CS260544B1 - Method of intravenous fat emulsion preparation - Google Patents
Method of intravenous fat emulsion preparation Download PDFInfo
- Publication number
- CS260544B1 CS260544B1 CS8610034A CS1003486A CS260544B1 CS 260544 B1 CS260544 B1 CS 260544B1 CS 8610034 A CS8610034 A CS 8610034A CS 1003486 A CS1003486 A CS 1003486A CS 260544 B1 CS260544 B1 CS 260544B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- oil
- phosphatides
- ethanol
- emulsion
- yolks
- Prior art date
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Řešení se týká způsobu přípravy nitrožilní tukové emulze, sloužící jako součást parenterální výživy. Rostlinný olej, který je hlavní složkou těchto emulzi, se převádí do formy stabilní emulze typu olej/voda pomocí fosfatidového emulgátoru, připraveného z vaječných žloutků. Extrakce fosfatidů ze žloutků se provádí bezvodým ethanolem zalkallzovaným přidáním 3 až 6 g hydroxidu sodného na 1 kg extrahovaných sušených žloutků, a dále se tyto fosfatidy převedou do formy koncentrátu, obsahujícího po zahuštění ještě 15 až 25 % hmot. ethanolu a 0,5 až 0,7 % hmot. sodných iontů. Tento koncentrát je při teplotě nad 35 °C mísitelný s rostlinným olejem, čímž vznikne filtrovatelná olejová fáze, jež po vmíchání do sterilní a rovněž zfiltrované vodné fáze obsahující isotonizační přísadu poskytne základní emulzi (premix), jež se stabilizuje opakovaným průchodem tlakovým homogenizátorem a po rozplnění do infúzních lahví sterilizuje v autoklávu.The present invention relates to a process for the preparation of intravenous fat emulsions, serving as part of parenteral nutrition. Vegetal oil, which is the main component of these emulsions, is converted into a stable emulsion oil / water type with a phosphatide emulsifier, prepared from egg yolks. Extraction of phosphatides from yolks is performed with anhydrous ethanol, added by addition 3 to 6 g of sodium hydroxide per kg of extracted dried egg yolks, and then these convert phosphatides into concentrate form, containing 15 to 25 wt. % ethanol and 0.5 to 0.7 wt. sodium ions. This concentrate is at temperature above 35 ° C oil to form a filterable oil phase, which after mixing into sterile as well as the filtered aqueous phase containing the same the isotonizing additive will provide a basic an emulsion (premix) that is stabilized by repeated through a pressure homogenizer and after filling into infusion bottles autoclaved.
Description
Vynález se týká přípravy nitrožilních tukových emulzí určených jako součást nitrožilní výživy pacientů.The present invention relates to the preparation of intravenous fat emulsions intended as part of the intravenous nutrition of patients.
Nitrožilní (intravenózní, parenterální) výživa, k niž je nutno přikročit při těžkých poúrazových, pooperačních a jiných stavech, kdy pacient nemůže přijímat potravu ústy, musí zajišťovat vyrovnaný přísun živin a energie. Základními složkami parenterální výživy jsou obvykle roztoky glycidú a aminokyselin. Podávání tuků do žíly je - vzhledem k jejich nerozpustnosti ve vodě - možné pouze v emulgovaném stavu, kdy částečky oleje napodobuji přirozená chylomikra.Intravenous (intravenous, parenteral) nutrition, which must be undertaken in severe post-traumatic, postoperative and other conditions where the patient cannot take food by mouth, must ensure a balanced supply of nutrients and energy. The basic constituents of parenteral nutrition are usually carbohydrate and amino acid solutions. Due to their insolubility in water, the administration of fats into a vein is only possible in an emulsified state, where the oil particles imitate natural chylomicra.
Jako součást parenterální výživy jsou tukové emulze bohatým zdrojem energie (500 ml 20% emulze sójového oleje odpovídá asi 4,7. MJ) , ale dodávají i esenciální mastné kyseliny.As part of parenteral nutrition, fat emulsions are a rich energy source (500 ml of 20% soybean oil emulsion corresponds to about 4.7 MJ), but they also supply essential fatty acids.
Jsou osmoticky neutrální a mohou být - na rozdíl od hyperosmotických roztoků glycidů - aplikovány i do periferních žil. Jejich příprava je ovšem velmi náročná a předpokládá použití speciálně čištěných winterizovaných rostlinných olejů, vysokotlaké homogenizace a účinných emulgátorů, schopných stabilizovat disperzní stav emulze po dobu dvou i více let. Syntetické emulgátory se neosvědčily a dnes se používají výhradně frakcionované sójové nebo vaječné fosfatidy.They are osmotically neutral and, unlike hyperosmotic carbohydrate solutions, can also be applied to peripheral veins. However, their preparation is very demanding and requires the use of specially purified winterized vegetable oils, high pressure homogenization and effective emulsifiers capable of stabilizing the emulsion dispersion state for two or more years. Synthetic emulsifiers have not worked and today only fractionated soy or egg phosphatides are used.
Kromě problému fyzikální stability emulze vyvstává u těchto přípravků i problém stability chemické. Během přípravy, sterilizace, a zejména při skladování za vyšší teploty dochází k odštěpováni mastných kyselin jak z triglyceridů rostlinného oleje, tak z fosfatidů; vzestup obsahu volných mastných kyselin” (free fatty acids, FFA) vede pak nejen ke vzrůstu titrovatelné acidity a k poklesu hodnoty pH, ale i k vzrůstu toxicity emulzí (T. Boberg, I. Hakansson, J. Pharm. Pharmacol. 16, 641, 1964; I. Hákannson, Acta Chem. Scand. 20, 17, 1966). Zpracování výchozích surovin i způsob přípravy nitrožilní tukové emulze musí tedy zaručit odstranění co největšího podílu volných mastných kyselin a předcházet jejich dalšímu tvoření, nebo je alespoň co nejvíce zpomalovat.In addition to the physical stability problem of the emulsion, there is also a chemical stability problem. During preparation, sterilization, and especially storage at a higher temperature, fatty acids are cleaved from both vegetable oil triglycerides and phosphatides; the increase in free fatty acids (FFA) leads not only to an increase in titratable acidity and a decrease in pH, but also to an increase in emulsion toxicity (T. Boberg, I. Hakansson, J. Pharm. Pharmacol. 16, 641, 1964) I. Hakannson, Acta Chem. Scand. 20, 17, 1966). The processing of the starting materials and the process for preparing the intravenous fat emulsion must therefore ensure the removal of as much free fatty acids as possible and prevent their further formation or at least slow them down as much as possible.
Farmakologické a klinické písemnictví o nitrožilních tukových emulzích je dnes sice velmi rozsáhlé, podrobností o jejich výrobní technologii bylo však zveřejněno málo.Pharmacological and clinical literature on intravenous fat emulsions is very extensive today, but little details have been published about their manufacturing technology.
Průkopnická práce z Harvardské univerzity (R. P. Geyer a sp., J. Am. Oil Chem. Soc.Pioneering work from Harvard University (R. P. Geyer et al., J. Am. Oil Chem. Soc.
32, 365 1955) nevedla ještě ke komerčnímu přípravku. Okruh patentů firmy Upjohn (americké patentové spisy 2 870 019, 2 945 869 a 2 977 283) se vztahuje k přípravku Lipomul, který byl v šedesátých létech v USA vyráběn, později však byl z výroby stažen. Zkušeností z výroby této emulze využil P. E. Schurr (Cancer Res. 29, 258, 1969) k přípravě pokusné emulze jako nosiče kancerogenní látky k inokulaci pokusných nádorů laboratorním zvířatům; tuto práci citujeme pro užitečné poznatky, jež obsahuje.32, 365 (1955) has not yet resulted in a commercial formulation. The Upjohn patent family (U.S. Pat. Nos. 2,870,019, 2,945,869, and 2,977,283) relates to Lipomul, which was manufactured in the United States in the 1960s but was later withdrawn from production. By the experience of making this emulsion, P. E. Schurr (Cancer Res. 29, 258, 1969) used to prepare the experimental emulsion as a carrier of a carcinogenic substance to inoculate experimental tumors in laboratory animals; we cite this work for the useful insights it contains.
Patenty, vztahující se k dnes nejrozšířenější nitrožilní tukové emulzi Intralipid Kabi-Vitrum (angl. pat. spis 948 407, amer. pat. spisy 3 169 094 a 4 101 673) jsou skoupé na technické podrobnosti. V NSR si firma Braun Melsungen patentovala přípravu tukových emulzí s obsahem aminokyselin (DOS 1 792 294). I novější přehledné články (např. P. A. Wells a sp., Drug. Intell. Clin. Pharm. 15, 908, 1981; P. K. Hansrani a sp., J. Parent. Sci. Technol.Patents relating to the most widely used intravenous fat emulsion Intralipid Kabi-Vitrum (U.S. Pat. No. 948,407, U.S. Pat. Nos. 3,169,094 and 4,101,673) are pending for technical details. In the Federal Republic of Germany Braun Melsungen patented the preparation of fat emulsions containing amino acids (DOS 1 792 294). More recent review articles (e.g., P.A. Wells et al., Drug. Intell. Clin. Pharm. 15, 908, 1981; P.K. Hansrani et al., J. Parent. Sci. Technol.
37, 145, 1983) ukazují, jak málo je známo o podrobnostech postupů, jimiž se nitrožilní tukové emulze průmyslově vyrábějí.37, 145, 1983) show how little is known about the details of the processes by which intravenous fat emulsions are manufactured industrially.
Při přípravě emulze je obecně možno postupovat bud tak, že se olejová fáze vmíchává do vodné, nebo naopak vodná do olejové; emulgátor může být v obou případech přítomen bud v olejové nebo ve vodné fázi. Nitrožilní tukové emulze jsou vesměs typu o/v, přidávání olejové fáze do vodné se tedy leví. vhodnější. V citovaných pramenech převažuje postup, při němž' jsou fosfatidy nejdříve dispergovány ve vodné fázi, do níž se pak vmíchává olej. Fosfatidy jsou totiž za normálních podmínek v oleji prakticky nerozpustné; ««rozpouštějí se v pravém smyslu ani ve vodě, ale tvoří v ní koloidní sól, v němž jsou přítomny ve formě micel. Tento sól vyžaduje homogenizaci a nedá se filtrovat membránovými filtry. Podle patentů firmy Upjohn se sójové fosfatidy dají upravovat do halvníkového oleje z ethanolického rovoku za současného oddestilovávání ethanolu. Existuje totiž jen omezená oblast poměru složek systému olej-fosfatidy-ethanol, za kterých může za dané teploty vzniknout jediná fáze. P. E. Schurr v citované práci obchází nutnost, destilace použitím fosfatidového koncentrátu, obsahujícího 65 až 75 % hmot fosfatidů v 95 % hmot. ethanolu; jedná se přitom o bavlníkový olej a sójové fosfatidy.In preparing the emulsion, it is generally possible to mix either the oil phase with the aqueous phase or the aqueous phase with the oil phase; in both cases the emulsifier may be present either in the oil phase or in the aqueous phase. Intravenous fat emulsions are mostly of the O / W type, thus adding an oil phase to the aqueous phase is left. preferable. In the cited strands, the process is predominantly in which the phosphatides are first dispersed in the aqueous phase into which the oil is then mixed. Phosphatides are virtually insoluble in oil under normal conditions; They dissolve in the true sense, even in water, but form a colloid sol in which they are present in the form of micelles. This sol requires homogenization and cannot be filtered by membrane filters. According to the Upjohn patents, soy phosphatides can be treated into halv oil from ethanolic liquor while distilling off ethanol. Indeed, there is only a limited area of the ratio of the components of the oil-phosphatide-ethanol system under which a single phase can be formed at a given temperature. P. E. Schurr, in the cited work, circumvents the necessity of distillation using a phosphatide concentrate containing 65 to 75% by weight of phosphatides in 95% by weight. ethanol; these are cottonseed oil and soy phosphatides.
Během homogenizace a sterilizace emulzí z rostlinného oleje s obsahem fosfatidů dojde zpravidla k poklesu hodnoty pH p.,-d 6 a tento pokles pokračuje během skladování emulze. Upravovat hodnotu pH již vytvořené tsnlze p“ 'sadou zásady nebo pufru není však žádoucí, protože změnou náboje na částicích může dojít ke snížení stability disperzního stavu.During the homogenization and sterilization of the phosphatide-containing vegetable oil emulsions, the pH p d -d 6 generally decreases and this decrease continues during the emulsion storage. However, it is not desirable to adjust the pH already formed by using a base or buffer set, since changing the charge on the particles may reduce the stability of the dispersed state.
Uvedené nevýhody odstraňuje způsob přípravy nitrožilní tukové emulze typu olej/voda na bázi rostlinného oleje, stabilizované fosfatidovým emulgátorem z vaječných žloutků, která vzniká spojením olejové fáze s vodní fází, přefiltrovanou membránovým filtrem a obsahující izotonizační složku, a následnou homogenizací opakovaným průchodem tlakovým homogenizátorem a nakonec sterilizací v autoklávu za vytvoření stabilní emulze s hodnotou pH 7,0 až 8,5 vyznačující se tím, že surový fosfatidový emulgátor se připraví extrakcí vaječných žloutků bezvodým ethanolem za přítomnosti 3 až 6 g hydroxidu sodného na 1 kg sušených žloutků, a tento emulgátor se po přesrážení a zahuštění na koncentrát o obsahu 15 až 25 % hmot. bezvodého ethanolu a 0,5 až 0,7 % hmot. sodíkových iontů rozpustí v rostlinném oleji při teplotě 35 až 65 °C a zfiltruje membránovým filtrem.These drawbacks are overcome by a process for preparing a vegetable oil based oil / water intravenous fat emulsion stabilized by an egg yolk phosphatide emulsifier formed by combining an oil phase with an aqueous phase, filtered by a membrane filter and containing an isotonizing component, followed by homogenization by repeated passage through a pressure homogenizer. sterilizing in an autoclave to form a stable emulsion having a pH of 7.0 to 8.5, characterized in that the crude phosphatide emulsifier is prepared by extracting egg yolks with anhydrous ethanol in the presence of 3 to 6 g of sodium hydroxide per kg of dried yolks, after precipitation and concentration to a concentrate of 15 to 25 wt. % anhydrous ethanol and 0.5 to 0.7 wt. sodium ions dissolved in vegetable oil at 35-65 ° C and filtered through a membrane filter.
Způsob podle vynálezu se s výhodou provádí tak, že se vaječné žloutky před extrakcí ethanolem ještě promývají rozpouštědlem ze skupiny acetonu a methylethylketonu. Surový ethanolický extrakt se po zahuštění ve vakuu 2 až 3krát přesráží rozpouštěním v rozpouštědle ze skupiny n-hexanu, n-heptanu, petroléteru nebo nízkovroucího benzinu a přídavkem rozpouštědla ze skupiny acetonu a methylethylketonu se opět vyloučí. Rostlinným olejem může být olej sójový, slunečnicový, saflorový nebo může být použit polosyntetický triglycerid obsahující mastné kyseliny se středním řetězcem, případně směs takových olejů. Izotonizační složkou ve vodní fázi může být sorbitol, glycerol, mannitol, xylitol, atd.The process according to the invention is preferably carried out by washing the egg yolks with a solvent selected from the group of acetone and methyl ethyl ketone before extraction with ethanol. The crude ethanolic extract is precipitated 2 to 3 times after concentration in vacuo by dissolving in a solvent of the n-hexane, n-heptane, petroleum ether or low-boiling naphtha group and precipitating again by addition of the acetone and methyl ethyl ketone solvent. The vegetable oil may be soybean, sunflower, safflower or a semi-synthetic triglyceride containing medium chain fatty acids or a mixture of such oils. The isotonizing component in the aqueous phase may be sorbitol, glycerol, mannitol, xylitol, etc.
Před průchodem tlakovým homogenizátorem se vodná a olejová fáze s výhodou nejprve spojí ha hrubou emulzi (premix) k čemuž lze použít vrtulového nebo turbinového míchadla, nebo lze nechat vodní a olejovou fázi, přilévané ve vhodném poměru, procházet štěrbinou mezi statorem a rotorem běžícího koloidního mlýnu, nebo lze fáze směřovat průchodem vhodnými tryskami.Prior to passing through the pressure homogenizer, the aqueous and oil phases are preferably first bonded to a coarse emulsion (premix), using a propeller or turbine mixer, or the aqueous and oil phases can be allowed to flow in suitable proportions through a slot between stator and rotor of running colloid mill. or the phases can be directed by passing through suitable nozzles.
Výhodou způsobu podle vynálezu je zjištění, že použitím, bezvodého ethanolu lze dosáhnout dobré rozpustnosti v rostlinném oleji i u vaječných fosfatidů, a to už za teploty nad 35 °C; fosfatidy obsahující více než 1 % vody se při chladnutí mohou z olejové fáze opět vyloučit. Smyslem způsobu podle vynálezu je také způsob přípravy fosfatidového koncentrátu, který již v sobě obsahuje sodné ionty v potřebném množství tak, aby získaná emulze měla mírně alkalickou reakci. Toho lze dosáhnout již při extrakci fosfatidů ze sušených vaječných žloutků tak, že se použije bezvodého ethanolu, k němuž se přidá vypočítané množství 50% (hmotn. %) vodného roztoku hydroxidu sodného. K extrakci 1 kg žloutkťi se použije 6 až 8 litrů ethanolu s obsahem 3 až 6 g NaOH. Přísada hydroxidu sodného sleduje současně ještě další cíl: vzhledem k nerozpustnosti sodných solí vyšších mastných kyselin v ethanolu přejdou do ethanolického extraktu fosfatidy do značné míry zbaveny volných mastných kyselin, jež v sušených žloutcích bývají přítomny a jež by jinak fosfatidy během jejich dalšího čištění provázely. Postup tohoto čištění je popsán v příkladech provedení.An advantage of the process according to the invention is that by using anhydrous ethanol, good solubility in vegetable oil and egg phosphatides can be achieved even at temperatures above 35 ° C; phosphatides containing more than 1% water can be eliminated from the oil phase once cooled. The present invention also provides a process for the preparation of a phosphatide concentrate which already contains sodium ions in the required amount so that the emulsion obtained has a slightly alkaline reaction. This can already be achieved by extracting phosphatides from dried egg yolks by using anhydrous ethanol to which a calculated amount of 50% (w / w) aqueous sodium hydroxide solution is added. 6-8 liters of ethanol containing 3-6 g of NaOH are used to extract 1 kg of yolk. At the same time, the addition of sodium hydroxide pursues another objective: due to the insolubility of the sodium salts of higher fatty acids in ethanol, the phosphatides are largely deprived of the free fatty acids present in the dried yolks which would otherwise accompany the phosphatides during their further purification. The procedure for this purification is described in the Examples.
Velmi účelné je promýt žloutky ještě před započetím ethanolické extrakce acetonem; aceton odstraní triglyceridovou frakci (žloutkový olej), která by ztěžovala extrakci a dostávala by se případně až do konečného produktu, takže by bylo obtížné dosáhnout požadovaného obsahu fosforu.nad 3,6 % hmot. na sušinu fosfatidů.It is highly expedient to wash the egg yolks before commencing ethanolic extraction with acetone; acetone removes the triglyceride fraction (egg yolk), which would make extraction difficult and eventually reach the final product, making it difficult to achieve the desired phosphorus content above 3.6 wt%. to dry matter phosphatides.
Analýzy různě připravovaných frakcí fosfatidových koncentrátů překvapivě ukazují, že určitý obsah sodných iontů se nachází i ve vzorcích, kde extrakční ethanol alkalizován nebyl. Fosfatidy nesou tuto příměs s sebou i přes čisticí stupně, v nichž jsou rozpuštěny v nepolár260544 ním rozpouštědle, podobně jako v nich zůstává vázána voda, kterou jednou přijaly (tu lze stanovit metodou K. Fischera).Surprisingly, analyzes of various fractions of phosphatide concentrates prepared show that some sodium ions are found in samples where the extraction ethanol has not been alkalinized. Phosphatides carry this additive despite the purification steps in which they are dissolved in a nonpolar solvent, just as the water they once received (which can be determined by the K. Fischer method) remains bound therein.
Čím je obsah vody ve fosfatidech vyšší, tim horší je mísitelnost jejich ethanolického koncentrátu s olejem (je nutno zvyšovat teplotu, aby se fáze spojily) a je také horší jejich skladovatelnost: v koncentrátu dochizí postupně k vzestupu obsahu volných mastných kyselin.The higher the water content of the phosphatides, the worse the miscibility of their ethanolic concentrate with the oil (the temperature must be raised to combine the phases) and the worse their shelf life: the free fatty acids will gradually increase in the concentrate.
Nastavení obsahu Nah ve fosfatidovém koncentrátu podle tohoto vynálezu je výhodné i v případě, že hydroxid sodný nebyl přidán už ve fázi extrakce sušených žloutků ethanolem; úpravu je možno provést až v ethanolickém roztoku po srážení acetonem před konečným zahuštěním. Nedosáhne se tak sice částečného odstranění volných mastných kyselin již ve fázi extrakce, ale zůstává výhoda toho, že vmícháním olejové fáze, složené z rostlinného oleje a fosfatidového koncentrátu s upraveným obsahem Na vzniká přímo emulze s výhodným pH nad 7, které již není třeba upravovat např. pomocí pufrů.Adjusting the Na h content of the phosphatide concentrate according to the invention is advantageous even if the sodium hydroxide was not already added during the extraction stage of the dried yolks with ethanol; the treatment can be carried out only in ethanolic solution after precipitation with acetone before the final concentration. Thus, the partial removal of the free fatty acids is not achieved already during the extraction phase, but the advantage remains that by mixing the oil phase composed of vegetable oil and phosphatide concentrate with a modified Na content, an emulsion with a preferred pH above 7 is formed. using buffers.
Získaná emulze má i pro sterilizaci v autoklávu hodnotu pH 7 až 8,5, která po 1 až 2 roky neklesá pod pH 6. Způsob podle vynálezu umožňuje přípravu čirých fází (vodné i olejové), z nichž každá může být před smícháním přefiltrována membránovým filtrem. Do vysokotlakého homogenizátoru přichází tedy emulze zbavena případných mechanických nečistot a je už v této fázi prakticky sterilní.The resulting emulsion also has a pH of 7 to 8.5 for sterilization in an autoclave, which does not fall below pH 6 for 1 to 2 years. The process according to the invention allows the preparation of clear phases (aqueous and oily), each of which can be filtered with a membrane filter . Thus, the emulsion is free of any mechanical impurities and is practically sterile at this stage.
Přečištěné fosfatidové koncentráty, použitelné jako emulgátory do nitrožilních tukových emulzí, jsou směsí fosfatidylcholinu, fosfatidylethanolaminu, jejich lysoderivátů a dalších vedlejších složek. Je známo, že takovéto směsisvhodným poměrem složek jsou lepšími emulgátory než chromatografický čistý fosfatidylcholin (M. S. Gray, W. S. Singleton, J. Pharm. Sci.Purified phosphatide concentrates useful as emulsifiers for intravenous fat emulsions are mixtures of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine, their lysoderivatives and other by-products. Such a mixture with an appropriate ratio of components is known to be better emulsifiers than chromatographic pure phosphatidylcholine (M.S. Gray, W.S. Singleton, J. Pharm. Sci.
56, 1 428, 1967). Dle našich zkušeností je dobrým měřítkem emulgační schopnosti světelná propustnost 0,1% vodných sólú; vyjádřena (analogicky jako absorbance) v přepočtu na 1% koncentraci, měla by mít hodnotu nejvýše 5 při 350 nm a nejvýše 11 při 850 nm (v 1-cm kyvetě).56, 1428 (1967). In our experience, a good measure of emulsifying ability is the light transmittance of 0.1% aqueous soles; expressed as analogous to absorbance, expressed as a 1% concentration, should have a value of not more than 5 at 350 nm and not more than 11 at 850 nm (in a 1-cm cuvette).
Vyšší obsah lysofosfatidových složek než ;0 % je nežádoucí vzhledem k možnosti hemolytického účinku, stejně jako titrační acidita nemá přesahovat 100 mmol/kg sušiny fosfatidů (vyjádřeno jako obsah palmitové' kyseliny při stanovení dle V. P. Dole, J. Clin. Invest. 35, 150, 1956).A lysophosphatide content greater than 0% is undesirable due to the possibility of a haemolytic effect, as well as the titration acidity should not exceed 100 mmol / kg of dry matter phosphatides (expressed as palmitic acid content as determined by VP Dole, J. Clin. Invest. 35, 150 (1956).
Obash lysoderivátů i volných mastných kyselin lze ještě v konečné fázi čisticího postupu snížit protřepáním ethanolického roztoku (před jeho zahuštěním na výsledný koncentrát) s oxidem hlinitým v množství 10 až 100 % hmot., počítáno na sušinu fosfatidů v roztoku. Tato operace odstraňuje však i jisté množství fosfatidylethanolaminu a může tak posunout poměr složek fosfatidového komplexu nevýhodným způsobem tak, že dojde ke zhoršení jeho emulgační schopnosti; projeví se to i na turbidanci vzorku sólu. Pro zpracovávané sušené žloutky je tedy třeba potřebné množství oxidu hlinitého pokusně ověřit.Both the lysoderivatives and the free fatty acids can be reduced by shaking the ethanolic solution (before concentrating it to the final concentrate) with alumina in an amount of 10 to 100% by weight, calculated on the dry matter of the phosphatides in the solution. However, this operation removes a certain amount of phosphatidylethanolamine and may thus shift the ratio of phosphatide complex components in a disadvantageous way, so that its emulsifying ability is impaired; this will also affect the turbidity of the sol sample. For the dried egg yolks to be processed, the required amount of alumina must therefore be verified by trial.
Fosfatidový koncentrát s obsahem 15 až 25 % hmot. bezvodého ethanolu a s obsahem Na+ iontů, připravený způsobem podle vynálezu, musí být uchováván při nízké teplotě pod -20 °C a v dobře uzavřených nádobách. Ztuhne přitom na voskovitou hmotu, která však po ohřátí na teplotu místnosti nabude opět konz:stence hustého sirupu a dá se z ní dobře odvažovat množství potřebné pro výrobu emulze. Sušinu koncentrátu lze zjišiovat vážkově (po zahuštění vzorku ve vakuu do sucha) nebo pohodlněji refraktometrický. Při zvlhnutí a zahřátí na vyšší teplotu může v koncentrátu dojit ke zvýšení obsahu volných mastných kyselin - v tomto směru je přítomnost vyššího obsahu Na nevýhodná - ale uchovávání při nízkých teplotách je u fosfatidů žádoucí i jako ochrana před vzdušnou oxidací, které fosfatidy obecně snadno podléhají.Phosphatide concentrate containing 15 to 25 wt. of anhydrous ethanol and containing Na + ions prepared by the process of the invention must be stored at a low temperature below -20 ° C and in well sealed containers. It solidifies to a waxy mass which, however, after warming to room temperature, regains the consistency of a dense syrup and can be used for weighing the amount required for emulsion production. The dry matter of the concentrate can be determined by gravity (after concentration of the sample under vacuum to dryness) or more conveniently by refractometry. Upon humidification and heating to a higher temperature, the free fatty acid content of the concentrate can be increased - in this respect, the presence of a higher Na content is disadvantageous - but low temperature storage is also desirable for phosphatides to protect against air oxidation, which phosphatides are generally easily subject to.
Způsob přípravy fosfatidového emulgátoru i nitrožilní tukové emulze z něho získané podle vynálezu byl s úspěchem použit při vývoji čs. nitrožilní tukové emulze (Nutralipid), jejíž klinické zkoušeni přebíhalo v létech 1980 až 1985 a jejíž pokusné výroba byla zahájena v roce 1986. Způsob podle vynálezu není však omezen na recepturu použitou v této emulzi, kde je obsaženo 20 % hmot. sojového oleje, 1,2 % hmot. sušiny vaječných iosfatidů a 5 % hmot. sorbitolu, ale je použitelný i v emulzích s jiným poměrem složek, s jinými druhy olejů (např. slunečnicovým, saflorovým, š polosyntetickými triglyceridy obsahujícími mastné kyseliny se středním řetězcem, nebo se směsí takových olejů). Je použitelný také s jinými isotonizačními složkami ve vodné fázi (glycerolem, mannitolem, xylitolem, atd.) a také v nitrožilních sukových emulzích, v nichž je olejová nebo vodná fáze nosičem nějaké látky s vlatsním farmakodynamickým účinkem (vitaminy rozpustné v oleji, anestetika, kancerostatika, kontrastní látky, ve vodné fázi aminokyseliny, atdí).The process for the preparation of both the phosphatide emulsifier and the intravenous fat emulsion obtained therefrom according to the invention has been successfully used in the development of MS. an intravenous fat emulsion (Nutralipid), whose clinical trials ran from 1980 to 1985 and whose experimental production began in 1986. However, the method of the invention is not limited to the formulation used in this emulsion, which contains 20% by weight of the emulsion. % soybean oil, 1.2 wt. % solids of egg iosfatides and 5 wt. sorbitol, but can also be used in emulsions with a different ratio of ingredients, with other types of oils (eg sunflower, safflower, semi-synthetic medium chain fatty acid triglycerides, or a mixture of such oils). It can also be used with other isotonizing components in the aqueous phase (glycerol, mannitol, xylitol, etc.) as well as in intravenous knot emulsions in which the oil or aqueous phase carries a substance with a particular pharmacodynamic effect (oil-soluble vitamins, anesthetics, cancerostatics) , contrast media, amino acid aqueous phase, etc.).
Následující příklady provedeni způsob podle vynálezu pouze dokládají, ale neomezují.The following examples illustrate, but do not limit, the process of the invention.
PřikladlHe did
a) Příprava fosfatidového koncentrátu z vaječných žloutků(a) Preparation of egg yolk phosphatide concentrate
Do 16 1 acetonu sé vsype 8 kg sušených žloutků, po 20minotovém míchání se žloutky, zbavené žloutkového oleje, oddělí na filtru a promyjí ještě 10 1 acetonu. Takto upravené žloutky se suspendují do 48,5 1 bezvodého ethanolu, k němuž bylo předem přidáno 25 g hydroxidu sodného, rozpuštěného ve 40 ml vody. Po 20mlnutovém míchání se žloutky odsají na kameninové nuči s oelulózovou filtrační deskou a ještě jednou se extrahují 10 1 bezvodého ethanolu. Filtrát a promývací ethanol se spojí a zahustí se na vakuové oběžné skleněné odparce pod dusíkem při dostatečném vakuu, aby teplota zahušťovaného roztoku nepřekročila 35 °C. Získá se cca 3 kg surového koncentrátu, ve kterém se zjistí obsah sušiny fosfatidů vážkově nebo změřením refrakce a srovnáním s kalibračním grafem. Na takto zjištěnou sušinu se použije 1,6 váhových dílů n-hexanu; koncentrát se rozpustí až na malý bílkovinný podíl, který se odstraní další filtrací, tentokráte pomocí tlaku.8 kg of dried egg yolks are added to 16 l of acetone, after 20 minutes of stirring, the yolks, free of yolk oil, are separated on the filter and washed with 10 l of acetone. The treated egg yolks are suspended in 48.5 L of anhydrous ethanol, to which 25 g of sodium hydroxide, dissolved in 40 ml of water, have been previously added. After stirring for 20 ml, the egg yolks are sucked off on an earthenware suction filter plate and extracted once more with 10 l of anhydrous ethanol. The filtrate and the washing ethanol were combined and concentrated on a vacuum circulating glass evaporator under nitrogen under sufficient vacuum to not allow the temperature of the concentrated solution to exceed 35 ° C. Approximately 3 kg of crude concentrate is obtained in which the dry matter content of phosphatides is determined by gravity or by refraction measurement and comparison with a calibration graph. 1.6 parts by weight of n-hexane are used for the solids thus determined; the concentrate dissolves up to a small protein fraction, which is removed by further filtration, this time by pressure.
K čirému filtrátu se za míchání přidá 12 hmotnostních dílů acetonu (opět počítáno na sušinu fosfatidů v zahuštěném ethanolickém extraktu), vysrážená voskovitá hmota fosfatidů se oddělí a vymačkáním zbaví větší části rozpouštědel. Na sušinu fosfatidů ve vysrážené hmotě (zpravidla to bývá 60 % hmot. její hmoty) se přidá znovu 1,6 hmotnostních dílů hexanu (v němž se hmota rozpustí) a 12 hmotnostních dílů acetonu, jimiž se fosfatidy opět vysrážejí.12 parts by weight of acetone are added to the clear filtrate with stirring (again calculated on the dry basis of phosphatides in the concentrated ethanolic extract), the precipitated waxy mass of phosphatides is separated and freed from most of the solvents by squeezing. 1.6 parts by weight of hexane (in which the substance is dissolved) and 12 parts by weight of acetone are again added to the dry matter of the phosphatides in the precipitated mass (usually 60% by weight of its mass), and 12 parts by weight of acetone are again precipitated therein.
Získaný, dobře vymačkaný produkt se rozpustí v 8 1 bezvodého ethanolu (získaný roztok obsahuje pak zpravidla 9 až 11 % hmot. sušiny) a do roztoku se vmíchá 200 g práškovitého oxidu hlinitého (neutrální, pro chromatografií, Brockmann II) a po 1 hodině se opět odfiltruje. 'The obtained well-squeezed product is dissolved in 8 l of anhydrous ethanol (the obtained solution usually contains 9 to 11% by weight of dry matter) and 200 g of alumina powder (neutral, for chromatography, Brockmann II) are stirred into the solution. filtered again. '
Zahuštěním roztoku ve vakuové odparce pod dusíkem a při teplotě pod 40 °C se získá koncentrát o obsahu 75 až 85 % hmot. sušiny fosfatidů, který se naplní do vhodných skleněných nádob s dobře těsnicími uzávěry tak, aby nádoby byly naplněny až po hrdlo a uloží se v hlubokomrazioí skříni při -20 °C až do doby, kdy se (po provedení potřebných analýz) použije k přípravě nltrožilní tukové emulze.Concentration of the solution in a vacuum evaporator under nitrogen and at a temperature below 40 ° C gives a concentrate of 75 to 85% by weight. Phosphatide solids, which are filled into suitable glass containers with well-sealed caps so that the containers are filled up to the throat and stored in a deep-freezer cabinet at -20 ° C until used (after the necessary analyzes have been made) fat emulsions.
b) Příprava nltrožilní tukové emulzeb) Preparation of an intravenous fat emulsion
Rozpustí se 750 g sorbitolu v 11 025 ml bezpyrogenní vody a tento roztok se sterilizuje membránovou filtrací přes ultrafiltr o velikosti pórů 0,22 ^um. Tento roztok se pak za aseptic kých podmínek předehřeje na 50 °C.,750 g of sorbitol are dissolved in 1025 ml of pyrogen-free water and this solution is sterilized by membrane filtration through a 0.22 µm pore ultrafilter. This solution is then preheated to 50 ° C under aseptic conditions.
Fosfatídový koncentrát obsahující 80 % hmot. sušiny fosfatidů (225 g) se rozmíchá do 3 000 g sójového oleje kvality pro nltrožilní tukovou emulzi, předehřátého rovněž na 50 °C. Roztok fosfatidů v oleji se tlakem dusíku přefiltruje rovněž přes membránový filtr, a pod dusíkem se vmíchá za použití vrtulového míchadla do vodné fáze. Získaná hrubá emulze (premix) se odpění krátkým vystavením sníženému tlaku, a potom se nechá projít vysokotlakým pístovým homogenizátorem dvoustupňového typu (tlak 3 až» 5 MPa ve 2. stupni, celkový tlaV. v 1. a 2. stupni 35 až 38 MPa), přičemž se vhodným chlazením teplota emulze při opakt íaných průchodech homogenizátorem (6x až 12x) udržuje na 50 až 60 °C a prostor nad emulzí v jíaiadle se vyplachuje dusíkem.Phosphatide concentrate containing 80 wt. dry matter of phosphatides (225 g) is mixed into 3,000 g of soybean oil grade for an intravenous fat emulsion, also preheated to 50 ° C. The phosphatide-in-oil solution was also filtered through a membrane filter under nitrogen pressure, and stirred under nitrogen using a propeller stirrer into the aqueous phase. The obtained coarse emulsion (premix) is defrosted by brief exposure to reduced pressure, and then passed through a two-stage high-pressure piston homogenizer (3 to 5 MPa pressure in stage 2, total pressure in 1 and 2 stages 35 to 38 MPa) wherein, by suitable cooling, the temperature of the emulsion is maintained at 50 to 60 ° C during repeated passes through the homogenizer (6x to 12x) and the space above the emulsion in the ice is flushed with nitrogen.
Ochlazená emulze se plní do ..,,úzních lahví po 400 ml a lahve se sterilizují v parním autoklávu. Získaná emulze obsahuje ve vodě emulgováno 20 % hmot. sojového oleje, 1,2 % hmot. sušiny fosfatidů, a rozpuštěno 5 % sorbitolu.The cooled emulsion is filled into 400 ml narrow bottles and the bottles are sterilized in a steam autoclave. The emulsion obtained contains 20% by weight of emulsified water. % soybean oil, 1.2 wt. dry matter phosphatides, and dissolved 5% sorbitol.
Příklad 2Example 2
Příprava probíhá stejným způsobem jako v přikladu 1 s tím rozdílem, že místo sorbitolu se ve vodná fázi použije přiměřené množství glycerolu tak, aby jej konečná emulze obsahovala 2,5 % hmot. Obsah sójového oleje je 20 % hmot., fosfatidů 1,2 % hmot. Plni se do lahví po 100 ml pro pediatrii.The preparation is carried out in the same manner as in Example 1 except that an adequate amount of glycerol is used in the aqueous phase in place of sorbitol such that the final emulsion contains 2.5% by weight. The soybean oil content is 20% by weight, the phosphatides are 1.2% by weight. Fill into 100 ml bottles for pediatrics.
Přiklad 3Example 3
Snížení titrační acidity fosfatidového koncentrátuReduction of the titratable acidity of the phosphatide concentrate
V následující tabulce 1 jsou srovnány vlastnosti fosfatidů, extrahovaných stejným postupem jako v příkladu 1 s tím rozdílem, že je vypuštěna počáteční extrakce žloutků acetonem, a že je používáno 96% ethanolu. Konečné protřepání s oxidem hlinitým je použito jen v případě C; ethanol použitý k extrakci žloutků obsahuje přidaný hydroxid sodný v případech B a C, ne však v případě AThe following Table 1 compares the properties of the phosphatides extracted in the same manner as in Example 1 except that the initial extraction of the yolks with acetone is omitted and 96% ethanol is used. Final shake with alumina is used only for C; the ethanol used for yolk extraction contains added sodium hydroxide in cases B and C, but not in case A
TabulkalTabulkal
Vodný 1% sólAqueous 1% sol
Titr. acidita mmol/kg suš.Titr. acidity mmol / kg dry.
Titrační acidita je stanovena dle V. P. Dole (J. Clin. Xnvest. 35, 150, 1956) a vyjadřována v mmol kys. palmitové. Turbidance je uváděna zlomkem, v němž prvá hodnota je nalezena při 350 nm a druhá při 850 nm. V odstavce TLC je poměr skvrn fosfatidylcholinu, fosfatidylethanolaminu a lysofosfatidylcholinu, nalezený pří chromatografií na tenké vrstvě silikagelu v soustavě ohloroform-methanol-ethylacetát-kys. octová-voda 10:10:7:2:2 s následnou elucí skvrn a kolorimetrickým stanovením fosforu. Obsah sodíku je zjištěn metodou atomové absorpce.Titration acidity is determined according to V. P. Dole (J. Clin. Xnvest. 35, 150, 1956) and is expressed in mmol of palmitic acid. Turbidance is reported by a fraction in which the first value is found at 350 nm and the second value at 850 nm. In the TLC paragraph, the ratio of phosphatidylcholine, phosphatidylethanolamine and lysophosphatidylcholine spots is found by thin layer chromatography on silica gel in the chloroform-methanol-ethyl acetate-acid system. acetic-water 10: 10: 7: 2: 2 followed by spot elution and colorimetric phosphorus determination. The sodium content is determined by the atomic absorption method.
Příklad 4Example 4
Účinek použití bezvodého ethanoluEffect of using anhydrous ethanol
V tabulce 2 jsou srovnány analytické hodnoty fosfatidových koncentrátů, připravených v podstatě podle příkladu 1 s tím, že y případě D je použito k extrakci žloutků 96% ethanolu, v případě E je použit ethanol bezvodý. Význam zkratek je stejný jako v předchozím příkladě. Oxid hlinitý v těchto případech použit nebyl.In Table 2, the analytical values of the phosphatide concentrates prepared essentially according to Example 1 are compared except that in case D, 96% ethanol is used for yolk extraction, and in case of E, anhydrous ethanol is used. The meaning of the abbreviations is the same as in the previous example. Alumina was not used in these cases.
Tabulka 2Table 2
Vodný 1% sólAqueous 1% sol
Ti.tr. aciditaTi.tr. acidity
Nižší titrační acidita v případě F nevyváží nevýhodu vysokého indexu turbidance, který ukazuje na fosfatid se špatnou emulgační schopností. Vlastnosti fosfatidů v případě G jsou pro přípravu nitrožilní tukové emulze dle zkušeností vhodnější.The lower titration acidity in F does not outweigh the disadvantage of the high turbidance index, which points to a phosphatide with poor emulsifying ability. The properties of phosphatides in case of G are more suitable for the preparation of an intravenous fat emulsion.
Claims (5)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (en) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Method of intravenous fat emulsion preparation |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (en) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Method of intravenous fat emulsion preparation |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS1003486A1 CS1003486A1 (en) | 1988-05-16 |
| CS260544B1 true CS260544B1 (en) | 1988-12-15 |
Family
ID=5447680
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS8610034A CS260544B1 (en) | 1986-12-28 | 1986-12-28 | Method of intravenous fat emulsion preparation |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS260544B1 (en) |
-
1986
- 1986-12-28 CS CS8610034A patent/CS260544B1/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS1003486A1 (en) | 1988-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR890004577B1 (en) | Process for preparing aqueous liquid containing a fatsoluble substance | |
| US5035895A (en) | Emulsified and solubilized pharmaceutical preparation | |
| DE60118395T2 (en) | PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS WITH DELAYED RELEASE FOR THE PARENTERAL APPLICATION OF HYDROPHILIC ACTIVE SUBSTANCES | |
| US6355693B1 (en) | Fractionated vegetable oil | |
| US4252793A (en) | Injectable lecithin preparation | |
| US4465693A (en) | Intravenously administered emulsion from a lecithin base and method of preparation | |
| CZ221596A3 (en) | Oil-in-water emulsion, its use and pharmaceutical composition containing thereof | |
| JPH0510327B2 (en) | ||
| EP0703918B1 (en) | Process for obtaining highly purified phosphatidylcholine | |
| KR960016890A (en) | Intravenous solution of staurosporin derivative | |
| US4563354A (en) | Oil-in-water emulsion for parenteral administration | |
| US4323563A (en) | Fat emulsion for intravenous injection | |
| JPH09241153A (en) | Lipid emulsion for intravenous injection | |
| JPH07238293A (en) | Production of docosahexaenoic acid-containing egg yolk oil | |
| KR101713219B1 (en) | Injectable composition comprising phosphatidycholine and lysophosphatidylcholine, and manufacturing method thereof | |
| KR920002326B1 (en) | Aqueous solution containing fat-soulble vitamin k | |
| CS260544B1 (en) | Method of intravenous fat emulsion preparation | |
| Ambache et al. | Investigation of an active lipid in aqueous extracts of rabbit brain, and of some further hydroxy-acids | |
| JP3267868B2 (en) | Egg yolk phospholipid composition | |
| JP4458893B2 (en) | Process for producing purified egg yolk phospholipid composition, and pharmaceutical composition, cosmetic composition, or food composition using the same | |
| JP3723992B2 (en) | Fat-containing infusion preparation and comprehensive nutrition infusion container containing it | |
| US1978297A (en) | Testicular hormone and method of producing the same | |
| US3197371A (en) | Process for treating hypercholesteralemia | |
| JP3464332B2 (en) | Egg yolk phospholipid composition | |
| DE2004408A1 (en) | Cosmetically action material prodn |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| IF00 | In force as of 2000-06-30 in czech republic | ||
| MM4A | Patent lapsed due to non-payment of fee |
Effective date: 20001228 |