CS245343B1 - Sposob přípravy p-difenol oxidázy - Google Patents
Sposob přípravy p-difenol oxidázy Download PDFInfo
- Publication number
- CS245343B1 CS245343B1 CS851880A CS188085A CS245343B1 CS 245343 B1 CS245343 B1 CS 245343B1 CS 851880 A CS851880 A CS 851880A CS 188085 A CS188085 A CS 188085A CS 245343 B1 CS245343 B1 CS 245343B1
- Authority
- CS
- Czechoslovakia
- Prior art keywords
- parts
- diphenol oxidase
- fomentarus
- fomes
- diphenol
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 12
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 8
- 108010029541 Laccase Proteins 0.000 title abstract description 10
- 241000123326 Fomes Species 0.000 claims abstract description 10
- RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N o-toluidine Chemical compound CC1=CC=CC=C1N RNVCVTLRINQCPJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 239000005018 casein Substances 0.000 claims abstract description 6
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 6
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 claims abstract description 6
- CDULGHZNHURECF-UHFFFAOYSA-N 2,3-dimethylaniline 2,4-dimethylaniline 2,5-dimethylaniline 2,6-dimethylaniline 3,4-dimethylaniline 3,5-dimethylaniline Chemical group CC1=CC=C(N)C(C)=C1.CC1=CC=C(C)C(N)=C1.CC1=CC(C)=CC(N)=C1.CC1=CC=C(N)C=C1C.CC1=CC=CC(N)=C1C.CC1=CC=CC(C)=C1N CDULGHZNHURECF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 claims abstract description 5
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 claims abstract description 5
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 5
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 claims abstract description 5
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 claims description 7
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 claims description 7
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 4
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims description 4
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 claims description 4
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 3
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims description 3
- 108050001049 Extracellular proteins Proteins 0.000 claims description 2
- 238000007664 blowing Methods 0.000 claims description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 2
- 238000005185 salting out Methods 0.000 claims description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 3
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 abstract description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 abstract description 3
- 231100000027 toxicology Toxicity 0.000 abstract description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract description 2
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 239000011707 mineral Substances 0.000 abstract description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 6
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 4
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L iron(2+) sulfate (anhydrous) Chemical compound [Fe+2].[O-]S([O-])(=O)=O BAUYGSIQEAFULO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910000359 iron(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 2
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 2
- 241000222481 Schizophyllum commune Species 0.000 description 2
- ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate Chemical compound [Cu+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] ARUVKPQLZAKDPS-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000366 copper(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 229910000357 manganese(II) sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 2
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 241000223678 Aureobasidium pullulans Species 0.000 description 1
- 241000221198 Basidiomycota Species 0.000 description 1
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 1
- QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N Hydroquinone Chemical compound OC1=CC=C(O)C=C1 QIGBRXMKCJKVMJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 235000019799 monosodium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M sodium dihydrogen phosphate Chemical compound [Na+].OP(O)([O-])=O AJPJDKMHJJGVTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Vynález sa týká sposobu přípravy enzýmu
p-difenol oxidázy.
Vynález rieši sposob přípravy p-difenol
oxidázy kultiváciou drevokaznej huby Fomes
fomentarus. Uvedeného účelu sa dosiahne
tým, že izolovaný kmeň Fomes fomentarus
sa kultivuje submerzne na pode s D-glukózou,
kazeínom minerálnymi látkami, tiamínom,
xylidínom alebo o-toluidínom v teplotnom
rozmedzí 20 až 40 °C.
Vynález má využitie v medicíně, klinickej
biochémii a toxikologii a v analytickej chemii
pri identifikácii škodlivin v prostředí.
Description
3 4 243343
Vynález sa týká spůsobu přípravy p-dife-nol oxidázy (p-difenol oxigen oxidoreduktá-za EC 1.10,3.2).
Pri príprave p-difenol oxidázy sa vychá-dza obyčajne z mikroskopických háb, napr.z Aureobasidium pullulans (Růsch R., LieseW., Berndt H.: Arch. Mikrobiol. 67, 28 /1969/)alebo Schizophyllum commune (Leonard P.j., Phillips L. E.: J. Bacteriol. 7, /1973/). Priizolácii a purifikácii uvedeného enzýmu saobyčajne frakcionujú bielkoviny získané zfermentačnej půdy zrážaním síranem amón-nym, organickými rozpúšťadlami alebo za po-užitia afinitných technik. Nevýhodou uvede-ných postupov je ich zdíhavosť, náročnostna použité materiály, predovšetkým v přípa-de přípravy afinantov.
Uvedené nedostatky rieši postup podlá vy-nálezu, využívajúci k príprave p-difenol oxi-dázy drevokazné huby druhu Fomes, ktorýpatří medzi Basidiomycetes. Podstata vyná-lezu spočívá v tom, že drevokazná huba Fo-mes fomentaru (Linne ex Fries) Kickx sakultivuje submerzne na pode zloženej z 10až 30 hmot. dielov D-glukózy, 1 až 3 dielovkazeínu, 0,5 až 12 dielov KH2PO4, 0,1 až 0,3diela NaH2PO4.12 H2O, 0,1 až 1 diel MgSO4,0,001 až 0,003 diela CuSO4, 0,0005 až 0,002diela ZnSO4, 0,0005 až 0,002 diela MnSOá,0,005 až 0,015 diela FeSO4, 0,005 až 0,015 die-la CaCl2, 0,00002 až 0,00008 diela tiamínu,0,1 až 0,001 diela xylidínu alebo o-toluidínuv 1 000 dieloch vody, pričom kultivácia pre-bieha pri 20 až 40 °C po dobu 250 až 750 ho-din za súčasného prevzdušňovania vháňa-ním vzduchu rýchlosťou 0,05 až 0,2 objemo-vého diela za minútu a v následnej izoláciiuvolnenej p-difenol oxidázy ako jedinej ex-tracelulárnej bielkoviny vysolením zrážanímorganickými rozpúšťadlami, alebo inými zná-mými postupmi. Výhodou navrhovaného postupu je jedno-duchost přípravy p-difenol oxidázy ako ajskutečnost, že na kultivačnej póde o hore-uvedenom zložení huba Fomes fomentarusuvolňuje ako jedinú enzýmaticky aktívnubielkovinu předmětný enzým do extracelu-lárneho prostredia. Příklad 1
Drevokazná huba Fomes fomentarus (Lin-ne ex Fries) Kickx kmeň 191 uložený v Zbier-ke kultur drevokazných húb Štátneho dre- várskeho výskumného ústavu v Bratislavě sakultivovala v desiatich Erlenmayerovýchbankách (objem 2 1), obsahu júcich 400 mlkultivačnej půdy zloženej z 10 g D-glukózy,1 g kazeínu, 0,5 g KH2PO4, 0,1 g NaH2PO4. . 12 H2O, 0,1 g MgSOá, 1 mg CuSO4, 5 mgZnSO4, 0,5 mg MnSO4, 5 mg FeSO4, 5 mgCaCl2, 0,02 mg tiamínu a 0,001 g o-toluidínuv 1 000 ml vody po dobu 750 hodin pri tep-lotě 20 °C na kultivačnom zariadení o frek-vencii 20 kmitov za minútu a amplitúde 25cm.
Po oddělení mycélia centrifugáciou pri 1 500 g po dobu 15 minút sa získaný super-natant zrážal síranom amónnym do nasýte-nia roztoku. Získaná zrazenina, odpovedajú-ca 4 1 kultivačnej půdy obsahovala 1,2 g biel-koviny p-difenol oxidázy o aktivitě 24 ,ukat.Příklad 2
Postupuje sa ako v příklade 1 s tým roz-dielom, že sa použil kmeň Fomes fomenta-rus 22 rovnakej zbierky, ako je uvedené vpříklade 1, ktoré sa kultivoval submerznevo fermentore o objeme 20 1, na kultivačnejpode o zložení 30 g D-glukózy, 3 g kazeínu, 2 g KH2PO4, 0,3 g Na2HPO4.12 H2O, 1 gramMgSO4, 3 mg CuSOá, 2 mg ZnSOá, 2 mg MnSOá,15 mg FeSO4, 15 mg CaCl2, 0,08 mg tiamínua 0,1 g xylidínu v 1 litri půdy pri 40 °C, podobu 250 hodin za prevzdušňovania rýchlos-ťou 0,05 1 vzduchu za minútu na 1 liter kul-tivačnej půdy.
Po odstránení biomasy sa získaný super-natant v množstve 20 1 zrážal 96 % etano-lom v objemovom pomere 1: 5. Získaná zra-zenina obsahovala 6,5 g bielkoviny, obsahu-júcej výlučné p-difenol oxidázu o aktivitě200 ^kat. Příklad 3
Postupuje sa ako v příklade 2 s tým roz-dielom, že sa kultivačná půda prevzdušňujesterilným vzduchom o rýchlosti 0,2 1 na 1liter kultivačnej půdy za minútu. Po spraco-vaní, tak ako je uvedené v příklade 2 sa zís-kalo 6,4 g bielkoviny, obsahujúcej výlučnép-difenol oxidázu o aktivitě 216 ^kat.
Vynález může nájsť široké uplatnenie vmedicíně, klinickej biochémii a toxikológiia v analytickej chémii pri identifikácii škod-livin v životnom prostředí.
Claims (1)
- η» «έ ίύ 4 PREDMET Spósob přípravy p-difenol oxidázy vyznače-ný tým, že drevokazná huba Fomes fomen-tarus (Linne ex Fries) Kickx sa kultivujesubmerzne na pode zloženej z 10 až 30 hmot.dielov D-glukózy, 1 až 3 dielov kazeínu, 0,5až 2 dielov KH2PO4, 0,1 až 0,3 diela NallPCU. . 12 H2O, 0,1 až 1 diel MgSCU, 0,001 až 0,003diela CuSOá, 0,0005 až 0,002 diela ZnSOd,0,0005 až 0,002 diela MnSCU, 0,005 až 0,015diela FeSCU, 0,005 až 0,015 diela CaCl2,0,00002 až 0,00008 diela tiamínu a 0,001 až VYNÁLEZU 0,1 diela xylidínu alebo o-toluidínu v 1 000dieloch vody, pričom kultivácia prebieha pri20 až 40 °C po dobu 250 až 750 hodin za sú-časného prevzdušňovania vháňaním vzdu-chu rýchlosťou 0,05 až 0,2 objemového dielaza minútu a v následnej izolácii uvoTnenejp-dlfenol oxidázy, ako jedinej extracelulár-nej bielkoviny vysolením, zrážaním organic-kými rozpúšťadlami alebo inými běžnými po-stupmi.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS851880A CS245343B1 (cs) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | Sposob přípravy p-difenol oxidázy |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CS851880A CS245343B1 (cs) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | Sposob přípravy p-difenol oxidázy |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CS188085A1 CS188085A1 (en) | 1985-11-13 |
| CS245343B1 true CS245343B1 (cs) | 1986-09-18 |
Family
ID=5354285
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CS851880A CS245343B1 (cs) | 1985-03-18 | 1985-03-18 | Sposob přípravy p-difenol oxidázy |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CS (1) | CS245343B1 (cs) |
-
1985
- 1985-03-18 CS CS851880A patent/CS245343B1/cs unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CS188085A1 (en) | 1985-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rao et al. | The effect of surface growth of blue-green algae and bryophytes on some microbiological, biochemical, and physical soil properties | |
| Fåhraeus | Formation of Laccase by Polyporus Versicolor in Different Culture Media. | |
| CN103627662B (zh) | 一种花生慢生根瘤菌及其用途 | |
| KR20010023494A (ko) | 벼 도열병 방제제 및 밀 적청병 방제제 | |
| CN102827794B (zh) | 一株地中海假单胞菌及其应用 | |
| RU93000541A (ru) | Способ получения энтомопатогенного препарата | |
| Hara et al. | A Study on the Mechanism of DNA Excretion from P. aeruginosa KYU-1 Effect of Mitomycin C on Extracellular DNA Production | |
| JPS6438049A (en) | Antimicrobial agent for human or animal | |
| Yusef | The requirements of some Hymenomycetes for essential metabolites | |
| Brown | Activity of glucanases of Zygorrhynchus moelleri in relation to antagonism against some soil‐borne plant pathogenic fungi | |
| SE453836B (sv) | Biologiskt ren kultur av saccharomyces cerevisiae samt dess anvendning for hydrolys av raffinos | |
| CN111019872B (zh) | 一株内生解淀粉芽孢杆菌jl-b06及其应用 | |
| Macris et al. | Solid state fermentation of straw with Neurospora crassa for CMCase and β-glucosidase production | |
| JPS63216888A (ja) | ミルベマイシン誘導体の微生物利用による製造方法 | |
| Strzelczyk et al. | Cellulolytic and pectolytic activity of streptomycetes isolated from root-free soil, rhizosphere and mycorrhizosphere of pine (Pinus sylvestris L.) | |
| CS245343B1 (cs) | Sposob přípravy p-difenol oxidázy | |
| Elorza et al. | Production of yeast cell-wall lytic enzymes on a semi-defined medium by a Streptomyces | |
| EP0136850A2 (en) | Herbicide | |
| Martin et al. | Studies on the production of Scytalidium acidophilum biomass | |
| Uno et al. | Presence of multiple protein kinase activities in Coprinus macrorhizus | |
| Tatum et al. | Essential growth factors for propionic acid bacteria: II. Nature of the Neuberg precipitate fraction of potato | |
| Virtanen et al. | Investigations on the root nodule bacteria of leguminous plants: Breakdown of proteins by the root nodule bacteria | |
| CN116286457B (zh) | 初农亮杆菌新物种及其应用 | |
| Ogundero | Cultural and nutritional studies of zoopathogenic fungi associated with livestock feeds in Nigeria | |
| US3997397A (en) | Production of proteic materials from yeast cells |