CS260544B1 - Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze - Google Patents
Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze Download PDFInfo
- Publication number
- CS260544B1 CS260544B1 CS8610034A CS1003486A CS260544B1 CS 260544 B1 CS260544 B1 CS 260544B1 CS 8610034 A CS8610034 A CS 8610034A CS 1003486 A CS1003486 A CS 1003486A CS 260544 B1 CS260544 B1 CS 260544B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oil
- phosphatides
- ethanol
- emulsion
- yolks
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 239000000468 intravenous fat emulsion Substances 0.000 title claims abstract description 16
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 51
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 42
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 claims abstract description 32
- 210000002969 egg yolk Anatomy 0.000 claims abstract description 29
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims abstract description 24
- 235000013345 egg yolk Nutrition 0.000 claims abstract description 18
- 239000012071 phase Substances 0.000 claims abstract description 16
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 claims abstract description 14
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 13
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 claims abstract description 11
- 229910001415 sodium ion Inorganic materials 0.000 claims abstract description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 239000003921 oil Substances 0.000 claims description 25
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 claims description 24
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 claims description 11
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 7
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 claims description 6
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 claims description 6
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 claims description 5
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 claims description 5
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 5
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 claims description 3
- 244000020551 Helianthus annuus Species 0.000 claims description 3
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 claims description 3
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000469 ethanolic extract Substances 0.000 claims description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 claims description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 claims description 3
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 claims description 3
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 claims description 3
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 claims description 3
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical group OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 claims description 2
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 2
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 claims description 2
- 235000019485 Safflower oil Nutrition 0.000 claims 1
- 235000019486 Sunflower oil Nutrition 0.000 claims 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims 1
- 239000003813 safflower oil Substances 0.000 claims 1
- 235000005713 safflower oil Nutrition 0.000 claims 1
- 239000002600 sunflower oil Substances 0.000 claims 1
- 235000016236 parenteral nutrition Nutrition 0.000 abstract description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 abstract description 2
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001802 infusion Methods 0.000 abstract 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 21
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 235000021588 free fatty acids Nutrition 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 4
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 4
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 4
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 3
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 3
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 3
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- 235000003255 Carthamus tinctorius Nutrition 0.000 description 2
- 244000020518 Carthamus tinctorius Species 0.000 description 2
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 2
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 230000005484 gravity Effects 0.000 description 2
- -1 medium chain fatty acid triglycerides Chemical class 0.000 description 2
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 1-acetyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CC(=O)OC[C@@H](O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C RYCNUMLMNKHWPZ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 101100387923 Caenorhabditis elegans dos-1 gene Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940035674 anesthetics Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 229940039231 contrast media Drugs 0.000 description 1
- 239000002872 contrast media Substances 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000012343 cottonseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000002385 cottonseed oil Substances 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N diazepam Chemical compound N=1CC(=O)N(C)C2=CC=C(Cl)C=C2C=1C1=CC=CC=C1 AAOVKJBEBIDNHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006185 dispersion Substances 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 229910052571 earthenware Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 229940028435 intralipid Drugs 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000005374 membrane filtration Methods 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 239000012454 non-polar solvent Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- OVYTZAASVAZITK-UHFFFAOYSA-M sodium;ethanol;hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+].CCO OVYTZAASVAZITK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004045 soybean oil emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Řešení se týká způsobu přípravy nitrožilní
tukové emulze, sloužící jako
součást parenterální výživy. Rostlinný
olej, který je hlavní složkou těchto emulzi,
se převádí do formy stabilní emulze
typu olej/voda pomocí fosfatidového emulgátoru,
připraveného z vaječných žloutků.
Extrakce fosfatidů ze žloutků se provádí
bezvodým ethanolem zalkallzovaným přidáním
3 až 6 g hydroxidu sodného na 1 kg extrahovaných
sušených žloutků, a dále se tyto
fosfatidy převedou do formy koncentrátu,
obsahujícího po zahuštění ještě 15 až
25 % hmot. ethanolu a 0,5 až 0,7 % hmot.
sodných iontů. Tento koncentrát je při
teplotě nad 35 °C mísitelný s rostlinným
olejem, čímž vznikne filtrovatelná olejová
fáze, jež po vmíchání do sterilní
a rovněž zfiltrované vodné fáze obsahující
isotonizační přísadu poskytne základní
emulzi (premix), jež se stabilizuje opakovaným
průchodem tlakovým homogenizátorem
a po rozplnění do infúzních lahví
sterilizuje v autoklávu.
Description
Vynález se týká přípravy nitrožilních tukových emulzí určených jako součást nitrožilní výživy pacientů.
Nitrožilní (intravenózní, parenterální) výživa, k niž je nutno přikročit při těžkých poúrazových, pooperačních a jiných stavech, kdy pacient nemůže přijímat potravu ústy, musí zajišťovat vyrovnaný přísun živin a energie. Základními složkami parenterální výživy jsou obvykle roztoky glycidú a aminokyselin. Podávání tuků do žíly je - vzhledem k jejich nerozpustnosti ve vodě - možné pouze v emulgovaném stavu, kdy částečky oleje napodobuji přirozená chylomikra.
Jako součást parenterální výživy jsou tukové emulze bohatým zdrojem energie (500 ml 20% emulze sójového oleje odpovídá asi 4,7. MJ) , ale dodávají i esenciální mastné kyseliny.
Jsou osmoticky neutrální a mohou být - na rozdíl od hyperosmotických roztoků glycidů - aplikovány i do periferních žil. Jejich příprava je ovšem velmi náročná a předpokládá použití speciálně čištěných winterizovaných rostlinných olejů, vysokotlaké homogenizace a účinných emulgátorů, schopných stabilizovat disperzní stav emulze po dobu dvou i více let. Syntetické emulgátory se neosvědčily a dnes se používají výhradně frakcionované sójové nebo vaječné fosfatidy.
Kromě problému fyzikální stability emulze vyvstává u těchto přípravků i problém stability chemické. Během přípravy, sterilizace, a zejména při skladování za vyšší teploty dochází k odštěpováni mastných kyselin jak z triglyceridů rostlinného oleje, tak z fosfatidů; vzestup obsahu volných mastných kyselin” (free fatty acids, FFA) vede pak nejen ke vzrůstu titrovatelné acidity a k poklesu hodnoty pH, ale i k vzrůstu toxicity emulzí (T. Boberg, I. Hakansson, J. Pharm. Pharmacol. 16, 641, 1964; I. Hákannson, Acta Chem. Scand. 20, 17, 1966). Zpracování výchozích surovin i způsob přípravy nitrožilní tukové emulze musí tedy zaručit odstranění co největšího podílu volných mastných kyselin a předcházet jejich dalšímu tvoření, nebo je alespoň co nejvíce zpomalovat.
Farmakologické a klinické písemnictví o nitrožilních tukových emulzích je dnes sice velmi rozsáhlé, podrobností o jejich výrobní technologii bylo však zveřejněno málo.
Průkopnická práce z Harvardské univerzity (R. P. Geyer a sp., J. Am. Oil Chem. Soc.
32, 365 1955) nevedla ještě ke komerčnímu přípravku. Okruh patentů firmy Upjohn (americké patentové spisy 2 870 019, 2 945 869 a 2 977 283) se vztahuje k přípravku Lipomul, který byl v šedesátých létech v USA vyráběn, později však byl z výroby stažen. Zkušeností z výroby této emulze využil P. E. Schurr (Cancer Res. 29, 258, 1969) k přípravě pokusné emulze jako nosiče kancerogenní látky k inokulaci pokusných nádorů laboratorním zvířatům; tuto práci citujeme pro užitečné poznatky, jež obsahuje.
Patenty, vztahující se k dnes nejrozšířenější nitrožilní tukové emulzi Intralipid Kabi-Vitrum (angl. pat. spis 948 407, amer. pat. spisy 3 169 094 a 4 101 673) jsou skoupé na technické podrobnosti. V NSR si firma Braun Melsungen patentovala přípravu tukových emulzí s obsahem aminokyselin (DOS 1 792 294). I novější přehledné články (např. P. A. Wells a sp., Drug. Intell. Clin. Pharm. 15, 908, 1981; P. K. Hansrani a sp., J. Parent. Sci. Technol.
37, 145, 1983) ukazují, jak málo je známo o podrobnostech postupů, jimiž se nitrožilní tukové emulze průmyslově vyrábějí.
Při přípravě emulze je obecně možno postupovat bud tak, že se olejová fáze vmíchává do vodné, nebo naopak vodná do olejové; emulgátor může být v obou případech přítomen bud v olejové nebo ve vodné fázi. Nitrožilní tukové emulze jsou vesměs typu o/v, přidávání olejové fáze do vodné se tedy leví. vhodnější. V citovaných pramenech převažuje postup, při němž' jsou fosfatidy nejdříve dispergovány ve vodné fázi, do níž se pak vmíchává olej. Fosfatidy jsou totiž za normálních podmínek v oleji prakticky nerozpustné; ««rozpouštějí se v pravém smyslu ani ve vodě, ale tvoří v ní koloidní sól, v němž jsou přítomny ve formě micel. Tento sól vyžaduje homogenizaci a nedá se filtrovat membránovými filtry. Podle patentů firmy Upjohn se sójové fosfatidy dají upravovat do halvníkového oleje z ethanolického rovoku za současného oddestilovávání ethanolu. Existuje totiž jen omezená oblast poměru složek systému olej-fosfatidy-ethanol, za kterých může za dané teploty vzniknout jediná fáze. P. E. Schurr v citované práci obchází nutnost, destilace použitím fosfatidového koncentrátu, obsahujícího 65 až 75 % hmot fosfatidů v 95 % hmot. ethanolu; jedná se přitom o bavlníkový olej a sójové fosfatidy.
Během homogenizace a sterilizace emulzí z rostlinného oleje s obsahem fosfatidů dojde zpravidla k poklesu hodnoty pH p.,-d 6 a tento pokles pokračuje během skladování emulze. Upravovat hodnotu pH již vytvořené tsnlze p“ 'sadou zásady nebo pufru není však žádoucí, protože změnou náboje na částicích může dojít ke snížení stability disperzního stavu.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob přípravy nitrožilní tukové emulze typu olej/voda na bázi rostlinného oleje, stabilizované fosfatidovým emulgátorem z vaječných žloutků, která vzniká spojením olejové fáze s vodní fází, přefiltrovanou membránovým filtrem a obsahující izotonizační složku, a následnou homogenizací opakovaným průchodem tlakovým homogenizátorem a nakonec sterilizací v autoklávu za vytvoření stabilní emulze s hodnotou pH 7,0 až 8,5 vyznačující se tím, že surový fosfatidový emulgátor se připraví extrakcí vaječných žloutků bezvodým ethanolem za přítomnosti 3 až 6 g hydroxidu sodného na 1 kg sušených žloutků, a tento emulgátor se po přesrážení a zahuštění na koncentrát o obsahu 15 až 25 % hmot. bezvodého ethanolu a 0,5 až 0,7 % hmot. sodíkových iontů rozpustí v rostlinném oleji při teplotě 35 až 65 °C a zfiltruje membránovým filtrem.
Způsob podle vynálezu se s výhodou provádí tak, že se vaječné žloutky před extrakcí ethanolem ještě promývají rozpouštědlem ze skupiny acetonu a methylethylketonu. Surový ethanolický extrakt se po zahuštění ve vakuu 2 až 3krát přesráží rozpouštěním v rozpouštědle ze skupiny n-hexanu, n-heptanu, petroléteru nebo nízkovroucího benzinu a přídavkem rozpouštědla ze skupiny acetonu a methylethylketonu se opět vyloučí. Rostlinným olejem může být olej sójový, slunečnicový, saflorový nebo může být použit polosyntetický triglycerid obsahující mastné kyseliny se středním řetězcem, případně směs takových olejů. Izotonizační složkou ve vodní fázi může být sorbitol, glycerol, mannitol, xylitol, atd.
Před průchodem tlakovým homogenizátorem se vodná a olejová fáze s výhodou nejprve spojí ha hrubou emulzi (premix) k čemuž lze použít vrtulového nebo turbinového míchadla, nebo lze nechat vodní a olejovou fázi, přilévané ve vhodném poměru, procházet štěrbinou mezi statorem a rotorem běžícího koloidního mlýnu, nebo lze fáze směřovat průchodem vhodnými tryskami.
Výhodou způsobu podle vynálezu je zjištění, že použitím, bezvodého ethanolu lze dosáhnout dobré rozpustnosti v rostlinném oleji i u vaječných fosfatidů, a to už za teploty nad 35 °C; fosfatidy obsahující více než 1 % vody se při chladnutí mohou z olejové fáze opět vyloučit. Smyslem způsobu podle vynálezu je také způsob přípravy fosfatidového koncentrátu, který již v sobě obsahuje sodné ionty v potřebném množství tak, aby získaná emulze měla mírně alkalickou reakci. Toho lze dosáhnout již při extrakci fosfatidů ze sušených vaječných žloutků tak, že se použije bezvodého ethanolu, k němuž se přidá vypočítané množství 50% (hmotn. %) vodného roztoku hydroxidu sodného. K extrakci 1 kg žloutkťi se použije 6 až 8 litrů ethanolu s obsahem 3 až 6 g NaOH. Přísada hydroxidu sodného sleduje současně ještě další cíl: vzhledem k nerozpustnosti sodných solí vyšších mastných kyselin v ethanolu přejdou do ethanolického extraktu fosfatidy do značné míry zbaveny volných mastných kyselin, jež v sušených žloutcích bývají přítomny a jež by jinak fosfatidy během jejich dalšího čištění provázely. Postup tohoto čištění je popsán v příkladech provedení.
Velmi účelné je promýt žloutky ještě před započetím ethanolické extrakce acetonem; aceton odstraní triglyceridovou frakci (žloutkový olej), která by ztěžovala extrakci a dostávala by se případně až do konečného produktu, takže by bylo obtížné dosáhnout požadovaného obsahu fosforu.nad 3,6 % hmot. na sušinu fosfatidů.
Analýzy různě připravovaných frakcí fosfatidových koncentrátů překvapivě ukazují, že určitý obsah sodných iontů se nachází i ve vzorcích, kde extrakční ethanol alkalizován nebyl. Fosfatidy nesou tuto příměs s sebou i přes čisticí stupně, v nichž jsou rozpuštěny v nepolár260544 ním rozpouštědle, podobně jako v nich zůstává vázána voda, kterou jednou přijaly (tu lze stanovit metodou K. Fischera).
Čím je obsah vody ve fosfatidech vyšší, tim horší je mísitelnost jejich ethanolického koncentrátu s olejem (je nutno zvyšovat teplotu, aby se fáze spojily) a je také horší jejich skladovatelnost: v koncentrátu dochizí postupně k vzestupu obsahu volných mastných kyselin.
Nastavení obsahu Nah ve fosfatidovém koncentrátu podle tohoto vynálezu je výhodné i v případě, že hydroxid sodný nebyl přidán už ve fázi extrakce sušených žloutků ethanolem; úpravu je možno provést až v ethanolickém roztoku po srážení acetonem před konečným zahuštěním. Nedosáhne se tak sice částečného odstranění volných mastných kyselin již ve fázi extrakce, ale zůstává výhoda toho, že vmícháním olejové fáze, složené z rostlinného oleje a fosfatidového koncentrátu s upraveným obsahem Na vzniká přímo emulze s výhodným pH nad 7, které již není třeba upravovat např. pomocí pufrů.
Získaná emulze má i pro sterilizaci v autoklávu hodnotu pH 7 až 8,5, která po 1 až 2 roky neklesá pod pH 6. Způsob podle vynálezu umožňuje přípravu čirých fází (vodné i olejové), z nichž každá může být před smícháním přefiltrována membránovým filtrem. Do vysokotlakého homogenizátoru přichází tedy emulze zbavena případných mechanických nečistot a je už v této fázi prakticky sterilní.
Přečištěné fosfatidové koncentráty, použitelné jako emulgátory do nitrožilních tukových emulzí, jsou směsí fosfatidylcholinu, fosfatidylethanolaminu, jejich lysoderivátů a dalších vedlejších složek. Je známo, že takovéto směsisvhodným poměrem složek jsou lepšími emulgátory než chromatografický čistý fosfatidylcholin (M. S. Gray, W. S. Singleton, J. Pharm. Sci.
56, 1 428, 1967). Dle našich zkušeností je dobrým měřítkem emulgační schopnosti světelná propustnost 0,1% vodných sólú; vyjádřena (analogicky jako absorbance) v přepočtu na 1% koncentraci, měla by mít hodnotu nejvýše 5 při 350 nm a nejvýše 11 při 850 nm (v 1-cm kyvetě).
Vyšší obsah lysofosfatidových složek než ;0 % je nežádoucí vzhledem k možnosti hemolytického účinku, stejně jako titrační acidita nemá přesahovat 100 mmol/kg sušiny fosfatidů (vyjádřeno jako obsah palmitové' kyseliny při stanovení dle V. P. Dole, J. Clin. Invest. 35, 150, 1956).
Obash lysoderivátů i volných mastných kyselin lze ještě v konečné fázi čisticího postupu snížit protřepáním ethanolického roztoku (před jeho zahuštěním na výsledný koncentrát) s oxidem hlinitým v množství 10 až 100 % hmot., počítáno na sušinu fosfatidů v roztoku. Tato operace odstraňuje však i jisté množství fosfatidylethanolaminu a může tak posunout poměr složek fosfatidového komplexu nevýhodným způsobem tak, že dojde ke zhoršení jeho emulgační schopnosti; projeví se to i na turbidanci vzorku sólu. Pro zpracovávané sušené žloutky je tedy třeba potřebné množství oxidu hlinitého pokusně ověřit.
Fosfatidový koncentrát s obsahem 15 až 25 % hmot. bezvodého ethanolu a s obsahem Na+ iontů, připravený způsobem podle vynálezu, musí být uchováván při nízké teplotě pod -20 °C a v dobře uzavřených nádobách. Ztuhne přitom na voskovitou hmotu, která však po ohřátí na teplotu místnosti nabude opět konz:stence hustého sirupu a dá se z ní dobře odvažovat množství potřebné pro výrobu emulze. Sušinu koncentrátu lze zjišiovat vážkově (po zahuštění vzorku ve vakuu do sucha) nebo pohodlněji refraktometrický. Při zvlhnutí a zahřátí na vyšší teplotu může v koncentrátu dojit ke zvýšení obsahu volných mastných kyselin - v tomto směru je přítomnost vyššího obsahu Na nevýhodná - ale uchovávání při nízkých teplotách je u fosfatidů žádoucí i jako ochrana před vzdušnou oxidací, které fosfatidy obecně snadno podléhají.
Způsob přípravy fosfatidového emulgátoru i nitrožilní tukové emulze z něho získané podle vynálezu byl s úspěchem použit při vývoji čs. nitrožilní tukové emulze (Nutralipid), jejíž klinické zkoušeni přebíhalo v létech 1980 až 1985 a jejíž pokusné výroba byla zahájena v roce 1986. Způsob podle vynálezu není však omezen na recepturu použitou v této emulzi, kde je obsaženo 20 % hmot. sojového oleje, 1,2 % hmot. sušiny vaječných iosfatidů a 5 % hmot. sorbitolu, ale je použitelný i v emulzích s jiným poměrem složek, s jinými druhy olejů (např. slunečnicovým, saflorovým, š polosyntetickými triglyceridy obsahujícími mastné kyseliny se středním řetězcem, nebo se směsí takových olejů). Je použitelný také s jinými isotonizačními složkami ve vodné fázi (glycerolem, mannitolem, xylitolem, atd.) a také v nitrožilních sukových emulzích, v nichž je olejová nebo vodná fáze nosičem nějaké látky s vlatsním farmakodynamickým účinkem (vitaminy rozpustné v oleji, anestetika, kancerostatika, kontrastní látky, ve vodné fázi aminokyseliny, atdí).
Následující příklady provedeni způsob podle vynálezu pouze dokládají, ale neomezují.
Přikladl
a) Příprava fosfatidového koncentrátu z vaječných žloutků
Do 16 1 acetonu sé vsype 8 kg sušených žloutků, po 20minotovém míchání se žloutky, zbavené žloutkového oleje, oddělí na filtru a promyjí ještě 10 1 acetonu. Takto upravené žloutky se suspendují do 48,5 1 bezvodého ethanolu, k němuž bylo předem přidáno 25 g hydroxidu sodného, rozpuštěného ve 40 ml vody. Po 20mlnutovém míchání se žloutky odsají na kameninové nuči s oelulózovou filtrační deskou a ještě jednou se extrahují 10 1 bezvodého ethanolu. Filtrát a promývací ethanol se spojí a zahustí se na vakuové oběžné skleněné odparce pod dusíkem při dostatečném vakuu, aby teplota zahušťovaného roztoku nepřekročila 35 °C. Získá se cca 3 kg surového koncentrátu, ve kterém se zjistí obsah sušiny fosfatidů vážkově nebo změřením refrakce a srovnáním s kalibračním grafem. Na takto zjištěnou sušinu se použije 1,6 váhových dílů n-hexanu; koncentrát se rozpustí až na malý bílkovinný podíl, který se odstraní další filtrací, tentokráte pomocí tlaku.
K čirému filtrátu se za míchání přidá 12 hmotnostních dílů acetonu (opět počítáno na sušinu fosfatidů v zahuštěném ethanolickém extraktu), vysrážená voskovitá hmota fosfatidů se oddělí a vymačkáním zbaví větší části rozpouštědel. Na sušinu fosfatidů ve vysrážené hmotě (zpravidla to bývá 60 % hmot. její hmoty) se přidá znovu 1,6 hmotnostních dílů hexanu (v němž se hmota rozpustí) a 12 hmotnostních dílů acetonu, jimiž se fosfatidy opět vysrážejí.
Získaný, dobře vymačkaný produkt se rozpustí v 8 1 bezvodého ethanolu (získaný roztok obsahuje pak zpravidla 9 až 11 % hmot. sušiny) a do roztoku se vmíchá 200 g práškovitého oxidu hlinitého (neutrální, pro chromatografií, Brockmann II) a po 1 hodině se opět odfiltruje. '
Zahuštěním roztoku ve vakuové odparce pod dusíkem a při teplotě pod 40 °C se získá koncentrát o obsahu 75 až 85 % hmot. sušiny fosfatidů, který se naplní do vhodných skleněných nádob s dobře těsnicími uzávěry tak, aby nádoby byly naplněny až po hrdlo a uloží se v hlubokomrazioí skříni při -20 °C až do doby, kdy se (po provedení potřebných analýz) použije k přípravě nltrožilní tukové emulze.
b) Příprava nltrožilní tukové emulze
Rozpustí se 750 g sorbitolu v 11 025 ml bezpyrogenní vody a tento roztok se sterilizuje membránovou filtrací přes ultrafiltr o velikosti pórů 0,22 ^um. Tento roztok se pak za aseptic kých podmínek předehřeje na 50 °C.,
Fosfatídový koncentrát obsahující 80 % hmot. sušiny fosfatidů (225 g) se rozmíchá do 3 000 g sójového oleje kvality pro nltrožilní tukovou emulzi, předehřátého rovněž na 50 °C. Roztok fosfatidů v oleji se tlakem dusíku přefiltruje rovněž přes membránový filtr, a pod dusíkem se vmíchá za použití vrtulového míchadla do vodné fáze. Získaná hrubá emulze (premix) se odpění krátkým vystavením sníženému tlaku, a potom se nechá projít vysokotlakým pístovým homogenizátorem dvoustupňového typu (tlak 3 až» 5 MPa ve 2. stupni, celkový tlaV. v 1. a 2. stupni 35 až 38 MPa), přičemž se vhodným chlazením teplota emulze při opakt íaných průchodech homogenizátorem (6x až 12x) udržuje na 50 až 60 °C a prostor nad emulzí v jíaiadle se vyplachuje dusíkem.
Ochlazená emulze se plní do ..,,úzních lahví po 400 ml a lahve se sterilizují v parním autoklávu. Získaná emulze obsahuje ve vodě emulgováno 20 % hmot. sojového oleje, 1,2 % hmot. sušiny fosfatidů, a rozpuštěno 5 % sorbitolu.
Příklad 2
Příprava probíhá stejným způsobem jako v přikladu 1 s tím rozdílem, že místo sorbitolu se ve vodná fázi použije přiměřené množství glycerolu tak, aby jej konečná emulze obsahovala 2,5 % hmot. Obsah sójového oleje je 20 % hmot., fosfatidů 1,2 % hmot. Plni se do lahví po 100 ml pro pediatrii.
Přiklad 3
Snížení titrační acidity fosfatidového koncentrátu
V následující tabulce 1 jsou srovnány vlastnosti fosfatidů, extrahovaných stejným postupem jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že je vypuštěna počáteční extrakce žloutků acetonem, a že je používáno 96% ethanolu. Konečné protřepání s oxidem hlinitým je použito jen v případě C; ethanol použitý k extrakci žloutků obsahuje přidaný hydroxid sodný v případech B a C, ne však v případě A
Tabulkal
Vodný 1% sól
Titr. acidita mmol/kg suš.
| A (96% EtOH | 200 | |
| bez NaOH) | ||
| B | (96% EtOH | |
| uprav. NaOH) | 143 | |
| C | (96% EtOH | |
| uprav. NaOH, ai2o3 100% na suš. fosf.) | 61 |
| pH | turbidance | TLC | % Na' |
| 6 | 17/8 | 81:15:4 | 0,5 |
| 9,7 | 9/3 | 75:16:9 | 0,73 |
| 9,1 | 9/4 | 75:15:11 | 0,58 |
Titrační acidita je stanovena dle V. P. Dole (J. Clin. Xnvest. 35, 150, 1956) a vyjadřována v mmol kys. palmitové. Turbidance je uváděna zlomkem, v němž prvá hodnota je nalezena při 350 nm a druhá při 850 nm. V odstavce TLC je poměr skvrn fosfatidylcholinu, fosfatidylethanolaminu a lysofosfatidylcholinu, nalezený pří chromatografií na tenké vrstvě silikagelu v soustavě ohloroform-methanol-ethylacetát-kys. octová-voda 10:10:7:2:2 s následnou elucí skvrn a kolorimetrickým stanovením fosforu. Obsah sodíku je zjištěn metodou atomové absorpce.
Příklad 4
Účinek použití bezvodého ethanolu
V tabulce 2 jsou srovnány analytické hodnoty fosfatidových koncentrátů, připravených v podstatě podle příkladu 1 s tím, že y případě D je použito k extrakci žloutků 96% ethanolu, v případě E je použit ethanol bezvodý. Význam zkratek je stejný jako v předchozím příkladě. Oxid hlinitý v těchto případech použit nebyl.
Tabulka 2
Vodný 1% sól
Ti.tr. acidita
| mmol/kg suš. | pH | turbidance | TLC | % Na+ | |
| D (96% | 142 | 9,95 | 8/2 | 72:15:13 | 1,04 % |
| EtOH) | 136 | 9,67 | 9/2 | 68:17:14 | 1,41 % |
| E (absol. | 87 | 10,3 | 7/2 | 74:17:10 | 1,05 % |
| EtOH) | 88 | 10,1 | 9/3 | 76:16:8 | 0,96 % |
| Příklad 5 | |||||
| Vliv použití bezvodého ethanolu | na hodnotu | pH | |||
| V tabulce 3 jsou | porovnány vlastnosti fosfatidových koncentrátů, připravených podle | ||||
| přikladu 1 (bez předextrakce žloutků | acetonem) s | tím, že k extrakčnimu ethanolu byl přidán | |||
| hydroxid sodný pouze | v případě G, ne | však v případě F. Oxid | hlinitý byl použit | v obou přípa· | |
| dech, v množství 100 % | , hmot. na sušinu fosfatidů | • | |||
| Tabulka 3 | |||||
| Titr. acidita | Vodný | 1% sól | |||
| mmol/kg suš. | pH | turbidance | TLC | % Na+ | |
| F (bez NaOH) | 24 | 7,2 | 12/8 | 80:16:4 | 0,31 % |
| 22 | 7,15 | 12/8 | 86:10:4 | 0,26 % | |
| G (5 g NaOH na | 54 | 10,2 | 9/4 | 76:16:9 | 0,48 % |
| kg žloutků) | 48 | 10,1 | 9/5 | 79:14:7 | 0,45 % |
Nižší titrační acidita v případě F nevyváží nevýhodu vysokého indexu turbidance, který ukazuje na fosfatid se špatnou emulgační schopností. Vlastnosti fosfatidů v případě G jsou pro přípravu nitrožilní tukové emulze dle zkušeností vhodnější.
Claims (5)
1. Způsob přípravy nitrožilní tukové emulze typu olej/voda na bázi rostlinného oleje, stabilizované fosfatidovým emulgátorem z vaječných žloutků, která vzniká spojením olejové fáze s vodní fází, přifiltrovanou membránovým filtrem a obsahující .izotonizační složku, a následnou homogenizací opakovaným průchodem tlakovým homogenizátorem a nakonec sterilizací v autoklávu za vytvoření stabilní emulze s hodnotou pH 7,0 až 8,5 vyznačující se tím, že surový fosfatidový emulgátor se připraví extrakcí vaječných žloutků bezvodým ethanolem za přítomnosti 3 až 6 g hydroxidu sodného na 1 kg sušených žloutků, a tento emulgátor se po přesrážení a zahuštěni na koncentrát o obsahu 15 až 25 % hmot. bezvodého ethanolu a 0,5 až 0,7 % hmot. sodíkových iontů rozpustí v rostlinném oleji při teplotě 35 ° až 65 °C a zfiltruje membránovým filtrem.
2. Způsob přípravy podle bodu 1, vyznačující se tím, že vaječné žloutky se před extrakcí ethanolem promývají rozpouštědlem ze skupiny acetonu a methylethylketonu.
3. Způsob příparvy podle bodu 1 vyznačující se tím, že se surový ethanolový extrakt
2 až 3krát přesráží rozpouštěním v rozpouštědle ze skupiny n-hexanu, n-heptanu, petroléteru nebo nízkovroucího benzinu a 'ídavkero rozpouštědla ze skupiny acetonu a nř* nylethylketonu se opět vyloučí.
4. Způsob přípravy podle bodl! 1 vyznačující se tím, že rostlinným olejem je sójový, slunečnicový nebo saflorový olej nebo polosyntetický triglycerid obsahující mastné kyseliny se středním řetězcem, případně směs takových olejů.
5. Způsob přípravy podle bodu 1 vyznačující se tím, že izotonizační složkou je sorbitol, glycerol, mannitol nebo xylitol.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (cs) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (cs) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS1003486A1 CS1003486A1 (en) | 1988-05-16 |
| CS260544B1 true CS260544B1 (cs) | 1988-12-15 |
Family
ID=5447680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (cs) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS260544B1 (cs) |
-
1986
- 1986-12-28 CS CS8610034A patent/CS260544B1/cs not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS1003486A1 (en) | 1988-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0325244B1 (en) | Aqueous solution of fat-soluble substance | |
| KR890004577B1 (ko) | 지용성물질을 함유한 수용액의 제조방법 | |
| DE60118395T2 (de) | Pharmazeutische zusammensetzungen mit verzögerter freisetzung für die parenterale applikation von hydrophilen wirkstoffen | |
| US6355693B1 (en) | Fractionated vegetable oil | |
| US4252793A (en) | Injectable lecithin preparation | |
| US4465693A (en) | Intravenously administered emulsion from a lecithin base and method of preparation | |
| CZ221596A3 (en) | Oil-in-water emulsion, its use and pharmaceutical composition containing thereof | |
| JPH0510327B2 (cs) | ||
| US4323563A (en) | Fat emulsion for intravenous injection | |
| EP0703918B1 (en) | Process for obtaining highly purified phosphatidylcholine | |
| US4563354A (en) | Oil-in-water emulsion for parenteral administration | |
| JPH09241153A (ja) | 静脈注射用脂肪乳剤 | |
| JPH07238293A (ja) | ドコサヘキサエン酸含有卵黄油の製造方法 | |
| Ambache et al. | Investigation of an active lipid in aqueous extracts of rabbit brain, and of some further hydroxy-acids | |
| KR101713219B1 (ko) | 포스파티딜콜린 및 리소포스파티딜콜린을 포함하는 주사제용 조성물 및 이의 제조방법 | |
| CS260544B1 (cs) | Způsob přípravy nitrožilnítukové emulze | |
| JP3267868B2 (ja) | 卵黄リン脂質組成物 | |
| JP4458893B2 (ja) | 精製卵黄リン脂質組成物の製造方法、及びこれを用いた医薬品組成物、化粧品組成物、又は食品組成物 | |
| JP3723992B2 (ja) | 脂肪含有輸液製剤及びそれが収容された総合栄養輸液 製剤入り容器 | |
| US1978297A (en) | Testicular hormone and method of producing the same | |
| US3197371A (en) | Process for treating hypercholesteralemia | |
| MXPA96003038A (en) | Oil emulsions in a | |
| DE2004408A1 (en) | Cosmetically action material prodn | |
| JPS6354926A (ja) | 界面活性剤組成物 | |
| JPS63166425A (ja) | 耐塩性界面活性剤組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20001228 |