CS267400B1 - Myší lymfocytámy hybridom RG-12 - Google Patents
Myší lymfocytámy hybridom RG-12 Download PDFInfo
- Publication number
- CS267400B1 CS267400B1 CS887047A CS704788A CS267400B1 CS 267400 B1 CS267400 B1 CS 267400B1 CS 887047 A CS887047 A CS 887047A CS 704788 A CS704788 A CS 704788A CS 267400 B1 CS267400 B1 CS 267400B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- hybridoma
- monoclonal antibody
- malignant melanoma
- cells
- tumors
- Prior art date
Links
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
CS 267 400 B1 1
Vynález sa týká nového buňkového hybridó-mu, zostrojeného buňkovou fúziou myšej mye-lómovcj linie Sp2/0 a myšej slczinovej lymfoíd-nej buňky, produkujúcej protilátku proti mem-bránovému antigénu bunick linie 1’udského ma-lígneho melanómu IIMB 2.
Zavedením hybridómovcj technologie sa ot-vorila cesta k príprave monoklonálnych proti-látok, namierených proti antigénnym determi-nantou! buniek nižších i vyšších organizmovvčítane buniek nádorových. Protinádorové mo-noklonálne protilátky našli široké uplatneniev imunohistoehemickej, rádioimunologickeja lokalizačnej diagnostíke primárných nádorova ich metastáz a v kontrole progresie nádoro-vé] choroby po terapii. Převážná váčšina dosialpřipravených protinádorových monoklonál-nych protilátok je namierená proti antigénomtransplantačného typu, antigénom cytoskeletu,diferenciačným antigénom a antigénom em-bryonálneho póvodu. V súčasnosti jestvuje vosvete iba niekofko monoklonálnych protilátokreagujúcich s neoantigénmi združenými s ná-dormi rovnakej histogenezy. V ostatnýeh rokoch sa podařilo vyvinúť mo-noklonálne protilátky proti antigénom združe-ným s buňkami l’udského kožného malígnehomelanómu [Ziai, M. R., lmberti, L., Nicotra, M.R., Badaracco, G., Segatto, O., Natali, P. G., Fe-rrone, S.: Analysis with monoclonal antibodiesof the molecular and cellular heterogeneity ofhuman high molecular weight melanoma asso-ciated antigen. Cancer Research 47, (1987),2474; Hotta H., Ross, A. H., Huebner, K., Isobe,M., Wendeborn, S., Chao, Μ, V., Risciardi, R. P.,Tsujimoto, Y., Croce, C. M., Koprowski, H,:Molecular cloning and characterization of anantigen associated with early stages of melano-ma tumor progression. Cancer Research, 48,(1988), 2955]. Žiadna z nich však nie je přísnéSpecifická pre buňky malígneho melanómu.Dokázala sa ich súčasná reaktivita s tkanivamia nádormi neuroektodermálneho póvodu akoi s nádormi inej histogenezy [Steplewski, Z.,Herlyn, D., Clark, W. H., Ross, A. H., Blaszcyk,M., Pak, K. Y., Koprowski, H.; Production andcharacterization of monoclonal antibodiesagainst human inalignant melanoma. CancerInvestigation, 1, (1983), 215; Hotta a spol., Can-cer Research, 48, (1988), 2955). Váčšina dosial’vyvinutých antimelanómových protilátok rea-guje s antigénmi, ktoré sa denaturujú formolom(fixatívum, rutinně používané na fixáciu tkanivpre histologické vyšetrenie) a preto nie súvhodné pre imuriohistochemické testy. Pre tietotesty je komerčně připravovaných niekofko an-timelanómových monoklonálnych protilátoks róznym stupňom špecificity firmou DakopattsA. S. (Santa Barbara, California, USA;) firmouHybritech Company (San Diego, California,USA) a i. V súčasnosti nie sú komerčně dostup-né antimelanómové monoklonálne protilátkyv súpravách pre rádioimunodiagnostické vyšet-renie cirkulujúcich antimelanómových protilá-tok v sérach pacientov s malígnym melanó-mom.
Uvedené nedostatky do značnej miery od- 2 straňuje hybridóm, produkujúci monoklonálnuprotilátku proti antigénu združenému s buňka-mi 1’udského malígneho melanómu, ktorý jeuložený v zbierke hybridómov Ústavu experi-mentálnej onkológie SAV v Bratislavě, ul. Čsl.armády 21, pod označením RG 12.
Hybridóm RG-12 bol získaný fúziou slezinovej buňky myši kmeňa Balb/c, umunizovanejbuňkami linie 1’udského malígneho melanómuHMB-2, s buňkou myšieho plazmocytómuSp2/O spósobom, popísaným v odbornej litera-túre [Kóhler, G., Milstein, C.: Continuous cultu-res of fused celíš secreting antibody of predefi-ned špecificity. Nátuře, 256, (1975), 495] a ná-sledným klonováním súboru hybridných buniekštandardnou technikou. Získaný hybridóm produkuje monoklonálnuprotilátku, ktorá sa Specificky viaže na nádoro-vý antigén, přítomný v buňkách 1’udského ma-lígneho melanómu a v buňkách nádorov epite-lového póvodu (karcinomy) nie však v buňkáchzdravých tkaniv.
Buňky hybridómu RG-12 možno pomnožo-vať v podmienkach in vitro v štandardných mé-diách pre živočišné buňkové kultúry, alebo invivo v peritoneálnej dutině myší kmeňa Balb/c.Viabilné buňky hybridómu móžu byť uchová-vané v ampulkách pri -180 °C v kvapalnom du-síku. Ich rozmražením sa získavajú životas-chopné kultúry, ktoré sa používajú ako zdrojmonoklonálnej protilátky. Příklad
Hybridómové buňky sa pomnožovali in vivoaplikáciou 1 x 107 buniek intraperitoneálnemyšiam kmeňa Balb/c bez predchádzajúcejpremedíkácie. Na 21. deň rastu hybridómu v as-citovej formě bola myš utratená a ascitová te-kutina bola odobraná punkciou brušnej dutiny.Získalo sa 5,6 ml ascitovej tekutiny s obsahom 6,9 mg/ml imunoglobulínu. Tento bol z ascito-vej tekutiny izolovaný vyzrážaním v 2 M síraneamónnom a purifikovaný chromatografiou nakoloně dietylamínoetyl-celulózy. Ascitová te-kutina obsahujúca monoklonálnu protilátkui purifikovaná protilátka vykazovala v imuno-histochemickom teste na parafínových rezochtkaniv špecifickú vazbu na buňky 1'udského ma-lígneho melanómu a buňky karcinómov, nievšak na buňky zdravých tkaniv a nádorov inejhistogenezy. V kompetitívnom rádioimunotestemonoklonálna protilátka odhafuje cirkulujúceprotinádorové protilátky v 85 % sér pacientovs malígnym melanómom. V podmienkach in vitro rastie hybridóm RG--12 ako suspenzná kultúra. Buňky hybridómumajú vefkosť a tvar charakteristický pre mye-lómové buňky. Obsahujú fúzované buňkové ja-drá s aneuploídnym karyotypom. Ako rastovémédium sa používá minimálně esenciálně médi-um MEM (Ustav sér a očkovacích látek, Praha)obohatené 10% fetálneho telacieho séra (Biove-ta, Ivanovice na Hané), gentamycínom a náraz-níkovým roztokom bikarbonátu sodného. Kul-túry sú udržiavané v termostate pri 37 °C v hu-midifikovanej atmosféře v přítomnosti 5% CO2.
Claims (1)
- 3 Za týchto podmienok je středná generačná do-ba buniek hybridómu 22,5 hod. Hybridóm pro-dukuje monoklonálny imunoglobulín triedyIgCi. Hybridóm RG-12 móže byť priemyslovo vy-užívány ako zdroj moiioklonáluej protilálkyproti inalígnemu melanómu. v kompetitívnomrádioimunotestc s použitím membránových bi-elkovín melanóniových buniek HMB-2 móžebyť monoklonálna protilátka použitá pre kvan-titativné i kvalitativně stanovenie cirkulujúcichprotinádorových protilátok u pacientov s ma- PREDMET Myší lymfocytárny hybridóm RG-12, produ-kujúci monoklonálnu protilátku triedy IgG CS 267 400 B1 4 lígnym melanómom pri diagnostike, diferenci-álnej diagnostike a monitorovaní priebehuochorenia po radikálnej liečbe. V imunohisto-chcmickom vyšetření parafínových rezov tka-niv sa monoklonálna protilátka uplatní pri de-fcrcnciálnej diagnostike malígnych melanómova ich metastáz od benígnyeh pigmentovanýchnádorov kože a iných nádorov neuroektoder-málneho póvodu. Potenciálně možné využitiemožno očakávať pri imunoscintigrafickej loka-lizačnej diagnostike metastáz malígneho mela-nómu in vivo. YNÁLEZU proti nádorovému antigénu, združenému s buň-kami 1’udského malígneho melanómu.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS704788A1 CS704788A1 (en) | 1989-06-13 |
| CS267400B1 true CS267400B1 (sk) | 1990-02-12 |
Family
ID=5418874
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS887047A CS267400B1 (sk) | 1988-10-25 | 1988-10-25 | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS267400B1 (cs) |
-
1988
- 1988-10-25 CS CS887047A patent/CS267400B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS704788A1 (en) | 1989-06-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CA1208576A (en) | Monoclonal antibodies specific to cea, a process for producing such antibodies and the use of such antibodies | |
| FI86077B (fi) | Monoklonala antikroppar och metod att producera dessa. | |
| EP0201509B1 (en) | Monoclonal antibody to a human carcinoma tumor associated antigen | |
| Kennel et al. | Analysis of surface proteins of mouse lung carcinomas using monoclonal antibodies | |
| AU661816B2 (en) | Urinary tumor associated antigen, antigenic subunits uses and methods of detection | |
| US20040001789A1 (en) | Cytotoxicity mediation of cells evidencing surface expression of gp96 or precursors thereof | |
| US4678747A (en) | Monoclonal antibodies for detection of an H (O) blood group antigen | |
| US5654408A (en) | Melanoma-associated antigens identified by monoclonal antibodies | |
| US4725538A (en) | Method of assaying the presence of cancer cells | |
| Aida et al. | Topographical analysis of tumor-associated antigens on bovine leukemia virus-induced bovine lymphosarcoma | |
| JPS61282096A (ja) | 新規な腫瘍関連抗原 | |
| US5639622A (en) | Monoclonal antibodies against tumor-associated antigens, a process for the preparation thereof and the use thereof | |
| EP0245520B1 (en) | Monoclonal antibody against glutathione s-transferase and its use in the diagnosis of cancer | |
| Furukawa et al. | A unique antigenic epitope of human melanoma is carried on the common melanoma glycoprotein gp95/p97. | |
| CS267400B1 (sk) | Myší lymfocytámy hybridom RG-12 | |
| EP0184906A1 (en) | Monoclonal antibodies specific for human squamous lung carninoma cells, their preparation and use | |
| Liao et al. | Identification of Immunoglobulin Class and Subclass of House Monoclonal Antibodies to Human Cell Surface Antigens by Mixed Hemadsorption Assay | |
| CA1315220C (en) | Preparation of monoclonal antibodies capable of reacting with human breast carcinoma cells | |
| EP0287012A2 (en) | Anti-R-binder monoclonal antibody, process for preparing the same and application of the same | |
| JPH08208698A (ja) | モノクローナル抗体 | |
| JPH0343078A (ja) | 新規ハイブリドーマ，モノクローナル抗体および用途 | |
| JPS61250000A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| JPS61249999A (ja) | モノクロ−ナル抗体 | |
| JPH01243986A (ja) | 抗ヒト固形癌ヒトモノクローナル抗体，抗体産生ハイブリドーマおよび抗体の製造法 | |
| JPS6233199A (ja) | モノクロ−ナル抗体 |