CS259548B2

CS259548B2 - Způsob výroby nových heierocyklických sloučenin

Info

Publication number: CS259548B2
Application number: CS872469A
Authority: CS
Inventors: Jean-Louis Fabre; Daniel Farge; Claude James; Daniel Lave
Original assignee: Rhone Poulenc Sante
Priority date: 1983-01-13
Filing date: 1987-04-06
Publication date: 1988-10-14
Also published as: CS246987A2; CS247087A2; CS259549B2

Abstract

Řešení se týká způsobu výroby nových heterocyklických sloučenin obecného vzorce I, kde A znamená atom síry nebo methylenový zbytek, R3 znamená atom vodíku, alkýlový zbytek o 1 až 4 atomech uhlíku a přímým nebo rozvětveným řetězcem, nebo fenylový zbytek, n znamená celé číslo 0 nebo 1, p znamená celé číslo 0, nebo 1, tak, že se hydrolyzuje nitril obecného vzorce II, kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, zahřátím v alkalickém prostředí v terč. butanolu na teplotu 30 až 85 °C, získaný produkt se izoluje a popřípadě převede na adiční sůl s kyselinou. Připravované sloučeniny jsou účinné při léčbě throm- botických onemocnění.

Description

Vynález se týká způsobu výroby nových heterocyklických sloučenin obecného vzorce I:

CONhL

C

i i R_rCH ^S- M avi (I) kde n znamená celé číslo 0 nebo 1,

A znamená atom síry, methylenový zbytek,

R3 znamená -atom vodíku o 1 až 5 atomech uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem, alkylový zbytek nebo fenylový zbytek, p znamená celé číslo 0 nebo 1.

Vynález se rovněž týká způsobu výroby solí svrchu uvedených sloučenin.

Sloučeniny obecného vzorce I je možno získat hydrolýzou nitrilů obecného vzorce II kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam.

Reakce se obvykle provádí v anhydridu kyseliny octové zahřátím na teplotu v rozmezí 80 až 130 °C.

•Sloučeniny obecného vzorce IV je možno získat kondenzací sloučenin obecného vzorce V

(CH = CH )~ COZ₀(V)

CN

- X j V i!

'^CHA>

(CH =CH ), .N λ\ kde p znamená celé číslo 0 nebo 1 a Z_o znamená aktivační skupinu kyseliny, například atom halogenu, se sloučeninou obecného vzorce VI (IIJ

ΓΊ coor.

kde (VI) m, n, p, A a R3 mají svrchu uvedený význam.

Hydrolýza se provádí jakýmkoliv způsobem pro přeměnu nitridu na amid bez ovlivnění zbytku molekuly. Obvykle je výhodné provádět hydrolýzu v zásaditém prostředí v organickém rozpouštědle, například v terc.butanolu při teplotě 30 až 85 °C.

Nitrily obecného vzorce II je možno získat působením 2-chlorakrylonitrilu vzorce III

Cl /

CH2 = C \

CN (III) na sloučeninu obecného vzorce IV kde

R_Q znamená atom vodíku nebo alkylový zbytek, načež se v případě, že R_o znamená alkylový zbytek, provádí ještě hydrolýza.

Kondenzace sloučeniny obecného vzorce V se sloučeninou obecného vzorce VI se provádí obvykle v inertním organickém rozpouštědle, například chloroformem za přítomnosti látky, která váže kyselinu, například triethylaminu při teplotě 0 až 65 °C.

V případě, že R_o znamená alkylový zbytek, provádí se hydrolýza jakýmkoliv známým způsobem, jímž je možno převést ester na kyselinu bez ovlivnění zbytku molekuly, zejména působením alkalického prostředí ve vodě nebo ve směsi vody a alkoholu, například vody a ethanolu při teplotě 20 až 80 ^aC.

Sloučeniny obecného vzorce VI je možno získat aplikací nebo adaptací metod, které

25S342 byly popsány v publikacích Η. T. Nagasawa, J. A. Elberling, P. S. Frasor a N. S. Nizuno, J. Med. Chem. 14, 501 (1971), B. Delleau, J. Med. Chem. 2, 553 (1960), J. C. Wriston a C. G, Mc Kenzie, J. Biol. Chem,, 225, 607 (1957), S. Wolf, G. Mllitello a další, Tot. Letters, 3 913 (1979), H. Gerzhon a A. Scala, J. Org. Chem. 26, 2 347 (1961), R. Riemschneider a G. A. Hoyer, Z. Naturforsch. 17 B, 765 (1962), H. Můhrle a C. Karl, Arch. Pharm. 301, 728 (1968) a R. K. Hill, T. H. Chán a J. A. Joule, Tetrahedron 21, 147 (1965).

Novou sloučeninu obecného vzorce I je popřípadě možno čistit jakýmkoliv běžným způsobem, například krystalizací, chromatografií nebo postupnou extrakcí v kyselém nebo alkalickém prostředí.

Novou sloučeninu obecného vzorce I, získanou způsobem podle vynálezu, je možno čistit běžnými známými způsoby a převádět je na adiění soli s kyselinami působením kyseliny v· organickém rozpouštědle, například alkoholu, betonu, etheru nebo v chlorovaném rozpouštědle. Vytvořená sůl se vysráží po případném zahuštění reakční směsi a pak je možno ji oddělit filtrací nebo dekantací.

Nové sloučeniny obecného vzorce I a také jejich soli mají zajímavé farmakologické vlastnosti, takže ie možno je užít k předcházení a k léčbě trombotických onemocnění. Tyto· látky jsou účinné již v koncentraci nižší, než 50 mg/litr při zkoušce na inhibiční účinek in vitro proti shlukování krevních destiček, které je vyvoláno kolagenem způsobem podle publikace Born G. V. R. a další, J. Physiol., 168, 178 (1963).

Nové sloučeniny obecného vzorce I, získané způsobem podle vynálezu a jejich solí mají mimoto velmi nízkou toxicitu. DLso pro tyto látky se obvykle pohybuje v rozmezích 300 až 900 mg/kg při perorálním podání u myši.

Nejdůležitějšími sloučeninami, které je možno získat způsobem podle vynálezu, jsou následující látky:

5- (3-pyridyl) -lH,3H-py rrolo [ 1,2-c j -7-ťhiazolkarboxamid,

6- (3-pyridyl) -l,2-dihydro-4H-pyrrolo[ 1,2-c j -l,3-thiazin-8-karboxamid,

5- (3-pyridyl) -2,3-dihydr ο-ΙΗ-7-pyrr olizinkarboxamid,

3- (3-pyridyl) -5,6,7,8-tetrahydro-l-indolizinkarboxamid.

Pro lékařské použití je možno užít sloučeniny, vyrobené způsobem podle vynálezu jako takovou nebo ve formě solí, přijatelných z farmaceutického hlediska, to znamená solí, netoxických při běžně používaných dávkách.

Jako příklady použitelných farmaceutických solí sloučenin, vyrobených způsobem podle vynálezu, je možno uvést: adiční soli s anorganickými kyselinami, například hydrqčhloridy, sulfáty, dusičnany nebo fosforečnany, nebo soli s organickými kyselinami, například soli s kyselinou:

octovou, propionovou, jantarovou, benzoovou, filmařovou, maleinovou, methansulfonovou, dále isothionáty, theofylinacetáty, salicyiláty, fenolftaleináty, methylen-bis-jS-oxonaftoáty nebo substituční deriváty svrchu uvedených sloučenin.

Vynález bude osvětlen následujícími příklady, které popisují, jak je možno prakticky provádět způsob podle vynálezu. Příklad 1

Suspenze 11,35 g 5-(3-pyridyl )-lH,3H-pyrroloj 1,2-c 1-7-thiazolkarbonitrilu a 14 g hydroxidu draselného v práškovité formě ve 100 ml terc.butylalkoholu se hodinu zahřívá na teplotu 85 “C. Po 16 hodinách míchání při teplotě 20 °C se reakční směs vlije do 2 litrů destilované vody. Suspenze se míchá při teplotě přibližně 20 ^aC celkem 15 minut, krystalky, které -se po této době vytvoří, se oddělí filtrací, osmkrát se promyjí celkovým množstvím 1 200 mil destilované vody a pak ještě třikrát celkovým množstvím 150 ml ethanolu, načež se suší za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného v peletované formě.

Tímto způsobem se získá 10,5 g surového produktu, tento produkt se spojí s 3,9 g obdobného produktu, připraveného stejným způsobem a celé množství se rozpustí v 850 mililitrech vroucího' ethanolu. Takto získaný roztok se smísí s 0,5 g aktivního uhlí a výsledná směs se za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na 3 hodiny na teplotu přibližně 4 °C. Vytvořené krystalky se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 30 mililitrů ethanolu, zchlazeného na teplotu přibližně 4 °'C, a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet. Tímto způsobem se získá celkem 11,3 gramu 5- (3-pyridyl)-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c j -7-thiazolkarboxamidu ve formě krémově zbarvených krystalů o teplotě tání 215 °C.

5- (3-pyridyl) -lH,3H-pyrrolo [ 1,2-c ] -7-thiazolkarbonitril, který se užívá jako výchozí látka ipři provádění svrchu uvedené reakce, je možno získat následujícím způsobem:

Suspenze 403 g kyseliny N-nikotinoylthiazolidin-4-karboxylové ve směsi 1 350 ml 2-chlorakrylonitrilu a 1 750 ml anhydridu kyseliny octové se zahřívá 2 hodiny a 40 minut na teplotu 90 °C. V průběhu této doby je možno pozorovat vytvoření homogenní zakalené fáze v průběhu 30 minut, po dalších 10 minutách se začne vyvíjet sraženina. Pale se směs zchladí na 16 hodin na teplotu přibližně 4 °C, vzniklé krystalky se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkem na množství 200 ml anhydridu kyseliny octové, třikrát celkovým množstvím 300 ml acetonu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Takto získaný produkt se uvede v suspenzi ve 2 400 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 2N. Pak se směs míchá 1 hodinu a 30 minut při teplotě přibližně 20 °C, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 1 250 ml destilované vody, třikrát celkovým množstvím 1 200 ml ethanolu, třikrát celkovým množstvím 900 ml diethyletheru a pak se usuší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibiližně 20 °'C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet. Tímto způsobem se získá 159,7 g 5-(3-pyridylj-lH,3H-pyrrolo [ 1,2-c j-7-thiazolkarbonitrilu ve formě krémově zbarvených krystalů o teplotě tání 170 °C.

Kyselinu N-nikotmoyl-4-thiazolidinkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem:

K roztoku 400 g kyseliny 4-thiazolidinkarboxylové a 613 g triethylaminu ve 4 500 ml chloroformu se v průběhu 1 hodiny přidá při teplotě v rozmezí 30 až 52 °C celkem 534 g hydrochloridu nikotinylchloridu. Získaný roztok se zahřívá 4 hodiny na teplotu přibližně 64 °C. Pak se reakční směs míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 °C, získané krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 1 500 ml chloroformu a pak třikrát celkovým množstvím 1 500 mililitrů diethyletheru, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá celkem 403 g kyseliny N-nikotinoyl-4-thiazolidinkarboxylové ve formě bílé krystalické látky o teplotě tání 190 °C.

Příklad 2

Suspenze 14,6 g 5-(3-pyridyl)-2,3-di'hydro-lH-7-pyrrolizinkarbonitrilu a 23,1 g práškovaného hydroxidu draselného ve 140 nul terc-butylalkoholu se zahřívá na 2 hodiny na teplotu 82 °C. V průběhu této doby je možno po 10 minutách pozorovat vznik homogenní zakalené fáze, po 20 minutách se počne vyvíjet sraženina. Pak se směs zchladí na teplotu přibližně 20 °C, rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 ^CC. Krystalický odparek, získaný tímto způsobem, se uvede do suspenze ve 250 ml destilované vody a míchá se 30 minut při teplotě přibližně 20 ^C'C. Vzniklé krystaly se oddělí filtrací, čtyřikrát se promyjí celkovým množstvím 200 ml destilované vody a pak třikrát celkovým množstvím 150 ml isopropyloxidu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 15,5 g surového produktu o teplotě tání 206 °C. Tento produkt se rozpustí ve 150 ml vroucího ethanolu. K získanému roztoku se přidá 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se zchladí na teplotu přibližně 1Ό °C v průběhu 2 hodin. Vzniklé krystaly se oddělí filtrací a suší se za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 ^aC za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 9,6 g 5-(3-pyridyl)-2,3-dihydro-lH-7-pyrrolizinkarboxamidu ve formě krémově zbarvené krystalické látky o teplotě tání 210 C.

5-(3-pyridyl)-2,3-dihydro-lH-7-pyrrolizinkarbonitril je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 44 g N-nikotinoyl L-prolinu ve směsi 160 ml 2-chlorakrylonitrilu a 200 ml anhydridu kyseliny octové se postupně zahřívá na teplotu 90 °C. Po rozpuštění reakěních složek v reakčním prostředí dojde ke vzniku sraženiny a tím suspenze. Vzniklá suspenze se dál zahřívá 3 hodiny a 30 minut na teplotu přibližně 90 °C. Po zchlazení na teplotu přibližně 4 °C na 1 hodinu se vzniklé krystaly oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 50 ml anhydridu kyseliny octové, třikrát celkovým množstvím 300 ml acetonu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet. Takto získaný produkt se smísí s 500 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 1N. Vyloučí se olejovitá kapalina, která se rozpustí ve 250 ml ethylacetátu. Organická fáze se oddělí dekantací a vodná fáze se třikrát extrahuje celkovým množstvím 750 ml ethylacetátu. Organické extrakty se slijí, třikrát se promyjí celkovým množstvím 750 ml destilované vody, vysuší se bezvodým uhličitanem draselným, přidá se 1 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 25,2 g surového produktu. Tento produkt se chromatografuje na sloupci o průměru 4 cm s náplní 250 'gramů kysličníku křemičitého o průměru zrn 0,0:63 až 0,2 mm, sloupec se vymývá eíthylacetátem a odebírají se frakce o objemu

253548

400 ml. Dvě první frakce se odloží, tři následující frakce se slijí a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 21 g výsledného produktu. Tento produkt se rozpustí ve 100 mililitrech vroucího ethanolu.' Získaný roztok se zchladí na teplotu přibližně 4 °C na 1 hodinú. Vzniklé krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým' množstvím 30 mililitrů ethanolu, zchlazeného na teplotu přibližně 4 °G a pak ještě třikrát celkovým množstvím 150 ml isopropyloxidu.

¹ Tímto způsobem se získá 16,1 g 5-(3-pyrídyl )-2,3-dihydro-lH-7-pyrrolizinkarbonitrilu ve formě krémově zbarvené krystalické látky o teplotě tání 112 °C.

^! N-nikotinoyl L-prolin je možno získat způsobem podle F. Coustoua a B. Bellegařďelio, NSR patentový spis č. 2 537 590.

Příklad 3

Suspenze 4,9 g 6-(3-pyridyl J-3,4-dihyďro-IH-pyrrOlo [ 2,1-c ]-l,4-thiazín-8'-karbonifrllu a 6,7 g práškovaného hydroxidu draselného v 50' .ml terc.butylalkoholu se 1 hodinu a 15 minut zahřívá na teplotu varu. Rozpouštědlo se pak odpaří za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě 60 °C a odparek se uvede do suspenze ve 150 ml destilované vody. Vytvoří se krystaly, kteťé se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 150 ml destilované vody a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C.

Tímto způsobem se získá 5,2 g sójového produktu o teplotě tání 186 °C. K tomuto produktu se přidá 4,5 g stejného produktu, připraveného předem týmž způsobeni a materiál Se rozpustí ve 250 ml vroucího ethanolu. Získaný roztok se smísí s 0,5 g aktivního uhlí a směs se zá tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na 2 hodiny na teplotu přibližně 4 G. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkem na množství 50 ml ethanolu, zchlazeného na teplotu přibližně 4 °C a pak třikrát celkovým množstvím 75 mldiethyletheru a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 7,1 g 6-(3-pyridyl j -3,4-dihyd.ro-lH-pýrrolo [ 2,1-c i -1,4-thiazin-8-karboxamidu ve formě žluté krystalické látky o teiplotě tání 192 °C.

6- (3-pyridyl) -3,4-dihydro-lH-pyrrolo [ 2,1-c]-l,4-thiazin-8-karbonitril je možno získat následujícím způsobem:

Postupně se zahřívá suspenze 27,9 g kyseliny N-nikotinoyl-l,4-tliiazin-3-karboxylové ve směsi 89 ml 2-chlorakrylonitrilu a 117 mililitrů anhydridu kyseliny octové. Jakmile teplota dosáhne 70 °C, je možno pozorovat samovolné stoupnutí teploty až na 90 °C a rozpuštění jednotlivých složek, a pak po 5 minutách při téže teplotě krystalizaci za vzniku suspenze. Směs se dále zahřívá 2 ia hodiny při teplotě 90 °C a pak se reakční směs žehla'® na- teplotu přibližně 20 °C. Krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 75 ml anhydridu kyseliny octové a- půk třikrát celkovým množstvím 150 ml acetonu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 27 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobeni se získá 6,3 g výsledného produktu. Tento produkt se uvede do suspenze ve 100 ml destilované vody. Získaná suspenze se smísí s 50 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o' koncentraci 5 N a pak se extrahuje třikrát celkovým množstvím 300 ml ethylacetátu. Organické extrakty se slijí, třikrát se promyjí celkovým množstvím 150 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, přidá se 0,5 g aktivního· uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 5 g 6-(3-pyridyl J-3,4-dihýdro-lH-pyrrolo [ 2,1-c 1 -1,4-thiazin-8-karbonitrilu ve formě jasně oranžové krystalické pevné látky o teplotě tání 150· °C.

Kyselinu N-nikotinoyl-l,4'-thiazin-3-karboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

Roztok 2,8 g N-nikotinoyl-l,4-thiaziii-3-eⁱthylkarboxylátu ve směsi 25 ml ethanolu a 10 ml vodného roztoku hydroxidu sodného· o koncentraci 2N se míchá 3 hodiny při teplotě přibližně 20 ^aC. Rozpouštědlo se pak odpaří za sníženého tlaku Z,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C. Získaný produkt se rozpustí v 5.0 ml destilované vody a čistí tak, že se roztok nechá iprojít přes 30 g pryskyřice, DOWEX 50WX-2 o průměru částic 50 až 100 mesh ve sloupci o průměru 1,6 cm. První frakce se získá při promývání sloupce destilovanou vodou, druhá frakce promývání methanolem a třetí frakce promývání sloupce destilovanou vodou. Tyto tři frakce se odloží. Další dvě frakce se získají promýváním sloupce vodným roztokem pyridinu o koncentraci 2 objemová %. Tyto dvě frakce a další dvě frakce, získané rovněž použitím vodného roztoku pyridinu o koncentraci 2 objemová %, se slijí a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C.

Tímto způsobem se získá 2,3 g surového produktu. Tento surový produkt se rozpustí v 50 ml vroucího methanolu a získaný roztok se zchladí na 1 hodinu na teplotu přibližně 4 ’°C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 100 ml methanolu a pak třikrát celkovým množstvím 45 ml isopropyloxidu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C, za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 1,5 g kyseliny N-nikotinoyl-l,4-thiazin-3-karboxylové ve formě bílých krystalů o teplotě tání 212 °C.

ie

N-nikotinoyřMjé-thiazin-S-etíhylkaFibo^ylátr je možrrQ získat následujícím způsobem·.

K roztoku 8,8 g l,4-thiazin-3-e.t:hytkarboxylátu a 10,1 g triethylaminu ve 125 ml chloroformu se přidá v průběhu 25 minut při teplotě v rozmezí 24 až 38 °C 8,9 g hydrochloridu nikotinoylchloridu. Získaný roztok se míchá při teplotě přibližně 20 °C a pak se postupně přidá 10,1 g triethylaminu a pak v průběhu 15 minut při teplotě v rozmezí 24 až 36 °C ještě 8,9 g hydrochloridu nikOtinoylchloridu. Získaný roztok se míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 °C a pak ještě 2 hodiny za varu. Reakční směs se zchladí na teplotu přibližně 20 °C a přidá se směs 250 ml chloroformu a 100 ml destilované vody. Organická fáze se oddělí dekantací, pro,myje se 100 ml destilované vody a pak ještě dvakrát celkovým množstvím 300 mililitrů vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 2 N a dvakrát celkovým množstvím 200 ml destilované vody, vysuší se bezvodým uhličitanem draselným, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 “C.

Tímto způsobem se získá 17,5 g surového produktu. Tento produkt se chromatografuje na sloupci o průměru 6 cm s obsahem 480 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,04 až 0,063 mm. Sloupec se vymývá směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 98 : 2 při tlaku 51 kPa, přičemž se odebírají frakce o objemu 100 ml. 14 prvních frakcí se odloží. Dalších 9 frakcí se slije a odpaří do sucha za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 9,6 g N-nikotinoyl-l,4-thiazin-3-ethylkarboxylátu ve formě žluté olejovité kapaliny.

R₍ výsledného produktu je 0,35 při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu a při použití směsi ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 98 : 2 jako rozpouštědla.

l,4-thiazin-3-ethylkarboxylát je možno získat způsobem podle publikace B. Belloau, J. Med. Pharm. Chem, 2, 553 (1960). Příklad 4

Suspenze 11,2 g práškovaného hydroxidu draselného o 10,2 g směsi 6-kyano- a 7-kyano 5-(2-( 3-pyridyl) -vinyl 1 -lH,3H-pyrrolo[l,2-c]thiazolu v poměru 69:31 ve 110i ml terc.butylalkoholu se zahřívá 1 hodinu na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se rozpouštědlo odpaří za sníženého Maku

2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C. Ke směsi se přidá 200 ml destilované vody, vzniklé krys+alky se oddělí filtrací, čtyřikrát se promyjí celkovým množstvím 120 ml destilované vody a pak se suší za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Ijímto způsQbehl· se získá ·1Ί g,-'mírového produktu. Tentp produkt s.e chromatografuje nQ. sloupcLo průměru 3,2 cm, sloupec obsahuje 110 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,063 až 0,2 mm, odebírají se frakce po 1 000 ml. První frakce se získá při vymývání sloupce čistým methylenchloridem, druhá frakce se získá při vymývání sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 97,5 : 2,5, třetí frakce se získá při vymývání sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 95 : 5 a čtvrtá frakce se získá při promývání sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 92,5 : 7,5.

Všechny tyto frakce se odloží. Pátá frakce se získá vymýváním sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 90: 10 a šestá frakce vymývání sloupce methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 85:15. Všechny tyto frakce se slijí a odpaří do sucha za sníženého Maku 2,7 kPa při teplotě přibližně 40 stupňů Celsia.

Tímto způsobem se získá 3,7 g výsledného produktu o teplotě tání 180 °C. Tento produkt se rozpustí v 700 ml vroucího acetonitrilu. Po ochlazení na teplotu přibližně 4 stupňů Celsia na 1 hodinu se vzniklé krystaly oddělí filtrací a suší za sníženého tlaku

2,7 kPa a při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 2,4 g výsledného produktu. K tomuto produktu se přidá 0,9 g téhož produktu, připraveného stejným způsobem a výsledný materiál se chromatografuje na sloupci o průměru 2,8 cm s obsahem 35 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,063 až 0,2 mm, odebírají se frakce po 500 ml. První dvě frakce se získají ipři vymývání sloupce čistým methylenchloridem, další dvě frakce se získají při vymývání sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 97,5 : 2,5. Obě tyto frakce se odloží. Další pátá a šestá frakce se získá vymýváním sloupce směsí methylenchloridu a methanol v objemovém poměru 95 : 5, sedmá frakce se získá vymýváním sloupce směsí methylenchloridu a methanolu v objemovém poměru 90 :10. Tyto frakce se slijí a odpaří do sucha za sníženého tlaku

2,7 kPa, při teplotě přibližně 40 °C.

Tímto způsobem se získá 3,1 g výsledného produktu, který se rozpustí v 900 ml vroucího acetonitrilu. K roztoku se přidá 0,3 g aktivního uhlí a roztok se za tepla zfiltruje. Pak se roztok chladí 2 hodiny na teplotu přibližně 4 ^aC, čímž se vytvoří krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 60 ml acetonitrilu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 2,1 g 5-[2-(3-py13 ridyl) vinyl ] -lH,3H-pyrro^;lo [1,2-c ] -7-thiazol·karboxamidu o teplotě tání 242 C.

Směs 6-kyano- a 7-kyano-5-[2-(3-pyridyljvinyl]-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c jthiazolu v poměru 69 : 31, která se užívá jako výchozí materiál, Je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 13,2 g kyseliny N-[3-(3-pyridyl) akryloví]-4-thiazolidinkarboxylové ve směsi 39,6 ml 2-chlorakrylonitrilu a 52 ml anhydridu kyseliny octové se zahřívá 4 hodiny na teplotu přibližně 83 G. Po zchlazení n,a 16 hodin na teplotu přibližně 4 °C ss takto získané krystaly oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 10 ml anhydridu kyseliny octové a pak ještě třikrát celkovým množstvím 60 ml acetonu. Takto získaný produkt se uvede v, suspenzi v 70 ml destilované vody. Směs se upraví na pH přibližně 10 přidáním vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentrací 2 N. Pak se směs ještě 1 hodinu míchá při teplotě přibližně 20 °C, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 60 ml destilované vody, pak ještě dvakrát celkovým množstvím 40 ml acetonu, dvakrát celkovým množstvím 40 ml diethyletheru a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá směs 6-kyano- a

7-kyauo-5- [ 2- (3-pyridyl ] vinyl j -lH,3H-pyrrolo[ 1,2-c jthiazolu ve formě béžové krystalické látky o teplotě tání 170 °C.

Kyselinu N- [ 3- [ 2-pyridy 1) akryloyl ] -4-thiazolkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

K roztoku 22,5 g kyseliny 4-thiazolidinkarboxylové ve směsi 47 ml triethylaminu a 250 ml chloroformu se přidá v průběhu 30 minut při teplotě v rozmezí 20 až 35 ^aC celkem 34,1 g hydrochloridu 3-(3-pyridyl )akrylcylchloridu. Reakční směs se zahřívá 16 hodin na teplotu varu pod zpětným chladičem a pak se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2.7 kPa. K získanému odparku se přidá 500 ml destilované vody a roztok se zahřeje na teplotu varu pod zpětným chladičem. Pak se přidá 1 g aktivního uhlí, směs se za tepla zfiltruje a filtrát se zchladí na •16 hodin na teplotu 4 -'C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 100 ml destilované vody, pak ještě jednou 30 ml ethanolu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet při teplotě přibližně 20 ^JC.

Tímto způsobem se získá 21,1 g surového produktu o teplotě tání 173 °C. Tento produkt se rozpustí ve 400 ml vroucího ethanolu. Získaný roztok se smísí s 1 g aktivního uhlí a směs se za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na teplotu přibližně 4 °C na 16 hodin. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 40 ml ethanolu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 ^?C za přítomnosti hydroxidu draselného vc formě pelet.

Tímto způsobem se získá 13,5 g kyseliny N-[3-(3-pyridyl jakryloyl]-4 tlnlszolldiakarboxylové o teplotě tání 176 kl

Hydrochlorid 3- (3-pyridyl)akryloylchloridu je možno získat následujícím způsobem.

•200 ml .thienylchloridu se v průběhu 15 minut přidá k 50 g kyseliny 3-(3-pyridylj•akrylové. Reakční směs se pak zahřívá 5 hodin na teplotu varu pod zpětným chladičem. Přebytek thionylchloridu se oddestibije a reakční směs se odpaří do sucha po přidání 300 ml bezvodého cyklohexanu. Tento poslední stupeň se ještě jednou opakuje. K takto získanému odparku se přidá 200 ml chloroformu a výsledná směs se 15 minut zahřívá na teplotu varu pod zpětným chladičem. Po zchlazení se vytvoří krystaly, které se oddělí filtrací, promyjí se 50 ml chloroformu a pak ještě dvakrát celkovým množstvím 200 ml hexanu, načež se suší za sníženého tluku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 ’C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 55 g hydrochloridu 3-(3-pvridvijokryloylchlondu o teplotě tání 137 °C.

Kyselinu 3-(3-pyridyl j akrylovou je možno· získat způsobem, který byl popsán v publikaci L. Panizzon. Helv. Chim. Acta, 24, 24E (1.941).

Příklad 5

Suspenze 12,3 g práškovaného hydroxidu draselného a 11,3 g směsi 6-kyano- ,a 7-kyano-3-f enyl-5- (3-pyridyl) -lH,3H-pyrrolo[ 1,2-cjthiazolu v poměru 20 : £0 ve 260 ml terc.butylalkoholu se zahřívá 3 hodiny na teplotu varu pod zpětným chladičem Vzniklá suspenze se míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 ^CC a pak se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 ^:|C. Získaný odparek se uvede v suspenzi ve 300 ml destilované vody a suspenze se extrahuje třikrát celkovým množstvím 750 ml ethylacetátu. Organické extrakty se slijí, třikrát se promyjí celkovým množstvím 300 ml destilované vody, vysuší se bezvodýra síranem horečnatým, přidá se 0,5 y aktivního uhlí, směs se zfiltruje a odpaří do sucha za sníženého tisku 2.7 kPa nři teolotě přibližně 60 °C. ’ Tímto způsobem se získá 9,2 g surového produktu. Tento produkt se chroínatografuie na sloupci o průměru 6 cm s obsahem 480 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,04 sž 0.063 min. Sloupec se vymývá směsí ethylacetátu n msthsnolu v objemovém poměru 95 : 5 při tlaku 51 kPn, přičemž se odebírají frakce o ohiemu 200 ml. Deset •prvních frakcí se odloží. Dvanáct následujících frakcí se slije a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobeni se získá 7 g výsledného produktu. Tento produkt se rozpustí ve 140 'mililitrech ethanolu a k získanému roztoku se přidá 3,1 ml ethanolového roztoku kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 2 N a směs se pak míchá při teplotě přibližně 20 stupňů Celsia ještě 15 minut. Vytvoří se krystalky, které se oddělí filtrací, promyjí se dvakrát celkovým množstvím 50 ml ethanolu a třikrát celkovým množstvím 75 mililitrů diethyletheru a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného vc formě pelet.

Tímto· způsobem se získá 6 g hydrochloridu 3-fenyl-5-(3-pyridyl)-lH,3ÍI-pyrrolo[l,2-c]-7-thiazolkarboxamidu ve formě žluté krystalické pevné látky o teplotě tání 250 °C.

Směs 6-kyano- a 7-kyano-3-fenyl-5-(3-pyrid.yl)-lH,3H-pyrrolof 1,2 ci thiazolu v poměru 20 : 80 je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 45,2 g kyseliny N-nikoíinoyl-2-fenyl-4-thiazolidiniscrboxylové ve směsi 115 mililitrů 2-chlorakrylonitrllu a 180 ml nnhydridu kyseliny octové se zahřívá 3 hodiny na teplotu přibližně 90 °C a získaný roztok se míchá 16 hodin při teplotě přibližně •20 °C. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého ‘tlaku. 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C a odparek se smísí při teplotě přibližně 4 °C se směsí 300 ml destilované vody, 400 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 10 N a 500 ml ethylacetátu. Organická fáze se oddělí dekantací a vodná fáze se extrahuje třikrát celkovým množstvím 1 500 ml ethylacetátu ® čtyřikrát celkovým množstvím 2 000 ml methylenchloridu. Organické extrakty se slijí, čtyřikrát se promyjí celkovým množstvím 1 000 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem hořecnatým, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

¹ Tímto způsobem se získá 33,8 g surového produktu. Tento produkt se chromatografu·· je na sloupci o průměru 6 cm s obsahem 480 g kysličuíku křemičitého o průměru částic 0,04 až 0,063 mm. Sloupec se vymý vá směsí cyklohexanu a ethylacelátu v objemovém poměru 50 : 50 při tlaku 5¹ U’· a odebírají se frakce po 100 ml. Sedmnáct prvních frakcí se odloží, čtrnáct dalších, se slije a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímtoi způsobem se získá 11,3 g směsi 6-kyano- a 7-kyano-5-(3-pyrid.yl)-lH,3H-pyrrolo[l,2-c] thiazolu v poměru 20 : 80, jak bylo prokázáno NMR-spektrem, ve formě hnědé olejovlté kapaliny.

R_f -- 0,35 a 0,4 při chromatografii na tenké vrstvě kysličníku křemičitého při použití směsi cyklohexanu o ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50 jako rozpouštědla.

Kyselinu N-nikotinoyl-2-fenyl-4-thiazol16 idinkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

K roztoku 94,2 g kyseliny 2-fenyl-4-thiazolidinkarboxylové a 100 g triethylaminu v 1120 ml chloroformu se v průběhu 20 minut při teplotě 32 až 54 °C přidá 88,1 g hydrochloridu nikotinoylchloridu. Získaný roztok se zahřívá 5 hodin na- teplotu přibližně 63 ^C‘C a pak se míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 °C. Dojde ke krystalizaci produktu, vzniklá suspenze se zchladí na 1 hodinu na teplotu přibližně 4 °C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 300 ml chloroformu a pa.k se suší za sníženého tlaku

Tímto způsobem se získá 145 g surového produktu o teplotě tání 150 °C. Tento produkt se uvede v suspenzi v 750 ml destilované vody. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 750 ml destilované vody a pak se suší na vzduchu.

Tímto způsobem se získá 99,9 g výsledného produktu o teplotě tání 182 °C. 15 g tohoto produktu se rozpustí ve 200 ml vroucího ethanolu. K získanému roztoku se přidá 0,5 g aktivního uhlí a roztok se za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na teplotu přibližně 4 C na 1 hodinu, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 5Ό ml ethanolu a třikrát celkovým množstvím 75 ml diethyletheru a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 11,4 g kyseliny N nikotinoyi-2-efnyl-4-thiazolidinkarboxylové ve formě bílé krystalické látky o teplo 16 tání 186 °C.

Kyselinu 2-fenyl-4-thiazolidinkarboxyⁱlovou je možno získat způsobem podle publikace R. Riemschneider a G. A. I-Ieyer, Z. Naturforsch., 17 B, 765 [1962).

1’ ř í k 1 a d 6

Suspenze 20,4 g práškovaného hydroxidu draselného a 17,6 g směsi 6-kyano- a 7-kyan >-3-methyl-5-(3-pyridyl)-lH 3H-pyrrolo[1,2-cl thiazolu v poměru 50:50 ve 200 mi terc.butylslkoholu se zahřívá 1 hodinu a 20 minut na teplotu varu pod zpětným chladičem. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C. Odparek se přidá ke směsi 200 ml destilované vody o 100 ml methylenchloridu. Organická fáze se oddělí dekantací a vodná fáze se čtyřikrát promyje celkovým množstvím 400 ml methylenchloridu. Organické extrakty se slijí, pětkrát se promyjí celkovým množstvím destilované vody, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, zfiltrují a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C.

Tímto způsobem se získá 19 g výsledného produktu. Tento produkt se rozpustí v 50 mililitrech methylenchloridu. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 15 ml methylenchloridu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 6,1 g výsledného produktu o teplotě tání 170 °Č. Filtrát se chromatografuje na sloupci o průměru 6 cm s obsahem 480 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,04 až 0,063 mm. Sloupec se vymývá směsí ethylacetátu a methanolu pod tlakem 51 kPa a odebírají se frakce po 250 ml. Prvních 13 frakcí se získá promýváním sloupce směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 97,5 : 2.5. Tyto frakce se odloží. Další 3 frakce se získají při promývání sloupce směsí ethylacetátu a methanolu v objemovém poměru 95 : 5, následující tři frakce se získají při promývání sloupce směsí ethylacetátu a methanolu rovněž v objemovém poměru 95 : 5, tyto frakce se slijí a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C.

Tímto způsobem se získá ještě 3,1 g výsledného produktu, který se spojí s dříve získanými 6,1 g a materiál se rozpustí v· 90 mililitrech vroucího isopropanolu. Získaný roztok se smísí s 0,5 g aktivního uhlí a za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na teplotu přibližně 4 °C na 1 hodinu. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 6 ml isopropanolu, zchlazeného· na teplotu přibližně 4 °C a třikrát celkovým množstvím 30 ml diethyl•etheru, načež se suší za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě ipelet.

Tímto způsobem se získá 5,6 g 3-methyl-5 (3-pyridyl} -lH,3H-pyrr olo [ 1,2-c j -7-thtazolkarboxamidu ve formě krémově zbarvené krystalické látky o teplotě tání 170 °C.

Směs 6-kyano- a 7-kyano-3-methyl-5-(3-pyridyl)-lH,3H-pyrrolo[ 1,2-cjthiazolu v poměru 50 : 50 je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 36,3 g kyseliny N-nikotinoyl-2-methyl-4-thiazolidinkarboxylové ve směsi Ί15 ml 2-chlorakrylonitrilu a 200 ml anhyd•ridu kyseliny octové se zahřívá 3 hodiny na teplotu přibližně 90 °C. Získaný roztok se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 70 °C a získaný odparek se smísí s 200 ml destilované vody. Vzniklá suspenze se upraví na pH přibližně 10 přidáním 80 ml. vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 10 N, přičemž reakční směs se udržuje na teplotě přibližně 20 °C. Získaná suspenze se smísí s 250 ml •methylenchloridu a směs se míchá 16 hodin při teplotě 20 °C. Organická fáze se oddělí slitím a vodná fáze se pětkrát extrahuje celkovým množstvím 500 ml meíhylenchloridu. Organické extrakty se slijí, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 500 ml destilované vody a pětkrát celkovým množstvím 400 ml vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové o koncentraci 2 N.

Vodná fáze se oddělí dekantací, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje, upraví na pH přibližně 10 přidáním vodného roztoku hydroxidu sodného· o koncentraci Ί0 N a pak se pětkrát extrahuje celkovým množstvím 500 ml ethylenchloridu. Organické extrakty se slijí, vysuší se bezvodým síranem horečnatým, přidá se 0,5 g aktivního uhlí a směs se zfiltruje a filtrát se odpaří clo sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 50 C.

Tímto způsobem se získá 3 9,3 g surového produktu. Tento produkt se chromatografuje na sloupci o průměru 6 cm s obsahem 430 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,04 mm až 0,063 mm. Sloupec se vymývá směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50 pod tlakem 5 kPa, odebírají se frakce po 200 ml. Osm prvních frakcí se odloží, dalších osm frakcí se slije, odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při- teplotě přibližně 50 °C, čímž se získá 17,8 g směsi 6-kyano- a 7-kyano-3-methyl-5- (3-pyridyl) -lH,3H-pyrrolo [ 1,2-c ] thiazolu ve formě žluté olejovité kapaliny v poměru 50 : 50, jak je možno prokázat NMR-spektrem.

R_f ~ 0,35 a 0,4 při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu při použití směsi cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50 jako rozpouštědla.

Kyselinu N-nikotinoyl-2-methyl-4-thiazolidinkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

K suspenzi 44,1 g kyseliny 2-raethyl-4-thiazolidinkarboxylové a 61,8 g triethylaminu v 500 ml chloroformu se přidá v průběhu 25 minut při teplotě v rozmezí 20 až 47 'C celkem 53,4 g hydrochloridu nikoti.noylchloridu. Získaná suspenze se zahřívá 1 hodinu a 45 minut na teplotu přibližně 65 stupňů Celsia -a pak se získaný roztok míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 ^CC. Rozpouštědlo· se utvoří za sníženého tlaku '2,7 kPa při teplotě přibližně 50 °C a získaný odparek se uvede do· suspenze v 300 ml acetonu. Po dvou hodinách míchání při teplotě přibližně 20 ^:C se vzniklé krystaly oddělí filtrací, dvakrát se promyjí celkovým množstvím 400 ml acetonu a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet. Získaná pevná látka se uvede do suspenze ve 250 ml destilované vody a vzniklé krystaly se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 450 mililitrů destilované vody a třikrát celkovým množstvím 60 ml acetonu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě 'přibližně 20 °C .za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

Tímto způsobem se získá 36,5 g kyseliny N-nikotinoyl-2-methyl-4-thiazoli'dinkarboxylové ve formě krémově zbarvené krystalické pevné látky o teplotě tání 190 °C.

Kyselinu 2-methyl-4-thiazolidin.k,arboxylovou je možno získat způsobem, popsaným v publikaci Η. T. Nagasawa, D. J. W. Goon, R. T. Žera a D. L. Yuzon, J. Med. Chem., 25, 489 (1982).

Příklad 7 <13 hodin se zahřívá na teplotu přibližně 80 °C suspenze 5,2 g 3-(3-pyridyl )-5,6,7,8-tetrahydro-l-indolizinkarbonitrilu a 7,7 g 'práškovaného hydroxidu draselného ve 120 mililitrech terc.butylalkoholu. Získaná suspenze se odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C. Získaný odparek se smísí s 200 ml destilované vody a získaná suspenze se 1 hodinu míchá při teplotě přibližně 20 °C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, pětkrát se promyjí celkovým množstvím 250 ml destilované vody a pak se suší za sníženého tlaku

¹ Tímto způsobem se získá 4,1 g surového produktu o teplotě tání 180 °C. K tomuto produktu se přidá ještě 1,1 g téhož produktu, získaného stejným způsobem a materiál se rozpustí ve 160 ml vroucího acetonitrilu. K získanému zakalenému roztoku se přidá 0,5 g aktivního uhlí a směs se za tepla zfiltruje. Filtrát se zchladí na 2 hodiny na teplotu přibližně 4 °C. Vytvoří se krystaly, které se oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým množstvím 75 ml acetonitrilu a třikrát celkovým množstvím 75 ml isopropylůxidu, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného' ve formě pelet.

Tímto způsobem se získají 4 g 3-(3-pyridyl )-5,6,7,8-tetrahydro-l-indolizinkarhox,amidu ve formě jemně béžové krystalické pevné látky o teplotě tání 184 °C.

¹ 3- (3-pyridyl) -5,6,7,8-tetrahydro-l-indoizinkarbonitrilu je možno získat následujícím způsobem.

Suspenze 14,7 g kyseliny N-nikotinoyl-2-piperidinkarboxylové ve směsi 50 ml 2-chlorakrylonitrilu a 65 ml anhydridu kyseliny octové se zahřívá 4 hodiny na teplotu 'přibližně 90 °C. Po 16 hodinách míchání při teplotě 20 ^aC vzniknou krystaly, které se Oddělí filtrací, třikrát se promyjí celkovým tanožstvím 75 ml anhydridu kyseliny octové 'a pak se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 20 °C za přítomnosti 'hydroxidu draselného ve formě pelet.

' Tímto· způsobem se získá 10 g produktu, který se rozpustí ve 100 ml destilované vody. Po přidání 50 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci 10 N při teplotě přibližně 10 °C se získá suspenze, která 'se 1 hodinu míchá při teplotě přibližně 20 stupňů Celsia a pak se třikrát extrahuje Celkem 450 ml ethylacetátu. Organické extrakty se slijí, třikrát se promyjí celkovým množstvím 300 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem hořečnatým, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a filtrát se odpaří do sucha za sníženého tlaku '2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

' Tímto způsobem se získá 8,8 g výsledného produktu, který se chromatografuje na sloupci o průměru 6 cm s náplní 580 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,04 až 0,063 mm, sloupec se vymývá ethylacetátem pod tlakem 51 kPa, přičemž se odebírají frakce o, objemu 10Ό ml. Prvních čtr'náct frakcí se odloží, dalších šest frakcí se 'slije a odpaří do sucha za sníženého tlaku

2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 5,2 g 3-(3-,pyridy 1) -5,6,7,8-tetrahydro-l-indolizinkarbonitrilu ve formě špinavě bílých krystalů o teplotě tání 112 °C.

Kyselinu N-nikotinoyl-2-piperidinkarboxylovou je možno získat následujícím způsobem.

Roztok 34,1 g N-nikotinoyl-2-piperidin'ethylkarboxylátu ve směsi 130 ml vodného roztoku hydroxidu sodného o koncentraci '2 N a 325 ml ethanolu se míchá 16 hodin ,při teplotě přibližně 20 °C. Pak se rozpouštědlo' odpaří za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C. Získaný odparek se 'rozpustí ve 250 ml destilované vody. K získanému zakalenému roztoku se přidá 0,5 g aktivního uhlí a roztok se zfiltruje. Filtrát se udržuje na teplotě 20 °C a současně se upraví pH na hodnotu přibližně 3 přidáním '80 ml vodného roztoku kyseliny chlorovo·díkové o koncentraci 4 N. Vznikne suspenze, která se míchá 1 hodinu při teplotě přibližně 20 °C, vzniklé krystaly se oddělí filtrací, čtyřikrát se promyjí celkovým množstvím 200 ml destilované vody, pak třikrát celkovým množstvím 150 ml acetonu a jednou 50 ml diethyletheru, načež se suší za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližme 20 °C za přítomnosti hydroxidu draselného ve formě pelet.

' Tímto způsobem se získá 14,8 g kyseliny N-nikotinoyl-2-piperidinkarboxylové ve formě bílé krystalické látky o teplotě tání 194 stupňů Celsia.

N-nikotinoyl-2-piperidinethylkarboxylát je možno získat následujícím způsobem.

K roztoku 72,9 g 2-piperidinethylkarboxylátu v· 1120 ml chloroformu se přidá 182 g 'triethylaminu při teplotním rozmezí 20 až 31 °C a pak v průběhu 35 minut při teplotě v rozmezí 26 až 50 °C ještě 160,2 g hydrochloridu níkotinoylchloridu. Získaná suspenze se míchá 16 hodin při teplotě přibližně 20 °C a pak se pětkrát promyje celkovým množstvím 1 500 ml destilované vody, vysuší se bezvodým síranem hořečna259548 tým, přidá se 0,5 g aktivního uhlí, směs se zfiltruje a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě 60 ^aC.

Tímto způsobem se získá 174 g surového produktu, který se chromatografuje na sloupci o průměru 8 cm s obsahem 1 740 g kysličníku křemičitého o průměru částic 0,063 až 0,2 mm, sloupec se vymývá směsí cyklohexanu a ethylacetátu a odebírají se frakce po 1000 ml. Pět prvních frakcí se získá vymýváním sloupce směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 80: 20, dalších pět frakcí se získá vymýváním sloupce směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 70 : 30, dalších sedm frakcí se získá vymýváním sloupce směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 60: 40 a další frakce se získá vymytím sloupce směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50.

Všechny tyto frakce se odloží. Následujících osm frakcí, které se získají vymýváním sloupce směsí cyklohexanu a ethylacetátu v objemovém poměru 50 : 50 a dalších sedm frakcí, získaných vymytím sloupce čistým ethylacetátem, se slije a odpaří do sucha za sníženého tlaku 2,7 kPa při teplotě přibližně 60 °C.

Tímto způsobem se získá 99,3 g N-nikotinoyl-2-piperidinethylkarboxylátu ve formě oranžově zbarvené olejovité kápaliny.

R_f = 0,46 při chromatografii na tenké vrstvě silikagelu při použití ethylacetátu jako elučníhoi činidla.

Popis farmakologických zkoušek

a) Inhibice shlukování krevních destiček, vyvolaného kolagenem in vitro

Shlukování krevních destiček plasmy králíka, bohaté na destičky se po vyvolání kolagenem za míchání měří zvětšením tramsmise světla směsí.

Čerstvá krev králíka (citrotovanáj se odstředí při 100 g celkem 20 minut při teplotě 15 °C. Získá se plasma, bohatá na destičky (PRP), obsahující alespoň 50 000 destiček v mm³.

0,2 ml PRP se uloží do polystyrénové zkumavky s obsahem silikónované železné tyčinky a přidá se 0,025 ml pufru tris-HCl o koncentraci 0,05 M a o pil 7,4. Po předběžné inkubaci 10 minut při teplotě 37 ^aC se přidá 0,025 ml suspenze kolagenu o koncentraci 25 ,gg/ml. Průchod světla se měří 10 minut a vypočítá se rozdíl TM mezi průchodem světla plasmou před počátkem shlukování a mezi průchodem v čase t, kdy bylo dosaženo maxima průchodu světla.

Aby bylo možno sledovat inhibiční účinek produktu na shlukování destiček, vyvolané kolagenem, nahradí se 0,025 ml pufru tris-HC1 o koncentraci 0,05 M a pH 7,4 množstvím 0,0.25 ml produktu v roztoku v tomtéž pufru. Po 10 minutách předběžné inkubace při teplotě 37 °C se přidá suspenze kolagenu.

Pro každou koncentraci c sledované sloučeniny se vypočítá rozdíl Tc (transmise před počátkem shlukování minus transmise v čase tj. Pak se zakreslí křivka, udávající Tc jako funkci c, vyjádřeno v mg/l reakčního prostředí. Místu křivky, v němž Tc TM = f(cj a pořadnice má hodnotu —- — odpovídá hodnota úsečky c — CIso, tj. koncentrace produktu, která vyvolá 50% inhibici shlukování, vyvolaného působením kolagenu.

b) Toxicita

Stanoví se dávka DLso, která po podání myším perorálně způsobí uhynutí 50 % těchto zvířat.

Výsledky těchto pokusů jsou uvedeny v následující tabulce:

T a b u 1 k a

Příklad číslo	DLso pro myš mg/kg ,p. o.	Agregace u králíka CIso mg/l
1	300 až 900	0,5
2	300 až 900	6
3	> 900	6
4	300 až 900	4,5
5	300 až 900	5
6	100 až 300	10
7	300 až 900	0,7

259540

Claims

PŘEDMĚT

VYNÁLEZU ,1. Způsob výroby nových heterocyklických sloučenin obecného vzorce I vyznačující se tím, že se hydrolyzuje nitril obecného vzorce II

Ύ^: i

CONi-L

5 Z-

H-í

CN

A, A—LL- (ch ~ch

C!-!J ýn i!!) (!)

H // W

Ύζ../ kde

A znamená atom síry nebo methylenový zbytek,

R3 znamená atom vodíku, alkylový zbytek o 1 až 4 atomech uhlíku s přímým nebo rozvětveným řetězcem nebo fenylový zbytek, n znamená celé číslo 0 nebo 1, :P znamená celé číslo 0 nebo 1, kde jednotlivé symboly mají svrchu uvedený význam, zahřátím v alkalickém prostředí v terč.butanolu na teplotu 30 až 85 °C, získaný produkt se izoluje a popřípadě převede na adiční sůl s kyselinou.
2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že se hydrolyzuje nitril obecného vzorce II, v němž R3 znamená atom vodíku a ostatní symboly mají svrchu uvedený význam.

Severografia, n. p. závod 7, Most