem aposléze se vodná fáze odpaří do sucha a dosuší za vysoké-ho vakua nad oxidem fosforečným. Dostane se 0,40 g (výtě-žek 82 teorie) pevné látky světle pískového zabarvenío teplotě měknutí zhruba 100 °C a teplotě jihnutí asi 120 °G

Analýza pro C37H48G13N4F9: vypočteno: 47,90 % 0, 5,20 %,H,á^: 6,03 % N, nalezeno : 47,90 % C, 5,70 % H, 6,08 % N.

Farmaceutické prostředky V následujících příkladech prostředků může být"účinnou sloučeninou" kterékoli sloučenina obecného vzor-ce I nebo její fyziologicky přijatelná sůl.

Příklad A

Tablety Μ- mg účinná sloučenina 5QQmikrokrystalické celulóza 100polyvinylpyrrolidon 10škrab modifikovaný glykolátem sodným 30stearát hořečnatý 5 celkem 645

Smísí se účinná sloučenina, mimromryetaxi^ácexuloza a Škrob modifikovaný glykolátem sodným. Potemse provede granulace s polyvinylpyrroxiGvuem χ-ύ/.ρ^νβ’-xýfi V ídlohotu. Získaný produkt se suší, smísí sestearátem horečnatým a lisuje do tablet © hmotnosti645 mg.

Příklad B

Kapsle mg t účinná sloučenina 250 laktoze 150 škrob 25 stearát hpřečnatý 5 celkem 430 - 6β-- *

Mnučenina, laktoza, škrob a stearáthořečnatý se smísení a plní do tvrdých želatinových

Příklad C Čípky účinná sloučenina 500 PEG 400 800 PEG 6000 1700 celkem 300-0 PEG 6000 se roztaví,smíchá s PEG 400 a po-tom s účinnou sloučeninou. Tavenina se vylije do Šíp-kových forem a ponechá chladnout.

Příklad D

Intrvenozní injekce účinná sloučenina ®00 mg voda pro injekce B.P. do 5,0 ml Účinná sloučenina se rozpustí asi v devíti desetinách celkového objemu vody pro injekce· Když je rozpouštění dokončeno* ápraví se objem dalším podílem vody pro injekce.

Za aseptických podmínek se roztok sterilujefiltrací přes sterilní filtr jakosti pro sterilizacia roztok se plní do předem sterilovaných ampulí. Ámpule před naplněním byly předem propláchnuty dusíkem.

Biologické příklady V následujících příkladech je •‘sloučeninou’*titulní sloučenina z příkladu 1, tedy N-^l-CS)—·-karboxy-5-/4- (3-isopropylamino-2-hydroxypropoxy) indol--2-karboxamido/pentyÍFD ,L-al anyl-l-prol in ♦ ^-blokáda in vitro Λ Při zkoušce «beta-adrenoceptořové blokádyvyvolané sloučeninou na levé předsíni srdeční u morčatse dosáhne jednoduché kompetitivní blokády odezvy naisoprenálin (pKg = 7*0)· ·* ACE inhibice in vitro Při zkoušce ACE inhibice vyvolané sloučeni-nou na ileu morčete se dostane inhibice závislá na dávce, ~^-^odezvy stehů na angiotensin I (ΕΟ^θ se rovná přibližně3 x 10~7 M) > ACE inhibice in vivo

Bylo* zjiStěno, že sloučenin© má inhibičníúčinek dávce závislé na metoděj u krys, jejichž míchabyla prolata, odpovídající změně tlaku vyvolané angío-tensinem I. Sloučenin© v dávce 1 až 1.00 yUg»kg“*^.min"’'Lúčinně posouvá napravo křivky odezvy na angiotensin I»Zdánlivá hodnota IO^q na izolovaném enzymu je11 nM. Účinek na rychlost srdce

Byl© zjiětěno, že sloučenina inhibuje^ydáv^ závislé na metod^ zrychlení srdeční činnosti vyvo-lané isoprenalinem u krys, jejichž mícha tyle projata.Dávky 10 až 100 ^ug.kg^^min“1 účinně posouva jínapravo křivky odezvy na dávku isoprenalinu· Účinek zabraňující zvýšení tlaku

Bylo zjištěno, že intravenozní podání slou-čeniny snižuje tlak krve u bdících psfi bígl, kteřínedostávají sůl. Kromě toho podávání sloučeniny způsobujezřetelný účinek snižující tlak v uninefrektomisovaných protilehlých zúženích ledvin u bdících psfi bígl. Dávky—1 v rozmezí 1 až 3 mg.kg vykazují zřetelný účinek. Pře drnět vynále zu

Claims (6)

1. PŘEDMĚT VÍN Á L BZ ϋ

   ΡρΟκΑ č. >j

   1, ŽIT Má ífi- I -

   1. Způsob výroby alanylprolinových derivátů obec- ného vzorce I

   Q Q1 Q3 Q4 Z Q7 I I I | I f B - N - C - C - 0 - 0 - (X) - A - C - M Q2 OH Q5 Q6 kde kde 1 s Q a Qaž Q jsou navzájem nezávisle zvoleny ze soubo-ru zahrnujícího atom vodíku a alkylovou skupi-nu s 1 až 4 atomy uhlíku, A znamená skupinu obecného vzorce - CO - NQ9 - (CH2)n - , ve kterém n znamená číslo od 1 do 6, II Q Q znamená atom vodíku nebo alkylovou skupi-nu s 1 až 4 atomy uhlíku a methylenové skupiny v -(CH2)a“ Jsou vždy nezá-vislý, popřípadě substituovány jednou nebo dvě-ma alkylovými skupinami s 1 až 4 atomy uhlíku, znamená alkylovou skupinu s 1 až 6 atomy uhlíkuuhlíku, jsou navzájem nezávisle zvoleny ze souboru za-hrnujícího i^ar boxy skupinu a od ní odvozený ben- íttr zylester nebo alkylem» s 1 až 4 atomy uhlíku,hydroxymethylovou skupinu a karbamoylovou sku-pinu , znamená atom vodíku nebo alkylovou skupinus 1 až $ atomy uhlíku, která je popřípadě sub-stituována^ aminoskupinou, znamená benzenový kruh nebo naftylový nebo indo-ly lový krýhový systém, které jsou popřípadě Jfcv libovolné jáoloze substituová^^^^nímfmebo—<aěkolík^ substituent/^voleným^ ze souboru zahr-nujícího alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku (X) - III - která je sama popřípadě substituována alespoňjedním atomem halogenu, alkoxyskupinu s 1 až4 atomy uhlíku, atom halogenu, nitroskupinu,aminoskupinu, karboxyskupinu, alkoxykarbonylo-vou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alkylovéčásti a hydroxyskupinu, a -N znamená pyrrolidinový, oxazolidinový nebothiazolidinový kruh, nebo jejízíyziologicky přijatelné soli, vyznačující se tím, že se nechá reagovat sloučenina obecného vzorce Ila Q1 Q3 Q4 I I I G-C-C-O-(X) »2 1 <5ζτ OH Q? ( Ila ), obecného vzorce lib Ph CH i N. Q I c - o ,5 - (X) ( lib ), IV - nebo obecného vzorce líc 0 Q4 x /\ i Qx - c - C «- C - 0 - (X) ( líc ), Q2 Q3 Q5 kde n, Q, Q1 až Q^, g a (χ) mají výše uvedený význam, se sloučeninou obecného vzorce III HQ9N - (CH2)n

   ( III ) kde 6 9 H až R , D, E a -Η Y mají výše uvedený význam, nebo reaktivním derivátem této sloučeniny nebo chráněným derivátem této sloučeniny nebo jejího reaktivního derivátu a potom, je-li to zapotřebí, provede se'jedna nebo něko— z následujících případných reakcí v libovolném pořadí: I) sloučenina takto vyrobená se γ-sobě známou nre--todo^i zbaví chránící skupiny nebo skupin, II) jestliže se použilo sloučeniny obecného vzorcelib, odstranění chránící skupiny nebo skupin a otevřeníkruhu se provádí působením kyseliny trifluoroctové, III) jestliže se použilo sloučeniny obecného vzorcelíc, otevření epoxidového kruhu sěfe^ofedí působením tep’ ve vhodném rozpouštědle, IV) jestliže se vyrob ^/sloučenina obecného vzorce I, kde £ a/nebo Z znamená karboxyskupinu, získaná slouče-nina se popřípadě převede snhě na slou- čeninu, ve které E a/nebo Z znamená fcd- původně přítomné ·iskupiny odvozený benzylester nebo alkylester s 1 až 4atomy uhlíku, hydroxymethylovou skupinu nebo karbamoylo-vou skupinu, V) jestliže se loučenina obecného vzorce - VI - I, kde E a/nebo Z znamené derivát karboxylové kyseliny,tato sloučenina se <j oobě-známou~metodoi^ hydrolýzuje zabázických podmínek na odpovídající sloučeninu, ve kteréE a/nebo Z znamená karboxyskupinu, VI) vyrobená sloučenina obecného vzorce I se zpra- cuje fra podmínek, které jsou 0 Sóbě~znáfflé^ s minerálnínebo organickou kyselinou na fyziologicky přijatelnou sůl. 2t Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, Se se použije reaktivního derivátu sloučeniny obecného vzorceHa, lib nebo líc, kde skupina (X) je substituována kar-boxyskupinou nebo skupinou odvozenou od karboxylové sku-piny a ostatní substituenty mají svrchu uvedený význam.
2. 3. Způsob podle bodu 2, vyznačující se tím, že se reakce provádí za použití dicyklohexylkarbodiimiduv přítomnosti l-hydroxybenzothiazolu/-k potlačení nežé» <dt>uc iclrrsake-í-jl v4-*hodnéi^rozp©uStědle při (fhodné-- teplotě j[pd snížené-tepíutý až) do teploty místnosti. VII
3. 4. Způsob podle bodu 3, vyznačující se tím, že se reakce provádí za teploty mezi -15 až 0 °C.
4. 5. Způsob podle některého z předcházejících bodů, vyznačující se tím, že se za použití příslušných výcho-zích látek připravuje sloučenina obecného vzorce I, kdeQ a Q až Q znamenají vždy atom vodíku, (X) znamená fe-ny lenovou skupinu nebo skupinu vzorce nebo CgNH?, A představuje skupinu vzorce -CO-NQ^-(CH2)n-, ve kterém Q n mé výše uvedený význam, Q představuje atom vodíku aani jedna z methylenových skupin nen]l- substi- tuována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku, B zna-mená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku a -N Yznamená pyrrolidinový, oxazolidinový nebo thiazolidinovýkruh, nebo její fyziologicky přijatelná sůl.
5. 6. Způsob podle některého z předcházejících bodů, vyznačující se tím, že za použití příslušných výchozích látek se připravuje sloučenina obecného vzorce I, kde1 8 Q a Q až Q znamenají vždy atom vodíku, ve skupině Aq znamená ςτ atom vodíku a žádná z methylenových skupin ne-ní substituována alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku - VIII - B znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku, E znamená karboxyskupinu, Z znamená karboxyskupinu neboalkoxykarbonylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku v alko-xylové části, D znamená alkylovou skupinu s 1 až 4 ato-my uhlíku, (X) znamená fenylenovou skupinu nebo skupinuvzorce ΟθΝΗγ a -N^^Y znamená pyrrolidinový kruh,nebo její fyziologicky přijatelná sůl.
6. 7. Způsob podle některého z předcházejících bodů, vyznačující se tím, že za použití příslušných výchozíchlátek připravovanou sloučeninou obecného vzorce I nebo její fyziologicky přijatelnou solí je N-Cl-karboXy-5-/4--(3-isopropylamino-2-hydroxypropoxy)-indol-2-karboxamido/pentyllalanylprolin v některé ze svých jednotlivých iso-merních forem nebo v jejich směsi,nebo fyziologicky při-jatelné sůl některého takového isomeru nebo směsí.

   CG':