CS231969B2

CS231969B2 - Manufacturing process of flavanoe derivatives

Info

Publication number: CS231969B2
Application number: CS80431A
Authority: CS
Inventors: John F Batchelor; Denis J Bauer; Harold F Hodson; John W T Selway; David A B Young
Original assignee: Wellcome Found
Priority date: 1978-03-15
Filing date: 1980-01-22
Publication date: 1985-01-16
Also published as: CS231968B2

Description

ťeiKOSLOVíMEKA sociALféricKÁ 1 U ϋ 1 L 1 K A POPIS VYNÁLEZU 231969 (11) (B2) (1S) K PATENTU (51) Int. Cl.5 C 07 D 311/69 (22) Přihlášeno 14 03 79(21) (PV 431-80) (32) (31) (33) Právo přednosti od 15 03 78(10251-78) Velká Británie (40) Zveřejněno 28 01 83 ÚŘAD PRO WNAlKVa osjstv (45) Vydáno 15 12 86 (72)

Autor vynálezu BATCHELOR JOHN FREDERICK, BECKENHAM, BAUER DENIS JOHN,LEATHERHEAD, HODSON HAROLD FRANCIS, BECKENHAM, SELWAY JOHN WILLIAM TALBOT, CRANBROOK, YOUNG DAVID ALBERT BLAKER, WEST WICKHAM (Velká Británie] (73)

Majitel patentu THE WELLCOME FOUNDATION LIMITED, LONDÝN (Velká Británie) (54) Způsob výroby flavanových derivátů 1

Vynález se týká způsobu výroby protivi-rových látek, vhodných jako účinná složkafarmaceutických přípravků, účinných proti rhínovirům.

Rhinoviry způsobují přibližně 70 ·% one-mocnění, obvykle vnímaných jako nachla-zení nebo· zánět horních cest dýchacích,přestože tyto choroby mohou být způsobe-ny i Jinými příčinami, například enterovi-ry, coironaviry a alergickými reakcemi. Naviry jsou citliví všichni lidé a nákaza těmitoviry je nejčastější příčinou absence v za-městnání a má proto velký hospodářský vý-znam.

Infekce se přenáší při kašli nebo kýchá-ní, kapénkovou infekcí tak, že kapénky jsouvdechovány dalším člověkem a vyvolají ná-kazu dýchacích cest. Po inkubační době 48hodin až 2 týdny se vyvinou u infikovanéosoby příznaky jako bolest v krku, kašel,kýchání, zánět sliznic a horečka vzhledemk sekundární bakteriální infekci.

Po nákaze určitým sérotypem rhinoviruzůstává určitá odolnost, která však se ne-týká odlišných sérotypů. Při kontinuální re-inifekci sérotypy, které v určité společnostipřevažují se tímto způsobem udržuje odol-nost proti virům u většiny členů této spo-lečnosti. K další nákaze dojde pouze v prí- 2 pádě, že se objeví nový sérotyp, což se stá-vá průměrně dvakrát až třikrát za rok.

Protože neexistuje zkřížená imunita avzhledem k tomu, že je známo alespoň 120od sehe odlišných imunologicky zjistitelnýchrhinovirů, není možno provádět očkování.Jako jeden ze způsobů snižování počtu one-mocněni byl v některých případech v uza-vřených prostorách desinfikován vzduch, to-to opatření však bylo neúspěšné. Je zřejmé,že jediná použitelná prevence by mohla spo-čívat v objevení sloučeniny, kterou by bylomožno podávat po delší dobu a která by by-la účinná proti všem nebo alespoň téměřvšems běžným· sérotypům rhinovirů. Přes roz-sáhlý výzkum· se prozatím takovou slouče-ninu nepodařilo najít, takže zatím neexistu-je žádná cheimoterapeutická látka, kterouby bylo možno zajistit ochranu proti náka-ze.

Nyní bylo zjištěno, že fiavan a různé de-riváty této sloučeniny jsou účinné proti ně-kterým virům, včetně těch, které způsobujíinfekci dýchacích cest, jako jsou picornavi-ry, mengoviry, arboviry, myxoviry, corona-viry, viry způsobující herpes a denovlry. Ty-to sloučeniny jsou zvláště účinné proti rhi-nnvirům, zvláště proti aérotypůim 1B, 2 a 9.Kromě sloučenin, které spadají do této tří- 231969 231969 3 4 dy byly dále připraveny a zkoumány novéderiváty těchto látek. Bylo pozorováno, žetyto sloučeniny mohou inhibovat rhínoviryin vltro v tkáňové kultuře a některé z nichbyly účinné i proti jiným virům, napříkladproti virům, způsobujících opar, chřipku aspalničky.

Mimoto bylo možno prokázat, že některésloučeniny jsou účinné proti rhinovirům invivo, zejména v případě, že se podávají vdostatečné dávce lidem a jiným savcům.Flavan sám má dobrou účinnost, substituo-vané deriváty mají účinnost podobnou, ne-bo ještě lepší v závislosti na povaze a po-loze jednotlivých substituentů.

Uvedené látky mají velmi nízkou toxicitu,LDso je vyšší než 500 mg/kg. Účinnost mů-že být zjišťována běžnými testy na agaro-vých plotnách s použitím kotoučů, při nichžse měří snížení počtu plaků po aplikaci ú-činné látky. Postupuje se tak, že se v Petri-iho misce vytvoří jednovrstevná buněčnákultura, která se infikuje suspenzí viru apak se převrství živným agarem ve forměgelu. Tento gel zajistí, že se virus dále ne-šíří a vzniknou lokalizovaná poškození bu-něk nebo se tvoří plaky. Při inhibici plaků se uloží na povrch ge-lu kotouč filtračního papíru, který při im-pregnaci roztokem účinné sloučeniny zadrží0,01 ml použitého roztoku. Účinná látka pakmůže difundovat gelem tak, že nejvyšší kon-centrace této látky bude v oblasti kotoučea nejnižší koncentrace u periferie použitémisky. Účinnost použité sloučeniny je možnoměřit poloměrem inhibice tvorby plaků odstředu kotouče. Při testu na snížení tvorby plaků se měřízjistitelná účinnost. Do gelu, kterým je kul-tura převrstvena se včlení různé koncentra-ce účinných látek, obvykle jde o zlomkymolární koncentrace. Potlačení tvorby plakůje obvykle přímo závislé na koncentraci po-užité sloučeniny. Počet plaků se obvykle u-vádí v % ve srovnání s kontrolními zkouš-kami, takže je možno vytvořit křivku závis-losti inhibice na koncentraci účinné látky.Z této křivky je možno stanovit účinnoudávku EDso, při níž je počet plaků potlačenna 50 %. V chemické literatuře je známa celá řa-da flavanů, o žádném z nich však dosud ne-bylo uváděno, že je možno jej užít k léčeb-ným účelům s výjimkou 3,3‘,4,4‘,5,7-hexahyd-roxyflavanu, kterého je možno užít při žit-ních onemocněních, mimoto byl 3-hydroxy-flavan úspěšně užit proti virovému zánětujater [Lancet, 2, 1153 (1977)], dále byly3,6-dialkyl- nebo 3,6-dialkoxylflávány (USpatent č. 3 553 047] užívány po snížení hla-diny cholesterolu v krvi, l-epi-3‘,4‘,5‘,5,7--pentahydroxyflavan-3-ol (J. M. Gazave,Fruits, 32, 275 až 284, (1977)), byl užit ja-ko látka, zabraňující vzniku kurdějí a 3,3‘,-4‘,5,7-pentahydroxyflavan (francouzské pa-tentové spisy č. 988 332 a 988 333] má vita-mínům podobný účinek na krevní kapiláry.

Předmětem vynálezu je způsob výrobyflavanových derivátů obecného vzorce II

jakož i jejich z farmaceutického hlediskapřijatelných solí, kde R1A až R1D a R2A až R2E znamenají atomyvodíku, atomy halogenu, nitroskupiny, kya-noskupiny, trifluormethylové skupiny, alky-lové zbytky o 1 až 4 atomech uhlíku, alko-xylové zbytky o 1 až 4 atomech uhlíku, ami-noskupiiny, mono- a dialkylaminoskupinyvždy o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylovéskupině nebo hydroxyskupiny za předpokla-du, že alespoň jedna ze skupin, avšak na-nejvýš čtyři ze skupin R1A až Rin a R2A ažR2E jsou odlišné od atomu vodíku, s výjim-kou následujících derivátů 6-aminoflavan, 4‘-hydroxyflavan, 5- hydroxyflavan, 6- hydroxyflavan, 7- hydroxyflavan, 4‘-methoxyf lavan, 5- methoxyf lavan, 6- methoxyflavan, 7- methoxyflavan, 8- methoxyf lavan, 6-methylflavan, 8-methylflavan, 3‘,4‘-dihydroxyf lavan, 4‘,7-dihydroxyf lavan, 5.7- dihydroxyflavan, 3‘,4‘-dimethoxyf lavan, 4‘,6-dimethoxyf lavan, 4‘,7-dimethoxyf lavan, 4‘,8-dimethoxyf lavan, 5.7- dimethoxyflavan, 7.8- dimethoxyflavan, 5.7- dimethylflavan, 6.8- dimethylflavan, 4‘-hydroxy-6-methoxyf lavan, 4‘-hydroxy-7-methylf lavan, 5- hydroxy-7-methoxyf lavan, 4'‘-methoxy-6-hydroxyflavan, 4‘-isopropoxy-6-hydroxyf lavan, 4‘-n-butoxy-6-hydroxyf lavan, 4‘-sek.butoxy-6-hydroxyf lavan, 6- hydroxy-7-methoxyf lavan, 4‘-methoxy-7-hydroxyf lavan, 5-methoxy-7-hydroxyf lavan, 231969 3 5- imethyl-7-hydroxyf lavan, 6- methyl-7-hydroxyflavan, 7- hydroxy-8-methylflavan, 6-ethyl-7-hydroxyf lavan, 6-n-butyl-7-hydroxyf lavan, 4‘-methoxy-6-methylf lavan, 4‘-methoxy-6-terc.butylflavan, 4‘-m'ethoxy-7-methylf lavan, 5- methyl-8-isopropylf lavan, 6- terc.butyl-8-methylf lavan, 3‘,4‘,6-trihydroxyflavan, 3‘,4‘,7-trihydroxyflavan, 4‘,5,7-trihydroxyflavan, 3‘,4‘,7-trimethoxyf lavan, 4‘,5,7-trimethoxyflavan, 4‘,6,7-trimethoxyflavan, 3‘,6-diimethoxy-4‘-hydroxyf lavan, 4‘,5-dihydroxy-7-methoxyf lavan, 5-,7-dihydroxy-4‘-methoxyflavan, 5- hydroxy-7-methoxy-8-methylf lavan, 5.8- dimethyl-7-hydroxyflavan, 3‘,6-dimethoxy-4‘-ethoxyflavan, 6.8- dimethyl-4‘-methoxyflavan, 4‘,6-dimethoxy-8-methylf lavan, 3‘,4‘,5,7-tetrahydroxyflavan, 3‘,4‘-dihydroxy-5,7-dimethoxyf lavan, 3.5.7- trihydroxy-4‘-methoxyflavan,4‘,6-diihydroxy-5,7-dimethoxyf lavan,3‘,4‘,5,7-tetramethoxyf lavan,3‘,4‘,5‘,7-tetramethoxyflavan, 4.6.7.8- tetrachlorflavan, 4‘-hydroxy-7-methoxyf lavan, 6- terc.butoxy-4‘-methoxyf lavan, 6,4‘-dihydroxyflavan, 5-ethyl-7-hydroxyflavan, 7- hydroxy-4‘-meťhylf lavan, 4‘-isobutO'xy-6-methoxyf lavan, 4‘-isopropoxy-6-methoxyf lavan, 7-hydroxy-5-methoxy-8-methylflavan,7,4‘-dimethoxy-5-hydro.xyflavan,3‘,4‘-dimethoxy-6-methylf lavan, 5.7- dimethyl-6-hydroxyflavan, 7-hydroxy-5-methoxy-6-methylf lavan,4‘-hydroxy-7-methoxy-8-methylf lavan,7,8,4‘-trihydroxyflavan, 7,8,3‘-trimethoxyflavan, 5.7- dihydroxy-3‘,4‘-d.imethoxyflavan,6,4‘-dihydroxy-5,7-dimethoxyflavan,7,8,3‘,4‘-tetrametihoxyflavan,7,3‘,4‘,5‘-tetramethoxyflavan,

vyznačující se tím, že se kondenzuje při tep-lotě 150 až 250 °C sloučenina obecného vzor-ce V

kde X znamená hydroxylovou skupinu neboatom halo-genu a

R1A až R1D mají svrchu uvedený významse sloučeninou obecného vzorce VI

kde R2A až R2E mají svrchu uvedený význam,a popřípadě se převede získaná sloučeninaobecného vzorce II na jinou sloučeninu o-becného vzorce II a popřípadě se sloučeni-na obecného vzorce II, obsahující aminosku-pinu nebo hydroxylovou skupinu převedena svou sůl, přijatelnou z farmaceutickéhohlediska reakcí s příslušnou anorganickounebo organickou kyselinou nebo zásadou vevodném reakčním prostředí.

Bylo· rovněž zjištěno, že účinnost můžezáviset na velikosti substituentu. Napříkladv případě, že se substituenty nacházejí v po-lohách 4‘ a 6, je vyšší účinnost spojena sesubstituentem, jehož hodnota [R]D je niž-ší než 15, s výhodou nižší než 10.

Hodnota [R]D je opravený molekulárníobjem, tak jak je uvedeno v publikaci S.Glasstons, Text-book of Physical Chemistry,2. vydání 1948, MacMillan, Londýn, str. 528.Je možno ji vypočítat z molární hmotnostiM, hustoty p a refrakčního indexu n podlerovnice:

Hodnoty pro celou řadu substituentů by-ly stanoveny Vogelem a uveřejněny v }.C-hem. Soc. v průběhu roku 1948.

Volba počtu substituentů, jejich polohy ajejich typu se provádí tak, aby bylo mož-no zvýšit pravděpodobnost vyšší účinnosti.Je však třeba uvážit, že výsledné vlastnostisloučeniny závisí také na jiných fyzikálnícha biologických podmíihkách.

Soli sloučenin obecného vzorce II je mož-no tvořit v případě, že sloučenina nese hyd-roxylovou skupinu nebo aminoskupinu. Far-maceuticky přijatelnými solemi jsou zejmé-na. soli s anorganickými kyselinami, napří-klad s kyselinou chlorovodíkovou nebo síro-vou a s organickými kyselinami, napříkladkyselinou mléčnou, maleinovou a octovou.Může jít také o soli se zásadami, napříkladsoli sodné nebo draselné.

Sloučeniny podle vynálezu mohou néstrůzné substituenty, přičemž se přihlíží k vý-hodným substituentům podle svrchu uvede- 231969 7 8 ných podmínek. Nejvýhodnějšími novýmisloučeninami pokud jde o účinnost ve svr-chu uvedených testech jsou 4-fl'uorflavan,3‘,4‘-dichlor-6-methylflavan, 4‘-methyl-7-me-thylflavan, 6-chlor-4‘-methoxyflavan, 6-me-thoxyflavan, 4‘-methylflavan, 6-chlor-4‘-me-thylflavan a 4‘,6-dichlorflavan. Výchozí látky jsou běžně dostupné neboje možno je připravit známými způsoby.

Sloučeniny, získané způsobem podle vy-nálezu je možno· zpracovávat na farmaceu-tické přípravky, které obsahují jako účin-nou složku sloučeninu obecného vizorce II,tautomer této sloučeniny nebo z farmaceu-tického hlediska přijatelnou sůl této slou-čeniny. Farmaceutický přípravek obsahujeúčinnou dávku sloučeniny obecného vzorceII a běžný farmaceutický nosič. •Pokud jde o pojem účinné dávky, míní sepod tímto názvem předem určené množstvísloučeniny s protivirovým účinkem tak, abypřípravek byl účinný proti virům in vivo.Farmaceuticky přijatelné nosiče jsou známélátky, kterých se běžně užívá při výroběfarmaceutických přípravků a které mohoubýt pevné, kapalné nebo plynné. Jinak jsoutyto nosiče inertní vzhledem k účinné látcea neškodné pro lidský organismus.

Farmaceutické přípravky s obsahem slou-čenin, vyrobených způsobem podle vynále-zu je možno podávat parenterálně, perorál-ně, do nosu nebo ve formě čípků, ve forměinhalace, jako mazání, krém, prášek, aero-sol, páry nebo nosní kapky apod. Při celkové infekci nebo při ochraně pro-ti této infekci se pohybuje dává volnéhoflavanu ve farmaceutických přípravcích vrozmezí 0,125 mikrogramů až 1,25 mg na 1kilogram, s výhodou 0,25 mikrogramů až0,125 mg na kg, zvláště 8 až 30 mikrogra-mů na kg hmotnosti, přípravek se užívá vněkolika denních dávkách v celkovém množ-ství 10 mikrogramů až 100 mg, obvykle 0,1až 10 mg na jednotlivou dávku. V případě perorálního podání mohou prás-ky nebo granule obsahovat nosič, disperz-ní a/nebo povrchově aktivní činidlo a je mož-no je podávat ve vodě nebo v sirupu, dáleje možno tímto· materiálem plnit kapsle ne-bo vytvářet suspenze nevodné povahy, při-čemž je možno užít suspenzní činidlo. Přivýrobě tablet je možno užít plnivo a kluznéčinidlo, ve všech případech je možno užítkonzervační činidlo, chuťové a vonné látky,zahušťovadlo nebo emulgační činidlo. Vý-hodným typem přípravku je tableta, kapsle,nebo granule, všechny tyto formy mohoubýt povlékané. Je možno užít také roztokuúčinné látky v oleji. Přípravky je možno podávat také do no-su s použitím inhalačních přístrojů, aeroso-lů nebo ve formě spraye nebo inhaíační pá-ry s obsahem sloučenin vzorce II. Při parenterálním podání nebo v případěaerosolu nebo kapek je možno vytvořit vod-ný roztok o koncentraci 0,1 až 10 %, s vý-hodou 0,1 až 1 °/o, zvláště 0,2 % (hmotnost-ní/objemová %). Roztok může obsahovatantioxidační látky, pufry a podobně.

Vynález bude osvětlen následujícími pří-klady. Příklad 1

Způsob výroby 6,8-dichlorflavanu

Směs 15,3 g 2,4-dichlorfenolu, 100 ml 10%vodného roztoku hydroxidu sodného a 37,5mililitru 40% vodného roztoku formaldehy-du se zahřívá na teplotu 95 až 100 °C po do-bu 4 hodin, pak se směs zchladí a okyselípřidáním 70 ml kyseliny sírové o koncentra-ci 2 N. Vyloučí se olejovitá kapalina, kteráse extrahuje toluenem, extrakt se promyjeroztokem hydrogenuhličitánu sodného, na-čež se vysuší a odpaří. Odparek se nechápřekrystalovat z vroucí vody, čímž se získá4,0 g 3,5-dichlor-2-hydroxybenzylalkoholu oteplotě tání 81 až 82 °C, po sušení při tep-lotě 56 °C a tlaku 2660 Pa. 4,0 g 3,5-dichlor-2-hydroxybenzylalkoholua 2,19 g styrenu se zahřívá 3 hodiny na ISOstupňů Celsia. Požadovaný 6,8-dichlorflavanse získá chromatografií surové reakční smě-si na kysličníku hlinitém, který se vymývásměsí toluenu a petroletheru o teplotě varu60 až 80 °C v poměru 1: 1, čímž se získá 2,6gramu produktu o teplotě tání 74 až 76 °C. Příklad 2

Způsob výroby 8-chlorflavanu 3-chlor-2-hydroxybenzylalkohol byl připra-ven způsobem popsaným v publikaci Zinatea další J. Prakt. Chem. [2] (152] (1939) 126.3,96 g alkoholu se zahřívá s 2,6 g styrenuna teplotu 180 °C 2 hodiny, reakční směs sechromatografuje na kysličníku hlinitém, e-lučním činidlem je toluen. Olej, získaný od-pařením eluátu se destiluje ve vakuu, čímžse získá 0,12 g 8-chlorflavanu o teplotě va-ru 155 až 160 °C při tlaku 10,7 Pa.Příklady 3 až 48

Způsobem podle příkladů 1 a 2 lze získatnásledující sloučeniny: 231969 9 10 Příklad

Sloučenina

Teplota tání °C 3 4‘-ethylflavan 94 4 7-chlorflavan 37 až 40 5 6-chlor-4‘-methylflavan 132 až 134 6 4‘-6-diehlorf lavan 97 až 99 7 6-chlor-4‘-methoxyf lavan 83 až 84 8 4‘,6-dimethylflavan 90 až 91 9 4‘-methoxy-6-methylflavan 57 10 4‘,7-dichlorflavan 62 až 65 11 7-chlor-4‘-methylf lavan 77 až 78 12 4‘-chlor-6-methylf lavan 89 13 3‘,4‘-dichlorflavan 76 14 7-chlor-4‘-methoxyflavan 84 15 2‘,4‘-dichlorflavan teplota varu 138 až 142 přitlaku 6,7 Pa ie 2‘,6‘-dichlo.rflavan 87 až 89 17 4‘-bromflava.n 78 až 79 18 2‘-meíhylflavan 73 až 75 19 3‘,4‘-dichlor-6-methylf lavan teplota varu 170 až 180 přitlaku 20 Pa 20 4‘-chlorflavan 76 až 77 21 4‘,-methoxyflavan 80 až 81 22 2‘-chlorflavan teplota varu 130 až 135 přitlaku 13,3 Pa 23 3‘-chlorflavan teplota varu 120 až 125 přitlaku 9,3 Pa 24 3‘-methoxyflavan 53 až 55 25 4‘-fluorflavan 66 až 67 26 4‘-brom-6-chlorf lavan 10 5 až 107 27 6-fluorflavan 66 až 68 28 6-bromflavan 58 až 59 29 ,6-brom-4‘-methylflavan 129 až 130 30 6-brom-4‘-chlorf lavan 78 až 81 31 2‘-methoxyflavan 80 až 81 32 3‘-trifluormethylflavan 64.až 65 33 6-methoxyflavan 85 až 86 34 4‘,8-dichlorflavan teplota varu 137 až 142 přitlaku 8 Pa 35 4‘-hydroxyfIavan 97 až 98 36 2‘-hydroxyflavan teplota varu 130 až 135 přitlaku 60 Pa 37 6-chlorflavan 71 až 72 38 6-methylflavan teplota varu 138 až 148 přitlaku 67 Pa 39 3‘-methylflavan teplota varu 114 až 120. přitlaku 13 Pa 40 4‘- [ Ν,Ν-dimethy lamino j f lavan 77 až 78 41 4‘-aminoflavan 85 až 87 42 4‘-isopropylflavan . 46 až 47 43 6-chlor-4‘-isopropylf lavan 117 až 119 44 6-ethylflavan teplota varu 130 až 140 přitlaku 20 Pa 45 4‘,5,7-trihydroxyflavan 212 až 215 46 4‘-chlor-6-ethylf lavan 61 až 63 47 6-brom-4‘-methoxyf lavan 121 až 123 48 2‘,4‘-dimethylf lavan teplota varu 135 až 145 přitlaku 107 Pa Příklad 49

Pokusy in vivo 4‘,6-dichlorflavan byl rozpuštěn v olivo-vém oleji v koncentraci 3 mg/ml a 1 mg/ml.Vždy 0,1 ml těchto roztoků byl podán myšiperorální cestou. 1/2 hodiny po této dávce, 1 hodinu a pakkaždou hodinu až do 7. hodiny byla myšímodebrána z retroorbitální žilní pleteně krev.Pak byla krev odebrána ještě 24 hodin popodání účinné látky. Krevní plasma bylazkoumána na protivínovou účinnost způso-bem, který byl svrchu uveden. V průběhu24 hodin byl také shromažďován trus kaž- 231969 11 12 dé myši, tento trus byl rozetřen s co nej-menšíím množstvím absolutního alkoholu avzniklá kapalina byla stejným způsobemzkoumána na protivirovou účinnost. Pak by-ly odstraněny žlučníky u všech myší a kaž-dý z nich byl extrahován 10 ml absolutní-ho alkoholu. Získaný extrakt byl rovněžzkoumán na protivirovou účinnost svrchuuvedeným způsobem.

Po 2 hodinách po podání bylo možno po-zorovat protivirový účinek v krevní plasmě,obsahu žlučníku i v trusu. Po kalibraci po-mocí standardní křivky bylo možno proká-zat, že koncentrace účinné látky v plasmě1 hodinu po podání je 2 až 4 mikromoly umyší, kterým byla podána nižší dávka a 10miikromolů u myší, kterým byla podána vyš-ší dávka (dávky jsou přibližně 30 mg/kg a100 mg/kg tělesné hmotnosti myši). P ř í k 1 a d 50

Intranazální aplikace — stimulace in vitro

Byly připraveny Petriho misky stejnýmzpůsobem jako v případě inhibičního testua na povrchu gelu byla připravena jedno-buněčná vrstva. 4‘,6-D,iichlorflavan byl roz-puštěn v ethanolu a byl nanesen na Petri-ho misku v množství 1 pg. Po odstranění e-thanolu odpařením proniká dostatečnémnožství účinné látky do vrstvy gelu, takžeje možno prokázat úplnou inhibici tvorbyplaků. Příklady 51 až 52 V následujících příkladech byly připrave-ny různé farmaceutické přípravky běžnýmzpůsobem a tyto přípravky byly určeny kpodání savcům. Příklad 51

Směs pro použití v inhalačním přístrojibyla připravena z následujících složek:

Sloučenina množství 4‘,6-dichloirflavan 0,6 g isopropylmyristát 10 g

Polyoxyethylen (20) sorbitan monooileét 0,5 g

Sorbitan monooleát 0,5 g kyselina methyl-p-hydroxybenzoová 0,1 g voda do 100 ml Příklad 52

Suspenze pro použití ve formě nosníchkapek byla připravena z následujících slo-žek:

Sloučenina množství 4‘,6-dichlorflavan 0,6 g Xanthanová pryž 0,1 g chlorid sodný 0,5 g laurylsíran sodný 0,1 g kyselina methyl-p-hydroxybenzoová 0,1 g voda do 100 ml

Xanthanová pryž je pryž typu polysacha-ridu, jejímiž hlavními hexosovými jednotka-mi j,sou D-glukóza, D-mannóza a kyselinaD-glukuronová, pryž rovněž obsahuje pyro-hroznan a je částečně acetylována.Příklad 53

Kapsle 1

Sloučenina množství 4‘,6-dichlorflavan 6 g laktóza sušená rozprašováním 300 g

Do želatinových kapslí velikosti 0 se plní500 mg směsi, kapsle obsahuje 10 mg účin-né látky. Příklad 54

Kapsle 2

Sloučenina množství 4‘,6-dichlorflavan 6 g laktóza sušená rozprašováním 208 g kukuřičný škrob 20,8 g polyvinylpyrrolidon 5,2 g Želatinové kapsle velikosti 1 se plní 400miligramy svrchu uvedené směsi. Kapsle ob-sahuje 10 mg účinné látky. Příklad 55

Tablety s obsahem 4‘,6-dichlorflavanu

Směs k výrobě tablet s obsahem 10 mg4‘,6-dichlorflavanu, 90 mg laktózy, 10 mgkukuřičného škrobu a 1 mg stearanu ihořeč-naitého se připraví granulací za vlhka.Příklady 56 až 105

Směs pro výrobu tablet, z nichž každá ob-sahuje některý z flavanových derivátů zpříkladů 1 až 50 se připraví způsobem podlepříkladu 55.

Claims

231969 13 14 Příklad 106 Flavanový derivát EDso (μΜ) Olejový roztok 4‘,6-dichlorflavanu je mož- 3‘,4‘-dichlor-6-methyl- 0,017 no připravit z následujících složek: 4‘-fluor- 0,0175 4‘-brom-8-chlor- 0,021 Sloučenina množství 4‘-brom- 0,036 4‘-chlor- 0,04 4‘,6‘-dichlorflavan 1 g 3‘,4‘-dichlor- 0,04 olivový olej B. P. 1 g 4‘,6-dimethyl- 0,042 flavain 0,046 Účinná látka se rozpustí v olivovém ole- 2‘,6‘-dichlor- 0,048 ji pro perorální podání. 4‘,7-dichlor- 0,048 4‘-amino- 0,05 Příklad 107 6-chlor- 0,05 4‘-hydroxy- 0,06 Různé flavanové deriváty byly zkoumány 2‘,4‘-dichlor- 0,064 testem na inhibici plaků, tak jak byl svrchu 4‘-acetoxy- 0,067 popsán. EDso pro tyto sloučeniny proti rhi- 4‘-methoxy-' 0,07 noviru sérotyp 1B jsou uvedeny v následu- 7-chlor- 0,07 jící tabulce: 4‘-methyl-7-chl‘or- 0,083. 4‘-methoxy-6-methyl- 0,1 Flavanový derivát EDso (μΜ) 2‘-chlor- 0,112 3‘-methoxy- 0,125 4‘,6-dichlor- 0,0014 6-methyl- 0,15 . 4‘-methyl-6-chlor- 0,0023 4‘-N,N-dimethylamino- 0,265 4‘-methyl- 0,0125 3‘-chlor- 0,27 6-methoxyl- 0,0125 3‘-methyl- 0,29 4‘-methoxy-6-chlor- 0,013 2‘-methoxy- 0,37 2‘-methyl- 0,015 2‘-hydroxy- ' 0,78 4‘-chlor-7-methyl- 0,0155 3‘-trifluormethyl- 1,4 , PREDMET VYNÁLEZU Způsob výroby flavanových derivátů o- 6-aminoflavan, becného vzorce II 4‘-hydroxyflavan,

jakož i jejich z farmaceutického hlediskapřijatelných solí, kde R1A až R1D a R2A až R2E znamenají atomyvodíku, atomy halogenu, nitroksupiny, kya-noskupiny, trifluormethylové skupiny, alky-lové zbytky o 1 až 4 atomech uhlíku, alko-xylové zbytky o 1 až 4 atomech uhlíku, ami-noskupiny, mono- a dialkylaminoskupimyvždy o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylovéskupině nebo hydroxyskupiny za předpokla-du, že alespoň jedna ze skupin, avšak nej-výš 4 ze skupin R1A až R1D a R2A až R2E jsouodlišné od atomu vodíku, s výjimkou násle-dujících derivátů 5- hydroxyflavan, 6- hydroxyflavan, 7- hydroxyflavan, 4‘-methoxyf lavan, 5- methoxyflavan, 6- methoxyf lavan, 7- methoxyf lavan, 8- methoxyf lavan, 6-methqxyflavan, '8-methylf lavan,3‘,4‘-dihydroxyf lavan,4‘,7-dihydroxyf lavan, 5.7- dihydroxýfIavan,S^^dimethoxyflavan,4‘,6-dimethoxyf lavan,4‘,7-dimethoxyf lavan,4‘,8-dimethoxyflavan, 5.7- dimethoxyflavan, 7.8- dimethoxyflavan, 6.7- dimethylflavan, 6.8- dimethylflavan,4‘-hydroxy-6-methoxyflavan,4‘-hydroxy-7-methoxyf lavan, 5- hydroxy-7-methoxyf lavan,4‘-methoxy-6-hydroxyflavan,4‘-isopropoxy-6-hydroxyflavan,4‘-n-butoxy-6-hydroxyf lavan,4‘-sek.butoxy-6-hydroxyf lavan, 6- hydroxy-7-methoxyf lavan,4‘-methoxy-7-hydroxyflavan, 231969 13 5- methoxy’7-hydroxyflavan,5imethyl-7-hydroxyflavan, 6- methyl-7-hydroxyf lavan, 7- hydroxy-8-methylflavan,6-ethyl-7-hydroxyf lavan,6-n-butyl-7-hydroxyf lavan,4‘*imethoxy-6-methylílavan,4‘-imethoxy-8-te!rc.butylflavan,4^methoxy-7-methylflavan,5«methyl-8-isopropylf lavan,6-terc.butyl-8-methylf lavan,3‘,4‘,6-trihydroxyf lavan,3‘,4‘,7-trihydroxyflavan, 4‘ ,5,7-trihydroxyf lavan, 3‘,4‘,7-tirimethoxyflavan, 4‘,5,7-trimethoxyflavan, 4‘,6,7-trimethoxyflavan, 3‘,6-dimethoxy-4‘-hydroxyflavan,4‘,5-dihydroxy-7-methoxyf lavan, 5.7- diihydroxy-4‘-methoxyflavan, 5- hydroxy-7-methoxy-8-methylflavan, 5.8- dl!inethyl-7-hydroxyflavan,3‘,6-dimethoxy-4‘-ethoxyflavan, 6.8- dimethyl-4‘-methoxyflavan,4‘,6-dimethoxy-8-methylflavan,3‘,4‘,5,7-tetrahydroxyflavan,3‘,4‘-dihydroxy-5,7-dimethoxyflavan, 3.5.7- trihydroxy-4‘-methoxyflavan,4‘,6-dihydroxy-5,7-dimethoxyflavan,3‘,4‘,5,7-tetramethoxyflavan,3‘,4‘,5‘,7-tetramethoxyflavan, 4.6.7.8- tetrachlorflavan, 4‘-hydroxy-7-:methoxyflavan, 6- terc .butoxy-4‘-methoxyf lavan,6,4‘-dihydroxyflavan,5-ethyl-7-hydroxyf lavan, 7- hydroxy-4‘-imethylflavan,4‘-isobutoxy-6-methoxyflavan,4‘-lsoprópoxy-6-methoxyflavan,7-hydroxy-5-methoxy-8-methylflavan,7,4‘-dimethoxy-5-hydroxyflavan,3‘,4‘-dimethoxy-6-methylflavan, , 5.7- dimethyl-6-hydroxyflavan,7-hydroxy-5-methoxy-6-methylflavan,4‘-hydroxy-7-methoxy-8-methylflavaii,7,8,'4‘-trihydroxyflavan, 7,8,3‘-trimethoxyflavan, 5.7- dihydroxy-3‘,4‘-diimethoxyflavan,6,4‘-dihydroxy-5,7-dimethoxyflavan, 16 7,8,3‘,4‘-tetramethoxyflavan, 7,3‘,4‘,5‘-tetramethoxyflavan, vyznačující se tím, že se kondenzuje při tep-lotě 150 až 250 °C sloučenina obecného vzor-ce V

kde X znamená hydroxylovou skupinu neboatom halogenu a R1A až R1D mají svrchu uvedený význam,se sloučeninou obecného vzorce VI

kde R2A až R2E mají svrchu uvedený význam,a popřípadě se převede získaná sloučeninaobecného vzorce II na jinou sloučeninu o-becného vzorce II a popřípadě se sloučeni-na obecného vzorce II, obsahující aminosku-pinu nebo hydroxylovou skupinu převede nasvou sůl, přijatelnou z farmaceutického hle-diska, reakcí s příslušnou anorganickou ne-bo organickou kyselinou nebo zásadou vevodném reakčním prostředí. Severografia, n. p., závod 7, Most Cena 3,40 KCs