CS272657B1 - Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis - Google Patents
Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis Download PDFInfo
- Publication number
- CS272657B1 CS272657B1 CS292287A CS292287A CS272657B1 CS 272657 B1 CS272657 B1 CS 272657B1 CS 292287 A CS292287 A CS 292287A CS 292287 A CS292287 A CS 292287A CS 272657 B1 CS272657 B1 CS 272657B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- monensin
- strain
- streptomyces cinnamonensis
- cultivation
- smu
- Prior art date
Links
- GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N Monensin A Natural products O1C(CC)(C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CCC1C(O1)(C)CCC21CC(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 12
- 241000187434 Streptomyces cinnamonensis Species 0.000 title claims abstract description 12
- GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N monensin A Chemical compound C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C(O)=O)O2 GAOZTHIDHYLHMS-KEOBGNEYSA-N 0.000 title claims abstract description 12
- 244000005700 microbiome Species 0.000 title claims abstract description 6
- 229930191564 Monensin Natural products 0.000 title description 8
- 229960005358 monensin Drugs 0.000 title description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 12
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims abstract description 12
- 239000004183 Monensin A Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000019376 monensin A Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 3
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 3
- 239000003925 fat Substances 0.000 abstract description 7
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 abstract description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 abstract description 6
- QXKHYNVANLEOEG-UHFFFAOYSA-N Methoxsalen Chemical compound C1=CC(=O)OC2=C1C=C1C=COC1=C2OC QXKHYNVANLEOEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 5
- 229960004469 methoxsalen Drugs 0.000 abstract description 5
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 5
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 abstract description 4
- 238000004040 coloring Methods 0.000 abstract description 4
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 abstract description 4
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 abstract description 3
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 abstract description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 abstract description 2
- ZXLUKLZKZXJEFX-WALYMESLSA-N CO[C@H]([C@H](C)[C@H]1O[C@@]2(CC[C@](C)(O2)[C@H]2CC[C@](C)(O2)[C@@H]2O[C@H](C[C@@H]2C)[C@H]2O[C@@](O)(CO)[C@H](C)C[C@@H]2C)C[C@H](O)[C@H]1C)[C@H](C)C(O)=O Chemical compound CO[C@H]([C@H](C)[C@H]1O[C@@]2(CC[C@](C)(O2)[C@H]2CC[C@](C)(O2)[C@@H]2O[C@H](C[C@@H]2C)[C@H]2O[C@@](O)(CO)[C@H](C)C[C@@H]2C)C[C@H](O)[C@H]1C)[C@H](C)C(O)=O ZXLUKLZKZXJEFX-WALYMESLSA-N 0.000 abstract 1
- ZXLUKLZKZXJEFX-UHFFFAOYSA-N Monensin B Natural products C1C(O)C(C)C(C(C)C(OC)C(C)C(O)=O)OC11OC(C)(C2OC(C)(CC2)C2C(CC(O2)C2C(CC(C)C(O)(CO)O2)C)C)CC1 ZXLUKLZKZXJEFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- PCWZKQSKUXXDDJ-UHFFFAOYSA-N Xanthotoxin Natural products COCc1c2OC(=O)C=Cc2cc3ccoc13 PCWZKQSKUXXDDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- BUNGCZLFHHXKBX-UHFFFAOYSA-N 8-methoxypsoralen Natural products C1=CC(=O)OC2=C1C=C1CCOC1=C2OC BUNGCZLFHHXKBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- SQBBOVROCFXYBN-UHFFFAOYSA-N methoxypsoralen Natural products C1=C2OC(=O)C(OC)=CC2=CC2=C1OC=C2 SQBBOVROCFXYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine Chemical compound O=NN(C)C(=N)N[N+]([O-])=O VZUNGTLZRAYYDE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 2
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 2
- 230000000485 pigmenting effect Effects 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 2
- YFYASMWDAMXQQT-UHFFFAOYSA-N 2-amino-3-chlorobutanoic acid Chemical compound CC(Cl)C(N)C(O)=O YFYASMWDAMXQQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N L-arabinopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-HWQSCIPKSA-N 0.000 description 1
- LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N L-norleucine Chemical compound CCCC[C@H]([NH3+])C([O-])=O LRQKBLKVPFOOQJ-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000001058 brown pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000002962 chemical mutagen Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000002026 chloroform extract Substances 0.000 description 1
- OQNGCCWBHLEQFN-UHFFFAOYSA-N chloroform;hexane Chemical compound ClC(Cl)Cl.CCCCCC OQNGCCWBHLEQFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N elaidic acid methyl ester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 1
- 239000012499 inoculation medium Substances 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011976 maleic acid Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000401 methanolic extract Substances 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N methyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N 0.000 description 1
- 229940073769 methyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 239000003471 mutagenic agent Substances 0.000 description 1
- 231100000707 mutagenic chemical Toxicity 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 125000001791 phenazinyl group Chemical class C1(=CC=CC2=NC3=CC=CC=C3N=C12)* 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 239000013587 production medium Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000008719 thickening Effects 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N vanillin Chemical compound COC1=CC(C=O)=CC=C1O MWOOGOJBHIARFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N vanillin Natural products COC1=CC(O)=CC(C=O)=C1 FGQOOHJZONJGDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012141 vanillin Nutrition 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Vynález se týká vysokoproďukčního kmene mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis produkujícího monensin A, přičemž jako zdroj uhlíku se využívá tuků.
Standardní kmeny mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis produkují směs monensinů, v níž jsou hlavními složkami monensiny A a B. Poměr produkovaných monensinů lze u těchto pigmentujících nízkoprodukčních kmenů omezeně regulovat použitím rostlinných olejů jako zdrojů uhlíku (AO č.218032). Nepigmentující mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis KI-1 (AO č.226964) produkuje zhruba 90 % monensinů A po přidání specifických prekursorů této látky, tj. valinu nebo butyrátu (AO č.225938).
Podstatou vynálezu je nový vysokoprodukční kmen Streptomyces cinnamonensis SMU-21, produkující monensin A, využívající při fermentaci jako zdroj uhlíku směs tuků, který je uložen ve Sbírce mikroorganismů Univerzity O.E.Purkyně (CCM) v Brně pod číslem CCM 3977.
Novost kmene spočívá v tom, že na rozdíl od rodičovského nízkoprodukčního kmene, produkujícího monensin A na půdách obsahujících glukosu, popř. některé další cukry, produkuje nový kmen SMU-21 více než 6000 yug/mL monensinů A při submersních kultivacích v médiích obsahujících jako zdroj uhlíku směs tuků.
Mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis SMU-21 byl získán z dvojnásobně rezistentního mutanta Streptomyces cinnamonensis ACM-NLR-2, rezistentního k 2-amino-3-chlorbutyrátu a norleucinu, který je uložen ve Sbírce mikroorganismů Mikrobiologického ústavu ČSAV, Praha, několikastupňovou selekční metodou zahrnující působení chemických mutantů 8-methoxypsoralenu a N-methyl-N’-nitro-N-nitrosoguanidinu na sporovou suspensi a ozáření sporové suspense UV-světlem.
K suspensi spor (koncentrace konidií 1.5.10^ mL-''·) v 0,1 M fosfátového pufru (Na) pil 7.0 byl přidán ethanolický roztok (96 % ethanol) 8-methoxypsoralenu tak, aby konečná koncentrace této látky byla 500/ug mL-'-. Suspense byla nepřetržitě míchána na elektromagnetickém míchadle při 24 °C. Po 15 min. byla suspense exponována za míchání 20 min. UVzářením (zdrojom záření byla lampa Philips 57415 P/40 ŤUV 15 W), odpovídajícím toku energie
-2 —7 mJ mm . Procento konidií přežívajících po mutagenním zásahu (2.10 30 bylo určeno z počtu kolonii vyrostlých z konidií po odstranění mutagenu po 5 dnech kultivace na agarové medium □ složení (X):
kvasniční extrakt 0,4 agar se sladinovým extraktem 2,0 glukosa 0,4 agar Oxaid 3,0 voda
Sporová suspense (koncentrace konidií 5.10^ mL-1, v 0,05 M Tris-maleinanovém pufru (Na) pH 9.0 byla za nepřetržitého míchání na elektromagnetickém míchadle vystavena působení N-methyl-N’-nítro-N-nitrosoquanidinu v konečné koncentraci 3 mg mL-'’. Expoziční doba byla 120 min. při 24° C. Procento přežívajících konidií (4.10-θ %) po mutagenním zásahu bylo určeno stejným způsobem jako po účinku 8-methoxypsoralenu a UV-záření, Variabilita kmenů získaných po působení chemických mutagenů byla snížena přirozenou selekcí. Izolovaný mutant byl rodičovským kmenem v následujícím selekčním stupni. Kritériem pro výběr mutantů byla biologická aktivita submersních kultur, u vybraných kmenů s vysokou produkcí poměr produkovaných monensinů A a 8, nepřítomnost nežádoucích derivátů fenazinu a schopnost využívat tuky. Mutant Streptomyces cinnamonensis SMU-21 byl po. přečištění porovnán s výchozí rodičovskou kulturou Streptomyces cinnamonensis ACQ-NLR-2.
Morfeloflická charakteristika
Při kultivaci na půdě se sladovým a kvasinkovým extraktem rostl mutant SMU 21 ve formě béžovo-bílých, vrásčitých kolonií s vystouplým středem. Kolonie byly pravidelné, kulaté, po 5 dnech kultivace dosahovaly velikosti 4 až 8 mm. Narostlé vzdušné mycelíum s rovnými a zvlněnými sporofory se po 6 dnech kultivace členilo na jednotlivá běžovo-bílá konidia (spory)
CS 272 657 Bl s hladkým povrchem.
Zatímco výchozí kmen ACM-NLR-2 tvořil během submersní kultivace dlouhá větvená vlákna, na mycelitu mutanta docházelo po 40 h. kultivace k bodovému ztluštění vláken a po 50 h. nastal výrazný rozpad mycelia na útvary podobné sporám.
Zbarvení kultur při kultivacích
Při povrchových kultivacích bylo sledováno zbarvení vzdušného mycelia a zbarvení pigmentů difundujících do agarového média. Na rozdíl od výchozího rodičovského kmene ACB-NLR-2, který vylučoval žlutobílé pigmenty, bylo mutantem SMU-21 po 7 dnech kultivace médium zbarveno hnědočerveným pigmentem. Vzdušné rnycelium a spory byly u obou kmenů béžovo-bílé.
Při submersních kultivacích mělo médium po 144 hod. intenzivní tmavě hnědou barvu na rozdíl od výchozího kmene, kde byly tvořeny světle hnědé pigmenty.
Asimilace zdrojů uhliku výchozím kmenem ACB-NLR-2 a mutantem SMU 21
Schopnost využívat různé zdroje uhlíku při povrchové kultivaci na pevných médiích byla testována podle Pridham a Gottlieb (J.Bact. 58: 107, 1948) a Shirling a Gottlieb (Int.J. Syst.Bacteriol. 16: 313, 1966), Pro srovnání je dále uvedena tabulka využití různých zdrojů uhlíku při povrchové kultivaci výchozím kmenem ACB-NLR-2 a kmenem SMU 21 podle vynálezu.
Oba kmeny rostly stejně na glukose, arabinose, xylose, mannitolu a rhamnose. Na rozdíl od výchozího kmene, na fruktose rostl mutant SMU 21 mnohem lépe. Naopak výchozí kmen rostl lépe na inositolu. Růst nebyl pozorován (kromě kontroly) na sacharose, raffinose a celulose.
Využití různých zdrojů uhlíku kmeny ACB-NLR-2 a SMU 21
| zdroj uhlíku | ACB-NLR-2 | SMU 21 | |
| 0 | - | - | |
| D-glukosa | + + | + + | |
| L-arabinosa | + + | ++ | |
| sacharosa | - | - | |
| 0-xylosa | + | + | |
| i.-inositol | ++ | + | |
| 0-mannitol | ++ | ||
| D-fruktosa | + | + + + | |
| L-rhamnosa | + | + | |
| ruffinosa | - | - | |
| cellulosa | - | - | |
| - neroste | ++ dobrý | růst | |
| + slabý růst | +++ velmi | dobrý | růst |
Submersní kultivace
Bylo kultivováno na rotačních třepacích strojích s frekvencí 4,5 Hz a poloměrem rotace 15 mm při 34° C v 500 ml varných baňkách s plochým dnem, plněných 50 ml, při kultivaci inokula mutantních kmenů 100 ml média.
Výchozí rodičovský kmen ACD-NLR-2 byl kultivován v médiu obsahujícím (%):
| glukosa | 2,5 (inokulum) 5,0 (II.vegetativní generace) |
| K2HPO4 | 0,05 |
| MgS04 | 0,05 |
| kno3 | 0,1 |
| NaCl | 0,05 |
| FeS04 | 0,001 |
CS 272 657 Bl
Mutantní kmeny byly kultivovány v inokulačním médiu o složení (%):
| sojová mouka | 1,5 |
| kvasničný extrakt | 0,25 |
| glukosa | 0,5 |
| dextrin | 2,0 |
| CaCO-j | 0,1 |
| Produkční médium | obsahovalo C&); |
| sojová mouka | 3,3 |
| glukosa | 3,7 |
| NaCl | 0,033 |
| FeSO^ | 0,011 |
| CaCQ-j | 0,25 |
| Na?S04 | 0,22 |
| ai2(so4)3 | 0,07 |
| k2hpo4 | 0,0075 |
| kyselina askorbová | 0,001? |
| sojový olej | 2,5 |
| námelový olej | 0,5 |
| methyloleát | 0,8 |
| HaHOj | 0,8 |
Inokulační baňky I. vegetativní generace byly očkovány jednou kličkou spor z kultur na sporulační půdě, starých 7 až 10 dní. Vlastní submersní kultivace probíhala ve II. vegetativní generací; baňky byly očkovány 4 % ipokula ve stáří 18 až 14 hod. Kultivace byly ukončeny po 8 dnech.
Po skončení kultivace byla v methanolickém extraktu ze submersních kultur sledována antibiotická aktivita difusní plotnovou metodou a tvorba látek íenazinového typu autobiograficky po tenkovrstevné chromatografií. Testovacím organismem byl Bacíllus subtilís.
Poměr produkovaných monensinů A a B byl zjišťován v hexan-chloroformovém extraktu z kultur. Po tenkovrstevné chromatografií byly zóny monensinů delegovány vanilinovým činidlem a měřena densitometricky jejich intenzita.
Spotřeba tuků byla určena v supernatantu po centrifugaci submersních kultur měřením ěísla zmýdelnění.
Z charakteristik uvedených výše vyplývá, že kmen SMU 21 podle vynálezu získaný několikastupňovou selekcí za použití chemických mutagenů 8-methoxypsoralenu a N-methyl-N’-nitro-M-nitrosoquanidinu a UV-záření se od rodičovského kmene Streptomyces cinnamonensis ACB-NLR-2 liší v těchto znacích;
a) zbarvení vzdušného mycelia při kultivaci na pevném agarovém médiu
b) zbarvení submersních kultur
c) využitím fruktosy pro růst při povrchové kultivaci na pevném médiu
d) schopností využívat jako zdroj uhlíku pří kultivacích tuky
o) vysokou produkcí monensinů A. (Oproti výchozímu kmenu produkujícímu monensln A v koncentracích kolem 1000 yug/ml, produkuje kmen SMZ 21 podle vynálezu více než 6000/Ug/ml.)
Claims (1)
- PŘEDMĚT VYNÁLEZUVysokoprodukční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis produkující monensin A označený jako SMU 21, využívající ,při fermentací jako zdroj uhlíku směs tuků, jehož vzorek kultury je uložen ve Sbírce mikroorganismů Univerzity O.E.Purkyně (CCM) pod číslem CCM 3977.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS292287A CS272657B1 (en) | 1987-04-24 | 1987-04-24 | Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS292287A CS272657B1 (en) | 1987-04-24 | 1987-04-24 | Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS292287A1 CS292287A1 (en) | 1990-06-13 |
| CS272657B1 true CS272657B1 (en) | 1991-02-12 |
Family
ID=5367769
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS292287A CS272657B1 (en) | 1987-04-24 | 1987-04-24 | Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS272657B1 (cs) |
-
1987
- 1987-04-24 CS CS292287A patent/CS272657B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS292287A1 (en) | 1990-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khokhlov et al. | Effect of A‐factor on the growth of asporogenous mutants of Streptomyces griseus, not producing this factor | |
| RU2211862C2 (ru) | (-) ШТАММ ГЕТЕРОТАЛЛИЧНОГО ФИКОМИЦЕТА Blakeslea trispora, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ЛИКОПИН В ПАРЕ С РАЗНЫМИ (+)ШТАММАМИ Blakeslea trispora, И СПОСОБ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО СИНТЕЗА ЛИКОПИНА | |
| US9365880B2 (en) | Fermentation process for the production of rapamycin | |
| Boeck et al. | NEW AZASTEROIDAL ANTIFUNGAL ANTIBIOTICS FROM GEOTRICHU FLAVO-BRUNNEUM I. DISCOVERY AND FERMENTATION STUDIES | |
| KR101580370B1 (ko) | 신규한 스트렙토마이세스 필라멘토서스 변이주 및 이를 이용한 답토마이신의 생산 방법 | |
| CZ282908B6 (cs) | Kmen Streptomyces a způsob produkce avermectinových sloučenin | |
| Holmalahti et al. | Production of dihydroabikoviromycin by Streptomyces anulatus: production parameters and chemical characterization of genotoxicity | |
| CS272657B1 (en) | Monensin a producing high-productive strain of microorganism streptomyces cinnamonensis | |
| US20100285524A1 (en) | Novel microorganism and method for producing carotenoid using the same | |
| EP0538050B1 (en) | Process for producing streptovaricin C | |
| KR100422307B1 (ko) | 리보플라빈을 생산하는 미생물 및 이를 이용한리보플라빈의 생산방법 | |
| EP0325137B1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Farbstoffen und/oder Wirkstoffen in der wasserarmen, sterilen Wirbelschicht | |
| CA1174995A (en) | Process for preparing polyether antibiotic | |
| RU2061754C1 (ru) | Штамм streptomyces kurssanovii - продуцент хитиназы и n-ацетил-d-глюкозаминидазы | |
| Nesbit et al. | Influence of cultural conditions on growth and lipolytic activity in Nocardia asteroides | |
| Pelechova et al. | Selection of a hyperproducing strain of Aspergillus niger for biosynthesis of citric acid on unusual carbon substrates | |
| RU2142509C1 (ru) | Штамм saccharopolyspora erythraea 52 - продуцент антибиотика эритромицина | |
| Marinelli et al. | Antibiotic GE37468A: A New Inhibitor of Bacterial Protein Synthesis III. Strain and Fermentation Study | |
| SU933704A1 (ru) | Штамм плесневого гриба aSpeRGILLUS oRyZae-3-продуцент @ -амилазы | |
| Sukumaram et al. | An actinomycete producing L-3, 4-dihydroxyphenylalanine from L-tyrosine | |
| Jackson et al. | COUMAMIDINES, NEW BROAD SPECTRUM ANTIBIOTICS OF THE CINODINE TYPE I. DISCOVERY, TAXONOMY OF THE PRODUCING ORGANISM AND FERMENTATION | |
| CS233853B1 (cs) | Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A | |
| CS226964B1 (cs) | Nový produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis KL-1 CCM 3525 | |
| KR100446108B1 (ko) | 세팔로스포린c생산미생물및이를이용한세팔로스포린c의제조방법 | |
| JP2009505681A (ja) | 酸代謝産物生成の調節 |