CS233853B1 - Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A - Google Patents
Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A Download PDFInfo
- Publication number
- CS233853B1 CS233853B1 CS418483A CS418483A CS233853B1 CS 233853 B1 CS233853 B1 CS 233853B1 CS 418483 A CS418483 A CS 418483A CS 418483 A CS418483 A CS 418483A CS 233853 B1 CS233853 B1 CS 233853B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- monensin
- strain
- streptomyces cinnamonensis
- ccm
- acbr
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Předmětem vynálezu je nový produkční kmen Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, který se liší od standardních kmenů Streptomyces cinnamonensis tím, že produkuje minimálně 90 % monenslnu A. Kmen je uložen ve Sbírce mikroorganismů University J. E. Purkyně.
Description
Vynález se týká produkčního mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis, který produkuje monensin A.
Pro standardní kmeny Streptomyces cinnamonensis je charakteristické, že produkuji směs monensinů A, B, C a Ď-s převahou monensinu A a B, přičemž monensin B má výrazně nižší biologickou aktivitu. Nežádoucí tvorbu monensinu B lze částečně potlačit vhodným složením kultivačního media s využitím prekursorů nebo rostlinných olejů /AO 218032 a AO 225 938
Podstatou vynálezu je nový produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis ACER-2, produkující monensin A, uložený ve Sbírce mikroorganismů University J.E. Purkyně /CCM/ v Brně pod číslem .
Novost kmene spočívá v tom, že na rozdíl od standardních kmenů Streptomyces cinnamonensis je hlavním produktem monensin A, jehož podíl v komplexu produkovaných monensinů je minimálně 90 %. Monensin A je hlavním nositelem žádaných vlastnosti, protože má nejpři zni vějši biologickou aktivitu. Nový kmen je svými vlastnostmi předurčen pro průmyslovou výrobu monensinového premixu, který bude sloužit k přípravě medikovaných krmiv pro použití ve velkochovech, přímo z usušeného mycelia bez nákladných isolací účinného monensinu A.
Studium biosyntézy monensinu ukázale, že rozhodující stavební jednotkou monensinu A je butyrátova jednotka, jejímž přirozeným prekursorem L-valin. Tento náš objev vedl k cílené přípravě mutantniho kmene Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 s kvalitativ2
233 8S3 nimi změnami v produkci standardních metabolitů, jejichž podstatou je změněná intracelulárni regulace metabolismu L-valinu.
Mutantni kmen Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 byt získán z rodičovského kmene Streptomyces cinnamonensis EC 100-5, uloženého ve Sbírce mikrorganismů MBŮ ÍSAV Praha, a to po ozářeni UV-světlem. Jako zdroje zářeni bylo použito lampy Philips 57415 P/40 TUV 15 W. Vodná suspenze konidii kmene EC 100-5 /koncentrace konidii 10 mL / byla vystavena účinkům UV-záření při teplotě 22 °C za nepřetržitého promícháváni na elektromagnetickém michadle. Expoziční dobu 30 s, odpovídající fluenci energie 150 ^uJ mm , přežilo 0.3 % konidii v suspenzi. Tato suspenze spor po mutagenira zásahu byla 42 h submersně kultivována při 36 °C v kultivačním mediu o složeni /hmotnostní koncentrace/:
L-asparagin /monohydrát/ 0,10 %
KH2P04 0,05 %
MgS04.7H20 0,1 %
FeS04.7H20 0,001 % citrát sodný 1,00 %
Po této době byl přidán antimetabolit L-threo-2-amino-3-chlormáselná kyselina v takovém množství, aby její koncentrace v kultivačním me'diu činila 0,075 %. Dále bylo submersně kultivováno 72 hodiny za stejných podminek. Potom byly přeživší buňky vyočkovány na agarovou půdu o složení /hmotnostni koncentrace/:
L-asparagin /monohydrát/ 0,10 %
KH2P04 0,05 %
MgS04.7H20 0,10 %
FeS04.7H20 0,001 %
L-threo-2-amino-3-chlormáselná kyselina 0,075 Jí agar p.a. /Difco/ 2r00 % citrát sodný 1,00 %
Po 20 dnech kultivace při 28 °C ve vlhké komůrce se na povrchu agaru objevily ojedinělé kolonie. Kritériem pro selekci . kmene Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 byly kolonie mutantního kmene, obklopené množstvim drobných kolonii standardního typu. Mutantni kmen byl přečištěn na agarové půdě stejného složeni jak uvedeno výše a jeho vlastnosti byly porovnány s vý3
233 853 chozi rodičovskou kulturou kmene Streptomyces cinnamonensis EC 100-5 při stacionární i submersni kultivaci.
1/ Morfologická charakteristika
Při kultivaci na půdě se sladovým a kvasinkovým výtažkem tvořil kmen ACBR-2, stejně jako rodičovský kmen EC 100-5, vzdušné mycelium s rovnými a zvlněnými sporofory. Po sedmi dnech kultivace byly sporofory obou kmenů Streptomyces cinnamonensis po celé délce členěny na jednotlivá konidia /spory/. Členění bylo v mikroskopu s procházejícím světlem velmi nezřetelné, bylo však potvrzeno pozorováním v elektronovém mikroskopu.
2/ Zbarveni kultur při kultivaci na agarových půdách
Při kultivaci na agarových půdách bylo sledováno zbarveni vzdušného mycelia a zbarveni difunduj icích pigmentů. Nebyly pozorovány žádné rozdíly. V obou případech, u rodičovského kmene i nového kmene ACBR-2, bylo vzdušné mycelium světlé, žlutobilé a difundující pigmenty světle žluté.
3/ Schopnost využívat různé zdroje uhlíku
Schopnost využívat různé zdroje uhlíku byla testována podle Shirlinga a Gottlieba /Int.J.System.Bacteriol., 16:313, 1966/ za užití devíti různých zdrojů uhlíku. Mutantní kmen ACBR-2 i rodičovský kmen EC 100-5 rostly stejně na D-glukose, glycerolu, L-arabinose, Ď-xylose, D-fruktose, cellobiose, L-rhamnose. Ani jeden z uvedených testovaných kmenů nerostl na sacharose. Mutantní kmen ACBR-2, na rozdíl od rodičovského kmene EC 100-5, slabě rostl na půdě s laktósou.
4/ Rezistence na L-threo-2-amino-3-chlormáselnou kyselinu
Nový kmen Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 rostl na agarových půdách /složení viz výše/ s přídavkem L-threo-2-amino-3-chlormáselné kyseliny o hmotnostní koncentraci 0,075 Růst rodičovského kmene EC 100-5 byl za těchto podmínek zcela inhibován.
5/ Submersni kultivace
Mutantní kmen ACBR-2 i rodičovský kmen EC 100-5 byly submersně kultivovány na rotační třepačce s frekvencí 2,8 Hz při teplotě 36 °C v 500 ml varných baňkách plněných 50 mL
233 8S3 fermentační půdy. Složení fermentační půdy v hmotnostní koncentraci :
sojová mouka 1,5 % glukosa 2,5 % pro 1.
vegetativní generaci
5,0 % pro 2.
vegetativní generaci
NaCl 0,3 %
CaC03 0,3 %
Fe2/S04/3.9H20 0,03 %
RnCl2.4H20 0,03 %
Půda před očkováním byla sterilizována při 120 °C a tlaku 100 kPa po dobu 35 minut.
Baňky 1. vegetativní generace byly očkovány sporovým inokulem z kultur na sporulačni agarové půdě se sladovým a kvasinkovým výtažkem. Vlastni submersni kultivace probíhala ve druhé, vegetativní generaci; baňky byly očkovány 2 % inokula z kultur první generace po 24 h kultivace. Kultivace druhé, produkční generace, byla ukončena po 120 h.
Mutantní kmen Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 i rodičovský kmen EC 100-5 tvořily při submersni kultivaci světlehnědý /béžový/pi gment.
Antibiotická aktivita monensinu v submersních kulturách byla stanovena plotnovou difusní metodou s testovacím organismem Bacillus subtilis nebo chemickou spektrofotometrickou metodou s valinem.
Obsah monensinu A a B se stanoví chromatografi i extraktu ze submersni kultury na tenké vrstvě /A0 č. 218032/. Kvalitativní poměr obou složek se objektivně zjistí dénsitometrickým proměřením. Nový kmen Streptomyces cinnamonensis ACBR-2 tvoři minimálně 90 % monensinu A.
Z výše uvedených charakteristik je zřejmé, že nový kmen Streptomyces cinnamonensis ACBR-2, získaný po mutagenesi UV-zářením a následující selekci, se liší od rodičovského kmene Streptomyces cinnamonensis EC 100-5 v těchto znacích: a/ rezistence na L-threo-2-amino-3-chlormáselnou kyselinu; b/ snížená schopnost využívat laktosu jako zdroj uhlíku; c/ potlačení produkce nežádoucího monensinu B a zvýšení obsahu monensinu A.
Claims (1)
- Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces produkující monensin A,
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS418483A CS233853B1 (cs) | 1983-06-10 | 1983-06-10 | Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS418483A CS233853B1 (cs) | 1983-06-10 | 1983-06-10 | Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS233853B1 true CS233853B1 (cs) | 1985-03-14 |
Family
ID=5384006
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS418483A CS233853B1 (cs) | 1983-06-10 | 1983-06-10 | Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS233853B1 (cs) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108359687A (zh) * | 2017-07-18 | 2018-08-03 | 天津大学前沿技术研究院有限公司 | 一种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法及应用 |
-
1983
- 1983-06-10 CS CS418483A patent/CS233853B1/cs unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108359687A (zh) * | 2017-07-18 | 2018-08-03 | 天津大学前沿技术研究院有限公司 | 一种提高莫能菌素产量的重组工程菌的构建方法及应用 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Khokhlov et al. | Effect of A‐factor on the growth of asporogenous mutants of Streptomyces griseus, not producing this factor | |
| RU2188867C2 (ru) | Микробный способ получения хиральных производных бензилового спирта | |
| RU2211862C2 (ru) | (-) ШТАММ ГЕТЕРОТАЛЛИЧНОГО ФИКОМИЦЕТА Blakeslea trispora, ПРОДУЦИРУЮЩИЙ ЛИКОПИН В ПАРЕ С РАЗНЫМИ (+)ШТАММАМИ Blakeslea trispora, И СПОСОБ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОГО СИНТЕЗА ЛИКОПИНА | |
| Ali et al. | Biosynthesis of L-DOPA by Aspergillus oryzae | |
| US7279314B2 (en) | Chemical substance having morphogenetic and growth-accelerating activities | |
| DE60007338T2 (de) | Verfahren zur herstellung von mycophenolsäure und derivaten davon | |
| EP0547898B1 (en) | Microbial process for the production of trans-4-hydroxy-L-proline | |
| Boeck et al. | NEW AZASTEROIDAL ANTIFUNGAL ANTIBIOTICS FROM GEOTRICHU FLAVO-BRUNNEUM I. DISCOVERY AND FERMENTATION STUDIES | |
| JP6527521B2 (ja) | 新規なストレプトマイセス・フィラメントサス変異株及びこれを用いたダプトマイシンの生産方法 | |
| Rosfarizan et al. | Isolation of a kojic acid‐producing fungus capable of using starch as a carbon source | |
| CS233853B1 (cs) | Produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis CCM 3658, produkující monensin A | |
| US20100285524A1 (en) | Novel microorganism and method for producing carotenoid using the same | |
| CN110564649A (zh) | 一株产脂肪酶菌株及其应用 | |
| EP0313297B1 (en) | Process for production of avermectin aglycones and cultures therefor | |
| Ashokkumar et al. | B-fructofuranosidase production by 2-deoxyglucose resistant mutants of | |
| JPH02150273A (ja) | 新規なモエノマイシン分解微生物および分解方法 | |
| US3884762A (en) | Fermentation process for the preparation of ergot alkaloids | |
| EP2032712B1 (en) | Regulation of acid metabolite production | |
| Gubash | Improved egg-yolk agar plate medium for the detection of clostridial phospholipase C activity | |
| CS226964B1 (cs) | Nový produkční kmen mikroorganismu Streptomyces cinnamonensis KL-1 CCM 3525 | |
| KR100419553B1 (ko) | 신규의 스트렙토마이세스 아버미틸리스 변이주 및 아버멕틴의 제조방법 | |
| KR100446108B1 (ko) | 세팔로스포린c생산미생물및이를이용한세팔로스포린c의제조방법 | |
| CS227700B2 (en) | Production of narasine antibiotic | |
| Sukumaram et al. | An actinomycete producing L-3, 4-dihydroxyphenylalanine from L-tyrosine | |
| FI74995C (fi) | Foerfarande foer mikrobiologisk framstaellning av fermenteringsmedia, som innehaoller antingen nebramycin-5' eller en blandning av nebramycin-2, nebramycin-4 och nebramycin-5'. |