CS244688B2 - New variety of amomile cultivating method - Google Patents

New variety of amomile cultivating method Download PDF

Info

Publication number
CS244688B2
CS244688B2 CS844737A CS473784A CS244688B2 CS 244688 B2 CS244688 B2 CS 244688B2 CS 844737 A CS844737 A CS 844737A CS 473784 A CS473784 A CS 473784A CS 244688 B2 CS244688 B2 CS 244688B2
Authority
CS
Czechoslovakia
Prior art keywords
plants
flowers
chamomile
seed
chamazulene
Prior art date
Application number
CS844737A
Other languages
Czech (cs)
Other versions
CS473784A2 (en
Inventor
Franz Chlodwig
Otto Isaac
Original Assignee
Degussa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=6202680&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CS244688(B2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Degussa filed Critical Degussa
Publication of CS473784A2 publication Critical patent/CS473784A2/en
Publication of CS244688B2 publication Critical patent/CS244688B2/en

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C11ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11BPRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B9/00Essential oils; Perfumes
    • C11B9/02Recovery or refining of essential oils from raw materials
    • C11B9/025Recovery by solvent extraction
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/14Asteraceae or Compositae, e.g. safflower, sunflower, artichoke or lettuce
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H1/00Processes for modifying genotypes ; Plants characterised by associated natural traits
    • A01H1/04Processes of selection involving genotypic or phenotypic markers; Methods of using phenotypic markers for selection
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/02Flowers
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A01AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01HNEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H6/00Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their botanic taxonomy
    • A01H6/74Rosaceae, e.g. strawberry, apple, almonds, pear, rose, blackberries or raspberries
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/28Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C11ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
    • C11BPRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
    • C11B9/00Essential oils; Perfumes
    • C11B9/02Recovery or refining of essential oils from raw materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Cosmetics (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Fats And Perfumes (AREA)

Abstract

Process for producing a pharmaceutical camomile product wherein flowers of the tetraploid camomile variety Manzana containing at least 150 mg % of chamazulene and at least 300 mg % of (-)- alpha -bisabolol, other bisaboloids amounting to less than 50 mg %, are harvested at a stage of growth when only 30 to 70% of the tubular florets of the flower head are open and dried at an air temperature not higher than 50 DEG C.

Description

Způsob získávání nové odrůdy heřmánku (označení Manzana), jejíž květy sušené při teplotě 40 °C obsahují 150 mg % chamazulenu a nejméně 300 mg % (-(-alfa-bisabololu, přičemž obsah ostatních bisaboloidů leží pod 50 mg %, tetraploidizací diploidní odrůdy heřmánku DEGUMILL a následující selekcí a množením.A method for obtaining a new camomile variety (Manzana designation) whose flowers dried at 40 ° C contain 150 mg% chamazulene and at least 300 mg% (- (- alpha-bisabolol, with other bisaboloids below 50 mg%) by tetraploidization of the diploid camomile variety DEGUMILL and subsequent selection and propagation.

Způsob přípravy nové odrůdy heřmánku (označení Manzana).Method of preparation of a new variety of camomile (designation Manzana).

Přípravky květních hlaviček heřmánku pravého (Chamomilla recutita (L.) Rauschert, synonymního s Matricaria chamomilla L.) nacházejí v důsledku antiflogistického a spasmolytického účinku široké terapeutické použití a tvoří důležitou součást sortimentu léčivých rostlin. Mimořádný terapeutický význam mají přitom účinné látky (-)-alfa-bisabolol a chamazulen. Kvalitní droga heřmánku by měla tudíž obsahovat co možná nejvyšší obsah těchto obou látek.The chamomile flower head chamomile (Chamomilla recutita (L.) Rauschert, synonymous with Matricaria chamomilla L.) finds a wide therapeutic use due to its antiphlogistic and spasmolytic effect and forms an important part of the range of medicinal plants. The active substances (-) - alpha-bisabolol and chamazulen are of particular therapeutic importance. Therefore, a high-quality camomile drug should contain the highest possible content of both substances.

Pod označení DEGUMILL (jedná se přitom o druh heřmánku uvedený v německém patentovém spise č. 24 02 802; NDr - ochranné právo druhu DEGUMILL; italský patentový spis č. 1 035 096) je znám druh heřmánku, který má současně vysoký obsah (-)-alfa-bisabololu i chamazulenu.DEGUMILL (the type of chamomile mentioned in German Patent Specification No. 24 02 802; NDr - DEGUMILL type of protection; Italian Patent No. 1 035 096) is known to have a chamomile type which also has a high content (-) -alpha-bisabolol and chamazulene.

Obsah chamazulenu a bisanololu je trvalý jenom tehdy, když se zabrání náhodnému zkřížení, případně cizímu opylení jinými druhy heřmánku, jejichž obsah bisabololu a chamazulenu je podstatně nižší, případně s divokým heřmánkem chudým na obsahové látky, který je všude přítomen.The content of chamazulene and bisanolol is permanent only if accidental crosses or foreign pollination with other camomile species whose content of bisabolol and chamazulene is substantially lower, possibly with a content-containing wild camomile present everywhere, is avoided.

Toto nebezpečí zkřížení cizím opylením hrozí téměř vždy, protože divoký heřmánek se vyskytuje prakticky všude.This risk of cross-pollination is almost always a threat, as wild camomile occurs almost everywhere.

Dále jsou známé tetraploidní druhy heřmánku (například BODEGOLD, NDR; POHOŘELICKÝ CSSR; ZLOTY LAN, Polsko, BK-2, Mačlarsko). Tyto tetraploidní druhy heřmánku mají obsah chamazulenu, který není v podstatě nižší než u druhu Manzana.Tetraploid camomile species are also known (for example, BODEGOLD, GDR; POHORELICKÝ CSSR; LANGLES, Poland, BK-2, Maclarsko). These tetraploid camomile species have a chamazulene content which is not substantially lower than that of the Manzanian species.

Na druhé straně je u těchto známých tetraploidních druhů účinná látka (-)-rlfr-bisabolol přítomna ve velice malém množství a v důsledku toho převládají ostatní bisaboloidy (bisaboloxid A a B jakož i bisabolonoxid), které vytvářejí více než polovinu etherického oleje u známých tetraploidních druhů heřmánku.On the other hand, in these known tetraploid species, the active ingredient (-) - rlfr-bisabolol is present in very small amounts and, as a result, other bisaboloids (bisaboloxide A and B as well as bisabolonoxide) predominate, producing more than half of the ether oil in known tetraploid chamomile species.

Nyní byl nalezen způsob výroby nového tetraploidního druhu heřmánku s výhodnými vlastnostmi .We have now found a process for the production of a novel tetraploid camomile species with advantageous properties.

Vynález se týká tudíž bodů vymezených předmětem vynálezu, případně sběhu věcí.The invention therefore relates to the points defined by the subject matter of the invention, or the fusion of things.

Nový tetraploidní druh heřmánku podle vynálezu označený jako Manzana se ve srovnání se známým druhem heřmánku DEGUMILL, jako i ostatními známými tetraploidními druhy heřmánku vyznačuje překvapivě řadou nových a výhodných vlastností.The novel tetraploid chamomile of the invention, designated Manzana, has surprisingly many new and advantageous properties compared to the known chamomile DEGUMILL as well as other known tetraploid chamomile.

Ve srovnání s DEGUMILLEM odolává cizímu opylení přirozeně se vyskytujícími populacemi heřmánku (divokého heřmánku). Kromě toho má podstatně vyšší obsah důležité účinné látky (-)-alfa-bisabololu než druh DEGUMILL.Compared to DEGUMILL, it resists foreign pollination by naturally occurring camomile populations (wild camomile). In addition, it has a significantly higher content of the important active ingredient (-) - alpha-bisabolol than DEGUMILL.

Ve srovnání se známými tetraploidními druhy heřmánku, druh Manzana podle vynálezu se odlišuje překvapivě nesrovnatelně vyšším obsahem důležité účinné látky ' (-)-alfa-bisabololu, jakož i velice nízkým obsahem ostatních bisaboloidů.Compared to the known tetraploid camomile species, the Manzana species of the invention are distinguished by a surprisingly incomparably higher content of the important active ingredient (-) - alpha-bisabolol as well as a very low content of other bisaboloids.

Dále se odlišuje druh Manzana od známých tetraploidních druhů heřmánku překvapivě ještě dalšími vlastnostmi: zlepšenou klíčivostí semen; menším odpadem nepoužitelné části rostliny (tj. vyšším výnosem květů); nižším obsahem vody v květech (tj. vyšším výnosem sušených květů a kratší dobou sušení); je vhodnější pro strojovou sklizeň, protože květy jsou likalizovány v jedné rovině a většina květů kvete současně (to umožňuje i jednotný termín sklizně); lepší skladovatelností drogy (menší sklon k rozpadavosti a tvorby drtě); vyznačuje se obzvláště aromatickou a typickou vůní heřmánku.Surprisingly, Manzana also differs from known tetraploid chamomile species with other properties: improved seed germination; less waste of the unusable part of the plant (ie higher flower yield); lower water content in flowers (ie higher yield of dried flowers and shorter drying time); it is more suitable for machine harvesting because the flowers are liquidated in one plane and most flowers bloom at the same time (this allows for a uniform harvesting date); better shelf life of the drug (less tendency to disintegration and pulp formation); characterized by a particularly aromatic and typical aroma of chamomile.

Dále je druh heřmánku Manzana podle vynálezu ve srovnání s dosud známými tetraploidními druhy heřmánku homogenní pckud se týká obsahových látek, přičemž vlastnosti obsahu chamazulenu a (a)-alfa-bisabololu (tj. homozygotní) zůstávají trvalé.Furthermore, the chamomile type Manzana according to the invention is homogeneous with respect to the substances as compared to the known tetraploid chamomile species, with the properties of the chamazulene and (a) -alpha-bisabolol (i.e. homozygous) content remaining permanent.

Proti tomu dokazují zkoušky s jednotlivými rostlinami známých tetraploidních druhů, že jedinci mají různý obsah látek, to znamená, že každý namátkou odebraný vzorek z takto získané drogy se liší jak kvalitativně, tak kvantitativně, je nehomogenní.In contrast, tests with individual plants of known tetraploid species show that individuals have different levels of substances, i.e. each sample taken from the drug thus obtained differs both qualitatively and quantitatively, being inhomogeneous.

Úkolem vynálezu je výroba nového tetraploidního druhu heřmánku se zlepšenými vlastnostmi, zejména vyšším obsahem (-)-alfa-bisabololu.SUMMARY OF THE INVENTION It is an object of the present invention to provide a novel tetraploid camomile species having improved properties, in particular a higher content of (-) - alpha-bisabolol.

Výroba nového druhu heřmánku podle vynálezu se provádí převedením v tetraploidní formu u druhu heřmánku DEGUMILL (genovou mutací) a na to navazující další kroky selekce a množení (vypěstování matečných rostlin pro vegetativně množené cizí oplodňovatele). Druh Manzana se skládá ze kmenů případně linií, které byly při udržování pěstování odděleně zpracovány.The production of the new camomile species according to the invention is carried out by converting it to the tetraploid form of the camomile DEGUMILL (gene mutation) and the subsequent further steps of selection and propagation (cultivation of mother plants for vegetatively propagated foreign fertilizers). Manzana consists of strains or lines, which have been separately processed while maintaining cultivation.

Převádění na tetraploidní formu lze provádět například působením na části rostlin (^(^mena, kořeny, vrcholy výhonků, klíčky, poupata, vpaždí) nebo tkáně heřmánku DEGUMILL pomocí chemikálií, rentgenovými paprsky, gama-paprsky, uf-paprsky. Dále to lze provádět způsobem dakepitací kalusu, pomocí prašníkových kultur, použitím vysokých ale i nízkých teplot na rostliny heřmánku druhu DEGUMILL, případně části rostlin nebo tkáně rostlin DEGUMILL.Conversion to the tetraploid form can be accomplished, for example, by treating parts of plants (m (m names, roots, sprouts, sprouts, buds, raids)) or DEGUMILL chamomile tissue using chemicals, X-rays, gamma-rays, uf-rays. by the method of dakepitization of callus, using anthropogenic cultures, applying high as well as low temperatures to chamomile plants of the DEGUMILL species, possibly part of the plant or tissue of DEGUMILL plants.

Lze příkladně odkázat na knihu Wernera Gottschalka die Bedeutung der Polyploidie fůr due Evikztuon der Pflanzen, Gustav Fischer Verlag, Stuttgart, 1976, zejména na strany 13 až 22.For example, reference may be made to Werner Gottschalk's book Die Bedeutung der Polyploidie für Due Evikztuon der Pflanzen, Gustav Fischer Verlag, Stuttgart, 1976, in particular pages 13 to 22.

Převádění na tetraploidní formu pomocí chemikálií.Conversion to tetraploid form using chemicals.

K převádění na tetraploidní formu přicházejí v úvahu například tyto chemikálie: Kolchicin, acnaften, alkaloidy jako atropin, veratrin, nikotin, sanguinarin, deriváty benzenu, difenylu a fenathrenu, naftalinu a deriváty naftalinu, difenylamin, tribromanilin, p-dichlorbenzen, methylnaftochinon, methylnaftohydrochinon, kyselina salicylová a příbuzné látky, hexachlorhexan, pervitin (hydrochlorid), alkylkarbamáty alkalických kovů, jako isopropylkarbamát sodný, fenylurethan, soli kyseliny kakodylové (například sodná sůl), ^glykosidy z Konvallaria jako Convallarin, convallatoxin a convallamarin, heteroauxin, Germisan (fenylmerkuripyrokatechin), organické deriváty rtuti jako ethyl-rtuE-fosfát, ethyl-rtuE-chlorid, fenyl-rtuE-hydroxid, fenyl-rtuEnaftylmethandisulfonát, chlorofm, tzv. rajský plyn (N20), jakož i směsi těchto látek. V úvahu přicházejí dále pokrutiny, kompost a kravská mrva.For example, the following chemicals can be converted to the tetraploid form: Colchicine, acnaften, alkaloids such as atropine, veratrine, nicotine, sanguinarine, benzene derivatives, diphenyl and phenathrene, naphthaline and naphthalene derivatives, diphenylamine, tribromaniline, p-dichlorobenzone, methylnaphthochine, methylnaphthochine salicylic acid and related substances, hexachlorhexane, pervitin (hydrochloride), alkali metal alkyl carbamates such as sodium isopropylcarbamate, phenylurethane, cacodylic acid salts (e.g. sodium salt), Konvallaria glycosides such as Convallarin, convallatoxin and convallamarin, heteroauxin, Germisrokatech (phenylurethmer) organic mercury derivatives such as ethyl mercury E-phosphate, ethyl mercury E-chloride, phenyl mercury E-hydroxide, phenyl mercury naphthyl methanesulfonate, chloroform, the so-called tomato gas (N 2 0), and mixtures thereof. Pellets, compost and cow manure are also possible.

Působeníše uvedenými látkami se prov^í příkladně při teplotách mezi. 0 a 35 °C s výhodou mezi. 12 a 30 °C zejména 25 a 25 °C.P s with b en e ye l á said weave is prov i ^ i p Rikli farm is considerably during te p diisopropylamine, among. 0 and 35 DEG C. The advantage of the ou d. 12, and especially 30 ° C and 25 s at 25 ° C.

Aplikace se provádí například působením na semena, vrcholy výhonků, kořeny (zejména kořenová zakončení, nebo kořeny klíčků), plodenství, plochy řezů na listech nebo lodyh, na buněčné suspenze z mezistemové tkáně, na kalusové kultury nebo pomocí injekce do bazální oblasti lodyhy nebo do oblasti poupat v paždí.Application is effected, for example, by treatment of seeds, shoot tops, roots (especially root endings or germ roots), fertility, leaf or stem cuts, cell suspensions from interstitial tissue, callus cultures or injection into the basal area of the stem or into field of buds in the armpits.

Chemikálií se používá zpravidla ve formě roztoků ve vodě, slabě alkoholických roztoků (obsah alkoholu je zpravidla méně než 5 %) nebo se používá slabě kyselých roztoků. Hodnota pH slabě kyselých roztoků je mezi 5,5 až 6,5, přičemž okyselení se provádí pomocí nízkých organických alifatických kyselin, jako kyseliny octové.Chemicals are generally used in the form of solutions in water, weakly alcoholic solutions (alcohol content is generally less than 5%), or weakly acidic solutions are used. The pH of the weakly acidic solution is between 5.5 and 6.5, the acidification being carried out with low organic aliphatic acids such as acetic acid.

Použije-li se alkoholických roztoků mohou být tyto rovněž slabě kyselé. Koncentrace chemikálií v těchto roztocích může být příkladně 0,01 až 0,5 %, s výhodou 0,02 až 0,2 %, obzvláště 0,05 až 0,1 %. Plynné látky přicházejí v úvahu k použití případně pod tlakem (například 1 až 10 barů). Doba působení je příkladně 1 až 36, s výhodou 2 až 12, zejména až 6 hodin.If alcoholic solutions are used, these may also be slightly acidic. The concentration of chemicals in these solutions can be, for example, 0.01 to 0.5%, preferably 0.02 to 0.2%, in particular 0.05 to 0.1%. The gaseous substances are suitable for use under pressure (for example 1 to 10 bar). The duration of action is, for example, 1 to 36, preferably 2 to 12, in particular up to 6 hours.

Nejúčinnější koncentrace stejně jako doba působení musely být účelně pokaždé hodnoceny v předpokusech. Obzvláště příznivé je například působení kolchicinu při teplotách mezi 0 a 35 °C, s výhodou l2 až 30 °C, zejména l2 až 25 °C.The most effective concentrations as well as the duration of action had to be expediently evaluated each time in the experiments. It is especially advantageous as treatment with colchicine at temperatures between 0 and 3 5 ° C, above Oda l H 2 and 30 ° C, especially 2 to L s and 25 ° C.

To se může například provádět tak, že semena druhu heřmánku DEGUMILL se přivádějí k bobtnání v 0,01 až 0,2%, zejména 0,01 až 0,1% s výhodou 0,05% roztoku kolchicinu, nebo vyklíčené, 5 až 7 dní staré, dobře vyvinuté druhy heřmánku DEGUMILL (s klíčními·listy dolů) se ponoří do 0,01 až 0,1%, zejména 0,02 až 0,1%, s výhodou do 0,05% roztoku kolchicinu. 'This can be done, for example, by introducing DEGUMILL chamomile seeds to swell in 0.01-0.2%, in particular 0.01-0.1%, preferably 0.05% colchicine solution, or germinated, 5-7%. The days-old, well-developed camomile DEGUMILL species (with the collar leaves down) are immersed in 0.01 to 0.1%, in particular 0.02 to 0.1%, preferably 0.05% colchicine solution. '

Při posledním způsobu má okolní atmosféra mít přibližně 100% relativní vlhkost. Doba kolchicinového ošetření činí přibližně 3 až 36 hodin, zejména 4 až 10 hodin. Při použití sazenic je obecně postačující doba působení až 10 hodin. Při použití semen se může doba působení prodloužit až na 36 hodin.In the latter process, the ambient atmosphere should have about 100% relative humidity. The duration of the colchicine treatment is about 3 to 36 hours, in particular 4 to 10 hours. When using seedlings, an exposure time of up to 10 hours is generally sufficient. When seeds are used, the exposure time can be extended up to 36 hours.

Po působení chemikálií se nabobtnalá semena, klíční rostliny, popřípadě jednotlivé části rostlin promyjí opakovaně vodou. Nabobtnalá semena se příkladně vysejí. Rostliny s ošetřenými kořeny nebo části rostlin nebo ošetření klíční rostliny se příklandně pikýrují do truhlíku pro rostliny.After exposure to chemicals, the swollen seeds, seedlings or plant parts are washed repeatedly with water. The swollen seeds are sown for example. Plants with treated roots or parts of plants or treatment of a seedlings are pricked in a plant box.

Z takto ošetřených semen případně klíčních rostlin se vypěstují rostliny, například skleníku při teplotě mezi 18 až 25 °C ve dne a ϋ0 až 16 °C v noci a vybírají se rostliny jejicpyl je asi l,5x větší než pyl výchozího materiálu, případně počet chromosomů somatických buněk je 36.The thus treated seeds optionally seedlings were grown plants, such as glass CART at at rate l OTE limit and 18 and 25 ° C during the day and ϋ0 and from 16 ° C at night and Yb Iraj s is increased and n y a i HZ c pollen is about l, 5 times larger than the pollen source material, or the number of chromosomes of somatic cells is 36th

V případě, že se ošetřují jednotlivé díly rostlin (nadzemní nebo podzemní díly) chemikáliemi podrobí se pozdějšímu vyšetření a převádění v tetraploidní formy jenom výhonky vyhnané z ošetřených dílů, kořeny nebo květy/semena. Když bylo například provedeno ošetření výhonků nebo ošetření paždí, vyšetřuje se potom jenom z tohoto paždí, případně z tohoto očka vyhnaný výhonek a vyšetřují se na něm vytvořené květy, případně semena na počet · chromosomů.If individual parts of plants (aboveground or underground parts) are treated with chemicals, only shoots expelled from the treated parts, roots or flowers / seeds are subjected to later examination and conversion into tetraploid form. If, for example, the shoots or the treatment of the axils have been carried out, then only the shoots or the eye which has been expelled from this eye are examined and the flowers or seeds produced on it are examined for the number of chromosomes.

Měření velikosti pylu a určení počtu chromosomů lze provádět například tak, jak je to udáno v příkladu 1.Pollen size measurements and chromosome counts can be performed, for example, as described in Example 1.

Převádění v tetraploidní formu pomocí paprsků.Conversion in tetraploid form by beams.

Působení se provádí například na semena nebo kořenové zakončení při teplotách mezi 0 a 35 °C, s výhodou 10 až 30 °3 zejména 15 a 25 °C. Množství ozáření: 5 x Skrčit. V livahu přicházejí s výhodou gama-a rentgenové paprsky. Jako uf-paprsky přicházejí v úvahu takové, které mají vlnovou délku 400 až 300 nm, s výhodou 350 nm.Treatment is carried out for example to the seeds or root ends at temperatures between 0 and 35 ° C, preferably 10 to 30 ° especially 3 to 15 s and 25 ° C. Oz, and rhenium amount: 5 x crouch. Preferably, gamma- and X-rays come in the livestock. Suitable U-rays are those having a wavelength of 400 to 300 nm, preferably 350 nm.

Ozářené rostliny, případně jejich části se ošetřují dále, jako rostliny po působení chemikálií.Irradiated plants, or parts thereof, are treated further, such as after exposure to chemicals.

Použití vyšších a nižších teplot.Use of higher and lower temperatures.

Jako vysoké teploty přicházejí v úvahu příkladně teploty mezi 33 a 50 °C, s výhodou mezi 4245 °C’. Těmto teplotám jsou například vys-taveny: nabobtnalá semena, konce výhona meristematické tkáně.As high temperatures are, for example, temperatures between 33 and 50 ° C, preferably bound and 42-4 5 ° C. ' T e t h e p MTO Lot m are of ex and d-TX point: seeds swell and, once the above h one To a meristematic tissue.

Doba působení: například 1 až 48, s výhodou 1,2 až 24 hodin. Jako nízké teploty přicházejí v úvahu: 0 až 5 °3 s výhodou 0,5 až 4 zejména 2 °C. mto teplotám jsou například vystaveny: nabobtnalá semena, klíční rostlinky, výhonky a meristemové tkáně. Doba působení: například 1 až 100, s výhodou 20 až 40 dní. Takto ošetřené rostliny, případně jejich části se zpracují dále jako po ošetření chemikáliemi.Duration of action: for example 1 to 48 hours, preferably 1.2 to 24 hours. As low temperatures are, ú weighting: 0 and 5 °, preferably 3 to 4, especially from 0.5 s to 2 ° C. Te to these pl Otama are subject of ex ad: swollen seeds, seedlings, shoots and meristematic tissue. Duration of action: for example 1 to 100, preferably 20 to 40 days. Plants thus treated, or parts thereof, are processed further as after treatment with chemicals.

Způsob dekapitace kalusu (dekapitace = odstranění hlavičky nebo odstraňování špiček nebo zpětný řez. Dekapitace se provádí například na mladých rostlinách na lodyze, s výhodou na konci vegetačního kuželu, po vytvoření 4 až 6 listů nebo také na řapících listů nebo postranních výhoncích.Callus decapitation method (decapitation = removal of head or tip removal or back cut) The decapitation is carried out, for example, on young plants on the stem, preferably at the end of the vegetation cone, after the formation of 4-6 leaves or also on petioles or side shoots.

Pupeny přivedou ke stejně jako vznikající ze zraněné tkáně (kalusové tkáně), případně výhonky se odříznou, kořenění, kultivují dále v kořenáčích a tetraploidní rostliny se vyselektují při zpracování chemikáliemi.The buds are brought to the same as emerging from the injured tissue (callus tissue), eventually shoots are cut off, seasoned, cultivated further in pots and tetraploid plants are selected during processing by chemicals.

Prašníkové kultury (příprava rostlin s jednoduchým počtem chromosomů z prašníkových váčků s následnou spontánní nebo umělou tetraploidní přeměnou.Anther cultures (preparation of plants with a single number of chromosomes from anther vesicles with subsequent spontaneous or artificial tetraploid transformation).

U kvetoucích rostlin se sklidí zavřené trubkovité květy, jejichž prašníky, prašníkové váčky se nalézají ve stadiu prvé pylové mitózy. Prašníky se vyjmou pomocí mikromanipulátoru z květních pupenů, přenesou na Petriho misky, které jsou plněny například živným prostředím podle Nitsche a Nitsche (tabulka 1).The flowering plants harvest closed tubular flowers whose anthers, anther sacs are found in the stage of the first pollen mitosis. The anthers are removed from the flower buds by means of a micromanipulator, transferred to petri dishes, which are filled, for example, with Nitsch and Nitsch broth (Table 1).

Potom se Petriho misky uchovávájív kultivačním prostoru po dobu 16 dní při teplotě 28 °C ve dne a 20 °C v noci.. Asi po ujalynuU doby 4 týdnů začnou prašníky pukat a rostHny vyrůstat. Tyto jsou u diploidní rodičovské části haploidní, u tetraploidní rodičovské Části dihaploidní; po vytvoření kořenového systému se přesadí do zahradní země do kořenáčů a ve skleníku se přivedou ke květu.The Petri dishes uchovávájív culture chamber for 16 days at 28 ° C by day and 20 ° C at night .. As the IP ujalynuU up by 4 characterized d N for No for either p ciliated ue p u k and t, and grows grow up. These are haploid in the diploid parent moiety, dihaploid in the tetraploid parent moiety; after the root system is established, they are transplanted to the garden soil in pots and brought to bloom in the greenhouse.

Tyto dihaploidní rostliny jsou sterilní, mohou však být ošetřením konců výhonků, kořenů, nebo lodyhy chemikáliemi, jako například kolchicinem převáděny v polyploidní formy, přičemž vznikají homozygotní rostliny, které lze množit dále pomocí semen. Další postup viz při působení chemikáliemi (například působení kolchicinu).These dihaploid plants are sterile, but can be converted into polyploid forms by treatment of the ends of the shoots, roots, or stems with chemicals such as colchicine, producing homozygous plants that can be propagated further by seeds. For other procedures, see chemicals (for example, colchicine).

Tabulka 1Table 1

Živné prostředí podle Nitsche a Nitsche (Science, 1969)Nitsch and Nitsch culture (Science, 1969)

7H2° 4H7H2° x 2H2° řI2° mg/17H2 ° 4H 2 ° 7H 2 ° x 2H 2 ° t 2 ° mg / 1

950950

720720

185185

166166

0,250.25

0,0250,025

KN°3 nh4no3 MgS°4 x CaCl2 KN ° 3 nh 4 no 3 MgSO 4 x CaCl 2

KH24 KH 2 P 4

MnS°4 x H3B°3 MnS ° 4 x H 3B ° 3

ZnS°4 xZnS ° 4 x

Na2Mo04Na2Mo04

CuS°4 x ml roztoku z 7,24 g dvojsodná sůl kyseliny ethylendiaminotetraoctové a 5,57 g FeS°4 x 7H2° na 1 000 ml myoinosit glycin kyselina nikotinová pyridoxin hydrochlorid thiamin hydrochlorid kyselina listová biotin sacharóza živná půda (DIFCO-Bacto-agar) kyselina indolyloctová pH media nastaveno na hodnotu 5,5CuS ° 4 x ml solution from 7.24 g disodium ethylenediaminetetraacetic acid and 5.57 g FeS ° 4 x 7H 2 ° per 1000 ml myoinosit glycine nicotinic acid pyridoxine hydrochloride thiamine hydrochloride folic acid biotin sucrose broth (DIFCO-Bacto- agar) indolylacetic acid pH of the medium adjusted to 5.5

100100 ALIGN!

0,50.5

0,50.5

0,50.5

0,05 g s g ' Z měření velikosti pylu a/nebo počtu chromosomů vyselektovaných tetraploidních rostlin heřmánku, které se získávají dříve popsanými možnostmi, se ještě vyselektují rostliny, které splňují následující podmínky:0,05 g s g 'From the measurement of the pollen size and / or number of chromosomes of the selected chamomile tetraploid plants obtained by the previously described possibilities, the following plants are selected which meet the following conditions:

a) Kvetení v přibližně stejnou dobua) Flowering at approximately the same time

b) Rovnoměrné, základní větvení a úzká zóna květu asi 5 cmb) Even, basic branching and narrow flowering zone about 5 cm

c) Velké hlavičky květu vnějšího průměru asi 30 mm/25 až 35 mm/,(c) Large flower heads of external diameter of about 30 mm (25 to 35 mm),

d) Minimální obsah chamazulenu 150 mg % a bisabololu 300 mg % a obsahu ostatních bisaboloidů (pod 50 mg %) vztaženo na vysušené květy, viz příklad).d) Minimum content of chamazulene 150 mg% and bisabolol 300 mg% and the content of other bisaboloids (below 50 mg%) based on dried flowers (see example).

Takto vyhledané rostliny se nyní množí vegetativně sazeničkami (pomocí klonů) a sledují se po dobu 3 až 5 generací, přičemž volba probíhá stále podle výše uvedených kriterií a) až d) . To znamená rostliny vyhledané podle kriterií a) až d) se klonují, z klonovaných rostlin se získává osivo, z něj získané rostliny se vyselektují ’ podle kriterií a) až d) a od posledních se opět získává osivo.The plants thus sought are now propagated vegetatively by seedlings (by means of clones) and are monitored for 3 to 5 generations, the choice being carried out according to criteria (a) to (d) above. That is, the plants found under criteria (a) to (d) are cloned, seed is obtained from the cloned plants, the plants derived therefrom are selected according to criteria (a) to (d), and seed is recovered from the last.

Sekvenční výsev - selekce podle a) až d) získání osiva lze 2 až 4x opakovat. Potom se provádí závěrečný sekvenční výsev - selekce podle a) až d) - klonování - získání osiva.Sequence sowing - selection according to a) to d) seed yield can be repeated 2 to 4 times. The final sequential sowing - selection according to a) to d) - cloning - seed recovery is then carried out.

Nakonec získané osivo je potom osivo k množení druhu heřmánku Manzana podle vynálezu.The seed finally obtained is then a seed for propagation of the Manzana camomile according to the invention.

Množení sazeničkami se provádí následujícím způsobem: K množení sazeničkami musí výchozí rostliny (klonové mateřské rostliny) vytvořit za podmínek krátkého dne krátké výhonky prosté květních pupenů. K tomuto dochází v.zimní polovině roku ve skleníku bez dalšího osvětlování nebo v klimatizované tomoře denní délky 6 až 10, případně 8 hodin a teplotách 1015 °C s výhodou 12 °C.Propagation by seedlings is carried out as follows: In order to propagate by seedlings, the starting plants (clonal mother plants) must produce short shoots free from flower buds under short day conditions. This occurs v.zimní half of the greenhouse without additional illumination not b o kl ima those ionised Tomori daily d e l 6-10 alkyl, or o n e 8h Odin t e p s Lot 10-15 ° C preferably 12 ° C.

Ke klonování, případně množení jsou vhodné listové, výhonkové a zejména sazeničky s ktkýmihonky (postranními výhonky) . Ke tvortě kořenů dochází při teplotě 1218 °C, s výhodou při 15 °C a délce dne 12 až 16, s výhodou 14 hodin v upravené atmosféře (asi 100% relativní vlhkosti vzduchu).The cloning or propagation are suitable leaf, shoot and especially seedlings with the caliber tk YM ye H on alkyl (p ostranními shoots). The E includes for the row ene with Doc h-i Pr I te pl rpm of 12 to 18 ° C, above h Oda at 15 ° C ad e LCE of 12-16, preferably 14 hours and nvu p Raven Atmos fer e (about 100% relative air humidity).

Jako substrátu lze použít příkladně směsi rašelina-písek v poměru 1:1, je vhodný i čistý křemičitý písek, kamenná drt - krychličky pro sazenice, rašelina - krychličky pro sazenice a podobně.For example, a 1: 1 peat-sand mixture may be used as a substrate, pure silica sand, crushed stone for seedlings, peat for seedlings, and the like are also suitable.

Pro výsev přicházejí přitom v úvahu: zahradní půda, humozní středně těžké hlinité půdy, hlinité nebo humozní písčité půdy. Mohou být vysety ve skleníku nebo volné zemi. Teploty klíčení a růstu leží například mezi. 1224 °C zejména 18 až 20 °C. V přípa volného vysetí se seje s výhodou na podzim (září/říjen) nebo brzy na jaře (březen/duben). Tyto termíny platí pro všechna území přicházející v úvahu (například severní hemisféru, mírné až subtropické klima).Suitable for sowing are: garden soil, humous medium-heavy loamy soils, loamy or humous sandy soils. They can be planted in a greenhouse or open ground. Temperatures key I, Ar en No growth is voltage between Rikli and d. 12-24 ° C, especially 18 s and 20 ° C. In at p and DE freely eh o y seeding is preferably sown in the autumn (September / October) or early spring (March / April). These terms apply to all eligible territories (eg northern hemisphere, mild to subtropical climate).

Nový druh heřmánku podle vynálezu náleží k pěstovanému rostlinnému druhu pravého heřmánku botanického označení Matricaria Chamomilla L. (synonymum Chamomilla recutita /L./ Rauschert) a je derinována údaji o účinných látkách podle bodu 1.The new camomile species according to the invention belongs to the cultivated plant species of the true camomile of the botanical name Matricaria Chamomilla L. (synonym Chamomilla recutita / L. / Rauschert) and is derinated by the active substance data according to point 1.

Tam udané hodnoty o obsahu účinných látek se vztahují na ta vývojová květní stadia, kterých je dosaženo, když 30 až 70 % zejména 40 až 60 % všech trubkovitých květů květní hlavičky je otevřenostto znamená, pro stanovení (činných látek použité květy byly v této době očesány a potom sušeny po dobu 72 hodin při. teplotě 40 °C v sušárně) .The active substance content values given there refer to those developmental stages of the flower which are obtained when 30 to 70%, in particular 40 to 60%, of all tubular flowers of the flower head is open, meaning to determine (the active substances used were hair during this time). and NY p Otom dried and yp of a d b at 72 hours at Odin. t ep l ot 40 ° C oven).

Provádí-li se sklizeň heřmánkových květů v čase, kdy vývojové stadium květů dále pokročilo, tj. kupříkladu kdy 100 % nebo až téměř 100 % všech trubkovitých květů květenství se již rozevřelo (např. ve stadiu úplného rozkvětu) nebo/a děje-li se sušení sklizených květů při teplotě vyšší než 40 °C\ je obsah činných látek H-aHa^satoloh a chamazu^nu nižší.If the chamomile flowers are harvested at a time when the development stage of the flowers has progressed, eg 100% or almost 100% of all tubular inflorescences have already opened (eg at full bloom) or / and if they occur drying the harvested flowers on that lot of the p yšší than 40 ° C \ b SAH is employed diacrylate e k H ^ AHA satoloh and chamazu ^ nu her primary and.

Provádí-li se tedy sklizeň ve vegetačním stadiu, kdy 30 až 100 % trubkovitých květů květenství.je rozevřeno a suší se přitom za teploty do 60 °C (výhodně při vyloučení slunečního světla, např. za takových podmínek sušení, jako je uvedeno dále v následujícím výkladu v popisu tohoto vyálezu), obsahuje takto získaná heřmánková droga alespoň 120 mg % chamazulenu a alespoň 200 mg % (-)-alfa-bisabololu, zatímco obsah ostatních bisaboloidů zůstává, stejně jako v předešlém výkladu, pod 50 mg %.Thus, when harvesting is carried out in the vegetation stage, where 30 to 100% of tubular inflorescence flowers are opened and dried at a temperature of up to 60 ° C (preferably with the exclusion of sunlight, e.g. under such drying conditions as described below). the camomile drug thus obtained contains at least 120 mg% of chamazulene and at least 200 mg% of (-) - alpha-bisabolol, while the content of the other bisaboloids remains, as in the previous explanation, below 50 mg%.

Pod označením ostatní bisaboloidy v definici předmětu vynálezu je zejména míněno:Other bisaboloids in the definition of the subject matter of the invention are in particular meant:

druhu heřmánku tracích snadno (-)-alfa-bisaboloxíd 1 a B; (-)-alfa-bisabolonoxid A; další podíly etherického oleje podle vynálezu jsou En-In-dicykloether, farnesen, spathulenol a malých koncentěkavé terpenické uhlovodíky.chamomile species traces easily (-) - alpha-bisaboloxide 1 and B; (-) - alpha-bisabolone oxide A; other proportions of the ether oil according to the invention are En-In-dicycloether, farnesene, spathulenol and small concentric terpenic hydrocarbons.

Například květy simené v sušárně při teplotě 40 °C (škozené ve stad^ vývoje květů, kdy je rozevřeno 30 až 70 % trubkovitých květů květenství) druhu Manzana podle vynálezu, obsahuje mezi 150 až 200 mg % chamazulenu, mezi 300 až 450 mg % (-)-alfa-bisabololu a jenom málo, to znamená mezi 5 až 50 mg % jiných bisaboloidů, vztaženo na suchou drogu (to znamená vztaženo na absolutní suchou hmotnost květů).For example, kv ethyl SIMEN SU propenoate RNE EXAMPLE te pl ot 40 ° C (free of damage in the herd-floral development which is apertured 30 to 70% of the tubular flowers of the inflorescence) type Manzana according to the invention contains between 150 to 200 mg% chamazulene , between 300 and 450 mg% of (-) - alpha-bisabolol and very little, i.e. between 5 and 50 mg% of other bisaboloids, based on dry drug (i.e., based on absolute dry flower weight).

Tato absolutní hmotnost sušiny se určuje sušením separátního vzorku květů heřmánku podle vynálezu druhu Manzana v sušárně při teplotě 105 °C až do konstantní, hmotnost (po dot»u 72 až 96 hodin) . Obsah účinných látek, příkladně při 3550 °C sušených kvě(<dro<jy) , se potom prápore na květy sušené při. teplotě 105 °C.The absolute dry weight was determined by drying a separate sample of camomile flowers p o dL e VYN s crawling type M Anzano SU Arne at t e pl OTE 105 ° C to constant weight (p o dot »at 72 and 96 hours) . B is O h U c h innýc la te to, comm graceful e p s 35 to 50 ° C are enýc w h e Tu q (<DRO <JY), then a flag on the dried flowers of e p s. te p lot of 105 ° C.

Ve svém fenotypu je druh Manzana podle vynálezu podobný dosud známým tetraploidním , BK-2, Pohořelický Velkokvětý); liší se od nich je (-)-alfa-bisabolol hlavní složkou ethericchamazulenu a obsah ostatních bisoboloidů nižší. Dalšími složkami etherického oleje a En-In-dicykloether.In its phenotype, the Manzana species of the invention are similar to the hitherto known tetraploid, BK-2, Pohořelický Velkokvětý); other than (-) - alpha-bisabolol, the main constituent of ethericchamazulene is lower and the content of other bisoboloids is lower. Other ethereal oil components and En-In-dicycloether.

druhům heřmánku (například Bodegolg, Zloty Lan zejména tím, že u druhu Manzana podle vynálezu kého oleje květů, že kromě toho má vyšší obsah (bisobololoxid A a B; bisabolonoxid) podstatně druhu manzana je farnesen, spathulenolchamomile species (for example Bodegolg, Zloty Lan in particular by the fact that in the Manzana species according to the invention the flower oil that in addition has a higher content (bisobololoxide A and B; bisabolonoxide) substantially of manzana species is farnesene, spathulenol

Druh heřmánku podle vynálezu může než 20 % organických látek (humusovité ní agrotechnické opatření nebo kultivační den o délce více než 13 hodin, to znamená tropy.The chamomile species of the invention may comprise more than 20% of organic matter (humus-like agrotechnical measure or cultivation day of more than 13 hours, i.e., tropics).

být pěstován úspěšně na všech půdách obsahu více látky a půdní organismy) není požadováno žádné zvláštopatření; pěstování vyžaduje jenom tzv. dlouhý pro pěstování jsou nejvhodnější mírné zóny a subbe cultivated successfully on all soils containing more substance and soil organisms) no special measure is required; Cultivation requires only the so-called long for cultivation are the most temperate zones and sub

Druh heřmánku Manzana pdole vynálezu má středně pozdní dobu sklizně, jednotnou výšku růstus úzkou zónou květů a velkými hlavicemi květů a je tudíž obzvláště vhodný pro mechanickou sklizeň. Dále, ve stejnou dobu vyseté rostliny druhu Manzana kvetou prakticky společně v tutéž dobu, takže sklizeň je velice zjednodušena a ulehčena.The chamomile type of Manzana of the invention has a medium late harvest time, a uniform growth height with a narrow flower zone and large flower heads and is therefore particularly suitable for mechanical harvesting. Furthermore, at the same time planted Manzana plants bloom practically together at the same time, so harvesting is greatly simplified and facilitated.

Heřmánek druhu Manzana podle vynálezu přináší vysoký výnos. Možnosti použití jsou napříextraktů, jakož i přiklad: získání heřmánku jako drogy, heřmánkového oleje, heřmánkových rozeného (-)-alfa-bisabololu.The camomile of the Manzana species according to the invention yields a high yield. Possible uses include extracts, as well as an example: obtaining chamomile as a drug, chamomile oil, chamomile natural (-) - alpha-bisabolol.

Droga heřmánku druhu Manzana podle vynálezu má maximální obsah nu a bisabololu když se květní hlavice sklidí ve vegetačním stadiu, 70 % s výhodou 40 až 60 %, to znamená obecně 50 % trubkových květů květních hlavic otevřeno, a provede se sušení při teplotě vzduchu max^álně 50 °^ příkladně 35 až 50‘ °C.Drug camomile species Manzana invention has a maximum content of nu and bisabolol when the flower heads are harvested in vegetation stage 70% preferably 40 to 60%, i.e., generally 50% of the tubular flowers of flower heads open, and p Roveda was dried with EN even when te mod p ture d uc u max h ^ 50 ^ cially of ex adn 3 of 5 to 50 "C.

účinných látek chamazulekdy je například 30 ažThe active ingredients of the chamazule are, for example, from 30 to 30%

Sušení lže přitom provádět bud umělým přívodem vzduchu nebo rovněž sušením ve stínu, případně i na sluncí, přičemž je třeba dbát na to, aby přívod tepla nebyl vyšší než je třeba k dokonalému vysušení.The drying process can be carried out either by artificial air supply or also by drying in the shade or even in the sun, taking care that the heat supply is not higher than necessary for perfect drying.

Je rovněž výhodné přesvědčit se občasným zvážením o dosažené konstantní hmotnosti. Suše1It is also advantageous to see from time to time the constant weight achieved. Dry1

být je nejvyšší vádět brzy, až 20 cm, spontánní nebo umělé (například umělým teplým vzduchem). Výtěžek účinných látek po spontánním sušení za vyloučení slunečního světla. Proces sušení je třeba propřípadně současně s výhodou v 10 cm se sklizní. Sušení má probíhat v tenkých vrstvách, například tloušňce vrstvy.be top tall early, up to 20 cm, spontaneous or artificial (for example, by artificial warm air). Yield of active ingredients after spontaneous drying with the exclusion of sunlight. The drying process, if necessary simultaneously, preferably at 10 cm is harvested. Drying should take place in thin layers, for example layer thickness.

Stanovení chamazulenu se provádí spektrofotometricky jako u obvyklých heřmánkových extraktů. Stanovení (-)*alfa-bisabololu jakož i ostatních obsahových látek heřmánkového oleje se provádí obvyklými chromatografickými způsoby.The determination of chamazulene is carried out spectrophotometrically as with conventional camomile extracts. Determination of (-) * alpha-bisabolol as well as other camomile oil ingredients is carried out by conventional chromatographic methods.

Přesné vylíčení analytických postupů obsahuje příloha A.A detailed account of the analytical procedures is given in Annex A.

Účinná látka chamazulen jé přítomen v květech heřmánku nikoliv jako takový, ale ve formě seksviterpenického laktonu matricinu. Matricin je farmakologicky účinný, účinek odpovídá chamazulenu. Z předstupně matricinu vzniká například zahřátím (například destilací s vodní párou) nálevem čaje okamžitě chamalzulen. Je tudíž obvyklé udávat u heřmánku nikoliv obsah matricinu, nýbrž analytický obsah z něj vznikajícího chamazulenu.The active substance chamazulene is present in camomile flowers not as such, but in the form of a secsviterpenic lactone matrix. Matricin is pharmacologically active, its effect corresponds to chamazulene. For example, chamalzulen is immediately formed from the precursor matrix by heating (e.g., steam distillation) by infusion of tea. It is therefore customary to report the chamazulene content of the chamomile, not the matrix content.

Příklady provedeníExamples

Příklad 1Example 1

Semena'druhu heřmánku DEGUMILL se nanesou na filtrační papír s 0,05% vodným roztokem kolchicinu a při teplotě místnosti (20 °C) se nechají po dobu 6 hodin bobtnat. Potom se odstraní z filtračního papíru, opakovaně se promyjí vodou a vysejí se do truhlíku ve skleníku: půda: rašelina-písek v poměru 1:1, teplota: 18 až 20 °C, relativní vlhkost vzduchu asi 60 %, délka dne při umělém osvětlepí: 14 hodin.DEGUMILL chamomile seeds are spread on filter paper with a 0.05% aqueous colchicine solution and allowed to swell at room temperature (20 ° C) for 6 hours. They are then removed from the filter paper, washed repeatedly with water and sown in a greenhouse: soil: peat-sand at a ratio of 1: 1, temperature: 18 to 20 ° C, relative air humidity of about 60%, length of day under artificial lighting : 14 hours.

Klíčící rostliny byly pozorovány až к době květu, výsledek přeměny v polyploidní formu byl hodnocen srovnávacím měřením velikosti pylu a semen i počtu chromosomů (F^-potomstvo « = prvé ze semen získané potomstvo, které představuje prvé tetraploidní rostliny po působení kolchicinu.Germinating plants were observed only until flowering, the result of the conversion to polyploid form was evaluated by comparative measurement of pollen and seed size and chromosome count (F-potency) = the first seed progeny that represents the first tetraploid plants after colchicine treatment.

Přeměnu v tetraploidní formu lze provádět i takto: Na vodou navlhčeném filtračním papíru vyklíčené, 5 až 7 dní staré heřmánkové sazeničky druhu DEGUMILL při teplotě místnosti (10 °C) po dobu 4 až 6 hodin s klíčními lístky směrem dolů, byly přeneseny do 0,05% roztoku kolchicinu. Přitom byly šetřeny kličkové kořeny; aby se zabránilo.škodám vysušením musí mít obklopující atmosféra přibližně 100% realtivní vlhkost vzduchu.Conversion to the tetraploid form can also be carried out as follows: On water-moistened filter paper, germinated, 5-7 days old DEGUMILL chamomile seedlings at room temperature (10 ° C) for 4 to 6 hours with the leaflets down, were transferred to 0, 05% colchicine solution. Looped roots were spared; In order to prevent drying damage, the surrounding atmosphere must have approximately 100% real air humidity.

Po působení byly sazeničky několikrát promyty vodou a pikýrovány v truhlících pro rostliny. Následovalo stejné ošetření jako u semen.After treatment, the seedlings were washed several times with water and plated in plant boxes. This was followed by the same treatment as the seeds.

Měření velikosti pylu bylo prováděno Leitzovým binokulárním výzkumným mikroskopem s měrným okulárem opatřeným mikrometrem a podložním sklíčkem s mikrometrem.Measurement of pollen size was performed by a Leitz binocular research microscope with a microscope equipped with a micrometer and a micrometer slide.

Chromosomy se počítají na kořenových zakončeních: Od mladých rostlin nebo sazeniček , vypěstovaných ve skleníku byly sbírány 1 až 2 cm dlouhé čerstvé konce kořenů: 5 hodin byly naloženy do 0,002 molárního roztoku hydroxychinolinu a potom po dobu 15 minut do 1N kyseliny chlorovodíkové.The chromosomes are counted at the root tips: Fresh green root tips 1 to 2 cm long were collected from young plants or seedlings grown in the greenhouse: 5 hours were loaded in 0.002 molar hydroxyquinoline solution and then for 15 minutes in 1N hydrochloric acid.

К mikroskopickému vyšetření byly asi 1 mm dlouhé konce kořenů vybarveny 2% směsí orcein-kyselina octová a mikroskopicky vyšetřeny v olejové imerzi. U buněk nalézajících se ve stadiu mitózy lze tak určit čtyřnásobný počet chromosomů somatických buněk (4n = 36).For microscopic examination, about 1 mm long root ends were stained with 2% orcein-acetic acid and microscopically examined for oil immersion. Thus, four times the number of chromosomes of somatic cells (4n = 36) can be determined in cells found in the mitosis stage.

Ty rostliny, u kterých byl průměr pylu asi o 50 % větší než u diploidního výchozího materiálu, (asi 30 místo asi 20 дип) a u kterých byl počet chromosomů somatických buněk zdvojen na 36 (u diploidního materiálu je odpovídající počet 18) jsou tetraploidní.Those plants in which the pollen diameter was about 50% greater than that of the diploid starting material (about 30 instead of about 20%) and in which the somatic cell chromosome number was doubled to 36 (the corresponding number of diploid material is 18) are tetraploid.

Tyto byly vyselektovány. Asi 0,1 až 0,5 % semen případně klíčních rostlin byly výše uvedeným způsobem převedeny v tetraploidní formu a poskytly květuschopné, nedotčené rostliny. Další postup je následující:These were selected. About 0.1 to 0.5% of the seeds or germinate plants were transformed into the tetraploid form as described above to yield flowering, intact plants. The next steps are as follows:

Krok 1:Step 1:

Z (jak je popsáno výše) vyselektovaných tetraploidních rostlin heřmánku byly vybrány ty rostliny, kteréFrom (as described above) selected chamomile tetraploid plants were selected those that

a) téměř současně kvetou,a) almost simultaneously bloom,

b) mají rovnoměrné, základní větvení a úzké květní pásmo asi 5 cm,(b) have an even, basic branching and a narrow floral zone of about 5 cm;

c) mají velké hlavice květů vnitřního průměru asi 30 mm,(c) have large flower heads of an internal diameter of about 30 mm;

d) dosahují minimálního obsahu pro chamazulen 150 mg% a 300 mg% bisabololu nebo jej překročují a jejichž obsah ostatních bisaboloidů (zejména bisabololoxidů) je zřetelně pdo 50 mg%) všechny hodnoty jsou vztaženy na květní hlavice, které byly sušeny při teplotě 40 °C a jejic skMzeň byla provetona ve stacliu, kdy teprve asi 50 % (40 až 60 %) trubkovitých květů hlaviček rozkvetlo.d) reach the minimum content of the chamazulene of 150 mg% and 300 mg% bisabolol or it crosses and the content of other bisaboloids (particularly bisabolol oxides) is clearly PDO 50 mg%) All values are based on flower heads which were dried at te pl of i 40 C refrigerati skMzeň was provetona in stacliu and when p te as tearing and 5 0% (40-60%), tubular flowers blossomed headers.

Tyto rostliny byly klonovány. K tomu účelu byly rostliny (klonované matečné rostliny) nařezané nejprve na asi 15 cm dlouhé výhonky a při délce dne 8 až 10 hodin a teplotě 12 až 14 °C povedeny к novým výhonkem (krátké postranní výhonky) . Krátké výhonky byly odřezány a vloženy do směsi rašelina-písek. Při asi 100% relativní vlhkosti vzduchu, teplotě vzduchu 15 °C a délce dne 14 hodin trval vývoj kořenového systému sazen^elk po dobu 7 až 14 dní.These plants were cloned. For this purpose the plants (clone mother plants) initially cut to about 15 cm long and shoots at a length of 8 to 10 hours and at 12 to 14 ° C hilarious к new shoots (Cr and TK s side shoots). Kr and TK shoots y s y l b y of the OF and n y and placed in a mixture of peat-sand. At about 100% relative humidity, air temperature 15 ° C and no lon ce d 14 h of di n t tearing evolution to ořenového hundredth betting with y ^ d of elk after b u t o 7 14 days.

Místo uvedeného obvyklého klonování (množení sazeniček) lze použít i množení tkáňových partií schopných dělení in vitro) tzv. meristemové množení). K etablování heřmánkové kultury jsou vhodné různé díly rostliny s výhodou konce výhonků nebo poupata v paždí.Instead of the usual cloning (multiplication of seedlings) it is also possible to use multiplication of tissue parts capable of dividing in vitro (so-called meristem propagation). Various parts of the plant, preferably the ends of the shoots or buds in the axils, are suitable for establishing a camomile culture.

Po opláchnutí rostlin se za aseptických podmínek v laminárnim proudění (vysokovýkonných podmínek v laminárnim proudění (vysokovýkonný filtr s vytěsňovacím prouděním omezujícím turbulaci) se odnímají konce výhonků poupat v paždí listů a přenášejí do reagenčních nádob, které jsou plněny živným mediem například podle Murashigeho a Skoopa (Physiol. Plant. 15, 473-497, 1962).After rinsing the plants, under aseptic conditions in the laminar flow (high performance conditions in the laminar flow (high performance filter with displacement flow limiting turbulation)) the ends of the shoots are removed from the leaf axes and transferred to reagent containers filled with nutrient media such as Murashige and Skoop Physiol Plant 15: 473-497 (1962).

Reagenční nádoby se odstaví v klimatizačním prostoru po dobu 12 až 18 s výhodou po 16 hodin délky dne (dosažené fluorescenční zářivkou), světelné intenzity 500 až 10 000 luxů s výhodou 1 000 až 3 000 luxů a t.eplotě 15 až 30 °C, s výhodou 22 až 27 °C.Reagent containers are removed in the air conditioning compartment for 12 to 18 preferably for 16 hours day length (obtained fluorescent lamp), light intensity from 500 to 10 000 lux with the above h Oda 1 00 0-3 0 00 l UX and te p lo thee 15 and 30 ° C, above about d h ou 22 and 27 ° C.

Jakmile explanáty dosáhnout dobrého růstu, převedou se na výše uvedené živné prostředí, avšak s vyšší koncentrací cytokininu (30 mg/1 N6-isopentenyladeninu) a s málem, případně žádným auxinem (0 až 0,3 mg/1 . kyseliny indolyloctové). Důsledkem toho se protahují osy a tvoří se adventivní orgány, jakož i zmnožená poupata v paždí. Tyto mohou být dříve uvedeným způsobem odňaty a pěstovány.Once the explanations achieve good growth, they are transferred to the above culture medium but with a higher cytokinin concentration (30 mg / l N 6 -isopentenyladenine) and with little or no auxin (0 to 0.3 mg / l indolylacetic acid). As a result, the axes stretch and adventurous organs are formed, as well as multiple buds in the armpits. These can be removed and grown as described above.

Explanáty určené ve větším množství k rozmnožování rostlin (třetí pasáže = .třetí generace množení) se přenesou po růstu a vtvoření listů na zprvu uvedeném živném prostředí přeneseny na živnou půdu, která obsahuje 10 mg/1 kyseliny indolyloctové nebo 3-indolylmáselné nebo 0,1 až 0,3 mg kyseliny alfa-naftyloctové.Explanates intended for the multiplication of plants (third passage = third generation of propagation) are transferred after growth and leaf formation in the initially mentioned culture medium to a culture medium containing 10 mg / l indolylacetic acid or 3-indolylbutyric acid or 0.1 up to 0.3 mg of alpha-naphthylacetic acid.

//

Rostlinky zakoření a asi po 4 týdnech mohou být pěstovány v kořenáčích se sterilní zahradnickou pMou (propadnou po dobu l2 hodin při teplotě l20 °C) a ve skleníku (za podmínek obvyklých jako u konvenčního množení sazeničkami) pěstovány dále.Plantlets rooted and after about 4 weeks, can be grown in pots with sterile for h r o n i c ou pMou (expiry p o d a b l 2 h of di n @ te pl OTE l 20 ° C) and KL Cart en u (for C o d m EQS common to the conventional propagation cuttings) grown further.

Živné prostředí podle Murashigeho a Skoga mg/1 mg/1Murashige and Skog culture medium mg / 1 mg / l

nh4nos nh 4 no s 400 400 Indolyloctová kyselina Indolylacetic acid 2,0 2,0 Ca(N03)2.4H2OCa (NO 3 ) 2 .4H 2 O 144 144 furfuryladenin furfuryladenin 0,1 0.1 KN03 KN0 3 80 80 thiamin thiamine 0,1 0.1 kh2po4 kh 2 Mon 4 12,5 12.5 nikotinová kyselina nicotinic acid 0,5 0.5 MgSO4-7H2OMgSO 4 7H 2 O 72 72 pyridoxin pyridoxine 0,5 0.5 KC1 KC1 65 65 glycin glycine 2,0 2,0 NaFe-EDTA NaFe-EDTA 25 25 myoinosit myoinosit 100 100 ALIGN! H 33 H 3 B ° 3 1/6 1/6 Kasein-hydrol. Casein-hydrol. 1 000 1 000 MnSO..4Ho0 4 2MnSO..4H o 0 4 2 6,5 6.5 sacharóza sucrose 2 % 2% ZnSO4.7H2OZnSO 4 .7H 2 O 2,7 2.7 čištěný práškovitý agar purified powdered agar 1 % 1%

Stupeň 2:Stage 2:

Rostliny získané podle stupně 1 kvetly za isolovaných podmínek společně ve skleníku. Rostliny přitom stály v 11-cm-kořenáčích plněných zahradní zemí při teplotě 18 až 24 °C ve dne a 12 až 14 °C v noci. Délka dne činila nejméně 14 hodin a v zimní polovině roku byla dosahována přídavným osvětlením (200 Watt/n^). Voda byla dodávána podle potřeby.The plants obtained according to step 1 bloomed together in a greenhouse under isolated conditions. The plants stood in 11-cm pots filled with garden soil at 18-24 ° C by day and 12-14 ° C at night. The day lasted at least 14 hours and was achieved by additional lighting (200 Watt / n ^) in the winter half of the year. Water was supplied as needed.

Ze selektovaných jedinců byly po dobu 4 týdnů sklízeny na semeno průběžně ty hlavičky, které kvetly a byly krátce před rozpadem. Osivo bylo získáno po vysušení sklizených květů při teplotě místnosti vyfoukáním lehčích květních částí.Of the selected individuals, for 4 weeks the heads that bloomed and were shortly before disintegration were continuously harvested on the seed. The seed was obtained after drying the harvested flowers at room temperature by blowing out lighter flower parts.

Stupeň 3:Stage 3:

Z osiva získaného ve gtupni 2 byl odebrán namátkový vzorek a z toho získáno asi 2 000 potomků (ekologické podmínky jako ve stupni 2) a selektováno podle stejných kriterií jako u a) až d) ve stupni 1. S takto selektivovanými jedinci bylo postupováno podle stupně 2.A random sample was taken from the seed obtained in Grade 2 and about 2000 offspring were obtained (ecological conditions as in Stage 2) and selected according to the same criteria as in Stage 1 (a) to (d).

Stupeň 4:Stage 4:

Z osiva podle stupně 3 byla na podzim vyseta část na dvou rozdílných stanovištích.A part of the seed of step 3 was sown at two different sites in the autumn.

Stanoviště A)Station A)

450 m NN, 48,5 °N/11,5 °O450 m NN, 48.5 ° N / 11.5 ° O

750 mm ročních srážek vlkhé, mírné klima, leden -10 až 0 °C, červenec +10 až +20 °C,750 mm annual precipitation wet, mild climate, January -10 to 0 ° C, July +10 to +20 ° C,

NN = severní zákl. rovina pro měření výšky nad mořem = mořská výška °N = severní šířka (ngrad) °O = východní délka (ngrad)NN = North bas. altitude plane = sea level ° N = north latitude (ngrad) ° O = east longitude (ngrad)

Stanoviště B)Station B)

200 m NN, 42 °N/L °O,200 m NN, 42 ° N / L ° O

400 mm ročních srážek středozemní klima, leden 0 až +10 °C,400 mm annual rainfall Mediterranean climate, January 0 to +10 ° C,

Červenec +20 až +30 °C.July +20 to +30 ° C.

Výsev na obou stanovištích byl proveden koncem září/začátkem října.The sowing at both sites was done in late September / early October.

Takto získané výsledky, polního pokusu byly zkoušeny a souzeny z hlediska homogenního růstu, velikosti květů, doby sklizně, kromě toho byly sledovány namátkové vzorky květů na obsah účinných látek. Z polního výsledku pokusu byly opět selektovány ti jednotlivci, kteří odpovídají parametrům uvedeným ve stupni 1. Z nich bylo získáno osivo odpovídající stupni 2.The results obtained in this field trial were tested and judged in terms of homogeneous growth, flower size, harvest time, and in addition, random flower samples were monitored for drug content. Again, those individuals corresponding to the parameters listed in step 1 were selected from the field result of the experiment. Seeds corresponding to step 2 were obtained from them.

Stupeň 5:Stage 5:

S osivem podle stupně 4 byly v udaném pořadí a způsobu opakovány stupně 3 a 4.Steps 3 and 4 were repeated with the seed of step 4, respectively.

Stupeň 6:Stage 6:

Z osiva získaného podle stupně 5 bylo získáno asi 1 500 jedinců (ekologické podmínky jako ve stupni 2) a selektovány podle téhož principu jak je udáno ve stupni 1. Z takto vyselektovaných rostlin bylo voleno 34 jednotlivců a klonováno podle stupně 1.About 1,500 individuals (ecological conditions as in step 2) were obtained from seed obtained in step 5 and selected according to the same principle as in step 1. 34 individuals were selected from the selected plants and cloned according to step 1.

Vždy 10 rostlin každého klonu bylo pěstováno v náhodném rozdělení ve vzdálenosti 40 x 30 cm na volném poli (stanoviště A, viz stupeň 4) na izolovaném místě. Půda byla z propustného jílu, o hodnotě pH 7,0; s pěstěním se začalo začátkem června, první sklizeň semen byly uprostřed července, potom byly rostliny posečeny, kvetly ještě jednou a poskytly uprostřed a koncem srpna další sklizeň osiva.In each case, 10 plants of each clone were grown in random distribution at a distance of 40 x 30 cm in a free field (site A, see step 4) in an isolated location. The soil was of permeable clay, pH 7.0; cultivation began in early June, the first seed harvest was in the middle of July, then the plants were mown, bloomed once more and provided another seed harvest in the middle and late August.

Získání osiva tohoto materiálu bylo provedeno podle stupně 2.The seed of this material was obtained according to step 2.

Osivo získané podle stupně 6 je osivo к množení heřmánku druhu Manzana. Květy rostlin z tohoto množícího osiva (výsev září/říjen, sklizeň začátkem června následujícího roku, které byly к určenému termínu očesány, když asi 50 % (40 až 60 %) trubkovitých květů hlavičky jsou otevřeny a které jsou potom sušeny po dobu 72 hodin při teplotě 40 °C v sušárně obsahují, vztaženo na hmotnost sušených květů (suchá látka) například: 150 mg % chamazulenu, 300 mg % (-)-alfa-bisabololu a maximálně 50 mg % ostatních bisaboloidů.The seed obtained according to step 6 is seed for the propagation of camomile of the species Manzana. Plant flowers from this propagating seed (September / October sowing, harvest in early June of the following year, which have been combed to the deadline when about 50% (40 to 60%) of tubular head flowers are open and which are then dried for 72 hours at For example, 150 mg% chamazulene, 300 mg% (-) - alpha-bisabolol and a maximum of 50 mg% other bisaboloids are included in the oven at a temperature of 40 ° C in the oven.

Další příkladné údaje к rostlinám získaným podle příkladu druhu heřmánku podle vynálezu:Further exemplary data for the plants obtained according to the example of the camomile species according to the invention:

1. Růst1. Growth

Jednotná výška růstu (vyrovnanost) s úzkou květní zónou, tudíž mimořádně vhodná pro mechanizovanou sklizeň, velké hlavice květů, středně vysoká sklizeň;Uniform growth height (balance) with a narrow flowering zone, therefore particularly suitable for mechanized harvesting, large flower heads, medium harvesting;

Tvar: základní rozvětvený (troj, až pětinásobně)Shape: basic branched (three to five times)

Kužel: přímý, málo větvenýCone: straight, little branched

2. Olistění2. Olistění

List: zpeřené, dvoj až trojnásobněLeaf: pinnate, two to three times

Síla: střední;Strength: Medium;

Zpeřený list, barva středně zelenáPinnate leaf, medium green

Zpeřený list (střed kužele); zpeření středně až silněPinnate leaf (center of cone); medium to severe constriction

3. Stav květenství3. State of inflorescence

Košíčky květů (hlavičky květů):Flower baskets (flower heads):

asi 30 mm vnější průměr, asi 15 mm vnitřní průměr;about 30 mm outer diameter, about 15 mm inner diameter;

Hmotnost jednotlivého košíčku (suchého): asi 45 mgWeight of single cup (dry): about 45 mg

Květní výhonek, délka (mm): asi 700, je však závislé na místě pěstování (klima), době vysetí, půdě, hnojení, ošetření rostlin, větrání;Flower head, length (mm): about 700, but depends on the place of cultivation (climate), sowing time, soil, fertilization, plant treatment, ventilation;

Počátek květu (od 1. ledna):Beginning of flowering (from 1 January):

asi 160. den (výsev září, stanoviště Freising Německá spolková republika, jinak závislý na výše uvedených faktorech).about 160th day (sowing September, location Freising Federal Republic of Germany, otherwise dependent on the above factors).

Květ: střed června (viz výše);Flowering: middle of June (see above);

Květy bez řapíku, obsah etherického oleje (% suché látky); asi 1,0 %, obsah azulenu v etherickém oleji; nejméně 15 %;Petioles, ethereal oil content (% dry matter); about 1.0%, azulene content in an ethereal oil; at least 15%;

Rozpad vysušených květů, květní drogy: mírný, pokud bylo sklizeno před otevřením posledních trubkovitých květů;Disintegration of dried flowers, flower drug: mild if harvested before opening the last tubular flowers;

Průměr pylu: asi 30 /im;Pollen diameter: about 30 µm;

Délka semene: asi 1,25 mm;Seed length: about 1.25 mm;

Počet chromosomů v somatických buňkách: 4 n : 36.Number of chromosomes in somatic cells: 4 n: 36.

4. Plod4. Fetus

Hmota tisíce semen (TKM) semen: 0,06 až 0,13Thousand seed mass (TCM) of seeds: 0.06 to 0.13

5. Klíčivost (KF)5. Germination (KF)

75,75'%75.75 '%

6. Čistota6. Purity

- 95 %- 95%

7. Další znaky7. Other characters

Poměr vysychání čerstvých: suchým (květům) = 5,5 až 6:1, význačná aromatická vůně drogy, jemná aromatická typická chuE čajového nálevu.Drying ratio of fresh: dry (flowers) = 5.5 to 6: 1, remarkable aromatic aroma of the drug, delicate aromatic typical taste of tea infusion.

Příloha AAnnex A

Získání etherického olejeObtaining an ethereal oil

Výchozím materiálem je droga z druhu heřmánku Manzana. К výrobě drogy se používají ty trubkové květy, kde je 30 aŽ 70 %, zejména 40 až 60 % trubkových květů otevřeno. Sušení se provádí v sušárně při teplotě 40 °C po dobu 72 hodin.The starting material is a drug from the type of chamomile Manzan. For the manufacture of the drug, tubular flowers are used where 30 to 70%, in particular 40 to 60%, of tubular flowers are open. Drying is carried out in an oven at 40 ° C for 72 hours.

Etherický olej z květů heřmánku se získává tak, jak je popsáno v následujícím dvouhodinovou destilací drogy vodní parou:Camomile essential oil is obtained as described in the following two-hour steam distillation of the drug:

2,0 h nerozmělněné drogy se smísí v litrové kulaté baňce podrobí dvouhodinové destilaci v refluxní aparatuře (aparatura pro vodní destilaci pro gravimetrické stanovení malých množství etherických olejů). Jako předloha slouží 1 ml pentanu pro analysu. Refluxní rychlost je 40 + 4 kapky za minutu.The 2.0 hour non-comminuted drugs are mixed in a 1 liter round-bottomed flask and subjected to a two-hour distillation in a reflux apparatus (water distillation apparatus for gravimetric determination of small amounts of ethereal oils). 1 ml of pentane for analysis is used as a template. The reflux rate is 40 + 4 drops per minute.

Po skončené destilaci se v pentanu obsažený etherický olej oddělí pokud možno od vody a v aparatuře vězící případně zbytkový etherický olej vymyje pentanem. К odstranění případných zbytků vody se к roztoku přidá malé množství bezvodého síranu sodného a roztok se potom zfiltruje přes skleněnou fritu hustoty D 3 nebo D 4 do zábrusových baněk.After the distillation is complete, the etheric oil contained in the pentane is preferably separated from the water and is washed off with pentane in the apparatus, possibly containing the residual ether oil. To remove any residual water, a small amount of anhydrous sodium sulphate is added to the solution, and the solution is then filtered through a D 3 or D 4 glass frit into a ground glass flask.

Po odpaření pentanu při teplotě 40 °C na vodní lázni a sušení v eksikátoru se olej hodnotí gravimetricky.After evaporation of the pentane at 40 ° C in a water bath and drying in a dessicator, the oil is evaluated gravimetrically.

К takto získanému oleji (cca 20 mg) se potom stanoví chamazulen a bisabolol.The oil thus obtained (about 20 mg) is then determined for chamazulen and bisabolol.

Spektrálně fotometrické hodnocení chamazulenuSpectral photometric evaluation of chamazulene

Stanovený roztok: Determined solution: Celkový ze 2 g drogy získaný etherický olej (asi 20 mg) získaného dříve popsaným způsobem, se rozpustí ve 25 ml n-hexanu nebo ,cýklohexanu. A total of 2 g of the drug obtained, the ether oil (about 20 mg) obtained as described above, is dissolved in 25 ml of n-hexane or cyclohexane. Měřicí aparatura: Measuring apparatus: Fotometr s filtrem (například Eppendorf). Photometer with filter (eg Eppendorf). Vlnová délka: Wavelength: 578 nm 578 nm Kyveta: Specifická extinkce Cuvette: Specific extinction 1 cm chamazulenu 1 cm chamazulene

(1 g/100 ml; 1 cm) : 20,8(1 g / 100 ml; 1 cm): 20.8

Kondenzační kapalina: n-hexan nebo cyklohexanCondensation liquid: n-hexane or cyclohexane

Nalezený obsah chamazulenu v mg/100 g: 12Ο.Ε57θContent of chamazulene found in mg / 100 g: 12Ο.Ε 57 θ

Není-li pro měření к dispozici fotometr s filtrem, lze stanovení provést i pomocí spektrálního fotometru.If a photometer with a filter is not available for measurement, the determination can also be carried out using a spectral photometer.

Měřicí aparatura: Vlnová délka Measuring apparatus: Wavelength Spektrální fotometr (například PM Q II) nebo PM Q III ”Zeiss) 605 nm Spectral photometer (eg PM Q II) or PM Q III ”Zeiss) 605 nm Kyveta Specifická extinkce Cuvette Specific extinction 1 cm chamazulenu (1 g/100 ml; 1 cm) : 24,5 1 cm chamazulene (1 g / 100 ml; 1 cm): 24.5

Kompenzační tekutina: n-hexan nebo cyklohexanCompensation fluid: n-hexane or cyclohexane

Nalezený obsah chamazulenu v mg/100 g: 1Ο2.Ε^θ5 Content of chamazulene found in mg / 100 g: 1Ο2.Ε ^ θ 5

V měřeném roztoku se potom měří bisabolol.Bisabolol is then measured in the measured solution.

Plynově chromatografické stanovení bisabololu a pomocí plynové chromatografie HewlettGas chromatographic determination of bisabolol and by gas chromatography Hewlett

Detektor:Detector:

Sloupec:Column:

Náplň sloupce:Column content:

Teplota:Temperature:

Detektor:Detector:

Vstřikovací blok:Injection block:

Sloupec:Column:

Programování teplotyTemperature programming

Roztok vzorku:Sample solution:

Srovnávací roztok:Reference solution:

Nastřikované množství:Injected amount:

Vyhodnocení:Evaluation:

Obsah bisamololu v mg 100 mg drogy:Bisamolol content in mg 100 mg drug:

Hodnocení ostatních bisaboloidů lze z nálsedujících podmínek:Evaluation of other bisaboloids can be made from the following conditions:

Zařízení:Equipment:

Sloupce:Columns:

Náplň:Cartridge:

Packard, Modell 7 721, Skleněné sloupce 3 m/2 mm 3 % methylfenylsilikonový Gaschrom Q 125 až 150 /im ostatních bisaboloidůPackard, Modell 7,721, Glass Columns 3 m / 2 mm 3% methylphenyl silicone Gaschrom Q 125 to 150 µm other bisaboloids

Packard Modell 5 750, Erba FractovapPackard Model 5 750, Erba Fractovap

350 nebo podobné zařízení350 or similar device

Plamenový ionizační detektorFlame ionization detector

0,031 cm; 200 cm; ocel % silikonového kaučuku XE 60 na silikonované křemelině Chromosorb WAW HP 125 až0.031 cm; 200 cm; steel% silicone rubber XE 60 on siliconized diatomaceous earth Chromosorb WAW HP 125 to

150 /um jako nosič150 µm as carrier

320 °C320 ° C

220 °C až 220 °C220 ° C to 220 ° C

4°/minuta4 ° / minute

Používá se měrného roztoku jako u chamazulenuA specific solution is used as in chamazulene

Asi 15 mg standardního bisabololu se rozpustí v cyklohexanu na objem 25 mlAbout 15 mg of standard bisabolol is dissolved in cyclohexane to a volume of 25 ml

Z roztoku vzorku a srovnávacího roztoku vždy 5 /11From the sample solution and the reference solution always 5/11

Hodnocení se provádí srovnáním ploch maxim lOx navážka (kontrolní) x The evaluation is performed by comparing the areas of maximum 10 x weight (control) x

Plocha/ vzorku:Area / sample:

Plocha/kontrolní provádět případně plynovou chromatografií, napříkladArea / control may be performed by gas chromatography, for example

Serie 800, případně Erba Fractovap Serie 2 350 v průměru; 2 m/2 mm v průměru kaučuk ’’OV 1 na silikonované křemelině jako nosný materiál.Series 800 or Erba Fractovap Series 2,350 in diameter; 2 m / 2 mm diameter rubber 'OV 1 on siliconised diatomaceous earth as carrier material.

Nosný plyn: Teplotní program: Carrier gas: Temperature program: 30 ml/minuta N2 80 až 180 °C, 2,5 (3) °C/minuta30 ml / minute N 2 80-180 ° C, 2.5 (3) ° C / minute Teplota injektor/ detektor: Injector / detector temperature: 200 °C 200 ° C Detektor: Detector: Plamenový ionizační detektor Flame ionization detector

NastřikovanéSprayed

množství: amount: asi 2 /д1 asi 1 : 50 naředěného etherického oleje about 2 / д1 about 1:50 diluted ethereal oil

Hodnocení se provádí zčásti bez, zčásti s vnitřním standardem. Jako vnitřní standard je vhodný methylester kyseliny laurové nebo hexadekan pro chamazulenem chudé případně chamazulenu prosté oleje. U olejů s obsahem chamazulenu vyšším než 5 % je třeba chamazulenu použítThe assessment is carried out in part without, in part with an internal standard. As the internal standard, methyl laurate or hexadecane is suitable for chamazulene-poor or chamazulene-free oil. For oils with a chamazulene content greater than 5%, chamazulene should be used

jako vnitřní standardu, as an internal standard, přičemž stanovení obsahu se provádí fotometricky (při 578 nm). the content determination is carried out photometrically (at 578 nm).

PŘEDMĚT VYNÁLEZUSUBJECT OF THE INVENTION

Claims (4)

1. Způsob získávání nové tetraploidné odrůdy heřmánku (označení Manzana) kulturního rostlinného druhu heřmánku pravého (Chamomilla recutita L., synonymního s Matricaria chamomilla L., Asteraceae), jehož květy sušené při teplotě 40 °C obsahují nejméně 150 mg % chamazulenu, nejméně 300 mg % (-)-alfa-bisabololu a méně než 50 mg % ostatních bisaboloidů, vyznačující se tím, že diploidní odrůda heřmánku DEGUMILL se tetraploidizuje a vyselektované rostliny se podrobí dalším selekcím a množení, popřípadě se z rostlin heřmánku, které se získají z této odrůdy, získává množivo a/nebo heřmánková droga.1. Method for obtaining a new tetraploid variety of camomile (Manzana designation) of the plant species Chamomilla recutita L., synonymous with Matricaria chamomilla L., Asteraceae, whose flowers dried at 40 ° C contain at least 150 mg% chamazulene, at least 300 mg% of (-) - alpha-bisabolol and less than 50 mg% of other bisaboloids, characterized in that the diploid chamomile variety DEGUMILL is tetraploidized and the selected plants are subjected to further selections and propagation, optionally from chamomile plants obtained therefrom variety, obtains multiply and / or chamomile drug. 2. Způsob podle bodu 1, vyznačující se tím, že tetraploidizace se provádí pomocí chemikálií při teplotách mezi 0 a 35 °C pomocí gama-záření, rentgenového záření nebo uf-paprsků při teplotách mezi 0 a 35 °C, pomocí vyšších teplot od 33 až 50 °C, pomocí nižších teplot od 0 do 5 °C, pomocí způsobu dekapitace kalusu nebo pomocí prašníkové kultury.Method according to claim 1, characterized in that the tetraploidization is carried out with chemicals at temperatures between 0 and 35 ° C by means of gamma-rays, X-rays or U-rays at temperatures between 0 and 35 ° C, by means of higher temperatures from 33 up to 50 ° C, using lower temperatures from 0 to 5 ° C, using a callus decapitation method or an anther culture. 3. Způsob podle bodů 1 a 2, vyznačující se tím, že po tetraploidizaci se provádí3. The process according to claim 1, wherein the tetraploidization is carried out a) selekce tetraploidních rostlin podle obsahu účinné látky (nejméně 150 mg % chamazulenu, nejméně 300 mg % bisabololu a méně než 50 mg % ostatních bisaboloidů, vše vztaženo na sušinu), podle současné doby květu, rovnoměrné doby kvetu, rovnoměrného větvení jakož i velikosti hlaviček květů 25 až 35 mm, takto selektované rostliny se klonují a z rostlin získaných klonováním se získává osivo,(a) selection of tetraploid plants according to the active substance content (at least 150 mg% chamazulene, at least 300 mg% bisabolol and less than 50 mg% other bisaboloids, all based on dry matter), by current flowering, uniform flowering time, uniform branching and size flower heads 25 to 35 mm, the plants thus selected are cloned and seed obtained from cloning, b) z takto získaného osiva se získávají potomci, potom následuje selekce podle stupněb) offspring are obtained from the seed thus obtained, followed by selection by step a) a od vyselektovaných rostlin se získává opět osivo,(a) seed shall be recovered from the selected plants, c) dvakrát až čtyřikrát se opakují opatření podle stupně b),(c) the measures referred to in (b) are repeated two to four times; d) z osiva získaného podle stupně c) se získává potomstvo, toto se selektuje podle stupně a), takto vyselektované rostliny se klonují a z rostlin získaných klonováním se získává osivo.d) offspring are obtained from the seed obtained according to step c), this is selected according to step a), the plants thus selected are cloned and seed obtained from the cloning plants. 4. Způsob výroby heřmánkové drogy z květů heřmánku podle bodů 1 až 3, vyznačující se tím, že květy se sklízejí ve vegetačním stadiu v době, kdy teprve 30 až 70 % trubkovitých květů v květenství je otevřeno a květy se suší při vzdušné teplotě ne vyšší než 50 °C.4. A method for producing a chamomile drug from chamomile flowers according to items 1 to 3, characterized in that the flowers are harvested at the vegetation stage at a time when only 30-70% of the tubular flowers in the inflorescence are open and the flowers are dried at air temperature not higher 50 ° C.
CS844737A 1983-06-29 1984-06-21 New variety of amomile cultivating method CS244688B2 (en)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3323411 1983-06-29

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CS473784A2 CS473784A2 (en) 1985-09-17
CS244688B2 true CS244688B2 (en) 1986-08-14

Family

ID=6202680

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CS844737A CS244688B2 (en) 1983-06-29 1984-06-21 New variety of amomile cultivating method

Country Status (18)

Country Link
JP (1) JPS6047621A (en)
AT (1) AT397021B (en)
BR (1) BR8403223A (en)
CH (2) CH667180A5 (en)
CS (1) CS244688B2 (en)
EG (1) EG17639A (en)
ES (1) ES533797A0 (en)
FI (1) FI80982C (en)
FR (1) FR2547982B1 (en)
GB (1) GB2142535B (en)
GR (1) GR79535B (en)
HU (2) HU209628B (en)
IL (1) IL72245A (en)
IT (1) IT1177840B (en)
KE (1) KE3762A (en)
NL (2) NL8402043A (en)
PL (1) PL248421A1 (en)
ZA (1) ZA844949B (en)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2167955B (en) * 1983-06-29 1988-12-07 Degussa Preparation of camomile extracts and ethereal oils
IN163594B (en) * 1984-03-16 1988-10-15 Degussa
JPS61134318A (en) * 1984-11-30 1986-06-21 アスタ・メディカ・アクチェンゲゼルシャフト Manufacture of alcoholic chamomile extract or etheric chamomile oil
DE3542756C3 (en) * 1984-12-19 1997-09-04 Asta Medica Ag Process for the preparation of a new tetraploid and bisabolol-rich chamomile with improved properties
DE3806210A1 (en) * 1988-02-26 1989-09-07 Robugen Gmbh CHAMOMILE
CN102893860A (en) * 2011-10-19 2013-01-30 崔广荣 Stevia rebaudiana bertoni polyploid in vitro induction technology

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE1814440A1 (en) * 1967-12-15 1969-07-31 Ottorino Sparano Process for the genetic influence of useful and ornamental plants
DE2402802C3 (en) * 1974-01-22 1979-06-13 Deutsche Gold- Und Silber-Scheideanstalt Vormals Roessler, 6000 Frankfurt Obtaining a chamomile drug with a high content of chamazulene and bisabolol

Also Published As

Publication number Publication date
CS473784A2 (en) 1985-09-17
HUT41940A (en) 1987-06-29
FI80982C (en) 1990-09-10
EG17639A (en) 1990-10-30
GB2142535B (en) 1987-08-05
HU209628B (en) 1994-09-28
FR2547982A1 (en) 1985-01-04
KE3762A (en) 1987-10-09
FI842616L (en) 1984-12-30
CH667205A5 (en) 1988-09-30
AT397021B (en) 1994-01-25
BR8403223A (en) 1986-02-04
HUT63022A (en) 1993-07-28
FR2547982B1 (en) 1986-11-21
JPS6047621A (en) 1985-03-15
ZA844949B (en) 1986-02-26
IT8448462A0 (en) 1984-04-27
IL72245A0 (en) 1984-10-31
NL8403671A (en) 1986-07-01
IL72245A (en) 1988-06-30
IT1177840B (en) 1987-08-26
NL8402043A (en) 1985-01-16
ES8503231A1 (en) 1985-02-16
GR79535B (en) 1984-10-30
HU203184B (en) 1991-06-28
ATA208784A (en) 1993-06-15
GB2142535A (en) 1985-01-23
GB8416563D0 (en) 1984-08-01
CH667180A5 (en) 1988-09-30
FI842616A0 (en) 1984-06-28
PL248421A1 (en) 1986-05-06
FI80982B (en) 1990-05-31
ES533797A0 (en) 1985-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DE3423207C2 (en) Process for the production of a new variety of chamomile (called Manzana)
CS244688B2 (en) New variety of amomile cultivating method
Datta Amaryllis/hippeastrum
JP2000350526A (en) Hybrid plant of onion and garlic or leek, breeding method and propagation method thereof
DE3542756C2 (en)
Nitsch The role of plant hormones in fruit development
AT406732B (en) METHOD FOR OBTAINING AGENTS WITH ANTIPHLOGISTIC EFFECT FROM MATRICARIA CHAMOMILLA
LALLAWMZUALI INTRASPECIFIC HYBRIDIZATION AND COMPATIBILITY STUDIES IN TUBEROSE (Polianthes tuberosa L.)
FI81007B (en) FOERFARANDE FOER ERHAOLLANDET AV ETT AEMNE MED ANTIINFLAMMATORISK VERKAN UR MATRICARIA CHAMOMILLA.
DE3446220C2 (en) Process for the preparation of a new tetraploid and bisabolol-rich chamomile with improved properties
AT386522B (en) Process for the production of a novel composition with antiinflammatory effect
Scholz et al. Propagation of cuttings of herbage plants by means of growth-promoting substances.
Antonidaki-Giatromanolaki Development of native species of Crete in the Urban landscape: an investigation of systems and plant reproduction, adaptability and fitness of wild species in commercial horticulture
CN118058188A (en) Method for creating double haploid of luffa by distant hybridization induction
EA041652B1 (en) METHOD FOR OBTAINING CALLUS CULTURE OF ARTEMISIA VULGARIS L. CELLS.
PAUL et al. PHARMACOGNOSY OF Rauvoifia serpentina {L,) Benth. GX Kruz IN TH6 GCOLOGICAL CONDITION OF DARJGGLING DISTRICT OF WGST BGNGAL
DD223064A5 (en) Process for the preparation of antiphlogistic agents
DD240135A5 (en) Process for the preparation of a new antiphlogistic agent
DD223064B5 (en) Process for the preparation of antiphlogistic agents
SOBHANA JDctor of Philosophy in Hortitulturt
DE3446219A1 (en) Process for the production of a composition with antiinflammatory effect