CS266252B1 - Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie - Google Patents

Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie Download PDF

Info

Publication number
CS266252B1
CS266252B1 CS847200A CS720084A CS266252B1 CS 266252 B1 CS266252 B1 CS 266252B1 CS 847200 A CS847200 A CS 847200A CS 720084 A CS720084 A CS 720084A CS 266252 B1 CS266252 B1 CS 266252B1
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
molecular weight
iga
igg
igm
low molecular
Prior art date
Application number
CS847200A
Other languages
English (en)
Other versions
CS720084A1 (en
Inventor
Ivan Ing Csc Stepanek
Original Assignee
Ivan Ing Csc Stepanek
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ivan Ing Csc Stepanek filed Critical Ivan Ing Csc Stepanek
Priority to CS847200A priority Critical patent/CS266252B1/cs
Publication of CS720084A1 publication Critical patent/CS720084A1/cs
Publication of CS266252B1 publication Critical patent/CS266252B1/cs

Links

Landscapes

  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

Spósob přípravy krvného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG + IgA + 4 IgA + XgM pre i.m. podanie je výrobny postup, ktorého cielom }e vyrobiť terapeutický .alebo diagnostický preparát, ktorý možno využit v obore klln^ckej imunologie, medicí­ ny, farmácie a biologie. Výrobný postup umožňuje vyrobit zmesný imunoglobulinový preparát na báze IgG + IgA + XgM, ktorý , možno aplikovat intramuskulárně. Bielkovmný materiál, obsahujúci purifikovanú zmes imunoglobulinov na báze IgG + IgA + IgM z krvnej plazmy alebo séra s definovanou antibakteriálnou, antitoxickou alebo antivirovou protilátkovou aktivitou, sa suspenduje za aseptických podmienok v takom množstve destilovanej apyrogennej vody o teplote 0 °C až +16 °C, aby hodnota koncentrácie bielkovín sa nachádzala v rozmedzí 10 až 150 gramov na liter, imunoglobulinový roztok sa vyčíri například filtráciou a oddelenie nízkomolekularnych zlúčenín, vyjádřené do 50 000 molekulovou hmotnostou, sa prevedie gelovou filtráciou, dialýzou, ultrafiltráciou alebo diafiltráciou pomocou elúcie alebo nariečlovaním s vodným roztokom chloridu sodného o koncentrácii do 30 gramov na liter o teplote 0 °C až +6 °C s hodnotou pH v rozmedzi 4,0 až 8,0, pričom roztok imuno^lobulinov na báze IgG + IgA + IgM, zbaveny nízkomolekulárných zlúčenín, sa sterilizuje například filtráciou, radiačnou sterilizáciou alebo inými metodami, podlá potřeby sa zakoncentrováva ultrafiltráciou, vymrazovaním, vakuovou destiláciou alebo inými metodami, rozplňuje sa, lyofilizuje a v případe potřeby sa podrobí čtalšiemu spracovaniu.

Description

2 CS 266 252 B1
Vynález sa týká spósobu přípravy zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG + + Igň + IgM, z normálnej alebo hyperimunej plazmy, připadne z normálneho alebo retroplacentár-ného připadne hypertmunného séra, ktorý je určený pre terapeutické účely cestou i.m. aplikácie
Na přeci pi láci ii balastnýcb bielkovín zo zmesi imunoglobulínov IgG + IqA + IgM bol použily π I l mi utni umy ,ι ι I vano I (hi hw I rk II. 11. , I Ί iiclii i .1 . , l ;> · I l II. : Ι'ι ι >> |. I.......ol, I o I .
Stand. 4, 86, 1970; Rchwick II. G. : Vox Sang. 23, 112 , 1972), kyselina borita (ΙΌ jaudíerL. , Audran P., Steinbuch M. : Vox Sang. 23, 165, 1972) a kyselina kaprylová (Blatrix G.,
Israěl J., Reinert Ph. , Grisceli G. , Steinbuch M. : l,a Nouvelle presse Medicale 5, 1 193, 1976). Súčasná technologická prax na jednej straně sice odděluje zmesný imunoglobulinovýpreparát na báze IgG + lgA + IgM od zmesi iných krvných bielkovín, ale na druhéj stranězanáša do roztoku IgG i IgA + IgM nízkomoLekulárné anorganické alebo organické zlúčenínypoužité na precipitáciu bielkovín. Technologický postup móže taktiež časť niektorých zlúče-nin s biochemicko-fyziologickou aktivitou v roztoku zmesného imunoglobulinového preparátukoncentrovat t. j. obohacovat vzhladom ku ich koncentráeii vo východzej surovině, z ktorejbolí imunoglobulíny IgG + IgA + IgM izolované. Přítomnost přebytku anorganických solí alebo solí organických kyselin znižuje použitel-nost injekčného roztoku a spolu s prítomnostou nízkomolekulárných zlúčenín v roztoku imuno-globulinov vytvára předpoklady pre vznik nežiaducich interakcii týchto zlúčenín s molekulamiIgG + IgA + IgM a to najma pri skladovaní za nízkých teplot Sálej pri lyofilizácli alebov priebehu skladovania v podobě terapeutického preparátu.
Zmesný imunoglobulinový preparát na báze IgG + IgA + IgM připravený podlá doposialpopísaných technologii má dokazatelný hypotenzívny a antikomplementárny účinok čo je ajpre kvalitu preparátu pre i.m. podanie nevhodné. Podanie intramuskulárného preparátu týchtokvalit móže v dósledku poklesu krvného tlaku pacienta ohrozit a v dósledku antikomplementár-nej aktivity oslabit jeho nešpecifickú obranu.
Na odstraňovanie antikomplementárnej aktivity gama globulínu, ktorý bol připravenýzo zmesi plazjnatických alebo sérových bielkovín bola použitá úprava hodnoty pH na 4,0 pri24 hodinovej inkubácii pri 37 °C (Barandun S., Kistler P., Jeunet F. , Isliker H.: Vox Sang. 7, 157, 1962).
Pokles antikomplementárnej aktivity gama globulínu bol zaznamenaný po přidaní aktívné-ho uhlia (Steinbuch Μ., Audran R., Amouch P., Blatrix C.: Vox Sang. 13, 103, 1967), popřidaní trikalciumfosfátu (Steinbuch Μ., Audran R., Amouch P. , Blatrix C.: Rev. med. Tourssuppl. No 3, 79, 1968) a po přidaní albuminu (Auerswald W., Kiesewetter E.:Wien. med. Wschr.115, 690, 1965).
Znižovanie antikomplementárnej aktivity gama globulinového roztoku pomocou proteolytic-kého štiepenia bolo realizované pepsínom (Schultze Η. E., Schwick G.: Dtsch. med. Wschr. 87, 1 643, 1962) a plazmínom (Sgouris J. T.: Vox Sang. 13, 71, 196?).
Antikomplementárnú aktivitu gama globulinovej molekuly je možné znížiť jej chemickouredukciou beta merkaptoetanolom (Wiederman G., Miescher P. A., Franklin E. C.: Proč. Soc.exp. Biol. Med. 113, 609, 1963), modifikáciou beta propiolaktonom (Stephan W.: Z. kliň.
Chem. 7, 282, 1969; Stephan W.; Vox Sang. 28, 422, 1975), redukciou s dithioerythritolom(Isenman D. E., Dorrington K. J., Painter R. H.: J. Immun. 114, 1 726, 1975), sulfonáciou(Masuho Y., Tomibe K., Matsuzawa K., Ohtsu A.: Vox Sang. 32, 175, 1977), amidáciou (Schmidt-berger R. : US Patent No 4 118 379 - 1978), redukciou s dithiothreitolom a alkyláciou s jodacet-amidom (Fernandes P. Μ., Lundblad J. L.: Vox. Sang. 39, 101, 1980) s redukciou s dithiothreito-lom v kombinácii s dithiorythritolom s následnou alkyláciou pomocou jodacptamidu alebometyljodidu, akrylonitrilu, benzylbromidu připadne etylénoxydu (Schroeder D. D., TankersleyD. L., Lundblad J. L. : Vox Sang. 40, 373, 1981). CS 266 252 Bl * 3
Antikomplementárna aktivita zmesného imunoglobulinového preparátu súvisí jednak sovznikom polymerov IgG + IgA + IgM, ktoré móžu vznikat v procese technologickéj izoláciea jednak vzniká v procese lyofilizácie pravděpodobně v dósledku interakcie niektorých nízko-molekulárných látok s molekulami imunoglobulinov. Použitie vodného roztoku chloridu sodnéhov destilovanej apyrogennej vodě v koncentrácii do 30 gramov na liter zaručuje polyméromI inum η j 11») m I | m tv v i ««: I < ik ti j .< 11 ι Η,11ι'ι ii t .-«) > i I l I υ π > t< >< Ίι/ηΙζη I ιίι ku Hr,>n i ói · t 1 li I z koltu · I oku I Λ t nyc blátok, ktoré potom už nespósobujú vznik antikomplementárnej aktivity v procese lyofilizácie.
Antikomplementárna aktivita bola testovaná na základe úbytku aktivity komplementu.
Obytok známej hodnoty aktivity komplementu po přidaní známého množstva roztoku lyofilizova-ného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG + IgA + IgM bol stanovený metodoupodlá Kabata a Mayera (Rabat E. A., Mayer Μ. M.i Experimentální imunochemie ČSAV, Praha1965 str. 180). Pokiaí niesú v zmesnom roztoku imunoglobulinov vyššie polymery bolo stanove-né zníženie antikomplementárnej aktivity u 10 experimentálnych šarží po lyofilizácii o 80 až95 % v porovnaní s tým istým materiálom u ktorého nebolo realizované oddelenie nízkomolekulár-nych látok. Pokial sa polymery vyskytovali bolo stanovené zníženie antikomplementárnejaktivity iba o 35 až 45 % v porovnaní s tým istým materiálom u ktorého nebolo realizovanéoddelenie nízkomolekulárných látok.
Hypotenzívny účinok bol testovaný na základe poklesu krvného tlaku králíka priamoukrvnou metodou podlá ČSL 3 (ČSL 3, svazok I, vydanie III, Avicenum Praha str. 149) s tým,že králíkovi o hmotnosti 2 až 3 kg sa aplíkujú 2 ml zmesného imunoglobulinového preparátuna báze IgG + IgA + IgM na kg hmotnosti. Obsah bielkovín v aplikovanom zmesnom imunoglobuli-novom preparáte je 15 gramov na 1 000 ml roztoku. U preparátov připravených podía navrhova-ného postupu sa hypotenzívna aktivita nevyskytovala v tak výraznej intenzitě, čo je možnédokumentovat údajom, že z 10 připravených experimentálných šarží podlá předloženého vynálezubol stanovený pokles systolického krvného tlaku maximálně o 4 až 8 % v porovnaní s týmistým materiálom v tej istej dávke bez separácie nízkomolekulárných zlúčenín, kde bol stano-vený pokles systolického tlaku od 20 do 30 %.
Podstatou vynálezu je odstranenie balastných neimunoglobulinových příměsí, ktoré majúvzhladom ku IgG, IgA a IgM nižšiu molekulárnú hmotnost. Za hraničně hodnoty je možno považovatúdaje okolo 50 000 molekulárnej hmotnosti.
Odstranenie balastných neimunoglobulinových příměsí je možné previest: A. Gelovou filtráciou B. Dialyzou C. Ultrafiltráciou D. Diafiltráciou A. V súčasnosti existuje celá rada komerčných materiálov pre gelovú filtráciu na bázedextranovaných gelov, pod označením Sephadex, polyakrylamidových gelov, pod označe-ním Biogel, hydroxyalkylmetakrylátových gélov, pod označením Spheron, polystyréno-vých gélov, pod označením Styragel, polyvinilacetátových gélov, pod označením Marcko-gel, porézných silikátov, pod označením Porasil, a porezných skiel pod označenímBioglas, ktoré majú odstupňované velkosti pórov v gelových časticiach a umožňujúgelovú filtráciu v poměrně širokých rozmedziach molekulárných hmotností. B. Dialyza sa v poslednom desatročí znovu začína uplatňovat najmá pri výrobě liečivako technologická metoda separacíe tých zmesí prírodných alebo syntetických látok,ktorých molekuly majú podstatné rozdielnú hmotnost. V súčasnosti existuje celá rada komerčných membrán pre dialyzu či už v podobě rovinnej membrány alebo v podobě potrubia o menlivom priemere a menlivej velkosti pórov na báze regenerovanej celulózy alebo jej derivátov, připadne na báze kolodia a taktiež na báze vinilových polymerov. 4 CS 266 252 B1 C. Separácia nízkomolekulárnych zlúčenín do raolekulovej hmotnosti 50 000 sa móže uskutočniť aj pomocou ultrafiltrácie, ktorú možno realizovat v podobě dutých nití pričomimunoglobulinový roztok preteká pod tlakom do 800 kP vo vnútri niťovej membrány a cez póry v stene niťovej membrány prestupujú nízkomolcku1árne látky vo vodnomroztoku do zbernej nádoby. U1 tra f i L Lráe ί,υ je možno realizovat aj v podobě kazetového systému kde v rovinnom usporiadaní je alebo vyměnitelná membrána aiebo doska z umelej hmoty s definovanými veíkosťamiporov. Roztok zmesných imunoglobulinov pod tlakom do 800 kP preteká například nad membránoua cez póry v stene rovinnej membrány alebo došky z umelej hmoty prestupujú relativné nízko-molekuláme látky vo vodnom roztoku do zbernej nádoby. D. Odstraňovanie relativné nízkomolekulárnych zlúčenín do molekulárnej hmotnosti 50 000je možno uskutočniť aj pomocou diafiltrácie čo je kombinácia dialyzy a ultrafiltrácie,Diafiltráciu je možné realizovat jednak v podobě dutých nití pričom gama globulinovýroztok preteká pod tlakom do 200 kP vo vnútri niťovej membrány a cez póry v steneniťovej membrány prestupujú reálne nízkomolekulárne látky do z vonkajšej stranypretekájúceho roztoku, ktorý relativné nízkomolekulárne látky odplavuje od niťovejmembrány do odpadu.
Diafiltráciu je možno realizovať aj v podobě kazetového systému kde v rovinnom usporia-daní je alebo vyměnitelná membrána připadne doska z umelej hmoty s definovanou velkosťoupórov. Roztok imunoglobulinov IgG + IgA + IgM pod mierným tlakom do 200 kP preteká napříkladnad membránou a cez póry v stene rovinnej membrány alebo poreznej došky prestupujú reálnevelmi pomalým prietpkom relativné nízkomolekulárne látky do pod membránou pretekájúcehoroztoku, ktorý odplavuje relativné nízkomolekulárne látky do odpadu.
Bielkovinný materiál obsahujúci purifikovaný IgG + IgA + IgM sa suspenduje za aseptic-kých podmienok v takom množstve apyrogennej destilovanej vody o teplote 0 °C až +6 °C,aby hodnota koncentrácie bielkovín sa nachádzala v rozmedzí 10 až 150 gramov na liter,s optimom 20 až "40 gramov na liter, roztok zmesných imunoglobulinov sa vycíri napříkladfiltráciou a separácia nízkomolekulárnych zlúčenín sa prevádza v prostředí vodného roztokuchloridu sodného v koncentrácii do 30 g na liter pomocou elúcie alebo nariedovania. Optimál-na koncentrácia chloridu sodného v destilovanej apyrogennej vodě je 3,0 až 9,0 gramov naliter, o teplote 0 °C až +6 °C s hodnotou pH v rozmedzí 4,0 až 8,0. Roztok imunoglobulinovzbavený nízkomolekulárnych zlúčenín sa sterilizuje například filtráciou, radiačnou sterilizá-ciou alebo inými metodami, podlá potřeby sa zakoncentrováva ultrafiltráciou, vymrazovaním,vakuovou destiláciou alebo inými metodami, rozplňuje sa, lyofilizuje a v případe potřebysa podrobí dalšiemu spracovanju na konečný produkt.
Vynález je dalej objasněný na príkladoch prevedenia, ktorými jeho obsah nieje aniobmedzený ani vyčerpaný. Příklady prevedenia Příklad 1 Východziou surovinou može byť bielkovinná pasta zmesného imunoglobulinového preparátuna báze IgG + IgA + IgM získaná například metodou podlá Pejaudiera a spol. (Pejaudier L.,Audran R., Steinbuch M.: Vox Sang. 23, 165, 1972). Bielkovinný materiál vyprecipitovanýchzmesných imunoglobulinov sa rozpusta v takom množstve destilovanej apyrogennej vody o teplote0 °C až +6 °C, aby hodnota koncentrácie bilekovín sa nachádzala v rozmedzí 10 až 150 gramovna liter, s optimom 20 až 40 gramov na liter. Rozpúštanie sa urýchluje miešaním. Po roz-puštění sa roztok imunoglobulinov na báze IgG + IgA + IgM vyčíri například filtráciou. V technologických podmienkách sú vyššie uvedené podmienky zpravidla zachované vtedy, ked rozpúšťame 1 kg bielkovinnej pasty zmesných imunoglobulinov v 2 000 ml apyrogennej CS 266 252 B1 5 destilovanej vody o teplote 0 °C až +6 °C. Hodnota pH takto vzniknutého roztoku imuno-globulinov bývá v rozmedzí 4,0 až 8,0, s optimom 7,0, a koncentrácia bielkovín bývá v roz-medzí 20 až 40 qramov na liter. Takto připravený roztok sa vyčíri například Eiltrácioua nízkomolckulárne zlúčeniny sa z roztoku imuncglobulinov na báze IgG + IgA + IgM od-s t r a n i a : Λ. Gelovou filtráciou B. DiaJ.yzou C. Ultrafiltráciou D. Diafiltráciou A. Odstranenie nízkomolekulárnych zlúčenín sa prevádza elučnou gelovou chromatografious destilovanou vodou v ktorej bol rozpuštěný chlorid sodný do koncentrácie 30 gramovna liter pri teplote 0 °C až 46 °C pri pH 4,0 až 8,0 s vylučovacou medzou geluvyjádřenou molekulárnou hmotnostou do 50 000 pričom je potřebné uvedené materiálypoužívat v optimálnom zrnění zaručujucom prietok v technologických podmienkách.Optimálna koncentrácia chloridu sodného je 3,0 až 9,0 gramov na liter a optimálně” pH je 7,0
Do kolony naplnenej s napučaným gelovým materiálom necháváme nasavat zmesný roztok imunoglobulinov IgG + IgA + IgM takou rýchlosťou, aby prietok spodnou plochou kolony sa2 pohyboval medzi 0,01 rul až 3,0 ml za minutu na plochu 1 cm . Množstvo imunoglobulinovéhoroztoku nasadeného na kolonu nemá překročit 25 až 30 % objemu gelovej časti kolony. Očinnostdelenia je možné sledovat podlá stupňa oddelenia etylalkoholu, chloroformu a ninhydrinpozitívnych látok z imunoglobulinového roztoku. Pokial by nedošlo ku dokonalému oddeleniuje potřebné zmenšit obsah vkladeného zmesného imunoglobulinového roztoku na kolonu a spomaliťprietok. Po separácii nízkomolekulárnych zlúčenín z imunoglobulinového zmesného roztokusa tento óalej spracováva. B. Sterilný roztok zmesných imunoglobulinov sa opatrné přesaje do sterilného dialyzačnéhopotrubia, ktoré sa před zahájením presavania v spodnej časti uzatvorí uzlom a popřesátí sa vrchná část uzatvorí uzlom so slučkou za ktorú sa naplněné potrubiezavěsí na háčik, ktorý je tak umiestnený, aby roztok zmesných imunoglobulinov v dialyzačnoni potrubí bol v styku s pretekajúcim vodným roztokom chloridu sodnéhov destilovanej apyrogennej o koncentrácii do 30 gramov na liter, s optimom 3,0 až9,0 gramov na liter, pri teplote 0 °C až +6 °C, pri pH 4,0 až 8,0, s optimom pH7,0, pričom velkost porov v dialyzačnej membráně by mala byt tak velká, aby umožnilaseparáciu relativné nízkomolekulárnych zlúčenín vyjadrenú molekulárnou hmotnosioudo 50 000.
Koniec dialýzy je indikovaný negativnou reakciou na etanol, chloroform a na ninhydrinpozitivně látky v pretekajúcej dialyzačnej tekutině ako aj negativnou reakciou na etanola chloroform v zmesnom imunoglobulinovom roztoku. Po skončení dialýzy sa dialyzačné potrubieso zmesným .imunoglobulinovým roztokom zvesí z háčika, opatrné sa vyberie a po rozstrihnutísa roztok IgG + IgA + IgM preleje do zbernej nádoby a dalej sa spracováva. C. Odstraňovanie relativné nízkomolekulárnych zlúčenín do molekulárnej hmotnosti 50 000 je možné uskutočnit pomocou ultrafiltrácie pričom relativné nízkomolekulárnelátky v podobě roztoku po přestupe membránou odtekajú do zbernej nádoby.
Ultrafiltráciu je možné realizovat jednak v podobě dutých nití alebo v podobě kazetové-ho systému kde sa používájú došky alebo membrány s definovanými velkostami porov.
Vzhladom na to, že roztok imunoglobulinov sa pri ultrafiltrácii zakoncentrováva, prevedie me opatovné nariedenie s vodným roztokom chloridu sodného v koncentrácii do 30 gramov na liter, s optimom 3,0 až 9,0 gramov na liter, pri teplote 0 °C až +6 °C, pri pH 4,0 až 8,0, 6 CS 266 252 Bl s optimom pH 7,0 a toto zakoncentrovavaniena povodný objem prevádzame dovtedy pokialtomnosť chloroformu a etanolu pozitivna. například na polovičný objem a nariedovanieje reakcia imunoglobulinového roztoku na prí
Sterilizácia u1trafi 1tračného zariadenia sa prevádza alebo parou alebo chnmickou rrstouíkl.id | u <*p I ·'·< ‘hnu I l tu <»j»<iiaJmy vodným /oztokom I oř πι.ι I řnu o končen L i ác I í do ',{) gramov na liter a následným vymytím formalínu sterilnou destilovanou vodou. D. Odstraňovanie relativné nízkomolekulárnych zlúčenín do molekulárnej hmotnosti 50 000je možné uskutočniť pomocou diafiltrácie pričom relativné nízkomolekulárne látkypřestupujú do roztoku chloridu sodného v destilovanéj apyrogennej vodě, o koncentráciido 30 gramov na liter, s optimom 3,0 až 9,0 g na liter, pri teplote 0 °C až +6 °C,pri píí 4,0 až 8,0 s optimom pri pH 1,0, ktorý relativné nízkomolekulárne látkyodplavuje do odpadu.
Diafiltráciu je možné realizovat jednak v podobě dutých nití alebo v podobě kazetovéhosystému kde sa používajú došky z umelej hmoty alebo membrány s definovanými velkosťamiporov.
Vzhladom na to, že zmesný imunoglobulinový roztok sa pri diafiltrácii zakoncentrovávaprevedieme opatovné nariedenie s vodným roztokom chloridu sodného, ktorý používáme pridiafiltrácii a toto zakoncentrovávanie například na polovičný objem a nariedovanie na povodnýobjem prevádzame dovtedy pokial je reakcia zmesného imunoglobulinového preparátu na bázeIgG + IgA + IgM na přítomnost chloroformu a etanolu pozitivna. Zmesný imunoglobulinovýroztok sa preleje do zbernej nádoby a dalej sa spracováva.
Sterilizácia diafiltračného zariadenia sa prevádza alebo parou alebo chemickou cestounapříklad prepláchnutím aparatúry vodným roztokom formalínu o koncentrácii do 50 gramovna liter s následným vymytím formalínu sterilnou destilovanou vodou. Dókaz chloroformu sa prevádza Fujiwarovou reakciou (Fujiwara: Sitzber. Naturw. Ges.
Rostock 6, 33, 1916) či už v póvodnom usporiadaní alebo v novších aplikáciach podlá Setaa Schultzeho (.Seto T. A., Schultze M. O.: Anal. Chem. 28, 1 625, 1956), Hildebrechta(ílildebrecht C. D. : Anal. Chem. 29, 1 037, 1957), Friedmana a Coopera /Friedman P. J.,
Cooper J. R. : Anal. Chem. 30, 1 674, 1958).
Ninhydrin pozitivně látky stanovujeme spósobom podlá Ruhemanna (Ruhemann S.: J. Chem.
Soc. 97, 1 438, 1910). Stanovenie etanolu sa prevádza Agulhonovou reakciou (Agulhon H.:
Bull. soc. chim. France (4), 9, 881, 1911) či už v póvodnom usporiadaní alebo v novějšíchaplikáciách podlá Kelletta (Kellett E. G.: Analyst 62, 728, 1937) alebo Webba (Webb D. A.: Sci. Proč. Roy Dublin. Soc. 21, 281, 1936).
Zmesný imunoglobulinový roztok zbavený nízkomolekulárnych zlúčenín se sterilizujenapříklad filtráciou, radiačnou sterilizáciou alebo inými metodami, podlá potřeby sa zakon-centrováva ultrafiltráciou, vymrazovaním, vakuovou destiláciou alebo inými metodami, roz-plňuje sa, lyofilizuje a v případe potřeby sa podrobí dalšiemu spracovaniu. Příklad 2 Východziou surovinou móže byť bielkovinná pasta zmesného imunoglobulinového preparátuna baze IgG + IgA + IgM alebo bielkovinný roztok, ktoré boli izolované aj pomocou iných ’metod. Bielkovinná pasta alebo bielkovinný roztok sa spracováva v dalšom postupe podobnéako v příklade č. 1 s tým rozdielom, že kritérium odstranenia nízkomolekulárnych zlúčenínzo zmesného imunoglobulinového roztoku nesúvisí s prítomnosťou liehu alebo chloroformu,ale s prítomnosťou precipitačnej látky, ktorá bola na precipitáciu alebo imobilizácíoupoužitá.

Claims (4)

  1. CS 266 252 B1 7 PREDMET VYNÁLEZU
    1. Spósob přípravy krvného zmesncho imunoglobulinového preparátu na báze XgG + IgA + i í«|M ρι«· i.ni. podánu· vyznarii jiíci sa f ým, materiál obsahu jílci purifikovnné IgG » jgA + + IgM sa suspenduje za aseptických podmienok v takom množsi "<· apyrogennej vody o teploten * <' -i · <. , .il .y Ιιμ.Ιιι-.ι,ι Ι-ιιιιπήΙ i .·!<· Ir )»}<') kov í n ί;> ιι;κΊι.ι 1 . I a v rozmodz í 10 až 150 gramov nu I j lei , zimmny i iiiuikx) I ubil! i novy to/Lok sa vyeíii na j»t 1 k l. i I IIltráciou a oddeJia ua nízko-molekulárně z 1úreniny, vyjádřené molekulovou hmotnostou do .0 000, potom sa roztok na bázeIgG + IgA i IgM zbavený nízkomolekulárných zlúčenín sterilizuje například filtráciou, radiač-nou sterilizáciou alebo inými metodami, podía potřeby sa zakoncentrováva ultrafiltráciou,vymrazovaním, vakuovou destiláciou alebo inými metodami, rozplňuje sa, lyofilizuje a v přípa-de potřeby sa podrobí dalšiemu spracovaniu na konečný produkt.
  2. 2. Sposoh podía bodu 1 vyznačujúci sa tým, že oddelenie nízkomolekulárnych látok saprevádza elúciou alebo nariedením s roztokom chloridu sodného v destilovanej apyrogennejvodě o koncentrácii do 30 gramov na liter pri teplote 0 °C až +6 °C pri pH 4,0 až 8,0.
  3. 3. Spósob podlá bodu 1 vyznačujúci sa tým, že oddelovanie nízkomolekulárných zlúčenín,vyjádřené molekulárnou hmotnostou do 50 000, sa prevedie například pomocou gelovej filtrácie,dialyzy, ultrafiltrácie a diafiltrácie.
  4. 4. Spósob podía bodu 1 vyznačujúci sa tým, že ako materiál, z ktorého sa frakcia zmesné-ho imunoglobulinového preparátu na báze IgG + IgA + IgM izoluje sa použije normálna alebohyperimunná plazma připadne normálně, retroplacentárne alebo hyperimunné sérum s definova.-nou antibakteriálnou, antitoxickou alebo antivirovou protilátkovou aktivitou. 4
CS847200A 1984-09-25 1984-09-25 Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie CS266252B1 (cs)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS847200A CS266252B1 (cs) 1984-09-25 1984-09-25 Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CS847200A CS266252B1 (cs) 1984-09-25 1984-09-25 Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS720084A1 CS720084A1 (en) 1987-08-13
CS266252B1 true CS266252B1 (cs) 1989-12-13

Family

ID=5420708

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS847200A CS266252B1 (cs) 1984-09-25 1984-09-25 Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie

Country Status (1)

Country Link
CS (1) CS266252B1 (cs)

Also Published As

Publication number Publication date
CS720084A1 (en) 1987-08-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Troccoli et al. Removal of viruses from human intravenous immune globulin by 35 nm nanofiltration
US5164487A (en) Manufacturing intravenous tolerable immunoglobulin-g preparation
DE3689734T2 (de) Gereinigter immunoglobulinbezüglicher Faktor, monoklonale Antikörper, Hybridoma-Zellinien, Verfahren und Verwendungen.
US4216205A (en) Process of preparing a serum protein composition for intravenous application
US3903262A (en) Pharmaceutical compositions comprising intravenously injectable modified serum globulin, its production and use
US5221483A (en) Process and apparatus for removal of DNA, viruses and endotoxins
CN106414476B (zh) 用于纯化免疫球蛋白的方法
JP2002517516A (ja) 静脈投与用免疫グロブリン及び他の免疫グロブリン生成物の製造法
CN107080842A (zh) 抗体制剂
JPH0694421B2 (ja) 静注可能な免疫グロブリン
RU2008916C1 (ru) Способ пастеризации водного раствора иммуноглобулина
SK287633B6 (sk) Spôsob výroby humánneho gamaglobulínu G a humánny gamaglobulín G s inaktivovanými vírusmi
KR20170030033A (ko) 항-a 및/또는 항-b 항체 제거용 신규 친화성 크로마토그래피 매질
US4434093A (en) Methods for preparation of HBs Ag free gamma globulins
US3790552A (en) Method of removing hepatitis-associated antigen from a protein fraction using polyethylene glycol
JPH08242849A (ja) 限外濾過によるタンパク質溶液からのウイルスの除去
EP0186360B1 (en) Methods for preparation of highly purified, gamma globulins free of hepatitis-b-virus infectivity
EP1356829A2 (en) Preparation of virally inactivated intravenously injectable immune serum globulin
Fernandes et al. Preparation of a stable intravenous gamma‐globulin: process design and scale‐up
US5659017A (en) Anion exchange process for the purification of Factor VIII
CS266252B1 (cs) Spdsob přípravy lovného zmesného imunoglobulinového preparátu na báze IgG +lgA+IgM pre i.m. podanie
Bloom et al. Factor VIII (antihaemophilic factor) in tissues detected by antibody neutralization
CS244306B1 (en) Blood gamma globulin preparation method with reduced hypotensive and anti complementary effect
US4541953A (en) Preparation of anti-T-lymphocyte globulin
CS247303B1 (cs) Sposob přípravy krvnébn zmesného imunoglobulínového preparátu