CS259550B2 - Způsob výroby nové heterocyklické sloučeniny - Google Patents

Abstract

Řešení se týká způsobu výroby nové heterocyklické sloučeniny vzorce I, jakož i adičních solí této sloučeniny s kyselinami tak, že se podrobí formylaci sloučenina vzorce II působením směsi fosforylchloridu a dimethylformamidu ipři teplotě v rozmezí 0 až 20 °C, načež se výsledný produkt izoluje a popřípadě se převede na adiční sůl s kyselinou. Látka má antithrombotické účinky.

Description

Vynález se týká způsobu výroby nové heterocyklické sloučeniny vzorce I

CHO

Způsobem podle vynálezu je možno získat sloučeninu vzorce I formylací sloučeniny obecného vzorce II

S'

(iJJ •N

Formylace se obvykle provádí jakýmkoliv známým způsobem pro formylaci pyrrolového jádra bez ovlivnění zbytku molekuly, zejména směsí fosforylchloridu a dimethylřormamidu při teplotě 0 až 20 °C.

Sloučeninu vzorce II je možno získat dekarboxylací kyseliny vzorce III

COOH Ό xidu draselného v ethylenglykolu při teplotě 1Ό0 °C až teplotě varu reakční směsi pod zpětným chladičem.

Nitril vzorce IV je možno získat působením 2-chlorakrylonitrilu vzorce V

Cl

CH2=C \

CN (V) na sloučeninu vzorce VI

N.

COOH 'CO (Ví) \, ~N

-O

Reakce se obvykle provádí v anhydridu kyseliny octové zahřátím na teplotu 80 až 130 °O.

Sloučeninu obecného· vzorce VI je možno získat kondenzací sloučeniny VII

(Vin kde •Z_o znamená aktivační skupinu kyseliny, například atom halogenu, se sloučeninou obecného vzorce VIII

Postup se provádí jakýmkoliv známým způsobem pro dekarboxylaci kyseliny, například zahříváním za přítomnosti práškované mědi.

Kyselinu vzorce III je možno získat hydrolýzou nitrilu vzorce IV

CN jakýmkoliv způsobem pro přeměnu nitrilu na kyselinu bez ovlivnění zbytku molekuly. Obvykle je výhodné provést hydrolýzu v bazickém prostředí v alkoholu s vysokou teplotou varu, například působením hydro5^x^y-COOR_o ’-------_NH (Vlil) kde ' ' :

R_o znamená atom vodíku nebo alkylový zbytek, s následnou hydrolýzou v případě, že R_o znamená alkylový zbytek.

Kondenzace sloučeniny obecného vzorce VII se sloučeninou obecného vzorce VIII se provádí obvykle v inertním organickém rozpouštědle, například chloroformem za přítomnosti látky, která váže kyselinu, například trlethylaminu při teplotě 0 až 65 °C.

V případě, že R_o znamená alkylový zbytek, provádí se hydrolýza jakýmkoliv zná2 5 9 5 5 O

S mým způsobem, jímž je možno převést ester na kyselinu bez ovlivnění zbytku molekuly, zejména působením alkalického prostředí ve vodě nebo ve směsi vody a alkoholu, například vody a ethanolu při teplotě 20 až 80 °C.

Sloučeniny obecného vzorce VIII je možno získat aplikací nebo adaptací metod, které byly popsány v publikacích Η. T. Nagasawa, J. A. Elberling, P. S. Fraser a N., S. Nizuno, J. Med. Chem. 14, 501 (1971], B. Delloau, J. Med. Chem. 2, 553 (1960], J. C. Wriston a C. G. McKenzie, J. Med. Chem. 225, 607 (1957), S. Wolf, G. Militello a další, Tet. Letters, 3 913 (1979), H. Gorshon a A. Scala, J. Oirg. Chem. 26, 2 347 (1961], R. Riemschneider a S. A. Hoyer, Z. Naturforsch. 17 B, 765 (1962], H. MOhrle a C. Karl, Arch. Pharm. 301, 728 (1968] a R. K. Hill, T. H. Chán a J. A. Joule, Teitrahedron 21, 147 J1965],

Novou sloučeninu obecného vzorce I je popřípadě možno čistit jakýmkoliv běžným způsobem, například krystalizací, chromatografií nebo postupnou extrakcí v kyselém nebo alkalickém prostředí.

Novou sloučeninu vzorce I, získanou způsobem podle vynálezu, je možno čistit běžnými známými způsoby a převádět ji na adiční soli s kyselinami působením kyseliny v organickém rozpouštědle, například alkoholu, ketonu, etheru nebo v chlorovaném rozpouštědle. Vytvořená sůl se vysráží po případném zahuštění reakční směsi a pak je možno.ji oddělit filtrací nebo dekantací.

Nová sloučenina vzorce I a také její soli mají zajímavé farmakologické vlastnosti, takže je možno je užít Ik předcházení a k léčbě trombotických onemocnění. Tyto látky jsou účinné již v koncentraci nižší než 50 mg/litr při zkoušce na inhibiční účinek in vitro shlukování krevních destiček, které je vyvoláno kolagenem způsobem podle publikace Born G. V. R. a další, J. Physiol., 168, 178 (1963],

Nová sloučenina vzorce I, získaná způsobem podle vynálezu a její soli mají mimoto velmi nízkou toxicitu. DLso pro tyto látky se obvyíkle pohybuje v rozmezích 300 až 900 mg/kg při perorálním podání u myši.

Pro lékařské použití je možno užít sloučeninu, vyrobenou způsobem podle vynálezu jako takovou nebo· ve formě solí, přijatelných z farmaceutického hlediska, to znamená solí, netoxických při běžně používaných dávkách.

Jako příklady použitelných farmaceutických solí sloučeniny, vyrobené způsobem podle vynálezu, je možno uvést: adiční soli s anorganickými kyselinami, například hydrochloridy, sulfáty, dusičnany nebo fosforečnany, nebo soli s organickými kyselinami, například soli s kyselinou:

octovou, propionovou, jantarovou, benzoovou, fumarovou, maleinovou, methansulfonovou, dále isoithionáty, theofylinacetáty, salicyláty, fenolftalcináty, methylen-bis-^-oxonaftoáty nebo substituční deriváty svrchu uvedených sloučenin.

Vynález bude osvětlen následujícím příkladem, který popisuje, jak je možno prakticky provádět způsob podle vynálezu. Příklad

V průběhu 10 minut se při iteplotě přibližně 10 °C přidá 16,4 g fosfoirylchloridu k 55 mililitrům dimethylformamidu. Získaný roztok se po Ikapkách přidá za stálého míchání v průběhu 25 minut při teplotě přibližně 4 °C k roztoku 14,4 g 5-(3-pyridyl]-lH,3H-pyrroloj 1,2-c jthiazolu ve 130 ml dimethylformamidu. Získaný roztok se míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 °C. Vytvoří se krystaly a k získané suspenzi se přidá 215 mililitrů vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 2 N. Získaný roztok se vlije do 2 150 ml destilované vody a směs se třikrát extrahuje celkovým množstvím 1 800 mililitrů ethylacetátu. Organické extrakty se slijí, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 2 000 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, přidá se 0,5 gramu aktivního uhlí, směs se zfiltruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 13,4 g výsledného surového produktu. Tento produkt se rozpustí ve 120 ml vroucího ethanolu. Vzniklý roztok se chladí dvě hodiny na teplotu přibližně 4 ^l0C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 20 ml ethanolu, zchlazeného na teplotu přibližně 4 °C a pak třikrát celkovým množstvím 150 ml isopropyloxidu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 7,4 g výsledného produktu o iteplotě tání 104 °C. Tento produkt se spojí s 3 g stejného produktu, připraveného týmž způsobem a materiál se rozpustí v 60 ml vroucího ethanolu. Vzniklý roztok se smísí s 0,5 ig aktivního uhlí a směs se za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na dvě hodiny na teplotu přibližně 4 °C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 15 mililitrů ethanolu, zchlazeného na teplotu přibližně 4 °C a pak ještě třikrát celkovým množstvím 75 ml isopropyloxidu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 7,9 g 5-(3-pyridyl) -lH,3H-pyrrolo [ 1,2-c ] -7-thiazolk,arboxaldehydu ve formě jasně béžové zbarvené krystalické pevné látky o teplotě tání 104 ^PC.

5-(3-pyridyl )-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c jthiazol se získá následujícím způsobem.

Směs 36,9 g kyseliny '5-(3-pyridyl)-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c ]-7-thiazolkarboxylové a 1,8 g práškované mědi se zahřívá na teplotu přibližně 250 °C celkem 30 hodin. Pak se reakční směs zchladí na teplotu přibližně 20 stupňů Celsia a smísí se s 500 ml methylenchloridu. Získaná suspenze se dvakrát promyije celkovým množstvím 200 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 2 N a pak se zfiltruje. Organická fáze se oddělí dekantací a pak se třikrát promyje celkovým množstvím 300 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a filtrát ,se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 25,3 g výsledného produktu. Tento produkt se chromatografuje na sloupci o průměru 4 cm s obsahem 250 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,063 až 0,2 mm, sloupec se vymývá směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50, odebírají se frakce po 600 ml. První frakce se odloží, další dvě frakce se slijí a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 213 g 5-(3-pyridyl )-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c jthiazolu ve formě oranžové .krystalické pevné látky o teplotě tání 74 °C.

Kyselinu 5- (3-pyridyl ] -lH,3H-pyrrolo [1,2-c]-7-thiazolkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

Směs 18,7 g 5-(3-pyridyl)-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c ]-7-thiazolkarbonitrilu, 16,3 g hydroxidu draselného ve formě pelet a 160 ml ethyleinglykolu se zahřívá za stálého míchání na teplotu přibližně 150 °C celkem dvě hodiny. Po 16 hodinách míchání při teplotě přibližně 20 °C se rozpouštědlo odpaří za sníženého tlaku 0,27 kPa při teplotě přibližně 100 °C. Odparek se rozpustí ve 100 mililitrech destilované vody a získaný roztok še upraví na pH přibližně 5 přidáním vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 2 N. Vzniklé krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 150 ml destilované vody a pak třikrát celkovým množstvím 150 ml acetonu a pak se usuší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného· ve formě pelet.

Tímto· způsobem se získá 17,7 g surového produktu o teplotě tání 264 °C. Tento produkt se spojí s 1,3 g téhož produktu, připraveného· stejným způsobem a výchozí látka se rozpustí ve směsi 650 ml 1-butanolu a 150 ml dimethylformamidu, předem zahřátého na teplotu přibližně 115 °C. Přidá se 0,5 g aktivního uhlí a vzniklý roztok se za tepla zfiltruje. Filtrát se chladí 16 hodin na teplotu přibližně 4 °C. Získané krystaly se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 50 ml dimethylformamidu, třikrát celkovým množstvím 150 ml ethanolu, třikrát celkovým množstvím 150 ml isopropyloxidu a nakonec třikrát celkovým množstvím 150 ml diethyletheru, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C, za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 16,1 g výsledného produktu o teplotě tání 266 °C. Tento: produkt se uvede do suspenze ve 250 ml destilované vody a získaná suspeňze se mí•chá 2 hodiny při teplotě přibližně 20· “C. Získané krystaly se oddělí filtrací, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 150 ml destilované vody, pak se promyjí třikrát celkovým množstvím 90 ml ethanolu, třikrát celkovým množstvím 90 ml isopropyloxidu a třikrát celkovým množstvím 90 ml diethyletheru, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 100 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

¹ Tímto způsobem se získá 15,5 g kyseliny '5- (3-pyridyl ] -lH,3Hpyrrolo [ 1,2-c ] -7-thiazolkarboxylové ve formě krystalické krémově zbarvené látky o teplotě tání 266 °'C.

5- (3-pyridyl j -lH,3H-pyrrolo [1,2-c ] -7-thiazolkarbonitril, který se užívá j-ako výchozí látka, je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 403 g kyseliny N-nikotinoylthiazolidin-4-karboxylové ve směsi 1 350 ml 2-chlorakrylonitrilu .a 1 750 ml anhydridu kyseliny octové se zahřívá 2 hodiny a 40 minut na teplotu 90 °C. V průběhu této doby je možno pozorovat vytvoření homogenní zakalené fáze v průběhu 30 minut, po dalších 10 minutách se začne vyvíjet sraženina. Pak se směs zchladí na 16 hodin na teplotu přibližně 4 °C, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkem na množství 200 ml anhydridu kyseliny octové, třikrát celkovým množstvím 300 ml -acetonu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Takto získaný produkt se uvede v suspenzi ve 2 400. ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 2 N. Pák se směs míchá 1 hodinu a 30 minut při teplotě přibližně 20 ^aC, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 1 2:50 ml destilované vody, třikrát celkovým množstvím 1 200 ml ethanolu, třikrát celkovým množstvím 900 ml diethyletheru a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 159,7 g 5-(3-pyridyl ) -lH,3H-pyrrolo [ i ,2-c ] -7-thiazolkarbonitrilu ve formě krémově zbarvených krystalů o teplotě tání 170 °C.

Kyselinu N-nikotinoyl-4-thiazolidinkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

K roztoku 400 g kyseliny 4-thiazolidinkarboxylové a 613 g triethylaminu ve 4 500 mililitrech chloroformu se v průběhu 1 hodiny přidá při teplotě v rozmezí 30 až 52 °C celkem 534 g hydrcchloridu nikotinoylchloridu. Získaný roztok se zahřívá 4 hodiiny na teplotu přibližně 64 °C. Pak se reakční směs míchá 16 hodin při teplotě přibližně 2Ό °C, získané krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 1 500 ml chloroformu a pak třikrát celkovým množstvím 1. 500 ml diethyletheru, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá celkem 403 g kyseliny N-nikotinoyl-4-thiazolidinkarboxylové ve formě bílé krystalické látky o teplotě tání 190 °C.

Popis farmakologických zkoušek aj Inhibice shlukování krevních destiček, vyvolaného kolagenem in vitro

Shlukování krevních destiček iplasmy králíka bohaté na destičky se po vyvolání kolagenem za míchání měří zvětšením transmise světla směsí.

Čerstvá krev králíka (citratovaná) se odstředí při 100 g celkem 20 minut při teplotě 15 °C. Získá se plasma, bohatá na destičky (PRP), obsahující alespoň 50 000 destiček v mm^ó.

0,2 ml PRP se uloží do polystyrénové zkumavky s obsahem silikonované železné tyčinky a přidá se 0,025 ml pufru tris-HCl o koncentraci 0,05 M a o pH 7,4. Po předběžné inkubaci 10 minut při teplotě 37 ^ciC se přidá 0,025 ml suspenze kolagenu o koncentraci 25 /zg/ml. Průchod světla se měří 10 minut a vypočítá se rozdíl TM mezi průchodem světla plasmou před počátkem shlukování a mezi průchodem v čase t, kdy bylo dosaženo maxima průchodu světla.

Aby bylo možno sledovat inhibiční účinek produktu na shlukování destiček, vyvolané kolagenem, nahradí se 0,025 ml pufru tris-HC1 o koncentraci 0,05 M -a pH 7,4 množstvím 0,025 ml produktu v roztoku v tomtéž pufru. Po 10 minutách předběžné inkubace při teplotě 37 °C se přidá suspenze 'kolagenu.

Pro každou koncentraci c sledované sloučeniny se vypočítá rozdíl Tc (transmise před počátkem shlukování minus transmise v čase tj. Pak se zakreslí křivka, udávající Tc jako funkci c, vyjádřeno v rng/l reakčního prostředí. Místu křivky, v němž Tc ~ f(c) .· , , TM a pořadnice ma hodnotu —— odpovídá hodnota úsečky c = CIso, tj. koncentrace produktu, která vyvolá 50% inhibici shlukování, vyvolaného působením kolagenu.

b) Toxicita

Stanoví se dávka DLso, která po podání myším perorálně způsobí uhynutí 50 % těchto zvířat.

Výsledky těchto pokusů jsou uvedeny v následující tabulce.

Tabulka

Látka podle DLso pro myš Agregace vynálezu mg/kg p. o. u králíka

CIso mg/1

300 až 900 2,8

Claims (1)

1. Způsob výroby nové heterocyklické sloučeniny vzorce I liuami, vyznačující sc tím, že se podrobí formylaci sloučenina vzorce II

   CHO

   Λ

   N~ -^!—

   -O

   C'

   J

   I

   j. Jí f;!l !/ \\ /

   (!) jakož i adičních solí této sloučeniny s kyšepůsobením směsi fosforylchloridu a dimethylformamidu při teplotě v rozmezí 0 až 20 °C, načež se výsledný produkt isoluje a popřípadě se převede na adiční sůl s kyselinou.