CS211113B1 - Spdsob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec - Google Patents

Abstract

Vynález rieši spósob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec. Podstata vynálezu spočívá v tom, že sa suspenzia žítkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných kmenom Chlamydia psittaci, spósobujúcim enzootický potrat oviec, v roztoku chloridu sodného obsahujúcom formaldehyd odstreauje, usadenina sa resuspenduje v roztoku chloridu sodného pufrovanom na pH 7,2, přidává sa trypsin a suspenzia sa inkubuje při teplote 35 až 38 °C po dobu 15 až oO minút, po nasledujúcom odstředění sa usadenina resuspenduje v alkalickom roztoku, v ktorom sa inkubuje pri teplote 25 až 37 °C po dobu ,5 až 30 minút, po zneutralizovaní sa suspenzia extrahuje éterom, pričom vodné fáza odstreauje, usadenina sa resuspenduje a vystaví pósobeniu ultrazvuku. Popísaný spósob zabezpečuje získanie neinfekčnej imunogénnej očkovacej látky použitelnej vo veterinárnej praxi na ochranu oviec před infekciou póvodcom nákazy Chlamydia psittaci.

Description

Vynález rieši spdsob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec použiteTnej vo veterínárskej praxi na ochranu oviec před infekciou pdvodcom nákazy Chlamydia psittaci.

Pdvodca enzootičkého potratu oviec Chlamydia psittaci zapříčiňuje infekčně ochorenie prejavujúce sa predovšetkým hromadnými potratmi spravidla v poslednom mesiaci brezivosti. Nákaza je zoonóza vyskytujúca sa v krajinách s vyspělým chovom oviec a jej prevenciu umožňuje ochranné očk·-.rentě. PodTa údajov v odbornej literatúre sa při príprave očkovacej látky nevěnovala dostatočná pozornost pdvodu a spracovaniu chlamýdiového kmena používaného na přípravu vakcíny. Dnej je známe, že účinnosť ochranného očkovania je zvyšovaná použitím homologných kmenov na přípravu vakcín, čo má osobitný význam pri núdzovom očkovaní.

Predmetom vynálezu je spdsob ktorým třeba postupovat aby sa zo Zítkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných pdvodcom nákazy, homológnym kmenom Chlamydia psittaci, získala účinná a neškodná očkovacia látka vhodná na špecifickú prevenciu oviec před infekciou Chlamydia psittaci a na núdzové očkovanie v čase hromadného zmetania bahníc.

Podstata vynálezu spočívá v tom, že sa suspenzia Sítkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných kmeňom Chlamydia psittaci, spdsobujúcim enzootický potrat oviec, v roztoku chloridu sodného obsahujúceho 0,2 až 0,4 % formaldehydu odstreďuje, usadenina sa resuspenduje v roztoku chloridu sodného pufrovanom na pH 7,2, přidává sa trypsin a suspenzia sa inkubuje pri teplote 35 až 38 °C po dobu 15 až 60 minút, po následnom odstředění sa usadenina resuspenduje v alkalickom roztoku, v ktorom sa inkubuje pri teplote 25 až 37 °C po dobu 1 5 až 30 minút, po zneutralizovaní sa suspenzia extrahuje éterom, pričom vodná fáza sa odstreďuje, usadenina sa resuspenduje a vystaví sa pdsobeniu ultrazvuku.

Popísaný spdsob zabezpečuje získanie neinfekčnej imunogénnej suspenzie chlamidií s dobrým preventivným ochranným účinkom po dvojrázovom podkožnom podaní vo vhodnej koncentrácii, a naviac umožňuje podstatné znížiť počty potratov pri jej použití ako núdzového očkovania v priebehu hromadných zmetaní.

Fyzikálně a chemické pdsobenie použité v postupe odstraňuje možnost kontaminácie konečného preparátu živými mikroorganizmami, ktorými mdžu byť spontánně infikované kuracie zárodky.

Účinnosť očkovacej látky bola experimentálně overená na zvieratách v terénnych pokusech. V chovoch postihnutých enzootickým potratom oviec sa po vakcinácii znížili počty potratov u bahníc napr. při preventívnom očkovaní zamořeného chovu (170 oviec) nedošlo v ďalšej graviditě k hromadnému zmetaniu. Pri núdzovom očkovaní (395 kusov), z ktorých do času vakcinácie zmetalo 61 zvierat, nechádzajúcich sa v 4. a 5.mesiaci brezivosti po převedení vakcinácie došlo iba k ojedinělým zmetaniam nedosahujúcim ani 2 % celkového počtu brezivých zvierat.

Využitie vynálezu je možné v odvetviach zaoberajúcich sa výrobou očkovacích látok pre domáce a užitkové zvieratá.

Přiklad

Zo žítkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných pdvodcom enzootickeho potratu oviec Chlamydia psittaci sa připraví 20% suspenzia v molárnom roztoku chloridu sodného obsahujúca 0,2 % formaldehydu. Po 72 hodinách státia pri 4 °C sa suspenzia oentrifuguje pri 30 000 xg 30 minút. Úsadky sa resuspendujú v 1/10 pdvodného objemu 0,05 molárnym fosfátom pufrovanom 0,15 molárnom roztoku chloridu sodného pH 7,2 a přidá sa trypsin do výslednej koncentrácie 0,5 % a inkubuje sa 30 minút při 37 °C.

Po skončení inkubácie sa suspenzia centrifuguje pri 30 000 xg 20 minút, úsadok sa resuspenduje v 1/5 pčvodného objemu 0,05 molárneho roztoku hydroxidu sodného, inkubuje sa 30 minút při 37 °C. Alkalické pčsobenie sa ukončí prídavkom kyseliny chlorovodíkovéj, aby pH suspenzie bolo 7,2 a suspenzia sa v deliacom lieviku pretrepe s rovnakým objemom dietyléteru. Vodná fáza sa odoberie, odstráni sa prebytočný éter a suspenzia sa centrifuguje 20 minút pri 30 000 xg. Úsadky sa resuspendujú v 0,15 molárnom roztoku chloridu sodného na koncentráciu 1 mg/ml, vystavia 5 minút účinku ultrazvuku frekvencie 20 kHz na přístroji výkonu 250 W a konzervujú prídavkom 0,05 % formaldehydu. Získaná suspenzia sa používá na očkovanie oviec.

Claims (2)

1. SpČsob přípravy očkovacej látky proti enzootickému potratu oviec vyznačujúci sa tým, že sa suspenzia žízkových vakov kuřácích zárodkov infikovaných kmeňom Chlamydia psittaci spčsobujúcim enzootický potrat oviec, v roztoku chloridu sodného obsahujúceho 0,2 až 0,4 % formaldehydu odstreňuje, usadenina sa resuspenduje v roztoku chloridu sodného pufrovanom na pH 7,2, přidává sa trypsin a suspenzia sa inkubuje pri teplote 35 až 38 °C po dobu 15 až 60 minút, po následnom odstředění sa usadenina resuspenduje v alkalickom roztoku, v ktorom sa inkubuje pri teplote 25 až 37 °C po dobu 15 až 30 minút, po zneutralizovaní sa suspenzia extrahuje éterom, pričom vodná fáza sa odstreňuje, usadenina sa resuspenduje a vystaví sa pčsobeniu ultrazvuku.